Состав с иринотеканом

011612 Техническая область Данное изобретение относится к составу с иринотеканом, содержащему носитель в виде замкнутой везикулы, содержащей иринотекан и/или его соль в высокой концентрации, и к фармацевтической композиции, содержащей то же самое. Предшествующая область техники Одной из категорий фармацевтических продуктов, используемых для лечения злокачественных опухолей, является ингибитор топоизомеразы, примеры которого включают камптотецин. Камптотецин представляет собой пятичленный циклический алкалоид, экстрагированный и выделенный из Camptotheca acuminata (растение из Китая) Wall et al. (USA) в 1996 г., и было обнаружено, что он обладает высокой антинеопластической активностью и широким антинеопластическим спектром (непатентный документ 1). Общепринятое химиотерапевтическое средство проявляет антинеопластическую активность посредством ингибирования топоизомеразы II, в то время как камптотецин ингибирует ферментативную функцию топоизомеразы, которая играет роль в репликации ДНК, репарации, генетической рекомбинации и транскрипции, посредством ингибирования топоизомеразы I. Существуют некоторые проблемы при применении камптотецина в качестве лекарственного средства. Среди них, что касается нерастворимости в воде, предложены некоторые водорастворимые аналоги камптотецина, каждый из которых является улучшенным в отношении нерастворимости (см., например,патентный документ 1). В частности, гидрохлорид иринотекана (СРТ-11), представляющий собой водорастворимое производное камптотецина и поступивший на рынок в Японии в 1994 г., представляет собой пролекарство и проявляет высокую антинеопластическую активность, так что его с нетерпением ожидали в клинической области. После введения гидрохлорид иринотекана, являющийся пролекарством, подвергается метаболизму до SN-38, являющегося активным метаболитом и проявляющим антинеопластическую активность. Между тем при введении иринотекана и его соли случаются тяжелые побочные эффекты, такие как дисфункция костного мозга и желудочно-кишечное заболевание. Поэтому его применение сильно ограничено. Кроме того, существует проблема, заключающаяся в том, что антинеопластическая активность уменьшена гидролизом -гидроксилактонового кольца из-за чувствительности к водной окружающей среде, уникальной для камптотецина и его аналога. Чтобы разрешить вышеуказанные проблемы и проводить оптимальное лечение злокачественных опухолей с применением аналога камптотецина в качестве циклоспецифического антиметаболита, необходимо поддерживать местную концентрацию лекарственного средства в течение длительного периода времени. Однако существует факт, что такое лекарственное средство обладает временем полужизни, таким непродолжительным, как несколько часов после внутривенного введения или подкожного введения. Применимым в качестве средства для контроля высвобождения является средство, которое можно применять для доставки фармацевтического средства в терапевтической концентрации. Одним из подходов для решения данных проблем, доставки аналога камптотецина стабильно и эффективно в участок очагамишени и проявления антинеопластической активности в участке очага-мишени является заключение лекарственного средства в носитель, обладающий формой замкнутой везикулы. Уже сделаны некоторые предложения по формированию состава липосомы, содержащей камптотецины. Например, опубликовано, что когда камптотецин включают в липосомную мембрану, гидролиз -гидроксилактонового кольца подавлен (см., например, патентный документ 2 и непатентный документ 2). Кроме того, описан способ,допускающий содержание в липосомной мембране собственно SN-38, являющегося основной активной частью гидрохлорида иринотекана (непатентные документы 3 и 4). Однако SN-38 является трудно стабилизируемым в липосомной мембране и быстро исчезает в крови, так что трудно поддерживать концентрацию SN-38 в плазме в течение длительного времени. Опубликован также пример производства на основе общепринятого способа, в котором гидрохлорид иринотекана (водорастворимое производное) помещают в липосому способом пассивной загрузки и стабилизируют электростатической фиксацией на мембране липидного бислоя (непатентный документ 5). Патентный документ 1: JP 3-4077 В Патентный документ 2: JP 9-504517 А Непатентный документ 1: Am. Chem. Soc, 94 (1966), 388 Непатентный документ 2: Tomas G. Burke et al., Biochemistry, 32 (1993), 5352-5364 Непатентный документ 3: W. Gao et al., J. of Chromatography B, 791 (2003), 85-92 Непатентный документ 4: Joshua Williams et al., J. of Controlled Release, 91 (2003), 167-172 Непатентный документ 5: Yasuyuki Sazuka et al., Cancer Letter 127 (1998), 99-106 Раскрытие сущности изобретения Проблемы, подлежащие разрешению посредством изобретения Количество гидрохлорида иринотекана для включения в липосому описанным выше, уже опубликованным способом инкапсуляции гидрохлорида иринотекана способом пассивной загрузки составляет приблизительно 0,05 (лекарственное средство (моль)/общий липид (моль. С таким введенным количе-1 011612 ством трудно поддерживать в течение длительного времени концентрацию гидрохлорида иринотекана в плазме и концентрацию SM-38, который является его активным метаболитом, и данных количеств недостаточно для клинических эффектов. Хотя формированием липосом улучшают удерживаемость гидрохлорида иринотекана в крови, концентрацию в плазме SN-38, который является активным метаболитом,трудно поддерживать долгое время, так как скорость исчезновения из крови является все еще высокой. Еще не опубликовано состава, содержащего клинически пригодное/достаточное инкапсулированное количество иринотекана (пролекарства) и/или его соли в замкнутой везикуле, существующего в крови в состоянии подавленного гидролиза -гидроксилактонового кольца в течение длительного времени для поддержания концентрации SN-38 в плазме, который является активным метаболитом гидрохлорида иринотекана, в течение длительного времени. Принимая во внимание данные обстоятельства, целью настоящего изобретения является предоставление в качестве состава, содержащего достаточное для клинических эффектов количество инкапсулированного лекарственного средства, состава с иринотеканом, способного включать иринотекан и/или его соль в замкнутой везикуле с высокой эффективностью инкапсуляции по меньшей мере 0,07 (лекарственное средство (моль)/общий липид (моль и поддерживать концентрацию в SN-38 плазме, который является активным метаболитом гидрохлорида иринотекана, в течение длительного времени. Способы решения проблем Авторы настоящего изобретения провели обширные исследования для достижения описанных выше целей. В результате они получили следующие заключения: когда способ дистанционной загрузки,основанный на ионном градиенте, в частности, выбирают в качестве способа инкапсуляции лекарственного средства для иринотекана и/или его соли в замкнутой везикуле (формируют ионный градиент внутри/снаружи замкнутой частицы и позволяют лекарственному средству проникать через мембрану замкнутой везикулы для введения лекарственного средства), лекарственное средство можно инкапсулировать в высокой концентрации, которой трудно достичь традиционным способом пассивной загрузки, и удерживаемость в крови значительно улучшается по сравнению с липосомой, полученной общепринятым способом, в результате чего концентрацию 7-этил-10-гидроксикамптотецина (SN-38) (который является активным метаболитом гидрохлорида иринотекана) в плазме можно поддерживать постоянной в течение длительного периода времени. Кроме того, авторы настоящего изобретения получили следующие данные: при выборе способа дистанционной загрузки можно значительно улучшить стабильность состава при 37 С и долговременную стабильность состава при 4 С. Таким образом, подтвердили, что можно получить состав, содержащий замкнутую везикулу, в которую инкапсулирован иринотекан с высокой эффективностью инкапсуляции 0,07 (лекарственное средство (моль)/общие липиды (моль, что является достаточным количеством инкапсулированного лекарственного средства для клинического эффекта. Не было опубликовано состава, содержащего замкнутую везикулу, в которую инкапсулирован иринотекан и/или его соль в такой концентрации, и способного поддерживать концентрацию SN-38 (который является активным метаболитом гидрохлорида иринотекана) в плазме в течение длительного времени. Соответственно, для достижения описанных выше целей настоящее изобретение обеспечивает следующее.(1) Состав с иринотеканом, содержащий замкнутую везикулу, сформированную липидной мембраной, в которую инкапсулирован иринотекан и/или его соль в концентрации по меньшей мере 0,07 моль/моль (моль лекарственного средства/моль общего мембранного липида). В предпочтительном аспекте состав с иринотеканом содержит лекарственное средство в концентрации выше, чем по меньшей мере 0,1 моль лекарственного средства/моль липида. Средний размер частиц состава с иринотеканом по настоящему изобретению составляет предпочтительно от 0,02 до 250 мкм. По настоящему изобретению иринотекан и/или его соль можно инкапсулировать в замкнутую везикулу в высокой концентрации посредством, например, следующего ниже способа дистанционной загрузки с применением ионного градиента.(2) Состав с иринотеканом по п. (1), в котором состав с иринотеканом обладает ионным градиентом между внутренней водной фазой и внешней водной фазой замкнутой везикулы. С применением вышеописанного ионного градиента иринотекан и/или его соль можно включать в замкнутую везикулу в ионизированном состоянии при концентрации.(3) Состав с иринотеканом по п. (2), в котором ионный градиент представляет собой градиент концентрации протонов с градиентом рН, где значение рН внутренней водной фазы ниже, чем значение рН внешней водной фазы.(4) Состав с иринотеканом по п. (3), в котором градиент рН образован градиентом концентрации иона аммония и/или градиентом концентрации органического соединения, обладающего аминогруппой,подверженной протонированию. Например, в случае, где концентрация иона аммония во внутренней водной фазе выше, чем во внешней водной фазе, можно сформировать градиент рН, где значение рН внутренней водной фазы ниже, чем значение рН внешней водной фазы.(5) Состав с иринотеканом по любому из пп. (1)-(4), в котором замкнутая везикула представляет собой липосому, сформированную мембраной липидного бислоя, содержащего фосфолипид в качестве-2 011612 основного компонента мембраны. В п. (5) выше предпочтительным является аспект, в котором основной компонент мембраны представляет собой фосфолипид с температурой фазового перехода 50 С или более. Конкретные предпочтительные примеры фосфолипида включают гидрогенизированный фосфолипид и/или сфингофосфолипид.(6) Липосома может дополнительно содержать липид, отличный от фосфолипида, и/или модифицирующий поверхность агент. В качестве другого липида предпочтительным является холестерин. Предпочтительные примеры модифицирующего поверхность агента включают производное гидрофильного полимера. Конкретные примеры гидрофильного полимера включают полиэтиленгликоль с молекулярной массой от 500 до 10000 Да, который можно вводить в виде производного фосфолипида или холестерина.(7) Состав с иринотеканом по п. (6), в котором только внешняя поверхность липосомы предпочтительно модифицирована гидрофильным полимером в аспекте, в котором производное гидрофильного полимера содержится в качестве модифицирующего поверхность агента.(8) Также предпочтительным является аспект, в котором состав с иринотеканом по п. (6) или (7) содержит соединение, обладающее основной функциональной группой, в качестве модифицирующего поверхность агента. Особенно предпочтительные примеры соединения, обладающего основной функциональной группой, включают гидрохлорид 3,5-дипентадецилоксибензамидина.(9) Фармацевтическая композиция, содержащая состав с иринотеканом по любому из пп. (1)-(8).(10) Профилактический и/или терапевтический способ в отношении заболевания, предусматривающий введение хозяину профилактически и/или терапевтически эффективного количества состава с иринотеканом по любому из пп. (1)-(8).(11) Способ высвобождения эффективного количества иринотекана и/или его соли в хозяине, предусматривающий введение хозяину состава с иринотеканом по любому из пп. (1)-(8).