Антитела и способы их получения

В описании представлены различные способы усовершенствованного получения организмов,продуцирующих антитело, тканей, продуцирующих антитело, клеток, продуцирующих антитело,и антител. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представлены способы быстрого получения продуцирующих антитело организмов, тканей, клеток и антител, полученных от людей, организмов, растений или клеток, генетически измененных для сверхэкспрессии некоторых белков. 021131 Традиционные подходы к продуцированию антигенспецифических моноклональных антител ограничены. В основном получено только небольшое представительство очень разнообразной антигенспецифической В-клеточной популяции. В некоторых случаях антигенспецифические В-клетки не могут пролиферировать из-за аутотолерантности. В других случаях антигенспецифические В-клетки не могут пролиферировать после слияния клеток со сливающимися клетками миеломы. Сущность изобретения В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представлены способы генерирования, выращивания, получения и(или) продуцирования (для простоты слово "продуцирование" в соответствии с использованием в настоящем описании в одинаковой степени относится к "генерированию","выращиванию" и "получению") требуемого антитела. Кроме того, приведено описание систем, используемых при получении требуемого антитела. Также описаны антитела и составы, включающие такие антитела. В настоящем документе представлены различные способы продуцирования (а) клеток, продуцирующих антитела, и (b) антител, которые решают многие из проблем, связанных с обычным получением антител. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представлены способы продуцирования (а) клеток, продуцирующих антитела, и (b) антител, полученных из клеток (например, клеток млекопитающего), которые являются клетками, сверхэкспрессирующими MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представлен способ (а) получения вырабатывающих антитело клеток и (b) антител, полученных из клеток, где MYC сверхэкспрессирован. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1, Mxi-1,MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с shRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представлен способ получения антитела из иммунодефицитного организма (например, млекопитающего), в котором иммунная система организма реконструируется множеством кроветворных стволовых клеток, которые включают экзогенный MYC ген (то есть, нуклеиновокислотная последовательность MYC (например, трансгенная последовательность), которая кодирует Мус пептид; то есть, трансгенной MYC). Кроме того, приведено описание способа получения человеческого или гуманизированного антитела путем введения (или "доставки") человеческого гена, который кодирует человеческое антитело, в клетку (например, клетку млекопитающего), содержащую трансгенную MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представлена выделенная В-клетка для продуцирования человеческого или гуманизированного антитела, в котором В-клетка сверхэкспрессирует MYC ген. Кроме того, в настоящей публикации представлено изолированное антитело, полученное любым из предлагаемых в ней способов. Кроме того,представлена клетка, которая сконструирована для продуцирования антитела, полученного в соответствии со способами, предложенными в настоящем описании. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представлены способы продуцирования антител (например, моноклональных антител) без необходимости слияния клеток. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенные способы обеспечивают продуцирование моноклонального антитела без необходимости слияния продуцирующих антитело В-клеток со сливающейся клеткой-партнером, таким образом, сокращается время, необходимое для продуцирования антитела. В некоторых представленных в данной публикации примерах осуществления настоящего изобретения представлено продуцирование антител, специфических к антигенам, которые обычно подвергаются иммунологическим ограничениям (например, аутотолерантности). Например, в некоторых примерах осуществления настоящего изобретения используются способы продуцирования моноклональных антител (то есть, mAB) к собственным антигенам. В настоящем документе представлен способ продуцирования антитела, специфического к антигену,включающий контактирование клетки, содержащей трансгенный MYC, с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) экспрессирует CD79 на его клеточной поверхности. В некоторых примерах осуществления настоящего-1 021131 изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) - это клетка млекопитающего. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) - это Вклетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения трансгенный MYC ген включает индуцибельный промотор или В-клетка-селективный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания (то есть, ORF) гена. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клетка-селективный промотор является Е промотором. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцибельный промотор включает один или несколько TRE. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) присутствует в организме (например, млекопитающем). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения контактирование клетки (например, клетки млекопитающего) с отобранным антигеном включает введение (то есть, инокуляцию или интродуцирование) отобранного антигена в организм (например,млекопитающее). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения геном организма (например, млекопитающее), кроме того, включает нуклеиновокислотную последовательность, кодирующую активатор обратной транскрипции тетрациклина (то есть, rtTA), активатор транскрипции тетрациклина (то есть, tTA) или и тот и другой. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность, кодирующая rtTA, включает В-клетка-селективный промотор,функционально связанный с открытой рамкой считывания последовательности. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность, кодирующая rtTA,включает MMTV промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания последовательности. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность, кодирующая tTA, включает В-клетка-селективный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания последовательности. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кодирование последовательности нуклеиновой кислоты tTA включает MMTV промотор,функционально связанный с открытой рамкой считывания последовательности. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представленный способ, кроме того, включает доставку доксициклина, тетрациклина или их аналога в организм (например, млекопитающее) в течение периода времени, достаточного для подавления tTA-зависимой экспрессии или rtTAзависимой экспрессии трансгенного MYC гена. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представленный способ, кроме того, включает (а) доставку доксициклина, тетрациклина или их аналога в организм (например, млекопитающее) в течение периода времени, достаточного для подавления tTA-зависимой экспрессии или rtTA-зависимой экспрессии трансгенного MYC гена, и (b) вывод доксициклина, тетрациклина или их аналога по истечение периода времени, достаточного для индуцирования tTA-зависимой экспрессии или rtTA-зависимой экспрессии трансгенного MYC гена. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм включает, кроме того, экзогенную нуклеиновокислотную последовательность, кодирующую отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения способ, кроме того, включает извлечение из организма одной или нескольких В-клеток, которые экспрессируют антитело, специфическое к отобранному антигену. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения трансгенный MYC ген кодирует Myc-ER полипептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения трансгенный MYC ген кодируетMyc-GR полипептид. В соответствии с использованием в настоящем описании "GR" означает глюкокортикоидный рецептор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Myc-ER полипептид перемещается в ядро клетки за счет контактирования клетки (например, клетки млекопитающего) сER лигандом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген - это собственный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения способ включает введение (или "доставку") вектора экспрессии, кодирующего отобранный антиген. В настоящем описании представлен способ продуцирования антитела, специфичного к антигену,включающий введение (то есть, интродуцирование или инокуляцию) отобранного антигена в организмMYC ген и индуцибельный промотор или В-клетка-селективный промотор, функционально связанный сORF гена MYC. В настоящем описании представлен способ продуцирования антитела, специфичного к антигену,включающий (а) получение В-клетки, экспрессирующей антитело, которое специфически связывается с антигеном, в котором В-клетка включает трансгенный MYC ген и(или) экзогенный Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием); и (b) индуцирование экспрессии MYC гена и(или) активности Мус пептида(например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием в В-клетке. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клетка получена за счет контактирования В-клетки, включающей трансгенный MYC ген и(или) экзогенный Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием, с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того, включает расширение В-клетки для выработки моноклональной популяции В-клеток. В некоторых примерах осуществления-2 021131 настоящего изобретения способ, кроме того, включает извлечение антитела из популяции моноклональных В-клеток. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клетка присутствует в организме (например, млекопитающем) и индукция Мус активности происходит in vivo. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того, включает введение (или "доставку") трансгенного MYC гена или экзогенного Мус пептида (например, рекомбинантного Мус пептида (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием в В-клетку ex vivo перед этапом индуцирования. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того, включает введение (или "доставку") экзогенного Мус пептида (например, рекомбинантного Мус пептида (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием в В-клеткуex vivo. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения экзогенный Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием включает трансдукционный домен белка (например, ТАТ домен). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клетка - это анергическая В-клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген - собственный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения трансгенный MYC ген включает В-клеткаселективный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания гена. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например,трансгенная последовательность) включает индуцибельный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания гена. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцибельный промотор включает один или несколько TRE, а клетка (например, клетка млекопитающего),кроме того, экспрессирует tTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рекомбинантная клетка экспрессирует tTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения экзогенный Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием - это Myc-ER слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцирование включает контактирование В-клетки с ER лигандом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения экзогенный Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием представляет собой Myc-GR полипептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцирование включает контактирование В-клетки с GR лигандом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клетка это мышиная В-клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клетка взята из организма (например, млекопитающего), в который был введен отобранный антиген (то есть, организм вакцинирован или иммунизирован отобранным антигеном). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунизированный организм включает трансгенный MYC ген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения трансгенный MYC ген индуцибельный. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения трансгенный MYC ген включает промотор, и в котором промотор включает один или несколько TRE. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм также содержит и экспрессирует tTA нуклеиновокислотную последовательность(например, трансгенную последовательность) или rtTA нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм также содержит и экспрессирует ген (например, экзогенный ген), кодирующий отобранный антиген. В настоящем описании представлен способ продуцирования антитела, которое специфически связывается с антигеном, включающий введение иммунодефицитному млекопитающему множества кроветворных стволовых клеток, которые включают трансгенный MYC ген; и (с) введение (то есть, внедрение или инокуляция) отобранного антигена иммунодефицитному млекопитающему. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки также включают экзогенныйBCL-2 ген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того, включает индуцирование множества кроветворных стволовых клеток для видоизменения в Вклетки. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того, включает извлечение множества В-клеток, которые экспрессируют антитело, из иммунодефицитного млекопитающего. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того, включает извлечение антитела из множества В-клеток, которые экспрессируют антитело. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения трансгенный MYC ген включает индуцибельный промотор или В-клетка-селективный промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения трансгенный MYC ген включает индуцибельный промотор, включающий один или несколько TRE. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки экспрессируют tTA или rtTA. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того, включает (а) доставку доксициклина, тетрациклина или их аналога в иммунодефицитное млекопитающее в течение периода времени, достаточного для подавления tTAзависимой трансактивации, и (b) вывод доксициклина, тетрациклина или их аналога по истечении этого-3 021131 периода времени для осуществления tTA-зависимой трансактивации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клетка-селективный промотор - это Е промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения трансгенный MYC ген кодирует Myc-ER полипептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того, включает(а) извлечение, как минимум, одной В-клетки, которая экспрессирует антитело-специфический антиген,из иммунодефицитного млекопитающего; и (b) контактирование В-клетки с ER лигандом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения экзогенный Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием - это Myc-GR полипептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представленный способ, кроме того, включает (а) извлечение, как минимум, одной В-клетки, которая экспрессирует антитело-специфический антиген, из иммунодефицитного млекопитающего; и (b) контактирование В-клетки с GR лигандом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген - это собственный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитный организм получен путем облучения организма (например, млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитный организм (например, млекопитающее) представляет собой Rag-1ko, Rag-2, SCID, DNA-PK, Ku70, Ku80, XRCC4 или МТ мышь. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитный организм (например, млекопитающее) экспрессирует отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитный организм (например, млекопитающее) включает последовательность экзогенной ДНК,которая кодирует отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген вводится в геном организма с помощью трансфекции нуклеиновокислотным вектором экспрессии или инфицирования вирусным вектором экспрессии. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения вектор экспрессии представляет собой лентивирус. В настоящем описании представлен способ продуцирования человеческого или гуманизированного антитела, включающий: обеспечение клетки (например, клетки млекопитающего), которая экспрессирует человеческие антитела и включает последовательность экзогенной ДНК, кодирующую Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием; и (b) контактирование клетки (например, клетки млекопитающего) с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) - это В-клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) индуцибельно сверхэкспрессирует Мус. