Способы лечения кожных язв

СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ КОЖНЫХ ЯЗВ Предложен способ лечения и/или профилактики кожных язв у субъекта, включающий определение, имеет ли указанный субъект кожную язву или подвергается риску ее развития, и введение фармацевтической композиции, включающей средство, ингибирующее активность и/или экспрессию белка Лп-ФЛА 2, которое выбрано из группы, включающей 1-(N-(2(диэтиламино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4-фторбензил) тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он или SB480848, или его фармацевтически приемлемую соль,или сложный эфир; N-(2-диэтиламиноэтил)-2-[2-(2-(2,3-дифторфенил)этил)-4-оксо-4,5,6,7 тетрагидроциклопентапиримидин-1-ил]-N-(4'-трифторметилбифенил-4-илметил)ацетамид, или его фармацевтически приемлемую соль, или сложный эфир; N-(1-(2-метоксиэтил)пиперидин 4-ил)-2-[2-(2,3-дифторбензилтио)-4-оксо-4 Н-хинолин-1-ил]-N-(4'-трифторметилбифенил-4-илметил)ацетамид, или его фармацевтически приемлемую соль, или сложный эфир; метиловый эфир 2-[4-([2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксопиридо[2,3-d]пиримидин-1(4 Н)-ил]ацетил[4'(три-фторметил)-4-бифенилил]метиламино)-1-пиперидинил]-2-метилпропановой кислоты, или его фармацевтически приемлемую соль, или сложный эфир, субъекту, имеющему кожную язву или с риском развития кожных язв.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ДЗЕ ТРАСТИЗ ОФ ДЗЕ ЮНИВЕРСИТИ ОФ ПЕНСИЛЬВАНИЯ (US) Область техники, к которой относится изобретение Варианты осуществления настоящего изобретения в целом относятся к способам лечения и/или профилактики кожных язв с применением средств, которые ингибируют экспрессию и/или активность белка Лп-ФЛА 2. Уровень техники Липопротеинассоциированная фосфолипаза А 2 (Лп-ФЛА 2), ранее также известная в уровне техники как ацетилгидролаза фактора активации тромбоцитов (ФАТ-ацетилгидролаза), является представителем суперсемейства ферментов - фосфолипаз А 2, которые вовлечены в гидролиз липопротеиновых липидов или фосфолипидов. Ее секретируют некоторые клетки, играющие главную роль в системном воспалительном ответе при ранении, которые включают лимфоциты, моноциты, макрофаги, Т-лимфоциты и тучные клетки. В ходе преобразования ЛПНП в окисленную форму Лп-ФЛА 2 ответственна за гидролиз сложногоsn-2 эфира окислительно модифицированного фосфатидилхолина, приводящий к образованию лизофосфатидилхолина и окислительно модифицированной жирной кислоты. Лп-ФЛА 2 гидролизирует sn-2 положение усеченного фосфолипида, связанного с окисленным ЛПНП. В результате происходит генерация 2 медиаторов хемотаксиса воспалительных клеток (неэтерифицированные жирные кислоты (НЭЖК) и ЛФХ). НЭЖК и ЛФХ являются хемоаттрактантами для циркулирующих моноцитов, играют роль в активации макрофагов и повышают окислительный стресс, а также влияют на функциональный и немедленный ответ Т-лимфоцитов. Лп-ФЛА 2 у человека и свиньи связана с молекулой ЛПНП через липопротеин В, и в случае появления в артериальной стенке окисленный ЛПНП становится восприимчив к гидролизу под действием Лп-ФЛА 2. Оба из указанных продуктов действия Лп-ФЛА 2 являются мощными хемоаттрактантами для циркулирующих моноцитов. Кроме того, считается, что указанный фермент ответственен за накопление клеток, загруженных эфиром холестерина, в артериях, вызывающее характерную "жировую прожилку", связанную с ранними стадиями атеросклероза, а ингибирование фермента Лп-ФЛА 2 может способствовать предотвращению формирования указанной жировой прожилки (посредством ингибирования формирования лизофосфатидилхолина) и применяться в лечении атеросклероза. Кроме того, предполагают, что Лп-ФЛА 2 играет прямую роль в окислении ЛПНП. Это обусловлено пероксидными продуктами, образованными из липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, под действием Лп-ФЛА 2, что способствует усилению общего окислительного процесса. В соответствии с данным предположением ингибиторы Лп-ФЛА 2 ингибируют окисление ЛПНП. Ингибиторы ЛпФЛА 2 могут, таким образом, найти общее применение при любом нарушении, которое вовлекает перекисное окисление липидов совместно с активностью фермента и/или активированными воспалительными ответами, например, в дополнение к таким заболеваниям, как атеросклероз и диабет, при других заболеваниях, таких как ревматоидный артрит, инфаркт