(12) Способ воздействия эффективным количеством иринотекана и/или его соли на участокмишень, предусматривающий введение хозяину состава с иринотеканом по любому из пп. (1)-(8). Эффекты изобретения Состав с иринотеканом, предоставленный по настоящему изобретению, инкапсулирует иринотекан и/или его соль в инкапсулированном количестве по меньшей мере 0,07 (лекарственное средство(моль)/общие липиды (моль и содержит лекарственное средство в высокой концентрации, достаточной для клинического эффекта. Как описано в примерах ниже, состав с иринотеканом по настоящему изобретению обладает значительно улучшенной удерживаемостью в крови по сравнению с общеизвестным составом липосомы с иринотеканом, так что он может присутствовать в крови в течение длительного периода времени. Кроме того, состав обладает значительно улучшенной стабильностью состава при 37 С и долговременной стабильностью состава при 4 С. Краткое описание чертежей Фиг. 1 - график, показывающий результаты (скорость высвобождения) теста увеличенной стабильности состава при 37 С для состава с СРТ-11, полученного в примере 1; фиг. 2 - график, показывающий результаты (скорость высвобождения) теста увеличенной стабильности состава при 37C для состава с СРТ-11, полученного в примере 3; фиг. 3 - график, показывающий результаты (размер частиц) теста увеличенной стабильности состава при 37C для состава с СРТ-11, полученного в примере 3; фиг. 4 - график, показывающий концентрации гидрохлорида иринотекана в плазме для каждого времени отбора крови после инъекции в тесте удерживаемости в крови; фиг. 5 - график, показывающий взаимосвязь между значением рН во внешней водной фазе и эффективностью инкапсуляции СРТ-11 (%) или соотношение присутствия открытой кольцевой формы (%); фиг. 6 - диаграмма, показывающая противоопухолевый эффект препарата СРТ-11, полученного в примере 8 по настоящему изобретению, по изменению со временем предполагаемого объема опухоли; фиг. 7 - диаграмма, показывающая противоопухолевый эффект препарата СРТ-11, полученного в примере 8 по настоящему изобретению, по изменению массы тела мыши; фиг. 8 - диаграмма, показывающая изменение общей концентрации СРТ-11 в плазме крови в фармакокинетическом эксперименте в примере 8; фиг. 9 - диаграмма, показывающая изменение концентрации высвобожденного из липосомы СРТ-11 в плазме крови в фармакокинетическом эксперименте на препарате СРТ-11 в примере 8; фиг. 10 - диаграмма, показывающая изменение концентрации SN-38 в плазме крови в фармакокинетическом эксперименте на препарате СРТ-11 в примере 8; фиг. 11 - диаграмма, показывающая изменение концентрации SN-38G в плазме крови в фармакокинетическом эксперименте на препарате СРТ-11 в примере 8; фиг. 12 - диаграмма, показывающая гемотоксичность (лимфоцит) препарата СРТ-11, полученного в примере 8;-3 011612 фиг. 13 - диаграмма, показывающая гемотоксичность (нейтрофил) препарата СРТ-11, полученного в примере 8; фиг. 14 - диаграмма, показывающая противоопухолевый эффект препарата СРТ-11, полученного в примере 9, по изменению со временем предполагаемого объема опухоли; фиг. 15 - диаграмма, показывающая противоопухолевый эффект препарата СРТ-11, полученного в примере 9, по изменению массы тела мыши; фиг. 16 - диаграмма, показывающая изменение общей концентрации СРТ-11 в плазме крови в фармакокинетическом эксперименте для препарата СРТ-11 в примере 9; фиг. 17 - диаграмма, показывающая изменение концентрации высвобожденного из липосомы СРТ 11 в плазме крови в фармакокинетическом эксперименте на препарате СРТ-11 в примере 9; фиг. 18 - диаграмма, показывающая изменение концентрации SN-38 в плазме крови в фармакокинетическом эксперименте на препарате СРТ-11 в примере 9; фиг. 19 - диаграмма, показывающая изменение концентрации SN-38G в плазме крови в фармакокинетическом эксперименте на препарате СРТ-11 в примере 9; фиг. 20 - диаграмма, показывающая противоопухолевый эффект препарата СРТ-11 по изменению со временем предполагаемого объема опухоли в примере 10; фиг. 21 - диаграмма, показывающая противоопухолевый эффект препарата СРТ-11 по изменению массы тела мыши в примере 10; фиг. 22 - диаграмма, показывающая изменение концентрации СРТ-11 в плазме крови в фармакокинетическом эксперименте для препарата СРТ-11 в примере 10; фиг. 23 - диаграмма, показывающая изменение концентрации SN-38 в плазме крови в фармакокинетическом эксперименте на препарате СРТ-11 в примере 10; фиг. 24 - диаграмма, показывающая изменение концентрации SN-38G в плазме крови в фармакокинетическом эксперименте на препарате СРТ-11 в примере 10; фиг. 25 - диаграмма, показывающая изменение концентрации СРТ-11 в опухолях в фармакокинетическом эксперименте на препарате СРТ-11 в примере 10; фиг. 26 - диаграмма, показывающая изменение концентрации SN-38 в опухолях в фармакокинетическом эксперименте на препарате СРТ-11 в примере 10; фиг. 27 - диаграмма, показывающая изменение концентрации SN-38G в опухолях в фармакокинетическом эксперименте на препарате СРТ-11 в примере 10; фиг. 28 - диаграмма, показывающая противоопухолевый эффект препарата СРТ-11 по изменению со временем предполагаемого объема опухоли в примере 12; фиг. 29 - диаграмма, показывающая противоопухолевый эффект препарата СРТ-11 по изменению массы тела мыши в примере 12. Лучший способ осуществления изобретения В дальнейшем настоящее изобретение будет описано более подробно. Иринотекан представляет собой соединение, обладающее каркасом камптотецина, и его представляют химическим наименованием (+)-(4S)-4,11-диэтил-4-гидрокси-9-[(4-пиперидино-пиперидино)карбонилокси]-1 Н-пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-3,14(4 Н,12 Н)дион. Иринотекан и/или его соль представляет собой антинеопластическое средство и является водорастворимым веществом, применяемым в форме соли-гидрохлорида (иринотеканHCl (гидрохлорид, показанной ниже. В настоящем описании на термин иринотекан и/или его соль иногда ссылаются как на иринотекан или лекарственное средство. Между тем, на термин соль-гидрохлорид иринотекана иногда ссылаются как на гидрохлорид иринотекана или СРТ-11. Настоящее изобретение относится к составу с иринотеканом, который содержит замкнутую везикулу (носитель), сформированную липидной мембраной, в которой описанный выше иринотекан и/или его соль инкапсулирован с высокой эффективностью инкапсуляции 0,07 моль/моль (лекарственное средство(моль)/общий липид (моль или более. Замкнутая везикула не является ограниченной определенным образом и может присутствовать в различных формах, пока она обладает структурой, способной заключать лекарственное средство. Можно применять липосому, липидную микросферу, наночастицу или подобные, обладающие потенциальной функциональной способностью инкапсулировать лекарственное средство здесь в высокой концентрации. Из них наиболее предпочтительным примером формы является липосома. Ниже будет сделано описание, принимая в качестве примера аспект, в котором носитель состава с иринотеканом по настоящему изобретению представляет собой особенно предпочтительную липосому. Липосома сформирована из мембраны из фосфолипидного слоя и представляет собой замкнутую-4 011612 везикулу, обладающую структурой, формирующей пространство, отделенное от внешней области мембраной, сформированной на основе полярных свойств гидрофобных групп и гидрофильных групп липида, и водная фаза (внутренняя водная фаза) заключена в пространстве везикулы. Липосомный состав формируют с применением липосомы, заключающей лекарство, в качестве носителя. Фосфолипид представляет собой основной компонент биомембраны, является амфифильным веществом, и молекула обладает гидрофобной группой, состоящей из длинноцепочечной алкильной группы, и гидрофильной группой, состоящей из фосфатной группы. Примеры фосфолипида включают фосфатидилхолины (=лецитин), фосфатидилглицерин, фосфатидную кислоту, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилсерин, фосфатидилинозитол и сфингофосфолипид, такой как сфингомиелин, природный или синтетический фосфолипид, такой как кардиолипин, или их производные, и соединение, гидрогенизированное общепринятым способом. В дальнейшем, термин фосфолипид иногда относится к фосфолипидам, чтобы охватывать их. Из них предпочтительными являются гидрогенизированный фосфолипид, такой как гидрогенизированный соевый фосфатидилхолин (HSPC), сфингомиелин (SM) и подобные. В качестве основного компонента мембраны может присутствовать один вид фосфолипида или различные виды фосфолипидов. В липосоме фосфолипид, обладающий температурой фазового перехода, превышающей температуру тела (35-37 С), предпочтительно применяют в качестве основного компонента мембраны, как не так легко пропускающий инкапсулированное лекарственное средство в течение периода хранения или в организме, например в крови. Кроме того, в случае получения такой липосомы, ее иногда подвергают воздействию более высокой температуры, чем температура тела. То есть липосому иногда получают в условиях температуры приблизительно от 50 до 70 С, например приблизительно 60 С, и увеличивают влияние нагревания на формирование липосомы, так что особенно предпочтительно применяют основной компонент мембраны, обладающий температурой фазового перехода, превышающей данные температуры. В частности, основной компонент мембраны предпочтительно представляет собой фосфолипид, обладающий температурой фазового перехода 50 С или выше. Липосома может содержать другой мембранный компонент вместе с вышеописанным основным компонентом мембраны. Например, предпочтительно, чтобы липосома содержала липид, отличный от фосфолипида, или его производное (в дальнейшем, иногда указывают как другие липиды), и мембрану формируют из липида, смешанного вместе с вышеописанным фосфолипидом. Термин липид, отличный от фосфолипида обозначает липид, содержащий в молекуле гидрофобную группу, состоящую из длинноцепочечной алкильной группы или подобной, и не содержащий в молекуле фосфатной группы. Он включает в качестве неограничивающих примеров глицерогликолипиды,сфингогликолипиды и стерины, такие как холестерин (описанный ниже как стабилизирующий агент), и их производное, такое как гидрогенизированный продукт. Примеры производного холестерина включают стерины, обладающие каждый циклопентаногидрофенантреновым кольцом, и они включают в качестве неограничивающих конкретных примеров холестерин. Смешанный липид может содержать один вид или различные виды других липидов. Скорость высвобождения состава с иринотеканом в плазме можно регулировать посредством количества холестерина. Для уменьшения скорости высвобождения до низкого уровня состав содержит холестерин в количестве предпочтительно от 0 до 20 мол.%, в то время как для увеличения скорости высвобождения до высокого уровня состав содержит холестерин в количестве от 30 до 50 мол.%, предпочтительно от 40 до 50 мол.%. Липосома по настоящему изобретению может поддерживать вышеописанную мембранную структуру вместе с вышеописанным формирующим мембрану липидом и может содержать другой мембранный компонент, способный содержаться в липосоме без отклонения от целей настоящего изобретения. Примеры другого мембранного компонента включают модифицирующий поверхность агент для обеспечения предназначенной характеристики компоненту мембраны носителя посредством изменения физического свойства липида. Примеры модифицирующего поверхность агента включают в качестве неограничивающих конкретно примеров заряженное вещество, производное гидрофильного полимера, производное водорастворимого полисахарида и подобные. Примеры заряженных веществ включают в качестве неограничивающих конкретно примеров вещество, обладающее основной функциональной группой, такой как аминогруппа, амидиногруппа или гуанидиногруппа; соединения, обладающие кислой функциональной группой, и подобные. Примеры основного соединения включают DOTMA, описанный в JP 61-161246 A, DOTAP, описанный в JP 05-508626 А, трансфектам, описанный в JP 02-292246 A, TMAG, описанный в JP 04-108391 А,соль гидрохлорида 3,5-дипентадецилоксибензамидина, описанные в WO 97/42166, и подобные DOSPA,TfxTM-50, DDAB, DC-CHOL и DMRIE. Примеры соединения, обладающего кислой функциональной группой, включают жирную кислоту,такую как олеиновую кислоту, стеариновую кислоту; ганглиозиды с сиаловой кислотой, такие как ганглиозид GM1 и ганглиозид GM3; поверхностно-активное вещество на основе кислых аминокислот, такое как N-ацил-L-глутамин, и подобные.-5 011612 В случае если вышеописанное заряженное вещество представляет собой вещество, включающее соединение, обладающее основной функциональной группой, связанной с липидом, на него ссылаются как на катионизированный липид. Липидный компонент катионизированного липида стабилизирован в липидном бислое липосомы, а компонент основной функциональной группы может присутствовать на поверхности мембраны липидного бислоя носителя (на внутренней поверхности мембраны и/или на внешней поверхности мембраны). Модификация мембраны катионизированным липидом позволяет улучшить адгезивность или подобное между мембраной липосомы и клеткой. Водорастворимые полисахариды включают в качестве неограничивающих конкретно примеров водорастворимые полисахариды, такие как глюкуроновая кислота, сиаловая кислота, декстран, пуллулан,амилоза, амилопектин, хитозан, маннан, циклодекстрин, пектин и каррагенан. Примеры производных водорастворимых полисахаридов включают гликолипид или подобные. Гидрофильные полимеры включают в качестве неограничивающих конкретно примеров полиэтиленгликоль, фиколл, поливиниловый спирт, чередующийся сополимер стирола - малеинового ангидрида,чередующийся сополимер дивинилового эфира - малеинового ангидрида, поливинилпирролидон, поливинилметиловый эфир, поливинилметилоксазолин, полиэтилоксазолин, полигидроксипропилоксазолин,полигидроксипропилметакриламид, полиметакриламид, полидиметилакриламид, полигидроксипропилметакрилат, полигидроксиэтилакрилат, гидроксиметилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, полиаспартамид и синтетическую полиаминокислоту. Гидрофильный полимер предпочтительно обладает структурой для модификации липосомы. В частности, данной структурой обладает один из концов цепи полимера. То есть предпочтительно, чтобы применяемый гидрофильный полимер для модификации содержал основной компонент молекулы гидрофильного полимера и структурный компонент для модификации липосомы. В случае, когда данная структура представляет собой гидрофобный компонент, такой как липид, основной компонент молекулы гидрофильного полимера фиксирован так, чтобы выступать из внешней поверхности липосомы в такой форме, что гидрофобный компонент вставлен в мембрану липосомы, в то время как в случае, где структура представляет собой реакционноспособную функциональную группу, способную ковалентно связывать мембранный компонент липосомы, основной компонент молекулы гидрофильного полимера фиксирован так, чтобы выступать из внешней поверхности липосомы благодаря ковалентной связи с мембранным компонентом липосомы, таким как фосфолипид, экспонированный на внешней поверхности липосомы. В дальнейшем, следующим будет описано гидрофобное соединение для применения для получения компонента гидрофильный полимер - гидрофобный полимер посредством связывания с основным компонентом молекулы гидрофильного полимера. Гидрофобное соединение не является конкретно ограниченным. Его примеры включают соединение, обладающее гидрофобной областью (гидрофобное соединение). Примеры гидрофобного соединения включают фосфолипид и другой липид, такой как стерин, формирующие смешанный липид, описанный ниже; длинноцепочечный алифатический спирт; сложный эфир глицерина и жирной кислоты и подобные. Из них предпочтительный аспект представляет собой фосфолипид. Кроме того, гидрофобное соединение может обладать реакционноспособной функциональной группой. Связь, образованная реакционноспособной функциональной группой, желательно, является ковалентной связью, и ее конкретные примеры включают в качестве неограничивающих конкретно примеров амидную связь, сложноэфирную связь, эфирную связь, сульфидную связь или дисульфидную связь. Ацильная цепь, включенная в фосфолипид, предпочтительно представляет собой насыщенную жирную кислоту. Длина цепи ацильной цепи предпочтительно составляет от C14 до С 20, более предпочтительно от C16 до C18. Примеры ацильной цепи включают дипальмитоил, дистеароил и пальмитоилстеароил. Фосфолипид не является ограниченным конкретно. Например, в качестве фосфолипида можно применять фосфолипид, обладающий функциональной группой, способной реагировать с гидрофильным полимером. Конкретные примеры такого