Способ предупреждения и/или лечения сердечной недостаточности и дисфункции желудочков антагонистами эндотелина

1 Область изобретения Настоящее изобретение относится к предупреждению и/или лечению сердечной недостаточности соединениями, которые являются антагонистами эндотелина. Описание уровня техники Эндотелии представляет собой пептид из 21 аминокислоты, продуцируемый клетками эндотелия. Этот пептид секретируется не только клетками сосудистого эндотелия, но также эпителиальными клетками трахеи и почечными клетками. Эндотелии (ЕТ-1) обладает сильным сосудосужающим действием. Этот вазоконстрикторный эффект обусловлен связыванием эндотелина с его рецептором на клетках гладких мышц сосудов.1-3 Эндотелин (ЕТ-1) представляет собой один из трех недавно идентифицированных сильнодействующих вазоконстрикторных пептидов, к которым относятся также эндотелин-2 (ЕТ-2) и эндотелин-3 (ЕТ-3), последовательность цепочек которых отличается от ЕТ-1, соответственно, двумя или шестью аминокислотами.4 Повышенное содержание эндотелина по сравнению с нормальным обнаружено в крови пациентов с гипертонией, острым инфарктом миокарда, легочной гипертензией, болезнью Рейно или атеросклерозом или в жидкостях,омывающих респираторный тракт пациентов,страдающих от астмы. Экспериментальная модель церебрального вазоспазма и вторая модель острой почечной недостаточности привели к выводу, что эндотелии является одним из медиаторов, вызывающих спазм церебральных сосудов вслед за субарахноидальным кровоизлиянием, а также почечную недостаточность.9-10 Как обнаружено, эндотелин также контролирует высвобождение многих физиологических веществ, таких как ренин, атриальный натриуретический пептид, эндотелийпроизводный релаксирующий фактор EDRF (endotheliumderivative relaxing factor), тромбоксан A214, простациклин, эпинефрин, ангиотензин II и вещество Р.11-16 Кроме того, эндотелии вызывает сокращение гладкой мускулатуры желудочнокишечного тракта и гладкой мышцы матки.17-19 Было показано также, что эндотелин способствует росту клеток сосудов гладких мышц крыс,что позволяет думать о его возможном отношении к гипертрофии артерий.20 В высокой концентрации эндотелиновые рецепторы присутствуют в периферических тканях, а также в центральной нервной системе,а введение эндотелина в мозг вызывает, как было показано, изменения в поведении животных,что позволяет думать о его важной роли в регуляции нервных функций.21 Было показано, что высвобождению эндотелина способствует эндотоксин. Установление этого факта заставляет полагать, что эндотелин 2 является важным медиатором для заболеваний 22-23, индуцированных эндотоксином. Проведено исследование, которое показало, что секрецию эндотелина повышает циклоспорин, внесенный в культуру почечных клеток.24 Другое исследование показало, что введение циклоспорина крысам приводило к понижению уровня клубочковой фильтрации и к повышению кровяного давления, что сочеталось с поразительно заметным повышением уровня эндотелина в циркуляторном русле. Эта индуцированная циклоспорином почечная недостаточность может быть подавлена введением антиэндотелинового антитела.25 Исследования эти позволяют думать о значительном участии эндотелина в патогенезе индуцированной циклоспорином болезни почек. Недавнее исследование, проведенное у пациентов, страдающих застойной сердечной недостаточностью, показало хорошую корреляцию между повышенными уровнями эндотелина в плазме и тяжестью заболевания.26 Эндотелин является эндогенным веществом, которое прямым или непрямым путем (посредством регулируемого высвобождения различных других эндогенных веществ) вызывает замедленное сокращение как сосудистых, так и неваскулярных гладких мышц. Его избыточное продуцирование или избыточная секреция представляет собой, как полагают, один из факторов,ответственных за гипертонию, легочную гипертензию, болезнь Рейно, бронхиальную астму,острую почечную недостаточность, инфаркт миокарда, стенокардию, артериосклероз, спазм церебральных сосудов и инфаркт мозга. См.Med. Chem., 35, 1493-1508 (1992). Считают, что вещества, которые специфически ингибируют связывание эндотелина с его рецептором, блокируют физиологические эффекты эндотелина и могут применяться для лечения больных с нарушениями, обусловленными эндотелином. Новые соединения настоящего изобретения могут использоваться как непептидные антагонисты эндотелина, которые не были еще раскрыты ни в одном из выданных патентов или опубликованных патентных заявок. Среди опубликованных патентных заявок, раскрывающих в качестве антагонистов эндотелина линейные или циклические пептидные соединения, имеются следующие: Fujisawa in EuropeanFujisawa раскрыл также два вида соединений из непептидных антагонистов эндотелина: производные антрахинона, продуцируемые про 3 цессом брожения с использованием Streptomyces sp. No. 89009 в ЕР-405 421 and U.S. PatentPatent Application GB 2259450. Shionogi