миокарда и реперфузионное повреждение миокарда. Кожа является наибольшим органом тела человека. Это относится к внешней поверхности, поскольку кожа покрывает тело и, по-видимому, обладает наибольшей площадью из всех органов. Более того, это относится к весу, поскольку кожа весит больше, чем любой отдельный внутренний орган, составляя приблизительно 15% массы тела. У среднего взрослого человека площадь кожи составляет 1,52,0 м 2 большей частью с толщиной 2-3 мм. Квадратный дюйм (6,5 см 2) кожи содержит в среднем 650 потовых желез, 20 кровеносных сосудов, 60000 меланоцитов и более тысячи нервных окончаний. Как орган кожа является покровной системой, состоящей из нескольких слоев эпителиальных тканей: эпидермы, дермы и гиподермы, которые защищают основные мышцы и органы. В качестве поверхности контакта с внешней средой она играет наиболее важную роль в защите против патогенных микроорганизмов, создавая гидроизолирующий и барьерный слой для инфекции. Ее другими главными функциями является изоляция и регулирование температуры, ощущение, а также синтез витаминов D и В. Дополнительное выделение мочевины, поглощение кислорода и лекарственных средств также достигается через кожу. Следовательно, кожа считается одной из самых важных частей тела. Когда целостность кожи нарушается, например в результате истирания или пореза, происходит также нарушение целостности нескольких слоев эпителия, при этом защитная функция кожи локально теряется. Организм человека вырабатывает локализованный репаративный ответ, прежде всего нацеленный на восстановление целостности эпителия и предотвращение проникновения патогенных микроорганизмов. Репаративный ответ включает усиление тока крови к ране, мобилизацию многочисленных иммуноцитов (фагоцитирующие макрофаги) и воспалительные ответы, чтобы устранить любые патогенные микроорганизмы и клеточные обломки, мобилизацию фибробластов к поврежденному участку кожи,секрецию внеклеточного матрикса и затягивание раны посредством восстановления дермы и эпидермы. Иногда указанный репаративный ответ ослаблен или затруднен в результате различных заболеваний и/или повторных травм, а также их комбинаций, при этом рана остается открытой или представляет собой язву на коже. Данная открытая рана уязвима для заражения патогенными микроорганизмами в окружающей области. Кожная язва может увеличиться в результате инфекции и распространяющегося воспаления. Гной (мертвые иммуноциты, клетки кожи и возбудители инфекции) накапливается в полости кожной язвы, формируя абсцесс. Абсцессы в большинстве отделов организма редко поддаются само-1 018101 устранению, таким образом, при первом подозрении на абсцесс показана быстрая медицинская помощь. Поскольку кожа является первой линией защиты против любых патогенных микроорганизмов в среде нашего обитания, наличие хронической язвы представляет очень серьезный и опасный случай,требующий быстрого и активного лечения, а отказ от своевременного обращения к данной проблеме может привести к страшным последствиям, таким как гангрена, потеря конечностей в результате ампутации, сепсис и даже смерть. Хронические раны кожи являются широкораспространенной проблемой у лиц, страдающих диабетом, нарушением кровообращения, раком, нарушениями иммунной системы, неврологическими расстройствами, или лиц с ограниченной подвижностью, которые прикованы к инвалидному креслу или кровати. Ограниченная подвижность может являться следствием паралича, обусловленного травмами или заболеванием, либо врожденными дефектами, такими как церебральный паралич и расщепление позвоночных дуг (spina bifida). Хроническая кожная язва послужила основным фактором смерти известного актера Кристофера Рива, который был парализован после несчастного случая при падении с лошади. Уровень распространения кожных язв может составлять порядка 60% у парализованных пациентов и 66% у пожилых пациентов с установленным переломом бедренной кости (см. "The Agency for Health CarePolicy and Research" Clinical Practice Guideline Number 3, AHCPR Pub. No. 92-0047). По меньшей мере один раз в течение жизни у 15% пациентов, страдающих диабетом, развиваются кожные язвы, крайне восприимчивые к инфекции. Практически 85% ампутаций у диабетиков, проводимых ежегодно, предшествуют язвы (Glover J.L., et al., 1997, Adv. Wound Care 10:33-38). Согласно статистике только