Фармацевтический состав, обладающий противогрибковой активностью, и способ его получения

1 Предлагаемое изобретение относится к области медицины и может быть использовано для получения мягкой лекарственной формы, предназначенной для лечения различных микозов кожи. Известны препараты азолового ряда, например кетоконазол, для лечения микотических инфекций кожи (Патент РФ 2126256, кл. А 61K 31/57, опубл. 1999.02.20). Кетоконазол является противогрибковым имидазольным препаратом с широким спектром воздействия против грибов и дрожжей таких как Candidafurfur, Aspergillus spp., Sporothirix schekii, однако, он недостаточно эффективен в отношении дерматофитов. Высокоэффективными противогрибковыми препаратами с широким спектром действия являются композиции, содержащие в качестве фармакологически активного агента тербинафин (Патент РФ 2093152, кл. А 61K 31/135,опубл. 1997.10.20). В России зарегистрировано несколько лекарственных форм тербинафина гидрохлорида для наружного применения: Ламизил (Lamisil) - крем 1% (туба 15 г)Reddy's Laboratories, Индия; Ламизил (Lamisil) - раствор для наружного применения 1%, флакон 30 мл, Novartis Pharma,Швейцария; Ламизил (Lamisil) - спрей для наружного применения 1%, флакон с распылителем 30 мл,Novartis Pharma, Швейцария. Наиболее близким к заявляемому по технической сущности и достигаемому результату,выбранным в качестве прототипа, является крем Ламизил 1% фирмы Novartis Pharma, Швейцария (Справочник ВИДАЛЬ, Лекарственные препараты в России, М., АстраФармСервис, 2001 г.,стр. Б-305). Крем содержит тербинафина гидрохлорид 1%, бензиловый спирт, изопропила миристат,моностеарат сорбитан, натрия гидроксид, полисорбат 60, стеариловый спирт, цетиловый спирт,цетил-пальмитат, воду деминерализованную. Недостатком известного крема являются его недостаточные антибактериальные и противовоспалительные свойства, что делает крем малоэффективным при осложненных формах микозов. Сведения о способе получения крема Ламизил в литературе отсутствуют. Задача, решаемая предлагаемым изобретением, - получение фармацевтического состава, обладающего кроме высокой противогрибковой активности,антибактериальными и противовоспалительными свойствами. 2 Технический результат от использования изобретения заключается в повышении антибактериальных и противовоспалительных свойств препарата. Указанный результат достигается тем, что фармацевтический состав, обладающий противогрибковой активностью, содержащий тербинафина гидрохлорид, основу, консервант, антиоксидант, эмульгатор, липофильную составляющую и растворитель дополнительно содержит кератолитик при следующем содержании компонентов, маc.%: Тербинафин гидрохлорид 0,9-1,1 Основа 48,0-67,0 Консервант 0,1-0,8 Антиоксидант 0,05-0,12 Эмульгатор 2,5-11,0 Липофильная составляющая 5,0-15,0 Кератолитик 0,3-0,7 Растворитель Остальное В качестве основы фармацевтический состав может содержать полиэтиленоксид 400 и полиэтиленоксид 1500, в качестве консерванта натрия бензоат, в качестве антиоксиданта - дибунол, в качестве эмульгатора - моноглицерид дистиллированный и эмульгатор 1, в качестве липофильной составляющей - оливковое масло,в качестве растворителя - пропиленгликоль, в качестве кератолитика - мочевину. Указанный результат достигается также тем, что способ получения фармацевтического состава, обладающего противогрибковой активностью, заключается в том, что смешивают основу с консервантом и эмульгаторами, добавляют липофильную составляющую и заранее приготовленный раствор тербинафина гидрохлорида в растворителе с добавлением антиоксиданта и кератолитика, эмульгируют крем, охлаждают и выдерживают для созревания. Смешивание основы с консервантом натрия бензоатом и эмульгаторами осуществляют при температуре 60-80 С, эмульгирование крема- 28-55 С. Охлаждают крем до 28-35 С. Раствор тербинафина гидрохлорида в растворителе пропиленгликоле готовят при температуре 40-55 С. Активное вещество в предлагаемом фармацевтическом составе - тербинафина гидрохлорид (Е)-N-(6,6-диметил-2-гептен-4-инил)-Nметил-1-нафталинметанамина гидрохлорид общей формулы C21H25NHCl м.