Композиции со сниженным образованием димеров

КОМПОЗИЦИИ СО СНИЖЕННЫМ ОБРАЗОВАНИЕМ ДИМЕРОВ Изобретение относится к применению невосстанавливающего углевода или производного углевода и по крайней мере одного агента, который ингибирует образование димеров в лиофилизированной композиции, включающей по крайней мере один пептид, который содержит свободный остаток цистеина, для предоставления лиофилизированной композиции с улучшенной долговременной стабильностью при хранении. Область изобретения Настоящее изобретение относится к использованию невосстанавливающего углевода или производного углевода и по крайней мере одного агента, который ингибирует образование димеров в лиофилизированной композиции, включающей по крайней мере один пептид, который содержит свободный остаток цистеина, для предоставления лиофилизированной композиции с увеличенной стабильностью при длительном хранении. Предпосылки изобретения Существуют различные способы, известные в данной области, которые применяются для сохранения скоропортящихся материалов или для того, чтобы сделать материал более подходящим для транспортировки. Для фармацевтических, биотехнологических или пищевых материалов типичным способом является лиофильная сушка (также известная как лиофилизация или сублимационная сушка). Она представляет собой процесс обезвоживания, который состоит в замораживании материала и затем снижения окружающего давления и добавления тепла, достаточного только для того, чтобы дать возможность замерзшей в материале воде испаряться из твердой фазы непосредственно в газообразную. Образующийся лиофилизированный продукт можно затем легко восстановить в растворе для дальнейшего использования. Преимущество лиофилизированного продукта состоит в том, что он обычно является более устойчивым во время хранения и транспортировки и имеет более длительный срок годности, чем эквивалентный материал в растворе. Однако существуют некоторые проблемы с высушиванием сублимацией, состоящие в том, что во время процессов замораживания и высушивания может произойти повреждение сохраняемого материала. Эти проблемы до некоторой степени решаются добавлением криопротекторов и протекторов при лиофилизировании к высушиваемому сублимацией материалу. Однако менее осознанным является то, что некоторые скоропортящиеся материалы, особенно пептиды, которые содержат по крайней мере один свободный остаток цистеина, подвергаются деградации и повреждаются даже после завершения процесса сублимационной сушки. Т.е. хотя высушивание сублимацией обладает предохраняющим эффектом, лиофилизированные продукты, включая пептиды, которые содержат по крайней мере один свободный остаток цистеина, часто обладают более коротким, чем требуется, сроком годности. Существует очевидная потребность в средствах улучшения стабильности лиофилизированных композиций, включающих такие пептиды. Краткое описание изобретения Изобретение относится к способу получения устойчивой лиофилизированной композиции, содержащей по крайней мере один пептид длиной 8-30 аминокислот, включающий по крайней мере один свободный остаток цистеина, где указанный способ включает:a) подготовку композиции, содержащей в растворе (i) трегалозу в качестве единственного невосстанавливающего углевода, (ii) тиоглицерин и (iii) по крайней мере один указанный пептид; иb) лиофилизацию композиции, образующейся на стадии (а). Образующаяся лиофилизированная композиция может быть устойчивой в течение по крайней мере 2 лет при хранении при температуре 2-8 С. Изобретение далее относится к устойчивой, лиофилизированной композиции, содержащей по крайней мере один пептид для толеризации или иммунизации длиной 8-30 аминокислот, включающий по крайней мере один свободный остаток цистеина, тиоглицерин и трегалозу в качестве единственного невосстанавливающего углевода. Изобретение также относится к способам восстановления стабильной лиофилизированной композиции и к восстановленным таким образом растворам. Описание чертежей Фиг. 1-83 демонстрируют стабильность пептидов, хранившихся при различных условиях, как обозначено, при содержании в различных лиофилизированных композициях, как описано в примерах(Т=трегалоза, S=сахароза, М=маннит, TG=тиоглицерин, G=глицин, Met=метионин). Время (недели) показано по оси X. Количество недеградировавшего пептида, присутствующего в растворе, восстановленном из данной композиции, показано на оси Y. Количество показано как процентное отношение относительно количества стандартного пептида MLA07, который не высушивался сублимацией. Каждая фигура демонстрирует семь различных наборов данных, соответствующих каждому из следующих различных пептидов: MLA05 (темная линия, маленькие круглые точки); MLA12 (темная линия, квадратные точки),MLA03 (светло-серая линия, треугольные точки); MLA14 (светло-серая линия, х-образные точки);(темная линия; вертикальные точки в форме линий). Данные были получены после сублимационного высушивания смеси этих семи пептидов в каждой композиции. Фиг. 84 демонстрирует стабильность при 30 С/65% RH более 12 месяцев смеси из семи пептидов:SEQ ID NO: 1-83 представляют последовательности пептидов, которые особенно предпочтительны для включения в композиции по изобретению. SEQ ID NO: 84-86 представляют последовательности дополнительных пептидов, которые могут быть включены в композиции по изобретению. Подробное описание изобретения Сублимационное высушивание. Сублимационное высушивание представляет собой сложную операцию, при которой растворитель(обычно вода) удаляется из продукта путем отгонки. Как известно, отгонка происходит, когда замороженная жидкость переходит непосредственно в газообразную фазу, не проходя через жидкую фазу. Отгонка представляет собой функцию давления и температуры, баланс которых является центральным для успешного высушивания сублимацией. Процесс высушивания сублимацией состоит из трех стадий: замораживание, первичное высушивание и вторичное высушивание. Во время стадии замораживания раствор преобразуется в твердое тело. Процедура замораживания должна тщательно контролироваться, поскольку скорость замораживания влияет на размер ледяных кристаллов, образующихся в продукте, которые могут влиять на стабильность продукта и могут также влиять на скорость высушивания во время первичных и вторичных фаз высушивания. Очень важно выполнять стадию замораживания при температуре ниже критической. Эта температура представляет собой эвтектическую температуру (Teut) для кристаллических материалов или температуру перехода в стеклообразное состояние максимально замороженного концентрированного раствора(Tg') для аморфных продуктов. Во время первичного высушивания лед удаляется из замороженного продукта посредством сублимации, приводя к сухому, структурно неповрежденному продукту. Это требует тщательного контроля температуры полки и давления в камере высушивающего устройства. Скорость сублимации льда из замороженного продукта зависит от множества факторов, которые должны оцениваться специалистом в данной области. Важно, что во время первичного высушивания температура продукта в сублимационной поверхности раздела (Тр) не должна превышать "критическую температуру" состава, т.е. не должна достичь достаточной текучести, чтобы течь и таким образом разрушить структуру спекшегося материала. Она также известна как температура разрушения (Тс) и обычно является на несколько градусов выше,чем Tg'. Как упомянуто выше, критическая температура представляет собой Teut для в основном кристаллических и Tg' или Тс для аморфных материалов. Кристаллические материалы легче высушивать сублимацией, так как Teut обычно высокая (например, Teut очень популярного агента-наполнителя маннита составляет -3 С). Кроме того, образующийся высушиванием сублимацией "спекшийся материал" обычно обладает привлекательным внешним видом в случае, когда получается из кристаллических материалов. Однако кристаллические материалы часто не очень хорошо подходят для стабилизирования пептидов во время процессов замораживания и высушивания. Здесь обычно используются аморфные сахара, полиолы и другие эксципиенты. Недостаток состоит в том, что Tg' этих веществ обычно намного ниже, чем эвтектические температуры (например, сахароза: -32 С). После завершения первичного высушивания и сублимации всего льда связанная влага все еще присутствует в продукте. Продукт кажется сухим, но остаточное влагосодержание может достигать 7-8%. Длительное высушивание при более высокой температуре полки необходимо, чтобы уменьшить остаточное влагосодержание до оптимальных значений (для многих составов 1%). Этот процесс, или вторичное высушивание, также известен как изотермическая десорбция, поскольку связанная вода десорбируется из продукта. Вторичное высушивание обычно продолжается при температуре продукта выше, чем температура окружающей среды, но все еще ниже температуры стеклования (Tg) или температуры плавления состава. Следует принять во внимание, что специалист понимает необходимость осторожного рассмотрения вышеупомянутых параметров, с надлежащим рассмотрением, данным различиям в свойствах между различными композициями и потенциальной потребностью в способе проб и ошибок, чтобы установить оптимальные условия замораживания и высушивания. Есть несколько преимуществ процесса сублимационного высушивания для стабилизации чувствительных продуктов (например, белков, пептидов и т.д.). Например, должным образом высушенные сублимацией продукты часто не нуждаются в охлаждении, они могут храниться при температурах окружающей среды и могут быть быстро полностью восстановлены водой или другим подходящим растворителем для инъекции. Обычно предполагается, что высушенная сублимацией композиция должна обладать устойчивым сроком годности более 2 лет. В этом контексте под устойчивым обычно подразумевается, что высушенная сублимацией композиция может быть без труда восстановлена и что восстановленный раствор является подходящим для фармацевтического применения. Под устойчивым также принимают во внимание отсутствие каких-либо изменений в физическом или косметическом признаках продукта, за исключением разрушения высушенного сублимацией спекшегося материала, до восстановле-2 019923 ния. Пригодность для фармацевтического применения зависит от рассматриваемых биологического материала и конкретного использования, но может обычно легко оцениваться специалистом. В общих терминах ожидается, что биологический материал в восстановленном растворе должен обладать активностью, сопоставимой с эквивалентным материалом в растворе перед высушиванием сублимацией. В случае восстановленного раствора, содержащего пептид или белок, восстановленный раствор должен обычно рассматриваться подходящим для фармацевтического использования, особенно для инъекции, если он является стерильным и свободным от видимых макрочастиц. Существует ряд трудностей с высушиванием сублимацией, которые могут сократить устойчивый срок годности продукта, иногда драматически, особенно для композиций, включающих белки или пептиды, имеющие по крайней мере один свободный остаток цистеина. Такие материалы могут претерпевать необратимое изменение или деградацию во время процесса сублимационного высушивания, но также и после этого процесса, т.е. во время хранения высушенного сублимацией продукта. Деградация во время процесса высушивания сублимацией может произойти во время замораживания, во время высушивания или и во время замораживания, и во время высушивания. Если деградация продукта происходит во время замораживания, обычно добавляют "криопротектор". Криопротекторы стабилизируют во время замораживания, но не обязательно стабилизируют во время лиофилизации (т.е. и во время замораживания, и во время высушивания). Общеупотребительные криопротекторы включают высокие концентрации дисахаридов и небольшое количество аминокислот (до 0,5 М) и низкие уровни полиэтиленгликоля (1% мас./об.) или другие полимеры. Термин "лиопротекция" относится к стабилизации во время всего процесса высушивания сублимацией (т.е. и во время замораживания, и во время высушивания). Такая стабилизация часто требуется для сублимационного высушивания биологических материалов, таких как белки и пептиды. Это происходит потому, что для сложных биологических молекул, таких как белки, часто требуется умеренный уровень остаточной воды для поддержания структуры и функции. Соответственно, обычно могут добавляться "лиопротекторы". Лиопротекторы, известные в данной области, обычно представляют собой полигидроксидные соединения, такие как сахара (моно-,ди- и полисахариды), полиспирты и их производные. В отличие от вышеприведенного, повреждение и деградация, которые происходят после процесса сублимационного высушивания, т.