Терапевтическое средство против сахарного диабета

1 Область техники Настоящее изобретение относится к лекарственному средству, действующему на углеводный обмен и также к пищевому продукту (продукту питания) или напитку для уменьшения симптомов заболеваний, вызванных нарушением углеводного обмена, или для профилактики указанных заболеваний. Предшествующий уровень техники Сахарный диабет представляет сложное заболевание, индуцированное гипергликемией,и его грубо классифицируют на инсулинзависимый сахарный диабет, где требуется введение инсулина из-за его недостатка, и инсулиннезависимый сахарный диабет, где действие инсулина не достигается даже когда продуцируется достаточное количество его, вследствие нарушения рецепторов или носителя, транспортирующего сахар. Цели изобретения Целью настоящего изобретения является разработка соединения, которое нормализует компоненты плазмы и является эффективным для лечения или профилактики заболеваний,включая сахарный диабет, и предложение лекарственного средства, продукта питания и напитка, содержащего указанное соединение в качестве эффективного компонента. Сущность изобретения Для достижения вышеупомянутой цели,настоящими изобретателями было проведено интенсивное исследование и было обнаружено,что 4,5-дигидрокси-2-циклопентен-1-он, который представляет собой соединение, представленное формулой (I) (в дальнейшем, называемое просто циклопентенон), оптически активное вещество или соль его обладают способностью индуцировать дифференциацию предшественника жировых клеток, таких как фибропласт, в жировые клетки и способностью подавлять продуцирование фактора некроза опухоли, и являются полезными для лечения или профилактики сахарного диабета, что и является предметом настоящего изобретения. В общих чертах настоящее изобретение заключается в том, что первый аспект настоящего изобретения относится к терапевтическому или профилактическому средству против сахарного диабета, которое отличается тем, что содержит, по крайней мере, одно соединение,выбранное из группы, состоящей из 4,5 дигидрокси-2-циклопентен-1-она, представленного нижеследующей формулой [I], и оптически активного вещества и соли его в качестве эффективного компонента. Второй аспект настоящего изобретения относится к пищевому продукту или напитку для улучшения состояния или профилактики сахарного диабета, который характеризуется 2 тем, что содержит, по крайней мере, одно соединение, выбранное из группы, состоящей из 4,5-дигидрокси-2-циклопентен-1-она, представленного формулой [I], и производных или соли его в качестве эффективного компонента. Краткое описание чертежей Фиг. 1 представляет взаимосвязь между дозой циклопентенона и уровнем сахара в крови; фиг. 2 представляет взаимосвязь между дозой циклопентенона и уровнем инсулина в сыворотке; фиг. 3 представляет взаимосвязь между дозой циклопентенона и уровнем триглицеридов в сыворотке; фиг. 4 представляет взаимосвязь между дозой циклопентенона и уровнем жирных кислот в сыворотке; фиг. 5 представляет взаимосвязь между количеством циклопентенона и количеством(продуцирования) фактора некроза опухоли; На фиг. 6 представлены КД (CD) пдиметиламинобензоил производного (-)-циклопентенона и структура стереоизомера (-)-циклопентенона. На фиг. 7 представлены КД пдиметиламинобензоил производного (+)-циклопентенона и структура стереоизомера (+)-циклопентенона. Варианты осуществления изобретения Настоящее изобретение конкретно иллюстрируется ниже. Используемый в настоящем изобретении циклопентенон, представленный формулой [I],охватывает оба изомера, где конфигурация гидроксильных групп при 4- и 5-положениях представляет цис и транс (форму). В настоящем изобретении, могут быть использованы любой из цис-циклопентенона, транс-циклопентенона и смесь цис- и транс-циклопентенона. Кроме того,возможно использование оптически активных веществ их. цис-Циклопентенон можно получить химическим синтезом [Helvetica Chimica Acta, volume 55, pages 2838-2844 (1972)]. трансЦиклопентенон можно получить либо с помощью химического синтеза [Carbohydrate Res.,volume 247, pages 217-222 (1993)], либо путем нагревания уроновой кислоты, такой как глюкуроновая кислота, производного уроновой кислоты, такого как глюкуронолактон, или вещества,содержащего те же компоненты (смотриPCT/JP97/03052). В настоящем изобретении,возможно также использование такого подвергнутого нагреванию продукта или частично очищенного продукта или очищенного продукта его. Например,когда используютDглюкуроновую кислоту в качестве уроновой кислоты и ее 1% раствор нагревают при 121 С в течение четырех часов, то в веществе, обработанном нагреванием, получается циклопенте 3 нон. Циклопентенон, образовавшийся в этом обработанном нагреванием веществе, экстрагируют растворителем и экстракт концентрируют. Затем, этот концентрированный экстракт отделяют с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюированную фракцию циклопентенона концентрируют, циклопентенон экстрагируют хлороформом из концентрата и экстракт концентрата подвергают колоночной хроматографии с обычной фазой, в результате чего из обработанного нагреванием вещества выделяют