м. 327,90 - высокоэффективный противогрибковый препарат, относится к группе аллиламинов. Тербинафин действует за счет подавления скваленэпоксидазы в клеточной мембране гриба. Это приводит к дефициту эргостерола и внутриклеточному накоплению сквалена, что вызывает гибель клетки возбудителя. Оказывает фунгицидное действие на дерматофиты, плесневые и некоторые диморфные грибы, дрожжевые и дрожжеподобные грибы. На некоторые виды дрожжевых грибов может 3 действовать фунгистатически. Активен в отношении возбудителей дерматомикозов (Trichophyton, в т.ч. Т. rubrum, Т. mentagrophytes, Т.Microsporum canis и Epidermophyton floccosum); дрожжеподобных грибов рода Candida (в основном Candida albicans); Pityrosporum orbiculare(Malassezia furfur) - возбудителя разноцветного лишая. В качестве активного вещества в предлагаемом фармацевтическом составе может быть использован, например, тербинафина гидрохлорид фирмы TRANS-MEDICA, серия ТВ 0040999,HAMBURG, соответствующий требованиям нормативной документации фирмы, в качестве липофильной составляющей - оливковое масло,например, по ВФС 42-1776-92; в качестве растворителя - пропиленгликоль, например, по ВФС 42-1594-86 или ТУ 6-09-2434-81; в качестве эмульгатора - эмульгатор 1 - сплавленная смесь спиртов синтетических первичных высших фракции C16-C20 с натриевыми солями сульфоэфиров этих же спиртов, например, по ФС 42-3821-99, и моноглицерид дистиллированный, например, по ТУ 10-04-1197-95; в качестве основы - полиэтиленоксид 400 (полиэтиленгликоль 400, полиоксиэтилен 400), например, по ФС 42-1242-96 и полиэтиленоксид 1500(полиэтиленгликоль 1500), например, по ФС 421885-96. Для стабилизации активного вещества и для предотвращения окислительновосстановительных процессов использован антиоксидант дибунол (бутилгидрокситолуол),например, по ФС 42-3460-97. Для консервации состава и оптимизации рН используется натрия бензоат, например, по ФС 42-2458-94. Как кератолитик и клатратообразователь в составе используется мочевина, например по ГОСТ 6691-77. Входящие в состав компоненты могут быть использованы также импортного производства, разрешенные в РФ. Предлагаемый фармацевтический состав содержит следующее соотношение компонентов, маc.%: тербинафина гидрохлорид - 0,9-1,1,предпочтительнее 1,0; дибунол - 0,05-0,12,предпочтительнее 0,1; мочевина - 0,3-0,7, предпочтительнее 0,5; масло оливковое -5,0-15,0,предпочтительнее 10,0; моноглицерид дистиллированный 0,5-3,0, предпочтительнее 1,5; натрия бензоат 0,1-0,8, предпочтительнее 0,5; полиэтиленоксид 1500 28,0-37,0, предпочтительнее 33,0; полиэтиленоксид 400 20,0-30,0, предпочтительнее 25,0; эмульгатор 1 2,0-8,0,предпочтительнее 5,0, пропиленгликоль - остальное. Предлагаемое соотношение активного вещества и целевых добавок является оптимальным, найдено экспериментально и обеспечивает получение необходимого качества препарата и его терапевтическое действие. 4 Уменьшение количества тербинафина гидрохлорида ниже 0,9 маc.%, а количества мочевины ниже 0,3 маc.% уменьшает эффективность препарата. Увеличение количества тербинафина гидрохлорида более 1,1 маc.% нецелесообразно,поскольку определяется терапевтической дозой. Увеличение количества мочевины более 0,7 маc.% ухудшает качество крема, так как может вызвать раздражение кожи. Увеличение количества дибунола более 0,12 маc.% технологически нецелесообразно, а уменьшение его количества менее 0,05 маc.% снижает качество препарата. Увеличение количества масла оливкового более 15,0 маc.% снижает качество крема в процессе хранения, а уменьшение его количества менее 5,0 маc.