and Co. раскрыли в WO 92/12991 также тритерпеновые соединения непептидных антагонистов эндотелина, которые продуцировались процессом брожения с использованием Myriса сеriferа. Среди непептидных соединений антагонистов эндотелина, которые хорошо известны в патентной литературе, имеются 1) ряд замещенных (1,4-хинолинокси)метилбифенилкарбоновых кислот, раскрытыхRoussel-Uclaf в ЕР-498 723; 2) ряд N-(4-пиримидинил)бензолсульфонамидов с различными структурами замещения,фирмы Hoffmann-La Roch, опубликованных в ЕР-510 526, ЕР-526 708 и ЕР-601 386; 3) ряд нафталинсульфонамидов и бензолсульфонамидов, раскрытых E.R. SquibbSons соответственно в ЕР-528 258 и ЕР-569 193; 4) ряд соединений, представленных 3-(3 индолилметил)-1,4-диаза-2,5-диоксобицикло[4,3,0]нонан-9-карбоновой кислотой фирмы ImmunoPharmaceutics Inc., в WO 93/23404; 5) ряд конденсированных [1,2,4]тиадиазолов, замещенных иминосульфонильным заместителем, фирмы Takeda Chemical Inc., раскрытых в ЕР-562 599; и 6) ряд производных индана и индена, фирмы SmithKline Beecham Corp., раскрытых в WO 94/02474. Литература 1. Nature, 332, 411-415 (1988). 2. FEBS Letters, 231, 404-444 (1988). 3. Biochem. Biophys. Res. Commun., 154,868-875 (1988). 4. TiPS, 13, 103-108, March 1992. 5. Japan. J. Hypertension, 12, 79 (1989). 6. J. Vascular Medicine Biology, 2, 207,(1990). 7. J. Am. Med. Association, 264, 2868 (1990). 8. The Lancet, ii, 207 (1990) and The Lancet,ii, 747-748 (1989). 9. Japan. Soc. Cereb. Blood FlowMetabol.,1, 73 (1989). 10. J. Clin. Invest., 83, 1762-1767 (1989). 11. Biochem. Biophys. Res. Commun., 157,1164-1168 (1988). 12. Biochem. Biophys. Res. Commun., 155,167-172 (1989). 13. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85, 97979800 (1989). 14. J. Cardiovasc. Pharmacol., 13, 589-592(1989). 24. Eur. J. Pharmacol., 180, 191-192 (1990). 25. Kidney Int., 37, 1487-1491 (1990). 26. Mayo Clinic Proc., 67, 719-724 (1992). Краткое изложение сущности изобретения Настоящее изобретение касается предупреждения и/или лечения сердечной недостаточности и дисфункции желудочков антагонистами эндотелина. Краткое описание фигур Фиг. 1. Измерения скорости изменения левожелудочкового давления LV dP/dt (left ventricular dP/dt),среднего левопредсердного давления, среднего артериального давления и частоты сердечных сокращений, выполненные у одних и тех же находящихся в сознании свиней до и после развития сердечной недостаточности и через 60 мин после инъекционного введения соединения 1 (0,5 мг/кг, в/в) на стадии сердечной недостаточности. Данные представляют собой среднюю величинустандартная ошибка, а в скобках указано число взятых для исследования животных. Фиг. 2. Измерения сердечного индекса, ударного объема, общего периферического сопротивления сосудов и скорости сокращения круговых волокон левого желудочка Vcf (LV velocity ofcircumferential fibre shortening), выполненные у одних и тех же находящихся в сознании свиней до и после развития сердечной недостаточности и через 60 мин после инъекционного введенияcоединения 1 (0,5 мг/кг, в/в) на стадии сердечной недостаточности. Данные представляют собой среднюю величинустандартная ошибка, а в скобках указано число взятых для исследования животных. Фиг. 3. Действие cоединения 1 (0,5 мг/кг, в/в) на среднее артериальное давление, среднее левопредсердное давление, сердечный индекс и общее периферическое сопротивление сосудов у находящихся в сознании свиней после развития сердечной недостаточности. Величины представлены в виде процентных отклонений от уровней базисной линии, кроме среднего левопредсердного давления, которое представлено в виде отклонения от значения базисной линии в мм ртутного столба (mm Нg). Данные представляют собой среднюю величинустандартная ошибка, а в скобках указано число взятых для исследования животных. Фиг. 4. Действие cоединения 1 (0,5 мг/кг, в/в) на скорость изменения левожелудочкового давле 5 ния LV dP/dt, скорость сокращения круговых волокон левого желудочка Vcf, фракционное сокращение ЛЖ и частоту сердечных сокращений у находящихся в сознании свиней после развития сердечной недостаточности. Величины представлены в виде процентных отклонений от уровней базисной линии. Данные представляют собой среднюю величинустандартная ошибка, а в скобках указано число взятых для исследования животных. Фиг. 5. Действие cоединения 1 (0,5 мг/кг, в/в) иcоединения 2 (1 мг/кг и 4 мг/кг, в/в) на общее периферическое сопротивление сосудов TPR(total peripheral resistance) у находящихся в сознании свиней после развития сердечной недостаточности. Величины представлены в виде процентных отклонений от уровней базисной линии. Данные представляют собой среднюю величинустандартная ошибка, а в скобках указано число взятых для исследования животных. Фиг. 6. Сравнение реакций среднего артериального давления MAP (mean arterial pressure), скорости изменения ЛЖ давления LV dP/dt, сердечного