Способ производства масла из семян растений

СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА МАСЛА ИЗ СЕМЯН РАСТЕНИЙ Изобретение относится к способу, который включает получение эксплантата из семян Jatrophacurcas; помещение экплантата, выделенного из семян Jatropha curcas, в питательную среду; разрушение межклеточных контактов в ткани эксплантата с получением отдельных клеток; инкубацию размноженных отдельных клеток в питательной среде в течение определенного времени и экстрагирование масла из клеток, полученных путем размножения отдельных клеток,выделенных из эксплантатов, полученных из семян Jatropha curcas. Атехортуа Гарсес Люсия, Корреа Кордоба Сандра Марсела (CO) Нилова М.И. (RU)(71)(73) Заявитель и патентовладелец: УНИВЕРСИДАД ДЕ АНТЬОКИЯ; ЭМПРЕСАС ПАБЛИКАС ДЕ МЕДЕЛЬИН Е.С.П. (CO) Область техники Настоящее изобретение относится к размножению клеток, полученных из семян масличных растений, и получению масел, выделенных из образованных клеток. Уровень техники Было установлено, что семена масличных растений являются источником для производства масел,которые можно использовать, помимо прочего, в качестве биодизельного топлива. Одним из примеров является растение Jatropha curcas, семена которого содержат масло. Указанное масло, помимо применения в медицине, ветеринарии и производстве мыла и т.д., считается пригодным в качестве биодизельного топлива высокого качества. Физико-химические свойства и выход масла, полученного из семян Jatropha curcas, аналогичны свойствам дизельного топлива для двигателей (Murali, etal., US Patent application Publication2008/0194026 A1, параграфы 0008-0010). Таким образом, из уровня техники известны способы микроразмножения с целью получения растений Jatropha curcas из органов, тканей, клеток или протопластов (см. Murali, et al., paragraphs 0014, 0017,and 0024). Созданные растения могут служить источником семян для производства масла (Shuyi Qiu, etal., China (CN) Patent Publication No. 11225416 A, Abstract). К сожалению, возможности получения масла, выделенного из семян Jatropha curcas, в больших количествах для использования в качестве биодизельного топлива ограничены потому, что для получения необходимого урожая растений, произведенных с помощью микроразмножения или традиционного размножения, требуются большие земельные площади. Настоящее изобретение обеспечивает способ производства масла, полученного из Jatropha curcas,согласно которому не требуется выращивать растение. Таким образом, при реализации способа согласно настоящему изобретению не требуется использование земельных участков для получения масла из Jatropha curcas или других масличных растений. Краткое описание изобретения Настоящее изобретение обеспечивает способ производства масла, полученного из размноженных клеток ткани семян Jatropha curcas, при этом способ применим к другим семенам масличных растений. Указанный способ включает получение эксплантата семядолей из семян Jatropha curcas, инокуляцию указанным эксплантатом питательной среды с ферментами, которые разрушают межклеточные контакты таким образом, что в процессе инкубации при перемешивании получают отдельные клетки, которые размножают. Из размноженных клеток, полученных из отдельных клеток, выделенных из ткани семядолей семян Jatropha curcas, экстрагируют масло, которое может быть использовано в качестве биодизельного топлива. В частности, способ согласно настоящему изобретению включает получение эксплантата из семянJatropha curcas; помещение эксплантата, полученного из семян Jatropha curcas в жидкую питательную среду; разрушение межклеточных контактов в ткани эксплантатов, полученных из семян Jatropha curcas в указанной культуре, при этом эксплантаты образуют отдельные клетки; инкубацию в течение определенного времени питательной среды с отдельными клетками, полученными из эксплантатов, выделенных из семян Jatropha curcas, при этом указанные отдельные клетки размножают в течение определенного времени; и экстракцию масла из клеток, полученных путем