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула представляет собой антагонист Мах-1,Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессияMYC индуцируется контактированием клетки с shRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) присутствует в организме (например, млекопитающем). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения способ, кроме того, включает извлечение клетки (например, клетки млекопитающего) из организма (например, млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) - это мышь. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) - это MMTV-tTA/TRE-MYC мышь. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) получен путем: (а) представления иммунодефицитного организма (например, млекопитающего); и (b) введения в организм (например, млекопитающее) множества кроветворных стволовых клеток,которые сверхэкспрессируют MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекулаэто антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки сsiRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с shRNA моле-4 021131 кулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитный организм (например, млекопитающее) получен путем облучения организма (например, млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитный организм (например, млекопитающее) представляет собой Rag-1ko, Rag-2, SCID, DNAPK, Ku70, Ku80, XRCC4 или МТ мышь. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) экспрессирует отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представленный способ, кроме того, включает извлечение антитела. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того,включает воздействие на клетку (например, клетку млекопитающего) условий, которые индуцируют сверхэкспрессию MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессияMYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула это антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с shRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения последовательность ДНК MYC включает индуцибельный промотор или В-клетка-селективный промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения перед выделением клетки (например, клетки млекопитающего) из организма (например, млекопитающего) клетка (например, клетка млекопитающего) подвергается воздействию условий, которые индуцируют сверхэкспрессию MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1, Mxi-1,MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с shRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения после выделения клетки, продуцирующей антитела, из млекопитающего антитело-продуцирующая клетка подвергается воздействию условий, которые индуцируют сверхэкспрессию MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки сshRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения млекопитающее представляет собой MMTV-rtTA/TRE-MYC; MMTV-rtTA/TREMYC/Rag-1-/-; MMTV-tTA/TRE-MYC; или MMTV-tTA/TRE-MYC/Rag-1-/- мышь, а условия, которые индуцируют сверхэкспрессию MYC, - это воздействие доксициклина, тетрациклина или их аналога. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид представляет собой Myc-ER слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ,кроме того, включает контактирование клетки млекопитающего с лигандом эстрогенного рецептора. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка млекопитающего контактирует с отобранным антигеном при отсутствии лиганда эстрогенного рецептора. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид - это Myc-GR слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того, включает контактирование клетки млекопитающего с лигандом глюкокортикоидного рецептора. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка млекопитающего контактирует с отобранным антигеном при отсутствии лиганда глюкокортикоидного рецептора. В настоящем описании представлен способ продуцирования человеческого или гуманизированного-5 021131 антитела, включающий: (а) обеспечение человеческой клетки; (b) выделение человеческого гена, кодирующего антитело, из человеческой клетки; и (с) введение (или "доставку") гена в клетку, которая включает трансгенный MYC ген или экзогенный Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения человеческий ген кодирует человеческий IgH(тяжелая цепь иммуноглобулина) и IgL (легкая цепь иммуноглобулина), в котором IgH и IgL совместно формируют антитело, которое специфически связывается с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) - это В-клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того, включает трансплантацию клетки (например, клетки млекопитающего) в организм (например, мышь). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения выделенный человеческий ген кодирует первое антитело и второе антитело. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный способ, кроме того, включает извлечение антитела из клетки (например, клетки млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения трансгенная последовательность ДНКMYC включает индуцибельный промотор или В-клетка-селективный промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения экзогенный Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием это Myc-ER слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид- это Myc-GR слитый пептид. В настоящем описании представлен способ продуцирования человеческого или гуманизированного антитела, включающий: (а) введение (или "доставку") гена, кодирующего человеческий иммуноглобулин, в клетку, которая сверхэкспрессирует Мус; и (b), выделение кодированного человеческого иммуноглобулина. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула-это антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1,Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с shRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1,MAD или их комбинации. В настоящем описании представлены выделенные В-клетки для продуцирования человеческого или гуманизированного антитела, в котором В-клетки сверхэкспрессируют Мус. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с shRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В настоящем описании также представлены выделенные антитела, полученные в соответствии с любым из предложенных способов. Кроме того, в настоящем документе представлены клетки млекопитающих, которые созданы для продуцирования рекомбинантной формы любого антитела, полученного в соответствии с предложенными способами. Краткое описание чертежей Фиг. 1. Наглядный пример поверхностного фенотипа опухолей и клеточных линий, которые возникают у E-MYC/BCRHEL/sHEL трансгенных мышей. Закрашенные черным гистограммы соответствуют профилям клеток, полученных от мышей дикого типа, серый след соответствует BCRHEL трансгенным мышам, тонкая линия или пунктир соответствуют BCRHEL/sHEL мышам, а черный след соответствует клеткам, полученным от трижды трансгенных мышей. Данные представляют экспрессию указанных маркеров на В 220+ спленоцитах. Фиг. 2. Наглядный пример продуцирования иммуноглобулина и HEL специфических титров в опухолях и клеточных линиях, которые возникают у Е-MYC/BCRHEL/sHEL мышей. Определенное количество клеток (105), полученных из каждой клеточной линии (TBL-1, TBL-8, TBL-14 и TTLN9, все получены из опухолей, которые возникли у E-MYC/BCRHEL/sHEL мышей), засеяли в 24-луночный планшет,в 1 мл среды для выращивания, без добавления цитокинов. Образцы супернатанта собрали через 4 дня и-6 021131 провели анализ на концентрацию общего содержания IgM (панель А), а также на титр HEL специфического IgM (панель В). Для сравнения продуцирования антител с клеточными линиями использовали сыворотку от разных мышей. Среди этих мышей были мыши дикого типа C57/BL6 (WT), BCRHEL трансгенные мыши (BCR-tg), sHEL трансгенные мыши (Ag-tg), BCRHEL/sHEL дважды трансгенные мыши(BL). Приведенные в настоящем описании результаты из одного эксперимента, представляющие три независимых анализа. Фиг. 3. Внешний вид активированных В-клеток после острой сверхэкспрессии MYC. Проточноцитометрическое обнаружение активированных В-клеток. Анализы выполнялись на клетках лимфатического узла, полученных от мыши дикого типа (закрашенная черным гистограмма), MMTV-tTA/TREMYC/BCRHEL/sHEL мыши, которую держали на доксициклине постоянно (серый след), и MMTVtTA/TRE-MYC/BCRHEL/sHEL мыши, которой отменили доксициклин за неделю до эвтаназии (черный след). Клетки были окрашены антителами к двум молекулам, которые подвергли повышающей регуляции после зависимой от отобранного антигена активации В-клеток, CD69 (А) и В 7-2 (CD86) (В). Следы представляют уровни CD69 и В 7-2, присутствующие на В 220+ фракции клеток, выявленные с помощью гейтинга на Cychrome-C окрашивающих клетках проточной цитометрией. Фиг. 4. Накопление активированных В-клеток требует непрерывной сверхэкспрессии MYC. Активация В-клеток под действием MYC. Количество активированных В-клеток в лимфатических узлах определили согласно приведенному ранее описанию (34). Каждая точка на этих графиках представляет количество активированных В-клеток, обнаруженных в лимфатических узлах отдельной мыши. Для каждого момента времени использовали когорты из четырех мышей. На этой фигуре показано требование кMYC при инициировании и сохранении накопления активированных В-клеток у индуцированныхMMTV-tTA/TRE-MYC/BCRHEL/sHEL мышей. Фиг. 5. Накопление аутоантител в сыворотке после сверхэкспрессии MYC Серологическое доказательство нарушенной толерантности. Сыворотка была получена от групп мышей указанных генотипов(по четыре особи в каждой группе), анализ проводился трижды с помощью ELISA против HEL (А) или на общий серологический иммуноглобулин (В). Пронумерованные категории представляют сыворотку,полученную от мышей дикого типа (1), BCRHEL мышей (2), BCRHEL/sHEL мышей (3), ЕMYC/BCRHEL/sHEL мышей до развития очевидных опухолей(4),MMTV-tTA/TREMYC/BCRHEL/sHEL мышей, которых держали на доксициклине все время (5), и MMTV-tTA/TREMYC/BCRHEL/sHEL мышей, которым отменили доксициклин за 28 дней до сбора сыворотки (6). Фиг. 6. Накопление аутоантител и иммунных комплексов в почках после сверхэкспрессии MYC. Почки были получены от мыши дикого типа (А) или Е-MYC/BCRHEL/sHEL мыши (В) для гистологического исследования. Ткани были подразделены и окрашены гематоксилином и эозином, были получены микроскопические изображения. Увеличение составило 100. Для иммунофлуоресценции взяли почки от мыши дикого типа (С) или Е-MYC/BCRHEL/sHEL мыши (D). Замороженные ткани были секционированы и окрашены родамин-конъюгированными антителами к IgM, как описано в Materials and Methods [Материалы и Методы]. Увеличение составило 5. Фиг. 7. Защита мышей новыми HEL-специфическими антителами от летального инфицированияPRV вариантов, которые экспрессируют HEL. Когорты мышей инфицировали внутривенным введением двух разных вариантов PRV - Us9-GFP вариант (сплошная линия) или Us9-HEL вариант вируса (пунктирная линия). Вирусные супернатанты инкубировали с анти-HEL антителами, которые получены нами от MMTV-tTA/TRE-MYC/BCRHEL/sHEL мышей, в течение 1 ч, на льду, перед инъекцией животным. Все животные были инъецированы одновременно, обследование проводили три раза в день на наличие клинических симптомов, совместимых с PRV инфекцией. Это один эксперимент, отражающий два независимых анализа. Фиг. 8. Поверхностный фенотип В-клеточных опухолей получен у ретровирусных химерных мышей. Полученные из TRE-MYC костного мозга HSC [кроветворные стволовые клетки] клетки были трансфектированы с помощью pMIG-tTA и pMIG-Н 5. Трансфектированные клетки использовали для реконструирования когорт смертельно облученных мышей. У мышей начали проявляться внешние очевидные клинические симптомы гемабластом, их подвергли эвтаназии. Лимфатические узлы и селезенки собрали и использовали для создания одноклеточных суспензий. Фракцию этих клеток окрасили антителами к В 220 и IgM. Панели представляют результаты проточного цитометрического анализа, выполненного на этих клетках. Опухоли были составлены из зрелых, активированных (бластных) В-клеток, подобных тем, которые мы наблюдали у наших мышиных моделей лимфомы Беркитта, которые дали MYCуправляемые, антиген-зависимые опухоли, составленные из зрелых, активированных В-клеток. Фиг. 9. Вестерн-блоттинг реактивности сыворотки, полученной от ретровирусных химерных мышей. Полученные из TRE-MYC костного мозга HSC клетки были трансфектированы с помощью pMIGtTA и pMIG-Н 5. Трансфектированные клетки использовали для реконструирования когорт смертельно облученных мышей. У мышей начали проявляться внешние очевидные клинические симптомы гемабластом, их подвергли эвтаназии. Кровь собрали вскоре после эвтаназии и дали ей свернуться, чтобы полу-7 021131 чить сыворотку. Для проверки реактивности к Н 5 ХА, 293FT клетки были транзиентно трансфектированы с помощью как pMIG, pcDNA2-H5, так и pMIG-Н 5 (такая же плазмида была использована для генерации химерных мышей). Клетки собрали через 48 ч после трансфекции и лизировали с помощью лизирующего буфера на основе Тритон Х-100, как описано ранее. Лизаты обработали на 12% SDS-PAGE геле и переместили на ПВДФ мембрану. Пятна исследовали с помощью сыворотки, полученной от ретровирусных химерных мышей с разбавлением 1:5000. Низкомолекулярный бэнд (19Kd) неспецифический и служит в этом случае как хороший контроль нагрузки). Специфические бэнды, распознанные сывороткой, представляют предсказанный молекулярный вес для нерасщепляемой (НА 0) H5 (60 кДа) и HA1 субъединицы (40 кДа), полученной в результате расщепления HA0 фурин протеазой при обработке вER. Фиг. 10. Анализ подавления гемагглютинации сыворотки мыши, полученной от ретровирусных химерных мышей. Сыворотка, выделенная из трех мышей (1-3), через 6-8 недель после H5/tTA BM трансдукции, или забуференный фосфатом физиологический раствор [PBS] (Cl) разбавили последовательно на титрационных микропланшетах в двойных лунках. После серийного разведения в каждую лунку добавили 4 агглютинирующие единицы вирусов A/Mal/WI/944/82 (H5N2), A/NY/1469/02 (H1N1) гриппа А илиPBS (без вируса) и инкубировали в течение 30 мин. Затем добавили индюшачьи эритроциты и инкубировали в течение 30 мин, чтобы определить активность гемагглютинации. Первая колонка содержит окончательную сывороточную концентрацию 1:20. Фиг. 11. Антитела были получены от мышей, иммунизированных с помощью HEL и CFA (полный адъювант Фрейнда) или HEL и ТАТ-Мус. Антитела, полученные от мышей, иммунизированных с помощью HEL и ТАТ-Мус, определяются раньше и дают более устойчивую реакцию. Фиг. 12. Антитела были получены от мышей, иммунизированных с помощью HEL и CFA (полный адъювант Фрейнда) или HEL и ТАТ-Мус в день 0. Мышам ввели бустер-дозу антигена в день 30. Мыши,иммунизированные с помощью HEL и ТАТ-Мус, демонстрировали повышенный вторичный иммунный ответ хозяина на HEL антиген. Фиг. 13. Антитела были получены от мышей, иммунизированных с помощью Fluvirin (2007-2008) иCFA (полный адъювант Фрейнда) или HEL и ТАТ-Мус. Антитела, полученные от мышей, иммунизированных с помощью Fluvirin и ТАТ-Мус, определяются раньше и дают более устойчивую реакцию. Подробное описание изобретения В настоящем описании представлены системы и способы создания антител с (а) повышенной специфичностью, (b) существенно увеличенной иммунногенностью или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения системы и способы более эффективны и действуют быстрее, чем существующие подходы. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отсутствие аутотолерантности позволяет этим системам генерировать антитела без значительных (или любых) иммунологических ограничений. Системы и подходы дают возможность создавать специфичности антител, которые нельзя достичь с помощью существующих процедур иммунизации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения родственный антиген управляет Вклеточной неоплазией in vivo и способствует отбору антитело-продуцирующих клеток, которые превратятся в лимфому, и клеточных линий, продуцирующих конечные моноклональные антитела. Такие системы и подходы ускоряют время развития антитела, поскольку такие системы и подходы позволяют выполнять скринирование конечных моноклональных антител управляемым образом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанные способы и системы обеспечивают способность генерировать и клонально расширять антитело-продуцирующие клеточные линии из опухолей, таким образом, исключается необходимость клеточного слияния селезеночных Вклеток, продуцирующих антитела, с миеломной клеткой-партнером. Процесс слияния клеток, описанный в данной области, довольно неэффективный и только позволяет иммортализацию фракции В-клеток, которые пролиферируют после иммунизации, и следовательно, ограничивает количество и многообразие получаемых антиген-специфических моноклональных антител. Некоторые определения Если не указано иное, нижеуказанные термины имеют следующие значения при использовании в настоящем описании и в прилагаемой формуле изобретения. Термин "лейкоцит" включает, в виде неограничивающего примера, лимфоциты, моноциты, макрофаги, эозинофилы, нейтрофилы и базофилы. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения лейкоциты относятся к кроветворным стволовым клеткам и всем миелоидным и лимфоидным линиям дифференцировки, которые происходят от кроветворных стволовых клеток. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения лейкоциты относятся ко всем популяциям незрелых, зрелых,недифференцированных и дифференцированных белых кровяных телец, включающих специфические и специализированные разновидности ткани. Термин "лимфоцит" охватывает, в виде неограничивающего примера, В-клетки, Т-клетки, NKT клетки и NK клетки. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения лимфоциты относятся ко всем популяциям незрелых, зрелых, недифференцированных и дифференцированных белых-8 021131 лимфоцитов, включающих специфические и специализированные разновидности ткани. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения лимфоциты включают все В-клеточные линии дифференцировки, включающие пре-В-клетки, В-клетки-предшественники, ранние про-В клетки, поздние проВ клетки, большие пре-В клетки, малые пре-В клетки, незрелые В клетки, зрелые В клетки, плазматические В-клетки, В-клетки памяти, В-1 клетки, В-2 клетки и популяции анергических AN1/T3 клеток. Термин В-клетка относится в виде неограничивающего примера к пре-В-клеткам, В-клеткампредшественникам, ранним про-В клеткам, поздним про-В клеткам, большим пре-В клеткам, малым преВ клеткам, незрелым В клеткам, зрелым В клеткам, плазматическим В-клеткам, В-клеткам памяти, В-1 клеткам, В-2 клеткам и популяциям анергических AN1/T3 клеток. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения термин В-клетка включает В-клетку, которая экспрессирует тяжелую цепь и(или) легкую цепь иммуноглобулина на его клеточной поверхности. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения термин В-клетка включает В-клетку, которая экспрессирует и секретирует тяжелую цепь и(или) легкую цепь иммуноглобулина. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения термин В-клетка включает клетку, которая связывается с антигеном на его клеточной поверхности. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения, представленных в настоящем описании, В-клетки или AN1/T3 клетки используются в описанных способах. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения такие клетки факультативно замещаются любой животной клеткой, подходящей для экспрессии, способной экспрессировать (например, индуцибельная экспрессия) или способный дифференцироваться в клетку, подходящую для экспрессии антитела, включающая, например, кроветворную стволовую клетку, В-клетку, пре-В-клетку, В-клетку-предшественницу, раннюю про-В клетку, позднюю про-В клетку, большую пре-В клетку, малую пре-В клетку, незрелую В клетку,зрелую В клетку, плазматическую В-клетку, В-клетку памяти, В-1 клетку, В-2 клетку, анергическую Вклетку или анергическую AN1/T3 клетку. Термин "иммунизировать" относится к введению антигена в организм любым подходящим способом. Неограничивающие примеры различных маршрутов - это внутрикожная инъекция, внутривенная инъекция, внутриглазное введение, подкожная инъекция, внутрибрюшинная инъекция, перроальное введение или местное введение. Термин "антиген" относится к субстанции, которая способна вызвать продуцирование антитела. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения антиген - это субстанция, которая связывается с вариабельным участком антитела. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген - это субстанция, не свойственная антитело-продуцирующему организму. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген - это субстанция, свойственная антитело-продуцирующему организму (например, собственный антиген). Термин "популяции AN1/T3 клеток" относится к анергической популяции В-клеток; примеры осуществления настоящего изобретения, в которых описаны популяции AN1/T3 клеток, также включают примеры, в которых термин популяции AN1/T3 клеток заменен термином "энергическая популяция Вклеток". Термин "анергическая" относится к CD79 экспрессирующей клетке, которая не активируется при связывании антигена. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения активация определяется повышающей регуляцией клеточной поверхности CD79. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения активация определяется фосфорилированием CD79a и(или) фосфорилированием Syk. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения активация определяется мобилизацией кальция. Термин "CD79" относится к белку клеточной поверхности, включающему либо CD79a (Ig альфа),либо CD79b (Ig бета). Термины "слитый белок" и "слитый пептид" используются равноправно и относятся к смежной полипептидной цепи, включающей, как минимум, два разных белка, части белков или домены белков, которые обычно не встречаются вместе в природе. Термины "Мус", "сМус", "Мус белок" и "Мус полипептид" используется равноправно и относятся в некоторых случаях к номеру доступа NCBI Accession Number NP002458.2 [номер доступа NP002458.2NCBI - Национального центра биотехнологической информации], функциональным гомологам, аналогам или их фрагментам. Синонимы Мус включают, но не ограничиваются этим, с-Мус, v-Myc, Мус протоонкогенный белок и транскрипционный фактор р 64. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус полипептид включает аминокислотную последовательность, которая, как минимум, на 40-100% идентична, например, как минимум, на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 86, 87, 88, 90, 92, 93,94, 95, 96, 97, 98% или на любое иное число процентов, приблизительно от 40 до 100%, идентична последовательности с номером доступа NCBI Accession Numbers NP002458.2. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус полипептид включает полипептидную последовательность длиной 40 аминокислот или более, которая, как минимум, на 50-100% идентична, например, как минимум, на 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 86, 87, 88, 90, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98% или на любое иное число процентов, приблизительно от 50 % до 100 %, идентична последовательности NCBI Accession NumbersNP002458.2. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус полипептид включает-9 021131 полипептидную последовательность длиной 40 аминокислот или более, которая, как минимум, на 50100% идентична, например, как минимум, на 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 86, 87, 88, 90, 92, 93, 94, 95, 96,97, 98%, или на любое иное число процентов, приблизительно от 50 до 100%, идентична последовательности с номером доступа NCBI Accession Numbers NP002458.2, в которой Мус полипептид способствует живучести клетки, иммортализации клетки, росту клетки и(или) пролиферации клетки. Кроме того,функция онкопептида в соответствии с использованием в настоящем описании относится к одному или нескольким из следующих понятий - живучесть клетки, иммортализация клетки, рост клетки и(или) пролиферация клетки. В нескольких представленных примерах осуществления настоящего изобретения Мус используется в качестве наглядного примера онкопептида с функцией онкопептида. Следует понимать,что в этих представленных примерах осуществления настоящего изобретения Мус факультативно замещается любым подходящим онкопептидом, аналогом, гомологом или их фрагментом, который содействует живучести клетки, иммортализации клетки, росту клетки и(или) пролиферации клетки."MYC" относится к нуклеиновой кислоте, кодирующей Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием.MYC ген включает нуклеотидную последовательность, как минимум, из 120 нуклеотидов, которая как минимум, на 60-100% идентична или гомологична, например, как минимум, на 60, 65, 70, 75, 80, 85,86, 87, 88, 90, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98% или любое иное число процентов, приблизительно от 70 до 100%,идентична последовательностям с номером доступа NCBI Accession Number NM002467."Myc-ER" относится к Мус пептиду, слитому с модифицированным гормон-связанным доменом рецептора эстрогена (ER). Под воздействием 4-гидрокситамоксифена или другого аналога эстрогена MycER полипептид стимулируется на перемещение в ядро клетки."Myc-GR" относится к Мус пептиду, слитому с модифицированным гормон-связанным доменом глюкокортикоидного рецептора (GR)."MYC-GR" относится к трансгену, кодирующему Myc-GR полипептид. Для определения гомологии в процентах двух аминокислотных последовательностей или двух нуклеиновых кислот, в целях оптимального сравнения последовательности можно выровнять (например,вводятся пробелы в последовательность первой аминокислотной или нуклеиновокислотной последовательности для оптимального выравнивания с второй амино- или нуклеиновокислотной последовательностью). Аминокислотные остатки или нуклеотиды в соответствующих аминокислотных позициях или нуклеотидных позициях можно после этого сравнить. Когда позицию в первой последовательности занимает такой же аминокислотный остаток или нуклеотид, как и соответствующую позицию во второй последовательности, тогда молекулы в этой позиции идентичны. Гомология в процентах между двумя последовательностями представляет собой функцию числа идентичных позиций, совместных для последовательностей (то есть, % идентичность = количеству идентичных позиций/общее количество позиций(например, перекрывающиеся позиции)100). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения эти две последовательности одинаковой длины. Для определения гомологии в процентах между двумя последовательностями используется алгоритм Karlin and Altschul (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-2268, модифицированный так же, как и в Karlin and Altschul (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-5877. Этот алгоритм включен в NBLAST иXBLAST программы, представленные в работе Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410. BLAST исследования нуклеотида выполнены с помощью NBLAST программы, оценка=100, длина слова=12,чтобы получить нуклеотидные последовательности, гомологичные описанным или предложенным в настоящем описании нуклеиновокислотным молекулам. BLAST исследования белка выполняются с помощью XBLAST программы, оценка=50, длина слова=3. Для получения выравниваний с пробелами в целях сравнения используется Gapped BLAST, согласно описанию в работе Altschul et al. (1997) Nucleic AcidsRes. 25:3389-3402. При использовании программ BLAST и Gapped BLAST применяются параметры по умолчанию соответствующих программ (например, XBLAST и NBLAST). Подробности см. на вебсайте Национального центра биотехнологической информации (wwwatncbi.nlm.nih.gov). Белки, подходящие для использования в описанных в данной публикации способах, также включают белки, имеющие от 1 до 15 аминокислотных замещений, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных замещений, удалений или добавлений, по сравнению с аминокислотной последовательностью любого описанного в данной публикации белка. В других примерах осуществления настоящего изобретения измененная аминокислотная последовательность, как минимум, на 75 % идентична, например, на 77, 80,82, 85, 88, 90, 92, 95, 97, 98, 99 или 100% идентична аминокислотной последовательности любого белкового ингибитора, описанного в данной публикации. Такие последовательность-вариантные белки подходят для способов, описанных в данной публикации, пока измененная аминокислотная последовательность сохраняет достаточную биологическую активность, чтобы быть функциональной в описанных составах и способах. Если аминокислотные замещения производятся, то замещения должны быть консервативными аминокислотными замещениями. Среди общих аминокислот, например, "консервативное аминокислотное замещение" иллюстрируется замещением среди аминокислот в рамках каждой из сле- 10021131 дующих групп: (1) глицин, аланин, валин, лейцин и изолейцин, (2) фенилаланин, тирозин и триптофан,(3) серин и треонин, (4) аспартат и глутамат, (5) глутамин и аспарагин и (6) лизин, аргинин и гистидин.BLOSUM62 таблица представляет собой матрицу аминокислотных замещений, полученную приблизительно из 2000 локальных множественных выравниваний сегментов белковой последовательности, представляющих высоко консервативные области более чем 500 групп родственных белков (Henikoff et al(1992), Proc. Natl Acad. Sci. USA, 89:10915-10919). Соответственно, частота BLOSUM62 замещений используется для определения консервативных аминокислотных замещений, которые, в некоторых примерах осуществления настоящего изобретения, вводятся в аминокислотные последовательности, описанные или предложенные в настоящем описании. Хотя можно разработать аминокислотные замещения,основанные исключительно на химических свойствах (как указано выше), выражение "консервативное аминокислотное замещение" предпочтительно относится к замещению, представленному значениемBLOSUM62 более -1. Например, аминокислотное замещение консервативно, если замещение характеризуется значением BLOSUM62, равным 0, 1, 2 или 3. В соответствии с этой системой предпочтительные консервативные аминокислотные замещения характеризуются значением BLOSUM62, равным, как минимум, 1 (например, 1, 2 или 3), тогда как более предпочтительные консервативные аминокислотные замещения характеризуются значением BLOSUM62, равным, как минимум, 2 (например, 2 или 3). Термин "экспрессия" относится к одному или нескольким из следующих событий: (1) продуцирование РНК из последовательности ДНК (например, транскрипцией) в границах клетки; (2) обработка транскрипта РНК (например, с помощью сплайсинга, редактирования, 5' шапкообразования и(или) 3' образования концов) в границах клетки; (3) трансляция РНК в полипептид или белок в границах клетки;(4) посттрансляционная модификация полипептида или белка в границах клетки; (5) представление полипептида или белка на поверхности клетки; (6) секреция или выделение полипептида или белка из клетки. Термин "сверхэкспрессия" относится к высокому уровню экспрессии по сравнению с эндогенным уровнем экспрессии идентичного полипептида или белка в границах аналогичной клетки. В некоторых случаях "сверхэкспрессия" относится к рекомбинантной экспрессии полипептида. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения высокий уровень экспрессии включает превышение от 2 до 200%. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения более высокий уровень экспрессии включает превышение от 2-кратного до 1000-кратного. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения более высокий уровень экспрессии включает превышение от 2-кратного до 1000 кратного. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения более высокий уровень экспрессии включает превышение от 2-кратного до 10000-кратного. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения более высокий уровень экспрессии включает обнаруживаемый уровень экспрессии по сравнению с прежним необнаруживаемым уровнем экспрессии. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения "сверхэкспрессия" относится к любому обнаруживаемому уровню экспрессии экзогенного полипептида или белка. Фраза "сверхэкспрессия MYC" относится к сверхэкспрессии Мус пептида (например, рекомбинантного Мус пептида (например, Мус слитого пептида в соответствии с приведенным в данной публикации описанием или Мус пептида (например, рекомбинантного Мус пептида (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием, слитого с другим пептидом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения "сверхэкспрессия MYC" относится к сверхэкспрессии MYC-ER. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения "сверхэкспрессияMYC" относится к сверхэкспрессии MYC-GR. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения "сверхэкспрессия MYC" относится к сверхэкспрессии фрагмента Мус-полипептида, который содержит ДНК связывающий домен Мус. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения"сверхэкспрессия MYC" относится к сверхэкспрессии полипептида, который включает ДНК связывающий домен Мус. Термины "антитело" и "антитела" относятся к моноклональным антителам, поликлональным антителам, биспецифическим антителам, мультиспецифическим антителам, трансплантированным антителам, человеческим антителам, гуманизированным антителам, синтетическим антителам, химерным антителам, антителам верблюда (camelized), Fv (scFv) с одиночной цепью, антителам с одиночной цепью, Fab фрагментам, F(ab') фрагментам, дисульфид-связанным Fv (sdFv), интраантителам и антиидиотипическим(анти-Id) антителам и антигенсвязывающим фрагментам любого из описанных выше представителей. В частности, антитела включают молекулы иммуноглобулина и иммунологически активные фрагменты молекул иммуноглобулина, то есть молекулы, которые содержат антигенсвязывающий сайт. Молекулы иммуноглобулина могут быть любого типа (например, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA и IgY), класса (например,IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2) или подкласса. Термины "антитело" и иммуноглобулин используются равноправно в самом широком смысле. Структуры субъединицы и трехмерные конфигурации различных классов иммуноглобулинов известны в данной области. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения антитело представляет собой часть более крупной молекулы, образованной ковалентной или нековалентной взаимосвязью антитела с одним или несколькими другими белками или пептидами.- 11021131 Термин "производное соединение или дериват" в контексте полипептида или белка, например антитела, относится к полипептиду или белку, включающему аминокислотную последовательность, которая была изменена введением замещений, удалений или добавлений аминокислотного остатка. Термин "производное соединение" также относится к полипептиду или белку, который был модифицирован, а именно, ковалентным присоединением молекулы любого типа к антителу. Например, в некоторых примерах осуществления настоящего изобретения полипептид или белок модифицируется, например, гликозилированием, ацетилированием, пегилированием, фосфорилированием, амидированием, дериватизацией с помощью защитных/блокирующих групп, протеолитического расщепления, присоединения к клеточному лиганду или другому белку, и т.п. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения производные соединения, полипептиды или белки получены путем химических модификаций при использовании соответствующих методик, включающих, помимо прочего, специфическое химическое расщепление, ацетилирование, формилирование, метаболический синтез туникамицина, и т.п. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения производное соединение, полипептид или белок обладает такой же или идентичной функцией, что и полипептид или белок, из которого они получены. Термины "полноразмерное антитело", "интактное антитело" и "целое антитело" используются в настоящем описании равноправно и относятся к антителу в его, в основном, нетронутой форме, а не к фрагментам антитела, определение которых приведено ниже. Эти термины в частности относятся к антителу с тяжелыми цепями, содержащему Fc области. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представленный в настоящем описании вариант антитела - это полноразмерное антитело. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения полноразмерное антитело является человеческим, гуманизированным или химерным, либо антителом с созревшей аффинностью. Антитело с созревшей аффинностью - это антитело с одним или несколькими сдвигами в одном или нескольких CDR участках, которые приводят к повышению аффинности антител к антигену по сравнению с родительским антителом, у которого нет такого(их) сдвига(ов). Предпочтительные антитела с созревшей аффинностью будут иметь наномолярную или даже пикомолярную аффинностью к антигенумишени. Антитела с созревшей аффинностью продуцируются с помощью соответствующих процедур. См., например, работу Marks et al., (1992) Biotechnology 10:779-783, в которой описывается созревание аффинности с помощью перестановки вариабельных доменов тяжелой цепи (VH) и вариабельных доменов легкой цепи (VL). Неспецифический мутагенез CDR и(или) каркасных остатков описан в: Barbas, etBiol. 226:889-896, например. Термины "связывающий фрагмент", "фрагмент антитела" или "антигенсвязывающий фрагмент" используются в настоящем документе для целей описания и формулы изобретения, и означают часть или фрагмент молекулы интактного антитела, предпочтительно с сохранением у фрагмента антигенсвязывающей функции. Примеры фрагментов антитела включают Fab, Fab', F(ab')2, Fd, Fd' и Fv фрагменты,диатела, линейные антитела (Zapata et al. (1995) Protein Eng. 10: 1057), молекулы антитела с одиночной цепью, связывающие полипептиды с одиночной цепью, scFv, двухвалентный scFv, четырехвалентныйscFv и антитела биспецифического или мультиспецифического связывания, образованные из фрагментов антитела."Fab" фрагменты обычно получают путем папаинового расщепления антител, приводящего к продуцированию двух идентичных антигенсвязывающих фрагментов, каждый с одним антигенсвязывающим сайтом и остаточным "Fc" фрагментом. Воздействие пепсином дает F(ab')2 фрагмент, который имеет два антигенсвязывающих сайта, способных к перекрестному сшиванию антигена. "Fv" является минимальным фрагментом антитела, который содержит полный сайт распознавания и связывания антигена. В биотипе Fv с двойной цепью эта область состоит из димера одного вариабельного домена тяжелый цепи и одного вариабельного домена легкой цепи в плотной, нековалентной связи. В биотипе Fv (scFv) с одиночной цепью один вариабельный домен тяжелый цепи и один вариабельный домен легкой цепи соединены ковалентной связью гибким пептидным линкером так, что легкие и тяжелые цепи соединяются в"димерной" структуре, аналогичной такой структуре в разновидности Fv с двойной цепью. Именно в этой конфигурации три CDR участка каждого вариабельного домена взаимодействуют для определения антигенсвязывающего сайта на поверхности VP-VL димера. Совместно шесть CDR участков сообщают антителу антигенсвязывающую специфичность. Однако даже один вариабельный домен (или половинаFv, включающая только три CDR, специфичных к антигену) обладает способностью распознавать и связывать антиген, хотя, как правило, при более низкой аффинности, чем полный сайт связывания.Fab фрагмент также содержит С-домен легкой цепи и первый С-домен (CH1) тяжелой цепи. Fab фрагменты отличаются от Fab' фрагментов добавлением нескольких остатков на карбокси-конце CH1 домена тяжелой цепи, включающем один или несколько цистеинов из шарнирного участка антитела.Fab'-SH - принятое в настоящем описании обозначение для Fab', в котором остаток (ки) цистеина Сдоменов имеет (ют) свободную тиоловую группу. F(ab')2 фрагменты антитела первоначально были получены как пары Fab' фрагментов с шарнирными цистеинами между ними. Другие химические связи фрагментов антитела также подходят. Способы получения различных фрагментов от моноклональных Ab- 12021131 включают, например, Pluckthun, 1992, Immunol. Rev. 130:152-188. Термин "моноклональное антитело" относится к антителу, полученному из популяции в основном гомогенных антител, то есть, индивидуальные антитела, включающие популяцию, идентичны за исключением возможных природных мутаций, которые присутствуют в незначительных объемах. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения моноклональные антитела получены, например, методом гибридом, впервые описанным в работе Kohler and Milstein (1975) Nature 256:495, или рекомбинантными методами, например, как описано в патенте США 4816567. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения моноклональные антитела выделены из библиотек антитела фага при использовании методик, описанных в работе Clackson et al., Nature 352:624-628 (1991), а также в работеMarks et al., J. Mol. Biol. 222:581-597 (1991). Антитела в настоящем описании включают моноклональные, поликлональные, рекомбинантные,химерные, гуманизированные, биспецифические, трансплантированные, человеческие антитела и их фрагменты, включая антитела, измененные любым образом так, чтобы они были менее иммуногенными в человеческом организме. Таким образом, например, моноклональные антитела и фрагменты, и т.п., в настоящем описании включают "химерные" антитела и "гуманизированные" антитела. Вообще, химерные антитела включают часть тяжелой и(или) легкой цепи, которая идентична или гомологична соответствующим последовательностям в антителах, производных от конкретного биотипа или принадлежащих к конкретному классу или подклассу антител, тогда как остальная часть цепи(ей) идентична или гомологична соответствующим последовательностям в антителах, производных от другого биотипа или принадлежащих к другому классу или подклассу антител, пока они демонстрируют требуемую биологическую активность (U.S. Pat. No. 4816567); Morrison et al. Proc, Natl Acad. Sci. 81:6851-6855 (1984). Например, в некоторых случаях осуществления настоящего изобретения химерное антитело содержит вариабельные области, полученные от мыши, и константные области, полученные от человека, в которых константная область содержит последовательности, гомологичные и человеческому IgG2, и человеческомуIgG4. В данной области известно много способов получения "химерных" антител, и т.п. "Гуманизированные" формы (например, мышиные) антител или фрагментов нечеловеческого происхождения представляют собой химерные иммуноглобулины, иммуноглобулиновые цепи или их фрагменты (такие, как например, Fv, Fab, Fab', F(ab')2 или другие антигенсвязывающие подпоследовательности антител), которые содержат минимальную последовательность, производную от иммуноглобулина нечеловеческого происхождения. Гуманизированные антитела включают трансплантированные антитела или антитела с трансплантированным CDR, в которых часть или вся аминокислотная последовательность одного или нескольких гипервариабельных участков (CDR), производная от антитела животного организма нечеловеческого происхождения, трансплантирована в соответствующую позицию человеческого антитела с сохранением требуемой специфичности связывания и(или) аффинности исходного нечеловеческого антитела. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения соответствующие остатки нечеловеческого происхождения заменяют Fv каркасные остатки человеческого иммуноглобулина. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения гуманизированные антитела включают остатки,которые не обнаружены ни в антителе-реципиенте, ни в импортированных CDR или каркасных последовательностях. Эти модификации выполнены для последующего усовершенствования и оптимизации свойств антитела. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения гуманизированное антитело включает в основном весь, как минимум, один, а обычно два, вариабельных домена, в которых все, или в основном все, из CDR участков соответствуют таковым иммуноглобулина нечеловеческого происхождения и все, или в основном все, из FR участков являются участками согласованной последовательности человеческого иммуноглобулина. Подробности см., например, в работах: Jones et al., Nature 321: 522-525 (1986); Reichmann et al, Nature 332: 323-329 (1988) и Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2: 593-596(1992). В данной области известно множество способов "гуманизации" антител, и т.п. Термин "вектор" или "экспрессирующий вектор или вектор экспрессии" используется в настоящем описании для обозначения векторов, используемых в качестве подходящих проводников для введения(или "доставки") в клетку-хозяин и(или) экспрессии нужного гена в клетке-хозяине. Примеры векторов включают, помимо прочего, плазмиды, фаги, вирусы и ретровирусы. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения подходящие векторы включают маркер выбора. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения подходящие векторы включают сайты рестрикции для упрощения клонирования нужного гена, а в некоторых примерах осуществления настоящего изобретения подходящие векторы включают способность входить в эукариотные или прокариотные клетки и(или) реплицироваться в них. В представленном в настоящем описании способе факультативно используются многочисленные системы экспрессирующего вектора. Например, один класс вектора использует элементы ДНК, которые получены из вирусов животного, как например, вирус бычьей папилломы, вирус полиомы, аденовирус,вирус коровьей оспы, бакуловирус, ретровирусы (RSV, MMTV или MOMLV) или SV40 вирус. В других используются полицистронные системы с внутренними рибосомными сайтами связывания. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетки со встроенной экзогенной ДНК в их хромосомы отбираются введением ("доставкой") одного или нескольких маркеров выбора в трансфектированные- 13021131 клетки хозяина. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения маркеры выбора обеспечивают прототрофию ауксотрофному носителю, устойчивость к биоциду (например, антибиотикам) или устойчивость к тяжелым металлам, например меди. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения селектируемый маркерный ген либо непосредственно связан с ДНК экспрессируемыми последовательностями, либо вводится в ту же клетку с помощью котрансформации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения в вектор для оптимальной транскрипции включены дополнительные регуляторные элементы. Примеры регуляторных элементов включают сигнальные последовательности, сплайс-сигналы, а также транскрипционные промоторы, энхансеры и сигналы терминации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанные в данной публикации нуклеиновые кислоты включают промотор, содержащий тетрациклин-ответный элемент и трансген, который конститутивно экспрессирует либо rtTA (обратный тетрациклиновый трансактиватор), либо tTA(тетрациклин-регулируемый трансактиватор). Белок rtTA связывается с TRE и активирует транскрипцию только при наличии тетрациклина, доксициклина или их аналога. Белок tTA при наличии тетрациклина,доксициклина или их аналога, связывается с TRE, ингибируя при этом транскрипцию. При отсутствии тетрациклина, доксициклина или их аналога tTA разрешает транскрипцию. Термин "эпитоп" относится к фрагменту полипептида или белка, обладающего антигенной или иммуногенной активностью в организме, предпочтительно в организме млекопитающего, и наиболее предпочтительно в человеческом организме. Эпитоп, обладающий иммуногенной активностью, представляет собой фрагмент полипептида или белка, который вызывает гуморальный иммунный ответ в животном организме. Эпитоп, обладающий антигенной активностью, представляет собой фрагмент полипептида или белка, с которым антитело связывается иммуноспецифически, что устанавливается любым известным способом, например иммуноанализами. Эпитопы не обязательно должны быть иммуногенными. Фраза "специфически связывается", если относится к взаимодействию между антителом или другой связывающей молекулой и белком или полипептидом или эпитопом, обычно относится к антителу или другой связывающей молекуле, которая распознает и очевидно связывается с высокой аффинностью с исследуемой мишенью. Предпочтительно, в обозначенных или физиологических условиях, указанные антитела или связывающие молекулы связываются с конкретным полипептидом, белком или эпитопом,который еще не связывается в значительном или нежелательном количестве с другими молекулами, присутствующими в пробе. Другими словами, указанное антитело или связывающая молекула не вступают в нежелательную перекрестную реакцию с антигенами и(или) эпитопами, не являющимися мишенями. Существует целый ряд форматов иммунологического анализа, применяемых для выбора антител или другой связывающей молекулы, иммунореактивных в отношении конкретного полипептида и обладающих требуемой специфичностью. Например, для выбора моноклональных антител, обладающих требуемой иммунореактивностью и специфичностью, используются твердофазные ELISA иммуноанализы,BIAcore, проточная цитометрия и радиоиммуноанализы. Описание форматов и условий иммунологического анализа, которые используются для определения или оценки иммунореактивности и специфичности, см. в работе Harlow, 1988, ANTIBODIES, A LABORATORY MANUAL, Cold Spring Harbor Publications, Нью-Йорк (в дальнейшем "Harlow"),"Селективное связывание", "селективность" и т.