выброса СО (cardiac output) и общего периферического сопротивления сосудов через 60 мин после инъекционного введения cоединения 1 (0,5 мг/кг, в/в) или cоединения 2 (1 мг/кг и 4 мг/кг, в/в) у находящихся в сознании свиней после развития сердечной недостаточности. Величины представлены в виде процентных отклонений от уровней базисной линии. Данные представляют собой среднюю величинустандартная ошибка, а в скобках указано число взятых для исследования животных. Фиг. 7. Действие эндотелина-1 (ЕТ-1, от 1,0 до 0,5 мг/кг, в/в) с cоединением 1 (0,5 мг/кг, в/в) и без него на среднее артериальное давление, среднее левопредсердное давление, общее периферическое сопротивление сосудов и частоту сердечных сокращений у находящихся в сознании свиней после развития сердечной недостаточности. Величины представлены в виде процентных отклонений от уровней базисной линии, кроме среднего левопредсердного давления, которое представлено в виде отклонения от значений базисной линии в мм ртутного столба (mm Нg). Данные представляют собой среднюю величинустандартная ошибка, а в скобках указано число взятых для исследования животных. Фиг. 8. Модель инструментального исследования сердечной недостаточности. Описание изобретения Настоящее изобретение относится к способу предупреждения и/или лечения сердечной недостаточности и дисфункции желудочков у теплокровного животного, который включает введение этому животному, при необходимости 6 в таком лечении, терапевтически эффективного количества антагониста эндотелина формулы или его фармацевтически приемлемой соли, где А представляет собой пиридинил, замещенный C1-C6 алкилом или C1-C6 алкиламином,Аr1 - дигидробензофуранил или бензодиоксоланил,Ar2 - фенил, замещенный метокси- и C1-C6 алкилом, замещенным C1-C6 алкокси-, гидроксии карбоксигруппами,R1, R2 и R3 - водород, Y - СООН.C1-C6-алкоксигруппа означает линейную или разветвленную алкоксигруппу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода, такую как, например,метокси-, этокси-, пропокси-, изопропокси-,бутокси-, изобутокси-, втор-бутокси-, третбутокси-, пентилокси или гексилоксигруппу.C1-C6-алкиламиногруппа означает алкиламиногруппу, имеющую 1 или 2 линейных или разветвленных C1-C6-алкильных групп у атома азота, такую, как, например, метиламино-, этиламино-, пропиламино-, изопропиламино-, бутиламино-, изобутиламино-, трет-бутиламино-,пентиламино-, изопентиламиногруппу, гексиламино-, диметиламиногруппу, этилметиламино-, диэтиламино-, дипропиламино-, пропилметиламино-, этилпропиламино-, диизопропиламино-, диизобутиламино-, этилизобутиламино-,ди-трет-бутиламино-, дипентиламино-, диизопентиламино-, изопентилметиламино- или дигексиламиногруппу.C1-C6-алкильная группа означает линейную или разветвленную алкильную группу,имеющую от 1 до 6 атомов углерода, такую,например, как метильную, этильную, пропильную, изопропильную, бутильную, изобутильную, втор-бутильную, трет-бутильную, пентильную, изопентильную, неопентильную, третпентильную, 1-метилбутильную, 2-метилбутильную, 1,2-диметилпропильную, 1-этилпропильную, гексильную, изогексильную, 1-метилпентильную, 2-метилпентильную, 3-метилпентильную, 1,1-диметилбутильную, 1,2-диметилбутильную, 2,2-диметилбутильную, 1-этилбутильную, 1,1,2-триметилпропильную, 1,2,2-триметилпропильную, 1-этил-2-метилпропильную или 1-этил-1-метилпропильную группу. Примеры антагонистов эндотелина, применимых в настоящем изобретении, включают в себя(5S,6R,7R)-2-бутил-6-карбокси-7-[(S)-2-(2 карбоксипропил)-4-метоксифенил]-5-(3,4-метилендиоксифенил)циклопентено-[1,2-b]пиридин. Особенно предпочтительными являются наиболее сильные изомеры антагонистов эндотелина, отобранные из группы, состоящей из(5S,6R,7R)-2-изопропиламино-6-карбокси 7-[(S)2-(2-карбоксипропил)-4-метоксифенил]-5(3,4-метилендиоксифенил)циклопентено-[1,2-b] пиридина. Описанные выше соединения образуют соли с различными неорганическими и органическими кислотами и основаниями, и эти соли также составляют область изобретения. Эти соли включают в себя соли аммония, соли щелочных металлов, такие как соли натрия и калия,соли щелочно-земельных металлов, такие как соли кальция и магния, соли с органическими основаниями; например дициклогексиламиновые соли, N-метил-D-глюкаминовые, соли с аминокислотами, такими как аргинин, лизин и им подобными. Также могут быть получены соли с неорганическими и органическими кислотами: НСl, НВr, Н 2SO4, Н 3 РО 4, метансульфоновой кислотой, толуолсульфокислотой, малеиновой кислотой, фумаровой кислотой, камфорсульфоновой кислотой. Описанные выше соединения раскрыты в патентной заявке WO 95/05374, включенной в описание в качестве ссылки, и могут быть получены описанными в них способами. Их изомерически чистые соединения могут быть получены из соответствующей смеси изомеров, например, с помощью хроматографии с использованием хиральной колонки. Вышеприведенные соединения антагонистов эндотелина, относящиеся к формуле I,включая их фармацевтически приемлемые соли,эффективны при использовании в целях предупреждения и/или лечения сердечной недостаточности (т.