е. во время хранения или транспортировки высушенного сублимацией продукта, являются более трудными для обращения. Такое повреждение может принять форму, например, дезамидирования, гидролиза, рацемизации или окисления, каждое из которых может обычно приводить к агрегации и/или денатурации хранящегося белка или пептида. Окисление боковых цепей остатков цистеина, приводящее к формированию дисульфидных связей между молекулами и их последующей димеризации, представляет собой специфическую проблему. Такое повреждение может происходить медленно в течение длительного промежутка времени или может произойти быстро во время кратковременного изменения условий хранения, таких как внезапное увеличение температуры из-за отказа системы кондиционирования воздуха или даже простого сезонного изменения температуры окружающей среды. Настоящее изобретение относится к вопросам повреждения и деградации, которые происходят после процесса сублимационного высушивания в высушенных сублимацией композициях, включающих по крайней мере один пептид, в частности пептид, содержащий по крайней мере один свободный остаток цистеина, путем ингибирования или уменьшения димеризации указанного по крайней мере одного пептида. Высушенные сублимацией композиции по изобретению. Настоящее изобретение, в частности, касается высушенных сублимацией композиций, включающих по крайней мере один пептид, содержащий по крайней мере один свободный остаток цистеина. Пептиды, которые представляют собой особенный интерес, являются пептидами, которые пригодны для модуляции иммунной системы, в частности модуляции Т-клеточных ответов. Для Т-клеточного распознавания антигенов требуются антиген-представляющие клетки (АРС) для представления фрагментов (пептидов) антигенного белка на их клеточной поверхности совместно с молекулами главного комплекса тканевой совместимости (МНС). Т-клетки используют свои антигенспецифические Т-клеточные рецепторы (TCR) для распознавания с высокой специфичностью фрагментов, представленных АРС. Такое распознавание действует в качестве триггера для иммунной системы,чтобы произвести диапазон ответов для уничтожения распознанного антигена. Большая часть специфичности Т-клеточного распознавания фрагментов антигена обеспечивается небольшой подпоследовательностью аминокислот в пределах фрагментов. Эта подпоследовательность известна как Т-клеточный эпитоп. Таким образом, пептиды, включающие такие эпитопы, представляют интерес для использования в качестве терапевтических агентов для модуляции иммунных систем субъектов. В случае внеклеточных аллергенов и ауто- или аллоантигенов пептиды обычно представлены на молекулах МНС класса II, которые распознаются CD4 Т-клетками. Соответственно, при аллергических и ауто- или аллоиммунных расстройствах интерес сосредотачивается на МНС класса II - связывающих Тклеточных эпитопах. Однако могут также представлять интерес МНС класса I - связывающие Тклеточные эпитопы, которые распознаются CD8 Т-клетками. Например, в случаях, когда требуется мо-3 019923 дулировать иммунные ответы на эндогенные и/или внутриклеточные антигены. Это может быть желательно в случае определенных онкомаркеров, пептиды от которых можно использовать для индуцирования опухолевой иммунности, или для лечения инфекционных заболеваний, таких как заболевания, вызванные вирусами гепатита и папилломы человека. Было продемонстрировано, что введение субъектам пептидных эпитопов, полученных из внеклеточных аллергенов и ауто- или аллоантигенов, приводит к индукции толерантности к антигену, из которого происходит эпитоп. Терапевтические вещества, основанные на таком эффекте, обладают большим потенциалом при предупреждении и лечении аллергий и ауто- или аллоиммунных заболеваний, где желательна негативная регуляция определенного иммунного ответа. Было продемонстрировано, что введение субъектам пептидных эпитопов, полученных, например,из определенных белков, связанных с раком или инфекционными заболеваниями, приводит к индукции специфического иммунитета к антигену, из которого происходит эпитоп. Терапевтические агенты, основанные на таком эффекте, обладают большим потенциалом в предупреждении и лечении заболеваний,где желательна позитивная регуляция определенного иммунного ответа. Дальнейшему прогрессу использования пептидных эпитопов для получения толерантности или иммунности к определенному антигену препятствует ряд проблем. Одна такая проблема состоит в том, что последовательности эпитопов, особенно последовательности эпитопов аллергенов и ауто- и аллоантигенов, часто являются плохо растворимыми и поэтому являются проблематичными для производства, хранения и введения субъектам. В частности, пептиды, включающие эпитопные последовательности, которые содержат остатки цистеина, могут быть уязвимыми для димеризации или агрегации более высокого порядка, приводящей к несоответствующему иммунному ответу, обычно воспалению, обусловленному связыванию IgE или IgG. Соответственно, когда пептиды, включающие такие эпитопы, содержатся в высушенной сублимацией композиции, они особенно уязвимы для типов повреждения и деградации, которые происходят во время транспортировки и хранения, т.е. после процесса сублимационного высушивания, как изложено выше. Это, в свою очередь, приводит к получению восстановленного раствора, который является неподходящим для его предназначенного фармацевтического использования, поскольку в случае, когда требуется толеризация, крайне нежелательно индуцирование несоответствующих иммунных ответов, таких как воспаление. Точно так же в случае, когда требуется индукция специфического иммунитета, формирование димеров или агрегатов более высоких порядков будет ингибировать связывание с молекулами МНС класса I, или последующее связывание с соответствующими Т-клетками, предотвращая таким образом стимуляцию обусловленных Т-клетками иммунных ответов. МНС класса II - связывающие Т-клеточные эпитопы. Как обсуждено выше, интерес к пептидам для лечения или предупреждения аллергических и аутоили аллоиммунных расстройств сосредоточился на МНС класса II - связывающих Т-клеточных эпитопах. Такие эпитопы могут также представлять интерес, когда требуется индуцирование определенного иммунного ответа. МНС класса II - связывающий Т-клеточный эпитоп, содержащийся в пептидах по изобретению, обычно представляет собой минимальную последовательность аминокислот, которая способна связываться с молекулами класса II и способна к стимулированию CD4 Т-клеток в случае, когда представлена Т-клеткам совместно с классом II на поверхности клетки. Эпитоп обычно представляет собой эпитоп, который связывается с молекулой МНС класса II человека, такой как любая такого рода молекула, упомянутая здесь. Молекула МНС класса II состоит из двух белков,и , каждый из которых кодируется различным геном. У людей существует три группы генов, кодирующих различные белкии . Существуют кластеры лейкоцитных антигенов (HLA) человека: DR, DQ и DP. Каждый кластер включает множество различных генов А, кодирующих различный вариант белкаи множество различных генов В, кодирующих различный вариант белка . Поэтому образующиеся гетеродимеры МНС Класса II экстремально разнообразны, и соответственно так представляют собой Т-клеточные эпитопы, которые они связывают. Связывающий участок молекул МНС класса II состоит из двух отдельных белков, которые формируют расщелину. Расщелина является открытой, что в теории позволяет связываться пептиду любой длины. Однако только 9 аминокислот могут занять расщелину непосредственно. Идентичности до 9 аминокислот, которые занимают расщелину, определяют, свяжется ли данный пептид с данной молекулой МНС класса II и будет ли доступен для представления для Т-клеток. Поэтому эти до 9 аминокислот представляют минимальную последовательность, которая требуется для связывания МНС класса II. Обычно предполагается, что такая последовательность должна быть способна к стимулированию Тклеток в случае, когда представлена Т-клеткам совместно с классом II на поверхности клетки. Впрочем,это может быть подтверждено экспериментально способами, стандартными в данной области. Такие способы могут обычно включать контактирование эпитопа с Т-клетками в образце, взятом от субъекта, при условиях, которые позволяют эпитопу и Т-клеткам взаимодействовать; и затем определение, стимулируется или нет какая-либо из Т-клеток. Определение того, стимулируются ли Т-клетки или нет, может быть достигнуто любым подходящим способом, например путем детектирования продуциро-4 019923 вания цитокинов Т-клетками, где продуцирование цитокина указывает, что Т-клетки стимулированы. Подходящие цитокины включают гамма-интерферон, интерлейкин-4 и интерлейкин-13. Продуцирование цитокина может быть обнаружено любым подходящим способом, например ELISA, анализом ELISPOT или проточно-цитометрическим анализом. Т-клетки в образце от субъекта обычно присутствуют в совокупности мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС), выделенных из образца крови или сыворотки, взятого от субъекта. МНС класса II - связывающий Т-клеточный эпитоп по изобретению обычно состоит из 8 или 9 аминокислот, но может состоять из 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 аминокислот. Последовательность аминокислот эпитопа может быть приблизительно определена дальнейшей ссылкой на связывающий участок молекул МНС класса II. У этого связывающего участка есть углубления для связывания, которые соответствуют первичным и вторичным якорным положениям в последовательности связывающего пептидного эпитопа. Связывающие углубления определены положениями аминокислот в последовательности молекул МНС класса II, и обычно не являются абсолютно дискриминационными для определенной аминокислоты в эпитопе. Поэтому специфичность пептидного связывания любой данной молекулы МНС относительно широка. Таким образом, пептиды, связывающие с МНС того же аллотипа,демонстрируют некоторую степень подобия, однако какие-либо требования идентичности отсутствуют. Для наиболее распространенного типа МНС класса II человека, HLA-DR, ключевые якорные положения для связывания с углублениями для связывания находятся в положениях 1, 4, 6, 7 и 9 пептидного эпитопа (нумерация от наиболее N-концевого предельного остатка, занимающего расщелину, до самого С-конца). Поэтому различные аллели HLA-DR, которые обладают подобными аминокислотами в своих углублениях для связывания, обычно связывают пептиды с подобными аминокислотами в положениях 1,4, 6, 7 и 9. Соответственно, область, содержащая МНС класса II - связывающий Т-клеточный эпитоп,предпочтительно обладает аминокислотами в положениях, соответствующих положениям 1, 4, 6, 7 и 9,которые позволяют связывание с самым широким диапазоном аллелей HLA-DR. Примеры характерных связывающих свойств различных аллелей HLA-DR изложены ниже. Аллели DR с глицином в положении 86 -цепи демонстрируют сильное предпочтение большим гидрофобным боковым цепям (Trp, Tyr, Phe) в положении 1 пептида, тогда как валин в положении 86 ограничивает размер углубления и изменяет предпочтение на маленькие гидрофобные боковые цепи (Val и Ala) в этом положении. Среднего размера гидрофобные аминокислоты Leu и Ile хорошо принимаются во всех аллелях DR. Аллели DR с Gln в положении 70, лизин в положении 71 и аргинин или Gln в положении 74 -цепи имеют в пределах углубления общий положительный заряд 4, который требует отрицательно заряженных аминокислот Asp и Glu в положении 4 из связывающегося пептида (как, например, DRB10301). Аллели DR с этим мотивом связаны с двумя аутоиммунными заболеваниями: системной красной волчанкой и тиреоидитом Хашимото. Аллели DR с Gln или Arg в положении 70, Arg или Lys в положении 71 и Glu или Ala в положении 74 -цепи связывают подобные пептиды с теми пептидами, которые непосредственно выше, поскольку единственное существенное различие находится в положении 74. Однако в случае, когда Ala присутствует в положении 74, углубление 4 увеличивается в размере и может вместить большие аминокислоты, такие как Phe, Trp и Ile (как, например, в DRB10401, 04, 05). Аллели, имеющие Glu в положении 74, как ожидают, разрешают маленькие полярные остатки, как Ser и Thr, в положении 4 связывающего пептида. Аллели DR с этим мотивом связаны с предрасположенностью к ревматоидному артриту. Аллели DR с Asp в положении 70, Glu или Arg положении 71 и Leu или Ala в положении 74 -цепи исключают пептиды с отрицательно заряженными аминокислотами в положении 4 пептида (например,DRB10402). Это происходит благодаря наличию Asp в положении 70. Аллели DR с этим мотивом связаны с аутоиммунным заболеванием - подростковым ревматоидным артритом (JRA), вульгарной пузырчаткой и аллергическим бронхолегочным заболеванием/синдромом. Полиморфизмы в положении 9 -цепи определяют размер связывающего углубления 9 во всех аллелях DR. Аллели с Trp в этом положении принимают только маленькие аминокислоты в положении 9 связывающего пептида, например, Ala, Val, Gly, Ser, Thr, Pro (как, например, в DRB10101 и 1501). Glu в положении 9, в комбинации с Asp в положении 57, делает углубление 9 отрицательно заряженным, облегчая размещение положительно заряженных аминокислот, таких как Lys (как, например, в DRB10401 и 0404) и гистидина (как, например, в DRB10402). В большинстве аллелей МНС класса II Asp в положении 57 образует водородную связь солевого мостика с Arg в положении 76, позволяя углублению также разместить алифатические и полярные аминокислоты. В случаях, где Asp в положении 57 замененаSer (например, DRB10405) или Ala (DQ8), сеть водородных связей разрушается, и Arg в положении 76 может прочно притягивать отрицательно заряженные аминокислоты, такие как Asp или Glu в положении 9 связывающего пептида (как, например, в DRB10405). Примером предпочтительной последовательности для эпитопа, поэтому, является содержание Trp,Tyr, Phe, Val или Ala в положении 1; Asp, Glu, Ser или Thr в положении 4 и Ala, Val, Gly, Ser, Thr, Pro в положении 9. Другой пример предпочтительной последовательности эпитопа содержит большую арома-5 019923 тическую или гидрофобную аминокислоту в положении 1, например, Tyr, Phe, Trp, Leu, Ile или Val, и маленькую, незаряженную аминокислоту в положении 6, например, Ser, Thr, Ala, Pro, Val, Ile или Met. Приблизительно 