Терапевтические полимерные наночастицы, содержащие алкалоиды vinca, и их применение

Изобретение относится в общем к терапевтическим наночастицам. Описанные здесь примерные наночастицы могут включать приблизительно 1-20 мас.% алкалоида vinca и приблизительно 50-99 мас.% биосовместимого полимера. Родственные заявки По заявке на данное изобретение испрашивается приоритет на основании U.S.S.N. 61/061760, поданной 16 июня 2008 г.; U.S.S.N. 61/105916, поданной 16 октября 2008 г.; U.S.S.N. 61/106777, поданной 20 октября 2008 г.; U.S.S.N. 61/169514, поданной 15 апреля 2009 г.; U.S.S.N. 61/175209, поданной 4 мая 2009 г.; U.S.S.N. 61/061704, поданной 16 июня 2008 г.; U.S.S.N. 61/169519, поданной 15 апреля 2009 г.;U.S.S.N. 61/182300, поданной 29 мая 2009 г., каждая из которых включена в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме. Уровень техники Системы, которые доставляют некоторые лекарственные средства пациенту (например, нацеленные на конкретную ткань или конкретный тип клеток или нацеленные на конкретную патологическую ткань,но не на нормальную ткань) или которые контролируют высвобождение лекарственных средств, были давно признаны как предпочтительные. Например, терапевтические препараты, которые включают активное лекарственное средство и которые способны локализоваться в конкретной ткани или в конкретном типе клеток, например в конкретной патологической ткани, могут уменьшать количество лекарственного средства в тканях тела, которые не требуют лечения. Это особенно важно при лечении состояния, такого как рак, где желательно, чтобы цитотоксическая доза лекарства, поставлялась к раковым клеткам, не уничтожая при этом окружающие нераковые клетки. Далее, такие терапевтические вещества могут уменьшать нежелательные и иногда угрожающие жизни побочные эффекты, обычные в противораковой терапии. Например, состоящие из наночастиц терапевтические препараты могут вследствие их малого размера избегать распознавания в организме, обеспечивая при этом нацеленную и контролируемую доставку, например оставаясь стабильными в течение эффективного периода времени. Терапевтические препараты, которые предоставляют такую терапию, и/или контролируемое высвобождение, и/или нацеленную терапию, также должны быть способны доставлять эффективное количество лекарственного средства. Может возникнуть проблема приготовления систем наночастиц, которые имеют подходящее количество лекарственного средства, ассоциированного в каждом случае с наночастицей, при сохранении достаточно малого размера этих наночастиц для получения выгодных свойств доставки. Например, хотя желательной является загрузка наночастицы высоким количеством терапевтического средства, препараты наночастиц, которые используют нагрузку лекарственного средства, которая является слишком высокой, будут приводить к наночастицам, которые являются слишком большими для конкретного терапевтического применения. Кроме того, может быть желательным, чтобы терапевтические наночастицы оставались достаточно стабильными для того, чтобы препятствовать быстрому или немедленному высвобождению терапевтического средства. Таким образом, существует потребность в новых готовых формах наночастиц и способах приготовления таких наночастиц и композиций, которые могут доставлять терапевтические уровни лекарственных средств для лечения таких заболеваний, как рак, при уменьшении также побочных эффектов у пациентов. Сущность изобретения В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает терапевтическую наночастицу, которая включает активное вещество или терапевтическое средство, например винорелбин или винкристин или их фармацевтически приемлемые соли, и один, два или три биосовместимых полимера. Например, здесь описана терапевтическая наночастица, содержащая приблизительно 1-20 мас.% терапевтического средства (например, винорелбина или винкристина) и приблизительно 50-99 мас.% биосовместимого полимера, например приблизительно 70-99 мас.% биосовместимого полимера. Например, биосовместимым полимером может быть диблок-сополимер поли(молочной) кислоты и поли(этилен)гликоля (например,PLA-PEG) или диблок-сополимер сополимера поли(молочной) и (гликолевой) кислоты и полиэтиленгликоля (PLGA-PEG) или этот биосовместимый полимер может включать два или более различных биосовместимых полимера. Например, эти терапевтические наночастицы могут также включать гомополимер,такой как гомополимер поли(молочной кислоты). Например, описанная терапевтическая наночастица может включать приблизительно 1-20 мас.% алкалоида vinca и приблизительно 70-99 мас.% биосовместимого полимера, где этот биосовместимый полимер выбран из группы, состоящей из а) диблоксополимера поли(молочной) кислоты и поли(этилен)гликоля; b) диблок-сополимера сополимера поли(молочной) и (гликолевой) кислот и поли(этилен)гликоля; с) комбинации а) и гомополимера поли(молочной) кислоты и d) комбинации b) и гомополимера поли(молочной) кислоты. Диаметр описанных наночастиц может быть, например, приблизительно 60-120 нм, приблизительно 70-120 нм, приблизительно 70-140 нм или приблизительно 80-130 нм. Описанные терапевтические наночастицы могут быть стабильными в течение по меньшей мере 5 дней при 25C, например могут оставаться стабильными на протяжении 5 дней in vitro, например, в растворе сахарозы. В другом варианте осуществления описанные частицы могут, по существу, сразу высвобождать менее приблизительно 2% или менее приблизительно 5%, менее приблизительно 7% или даже менее приблизительно 10% терапевтического средства (например, алкалоида vinca) при помещении в раствор фосфатного буфера при комнатной температуре или при 37C. Один пример терапевтической наночастицы содержит приблизительно 1-20 мас.% алкалоида vinca и приблизительно 70-99 мас.% биосовместимого полимера, где этот биосовместимый полимер выбран из группы, состоящей из а) диблок-сополимера поли(молочной) кислоты и поли(этилен)гликоля; b) диблоксополимера сополимера поли(молочной) и (гликолевой) кислот и поли(этилен)гликоля; с) комбинации а) и гомополимера поли(молочной) кислоты (например, включая диблок-сополимер поли(молочной) кислоты и поли(этиленгликоля) и d) комбинации b) и гомополимера поли(молочной) кислоты. Алколоиды vinca могут включать, например, винорелбин или винкристин или их фармацевтически приемлемые соли. Например, рассматриваемые наночастицы могут включать приблизительно 9-16 мас.% соединения алкалоида vinca. В другом примере рассматриваемые наночастицы могут включать приблизительно 3-9 мас.% соединения алкалоида vinca. Описанные терапевтические наночастицы могут включать приблизительно 10-20 мас.% винорелбина или его фармацевтически приемлемой соли. Кроме того, описанные терапевтические наночастицы могут включать приблизительно 3-10 мас.% винкристина или его фармацевтически приемлемой соли. Например, описанные наночастицы могут включать биосовместимый полимер, которым является диблок-сополимер поли(молочной) кислоты и поли(этилен)гликоля. Диблок-сополимер поли(молочной) кислоты и поли(этилен)гликоля, который может образовывать часть описанной наночастицы, может содержать поли(молочную) кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу приблизительно 15-20 кДа, и поли(этилен)гликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу приблизительно 4-6 кДа. Диблок-сополимер сополимера поли(молочной) и гликолевой кислот и поли(этилен)гликоля может включать сополимер поли(молочной) и гликолевой кислоты, имеющий среднечисловую молекулярную массу приблизительно 15-20 кДа, например приблизительно 16 кДа, и поли(этилен)гликоль,имеющий среднечисловую молекулярную массу приблизительно 4-6 кДа, приблизительно 5 кДа. Эта часть сополимера поли(молочной) и поли(гликолевой) кислоты рассматриваемого диблок-сополимера поли(молочной) и поли(гликолевой) кислоты и поли(этилен)гликоля может иметь в некоторых вариантах осуществления приблизительно 50 мол.% гликолевой кислоты и приблизительно 50 мол.% поли(молочной) кислоты. Примеры терапевтических наночастиц могут включать приблизительно 40-50 мас.% диблоксополимера поли(молочной) кислоты и поли(этилен)гликоля и приблизительно 40-49 мас.% гомополимера поли(молочной) кислоты. Такие гомополимеры поли(молочной) кислоты могут иметь, например,средневесовую молекулярную массу приблизительно 8-12 кДа, например приблизительно 10 кДа. В одном возможном варианте осуществления описанная наночастица может дополнительно включать приблизительно 0,2-10 мас.% диблок-сополимера сополимера поли(молочной) и (гликолевой) кислот и поли(этилен)гликоля, ковалентно связанного с нацеливающим лигандом. Предложена примерная терапевтическая наночастица, которая включает приблизительно 10-20 мас.% винорелбина или его фармацевтически приемлемой соли или приблизительно 3-10 мас.% винкристина или его фармацевтически приемлемой соли; диблок-полимер, выбранный из сополимера поли(молочной) кислоты и поли(этилен)гликоля или сополимера сополимера поли(молочной) и (гликолевой) кислот и поли (этилен)гликоля, и гомополимер поли(молочной) кислоты, например гомополимер поли(молочной) кислоты, который имеет средневесовую молекулярную массу приблизительно 10 кДа. Такая терапевтическая наночастица может в некоторых вариантах осуществления содержать приблизительно 40-45 мас.% диблок-полимера и приблизительно 40-45 мас.% гомополимера. В некоторых вариантах осуществления описанные наночастицы могут дополнительно включать цетиловый спирт. Также предлагается фармацевтически приемлемая композиция, содержащая множество описанных терапевтических наночастиц и фармацевтически приемлемый эксципиент. Примером фармацевтически приемлемых эксципиентов является сахар, такой как сахароза. Также предлагаются способы лечения рака предстательной железы, молочной железы или немелкоклеточного рака легких, предусматривающие введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции, содержащей описанную терапевтическую наночастицу. В другом варианте осуществления настоящего изобретения предлагается множество терапевтических наночастиц, полученных объединением винорелбина или винкристина или их фармацевтически приемлемых солей и диблок-полимера поли(молочной) кислоты и полиэтиленгликоля или диблокполимера сополимера поли(молочной) и (гликолевой) кислот и полиэтиленгликоля и, необязательно,гомополимера с органическим растворителем с образованием первой органической фазы, имеющей приблизительно 10-40% твердых частиц; объединением этой первой фазы с первым водным раствором с образованием второй фазы; эмульгированием этой второй фазы с образованием фазы эмульсии; гашением этой фазы эмульсии с образованием погашенной фазы; добавлением солюбилизатора лекарственного средства к этой погашенной фазе с образованием солюбилизированной фазы неинкапсулированного терапевтического средства и фильтрованием этой солюбилизированной фазы для извлечения наночастиц, с образованием посредством этого суспензии терапевтических наночастиц, каждая из которых имеет приблизительно 3-20 мас.