в Соединенных Штатах Америки 5-7 млн человек страдают хроническими кожными язвами (Petrie N., et al., 2003, Surgical Clinics of North America 83(3):194-9). Ежегодно в Америке полная стоимость лечения хронических ран, включая диагностику ран и хирургические операции, фармацевтические препараты, устройства для затягивания ран, включая также затраты на больничное обслуживание и работу медперсонала, составляет приблизительно 20 млрд(Frykberg R., et al., 2000,J. Foot Ankle Surg. 39(5 Suppl):l-60; Harding K., et al., 2002, BMJ 324 (7330):160-3). В приведенную оценку не включены косвенные затраты на хронические раны, такие как потерянное время работы и ухудшение качества жизни, которые с большим трудом поддаются количественному определению, но могут считаться существенными. В настоящее время лечение хронических ран включает лекарственные средства, такие как антибактериальные и противогрибковые средства, тромболитические средства или тромборастворяющие средства, такие как активатор тканевого плазминогена (tPA), применение давящих бандажей, биоинженерных заменителей кожи (выращенных эпидермальных аллографтов), электростимуляции, современных систем доставки лекарственных средств, таких как система трансдермальной доставки на основе электрофореза,локальной доставки материалов, которые восстанавливают ткань, например тромбоцитарный и аутологичный фактор роста, гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (ГМ-КСФ) и мезогликан, вакуумной терапии ран и ультразвука. Однако несмотря на многосторонний подход к лечению и ускорению заживления хронических кожных язв с применением активного лечения инфекции и улучшения кровообращения, хронические кожные язвы остаются одной из главных клинических проблем. Большей частью врачи не имели никакого способа определения на ранних этапах, какие раны могут потребовать указанных современных и дорогостоящих процедур. Таким образом, сохраняется потребность в новом усовершенствовании лечения, а также профилактики кожных язв у лиц, которые находятся в группе высокого риска развития хронических кожных язв. Кроме того, существует безотлагательная потребность в новом усовершенствовании профилактики повторных случаев кожных язв среди лиц, подверженных риску. Сущность изобретения Настоящее изобретение направлено на способ лечения и/или профилактики кожных язв у субъекта,включающий введение субъекту, испытывающему в этом потребность, фармацевтической композиции,включающей средство, которое ингибирует активность и/или экспрессию белка Лп-ФЛА 2. Один из вариантов осуществления изобретения является способом лечения и/или профилактики кожных язв у субъекта, включающим определение того, имеет ли субъект кожную язву или подвергается риску ее возникновения, и введение фармацевтической композиции, включающей средство, которое ингибирует активность и/или экспрессию белка Лп-ФЛА 2 у субъекта, имеющего кожную язву или подверженного развитию кожной язвы. Кожные язвы, которые могут подвергаться лечению с применением способов настоящего изобретения, выбраны из группы, состоящей из пролежней, язв от ожогов, язв от обморожения, сосудистых язв,метаболических язв, невропатических язв, язв при заболеваниях соединительной ткани, ятрогенных язв,самопроизвольных язв, травматических язв, опухолевых язв, язв при иммунологических заболеваниях и нарушениях, а также при аутоиммунных заболеваниях, язв, связанных с заболеваниями кроветворной системы, язв, связанных с лейкоцитарными нарушениями, диспротеинемических язв, язв, вызванных инфекцией, язв, вызванных паразитарной инвазией, а также язв при заболеваниях и нарушениях с неизвестной этиологией. Факторы риска развития кожных язв включают наличие предыдущего случая возникновения кож-2 018101 ной язвы, связанного с заболеванием или нарушением, или травмой, которые могут вызывать возникновение кожной язвы; преклонный возраст; постоянное пребывание в постели или в инвалидном кресле; плохое питание; нехватку физической активности; чрезмерное употребление алкоголя; недержание мочи; недержание стула; слабую кожу; сниженную умственную способность; курение; диагноз или наличие диабета; высокое кровяное давление; высокие уровни гомоцистеина; лишний вес; варикозное расширение вен в семейном анамнезе; васкулит; диагноз нарушения свертываемости крови; профессию, требующую длительного пребывания в