Применение иммуномодулирующей композиции на основе липидов

1 Область и предпосылки изобретения Данное изобретение относится к композиции и способу активации иммунной системы. Композиция согласно изобретению особенно применима для активации иммунной системы в стрессовых ситуациях, когда ее активность снижается. Конкретным примером снижения активности иммунной системы, вызванной стрессом, является прекращение курения. Существует множество клинических состояний, когда активность иммунной системы снижается, делая таким образом человека более уязвимым для условно-патогенных инфекций. Также известно, что стресс, возникающий в результате травм, реабилитации, пристрастия к наркотикам, алкоголю или курению, может привести к снижению активности иммунной системы за несколько минут. Например, были отмечены тяжелые инфекции, возникшие в результате сильных травм. Целью данного изобретения является разработка композиции для усиления активности иммунной системы, особенно необходимой у людей, подвергнутых стрессу. Краткое описание изобретения В соответствии с данным изобретением,было неожиданно обнаружено, что натуральный липидный препарат, обогащенный фосфатидной кислотой (РА), способен активировать иммунную систему. Эта активность липидного препарата, обогащенного фосфатидной кислотой, которая, как обнаружилось, связана со снижением активности иммунной системы, исследовалась на людях, проходивших лечение по случаю прекращения курения. В данном описании используются некоторые термины; в контексте настоящего изобретения эти термины имеют следующие значения:"Липидный препарат, обогащенный фосфатидной кислотой (РА-E-LP)" - липидный препарат, включающий, по меньшей мере, 10% мас./мас.) фосфатидной кислоты, предпочтительно около 20-75% фосфатидной кислоты, от общего содержания липидов в композиции.(Обозначение концентрации в %, используемое в данном описании, означает количество весовых единиц ингредиента на 100 весовых единиц всей композиции (маc. /маc"Натуральный липидный препарат, обогащенный фосфатидной кислотой" - это указанный препарат, полученный из натурального липидного препарата, например фосфолипидный препарат, полученный из растений, животных тканей или любых их сочетаний. Такой натуральный фосфолипидный препарат может быть обычно получен из соевых бобов, яичного желтка или животных сывороток. Натуральный липидный препарат, обогащенный фосфатидной кислотой, получают из натурального фосфолипидного препарата, обычно ферментативным путем. В натуральном липидном препарате,обогащенном фосфатидной кислотой, остаток 2 липидов, в основном, состоит из фосфолипидов,хотя и другие липофильные вещества в небольших количествах, например 0,1-10%, такие как холестерин, жирные кислоты и т.д., также могут быть включены в препарат."Люди, находящиеся в состоянии стресса" это люди, находящиеся в ситуации или состоянии, таком как тревога, физические травмы,прекращение применения наркотиков, алкоголя,курения и т.д., вызывающем стресс. Данное изобретение направлено на применение фармацевтической композиции для активации иммунной системы, которая содержит липидный препарат, полученный из натурального источника и обогащенный таким образом,чтобы включать в себя, по меньшей мере, около 10% фосфатидной кислоты, предпочтительно,по меньшей мере, около 20% фосфатидной кислоты и наиболее желательно свыше 50% фосфатидной кислоты. Обычно концентрация фосфатидной кислоты не превышает 75% общего содержания липидного ингредиента. Применяемая согласно изобретению композиция особенно актуальна для активации иммунной системы в стрессовых ситуациях, вызывающих снижение иммунной активности. Примерами таких стрессовых ситуаций являются различные травмы, прекращение применения наркотиков, алкоголя, курения и т.д. Применение данного изобретения предусматривает способ активации иммунной системы у человека, нуждающегося в этом, включающий в себя введение такому человеку эффективного количества липидного препарата,обогащенного фосфатидной кислотой, особенно натурального PA-E-LP. Далее данное изобретение предусматривает применение указанного липидного препарата,обогащенного фосфатидной кислотой, особенно натурального PA-E-LP, для получения фармацевтической композиции для активации иммунной системы. Термин "эффективное количество" означает количество ингредиента, достаточное для получения желаемого терапевтического эффекта. Например, введение эффективного количества фармацевтической композиции человеку согласно изобретению приводит к увеличению уровня активации иммунной системы. Уровень активации можно, например, определить, измерив уровень гамма-интерферона (-IFN) в плазме крови, который может, таким образом, служить мерой определения эффективного количества. Термин "активация иммунной системы" или подобный термин означает увеличение активности иммунных клеток, противостоящих патогенам или патологическим процессам, увеличение, таким образом, уровня секреции или продуцирования различных цитокинов, усиливающих активность иммунных клеток, и т.