% винорелбина или винкристина. Краткое описание фигур На фиг. 1 представлена блок-схема для обработки эмульсии для образования описанной наночастицы. На фиг. 2 представлена диаграмма последовательности стадий обработки эмульсии. На фиг. 3 показано влияние процесса приготовления грубой эмульсии на размер погашенных частиц. Использовали органическую фазу (плацебо) при 30% твердых частиц, эмульгированную при 5:1M:O (W:O) с использованием стандартной водной фазы (1% холат натрия, 2% бензиловый спирт, 4% этилацетат). На фиг. 4 показано влияние давления подачи на размер получаемых частиц. На фиг. 5 показана зависимость размера частиц от размера получения. Органическая фаза плацебо состояла из 25,5% исходного раствора полимера 50:50 16,5/5 PLA/PEG:8,2 PLA. Органическую фазу эмульгировали 5:1 O:M (O:W) со стандартной водной фазой и выполняли множество раздельных пропусканий (через гомогенизатор) с гашением малой порции эмульсии после каждого пропускания. Указанная шкала представляет общие количества твердых частиц этой готовой формы. На фиг. 6 показано влияние концентрации твердых частиц на размер частицы. На фиг. 7 показано высвобождение in vitro наночастицы, которая включает винорелбин. На фиг. 8 показано высвобождение in vitro примерной описанной наночастицы, которая включает винкристин. На фиг. 9 показана фармакокинетика винкристина и PTNP винкристина у крыс. Подробное описание Данное изобретение, в общем, относится к полимерным наночастицам, которые включают терапевтическое средство или лекарственное средство, и способам получения и применения таких терапевтических наночастиц. Обычно "наночастицей" называют любую частицу, имеющую диаметр менее чем 1000 нм, например приблизительно 10-200 нм. Описанные терапевтические наночастицы могут включать наночастицы, имеющие диаметр приблизительно 60-120 нм, или приблизительно 70-130 нм, или приблизительно 60-140 нм, или приблизительно 70-140 нм. Описанные наночастицы могут включать приблизительно 0,2-35 мас.%, приблизительно 3-40 мас.%, приблизительно 5-30 мас.%, приблизительно 1-20 мас.%, приблизительно 10-30 мас.%, приблизительно 15-25 мас.% или даже приблизительно 4-25 мас.% активного агента, такого как противоопухолевого средства, например средства, представляющего собой алкалоид vinca (например, винорелбин или винкристин или их фармацевтически приемлемая соль). Описанные в настоящем описании наночастицы включают один, два, три или более биосовместимых и/или биодеградируемых полимеров. Например, рассматриваемая наночастица может включать приблизительно 60-99 мас.% одного, двух, трех или более биосовместимых полимеров, таких как один или несколько сополимеров (например, диблок-полимеров), которые включают биодеградируемый полимер (например, поли(молочной) кислоты и полиэтиленгликоля) и необязательно приблизительно 0-50 мас.% гомополимера, например биодеградируемого полимера, такого как поли(молочная) кислота. Полимеры. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанные наночастицы включают матрикс из полимеров. Описанные наночастицы могут включать один или несколько полимеров, например диблок-сополимер и/или монополимер. Описанные терапевтические наночастицы могут включать терапевтическое средство, которое может быть ассоциировано с поверхностью полимерного матрикса,инкапсулировано в полимерном матриксе, окружено полимерным матриксом и/или диспергировано в полимерном матриксе. В области доставки лекарственных средств известно большое разнообразие полимеров и способов образования из них частиц. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение направлено на наночастицы по меньшей мере с одним полимером, например первым полимером, который может быть сополимером, например диблок-сополимером, и, необязательно, полимером, который может быть,например, гомополимером. Любой полимер может быть использован с данным изобретением. Полимеры могут быть природными или неприродными (синтетическими) полимерами. Полимеры могут быть гомополимерами или сополимерами, содержащими два или более мономера. Что касается последовательностей (порядков чередования), сополимеры могут быть статистическими сополимерами, блок-сополимерами или могут содержать комбинацию статистических или блок-последовательностей. Рассматриваемые полимеры могут быть биосовместимыми и/или биодеградируемыми. Термин "полимер" имеет в данном контексте его ординарное значение, используемое в данной области, т.е. имеет молекулярную структуру, содержащую одно или несколько повторяющихся элементарных звеньев (мономеров), соединенных ковалентными связями. Эти повторяющиеся звенья могут быть,все, идентичными или в некоторых случаях в этом полимере могут иметься более одного типа повторяющихся звеньев. В некоторых случаях этот полимер может иметь биологическое происхождение, т.е. быть биополимером. Не ограничивающие изобретение примеры включают пептиды или белки. В некоторых случаях в этом полимере могут присутствовать также дополнительные части молекул, например биологические части, например, такие как части, описанные ниже. Если в полимере присутствуют более одного типа повторяющихся элементарных звеньев, то этот полимер называют "сополимером". Должно быть понятно, что в любом варианте осуществления, использующем полимер, этот используемый полимер в некоторых случаях может быть сополимером. Повторяющиеся звенья, образующие сополимер,могут быть размещены любым образом. Например, повторяющиеся звенья могут быть размещены в статистическом порядке, в чередующемся порядке или в виде блок-сополимера, т.е. могут содержать одну или несколько областей, каждая из которых содержит первое повторяющееся звено (например, первый блок), и одну или несколько областей, каждая из которых содержит второе повторяющееся звено (например, второй блок), и т.д. Блок-сополимеры могут иметь два (диблок-сополимер), три (триблоксополимер) или большее количество отличающихся блоков. Описанные частицы могут включать сополимеры, которые в некоторых вариантах содержат два или более полимера (таких, как описанные здесь полимеры), которые были ассоциированы друг с другом,обычно ковалентным связыванием этих двух или более полимеров вместе. Таким образом, сополимер может содержать первый и второй полимеры, которые были конъюгированы вместе с образованием блок-сополимера, где этот первый полимер может быть первым блоком этого блок-сополимера, а второй полимер может быть вторым блоком этого блок-сополимера. Конечно, квалифицированным в данной области специалистам будет понятно, что блок-сополимер может в некоторых случаях содержать множественные блоки полимера и что "блок-сополимер" не ограничивается в данном контексте только блоксополимерами, имеющими только единственный первый блок и единственный второй блок. Например,этот блок-сополимер может содержать первый блок, содержащий первый полимер, второй блок, имеющий второй полимер, и третий блок, содержащий третий полимер или первый полимер и т.д. В некоторых случаях блок-сополимеры могут содержать любое число первых блоков первого полимера и вторых блоков второго полимера (и в некоторых случаях третьи блоки, четвертые блоки и т.д.). Кроме того, следует отметить, что блок-сополимеры могут быть также образованы в некоторых случаях из других блоксополимеров. Например, первый блок-сополимер может быть конъюгирован с другим полимером (который может быть гомополимером, биополимером, другим блок-сополимером и т.д.) с образованием нового блок-сополимера, содержащего множественные типы блоков, и/или с другими частями (например, не с полимерными частями молекулы). В некоторых вариантах осуществления этот полимер (например, сополимер, например блоксополимер) может быть амфифильным, т.е. имеющим гидрофильную часть и гидрофобную часть или относительно гидрофильную часть и относительно гидрофобную часть. Гидрофильным полимером может быть обычно полимер, который аттрагирует воду, а гидрофобным полимером может быть полимер,который обычно отталкивает воду. Гидрофильный или гидрофобный полимер может быть идентифицирован, например, приготовлением пробы этого полимера и измерением его краевого угла с водой (обычно этот полимер будет иметь краевой угол менее 60C, тогда как гидрофобный полимер будет иметь краевой угол более приблизительно 60C). В некоторых случаях гидрофильность двух или более полимеров может быть измерена относительно друг друга, т.е. первый полимер может быть более гидрофильным,чем второй полимер. Например, первый полимер может иметь меньший угол контакта, чем второй полимер. В одном ряду вариантов осуществления настоящего изобретения полимер (например, сополимер,например, блок-сополимер), рассматриваемый здесь, включает биосовместимый полимер, т.е. этот полимер обычно не индуцирует вредную реакцию при введении или инъецировании в живого субъекта, например, без значительного воспаления и/или острого отторжения этого полимера иммунной системой,например, через Т-клеточную реакцию. Таким образом, рассматриваемые здесь терапевтические частицы могут быть неиммуногенными. Термин "неиммуногенный" относится в данном контексте к эндогенному фактору роста в его нативном состоянии, который в норме не индуцирует или индуцирует только минимальные уровни циркулирующих антител, Т-клеток или реактивных иммунных клеток и который в норме не индуцирует в индивидуумах иммунную реакцию против самого себя. Биосовместимость обычно относится к острому отторжению материала по меньшей мере части иммунной системы, т.е. не биосовместимый материал, имплантированный в субъекта, провоцирует иммунную реакцию в этом субъекте, которая может быть достаточно тяжелой, так что иммунная система не может адекватно контролировать отторжение этого материала, и часто имеет такую степень, что этот материал должен быть удален из этого субъекта. Одним простым тестом для определения биосовместимости может быть экспонирование полимера клеткам in vitro; биосовместимые полимеры являются полимерами, которые обычно не приводят к значительной смерти клеток при умеренных концентрациях,например при концентрациях 50 мкг/106 клеток. Например, биосовместимый полимер может вызывать менее чем приблизительно 20% гибели клеток при предоставлении клеткам, таким как фибробласты или эпителиальные клетки, даже если он подвергается фагоцитозу или другим образом поглощается такими клетками. Не ограничивающие изобретение примеры биосовместимых полимеров, которые могут быть применимы в различных вариантах осуществления данного изобретения, включают полидиоксанон(PDO), полигидроксиалканоат, полигидроксибутират, поли(глицеринсебацат), полигликолид, полилактид, PLGA, поликапролактон или сополимеры или производные, включающие эти и/или другие полимеры. В некоторых вариантах осуществления рассматриваемые биосовместимые полимеры могут быть биодеградируемыми, т.е. этот полимер способен деградироваться, химически и/или биологически, в физиологической среде, например внутри тела. В данном контексте "биодеградируемыми полимерами" являются полимеры, которые при введении в клетки разрушаются клеточным аппаратом (являются биологически деградируемыми) и/или химическим процессом, таким как гидролиз (являются химически деградируемыми), в компоненты, которые эти клетки могут либо повторно использовать, либо устранять без значимого токсического действия на эти клетки. В одном варианте осуществления биодеградируемый полимер и побочные продукты его деградации могут быть биосовместимыми. Например, рассматриваемый полимер может быть полимером, который гидролизуется самопроизвольно при подвергании действию воды (например, в субъекте), этот полимер может деградироваться под действием тепла (например, при температурах приблизительно 37C). Деградация полимера может иметь место при варьирующихся скоростях в зависимости от используемого полимера или сополимера. Например, период полужизни этого полимера (время, при котором 50% этого полимера может деградироваться в мономеры и/или другие неполимерные части молекул) может быть порядка дней, недель, месяцев, лет, в зависимости от этого полимера. Эти полимеры могут быть биологически деградируемыми,например, посредством ферментативной активности или клеточного аппарата, в некоторых случаях например, посредством воздействия лизоцима (например, при относительно низком рН). В некоторых случаях эти полимеры могут разрушаться в мономеры и/или другие неполимерные части, которые клетки могут повторно использовать или устранять без значимого токсичного действия на клетки (например,полилактид может быть гидролизован с образованием молочной кислоты, полигликолид может быть гидролизован с образованием гликолевой кислоты и т.