Вакцина для лечения воспаления и доброкачественной гиперплазии предстательной железы на основе бактерий lactobacilli и способ лечения указанных заболеваний

1 Область изобретения Настоящее изобретение относится к вакцине, содержащей штаммы Lactobacillus, используемой при лечении воспаления предстательной железы и доброкачественной гиперплазии предстательной железы (I и II стадии). Предшествующий уровень техники О патогенности некоторых штаммов Lactobacillus сообщалось в 1938 году [F.Marshall:B.F.Hammond: Toxicity of Lactobacillus casei,J.Dent.Res., 44:783-787 (1965); M.E.Sharpe,L.R.Hill and S.P.Lapage: Pathogenic lactobacilli,J.Med., Microbiol., 6, 281-286 (1973)]. В 1952 году G. Wied сообщил [Zbl.Bact.,160:413 (1952)], что некоторые штаммы Lactobacillus оказывают повреждающее действие на слизистую оболочку. Rosan и Hammond [1965,там же] сообщили, что в случае штаммов Lactobacillus, чрезвычайно патогенных в отношении мышей, подкожная инокуляция бактерий как в живом, так и в термически инактивированном состоянии вызывает некроз на спине кроликов.K.jhelyi установил, что некроз может быть вызван также штаммами Lactobacillus,культивированными из влагалища. Основываясь на его наблюдениях можно утверждать, что организм бактерии содержит токсин, который ответственен за повреждение эпителия [jhelyi K.et al.: Role of Lactobacillus in urogenital inflammations and their treatment with vaccination, Symposium cum participatione internationalis de Biocenosi Vaginae, Smolenie, 1983]. Некоторые штаммы, инъецируемые интрадермально в спину кроликов, вызывают некроз меньших или больших участков, тогда как другие вызывают некроз только в более высокой концентрации или не вызывают некроз вообще.K.jhelyi обнаружил, что кроликов можно иммунизировать путем вакцинации против некротического эффекта. Он вакцинировал кроликов внутримышечно вакциной, полученной из определенных штаммов Lactobacillus. Спустя 6 недель он подкожно вводил суспензию клеток,приготовленную из штаммов, которые, как было показано ранее, были некротическими, и обнаружил, что некроз не вызывается или вызывается в меньшей степени, чем в случае не вакцинированных кроликов. Кроме того, K. jhelyi установил, чтоTrichomonas vaginalis способствует повышению рН влагалища, потребляя молочную кислоту,продуцируемую штаммами Lactobacillus во влагалище, и тем самым стимулирует сверхпролиферацию штаммов Lactobacillus, в результате чего продуцируемый токсин присутствует в более высокой концентрации, при который он вы 005198 2 зывает некроз клеток, повреждая слизистую оболочку. Кроме того, известно, что штаммы Lactobacillus за счет своей рецептор-ингибирующей и антибиотической активности, а также рНмодифицирующего эффекта являются антагонистами гноеродных микроорганизмов [Reddy etLactic acid bacteria in the gut in normal and disorded states, Dig.Dis., 10:227-238(1992)]. Недавно было показано, что штаммы Lactobacillus могут связываться непосредственно с Т-лимфоцитами, поскольку как Т-хелперные,так и Т-киллерные клетки имеют специфические рецепторы к штаммам Lactobacillus. Кроме того, штаммы Lactobacillus стимулируют продуцирование гамма-интерферона лимфоцитов и цитотоксическую активность природных клеток-киллеров [De Simone С. et al.: Enhancementdiet supplemented with yoghurt, J.Immunopharmacol., 1:87-95 (1987)]. Было показано также,что штаммы Lactobacillus неспецифично увеличивают продукцию IgM и IgG [Blocksma et al.:viable and killed bacteria, Clin.Exp.Immunol.,37:367-373]. Кроме того, в экспериментальных условиях штаммы Lactobacillus оказывают противоопухолевое и макрофаг-активирующее действие [Kato I. et al.: Antitumor activity of Lactobacillus casei in mice, Gann, 72:517-523 (1983); OdaH.Rttgers установил, что иммуностимуляция штаммами Lactobacillus вызывает значительное длительное повышение уровня секреторного иммуноглобулина во влагалище [Bacterial vaginitis: Protection against infection and secretoryjhelyi et al. [1983, там