фосфолипида, обладающего функциональной группой, способной реагировать с гидрофильным полимером, включают фосфатидилэтаноламин, обладающий аминогруппами, фосфатидилглицерин, обладающий гидроксигруппами, и фосфатидилсерин, обладающий карбоксильными группами. Предпочтительным аспектом является применение описанного выше фосфатидилэтаноламина. Производное гидрофильного полимера-липида составлено из описанных выше гидрофильного полимера и липида. Сочетание описанных выше гидрофильного полимера и липида не является ограниченным конкретно. В зависимости от цели можно применять подходящее сочетание. Его примеры включают производное гидрофильного полимера, полученное связыванием по меньшей мере одного, выбранного из фосфолипида, других липидов, таких как стерин, длинноцепочечного алифатического спирта и сложного эфира глицерина и жирной кислоты по меньшей мере с одним, выбранным из PEG, PG и PPG. Конкретные примеры этого включают полиоксипропиленалкил, в частности, предпочтительным аспектом является, что, в случае, где гидрофильный полимер представляет собой полиэтиленгликоль (PEG), в качестве липида выбирают фосфолипид или холестерин. Примеры производного PEG-липида, сформиро-6 011612 ванного таким сочетанием, включают производное PEG-фосфолипида или производное PEGхолестерина. Для производного гидрофильного полимера-липида можно выбирать положительно, отрицательно или нейтрально заряженное производное посредством выбора липида. Например, в случае, где в качестве липида выбирают DSPE, производное липида демонстрирует отрицательный заряд благодаря эффекту фосфатных групп, тогда как в случае, где в качестве липида выбирают холестерин, производное липида демонстрирует нейтральный заряд. Липид можно выбирать в зависимости от цели. Молекулярная масса PEG не является ограниченной конкретно. Как правило, молекулярная массаPEG составляет от 500 до 10000 Да, предпочтительно от 1000 до 7000 Да и более предпочтительно от 2000 до 5000 Да. Молекулярная масса PG не является ограниченной конкретно. В общем, молекулярная масса PG составляет от 100 до 10000 Да, предпочтительно от 200 до 7000 Да и более предпочтительно от 400 до 5000 Да. Молекулярная масса PPG не является ограниченной конкретно. Как правило, молекулярная массаPPG составляет от 100 до 10000 Да, предпочтительно от 200 до 7000 Да и более предпочтительно от 1000 до 5000 Да. Из этого предпочтительный аспект представляет собой производное PEG-фосфолипида. Примеры производного PEG-фосфолипида включают полиэтиленгликоль-дистеароилфосфатидилэтаноламин(PEG-DSPE). PEG-DSPE является предпочтительным, так как он представляет собой универсальное соединение и является легко доступным. Описанный выше гидрофильный полимер можно применять отдельно или два или более полимеров можно применять в сочетании. Такое производное гидрофильного полимера-липида можно получить общепринятым способом. Примеры способа синтеза производного PEG-фосфолипида, являющегося примером производного гидрофильного полимера-липида, включают способ взаимодействия PEG с фосфолипидом, обладающим функциональной группой, способной реагировать с PEG, с применением катализатора. Примеры катализатора включают циануровый хлорид, карбодиимид, ангидрид кислоты и глутаральдегид. Вышеописанной функциональной группе позволяют ковалентно связываться с PEG посредством такой реакции, получая, таким образом, производное PEG-фосфолипида. В липосоме, подвергаемой поверхностной модификации с применением такого производного гидрофильного полимера-липида, когда предупреждают адсорбцию белка опсонина или подобного в плазме на поверхности липосомы, стабильность липосомы в крови увеличивается, можно избежать захвата RES,и можно улучшить способность доставки лекарственного средства к ткани или клетке, являющейся мишенью доставки. Модифицированное соотношение мембранный липид (общий липид) для вышеописанного производного гидрофильного полимера-липида составляет как отношение к мембранному липиду обычно от 0,1 до 20 мол.%, предпочтительно от 0,1 до 5 мол.%, более предпочтительно от 0,5 до 5 мол.%. Нужно заметить, что по настоящему изобретению термин общие липиды означает общие липиды,формирующие мембрану, отличные от производных гидрофильного полимера-липида. Конкретно, он включает фосфолипиды и другие липиды (включая холестерин), далее включает модифицирующий поверхность агент, в случае, где включен модифицирующий поверхность агент, отличный от производного гидрофильного полимера-липида, но не включает фосфолипид, такой как фосфатидилэтаноламин (РЕ) или холестерин, которые включены в производное гидрофильного полимера-липида. По настоящему изобретению модификацию мембраны липосомы вышеописанным производным гидрофильного полимера-липида (PEG-РЕ) можно проводить распределением гидрофильного полимера(PEG) как снаружи, так и изнутри липидной мембраны (бислоя), или распределением избирательно во внешней мембране. Конкретно, при получении липосомного состава, описанного ниже, липосому можно формировать после равномерного смешивания формирующего липосому липида и PEG-РЕ (превведение). PEG-РЕ можно вводить после формирования липосомы общепринятым способом, с применением смешанного липида, полученного смешиванием формирующих липосому липидов, не содержащихPEG-РЕ (пост-введение), но особенно предпочтительной является липосома, полученная избирательной модификацией поверхности только внешнего слоя липидной мембраны бислоя посредством модификации поверхности мембраны гидрофильным полимером снаружи после формирования немодифицированной липосомы, составленной из липидного бислоя (пост-введение). В данном случае, когда производное гидрофильного полимера-липида применяют в качестве модифицирующего агента для введения гидрофильного полимера, компонент гидрофильного полимера поддерживают в состоянии, в котором он выступает наружу, и липидный компонент, являющийся гидрофобным компонентом, поддерживают в стабильном состоянии посредством введения в липидную бислойную мембрану липосомы так, что можно сформировать липосому, обладающую поверхностью внешнего слоя липидного бислоя, в котором присутствует и распределен гидрофильный полимер, связанный с липидом. После стадии формирования липосомы происходит дестабилизация, такая как агрегация, зависящая от температуры или от времени. Такая дестабилизация различается в соответствии с липидным составом-7 011612 липосомы, так что известно, что температура или время различается в соответствии с липидным составом. Чтобы избежать дестабилизации, различающейся в соответствии с липидным составом, желательно помещать стадию модификации гидрофильным полимером после стадии формирования липосомы. Желательным является время добавления гидрофильного полимера на стадии добавления гидрофильного полимера, желательно почти немедленно после стадии формирования липосомы. Конкретно,время предпочтительно составляет в пределах 180 мин, потому что действие нагревания на компоненты мембраны или заключенные вещества является небольшим. Более предпочтительно время составляет в пределах 120 мин, более предпочтительно в пределах 45 мин, наиболее желательно немедленно после стадии формирования липосомы. Более конкретно, после стадии формирования липосомы липосомный дисперсант можно заливать непосредственно в раствор гидрофильного полимера. Между тем, можно применять способ добавления раствора гидрофильного полимера к липосомному дисперсанту после стадии формирования липосомы. Кроме того, можно также применять способ декантирования липосомного дисперсанта и раствора гидрофильного полимера одновременно в другую емкость для смешивания. В данном случае с точки зрения однородности концентрации и выравнивания температуры, желательно добавлять стадию перемешивания посредством смесителя или подобного. После добавления гидрофильного полимера на стадии модификации гидрофильным полимером смесь желательно перемешивать с нагреванием в течение предопределенного времени при температуре фазового перехода или выше. Время перемешивания с нагреванием составляет от 0 до 120 мин, предпочтительно от 0 до 60 мин, более предпочтительно от 0 до 45 мин. В противоположность описанным выше способам липосому, содержащую формирующий мембрану липид, такой как фосфолипид, обладающий реакционноспособной функциональной группой, получают общепринятым способом и затем либо добавляют активированный на конце PEG к внешней жидкости липосомы для связывания с формирующим мембрану липидом, таким как фосфолипид, обладающий функциональной группой, таким образом получая липосому. В отличном от вышеописанных способов описанные выше компоненты смешивают, и смесь выгружают под высоким давлением посредством эмульсификатора с типом разгрузки под высоким давлением, таким образом получая липосому. Данный способ конкретно описан в "Liposome in Life Science"(Terada, Yoshimura, et al.; Springer-Verlag Tokyo (1992, содержание которой приведено здесь в качестве ссылки. В описанном выше случае, для сортировки липосом по размерам до предопределенного размера,доступно несколько способов (edited by G.Gregoriadis "Liposome Technology Liposome Preparation andRelated Techniques" 2nd edition, Vol. I-III, CRC Press), содержание которой приведено здесь в качестве ссылки. В качестве структуры липидной мембраны липосомы известны такие мембранные структуры, как однослойная везикула (малая однослойная везикула (SUV) или большая однослойная везикула (LUV из липидного бислоя и многослойная везикула (MLV), содержащая множество липидных бислоев. Хотя липосому по настоящему изобретению можно составлять с любой мембранной структурой,предпочтительной является липосома, состоящая из однослойной везикулы, и конкретно предпочтительной является липосома LUV. Дисперсант липосомы можно формировать в однослойной форме многократным пропусканием с силой через фильтр с применением экструдера. В общем, применяли два или более видов фильтров с различным размером пор (фильтр с размером пор более предопределенного размера пор и фильтр для получения в конечном счете предопределенного размера пор). Чем больше раз пропускания через фильтры с различным размером частиц применяют в экструдере, тем выше соотношение однослойного формирования, так что полученный продукт становится рассматриваемым как липосома, практически состоящая из однослойной везикулы. Липосома, практически состоящая из однослойной везикулы, конкретно означает липосому с однослойной везикулой, так что отношение однослойной везикулы ко всем носителям (везикулам), формирующим липосомный состав, может составлять 50% или более, предпочтительно 80% или более. В вышеописанной липосоме цепи гидрофильного полимера на ее внешней поверхности распределены снаружи липосомы, тогда как поверхность внутренней водной фазы - стороны внутреннего слоя липидного бислоя не модифицирована, так что цепи гидрофильного полимера в основном не распределены во внутренней водной фазе. В случае липосомы, обладающей данной структурой распределения,стабильность мембраны может быть сохранена по сравнению с липосомой, обладающей гидрофильными полимерами, распределенными на обеих сторонах внутренней и внешней мембран бислойной мембраны,даже если значение рН внутренней водной фазы является низким. Кроме того, можно получить эффект стабильности в крови, даже если общее количество гидрофильных полимеров является маленьким по сравнению с липосомой, обладающей гидрофильными полимерами, распределенными на обеих сторонах внутреннего и внешнего слоев бислойной мембраны. Нужно заметить, что термин удерживаемость в крови означает свойство включенного в носитель лекарственного средства присутствовать в крови. Когда лекарственное средство высвобождается из носителя, лекарственное средство быстро исчезает из крови и действует на подвергаемый воздействию уча-8 011612 сток. Лекарственное средство, обладающее отличной удерживаемостью в крови, можно вводить в меньшей дозе. Носитель по настоящему изобретению может присутствовать в сферической форме или в подобной форме. Размер его частицы (внешний диаметр частицы) не является ограниченным конкретно, однако,составляет от 0,02 до 250 мкм, предпочтительно от 0,03 до 0,4 мкм, более предпочтительно от 0,05 до 0,2 мкм. Внешний диаметр частицы представляет собой среднее значение диаметра всех частиц в липосомном составе, которое определяют посредством способа динамического светового рассеяния. Конкретно,определение можно проводить с применением Zetasizer (Malven Instruments 3000HS или S ZEM 5002). Состав с иринотеканом по настоящему изобретению может дополнительно содержать фармацевтически приемлемый стабилизатор и/или антиоксидант в зависимости от способа его введения. Стабилизатор включает в качестве неограничивающих конкретно примеров сахариды, такие как глицерин и сахарозу. Антиоксидант включает в качестве неограничивающих конкретно примеров аскорбиновую кислоту, мочевую кислоту, гомологи токоферола (например, витамин Е) и подобные. Существует четыре изомера токоферола ( и ), каждый из которых можно применять по настоящему изобретению. Состав с иринотеканом может дополнительно содержать фармацевтически приемлемую добавку в зависимости от способа его введения. Добавка включает в качестве неограничивающих примеров воду,физиологический раствор, фармацевтически приемлемый органический растворитель, коллаген, поливиниловый спирт, поливинилпирролидон, карбоксивиниловый полимер, натрийкарбоксиметилцеллюлозу,полиакрилат натрия, альгинат натрия, водорастворимый декстран, натрийкарбоксиметилкрахмал, пектин, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, ксантановую смолу, гуммиарабик, казеин, желатин, агар, диглицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, вазелин, парафин, стеариновый спирт, стеариновую кислоту, человеческий сывороточный альбумин (HSA), маннит, сорбит, лактозу, PBS, биоразлагаемый полимер, бессывороточную среду, поверхностно-активное вещество, применимое в качестве фармацевтической добавки, буфер физиологического рН, применимый в живом организме, или подобные. Применяемая добавка не является ограниченной, но ее можно выбрать из вышеописанных добавок в зависимости от ее лекарственной формы, соответственно, или в сочетании с другой добавкой. По настоящему изобретению состав с иринотеканом, содержащий такие добавки, можно предоставлять в качестве фармацевтической композиции. Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно хранить обычным способом, например, в холодильнике при температуре от 0 до 8 С или при комнатной температуре от 1 до 30 С. По настоящему изобретению липосома принимает форму с инкапсулированным СРТ-11. Известно,что -гидроксилактоновое кольцо в СРТ-11 подвержено гидролизу в диапазоне рН выше, чем в нейтральных условиях. Поэтому в липосоме по настоящему изобретению необходимо поддерживать внутреннюю водную фазу липосомы при кислом рН, чтобы подавлять гидролиз -гидроксилактонового кольца, независимо от того, заключен ли СРТ-11 в липидном бислое или во внутренней водной фазе. В основном известно, что липид гидролизуется в зависимости от температуры или величины рН. В частности, известно, что сложные эфиры карбоксилата и жирной кислоты легко гидролизуются в положениях sn-1 и sn-2 и разлагаются до лизолипида и жирной кислоты (Grit et al., Chem. Phys. Lipids 64, 318, 1993). Такие продукты разложения нарушают общепринятый состав липидной мембраны, и проницаемость липидной мембраны улучшается, приводя к нарушению стабильности липосомы. Следовательно, когда внутреннюю водную фазу сохраняют кислой, рН во внешней водной фазе желателен приблизительно нейтральный, с точки зрения стабильности липида. Ситуацией, где данные два противоположных условия наиболее жестко ограничены, является стадия введения лекарственного средства. На стадии введения лекарственного средства смесь необходимо нагревать, по меньшей мере, до температуры фазового перехода липидной мембраны, что в значительной степени способствует гидролизу липида. Для подавления гидролиза липида желательно установить рН во внешней водной фазе приблизительно нейтральным. Однако когда рН во внешней водной фазе устанавливают приблизительно нейтральным, активизируется гидролиз -гидроксилактонового кольца в СРТ 11. Ввиду данных двух противоположных условий значение рН во внешней водной фазе составляет предпочтительно от 4,0 до 8,0, более предпочтительно от 4,0 до 7,0, более предпочтительно от 5,0 до 7,0. Для заполнения составом с иринотеканом с высоким включением по настоящему изобретению формируют липосому-носитель и затем выполняют способ, на который ссылаются как на способ дистанционной загрузки, для введения лекарственного средства с применением ионного градиента внутри/снаружи мембраны липосомы. Способ дистанционной загрузки можно применять для обычного лекарственного средства, способного существовать в заряженном состоянии, в случае, где лекарственное средство растворяют в подходящей водной среде. Когда получен ионный градиент внутри/снаружи липосомы, лекарственное средство можно инкапсулировать посредством проникновения через мембрану липосомы в зависимости от полученного градиента. Примеры ионного градиента, полученного через мембрану липосомы, включают градиент концентраций Na+/K+. Методика добавления лекарственного средства в предварительно сформированную липосому способом дистанционной загрузки для градиента концентраций Na+/K+ описана в US 5077056 (со-9 011612 держание которого приведено здесь в качестве ссылки), что можно осуществить в соответствии с описанием. Предпочтительные примеры ионного градиента по настоящему изобретению включают градиент концентрации протонов и приводят пример вида градиента рН, сформированного установлением значения рН изнутри мембраны (внутренняя водная фаза) ниже, чем значение рН снаружи мембраны (внешняя водная фаза). Конкретно, градиент рН можно получить на основе градиента концентрации иона аммония и/или градиента концентрации органического соединения, обладающего аминогруппой, подверженной протонированию. Конкретный пример способа инкапсуляции лекарственного средства (иринотекана или его соли) в липосому с применением градиента концентрации иона аммония будет описан ниже. Во-первых, предварительно формируют липосомув водном буфере, содержащем от 0,1 до 0,3 М соли аммония, и внешнюю среду заменяют на среду, не содержащую ионов аммония (например, раствор сахарозы), таким образом получая градиент ионов аммония внутри/снаружи мембраны липосомы. Ионы аммония внутри уравновешены аммиаком и протонами, и аммиак проникает через липидную мембрану и рассеивается для устранения аммиака изнутри липосомы. С устранением аммиака уравновешенную часть в липосоме направляют к формированию протонов. В результате в липосоме накапливаются протоны, и формируется градиент рН внутри/снаружи липосомы. Когда к дисперсанту липосомы, обладающему таким градиентом рН, добавляют лекарственное средство, лекарственное средство включается в липосому. Соль аммония, применимая для получения градиента концентрации ионов аммония, включает в качестве неограничивающих конкретно примеров сульфат аммония, гидроксид аммония, ацетат аммония,хлорид аммония, фосфат аммония, цитрат аммония, сукцинат аммония, лактобионат аммония, карбонат аммония, тартрат аммония и оксалат аммония. Необходимо заметить, что сама методика введения лекарственного средства в предварительно сформированную липосому способом дистанционной загрузки для градиента концентрации ионов аммония описана в US 5192549 (содержание которого приведено здесь в качестве ссылки), что можно осуществить в соответствии с описанием. Желательно, чтобы органическое соединение, обладающее аминогруппой, подверженной протонированию, обладало низкой молекулярной массой. Конкретные неограничивающие примеры включают метиламин, этиламин, пропиламин, диэтиламин, этилендиамин и подобные. По настоящему изобретению подходящим является способ, когда иринотекан или его соль вводят способом дистанционной загрузки с применением градиента концентрации ионов аммония. Состав с иринотеканом по настоящему изобретению получают введением иринотекана или его соли в вышеописанный носитель в концентрации, превышающей 0,07 моль/моль (лекарственное средство(моль)/общий липид мембраны (моль, предпочтительно превышающей 0,1 моль /моль. По настоящему изобретению термин включен означает состояние, когда лекарственное средство инкапсулировано в носитель. Термин означает также состояние, где часть или все молекулы лекарственного средства включены в слой липида, являющийся компонентом носителя. Носитель по настоящему изобретению очищают общепринятым способом (таким как гель-фильтрация, диализ, разделение на мембране или центрифугирование), таким образом удаляя лекарственные средства, незагруженные в носитель. Носитель предоставляют после стадии удаления незагруженных лекарственных средств. Следовательно, может существовать градиент концентрации через липидный бислой между внутренней и внешней частью носителя. Предпочтительно, чтобы носитель по настоящему изобретению не содержал свободных лекарственных средств снаружи липидного бислоя после получения носителя. Затем заключенные в носителе лекарственные средства высвобождаются во внешнюю область. Носитель по настоящему изобретению с заключенным лекарственным средством поступает к участку-мишени, что в результате приводит к доставке лекарственных средств к участку-мишени. Доставку лекарственных средств к участку-мишени можно осуществлять посредством поглощения включенных в носитель лекарственных средств в участке-мишени или проявления эффекта лекарственного средства в участке-мишени или по соседству с ним, даже если лекарственное средство не поглощается в участке-мишени. По настоящему изобретению термин высвобождать обозначает, что лекарственное средство, заключенное в носителе, диффундирует наружу из замкнутой везикулы посредством прохождения через липидную мембрану, формирующую носитель, или посредством изменения части структуры липидной мембраны. Когда гидрохлорид иринотекана подвергается метаболизму в плазме до SN-38, являющегося активным метаболитом, и воздействует на участок-мишень в высокой концентрации в течение длительного времени, проявляется сильная антинеопластическая активность, так что необходимо контролировать высвобождение. Скорость высвобождения состава с иринотеканом в плазме можно контролировать регулированием количества холестерина, и ожидают предпочтительного эффекта посредством регулирования количества холестерина. Термин скорость высвобождения означает отношение лекарственного средства, просачивающегося наружу из замкнутой везикулы из компонентов инкапсулирующего носителя и гидрохлорида иринотекана к лекарственному средству, инкапсулированному в носителе (массовое отношение или молярное отношение). Фраза скорость высвобождения является низкой означает, что- 10011612 количество лекарственного средства, просачивающегося наружу из замкнутой везикулы в единицу времени, является небольшим. По настоящему изобретению термин участок-мишень означает конкретный участок, в котором лекарственное средство, инкапсулированное в носителе, высвобождается и действует, и означает клетку,ткань, орган или внутренний орган, точно определенный в каждом участке, и их внутреннюю часть. Участок-мишень, такой как клетка, ткань, орган или внутренний орган и их внутренняя часть, может являться участком, подлежащим лечению лекарственным средством. Когда участок подвергают воздействию высвобожденного лекарственного средства, это вызывает эффект. Участок-мишень включает в качестве конкретных неограничивающих примеров опухоль. Подлежащая лечению опухоль включает в качестве конкретных неограничивающих примеров солидную опухоль. Конкретные примеры включают рак пищевода, рак желудка, рак ободочной кишки, рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак поджелудочной железы, рак печени, рак гортани, рак легкого, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак тела матки и рак яичника. Участок-мишень представляет собой опухолевую клетку, ткань, орган или внутренний орган, их внутреннюю часть и подобные. Следовательно, по настоящему изобретению заболевание означает вышеописанную опухоль, и ожидают, что лекарственное средство окажет на нее антинеопластический эффект. По настоящему изобретению термин воздействие означает, что лекарственное средство, высвобождаемое наружу из носителя, действует на внешнюю область. Конкретно, когда высвобожденное лекарственное средство приближается к участку-мишени и вступает с ним в контакт, лекарственное средство проявляет антинеопластический эффект в качестве своего действия. Когда лекарственное средство действует на участок-мишень, оно действует местно на клетку в участке-мишени, в клеточном цикле, в котором происходит синтез ДНК, так что вызывает ожидаемый эффект. Для вызова такого эффекта необходимо поддерживать баланс между скоростью высвобождения лекарственного средства из носителя и удерживаемостью носителя в крови. Носитель по настоящему изобретению высвобождает иринотекан и/или его соль с предпочтительной скоростью высвобождения, и высвобожденный иринотекан и/или его соль далее подвергается метаболизму до SN-38, являющегося активным метаболитом. Настоящее изобретение применяют для воздействия SN-38 на предопределенный участок-мишень в течение длительного периода времени. Следовательно, по настоящему изобретению для предотвращения и/или лечения заболевания, которым страдает хозяин, системное или местное введение хозяину (пациенту) можно осуществлять парентерально посредством введения носителя, в котором заключено эффективное количество иринотекана и/или его соли, для высвобождения эффективного количества иринотекана и/или его соли в хозяине или для воздействия эффективным количеством SN-38 на участок-мишень в высокой концентрации в течение длительного времени. Примеры хозяина как мишени введения включают млекопитающих, предпочтительно людей, обезьян, мышей, крупный рогатый скот и подобных. Примеры способов парентерального введения для выбора включают внутривенную инъекцию (i.v.),такую как капельную, внутримышечную инъекцию, внутрибрюшинную инъекцию, подкожную инъекцию, и подходящий способ введения можно выбрать в зависимости от возраста или симптома пациента. Носитель по настоящему изобретению вводят пациенту, страдающему заболеванием, в количестве, достаточном для излечения симптома заболевания или для облегчения по меньшей мере части симптома. Например, эффективную дозу лекарственного средства, подлежащую инкапсуляции в носитель, выбирают из диапазона от 0,01 до 100 мг на кг массы тела в сутки. Однако доза носителя для этой цели по настоящему изобретению не ограничена. В течение периода введения введение можно осуществлять после дебюта заболевания или его можно осуществлять профилактически для облегчения симптома после дебюта, в случае, если предсказан дебют заболевания. Кроме того, период введения можно выбрать подходящим образом в зависимости от возраста или симптома пациента. Конкретные примеры способа введения включают введение фармацевтической композиции с применением шприца или капельницы. При этом в тело пациента или хозяина (например, полость или сосуд) вставляют катетер, направляя его острие вблизи участка-мишени, и композицию можно вводить через катетер в предопределенный участок-мишень или поблизости от участка или в участок, от которого кровь, как ожидают, протекает через участок-мишень. Как описано в примерах, когда определили скорость высвобождения лекарственного средства, заключенного в носитель по настоящему изобретению, обнаружили, что скорость высвобождения является низкой. Чтобы рассчитать скорость высвобождения, носитель по настоящему изобретению осаждали центрифугированием и определяли количество лекарственного средства, присутствующее в супернатанте и в носителе. Примеры В дальнейшем настоящее изобретение будет описано более подробно посредством примеров, однако, настоящее изобретение не является ограниченным данными примерами и тестовыми примерами. Каждую концентрацию и размер частиц липосом с инкапсулированным лекарственным средством,полученных в каждом примере, определяли следующим образом. Концентрация фосфолипида (мг/мл): концентрация фосфолипида (HSPC) в дисперсии липосом, оп- 11011612 ределенная с применением набора для определения фосфолипида (Phospholipid C-Test Wako, Wako PureChemical Industries, Ltd.). Общая концентрация липидов (моль/л): общая молярная концентрация (мМ) смешанного липида,являющегося компонентом мембраны, которую вычисляют из концентрации фосфолипида выше. Общие липиды содержат липидные компоненты в модифицирующем поверхность агенте, полученном как смешанный липид, но не содержат липида (например, РЕ (фосфатидилэтаноламина) в PEG-PE или Chol (холестерина) в Chol-PEG), в производном PEG для введения PEG. Концентрация лекарственного средства (мг/мл): концентрацию определяли следующим образом: состав, полученный выше, разводили в 40 раз физиологическим раствором, и к 50 мкл смеси добавляли 2 мл метанола с последующим измерением интенсивности флуоресценции (длина волны возбуждения: 360 нм, длина волны флуоресценции: 435 нм) смеси с применением спектрофлуориметра. Концентрация заключенного гидрохлорида иринотекана представлена как количество лекарственного средства(мг)/общее количество состава (мл). Количество включенного лекарственного средства (молярное соотношение лекарственное средство/общие липиды): концентрация гидрохлорида иринотекана, заключенного в носителе, представлена как молярное соотношение лекарственное средство/общие липиды, которое вычисляют из отношения концентрации лекарственного средства к концентрации липида. Размер частиц (нм): 20 мкл дисперсии липосом растворяли в 3 мл физиологического раствора и определяли средний размер частиц посредством Zetasizer 3000 HS (Malvern Instruments). Далее следуют сокращенные наименования и молекулярные массы применяемых компонентов.HSPC: гидрогенизированный соевый фосфатидилхолин (молекулярная масса: 790, изготовлен Lipoid, SPC3)TRX-20: 3,5-дипентадецилоксибензамидина гидрохлорид (молекулярная масса: 609,41, Joko Pharmaceutical Co., Ltd.) Пример 1. Чтобы подтвердить способ, которым можно получить липосомный состав с высокой инкапсуляцией гидрохлорида иринотекана, осуществляли введение лекарственного средства в высокой концентрации способом дистанционной загрузки (пример получения 1) или способом пассивной загрузки (сравнительный пример получения 1). Для всех липосомных составов, включающих гидрохлорид иринотекана (в дальнейшем сокращены как состав с СРТ-11), в качестве носителя применяли липосому PGE-PE (поствведение), хотя способы введения являлись различными. Пример получения 1. Способ дистанционной загрузки.