% ухудшает качество препарата за счет уменьшения всасываемости. Увеличение количества моноглицерида дистиллированного более 3,0 маc.%, так же как и уменьшение менее 0,5 маc.% технологически нецелесообразно. Увеличение количества натрия бензоата более 0,8 маc.% может вызвать реакцию непереносимости, а уменьшение менее 0,1 маc.% ухудшает качество препарата в процессе хранения в результате микробной обсемененности. Увеличение количества полиэтиленоксида 400 более 30,0 маc.% ухудшает качество крема в процессе хранения, а уменьшение его менее 20,0 маc.% ухудшает технологические свойства крема. Увеличение количества полиэтиленоксида 1500 более 37,0 маc.% технологически нецелесообразно и уменьшает эластичность крема, а уменьшение его количества менее 28,0 маc.% ухудшает качество препарата в процессе хранения. Увеличение количества эмульгатора 1 более 8,0 маc.% технологически нецелесообразно, а уменьшение менее 2,0 маc.% ухудшает качество крема в процессе хранения. Пропиленгликоль в предложенном составе является растворителем и его вводят в количестве до 100 маc.%. В качестве липофильной составляющей возможно использование касторового, кукурузного, соевого и косточкового масел, консерванта - нипагина, нипазола, гермаля 115, довицила,лаурицидина и различных их комбинаций, в качестве антиоксиданта -токоферола ацетат. Фармацевтический состав по предлагаемому изобретению получают следующим образом. Вначале смешивают в определенной последовательности следующие компоненты: полиэтиленоксид 400 перемешивают с водным раствором натрия бензоата, добавляют при перемешивании моноглицерид дистиллированный, затем эмульгатор 1 и полиэтиленоксид 1500. Перемешивают смесь при температуре 6080 С до полного сплавления компонентов, охлаждают до температуры 45-55 С и добавляют оливковое масло для получения эмульсии. Про 5 цесс приготовления эмульсии ведут при постоянном перемешивании и температуре 28-55 С. Готовят раствор тербинафина гидрохлорида добавлением к пропиленгликолю дибунола при температуре 45-60 С. Мочевину и тербинафина гидрохлорид добавляют в раствор при температуре 40-55 С. Добавляют к эмульсии раствор тербинафина гидрохлорида и эмульгируют крем при температуре 28-55 С. Время эмульгирования зависит от объема загрузок. Охлаждают полученный крем до температуры 28-35 С, определяемой требованиями технологического процесса, например, 15-20 мин. Готовый крем выдерживают для созревания 20-24 ч. Полученный крем мягкой консистенции белого или белого с желтоватым оттенком цвета, со слабым специфическим запахом, рН от 3,5 до 5,5. В препарате допускается наличие примесей, каждая из которых не должна превышать 0,5%. Суммарное содержание всех примесей,определяемое методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), не более 2%. Пример 1. В реактор для приготовления крема загружают 30,0 кг полиэтиленоксида 400 и заранее приготовленный водный раствор 0,5 кг натрия бензоата в 2,0 кг воды очищенной. Включают якорную мешалку со скоростью 50-60 об./мин. Перемешивают до однородного раствора. Включают обогрев и нагревают смесь в реакторе до 60-65 С. В реактор загружают 0,5 кг моноглицерида дистиллированного небольшими порциями при работающей мешалке, а затем 2,0 кг эмульгатора 1 также небольшими порциями и при работающей мешалке. Перемешивают 10-15 мин и добавляют 37,0 кг полиэтиленоксида 1500 также небольшими порциями при работающей мешалке. Перемешивают смесь при 7580 С до полного сплавления компонентов. Полноту сплавления компонентов проверяют визуально, отбирая пробу пробоотборником. Загружают в другой реактор 16,52 кг пропиленгликоля для приготовления раствора тербинафина гидрохлорида в пропиленгликоле, включают обогрев и якорную мешалку со скоростью 50-60 об./мин. Содержимое реактора нагревают до температуры 55-60 С. Добавляют в реактор 0,08 кг дибунола и перемешивают до получения однородного раствора. Пуском холодной воды в рубашку реактора