87,5% пептидов, связывающихся со всеми молекулами или комбинацией молекул МНС класса II, кодируемых аллелями DRB10101, 0401 и 0701, содержат этот мотив. Кроме того, так как Тклеточные эпитопы, полученные из аллергенов и аутоиммунных антигенов, обычно не содержат большого числа повторов данной аминокислоты или аминокислот, предпочтительные антигенные эпитопы по изобретению обычно включают по крайней мере 5, 6, 7 или 8 различных аминокислот. Точная аминокислотная последовательность эпитопа может быть предсказана на основе применения компьютерных алгоритмов и подтверждена биохимическим анализом in vitro. Подходящие коммерчески доступные алгоритмы включают алгоритм EpiMatrix (EpiVax Inc.). Другие алгоритмы доступны,например, на http://www.imtech.res.in/raghava/propred/ и http://www.imtech.res.in/raghava/mhc2pred/. Анализ с использованием этих алгоритмов обычно включает парсинг большей полипептидной последовательности во множество маленьких наложенных пептидов. Последовательности этих маленьких пептидов затем анализируют, используя алгоритм для идентификации пептидов, которые предсказаны для связывания молекул МНС класса II. Наложенные маленькие пептиды обычно представляют собой 9-меры. Пептиды-кандидаты, чей оценочный результат является наибольшим в этом анализе, затем оценивают по способности связывать in vitro группу молекул МНС класса II, кодируемых различными аллелями класса II, при помощи стандартного анализа связывания. Например, может использоваться конкурентный анализ связывания МНС класса II, где каждый пептид анализируется по его способности вытеснения известного контрольного связывающего пептида из каждого из исследованных аллотипов МНС класса II человека. В таком испытании для каждого пептида определяют значение IC50 (концентрация,при которой достигается 50%-ое ингибирование связывания контрольного пептида). Чем ниже IC50, тем выше аффинность пептида для данного аллотипа МНС класса II. Предполагается, что эпитопом или эпитопами в полипептиде являются те пептиды, которые демонстрируют самую высокую аффинность связывания с молекулам МНС класса II. Особенно предпочтительные эпитопы демонстрируют высокую аффинность связывания с различными молекулами класса II,кодируемыми более чем одной, предпочтительно двумя, более предпочтительно тремя, четырьмя или пятью аллелями МНС класса II. Особенно предпочтительными эпитопами являются эпитопы, которые содержатся в областях, которые склонны к формированию димеров. Эти области определены в отдельном разделе ниже. МНС класса I - связывающие Т-клеточные эпитопы. Как обсуждено выше, МНС класса I - связывающие Т-клеточные эпитопы обычно представляют больший интерес для индуцирования специфического иммунного ответа (такого как опухолевая иммунность или индукция иммунных ответов против агентов, вызывающих инфекционное заболевание). МНС класса I связывающий Т-клеточный эпитоп, содержащийся в пептидах по изобретению, обычно является минимальной последовательностью аминокислот, которая способна к связыванию с молекулами Класса I и способна к стимулированию CD8 Т-клеток в случае, когда представлена Т-клеткам совместно с классом I на поверхности клетки. Эпитоп обычно представляет собой эпитоп, который связывается с молекулой МНС класса I человека, такой как любая такая молекула, упомянутая здесь. Молекула МНС класса I состоит из тяжелой пептидной цепи, нековалентно связанной с меньшим пептидом, называемым 2-микроглобулином. Тяжелая цепь пептида организована в три больших глобулярных домена, 1, 2 и 3, и меньшую трансмембранную и внутриклеточную область. Тяжелая цепь пептида кодируется единственным геном. У человека существует три основных кластера генов, кодирующих различные тяжелые цепи класса I, и три минорных кластера. Существуют кластеры антигенов лейкоцитов человека (HLA), HLA-A, HLA-B, HLA-C (основные) и HLA-E, HLA-F и HLA-G (минорные). Каждый кластер включает множество различных генов, кодирующих различный вариант тяжелой цепи. Поэтому образующиеся белки МНС класса I очень разнообразны и соответственно такими являются Тклеточные эпитопы, которые они связывают. Связывающий участок молекул МНС класса I формируется расщелиной между доменами 1 и 2(теми, которые дальше всего от мембраны клетки). Расщелина представляет собой закрытое углубление,и обычно пептид, связанный с расщелиной, обладает максимальной длиной до 12 аминокислот. Идентичности до 12 аминокислот, которые занимают расселину, определяют, свяжется ли данный пептид с данной молекулой МНС класса I и будет ли доступен для представления для Т-клеток. Эти аминокислоты, поэтому, представляют минимальную последовательность, которая требуется для связывания МНС класса I. Обычно предполагается, что такая последовательность будет способна к стимулированию Тклеток в случае, когда представлена Т-клеткам совместно с классом I на поверхности клетки. Однако это может быть подтверждено экспериментально при помощи способов, стандартных в данной области,обычно способов, эквивалентных изложенным выше для эпитопов класса II. МНС класса I - связывающий Т-клеточный эпитоп по изобретению обычно состоит от 6 до 12, чаще от 8 до 12 аминокислот или от 8 до 10 аминокислот. Эпитопы могут состоять из 8, 9, 10, 11 или 12 аминокислот. Наиболее типично, эпитопы составляют 9 аминокислот в длину. Аминокислотная последова-6 019923 тельность эпитопа может быть приблизительно определена дополнительной ссылкой на связывающий участок молекул МНС класса I. Скрытая природа связывающей МНС класса I расщелины означает, что остатки в каждом конце эпитопа класса I особенно важны для распознавания. Аминоконцевая аминогруппа пептида вступает в контакт с инвариантным участком в одном конце пептидного углубления, и карбоксильная группа на карбоксиконце связывается с инвариантным участком в другом конце углубления. Однако, эти инварианты обычно являются не абсолютно дискриминационными для определенной аминокислоты в эпитопе. Поэтому специфичность пептидного связывания любой данной молекулы МНС относительно широк. Таким образом, пептиды, связывающиеся с одним и тем же аллотипом МНС, демонстрируют некоторую степень подобия, но требование для идентичности отсутствует. Даже в этом случае обычно эпитопы класса I обладают гидрофобным или основным карбоксиконцом и отсутствием пролина на аминоконце. Эпитоп находится в протяженном подтверждении вдоль углубления с дополнительными контактами между атомами главной цепи и боковыми цепями консервативных аминокислот,которые выстраивают углубление. Вариации в длине компенсируются путем образования изгибов в основной цепи пептида, часто в остатках пролина или глицина. Особенно предпочтительными являются эпитопы, которые содержатся в областях, склонных к формированию димеров. Эти области определены в отдельном разделе ниже. Области, содержащие по крайней мере один Т-клеточный эпитоп. Биохимические анализы для идентификации Т-клеточного эпитопа обычно не в состоянии определить положение минимальной последовательности эпитопа в пределах большей последовательности более точно, чем в пределах приблизительно 10-12 аминокислот, и более типично 15, 20 или более аминокислот. Причина этого состоит в том, что большая последовательность должна быть физически фрагментирована в меньшие перекрывающиеся пептиды, или меньшие перекрывающиеся пептиды должны быть произведены de novo перед оценкой in vitro способности этих пептидов связывать молекулы МНС. Специалист должен признать, что чем меньшие перекрывающиеся фрагменты пептида используются, тем более длительным и трудоемким является процесс изготовления. Следовательно, эпитопы часто идентифицируются как содержащиеся в пределах большей полипептидной области. Предусматривается, что пептиды по изобретению могут включить такую большую область. Соответственно, в пептидах по изобретению область, содержащая Т-клеточный эпитоп, обычно составляет 8 или 9 аминокислот в длину, но может составлять в длину 6, 7, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18,19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25 аминокислот. В случае МНС класса I, связывающих Т-клеточные эпитопы,следует подразумевать, что процессинг области может требоваться прежде, чем эпитоп может быть представлен на молекуле МНС. Процессинг антигена перед представлением на молекулах МНС класса I представляет собой хорошо известное в данной области явление. Область по изобретению обычно представляет собой последовательность, которая склонна к формированию димеров. Следует понимать, что это включает как образование гомодимеров (т.е. ассоциация пептидных мономеров с другими идентичными пептидными мономерами), так и образование гетеродимеров (т.е. ассоциация пептидных мономеров с отличными пептидными мономерами). Следует также подразумевать, что путем последовательностей, склонных к формированию димеров, также предполагается обращение к последовательностям, которые склонны к формированию более высоких порядков олигомеров, таких как тримеры, тетрамеры и т.п. Область по изобретению может включать или состоять из любой последовательности, которая склонна к формированию димеров. Специфическая последовательность аминокислот в пределах данной области, которая способствует образованию димеров, может содержаться в пределах минимальной последовательности связывающей последовательности МНС классаII Т-клеточного эпитопа, или может содержаться в пределах остатков, которые обрамляют эту последовательность. Последовательность, склонная к формированию димеров, может, таким образом, полностью состоять из минимальной связывающей МНС последовательности Т-клеточного эпитопа. Настоящее изобретение, в частности, касается формирования ковалентных димеров между цистеинсодержащими пептидами. Соответственно, предпочтительные последовательности включают по крайней мере один остаток цистеина. Специалист может оценить, что любой пептид, который содержит единственный остаток цистеина, может сформировать димеры, или с себе подобным, или с другим цистеин-содержащим пептидом, с которым он может контактировать. У пептидов, которые содержат два или более цистеинов, есть потенциал, чтобы сформировать длинные цепи, которые могут затем агрегировать. Такое формирование димера/агрегата приводит к риску связывания с IgE или IgG и, таким образом, к появлению местного воспалительного ответа. Соответственно, предпочтительная область по изобретению обычно происходит из белка с высоким количественным соотношением остатков цистеина. Например, область по изобретению может быть получена из белка, имеющего более чем 20, 21, 22, 23,24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34 или 35% остатков цистеина в качестве количественного соотношения общего количества аминокислотных остатков в белке. Область по изобретению предпочтительно отбирают из последовательности в пределах такого белка, который обладает более низким количественным соотношением остатков цистеина. Соответственно, область может включать вплоть до максимум 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20% остатков цистеина в качестве количественного соотношения общего количества аминокислотных остатков в области. Остатки цистеина могут содержаться в минимальной МНС-связывающей последовательности эпитопа, или могут содержаться в остатках, которые обрамляют эту последовательность. Другие последовательности, склонные к формированию димеров, можно идентифицировать в силико-анализе с использованием подходящих вычислительных методов, или анализом in vitro, используя подходящие лабораторные способы, которые количественно определяют соотношение последовательности, которая присутствует в мономерной или димерной форме, как изложено ниже. Для последовательности, которая является склонной к димеризации, количественное соотношение последовательности,присутствующей в виде димера, может быть минимальным, т.