д. Фармацевтическая композиция согласно изобретению обычно может быть введена перо 3 рально, хотя она также может быть приготовлена для местного или парентерального введения. При пероральном введении композиция может включать в себя различные корригенты, пищевые красители и т.д. Более того, композиция для перорального введения может также быть инкапсулирована, например, в энтеросолюбильную желатиновую капсулу. Композиция может включать в себя различные фармацевтически приемлемые носители, разбавители или наполнители, которые могут быть выбраны, исходя из предполагаемого способа введения композиции. При парентеральном введении композицию обычно вводят внутривенно при помощи инъекций. Такая парентеральная композиция может, например, включать в себя соевые мультитриглицериды, яичные фосфолипиды, фосфатидную кислоту, полученную согласно изобретению, глицерин и дистиллированную воду. Композиция для местного применения может быть в виде геля или мази и может, таким образом, включать различные добавки, известные сами по себе, для обеспечения такой физической формы композиций (например, желатинизирующий агент). Натуральный липидный препарат, обогащенный фосфатидной кислотой, предпочтительно получают из натурального фосфолипидного препарата путем ферментативной обработки, используя синтетический или натуральный источник, включающий в себя ферментную фосфолипазу-D. Натуральный фосфолипидный препарат может иметь растительное или животное происхождение либо их сочетание. Типичными примерами натуральных фосфолипидных препаратов, применяемых для получения натуральных липидных препаратов, обогащенных фосфатидной кислотой согласно изобретению,являются соевый лецитин, яичный желток и фосфолипиды из животной сыворотки. Примерами источников фосфолипазы-D являются земляные орехи (арахис), обычно измельченные земляные орехи или фракция фосфолипазы-D,полученная из них. Фосфолипазу-D или ее источник добавляют в количестве и в течение периода времени, достаточных для гидролизации,по меньшей мере, около 10%, предпочтительно около 25% и наиболее предпочтительно около 50% фосфолипидов, для получения липидного препарата, обогащенного фосфатидной кислотой. Далее данное изобретение иллюстрируется нижеследующими не ограничивающими примерами со ссылкой на прилагаемые чертежи. Краткое описание чертежей Фиг. 1 - схематическое изображение, показывающее получение смеси, обогащенной фосфатидной кислотой, согласно изобретению. Как указано на фиг. 1, соотношение исходных материалов (арахис, соевый лецитин и вода) составляет 1:1:7,5, соответственно. 4 Фиг. 2 - схематическое изображение, показывающее отделение липидной фазы смеси, содержащей фосфатидную кислоту, полученную при помощи реакции, изображенной на фиг. 1. Фиг. 3 - схематическое изображение, показывающее получение смеси, содержащей фосфатидную кислоту, согласно изобретению, полученной, как показано на фиг. 1 и 2, в соответствующей форме для наполнения упаковок. Фиг. 4 - схематическое изображение, показывающее получение таблеток из смеси, содержащей фосфатидную кислоту, полученной, как показано на фиг. 1 и 2. На фиг. 5 - показано получение профиля фосфатидной кислоты во время ферментативного гидролиза соевых фосфолипидов. (Результаты представлены в процентах от всей композиции.) Пример 1. Получение смеси, содержащей фосфатидную кислоту.(a) Получение реакционного продукта. На фиг. 1 схематически изображен способ получения смеси, содержащей фосфатидную кислоту, согласно изобретению. Как следует из фиг. 1, необходимы следующие исходные материалы: 1) 150 г измельченных свежих земляных орехов как источник фосфолипазы-D; 2) 150 г гранулированного соевого лецитина как источник соевых фосфолипидов; 3) 1000 мл, добавляемых к Н 2 О. Вышеуказанные исходные материалы смешивают в смесителе для мяса, доводят до гомогенизации, а затем рН смеси доводят до 5,3-5,4 путем добавления лактата, сорбата бензоата кальция, аскорбиновой, лимонной кислоты и антиоксиданта (каждый в количестве, указанном на этой фигуре). Затем смесь подвергают реакции при постоянном перемешивании в течение 4 ч при 36-38 С, после чего рН еще раз доводят до 3,9 путем добавления лимонной кислоты и сахара в количествах, указанных на этой фигуре. Затем смесь выдерживают при 4 С в течение ночи.