охлаждают раствор до температуры 50-55 С. Загружают в реактор 0,5 кг мочевины и 0,9 кг порошка тербинафина гидрохлорида и перемешивают до получения однородной массы. Включают мешалки и добавляют 10,0 кг оливкового масла. Эмульгируют смесь в течение 10 мин. Продолжая перемешивание, загружают раствор тербинафина гидрохлорида в реактор для приготовления крема. Эмульгируют крем при температуре 50-55 С в течение 30 мин. 6 Включают насос на циркуляцию и охлаждают реактор пуском холодной воды в рубашку реактора. Охлаждают крем до температуры 30-35 С в течение 15 мин. Отключают насос от циркуляции, выключают мешалки и готовый крем перекачивают в передвижной сборник для хранения крема и выдерживают в течение суток для созревания. Получают 100 кг крема, соответствующего требованиям на фармацевтическое средство. Пример 2. Аналогично примеру 1, но при следующих количествах компонентов: полиэтиленоксида 400 30,0 кг; раствор 0,1 кг натрия бензоата в 2,0 кг воды; 3,0 кг моноглицерида дистиллированного; 28,0 кг полиэтиленоксида 1500; 8,0 кг эмульгатора 1; 16,55 кг пропиленгликоля; 0,05 кг дибунола; 0,3 кг мочевины; 1,0 кг тербинафина гидрохлорида; 11,0 кг оливкового масла. Раствор тербинафина гидрохлорида в пропиленгликоле готовят при температуре 40-45 С,смешивание основы с эмульгатором при температуре 60-65 С, эмульгирование крема - при температуре 45-50 С, а его охлаждение - при температуре 28-30 С. Получают 100 кг крема,соответствующего требованиям НД на фармацевтическое средство. Пример 3. Отличается от примера 1 последовательностью загрузки ингредиентов. В реактор для приготовления раствора загружают 2 кг воды, 0,8 кг натрия бензоата, 20,0 кг полиэтиленоксида 400,включают перемешивание и обогрев реактора до достижения температуры 60-65 С. После растворения порошка загружают 8,0 кг эмульгатора 1, 2,0 кг моноглицерида дистиллированного, 28,0 кг полиэтиленоксида 1500. Дальнейшее приготовление крема аналогично примеру 1,но при следующих количествах остальных компонентов: тербинафина гидрохлорида 1,1 кг,мочевины 0,7 кг, пропиленгликоля 22,28 кг, дибунола 0,12 кг, масла оливкового 15,0 кг. Эмульгирование крема осуществляют при температуре 50-55 С, раствор тербинафина гидрохлорида готовят при температуре 50-55 С, крем охлаждают до 28-30 С. Получают 100 кг крема,соответствующего требованиям НД на фармацевтическое средство. Пример 4. Особенность технологии заключается в том, что приготовление раствора тербинафина гидрохлорида ведут при температуре 45-50 С путем добавления 26,4 кг пропиленгликоля, 0,5 кг мочевины, 0,1 кг дибунола и 1,0 кг тербинафина гидрохлорида. В остальном технология аналогична примеру 1, но при следующих количествах остальных компонентов: полиэтиленоксид 400 - 25,0 кг, вода - 2,0 кг, натрия бензоат - 0,5 кг, моноглицерид дистиллированный 1,5 кг, полиэтиленоксид 1500 - 33,0 кг, эмульгатор 1 - 5,0 кг, оливковое масло - 5,0 кг. Смешивание основы с натрия бензоатом и эмульга 7 торами осуществляют при температуре 65-70 С,эмульгирование крема - при 50-55 С. Крем охлаждают до температуры 30-35 С. Получают 100 кг крема, соответствующего требованиям НД на фармацевтическое вещество. Пример 5. Особенность технологии заключается в температурных режимах на стадии эмульгирования. Приготовление крема ведут при следующих соотношениях компонентов: тербинафина гидрохлорид - 1,0 кг, полиэтиленоксид 1500 - 33,0 кг, полиэтиленоксид 400 -25,0 кг, моноглицерид дистиллированный -1,5 кг, эмульгатор 1 - 5,0 кг, оливковое масло - 5,0 кг, натрия бензоат - 0,5 кг, мочевина - 0,5 кг, дибунол - 0,1 кг, вода очищенная -2,0 кг, пропиленгликоль - 26,4 кг. Раствор консерванта (из 0,5 кг натрия бензоата и 2,0 кг воды) смешивают с 25,0 кг полиэтиленоксида 400 и нагревают до температуры 65-70 С. В раствор при перемешивании загружают 1,5 кг моноглицерида дистиллированного; 5,0 кг эмульгатора 