циклопентенон. Физические свойства циклопентенона будут даны ниже. В связи с этим, проводили массспектрометрический анализ циклопентенона,используя масс-спектрометр DX302 (производимый Nippon Denshi). Кроме того, измерение ЯМР, используя тяжелый хлороформ в качестве растворителя, проводили с помощью JNM-A 500(производ. Nippon Denshi). Удельное вращение измеряли с помощью DIP-370 поляриметраH-ЯМР (CDCl3):4,20 (1 Н, д, J=2,4 Гц, 5 Н), 4,83 (1 Н, м, 4-Н), 6,30 (1 Н, дд, J=1,2, 6,1 Гц,2-Н), 7,48 (1H, дд, J=2,1, 6,1 Гц, 3-Н). В этой связи, значение химического сдвига 1H-ЯМР представлены с учетом того, что значение химического сдвига СНСl3 составляет 7,26 ппм. Оптическое вращение: []D20 0 (с 1,3, вода) УФ: макс 215 нм (вода). ИК (КВr метод): поглощения отмечались при 3400, 1715, 1630, 1115, 1060, 1025 см-1. Когда выделенный циклопентенон подвергают оптическому разделению, получают (-)4,5-дигидрокси-2-циклопентен-1-он и (+)-4,5 дигидрокси-2-циклопентен-1-он. Само собой разумеется, что циклопентенон, полученный синтетическим способом, можно также подвергнуть оптическому разделению. Например, циклопентенон растворяют в этаноле. К этому раствору далее добавляют смесь гекса/этанол (94/6), получая раствор циклопентенона. Циклопентенон может быть оптически разделен, если раствор этого образца подвергнуть ВЭЖХ (HPLC), используя, например,Chiral Pack AS (произв. Daicel Chemical Industries), при таком условии, что температура колонки составляет 40 С и подвижной фазой является смесь гексан/этанол (94/6). Оптическое вращение оптически разделенного (-)-транс-4,5-дигидрокси-2-циклопентен-1-она [в дальнейшем называемого (-)циклопентенон] составляет []D20 -105 (с 0,53, 001763 4 этанол), в то время как оптическое вращение[в дальнейшем называемого (+)-циклопентенон] составляет []D20 +104 (с 0,53, этанол). В связи с этим оптическое вращение измеряют с помощью вышеупомянутого поляриметра типа DIP370 (произв. Nippon Bunko). После этого, каждый, как (-)-циклопентенон, так и (+)-циклопентенон, подвергают структурному анализу с помощью методов масс-спектрального анализа и ядерного магнитного резонанса (ЯМР), измерению УФ-спектра поглощения и измерению инфракрасного спектра поглощения с помощью уже упомянутых выше методов. Как результат, оба оптически активных вещества показывают тот же самый результат, что и циклопентенон до оптического разделения. Каждый, как оптически разделенный (-)циклопентенон, так и (+)-циклопентенон, превращают в производное п-диметиламинобензоила, спектр кругового дихроизма (КД, CD) измеряют, используя дисперсиметр кругового дихроизма типа J-720 (произв. Nippon Bunko) и результат соотносят с правилом хиральности дибензоата [J. Am. Chem. Soc., volume 91, pages 3989-3991,(1969)], чтобы определить конфигурацию. КД п-диметиламинобензоил производного(-)-циклопентенона и структура изомера (-)циклопентенона представлены на фиг. 6. На рисунке, ордината соответствует молярному круговому дихроизму, в то время как абсцисса соответствует длине волны (нм). В данном случае, вышеупомянутая структура стереоизомера представлена ниже в виде формулы [II](+)-циклопентенона представлены на фиг.7. На рисунке ордината соответствует молярному круговому дихроизму, в то время как абсцисса соответствует длине волны (нм). В данном случае, вышеупомянутая структура стереоизомера представлена ниже в виде формулы [III] Как показано на фиг. 6, фиг. 7, формула[II] и формула [III], (-)-циклопентенон представляет собой (-)-(4R, 5S)-Транс-4,5-дигидрокси-2-циклопентен-1-он, в то время как (+)циклопентенон представляет (+)-(4S,5R)-транс 4,5-дигидрокси-2-циклопентен-1-он. Вышеупомянутые циклопентеноны или их оптически активное вещество можно получить с помощью любого способа, т.е. они могут быть получены способом, раскрытым в этом описании, или посредством химического синтеза; и 5 транс- и цис-циклопентенон или смесь их и оптически активное вещество их могут быть с успехом использованы в настоящем изобретении. Примерами соли циклопентенона или его оптически активного вещества являются в фармацевтически приемлемые соли и их можно получить с помощью известных способов превращения. Циклопентенон взаимодействует, например, с SH-содержащим соединением (таким как цистеин и глутатион) in vivo с получением метаболического производного, которое используют в качестве лекарственного средства. Поэтому, полагают, что фармацевтическое действие метаболического производного достигается даже, когда применяют циклопентенон. Продукт реакции циклопентенона с SH-содержащим соединением in vivo, как полагают, представляет собой одно из метаболически эффективных веществ. Таким образом, когда иллюстративный пример дается для SH-содержащего соединения(R-SH), циклопентенон взаимодействует с SНсодержащим соединением, давая соединение,представленное, например, нижеследующей формулой [IV] или [V]. Кроме того, соединение,представленное формулой [V], превращается в соединение, представленное формулой [IV]. Как таковой, циклопентенон превращается в каждое из метаболических производных в присутствии SH-содержащего соединения (RSH) и такое метаболическое производное, продуцированное in vivo, обеспечивает эффект как лекарственное средство.