же] использовал штаммы Lactobacillus для неспецифичной иммуностимуляции парентерально и заметил, что использованные штаммы Lactobacillus в отличие от другой неспецифичной иммуностимуляции(например БЦЖ, эндотоксинами и др.) оказывают защитный эффект против некоторых бактериальных токсинов. Это особенно применимо к токсическим штаммам Lactobacillus. В испытаниях, проведенных с вакцинамиjhelyi, было показано, что иммуностимуляция штаммами Lactobacillus в отличие от других терапевтических лечений восстанавливает биологический баланс влагалища, нормализует рН,снижает число патогенных бактерий и способствует размножению Dderlein-флоры (смешанной популяции штаммов Lactobacillus, которую возможно культивировать из влагалища). В на 3 стоящее время признано, что, с одной стороны,воспалительные заболевания влагалища, вызванные бактериальными и Trichomonas инфекциями, этим путем можно лечить более успешно, чем при помощи другой терапии, и что, с другой стороны, такие воспалительные состояния являются самой главной причиной преждевременных родов. Следовательно, частота преждевременных родов также может быть снижена при помощи такой терапии [см., например, в Genitalinfektion der Frau (SolcoTrichovac/Gynatren), Geburtsch. u. Frauenheilk, 44:311Sharon et al., New England Journal, December 28,1995]. Более 50% мужчин в возрасте от 50 лет и старше страдают гиперплазией предстательной железы и/или воспалением предстательной железы. Несмотря на многочисленные виды известных и применяемых терапий, эти пациенты нуждаются в медицинском лечении, которое часто является безуспешным. Принимая во внимание известный и общепризнанный патогенез,нельзя было предположить, что такие заболевания можно успешно лечить вакцинами, содержащими штаммы Lactobacillus. Однако авторы настоящего изобретения обнаружили, что условия в предстательной железе благоприятны для количественного роста штаммов Lactobacillus, и что патогенные молочнокислые бактерии часто можно культивировать из пациентов, страдающих хроническим воспалением предстательной железы и/или гиперплазией предстательной железы. На этой основе была проведена работа по терапевтическому использованию вакцин, содержащих штаммы Lactobacillus для лечения таких пациентов. Описание изобретения Изобретение относится к вакцинам для лечения воспаления предстательной железы и доброкачественной гиперплазии предстательной железы (I и II стадии), содержащим штаммыLactobacillus в инактивированной форме, и носители и/или эксципиенты, обычно используемые в вакцинных препаратах. В другом аспекте изобретение относится к применению штаммов Lactobacillus для производства вакцин, способных лечить воспаление 4 предстательной железы и доброкачественную гиперплазию предстательной железы (I и II стадии). В еще одном аспекте изобретение относится к применению штаммов Lactobacillus для лечения пациентов, страдающих воспалением предстательной железы и доброкачественной гиперплазией предстательной железы (I и II стадии). Кроме того, изобретение относится к способу лечения пациентов, страдающих воспалением предстательной железы и доброкачественной гиперплазией предстательной железы (I и II стадии), при котором пациенту, нуждающемуся в подобном лечении, внутримышечно вводят эффективную дозу суспензии штаммов Lactobacillus. В предпочтительном воплощении способа по изобретению суспензия штаммов Lactobacillus содержит смешанную популяцию указанных штаммов Lactobacillus в инактивированной форме. Молочнокислые бактерии, используемые в вакцине по изобретению, являются штаммамиLactobacillus, используемыми в вышеуказанных вакцинах Gynevac(R), Gyantren(R) и SolcoTrichovac(R), которые предварительно культивировали из женщин, страдающих гинекологическими воспалениями бактериального происхождения. Отдельные культивированные штаммы можно использовать сами по себе или в форме смеси штаммов. Вакцину по изобретению можно получить способом, обычно используемым для приготовления