1 и 33,0 кг полиэтиленоксида 1500. Сплавление основы с эмульгаторами проводят при температуре 65-70 С. Полноту сплавления компонентов проверяют визуально. Приготовление раствора тербинафина гидрохлорида осуществляют постадийно. Сначала,при температуре 55-60 С и перемешивании, в 26,4 кг пропиленгликоля растворяют 0,1 кг дибунола. После полного растворения дибунола раствор охлаждают до температуры 45-50 С,вводят 0,5 кг мочевины и и 1,0 кг тербинафина гидрохлорида. Продолжают перемешивание до получения прозрачного раствора. Приготовление эмульсии ведут, при температуре 40-50 С и перемешивании якорной мешалкой, путем последовательного введения в основу 5,0 кг оливкового масла и раствора тербинафина гидрохлорида в пропиленгликоле. Перемешивают эмульсию 10-15 мин, после чего ее охлаждают до температуры 28-33 С. Дальнейшее эмульгирование ведут при помощи мешалки типа Ультра-Турракс (или РПА-2800 или ГАРТ-220-Ш-5) при охлаждении. Готовый крем выдерживают для созревания не более суток. Получают 100 кг крема, соответствующего требованиям НД на фармацевтическое средство. Смешивание основы крема с натрия бензоатом и эмульгаторами осуществляют при температуре 60-80 С, предпочтительно 60-65 С,поскольку при температуре ниже 60 С процесс сплавления замедляется, а увеличение температуры более 80 С может привести к деструкции входящих компонентов и экономически нецелесообразно. Приготовление раствора тербинафина гидрохлорида осуществляют при температуре 4055 С, предпочтительно 45-50 С, так как уменьшение температуры ниже 40 С увеличивает время растворимости дибунола, а увеличение ее 8 более 55 С не исключает деструкцию действующего вещества. Эмульгирование крема проводят при температуре 28-55 С, предпочтительно 50 С, так как при температуре ниже 28 С идет загущение основы, а при температуре выше 55 С может произойти негативное воздействие на тербинафина гидрохлорид. Биологические испытания проведены на модели кандидоза у мышей. В экспериментах использовали нелинейных мышей массой 20-25 г. Модель кожного кандидоза у мышей воспроизводили в соответствии с рекомендациями приведенными в работах Харлей,Рэй, Вилдфенера [1,2, 3]. Для заражения применяли 3-х суточную культуру Candida albicans,выращенную на твердой среде Сабуро. Для увеличения чувствительности к Candida albicans мышам предварительно (за 3 суток до заражения) однократно п/к вводили гидрокортизон в дозе 5 мг/кг и аллоксан в дозе 200 мг/кг, а также смазывали предварительно выстриженный на боку участок кожи 0,5 % раствором гидрокортизона ацетата и 0,25% раствором неомицина (начиная за 3 дня до заражения и в течение 2 дней после заражения). В предварительных экспериментах была определена заражающая доза Candida albicans - 1011 микробных тел/мышь, которую вводили мышам подкожно в объеме 50 мкл в заранее подготовленный участок. Лечение 1% кремами предлагаемого состава и Ламизила начинали на третьи сутки после заражения. Мазь наносили тонким слоем на пораженный участок кожи и вокруг него 1 раз в день до исчезновения признаков воспаления. Степень поражения (СП) оценивали по трехбалльной системе, исходя из следующих критериев: 1 балл - гиперемия, отек 5 мм; 2 балла - гиперемия, отек 5 мм; 3 балла - отек 5 мм, изъязвление. На рисунке представлены графики изменения степени поражения (СП) в разных группах мышей в процессе лечения 1% кремами ламизила и предлагаемого состава, гдеКонтроль, Ламизил,предлагаемый состав. На основе этих результатов рассчитывали в группах среднее время (от начала лечения) полного излечения (снижение индекса СП до 20% от начального) и среднее время снижения индекса СП на 50 % (скорость выздоровления). Результаты представлены в таблице. Как видно из таблицы, время снижения индекса СП на 50% в группе мышей, получавших крем предлагаемого состава, было равно 5,5 суток по сравнению с 8,10 суток в контроле. Скорость