е. меньше чем приблизительно 0,5 или 1% в твердом состоянии, но обычно должно увеличиваться в течение продолжительного времени, по крайней мере, до приблизительно 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 или 90% для материала, хранящегося в растворе в течение подходящего промежутка времени при подходящих условиях. Подходящие промежутки времени и условия включают диапазоны времени и условий, при которых квалифицированный практик мог бы разумно рассчитывать сохранять последовательность в растворе до использования. Например, промежутки времени приблизительно 24 ч, приблизительно 48 ч или приблизительно 72 ч типичны, хотя некоторые растворы могут сохраняться в течение более длинных периодов времени, например, по крайней мере, недели, месяца, 6 месяцев, 1 года, 2 лет, 3 лет или больше. Условия хранения могут обычно представлять собой комнатную температуру и относительную влажность, или обычно 25 С и 60%-ная относительная влажность, но могут включать любые стандартные условия хранения, с которыми сталкивается специалист, например, приблизительно 53 С, -20 С или -80 С. Чувствительность иммунной системы такова, что лишь небольшое количественное соотношение димера считается вероятным для вызывания нежелательного иммунного ответа. Для оценки количественного соотношения последовательности, присутствующей в данной форме,существует подходящий способ, например, аналитический гель-электрофорез в неденатурирующих условиях. В таком способе раствор последовательности разгоняют в полиакриламидном геле, рядом с набором стандартных маркеров молекулярной массы. Если последовательность формирует димеры, белковая полоса будет наблюдаться в геле, соответствующем образцу с приблизительно двукратной молекулярной массой от той, которая вычислена для суммы масс аминокислот последовательности. (Точно так же любые присутствующие тримеры или тетрамеры будут наблюдаться в качестве дорожек, соответствующих образцам с молекулярными массами, приблизительно трех- или четырехкратными тем, которые вычислены для суммы масс аминокислот последовательности). Поскольку редко бывает так, чтобы 100% последовательности присутствовало в олигомерной форме, можно также наблюдать вторую полосу, соответствующую разновидности с приблизительной молекулярной массой, вычисленной по сумме масс аминокислот последовательности - это представляет последовательность в мономерной форме. Для количественного определения соотношения последовательностей, которые присутствуют в каждой форме,может использовать относительную интенсивность полос. Подобными способами можно оценить молекулярную массу альтернативными средствами, например, аналитическим центрифугированием, массспектрометрией или эксклюзионной хроматографией. Альтернативно, олигомеры можно определить количественно, используя обращенно-фазовую высокоэффективную жидкостную хроматографию (ОФВЭЖХ), где димеры и более высокие олигомерные разновидности отделены от мономеров, на основе различия в их гидрофобностях. Идентификацию разновидностей достигают с использованием массспектрального обнаружения. Те же самые способы могут быть приспособлены для оценки того, демонстрирует ли данный пептид тенденцию образования гетеродимеров с любым другим пептидом или молекулой. Дополнительно, область по изобретению может обладать растворимостью меньше чем 3,5 мг/мл в водном растворе при рН от 2,0 до 12,0 или рН от 2,0 до 11,0, рН от 2,0 до 10,0, рН от 2,0 до 9,0, рН от 2,0 до 8,0 либо рН от 2,0 до 7,0; и/или включать 1, 2, 3 или 4 остатка цистеина; и/или иметь изоэлектрическую точку ниже чем 4,5; и/или иметь счет GRAVY выше +0,25. Эти параметры можно оценить любым подходящим способом. Например, растворимость может быть оценена стандартными способами in vitro,GRAVY и изоэлектрическую точку можно оценить в silico с использованием подходящих вычислительных методов, таких как инструмент ProtParam (Gasteiger E. et al., p. 571-607. The Proteomics Protocolshttp://www.expasy.ch/tools/protparam.html. Пептиды. Пептид по изобретению может включать или состоять из нативной последовательности области,как определено выше, или может включать или состоять из нативной последовательности области, спроектированной, чтобы уменьшить образование димеров или улучшить растворимость. Однако в контексте области, которая была спроектирована, следует подразумевать, что настоящее изобретение особенно применимо к тем пептидам, которые все еще могут подвергаться недопустимому уровню формирования димеров. Такие пептиды обычно должны по-прежнему включать по крайней мере один остаток цистеина. В случае если область спроектирована, чтобы уменьшить образование димеров, то она обычно должна представлять собой модификацию его нативной последовательности. Особенно предпочтительны модификации, где по крайней мере один остаток цистеина в нативной последовательности области заменен серином, 2-аминомасляной кислотой, аланином или глицином; и/или по крайней мере один остаток цистеина в нативной последовательности области является цистеинилированным для создания остатка цистеина. Следует осознавать, что пептиды по изобретению предназначены, чтобы охватить определенные варианты указанных пептидов. За исключением обсужденной выше инженерии для уменьшения образования димеров, можно создать другие модификации нативной аминокислотной последовательности пептида. Например, к одной, двум, трем, четырем или пяти аминокислотам в последовательности пептида. Любые такие модификации обычно должны быть консервативными, в том смысле, что, если аминокислота в нативной последовательности заменена отличной аминокислотой, у отличной аминокислоты должны быть свойства, сходные со свойствами нативной аминокислоты. Таблица ниже демонстрирует свойства аминокислот. Молекулярные массы представлены рядом с 3-буквенным кодом для каждой аминокислоты. Данные молекулярные массы соответствуют таковым для нейтральных, свободных аминокислот; массы остатка можно получить путем вычитания одного эквивалента воды (18 г/моль). Изобретение также включает пептиды, содержащие N- и С-концы, измененные или блокированные для уменьшения или ингибирования деградации экзопептидазными ферментами. Остаток или остатки, которые изменены, могут содержаться в любой части последовательности области. В одном варианте осуществления остаток или остатки, которые изменены, не состоят в минимальной МНС-связывающей последовательности области. В предпочтительном варианте осуществления модификация не создает новый эпитоп или не затрагивает МНС-связывающие свойства области. Пептид по изобретению обычно содержит от 8 до 30 аминокислот и может содержать 9, 10, 11, 12,13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28 или 29 аминокислот. Следует учитывать, что пептид по изобретению может состоять полностью из области, как определено выше, или может включить дополнительные аминокислоты, обрамляющие область до максимум 30 аминокислот. Пептиды, длиннее чем 30 аминокислот, вероятно, могут обладать адекватной третичной структурой, чтобы поперечно связать IgG или IgE на клеточных поверхностях, приводящих к нежелательным иммунным ответам, таким как активация В-клеток или дегрануляция мастоцитов. Пептидный синтез. Пептиды по изобретению получены в интеллектуальном смысле из полипептида, который включает область, как определено выше. Это сделано с использованием аминокислотной последовательности области и синтезирования пептидов, основанных на последовательности. Пептиды могут быть синтезированы, используя способы, известные в данной области. Предпочтительные способы включают способы твердофазного пептидного синтеза и, наиболее предпочтительно, автоматизированного или полуавтоматического пептидного синтеза. Как правило, используя такие способы, защищенную -N-карбамоильной группой аминокислоту и аминокислоту, присоединенную к растущей пептидной цепи на смоле, соединяют при комнатной температуре в инертном растворителе, таком как диметилформамид, Nметилпирролидин или метиленахлорид в присутствии связующих веществ, таких как дициклогексилкарбодиимид и 1-гидроксибензотриазол в присутствии основания, такого как диизопропилэтиламин. Защитные -N-карбамоильные группы удаляют с образовавшегося пептида-смолы, используя реактив, такой как трифторуксусная кислота или пиперидин, и реакцию связывания повторяют со следующей желательной N-защищенной аминокислотой, добавляемой к пептидной цепи. Подходящие N-защитные группы известны в данной области и включают трет-бутилоксикарбонил (tBoc) и флуоренилметоксикарбонил(Fmoc). Термин "пептид" включает не только молекулы, в которых аминокислотные остатки соединены пептидными (-CO-NH-) связями, но также молекулы, в которых пептидная связь ревертирована. Такие ретроинверсные пептидомиметики можно создать, используя способы, известные в данной области, например, такие как описанные в Meziere et al. (1997), J. Immunol. 159, 3230-3237. Этот подход включает создание псевдопептидов, содержащих изменения, вовлекающие основную цепь, а не ориентацию боковых цепей. Meziere et al. (1997), показывают, что эти псевдопептиды полезны, по крайней мере, для МНС класса II и ответов Т-хелперных клеток. Ретроинверсные пептиды, которые содержат связи NH-CO вместо пептидных связей CO-NH, являются значительно более устойчивыми к протеолизу. Точно так же пептидная связь может распределяться в целом при условии, что используется соответствующая связующая функциональная группа, которая сохраняет интервал между углеродными атомами аминокислотных остатков; это особенно предпочтительно, если связующая функциональная группа обладает существенно тем же распределением заряда и существенно той же планарностью, что и пептидная связь. Следует также принять во внимание, что пептид можно удобно блокировать на его N- или С-конце, с тем, чтобы помочь уменьшить чувствительность к экзопротеолитическому перевариванию. Например, N-концевая аминогруппа пептидов может быть защищена путем реакции с карбоксильной кислотой, и С-концевая карбоксильная группа пептида может быть защищена путем реакции с амином. Другие примеры модификаций включают гликозилирование и фосфорилирование. Еще одна потенциальная модификация состоит в том, что водороды аминов боковых цепей R или K могут быть заменены на метиленовые группы (-NH2 заменяется на -NH(Me) или -N(Me)2). Аналоги пептидов по изобретению могут также включать варианты пептида, которые увеличивают или уменьшают время полужизни пептида in vivo. Примеры аналогов, способных к увеличению времени полужизни пептидов, используемых согласно изобретению, включают пептоидные аналоги пептидов, Dаминокислотные производные пептидов и гибриды пептид-пептоид. Дополнительный вариант осуществления различных полипептидов, используемых согласно изобретению, включает D-аминокислотные формы полипептида. Подготовка полипептидов с использованием D-аминокислот, а не L-аминокислот,сильно уменьшает любое нежелательное повреждение такого агента нормальными метаболическими процессами, снижая количества вещества, которое следует вводить, наряду с частотой его введения. Пептиды, представляющие интерес. Представляющие интерес пептиды обычно включают по крайней мере один свободный остаток цистеина. "Свободный" обычно означает, что остаток цистеина доступен для химической модификации и/или димеризации с другими содержащими цистеин пептидами в отсутствие агента, который ингибирует образование димеров. Другими словами, свободный цистеин представляет собой цистеин, который содержит тиогруппу в своей редуцированной форме (-SH) и который в состоянии подвергнуться реакции окисления с другим цистеином с тиогруппой, также в редуцированная форма (-SH) для образования дисульфидной связи (-S-S-), в отсутствие агента, который ингибирует образование димеров. Представляющие интерес пептиды также обычно содержат область, включающую по крайней мере один МНС-связывающий Т-клеточный эпитоп, полученную из аллергена или алло-антигена. Таким образом, водный раствор, включающий представляющие интерес пептиды, обычно способен к стимулированию поздней фазы ответа у индивидуума, который является чувствительным к аллергену. Термин "поздняя фаза ответа" включает значение, как формулируется в Allergy and Allergic Diseases (1997), А.В. Kay(Ed.), Blackwell Science, p. 1113-1130. Поздняя фаза ответа может представлять собой любую позднюю фазу ответа (LPR). Предпочтительно композиции, включающие эпитоп, полученный из белкового аллергена, способны к стимулированию позднего астматического ответа (LAR) или позднего ринитного ответа либо поздней фазы кожного ответа или поздней фазы глазного ответа. Может ли специфическая композиция дать начало LPR, возможно определить с использованием способов, известных в данной области; особенно предпочтительным является способ, который описан в Cromwell О., Durham S.R., Shaw R.J.,Mackay J. and Kay A.B. Provocation tests and measurements of mediators from mast cells and basophils inasthma and allergic rhinitis. B: Handbook of Experimental Immunology (4), Chapter 127, Editor: Weir D.M.,Blackwell Scientific Publications, 1986. Таким образом, предпочтительно, чтобы отдельные композиции по изобретению были в состоянии вызвать LPR у индивидуума, который был сенсибилизирован к белковому аллергену, из которого происходит эпитоп. Был ли индивидуум сенсибилизирован к белку, из которого происходит эпитоп, можно определить путем известных процедур, таких как обнаружение антител в крови или сыворотке индивидуума, которые являются специфическими для белка. В случае, где эпитоп происходит из аллергена, подходящие тесты на сенсибилизацию к аллергену включают тестирование укола кожи с растворами белковых экстрактов, индукцию кожных LPR, историю болезни, иммунизацию аллергеном и радиоаллергосорбционный анализ (RAST) для определения специфичных к белку IgE. На основе, например, таких тестов или определений лечащий врач может определить, получит ли конкретный индивидуум ожидаемую пользу от лечения. Десенсибилизация или толеризация индивидуума к белку, из которого эпитоп получен, означает ингибирование или ослабление иммунологических тканевых реакций, вызванных указанным белком в соответственно сенсибилизированных индивидуумах. Было показано, что Т-клетки можно селективно активизировать, и затем предоставить нечувствительные. Кроме того, возбуждение или уничтожение этих Т-клеток приводит к десенсибилизации пациента для специфического белка. Десенсибилизация проявляется как ослабление ответа на белок или полученный из белка пептид, или предпочтительно, как устранение такого ответа, на второе и дальнейшие введения белка или полученного из белка пептида. Второе введение может быть сделано после того, как прошел подходящий промежуток времени, чтобы дать возможность десенсибилизации произойти; это предпочтительно является любым промежутком времени от одного дня и до нескольких недель. Интервал приблизительно в две недели предпочтителен. Хотя композиции по изобретению в состоянии вызвать LPR у индивидуума, который был сенсибилизирован к белку, нужно учитывать, что в случае, когда композиция используется для лечения