е. застойной сердечной недостаточности) и дисфункции желудочков (симптоматически манифестной и бессимптомной). Среди соединений формулы I, применимых в лечении сердечной недостаточности и дисфункции желудочков, можно назвать смесь изомеров (5RS,6SR,7SR)-2-бутил-6-карбокси-7-[2-(2-карбоксипропил)-4-метоксифенил]-5-(3,4-метилендиоксифенил)циклопентено[1,2-b]пиридина. Данная изомерная смесь подвергалась хроматографированию с использованием хиральной колонки, в результате чего был идентифицирован и выделен самый активный изомер (+) (5S,6R,7R)-2 бутил-6-карбокси-7-[2-(2-карбоксипропил)-4-метоксифенил]-5-(3,4-метилендиоксифенил)циклопентено[1,2-b]пиридин, упоминаемый здесь и далее как соединение 1. См. пример 1. Настоящее изобретение относится к способу предупреждения и/или лечения сердечной недостаточности и дисфункции желудочков,включая застойную сердечную недостаточность,но не ограничивается только ею, у теплокровных животных, который состоит во введении этим теплокровным животным, в случае необходимости в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы 9 в целях лечения сердечной недостаточности и дисфункции желудочковa) может вызвать регресс (т.е. обратное развитие) сердечной недостаточности и дисфункции желудочков;c) может также вторично обеспечивать устранение любого из следующих состояний: почечную недостаточность, трепетание предсердий, фибрилляцию предсердий и желудочковую аритмию. Для целей раскрытия возможностей настоящего изобретения теплокровным животным является представитель животного мира, обладающий механизмом гомеостаза, и включает млекопитающих и птиц. Предпочтительным таким представителем теплокровных является человек. Терапевтически эффективное количество вещества, взятое для целей раскрытия возможностей настоящего изобретения, представляет собой количество его, приносящее эффект в виде улучшения функции сердца и/или снижения гемодинамической нагрузки на сердце,и/или смягчающее другие патофизиологические проявления сердечной недостаточности и дисфункции желудочков. Описанные выше вещества, представляющие собой антагонисты эндотелина, могут применяться в виде лекарственных составов, удобных для парентерального введения, перорального приема или наружного применения, после смешивания их с твердыми или жидкими носителями - известными в данной области инертными средами. Лекарственные формы включают в себя жидкие составы, такие как инъекционные формы, ингаляционные формы, сиропы или эмульсии, твердые формы, такие как таблетки, капсулы или гранулы, и наружные средства, такие как мази или суппозитории. Кроме того, эти лекарственные рецептуры, в случае необходимости, могут содержать общепринятые в фармацевтической практике добавки, такие как адъюванты, стабилизаторы, смачивающие вещества, эмульгаторы, способствующие абсорбции агенты или поверхностно-активные вещества. Можно упомянуть в качестве добавок также дистиллированную воду для инъекций,физиологический раствор, раствор Рингера,глюкозу, сахарный сироп, желатин, растительное масло, масло какао, этиленгликоль, гидроксипропилцеллюлозу, лактозу, сахарозу, кукурузный крахмал, стеарат магния и тальк. Доза антагониста эндотелина варьирует в зависимости от пути введения, возраста и веса тела пациента, а также от состояния пациента,подвергаемого лечению. Типичным же, однако,способом введения для взрослого является пероральный прием или парентеральное введение 10 препарата. Суточная доза в случае перорального приема препарата взрослым пациентом составляет от 0,1 до 100 мг/кг веса тела, а в случае парентерального его введения суточная доза составляет от 0,01 до 10 мг/кг тела. Более специфически настоящее изобретение может быть проиллюстрировано следующими ниже примерами. Следует иметь в виду при этом, что настоящее изобретение не ограничивается лишь рамками данных примеров. Пример 1.(+)-(5S,6R,7R)-2-бутил-6-карбокси-7[2-(2-карбоксипропил)-4-метоксифенил]-5-(3,4 метилендиоксифенил)циклопентено[1,2-b]пиридин. Разделение (+) и (-) соединения, полученного в примере 186 патентной заявки WO 95/05374, производилось по методу высокоэффективной жидкостной хроматографии HPLC(high performance liquid chromatography) с использованием хиральной колонки Daicel chiralpack AD; время задержания для (+):39-58 мин,Данные HPLC: колонка: Daicel chiralpack AD, диаметр 50 мм, длина 500 мм; растворитель: гексан:изопропанол:TFA(90:10:0,1); расход жидкости: 100 мл/мин; инжекция: 1,1 г рацемата в изопропаноле; обнаружение: UV=260 нм Вышеприведенное разделение было повторено восьмикратно, и фракции, содержащие нужное соединение, комбинировались и выпаривались досуха. К остатку добавляли AcOEt и воду. Водную фазу доводили до рН 4 с помощью 3N NaOH. Органическую фазу промывали водой, рассолом и сушили над Na2SО 4. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (Wako Gel C-300,элюент:гексан(2)/AcOEt(1)AcOEt), получая стеклообразное твердое вещество (2,91 г). Твердое вещество растирали до получения соединения, указанного в заглавии, в виде белого аморфного порошка (2,24 г). 1 Н-NMR (300 MHz, CDCl3,ppm); 0,84 (3H, t, J=7,3 Hz), 1,18-1,35 (2 Н, m),1,31 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,40-1,56 (2H, m), 2,552,72 (3H, m), 2,88-3,02 (1H, m), 3,36 (1H, dd,J=5,6 Hz, 13,1 Hz), 3,60 (1H, t, J=9,7 Hz), 3,75 11 Чистые изомеры соединения здесь и далее обозначены как cоединение 1. Пример 2. Стадия А. Имплантирование приборов. Пять свиней с сельскохозяйственной фермы, самцов и самок, весом 34,52,5 кг подвергали седативному воздействию гидрохлоридом кетамина (25 мг/кг) и ксилазином (6 мг/кг). После интратрахеальной интубации общее обезболивание поддерживали с помощью изофлурана(1,5-2,0 об.% в кислороде). В условиях стерильности производили хирургическую операцию левостороннюю торакотомию по пятому межреберному промежутку. Имплантировали катетеры, изготовленные из трубок Tygon (фирмыNorton Performance Plastics Co., Akron, ОН), в нисходящую аорту, левое и правое предсердие для измерения давления. В полость левого желудочка (LV) для получения ЛЖ давления и скорости изменения ЛЖ давления (LV dP/dt) имплантировали твердый миниатюрный датчик давления (фирмы Konigsberg Instruments Inc.,Pasadena, CA). Для измерения кровотока помещали вокруг главной легочной артерии датчик кровотока (фирмы Transonic System Inc., Ithaca,NY). В противолежащие области переднего и заднего отделов миокарда ЛЖ имплантировали одну пару пьезоэлектрических кристаллов для ультразвукового снятия размеров в целях получения внутреннего диаметра по короткой оси желудочка. В ходе хирургического имплантирования достигалась соответствующая фиксация кристаллов на эндокарде, которые размещались таким образом, чтобы обеспечивалось получение сигнала с наибольшей амплитудой и наименьшим временем прохождения. Подводящий проводник электрокардиостимуляции (модель 5069, Medtronic Inc., Minneapolis, MN) закрепляли на свободной стенке правого желудочка, а контактные концы из нержавеющей стали крепили к ушку левого предсердия. Левую круговую коронарную артерию выделяли и имплантировали проксимально и дистально ее первой тупой маргинальной ветви изготовленные из трубок Туgоn два гидравлических обтуратора. Проволочные проводники и катетеры выводили наружу между лопатками, разрез ушивали послойно и удаляли воздух из грудной полости. См. фиг. 8. Стадия В. Экспериментальные измерения. Запись гемодинамических показателей осуществлялась с помощью аппарата ленточной регистрации данныхRD-130TE,ТЕАС,Montebello, СА, и многоканального осциллографа MT95R2, AstroMed, West Warwick, RI. Аортальное левопредсердное давление измеряли с помощью датчиков - манометров фирмыStatham Instruments, Oxnard, СА, которые были откалиброваны in vitro пo ртутному манометру,соединенному с наполненными жидкостью катетерами. Твердый датчик ЛЖ давления был подвергнут перекрестной калибровке при опре 003587 12 делении значений аортального и левопредсердного давления. Скорость изменения ЛЖ давления LV dP/dt получали путем электронного дифференцирования сигнала ЛЖ давления. Кровоток измеряли с помощью волюметра объемного кровотока фирмы Transonic System Inc.,Ithaca, NY. Среднее артериальное давление, левопредсердное давление и легочный кровоток(сердечный выброс) измеряли с помощью фильтра-усилителя. Ударный объем рассчитывали как отношение сердечного выброса к частоте сердечных сокращений. Сердечный выброс был стандартизирован по весу тела и сердечному индексу. Размер ЛЖ измерялся с помощью ультразвукового датчика размеров по времени прохождения сигнала (Model 203, Triton Technology Inc., San Diego, СА). Общее периферическое сопротивление сосудов рассчитывалось как отношение среднего артериального давления к сердечному выбросу. Размер ЛЖ по короткой оси в конце диастолы EDD (end diastolic dimension) измерялся в начале подъема сигнала скорости изменения ЛЖ давления LV dP/dt. Размер ЛЖ в конце систолы ESD (end systolic dimension) измерялся во время максимального отрицательного dP/dt. Процентное укорочение внутреннего диаметра ЛЖ рассчитывалось как(EDD-ESD)/EDD100. Средняя скорость сокращения круговых волокон ЛЖ Vcf (velocity ofcircumferential fibre shortening) рассчитывалась из полученных данных размеров с использованием формулы: (EDD-ESD)/EDD/время опорожнения (с-1). Время опорожнения измерялось как интервал между максимальным и минимальным значением LV dP/dt. Кардиотахометр,пуск которого инициировался пульсацией ЛЖ давления, давал как моментальную, так и непрерывную запись скорости сердечных сокращений. Стадия С. Моделирование сердечной недостаточности. Эксперименты начинали через 10-14 дней после операции, когда свиньи полностью поправлялись