стоячем положении; наличие серповидноклеточной анемии; прием бромидосодержащих лекарственных средств; химиотерапию средствами на основе гидроксимочевины; почечную недостаточность; лепру; ожоги и обморожение. В одном из вариантов осуществления субъект имеет по меньшей мере один фактор риска. В другом варианте осуществления субъект имеет по меньшей мере два фактора риска. В одном из вариантов осуществления средство, ингибирующее активность белка Лп-ФЛА 2, представляет собой небольшую молекулу, нуклеиновую кислоту, аналог нуклеиновой кислоты, белок, антитело, пептид, аптамер или их варианты или фрагменты. В некоторых вариантах осуществления средство, ингибирующее активность белка Лп-ФЛА 2, представляет собой небольшую молекулу, например, помимо прочего, низкомолекулярный, обратимый или необратимый ингибитор белка Лп-ФЛА 2. В некоторых вариантах осуществления подобная небольшая молекула является соединением на основе пиримидиона. В некоторых вариантах осуществления низкомолекулярным ингибитором Лп-ФЛА 2 является, например, помимо прочих, 1-(N-(2-(диэтиламино)этил)N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4-фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он (который также известен как SB480848) или его соль. В некоторых вариантах осуществления низкомолекулярным ингибитором Лп-ФЛА 2 является, например, помимо прочих, N-(2 диэтиламиноэтил)-2-[2-(2-(2,3-дифторфенил)этил)-4-оксо-4,5,6,7-тетрагидроциклопентапиримидин-1 ил]-N-(4'-трифторметилбифенил-4-илметил)ацетамид или его соль. В некоторых вариантах осуществления низкомолекулярным ингибитором Лп-ФЛА 2 является, например, помимо прочих, N-(1-(2 метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-2-[2-(2,3-дифторбензилтио)-4-оксо-4 Н-хинолин-1-ил]-N-(4'-трифторметилбифенил-4-илметил)ацетамид или его соль. В некоторых вариантах осуществления низкомолекулярным ингибитором Лп-ФЛА 2 является, например, помимо прочих, метил-2-[4-([2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]4-оксопиридо[2,3-d]пиримидин-1(4 Н)-ил]ацетил[4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метиламино)-1 пиперидинил]-2-метилпропаноат или его соль. Другие формы ингибиторов включают средство на основе нуклеиновой кислоты, которое является средством на основе интерферирующих РНК, например миРНК, мшРНК, мкРНК, днРНК, или рибозима,или вариантов на их основе. В одном из вариантов осуществления средство, ингибирующее активность белка Лп-ФЛА 2, может быть введено субъекту вместе с дополнительными терапевтическими средствами. Указанные дополнительные терапевтические средства выбраны из группы, состоящей из антибактериальной терапии, антипаразитарной терапии, терапии против ожирения, терапии против диабета, терапии сердечно-сосудистых заболеваний, терапии при почечной недостаточности, терапии при васкулите, терапии при венозной недостаточности, терапии при артериальной недостаточности, терапии при раке, иммуносупрессивной терапии, терапии при иммунной недостаточности, стероидной терапии, терапии при ожогах и психотерапии. В еще одном варианте осуществления средство, ингибирующее активность белка Лп-ФЛА 2, вводят субъекту вместе с дополнительными терапевтическими средствами и стандартным медицинским уходом за раной. В другом варианте осуществления средство, ингибирующее активность белка Лп-ФЛА 2, вводят субъекту вместе с биоинженерными заменителями кожи. Краткое описание чертежа Временной график (дни) развития абсцесса (накопление гноя в язвах) и лечения язвы у свиней с диабетом/гиперхолестеринемией (DM/НС), получавших ингибитор Лп-ФЛА 2, SB480848, и DM/НС свиней, не получавших ингибитор Лп-ФЛА 2. Контрольная группа необрабатываемых животных включала 21 DM/HC свинью I, а экспериментальная группа - 22 свиньи DM/HC, обработанных SB480848. Свиней 948 и 963 обрабатывали ингибитором Лп-ФЛА 2. У обозначенных свиней развивались абсцессы перед началом обработки ингибитором. Абсцессы обработали, после чего они зажили в среднем за 1-2 недели. После введения ежедневной разовой дозы ингибитора SB480848 абсцесс более не развивался. Свиней 975, 1024, 949, 947, 1007 и 15 не обрабатывали ингибитором Лп-ФЛА 2 SB480848. У всех обозначенных свиней развивались абсцессы, причем у двух свиней развился повторный абсцесс, а у одной свиньи развилось хроническое изъязвление, длившееся более 2 месяцев. Подробное описание