выздоровления в группах животных,получавших крем предлагаемого состава и ламизил, существенно не отличались и были достоверно выше чем в группе контрольных животных. Полное время излечения животных препаратами предлагаемого состава и Ламизил составило 7,43 и 7,22 дней соответственно, что 9 было существенно ниже по сравнению с 9,75 дней у контрольных мышей. Полученные результаты свидетельствуют о том, что предлагаемый фармацевтический состав обладает выраженной противогрибковой активностью. По выраженности эффекта предлагаемый состав не уступает препарату сравнения 1% крему Ламизил (Sandoz, Швейцария). Препарат в виде крема для наружного применения рекомендуется при следующих грибковых заболеваниях: грибковые инфекции кожи, вызванные дерматофитами (дерматофитии); дрожжевые инфекции кожи, главным образом кандидозы; разноцветный (отрубевидный) лишай,причем в этом случае эффективно только местное применение; микозы кистей и стоп при поражениях кожи и/или онихомикозе единичных ногтей с дистального или боковых краев; в качестве дополнения к терапии системными пероральными антимикотиками или при противопоказаниях к их применению. При местном применении всасывается менее 5% дозы, таким образом, системное действие препарата очень незначительно. Препарат липофилен, ему присуща кератинотропность, при наружном применении он, в связи с этим, обладает быстротой действия. Кроме противогрибковой активности, препарат обладает также антибактериальными и противовоспалительными свойствами, что позволяет применять его при осложненных формах микозов. Среднee время Среднee время Кол-во полного изле- снижения СП животных чения, сутки на 50%, сутки Контроль 10 9,750,91 8,100,76 Ламизил Sandoz 10 7,220,68 5,550,64 Предлагаемый 10 7,430,93 5,500,76 фармацевтический состав Группа 10 тербинафина гидрохлорид, основу, консервант,антиоксидант, эмульгатор, липофильную составляющую и растворитель, отличающийся тем, что он дополнительно содержит кератолитик при следующем соотношении компонентов,мас.%: Тербинафин гидрохлорид 0,9-1,1 Основа 48,0-67,0 Консервант 0,1-0,8 Антиоксидант 0,05-0,12 Эмульгатор 2,5-11,0 Липофильная составляющая 5,0-15,0 Кератолитик 0,3-0,7 Растворитель Остальное 2. Фармацевтический состав по п.1, отличающийся тем, что в качестве кератолитика он содержит мочевину. 3. Фармацевтический состав по пп.1 и 2,отличающийся тем, что в качестве основы он содержит полиэтиленоксид 400 и полиэтиленоксид 1500. 4. Фармацевтический состав по пп.1-3, отличающийся тем, что в качестве консерванта он содержит натрия бензоат. 5. Фармацевтический состав по пп.1-4, отличающийся тем, что в качестве антиоксиданта он содержит дибунол. 6. Фармацевтический состав по пп.1-5, отличающийся тем, что в качестве эмульгатора он содержит моноглицерид дистиллированный и эмульгатор 1. 7. Фармацевтический состав по пп.1-6, отличающийся тем, что в качестве липофильной составляющей он содержит оливковое масло. 8. Фармацевтический состав по пп.1-7, отличающийся тем, что в качестве растворителя он содержит пропиленгликоль. 9. Способ получения фармацевтического состава по пп.1-8, заключающийся в том, что смешивают основу с консервантом и эмульгаторами, добавляют липофильную составляющую и заранее приготовленный раствор тербинафина гидрохлорида в растворителе с добавлением антиоксиданта и кератолитика, эмульгируют крем, охлаждают и выдерживают для созревания. 10. Способ по п.9, отличающийся тем, что раствор тербинафина гидрохлорида в пропиленгликоле готовят при температуре 40-55 С. 11. Способ по пп.9, 10, отличающийся тем,что смешивание основы с натрия бензоатом и эмульгаторами осуществляют при температуре 60-80 С. 12. Способ по пп.9-11, отличающийся тем,что приготовление эмульсии и эмульгирование крема осуществляют при температуре 28-55 С. 13 Способ по пп.9-12, отличающийся тем,что крем охлаждают до 28-33 С.