(HSPC) и 0,176 г холестерина (Chol) растворяли в 25 мл t-бутанола (Kanto Kagaku), нагретого до 60 С и смесь охлаждали на льду с последующей лиофилизацией, чтобы, таким образом, получить смешанный липид HSPC:Chol - 54:46 (молярное соотношение).(2) Получение липосомы: к 0,598 г смешанного липида, полученного ранее, добавляли 10 мл 250 мМ раствора сульфата аммония и позволяли липиду полностью набухнуть. Затем смесь перемешивали на смесителе со встряхиванием и полученную смесь последовательно пропускали через фильтр (размер пор: 0,2 мкм 5 раз, 0,1 мкм 10 раз, Whatman), присоединенный к экструдеру (Extruder Т. 10, biomembranes Inc.) при 68 С, чтобы таким образом получить дисперсию липосом.(3) Введение PEG-РЕ: к полученной дисперсии липосом добавляли 1,21 мл (соответствует количеству смешанного липида 0,75 мол.% от общих липидов) раствора полиэтиленгликоль 5000 фосфатидилэтаноламина (PEG5000-PE) в дистиллированной воде (36,74 мг/мл) и смесь нагревали при 60 С в течение 30 мин, чтобы таким образом ввести PEG5000-PE. Замену внешней водной фазы проводили с применением гелевой колонки, предназначенной для замены растворителя раствором 10 мМ гистидина/10% сахарозы (рН 6,0). Концентрацию HSPC определяли с применением набора для определения фосфолипида. Количество общих липидов (мМ) вычисляли из концентрации HSPC.(4) Инкапсуляция лекарственного средства: получали раствор гидрохлорида иринотекана (СРТ-11) в RO-воде (вода, очищенная на мембране обратным осмосом) с концентрацией 10 мг/мл. К дисперсии липосом добавляли раствор гидрохлорида иринотекана в количестве СРТ-11/HSPC =- 12011612 0,2 (мас./мас.) для концентрации HSPC (мг/мл) выше и смесь перемешивали при 60 С в течение 60 мин,чтобы таким образом ввести гидрохлорид иринотекана. После введения образец охлаждали на льду. После инкапсуляции гидрохлорида иринотекана дисперсию липосом пропускали через гелевую колонку,предназначенную для замены растворителя, с раствором 10 мМ гистидина/10% сахарозы (рН 6,5) для удаления неинкапсулированных лекарственных средств. Составы и размеры частиц составов с СРТ-11, полученных выше, показаны в табл. 1. Получены составы с высокой инкапсуляцией СРТ-11 по настоящему изобретению. Сравнительный пример получения 1. Способ пассивной загрузки. К 0,2992 г смешанного липида (HSPC:Chol = 54:46 (молярное соотношение, полученного таким же способом, как в примере получения 1, добавляли 5 мл раствора гидрохлорида иринотекана (СРТ 11/10% раствор сахарозы с концентрацией 10 мг/мл) и позволяли липиду полностью набухнуть. Смесь перемешивали на смесителе со встряхиванием и полученную смесь последовательно пропускали через фильтр (0,2 мкм 5 раз, 0,1 мкм 10 раз), присоединенный к экструдеру, при 68 С таким же способом,как в примере получения 1, чтобы таким образом получить липосому, инкапсулирующую гидрохлорид иринотекана. К липосоме добавляли 0,61 мл (соответствует количеству смешанного липида 0,75 мол.% от общих липидов) PEG5000-PE таким же способом, как в примере получения 1 (3), и смесь нагревали при 60 С в течение 30 мин, чтобы таким образом ввести PEG5000-PE. Затем неинкапсулированные лекарственные средства удаляли с применением гелевой колонки, предназначенной для замены растворителя, с раствором 10 мМ гистидина/10% сахарозы (рН 6,5). Составы и размеры частиц составов с СРТ-11, полученных выше, показаны в табл. 1. Лекарственное средство вводили в том же количестве лекарственного средства, как в примере получения 1, но способом пассивной загрузки не получили составов с высокой инкапсуляцией СРТ-11. Пример 2. Исследовали исходное количество, необходимое для получения состава с высокой инкапсуляцией СРТ-11 по настоящему изобретению, способом дистанционной загрузки. Пример получения 2. Повторяли процедуру из примера получения 1 за исключением того, что при инкапсуляции лекарственного средства, описанной в примере получения 1 (4), соотношение CPT-11/HSPC (мас./мас.) с раствором СРТ-11/в RO-воде (10 мг/мл), для добавления к дисперсии липосом с пост-введением PGE-PE,полученной таким же способом, как от (1) до (3), изменяли на 0,1, 0,2, 0,4 и 0,8, чтобы таким образом получить составы с СРТ-11. Составы и размеры частиц составов с СРТ-11, полученных выше, показаны в табл. 1. Как показано в табл. 1, составы, хорошо поддерживающие (инкапсулирующие) СРТ-11 с лекарственным средством в полностью эффективной концентрации для клинического применения, можно получить способом дистанционной загрузки посредством увеличения количества исходного количества лекарственного средства (соотношения лекарственное средство/HSPC). Таблица 1 Тестовый пример 1. Увеличенная стабильность состава при 37 С. Каждый из составов с СРТ-11, полученных в примере 1, нагревали при 37 С в течение предопределенного периода. После нагревания состав с СРТ-11 растворяли в 20 раз добавлением физиологического раствора и проводили ультрацентрифугирование (1105 g, 2 ч, 10 С) для осаждения состава с СРТ-11(липосомы, инкапсулирующей гидрохлорид иринотекана). Количество гидрохлорида иринотекана, присутствующее в супернатанте, определяли для вычисления скорости высвобождения (%) гидрохлорида иринотекана из состава с СРТ-11. Результаты показаны на фиг. 1. Обнаружено, что состав с СРТ-11, полученный в сравнительном примере получения 1, обладает скоростью высвобождения гидрохлорида иринотекана приблизительно 60% после нагревания при 37 С в- 13011612 течение 7 суток, в то время как обнаружено, что состав с СРТ-11, полученный в примере получения 1 способом дистанционной загрузки, высвобождает мало гидрохлорида иринотекана даже после нагревания при 37 С в течение 7 суток. Следовательно, выяснили, что инкапсуляция гидрохлорида иринотекана в липосому способом дистанционной загрузки позволяет получение хорошо поддерживающего СРТ-11 состава с отличной стабильностью состава. Тестовый пример 2. Стабильность состава при 37C. Каждый состав с СРТ-11, полученный в примере 2, нагревали при 37 С в течение предопределенного периода. После нагревания для состава с СРТ-11 определяли скорость высвобождения гидрохлорида иринотекана таким же способом, как в тестовом примере 1. Обнаружили, что скорость высвобождения из каждого состава с СРТ-1 составляет 1% или менее даже после нагревания при 37 С в течение 14 суток. Следовательно, выяснили, что на скорость высвобождения состава с СРТ-11, полученного способом дистанционной загрузки, сильно не влияет количество содержащегося лекарственного средства (соотношение лекарственное средство/общие липиды), и даже состав с чрезвычайно высокой инкапсуляцией СРТ-11 обладает отличной стабильностью состава. Пример 3. Липосому, обладающую мембранным составом, отличным от примера получения 1, применяли в качестве носителя для получения состава с СРТ-11. Конкретно, процедуру для инкапсуляции гидрохлорида иринотекана проводили способом дистанционной загрузки таким же образом, как в примере получения 1 с применением липосомы PEG-РЕ с пост-введением (пример получения 3) или липосомы PEGРЕ с пре-введением (контрольный пример получения 1), содержащей в качестве компонента мембраны смешанный липид, показанный ниже. Пример получения 3.(HSPC), 0,6419 г холестерина (Chol) и 0,005 г родамин-дигексадеканоилфосфатидилэтаноламина (RDHPE) растворяли в 50 мл t-бутанола, нагретого до 60 С, и смесь охлаждали во льду с последующей лиофилизацией, чтобы таким образом получить смешанный липид с молярным соотношением HSPC:(2) Получение липосомы: добавление 10 мл 250 мМ раствора сульфата аммония, перемешивание на смесителе со встряхиванием и фильтрование через фильтр, присоединенный к экструдеру (0,2 мкм 5 раз, 0,1 мкм 10 раз), проводили таким же способом, как в примере получения 1, за исключением того,что применяли 0,37 г смешанного липида, полученного выше, таким образом получая дисперсию липосом. Затем проводили замену внешней водной фазы раствором 10 мМ гистидина/10% сахарозы (рН 6,0).(3) Введение PEG-РЕ: к полученной дисперсии липосом добавляли раствор полиэтиленгликоля 2000- фосфатидилэтаноламина (PEG2000-PE) в дистиллированной воде (36,74 мг/мл) (соответствует 2,8 мол.% от общего количества липидов) и смесь нагревали при 60 С в течение 30 мин, чтобы таким образом ввести PEG2000-PE.(4) Таким же способом, как при инкапсуляции лекарственного средства в примере получения 1, 10 мг/мл раствора CPT-11/RO-вода добавляли к дисперсии липосом в количестве, необходимом для CPT11/HSPC = 0,2 (мас./мас.) для введения гидрохлорида иринотекана. Затем смесь охлаждали во льду и неинкапсулированные лекарственные средства удаляли раствором 10 мМ гистидина/10% сахарозы (рН 6,5). Полученный состав с СРТ-11 показан в табл. 2. Контрольный пример получения 1. Повторяли процедуру примера получения 3 за исключением того, что PEG2000-PE для добавления в примере получения 3 (3) предварительно добавляли к смешанному липиду в качестве мембранного компонента для получения липосомы с PEG-PE, распределенным на обеих сторонах внутренней и внешней мембран, чтобы таким образом получить состав с СРТ-11. Процедура показана ниже. К 0,37 г смешанного липида (HSPC:Chol:R-DHPE = 54:46:0,1 (молярное соотношение, полученного таким же способом, как в примере получения 3 (1), и 0,094 г (соответствующего количеству (5,6 мол.%) в два раза больше количества в примере получения 3) PEG2000-PE добавляли 1 мл этанола и смесь полностью растворяли перемешиванием при 65 С в течение 30 мин. После подтверждения, что смесь растворилась полностью при перемешивании, к раствору этанола добавляли 10 мл раствора сульфата аммония, приготовленного так, чтобы получить 250 мМ. Затем проводили такие же процедуры, как в примере получения 3 (2) с встряхивающим смесителем и экструдером,и проводили замену внешней водной фазы для дисперсии липосом, полученной с применением 10% раствора сахарозы. Тем же способом, как в примере получения 3 (4), 10 мг/мл раствора CPT-11/RO-вода добавляли к дисперсии липосом в количестве, необходимом для значения CPT-11/HSPC = 0,2 (мас./мас.), для введения гидрохлорида иринотекана. После введения смесь охлаждали во льду и неинкапсулированные лекарственные средства удаляли таким же способом, как в примере получения 3 (4). Полученный состав с СРТ-11 показан в табл. 2. Тестовый пример 3. Увеличенная стабильность состава при 37 С. Для каждого из составов с СРТ-11, полученных в примере 3, проводили тест на улучшение посредством нагревания при 37 С в течение 1 месяца. Аликвоту нагреваемого состава с СРТ-11 отбирали каждую 1 неделю и разводили в 20 раз добавлением физиологического раствора с последующим ультрацентрифугированием (1105 g, 2 ч, 10 С) для осаждения состава с СРТ-11. Интенсивность флуоресценции,соответствующую количеству гидрохлорида иринотекана, присутствующему в супернатанте, определяли для вычисления скорости высвобождения из липосомы (%). Результаты показаны на фиг. 2. При этом размер частиц липосомы в нагреваемой дисперсии измеряли каждую 1 неделю. Результаты показаны на фиг. 3. На фиг. 2 и 3 показано, что липосома, полученная в примере получения 3, не высвобождает лекарственного средства при 37 С даже спустя 1 месяц (фиг. 2) и обладает в основном постоянным размером частиц (фиг. 3), так что обладает отличной стабильностью состава. С другой стороны, для липосомыPEG-РЕ с пре-введением, полученной в контрольном примере получения 1, высвобождение лекарственного средства при 37 С начиналось на третьей неделе, скорость высвобождения на четвертой неделе являлась чрезвычайно высокой (фиг. 2), и размер частиц увеличивался с третьей недели (фиг. 3), так что предположили, что с третьей недели происходит нарушение мембраны. Из данных результатов обнаружено, что для состава, хорошо поддерживающего СРТ-11 по настоящему изобретению, липосома PEG-РЕ с пост-введением, полученная добавлением PEG-РЕ после формирования липосомы, обладает предпочтительной формой. Пример 4. Чтобы проверить долговременную стабильность при хранении и стабильность в крови состава с СРТ-11 по настоящему изобретению, составы с СРТ-11 получали способами примеров получения 4 и 5 ниже. Пример получения 4. Лекарственное средство вводили способом дистанционной загрузки, так же как в примере получения 1, за исключением того, что замену внешней водной фазы для дисперсии липосом PEG-РЕ с поствведением проводили с применением гелевой колонки, предназначенной для замены растворителя раствором 10 мМ MES/10% сахарозы (рН 6,0) в примере получения 1 (3), чтобы таким образом получить состав, хорошо поддерживающий СРТ-11. Составы показаны в табл. 3. Пример получения 5. Повторяли процедуру примера получения 4, за исключением того, что смешанный липид, полученный в (1) ниже, применяли в качестве компонента мембраны, чтобы таким образом получить состав, хорошо поддерживающий СРТ-11, содержащий гидрохлорид 3,5-дипентадецилоксибензамидина, являющийся заряженным веществом. Процедура показана ниже.