после хирургического вмешательства. В течение послеоперационного периода свиней помещали в станок для упражнений. Сердечную недостаточность вызывали индуцированием прогрессирующей ишемии миокарда с помощью двух окклюзий коронарной артерии,сопровождающихся вслед за ними интермиттирующей электрокардиостимуляцией желудочков. Кратко, по проведении контрольного мониторинга гемодинамики после хирургической операции, путем вздувания гидравлического обтуратора, имплантированного дистально,подвергали окклюзии левую круговую коронарную артерию. Приблизительно через 48 ч после первой окклюзии вздували проксимальный обтуратор коронарной артерии. Через 1-2 дня после второго инфракта миокарда проводили электростимуляцию правого желудочка в режиме 190-210 ударов/мин, используя программный 13 наружный электростимулятор сердечного ритма(model EV4543, Расе Medical, Waltham, МА). Электрокардиостимуляция продолжалась в течение 1 недели, а затем прекращалась на 3 дня. Процедура эта повторялась в виде еще дополнительных 1-2 циклов, пока сердечная недостаточность не приобретала явный характер и не приобретали стабильность гемодинамические параметры. Стадия D. Протоколы экспериментов. Гемодинамические эксперименты производились после 2 циклов тахикардиостимуляции при наличии ишемического повреждения миокарда, после того, как у животного устанавливалось стойкое состояние сердечной недостаточности. Во время экспериментов свиньи находились в сознании, будучи заключенными в спокойном состоянии в станок для обследования. Испытываемое соединение, растворенное в насыщенном NаНСО 3 (10% по объему) и 0,9% физиологическом растворе (90% по объему) при концентрации 2 мг/мл, изучали на четырех находящихся в сознании свиньях с сердечной недостаточностью. Инъекционным путем вводили внутривенно в течение 2 мин дозу 0,5 мг/кг и производили затем непрерывно запись показателей гемодинамики до и через 90 мин после инъекционного введения испытываемого соединения у всех 4 свиней. У двоих из этих свиней запись продолжали в течение 3 ч после инъекции испытываемого соединения. Носитель испытывали в отдельные дни. Эффекты кумулятивных болусов в дозах от 0,1 до 0,5 мкг/кг на уровнях эндотелина-1 0,1 мкг/кг (Peptide Institute, Inc., Osaka, Japan) также изучались в отдельные дни до и через 90 мин после инъекционного введения испытываемого соединения у трех свиней во время развивающейся у них сердечной недостаточности для получения картины, характеризующей степень блокады эндотелина испытываемым соединением. ЕТ-1 растворяли в 0,1N NаНСО 3 (95% по объему) и 0,9% физиологическом растворе (95% по объему) при концентрации 2 мкг/мл. Стадия Е. Анализ данных. Все данные сохранялись в памяти компьютера AST 4/d computer. Сравнение данных, полученных до и после развития сердечной недостаточности, проводились с помощью t-теста Стьюдента для парных данных (Student's t-testfor paired data). Данные на базисной линии и полученные после инъекции испытываемого соединения также сравнивались с использованием t-теста Стьюдента для парных данных с поправкой Бонферрони (Bonferroni correction). Все значения выражены в виде средней величиныстатистическая ошибка. Статистическая значимость была принята на уровне р 0,05. Пример 3. Протокол экспериментов с применением антагониста эндотелина: соединение 1. Стадия А. Исследование гемодинамики с применением соединения 1. 14 Гемодинамические эксперименты производились после 2 циклов тахикардиостимуляции при наличии ишемического повреждения миокарда, после того, как у животного устанавливалось стойкое состояние сердечной недостаточности. Во время экспериментов свиньи находились в сознании, будучи заключенными в спокойном состоянии в станок для обследования. Соединение 1, растворенное в насыщенномNаНСО 3 (10% по объему) и 0,9% физиологическом растворе (90% по объему) при концентрации 2 мг/мл, изучали на четырех находящихся в сознании свиньях с сердечной недостаточностью. Инъекционным путем вводили внутривенно дозу 0,5 мг/кг в течение 2 мин и производили затем непрерывно запись показателей гемодинамики до и и через 90 мин после инъекционного введения соединения 1 у всех 4 свиней. У двоих из этих свиней запись продолжали в течение 3 ч после инъекции соединения 1. Носитель испытывали в отдельные дни. Эффекты кумулятивных болусов в дозах от 0,1 до 0,5 мкг/кг на уровнях эндотелина-1 0,1 мкг/кг (Peptide Institute, Inc., Osaka, Japan) также изучались в отдельные дни, до и через 90 мин после инъекции cоединения 1, у трех свиней во время развивающейся у них сердечной недостаточности для получения картины, характеризующей степень блокады эндотелина cоединением 1. ЕТ-1 растворяли в 0,1N NаНСО 3 (95% по объему) и 0,9% физиологическом растворе (95% по объему) при концентрации 20 мкг/мл. В целях проведения сравнения эффекты инъекционного внутривенного введения соединения 2 (эналаприлат) в дозах 1 и 4 мг/кг изучались в отдельные дни на трех свиньях, которые использовались для изучения соединения 2, и еще на одной, дополнительно взятой свинье. Соединение 2 растворяли в 0,9% физиологическом растворе. Стадия В. Гемодинамика на базисной линии до и после развития сердечной недостаточности. Табл. 1 и 2 суммируют функцию ЛЖ и системную сосудистую динамику на базисной линии до (т.