пациента, предпочтительно использовать достаточно низкую концентрацию композиции, такую, чтобы никакой заметной LPR не произошло, но ответ был бы достаточным для частичного уменьшения чувствительности Т-клеток, так что можно было бы дать следующую (предпочтительно более высокую) дозу, и так далее. Таким образом, доза строится до того, как будет достигнута полная десенсибилизация, но часто без какого-либо индуцирования LPR у пациента. Несмотря на то что композиция или пептид в состоянии осуществить это при более высокой концентрации, чем вводится. Композиция по изобретению обычно имеет уменьшенную способность вызывать раннюю фазу ответа у индивидуума. Под "уменьшенной способностью вызвать раннюю фазу ответа" следует подразумевать, что композиция по изобретению приведет к более низкой тяжести признаков ранней фазы (таких как дегрануляция базофильных лейкоцитов или мастоцитов) по сравнению с композицией, включающей пептид, содержащий ту же область, что и в композиции по изобретению, но без модификации ее последовательности для уменьшения образования димеров, и при отсутствии агента, уменьшающего образование димеров. Соответственно, композиция по изобретению должна производить меньший ответ ранней фазы, чем эквивалентный пептид, преобладающе присутствующий в димерной форме. Пептид является эквивалентным, потому что он содержит тот же самый МНС класса II - связывающий Т-клеточный эпитоп. Альтернативно или дополнительно, композиция по изобретению обычно обладает увеличенной способностью вызывать толерантность у индивидуума. Под "увеличенной способностью вызвать толерантность" следует подразумевать, что композиция по изобретению должна производить больший уровень десенсибилизации у индивидуума, чем композиция, включающая пептид, содержащий ту же область, что и в композиции по изобретению, но без модификации его последовательности для уменьшения образования димеров, и при отсутствии агента, уменьшающего образование димеров. Соответственно,композиция по изобретению должна произвести больший уровень десенсибилизации, чем эквивалентный пептид, преобладающе представленный в димерной форме. Пептид является эквивалентным, потому что он содержит тот же самый МНС класса II - связывающий Т-клеточный эпитоп. Десенсибилизация представляет собой то, как определено выше, и ее уровень может характеризоваться любыми подходящими средствами. Например, при аллергической астме меньший LAR, образующийся в ответ на ингаляцию белка, из которого эпитоп происходит (или полученный из белка пептид),показал бы больший уровень десенсибилизации после лечения композицией по изобретению. РазмерLAR можно оценить любыми подходящими способами из данной области, например, обнаружение уменьшения объема форсированного выдоха (FEV) у индивидуума после введения белка. Большее уменьшение в FEV указывает на больший LAR. Композиция по изобретению предпочтительно приводит,- 11019923 по крайней мере, к уменьшению LAR на 10, 20, 30, 40 или на 50% по сравнению с композицией, включающей эквивалентный пептид, преобладающе присутствующий в димерной форме. Альтернативно, более высокий уровень десенсибилизации может быть обозначен большим уменьшением продуцирования определенного белка Т-клетками воспалительных цитокинов, такого как гаммаинтерферон, интерлейкин-4 и интерлейкин-13. Цитокин, продуцированный Т-клетками, может быть обнаружен любым подходящим способом, например анализами ELISA, ELISPOT или проточноцитометрическим анализом. Особенно предпочтительные способы включают Multiplex bead array assays,как описано, например, в de Jager et al.; Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology, 2003, Vol. 10(1), p. 133-139. Под "большим уменьшением" предпочтительно подразумевается, что лечение композицией по изобретению будет приводить к продуцированию предпочтительно по крайней мере на 10, 20, 30, 40 или 50% меньше воспалительных цитокинов, чем композиция, включающая эквивалентный пептид, преобладающе представленный в димерной форме. Предпочтительные композиции по изобретению включают по крайней мере один пептид, включающий или состоящий из эпитопа, который происходит из аллергена, выбранного из растительного аллергена (особенно аллерген трав), аллергенов тревоги животных, плесневого и грибкового аллергена,аллергена пыли, антибиотика или другого препарата, жгучего яда насекомого, аллергена окружающей среды или пищевого аллергена; или антигена, выбранного из главных антигенов, связанных с острым рассеянным энцефаломиелитом (ADEM); болезнью Аддисона; анкилозирующим спондилоартритом; синдромом антифосфолипидных антител (APS); апластической анемией; аутоиммунным гепатитом; аутоиммунным оофоритом; глютеновой энтеропатией; болезнью Крона; сахарным диабетом 1 типа; гестационным пемфигоидом; синдромом Гудпасчера; болезнью Грейвса; синдромом Гийена-Барре (GBS); болезнью Хашимото; идиопатической тромбоцитопенической пурпурой; болезнью Кавасаки; красной волчанкой; рассеянным склерозом; миастенией gravis; нарколепсией, синдромом пляшущих глаз (OMS); невритом зрительного нерва; тиреоидитом Орда; обыкновенной пузырчаткой; злокачественной анемией; множественным артериитом у собак; билиарным первичным циррозом печени; ревматическим полиартритом; синдромом Рейтера; синдромом Шегрена, синдромом Такаясу; темпоральным артериитом (также известным как "гигантоклеточный артериит"); тепловой аутоиммунной гемолитической анемией и гранулематозом Вегенера. Особенно предпочтительные эпитопы происходят из изоформ: белка тревоги кошки Fel d1; белков клеща домашней пыли Der p 1, Der р 2, Der р 7, Der р 3-15, Der р 18, 20, 21 и 23, Der f 1, 2, 7, 10, с 11 по 18 и 20-22; белка амброзии amb a 1, 2, 3, 5, 6, 7, 8, 9 и их изоформ, включая amb а 1.1, а 1.2, a 1. 3 или a 1.4; белков райграса многолетнего lol p1 и lol р 5; белков тимофеевки луговой phl p1 и phl p5; белка свинороя пальчатого Cyn d 5; белков Alternaria alternata Alt a 1, Alt a 2, от Alt a 3 до Alt а 10, Alt а 12, Alt а 13 и енолазы (Alt а 6), Cla h 1, 2, 5-10, 12, GST, HCh1, HSP70, NTF2, ТСТР; белка березы Bet vl, 2, 3, 4, 6, 7,8 и Р 14; белков таракана рыжего Bla g 1, Bla g 2, Bla g 3, Bla g 4, Bla g 5 и Bla g 6, 7, 8, 9, GSTD1, Трипсина; белка полыни обыкновенной Art v 1; белка солянки русской Sal k 1, Sal k 2 и Sal k 8; арахиса Arah1, Ara h2, Ara h3, Ara h4, Ara h5, Ara h6, профилинов растений или липид-передающих белков или лейкоцитарного антигена человека. Особенно предпочтительные пептиды включают или состоят из последовательностей (прописанных путем ссылки на соответствующее аллергическое или аутоиммунное расстройство): Последовательности клеща домашней пыли, приведенные выше, обычно происходят из разновидностей клеща Dermatophagoides pteronyssinus. Предпочтительные варианты этих последовательностей включают гомологичные последовательности, полученные из родственных разновидностей клеща Dermatophagoides farinae. Они обозначены идентификатором "f" в таблице ниже. Другие предпочтительные варианты пептидов по изобретению включают укорочения или удлинения на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 или 17 аминокислот с N и/или С конца данного пептида. Примеры предпочтительных укорочений или удлинений пептида клеща домашней пыли HDM03C также демонстрируются ниже как HDM03M, Р и W. В случае, где полипептиды включают остатки, которые обычно трудно сохранить во время изготовления, эти остатки могут быть заменены. Например, остаток глутаминовой кислоты или глутамина спонтанно образует пироглутамат в растворе, особенно в случае, когда присутствует на N-конце пептида. Таким образом, остатки пептидов по изобретению, которые соответствуют последовательности глутаминовой кислоты или глутамина в нативной последовательности белка, могут быть заменены пироглутаминовой кислотой в пептидах по изобретению, когда такие остатки присутствуют на N-конце пептида. Например, HDM03Wn (SEQ ID NO: 54) может содержать пироглутаминовую кислоту вместо Е на Nконце. В одном варианте осуществления композиция по изобретению включает пептиды с SEQ ID NO: 1-4. Композиция может также включать пептиды с SEQ ID NO: 83-85 и, необязательно, не включать никакие дополнительные пептиды. Другие компоненты. Как можно понять из вышеупомянутого раздела, касающегося высушивания сублимацией, композиции, которые подлежат высушиванию сублимацией, должны обычно включать дополнительные компоненты, а также представляющие интерес биологические материалы. Настоящее изобретение относится к использованию комбинации дополнительных компонентов для предотвращения или ослабления димеризации по крайней мере одного пептида в композициях по изобретению, приводя, тем самым, к более устойчивым высушенным сублимацией композициям. Настоящее изобретение также относится к способами изготовления таких композиций. Авторы изобретения определили, что комбинация (i) трегалозы в качестве единственного невосстанавливающего углевода и (ii) тиоглицерина в качестве агента, ингибирующего образование димеров, достигает этого эффекта. Как упомянуто здесь, углеводы и родственные соединения обладают преимуществом в том, что они полезны в качестве крио- и лиопротекторов во время процесса сублимационного высушивания. При этом они не предотвращают образование димеров пептидом, содержащимся в высушенном сублимацией конечном продукте во время его хранения. Дополнительный компонент тиоглицерин предназначен для достижения этого. Чтобы эффективно предотвратить образование димеров, этот агент теоретически должен присутствовать, по крайней мере, в эквивалентной молярной концентрации к молярной концентрации материала,который подвержен формированию димеров, при определении до замораживания. Таким образом, в случае, где материал, подверженный формированию димеров, представляет собой один или несколько пептидов, включающих по крайней мере один свободный остаток цистеина, агент присутствует, по крайней мере, в эквивалентной молярной концентрации относительно концентрации одного или нескольких пептидов, включающих по крайней мере один свободный остаток цистеина. Концентрация других компонентов, таких как пептиды, которые не содержат свободный остаток цистеина, обычно не принимается во внимание. Т.е. в случае, где композиция включает, например, четыре пептида, которые содержат свободный остаток цистеина и три пептида, которые не содержат свободный остаток цистеина, концентрацию агента, который ингибирует образование димеров, определяют относительно полной концентрации четырех содержащих свободный цистеин пептидов. Концентрация трех пептидов, которые не содержат цистеин, и любых других компонентов в композиции не относится к уровню требуемого агента. В одном варианте осуществления агент, который ингибирует образование димеров, может присутствовать в большем или меньшем количестве, чем материал, который подвержен формированию димеров, когда определение проводится до замораживания, при условии, что предотвращение образования димеров происходит эффективно. В специфическом варианте осуществления агент присутствует в большем количестве, чем материал, который подвержен формированию димеров. Например, агент может присутствовать в молярной концентрации, которая является по крайней мере приблизительно в 10, 20,30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 или 1000 раз больше, чем молярная концентрация материала, который подвержен формированию димеров. Предпочтительно агент присутствует при молярной концентрации, которая является по крайней мере в 60-80 раз больше, чем молярная концентрация материала, который подвержен формированию димеров. Например, в случае, где материал присутствует в молярной концентрации 200 мкМ, агент должен предпочтительно присутствовать в молярной концентрации от 12 до 16 мМ. Такая ситуация применяется, например, в композиции Тиоглицерин "низкий" в примере 4, где четыре пептида, содержащие по крайней мере один свободный цистеин, каждый присутствует в концен- 15019923 трации 50 мкМ, и три пептида, не содержащие цистеин, также каждый присутствует в концентрации 50 мкМ. Таким образом, в 1 л этой композиции содержится всего 350 мкмолей пептидов (семь пептидов) и 200 мкмолей пептидов со свободным цистеином (4 пептида со свободным цистеином). Соответственно,материал, подверженный формированию димеров, содержится в концентрации 200 мкМ, и тиоглицерин присутствует в концентрации 14 мМ, которая является в 70 раз большей. Альтернативно агент может присутствовать в молярной концентрации, которая по крайней мере в 30-40 раз больше, чем молярная концентрация материала, который подвержен формированию димеров. Например, в случае, где материал присутствует в молярной концентрации 400 мкМ, агент должен предпочтительно присутствовать в молярной концентрации от 12 до 16 мМ. Такая ситуация могла бы иметь место, например, в случае композиции Тиоглицерин "низкий" в примере 4, если бы все пептиды присутствовали в концентрации 100 мМ, а не 50 мМ. Таким образом, в литре этой композиции содержится всего 700 мкмолей пептидов (семь пептидов) и 400 мкмолей пептидов со свободным цистеином (4 пептида со свободным цистеином). Соответственно, материал, подверженный формированию димеров, содержится в концентрации 400 мМ, и тиоглицерин присутствует в концентрации 14 мМ, которая является в 35 раз большей. Материал обычно представляет собой по крайней мере один пептид, включающий по крайней мере один свободный остаток цистеина. Нижний предел количества присутствующего в композиции пептида перед замораживанием, как