(HSPC), 0,1876 г холестерина (Chol) и 0,0563 г гидрохлорида 3,5-дипентадецилоксибензамидина (TRX20) растворяли в 25 мл t-бутанола, нагретого до 60 С, и смесь охлаждали на льду с последующей лиофилизацией, чтобы таким образом получить смешанный липид HSPC:Chol:TRX-20 = 50:42:8 (молярное соотношение). Повторяли процедуру примера получения 1 (2) за исключением того, что применяли 0,700 г смешанного липида, полученного выше, чтобы таким образом получить дисперсию липосом. К дисперсии липосом добавляли 1,42 мл (соответствует количеству смешанного липида 0,75 мол.% от общих липидов) раствора PEG5000-PE в дистиллированной воде (36,74 мг/мл) для введения PEG5000-PE. Затем вводили лекарственное средство способом дистанционной загрузки таким же образом, как в примере получения 1 (3), за исключением того, что проводили замену внешней водной фазы дисперсии липосом раствором 10 мМ MES/10% сахарозы (рН 6,0), чтобы таким образом получить состав, хорошо поддерживающий СРТ-11. Состав показан в табл. 3.- 15011612 Тестовый пример 4. Тест на стабильность при долговременном хранении при 4 С. Каждый из составов с СРТ-11, полученных выше, хранили при 4 С в течение предопределенного периода. После истечения предопределенного периода размер частиц состава с СРТ-11 и скорость высвобождения (%) гидрохлорида иринотекана из состава с СРТ-11 измеряли таким же способом, как в тестовом примере 1. Результаты показаны в табл. 3. Таблица 3 Для каждого из составов с СРТ-11, полученных в примере 4 выше, размер частиц и скорость высвобождения не изменялись даже после 6-месячного хранения при 4 С. Следовательно, выяснили, что каждый состав с СРТ-11, полученный способом дистанционной загрузки, обладает отличной долговременной стабильностью при хранении. Тестовый пример 5. Удерживаемость в крови. Каждый состав с СРТ-11, полученный в примере 4 (примеры получения 4 и 5), или раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе (содержащий 1 мг/мл гидрохлорида иринотекана),внутривенно инъецировали в хвост мыши (BALB/c, самка, возраст 5 недель, CLEA Japan, Inc.) с количеством гидрохлорида иринотекана 10 мг/кг (соответствует 8,77 г/кг в переводе на количество иринотекана). Кровь отбирали через 1, 6 и 24 ч после инъекции и центрифугировали (3000 об./мин, 10 мин, 4 С) для сбора плазмы. Концентрацию гидрохлорида иринотекана в каждой плазме измеряли посредством измерения интенсивности флуоресценции. До измерения плазму хранили в холодильнике. Результаты показаны в табл. 4 и на фиг. 4. В случае каждого состава с СРТ-11, полученного в примере 4, концентрацию гидрохлорида иринотекана в плазме можно измерять до 24 ч после инъекции в хвостовую вену, в то время как в случае раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе концентрацию можно изменять только 1 ч после инъекции в хвостовую вену. Следовательно, состав с СРТ-11, полученный способом дистанционной загрузки, способен поддерживать концентрацию гидрохлорида иринотекана в плазме с высокой концентрацией в течение длительного периода времени. Таблица 4 Пример 5. Чтобы протестировать эффективность лекарственного средства из состава с высокой инкапсуляцией СРТ-11 по настоящему изобретению, составы с СРТ-11 получали в примерах получения 6-9 ниже. Пример получения 6. Повторяли процедуру примера получения 4, за исключением того, что смешанный липид, полученный в (1) ниже, применяли в качестве компонента мембраны, чтобы таким образом получить состав, хорошо поддерживающий СРТ-11, содержащий гидрохлорид 3,5-дипентадецилоксибензамидина, являющийся заряженным веществом. Процедура показана ниже.(HSPC), 1,876 г холестерина (Chol) и 0,564 г гидрохлорида 3,5-дипентадецилоксибензамидина (TRX-20) растворяли в 50 мл t-бутанола, нагретого до 60 С, и смесь охлаждали на льду с последующей лиофилизацией, чтобы таким образом получить смешанный липид HSPC:Chol:TRX-20=50:42:8 (молярное соотношение). Повторяли процедуру примера получения 1, за исключением того, что применяли 7,002 г смешанного липида, полученного выше, чтобы таким образом получить дисперсию липосом. К дисперсии липосом добавляли раствор полиэтиленгликоля 5000-фосфатидилэтаноламина(PEG5000-PE) в дистиллированной воде (36,74 мг/мл), что соответствует 0,75 мол.% количества общих липидов, и смесь нагревали при 60 С в течение 30 мин для введения PEG5000-РЕ. Затем вводили лекарственное средство способом дистанционной загрузки таким же образом, как в примере получения 1 (4),чтобы таким образом получить состав с высокой инкапсуляцией СРТ-11. Состав показан в табл. 5. Таблица 5 Пример получения 7. Повторяли процедуру примера получения 4 за исключением того, что смешанный липид, полученный в (1) ниже, применяли в качестве компонента мембраны, чтобы таким образом получить состав, хорошо поддерживающий СРТ-11, содержащий гидрохлорид 3,5-дипентадецилоксибензамидина, являющийся заряженным веществом. Процедура показана ниже.(HSPC), 1,518 г холестерина (Chol) и 1,126 г гидрохлорида 3,5-дипентадецилоксибензамидина (TRX-20) растворяли в 50 мл t-бутанола, нагретого до 60 С, и смесь охлаждали на льду с последующей лиофилизацией, чтобы таким образом получить смешанный липид HSPC:Chol:TRX-20 = 50:34:16 (молярное соотношение). Повторяли процедуру примера получения 1 за исключением того, что применяли 7,207 г смешанного липида, полученного выше, чтобы таким образом получить дисперсант липосомы. К дисперсии липосом добавляли раствор полиэтиленгликоля 1600 холестерин (PEG1600-Chol) в дистиллированной воде (36,74 мг/мл), что соответствует 2,0 мол.% количества общих липидов, и смесь нагревали при 60 С в течение 30 мин для введения PEG1600-Chol. Затем вводили лекарственное средство способом дистанционной загрузки таким же образом, как в примере получения 1 (4) за исключением того, что проводили замену внешней водной фазы дисперсии липосом раствором 10 мМ MES/10% сахарозы (рН 6,0), чтобы таким образом получить состав с высокой инкапсуляцией СРТ-11. Состав показан в табл. 6. Таблица 6- 17011612 Пример получения 8. Повторяли процедуру примера получения 4 за исключением того, что смешанный липид, полученный в (1) ниже, применяли в качестве компонента мембраны, чтобы таким образом получить состав, хорошо поддерживающий СРТ-11, содержащий гидрохлорид 3,5-дипентадецилоксибензамидина, являющийся заряженным веществом. Процедура показана ниже.(HSPC), 1,376 г холестерина (Chol) и 0,564 г гидрохлорида 3,5-дипентадецилоксибензамидина (TRX-20) растворяли в 50 мл t-бутанола, нагретого до 60 С, и смесь охлаждали на льду с последующей лиофилизацией, чтобы таким образом получить смешанный липид HSPC:Chol:TRX-20 - 50:42:8 (молярное соотношение). Повторяли процедуру примера получения 1, за исключением того, что применяли 7,002 г смешанного липида, полученного выше, чтобы таким образом получить дисперсию липосом. К дисперсии липосом добавляли раствор полиэтиленгликоля 5000-фосфатидилэтаноламин (PEG5000PE) в дистиллированной воде (36,74 мг/мл), что соответствует 0,75 мол.% количества общих липидов, и смесь нагревали при 60 С в течение 30 мин для введения PEG5000-PE. Затем вводили лекарственное средство способом дистанционной загрузки таким же образом, как в примере получения 1 (4), чтобы таким образом получить состав, хорошо поддерживающий СРТ-11. Состав показан в табл. 6. Пример получения 9. Повторяли процедуру примера получения 4 за исключением того, что смешанный липид, полученный в (1) ниже, применяли в качестве компонента мембраны, чтобы таким образом получить состав, хорошо поддерживающий СРТ-11. Процедура показана ниже.(HSPC) и 2,060 г холестерина (Chol) растворяли в 50 мл t-бутанола, нагретого до 60 С, и смесь охлаждали на льду с последующей лиофилизацией, чтобы таким образом получить смешанный липид HSPC:Chol= 54:46 (молярное соотношение). Повторяли процедуру примера получения 1 за исключением того, что применяли 7,002 г смешанного липида, полученного выше, чтобы таким образом получить дисперсию липосом. К дисперсии липосом добавляли раствор полиэтиленгликоля 5000-фосфатидилэтаноламина(PEG5000-PE) в дистиллированной воде (36,74 мг/мл), что соответствует 0,75 мол.% количества общих липидов, и смесь нагревали при 60 С в течение 30 мин для введения PEG5000-PE. Затем вводили лекарственное средство способом дистанционной загрузки таким же образом, как в примере получения 1 (4),чтобы таким образом получить состав, хорошо поддерживающий СРТ-11. Состав показан в табл. 7. Таблица 7 Пример 6. Проверяли влияние значения рН во внешней водной фазе на скорость инкапсуляции лекарственного средства. Пример получения 10.(1) Получение смешанного липида: взвешивали 7,01 г HSPC и 2,93 г Chol и добавляли к ним 10 мл абсолютного этанола. Затем их растворяли при 68 С. После подтверждения, что они полностью растворились, к ним добавляли 90 мл раствора сульфата аммония (250 мМ) и смесь перемешивали при нагревании при 68 С.(2) Получение липосомы: после завершения перемешивания с нагреванием, полученную смесь пропускали через фильтр с размером пор 0,2 мкм пять раз с применением экструдера, нагретого до 68 С. Затем фильтр заменяли фильтром с размером пор 0,1 мкм, и фильтрат пропускали через фильтр пять раз. Затем фильтр снова заменяли фильтром с размером пор 0,1 мкм, и фильтрат пропускали через фильтр пять раз. Введение PEG5000-DSPE: после экструзии к образцу добавляли 20,4 мл раствора PEG5000-DSPE(36,74 мг/мл) так, чтобы содержание PEG5000-SSPE (мол.%) являлось предопределенным, и смесь перемешивали при 60 С в течение 30 мин, чтобы таким образом ввести PEG5000-DSPE. После введения образец охлаждали на льду.(3) Замена внешней водной фазы: для каждого ледяного образца (8 мл) проводили замену внешней водной фазы с применением гелевой колонки, предназначенной для соответствующей замены каждым из- 18011612 растворов внешней водной фазы с различными значениями рН (рН 4,0, 5,0, 6,0, 7,0, 8,0 или 9,0), конкретно, растворами внешней водной фазы с рН 4,0, 5,0 (растворами 10 мМ уксусной кислоты/10% сахарозы),раствором внешней водной фазы с рН 6,0 (раствором 10 мМ гистидина/10% сахарозы), растворами внешней водной фазы с рН 7,0, 8,0, 9,0 (растворами 10 мМ Трис/10% сахарозы). После замены внешней водной фазы каждую концентрацию HSPC для дисперсии липосом определяли с применением набора для определения фосфолипида. Общее количество фосфолипида (мМ) рассчитывали по концентрации(4) Инкапсуляция лекарственного средства: получали раствор гидрохлорида иринотекана (СРТ 11)/RO-вода (вода, очищенная на мембране обратным осмосом) с концентрацией 10 мг/мл. К дисперсии липосом добавляли раствор гидрохлорида иринотекана в количестве СРТ-11/количество общих липидов = 0,16 (моль/моль) по отношению к количеству общих липидов (мМ) выше, и смесь перемешивали при 60 С в течение 60 мин, чтобы таким образом ввести гидрохлорид иринотекана. После введения образец охлаждали на льду. После инкапсуляции гидрохлорида иринотекана дисперсию липосом пропускали через гелевую колонку, предназначенную для замены раствором 10 мМ гистидина/10% сахарозы (рН 6,5) для удаления неинкапсулированных лекарственных средств. Концентрация липида (HSPC), концентрация лекарственного средства (СРТ-11) и размер частиц для каждого состава с СРТ-11, полученного выше, показаны в табл. 8. Эффективность инкапсуляции лекарственного средства. Для каждого состава с СРТ-11, полученного выше, эффективность инкапсуляции лекарственного средства (%) вычисляли из соотношения конечной концентрации лекарственного средства СРТ-11 относительно исходной концентрации лекарственного средства 0,16 (моль/моль) согласно следующему уравнению. Математическая формула 1. Эффективность инкапсуляции СРТ-11 (%) = конечный СРТ-11/общие липиды (моль/моль)/исходный СРТ-11/общие липиды моль/моль)100. Результаты показаны в табл. 8 и на фиг. 5. В таблице и на фигуре показано следующее: в случае, где значение рН внешней водной фазы составляет 8,0 или менее, эффективность инкапсуляции СРТ-11 (%) является чрезвычайно высокой величиной 90% или более, в то время как, где значение составляет более 8,0, эффективность инкапсуляции СРТ-11 (%) уменьшается. Таблица 8 Пример 7. Изучали влияние значения рН внешней водной фазы на стабильность лекарственного средства. К 1 мл каждой внешней водной фазы с различными значениями рН, конкретно, к растворам внешней водной фазы с рН 4,0, 5,0 (растворам 10 мМ уксусной кислоты/10% сахарозы), раствору внешней водной фазы с рН 6,0 (раствору 10 мМ гистидина/10% сахарозы), растворам внешней водной фазы с рН 7,0, 8,0, 9,0 (растворам 10 мМ Трис/10% сахарозы) (рН 4,0, 5,0, 6,0, 7,0, 8,0 или 9,0), которые применяли в(3) примера получения 10, добавляли 0,7 мл раствора гидрохлорида иринотекана (СРТ-11)/RO-воды (вода, очищенная на мембране обратным осмосом) с концентрацией 10 мг/мл, и смесь перемешивали при 60 С в течение 60 мин. Раствор СРТ-11, полученный выше, разбавляли в 20 раз каждым из растворов внешней водной фазы и 5 мкл образца подвергали измерению высокоэффективной жидкостной хроматографией. Затем степень гидролиза (соотношение присутствия открытой кольцевой формы) (%) -гидроксилактонового кольца- 19011612 вычисляли по следующему уравнению. Соотношение присутствия открытой кольцевой формы СРТ-11 (%) = Аоткрытой/(Аоткрытой + 1,102 Азамкнутой)100 Аоткрытой - площадь пика открытой кольцевой формы СРТ-11,Азамкнутой - площадь пика замкнутой кольцевой формы СРТ-11. Результаты показаны на фиг. 5. Выяснили, что в случае, где значение рН внешней водной фазы составляет 8,0 или более, соотношение присутствия открытой кольцевой формы СРТ-11 (%) увеличено и составляет чрезвычайно большое значение 95% или более. Чтобы поддерживать активность СРТ-11, требуется значение рН 4,0 или менее для подавления гидролиза -гидроксилактонового кольца. Однако из аспекта стабильности липида(гидролиза липида) желательным является значение рН приблизительно 6,0-7,0. Принимая во внимание результаты примера 6, обнаружили, что при введении лекарственного средства желательным является значение рН внешней водной фазы приблизительно 4,0-7,0. Пример 8. Пример получения 11.(1) Получение липосомы. Взвешивали 70,87 г HSPC и 29,13 г Chol и добавляли к ним 100 мл абсолютного спирта. Затем их растворяли с нагреванием при 68 С. После подтверждения, что они растворились полностью, к ним добавляли 900 мл раствора сульфата аммония (250 мМ) и смесь перемешивали с нагреванием при 68 С.