(R представляет остаток SH-содержащего соединения после удаления SH-группы).(R представляет остаток SH-содержащего соединения после удаления группы SH). Таким образом использование циклопентенона, его оптически активного вещества или его соли, имеющее целью получение такого продукта реакции in vivo, т.е. метаболического производного, также охватывается настоящим изобретением. В результате проведенных в последние годы исследований патологии сахарного диабета обнаружено, что нормальные жировые клетки играют важную роль в нормальном системном действии инсулина и что для гладкого развития сахаридного обмена необходимы нормальные жировые клетки [Jikken Igaku, volume 14, pages 61-68 (1996)]. Циклопентенон, его оптически активное вещество или соль его, имеет способность индуцировать дифференциацию предшественника жировых клеток, такого как предшественник 6 фибробласта, и индуцирует дифференциацию указанных клеток в жировые клетки. Поэтому,когда применяют циклопентенон, его оптически активное вещество или соль его, нормальные жировые клетки увеличиваются, в соответствии с чем симптом (признак) сахарного диабета, как полагают, снижается. Циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль, имеет гипогликемическую активность, и в настоящее время можно получить терапевтическое или профилактическое средство против сахарного диабета, содержащее, по крайней мере, одно соединение, выбранное из циклопентенона, его оптически активного вещества или его соли в качестве эффективного компонента. Таким образом, когда используют, по крайней мере, одно соединение, выбранное из циклопентенона, его оптически активного вещества или его соли в качестве эффективного компонента, и составляют его в фармацевтический препарат путем комбинирования с известными фармацевтическими носителями, то можно получить терапевтическое или профилактическое средство против сахарного диабета. В общем,циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль, объединяют с фармацевтически приемлемым жидким или твердым носителем и,при необходимости, туда добавляют растворитель, диспергатор, эмульгатор, буфер, стабилизатор, наполнитель, связующее, дезинтегратор,смазку, и т.д., получая указанный фармацевтический препарат, который может быть в твердом виде, таким как таблетки, гранулы, разбавленные порошки, порошки, капсулы, и т.д., или жидким, таким как растворы, суспензии, эмульсии, и т.д. Кроме того, это может быть сухой препарат, который может быть превращен в жидкий путем добавления в него соответствующего носителя перед использованием. Фармацевтический носитель может быть выбран в зависимости от вышеупомянутого способа введения и формы препарата. В случае пероральных препаратов, можно использовать крахмал, лактозу, сахар, маннит, карбоксиметилцеллюлоза, кукурузный крахмал, неорганические соли и т.д. При получении пероральных препаратов, связующие, дезинтеграторы, поверхностно-активные вещества, смазки, промоторы разжижения, вкусовые корригенты, красители, ароматизаторы, и т.д. могут быть дополнительно добавлены туда. С другой стороны, в случае парентеральных препаратов, их можно получить обычными способами, где циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль, который представляет эффективный компонент настоящего изобретения, растворяют или суспендируют в разбавителе, таком как дистиллированная вода для инъекции, физиологический солевой раствор, водный раствор глюкозы, растительное масло для инъекции, кунжутное масло, арахисо 7 вое масло, соевое масло, кукурузное масло,пропилен-гликоль, полиэтиленгликоль, и т.д. с последующим добавлением туда, при необходимости, бактерицидов, стабилизаторов, изотонических средств, анальгетиков, и т.д. Терапевтическое или профилактическое средство для (лечения) сахарного диабета настоящего изобретения применяют, используя подходящий маршрут введения в зависимости от формы препарата. Нет также особого ограничения для способа применения и его можно вводить перорально, наружно или с помощью инъекции. Препараты для инъекции вводят, например, внутривенно, внутримышечно, подкожно, внутрикожно, и т.д., в то время как препараты для наружного применения включают суппозитории, и т.д. Доза как терапевтического средства, так и профилактического средства для сахарного диабета особенно не устанавливается, но может быть соответствующим образом определена в зависимости от лекарственной формы, способа введения, цели использования и возраста, массы тела, состояний, и т.