размножения отдельных клеток, выделенных из эксплантатов, полученных из семян Jatropha curcas. Согласно одному аспекту настоящего изобретения эксплантат получают из семян Jatropha curcas с помощью процедуры, включающей дезинфекцию семян Jatropha curcas с помощью этанола, при этом указанное семя погружается в ванну с этанолом; гидратацию указанных продезинфицированных семянJatropha curcas бумагой, увлажненной стерильной водой, при этом бумага, увлажненная стерильной водой, оборачивается вокруг семян Jatropha curcas; стерилизацию гидратированных семян Jatropha curcas гипохлоритом натрия, при этом указанное гидратированное семя Jatropha curcas погружают в ванну с гипохлоритом натрия; отделение кожицы со стерилизованных семян Jatropha curcas, в результате чего из семян Jatropha curcas извлекают семядоли; и получение эксплантатов из семядолей семян Jatropha curcas. Способ согласно настоящему изобретению можно применять для любого масличного растения. Указанный способ, адаптированный для любого масличного растения, включает: а) получение эксплантата из семян масличного растения; б) помещение эксплантата, полученного из семян, в питательную среду; с) разрушение межклеточных контактов в ткани эксплантатов, полученных из семян в указанной питательной среде, при этом из эксплантатов образуются отдельные клетки; д) инкубацию в течение определенного времени питательной среды с отдельными клетками, образованными из эксплантатов, полученных из семян, при этом указанные отдельные клетки размножают в течение определенного времени; е) экстракцию масла из клеток, полученных путем размножения отдельных клеток, образованных из эксплантатов, полученных из семян. Согласно одному аспекту способа согласно настоящему изобретению предпочтительно питательная среда содержит, по меньшей мере, NH4NO3, Ca(NO3)2, CuSO4, MnSO4, ZnSO4, H3BO3, KH2PO4, Na2MoO4,EDTA, FeSO4, CaCl2, CaCO3, NaC6H7O7 (цитрат натрия), MgSO4, K2SO4, тиамин, глицин, инозит, никоти-1 020172 новую кислоту, пиридоксин, биотин, глютамин, нафталинуксусную кислоту, зеатин и источник углерода. Согласно одному аспекту получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать соль, выбранную из группы, состоящей из Са(NO3)2 и KNO3. Согласно одному аспекту получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать соль, выбранную из группы, состоящей из CaCl2 иKCl. Согласно одному аспекту получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать гормон, выбранный из группы, состоящей из индолилуксусной кислоты (IAA), нафталинуксусной кислоты (NAA) и индолилмасляной кислоты (IBA). Согласно одному аспекту получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать гормон, выбранный из группы, состоящей из кинетина, бензиладенина (BA), гиббереллина (GA) и зеатина. Согласно одному аспекту получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать источник углерода, выбранный из группы, состоящей из сахарозы, фруктозы и глюкозы. Согласно другому аспекту получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению целлюлазу, пектиназу и гемицеллюлазу добавляют в питательную среду, при этом целлюлаза,пектиназа и гемицеллюлаза разрушают межклеточные контакты ткани в эксплантатах, полученных из семян Jatropha curcas в указанной питательной среде. Согласно одному дополнительному аспекту получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению масло экстрагируют из питательной среды с отдельными клетками, которые были получены путем размножения отдельных клеток, выделенных из эксплантатов, полученных из семянJatropha curcas с помощью процедуры, включающей добавление органического растворителя, обработку ультразвуком, центрифугирование, экстрагирование верхней фазы и выпаривание растворителя. Настоящее изобретение также обеспечивает питательную среду, включающую NH4NO3, Ca(NO3)2,CuSO4, MnSO4, ZnSO4, H3BO3, KH2PO4, Na2MoO4, EDTA, FeSO4, CaCl2, CaCO3, NaC6H7O7 (цитрат натрия), MgSO4, K2SO4, тиамин, глицин, инозит, никотиновую кислоту, пиридоксин, биотин, глютамин,нафталинуксусную