количественное соотношение, обычно должен составлять приблизительно 0,01, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,15, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3,1,4 или 1,5% мас./мас. или мас./об. Верхний предел количества присутствующего пептида в композиции перед замораживанием, как количественное соотношение, обычно должен составлять приблизительно 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 3, 4 или 5% мас./мас. или мас./об. Следует признать, что количество пептида может обычно составлять количество между любым из нижних пределов, независимо объединенным с любым из верхних пределов, изложенных выше. Агент, который ингибирует образование димеров, должен поэтому присутствовать в подобном диапазоне в качестве количественного соотношения композиции, при условии, что полная концентрация агента в композиции до замораживания содержится, по крайней мере, в эквивалентной молярной концентрации к полной концентрации пептидов, включающих по крайней мере один свободный остаток цистеина. Например, если полная концентрация пептидов, включающих по крайней мере один свободный остаток цистеина, составляет 0,03 нмоль/мл, то полная концентрация агента должна составлять по крайней мере 0,03 нмоль/мл. Если полная концентрация пептидов, включающих по крайней мере один свободный остаток цистеина, составляет 500 нмоль/мл, то полная концентрация агента должна составлять по крайней мере 500 нмоль/мл. Следует также учитывать, что агент можно обычно включать в более высоком количественном соотношении относительно пептида, как объяснено выше, например, для гарантии, что образование димеров эффективно уменьшилось. Кроме того, верхний предел для полной концентрации агента может обычно принимать во внимание клинические требования или ограничения в применении фармацевтических композиций. Например, восстановленный раствор для инъекции обычно содержал бы не больше чем 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, 3,0, 3,5 или 4,0% мас./мас. или мас./об. агента. Это соответствует приблизительно 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35 или 40% мас./мас. или мас./об. соответственно в высушенном сублимацией продукте. Соответственно, количество пептида в продукте, возможно, следует ограничить, чтобы соответствовать этим клиническим требованиям. Специалистам следует учитывать, что количественное соотношение любого компонента в композиции перед замораживанием должно обычно соответствовать количественному соотношению, приблизительно в 5-10 раз выше, чем в конечной высушенной сублимацией композиции. Трудность с включением агента, который ингибирует образование димеров в высушенной сублимацией композиции, состоит в том, что, как определено авторами, такие агенты улетучиваются из высушенного сублимацией продукта, особенно когда указанный продукт хранится в течение длительного периода времени при температуре окружающей среды, или когда указанный продукт подвергается внезапным увеличениям температуры. Агенты обычно улетучиваются, и, таким образом, не сохраняются в конечном продукте, который либо испытывает повреждение и деградацию во время хранения и транспортировки, с уменьшением, таким образом, его устойчивого срока годности, либо становится недопустимым для фармацевтического использования. Например, благодаря изменениям во внешнем виде высушенной сублимацией композиции или восстановленного из этого раствора. Чтобы преодолеть эту трудность, авторы изобретения разработали комбинацию трегалозы в качестве невосстанавливающего углевода и тиоглицерина в качестве агента, ингибирующего образование димеров, который не приводит к потере агента, ингибирующего образование димеров, из лиофилизированного конечного продукта. Для достижения этого необходимо, чтобы у лиофилизированной композиции была аморфная структура. Соответственно, трегалоза в качестве невосстанавливающего углевода является особенно подходящей для использования в настоящем изобретении, поскольку является аморфной после лиофилизации. Чтобы гарантировать, что композиция в целом обладает аморфной структурой после лиофилизации, аморфный углевод в композициях по изобретению должен обычно присутствовать в количестве, которое составляет по крайней мере 50%, а более предпочтительно по крайней мере 60, 70 или 80% и наиболее предпочтительно по крайней мере 90% в качестве количественного соотношения полных компонентов лиофилизированной композиции. Как показано в настоящем патенте, аморфная структура лиофилизированного углевода задерживает агент, который ингибирует образование димеров в пределах конечного лиофилизированного продукта. Это контрастирует с материалами, которые обладают кристаллизованной структурой после лиофилизации. Кристаллические или смешанные/аморфные материалы ранее были предпочтительными для описанного здесь типа применений сублимационного высушивания, отчасти потому, что конечный лиофилизированный "спекшийся материал" обычно имеет более привлекательный внешний вид и можно использовать более короткие, более агрессивные циклы высушивания. Таким образом, применение (i) трегалозы в качестве невосстанавливающего углевода и (ii) тиоглицерина в качестве агента, который ингибирует образование димеров, в лиофилизированной композиции,содержащей по крайней мере один пептид, включающий свободный остаток цистеина, приводит к предотвращению или уменьшению димеризации указанного по крайней мере одного пептида в указанной композиции. Агент, который ингибирует образование димеров, сохраняется в лиофилизированном продукте за счет аморфной структуры углевода и, таким образом, в состоянии уменьшить или предотвратить там димеризацию пептида или пептидов в течение времени хранения продукта. Таким способом достигается устойчивый срок годности, который теоретически составляет по крайней мере 1 год или по крайней мере 2 года при 53 С, 25C/60% RH, 30C/65% RH или 40 С/75% RH. Не желая пока быть связанными какой-либо определенной гипотезой, авторы полагают, что этот вариант осуществления является особенно выгодным из-за хорошего задержания тиоглицерина в высушенном сублимацией спекшемся материале. Тиоглицерин ранее считали менее подходящим для включения в высушенные сублимацией композиции, поскольку он самостоятельно не замерзает с формированием стеклообразной массы при типичных условиях сублимационного высушивания, т.е. он остается жидкостью при температурах в районе -80 С. Тем не менее, в настоящем изобретении продемонстрировано,что тиоглицерин можно сохранить, особенно в комбинации с трегалозой, без каких-либо признаков улетучивания или негативного воздействия на физические качества высушенного сублимацией спекшегося материала. Присутствие тиоглицерина эффективно предотвращает формирование пептидных димеров в композиции. Восстановленные композиции по изобретению. Следует учесть, что высушенные сублимацией композиции, изготовленные согласно изобретению,могут быть восстановлены в растворе, обычно в водном растворе, подходящем для инъекции, таком как стерильная, апирогенная вода. Теоретически, раствор должен быть изотоническим/изоосмотическим и,таким образом, подходящим для парентеральной инъекции. Восстановленная композиция обычно должна обладать минимальным количественным соотношением пептида, присутствующего в качестве димера. Т.е. образование димеров должно эффективно предотвращаться. Под минимальным количественным соотношением присутствующего в качестве димера пептида подразумевается, что в растворе в качестве димера присутствует максимум 5, 4, 3, 2, 1, 0,9, 0,8,0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2, 0,1, 0,05 или 0,01%. Следует понимать, что количественное соотношение присутствующего в качестве димера пептида в растворе будет количественным соотношением присутствующего в качестве димера пептида после подходящего промежутка времени в растворе. Подходящие промежутки времени включают диапазоны времени, когда квалифицированный практик мог бы разумно рассчитывать сохранять последовательность в растворе до использования. Например, приблизительно 24 ч, приблизительно 48 ч или приблизительно 72 ч. Количественное соотношение пептида, присутствующего в данной форме, может быть оценено любым подходящим способом. Восстановленная композиция обычно должна представлять собой фармацевтический состав для толеризации или иммунизации индивидуума к белку, из которого происходит пептид, содержащийся в композиции. Сама по себе восстановленная композиция может включать один или несколько фармацевтически приемлемых носителей или разбавителей и необязательно один или несколько других терапевтических компонентов. Носитель(и) должен являться "приемлемым" в смысле того, чтобы быть совместимым с другими компонентами состава (в особенности, они не должны активировать образование димеров), и не вредным для реципиента этого. Как правило, носители для инъекции и конечного состава являются стерильными и апирогенными. Дополнительные компоненты могут присутствовать в высушенной сублимацией композиции или могут быть добавлены во время или после восстановления. Таким образом, могут присутствовать вспомогательные вещества, такие как увлажняющие или эмульгирующие агенты, изменяющие рН или забуферивающие вещества, антиокислители, хелатообразующие агенты и т.п. Эти эксципиенты, носители и вспомогательные вещества обычно представляют собой фармацевтические агенты, которые не вызывают иммунный ответ у индивидуума, принимающего композицию, и которые можно вводить без нежелательной токсичности. Фармацевтически приемлемые эксципиенты включают в качестве неограничивающих примеров жидкости, такие как вода, физиологический раствор,полиэтиленгликоль, гиалуроновая кислота и этанол. Там также могут быть включены фармацевтически приемлемые соли, например минеральные кислые соли, такие как гидрохлориды, гидробромиды, фосфа- 17019923 ты, сульфаты и т.п.; и соли органических кислот, такие как ацетаты, пропионаты, малонаты, бензоаты и т.п. Полное обсуждение фармацевтически приемлемых эксципиентов, носителей и вспомогательных веществ доступно в Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Pub. Co., N.J. 1991). Для того чтобы являться эффективными, композиции по изобретению должны включать каждый пептид в подходящей концентрации, не вызывая побочную реакцию. Как правило, для использования при толеризации концентрация каждого пептида в композиции должна находиться в диапазоне от 0,03 до 500 нмоль/мл или от 0,03 до 200 нмоль/мл. Более предпочтительно в диапазоне от 0,3 до 200, 3-180, 10150 или 30-120 нмоль/мл. Особенно предпочтительным является диапазон от 3 до 12 нмоль/мл. Композиция должна обладать чистотой больше чем 90, или 95, или 98% или чистотой по крайней мере 99%. Объемы инъекции могут обычно составлять 60 или 120 мкл. Поэтому можно составить композицию, которая включает молекулу и/или клетку по изобретению и также одну или несколько других терапевтических молекул. Композиция по изобретению может альтернативно использоваться одновременно, последовательно или отдельно с одной или несколькими другими терапевтическими композициями как часть комбинированной терапии. Как правило, для использования при иммунизации композиция должна обеспечить представление,которое после восстановления позволяет вводить от 1 мкг до 10 мг каждого пептида. Более предпочтительным является количество каждого пептида в диапазоне от 3 мкг до 5 мг, от 5 мкг до 5 мг, от 10 мкг до 2 мг или от 20 мкг до 1 мг. Концентрация каждого пептида должна зависеть от способа введения, но обычно может доставляться внутрикожно, подкожно, внутримышечно, внутривенно, перорально, интраназально или путем ингаляции. У композиции должна быть чистота больше чем 90, или 95, или 98% или чистота по крайней мере 99%. Терапевтические способы и индивидуумы, подвергаемые лечению. Настоящее изобретение относится к композициям, включающим по крайней мере один пептид, который способен к модуляции иммунной системы индивидуума."