д.). В некоторых вариантах осуществления полимерами могут быть сложные полиэфиры, включающие сополимеры, содержащие звенья молочной кислоты и гликолевой кислоты, такие как сополимер поли(молочной кислоты и гликолевой кислоты) и сополимер поли(лактида и гликолида), вместе называемые "PLGA"; и гомополимеры, содержащие звенья гликолевой кислоты, называемые здесь "PGA", и звенья молочной кислоты, такие как поли-L-молочная кислота, поли-D-молочная кислота,поли-D,L-молочная кислота, поли-L-лактид, поли-D-лактид и поли-D,L-лактид, вместе называемые"PLA". В некоторых вариантах осуществления примерные сложные полиэфиры включают, например, полигидроксикислоты; пэгилированные полимеры и сополимеры лактида и гликолида (например,пэгилированный PLA, пэгилированный PGA, пэгилированный PLGA и их производные). В некоторых вариантах осуществления сложные полиэфиры включают, например, полиангидриды,поли(ортоэфир),пэгилированный поли(ортоэфир),поли(капролактон),пэгилированный поли(капролактон), полилизин, пэгилированный полилизин, поли(этиленимин), пэгилированный поли(этиленимин), сополимер поли(L-лактида) и L-лизина), поли(эфир серина), поли(эфир 4-гидрокси-Lпролина), поли[-(4-аминобутил)-L-гликолевую кислоту] и их производные. В некоторых вариантах осуществления этим полимером может быть PLGA. PLGA является биосовместимым и биодеградируемым сополимером молочной кислоты и гликолевой кислоты, и различные формы PLGA могут быть охарактеризованы отношением молочная кислота:гликолевая кислота. Молочной кислотой может быть L-молочная кислота, D-молочная кислота или D,L-молочная кислота. Скорость деградации PLGA может корректироваться изменением отношения молочная кислота:гликолевая кислота. В некоторых вариантах осуществления PLGA, который может быть использован в соответствии с данным изобретением, может быть охарактеризован молярным отношением молочная кислота:гликолевая кислота приблизительно 85:15, приблизительно 75:25, приблизительно 60:40, приблизительно 50:50, приблизительно 40:60, приблизительно 25:75 или приблизительно 15:85. В некоторых вариантах осуществления отношение мономеров молочная кислота:гликолевая кислота в полимере этой частицы (например, блок-сополимера PLGA или блок-сополимера PLGA-PEG) может быть выбрано для оптимизации на различные параметры, такие как поглощение воды, высвобождение терапевтического средства, и/или может быть оптимизирована кинетика деградации полимера. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть одним или несколькими акриловыми полимерами. В некоторых вариантах осуществления акриловые полимеры включают, например, сополимеры акриловой кислоты и метакриловой кислоты, сополимеры метилметакрилата, этоксиэтилметакрилатов,цианоэтилметакрилата,сополимер аминоалкилметакрилата,поли(акриловую кислоту),поли(метакриловую кислоту), сополимер алкиламида метакриловой кислоты, поли(метилметакрилат), сополимер поли(метакриловой кислоты) и полиакриламида, сополимер аминоалкилметакрилата, сополимеры глицидилметакрилата, полицианоакрилаты и комбинации, содержащие один или несколько из предыдущих полимеров. Акриловый полимер может содержать полностью полимеризованные сополимеры эфиров акриловой и метакриловой кислот с низким содержанием групп четвертичного аммония. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть катионными полимерами. Обычно катионные полимеры способны конденсироваться и/или защищать отрицательно заряженные цепи нуклеиновых кислот (например, ДНК, РНК или их производных). В некоторых вариантах осуществления рассматриваются аминсодержащие полимеры, такие как поли(лизин), полиэтиленимин (PEI), и дендримеры поли(амидоамина), в описанной частице. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть деградируемыми сложными полиэфирами, несущими катионные боковые цепи. Примеры этих сложных полиэфиров включают поли(сополимер L-лактида и L-лизина), поли(эфир серина) и поли(эфир 4-гидрокси-L-пролина). Полимер(например, сополимер, например, блок-сополимер), содержащий повторяющиеся звенья поли(этиленгликоля), может также называться "пэгилированным" полимером. Такие полимеры могут контролировать воспаление и/или иммуногенность (т.е. способность провоцировать иммунную реакцию) и/или снижать скорость клиренса из системы кровообращения через ретикулоэндотелиальную систему(RES) вследствие присутствия групп поли(этиленгликоля). Пэгилирование может быть также использовано в некоторых случаях для уменьшения взаимодействия зарядов между полимером и биологической частью, например, созданием гидрофильного слоя на поверхности этого полимера, который может защищать этот полимер от взаимодействия с этой биологической частью. В некоторых случаях добавление повторяющихся звеньев поли(этилен)гликоля может увеличивать время полужизни этого полимера (например, сополимера, например блок-сополимера), например, уменьшением поглощения этого полимера фагоцитарной системой, с уменьшением эффективности трансфекции/поглощения клетками. Квалифицированным в данной области специалистам будут известны методы и способы пэгилирования полимера, например с использованием EDC (гидрохлорида 1 этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида) и NHS (N-гидроксисукцинимида), для реакции полимера с ПЭГ-группой, заканчивающейся амином, способы полимеризации с раскрытием кольца (ROMP) или т.п. Рассматривается, что ПЭГ может включать группу концевой стороны, например, когда ПЭГ не конъюгирован с лигандом. Например, ПЭГ может заканчиваться гидроксилом, метокси или другой алкоксильной группой, метилом или другой алкильной группой, арильной группой, группой карбоновой кислоты, амином, амидом, ацетильной группой, гуанидиногруппой или имидазолом. Другие рассматриваемые концевые группы включают группы азида, алкина, малеимида, альдегида, гидразида, гидроксиламина, алкоксиамина или тиола. Описанные здесь частицы могут содержать или могут не содержать ПЭГ. Кроме того, некоторые варианты осуществления могут быть направлены на сополимеры, содержащие поли(сложный эфирпростой эфир), например полимеры, имеющие повторяющиеся звенья, соединенные сложноэфирными связями (например, связями R-C(O)-O-R') и связями простых эфиров (например, R-O-R'). В некоторых вариантах осуществления этого изобретения биодеградируемый полимер, такой как гидролизуемый полимер, содержащий группы карбоновой кислоты, может быть конъюгирован с повторяющимися звеньями поли(этилен)гликоля с образованием поли(сложный эфир-простой эфир). В одном варианте осуществления молекулярная масса этих полимеров может быть оптимизирована для эффективного лечения, как описано здесь. Например, молекулярная масса полимера может влиять на скорость деградации частиц (например, при корректировании молекулярной массы биодеградируемого полимера), растворимость, поглощение воды и кинетику высвобождения лекарственного средства. Например, молекулярная масса этого полимера может корректироваться таким образом, что эта частица биодеградируется в субъекте, получающем лечение, в пределах приемлемого периода времени (в диапазоне от нескольких часов до 1-2 недель, 3-4 недель, 5-6 недель, 7-8 недель и т.д.). Описанная частица может, например, содержать сополимер PEG и PLGA, PEG может иметь молекулярную массу 1000-20000 Да, например 5000-20000 Да, например 10000-20000 Да, и PLGA может иметь молекулярную массу 5000-100000 Да, например 20000-70000 Да, например 20000-50000 Да. Для примера в настоящем описании описана терапевтическая наночастица, которая включает приблизительно 10-99 мас.% сополимера поли(молочной) кислоты и поли(этилен)гликоля или сополимера поли(молочной) и поли(гликолевой) кислоты и поли(этилен)гликоля или приблизительно 20-80 мас.%,приблизительно 40-80 мас.%, или приблизительно 30-50 мас.%, или приблизительно 70-90 мас.% сополимера поли(молочной) кислоты и поли(этилен)гликоля или сополимера поли(молочной) и поли(гликолевой) кислоты и поли(этилен)гликоля. Примерные сополимеры поли(молочной) кислоты и поли(этилен)гликоля могут иметь среднечисловую молекулярную массу приблизительно 15-20 кДа, или приблизительно 10-25 кДа поли(молочной) кислоты и среднечисловую молекулярную массу приблизительно 4-6, или приблизительно 2-10 кДа поли(этилен)гликоля. Описанные наночастицы могут необязательно включать приблизительно 1-50 мас.% поли(молочной) кислоты или сополимера поли(молочной) кислоты и поли(гликолевой) кислоты (который не содержит PEG, например гомополимера PLA) или могут необязательно включать приблизительно 150 мас.%, или приблизительно 10-50 мас.%, или приблизительно 30-50 мас.% поли(молочной) кислоты или сополимера поли(молочной) кислоты и поли(гликолевой) кислоты. Например, сополимер поли(молочной) или поли(молочной) и поли(гликолевой) кислоты может иметь среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5-15 кДа, или приблизительно 5-12 кДа. Примерный гомополимерныйPLA может иметь среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5-10 кДа. Примерный PLGA может иметь среднечисловую молекулярную массу приблизительно 8-12 кДа. В некоторых вариантах осуществления описанные полимеры могут быть конъюгированы с липидом, например "кэппированы на конце", например могут включать заканчивающийся липидом PEG. Как описано ниже, эта липидная часть полимера может быть использована для самосборки с другим полимером с облегчением образования наночастицы. Например, гидрофильный полимер может конъюгироваться с липидом, который будет самособираться с гидрофобным полимером. Примерные липиды включают жирные кислоты, такие как имеющие длинную цепь (например,С 8-С 50), замещенные или незамещенные углеводороды. В некоторых вариантах осуществления группой жирной кислоты может быть С 10-С 20-жирная кислота или ее соль. В некоторых вариантах осуществления группой жирной кислоты может быть С 15-С 20-жирная кислота или ее соль. В некоторых вариантах осуществления жирная кислота может быть ненасыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной. Например, группой жирной кислоты может быть одна или несколько из масляной, капроновой, каприловой, каприновой, лауриновой, миристиновой, пальмитиновой, стеариновой, арахидиновой, бегеновой или лигноцериновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления группой жирной кислоты может быть одна или несколько из пальмитолеиновой, олеиновой, вакценовой, линолевой, альфа-линоленовой,гамма-линоленовой, арахидоновой, гадолеиновой, эйкозапентановой, докозагексановой или эруковой кислоты. В одном конкретном варианте осуществления липид является липидом формулы (V) и его солями,где каждый R независимо обозначает C1-30 алкил. В одном варианте формулы (V) этим липидом является 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3 фосфоэтаноламин (DSPE) и его соли, например соль натрия. В одном варианте необязательные "нацеливающие" части малых молекул связаны, например ковалентно связаны, с липидным компонентом этой наночастицы. Например, здесь обсуждается также наночастица, содержащая терапевтическое средство, полимерный матрикс, содержащий функционализированные и нефункционализированные полимеры, липид и низкомолекулярный нацеливающий лиганд, где этот нацеливающий лиганд связан, например ковалентно связан, с липидным компонентом этой наночастицы. Нацеливающие части молекулы. Предлагаются наночастицы, которые могут включать необязательную нацеливающую часть, т.е. часть, способную связываться или другим образом ассоциироваться с биологической частицей, например компонентом мембраны, рецептором поверхности клетки, специфическим для предстательной железы мембранным антигеном или т.п. Нацеливающая часть, присутствующая на поверхности этой частицы,может позволять этой частице становиться локализованной в конкретном сайте-мишени, например, опухоли, патологическом сайте, ткани, органе, типе клеток и т.