изобретения Варианты осуществления настоящего изобретения основаны на открытии, которое заключается в том, что у DM/НС свиней, обработанных средством, ингибирующим фермент Лп-ФЛА 2, не развивались какие-либо кожные язвы. Модель на основе DM/HC свиней фенотипически демонстрирует много сходства с пациентами, подверженными высокому риску диабета. Одним из ключевых сходств является тенденция к развитию абсцессов кожи - инфицированных кожных язв, которые вызывает стафилококк, мик-3 018101 роорганизм, наиболее часто выделяемый при инфекциях у лиц, страдающих диабетом. Пациенты с диабетом крайне склонны к развитию язв на ногах в результате осложнений, таких как невропатия, патология периферических сосудов, а также плохое заживление, которые часто связывают с неконтролируемым повышением сахара в крови. В ходе обработки свиней ингибитором фермента Лп-ФЛА 2 SB480848 в течение 6 месяцев ни у одной свиньи не развивались какие-либо абсцессы кожи. Кроме того, наблюдалось,что у свиней, у которых наблюдали активные абсцессы кожи в начале обработки, после заживления первичного абсцесса более не развивалось повторных случаев абсцессов кожи. Таким образом, один из вариантов осуществления изобретения относится к лечению кожных язв у субъекта, испытывающего в этом потребность, посредством ингибирования экспрессии и/или активности белка Лп-ФЛА 2. Другой вариант осуществления изобретения охватывает профилактику кожных язв у субъекта, у которого ранее наблюдались кожные язвы, включающую ингибирование экспрессии и/или активности белка Лп-ФЛА 2. В другом варианте осуществления изобретение охватывает профилактику кожных язв у субъекта, который подвергается риску развития кожных язв, посредством ингибирования экспрессии и/или активности белка Лп-ФЛА 2. Определения. Если в настоящем описании не указано иное, научно-технические термины, используемые применительно к настоящей заявке, должны иметь такие значения, которые обычно подразумеваются средними специалистами в данной области. Кроме того, если контекст не предусматривает иное, термины в форме единственного числа должны включать множества, а термины во множественной форме должны включать единственное. Термин "кожная язва", используемый в настоящей заявке, относится к открытой ране на коже, в которой отсутствует эпидерма. Подстилающий слой дермы или гиподерма может быть открыт и виден. Окружающая кожа может быть покрасневшей и воспаленной. Кардинальными симптомами и признаками любого типа воспалительного процесса являются краснота, высокая температура, опухоль, боль и потеря функции. Такие открытые раны склонны к заражению патогенными микроорганизмами, такими как бактерии, грибки и вирусы. В запущенных случаях из раны может выделяться жидкий гной. Гной(мертвые иммуноциты, клетки кожи, клеточная жидкость и возбудители инфекции) накапливается в полости кожной язвы, формируя абсцесс. Термины "заболевание" или "нарушение" попеременно используются в настоящей заявке и относятся к любому изменению состояния тела или некоторых органов, прерывающему или нарушающему эффективность функций и/или вызывающему такие симптомы, как дискомфорт, дисфункция, тяжелое недомогание или даже смерть, пораженному лицу, или тем, кто находится в контакте с данным лицом. Заболевание или нарушение могут также относиться к плохому настроению, недомоганию, недугу, расстройству, нездоровому состоянию, болезни или ненормальному состоянию. Термин "средство" относится к любой единице, которая в клетке обычно не присутствует или вообще не присутствует на уровнях, в которых ее вводят. Средство может быть выбрано из группы, включающей: химические вещества; небольшие молекулы; последовательности нуклеиновых кислот; аналоги нуклеиновых кислот; белки; пептиды; аптамеры; антитела или фрагменты перечисленного. Последовательность нуклеиновых кислот может представлять собой РНК или ДНК, может являться однонитевой или двунитевой и может быть выбрана из группы, включающей нуклеиновую кислоту, кодирующую целевой белок, олигонуклеотиды, аналоги нуклеиновой кислоты, например пептидно-нуклеиновую кислоту (ПНК), псевдокомплементарную ПНК (пкПНК), закрытую нуклеиновую кислоту (ЗНК) и т.