(b) Отделение липидной фракции. Реакционную смесь, полученную в результате вышеописанной процедуры, затем подвергают дальнейшему отделению, применяя процедуру, схематически изображенную на фиг. 2. Как показано на этой фигуре, реакционный продукт подвергают трем основным разделениям(обозначенным на этой фигуре как разделения I,II и III), при каждом из которых водную фазу смеси удаляют из нижней части до тех пор, пока, наконец, отделенная липидная фаза не будет собрана в морозильной камере (-18 С).(c) Получение липидной композиции для наполнения упаковок. Липидную смесь, полученную в результате вышеописанного отделения, подвергают некоторым дополнительным процедурам, подготавливая ее для заполнения контейнеров. Как пока 5 зано на фиг. 3, липидную смесь, полученную в результате вышеописанного процесса отделения, сначала размораживают, а затем подвергают нагреванию, охлаждению, гомогенизации и смешиванию, как описано на фиг. 3, для получения композиции, подходящей для заполнения контейнеров. Обычно размер контейнеров составляет поллитра; затем контейнеры хранят при 4 С.(d) Получение таблеток, содержащих фосфатидную кислоту. Смесь, содержащая фосфатидную кислоту,полученную способом, описанным выше в примерах 2(а)-2(с) и показанным на фиг. 1-3, может быть также спрессована в таблетки. Способ получения таблеток, включающих в себя смесь,содержащую фосфатидную кислоту, показан на фиг. 4. Как следует из этой фигуры, обычно фосфолипидную пасту, полученную в результате вышеописанного процесса, вначале размораживают, а затем нагревают и доводят рН смеси до высокого значения, составляющего около 9. После добавления к смеси ацетата цинка появляется обширный осадок, который после промывания и сушки прессуют в таблетки.(е) Профиль образования фосфатидной кислоты. Профиль образования фосфатидной кислоты изображен на фиг. 5. Как следует из этой фигуры, приблизительно через 24 ч более 80% 6 соевых фосфолипидов гидролизуется, образуя препарат, обогащенный фосфатидной кислотой. Пример 2. Действие липидного препарата,обогащенного фосфатидной кислотой, на повышение уровня гамма-интерферона у людей,проходящих лечение по поводу прекращения курения.(а) Схема исследования. 35 Курильщиков, курящих 20 и 40 сигарет в день, изъявивших желание участвовать в исследовании, делят произвольно на 2 группы: одна группа, включающая в себя 16 человек,получает дневную дозу, составляющую 12 г(вводимую перорально), композиции липидного препарата, обогащенного фосфатидной кислотой, полученной в соответствии с примером 1,содержащей 50% фосфатидной кислоты; вторая группа, используемая в качестве контроля, получает плацебо. Участники обеих групп прекращают курение во время исследования. Концентрацию гамма-интерферона в плазме измеряют у участников обеих групп до и после прекращения курения. Уровень гаммаинтерферона измеряют, используя набор(b) Результаты. Концентрация гамма-интерферона в обеих группах до и после лечения показана в нижеследующей таблице. Из вышеприведенных результатов следует,что концентрация гамма-интерферона в плазме крови поднимается в группе, получавшей липидный препарат, обогащенный фосфатидной кислотой, в то время как концентрация гаммаинтерферона в плазме в группе, получавшей плацебо, оказалась ниже, чем его концентрация до лечения. Следует отметить, что уровень гаммаинтерферона в плазме крови является показателем активности иммунной системы. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение липидного препарата, полученного из натурального источника, обога 7 щенного, по меньшей мере, примерно на 10% фосфатидной кислотой, для получения фармацевтической композиции для активации иммунной системы у людей со стрессом. 2. Применение по п.1, при котором указанный стресс является результатом лечения индивидуума по поводу прекращения курения. 3. Применение по п.1, при котором указанный липидный препарат содержит, по меньшей мере, примерно 20% фосфатидной кислоты. 4. Применение по п.2, при котором указанный липидный препарат содержит, по меньшей мере, примерно 50% фосфатидной кислоты. 5. Применение по любому из пп.1-4, при котором указанный липидный препарат получен из натурального источника липидов. 6. Применение по любому из пп.1-4, при котором указанный фармацевтический препарат приготовлен для перорального введения.