Местное трансдермальное лечение

1 Область изобретения Изобретение относится к способам получения спирта из хохобы (жожоба), смеси преимущественно мононенасыщенных спиртов с длинной цепью, и применению этой маслянистой жидкости или ее композиций для местного лечения субдермальных инфекций, таких как вирус простого герпеса, и трансдермальной доставки фармакологических агентов для лечения различных заболеваний, состояний. Предпосылки изобретения Большой процент мирового населения заражен вирусами герпеса. Тремя наиболее распространенными вирусами герпеса являются вирус простого герпеса 1 (HSV-1), который является причиной эрозии на лице и слизистой глаз, вирус простого герпеса 2 (HSV-2), к которому предрасположена область половых органов, и вирус простого герпеса 3 (HSV-3), также называемый опоясывающим герпесом и varicellazoster, который вызывает ветряную оспу и позднее опоясывающий лишай. Вирус простого герпеса 8 связан с раком кожи саркомой Капоши. Каждый из этих случаев герпеса чувствителен к местному лечению, поскольку вирусы реплицируются в субдермальных клетках во время рецидива и перед очаговыми высыпаниями. Ингибирование проникновения вируса в клетку хозяина является способом лечения, который используется даже для индивидуумов, зараженных вирусом иммунодефицита человека, и здесь используется против герпеса. Как только индивидуум заражается, герпесвирусы становятся латентными преимущественно в нервных клетках и они могут вновь реактивироваться, вызывая рецидивы первоначальных симптомов. Когда зараженный вирусом герпеса индивидуум претерпевает стресс в результате истощения, сильного солнечного света,ветра, некоторых продуктов питания и лекарственных препаратов, менструации или бактериальной инфекции, вирус распространяется в клетки под эпидермисом, где он начинает реплицироваться. Для HSV-1 и HSV-2 первоначальный зуд, пощипывание или боль относятся к продромальной стадии, сигнализирующей, что вирус является активным под кожей. Продромальная стадия может иметь место от часа до нескольких дней перед появлением очагов поражения. На стадии эритемы или воспаления иммунная система начинает бороться с вирусом. После этой раздражающей стадии покраснения образуются везикулы и появляются очаговые высыпания на коже и слизистых. HSV-1 и HSV-2 морфологически не различаются, основные различия заключаются в том, где на коже появляются очаги поражения, и имеется некоторая смена мест при рецидивах между этими двумя вирусами. Распространение герпеса в мозг или спинной мозг приводит к энцефалиту и менингиту, которые являются состояниями, угрожающими жизни. 2 Существует несколько возможностей лечения инфекций, вызываемых вирусами герпеса,но не излечения. Несколько препаратов, аналогов нуклеозидов, могут быть эффективными,если принимаются ежедневно в профилактических целях. Они менее эффективны, если назначаются во время рецидива, перорально или местно. Лекарственные препараты на основе нуклеозидов ингибируют репликацию вирусов,проникая в клетку и нарушая продукцию нуклеиновых кислот. Они не являются вируцидными, и дезактивация любого имеющегося вируса зависит от функциональной иммунной системы. Существует ряд коммерческих препаратов против простудной болячки, которые лечат симптомы, но в целом являются неэффективными в предупреждении образования очагов поражения. Они включают преимущественно анестетики, антибактериальные, смягчающие и ранозаживляющие препараты, которые уменьшают боль, предупреждают развитие бактериальной инфекции и помогают подсушить пузырьки. Новые препараты против вируса герпеса, их мишени и терапевтическая эффективность описаны в обзоре (Alrabian and Sacks, Drugs, 52: 1732, 1996), как и существующие способы местного лечения инфекций, вызванных вирусом простого герпеса (Hamuy and Berman, Europ. J.Dermatol., 8: 310-319, 1998; Evans and Tyring,Dermatol. Clinic. 16: 409-419, 1998; Syed et al.,Clin. Drug Invest., 16: 187-191, 1998). Спирты с длиной цепи из 16-20 атомов углерода и 1-4 двойными связями ингибируют простой герпес и другие вирусные бактериофаги с липидной оболочкой в клеточных культурах (Sands et al., Antimicrob. Agents Chemother.,15: 67-73, 1979). Эти ненасыщенные спирты являются более эффективными в условиях invitro, чем насыщенные спирты с более короткой длиной цепи (Snipes et al., Antimicrob. Agentset al., патент США 4513008, 1985) описывается ингибирование покрытых оболочкой вирусов,таких как герпес, нормальными полиненасыщенными кислотами, альдегидами или первичными спиртами с длиной цепи из 20-24 атомов углерода и 5-7 двойными связями. Эти сообщения были продолжены исследованиями и разработкой н-докозанола в качестве местного лечения инфекций, вызываемых герпесом. н-Докозанол, также называемый 1-докозанолом и бегениловым спиртом, является насыщенным спиртом с нормальной цепью из 22 атомов углерода, который находится в коре,цветках и плодах дерева Pygeum africanum. Сообщалось, что н-докозанол имеет широкий спектр активности in vitro против покрытых липидной оболочкой вирусов, таких как герпес(Katz et al., Proc. Nat. Acad. Sci., 88: 1082510829, 1991; Katz et al., Ann. N.Y.Acad. Sci., 724: 472-488, 1994; Pope et al., J. Lipid Res., 37: 21672178, 1996; Pope et al., Antiviral Res., 40: 85-94, 3 1998) и также против вируса иммунодефицита человека HIV (Marcelletti et al., AIDS Researchand Human Retroviruses, 12: 71-74, 1996). В этих исследованиях было показано, что противовирусная активность н-докозанола включает ингибирование процесса проникновения вируса в клетку, что осуществляется при внутриклеточной метаболической биотрансформации препарата. Ряд патентов по составу смесей на основе н-докозанола в композициях, которые делают его полезным для местного применения, подтверждает эти публикации (Katz, патент США 4874794, 1989; Katz, патент США 5071879,1991; Katz, патент США 5166219, 1992; Katz,патент США 5194451, 1993; Katz, патент США 5534554, 1996). н-Докозанол не является вируцидным, прямо дезактивируя вирусы, но он нарушает репликацию вирусов, и уничтожение оставшихся вирусов зависит уже от функциональной иммунной системы. н-Докозанол является кристаллическим воскообразным твердым веществом, не