кислоту, зеатин и источник углерода. Согласно одному аспекту получения питательной среды согласно настоящему изобретению указанная питательная среда содержит целлюлазу, пектиназу и гемицеллюлазу, при этом целлюлаза, пектиназа и гемицеллюлаза разрушают межклеточные контакты в ткани эксплантата, полученного из семян Jatropha curcas в указанной питательной среде. Согласно одному аспекту получения питательной среды согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать соль, выбранную из группы, состоящей из Ca(NO3)2 и KNO3. Согласно одному аспекту получения питательной среды согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать соль, выбранную из группы, состоящей из CaCl2 и KCl. Согласно одному аспекту получения питательной среды согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать гормон, выбранный из группы, состоящей из индолилуксусной кислоты (IAA), нафталинуксусной кислоты (NAA) и индолилмасляной кислоты (IBA). Согласно одному аспекту получения питательной среды согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать гормон, выбранный из группы, состоящей из кинетина,бензиладенина (BA), гиббереллина (GA) и зеатина. Согласно одному аспекту получения питательной среды согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать источник углерода, выбранный из группы, состоящей из сахарозы, фруктозы и глюкозы. Другие цели и преимущества настоящего изобретения станут более очевидными из подробного описания и формулы изобретения. Подробное описание изобретения Способ согласно настоящему изобретению включает получение эксплантата из семян Jatropha curcas; помещение эксплантата, полученного из семян Jatropha curcas в питательную среду; разрушение межклеточных контактов в ткани эксплантатов, полученных из семян Jatropha curcas в указанной питательной среде, при этом из эксплантатов образуются отдельные клетки; инкубацию питательной среды с отдельными клетками, образованными из эксплантатов, полученных из семян Jatropha curcas, при этом указанные отдельные клетки размножают в течение определенного времени; и экстракцию масла из клеток, полученных путем размножения отдельных клеток, образованных из эксплантатов, полученных из семян Jatropha curcas. В предпочтительном варианте способа согласно настоящему изобретению предпочтительная продолжительность инкубации составляет по меньшей мере 3 дня с момента помещения эксплантата в питательную среду. В более предпочтительном варианте продолжительность инкубации составляет по меньшей мере 8 дней с момента помещения эксплантата в питательную среду. В еще более предпочтительном варианте продолжительность инкубации составляет по меньшей мере 14 дней с момента помещения экс-2 020172 плантата в питательную среду. Предпочтительно инкубацию проводят при постоянном перемешивании при комнатной температуре в темноте. Также инкубацию можно проводить при освещении источником света, который испускает волны определенной длины, например инфракрасное излучение, или при источнике света, который испускает волны с длиной, оптимальной для размножения клеток, полученных из семян конкретных масличных растений. Отдельные клетки, образованные из эксплантатов, полученных из семян Jatropha curcas, после разрушения межклеточных контактов после инкубации в питательной среде в течение по меньшей мере 3 дней, могут быть использованы в качестве источника клеток для пересева (повторной инокуляции) на свежую питательную среду, неоднократно повторяя процесс повторной инокуляции свежей питательной среды и, следовательно, продлевая процесс размножения указанных отдельных клеток. Предпочтительное количество отдельных клеток, которое пересевают на свежую питательную среду, составляет от 1 до 2105 клеток/мл, и указанную свежую питательную среду после повторной инокуляции инкубируют в течение определенного времени, пока клетки не перейдут в стационарную фазу роста. В одном аспекте способа согласно настоящему изобретению эксплантат получают из семян Jatrophacurcas с