вакцин. Культивированные штаммы преимущественно хранят в лиофилизированной форме, а затем перед применением их размножают культивированием на среде Man-RogosaSharpe при 45 С. Состав указанной среды и способ приготовления изложены ниже. К 2300 мл стерильной воды последовательно добавляют перечисленные ниже компоненты после растворения компонента, добавленного ранее:K2 НРO4 6 г Цитрат аммония 6 г Ацетат натрия 15 г Глюкоза 30 г Лактоза 30 г Мальтоза 9 г Дрожжевой экстракт (Reanal) 15 г Твин 80 3 мл Солевой раствор (состав см. ниже) 15 мл Полученный раствор доводят до 3000 мл путем добавления стерильной воды, фильтруют на фильтре G4, разливают в бутылки меньшего объема и стерилизуют при 121 С. Состав вышеуказанного солевого раствора следующий: 28,75 г MgSO47H2O, 6 гMnSO42H2O и 1,7 г FeSO47H2O, растворенных в 250 мл стерильной воды. После культивирования клетки собирают центрифугированием, остаток после центрифугирования суспендируют в физиологическом растворе и обрабатывают формальдегидом. Инактивированные клетки собирают и ресуспендируют в физиологическом растворе. Степень разведения регулируют, исходя из содержания белка в суспензии. Содержание белка в вакцине (суспензии) по изобретению составляет по меньшей мере 0,08 мг/мл и может доходить до 1 мг/мл или более, предпочтительно от примерно 0,08 до примерно 0,32 мг/мл, более предпочтительно примерно 0,16 мг/мл. Применяемая доза вакцины по изобретению и частота введения зависят от состояния и тяжести симптомов пациента, которого лечат. Точную дозу и частоту введения должен определять лечащий врач. Согласно нашему опыту предпочтительно во время курса лечения вводить вакцину внутримышечно в объеме 1 мл один раз в неделю, всего 5 раз. Следующий пример приведен в целях иллюстрации изобретения, и он не ограничивает заявленный объем изобретения. Пример Исследования проводили с использованием вакцины по изобретению путем введения ее пациентам с диагнозом - воспаление предстательной железы и/или гиперплазия предстательной железы (I и II стадии). Пациентам вводили внутримышечно 1 мл вакцины, содержащей штаммы Lactobacillus по изобретению,один раз в неделю в течение 5 недель без какого-либо другого терапевтического лечения. Результаты контрольного обследования, проведенного после этого курса лечения, приведены в следующих ниже таблицах. Число пациентов, подвергнутых лечению: 127 Диагноз: гиперплазия предстательной железы I и II стадии Как можно видеть из вышеуказанных таблиц, значительное число пациентов было вылечено или их состояние существенно улучшилось. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Вакцина для лечения воспаления предстательной железы и доброкачественной гиперплазии предстательной железы (I и II стадии),содержащая штаммы Lactobacillus, входящие в состав вакцин Gynevac, Gynatren и SolcoTrichovac, в инактивированной форме, и носители и/или эксципиенты, обычно используемые в вакцинных препаратах. 2. Применение штаммов Lactobacillus, входящих в состав вакцин Gynevac, Gynatren иSolcoTrichovac, в инактивированной форме для производства вакцин, способных лечить воспаление предстательной железы и доброкачественную гиперплазию предстательной железы (I и II стадии). 3. Применение по п.2 для производства вакцин, способных лечить воспаление предстательной железы. 4. Применение по п.3 для производства вакцин, способных лечить доброкачественную гиперплазию предстательной железы (I и II стадии). 5. Применение штаммов Lactobacillus, входящих в состав вакцин Gynevac, Gynatren иSolcoTrichovac, в инактивированной форме для лечения пациентов, страдающих воспалением предстательной железы и доброкачественной гиперплазией предстательной железы (I и II стадии). 6. Способ лечения пациентов, страдающих воспалением предстательной железы и доброкачественной гиперплазией предстательной железы (I и II стадии), при котором пациенту, нуждающемуся в таком лечении, внутримышечно вводят эффективную дозу суспензии штаммов