растворимым в воде, для которого необходимо его сочетание с неионным поверхностно-активным веществом и носителем для облегчения прохождения через кожу и воздействия на уровне клеток-мишеней. Это ограничение также было отмечено для некоторых других соединений с нормальной длинной цепью из 18 атомов углерода, включая амиды, алканы, кислоты и спирты, для которых необходимо сочетание с поверхностно-активным веществом и носителем для облегчения прохождения через эпидермис (Katz et al., патент США 5534554, 1996; Katz et al., PCT WO 98/11887,1998). В последних двух патентах заявляется композиция на основе н-докозанола или других соединений с длинной цепью с поверхностноактивным веществом и фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем в качестве активного ингибитора репликации вирусов с большей степенью активности, чем отдельные соединения. Спирты и другие соединения с длинной цепью являются твердыми веществами при обычной комнатной температуре, и не следует ожидать, что они проникнут через кожные слои одни без носителя. В опыте, в котором использовали 10% н-докозанол, суспендированный в водной системе, содержащей неионное поверхностно-активное вещество и носитель,среднее время заживления очагов поражения у людей, зараженных лабиальным герпесомVenereol., 76: 479-481, 1996). Испытали крем с 12% н-докозанола в качестве возможного профилактического средства против передачи вируса иммунодефицита обезьяны (SIV) у обезьян макака резус (Miller et al., Antiviral Res., 26: А 277, 1995). Внутривагинальное применение перед заражением предупреждало передачу вируса у пяти из шести опытных животных. Сообщается, что н-докозанол и другие насыщенные спирты с длиной цепи из 20-26 атомов уг 003741 4 лерода способствуют заживлению поврежденной роговицы глаза (Muller, патент США 5214071, 1993; Muller, патент США 5296514,1994). Масло хохобы является смесью эфиров,состоящих преимущественно из мононенасыщенных спиртов с длинной цепью и карбоновых кислот (Wisniak, The Chemistry and TechnologySociety, Champaign, Illinois, 272 pp., 1987). Это масло получают из семян пустынного кустарника Simmonsia chinensis. Масло хохобы имеется в продаже в течение уже более, чем двадцати лет, и несколько миллионов фунтов ежегодно используется для косметических композиций. Существенным свойством масла хохобы является его способность быстро всасываться кожей. Это легкое всасывание достигается за счет одной двойной связи углерод-углерод, имеющейся в средней части спиртовой и карбоновокислотной групп в молекулах моноэфира. В результате интенсивного изучения и применения масла хохобы было установлено, что оно является полностью нетоксичным, когда наносится на кожу человека или вводится перорально мышам, крысам, суркам и кроликам (Taguchi andSci., 49: 417-428, 1984; Verschuren and Nugteren,Food Chem. Toxicol., 27: 45-48, 1989). Потребление внутрь семян хохобы, которые на 50% состоят из масла, не приносит вреда людям, хотя появляется тошнота, если съедено так много,как 200 г. У мышей масло хохобы действует в качестве смазывающего агента в кишечнике(Verbiscar et al., J. Agric. Food Chem., 28: 571578, 1980). Установлено, что примерно 20% масла хохобы расщепляется гидролитическими ферментами в желудочно-кишечном тракте,образуя таким образом спирт из хохобы in situ. После всасывания через кожу масло хохобы, по меньшей мере, частично будет метаболизироваться в спирт из хохобы. Масло хохобы в целом считается безопасным продуктом для местного применения во всем мире. Спирт из хохобы готовят из масла хохобы гидрогенолизом с натрием и спиртом (Molaisonet al., J. Amer. Oil Chem. Soc., 36: 379-382, 1959). В этой реакции гидрогенолиза группа карбоновой кислоты в эфире превращается в ее соответствующий эфир в отличие от химического гидролиза, где жирные кислоты остаются интактными и должны отделяться от спиртов в смеси. Гидрогенолиз удваивает количество спирта из хохобы, которое можно получить из масла хохобы. Один спиртовой продукт из хохобы, приготовленный гидрогенолизом, приводит к смеси 6% октадек-9-енола, 62% эйкоз-11-енола, 28% докоз-13-енола и 4% тетракоз-15-енолаNegev, Beer-Shiva, Israel, p. 371-391, 1984). Фактическая спиртовая композиция будет варьировать в зависимости от источника масла хохобы,используемого в гидрогенолизе. Относительные количества отдельных спиртовых компонентов в спирте из хохобы зависят от эфирного состава масла хохобы, продукта, полученного из семян,собираемых на юго-западе США, в Мексике,Израиле и Южной Америке. Чистые мононенасыщенные спирты с нормальной длинной цепью в некоторых случаях являются жидкими или твердыми веществами,плавящимися при низкой температуре, но в смеси, такой как спирт из хохобы, они находятся в виде бесцветного масла без запаха при обычной комнатной температуре. Характерным свойством спирта из хохобы является то, что он легко всасывается через кожу человека, во многом также, как исходное масло хохобы. Для спирта из хохобы не требуется носитель или поверхностно-активное вещество для облегчения прохождения через кожу. В одном патенте сообщается, что спирт из хохобы входит в компоненты помады наряду с большим количеством различных карбоновых кислот, эфиров и спиртов с различной структурой и функциями (Sato, Lipocolor Composition, патент США 5700453, 1997). В последнем случае в технологии, заявленной в Патенте, в большей степени шел поиск липокрасящих свойств, которые позволят ощущать композицию менее сухой, и не подразумевалось улучшение проникновения ее через кожу. Парфюмерная компания Косу, Токио, которая ввела в продажу масло хохобы в качестве косметического ингредиента, также изучала безопасность спирта из хохобы для косметических применений (Taguchi. Proc. Sixth Int. Conf.Jojoba and Its Uses, eds. Wisniak and Zabicki, BenGurian Univ. Negev, Israel, p. 371-391, 1984). На мышах, кроликах, сурках и людях были проведены следующие тесты со спиртом из хохобы,подтверждающие, что этот продукт является совершенно безопасным для местного применения. Результаты мутагенных тестов также были отрицательными. Острая пероральная токсичность на мышах. 