помощью процедуры, которая включает дезинфекцию семян Jatropha curcas этанолом, при этом указанное семя помещается в ванну с этанолом; гидратацию указанных продезинфицированных семянJatropha curcas бумагой, увлажненной стерильной водой, при этом бумагу, увлажненную стерильной водой, оборачивают вокруг семян Jatropha curcas; стерилизацию гидратированных семян Jatropha curcas гипохлоритом натрия, при этом указанное гидратированное семя Jatropha curcas погружают в ванну с гипохлоритом натрия; отделение кожицы со стерилизованного семени Jatropha curcas, в результате чего извлекают семядоли семян Jatropha curcas; и получение эксплантатов из семядолей семян Jatropha curcas. В целях применения настоящего изобретения термин "эксплантат" обозначает часть семядолей семян Jatropha curcas. В предпочтительном варианте эксплантат, получаемый из семядолей семян Jatrophacurcas, состоит из поперечно нарезанных частей семядолей в форме пластины толщиной от 1 до 2 мм. Эксплантаты также могут быть другими образцами частей семядолей различной формы, полученных из семян Jatropha curcas или семян других масличных растений. В предпочтительном варианте настоящего изобретения количество эксплантата составляет от 1 до 7 г/100 мл питательной среды. Способ согласно настоящему изобретению можно применять для любого масличного растения. Указанный способ, адаптированный для любого масличного растения, включает: а) получение эксплантата из семян масличного растения; б) помещение эксплантата, полученного из семян, в питательную среду; в) разрушение межклеточных контактов в ткани эксплантатов, полученных из семян в указанной питательной среде, при котором из эксплантатов образуются отдельные клетки; г) инкубацию в течение определенного времени питательной среды с отдельными клетками, образованными из эксплантатов, полученных из семян, при которой указанные отдельные клетки размножают в течение определенного времени; и д) экстракцию масла из клеток, полученных путем размножения отдельных клеток, образованных из эксплантатов, полученных из семян. Термин "масличные растения" относится к любым растительным формам, из семян или плодов которых можно выделить масло, в одних случаях, пригодное для употребления в пищу, в других случаях,для промышленного использования, а также для лекарственных целей. К масличным растениям относятся:Glycine max (соя),Elaeis guineensis (Африканская пальма),Elaeis oleifera (Ноли или американская масличная пальма),Arachis hypogaea (арахис),Helianthus annuus (подсолнечник),Zea mays (кукруза),Linum usitatissimum (семена льна),Brassica napus (кольза, рапс, канола или полевая капуста),Olea europaea L. (олива),Ricinus communis (касторовое масло),Sesamum indicum (кунжут),Simmondsia chinensis (жожоба),Vernicia fordii (тунг),Prunus dulcis (миндаль),Carthamus tinctorius (сафлор или alazor),Gossypium hirsutum (хлопок),Moringa oleifera (кассия пучковатая),Triticum aestivum (пшеница),и все классы растений, семена которых содержат масло. В одном аспекте способа согласно настоящему изобретению предпочтительно питательная среда содержит, по меньшей мере, NH4NO3, Ca(NO3)2, CuSO4, MnSO4, ZnSO4, H3BO3, KH2PO4, Na2MoO4, EDTA,FeSO4, CaCl2, CaCO3, NaC6H7O7 (цитрат натрия), MgSO4, K2SO4, тиамин, глицин, инозит, никотиновую кислоту, пиридоксин, биотин, глютамин, нафталинуксусную кислоту, зеатин и источник углерода. В одном аспекте получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать соль, выбранную из группы, состоящей из Ca(NO3)2 и KNO3. В одном аспекте получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать соль, выбранную из группы, состоящей из CaCl2 и KCl. В одном аспекте получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать гормон, выбранный из группы, состоящей из индолилукусуной кислоты (IAA), нафталинуксусной кислоты (NAA) и индолилмасляной кислоты (IBA). В одном аспекте получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать гормон, выбранный из группы, состоящей из кинетина, бензиладенина (BA), Гиббереллина (GA) и зеатина. В одном аспекте получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать источник углерода, выбранный из группы, состоящей из сахарозы, фруктозы и глюкозы. В одном аспекте получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению в питательную среду добавляют целлюлазу, пектиназу и гемицеллюлазу, при этом целлюлаза, пектиназа и гемицеллюлаза разрушают межклеточные контакты в ткани эксплантатов, полученных из семян Jatrophacurcas в указанной питательной среде. Межклеточные контакты в ткани эксплантатов, полученных из семян Jatropha curcas, можно разрушить с помощью других ферментативных или неферментативных процедур. В предпочтительном варианте концентрации компонентов питательной среды согласно настоящему изобретению находятся в следующих диапазонах: В предпочтительном варианте способа согласно настоящему изобретению ЭДТА находится в форме двунатриевой соли. Мононатриевая форма ЭДТА также может быть использована в способе согласно настоящему изобретению. В предпочтительном варианте способа согласно настоящему изобретению инозит представляет собой миоинозит. В предпочтительном варианте способа согласно настоящему изобретению рН питательной среды доводят до 4,8-6,5. В дополнительном аспекте способа согласно настоящему изобретению масло экстрагируют из питательной среды с отдельными клетками, полученными путем размножения отдельных клеток, полученных от эксплантата, выделенного из семян Jatropha curcas с помощью процедуры, которая включает добавление органического растворителя; обработку ультразвуком; центрифугирование; выделение верхней фазы и выпаривание растворителя. В случае Jatropha curcas или любого другого масличного растения экстракцию масла из клеток, полученных путем размножения отдельных клеток, образованных из эксплантата, полученного из семядолей семян, осуществляют, когда биомасса клеток достигает в стационарной фазы роста в питательной среде. В питательную среду с клетками, полученными путем размножения, добавляют органический растворитель. Предпочтительным органическим растворителем является гексан, хотя можно использовать другие растворителя, например изопропанол или этанол и т.п. Стенки отдельных клеток разрушаются в процессе обработки смеси растворителя, питательной среды и отдельных клеток ультразвуком, высвобождая масло из клеток. Смесь растворителя и питательной среды, которая содержит разрушенные клетки и выделившееся масло, центрифугируют, при этом указанная смесь разделяется на две фазы - верхнюю и нижнюю. Верхняя фаза содержит растворитель и выделившееся масло, а нижняя фаза содержит указанные остатки клеток и питательную среду. Верхнюю фазу с растворителем и маслом разделяют и затем растворитель в указанной фазе выпаривают путем роторного испарения и нагревания, что приводит к очистке масла. Настоящее изобретению также обеспечивает питательную среду, которая содержит NH4NO3,Ca(NO3)2, CuSO4, MnSO4, ZnSO4, H3BO3, KH2PO4, Na2MoO4, EDTA, FeSO4, CaCl2, CaCO3, NaC6H7O7 (цитрат натрия), MgSO4, K2SO4, тиамин, глицин, инозит, никотиновую кислоту, пиридоксин, биотин, глютамин, нафталинуксусную кислоту, зеатин и источник углерода. В одном аспекте получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда содержит целлюлазу, пектиназу и гемицеллюлазу, при этом целлюлаза, пектиназа и гемицеллюлаза разрушают межклеточные контакты в ткани эксплантатов, полученных из семянJatropha curcas в указанной питательной среде. В одном аспекте получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать соль, выбранную из группы, состоящей из Ca(NO3)2 и KNO3. В одном аспекте получения питательной среды по способу согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать соль, выбранную из группы, состоящей из CaCl2 и KCl. В одном аспекте получения питательной среды согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать гормон, выбранный из группы, состоящей из индолилуксусной кислоты(IAA), нафталинуксусной кислоты (NAA) и индолилмасляной кислоты (IBA). В одном аспекте