д. пациента. Обычно, однако, количество, по крайней мере, одного соединения, выбранного из циклопентенона, его оптически активного вещества или его соли, содержащегося в препарате для взрослого, составляет 10 пг-200 мг/кг в день. Как нечто само собой разумеющееся, доза может варьироваться в зависимости от различных факторов и, поэтому,доза меньше, чем вышеупомянутая доза, может быть достаточна в некоторых случаях, в то время как, в других случаях, может быть необходима доза больше, чем вышеупомянутая. Средство настоящего изобретения можно применять перорально как оно есть и, кроме того, средство можно принимать ежедневно, добавляя в обычный продукт питания и/или напиток. Кроме того, циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль можно использовать в виде вещества для продукта питания или напитка для улучшения или профилактики сахарного диабета. Когда принимают продукт,содержащий циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль, наступает улучшение у больных сахарным диабетом и количество сахара в моче значительно уменьшается. Кроме того, осложнения, такие как гипогонадизм, значительно ослабляются. Кроме того,гиперлипемия также улучшается. Циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль проявляют активность в улучшении гиперлипемии или активность в понижении суммарного холестерина в сыворотке,активность в понижении триглицеридов в сыворотке и активность в понижении свободных жирных кислот в сыворотке и, когда, по крайней мере, одно соединение, выбранное из циклопентенона, его оптически активного вещества или его соли, имеющее такую активность, используют в качестве эффективного компонента 8 и его составляют в фармацевтический препарат путем комбинирования с известными фармацевтическими носителями, то теперь можно получить средство для лечения или профилактики гиперлипемии. Получение такого препарата можно осуществлять таким же способом как в случае вышеупомянутого терапевтического или профилактического средства против сахарного диабета и такой препарат можно применять таким же способом как в случае указанного терапевтического или профилактического средства против сахарного диабета. Кроме того, циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль можно использовать в качестве вещества для пищевого продукта или напитка для улучшения состояния при гиперлипемии или профилактики гиперлипемии. Когда принимают продукт, содержащий циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль, при гиперлипемии наступает улучшение и уровень липидов в крови значительно снижается. Кроме того, когда циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль,имеющий способность индуцировать дифференциацию предшественника жировых клеток в жировые клетки, используют в качестве эффективного компонента и составляют в фармацевтические препараты, комбинируя с известными фармацевтическими носителями, то в дальнейшем можно получить средство для индуцирования дифференциации предшественника жировых клеток в жировые клетки. Получение указанного средства можно осуществлять таким же образом, как в случае вышеупомянутого терапевтического или профилактического средства против сахарного диабета, и средство можно применять таким же способом, как в случае терапевтического или профилактического средства при сахарном диабете. Кроме того, циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль, проявляют ингибирующую активность в продуцировании фактора некроза опухоли и он является полезным для лечения или профилактики инсулиннезависимого сахарного диабета, вызванного фактором некроза опухоли. [Nature, volume 389,pages 610-614 (1997)]. Лекарственное средство, содержащее, по крайней мере, одно соединение, выбранное из циклопентенона, его оптически активного вещества или его соли, используют в качестве средства для индуцирования дифференциации предшественника жировых клеток в жировые клетки, и в качестве средства для ингибирования продуцирования фактора некроза опухоли. Когда циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль применяют, отмечается улучшение в уровне сахара в крови и нормализация значения инсулина, и лекарственное средство настоящего изобретения может быть использовано в качестве терапевтического или профилактического средства для сахарного диа 9 бета. Кроме того, применение лекарственного средства настоящего изобретения нормализует уровень триглицерида и уровень свободных жирных кислот в плазме, и лекарственное средство настоящего изобретения может быть использовано в качестве лекарственного средства для лечения или профилактики гиперлипемии. Кроме того, средство для индуцирования дифференциации предшественника жировых клеток в жировые клетки, содержащее циклопентенон, его оптически активное вещество или его соль, является индуцирующим дифференциацию средством, используемым в биохимическом исследовании, и т.д. и, когда используют указанное индуцирующее дифференциацию средство, то может быть предложен способ индуцирования дифференциации предшественника жировой клетки в жировую клетку, который используют в биохимическом исследовании, и т.