д. Затем это лекарственное средство или другая полезная нагрузка могут в некоторых случаях высвобождаться из частицы и взаимодействовать локально с конкретным сайтом-мишенью. В одном варианте осуществления этого изобретения нацеливающей частью молекулы может быть низкомолекулярный лиганд, например низкомолекулярный лиганд PSMA. Например, нацеливающая часть может заставлять эти частицы становиться локализованными в опухоли, патологическом сайте,ткани, органе, типе клеток и т.д. в теле субъекта в зависимости от используемой нацеливающей части. Например, низкомолекулярный лиганд PSMA может становиться локализованным в клетках рака предстательной железы. Этим субъектом может быть человек или животное, не являющееся человеком. Примеры субъектов включают, но не ограничиваются ими, млекопитающее, такое как собака, кошка, лошадь, осел, кролик, корова, свинья, овца, коза, крыса, мышь, морская свинка, хомяк, примат, человек или т.п. Рассматриваемые нацеливающие части включают малые молекулы. В некоторых вариантах осуществления термин "малая молекула" относится к органическим соединениям, независимо от того, являются ли они встречающимися в природе или искусственно созданными (например, при помощи химического синтеза), которые имеют относительно низкую молекулярную массу и которые не являются белками,полипептидами или нуклеиновыми кислотами. Малые молекулы обычно имеют множественные углеродуглеродные связи. В некоторых вариантах осуществления малые молекулы имеют размер приблизительно менее 2000 г/моль. В некоторых вариантах осуществления малые молекулы имеют размер приблизительно менее 1500г/моль или менее приблизительно 1000 г/моль. В некоторых вариантах осуществления малые молекулы имеют размер менее 800 г/моль или менее приблизительно 500 г/моль, например при-7 020753 близительно 100-600 г/моль, или приблизительно 200-500 г/моль. Например, лигандом может быть низкомолекулярный лиганд PSMA, такой как и его энатиомеры, стереоизомеры, ротамеры, таутомеры, диастереомеры или рацематы. В некоторых вариантах осуществления нацеливающие части малых молекул, которые могут быть использованы для нацеливания на клетки, ассоциированные с опухолями рака предстательной железы,включают пептидазные ингибиторы PSMA, такие как 2-РМРА, GPI5232, VA-033, фенилалкилфосфонамидаты и/или их аналоги и производные. В некоторых вариантах осуществления низкомолекулярные нацеливающие части, которые могут быть использованы для нацеливания на клетки, ассоциированные с опухолями рака предстательной железы, включают производные тиола и индолтиола, такие как 2-МРРА,и производные 3-(2-меркаптоэтил)-1 Н-индол-2-карбоновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления низкомолекулярные нацеливающие части, которые могут быть использованы для нацеливания на клетки, ассоциированные с опухолями рака предстательной железы, включают производные гидроксаматов. В некоторых вариантах осуществления низкомолекулярные нацеливающие части, которые могут быть использованы для нацеливания на клетки, ассоциированные с опухолями предстательной железы,включают ингибиторы на основе PBDA и мочевины, такие как ZJ 43, ZJ 11, ZJ 17, ZJ 38 и/или их аналоги и производные, нацеливающие на рецептор андрогена агенты (ARTA), полиамины, такие как ингибиторы путресцина, спермина и спермидина, ингибиторы фермента глутаматкарбоксилазы II (GCPII), также известного как NAAG-пептидаза или NAALAD-аза. В другом варианте осуществления настоящего изобретения этой нацеливающей частью может быть лиганд, который нацелен на Her2, EGFR или toll-рецепторы. Например, рассматривающиеся нацеливающие части могут включать нуклеиновую кислоту, полипептид, гликопротеин, углевод или липид. Например, нацеливающая часть может быть нацеливающей на нуклеиновую кислоту частью (например,аптамером, например аптамером А 10), которая связывается со специфическим для типа клеток маркером. Обычно этим аптамером является олигонуклеотид (например, ДНК, РНК или их аналог или производное), который связывается с конкретной мишенью, такой как полипептид. В некоторых вариантах осуществления нацеливающей частью может быть встречающийся в природе или синтетический лиганд для рецептора поверхности клетки, например, фактор роста, гормон, LDL,трансферрин и т.д. Нацеливающей частью может быть антитело, причем этот термин включает фрагменты антител; характерные части антител, одноцепочечные нацеливающие части могут быть идентифицированы, например, с использованием таких процедур, как фаговый дисплей. Нацеливающими частями могут быть нацеливающий пептид или нацеливающий пептидомиметик, которые имеют длину приблизительно до 50 остатков. Например, нацеливающие части могут включать аминокислотную последовательность AKERC, CREKA, ARYLQKLN или AXYLZZLN, где X и Z являются вариабельными аминокислотами, и эта последовательность имеет длину менее 20, 50 или 100 остатков. Пептид CREKA(Cys Arg Glu Lys Ala) или его пептидомиметический пептид или октапептид AXYLZZLN также рассматриваются в качестве нацеливающих частей молекул, а также пептиды или их консервативные варианты или псевдомиметики, которые связываются с коллагеном IV или образуют комплекс с коллагеном IV,или нацелены на ткань базальной мембраны (например, базальной мембраны кровеносного сосуда), могут быть использованы в качестве нацеливающей части молекулы. Примеры нацеливающих частей включают пептиды, которые нацелены на ICAM (молекулу межклеточной адгезии, например ICAM-1). Описанные здесь нацеливающие части обычно конъюгируют с описанным полимером или сополимером (например, PLA-PEG), и такой конъюгат полимера может образовывать часть описываемой наночастицы. Например, описываемая терапевтическая наночастица может, необязательно, включать приблизительно 0,2-10 мас.% PLA-PEG или PLGA-PEG, где PEG функционализирован нацеливающим лигандом. Рассматриваемые терапевтические наночастицы могут включать, например, приблизительно 0,2-10 мол.% PLA-PEG-лиганда или сополимера поли(молочной) кислоты и поли(гликолевой) кислотыPEG-лиганда. Например, PLA-PEG-лиганд может включать PLA со среднечисловой молекулярной массой 10-20 кДа и PEG со среднечисловой молекулярной массой приблизительно 4000-8000 Да. Наночастицы. Описанные наночастицы могут иметь, по существу, сферическую (т.е. эти частицы обычно кажутся сферическими) или несферическую конфигурацию. Например, эти частицы после набухания или сжатия могут принимать несферическую конфигурацию. В некоторых случаях эти частицы могут включать полимерные смеси. Например, полимерная смесь может включать первый сополимер, который включает полиэтиленгликоль, и второй полимер. Описанные наночастицы могут иметь характеристический размер менее приблизительно 1 мкм, где этим характеристическим размером частицы является диаметр идеальной сферы, имеющей тот же самый объем, что и объем этой частицы. Например, эта частица может иметь в некоторых случаях характеристический размер менее приблизительно 300 нм, менее приблизительно 200 нм, менее приблизительно 150 нм, менее приблизительно 100 нм, менее приблизительно 50 нм, менее приблизительно 30 нм, менее приблизительно 10 нм, менее приблизительно 3 нм или менее приблизительно 1 нм. В конкретных вариантах осуществления описанные наночастицы могут иметь диаметр приблизительно 70-200 нм или приблизительно 70-180 нм, приблизительно 80-130 нм, приблизительно 80-120 нм. В одной серии вариантов эти частицы могут иметь внутреннюю часть и поверхность, где эта поверхность имеет состав, отличающийся от состава внутренней части, т.е. может быть по меньшей мере одно соединение, присутствующее во внутренней части, но не присутствующее на поверхности (или наоборот), и/или по меньшей мере одно соединение присутствует во внутренней части и на поверхности в различных концентрациях. Например, в одном варианте осуществления соединение, такое как нацеливающая часть (т.е. лиганд низкой молекулярной массы) полимерного конъюгата данного изобретения,может присутствовать как во внутренней части, так и на поверхности этой частицы, но при более высокой концентрации на поверхности, чем во внутренней части этой частицы, хотя в некоторых случаях эта концентрация во внутренней части этой частицы может быть равна, по существу, ненулевой, т.е. имеется детектируемое количество этого соединения, присутствующее во внутренней части этой частицы. В некоторых случаях внутренняя часть этой частицы является более гидрофобной, чем поверхность этой частицы. Например, внутренняя часть этой частицы может быть относительно гидрофобной в отношении поверхности этой частицы, и лекарственное средство или другая полезная нагрузка может быть гидрофобной и легко ассоциируется с относительно гидрофобным центром этой частицы. Таким образом, лекарственное средство или другая полезная нагрузка могут содержаться внутри внутренней части этой частицы, которая может защищать их от наружной среды, окружающей эту частицу (или vice versa). Например, лекарственное средство или другая полезная нагрузка, содержащиеся в частице, вводимой субъекту, будут защищены от тела субъекта, и тело субъекта может быть также, по существу, изолировано от этого лекарственного средства в течение, по меньшей мере, некоторого периода времени. Например, здесь описана терапевтическая полимерная наночастица, содержащая первый нефункционализированный полимер; необязательный второй нефункционализованный полимер; причем необязательный функционализированный полимер содержит нацеливающую часть; и терапевтическое средство. В одном конкретном варианте осуществления первым нефункционализированным полимером является PLA, PLGA или PEG или их сополимеры, например диблок-сополимер PLA-PEG. Например, полимерная наночастица может иметь PEG-корону с плотностью приблизительно 0,065 г/см 3 или приблизительно 0,01-0,10 г/см 3. Описанные наночастицы могут быть стабильными, например, в растворе, который может содержать сахарид, в течение по меньшей мере приблизительно 3 дней, по меньшей мере приблизительно 4 дней или по меньшей мере приблизительно 5 дней при комнатной температуре или 25C. В некоторых вариантах осуществления описанные наночастицы могут также включать жирный спирт, который может увеличивать скорость высвобождения лекарственного средства. Например, описанные наночастицы могут включать С 8-С 30-спирт, такой как цетиловый спирт, октанол, стеариловый спирт, арахидиловый спирт, докозональ или октазональ. Наночастицы могут иметь свойства контролируемого высвобождения, например могут быть способны доставлять некоторое количество активного средства пациенту, например, в конкретный участок в пациенте, на протяжении пролонгированного периода времени, например на протяжении 1 дня, 1 недели или более длительного времени. В некоторых вариантах осуществления описанные наночастицы, по существу, немедленно высвобождают (например, на протяжении приблизительно 1-30 мин) менее приблизительно 2%, менее приблизительно 4%, менее приблизительно 5% или менее приблизительно 10% активного средства (например, алкалоида vinca), например, при помещении в раствор фосфатного буфера при комнатной температуре и/или 37C. В одном варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает наночастицу, содержащую 1) полимерный матрикс и 2) амфифильное соединение или амфифильный слой, который окружает этот полимерный матрикс или диспергирован в этом полимерном матриксе, образуя непрерывную или перемежающуюся оболочку для этой частицы. Амфифильный слой может уменьшать проникновение воды в эту наночастицу, увеличивая посредством этого эффективность инкапсулирования лекарственного средства и замедляя высвобождение лекарственного средства. Кроме того, эти защищенные амфифильным слоем наночастицы могут обеспечивать терапевтические преимущества посредством высвобождения инкапсулированного лекарственного средства и полимера в подходящих временных точках. В данном контексте термин "амфифильный" относится к свойству, при наличии которого молекула имеет как полярную, так и неполярную части. Часто амфифильное соединение имеет полярную головку,присоединенную к длинному гидрофобному хвосту. В некоторых вариантах осуществления полярная часть растворима в воде, тогда как неполярная часть является нерастворимой в воде. Кроме того, эта полярная часть может иметь либо номинальный положительный заряд, либо номинальный отрицательный заряд. Альтернативно, полярная часть может иметь как номинальный положительный заряд, так и отрицательный заряд и быть цвиттерионом или внутренней солью. Примерные амфифильные соединения включают одно или множество из следующих веществ: природно образуемых липидов, поверхностноактивных веществ или синтезированных соединений как с липофильными, так и с гидрофобными частями. Конкретные примеры амфифильных соединений включают, но не ограничиваются ими, фосфолипиды, такие как 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин (DSPE), дипальмитоилфосфатидилхолин(DLPC), включенные при отношении 0,01-60 (масса липида/масса полимера), наиболее предпочтительно 0,1-30 (масса липида/масса полимера). Фосфолипиды, которые могут быть использованы, включают, но не ограничиваются ими, фосфатидные кислоты, фосфатидилхолины как с насыщенными, так и ненасыщенными липидами, фосфатидилэтаноламины, фосфатидилглицерины, фосфатидилсерины, фосфатидилинозиты, лизофосфатидилпроизводные, кардиолипин и -ацилалкилфосфолипиды. Примеры фосфолипидов включают, но не ограничиваются ими, фосфатидилхолины, такие как диолеоилфосфатидилхолин, димиристоилфосфатидилхолин, дипентадеканоилфосфатидилхолин, дилауроилфосфатидилхолин,дипальмитоилфосфатидилхолин (DPPC), дистеароилфосфатидилхолин (DSPC), диарахидоилфосфатидилхолин (DAPC), дибегеноилфосфатидилхолин (DBPC), дитрикозаноилфосфатидилхолин (DTPC), дилигноцероилфосфатидилхолин (DLPC), и фосфатидилэтаноламины, такие как диолеоилфосфатидилэтаноламин или 1-гексадецил-2-пальмитоилглицерофосфоэтаноламин. Могут быть использованы также синтетические фосфолипиды с асимметрическими ацильными цепями (например, с одной ацильной цепью из 6 атомов углерода и другой ацильной цепью из 12 атомов углерода). В одном конкретном варианте осуществления амфифильный компонент может включать лецитин,и/или, в частности, фосфатидилхолин. Получение наночастиц. Другой аспект этого изобретения направлен на системы и способы получения описанных наночастиц. В некоторых вариантах осуществления с использованием двух или более различных полимеров(например, сополимера, такого как диблок-сополимер, и гомополимера) могут контролироваться свойства частиц. В одном конкретном варианте осуществления описанные здесь способы образуют наночастицы, которые имеют высокое количество инкапсулированного терапевтического средства, например могут включать приблизительно 1-40 мас.% или приблизительно 1-30 мас.%, например приблизительно 10-25 мас.% или приблизительно 5-20 мас.% терапевтического средства. В одном варианте осуществления обеспечен способ получения наноэмульсии, такой как процесс,представленный на фиг. 1 и 2. Например, терапевтическое средство, первый полимер (например,PLA-PEG или PLGA-PEG) и второй полимер (например, (PL(G)A или PLA), с органическим раствором образуют первую органическую фазу. Такая первая фаза может включать приблизительно 5-50 мас.% твердых частиц, например приблизительно 5-40% твердых частиц, или приблизительно 10-30% твердых частиц, например приблизительно 10, 15, 20% твердых частиц. Эта первая органическая фаза может быть объединена с первым водным раствором с образованием второй фазы. Этот органический раствор может включать, например, ацетонитрил, тетрагидрофуран, этилацетат, изопропиловый спирт, изопропилацетат, диметилформамид, метиленхлорид, дихлорметан, хлороформ, ацетон, бензиловый спирт, Твин-80,Спан-80 или т.п. и их комбинации. В одном варианте осуществления эта органическая фаза может включать бензиловый спирт, этилацетат и их комбинации. Эта вторая фаза может иметь приблизительно 1-50 мас.%, например 5-40 мас.%, твердых частиц. Водным раствором может быть вода, необязательно в комбинации с одним или несколькими из холата натрия, этилацетата и бензилового спирта. Например, в масляной или органической фазе можно использовать растворитель, который является только частично смешивающимся с нерастворителем (водой). Таким образом, при смешивании при достаточно низком отношении и/или при использовании воды, предварительно насыщенной органическими растворителями, эта масляная фаза остается жидкой. Масляная фаза может быть эмульгирована в водный раствор и в виде капелек жидкости подвергнута усилию сдвига с получением наночастиц с использованием, например, высокоэнергетических систем диспергирования, таких как гомогенизаторы и ультразвуковые дезинтеграторы. Водной частью этой эмульсии, известной также как "водная фаза", может быть раствор поверхностно-активного вещества, состоящий из холата натрия и предварительно насыщенный этилацетатом и бензиловым спиртом. Эмульгирование второй фазы с образованием фазы эмульсии может выполняться в одной или двух стадиях эмульгирования. Например, может быть приготовлена первичная эмульсия, и затем она может эмульгирована с образованием тонкой эмульсии. Эта первичная эмульсия может быть образована, например, с использованием простого смешивания с использованием гомогенизатора высокого давления,зондового ультразвукового дезинтегратора, перемешивающего стержня или роторного-статорного гомогенизатора. Эта первичная эмульсия может быть образована в тонкую эмульсию посредством использо- 10020753 вания, например, зондового ультразвукового дезинтегратора или гомогенизатора высокого давления,например, с использованием 1, 2, 3 или более пропусканий через гомогенизатор. Например, при применении гомогенизатора высокого давления используемое давление может быть равно приблизительно 4000-8000 фунт/кв.дюйм (psi) или приблизительно 4000-5000 фунт/кв.дюйм, например 4000 или 5000 фунт/кв.дюйм. Для завершения экстракции растворителя и отверждения этих частиц может быть необходимым либо упаривание растворителя, либо разведение. Для лучшего контроля над кинетикой экстракции и для более весомой обработки может быть использовано разведение растворителя посредством водного гашения. Например, эта эмульсия может быть разведена выливанием в холодную воду до концентрации, достаточной для растворения всего органического растворителя с образованием погашенной фазы. Гашение может выполняться, по меньшей мере частично, при температуре приблизительно 5C или менее. Например, вода, используемая в гашении, может находиться при температуре, которая ниже комнатной температуры (например, приблизительно 0-10C или приблизительно 0-5C). В некоторых вариантах осуществления на этой стадии не все терапевтическое средство инкапсулируется в частицы, и к этой погашенной фазе добавляют солюбилизатор лекарственного средства с образованием солюбилизированной фазы. Этим солюбилизатором лекарственного средства может быть, например, Твин-80, Твин-20, поливинилпирролидон, циклодекстран, додецилсульфат натрия или холат натрия. Например, Твин-80 может быть добавлен к погашенной суспензии наночастиц для солюбилизации свободного лекарственного средства и предотвращения образования кристаллов лекарственного средства. В некоторых вариантах осуществления отношение солюбилизатора лекарственного средства к терапевтическому средству равно приблизительно 100:1 приблизительно 10:1. Эта солюбилизированная фаза может быть отфильтрована для извлечения наночастиц. Например,могут быть использованы ультрафильтрационные мембраны для концентрирования суспензии наночастиц и, по существу, устранения органического растворителя, свободного лекарственного средства и других вспомогательных добавок обработки (поверхностно-активных веществ). Примерная фильтрация может выполняться с использованием системы фильтрации с тангенциальным потоком. Например, наночастицы могут быть селективно отделены с использованием мембраны с размером пор, подходящим для удерживания наночастиц при позволении прохождения растворенных веществ, мицелл и органического растворителя. Могут быть использованы примерные мембраны с пределами молекулярной массы приблизительно 300-500 кДа (5-25 нм). Может выполняться диафильтрация с использованием подхода постоянного объема в том смысле,что диафильтрат (холодная деионизованная вода, например приблизительно 0-5C или 0-10C) может добавляться при той же самой скорости, при которой фильтрат удаляется из этой суспензии. В некоторых вариантах осуществления фильтрация может включать первую фильтрацию с использованием первой температуры приблизительно 0-5C или 0-10C и второй температуры приблизительно 20-30C или 15-35C. Например, фильтрация может включать обработку приблизительно 1-6 диаобъемами приблизительно при 0-5C и обработку по меньшей мере одним диаобъемом (например, приблизительно 1-3 или приблизительно 1-2 диаобъемами) приблизительно при 20-30C. После очистки и концентрирования суспензии наночастиц частицы могут пропускаться через один,два или более стерилизующих фильтров и/или глубинных фильтров, например, с использованием предварительного фильтра 0,2 мкм. В примерном варианте осуществления получения наночастиц образуют органическую фазу, состоящую из смеси терапевтического средства, например винорелбина или винкристина, и полимера (гомополимера и сополимера). Эта органическая фаза может быть смешана с водной фазой при соотношении приблизительно 1:5 (масляная фаза:водная фаза), где эта водная фаза состоит из поверхностноактивного вещества и, необязательно, растворенного растворителя. Затем может быть образована первичная эмульсия объединением этих двух фаз при простом смешивании или с использованием роторного-статорного гомогенизатора. Затем эту первичную эмульсию превращают в тонкую эмульсию с использованием, например, гомогенизатора высокого давления. Такая тонкая эмульсия может быть затем погашена, например, добавлением в деионизованную воду после смешивания. Примерное отношение гаситель:эмульсия может быть равно приблизительно 8,5:1. Затем к гасителю может быть добавлен раствор Твин (например, Твин-80) для получения в целом приблизительно 2% Твин, который может служить для растворения свободного, неинкапсулированного лекарственного средства. Образованные наночастицы могут быть затем выделены центрифугированием или ультрафильтрацией/диафильтрацией. Терапевтические средства. Согласно данному изобретению посредством описанных наночастиц могут доставляться любые средства, включающие, например, терапевтические средства (например, противораковые средства), диагностические средства (например, контрастные средства, радионуклиды и флуоресцентные, люминесцентные и магнитные части молекул), профилактические средства (например, вакцины) и/или нутрицевтические средства (например, витамины, минеральные вещества и т.д.). Примеры подлежащих доставке средств согласно данному изобретению включают, но не ограничиваются ими, малые молекулы (например, цитотоксические средства), нуклеиновые кислоты (например, siRNA, RNAi и микроРНК), белки(например, антитела), пептиды, липиды, углеводы, гормоны, металлы, радиоактивные элементы и соединения, лекарственные средства, вакцины, иммунологические средства и т.