Способ профилактики туберкулеза молодняка крупного рогатого скота

1 Изобретение относится к ветеринарной медицине и может быть использовано для профилактики туберкулеза - заразной болезни, общей для человека и животных. Известен способ профилактики туберкулеза молодняка крупного рогатого скота с использованием живой вакцины, изготовленной из микобактерий туберкулеза штамма БЦЖ (Наставление по применению вакцины БЦЖ при туберкулезе крупного рогатого скота, утвержденное Главным управлением ветеринарии 26 февраля 1990 г.). Способ включает внутрикожное введение 0,3 мл вакцины, содержащей 1 мг живых микобактерий БЦЖ, телятам 10-20-дневного возраста в область шеи на расстоянии 8-10 см от переднего края лопатки. Через 14-16 месяцев после иммунизации животных исследуют внутрикожным введением туберкулина; реагирующих сдают на убой, остальных, в дальнейшем,исследуют в порядке, предусмотренном санитарными (СП 3.1.093-96) и ветеринарным (ВП 13.3.1325) правилами (см. книгу Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных. Сборник санитарных и ветеринарных правил. Госкомсанэпид-надзор и Минсельхоз России. Москва. 1996). Однако эффективность профилактики с использованием указанного способа невысока,поскольку вакцина БЦЖ не обеспечивает достаточную защиту животных от заражения туберкулезом. Кроме того, сроки формирования противотуберкулезного иммунитета за счет использования вакцины БЦЖ достаточно длительны. При этом, телята, сенсибилизированные живыми микобактериями БЦЖ, особенно восприимчивы к заражению и для их эффективной защиты от туберкулеза в период формирования иммунитета необходима полная изоляция, что в условиях неблагополучных хозяйств, практически, нереально. Известны также способы профилактики туберкулеза с использованием вакцины БЦЖ в сочетании с иммуностимуляторами с целью повышения уровня иммунитета. Так, известен способ профилактики туберкулеза (Спиридонов Г.Н. Влияние отдельных иммуномодуляторов на показатели противотуберкулезного иммунитета. Автореферат канд. дисс., 1988), заключающийся в том, что животному вводят внутрикожно вакцину БЦЖ и одновременно 5%-ный стерильный раствор нуклеината натрия в дозе 5 мг/кг живой массы по схеме: первые две инъекции с интервалом 24 ч,через 3-е суток еще две инъекции с интервалом 24 ч. Кроме нуклеината натрия способ предусматривает возможность использования левомизола в виде 3%-ного стерильного раствора по той же схеме. Недостатком данного способа является,также как и предыдущего аналога, невысокая 2 эффективность профилактических мероприятий,обусловленная незначительным увеличением устойчивости животных к заражению. Кроме этого, способ трудоемок, поскольку предусматривает многократное введение иммуномодулятора (до 4-х раз). Наиболее близким к заявленному является способ профилактики туберкулеза животных(см. патент СССР 1790414 по кл. А 61 К 39/04,опубликован. 23.01.93 г.), заключающийся во внутрикожном введении вакцины БЦЖ с иммуномодулятором, в качестве которого используют высокомолекулярную РНК из дрожжей(ВПР). Введение РНК осуществляют вначале одновременно с вакциной в количестве 0,5-50 мг/кг, а затем через 13-15 дней в том же количестве. Эффективность указанного способа для профилактики туберкулеза у молодняка крупного рогатого скота также невысока, так как применение иммуномодулятора усиливает сенсибилизирующие свойства вакцины БЦЖ и риск возможного заражения в период формирования иммунитета (2-3 месяца) еще более усиливается. Кроме того, сенсибилизация к туберкулину у отдельных животных сохраняется неопределенно долго, что приводит к их преждевременной выбраковке. В основу изобретения положена задача обеспечения эффективной профилактики туберкулеза крупного рогатого скота в значительно короткие сроки при создании высокого уровня напряженности иммунитета. Поставленная задача решается путем внутримышечных инъекций профилактического препарата и иммуномодулятора, в качестве профилактического препарата используют туберкулин (туберкулопротеин), а в качестве иммуномодулятора - препарат, содержащий- 0,9-0,95; дистиллированную воду - остальное,при этом вначале вводят туберкулин однократно молодняку молозивного возраста в дозе 3-4 мл на голову, а через 30-40 мин - иммуномодулятор в дозе 4-6 мл на голову. В результате использования в качестве профилактического средства - туберкулина, а в качестве иммуномодулятора - препарата на основе формальдегида удается осуществить эффективную профилактику туберкулеза в значительно короткие сроки. Традиционные методы профилактики основаны на использовании вакцины БЦЖ (живых клеток микобактерий туберкулеза). При вакцинации или инфицировании живыми вакцинами микобактерии размножаются, выделяя продукты жизнедеятельности, на которые восприимчивые животные отвечают выработкой защитных средств. Однако для выработки достаточного количества антигена нужно определенное время, как правило - 2-3 месяца. В этот период жи 3 вотное находится в стадии повышенной чувствительности (сенсибилизации) и особенно уязвимо для повторного заражения. Введение в организм готового антигена (туберкулина, являющегося по своей природе экзотоксином) в достаточном количестве способствует непосредственному защитному действию организма: выработке противотуберкулезных антител. Известно, что парентеральное введение туберкулина способствует специфической десенсибилизации с одновременной стимуляцией синтеза противотуберкулезных антител (Кноринг В.