д., и, если использовать указанный способ, то можно скринировать ингибиторы для индукции дифференциации и индуцирующие дифференциацию средства. В настоящем изобретении вещество, выбранное из циклопентенона, его оптически активного вещества или его соли, обработанного нагреванием вещества, содержащего циклопентенон, и частично очищенного циклопентенона из указанного обработанного нагреванием вещества, используют в качестве добавки в пищевой продукт или напиток для улучшения или профилактики сахарного диабета, в пищевой продукт или напиток для улучшения или профилактики гиперлипемии и в пищевой продукт или напиток для индуцирования дифференциации предшественника жировой клетки в жировую клетку. Таким образом, пищевой продукт или напиток, который получают путем разбавления и/или добавления вещества, выбранного из циклопентенон-содержащего обработанного нагреванием продукта, частично очищенного циклопентенона и очищенного циклопентенона из обработанного нагреванием продукта, или циклопентенона, оптически активного вещества его или соли его, охватывается пищевым продуктом или напитком настоящего изобретения. Нет особого ограничения для способа получения пищевого продукта или напитка настоящего изобретения, но можно применять способы варки, переработки и обычно используемые способы получения продукта питания или напитка при условии, что, по крайней мере,одно соединение, выбранное из циклопентенона, оптически активного вещества его или его соли, имеющее улучшающее или профилактическое действие на сахарный диабет, содержится в полученном продукте питания или напитке в качестве эффективного компонента. Нет особого ограничения на форму пищевого продукта или напитка настоящего изобретения, когда речь идет о том, что, по крайней 10 мере, одно соединение, выбранное из циклопентенона, оптически активного вещества его или его соли, имеющее улучшающее или профилактическое действие на сахарный диабет, содержится в нем, добавленное туда и/или разбавленное в нем. Таким образом, форма включает формы, которые можно принимать перорально,такие как таблетки, гранулы, капсулы, гель или золь. Кроме того, не наблюдалось никакой токсичности при использовании соединения в настоящем изобретении, даже когда применяли дозу, которая является эффективной для достижения этих физиологических активностей. В случае перорального применения, например, не наблюдалось смертного случая у крыс при разовом пероральном введении 100 мг/кг любого из циклопентенона, оптически активного вещества его или его соли. Примеры Настоящее изобретение далее иллюстрируется посредством нижеследующих примеров,хотя настоящее изобретение никоим образом не ограничивается этими примерами. В данном случае, %, используемый в примерах, обозначает %, по массе. Сравнительный пример 1.Sigma) (10 г) растворяют в 1 литре воды, нагревают при 121 С в течение четырех часов и концентрируют в вакууме до приблизительно 10 мл. Этот объем смешивают с 40 мл верхнего слоя 3:2:2 смеси бутил ацетата, уксусной кислоты и воды и центрифугируют, и полученную жидкость-супернатант концентрируют в вакууме до приблизительно 10 мл. Вышеупомянутый экстракт наносят на силикагель колонки (BW-300SP; 2 х 28 см; произв.Fuji Silycia) для колоночной хроматографии и отделяют, используя верхний слой 3:2:2 смеси бутил ацетата, уксусной кислоты и воды в качестве элюента при скорости протока около 5 мл/минута под давлением 0,2 кг/см 2, используя компрессор. Фракционирование проводят, получая объем одной фракции 10 мл, и часть каждой фракции анализируют с помощью тонкослойной хроматографии, и тогда циклопентенон высокой чистоты содержится в 61-ой-80-ой фракциях. Эти фракции собирают, концентрируют в вакууме, экстрагируют 40 мл хлороформа и экстракт концентрируют в вакууме, получая 100 мг циклопентенона. Фракцию разделяют с помощью ВЭЖХ с нормальной фазой, используя колонку Palpack тип S (произв. Takara Shuzo) и, когда детектирование проводят при ультрафиолетовом поглощении 215 нм, чистота, как установлено, составляет 98%. Вышеупомянутый циклопентенон (113,9 мг) растворяют в 2,85 мл этанола. К этому этанольному раствору добавляют 3,85 мл смеси гексан/этанол (94/6), получая раствор циклопен 11 тенона (17 мг/мл). Этот раствор фильтруют через фильтр 0,5 мк, чтобы получить раствор образца для ВЭЖХ с оптическим разделением. Этот раствор образца подвергают ВЭЖХ с оптическим разделением, каждую из фракций(-)-циклопентенона в более раннем пике и(+)-циклопентенона в более позднем пике собирают и выпаривают досуха в вакууме, получая 43,2 мг (-)-циклопентенона и 43,0 мг (+)циклопентенона. Условия для ВЭЖХ с оптическим разделением. Колонки: Chiral Pack AS (произв. Daicel) 2,0 см х 25,0 см. Температура колонки: 40 С. Подвижная фаза: гексан/этанол (94/6). Скорость протока: 14,0 мл/мин. Детектирование: УФ 210 нм. Количество загружаемого образца: 150 мкл(2,55 мг). Каждая из полученных (фракций) (-)циклопентенона и (+)-циклопентенона содержит около 1% энантиомера и, поэтому, их еще раз подвергают оптическому разделению в вышеупомянутых условиях. В результате, получают 19,7 мг (-)-циклопентенона, не содержащего энантиомера, из 30,0 мг (-)-циклопентенона более раннего пика, в то время как, из 37,4 мг (+)циклопентенона более позднего пика получают 27,7 мг (+)-циклопентенона, не содержащего энантиомера. В данном случае, времена элюирования при ВЭЖХ с оптическим разделением для (-)-циклопентенона и (+)-циклопентенона составляли 33 мин и 40 мин, соответственно. Пример 1. ЗТЗ-Li клетки (АТСС CL-173), которые представляют собой клетки предшественника фибробласта, полученные из эмбриона мыши,инкубируют в Dulbecco-модифицированнойEagle's среде (DMEM), содержащей 5% фетальной телячьей сыворотки (ФТС, FCS), до тех пор,пока не получится 90% слияния. Тем временем,циклопентенон, полученный по способу, указанному в