д. и/или их комбинации. В некоторых вариантах осуществления средством, подлежащим доставке, является средство, применимое в лечении рака (например, противоопухолевое средство). В конкретном варианте осуществления лекарственное средство может высвобождаться контролируемым высвобождением из этой частицы и может взаимодействовать локально с конкретным участком пациента (например, опухолью). Термин "контролируемое высвобождение" обычно включает высвобождение вещества (например, лекарственного средства) в выбранном месте или в другом случае высвобождение, контролируемое по скорости, интервалу и/или количеству. Контролируемое высвобождение включает, но не ограничивается ими, по существу, непрерывную доставку, доставку по определенной схеме (например, интермиттирующую (прерывистую) доставку на протяжении некоторого периода времени, которая прерывается регулярными или нерегулярными временными интервалами и доставку болюса выбранного вещества (например, в виде заранее заданного, дискретного количества вещества на протяжении относительно короткого периода времени (например, нескольких секунд или минут. Этим активным средством или лекарственным средством может быть такое терапевтическое средство, как сиролимус, темсиролимус, эверолимус, винкристин, таксан или производное дитерпена, такое как паклитаксел (или его производные, такие как ДНА-паклитаксел или PG-паклитаксел) или доцетаксел. В другом варианте осуществления этим активным агентом или лекарственным средством может быть алкалоид vinca, такой как винорелбин, винбластин, винкристин или виндезин. Фармацевтические готовые формы. Описанные здесь наночастицы могут быть объединены с фармацевтически приемлемыми носителями с образованием фармацевтической композиции. Как будет понятно квалифицированному в данной области специалисту, эти носители могут быть выбраны на основе способа введения, как описано ниже,местоположения ткани-мишени, подлежащего доставке лекарственного средства, временного хода доставки этого лекарственного средства и т.д. Фармацевтические композиции и частицы, описанные здесь, могут вводиться пациенту любыми способами, известными в данной области, в том числе пероральным и парентеральным способами. Термин "пациент" относится в данном контексте к людям, а также к другим животным, включающим, например, млекопитающих, птиц, пресмыкающихся, земноводных и рыб. Например, животными (не являющимися человеком) могут быть млекопитающие (например, грызуны, мышь, крыса, кролик, обезьяна, собака, кошка, примат или свинья). В некоторых вариантах осуществления желательными являются парентеральные способы, так как они позволяют избежать контакта с пищеварительными ферментами,которые обнаруживаются в пищеварительном канале. Согласно таким вариантам осуществления композиции этого изобретения могут вводиться инъекцией (например, внутривенной, подкожной или внутримышечной, внутрибрюшинной инъекцией), ректально, вагинально, местно (в виде порошков, кремов,мазей или капель) или ингаляцией (в виде спреев). В одном конкретном варианте осуществления описанные наночастицы могут вводиться субъекту,нуждающемуся в этом, системно, например IV инфузией или инъекцией. Инъецируемые препараты, например стерильные инъекционные водные или масляные суспензии,могут быть приготовлены в соответствии с известными в данной области способами с применением подходящих диспергирующих или увлажняющих агентов и суспендирующих агентов. Стерильный инъекционный препарат может также быть стерильным инъекционным раствором, суспензией или эмульсией в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, находятся вода, раствор Рингера, U.S.Р. и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды удобно использовать стерильные, нелетучие масла. Для этой цели может быть использовано любое легкое нелетучее масло, в том числе синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, в приготовлении инъекционных растворов используют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота. В одном варианте осуществления конъюгат этого изобретения суспендируют в жидкости-носителе, содержащей 1% (мас./об.) натрий-карбоксиметилцеллюлозу и 0,1% (об./об.)TWEEN-80. Эти инъекционные готовые формы могут стерилизоваться, например, фильтрацией через удерживающий бактерии фильтр или включением стерилизующих агентов в этой форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены или диспергированы в стерильной воде или другой стерильной инъекционной среде перед использованием. Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли,порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах инкапсулированный или неинкапсулированный конъюгат смешивают по меньшей мере с одним инертным, фармацевтически приемлемым эксципиентом или носителем, таким как цитрат натрия или дикальцийфосфат, и/или (а) наполнителями или разбавителями, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота; крахмал тапиоки, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия; (е) замедляющими растворение агентами, такими как парафин; (f) ускорителями абсорбции, такими как соединения четвертичного аммония; (g) увлажняющими агентами, такими как, например, цетиловый спирт и моностеарат глицерина; (h) абсорбентами, такими как каолиновая и бентонитная глины; и (i) смазывающими веществами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия, и их смесями. В случае капсул, таблеток и пилюль эта лекарственная форма может также содержать буферирующие вещества. Описанные наночастицы могут быть также приготовлены в унифицированной (стандартной) лекарственной форме для легкости введения и однородности дозы. Выражение "унифицированная (стандартная) лекарственная форма" относится в данном контексте к физически дискретной единице наночастиц,подходящей для получающего лечение пациента. Для любой наночастицы эта терапевтически эффективная доза может быть определена сначала либо в анализе с культурой клеток, либо в моделях животных,обычно мышей, кроликов, собак или свиней. Модель животного может быть также использована для получения желаемого диапазона концентраций и способа введения. Затем такую информацию можно использовать для определения применимых доз и способов для введения людям. Терапевтическая эффективность и токсичность наночастиц могут быть определены стандартными фармацевтическими процедурами в культурах клеток или экспериментальных животных, например ED50 (эта доза является терапевтически эффективной в 50% конкретной популяции) и LD50 (эта доза является летальной для 50% конкретной популяции). Отношение доз токсических эффектов к дозам терапевтических эффектов является терапевтическим индексом и может быть выражено в виде отношения LD50/ED50. Фармацевтические композиции, которые обнаруживают большие терапевтические индексы, могут быть применимы в некоторых вариантах. Данные, полученные из анализов культур клеток и исследований на животных, могут быть использованы в приготовлении диапазона доз для применения к человеку. В одном примерном варианте осуществления описана фармацевтическая композиция, которая включает множество наночастиц, каждая из которых содержит терапевтическое средство, и фармацевтически приемлемый эксципиент. В некоторых вариантах осуществления рассматриваются композиция, подходящая для замораживания, включающая описанные здесь наночастицы, и раствор, подходящий для замораживания, например раствор сахара (например, сахарозы) добавляют к суспензии наночастиц. Сахароза может, например,действовать в качестве криопротектора для предотвращения агрегации этих частиц после замораживания. Например, здесь обеспечена готовая форма наночастиц, содержащая множество описанных наночастиц, сахарозу и воду, где, например, эти наночастицы/сахароза/вода присутствуют в соотношении приблизительно 5-10/10-15/80-90 (мас.%.). Способы лечения. В некоторых вариантах осуществления описанные здесь терапевтические наночастицы могут быть использованы для лечения, облегчения, уменьшения симптомов, ослабления, задержки появления, ингибирования прогрессирования, уменьшения тяжести и/или уменьшения встречаемости одного или нескольких симптомов или признаков заболевания, нарушения и/или состояния. Например, описанные терапевтические частицы, которые включают, например, винорелбин или винкристин или их фармацевтически приемлемые соли, могут быть использованы для лечения рака, такого как рак предстательной железы, молочной железы или легких, например немелкоклеточного рака легких, у пациента, нуждающегося в этом. В настоящем описании рассматриваются также способы лечения рака предстательной железы,немелкоклеточного рака легких, колоректальной карциномы и глиобластомы с использованием описанных наночастиц. Описанные способы лечения рака (например, рака предстательной железы или молочной железы) могут предусматривать введение терапевтически эффективного количества описанных терапевтических частиц субъекту, нуждающемуся в этом, в таких количествах и в течение такого времени, которые необходимы для достижения желаемого результата. В некоторых вариантах осуществления данного изобретения "терапевтически эффективным количеством" является количество, эффективное для лечения, облегчения, уменьшения симптомов, ослабления, задержки появления, ингибирования прогрессирования,уменьшения тяжести и/или уменьшения встречаемости одного или нескольких симптомов или признаков, например, подлежащего лечению рака. Здесь обеспечены также терапевтические протоколы, которые включают введение терапевтически эффективного количества описанной терапевтической частицы здоровому индивидууму (т.е. субъекту,который не обнаруживает никаких симптомов рака и/или который не был диагностирован как имеющий рак). Например, здоровые индивидуумы могут быть "иммунизированы" нацеленной частицей согласно этому изобретению перед развитием рака и/или появлением симптомов рака; индивидуумы риска (например, пациенты, которые имеют семейный анамнез рака; пациенты, несущие одну или несколько генетических мутаций, ассоциированных с развитием рака; пациенты, имеющие генетический полиморфизм,ассоциированный с развитием рака; пациенты, инфицированные вирусом, ассоциированным с развитием рака; пациенты с привычками и/или стилем жизни, по существу, одновременно (например, в пределах 48,24 или 12 ч) с появлением симптомов рака. Конечно, индивидуумы, о которых известно, что они имеют рак, могут получать лечение согласно этому изобретению в любое время. В других вариантах осуществления описанные наночастицы могут быть использованы для ингибирования роста раковых клеток, например клеток рака предстательной железы. В данном контексте термин "ингибирует рост раковых клеток" или "ингибирование роста раковых клеток" относится к любому замедлению скорости пролиферации и/или миграции раковых клеток, остановке пролиферации и/или миграции раковых клеток, так что скорость роста раковых клеток уменьшается в сравнении с наблюдаемой или предсказанной скоростью роста необработанных контрольных раковых клеток. Термин "ингибирует рост" может также относиться к уменьшению в размере или исчезновению раковой клетки или опухоли, а также к уменьшению ее метастатического потенциала. Предпочтительно такое ингибирование на клеточном уровне может уменьшать размер, удерживать рост, уменьшать агрессивность или предотвращать или ингибировать метастазирование рака у пациента. Квалифицированные в данной области специалисты могут легко определить по любому из множества подходящих показателей, ингибируется ли рост раковых клеток. Ингибирование роста раковых клеток может подтверждаться, например, остановкой раковых клеток в конкретной фазе клеточного цикла, например по остановке в фазе G2/M клеточного цикла. Ингибирование роста раковых клеток может также подтверждаться прямым или непрямым измерением размера раковых клеток или опухоли. У раковых пациентов-людей такие измерения обычно выполняют с использованием хорошо известных способов визуализации, таких как визуализация с использованием ядерно-магнитного резонанса (ЯМР-томографии), компьютеризованной аксиальной томографии и рентгеновских лучей. Рост раковых клеток может быть также определен непрямым способом, таким как определение уровней циркулирующего в кровотоке карциноэмбрионального антигена, простатаспецифического антигена или других специфических для рака