д. Такие последовательности нуклеиновых кислот включают, например, помимо прочих, последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белки, например, которая действует в качестве репрессоров транскрипции, антисмысловых молекул, рибозимов, малых ингибиторных последовательностей нуклеиновых кислот, например, помимо прочих, РНКи, мшРНК, миРНК, микроРНК (мкРНК), антисмысловых олигонуклеотидов и т.д. Белок, и/или пептид, или их фрагмент могут являться любым целевым белком, например, помимо прочих, мутированными белками; терапевтическими белками и усеченными белками,где белок обычно отсутствует или экспрессируется на более низких уровнях в клетке. Белки могут также быть выбраны из группы, включающей мутированные белки, генно-инженерные белки, пептиды, синтетические пептиды, рекомбинантные белки, химерные белки, антитела, миди-антитела, мини-антитела,тримерные антитела, гуманизированные белки, гуманизированные антитела, химерные антитела, модифицированные белки и их фрагменты. В альтернативе средство может быть расположено внутри клетки в результате введения последовательности нуклеиновой кислоты в клетку и ее транскрипции, приводящей к синтезу нуклеиновой кислоты и/или белка-ингибитора Лп-ФЛА 2 внутри клетки. В некоторых вариантах осуществления средство является любым химическим веществом, единицей или молекулой,включая, помимо прочего, синтетические и природные небелковые единицы. В некоторых вариантах осуществления средство является небольшой молекулой, имеющей химическую группу. Например, химические группы включают незамещенные или замещенные алкильные, ароматические или гетероциклильные группы, включая макролиды, лептомицины и родственные природные продукты или аналоги перечисленного. Может быть известно, что средства обладают желаемой активностью и/или свойством или могут быть выбраны из разнообразных соединений. Термин "ингибирующий", также используемый в настоящем описании, который относится к экспрессии или активности белка или полипептида Лп-ФЛА 2 или их вариантов или гомологов, не обязательно означает полное ингибирование экспрессии и/или активности. Скорее экспрессия или активность белка, полипептида или полинуклеотида ингибирована в некоторой степени, и/или в течение некоторого времени, достаточного для получения необходимого эффекта. В частности, ингибирование Лп-ФЛА 2 может быть определено с помощью анализа на ингибирование Лп-ФЛА 2, например, помимо прочего, с использованием биотеста на белок Лп-ФЛА 2, описанного в настоящей заявке. Средства, которые ингибируют Лп-ФЛА 2, являются средствами, которые ингибируют белок Лп-ФЛА 2 и/или активность Лп-ФЛА 2 по меньшей мере на 10%. В некоторых вариантах осуществления ингибитором Лп-ФЛА 2 является средство, которое ингибирует белок Лп-ФЛА 2 или экспрессию Лп-ФЛА 2 по меньшей мере на 10%. Используемый в настоящем описании термин "Лп-ФЛА 2" относится к белку-мишени, ингибируемому способами, описанными в настоящей заявке. Лп-ФЛА 2 используется попеременно с липопротеинассоциированной фосфолипазой А 2, также ранее известной в уровне техники как ацетилгидролаза Фактора Активации Тромбоцитов (ацетилгидролаза ФАТ). Лп-ФЛА 2 человека кодируется нуклеиновой кислотой, соответствующей регистрационному номеру U20157 (SEQ ID NO: 1) или Ref Seq ID:NM005084 (SEQ ID NO: 2), или же Лп-ФЛА 2 человека соответствует белковой последовательности,соответствующей регистрационному номеру NP005075 (SEQ ID NO: 3), которые раскрыты в заявке на патент США 5981252, которая прямо включена в настоящую заявку в полном объеме путем отсылки. Используемый в настоящем описании "сайленсинг гена" или "выключенный ген" касательно активности РНКи молекулы, например миРНК или мкРНК, относится к уменьшению уровня мРНК целевого гена в клетке по меньшей мере приблизительно на 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99, 100% от уровня мРНК, обнаруживаемого в клетке без присутствия мкРНК или РНК-интерферирующей молекулы. В одном предпочтительном варианте осуществления уровни мРНК уменьшены по меньшей мере приблизительно на 70, 80, 90, 95, 99, 100%. Используемый в настоящем описании термин "РНКи" относится к любому типу интерферирующей РНК, включая, помимо прочих, миРНК, мшРНК, эндогенную микроРНК и искусственную микроРНК. Например, РНКи включает последовательности, идентифицируемые ранее как миРНК, независимо от механизма постпроцессинга РНК (т.