Сравнительном примере 1, при концентрации 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6, 10-7, 10-8 или 10-9 мкг/мл, или инсулин (доступный отTakara Shuzo) при концентрации 100, 50, 10, 5, 1 или 0,2 мкг/мл добавляют в DMEM, содержащую 5% высокомолекулярной фракции, полученной ультрафильтрацией ФТС, используя ультрафильтр, имеющий молекулярную массу фракционирования 30 000, и затем подвергая обработке протеиназой К, проназой и лейцин амино-пептидазой (в дальнейшем, называемой фермент-обработанная ФТС), и затем инкубацию проводят в течение девяти дней. В связи с этим, спустя три дня и шесть дней во время инкубации, проводят замену на свежую среду, содержащую циклопентенон или инсулин каждой концентрации. Жир, содержащийся в клетках среды, окрашивают Oil Red О (произв. Sigma) и наблюдают под микроскопом. В тех случаях, 001763 12 когда клетки дифференцированы в жировые клетки и жир аккумулирован, отмечается окрашивание в красный цвет. Результат представлен в таблице 1. В таблице 1, "-" означает, что аккумуляция жира не замечена; ' означает, что аккумуляция жира отмечена в меньше, чем 25% клеток; "+" означает, что аккумуляция жира отмечена в от 25% до меньше, чем 50% клеток; означает, что аккумуляция жира отмечена в от 50% до меньше, чем 75% клеток; и означает, что аккумуляция жира отмечена в 75% или больше клеток. Таблица 1 Циклопентенон Степень аккумуляции жира 10-9 0 Инсулин (мкг/мл) Степень аккумуляции жира 100+ 0 Как показано в таблице 1, степень аккумуляции жира составляет , когда добавляют 10-50 мкг/мл инсулина, в то время когда добавляют 10-510-6 мкг/мл циклопентенона, степень аккумуляции жира составляет . Циклопентенон проявляет активность в индуцировании дифференциации в жировые клетки при низких концентрациях.(-)-Циклопентенон и (+)-циклопентенон также демонстрируют такие же результаты. Пример 2.(1) КК-АУ мыши (самец; возраста десяти недель; масса тела около 40 г) , которые представляли мышей, у которых был инсулиннезависимый сахарный диабет природного происхождения, были приобретены в Clea Japan.CE-2 (Clea Japan) дали в виде пищи и, после одного предварительного кормления, мышей возраста 11 недель подвергают испытанию. Мышам (8-9 на группу) принудительно вводятper os 0,1 мг, 1 мг или 10 мг/кг циклопентенона,полученного по способу, упомянутому в сравнительном примере 1, один раз в день до четвертого дня (пять раз в сумме) и, на четвертый день, отбирают кровь из вены глазного дна. Контрольной группе вместо циклопентенона 13 вводят воду и отбирают кровь таким же образом. После отделения плазмы, количество глюкозы в плазме измеряют с помощью реагента для определения глюкозы (GlU Neo Shinotest;Shinotest). Результат представлен в таблице 2. В группе, который вводили циклопентенон, уровень сахара в плазме крови понижался в зависимости от дозы по сравнению с контрольной группой и, в частности, в случае группы, которой вводили 10 мг/кг/день пять раз, уровень сахара в плазме крови понизился по сравнению с уровнем сахара в плазме крови у контрольной группы. В данном случае, не существовало различия в терминах gain привеса или потери массы тела между группой с вводимым циклопентеноном и контрольной группой. Доза циклопентенона Таблица 2 Число мышей Глюкоза в плазме (мг/дл)(2) КК-Аy мыши (самец; возраста четыре недели) были приобретены в Clea Japan и, после выкармливания у заявителей до возраста десяти недель, им вводят перорально циклопентенон,полученный по способу, указанному в сравнительном (ссылочном) примере 1, в течение 14 дней и исследуют его влияние на сахар, инсулин и липид в крови. Дозы циклопентенона составляли 13 мг/кг. Сахар в крови понижался в каждой из групп, которой вводили 13 мг/мл циклопентенона (фиг. 1). Инсулин в сыворотке понижался в каждой из групп, которой вводили 13 мг/кг циклопентенона (фиг. 2). Что касается липида в сыворотке, триглицериды в сыворотке понижались в группе, которая получала 13 мг/кг циклопентенона (фиг. 3), и свободные жирные кислоты в сыворотке понижались в группе, которая получала 13 мг/кг циклопентенона (фиг. 4). Таким образом, фиг. 1 показывает взаимосвязь между дозой циклопентенона и сахаром в крови, где ордината соответствует значению глюкозы в сыворотке (мг/дл), в то время как абсцисса соответствует дозе циклопентенона(мг/кг). На фиг. 2 представлена взаимосвязь между дозой циклопентенона и инсулином в сыворотке, причем ордината соответствует значению инсулина в сыворотке (мкЕ/мл), в то время как абсцисса соответствует дозе циклопентенона (мг/кг). На фиг. 3 представлена взаимосвязь между дозой циклопентенона и значением триглицеридов в сыворотке, причем ордината соответствует значению триглицеридов в сыворотке(мг/дл), в то время как абсцисса соответствует дозе циклопентенона (мг/кг). На фиг. 4 представлена взаимосвязь между дозой циклопентенона и значением свободной жирной кислоты в 14 сыворотке, причем ордината соответствует значению свободной жирной кислоты в сыворотке(мкэкв/литр), в то время как абсцисса соответствует дозе циклопентенона (мг/кг). На рисунках, иозначают, что достоверности вTurkey's многократном сравнительном тесте к группе, которой не вводили