Е., Павлова М.В., Иванова Л.А. Влияние туберкулинотерапии на иммунологические показатели у подростков, больных туберкулезом легких. Проблемы туберкулеза.-1991.- 12.С.31-34). Под влиянием туберкулина прослеживается отчетливая тенденция коррегирующего действия на факторы клеточного иммунитета,при этом возрастает уровень Ig G, Ig M и падаетIg А. Защитные реакции, возникающие в организме в различных сочетаниях как при туберкулезном процессе, вакцинации БЦЖ, так и при введени микобактериальных антигенов или туберкулинов, развиваются по одному типу неспецифических иммуноморфологических изменений в тканях, имеющих четкую связь с антигенным стимулом. Таким образом, парентерально введенный туберкулин вызывает иммунную перестройку аналогично вакцине БЦЖ, но в более короткие сроки и без сенсибилизации организма. Применение в качестве профилактического средства растворимого антигена создает предпосылки и для одновременного прямого воздействия на иммуноген иммунокорректирующих веществ. С другой стороны, известен препарат, содержащий (мас.%): формальдегид - 0,07-0,24; хлорид натрия - 0,9-0,95; дистиллированную воду - остальное (патент РФ 2077882 по кл. А 61 К 31/115, опуб. 27.04.97 г.), который используется в качестве модулятора естественной резистентности, обеспечивающий саморегуляцию всех систем макроорганизма. Нами установлено, что введение животным туберкулина совместно с иммуномодулятором на основе формальдегида сопровождается образованием антител, выявляемых реакцией преципитации. На наш взгляд, ответная реакция организма в сравнительно короткие сроки наступает в связи с тем, что туберкулин адсорбируется на клетках крови, фиксируется введенным препаратом на основе формальдегида, в результате чего каждая клетка несет на себе специфический антигенный раздражитель. Таким образом, вводя теленку молозивного периода внутримышечно необходимую дозу туберкулина, а затем для фиксации препарат на основе формальдегида, мы создаем условия для образования в организме на клеточном уровне идеальной вакцины, а образующиеся при этом антитела надежно защищают теленка от возбу 002195 4 дителя туберкулеза в первые, наиболее опасные для заражения месяцы жизни, обеспечивая затем защиту и в более старшем возрасте. Способ профилактики туберкулеза осуществляется следующим образом. Телятам молозивного возраста (от 1 до 10 дней) вводят внутримышечно в область крупа по 3-4 мл туберкулина (туберкулопротеина) для млекопитающих в концентрации, применяемой для аллергической диагностики туберкулеза. Через 30-40 мин телятам вводят внутримышечно также в область крупа по 4-5 мл препарата,содержащего формальдегид, хлорид натрия и дистиллированную воду. Оба препарата вводят животным однократно. Доза введения туберкулина подобрана экспериментально. Установлено, что введение туберкулина в дозе менее 3 мл не приводит к решению поставленной задачи, а именно - созданию достаточно напряженного иммунитета. Введение туберкулина более 4 мл нецелесообразно с экономической точки зрения. Доза введения иммуномодулятора 4-6 мл также подобрана экспериментально. Интервал в 30-40 мин между инъекциями соответствует периоду наибольшего притока крови к месту инъекции, обусловленного первой фазой реакции организма на туберкулин. Иммунизация телят молозивного возраста(1-10 дней) обусловлена не только целью ускорения иммунного ответа, но и усиления его за счет колостральных антител. Рабочий раствор туберкулина (туберкулопротеина) представляет собой прозрачную бесцветную жидкость со слабым запахом фенола. Иммуномодулятор представляет собой бесцветную прозрачную жидкость со слабым запахом формалина. Все последующие мероприятия по профилактике и ликвидации туберкулеза проводят в соответствии с Ветеринарными правилами ВП 13.3.1325-96, утвержденными Департаментом ветеринарии РФ 18.06.96 г. Эффективность способа оценивают по результатам аллергических исследований, предусмотренных вышеуказанными ветеринарными правилами. Защищенные от заражения возбудителем туберкулеза животные либо не дают положительных аллергических реакций на туберкулин даже при их содержании в длительно неблагополучных по туберкулезу хозяйствах, либо их количество незначительно в острых очагах инфекции. Эффективность способа профилактики туберкулеза подтверждена в хозяйствах с острым течением туберкулеза, в хозяйствах, длительно неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота и в условно благополучном по туберкулезу хозяйстве. Так, в хозяйстве с острым течением туберкулеза создали две группы животных из нарождающегося молодняка. Первая группа (опытная) 5 состояла из 250 голов (бычков и телочек), набранных по мере растела коров. Телятам после выпойки молозива в первые 5 дней жизни однократно вводили внутримышечно 4 мл туберкулопротеина (ППД), изготовленного Курской биофабрикой. Разведение сухого туберкулина проводили в соответствии с методикой его применения. Через 30-40 мин телятам вводили иммуномодулятор, содержащий (мас.