60 инбредных мышей, по 30 самцов и самок, разделили на три группы, им вводили однократно спирт из хохобы желудочным зондом. Первая группа получила 32 мл/кг (27 г/кг), вторая - 40 мл/кг (34 г/кг) и третья группа получила 50 мл/кг (42,5 г/кг). Ни в одной группе спустя 7 суток не было зарегистрировано смертных случаев, таким образом, LD50 выше 50 мл/кг. Средняя масса тела снизилась на 1-й день, но после увеличилась до нормы. Спирт из хохобы, возможно, действует, как смазывающее вещество в кишечнике подобно маслу хохобы, вызывая изменение массы тела в первые 24 ч за счет выведения питательных веществ наряду со спиртом из хохобы, с фекалиями. Отсутствовали наблю 003741 6 даемые анатомические изменения. В этих дозах спирт из хохобы при пероральном введении не токсичен для мышей. Глазные и кожные тесты на кроликах. Спирт из хохобы растворили в масле хохобы в трех концентрациях 50, 25 и 12,5% на основе масса/массе. Девяти кроликам, по три в группе на каждую дозу, ввели 0,05 мл (1 капля) этих растворов в правый глаз. Левый глаз не обрабатывали. Раздражающее действие на глаз было очень незначительным без воздействия на роговицу и радужку, и слабовыраженный конъюнктивит прошел через 24-48 ч. В другом опыте 10 кроликам альбиносам, самцам, нанесли на кожу полоски полотняного пластыря с каждой из этих трех проб. Кусочки пластыря удалили у 5 кроликов через 15 дней и у оставшихся 5 кроликов - через 30 дней. Визуальное и патологическое обследование обработанных участков кожи указало, что раздражение было очень незначительным и сравнимым для трех проб. Кожные и подкожные тесты на сурках. Спирт из хохобы растворили в масле хохобы высокой чистоты в 10% концентрации. Суркам альбиносам, 10 самцам и 10 самкам, нанесли эти пробы в тесте с кусочками пластыря. Через 24 и 48 ч не было замечено признаков какого-либо раздражения. В другом тесте 10% раствор спирта из хохобы в масле хохобы ввели подкожно каждому из 10 самцов и самок. Через 24 и 48 ч не было обнаружено признаков раздражения в месте инъекции. Через одну неделю раствор спирта из хохобы распределили на кусочки полотняного пластыря и пластырь поместили на место инъекции. Через две недели раствор спирта из хохобы на кусочке пластыря поместили на место нанесения с места инъекции. Ни в одном месте не было замечено признаков сенсибилизации. Кожные тесты с кусочками пластыря на людях. Тест провели у 40 людей со здоровой кожей. Приготовили две пробы, включающие 100% спирт из хохобы и 10% спирт из хохобы в масле хохобы, на полосках полотняного пластыря. Кусочки пластыря поместили на верхнюю часть спины 20 субъектам для каждой пробы. Результаты оценивали через 30 мин и через 24 ч. У 39 субъектов не было отмечено признаков раздражения какого-либо рода и только у одного из субъектов была возможная реакция на 10% композицию. Второй тест провели на других 40 субъектах с контактным дерматитом,используя чистый спирт из хохобы на полосках полотняного пластыря. Только у одного из 40 объектов в опыте была видна сомнительная реакция в течение первых 30 мин, и ни одного случая положительной реакции не было обнаружено через 24 ч. Спирт из хохобы не обладает кожной токсичностью. 7 Краткое описание изобретения Спирт из хохобы представляет собой маслянистую жидкость, которая легко всасывается кожей человека, не оставляя ни остатка, ни запаха. Нанесенный на начальной стадии рецидива простого герпеса, он быстро проникает через эпидермальный слой к субдермальным клеткам,где происходит репликация вируса, в противном случае приводящая к симптоматическому проявлению заболевания. Оказалось, что спирт из хохобы действует таким же образом, как действует н-докозанол, ингибируя миграцию покрытых липидной оболочкой вирусов в клетки и внутри клеток. Раздражение ослабляется, и замедляется репликация вирусов в то время, как иммунная система хозяина приводится в готовность для уничтожения свободных вирусных единиц. При раннем лечении на продромальной стадии или даже стадии эритемного воспаления пузырьки герпеса не образуются или, по меньшей мере, ингибируются у людей с функциональной иммунной системой. Это ингибирующее действие применимо в отношении покрытых оболочкой вирусов, которые проявляются в виде очагов поражения на эпидермальных поверхностях. Мишеневыми объектами для лечения являются вирусы простого герпеса, которые вызывают возвратные эрозии на лице (HSV-1) и эрозии на половых органах (HSV-2), опоясывающий лишай (HSV-3) и саркому Капоши(HSV-8). Подробное описание изобретения В опытах на мышах и морских свинках было показано, что спирт из хохобы не является ни вируцидом, ни бактерицидом, которые непосредственно разрушают вирусы. Спирт из хохобы является вирустатиком, который замедляет репликацию вирусов, ингибируя проникновение в клетки. Лекарственные препараты, аналоги нуклеозидов, такие как ацикловир и пенцикловир, которые используются для перорального и местного лечения вирусных инфекций, также являются вирустатиками, действуя путем вмешательства в производство нуклеиновых кислот внутри зараженной клетки. Для вирустатиков,чтобы быть наиболее эффективными, необходима функциональная иммунная система для ответной реакции и уничтожения вируса. Следовательно, важно начать лечение рецидивов герпеса как можно раньше после того, как вирус становится активным, для того, чтобы свести до минимума вирусную нагрузку, которая должна быть элиминирована иммунной системой. Спирт из хохобы является наиболее эффективным на стадии продромы, как только кожа становится раздраженной и воспаленной,когда иммунная система начинает свою ответную реакцию на локализованную инфекцию. Лучше всего действуют ранние аппликации каждые несколько часов, устраняющие зуд и другие виды раздражения, вызванные лизисом зараженных клеток. Спирт из хохобы, распреде 003741 8 ленный по раздраженной поверхности кожи,быстро проникает и является активным без необходимости в носителе. В противоположность этому, для кристаллических спиртов с длинной цепью, таких как н-докозанол, для того, чтобы быть активными, требуется носитель. По сравнению с небольшими молекулами спиртов, таких как этиловый или изопропиловый спирт,которые испаряются или уносятся в кровоток,спирт из хохобы останется в основном месте нанесения на кожу в течение часа