Энтомопатогенный препарат против личинок комаров на основештамма bacillus thuringiensis var. israelensis h-14 вкпм в-7572

(54) ЭНТОМОПАТОГЕННЫЙ ПРЕПАРАТ ПРОТИВ ЛИЧИНОК КОМАРОВ НА ОСНОВЕ ШТАММА БАКТРИЙ ВАСПЦЛЗ ТНПН 1 Ы 61 М 1 ЧАН. 1 НАЕЬЕЫ 515 Н-14 ВКПМ В - 7572 ФИзобретение относится к области биотехнологии, а именно к производству средств борьбы с кровососущими комарами.ИЗВССТНО, ЧТО КОМЗрЬТ И МОШКИ ЯВЛШОТСЯ переносчиками многих инфекций человека И животных. Особенно тревожное положение возникло с малярией, переносчиком которой является АпорЬе 1 е 5 шасийрегпз.Основным профилактическим мероприятием, предупреждающим массовые заболевания малярией, является борьба с комарами переносчиками. Долгое время успешная борьба С комарами ВСЛЗСЬ РЗЗЛИЧНЬТМИ ХШИИЧССКИМИ средствами. При этом большой вред наносился другим обитателям водоемов, в том числе рь 1 бам.Биопрепараты на основе Вас. шщдпдюцваз уаг. 15 гае 1 еп 515 обладает высокой токсичностью только для комаров и мошек, но совершенно не токсичен против других насекомых, обитающих в водоемах, а также для рыб.Наиболее близким к предлагаемому изобретению являются ларвицидные препараты,полученные на основе бактерий Вас. шпиндел 515 уаг. 15 гае 1 еп 515, описанные в патентах РФ Мг 2064264 и 1121806. Препараты, полученные на их основе, токсичны для комаров родов Аеаез,АпорЬе 1 е 5, С 111 ех. В табл. 1 приведены данные ПО ТОКСИЧНОСТИ ДЗННЬТХ препаратов В ОТНОШСНИИ ЛИЧИНОК НСКОТОРЬТХ ВИДОВ комаров.Недостатком штамма ИГПИ 1501 является то, что для культивирования штамма используется среда, содержащая дорогостоящие и дефиЦИТНЬТС КОМПОНСНТЬТ, ТЗКИС как СОСВЭЯ МУКа, Кукурузный крахмал, зеленая патока и т.д. Кроме того, при выращивании на довольно дорогой и дефрщитной питательной среде штамм ИПМ 1501 проявляет низкую патогенность для личиНОК ВССХ ИССЛСДОВЗННЬТХ ВИДОВ комаров.Штамм ВТЗ 393 также имеет недостаточно высокую биологическую активность.Поиск новых высокоэффективных штаммов является актуальной задачей, поскольку ПОЗВОЛЯСТ не ТОЛЬКО ПОЛУЧИТЬ НОВЬТЙ ЭНТОМОПЗтогенный препарат с новыми свойствами,уменьшить риск фаголизиса в производстве, но И ЗНЗЧИТСЛЬНО СНИЗИТЬ ЗЗТРЗТЬТ на СГО ПрОИЗВОДство.Задачей настоящего изобретения является получение более эффективного ларвицидного препарата.Для решения поставленной задачи предлагается штамм Вас 111115 [Ъшгшфепзйз маг. 15 гае 1 еп 515 Н-14 ВКПМ В - 7572 для приготовле ния энтомопатогенного препарата против кровососущих комаров. Препарат представляет собой стабилизированный спорокристаллический баКтериальнЬ 1 й комплекс.Штамм выделен из природной среды и имеет следующие морфологическую и физиолого-биохимическую характеристики.