(2) Регуляция размера частиц липосомы. Регуляция размера частиц липосомы: после завершения перемешивания с нагреванием полученную смесь пропускали через фильтр с размером пор 100 нм пять раз с применением экструдера, нагретого до 68 С. Введение PEG5000-DSPE: после экструзии к образцу добавляли 200 мл раствора PEG5000-DSPE (36,74 мг/мл) так, чтобы получить предопределенное содержание PEG5000-DSPE (мол.%), и перемешивали смесь при 60 С в течение 30 мин, чтобы таким образом ввести PEG5000-DSPE. После введения образец охлаждали на льду.(3) Замена внешней водной фазы. Для ледяного образца проводили замену внешней водной фазы с применением системы для фильтрации с перекрестным потоком на раствор внешней водной фазы (10 мМ гистидин/10% сахароза) (рН 6,5). После замены внешней водной фазы концентрацию HSPC и концентрацию холестерина определяли высокоэффективной жидкостной хроматографией. Количество гидрохлорида иринотекана, подлежащего инкапсуляции, рассчитывали по суммированию концентрации HSPC и концентрации холестерина как концентрации общего липида.(4) Инкапсуляция лекарственного средства. Получали раствор гидрохлорида иринотекана (СРТ-11)/в RO-воде (вода, очищенная на мембране обратным осмосом) с концентрацией 10 мг/мл. К дисперсии липосом добавляли раствор гидрохлорида иринотекана в количестве СРТ-11/количество общих липидов = 0,16 (моль/моль) по отношению к количеству общих липидов (мМ) выше и смесь перемешивали при 50 С в течение 20 мин, чтобы таким образом ввести гидрохлорид иринотекана. После введения образец охлаждали на льду.(5) Удаление неинкапсулированного лекарственного средства. После инкапсуляции гидрохлорида иринотекана к дисперсии липосом добавляли раствор внешней водной фазы и проводили удаление неинкапсулированного лекарственного средства с применением системы для фильтрации с перекрестным потоком.(6) Регуляция концентрации. Для дисперсии липосом после удаления неинкапсулированных лекарственных средств определяли количество гидрохлорида иринотекана с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии и регулировали до концентрации гидрохлорида иринотекана 5,0 мг/мл.(7) Стерилизация фильтрованием. После регулирования концентрации дисперсию липосом фильтровали в цилиндрическую пробирку посредством стерилизующего фильтра с размером пор 0,2 мкм. Составы и размеры частиц составов с СРТ-11, полученных выше, показаны в табл. 9. Таблица 9- 20011612 Тестовый пример 6. Противоопухолевый эффект. Клетки рака предстательной железы человека (РС-3), 2,5106 клеток/мышь, имплантировали подкожно в левую паховую область мыши (BALB/c голой, самца, возраст 6 недель, Charles River Japan, Inc.). После имплантации опухолей предположительный объем опухоли вычисляли посредством 1/2ab2 (а представляет ее продольный диаметр, и b представляет диаметр по короткой оси). На следующие сутки после суток (сутки 0), в которых достигали предположительного объема опухоли приблизительно 40 мм 3, 3 раза на каждые четвертые сутки (сутки 1, 5 и 9), в хвостовую вену мыши инъецировали препарат СРТ-11, полученный в примере получения 11, или раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе. В качестве контрольной группы присутствовали мыши без инъекции каких-либо средств. Предположительный объем опухоли и массу тела мыши измеряли на сутки 1, 5, 9, 12, 16 и 22. После иссечения опухолей и измерения их массы на сутки 22, далее вычисляли степень ингибирования роста опухоли I.R. (%) по следующей формуле.IR. % = (1 - средняя масса опухоли в группе лечения/средняя масса опухоли в контрольной группе)100 Результаты показаны в табл. 10 и на фиг. 6 и 7. Как для препарата СРТ-11, так и для раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе показали значительный подавляющий эффект на рост опухоли для рака предстательной железы человека у группы лечения по сравнению с контрольной группой. Для препарата СРТ-11 показали более высокий противоопухолевый эффект, чем для раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе (табл. 10, фиг. 6). Кроме того, ни одно из средств не влияло на массу тела мыши (фиг. 7). Таблица 10 Тестовый пример 7. Фармакокинетика. Препарат СРТ-11, полученный в примере получения 11, или раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе непрерывно инъецировали в головную вену яванского макака (самец, возраст от 4 до 5 лет, Guangxi Research Center of Primate Laboratory Animal) в течение 4 мин до достижения содержания гидрохлорида иринотекана 10 мг/кг. Собирали кровь яванского макака сразу после инъекции и после начала инъекции; после 10 и 30 мин и после 1, 6, 24, 48, 72, 168, 336 и 504 ч; плазму крови получали разделением центрифугированием. Добавлением к 50 мкл плазмы крови 550 мкл раствора внутреннего стандарта В (раствора веществ внутреннего стандарта в метаноле) и применением центробежной силы, супернатант разводили в метаноле в 100 раз в качестве образца для измерения общей концентрации СРТ-11. Тем временем, добавляя к 50 мкл плазмы крови 200 мкл раствора внутреннего стандарта А (0,147 моль/л раствора веществ внутреннего стандарта в Н 3 РО 4), 200 мкл из этого подвергали разделению центрифугированием (100000g, в течение 30 мин, 10 С). 100 мкл из верхнего водного слоя отделяли и подвергали твердофазной экстракции для получения элюента в качестве образцов для измерения концентрации свободного СРТ-11 (т.е. СРТ-11,высвобожденного из липосомы, в дальнейшем обозначаемого высвобожденный из липосомы СРТ-11),измерения концентрации SN-38 и измерения концентрации SN-38G (SN-38 10-О-глюконида). В полученных образцах измеряли концентрацию каждого из них LC/MS/MS. Результаты показаны на фиг. 8-11. В растворе гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе общая концентрация СРТ-11 после инъекции быстро уменьшалась до меньшей, чем нижний предел количественного определения (1 мкг/мл), до 1 ч. При этом для препарата СРТ-11 общая концентрация СРТ-11 уменьшалась экспоненциально от 1 до 48 ч после инъекции, и обнаружили значительное продление времени удержания по сравнению с раствором гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе (фиг. 8). Для раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе концентрация свободного СРТ-11 уменьшалась относительно быстро до 6 ч после достижения наивысшей концентрации сразу после инъекции, после чего концентрация уменьшалась умеренно. При этом для препарата СРТ-11 концентрация свободного СРТ-11 достигала наивысшей концентрации за 1 ч после инъекции и затем уменьшалась умеренно (фиг. 9). Для раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе концентрация SN-38 быстро уменьшалась после достижения наивысшей концентрации сразу после инъекции и уменьшалась до- 21011612 меньшей, чем нижний предел количественного определения (0,0005 мкг/мл), до 24 ч. При этом для препарата СРТ-11 концентрация SN-38 сохранялась в течение 1 ч после достижения наивысшей концентрации сразу после инъекции. После этого концентрация уменьшалась, чтобы поддерживаться от 6 до 48 ч(фиг. 10). Как для препарата СРТ-11, так и для раствора гидрохлорида иринотекана, концентрация SN-38G увеличивалась 1 ч после инъекции, чтобы слабо снижаться с поддержанием концентрации (фиг. 11). Тестовый пример 8. Гемотоксичность. Препарат СРТ-11, полученный в примере получения 11, инъецировали в хвостовую вену крысы(CD(SD)IGS, самца, в возрасте 7 недель, Charles River Japan, Inc.) до достижения содержания гидрохлорида иринотекана 3, 10 и 30 мг/кг, или до достижения содержания раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе 30 мг/кг. Собирали по 0,4 мл крови из шейной вены крысы до и после инъекции; и после 2, 4, 6, 13, 20 и 27 суток (в течение 4 недель); число нейтрофилов и лимфоцитов измеряли автоматическим гематологическим анализатором (Sysmex XT-2000i, Sysmex). Результаты показаны на фиг. 12 и 13. Число нейтрофилов кратковременно уменьшалось, после этого быстро восстанавливаясь после любого инъецируемого количества. При дозе 10 и 30 мг/кг по сравнению с содержанием гидрохлорида иринотекана 3 мг/кг степень сокращения числа являлась большой. При дозе 30 мг/кг число увеличилось быстро в период восстановления. При 30 мг/кг каждого из двух инъецируемых средств не обнаружили значительных различий между изменениями числа нейтрофилов (фиг. 12). Число лимфоцитов снижалось немедленно после инъекции, хотя и только слабо. Тем не менее, не было разницы между инъекциями(фиг. 13). Описанные выше результаты показали временную слабую гемотоксичность для нейтрофилов препарата СРТ-11. Однако интенсивность гемотоксичности являлась приблизительно равной гемотоксичности такого же количества раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе. Пример 9. Пример получения 12.(1) Получение липосомы. Взвешивали 65,250 г HSPC, 26,800 г Chol и 8,000 г TRX-20 и добавляли к ним 100 мл абсолютного спирта. Затем их растворяли с нагреванием при 68 С. После подтверждения, что они растворились полностью, к ним добавляли 900 мл раствора сульфата аммония (250 мМ) и смесь перемешивали с нагреванием при 68 С.(2) Регуляция размера частиц липосомы. Регуляция размера частиц липосомы: после завершения перемешивания с нагреванием полученную смесь пропускали через фильтр с размером пор 100 нм пять раз с применением экструдера, нагретого до 68 С. Введение PEG5000-DSPE: после экструзии к образцу добавляли 200 мл раствора PEG5000-DSPE (36,74 мг/мл) так, чтобы получить предопределенное содержание PEG5000-DSPE (мол.%), и перемешивали смесь при 60 С в течение 30 мин, чтобы таким образом ввести PEG5000-DSPE. После введения образец охлаждали на льду.(3) Замена внешней водной фазы. Для ледяного образца проводили замену внешней водной фазы с применением системы для фильтрации с перекрестным потоком на раствор внешней водной фазы (10 мМ гистидин/10% сахароза) (рН 6,5). После замены внешней водной фазы концентрацию HSPC и концентрацию холестерина определяли высокоэффективной жидкостной хроматографией. Количество гидрохлорида иринотекана, подлежащего инкапсуляции, вычисляли по суммированию концентрации HSPC и концентрации холестерина как концентрации общего липида.(4) Инкапсуляция лекарственного средства. Получали раствор гидрохлорида иринотекана (СРТ-11)/ в RO-воде (вода, очищенная на мембране обратным осмосом) с концентрацией 10 мг/мл. К дисперсии липосом добавляли раствор гидрохлорида иринотекана в количестве СРТ-11/количество общих липидов = 0,16 (моль/моль) по отношению к количеству общих липидов (мМ) выше и смесь перемешивали при 50 С в течение 20 мин, чтобы таким образом ввести гидрохлорид иринотекана. После введения образец охлаждали на льду.(5) Удаление неинкапсулированного лекарственного средства. После инкапсуляции гидрохлорида иринотекана к дисперсии липосом добавляли раствор внешней водной фазы и проводили удаление неинкапсулированного лекарственного средства с применением системы для фильтрации с перекрестным потоком.(6) Регуляция концентрации. Для дисперсии липосом после удаления неинкапсулированных лекарственных средств определяли количество гидрохлорида иринотекана с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии и регулировали до концентрации гидрохлорида иринотекана 5,0 мг/мл.(7) Стерилизация фильтрованием. После регулирования концентрации дисперсию липосом фильтровали в цилиндрическую пробирку- 22011612 посредством стерилизующего фильтра с размером пор 0,2 мкм. Составы и размеры частиц составов с СРТ-11, полученных выше, показаны в табл. 11. Таблица 11 Тестовый пример 9. Противоопухолевый эффект. Клетки рака ободочной кишки человека (НСТ 116), 2106 клеток/мышь, имплантировали подкожно в левую паховую область мыши (BALB/c голой, самца, возраст 6 недель, Charles River Japan, Inc.). После имплантации опухолей вычисляли предположительный объем опухоли посредством 1/2ab2 (а представляет продольный диаметр опухоли, и b представляет ее диаметр по короткой оси), достигающий приблизительно 90 мм 3 за сутки (сутки 0). Со следующих суток 3 раза на каждые четвертые сутки (сутки 1, 5 и 9) препарат СРТ-11, полученный в примере получения 12, или раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе, инъецировали в хвостовую вену мыши. В качестве контрольной группы присутствовали мыши без инъекции каких-либо средств. Предположительный объем опухоли и массу тела мыши измеряли на сутки 5, 8, 12, 16 и 21 после инъекции. После иссечения опухолей и измерения их массы на сутки 21 после инъекции далее вычисляли степень ингибирования роста опухоли I.R. (%) по формуле, как показано в тестовом примере 6. Результаты показаны в табл. 12 и на фиг. 14 и 15. Для каждого из препарата и раствора гидрохлорида иринотекана СРТ-11 в физиологическом растворе показали значительный подавляющий эффект на рост опухоли для рака ободочной кишки человека у группы лечения по сравнению с контрольной группой. Препарат СРТ-11 предоставлял более высокий противоопухолевый эффект, чем раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе (табл. 12, фиг. 14). Кроме того, ни одно из средств не влияло на массу тела мыши (фиг. 15). Таблица 12 Тестовый пример 10. Фармакокинетика в результате однократного введения. После введения катетеров в бедренную вену крысы (CD(SD)IGS крыса, самец, возраст 7 недельCharles River Japan, Inc.) при анестезии и помещения крысы в камеру Больмана препарат СРТ-11, полученный в примере получения 12, или раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе инъецировали крысе внутривенно через катетер в бедренной вене до достижения содержания гидрохлорида иринотекана 3, 10 и 30 мг/кг. Собирали кровь крысы после инъекции: после 2, 10 и 30 мин и после 1, 3, 6, 9, 24 и 30 ч разделением центрифугированием получали 50 мкл плазмы крови, чтобы развести 200 мкл раствора внутреннего стандарта. После добавления к 50 мкл плазмы крови, разбавленной раствором внутреннего стандарта,500 мкл метанола и перемешивания, разведенную плазму крови разводили в 10 раз 0,146 М Н 3 РО 4 в качестве образца для измерения общей концентрации СРТ-11. При этом, подвергая 200 мкл разведенной плазмы крови разделению центрифугированием (100000g, в течение 30 мин, 10 С) и полученные 50 мкл в верхнем слое, разводили 0,146 M Н 3 РО 4 в 10 раз в качестве образца для измерения концентрации свободного СРТ-11, измерения концентрации SN-38 и измерения концентрации SN-38G. В полученных образцах