Модуляция" может означать сенсибилизацию или вызывание иммунитета у индивидуумов к белку,из которого происходит по крайней мере один пептид композиции по изобретению. В этом случае белок обычно представляет собой белок опухолевого антигена или белок антигена инфекционного заболевания, такого как заболевания, вызванные вирусами гепатита и папилломы человека. Композиции по изобретению, поэтому, полезны при предупреждении или лечении рака или инфекционных заболеваний. Альтернативно, "модуляция" может означать уменьшение чувствительности или толеризации индивидуумов к белку, из которого происходит по крайней мере один пептид композиции по изобретению. В этом случае белок обычно представляет собой аллерген или другой антиген, к которому иммунный ответ нежелателен. Примеры таких антигенов включают антигены, связанные с аутоиммунными заболеваниями, антигены, связанные с реакцией трансплантата против хозяина или отторжением трансплантата(здесь называемые как аллоиммунные состояния), и антигены, связанные с материнско-эмбриональными иммунными ответами, например резус-D-гемолитическое заболевание новорожденных. Композиции по изобретению, поэтому, полезны при предупреждении или лечении аллергического заболевания, аутоиммунного заболевания, аллоиммунного состояния или материнско-эмбрионального иммунного ответа. Изобретение предоставляет композиции для профилактики или лечения вышеуказанных заболеваний. Таким образом, вышеуказанные заболевания могут быть предупреждены или вылечены путем введения субъекту с этим заболеванием восстановленной композиции по изобретению. Индивидуум, который будет подвергаться лечению или которому будут предоставлять композицию по изобретению, предпочтительно является человеком. В случае, где желательна десенсибилизация/толеризация, следует учитывать, что об индивидууме,который будет подвергаться лечению, может быть известно, что он является чувствительным к специфическому аллергену или антигену, находится под риском быть чувствительным или подозревается в чувствительности. Индивидуум может быть проверен на сенсибилизацию с использованием способов, известных в данной области и как описано здесь. Альтернативно, у индивидуума может быть семейная история состояний, описанных выше. Возможно, необходимость проверки индивидуума на сенсибилизацию к аллергенам отсутствует, поскольку индивидуум может проявить признаки аллергии, когда вступает в близость с соответствующим источником аллергена. Под близостью подразумевается 10 м или меньше, 5 м или меньше, 2 м или меньше, 1 м или меньше либо 0 м от источника. Симптомы аллергии могут включать зудящие глаза, слизисто-водянистые выделения из носа, затруднение дыхания, красную зудящую кожу или сыпь. У индивидуума, который будет подвергаться лечению от аллергического заболевания, возможно, была аллергия в течение по крайней мере 2 недель, 1 месяца, 6 месяцев, 1 года или 5 лет. Индивидуум может страдать от высыпания, заложенности носа, выделения из носа и/или кашля, вызванного аллергией. Индивидууму могли вводить или могли не вводить другие композиции/соединения,которые лечат аллергию. Обычно индивидуум, который подвергается лечению, может иметь любой возраст. Однако предпочтительно человек может относиться к возрастной группе от 1 до 90, от 5 до 60, от 10 до 40 или более предпочтительно от 18 до 35. Предпочтительно индивидуум, который подвергается лечению, происходит из группы населения, которая обладает частотами МНС-аллели в пределах диапазона частот, которые являются представительными для белого населения. Справочные популяционные частоты аллелей для 11 общераспространенных семейств DRB1-аллели демонстрируют ниже. Референсные частоты были получены анализом описанных в многочисленных исследованиях частот, и на фигурах приведены усредненные значения. Предпочтительно поэтому, чтобы индивидуум, который подвергается лечению, происходил из группы населения, которая обладает эквивалентными частотами МНС-аллели, как контрольная группа населения для аллелей, упомянутых в вышеупомянутой таблице (таких как для по крайней мере 1, 2, 3, 4, 5 или всех аллелей), например, в пределах диапазонов тех значений плюс или минус 1, 2, 3, 5, 10, 15 или 20%. Предпочтительно, чтобы индивидуум происходил из группы населения, где частоты аллелей следующих DRB1-аллелей составляют: 4 - по крайней мере 9%; 7 - по крайней мере 10%; 11 - по крайней мере 8%. Изобретение является особенно подходящим для использования у индивидуумов, которые могут нуждаться в получении многократных введений композиций по изобретению, как описано выше. Пептиды, которые являются более склонными к формированию димеров, чем пептиды по изобретению, наиболее вероятно, вызовут неблагоприятный ответ у индивидуумов, получающих многократные введения. Поскольку мономерные пептиды обычно в меньшей степени способствуют воспалению, чем димерные пептиды, изобретение является также особенно подходящим для введения индивидууму, который находится в состоянии или подвергается риску находиться в состоянии, где состояние характеризуется неблагоприятной воспалительной реакцией на лечение, включающее пептид. Неблагоприятная воспалительная реакция на лечение, включающее пептид, может быть диагностирована в результате начала любого из признаков аллергии, как определено выше, после проведения лечения, включающего пептид. Индивидуум, как могут полагать, подвергается риску такой реакции по любой подходящей медицинской причине,например, семейной истории подобных реакций, личной медицинской истории многократных аллергических ответов, или сильной положительной реакции на укол кожи или ответов на чрескожное введение общих аллергенов. Следующие примеры иллюстрируют изобретение. Примеры Следующие примеры и сравнительные примеры демонстрируют действие различных композиций при различных условиях хранения. Каждая из различных композиций включает пептиды, состоящие из последовательностей SEQ ID NO: 1-4 (пептиды MLA01, 04, 05 и 12), и три дополнительных пептида:MLA14 (SRVLDGLVMTTISSSK (SEQ ID NO: 86. В каждом случае композицию подготавливали в растворе перед тем, как подвергнуть высушиванию сублимацией. Условия сублимационного высушивания были выбраны как соответствующие для каждой композиции, и типичный цикл сублимационного высушивания демонстрируется для каждой. Деградация пептидов во время процесса сублимационного высушивания была измерена путем сравнения уровней деградации пептида в образце раствора до и после процесса. Все проверенные композиции подверглись лишь незначительной деградации пептидов во время процесса сублимационного высушивания (данные не представлены). После сублимационного высушивания образец каждой композиции сохраняли при множестве различных условий (-80 С, 5 С, 25 С/65% RH, 40C/75% RH) (RH: относительная влажность) в течение 28 недель. Деградацию во время хранения высушенного сублимацией конечного продукта проверяли путем восстановления образца с промежутками и сравнения уровня деградации пептида таковому в свежеприготовленном стандартном растворе MLA07. В каждой проверенной композиции единственным летучим компонентом является тиоглицерин. Соответственно, задержание тиоглицерина определяли, наблюдая за наличием или отсутствием конденсации на стенках пузырьков для хранения. Пример 1. Состав с трегалозой. Типичный цикл сублимационного высушивания Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) трегалоза/тиоглицерин/метионин (250:46:5). Характеристики:WAXS-дифрактограмма: полностью аморфный. Превосходное удерживание тиоглицерина. На стенах пузырька не наблюдается никакой конденсат для всех условий хранения. Тиоглицерин однозначно иммобилизован в пределах аморфного спекшегося материала. Внешний вид спекшегося материала нарушен и поэтому эстетически непривлекателен, но стабильность хранения является превосходной, как показано на фиг. 17-19. Никакая существенная деградация пептида не наблюдалась, за исключением самых экстремальных проверенных условий (40 С/75% RH) после приблизительно 8 недель. Пример 2. "Аморфные" серии двойных смесей. Типичный цикл сублимационного высушивания 2 А. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) трегалоза/глицин/тиоглицерин/метионин (165:95:46:5). Характеристики:Tg = 62,5 С; Остаточная влажность = 0,61% мас./об.; Структура спекшегося материала: полностью аморфный. Превосходное удерживание тиоглицерина. На стенах пузырька не наблюдается никакой конденсат для всех условий хранения. Тиоглицерин однозначно иммобилизован в пределах аморфного спекшегося материала. Внешний вид спекшегося материала нарушен и поэтому эстетически непривлекателен, но стабильность хранения является превосходной, как показано на фиг. 20-23. Никакая существенная деградация пептида не наблюдалась, за исключением самых экстремальных проверенных условий (40 С/75% RH) ,при которых наблюдалось непрерывное снижение в содержании пептида. 2 В. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) сахароза/глицин/тиоглицерин/метионин (182:78:46:5). Характеристики:WAXS-дифрактограмма: полностью аморфный. Удержание тиоглицерина является худшим, чем в примере 2 А, конденсат видим на стенах пузырька, хранившегося в 25C/65% RH. Тиоглицерин однозначно полностью не сохранился в пределах аморфного спекшегося материала. Внешний вид спекшегося материала нарушен и поэтому эстетически непривлекателен, но стабильность хранения является хорошей, как показано на фиг. 24-27. Существенная деградация пептида наблюдалась только для самых экстремальных проверенных условий: 25 С/65% RH (при которых показано явное снижение, особенно после 5 недель) и 40 С/75% RH (при которых показана очень плохая стабильность пептида). 2 С. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) трегалоза/маннит/тиоглицерин/метионин (160:100:46:5). Характеристики:WAXS-дифрактограмма : полностью аморфный. Удержание тиоглицерина является худшим, чем в примере 2 А, конденсат видим на стенах пузырька, хранившегося в 25C/65% RH. Тиоглицерин однозначно полностью не сохранился в пределах аморфного спекшегося материала. Внешний вид спекшегося материала нарушен и поэтому эстетически непривлекателен, но стабильность хранения является хорошей, как показано на фиг. 28-31. Никакая существенная деградация пептида не наблюдалась, кроме самых экстремальных проверенных условий (40 С/75% RH), при которых наблюдалось постепенное снижение в содержании пептида. Стабильность при 25 С/65% RH была хорошей,хотя и не такая, как в примере 2 А. 2D. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) сахароза/маннит/тиоглицерин/метионин (150:110:46:5). Характеристики:WAXS-дифрактограмма: полностью аморфный. Удержание тиоглицерина является худшим, чем в примере 2 А, конденсат видим на стенах пузырька, хранившегося в 25C/65% RH. Тиоглицерин однозначно полностью не сохранился в пределах аморфного спекшегося материала. Внешний вид спекшегося материала нарушен и поэтому эстетически непривлекателен, но стабильность хранения является хорошей, как показано на фиг. 32-35. Деградация пептида наблюдалась только при 25C/65% RH (плохая стабильность) и 40 С/75% RH (очень плохая стабильность). Сравнительный пример 1. Серии с маннитом. Типичный цикл сублимационного высушиванияC1A. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/тиоглицерин (265:14). Характеристики:Tg = нет; Остаточная влажность = 0,75% мас./об.; Структура спекшегося материала: кристаллическая; Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька для всех условий хранения. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано в фиг. 1-4. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме самого благоприятного (-80 С). Это условие хранения вряд ли будет коммерчески рентабельно для фармацевтического продукта. С 1 В. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/тиоглицерин (265:46). Характеристики:Tg = нет; Остаточная влажность = 0,33% мас./об.; Структура спекшегося материала: кристаллическая. Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька в той же степени, что и для С 1 А. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала, даже в случае, когда присутствует в наиболее высокой концентрации. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 5-8. Существенная пептидная деградация наблюдалась при всех условиях, кроме самых благоприятных (-80 С). С 1 С. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/тиоглицерин/метионин (265:14:5). Характеристики:Tg = нет; Остаточная влажность = 1,04% мас./об.; Структура спекшегося материала: кристаллическая. Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька в той же степени, что и для С 1 А. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала в присутствии метионина. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 9-12. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме самых благоприятных (-80 С). Метионин не улучшил свойства этой композиции.C1D. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/тиоглицерин/метионин (265:46:5). Характеристики:Tg = нет; Остаточная влажность = 0,61% мас./об.; Структура спекшегося материала: кристаллическая. Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька в той же степени, что и для С 1 А. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала, даже когда присутствует при более высокой концентрации и в присутствии метионина. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 13-16. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме самого благоприятного (-80 С). Метионин не улучшил свойства этой композиции. Сравнительный пример 2. Серии "кристаллических" двойных смесей с трегалозой. Типичный цикл сублимационного высушивания С 2 А. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/трегалоза/тиоглицерин/метионин (245:10:46:5). Характеристики:Tm = са. 160 С; Остаточная влажность = 0,11% мас./об.; Структура спекшегося материала: кристаллическая (не полностью). Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька после 6 недель при 25 и 40 С. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 36-39. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме двух самых благоприятных (5 и -80 С). С 2 В. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/трегалоза/тиоглицерин/метионин (235:20:46:5). Характеристики:Tm = не определяли; Остаточная влажность = не определяли; Структура спекшегося материала: кристаллическая (не полностью). Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька особенно при 25 и 40 С. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала даже при более высокой концентрации трегалозы. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 40-43. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме двух самых благоприятных (5 и -80 С). С 2 С. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/трегалоза/тиоглицерин/метионин (225:30:46:5). Характеристики:Tm = не определяли; Остаточная влажность = не определяли; Структура спекшегося материала: кристаллическая (не полностью). Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька особенно при 25 и 40 С. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала даже при более высокой концентрации трегалозы. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 44-47. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме двух самых благоприятных (5 и -80 С).C2D. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/трегалоза/тиоглицерин/метионин/ЭДТК (245:10:46:5:0,5).Tm = не определяли; Остаточная влажность = не определяли; Структура спекшегося материала: кристаллическая (не полностью). Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 48-51. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме двух самых благоприятных (5 и -80 С). Добавление ЭДТК не затрагивает свойства этой композиции. С 2 Е. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/трегалоза/тиоглицерин/метионин/ЭДТК (235:20:46:5:0,5). Характеристики:Tm = не определяли; Остаточная влажность = не определяли; Структура спекшегося материала: кристаллическая (не полностью). Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 52-55. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме двух самых благоприятных (5 и -80 С). Добавление ЭДТК не затрагивает свойства этой композиции.C2F. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/трегалоза/тиоглицерин/метионин/ЭДТК (225:30:46:5:0,5). Характеристики:Tm = не определяли; Остаточная влажность = не определяли; Структура спекшегося материала: кристаллическая (не полностью). Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька особенно при 25 и 40 С. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала даже при высокой концентрации трегалозы и в присутствии ЭДТК. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 56-59. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме самого благоприятного (-80 С). Добавление увеличенных уровней ЭДТК не затрагивает значительно свойства этой композиции. Сравнительный пример 3. Серии "кристаллических" двойных смесей с сахарозой. Типичный цикл сублимационного высушивания С 3 А. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации нит/сахароза/тиоглицерин/метионин (250:10:46:5). Характеристики: Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька особенно при 25 и 40 С. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала. Спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 60-63. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме двух самых благоприятных (5 и -80 С).C3B. Компоненты непептида (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/сахароза/тиоглицерин/метионин (235:20:46:5) Характеристики:Tm = не определяли; Остаточная влажность = не определяли; Структура спекшегося материала: кристаллическая (не полностью). Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька особенно при 25 и 40 С. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала даже при более высокой концентрации сахарозы. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 64-67. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме двух самых благоприятных (5 и -80 С). С 3 С. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/сахароза/тиоглицерин/метионин (225:30:46:5). Характеристики:Tm = не определяли; Остаточная влажность = не определяли; Структура спекшегося материала: кристаллическая (не полностью). Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька после 5 недель, особенно при 25 и 40 С. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала даже при более высокой концентрации сахарозы. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 68-71. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме двух самых благоприятных (5 и -80 С).C3D. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/сахароза/тиоглицерин/метионин/ЭДТК (245:10:46:5:0,5). Характеристики:Tm = не определяли; Остаточная влажность = не определяли; Структура спекшегося материала: кристаллическая (не полностью). Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька после 5 недель, особенно при 25 и 40 С. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала даже при более высокой концентрации сахарозы. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 72-75. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме двух самых благоприятных (5 и -80 С). С 3 Е. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/сахароза/тиоглицерин/метионин/ЭДТК (235:20:46:5:0,5). Характеристики:Tm = не определяли; Остаточная влажность = не определяли; Структура спекшегося материала: кристаллическая (не полностью). Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька после 5 недель, особенно при 25 и 40 С. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося мате- 25019923 риала. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 76-79. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме двух самых благоприятных (5 и -80 С). Добавление ЭДТК не затрагивает свойств этой композиции.C3F. Непептидные компоненты (значения в скобках указывают концентрации в мМ) маннит/сахароза/тиоглицерин/метионин/ЭДТК (225:30:46:5:0,5). Характеристики:Tm = не определяли; Остаточная влажность = не определяли; Структура спекшегося материала: кристаллическая (не полностью). Удержание тиоглицерина слабое. Конденсат видим на стенах пузырька после 5 недель, особенно при 25 и 40 С. Тиоглицерин однозначно не сохранился в пределах кристаллического спекшегося материала даже при высокой концентрации сахарозы и в присутствии ЭДТК. Внешне спекшийся материал выглядит хорошо и поэтому эстетически привлекателен, но стабильность при хранении низкая, как показано на фиг. 80-83. Существенная деградация пептида наблюдалась при всех условиях, кроме двух самых благоприятных (5 и -80 С). Добавление ЭДТК не затрагивает свойств этой композиции. Пример 4. Состав, основанный на результатах примера 1, был дополнительно проверен на долгосрочную стабильность. Следующий состав (названный Тиоглицерин "высокий") хранился в течение одного года при 30 С/65% RH: Концентрации приведены для композиции в жидком состоянии, которая находится перед сублимационным высушиванием и после восстановления. Альтернативный состав (Тиоглицерин "низкий") был проведен при тех же условиях, и был идентичен, за исключением того, что тиоглицерин присутствовал в концентрации 14 мМ, а не 46 мМ. Деградацию пептида проверяли с интервалами, как показано на фиг. 84. Результаты указывают, что в обоих составах достигнута превосходная пептидная стабильности в продолжение всего периода испытания. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ получения стабильной лиофилизированной композиции, содержащей по крайней мере один пептид длиной 8-30 аминокислот, включающий по крайней мере один свободный остаток цистеина; указанный способ включает:(a) подготовку композиции, содержащей в растворе (i) трегалозу в качестве единственного невосстанавливающего углевода; (ii) тиоглицерин и (iii) по крайней мере один указанный пептид; и(b) сублимационное высушивание композиции, полученной на стадии (а). 2. Способ по п.1, где указанная композиция образуется на стадии (а), в которой тиоглицерин присутствует в молярной концентрации, которая в 30-40 или 60-80 раз больше, чем молярная концентрация пептидных компонентов композиции, содержащих по крайней мере один свободный остаток цистеина. 3. Способ по п.1 или 2, в котором по крайней мере один пептид содержит область, включающую по крайней мере один МНС-связывающий Т-клеточный эпитоп, полученную из аллергена или аллоантигена. 4. Способ по п.3, где эпитоп получают из:(a) аллергена, выбранного из растительного аллергена, аллергенов тревоги животных, плесневого и грибкового аллергена, аллергена пыли, антибиотика или другого препарата, жгучего яда насекомого,аллергена окружающей среды или пищевого аллергена; или(b) антигена, выбранного из главных антигенов, связанных с острым рассеянным энцефаломиелитом (ADEM); болезнью Аддисона; анкилозирующим спондилоартритом; синдромом антифосфолипидных антител (APS); апластической анемией; аутоиммунным гепатитом; аутоиммунным оофоритом; глютеновой энтеропатией; болезнью Крона; сахарным диабетом 1 типа; гестационным пемфигоидом; синдромом Гудпасчера; болезнью Грейвса; синдромом Гийена-Барре (GBS); болезнью Хашимото; идиопатической тромбоцитопенической пурпурой; болезнью Кавасаки; красной волчанкой; рассеянным склерозом; миастенией gravis; нарколепсией, синдромом пляшущих глаз (OMS); невритом зрительного нерва; тиреоидитом Орда; обыкновенной пузырчаткой; злокачественной анемией; множественным артериитом у собак; билиарным первичным циррозом печени; ревматическим полиартритом; синдромом Рейтера; синдромом Шегрена, синдромом Такаясу; темпоральным артериитом (также известным как "гигантоклеточный артериит"); тепловой аутоиммунной гемолитической анемией и гранулематозом Вегенера. 5. Способ по п.4, где эпитоп получают из аллергена трав или из белка тревоги кошки Fel d1; белков клеща домашней пыли Der p 1, Der p 2, Der p 7, Der p 3-15, Der p 18, 20, 21 и 23, Der f 1, 2, 7, 10, с 11 по 18 и 20-22; белка амброзии amb a 1, 2, 3, 5, 6, 7, 8, 9 и их изоформ, включая amb a 1.1, а 1.2, a 1.3 или a 1.4; белков райграса многолетнего lol p1 и lol р 5; белков тимофеевки луговой phl p1 и phl p5; белка свинороя пальчатого Cyn d 5; белков Alternaria alternata Alt a 1, Alt a 2, от Alt a 3 до Alt a 10, Alt a 12, Alt a 13 и енолазы (Alt a 6), Cla h 1, 2, 5-10, 12, GST, HCh1, HSP70, NTF2, ТСТР; белка березы Bet v1, 2, 3, 4, 6, 7,8 и P14; белков таракана рыжего Bla g 1, Bla g 2, Bla g 3, Bla g 4, Bla g 5 и Bla g 6, 7, 8, 9, GSTD1, трипсина; белка полыни обыкновенной Art v 1; белка солянки русской Sal k 1, Sal k 2 и Sal k 8; арахиса Ara h1,Ara h2, Ara h3, Ara h4, Ara h5, Ara h6, профилинов растений или липид-передающих белков или лейкоцитарного антигена человека. 6. Способ по п.5, в котором композиция включает пептиды с SEQ ID NO: 1-4. 7. Способ по п.6, в котором композиция дополнительно включает пептиды с SEQ ID NO: 84-86 и,необязательно, не содержит никаких дополнительных пептидов. 8. Стабильная лиофилизированная композиция, полученная способом по любому из предшествующих пунктов. 9. Способ восстановления стабильной лиофилизированной композиции по п.8, включающий восстановление лиофилизированной композиции в растворе. 10. Раствор, восстановленный способом по п.9. 11. Стабильная лиофилизированная композиция, содержащая по крайней мере один пептид длиной 8-30 аминокислот, включающий по крайней мере один свободный остаток цистеина, тиоглицерин и трегалозу в качестве единственного невосстанавливающего углевода. 12. Композиция по п.11, в которой по крайней мере один пептид содержит область, включающую по крайней мере один МНС-связывающий Т-клеточный эпитоп, полученную из аллергена или аллоантигена. 13. Композиция по п.12, в которой эпитоп получают из:(a) аллергена, выбранного из растительного аллергена, аллергенов тревоги животных, плесневого и грибкового аллергена, аллергена пыли, антибиотика или другого препарата, жгучего яда насекомого,аллергена окружающей среды или пищевого аллергена; или(b) антигена, выбранного из главных антигенов, связанных с острым рассеянным энцефаломиелитом (ADEM); болезнью Аддисона; анкилозирующим спондилоартритом; синдромом антифосфолипидных антител (APS); апластической анемией; аутоиммунным гепатитом; аутоиммунным оофоритом; глютеновой энтеропатией; болезнью Крона; сахарным диабетом 1 типа; гестационным пемфигоидом; синдромом Гудпасчера; болезнью Грейвса; синдромом Гийена-Барре (GBS); болезнью Хашимото; идиопа- 27019923 тической тромбоцитопенической пурпурой; болезнью Кавасаки; красной волчанкой; рассеянным склерозом; миастенией gravis; нарколепсией, синдромом пляшущих глаз (OMS); невритом зрительного нерва; тиреоидитом Орда; обыкновенной пузырчаткой; злокачественной анемией; множественным артериитом у собак; билиарным первичным циррозом печени; ревматическим полиартритом; синдромом Рейтера; синдромом Шегрена, синдромом Такаясу; темпоральным артериитом (также известным как "гигантоклеточный артериит"); тепловой аутоиммунной гемолитической анемией и гранулематозом Вегенера. 14. Композиция по п.13, где эпитоп получают из аллергена трав, белка тревоги кошки Fel d1; белков клеща домашней пыли Der p 1, Der p 2, Der p 7, Der p 3-15, Der p 18, 20, 21 и 23, Der f 1, 2, 7, 10, с 11 по 18 и 20-22; белка амброзии amb a 1, 2, 3, 5, 6, 7, 8, 9 и их изоформ, включая amb a 1.1, а 1.2, a 1.3 или a 1.4; белков райграса многолетнего lol p1 и lol р 5; белков тимофеевки луговой phl p1 и phl p5; белка свинороя пальчатого Cyn d 5; белков Alternaria alternata Alt a 1, Alt a 2, от Alt a 3 до Alt a 10, Alt a 12, Alt a 13 и енолазы (Alt a 6), Cla h 1, 2, 5-10, 12, GST, HCh1, HSP70, NTF2, ТСТР; белка березы Bet v1, 2, 3, 4, 6, 7,8 и P14; белков таракана рыжего Bla g 1, Bla g 2, Bla g 3, Bla g 4, Bla g 5 и Bla g 6, 7, 8, 9, GSTD1, трипсина; белка полыни обыкновенной Art v 1; белка солянки русской Sal k 1, Sal k 2 и Sal k 8; арахиса Ara h1,Ara h2, Ara h3, Ara h4, Ara h5, Ara h6, профилинов растений или липид-передающих белков или лейкоцитарного антигена человека. 15. Композиция по п.14, которая включает пептиды с SEQ ID NO: 1-4. 16. Композиция по п.15, где композиция дополнительно включает пептиды с SEQ ID NO: 84-86 и,необязательно, не содержит никаких дополнительных пептидов. 17. Способ восстановления стабильной лиофилизированной композиции по любому из пп.11-16,включающий восстановление лиофилизированной композиции в растворе. 18. Раствор, восстановленный способом по п.17.