Клетки палочковидные, прямые с закругЛСННЬПИИ КОНЦЗМИ, РЗСПОЛОЖСННЪТС ОДИНОЧНО,парами или короткими (2-5 кл) цепочками, размером 1,1-1,2 ' 4,0-6,0 мкм, грамположительные,перегрихи. Клетки образуют терминальные спорь 1 овальной формы и параспоральные кристаллы неправильной округлой формы разного разМера с преобладанием крупных включений размером 0,6-0,8 - 1,0-1,2 мкм. Споры и параспоральные включения формируются внутри вегетативных клеток с последующим высвобождением из клеток. Размеры спор 0,8-0,9 1,8-2,0 мкм. Соотношение спор и параспоральных кристаллов примерно 1:1. Степень рассыпания спор в оптимальных условиях роста культуры достигает 99 - 99,5 %. Штамм ВКПМ В - 7572 на Ь агаре образует крупные однородные колонии К- формы, серовато-белого цвета, матовые, плоские, с шероховатой сетчатой поверхностью с прозрачными изрезанными краями, округлой формы, диаметром 20 - 25 мм ( на 7-ые сутки роста при 28 С при свободном росте). При последовательных 3-х кратных пересевах наблюдается слабая диссоциация не более 1 %.Штамм бактерий Вас 111115 [Ъшгшфепзйз ВКПМ В - 7572 при расщеплении глюкозы образует кислоту и не образует газа, гидролизует крахмал и казеин, каталазоотрицательный, восстанавливает ъштраты в нитриты, образуя Щелочь на нитратно-солевом агаре. Штамм ВКПМ В-7572 усваивает маннозу и мальтозу. Слабо усваивает сахарозу и сорбит, не усваивает целлобиозу, арабинозу, лактозу, маннит, дульцит .Штамм ВКПМ В - 7572 проявляет антигенное сродство с сывороткой тгшового штамма Н - 14 .Штамм Вас 111 и Ьпгшфепзйз ВКГПИ В 7572 непатогенен для человека и животных. Созданный на базе штамма препарат обладает токсичностью для личинок комаров Аеаез,АпорЬе 1 е 5 и Си 1 ех. Не токсичен для гусениц пчелиной огневки и непарного шелкопряда, капустной беляшиПример 1. Штамм Вас 111115 [Ъшгшфепзйз ВКПМ В-7572 выращивали на дрояокеполисахаридной среде в колбах на качалке при 29:1 С. Время выращивания 44 ч при 220 об/мин. В качестве посевного материала использовали вегетативную культуру Васшцз шцыпдсфепзйз, выращенную в течение 17 ч на Ь агаре.Продуктивность штамма ВКПМ В - 7572ЬКЫ, в отношении личинок комаров Аеаез аепрй составила 0,000 О 2 - О,000025 мл/л.Пример 2. Штамм Вас 111115 [Ъшгп 131 еп 515 ВКПМ В-7572 выращивали на дроэюкеполисахаридной среде в ферменгере Ферматрон с рабочим объемом 100 л. В качестве посевного материала использовали 17 часовую культуру бактерий, предварительно выращенную в колбах на качалке на дрояокеполисахаридной среде.После ферментации в культуральную Жидкость, представляющую собой спорокристаллический комплекс Вас 111115 11 шг 1 п 31 еп 515 ВКП 1/[ В 7572, добавляют определенную концентрацию консерванта и стабилизатора.ЬКЫ, полученного препарата в отношении личинок комаров АпорЬе 1 е 5 шеззеае составляет О,00006 - 0,00009 мл/л.Пример 3. Штамм бактерий Вас 111115 тиг 1 п 31 еп 515 ВКГП/[ В-7572 выращивали на дрожЖеполисахаридной среде в условиях Белгородского завода лимонной кислоты на ферментере объемом 10 м.Препарат в виде спорокристаллического комплекса получают, как описано в примере 2.1350 препарата в отношении личинок комаров Сп 1 ех составляет 0,00003-0,00 ОО 4 мл/л.Энтомопатогенный препарат против личинок комаров на основе штамма бактерий В.[1111 г 1 п 31 еп 515 уаг. 15 гае 1 еп 515 ВКГПИ В-7572.