измеряли концентрацию каждого из них PROSPEKT-HPLC согласно таким способам, как спо- 23011612 соб Kurita (J. Chromatogr. В 724, р 335 to 344, 1999). Результаты показаны на фиг. 16-19. В растворе гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе общая концентрация СРТ-11 после инъекции быстро уменьшалась и уменьшалась экспоненциально от 0,5 до 9 ч для любого инъецируемого количества (3, 10 и 30 мг/кг). При этом для препарата СРТ-11 общая концентрация СРТ-11 уменьшалась почти экспоненциально от 10 мин до 30 ч после инъекции, обнаружили значительное продление времени удержания по сравнению с раствором гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе (фиг. 16). Концентрация высвобожденного из липосомы СРТ-11 уменьшалась почти экспоненциально от 10 мин до 30 ч после инъекции препарата СРТ-11, и обнаружили значительное продление времени удержания по сравнению с раствором гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе (фиг. 17). В растворе гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе концентрация SN-38 быстро уменьшалась сразу после инъекции и умеренно уменьшалась спустя 1 ч для любого инъецируемого количества, сохраняясь в течение 3 ч приблизительно 30 мг/кг. При этом для препарата СРТ-11 концентрация SN-38 уменьшалась умеренно после достижения наивысшей концентрации от 3 до 6 ч после инъекции при дозах 3 и 10 мг/кг соответственно. Концентрация быстро уменьшалась в течение 1 ч после достижения наивысшей концентрации сразу после инъекции, чтобы почти сохраняться 9 ч для дозы 30 мг/кг(фиг. 18). В растворе гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе концентрация SN-3SG быстро уменьшалась 1 ч после достижения наивысшей концентрации через 10 мин после инъекции любого инъецируемого количества, чтобы после этого уменьшаться умеренно. При этом для препарата концентрация СРТ-11 SN-38G увеличивалась до 1 ч после инъекции, чтобы медленно уменьшаться с поддержанием концентрации (фиг. 19). Пример 10. Тестировали состав с СРТ-11, полученный в примере получения 9, в качестве состава, хорошо поддерживающего СРТ-11, по настоящему изобретению. Тестовый пример 11. Противоопухолевый эффект. Клетки рака ободочной кишки человека (НТ-29) квадратом 2-3 мм трансплантировали подкожно в паховую область мыши (BALB/c голой, самца, возраст 6 недель, CLEA Japan, Inc.) иглой для трансплантации. Состав с СРТ-11, полученный в примере получения 9, или раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе инъецировали в хвостовую вену всего 3 раза, которые представляли собой точку (сутки 1), в которой приблизительный объем опухоли вычисляли посредством 1/2ab2 (а относится к большей оси каждой опухоли, b относится к меньшей оси), приближающийся к приблизительно 100 мм 3, дополнительные 4 суток (сутки 5) и дополнительные 8 суток (сутки 9), после трансплантации опухолей. Мыши без инъекции каких-либо средств служили контрольной группой. Приблизительный объем опухолей и массу тела мыши вычисляли на сутки 4, 8, 12, 17, 21 после первой инъекции. Опухоли иссекали также на 21 сутки после инъекции и измеряли массу опухолей, чтобы таким образом вычислить степень ингибирования пролиферации опухоли, I.R. (%) по формуле, как показано в тестовом примере 6. Результаты показаны в табл. 13, на фиг. 20 и 21. Как для препарата СРТ-11, так и для раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе показали значительный подавляющий эффект на пролиферацию опухоли для рака ободочной кишки человека у группы лечения по сравнению с контрольной группой. Далее, состав с СРТ-11 проявлял более высокий противоопухолевый эффект по сравнению с раствором гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе (табл. 13, фиг. 20). Кроме того, ни одно из средств не влияло на массу тела мыши (фиг. 21). Таблица 13 Тестовый пример 12. Фармакокинетика в результате однократного введения. Фибросаркому мыши (Meth А), 2,5105 клеток/мышь трансплантировали подкожно в паховую область мыши (BALB/c, самка, возраст 7 недель, Japan SLC, Inc.). Опухоли позволяли расти в течение 20- 24011612 дней после трансплантации опухолей и затем состав с СРТ-11, полученный в примере получения 9, или раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе вводили в хвостовую вену с концентрацией гидрохлорида иринотекана 10 мг/кг. После введения кровь в сердце отбирали спустя 10 и 30 мин и 1, 3, 6, 12, 24, 48 и 96 ч, центрифугировали (15000 об./мин, 1 мин, 0 С), чтобы таким образом получить плазму. Полученную плазму разводили в 50 раз 0,146 М Н 3 РО 4 и добавляли равный объем раствора внутреннего стандарта в качестве образца для измерения концентрации СРТ-11 в плазме животного, которому вводили состав с СРТ-11. Полученную плазму разводили в 4 раза 0,146 М Н 3 РО 4 и добавляли равный объем раствора внутреннего стандарта в качестве образца для измерения как концентрации SN-38, так и концентрации SN-38G в плазме животного, которому вводили состав с СРТ-11, и концентрации лекарственного средства в плазме животного, которому вводили раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе. После отбора крови в сердце опухоли иссекали из паховой области, промывали физиологическим раствором и измеряли массу опухоли. К полученной опухоли добавляли в 5 раз большее количество охлажденной 0,146 M H3PO4 и гомогенизировали в тефлоновом гомогенизаторе. 200 мкл полученной гомогенизированной опухоли добавляли к 50 мкл раствора внутреннего стандарта и 0,75 мл метанола, суспендировали и затем оставляли стоять в течение ночи при -20 С. Полученный раствор центрифугировали(15000 об./мин, 3 мин, 0 С) перед добавлением 0,4 мл 0,146 М Н 3 РО 4 к 0,1 мл супернатанта, чтобы таким образом получить образец для измерения HPLC. Каждую концентрацию в полученном образце для измерения измеряли PROSPEKT-HPLC согласно способу Kurita (J Chromoatogr В 724, pp. 335-344, 1999) или подобному. Результаты показаны на фиг. 22-27. Для состава с СРТ-11 для концентрации СРТ-11 в плазме увеличивалась площадь под кривой концентрация в плазме - время вплоть до 302 раз, и среднее время нахождения (присутствия) вплоть до 4,4 раза по сравнению с раствором гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе соответственно,благодаря липосомному составу (фиг. 22). При этом получение в виде липосомного состава увеличивало площадь под кривой концентрация в плазме - время вплоть до 2,5 раз, так же как концентрацию SN-38 в плазме, и продлевало среднее время нахождения в плазме (фиг. 23). Кроме того, получение в виде липосомного состава увеличивало площадь под кривой концентрация в плазме - время вплоть до 1,8, так же как концентрацию SN-38G в плазме, и продлевало среднее время нахождения (фиг. 24). Для раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе концентрация гидрохлорида иринотекана в опухолевых тканях достигала максимального уровня концентрации в опухолевой ткани через 0,5 ч после введения и затем уменьшалась при полужизни 2,3 ч. Между тем для состава с СРТ-11 концентрация увеличивалась постепенно и достигала максимального уровня концентрации в опухолевой ткани спустя 12 ч и затем уменьшалась более умеренно, чем для раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе с увеличением площади под кривой концентрация в опухолевой ткани - время в 9,0 раз (фиг. 25). Для раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе концентрация SN-38 в опухолевых тканях достигала максимальной концентрации в опухолевой ткани за 10 мин после введения и затем уменьшалась постепенно. Для состава с СРТ-11 концентрация постепенно увеличивалась за 6 ч после введения и затем поддерживалась постоянной приблизительно 48 ч. Затем концентрация уменьшалась при ослаблении до полужизни почти таким же образом, как концентрация раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе, с увеличением площади под кривой концентрация в опухолевой ткани - время в 3,9 раза (фиг. 26). Для раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе концентрация SN-38G в опухолевых тканях достигала максимальной концентрации в опухолевой ткани за 10 мин после введения и затем уменьшалась постепенно. Для состава с СРТ-11 концентрация постепенно увеличивалась, достигала максимальной концентрации в опухолевой ткани за 12 ч после введения и затем уменьшалась постепенно (фиг. 27). Следовательно, подтвердили, что удерживаемость в крови и свойства прохождения опухоли у состава с СРТ-11 были выше, чем у раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе. Пример 11. Состав с СРТ-11, полученный в примере получения 7, тестировали в качестве состава, хорошо поддерживающего СРТ-11, по настоящему изобретению. Тестовый пример 13. Противоопухолевый эффект в результате трехкратного введения лекарственного средства. Фибросаркому мыши (Meth А), 2,5105 клеток/мышь трансплантировали подкожно в паховую область мыши (BALB/c, самка, возраст 7 недель, CLEA Japan, Inc.). Состав с СРТ-11, полученный в примере получения 7, или раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе вводили в хвостовую вену всего три раза, то есть на 7, 9 и 11 сутки или на 7, 11 и 15 сутки после трансплантации опухолей. Мыши без инъекции каких-либо средств служили контрольной группой. Опухоли иссекали также спустя 21 сутки после трансплантации и измеряли массу опухолей, чтобы таким образом вычислить степень ингибирования пролиферации опухоли, I.R. (%) по формуле, как показано в тестовом примере 6. Результаты показаны в табл. 14.- 25011612 Каждый из препарата СРТ-11 и раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе демонстрировал значительный подавляющий эффект на пролиферацию опухоли для фибросаркомы мыши по сравнению с контрольной группой. Далее, состав с СРТ-11 проявлял более высокий противоопухолевый эффект, чем раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе. Кроме того, ни одно из средств не влияло на массу тела мыши. Таблица 14 Тестовый пример 14. Противоопухолевый эффект в результате однократного или двукратного введения лекарственного средства. Фибросаркому мыши (Meth A), 2,5105 клеток/мышь трансплантировали подкожно в паховую область мыши (BALB/c, самка, возраст 7 недель, CLEA Japan, Inc.). Состав с СРТ-11, полученный в примере получения 7, или раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе вводили в хвостовую вену на 7 и/или 11 сутки всего один раз или дважды после трансплантации опухолей. Мыши без инъекции каких-либо средств служили контрольной группой. Опухоли иссекали также спустя 21 сутки после трансплантации и измеряли массу опухолей, чтобы таким образом вычислить степень ингибирования пролиферации опухоли, I.R. (%) по формуле, как показано в тестовом примере 6. Результаты показаны в табл. 15. Каждый из составов с СРТ-11 и растворов гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе демонстрировал значительный подавляющий эффект на пролиферацию опухоли для фибросаркомы мыши по сравнению с контрольной группой, за исключением части растворов гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе. Кроме того, некоторые из составов с СРТ-11 проявляли более высокий противоопухолевый эффект, чем растворы гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе. Кроме того, ни один из двух видов средств не влиял на массу тела мыши. Таблица 15 Пример 12. Состав с СРТ-11, полученный в примере получения 8, тестировали в качестве состава, хорошо поддерживающего СРТ-11 по настоящему изобретению. Тестовый пример 15. Противоопухолевый эффект. Клетки рака легкого человека (QG56) квадратом 2-3 мм трансплантировали подкожно в паховую область мыши (BALB/C голая, самец, возраст 6 недель, CLEA Japan, Inc.) иглой для трансплантации. Состав с СРТ-11, полученный в примере получения 8, или раствор гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе инъецировали в хвостовую вену всего три раза, которые представляли собой точку (сутки 1), в которой приблизительный объем опухоли рассчитывали посредством 1/2ab2 (а относится к большей оси опухоли, b относится к меньшей оси), приближающийся к около 1 мм 3, дополнительные 4 суток (сутки 5) и дополнительные 8 суток (сутки 9) после трансплантации опухолей. Мыши без инъекции какого-либо средства служили контрольной группой. Приблизительный объем каждой опухоли и массу тела мыши вычисляли на сутки 4, 8, 12, 16 и 21 после первой инъекции. Опухоли иссекали также на 21 сутки после первой инъекции и измеряли массу опухолей, чтобы таким образом вычислить степень ингибирования пролиферации опухоли, I.R. (%) по формуле, как показано в тестовом примере 6. Результаты показаны в табл. 16, на фиг. 28 и 29. Каждый из состава с СРТ-11 и раствора гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе демонстрировал значительный подавляющий эффект на пролиферацию опухоли для легочной карциномы человека по сравнению с контрольной группой. Далее, состав с СРТ-11 проявлял более высокий противоопухолевый эффект по сравнению с раствором гидрохлорида иринотекана в физиологическом растворе (табл. 16, фиг. 28). Кроме того, ни одно из средств не влияло на массу тела мыши (фиг. 29). Таблица 16 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Состав с иринотеканом, содержащий липосому, сформированную мембраной липидного бислоя,содержащего фосфолипид в качестве основного компонента мембраны, где только внешняя поверхность липосомы модифицирована модифицирующим поверхность агентом, содержащим гидрофильный полимер, в котором иринотекан и/или его соль инкапсулированы в концентрации по меньшей мере 0,1 моль/моль (моль лекарственного средства/моль общего липида мембраны) посредством ионного градиента между внутренней водной фазой и внешней водной фазой липосомы. 2. Состав с иринотеканом по п.1, где ионный градиент представляет собой градиент концентрации протонов с градиентом рН, где значение рН внутренней водной фазы ниже, чем значение рН внешней водной фазы.- 27011612 3. Состав с иринотеканом по п.2, где градиент рН образован градиентом концентрации иона аммония и/или градиентом концентрации органического соединения, обладающего аминогруппой, подверженной протонированию. 4. Состав с иринотеканом по любому из пп.1-3, где липосома дополнительно содержит липид, отличный от фосфолипида, и/или модифицирующий поверхность агент. 5. Состав с иринотеканом по п.4, дополнительно содержащий соединение, обладающее основной функциональной группой, в качестве модифицирующего поверхность агента. 6. Фармацевтическая композиция, содержащая состав с иринотеканом по любому из пп.1-5.