е. хотя миРНК, как полагают, действуют по определенному механизму in vivo процессинга, который приводит к расщеплению мРНК, такие последовательности могут быть включены в векторы в контексте фланкирующих последовательностей, описанных в настоящей заявке). Используемый в настоящем описании термин "миРНК" относится к нуклеиновой кислоте, которая формирует двунитевую РНК, которая обладает способностью снижать или ингибировать экспрессию гена или целевого гена, когда миРНК присутствует или экспрессируется в той же клетке, как и целевой ген, например Лп-ФЛА 2. Двунитевая РНК миРНК может быть образована комплементарными цепями. В одном варианте осуществления миРНК относится к нуклеиновой кислоте, которая может формировать двунитевую миРНК. Последовательность миРНК может соответствовать полноразмерному целевому гену или его подпоследовательности. Как правило, длина миРНК составляет по меньшей мере приблизительно 15-50 нуклеотидов (например, длина каждой комплементарной последовательности двунитевой миРНК составляет приблизительно 15-50 нуклеотидов, при этом длина двунитевой миРНК составляет 15-50 пар нуклеотидов, предпочтительно приблизительно 19-30 нуклеотидов, предпочтительно приблизительно 20-25 нуклеотидных оснований, например длина составляет 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 или 30 нуклеотидов). Используемые в настоящем описании "мшРНК" или "малая шпилечная РНК" (также называемая"стебель-петля") представляет собой тип миРНК. В одном варианте осуществления указанные мшРНК состоят из короткой, например длиной от приблизительно 19 до приблизительно 25 нуклеотидов, антисмысловой цепи, после которой следует нуклеотидная петля размером от приблизительно 5 до приблизительно 9 нуклеотидов, а затем аналогичная смысловая цепь. В альтернативе, смысловая цепь может предшествовать нуклеотидной петлеобразной структуре, а антисмысловая цепь может располагаться за ней. Термины "микроРНК" или "мкРНК" используются попеременно в настоящем описании и являются эндогенными РНК, некоторые из которых, как известно, регулируют экспрессию генов, кодирующих белок, на посттранскрипционном уровне. Эндогенная микроРНК представляет собой короткие РНК,обычно присутствующие в геноме, которые способны модулировать эффективную утилизацию мРНК. Термин искусственная микроРНК включает любой тип РНК последовательности, кроме эндогенной микроРНК, которая способна модулировать эффективную утилизацию мРНК. Последовательности микроРНК были описаны в таких публикациях, как Lim, et al., GenesDevelopment, 17, стр. 991-1008 (2003),Lim et al., Science 299, 1540 (2003), Lee and Ambros Science, 294, 862 (2001), Lau et al., Science 294, 858861 (2001), Lagos-Quintana et al., Current Biology, 12, 735-739 (2002), Lagos Quintana et al., Science 294,853-857 (2001), а также Lagos-Quintana et al., RNA, 9, 175-179 (2003), которые включены путем отсылки. Некоторое количество микроРНК может быть также включено в молекулу-предшественник. Кроме того,мкРНК-подобные стебель-петли могут экспрессироваться в клетках в качестве транспортных молекул,-5 018101 предназначенных для доставки искусственных мкРНК и малых интерферирующих РНК (миРНК) с целью модуляции экспрессии эндогенных генов через механизмы мкРНК и/или РНКи. Используемая в настоящем описании "двунитевая РНК" или "днРНК" относится к молекулам РНК,которые состоят из двух цепей. Двунитевые молекулы включают молекулы, состоящие из одной молекулы РНК, которая изгибается и гибридизуется сама на себя, формируя двунитевую структуру. Например,структура стебель-петля молекул-предшественников, из которых формируется однонитевая мкРНК, называемая пре-мкРНК (Bartel et al., 2004, Cell, 116:281-297), включает молекулу днРНК. Термины "субъект", "лицо" и "пациент" попеременно используются в настоящем описании и относятся к животному, например человеку, которому адресовано лечение, включая профилактическое лечение, с применением фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению. Термин "субъект", используемый в настоящем описании, относится к человеку и животным за исключением человека. Термины "животные за исключением человека" и "млекопитающие за исключением человека" используются попеременно в настоящем описании и включают всех позвоночных животных, например млекопитающих, таких как приматы за исключением человека (в особенности высшие приматы), овца, собака,грызун (например, мышь или крыса), морская свинка, коза, свинья, кошка, кролики, коровы, а также не млекопитающих, таких как куры, амфибии, рептилии и т.