или более. Его нерастворимость в воде и отсутствие поверхностно-активного вещества ограничивают его всасывание в кровоток и удаление с активного субдермального участка. В предпочтительном варианте воплощения к спирту из хохобы добавляется витамин Е (токоферол) для повышения стабильности против окисления двойных связей. Витамин Е является естественным антиоксидантом, который находится в семенах хохобы и в масле хохобы, полученном отжимом или экстракцией. В еще одном варианте воплощения добавляется салициловая кислота в качестве противовирусного, антисептического и кератолитического агента. Это расширяет эффективность спирта из хохобы и улучшает его заживляющее действие. Другие низкомолекулярные органические кислоты, такие как молочная кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, бензойная кислота и ацетилсалициловая кислота,также усиливают противовирусную эффективность (Poli et al., Food Chem., 4: 251-258, 1979;Brown-Skrobot et al., патент США 4975217,1990; Primache et al., Microbiologica, 21: 397-401,1998), когда находятся в спирте из хохобы. Дополнительные пищевые низкомолекулярные ди- и трикарбоновые органические кислоты, которые, как было показано, обладают активностью in vitro против герпеса и других вирусов, включают яблочную кислоту, фумаровую кислоту, янтарную кислоту, винную кислоту и лимонную кислоту. Однако эти ди- и трикарбоновые кислоты являются слаборастворимыми в спирте из хохобы непосредственно и должны составляться с низшими спиртами, такими как этиловый и изопропиловый спирт для применения в качестве лосьонов. Спирт из хохобы легко растворяется в низших спиртах в качестве вирустатической части композиции, в то время как органические кислоты действуют в качестве вируцидов, непосредственно дезактивируя вирусы. В упомянутом гидрогенолизе с натрием,сореагенты спирт и масляный эфир хохобы добавляют к жидкому натрию в кипящем толуоле. Система генерирует выделяющийся водород,который восстанавливает эфирные группы в спиртовые группы без восстановления двойных связей углерод-углерод. В руках заявителей этот способ дает выход 73% чистого дистиллированного спирта из хохобы. Однако выделение и очистка конечного продукта затруднительна вследствие присутствия карбоновых кислот в качестве побочного продукта, образующихся в результате частичного гидролиза эфира в большей степени, чем в результате гидрогенолиза. Натриевые соли этих жирных кислот с длинной цепью действуют в качестве поверхностноактивных веществ и их нельзя вымыть водой из смеси. Кроме того, в то время как эту реакцию можно легко проводить в небольших количествах, крупномасштабное производство с жидким натрием представляется затруднительным. Для преодоления этих проблем предлагается новый химический гидрогенолиз эфирной группы масла хохобы в спирты с использованием коммерчески доступного реагента под названием натрий бис-(2-метоксиэтокси)алюмогидрид (Bazant et al., Tetrahedron Letters, 29: 3303-3306,1968). С этим реагентом получили выход спирта из хохобы 90,5%, который идентичен продукту,полученному гидрогенолизом с жидким натрием, но без проблем с выделением или опасностью за счет реагентов. Точка замерзания этого спирта из хохобы примерно 13 С, и он остается маслом при обычной комнатной температуре. Основными спиртовыми компонентами спирта из хохоба являются октадек-9-енол, эйкоз-11 енол, докоз-13-енол и тетракоз-15-енол. Фактическое количество любого отдельного спирта в препарате спирта из хохобы будет зависеть от источника масла хохобы, используемого для гидрогенолиза. Другие спирты с длиной цепи в пределах 14-24 атомов углерода также присутствуют в качестве минорных компонентов, составляя в целом 3% (Wisniak, Chemistry andChemists Society, Champaign, Illinois, 272 pp.,1987). Существенными структурными факторами в соединениях спирта из хохобы является то,что они высоколипофильны с гидрофильной гидроксильной концевой группой и двойной связью углерод-углерод во внутренней цепи,что облегчает проникновение через кожу. Этот способ также применим к спермацетовому китовому маслу, давая подобную смесь мононенасыщенных спиртов с длинной цепью. Общая структура основных компонентов этой спиртовой смеси из хохобы и примеры отдельных мононенасыщенных спиртов, составляющих спирт из хохобы, следующие, где двойная связь может находиться в цис- и трансформах, и m и n могут колебаться от 5 до 13 атомов углерода. СН 3(СН 2)mCH=СН(ОH2)nСH2OН Гексадек-7-енол Октадек-7-енол Октадек-9-енол Эйкоз-11-енол Докоз-13-енол Тетракоз-15-енол 10 Опыты на мышах и морских свинках. Использованные здесь зараженные HSV-2 мыши предназначались для демонстрации продуктов, которые имеют потенциальную возможность использоваться в однократной профилактической дозе против инфекции. Преимущественно это является полем деятельности вируцидов или бактерицидов. Виракол является вирустатиком, и, как предполагается, только замедляет развитие инфекции у мышей, как это он делает в примере 3. Система с морскими свинками в примере 4 расширяет противоинфекционные тесты до первичных случаев, которые являются значительно более тяжелыми, чем рецидивы. Принципиальной причиной этого является то, что иммунная защитная система у вновь зараженного хозяина еще не запрограммирована на борьбу с этим определенным вирусом. Спирт из хохобы только замедляет проникновение вируса в клетку, куда вирус должен проникнуть для репликации. Этот механизм замедления опирается на эффективную иммунную систему для уничтожения вируса. Спирт из хохобы можно использовать только для ингибирования рецидивов, и он должен наноситься несколько раз каждые несколько часов после первого ощущения раздражения, которое является сигналом о начале рецидива. Лечение зараженных морских свинок каждые двенадцать часов, как в примере 4, является неадекватным для вирустатика, который замедляет репликацию вирусов. Процедура применения была слишком нечастой у животных с высокой дозой заражения, и иммунная защитная система еще не настроилась на вирус. Тесты у людей против рецидивов случаев герпеса являются наилучшим путем оценки эффективности. Исследования у людей. Предварительные тесты со спиртом из хохобы против лабиального герпеса (HSV-1) у людей провели с чистым дистиллированным продуктом без добавок. В одном опыте 65 летнюю женщину, которая обычно переносит примерно два простудных герпеса в год, подвергли воздействию сильного солнечного света в течение продолжительного периода времени. Через день после этого воздействия у женщины появился зуд и небольшое воспаление на верхней губе и области носа (околоротовой). Нанесли одну каплю спирта из хохобы и распределили по раздраженному участку, и затем это повторяли каждые четыре часа. Ранние симптомы быстро исчезли, и очаги поражения не образовались. Этот результат был типичным для нескольких предварительных тестов со спиртом из хохобы против вируса герпеса простого у людей. В примере 5 описывается процедура, используемая для тестирования препаратов спирта из хохобы против HSV-1, вызывающего эрозии на лице, и HSV-2, вызывающего эрозии на половых органах. Результаты представлены в табл. 11 1 и 2. В этих таблицах спирт из хохобы составлен вместе с 0,5-1% токоферолом в качестве антиоксиданта и назван вираколом. Композиция виракол плюс содержит 2% салициловой кислоты. В табл. 1 сообщается о 15 субъектах из общего числа 30 случаев рецидивов. У 14 (47%) из этих случаев вовсе не было эрозий. В 8 других случаях развились слабые очаги поражения. Несколько рецидивов со средними и тяжелыми очагами поражения лечили только после того,как уже началось образование пузырьков. У нескольких субъектов с тяжелыми случаями лучшие результаты получили при использовании виракола плюс. По меньшей мере, у одного субъекта (102) проявились в одно время все симптомы рецидивирующего простого герпеса без предупреждающего периода, но даже у него 12 имело место ослабление образования пузырьков. Одна женщина (132), у которой был поставлен диагноз болезни Крона, никогда не была без наличия простого герпеса и хронической утомляемости в течение более, чем одного года,за счет подавленной иммунной системы. После нескольких обработок вираколом ей провели замену на виракол плюс с получением лучших результатов. У мужчины (107), который также имел частые случаи простого герпеса, также были получены лучшие результаты с вираколом плюс. При лечении вираколом плюс спирт из хохобы действует в качестве вирустатика, замедляющего проникновение вируса в клетку, в то же время действуя в качестве системы доставки через кожу твердой салициловой кислоты,которая является вируцидом. Таблица 1. Тестирование виракола против лабиального герпеса (НS/-1) у людей Стадии нанесения Результаты по очагам поражения Субъект Пол Возраст Начало Дозы Дни Нет Слабые Средние Тяжелые 102 мужчина(ы) 36 про 9 1.5 Субъекты: Женщина(ы)=10. Мужчина(ы)=5 14 8 5 3 Общее число отчетов = 30+ = виракол плюс про = продрома; эри = эритема; пап = папулаa) субъект без вспышки HSV-1 или HSV-2 в прошлом годуb) также имелись очаги поражения генитального HSV Таблица 2. Тестирование виракола против генитального герпеса (HSV-2) у людей Стадии нанесения Результаты по очагам поражения Возраст Начало Дозы Дни Нет Слабые Средние Тяжелые 55 эри 3 4 про 5 про 10 эри 5 мужчина(ы) 49 про 2 женщина(ы) 26 про 3 про 2 женщина(ы) 36 пап 4/д эри 4/д женщина(ы) про 1 мужчина(ы) 40 эри 4 про 12 мужчина(ы) 44 пап 10 эри 10 про 4 пап 3 женщина(ы) 36 про 5 эри 5 женщина(ы) 26 про 6 про 9 про 3 женщина(ы) 59 пап 16 эри 3/д про 3/д Субъекты: Женщина(ы)=9. Мужчина(ы)=8 Общее число отчетов = 31+ = виракол плюс про = продрома; эри = эритема; пап = папулаa) виракол был израсходован до окончания случаяb) также имелись очаги поражения HSV на лице В табл. 2 сообщается о 17 субъектах из общего числа 31 случая рецидивов герпеса половых органов. В 15 из этих случаев (48%) было полное ингибирование образования очагов поражения. 9 других случаев закончились образованием слабых очагов. Из 7 случаев с образованием средних и тяжелых очагов поражения, в 5 случаях лечение началось на стадии папулы или пузырей. У одной из них (141) лечение рецидива проводили только один раз вследствие занятости на службе. У женщины (174), имевшей рецидивы, вызванные как HSV-1, так и HSV-2,был достигнут лучший результат с вираколом плюс. Двенадцатилетняя девочка почувствовала боль, после которой через два дня у нее появилось несколько пузырьков на талии. В младенчестве у нее была ветрянка, и ей был поставлен диагноз опоясывающего лишая, вызванного вирусом простого герпеса 3, также называемого опоясывающим герпесом и ветряной оспой. Начиная с третьего дня после появления боли, ее лечили вираколом шесть раз в день и перорально фамцикловиром три раза в день. Случай полностью закончился в течение семи дней. Не было боли и дополнительного образования пузырьков после начала лечения вираколом. Случаи опоясывающего лишая могут быть тяжелыми и продолжаться в течение от нескольких недель до месяца или более. Композиции со спиртом из хохобы можно использовать для лечения мужчин и женщин с равным успехом при ранних эрозиях на коже,вызванных герпесвирусами. Результаты являются наилучшими, когда лечение начинают как можно раньше на стадиях продромы (зуд) или эритемы (покраснение). Лечение хорошо переносится без побочных эффектов. Виракол плюс,включающий салициловую кислоту, улучшает общую противовирусную активность и заживление пузырьков, которые могут образоваться за счет неадекватного применения продукта спирта из хохобы или за счет подавленной иммунной системы. В этой композиции спирт из хохобы способствует трансдермальному проникновению салициловой кислоты, кристаллического твердого вещества, к месту репликации вирусов. Спирт из хохобы является смесью преимущественно мононенасыщенных нормальных спиртов с 16-24 атомами углерода в цепи. Смесь этих спиртов легко получить гидрогенолизом масла хохобы, которое является эфиром. Смеси мононенасыщенных нормальных спиртов можно также получить из других источников, таких как гидрогенолиз или гидролиз спермацетового китового масла. Кроме того, смесь отдельных спиртовых компонентов можно получить объединением каждого спирта в любом определенном количестве. Чем больше спиртов в смеси,тем будет более вероятным, что смесь будет жидкой при комнатной температуре. Составленная смесь отдельных спиртов будет действовать