антигенов, которые коррелируют с ростом раковых клеток. Ингибирование ракового роста обычно коррелирует также с пролонгированным выживанием и/или улучшенным здоровьем и самочувствием субъекта. Примеры Это изобретение, теперь описанное в общем, будет легко пониматься со ссылкой на следующие примеры, которые включены только для целей иллюстрации определенных аспектов и вариантов данного изобретения и не предназначены для ограничения каким-либо образом этого изобретения. Пример 1. Получение PLA-PEG. Этот синтез выполняют полимеризацией с раскрытием кольца d,l-лактида с -гидрокси-метоксиполи(этиленгликолем) в качестве макроинициатора и проводят при повышенной температуре с использованием олово(II)-2-этилгексаноата в качестве катализатора, как показано ниже (PEG Полимер очищают растворением этого полимера в дихлорметане и осаждением его в смеси гексана и диэтилового эфира. Полимер, извлеченный из этой стадии, должен сушиться в печи. Пример 2. Получение наночастиц - обработка эмульсии. Образуют органическую фазу, состоящую из смеси винорелбина и полимера (гомополимера, сополимера и сополимера с лигандом). Эту органическую фазу смешивают с водной фазой в отношении приблизительно 1:5 (масляная фаза:водная фаза), где эта водная фаза состоит из поверхностно-активного вещества и некоторого количества растворенного растворителя. Для получения высокой нагрузки лекарственного средства используют приблизительно 30% твердых частиц в этой органической фазе. Первичную грубую эмульсию образуют объединением этих двух фаз простым смешиванием или с использованием роторного/статорного гомогенизатора. Этот ротор/статор давал гомогенный белесоватый раствор, тогда как перемешивающий стержень давал явно более грубую эмульсию. Наблюдали, что способ с перемешивающим стержнем приводил к значительному прикреплению масляной фазы к стороне питающего сосуда, что предполагает, что, хотя размер грубой эмульсии не является параметром процесса, критическим для качества, он должен быть сделан достаточно малым для предотвращения потери выхода или разделения фаз. Таким образом, ротор/статор используют в качестве стандартного способа образования грубой эмульсии, хотя при большем масштабе производства может быть подходящим высокоскоростной смеситель. Затем эту первичную эмульсию превращают в тонкую эмульсию с использованием гомогенизатора высокого давления. Размер грубой эмульсии не влияет значимо на размер частиц после последовательных пропусканий (1-3) через этот гомогенизатор, М-110-ЕН (фиг. 3). Было обнаружено, что давление на входе (давление подачи) оказывает значимое воздействие на полученный размер частиц. Было обнаружено, что как на пневматическом, так и на электрическом гомогенизаторах М-110 ЕН уменьшение давления на входе уменьшало также размер частиц (фиг. 4). Таким образом, стандартное рабочее давление, используемое для М-110 ЕН, равно 4000-5000 фунт/кв.дюйм на камеру взаимодействия, что было минимальным давлением обработки на этой установке. Этот М-110 ЕН имеет также опцию одной или двух камер взаимодействия. Это является стандартом в случае ограничивающей Y-камеры, расположенной последовательно с менее органичивающей 200 мкм Z-камерой. Было обнаружено, что размер частиц действительно уменьшался при удалении этой Y-камеры и замене ее пустой камерой. Кроме того, удаление Y-камеры значимо увеличивает скорость потока эмульсии во время обработки. После 2-3 пропусканий размер частиц не уменьшался значимо, и последующие пропускания могут даже вызывать увеличение размера частиц. Эти результаты суммированы на фиг. 5. Действие веса на размер частиц обнаруживало неожиданную зависимость от веса. Эта тенденция показывает, что в диапазоне размеров партий 2-10 г более крупные партии давали меньшие частицы. Было продемонстрировано, что эта зависимость от веса устраняется при рассмотрении партий с весом более чем 10 г. Количество твердых частиц, используемое в масляной фазе, было равно приблизительно 30%. Фиг. 6 изображает действие концентрации твердых частиц на размер частиц. Табл. А суммирует параметры процесса эмульгирования. Таблица А Затем тонкую эмульсию гасят добавлением ионизованной воды при данной температуре при перемешивании. В этой операции узла гашения эту эмульсию добавляют к холодной воде при перемешивании. Это способствует экстракции значительной части растворителей масляной фазы, с эффективным отверждением наночастиц для последующей фильтрации. Охлаждение гасителя значимо улучшало инкапсулирование лекарственного средства. Отношение гаситель:эмульсия равно приблизительно 5:1. К гасителю добавляют раствор 35% (мас.%) Твин-80 для достижения приблизительно 2% Твин-80 в целом. После гашения эмульсии добавляют раствор Твин-80, который действует как солюбилизатор лекарственного средства, что позволяет эффективное удаление неинкапсулированного лекарственного средства во время фильтрации. Табл. В показывает каждый из параметров процесса гашения. Таблица В Суммированные параметры процесса гашения Температура должна оставаться достаточно холодной с достаточно разведенной суспензией (с достаточно низкой концентрацией растворителей), чтобы оставаться ниже Tg этих частиц. Если отношениеQ:E не является достаточно высоким, то более высокая концентрация растворителя пластифицирует эти частицы и делает возможным просачивание лекарственного средства. Наоборот, более холодные температуры делают возможным высокое инкапсулирование лекарственного средства при более низких отношениях Q:E (до 3:1), позволяя проводить этот процесс более эффективно. Затем эти наночастицы выделяют посредством способа фильтрации с тангенциальным потоком для концентрирования суспензии наночастиц и буферного обмена растворителей, свободного лекарственного средства и солюбилизатора лекарственного средства из раствора гасителя в воду. Используют регенерированную целлюлозную мембрану с пределом молекулярной массы (MWCO) 300. Диафильтрацию постоянного объема (DF) выполняют для удаления растворителей гасителя, свободного лекарственного средства и Твин-80. Для выполнения DF постоянного объема в сосуд с ретентатом добавляют буфер при той же самой скорости, при которой удаляют фильтрат. Параметры этого процесса для TFF-операций суммированы в табл. С. Скоростью поперечного потока называют скорость протекания потока раствора через питающие каналы и через эту мембрану. Этот поток обеспечивает силу выметания молекул, которые могут засорять эту мембрану и ограничивать поток фильтрата. Трансмембранное давление является силой, которая гонит проникающие молекулы через эту мембрану. Затем отфильтрованную суспензию наночастиц подвергают тепловому круговому процессу до повышенной температуры во время обработки. Небольшая часть (обычно 5-10%) инкапсулированного лекарственного средства выделяется из этих наночастиц очень быстро после первого экспонирования температуры 25C. Вследствие этого феномена партии, которые удерживаются холодными во время всей обработки, являются чувствительными к свободному лекарственному средству или кристаллам лекарственного средства, образующимся во время доставки, или к любой части незамороженного запаса. Посредством экспонирования суспензии наночастиц повышенной температуре во время обработки это"рыхло инкапсулированное" лекарственное средство может удаляться и улучшать стабильность продукта за счет небольшого падения нагрузки лекарственного средства. 5 диаобъемов используют в качестве количества для холодной обработки перед обработкой с использованием 25C. После этого процесса фильтрации суспензию наночастиц пропускают через стерилизующий фильтр(0,2 мкм абс.). Предварительные фильтры используют для защиты этого стерилизующего фильтра для применения приемлемых площади/времени фильтрации в течение этого процесса. Величины суммированы в табл. D. Таблица D Фильтрационный агрегат представляет собой мембрану М 953 Р глубинного фильтра Ertel AlsopMicromedia XL (0,2 мкм номинально); Pall SUPRAcap со средой глубинного фильтра Seitz EKSPEKV 0,65/0,2 мкм. Можно использовать площадь 0,2 м 2 фильтрующей поверхности на 1 кг наночастиц для глубинных фильтров и площадь 1,3 м 3 фильтрующей поверхности на 1 кг наночастиц для фильтров категории, приемлемой для стерилизации. Пример 3. Криопротектор. Замораживание суспензии наноэмульсионных наночастиц только в деионизованной воде приводит к агрегации частиц. Считается, что это обусловлено кристаллизацией и переплетением цепей PEG на поверхностях наночастиц. Эксципиенты на основе сахара (сахарозы, трегалозы или маннита) могут действовать как криопротекторы этих наночастиц в условиях замораживания/оттаивания с концентрациями,такими низкими, как 1 мас.%, для разведенных (10 мг/мл) суспензий наночастиц. Одна готовая форма включает 10 мас.%. сахарозы, что является избытком сахарозы относительно того количества, которое требуется, и имеет ту же самую осмоляльность, что и физиологический раствор. Табл. Е показывает, что сополимер 16/5 PLA-PEG является менее чувствительным к агрегации при замораживании/оттаивании. Пример 4. Высвобождение in vitro. Способ высвобождения in vitro используют для определения высвобождения начальной фазы"всплеска" из наночастиц как в условиях комнатной температуры, так и при 37C. Для поддержания погруженных состояний и предотвращения вхождения наночастиц в пробы высвобождения была разработана система диализа. После получения ультрацентрифуги, способной осаждать частицы размером 100 нм, диализные мембраны устраняли и использовали центрифугирование для отделения высвобожденного лекарственного средства от инкапсулированного лекарственного средства. Эта система для диализа является следующей: 3 мл суспензии наночастиц винорелбина (приблизительно 250 мкг/мл наночастиц винорелбин PLGA/PLA, соответствующих концентрации твердых частиц 2,5 мг/мл) в DI-воде помещают пипетированием во внутреннюю пробирку диализатора с 300 кДаMWCO. Эти наночастицы суспендируют в этой среде. Диализатор помещают в стеклянные склянки, содержащие 130 мл высвобождающей среды (2,5% гидроксил-бета-циклодекстрин в ЗФР), которую непрерывно перемешивают при 150 об/мин с использованием шейкера для предотвращения образования не перемешанного водного слоя при поверхности раздела мембрана/наружный раствор. В заранее заданных временных точках брали аликвоты проб (1 мл) из наружного раствора (диализата) и анализировали на концентрацию винорелбина при помощи ЖХВД (HPLC). Центрифужная система работала с использованием сходных условий при более низких объемах суспензии без диализных мешочков. Пробы центрифугировали при 60000g в течение 30 мин и супернатант анализировали на содержание винорелбина относительно измеренного высвобожденного винорелбина. Пример 5. Анализ размеров частиц. Размер частиц анализировали двумя способами: с использованием динамического рассеяния света(DLS) и лазерной дифракции. DLS выполняют с использованием прибора Brookhaven ZetaPals при 25C в разведенной водной суспензии с использованием лазера 660 нм, рассеянного при 90, и анализируют с использованием способов Cumulants и NNLS (TP008). Лазерную дифракцию выполняют с прибором Horiba LS950 в разведенной водной суспензии с использованием как лазера HeNe при 633 нм, так и LED при 405 нм, рассеянного при 90, и анализируют с использованием оптической модели Mie (TP009). Выход из DLS ассоциирован с гидродинамическим радиусом этих частиц, который включает "корону" PEG,тогда как прибор лазерной дифракции более тесно ассоциирован с геометрическим размером "core" частицы PLA. Пример 6. Наночастицы винрелбина. Партии наночастиц получали с использованием общей процедуры примера 2, с 80% (мас./мас.) Полимер-PEG или Полимер-PEG с гомополимером PLA при 40% (мас./мас.), каждая, причем каждая партия имела % общих твердых частиц 5, 15 и 30%. Используемыми растворителями были 21% бензиловый спирт и 79% этилацетат (мас./мас.). Для каждой партии размером 2 г использовали 400 мг лекарственного средства и 1,6 г 16-5 полимер-PEG или 0,8 г 16-5 полимер-PEG + 0,8 г PLA 10 кДа (гомополимера). Использовали диблок-полимер 16-5 PLA-PEG или PLGA-PEG (50:50 L:G) и, если использовали, гомополимер: PLA с Mn=6,5 кДа, Mw=10 кДа и Mw/Mn=l,55. Органическую фазу (лекарственное средство и полимер) готовят в виде партий 2 г: в сцинтилляционный флакон добавляют лекарственное средство и полимер(ы). Масса растворителей, необходимых приiii) 30% твердых частиц: 0,98 г бензилового спирта + 3,69 г этилацетата. Безводный раствор готовят с 0,5% холатом натрия, 2% бензиловым спиртом и 4% этилацетатом в воде. В склянку добавляют 7,5 г холата натрия, 1402,5 г DI-воды, 30 г бензилового спирта и перемешивают на плите для перемешивания до растворения. Для образования эмульсии отношение водной фазы к масляной фазе равно 5:1. Органическую фазу выливают в водный раствор и гомогенизируют с использованием IKA в течение 10 с при комнатной температуре с образованием грубой эмульсии. Этот раствор пропускают через гомогенизатор (110S) при 96894,757 кПа (456894,757 Па на калибр) для 2 раздельных пропусканий с образованием наноэмульсии. Эту эмульсию быстро выливают в гаситель (DI-воду) при 5C при перемешивании на плите для перемешивания. Отношение гасителя к эмульсии равно 8:1. 