%): формальдегид - 0,07, хлорид натрия - 0,9, дистиллированную воду - остальное. Препарат готовили непосредственно перед употреблением согласно ТУ 93336-231-00494-189-97, вводили в дозе 4 мл на голову. Всех привитых животных метили, и они содержались в соответствии с технологией,принятой в хозяйстве. Вторая группа новорожденных телят в количестве 110 голов была сформирована в эти же сроки и служила контролем. Телятам этой группы не вводили ни туберкулин, ни иммуномодулятор. Все телята находились в одинаковых условиях выращивания и подвергались плановым аллергическим исследованиям в соответствии с мероприятиями по профилактике и борьбе с туберкулезом крупного рогатого скота. За время опыта ( срок наблюдения - 3 года) среди поголовья крупного рогатого скота дважды были выявлены животные с клиникой туберкулеза, а после убоя на вскрытии обнаруживалась генерализованная форма заболевания, что говорит о постоянном присутствии в хозяйстве источника возбудителя заболевания. Через 2 года из вакцинированных указанным способом телят за 8 исследований выделено 16 телят (6%) с положительными реакциями на туберкулин. Телята (реагирующие) были убиты, обследованы паталогоанатомически, а материал от них подвергался лабораторным методам исследования. Ни в одном случае туберкулез не был подтвержден. Среди контрольных телят за 8 аллергических исследований выявлено 77 голов, реагирующих на туберкулин (70%), у 23 из них туберкулез подтвержден на вскрытии, у остальных туберкулез подтвержден биопробой. Таким образом, в хозяйстве с острым течением туберкулеза осуществление способа профилактики позволило создать устойчивость к туберкулезу у молодняка крупного рогатого скота с эффективностью 94%. Применение предлагаемого способа профилактики в длительно неблагополучных по туберкулезу хозяйствах позволило сформировать у животных достаточно напряженный иммунитет. Так в хозяйстве с поголовьем 1300 коров с января 1997 года в течение 6 месяцев все новорожденные телята (300 голов бычков и телочек) после выпойки молозива в первые 10 дней были привиты туберкулином в дозе 3 мл на голову и иммуномодулятором в дозе 5 мл каждому через 30-40 мин после введения тубер 002195 6 кулина. Препараты вводили однократно внутримышечно в область крупа. Все дальнейшие мероприятия проводились по инструкции, по плану хозяйства. В результате, через 1,5 года в хозяйстве из привитых животных сформировали гурт телок в количестве 180 голов для дальнейшего их изолированного выращивания взамен неблагополучного поголовья коров, так как ни в одном случае при аллергическом исследовании привитого поголовья положительно реагирующих на туберкулин не обнаружено. Кроме того, при убое части вакцинированных бычков на мясо признаков туберкулеза также не зафиксировано. В то же время среди невакцинированных животных постоянно выделяли положительно реагирующих на туберкулин, а у части из них туберкулез подтверждали и на вскрытии. В условно благополучном по туберкулезу хозяйстве с поголовьем 980 коров, где систематически выделяли реагирующих на туберкулин животных, но не удавалось подтвердить туберкулез на вскрытии, также применили предлагаемый способ профилактики. Было привито 234 теленка в первую неделю жизни. Туберкулин вводили по 3 мл внутримышечно в область крупа, через 30-40 мин иммуномодулятор по 4 мл также внутримышечно. Все дальнейшие мероприятия осуществляли в соответствии с инструкциями. Наблюдение за поголовьем велось 3 года,ни в одном случае у вакцинированных телят положительных реакций на туберкулин не обнаружено, в то время как среди остального поголовья при каждом аллергическом исследовании выделяли по 5-15 голов положительно реагирующих, хотя туберкулез на вскрытии так и не был установлен. Полученные результаты указывают, что применение способа не осложняет последующую диагностику туберкулеза ложноположительными реакциями на туберкулин и создает достаточно прочный иммунитет. Приведенные данные позволяют утверждать, что предлагаемый способ профилактики туберкулеза молодняка крупного рогатого скота позволяет создать у телят высокую устойчивость к возбудителю туберкулеза в хозяйствах и стационарно неблагополучных, и в острых очагах заболевания. Осуществление способа позволяет в условиях неблагополучия создавать гурты здоровых телок из животных своего хозяйства для замены неблагополучного поголовья. Кроме этого, использование способа снимает проблему дальнейшей диагностики заболевания у привитых животных. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ профилактики туберкулеза молодняка крупного рогатого скота путем введения профилактического препарата и иммуномодуля 7 тора, отличающийся тем, что в качестве профилактического препарата и используют туберкулин, а в качестве иммуномодулятора - препарат,содержащий, мас.%: формальдегид - 0,07-0,1,хлорид натрия - 0,9-0,95, дистиллированную воду - остальное, при этом вначале вводят ту 8 беркулин однократно молодняку молозивного возраста в дозе 3-4 мл на голову, а через 30-40 мин осуществляют введение иммуномодулятора в дозе 4-6 мл на голову, причем введение туберкулина и иммуномодулятора осуществляют внутримышечно.