подобно спирту из хохобы, ингибируя проникновение вируса в клетки хозяина и таким образом ингибируя воспаление и образование очагов поражения. Спирт из хохобы фактически может состоять из любого числа отдельных мононенасыщенных спиртов с длинной цепью в зависимости от источника масла хохобы, из которого он происходит. Спирт из хохобы представляет собой смеси этих спиртов, которые 15 будут оставаться жидкими при комнатной температуре. Несмотря на то, что описание выше содержит много характерных признаков, они не должны истолковываться как ограничение объема притязаний, а в большей степени в качестве примеров предпочтительных воплощений. Возможно много больше вариаций для применения спирта из хохобы и других смесей мононенасыщенных спиртов с длинной цепью в качестве агентов трансдермальной доставки. Повышенная активность салициловой кислоты, растворенной в спирте из хохобы, является примером этой функции доставки через кожу. Другие применения являются многочисленными, некоторые из которых отмечаются ниже, где спирт из хохобы представляет любую смесь мононенасыщенных спиртов с длинной цепью. Альфа-гидроксикислоты (AHA), такие как молочная кислота и гликолевая кислота, интенсивно используются в косметических средствах для уменьшения морщин, пятен и других признаков старения (Kurtzweil, Alpha Hydroxy AcidsDrug Administration. Consumer Affairs. MarchApril, 1998). Спирт из хохобы будет модулировать проникновение и безопасность этих AHA. Ибупрофен и кетопрофен являются нестероидными противовоспалительными препаратами (NSAID), назначаемыми перорально для снятия боли. Составленные вместе со спиртом из хохобы и применяемые местно, они могут быть использованы для лечения артрита и других субдермальных болезненных симптомов.NSAID диклофенак является другим лекарственным препаратом для перорального применения, который можно сочетать со спиртом из хохобы для доставки через кожу этого агента,активного против боли. Капсаицин имеется в различных пищевых перцах. Он используется в качестве местного анальгетика в гелях и лосьонах для временного облегчения небольших болей и болезненных ощущений, связанных с артритом, повреждениями и растяжениями. Спирт из хохобы будет облегчать проникновение через кожу капсаицина в зонах местного применения. Тестостерон является основным мужским гормоном, продуцируемым в семенниках с воздействием на мышцы, кости и половую функцию. Заместительная терапия тестостероном у мужчин с дефицитом, иногда относящимся к гипоганадизму, обычно доступна в виде кусочков пластыря для местного применения. 1% раствор тестостерона в спирте хохобы не оставляет остатка, когда наносится субъекту на предплечье, что указывает на улучшенную доставку через кожу. Эту технологию доставки через кожу со спиртом из хохобы можно также использовать для соответствующих эстрогенных стероидов, таких как эстрадиол, для женщин. 16 Простагландин Е 1, также относящийся к алпростадилу, имеется в мужской репродуктивной системе, действуя в качестве периферического сосудорасширяющего соединения для поддержания эрекции полового члена. В настоящее время в продаже имеются два продукта,содержащих этот гормон, один для инъекций в пещеристое тело полового члена и один в виде уретрального суппозитория. Простагландин Е 1 легко растворяется в спирте из хохобы, который будет облегчать доставку этого мужского гормона через кожу при местном нанесении на половой член. Этот безопасный и эффективный способ введения будет более совершенным по сравнению с имеющимися в настоящее время нестерильными и болезненными способами введения простагландина Е 1. На стадии изучения находятся другие усилители систем доставки для этого гормона (Eisenberg and Samour, патент США 5527797, 1996). Витамин А (ретинол) и/или витамин D можно составить вместе со спиртом из хохобы для лечения псориаза. Паклитаксель (таксол) и его таксановые аналоги можно сочетать вместе со спиртом из хохобы в качестве усилителя проникновения для лечения раков кожи, таких как меланома или саркома Капоши. Миноксидил является антигипертензивным препаратом, используемым в настоящее время для стимуляции роста волос. Этот активный агент составляется с пропиленгликолем(антифриз), в качестве носителя, плюс спиртом,преимущественно для облегчения проникновения в скальп. Возможно применение препарата в виде капель и спрея. Миноксидил может быть в равной степени или более эффективным со спиртом из хохобы в качестве усилителя проникновения через кожу, композиция с которыми может также уменьшить побочные эффекты в виде зуда и раздражения кожи. Для использования в виде спрея можно добавить к композиции изопропиловый спирт или этиловый спирт. Пример 1. Спирт из хохобы, полученный гидрогенолизом с натрием и спиртом. Эфирную группу масла хохобы восстановили до спирта из хохобы способом с натрием и спиртом, о котором сообщалось ранее (Molaisonet al., J. Amer. Oil Chem. Soc., 36: 379-382, 1959) с небольшими модификациями. Суспензию 20,2 г (0,88 моль) натрия в 100 мл сухого толуола хорошо перемешали и довели до кипения в колбе с обратным холодильником, при этом натрий разжижился. Медленно при энергичном перемешивании с кипячением в колбе с обратным холодильником добавили раствор 120 г (0,2 моль) очищенного масла хохобы и 36,5 г (0,48 моль) 2-метоксиэтанола в 100 мл сухого толуола. Реакционный раствор стал прозрачным желтым с небольшим количеством взвешенных твердых частиц. После дополнительного перемешивания и кипячения с обратным холодиль 17 ником раствору дали охладиться, при этом образовалось воскообразное твердое вещество. Медленно добавили воду, 100 мл при перемешивании, при этом произошло вспенивание. Эмульгированную толуольную фазу отделили от эмульгированной водной фазы, затем промыли 100 мл солевого раствора. Толуол удалили отгонкой и к остатку добавили гексан. Собрали белое воскообразное вещество в количестве 14 г и идентифицировали по инфракрасному спектру в виде натриевой соли некоторой части карбоновых кислот масла хохобы. Вакуумная дистилляция гексановой растворимой фракции дала 88,2 г (73%) прозрачного бесцветного масла. Инфракрасный спектр соответствовал известной структуре. Остаток в дистилляционной колбе