получения питательной среды согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать гормон, выбранный из группы, состоящей из кинетина, бензиладенина(BA), гиббереллина (GA) и зеатина. В другом аспекте получения питательной среды согласно настоящему изобретению указанная питательная среда может содержать источник углерода, выбранный из группы, состоящей из сахарозы, фруктозы и глюкозы. В предпочтительном варианте концентрации компонентов питательной среды согласно настоящему изобретению находятся в следующих диапазонах: В предпочтительном варианте питательной среды согласно настоящему изобретению ЭДТА находится в форме двунатриевой соли. Мононатриевая форма ЭДТА также может быть использована в способе согласно настоящему изобретению. В предпочтительном варианте питательной среды согласно настоящему изобретению инозит представляет собой миоинозитол. В предпочтительном варианте питательной среды согласно настоящему изобретению рН питательной среды доводят до 4,8-6,5. Несмотря на то что в описании представлены предпочтительные варианты реализации настоящего изобретения, дополнительные изменения могут быть внесены в форму и последовательность частей, не отклоняясь от идей и основных принципов, включенных в формулу. Примеры Зрелые семена Jatropha curcas, предварительно очищенные и вымытые водой с мылом, дезинфицированы в ванночках с этанолом; затем указанные семена гидратировали, оборачивая вокруг них увлажненную стерильной водой бумагу; впоследствии семена стерилизовали в ванночках с 3% гипохлоритом натрия; затем скальпелем удаляли кожицу с семян; из полученных семядолей семян Jatropha curcas нарезали эксплантаты или поперечные пластинчатые срезы толщиной от 1 до 2 мм. От 1 до 3 г эксплантатов семядолей семян Jatropha curcas помещали в 100 мл питательной среды следующего состава при следующих концентрациях компонентов: рН питательной среды доводили до 5,8 с помощью 0,1 н. растворов HCl и/или NaOH. Указанную питательную среду инкубировали при постоянном перемешивании при комнатной температуре в темноте в течение 15 дней до тех пор, пока не было отмечено, что ткань эксплантата превратилась в отдельно размноженные клетки плотностью приблизительно 2105 отдельных клеток/мл. Клетки отделяли от питательной среды и пересаживали в 100 мл свежей питательной среды аналогичного состава и концентраций, продолжив культивирование при постоянном перемешивании, в темноте в течение еще приблизительно 10 дней, пока размножающиеся клетки не достигли стационарной фазы роста (приблизительно 2106 отдельных клеток/мл). В 100 мл питательной среды с отдельными клетками плотностью приблизительно 2106 отдельных клеток/мл добавили 100 мл гексана. Полученную смесь обрабатывали ультразвуком в течение 90 мин. Затем смесь центрифугировали при 2500 об/мин в течение 30 мин. После центрифугирования получили верхнюю и нижнюю фазы. Отделили верхнюю фазу и перенесли ее в приемник для роторного испарения при 70C и при 180 об/мин и затем поместили в печь на 1 ч при 75 С. Полученное в результате масло весило 1,978 г (итоговый выход 19,78 г/л). Масло было проанализировано, а полученные результаты представлены в следующей таблице. Предполагаемый жирнокислотный состав пробы масла Состав масла, выделенного из отдельных клеток, полученных из семядолей семян Jatropha curcas по способу согласно настоящему изобретению, аналогичен данным, представленным в литературе, как показано в следующей выдержке из табл. 3 из Akintayo, E.T., Bioresource technology, 92 (2004), 307-310. Таблица 3 (см. Akintayo, p. 309) Жирнокислотный состав (%) масел семян PKBS (Parkia biglobbossa) и JTC (Jatropha curcas) Величины представляют собой среднеестандартное отклонение параллельных определений. Состав масла, полученного из Jatropha curcas по способу согласно настоящему изобретению, сравним с составом масла, полученного из Jatropha curcas, описанным в литературе. Таким образом, масло,выделенное из Jatropha curcas, полученное по способу согласно настоящему изобретению, обладает необходимыми характеристиками биодизельного топлива высокого качества, как описано в литературе в отношении масла, получаемого из Jatropha curcas. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ производства масла из семян, включающий: а) получение эксплантата из семян; б) помещение эксплантата, полученного из семян, в питательную среду; в) добавление в питательную среду ферментов, которые обеспечивают разрушение межклеточных контактов в ткани эксплантатов, полученных из семян, с образованием из эксплантатов отдельных клеток; г) осуществление размножения отдельных клеток, полученных на стадии в), посредством их инкубации в питательной среде в течение по меньшей мере 3 дней; д) экстрагирование масла из клеток, полученных путем размножения на стадии г). 2. Способ производства масла из семян Jatropha curcas, включающий: а) получение эксплантата из семян Jatropha curcas; б) помещение эксплантата, полученного из семян Jatropha curcas, в питательную среду; в) добавление в питательную среду ферментов, которые обеспечивают разрушение межклеточных контактов в ткани эксплантатов, с образованием из эксплантатов отдельных клеток; г) осуществление размножения отдельных клеток, полученных на стадии в), посредством их инкубации в питательной среде в течение по меньшей мере 3 дней; д) экстрагирование масла из клеток, полученных путем размножения на стадии г). 3. Способ по п.1 или 2, согласно которому время инкубации составляет по меньшей мере 8 дней с момента, когда эксплантат помещают в питательную среду. 4. Способ по п.1 или 2, согласно которому время инкубации составляет по меньшей мере 14 дней с момента, когда эксплантат помещают в питательную среду. 5. Способ по пп.1-3 или 4, согласно которому отдельные клетки, образованные из эксплантатов, после осуществления стадии г) дополнительно помещают в свежую питательную среду и культивируют в течение еще приблизительно 10 дней с момента помещения указанных клеток в свежую питательную среду. 6. Способ по п.1 или 2, согласно которому указанный эксплантат получают из семян с помощью процедуры, включающей: а) дезинфекцию семян с помощью этанола, при этом указанные семена погружают в ванну с этанолом; б) гидратацию указанных продезинфицированных семян с помощью увлажненной стерильной водой бумаги, при этом увлаженную стерильной водой бумагу оборачивают вокруг семян; в) стерилизацию гидратированных семян с помощью гипохлорита натрия, при этом указанные гидратированные семена опускают в ванну с гипохлоритом натрия; г) удаление кожицы со стерилизованных семян, в результате чего из семян извлекают семядоли; д) получение эксплантатов из семядолей семян. 7. Способ по любому из пп.1-6, согласно которому питательная среда содержит, по меньшей мере,NH4NO3, Ca(NO3)2 или KNO3, CuSO4, MnSO4, ZnSO4, H3BO3, KH2PO4, Na2MoO4, EDTA, FeSO4, CaCl2 илиKCl, CaCO3, NaC6H7O7 (цитрат натрия), MgSO4, K2SO4, тиамин, глицин, инозит, никотиновую кислоту,пиридоксин, биотин, глютамин, нафталинуксусную кислоту, зеатин и источник углерода. 8. Способ по любому из пп.1-7, согласно которому ферменты, добавляемые в питательную среду,представляют собой целлюлазу, пектиназу и гемицеллюлазу. 9. Способ по любому из пп.7, 8, согласно которому питательная среда дополнительно содержит гормон, выбранный из группы, состоящей из нафталинуксусной кислоты (NAA), индолилуксусной кислоты (IAA) и индолилмасляной кислоты (IBA). 10. Способ по любому из пп.7-9, согласно которому питательная среда дополнительно содержит гормон, выбранный из группы, состоящей из кинетина, бензиладенина (BA) и гиббереллина (GA). 11. Способ по любому из пп.7-10, согласно которому питательная среда содержит источник углерода, выбранный из группы, состоящей из сахарозы, фруктозы и глюкозы. 12. Способ по п.1 или 2, согласно которому масло экстрагируют из клеток посредством процедуры,которая включает: а) добавление органического растворителя; б) обработку ультразвуком; в) центрифугирование; г) отделение верхней фазы и д) выпаривание растворителя.