п. касается предпочтения антитела взаимодействовать с одной молекулой по сравнению с другой. Предпочтительно, что взаимодействия между антителами, особенно модуляторами, и белками и специфические, и селективные. Следует обратить внимание,что в некоторых примерах осуществления настоящего изобретения антитело предназначено для того,чтобы "специфически связываться" и "селективно связываться" с двумя различными, но все же сходными мишенями, не связываясь с другими нежелательными мишенями. Термин "эндогенный" в контексте клеточного белка относится к белку, встречающемуся в природе и(или) экспрессированному клеткой при отсутствии рекомбинантной манипуляции; соответственно,термины "эндогенно экспресированный белок" или "эндогенный белок" исключают клеточные белки,экспрессированные с помощью рекомбинантной технологии. Термины "полипептид", "пептид" и "белок" используются в настоящем описании равноправно и относятся к полимеру аминокислотных остатков. Термины применяются к встречающимся в природе аминокислотным полимерам, а также к аминокислотным полимерам, в которых один или несколько аминокислотных остатков являются синтетической аминокислотой, например аминокислотный аналог. Термины охватывают аминокислотные цепи любой длины, включая полноразмерные белки (то есть, антигены),в которых аминокислотные остатки соединены ковалентными пептидными связями. Термины "онкопептид" и "онкобелок" используются равноправно в настоящем описании и относится к полимеру аминокислотных остатков, фрагментов или их аналогов, которые кодируются онкогенами или прото-онкогенами. В некоторых случаях онкопептиды стимулируют клеточную выживаемость и(или) клеточную пролиферацию. Термин "аминокислота" относится к природным и синтетическим аминокислотам, а также к аминокислотным аналогам и аминокислотным миметикам, которые функционируют аналогично природным аминокислотам. Кодируемые естественным образом аминокислоты - это 20 общих аминокислот (аланин,аргинин, аспарагин, аспарагиновая кислота, цистеин, глутамин, глютаминовая кислота, глицин, гисти- 14021131 дин, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, фенилаланин, пролин, серин, треонин, триптофан, тирозин и валин), а также пиролизин и селеноцистеин. Аминокислотные аналоги относятся к агентам, которые имеют такую же основную химическую структуру, как и природная аминокислота, то естьуглерод,связанный с водородом, карбоксильной группой, аминогруппой и R группой, как, например, гомосерин,норлейцин, метионин сульфоксид, метионин метил сульфоний. Такие аналоги имеют модифицированные R группы (как например, норлейцин) или модифицированные пептидные остовы, но сохраняют такую же основную химическую структуру, как и у природной аминокислоты. Аминокислоты упоминаются в настоящем описании либо по их общеизвестным трем буквенным обозначениям, либо по однобуквенным обозначениям, рекомендованным Комиссией по биохимической номенклатуре Международного общества чистой и прикладной химии Международного биохимического общества [IUPAC-IUB Biochemical Nomenclature Commission]. Нуклеотиды, аналогично, упоминаются по их общепринятым однобуквенным кодам. Термин "нуклеиновая кислота" относится к дезоксирибонуклеотидам, дезоксирибонуклеозидам,рибонуклеозидам или рибонуклеотидам и их полимерам либо в однонитевой, либо в двунитевой форме. При отсутствии особых ограничений термин охватывает нуклеиновые кислоты, содержащие известные аналоги природных нуклеотидов, которые имеют такие же сходные свойства связывания, что и эталонная нуклеиновая кислота, и метаболизируются аналогичным образом, как и природные нуклеотиды. При отсутствии особых ограничений термин также относится к олигонуклеотидным аналогам, включая PNA(пептидонуклеиновая кислота), аналоги ДНК, используемые в антисмысловой технологии (фосфотиоаты,фосфоамидаты и т.п.). Если не указано иное, конкретная нуклеиновокислотная последовательность, кроме того, в неявном виде охватывает ее консервативно модифицированные варианты (включающие, помимо прочего, замещения вырожденного кодона) и комплементарные последовательности, а также последовательность, указанную в явной форме. В частности, замещения вырожденного кодона достигаются путем порождения последовательностей, в которых третья позиция одного или нескольких отобранных(или всех) кодонов замещается остатками со смешанным основанием и(или) деоксиинозиновыми остатками (Batzer et al., Nucleic Acid Res. 19:5081 (1991); Ohtsuka et al., J. Biol. Chem. 260:2605-2608 (1985); иCassol et al. (1992); Rossolini et al., Mol. Cell. Probes 8:91-98 (1994. Термины "выделенный" и "очищенный" относится к веществу, которое в основном или по существу удалено из своей естественной среды или концентрирован в ней. Например, выделенная нуклеиновая кислота - это кислота, которая отделена, как минимум, от некоторых из нуклеиновых кислот, обычно примыкающих к ней, или других нуклеиновых кислот или компонентов (белки, липиды, и т.п.) в пробе. В другом примере полипептид очищен, если он в основном удален из своей естественной среды или концентрирован в ней. Способы очистки и выделения нуклеиновых кислот и белков зарегистрированы как методики. В примерах осуществления настоящего изобретения выражение "в основном" включает как минимум 20%, как минимум 40%, как минимум 50%, как минимум 75%, как минимум 85%, как минимум 90%, как минимум 95% или как минимум 99%. Фраза "рекомбинантная нуклеиновая кислота" относится к нуклеиновой кислоте, которая создана путем комбинации или вставки одной или нескольких нуклеиновых кислот, тем самым объединяя последовательности, обычно не встречающиеся вместе в природе. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рекомбинантные нуклеиновые кислоты включают промоторы или энхансеры. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рекомбинантные нуклеиновые кислоты включают сайты фермента рестрикции. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рекомбинантные нуклеиновые кислоты кодируют полипептиды. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рекомбинантные нуклеиновые кислоты включают мутации. Термин "рекомбинантный полипептид" относится к полипептиду, полученному из рекомбинантной нуклеиновой кислоты. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рекомбинантный полипептид - это Мус слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рекомбинантный полипептид - это ТАТ-Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием. Термин "рекомбинантный Мус полипептид" включает Мус полипептид, полученный из рекомбинантной нуклеиновой кислоты. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рекомбинантный Мус полипептид - это Мус слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рекомбинантный Мус полипептид - это ТАТ-Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием. Термин "рекомбинантная Мус активность" относится к связыванию рекомбинантного Мус полипептида с ДНК, локализованной в ядре клетки, где рекомбинантный Мус регулирует транскрипционную активность Мус-чувствительных генов. Термин "трансген" относится к экзогенному гену, интродуцированному в геном организма. Термин "трансгенное животное" относится к животному-носителю трансгена. Термин "генетически измененный" относится к животному, бактериям, вирусу или клетке, включающим рекомбинантную нуклеиновую кислоту. Термин "собственный антиген" относится к антигену, источником которого является животное,- 15021131 ткань или клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения собственный антиген включает эндогенный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения собственный антиген включает эндогенный антиген, выработанный эндогенным ретровирусом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения собственный антиген включают неособственные антигены, микробно или паразит-кодированные неособственные антигены или другие неособственные антигены, экспрессированные в результате генетического изменения в животном организме или клетке. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения химерная мышь экспрессирует неособственный антиген. Термин "аутоантиген" относится к антигену, который включает эпитоп собственного антигена или иммунологически реактивный эпитоп, который мимикрирует эпитоп собственного антигена. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения термин аутоантиген включает антигены, к которым получены аутоиммунные антитела. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения аутоантиген включает эндогенный антиген, где животный организм, от которого происходит эндогенный антиген, иммунологически толерантен или был однажды иммунологически толерантным к отобранному антигену. Термин "неособственный антиген" относится к антигену, который вводится в организм при посредстве ретровируса. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения ретровирус используется для сверхэкспрессии белка в стволовой клетке, а эти клетки трансплантируются в организм. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения белок воспринимается иммунной системой химерного животного как собственный антиген. Термин "Мус активность" относится к связыванию Мус пептида (например, рекомбинантного Мус пептида (например, Мус слитого пептида в соответствии с приведенным в данной публикации описанием с ДНК в ядре клетки, где Мус регулирует транскрипционную активность Мус-чувствительных генов. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус активность индуцирует клеточную пролиферацию и(или) продуцирование антител. Термин "активация Мус" и "Мус активация" относится к индуцированию Мус активности. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения активация Мус индуцируется сверхэкспрессией Мус пептида (например, рекомбинантного Мус пептида (например, Мус слитого пептида в соответствии с приведенным в данной публикации описанием. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения активация Мус индуцируется перемещением Мус пептида (например, рекомбинантного Мус пептида (например, Мус слитого пептида в соответствии с приведенным в данной публикации описанием в ядро клетки. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения активация Мус индуцируется переносом Мус пептида (например, рекомбинантного Мус пептида (например, Мус слитого пептида в соответствии с приведенным в данной публикации описанием в клетку. Термин "TRE" относится к тетрациклин-ответному элементу. Термин "иммортализованный" относится к способности клетки пролиферировать в культуре на множестве генераций с минимальной потерей живучести всей популяции. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммортализованные клетки считаются трансформированными клетками. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммортализованные клетки считаются злокачественными. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммортализованные В-клетки называются лимфомами. При отсутствии генетического изменения, мутации, модификации или вирусной инфекции нативные первичные клетки и первичные В-клетки в некоторых примерах осуществления настоящего изобретения не являются иммортализованными и потеряют живучесть после нескольких пассивирований в культуре. В соответствии с использованием в настоящем описании "xenomouse" ["ксеногенная мышь"] означает мышь, которая генетически изменена для экспрессии одного или нескольких ненативных генов. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения "xenomouse" генетически изменена для продуцирования человеческих антител."Пептидный переносчик" и "пептидный трансдукционный домен" (PTD) равноправные термины. В соответствии с использованием в настоящем описании они означают пептидную последовательность,которая способствует проникновению пептида в клетки и ткани. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения пептидный переносчик - это ТАТ. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения пептидный переносчик - это ТАТ[48-57]. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения пептидный переносчик - это ТАТ[57-48]. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения пептидный переносчик - это HTV-Vpr, HSV-Vp22, "antennapedia" [сложный локус,в котором локализованы гомеозисные мутации], кариотная система или их комбинация. Примеры пептидных переносчиков см. в патентной заявке США 11/583970 (Публикация 2007-0116691), который включен в настоящее описание путем ссылки. В соответствии с использованием в настоящем описании "MYC последовательность" представляет собой MYC аминокислотную пептидную последовательность. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения MYC пептид - это полная MYC пептидная последовательность. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения МУС пептид - это частичная МУС пептидная после- 16021131 довательность. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения МУС - это с-МУС. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения МУС пептидная последовательность включает: Способы получения антител В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представлен способ продуцирования антител, которое специфически связывается с антигеном, включающий: контактирование клетки,включающей нуклеиновую кислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), кодирующую онкопептид (например, MYC) или онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, ТАТ-Мус, с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид, включающий PTD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это TAT-MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-ER. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Мус-GR. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это пептид, который способствует выживанию и(или) пролиферации клетки. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка представляет собой клетку млекопитающего. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - человеческая клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - В-клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - кроветворная клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка человеческая В-клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - человеческая кроветворная клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) экспрессирует CD79 на его клеточной поверхности. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) включает интактный "реутилизационный" путь для пуринового биосинтеза и является толерантной и(или) анергической к отобранному антигену. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка(например, клетка млекопитающего) - это В-клетка, В-клетка-предшественник или прародитель или кроветворная стволовая клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения антитело специфически связывается с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид представляет собой пептид, способствующий выживанию и(или) пролиферации клетки. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) контактирует с отобранным антигеном любым подходящим образом. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) включает нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), которая кодирует отобранный антиген и при этом контактирует с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген - это собственный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения, в которых используется В-клеткапредшественник, или прародитель, или кроветворная стволовая клетка, описанный способ, кроме того,включает разрешение или индуцирование дифференциации клетки (например, клетки млекопитающего) в В-клетку. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения MYC последовательность (например, трансгенная последовательность) включает, кроме того, В-клеточный селективный промотор или индуцибельный промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная последовательность), кодирующая отобранный антиген, кроме того, включает В-клеточный селективный промотор или индуцибельный промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клеточный селективный промотор представляет собой, в виде неограничивающего примера, Е промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцибельный промотор включает, в виде неограничивающего примера,- 17021131 один или несколько TRE. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего), кроме того, включает нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), которая кодирует нуклеиновокислотную последовательность(например, трансгенную последовательность), кодирующую tTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например,трансгенная последовательность), кодирующая tTA пептид или rtTA пептид, включает В-клеткаселективный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующей tTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая tTA пептид или rtTA пептид, включает MMTV промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующей tTA пептид или rtTA пептид. Кроме того, в некоторых примерах осуществления настоящего изобретения, в которых индуцибельный промотор включает один или несколькоTRE, описанный способ, кроме того, включает контактирование клетки (например, клетка млекопитающего) с доксициклином, тетрациклином или их аналогом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид,включающий рецептор, который активирует онкопептидную активность (например, выживание и(или) пролиферацию клетки), когда он связан с лигандом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рецептор представляет собой рецептор эстрогена (ER). В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-ER слитый пептид. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Мус-GR слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, контактирование клетки,включающей рекомбинантный онкопептид, являющийся слитым пептидом, включающим рецептор, с лигандом, который связывается с рецептором. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, контактирование клетки (например, клетки млекопитающего), включающей Myc-ER слитый пептид, с модулятором рецептора эстрогена (например, агонистом или антагонистом ER). В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, контактирование клетки (например, клетки млекопитающего), включающей Myc-GR слитый пептид, с модулятором глюкокортикоидного рецептора (например, агонистом или антагонистом GR). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид,который включает (а) последовательность пептидного переносчика (например, ТАТ); и (b) MYC последовательность (например, c-MYC). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения слитый пептид - это пептид по формуле (I): последовательность пептидного переносчика - MYC последовательность. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения слитый пептид, предложенный в настоящем описании, включает (а) последовательность пептидного переносчика; (b) MYC последовательность; и (с) одну или несколько молекул, которые связывают последовательность пептидного переносчика и MYC последовательность (то есть "X"). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения слитый пептид - это пептид по формуле (II): последовательность пептидного переносчика X-MYC последовательность, в которой -X- - это молекула, которая связывается с последовательностью пептидного переносчика и MYC последовательностью. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения -Х- аминокислота. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения -Хкак минимум одна аминокислота. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, индуцирование MYC экспрессии, Мус активности или их комбинации, в клетке (например, клетке млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, пролиферацию или индуцирование пролиферации клетки (например, клетки млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетки (например, клетка млекопитающего) пролиферируют, как минимум, до формирования лимфомы (например, В-клеточной лимфомы). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения пролиферирующие клетки это клетки лимфомы. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетки (например,клетки млекопитающего) не требуют слияния и(или) не сливаются, например, с миеломой до пролиферации (например, чтобы обеспечить клеточную популяцию, достаточную для продуцирования значительного или терапевтического количества антитела в приемлемый период времени). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения способ включает, кроме того, извлечение из клетки (например, клетки млекопитающего) антитела, которое специфически связывается с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения полученное антитело растворимо и не является мембраносвязанным. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) (например, клетка млекопитающего) находится в организме (например, млекопитающем). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это "xenomouse". В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) включает, кро- 18021131 ме того, нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), которая кодирует трансгенную онкопептидную последовательность (например, MYC). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) далее включает трансгенную нуклеиновокислотную последовательность, кодирующую tTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность(например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая tTA пептид или rtTA пептид, включает В-клетка-селективный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующей tTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая tTA пептид или rtTA пептид, включает MMTV промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующей tTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения контактирование клетки, включающей Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием, включает введение (или "доставку") отобранного антигена в организм (например, млекопитающее) любым подходящим образом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид, включающий PTD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это TAT-MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-ER. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-GR. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм представляет собой "xenomouse". В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) включает, кроме того, нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную нуклеиновокислотная последовательность),кодирующую отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность(например,трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая отобранный антиген, включает В-клетка-селективный промотор,функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующей отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, доставку доксициклина, тетрациклина или их аналога в организм (например, млекопитающее) для подавления tTA-зависимой экспрессии Мус пептида. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, доставку доксициклина, тетрациклина или их аналога в организм (например, млекопитающее) в течение периода времени, достаточного для подавленияtTA-зависимой экспрессии трансгенного MYC гена, и вывода доксициклина, тетрациклина или их аналога через определенный период времени, чтобы индуцировать tTA-зависимую экспрессию трансгенногоMYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, извлечение из организма (например, млекопитающего; например, "xenomouse") клетки (например,В-клетки), которые экспрессируют антитело, специфически связывающееся с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того,извлечение из клеток (например, клетки млекопитающего) (например, В-клетки) антитела, специфически связывающегося с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, извлечение из организма (например, млекопитающего) антитела, специфически связывающегося с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представлен способ продуцирования антитела, которое специфически связывается с антигеном, включающий: контактирование клетки с отобранным антигеном и онкопептидом (например, Мус). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это пептид, который способствует выживанию и(или) пролиферации клетки. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка представляет собой клетку млекопитающего. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка представляет собой человеческую клетку. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - это В-клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - это кроветворная клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - человеческая В-клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - человеческая кроветворная клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) экспрессирует CD79 на его клеточной поверхности. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) включает интактный "реутилизационный" путь для пуринового биосинтеза и является толерантной и(или) анергической к отобранному антигену. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) - это В-клетка, В-клеткапредшественник или прародитель или кроветворная стволовая клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения антитело специфически связывается с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид представляет собой пептид, способ- 19021131 ствующий выживанию и(или) пролиферации клетки. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) контактирует с отобранным антигеном с помощью любого подходящего способа. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) включает нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), которая кодирует отобранный антиген и при этом контактирует с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген - это собственный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения, в которых используется В-клеткапредшественник или прародитель или кроветворная стволовая клетка, описанный способ включает, кроме того, разрешение или индуцирование дифференциации клетки (например, клетки млекопитающего) в В-клетку. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид,включающий рецептор, который активирует активность онкопептида (например, выживание и(или) пролиферацию клетки), когда он связан с лигандом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рецептор представляет собой рецептор эстрогена (ER). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рецептор представляет собой глюкокортикоидный рецептор (GR). В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-ER слитый пептид. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-GR слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, контактирование клетки, включающей рекомбинантный онкопептид, являющийся слитым пептидом, включающим рецептор с лигандом, который связывается с рецептором. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, контактирование клетки (например, клетки млекопитающего), включающей Myc-ER слитый пептид, с модулятором рецептора эстрогена(например, агонистом или антагонистом ER). В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, контактирование клетки (например, клетки млекопитающего), включающей Myc-GR слитый пептид, с модулятором глюкокортикоидного рецептора (например, агонистом или антагонистом GR). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид,который включает (а) последовательность пептидного переносчика (например, ТАТ); и (b) MYC последовательность (например, c-MYC). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения слитый пептид - это пептид по формуле (I): последовательность пептидного переносчика - MYC последовательность. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения слитый пептид, предложенный в настоящем описании, включает (а) последовательность пептидного переносчика; (b) MYC последовательность; и (с) одну или несколько молекул, которые связывают последовательность пептидного переносчика и MYC последовательность (то есть, "X"). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения слитый пептид - это пептид по формуле (II): последовательность пептидного переносчика X-MYC последовательность, где -X- - это молекула, которая связывается с последовательностью пептидного переносчика и MYC последовательностью. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения -X- - это аминокислота. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения -X- это как минимум одна аминокислота. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения способ включает, кроме того, извлечение из клетки (например, клетки млекопитающего) антитела, которое специфически связывается с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения полученное антитело растворимо и не является мембраносвязанным. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения контактирование клетки, включающей Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид, ТАТ-Мус слитый пептид), включает введение (или "доставку") отобранного антигена в организм (например, млекопитающее) любым подходящим образом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид - это ТАТ-Мус пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это "xenomouse". В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) включает, кроме того, нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную нуклеиновокислотную последовательность), кодирующую отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая отобранный антиген, включает В-клетка-селективный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующей отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, извлечение из организма (например, млекопитающего) клеток (например, В-клеток), которые экспрессируют антитело, специфически связывающееся с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, извлечение из клеток(например, клеток млекопитающего), В-клеток) антитела, специфически связывающегося с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает,кроме того, извлечение из организма (например, млекопитающего) антитела, специфически связывающегося с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представлен способ продуцирования антитела, которое специфически связывается с антигеном, включающий: контактирование клетки с отобранным антигеном, в котором клетка (например, клетка млекопитающего) сверхэкспрессирует онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид - это ТАТ-Мус пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это пептид, способствующий выживанию и(или) пролиферации клетки. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - это клетка млекопитающего. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - это человеческая клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - это В-клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - это кроветворная клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - это человеческая В-клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка - это человеческая кроветворная клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) экспрессирует CD79 на его клеточной поверхности. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего), включающая нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), включает интактный "реутилизационный" путь для пуринового биосинтеза. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего), включающая нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), включает интактный "реутилизационный" путь для пуринового биосинтеза и является толерантной и(или) анергической к отобранному антигену. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) - это В-клетка, В-клетка-предшественник или прародитель или кроветворная стволовая клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения антитело специфически связывается с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид представляет собой пептид, способствующий выживанию и(или) пролиферации клетки. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых случаях понижающая регуляция Мах-1 гена и(или) полипептида повышающе регулирует экспрессию MYC прото-онкогена и(или) полипептида, кодированного MYC прото-онкогеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых случаях понижающая регуляция Mxi-1 гена и(или) полипептида повышающе регулирует экспрессию MYC прото-онкогена и(или) полипептида, кодированногоMYC прото-онкогеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула это антагонист MAD. В некоторых случаях понижающая регуляция MAD-1 гена и(или) полипептида повышающе регулирует экспрессию MYC прото-онкогена и(или) полипептида, кодированного MYC протоонкогеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с shRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) контактирует с отобранным антигеном любым подходящим образом. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) включает нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), кодирующую нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), которая кодирует отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген - это собственный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения, в которых используются В-клетка предшественник или прародитель или кроветворная стволовая клетка, описанный способ включает, кроме того, разрешение или индуцирование дифференциации клетки (например, клетки млекопитающего) в В-клетку. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения MYC последовательность (например, трансгенная последовательность) включает, кроме того, В-клетка-селективный промотор или индуцибельный промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная последовательность), кодирующая отобранный анти- 21021131 ген, включает, кроме того, В-клетка-селективный промотор или индуцибельный промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клетка-селективный промотор, в виде неограничивающего примера, представляет собой Е промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцибельный промотор включает, в виде неограничивающего примера, один или несколько TRE. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) включает, кроме того, нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), которая кодирует tTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая tTA пептид или rtTA пептид, включает Вклетка-селективный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующейtTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность),кодирующая tTA пептид или rtTA пептид, включает MMTV промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующей tTA пептид или rtTA пептид. Кроме того, в некоторых примерах осуществления настоящего изобретения, в которых индуцибельный промотор включает один или несколько TRE, описанный способ включает, кроме того, контактирование клетки (например, клетки млекопитающего) с доксициклином, тетрациклином или их аналогом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид,включающий рецептор, который активизирует онкопептидную активность (например, выживание и(или) пролиферацию клетки), когда он связан с лигандом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рецептор представляет собой рецептор эстрогена (ER). В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-ER слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рецептор представляет собой глюкокортикоидный рецептор (GR). В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-GR слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того,контактирование клетки, включающей слитый пептид, содержащий рецептор, с лигандом, который специфически связывается с рецептором. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, контактирование клетки, включающей Myc-ER пептид, с модулятором рецептора эстрогена (например, агонистом или антагонистом ER). В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ, кроме того, включает контактирование клетки,включающей Myc-GR пептид, с модулятором глюкокортикоидного рецептора (например, GR агонистом или антагонистом). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид,который включает (а) последовательность пептидного переносчика (например, ТАТ); и (b) MYC последовательность (например, c-MYC). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения слитый пептид - это пептид по формуле (I): последовательность пептидного переносчика - MYC последовательность. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения представленный слитый пептид включает (а) последовательность пептидного переносчика; (b) MYC последовательность; и (с) одну или несколько молекул, которые связывают последовательность пептидного переносчика и MYC последовательность (то есть, "X"). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения слитый пептид это пептид по формуле (II): последовательность пептидного переносчика -X-MYC последовательность,где -Х- - это молекула, которая связывается с последовательностью пептидного переносчика и MYC последовательностью. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения -X- - это аминокислота. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения -X- - это как минимум одна аминокислота. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, индуцирование MYC экспрессии, Мус активности или их комбинации, в клетке (например, клетке млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, пролиферацию или индуцирование пролиферации клетки (например, клетка млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетки (например, клетки млекопитающего) пролиферируют, как минимум, до формирования лимфомы (например, В-клеточной лимфомы). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения пролиферирующие клетки это клетки лимфомы. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетки (например,клетки млекопитающего) не требуют слияния и(или) не сливаются, например, с миеломой, до пролиферации (например, чтобы обеспечить клеточную популяцию, достаточную для продуцирования значительного или терапевтического количества антитела в приемлемый период времени). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения способ включает, кроме того, извлечение антитела, которое специфически связывается с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения полученное антитело растворимо и не является мембраносвязанным. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения полученное антитело мембраносвязанное. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения полученное антитело внут- 22021131 риклеточное. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) находится в организме (например, млекопитающем). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это "xenomouse". В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) включает нуклеиновокислотную последовательность(например, трансгенную последовательность), которая кодирует онкопептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) включает, кроме того,нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), которая кодирует tTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая tTA пептид или rtTA пептид, включает В-клетка-селективный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующей tTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая tTA пептид или rtTA пептид, включает MMTV промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующей tTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения контактирование клетки (например,клетки млекопитающего), включающей MYC (например, трансгенный MYC), включает введение (или"доставку") отобранного антигена в организм (например, млекопитающее) любым подходящим образом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) также включает нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), кодирующую отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая отобранный антиген, включает В-клетка-селективный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующей отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, доставку доксициклина, тетрациклина или их аналога в организм (например, млекопитающее) для подавления tTA-зависимой экспрессии нуклеиновокислотной последовательности (например, трансгенной нуклеиновокислотной последовательности), кодирующей Мус пептид (например, рекомбинантный Мус пептид (например, Мус слитый пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид, включающий PTD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это TATMYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-ER. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-GR. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ, кроме того, включает (а) доставку доксициклина, тетрациклина или их аналога в организм (например, млекопитающее) в течение периода времени, достаточного для подавления tTA-зависимой экспрессии нуклеиновокислотной последовательности (например, трансгенной нуклеиновокислотной последовательности), кодирующей Мус пептид, и (b) вывод доксициклина, тетрациклина или их аналога через определенный период времени для индуцирования tTA-зависимой экспрессии нуклеиновокислотной последовательности (например, трансгенной нуклеиновокислотной последовательности), кодирующей Мус пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ, кроме того,включает извлечение из организма (например, млекопитающего) клетки (например, В-клетки), экспрессирующей антитело, которое специфически связывается с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ, кроме того, включает извлечение из клетки (например, клетки млекопитающего) (например, В-клетки) антитела, которое специфически связывается с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ, кроме того, включает извлечение из организма (например, млекопитающего) антитела,которое специфически связывается с отобранным антигеном. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения в настоящем описании представлен способ продуцирования антитела, которое специфически связывается с антигеном, включающий: введение (или "доставку") отобранного антигена в организм (например, млекопитающее), в котором организм (например, млекопитающее) включает нуклеиновокислотную последовательность (например,трансгенную последовательность), кодирующую онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус), и включает индуцибельный промотор или В-клетка-селективный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания кодированного онкопептида. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид, включающий PTD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это TATMYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-ER. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-GR.- 23021131 В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм представляет собой "xenomouse". В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения в настоящем описании представлен способ продуцирования антитела, которое специфически связывается с антигеном, включающий: а. обеспечение клетки (например, В-клетки), экспрессирующей антитело, которое специфически связывается с антигеном, в котором клетка (например, клетка млекопитающего) включает онкопептид(например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус) или нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), кодирующую онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус); иb. индуцирование активности онкопептида в клетке (например, клетке млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид, включающий PTD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это TATMYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-ER. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-GR. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) получена путем контактирования клетки с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген - это собственный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения антитело специфически связывается с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка представляет собой человеческую клетку. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) - это В-клетка, В-клетка-предшественник или прародитель или кроветворная стволовая клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клетка - анергическая Вклетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) экспрессирует CD79 на его клеточной поверхности. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клетка - это мышиная В-клетка. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего; например, В-клетка) взята из организма (например, млекопитающего; например, xenomouse), в который был введен отобранный антиген (то есть, организм инокулирован отобранным антигеном или иммунизирован против отобранного антигена). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это "xenomouse". В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) включает онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус) или нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), кодирующую онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид, включающий PTD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это TAT-MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-ER. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид это Myc-GR. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм (например, млекопитающее) включает, кроме того, нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), которая кодирует отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения MYC последовательность (например, трансгенная последовательность) включает,кроме того, В-клетка-селективный промотор или индуцибельный промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная последовательность), кодирующая отобранный антиген, также включает В-клетка-селективный промотор или индуцибельный промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Вклетка-селективный промотор, в виде неограничивающего примера, представляет собой Е промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцибельный промотор включает, в виде неограничивающего примера, один или несколько TRE. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения, в которых используется В-клеткапредшественник или прародитель или кроветворная стволовая клетка, описанный способ включает, кроме того, разрешение или индуцирование дифференциации клетки (например, клетки млекопитающего) в В-клетку. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения способ включает, кроме того, извлечение антитела. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения активность онкопептида индуцирует экспансию популяции клеток (например, клетки млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) (например, В-клетка) находится в организме (например, млекопитающем) и индуцирование активности онкопептида (например, рекомбинантного онкопептида; например, Мус) в клетке (например,в клетке млекопитающего) (например, в В-клетке) происходит in vivo. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это "xenomouse". В некоторых примерах осуществления на- 24021131 стоящего изобретения способ включает, кроме того, введение (или "доставку") онкопептида (например,рекомбинантного онкопептида; например, Мус) или нуклеиновокислотной последовательности (например, трансгенной нуклеиновокислотной последовательности), кодирующей онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус), в клетку (например, клетку млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид или нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая онкопептид, интродуцируется в клетку (например, в клетку млекопитающего) ex vivo, а затем клетка (например, клетка млекопитающего) интродуцируется в организм (например, млекопитающее). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это "xenomouse". В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения процесс включает введение ("доставку") онкопептида (например, рекомбинантного онкопептида; например, Мус) в клетку (например, в В-клетку) ex vivo. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус) включает трансдукционный домен белка, например, HIV-1 Tat или Vpr (например, Tat-Myc или Vpr-Myc). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцирование активности онкопептида включает индуцирование экспрессии нуклеиновокислотной последовательности, кодирующей онкопептид, индуцирующей активность онкопептида, или его комбинацию. В некоторых случаях индуцирование активности онкопептида включает индуцирование сверхэкспрессии онкопептида. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцибельная экспрессия или сверхэкспрессия онкопептида достигается путем активации индуцибельного промотора нуклеиновокислотной последовательности (например, трансгенной последовательности), которая индуцирует экспрессию онкопептида. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула представляет собой антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1,Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с shRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая онкопептид(например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус), включает промотор, например, В-клеткаселективный промотор или индуцибельный промотор, функционально связанный с открытой рамкой считывания, кодирующей онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус). В некоторых конкретных примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая онкопептид(например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус), включает В-клетка-селективный промотор,функционально связанный с открытой рамкой считывания. В некоторых конкретных примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая онкопептид, включает индуцибельный промотор,функционально связанный с открытой рамкой считывания для Мус пептида. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцибельный промотор включает один или несколько TRE, а клетка (например, клетка млекопитающего), кроме того, экспрессирует tTA пептид или rtTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) экспрессирует tTA пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид это слитый пептид, включающий PTD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это TAT-MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид- это Myc-ER. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Мус-GR. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид,индуцибельно активизированный. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид, включающий рецептор, который активизирует характеристику выживания и(или) пролиферативную характеристику онкопептида при модулировании (то есть, когда он связан с лигандом, например, агонистом или антагонистом). В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус) - это слитый пептид,включающий рецептор эстрогена (например, Myc-ER). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцирование активности онкопептида в клетке (например, клетке млекопитающего) включает контактирование клетки (например, клетки млекопитающего) с ER лигандом. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид;- 25021131 например, Мус) - это слитый пептид, включающий глюкокортикоидный рецептор (например, Myc-GR). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцирование активности онкопептида в клетке (например, клетке млекопитающего) включает контактирование клетки (например, клетки млекопитающего) с GR лигандом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид,который включает (а) последовательность пептидного переносчика (например, ТАТ); и (b) MYC последовательность (например, c-MYC). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения слитый пептид - это пептид по формуле (I): последовательность пептидного переносчика - MYC последовательность. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения слитый пептид, предложенный в настоящем описании, включает (а) последовательность пептидного переносчика; (b) MYC последовательность; и (с) одну или несколько молекул, которые связывают последовательность пептидного переносчика и MYC последовательность (то есть, "X"). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения слитый пептид - это пептид по формуле (II): последовательность пептидного переносчика X-MYC последовательность, где -Х- - это молекула, которая связывается с последовательностью пептидного переносчика и MYC последовательностью. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения -Х- - это аминокислота. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения -Х- это как минимум, одна аминокислота. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего; например, В-клетка), включающая онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус) или нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), кодирующую онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус), находится в организме (например, млекопитающем). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид - это ТАТ-Мус пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это "xenomouse". В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения в организм вводится антиген (то есть, организм иммунизирован против антигена, инокулирован антигеном) и он может дать иммунную реакцию на отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм подвергается воздействию отобранного антигена любым подходящим образом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген вводится с адъювантом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген соединен ковалентно с носителем. Примеры носителей включают, помимо прочего, бычий сывороточный альбумин, гемоцианин лимфы улитки, овальбумин и гироглобулин. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка или организм, используемые в представленном в настоящем описании способе, включает клетку или организм, которые индуцибельно сверхэкспрессируют онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус) и разработаны для экспрессии антигена. Такие клетки и организмы получают любым подходящим способом, включающим, в виде неограничивающего примера, ретровирусную опосредованную трансдукцию кроветворных стволовых клеток костного мозга, продуцирование трансгенных организмов (или скрещивание сверхэкспрессирующих онкопептид организмов с организмом, который экспрессирует отобранный антиген), или любым другим способом для доставки гена в клетку (например, клетку млекопитающего) или организм. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула представляет собой антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с shRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) или организм выдерживается в условиях, в которых онкопептид (например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус) не сверхэкспрессируется до тех пор,пока не потребуется продуцирование антител. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) или организм выдерживается в условиях, в которых активность онкопептида не индуцируется до тех пор, пока не потребуется продуцирование антител. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетка (например, клетка млекопитающего) или организм выдерживается в условиях, в которых онкопептид сверхэкспрессируется в клетке- 26021131 В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клетки, специфичные к гетерологичному антигену, собственному антигену или аутоантигену, толерантны к гетерологичному антигену,собственному антигену или аутоантигену. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцирование активности онкопептида (например, рекомбинантного онкопептида; например, Мус) в толерантных В-клетках вызывает прерывание толерантности к антигену и побуждает продуцирование антител, специфически связывающихся с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения толерантная В-клетка анергична к антигену. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения толерантная В-клетка толерантна к антигену, иммунологически подобному аутоантигену или собственному антигену. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения толерантная В-клетка толерантна к антигену, который является гетерологичным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения гетерологичный антиген гомологичен к аутоантигену или собственному антигену. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения специфичные к отобранному антигену В-клетки, полученные путем сверхэкспрессии MYC, удаляются из организма и клонируются для выработки продуцирующих иммортальные антитела В-клеток без необходимости слияния клеток с миеломной клеткой-партнером. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид - это ТАТ-Мус пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения в настоящем описании представлен способ продуцирования антитела, которое специфически связывается с антигеном, включающий: а) обеспечение В-клетки, толерантной к антигену, иb) индуцирование активности онкопептида (например, рекомбинантного онкопептида; например,Мус) в В-клетке, толерантной к отобранному антигену. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид, включающий PTD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это TATMYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид -Myc-ER. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Мус-GR. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцирование активности онкопептида индуцирует экспансию В-клеточной популяции. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения способ включает, кроме того, извлечение антитела из множества рекомбинантных В-клеток, полученных путем экспансии В-клетки. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения в настоящем описании представлен способ продуцирования антитела, специфически связывающегося с антигеном, включающий: введение в иммунодефицитный организм (например, млекопитающее) множества кроветворных стволовых клеток (например, рекомбинантных кроветворных стволовых клеток), которые включают нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), кодирующую онкопептид(например, рекомбинантный онкопептид; например, Мус); и контактирование отобранного антигена с иммунодефицитным организмом (например, млекопитающим). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид, включающий PTD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это TAT-MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-ER. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-GR. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это "xenomouse". В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Мус пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид, включающийPTD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это TAT-MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид индуцибельно активирован (например, индуцибельно экспрессирован или функция индуцибельно активирована). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это слитый пептид, включающий рецептор, а функция онкопептида индуцибельно активирована модулированием или связыванием с рецептором (например, с лигандом, таким как агонист или антагонист). В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - это Myc-ER. В конкретных примерах осуществления настоящего изобретения онкопептид - Myc-GR. В других примерах осуществления настоящего изобретения способ включает, кроме того, индуцирование активности онкопептида (например, рекомбинантного онкопептида; например, Мус) в организме (например, млекопитающем). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это "xenomouse". Например, в отношении Myc-ER активность Мус факультативно индуцируется введением лиганда рецептора эстрогена в иммунодефицитный организм (например, млекопитающее); в отношении MYC нуклеиновокислотной последовательности с индуцибельным промотором, включающим один или несколько TRE, Мус активность индуцируется доставкой доксицик- 27021131 лина, тетрациклина или их аналога в иммунодефицитный организм (например, млекопитающее); или в отношении Myc-GR активность Мус индуцируется введением лиганда глюкокортикоидного рецептора в иммунодефицитный организм. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки,кроме того, включают нуклеиновокислотную последовательность (например, трансгенную последовательность), кодирующую полипептид, который ингибирует апоптоз (например, Bcl-2, Bcl-x, Mel 1). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ включает, кроме того, индуцирование множества кроветворных стволовых клеток к дифференциации в В-клетки. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения предложенный в настоящем описании способ включает, кроме того, извлечение множества В-клеток, экспрессирующих антитело, которое специфически связывается с отобранным антигеном, из иммунодефицитного организма (например, млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ, кроме того,включает извлечение антитела из иммунодефицитного организма (например, млекопитающего) или из множества В-клеток, которые экспрессируют антитело. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая онкопептид,включает индуцибельный промотор или В-клетка-селективный промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения нуклеиновокислотная последовательность (например, трансгенная нуклеиновокислотная последовательность), кодирующая онкопептид, включает индуцибельный промотор, содержащий один или несколько TRE. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки экспрессируют tTA или rtTA. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения описанный способ, кроме того, включает доставку доксициклина, тетрациклина или их аналога в иммунодефицитный организм (например, млекопитающее) для подавления tTAзависимой трансактивации, и вывод доксициклина, тетрациклина или их аналога для индуцированияtTA-зависимой трансактивации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Вклетка-селективный промотор - это E промотор. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитный организм (например, млекопитающее) получен путем облучения организма (например, млекопитающего). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитный организм (например, млекопитающее) - это Rag-1ko, Rag-2, SCID, DNA-PK, Ku70, Ku80, XRCC4 или МТ мышь. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это "xenomouse". В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген вводится в организм любым подходящим способом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген - собственный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это иммунодефицитное млекопитающее. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это иммунодефицитная мышь. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это иммунодефицитная "xenomouse". В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитный организм (например, млекопитающее) экспрессирует отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитный организм (например, млекопитающее), экспрессирующий отобранный антиген, включает экзогенную нуклеиновокислотную последовательность, которая кодирует отобранный антиген. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения отобранный антиген вводится трансфекцией нуклеиновокислотным экспрессирующим вектором или инфицированием рекомбинантным вирусным экспрессирующим вектором. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения рекомбинантный вирусный экспрессирующий вектор представляет собой рекомбинантный лентивирус. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения антитело специфически связывается с отобранным антигеном. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид - это слитый пептид. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения Мус пептид - это ТАТ-Мус пептид в соответствии с приведенным в данной публикации описанием. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки,сверхэкспрессирующие МУС, используются для реконструирования периферических лимфоидных компартментов [частей] иммунодефицитных организмов. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия МУС индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинация. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки сshRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитные организмы становятся иммунодефицитными под воздействием смертельного облучения. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитные организмы - это мыши, облученные летальными дозами. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитный организм - это любая иммунодефицитная или больная СПИДом мышь. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения иммунодефицитное животное - это Rag-1 нокаутная, Rag-2, SCID, DNA-PK, Ku70, Ku80, XRCC4 или МТ мышь. Периферический лимфоидный компартмент иммунодефицитного животного обычно реконструируется через 8-12 недель после трансплантации кроветворных стволовых клеток. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организмы, реконструированные кроветворными стволовыми клетками, которые сверхэкспрессируют MYC, кроме того, изменены генетически для экспрессии отобранного антигена. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения в организмы, реконструированные кроветворными стволовыми клетками, которые сверхэкпрессируют MYC, вводится отобранный антиген (то есть, организмы иммунизированы отобранным антигеном или инокулированы против отобранного антигена). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения В-клеточные популяции (например,анергические В-клетки, такие как AN1/T3) выделены из организмов, реконструированных кроветворными стволовыми клетками, и используются в любом описанном в данной публикации способе. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки, которые сверхэкспрессируют MYC, реконструируют периферический кроветворный компартмент иммунодефицитных организмов, подвергаются воздействию отобранного антигена и превращаются в антиген-специфическиеAN1/T3 клеточные популяции. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения индуцирование Мус активности в этих клетках порождает иммортальные антиген-специфические В-клетки. Используемые в настоящем описании кроветворные стволовые клетки получают любым подходящим способом. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки выделены из организма, который сверхэкспрессирует Мус. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула -это антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинация. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист MAD. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с siRNA молекулой для Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинации. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организм - это "xenomouse". В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки выделены из организмов, которые включают антиген-специфические В-клеточные популяции. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки выделены из организмов, которые включают антигенсвязывающие В-клеточные популяции. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки выделены из организмов, которые включают антигенспецифические AN1/T3 клеточные популяции. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки выделены из организмов, которые включают антигенспецифические анергические В-клеточные популяции. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения кроветворные стволовые клетки выделены из организмов дикого типа. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организмы - это мыши (например, трансгенные мыши или генетически измененные мыши). В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организмы лечат с помощью 5FU для пополнения долгоживущих кроветворных стволовых клеток и индуцирования их пролиферации in vivo. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организмы (например, мышей) лечат с помощью 5FU в дозировке от 0,01 до 100 мг/мышь. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организмы (например, мышей) лечат с помощью 5FU в дозировке от 0,1 до 50 мг/мышь. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организмы (например, мышей) лечат с помощью 5FU в дозировке от 1 до 10 мг/мышь. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения организмы (например, мышей) лечат с помощью 5FU в дозировке 5 мг/мышь. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения клетки костного мозга,содержащие 5FU, пополнившие популяции кроветворных стволовых клеток, выделяются любым подходящим способом из бедренных костей и большеберцовых костей организмов, которые сверхэкспрессируют MYC. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения сверхэкспрессия MYC индуцируется контактированием клетки с малой молекулой, биопрепаратом, пептидом, антителом или их комбинацией. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1, Mxi-1, MAD или их комбинация. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Мах-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения малая молекула - это антагонист Mxi-1. В некоторых примерах осуществления настоящего изо- 29