содержал непрореагировавшее масло хохобы и в большей степени гидролитические карбоновые кислоты, что было определено ИК-спектром. Пример 2. Спирт из хохоба, полученный гидрогенолизом с натрием бис(2-метоксиэтокси)алюмогидридом. Порцию в 70 мл (0,245 моль) 3,5 М раствора натрия бис (2-метоксиэтокси)алюмогидрида(Bazant et al., Tetrahedron Letters, 29: 3303-3306,1968) загрузили в реакционную колбу с 30 мл сухого толуола. Над молекулярными ситами высушили раствор 120 г (0,2 моль) масла хохобы в 120 мл толуола. Этот раствор прикапали в течение 30 мин к хорошо перемешанному восстанавливающему реагенту, при этом произошло вспенивание. После добавления реакционный раствор нагревали в течение часа и отобрали пробу. Инфракрасный спектр показал отсутствие эфирного карбонильного поглощения, что указывало на завершение гидрогенолиза. После нагревания в целом в течение двух часов прикапывали 60 мл воды, вызвав первоначальное вспенивание, затем образование желатинообразного осадка. Надосадочный толуольный раствор отделили и осадок хорошо промыли гексаном. Объединенный толуолгексановый экстракт высушили над сульфатом кальция. Прозрачный бесцветный маслянистый спирт из хохобы дистиллировали при 188-218/5 мм рт. ст. и взвесили 108,6 г (90,5%). Он затвердел в холодильнике примерно при 13 С. Инфракрасный спектр этого продукта был идентичен продукту при восстановлении с натрием и соответствовал его структуре, как следует для длины волны см-1, группы типа: 3340, ОН, интенсивная, широкая полоса; 3000, СН 3, острая, слабая полоса; 2920, СН 2,интенсивная, острая полоса; 2850, СН, средняя,острая полоса; 1650, С=С, слабая, широкая полоса; 1455, CH2, сильная деформация; 1375, ССН 3, слабая деформация; 1050, С-O, интенсивная полоса; 715, (СН 2)n, интенсивная структурная. Пример 3. Профилактический тест против вируса простого герпеса 2 на мышах. 18 Тридцать мышей Swiss Webster самок отъемышей со средней массой 21 г разделили на две группы: 15 контрольных и 15 опытных мышей. Непосредственно перед заражением вирусом контрольным мышам ввели плацебо в виде забуференного фосфатом физиологического раствора и каждой опытной мыши ввели 15 микролитров спирта из хохобы внутривагинально. Всех 30 мышей заразили внутривагинально 10000 бляшкообразующими единицами штамма 186 вируса простого герпеса 2 (HSV2) и затем содержали в течение 21 дня. Результаты показали, что спирт из хохобы замедлял эффекты инфекции, вызываемой HSV-2 у мышей, а именно смертность, но значительно не предотвращал инфекцию. На 15-й день после заражения 80% мышей, которым вводили плацебо, умерли в сравнении с 40% в опытной группе. Это действие может быть результатом ограничения первоначальной репликации вируса в половых путях и снижения таким образом количества вирусов, достигающих мест латентного сохранения в ганглии. Однако к 21-му дню выжила только одна опытная мышь, а все мыши, которым вводили плацебо, погибли. Этот опыт четко показал, что виракол не является вируцидом и его не следует применять в качестве профилактического средства для предупреждения передачи HSV-2. Пример 4. Тест с первичным случаем против вируса простого герпеса 2 на морских свинках. 24 морских свинок Hartley самок с массой тела 300-350 г разделили на две группы по 12 в каждой, получивших спирт из хохобы и не обработанных. Опытные животные получили 0,05 мл (1 каплю) спирта из хохобы внутривагинально, сразу же животных обеих групп заразили внутривагинально 75000 бляшкообразующими единицами вируса простого герпеса 2, очень высокая вирусная нагрузка гарантировала заражение вирусной инфекцией. Последующие внутривагинальные/местные обработки с 0,05 мл спирта из хохобы провели через 12 ч после заражения вирусом и продолжали дважды в день каждые 12 ч в течение последующих 7 дней. Всех животных обследовали ежедневно на наличие первичного случая герпеса, который начал появляться на 3-й день и продолжался до 10-го дня. Симптомы заболевания отсутствовали у двух обработанных животных и одного контрольного. Спирт из хохобы значительно не снизил частоту или тяжесть этого первичного случая у морских свинок. Однако отсутствовали побочные эффекты за счет спирта из хохобы при внутривагинальном введении. Пример 5. Исследования у людей против вирусов простого герпеса. Провели клиническое исследование, используя чистый спирт из хохобы, 1% раствор альфа-токоферола в спирте из хохобы, названный вираколом, и 2% раствор салициловой ки 19 слоты в вираколе, названный вираколом плюс. В исследование включили мужчин и женщин любого возраста, кто испытывал, по меньшей мере, 2 или 3 рецидива лабиального герпеса(HSV-1) или генитального герпеса (HSV-2) в год. Исключили беременных женщин, субъектов, находящихся на хронической противовирусной химиотерапии, иммунотерапии или альтернативной терапии или индивидуумов с гиперчувствительностью. Субъектам дали инструкции по нанесению продукта на основе спирта из хохобы 3-5 раз каждые 2-3 ч, как можно раньше после первоначального раздражения. Их обеспечили несколькими карточками для отчета, которые включали вход для номера кода субъекта, идентичность герпесвируса, дату лечения, число аппликаций, стадию, когда началось нанесение (продрома, эритема, папула),очаги поражения (нет, слабые, средние, сильные), общее количество дней случая и побочные эффекты/комментарий. Все субъекты были добровольцами, поскольку у всех были случаи герпеса без индуцированных рецидивов. Субъекты находились на системе доверия при заполнении карточек для отчета после лечения рецидива, и они отправили их обратно по почте в лабораторию. Результаты обобщены в табл. 1 и 2. Пример 6. Низкомолекулярные органические кислоты в спирте из хохобы. Салициловая кислота является противовирусным, антисептическим и кератолитическим агентом. Ее растворили в 2% концентрации в спирте из хохобы. Эта бета-гидроксикислота усиливает эффективность спирта из хохобы в качестве противовирусного агента. Она также улучшает заживляющее действие, когда наносится на стадии папулы при рецидиве герпеса. Ацетилсалициловая кислота, или аспирин,является анальгетиком, антипиретиком и противовоспалительным агентом, которая также активна против вируса простого герпеса 3 (ветряная оспа), возбудителя ветрянки и опоясывающего лишая. Ацетилсалициловая кислота легко растворяется в спирте из хохобы. Бензойная кислота является пищевой добавкой, которая действует в качестве консерванта. Бензойная кислота обладает гермицидной активностью и легко растворяется в спирте из хохобы. Молочная кислота является подкислителем, используемым для пищевых продуктов. В естественных условиях она находится в йогуртах и кислом молоке. 