циклопентенон,составляли р 0,05 и р 0,01, соответственно. Животных объединяют в две (каждая группа состоит из десяти животных) группы и двум группам вводят физиологический солевой раствор (5 мл/кг) или 13 мг/5 мл/кг циклопентенона. Каждое испытываемое вещество вводят перорально один раз в день в течение 14 дней и,на конечный день приема, животных анестезируют эфиром спустя четыре часа после приема испытываемого вещества, и отбирают кровь из артерии нижнего отдела брюшной полости. Инсулин в сыворотке измеряют с помощью иммуноферментного анализа (коммерчески доступный набор: Glazym Insulin-EIATEST,произв. Wako Pune Chemicals). Сахар, триглицериды и свободные жирные кислоты в сыворотке определяют, используя автоматический анализатор (тип 7070, произв. Hitachi), с помощью гексоназа-G6PDH метода, GPO.DAOS метода и(-)-Циклопентенон и (+)-циклопентенон также демонстрируют такие же результаты. Пример 3.Sigma), полученный из Salmonella abortus equi,растворенный в физиологическом солевом растворе, вводят внутрибрюшинно (0,1 мг/кг) мышам-самкам CDF1 линии 20 недельного возраста, чтобы получить эндотоксин-шоковые модели. Циклопентенон вводят либо внутрибрюшинно, либо перорально при дозе 30 мг/кг за 30 минут до введения ЛПС. С другой стороны,контрольной группе не вводят как таковой(циклопентенон). Спустя 90 мин после введения ЛПС, у мышей отбирают кровь и отделяют сыворотку. Затем измеряют количество фактора некроза опухоли в сыворотке при помощи TNF.ELISA Набора (произв. Genzyme) и измеряют ингибирующее действие на продуцирование фактора некроза опухоли при введении циклопентенона. Результат представлен в таблице 3. Таким образом, по сравнению с контрольной группой,концентрации фактора некроза опухоли в сыворотке были низкими у групп, которым вводили циклопентенон, как у групп с внутрибрюшинным введением, так и у групп с пероральным введением, в результате чего при введении циклопентенона продуцирование фактора некроза опухоли существенно подавляется. Группы Контрольная группа Группа, которой вводили цикклопентенон (внутрибрюшинно) Группа, которой вводили циклопентенон (перорально): имеющие значительное отличие к контролю при р 0,001;: имеющие значительное отличие к контролю при р 0,01.(2) ЛПС инъецируют внутрибрюшинно (10 мкг/мышь) CDF1 мышам-самкам возраста восемь недель и получают эндоксиншоковые модели. Циклопентенон вводят подкожно при дозе 0,03, 0,3, 3 и 30 мг/кг за пятнадцать минут до введения ЛПС (каждая группа состоит из четырех мышей). Через час после введения ЛПС, у мышей отбирают кровь, отделяют сыворотку и измеряют количество фактора- некроза опухоли в сыворотке при помощи коммерчески доступного ELISA набора (произв. Endogen). Результат представлен в таблице 4. Таким образом, Циклопентенон дозазависимым образом подавляет увеличение концентрации факторанекроза опухоли при введении ЛПС. Доза Таблица 4 Фактор некроза опухоли (нг/мл) СреднееСО 3,000,30 0,240,08 1,410,45 2,300,24 2,680,28(3) Парафиновое масло (Cosmo Bio) (2 мл) вводят внутрибрюшинно CDF1 мышам-самкам возраста восемь недель, чтобы индуцировать брюшной макрофаг (Мф). Спустя одну неделю после введения парафинового масла, 4 млRPMI-1640 среды (Gibco) инфузируют внутрибрюшинно, хорошо массируют и выделяют, получая брюшные клетки. Брюшные клетки промывают RPMI-1640 средой дважды и суспендируют в RPMI-1640 среде, содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки (ФТС; High-Clone),доводя концентрацию клеток до 1 х 106 клеток/мл. Раствор клеток (1 мл), полученный как таковой, высевают на 24-луночный планшет и инкубируют в СO2 инкубаторе при 37 С в течение двух часов. Неадгезирующие клетки, содержащиеся в жидкости-супернатанте, после инкубации удаляют и адгезирующие клетки используют как брюшные Мф. В каждую из лунок планшета добавляют 800 мкл RPMI-1640 среды, содержащей 10% ФТС, затем туда добавляют 100 мкл 1, 10, 100 и 1000 мкМ циклопентенона, растворенного в физиологическом солевом растворе (произв. 16 После инкубации, 100 мкл 100 нг/мл липосахарида (произв. Sigma) добавляют и инкубацию проводят в течение 24 ч еще. После окончания инкубации, жидкость супернатанта отделяют и определяют количество TNF-, продуцированного в ней, используя коммерчески доступный ELISA набор (произ. Endogen). Результат представлен на фиг.5. Таким образом, на фиг.5 представлена взаимосвязь между концентрацией циклопентенона и продуцированным количеством фактора некроза опухоли, где ордината указывает на количество фактора некроза опухоли (пг/мл), в то время как абсцисса указывает на концентрацию циклопентенона (мкМ) каждого образца. Циклопентенон в концентрации не меньше, чем 10 мкМ значительно ингибирует продуцирование фактора некроза опухоли из брюшного макрофага мышей, вызванное липополисахаридом. Как показано выше, циклопентенон имеет ингибирующую активность в продуцировании фактора некроза опухоли. (-)-циклопентенон и(+)-циклопентенон также демонстрируют такие же результаты. Пример 4. Если 50 мл (содержащие 2 мг циклопентенона) напитка, полученного в примере 7-(2),давать каждый день в течение трех месяцев пациенту мужского пола (возраст 55 лет), у которого пять лет назад диагностирован инсулиннезависимый сахарный диабет и которого лечили как диабетика посредством приема ежедневно одной таблетки Euglucon (произв. Yamanouchi), но не наблюдали улучшения сахарного диабета (причем сахар в моче натощак составлял , измеренный с помощью тестовой полоски на сахар в моче, произв. Miles-Sankyo), то уровень сахара в моче натощак теперь становится (-), после чего отмечается значительное выздоровление от инсулин-независимого сахарного диабета. Кроме того, вместе с выздоровлением от инсулин-независимого сахарного диабета отмечается также значительное восстановление половой функции. Пример 5. Инъекционные препараты.