е. по данным контроля после хирургической операции) и после сердечной недостаточности, индуцированной серийными инфарктами миокарда в комбинации с интермиттирующим стрессовым воздействием тахикардиостимуляции у находящихся в сознании свиней. Сердечная недостаточность, возникающая в результате не менее чем 2 циклов воздействия тахикардиостимуляции при наличии повреждения миокарда, проявлялась в значительном возрастании величин диаметра ЛЖ в конце диастолы (+10,70,4 мм от 40,23,6 мм) и в конце систолы (+14,61,1 мм от 31,22,7 мм), а также среднего левопредсердного давления (+193mm Нg по от 42 mm Нg). Скорость изменения давления в ЛЖ LV dP/dt, фракционное сокращение ЛЖ, скорость сокращения круговых волокон Vcf и сердечный индекс значительно снижались, соответственно на 454, 546, 461 и 298%. Кроме того, значительно повышалось общее периферическое сопротивление сосудов(4614%), тогда как среднее артериальное давление и частота сердечных сокращений оставались неизменными. Кроме этих изменений гемодинамики, которые показаны на фиг. 1 и 2,сердечная недостаточность, особенно в далеко зашедших стадиях, характеризовалась анорексией, периферическими отеками и отеком легких и снижением активности. Таблица 1 Левожелудочковая функция на базисной линии у контрольных животных и у находящихся в сознании свиней с сердечной недостаточностью Контрольные животные Диаметр ЛЖ в конце диастолы, мм Диаметр ЛЖ в конце систолы, мм Фракционное сокращение ЛЖ, % Скорость сокращения круговых волокон Vcf,с-1 Средняя скорость изменения давления в ЛЖ LV dP/dt, мм НG/с Существенно отличается от контроля,р 0,05 Данные представлены средней величинойстатистическая ошибка, при n=4, кроме LVdP/dt, где n=3 Таблица 2 Сердечная и системная гемодинамика на базисной линии у контрольных животных и у находящихся в сознании свиней с сердечной недостаточностью Контрольные животные Среднее артериальное давление, мм Нg Среднее левопредсердное давление, мм Нg Сердечный индекс,мл/мин/кг Общее периферическое сопротивление сосудов, мм Нg/мл/мин/кг Частота сердечных сокращений, ударов/мин Существенно отличается от контроля,р 0,05 Данные представлены средней величинойстатистическая ошибка, при n=4. Стадия С. Действие, оказываемое соединением 1 на гемодинамику при сердечной недостаточности. Характер изменений во времени в гемодинамике после внутривенного введения соединения 1 (0,5 мг/кг) показан в фиг. 3 и 4. Табл. 3 и 4 суммируют ответы функции ЛЖ и системные гемодинамические ответы на соединение 1 че 16 рез 15 мин и через 60 мин после введения соединения 1. Фиг. 1 и 2 иллюстрируют измерения параметров сердечной и системной динамики,сделанные до и после развития сердечной недостаточности, а также через 60 мин после введения соединения 1 в течение стадии сердечной недостаточности. Соединение 1, в основном, индуцировало стойкий подъем сердечного индекса и удлиняло снижение среднего артериального давления и общего периферического сопротивления сосудов. Например, через 60 мин после введения соединения 1 среднее артериальное давление оказывалось существенно сниженным на 102%, а сердечный индекс повышался на 174%. Общее же периферическое сопротивление сосудов существенно снижалось соединением 1 на 223%, что, в сущности, составляет полное восстановление повышенного сопротивления сосудов при сердечной недостаточности снова до контрольных величин перед наступлением сердечной недостаточности (фиг. 1). Хотя соединение 1 также понижало левопредсердное давление и повышало частоту сердечных сокращений, эти изменения не были статистически значимыми. Скорость сокращения круговых волокон Vcf повышалась на 122%, тогда как скорость изменения ЛЖ давления LV dP/dt, конечный систолический и диастолический диаметр ЛЖ и фракционное сокращение ЛЖ влиянию со стороны соединения 1 подвержены не были. Носитель на протяжении 180 мин наблюдения не вызывал каких-либо существенных изменений (фиг. 3 и 4). Полезные действия экстренного введения соединения 1 в модели сердечной недостаточности были, в основном, связаны с обратным развитием повышенного сопротивления сосудов. Таблица 3 Действие инъекционного внутривенного введения соединения 1 (0,5 мг/кг) на функцию ЛЖ у находящихся в сознании свиней с сердечной недостаточностью Отклонение от базиснoй линии Базисная 15 мин 60 мин линия Диаметр ЛЖ в конце диастолы, мм Диаметр ЛЖ в конце систолы, мм Фракционное сокращение ЛЖ, % Скорость сокращения круговых волокон Vcf,с-1 Скорость изменения ЛЖ давления сердечных сокращений LV Существенно отклоняется от базисной