5% раствор в спирте из хохобы легко всасывается в кожу человека без раздражения. Молочная кислота является альфагидроксикислотой, используемой в некоторых косметических средствах. Было показано, что молочная кислота обладает противовирусной активностью in vitro. Гликолевая кислота является альфагидроксикислотой без запаха, найденной в соке сахарного тростника. Она легко растворяется в 20 спирте из хохобы и используется в косметических средствах. Было показано, что гликолевая кислота обладает противовирусной активностьюin vitro. Пировиноградная кислота является естественным компонентом мышечного метаболизма. Пировиноградная кислота легко растворяется в спирте из хохобы, и было показано, что она обладает противовирусной активностью in vitro. Пример 7. Ди- и трикарбоновые органические кислоты в лосьонах на основе спирта из хохобы. Маликовая кислота, также известная как оксиянтарная кислота, иногда называемая яблочной кислотой, потому что в естественных условиях находится в яблоках. Она используется в основном как подкислитель в продуктах питания. Количество в 40 мг быстро растворили в 3 мл этилового спирта и к этому раствору добавили 3 мл спирта из хохобы для обеспечения 0,7% лосьона. Этот лосьон, нанесенный на кожу человека, легко всасывался и не был раздражающим, не оставляя остатка. Было показано,что маликовая кислота обладает противовирусной активностью in vitro. Лимонная кислота имеется в цитрусовых и многих других фруктах и широко распространена в тканях животных. Она является усиливающей экскрецию пищевой добавкой и одним из активных ингредиентов в Алка-Зельцер. Количество в 35 мг быстро растворили в 4 мл изопропилового спирта, к этому раствору добавили 4 мл спирта из хохобы, получив 7 мл лосьона,содержащего 0,5% лимонной кислоты. Этот лосьон легко всасывался кожей человека и не был раздражающим, не оставляя остатка. Было показано, что лимонная кислота обладает вируцидной активностью in vitro. Фумаровая кислота является незаменимой для тканевого дыхания у животных. Она используется, как заменитель или частичный заменитель винной кислоты или лимонной кислоты в напитках. Она может быть составлена со спиртом из хохобы и низшим спиртом, таким как этиловый спирт и изопропиловый спирт, в виде лосьона. Было показано, что фумаровая кислота обладает вируцидной активностью invitro. Янтарная кислота используется в качестве буфера и нейтрализующего агента в пищевых продуктах. Она может быть составлена со спиртом из хохобы и низшим спиртом, таким как этиловый спирт или изопропиловый спирт, в виде лосьона. Было показано, что янтарная кислота обладает вируцидной активностью invitro. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ трансдермальной доставки фармацевтически активного агента субъекту, включающий:a) включение указанного агента в смесь со смешанными, преимущественно мононенасыщенными спиртами, содержащими от 14 до 24 атомов углерода, как представлено формулой СН 3(СН 2)mСН=СН(СН 2)nСН 2OН, где m и n равны 5-13,а углерод-углеродные двойные связи представляют собой цис или транс, иb) нанесение указанной композиции местно на участки кожи указанного субъекта. 2. Способ по п.1, при котором смешанными мононенасыщенными спиртами является спирт хохобы, полученный из масла хохобы. 3. Способ по п.1, при котором смешанными мононенасыщенными спиртами является спермацетовый спирт, полученный из спермацетового масла. 4. Способ по п.1, при котором из отдельных длинноцепочечных мононенасыщенных спиртов составляют смесь, температура замерзания которой 3 С и выше. 5. Способ по п.1, при котором жидкая смесь длинноцепочечных мононенасыщенных спиртов используется непосредственно без дополнительного носителя для местного лечения инфекций, вызванных вирусом герпеса. 6. Способ по п.5, при котором вирус представляет собой вирус простого герпеса-1, также называемый лабиальным герпесом, который вызывает раздражения и эрозии в области лица. 7. Способ по п.5, при котором вирус представляет собой вирус простого герпеса-2, также называемый генитальным герпесом, который вызывает раздражения и эрозии в области половых органов. 8. Способ по п.5, при котором вирус представляет собой человеческий вирус герпеса-3,также называемый опоясывающим герпесом и вирусом ветряной оспы, который вызывает ветряную оспу и опоясывающий лишай. 22 9. Способ по п.5, при котором вирус представляет собой человеческий вирус герпеса-8,который вызывает саркому Капоши. 10. Способ по п.1, дополнительно включающий антиоксидант в количестве от 0,05 до 5 мас./об.%. 11. Способ по п.10, при котором антиоксидант представляет собой токоферол. 12. Способ по п.1, дополнительно включающий низкомолекулярную органическую кислоту в количестве от 0,05 до 5 мас./об.%. 13. Способ по п.12, при котором низкомолекулярная органическая кислота представляет собой салициловую кислоту. 14. Способ по п.1, при котором смесь мононенасыщенных спиртов содержит как антиоксидант, так и низкомолекулярную органическую кислоту. 15. Способ по п.1, при котором активный агент представляет собой ибупрофен для лечения боли. 16. Способ по п.1, при котором активный агент представляет собой кетопрофен для лечения боли. 17. Способ по п.1, при котором активный агент растворяют в смеси преимущественно мононенасыщенных спиртов вместе с этиловым спиртом или изопропиловым спиртом для получения лосьона, который наносят местно на участки кожи указанного субъекта. 18. Способ по п.1, при котором смесь мононенасыщенных спиртов получают гидрированием смеси длинноцепочечных сложных эфиров, включающих мононенасыщенный спирт и мононенасыщенную карбоновую кислоту, с использованием натрий бис-(2-метоксиэтокси) алюмогидрида, выбранного в качестве восстанавливающего агента гидрида металла.