35% (мас./мас.) Твин-80 добавляют в воду для гашения при отношении 25:1 Твин-80:лекарственное средство. Эти наночастицы концентрируют посредством TFF и гаситель концентрируют на TFF с кассетой Pall 500 кДа (2 мембраны) до 100 мл. Используют диафильтрование с применением 20 диаобъемов (2 л) холодной DI-воды, этот объем снижают до минимального объема и затем собирают конечную суспензию, 100 мл. Концентрацию твердых частиц непрофильтрованной конечной суспензии определяют с использованием тарированного сцинтилляционного флакона на 20 мл и добавлением 4 мл конечной суспензии и сушкой под вакуумом на лио/сушилке и определяют массу наночастиц в 4 мл высушенной суспензии. К пробе конечной суспензии добавляют концентрированную сахарозу (0,666 г/г) с получением 10% сахарозы. Концентрацию твердых частиц отфильтрованной конечной суспензии 0,45 мкм определяли фильтрованием пробы приблизительно 5 мл конечной суспензии перед добавлением сахарозы через фильтршприц 0,45 мкм; в тарированный сцинтилляционный флакон на 20 мл добавляют 4 мл отфильтрованной пробы и сушат под вакуумом на лио/сушилке. Оставшуюся пробу неотфильтрованной конечной суспензии замораживали с сахарозой. Композиции винорелбина.Ha пробах проводили высвобождение in vitro. Высвобождение in vitro проводили на трех композициях при 30% общих твердых частиц: 16-5PLA-PEG; 16-5 PLA-PEG + PLA и 16-5 PLGA-PEG + PLA и эти данные высвобождения in vitro получали при 37C в воздушной камере (колоколе) с использованием 10% мочевины в растворе ЗФР (PBS) в качестве среды высвобождения. Эти результаты изображены в таблице ниже и на фиг. 7. Пример 7. Наночастицы винкристина. Композиции наночастиц, которые включают винкристин, готовили с использованием общей процедуры примера 2. Композиции винкристина. Аналитическая характеристика композиций винкристина. Высвобождение in vitro проводили на этих композициях винкристина и эти данные высвобожденияin vitro получали при 37C в воздушной камере (колоколе) с использованием 10% мочевины в растворе ЗФР в качестве среды высвобождения. Высвобождение in vitro для нескольких из этих наночастиц изображено на фиг. 8. Пример 8. Фармакокинетика. Фармакокинетику (PK) наночастиц, имеющих винкристин, полученных в примере 7, определяли на крысах Sprague-Dawley (SD). Крысам (самцам Sprague-Dawley массой приблизительно 300 г с канюлей в яремных венах) вводили единственную внутривенную дозу 0,5 мг/кг свободного лекарственного средства или пассивно нацеленных наночастиц, инкапсулирующих лекарственное средство (10 мас.% лекарственного средства, 90 мас.% полимера (PLA-PEG, Mn PLA=16 Да; Mn PEG=5 Да, PTNP) с 5 мг/кг лекарственного средства и PTNP во временной точке = 0. В различных временных точках после введения дозы брали пробы крови из яремной канюли в пробирки, содержащие литий-гепарин, и получали плазму. Уровни плазмы определяли экстракцией лекарственных средств из плазмы с последующим анализом Эквиваленты Квалифицированным в данной области специалистам будут известны или они смогут получить с использованием рутинного экспериментирования многие эквиваленты конкретных вариантов настоящего изобретения, описанных здесь. Предполагается, что такие эквиваленты включены в следующую формулу изобретения. Включение посредством ссылки Полные содержания всех патентов, опубликованных заявок на патенты, web-сайтов и других цитируемых в настоящем описании ссылок включены в настоящее описание в их полном объеме посредством ссылки. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Терапевтическая наночастица, содержащая 1-20 мас.% алкалоида vinca и биосовместимый полимер, выбранный из группы, состоящей из:a) диблок-сополимера полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля, который содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу 15-20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу 4-6 кДа;b) диблок-сополимера молочной и гликолевой кислот и полиэтиленгликоля, который содержит сополимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднечисловую молекулярную массу 15-20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу 4-6 кДа;c) комбинации диблок-сополимера а) и гомополимера молочной кислоты или сополимера молочной и гликолевой кислот иd) комбинации диблок-сополимера b) и гомополимера молочной кислоты или сополимера молочной и гликолевой кислот,где диаметр терапевтической наночастицы равен 70-140 нм. 2. Терапевтическая наночастица по п.1, где алкалоидом vinca является винорелбин или винкристин или их фармацевтически приемлемая соль. 3. Терапевтическая наночастица по п.1 или 2, где биосовместимым полимером является диблоксополимер полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля. 4. Терапевтическая наночастица по любому из пп.1-3, где гомополимер молочной кислоты имеет средневесовую молекулярную массу 8-12 кДа. 5. Терапевтическая наночастица по любому из пп.1-4, где диблок-сополимер полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу 16 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу 5 кДа. 6. Терапевтическая наночастица по любому из пп.1-5, которая содержит 10-20 мас.% винорелбина или его фармацевтически приемлемой соли. 7. Терапевтическая наночастица по любому из пп.1-5, которая содержит 3-10 мас.% винкристина или его фармацевтически приемлемой соли. 8. Терапевтическая наночастица по любому из пп.1-7, дополнительно содержащая 0,2-10 мас.% диблок-сополимера молочной и гликолевой кислот и полиэтиленгликоля, ковалентно связанного с нацеливающим лигандом. 9. Терапевтическая наночастица, содержащая 10-20 мас.% винорелбина или винкристина или его фармацевтически приемлемой соли; диблок-сополимер, выбранный из диблок-сополимера полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля или диблок-сополимера сополимера молочной и гликолевой кислот полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу 15-20 кДа, и поли(этилен)гликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу 4-6 кДа, и где диблок-сополимер сополимера молочной и гликолевой кислот и полиэтиленгликоля содержит сополимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднечисловую молекулярную массу от 15 до 20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу 4-6 кДа,где диаметр терапевтической наночастицы равен 70-140 нм. 10. Терапевтическая наночастица, содержащая 2-20 мас.% винкристина или винорелбина или его фармацевтически приемлемой соли; диблок-сополимер, выбранный из диблок-сополимера полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля или сополимера молочной и гликолевой кислот и полиэтиленгликоля, где диблок-сополимер полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу 15-20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу 4-6 кДа, и где диблок-сополимер молочной и гликолевой кислот и полиэтиленгликоля содержит сополимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднечисловую молекулярную массу от 15 до 20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу 4-6 кДа,где диаметр терапевтической наночастицы равен 70-140 нм. 11. Терапевтическая наночастица по п.10, где гомополимер молочной кислоты имеет средневесовую молекулярную массу 10 кДа. 12. Терапевтическая наночастица по п.11, которая содержит 40-45 мас.% диблок-сополимера и 40-45 мас.% гомополимера. 13. Терапевтическая наночастица по любому из пп.1-12, дополнительно содержащая цетиловый спирт. 14. Фармацевтически приемлемая композиция, содержащая терапевтические наночастицы по любому из пп.1-13 и фармацевтически приемлемый эксципиент. 15. Фармацевтически приемлемая композиция по п.14, где фармацевтически приемлемым эксципиентом является сахар. 16. Способ лечения рака предстательной или молочной железы или немелкоклеточного рака легких,предусматривающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции,содержащей терапевтические наночастицы по любому из пп.1-13. 17. Суспензия терапевтических наночастиц, полученных объединением винорелбина или винкристина или их фармацевтически приемлемых солей в качестве терапевтического средства и диблок-сополимера полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля, содержащего полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу 15-20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу 4-6 кДа, или диблок-сополимера молочной и гликолевой кислот и полиэтиленгликоля, содержащего сополимер молочной и гликолевой кислот,имеющий среднечисловую молекулярную массу 15-20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу 4-6 кДа, с органическим растворителем с образованием первой органической фазы, имеющей 10-40% твердых веществ; объединением первой органической фазы с водным раствором с образованием второй фазы; эмульгированием второй фазы с образованием фазы эмульсии; водным гашением фазы эмульсии с образованием погашенной фазы; добавлением солюбилизатора терапевтичекого средства к погашенной фазе с образованием солюбилизированной фазы неинкапсулированного терапевтического средства; фильтрованием солюбилизированной фазы для извлечения наночастиц с образованием суспензии терапевтических наночастиц, где каждая из наночастиц имеет 3-20 мас.% винорелбина или винкристина и где диаметр терапевтических наночастиц равен 70-140 нм. 18. Суспензия терапевтических наночастиц по п.17, где фильтрование включает концентрирование,диафильтрование и завершающее фильтрование солюбилизированной фазы. 19. Терапевтическая наночастица регулируемого высвобождения, содержащая 10-20 мас.% терапевтического средства, выбранного из группы, состоящей из винорелбина или винкристина или их фармацевтически приемлемой соли; диблок-сополимер, выбранный из сополимера полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля или диблок-сополимера молочной и гликолевой кислот и полиэтиленгликоля, где указанное терапевтическое средство высвобождается с регулируемой скоростью высвобождения, где диблок-сополимер полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу 15-20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу 4-6 кДа, и где диблок-сополимер молочной и гликолевой кислот и полиэтиленгликоля содержит сополимер полимолочной и гликолевой кислот, имеющий среднечисловую молекулярную массу 15-20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу 4-6 кДа,где диаметр терапевтической наночастицы равен 70-140 нм. 20. Терапевтическая наночастица по п.19, где терапевтическое средство высвобождается в течение по меньшей мере 1 дня или более при введении пациенту.