(1) Циклопентенон добавляют в физиологический солевой раствор (как приведено вJapanese Pharmacopoeia) в концентрации 1%,чтобы получить препарат для инъекции.(2) (-)-Циклопентенон и глицирризиновую кислоту добавляют в физиологический солевой раствор (такой же, как выше) в концентрациях 0,5% и 0,1%, соответственно, чтобы получить препарат для инъекции. Пример 6. Таблетки.(1) Получают таблетку, содержащую 100 мг циклопентенона и соответствующее количество микрокристаллической целлюлозы, и покрывают сахаром, получая препарат в виде таблетки.(+)-циклопентенона, 10 мг дикалий глицирризината и соответствующее количество микрокристаллической целлюлозы, и покрывают сахаром,получая препарат в виде таблетки. Пример 7.(1) Пектин (Pomosin Pectin LM-13CG; произв. Hercules) (5 кг) добавляют к 100 л водопроводной воды и смесь нагревают от температуры жидкости 28 С до 120 С посредством продувки водяного пара через него в течение 35 мин, поддерживают при 120 С в течение пяти часов при перемешивании и охлаждают, получая 135 л охлажденной смеси. К ней добавляют 1,35 кгCelite 545 (произв. Celite) и 1,35 кг Silica 600S (произв. Chuo Silica) в качестве вспомогательного фильтровального вещества и фильтрацию проводят, используя компактный фильтр (6 дюймовая фильтровальная бумага в 16 ярусов;ADVANTEC 327), предварительно покрытый 0,1 кг Celite 545 и 0,1 кг Silica 600-S. Полученный фильтрат подвергают непрерывному быстрому нагреванию (при 98 С в течение 60 с),используя плиту-нагреватель (произв. NichihanSeisakusho) и затем охлаждают, получая обработанный нагреванием раствор пектина, содержащий циклопентенон. Указанный обработанный нагреванием раствор пектина, содержащий циклопентенон,имел рН около 3,5, кислотность 6,2 мл и градус сахара 5,8 Brix%. рН измеряют рН-метром, кислотность выражают в терминах количество(мл) 0,1N NaOH, используемого для нейтрализации до рН 7,0, и градус сахара измеряют с помощью Brix сахариметра.(2) Напиток получают согласно следующему составу. Фруктоза-глюкоза-жидкость сахар 5,00% Сахар 4,00% Кислое средство 1,20% Отдушки 0,30% Циклопентенонсодержащее вещество 0,5% Очищенная вода баланс Итого 100,00% Обработанный нагреванием раствор пектина, содержащий циклопентенон, упомянутый в примере 7-(1), используют в качестве циклопентенонсодержащего вещества и его добавляют в количестве, рассчитанном исходя из твердого вещества. Этот напиток (100 мл) содержит 4 мг циклопентенона. Достоинство изобретения В соответствии с настоящим изобретением, предлагается лекарственное средство,имеющее действие индуцировать дифференциа 18 цию предшественника жировой клетки в жировую клетку и действие подавлять продуцирование фактора некроза опухоли, и имеющее терапевтическое, улучшающее или профилактическое действие на сахарный диабет, в частности инсулиннезависимый сахарный диабет. Кроме того, предлагается также лекарственное средство, которое используют для лечения и профилактики гиперлипемии. Кроме того, в соответствии с настоящим изобретением, теперь возможно, чтобы соответствующее количество циклопентенона или оптически активного вещества его или соли его,имеющего физиологическую активность, содержалось в продукте питания или напитке. Изза действия (способности) этих соединений индуцировать дифференциацию предшественника жировой клетки в жировую клетку и действия(способности) подавлять продуцирование фактора некроза опухоли, продукт питания или напиток настоящего изобретения используют для улучшения или профилактики сахарного диабета, в частности, инсулин-независимого сахарного диабета, и для улучшения или профилактики симптомов гиперлипемии и, кроме того, оно весьма полезно для улучшения и профилактики симптомов осложнений, сопровождающих сахарный диабет, таких как глаукома, снижение половой функции, гиперлипемия, и т.д. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Терапевтическое или профилактическое средство против сахарного диабета, отличающееся тем, что содержит, по крайней мере, одно соединение, выбранное из группы, состоящей из 4,5-дигидрокси-2-циклопентен-1-она, представленного нижеследующей формулой [I] и оптически активного вещества и соли его в качестве эффективного компонента. 2. Пищевой продукт или напиток для улучшения или профилактики сахарного диабета, отличающийся тем, что содержит, по крайней мере, одно соединение, выбранное из группы, состоящей из 4,5-дигидрокси-2-циклопентен-1-она, представленного нижеследующей формулой [I] и оптически активного вещества и соли его.