линии, р 0,025. Данные представлены средней величинойстатистическая ошибка, при n=3,кроме LV dP/dt, где n=4. Таблица 4 Эффекты инъекционного внутривенного введения соединения 1 (0,5 мг/кг) на сердечную и системную гемодинамику у находящихся в сознании свиней с сердечной недостаточностью Отклонение от базиснoй линии Базисная 15 мин 60 мин линия Левопредсердное дав 233 ление, мм Нg Среднее артериальное 885 давление, мм Нg Сердечный индекс,869 мл/мин/кг Общее перифериче 1,04 ское сопротивление 0,09 сосудов Частота сердечных со 14315 кращений, ударов/мин Существенно отклоняется от базисной линии, р 0,025. Данные представлены средней величинойстатистическая ошибка, при n=4. Стадия D. Сравнение действия применения соединения 1 и соединения 2 при сердечной недостаточности. Фиг. 5 проводит сравнение эффектов применения соединения 1 (0,5 мг/кг) и соединения 2(эналаприлат) (1 или 4 мг/кг) на общее сопротивление сосудов у находящихся в сознании свиней при сердечной недостаточности. В то время как эффекты эти были независимы от дозы и подразумевался максимальный эффект, обе дозы соединения 2 в течение 90-минутного периода наблюдения вызывали существенное понижение общего сопротивления сосудов до подобного уровня. Снижение общего периферического сопротивления сосудов от введения соединения 1 (0,5 мг/кг) было большим, чем таковое снижение от введения любой из доз соединения 2. Фиг. 6 проводит сравнение средних величин артериального давления, скорости изменения ЛЖ давления LV dP/dt, сердечного выброса и общего периферического сопротивления сосудов через 60 мин после введения соединения 1 либо соединения 2. Стадия Е. Действия эндотелина ЕТ-1 в присутствии и в отсутствие соединения 1 при сердечной недостаточности. Фиг. 7 показывает эффекты кумулятивных внутривенных инъекций болюса ЕТ-1 (суммарная доза 0,5 мкг/кг) на среднее артериальное давление, среднее левопредсердное давление,общее периферическое сопротивление сосудов и частоту сердечных сокращений до и после внутривенного введения соединения 1 в дозе 0,5 мг/кг. ЕТ-1 вызывал существенные, зависящие от дозы, подъемы среднего артериального давления, среднего левопредсердного давления и общего периферического сопротивления сосудов. Частота сердечных сокращений снижалась,но не в режиме зависимости от дозы. Гемоди 18 намические ответы на ЕТ-1 заметно сглаживались после введения соединения 1, позволяя полагать, что внутривенное введение дозы 0,5 мг/кг соединения 1 способно обеспечивать значительную блокаду эффектов экзогенного ЕТ-1. Соединение 1 в дозе 0,5 мг/кг при внутривенном введении снижало повышенное сопротивление сосудов, но не оказывало влияния на сократимость миокарда у находящихся в сознании свиней с сердечной недостаточностью. Острый эффект введения соединения 1 был большим, чем эффект от 1 или 4 мг/кг вводимого внутривенно соединения 2. Полезные эффекты соединения 1 в данной модели сердечной недостаточности были связаны с его рецепторным антагонизмом в отношении ЕТ-1, поскольку гемодинамические ответы на провокационную пробу с введением ЕТ-1 отчетливо ослаблялись такой же дозой соединения 1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ предупреждения и/или лечения сердечной недостаточности и дисфункции желудочков у теплокровного животного, включающий введение этому теплокровному животному, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества антагониста эндотелина формулы или его фармацевтически приемлемой соли,где А представляет собой пиридинил, замещенный C1-C6 алкилом или C1-C6 алкиламином,Аr1 - дигидробензофуранил или бензодиоксоланил,Аr2 - фенил, замещенный метокси- и C1C6 алкилом, замещенным C1-C6 алкокси-, гидрокси- и карбоксигруппами,R1, R2 и R3 - водород, Y - СООН. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что антагонист эндотелина выбирают из следующих соединений:(5S,6R,7R)-2-бутил-6-карбокси-7-[(S)-2-(2 карбоксипропил)-4-метоксифенил]-5-(3,4-метилендиоксифенил)циклопентено[1,2-b]пиридина. 3. Способ предупреждения и/или лечения сердечной недостаточности и дисфункции желудочков у теплокровного животного, включающий введение этому теплокровному животному, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества антагониста(5S,6R,7R)-2-бутил-6-карбокси-7-[(S)-2-(2 карбокcипропил)-4-метоксифенил]-5-(3,4-метилендиоксифенил)циклопентено[1,2-b]пиридина. 4. Способ по п.3, отличающийся тем, что сердечная недостаточность представляет собой застойную сердечную недостаточность. 5. Способ по п.4, отличающийся тем, что теплокровное животное является млекопитающим. 6. Способ по п.5, отличающийся там, что животное является человеком. 7. Способ по п.1, отличающийся тем, что сердечная недостаточность представляет собой застойную сердечную недостаточность. 8. Способ по п.7, отличающийся тем, что теплокровное животное является млекопитающим. 9. Способ по п.8, отличающийся тем, что животное является человеком.