д. В одном варианте осуществления субъект является человеком. В другом варианте осуществления субъект является экспериментальным животным или животным-заменителем, например моделью заболевания. Термин "ген", используемый в настоящем описании, может являться геномным геном, включающим последовательности регуляции транскрипции и/или трансляции, и/или кодирующую область, и/или нетранслируемые последовательности (например, интроны, 5'- и 3'-нетранслируемые последовательности, а также регуляторные последовательности). Кодирующая область гена может представлять собой нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность или функциональную РНК, такую как тРНК, рРНК, каталитическую РНК, миРНК, мкРНК и антисмысловую РНК. Ген также может являться мРНК или кДНК, соответствующими кодирующим областям (например, экзонами и мкРНК), необязательно включающими 5'- или 3'-нетранслируемые последовательности, связанные с ними. Ген может также являться амплифицированной молекулой нуклеиновой кислоты, полученной invitro, которая включает всю кодирующую область или ее часть, и/или 5'- или 3'-нетранслируемые последовательности, связанные с ней. Термин "нуклеиновая кислота", или "олигонуклеотид", или "полинуклеотид", используемый в настоящем описании, может означать по меньшей мере два ковалентно связанных нуклеотида. Специалистам в данной области будет понятно, что одиночная цепь также определяет последовательность комплементарной цепи. Таким образом, нуклеиновая кислота также охватывает комплементарную цепь приведенной одиночной цепи. Специалистам в данной области будет понятно, что множество вариантов нуклеиновой кислоты может использоваться с той же целью, что и данная нуклеиновая кислота. Таким образом, нуклеиновая кислота также охватывает, по существу, идентичные нуклеиновые кислоты и их комплементарные последовательности. Специалистам в данной области будет понятно, что одиночная цепь обеспечивает зонд для зонда, который может гибридизоваться с целевой последовательностью в жестких условиях гибридизации. Таким образом, нуклеиновая кислота также охватывает зонд, который гибридизуется в жестких условиях гибридизации. Нуклеиновые кислоты могут являться однонитевыми или двунитевыми или могут содержать части как двунитевой, так и однонитевой последовательности. Нуклеиновая кислота может представлять собой ДНК как геномную, так и кДНК, РНК или гибрид, в котором нуклеиновая кислота может содержать комбинации дезоксирибо- и рибонуклеотидов, а также комбинации оснований, включающих урацил, аденин,тимин, цитозин, гуанин, инозин, ксантин, гипоксантин, изоцитозин и изогуанин. Нуклеиновые кислоты могут быть получены методами химического синтеза или генно-инженерными методами. Нуклеиновая кислота обычно содержит фосфодиэфирные связи, хотя могут быть включены аналоги нуклеиновой кислоты, которые могут иметь по меньшей мере одну другую связь, например фосфорамидатную, фосфоротиоатную, фосфородитиоатную или 0-метилфосфорамидитную связи, а также пептидонуклеиновые цепи и связи. Другие аналоги нуклеиновых кислот включают нуклеиновые кислоты с положительно заряженными цепями, неионными цепями и цепями, не содержащими рибозы, включая описанные в патентах США 5235033 и 5034506, которые включены путем отсылки. Нуклеиновые кислоты,содержащие один или более неприродных или модифицированных нуклеотидов, также включены в одно определение нуклеиновых кислот. Модифицированный нуклеотидный аналог может быть расположен,например, на 5'-конце и/или на 3'-конце молекулы нуклеиновой кислоты. Характерные примеры нуклеотидных аналогов могут быть выбраны из рибонуклеотидов, модифицированных по остатку сахара либо по основной цепи. Впрочем, следует отметить, что также подходящими являются рибонуклеотиды, модифицированные по нуклеиновым основаниям, т.е. рибонуклеотиды, содержащие вместо природных нуклеиновых оснований неприродные нуклеиновые основания, например уридины или цитидины, модифицированные по 5 положению, например 5-(2-амино)пропилуридин, 5-бромуридин; аденозины и гуанозины, модифицированные по 8 положению, например 8-бромгуанозин; деазануклеотиды, например 7 деазааденозин; О- и N-алкилированные нуклеотиды, например NG-метиладенозин. 2'ОН-группа может быть заменена группой, выбранной из Н, OR, R, галогена, SH, SR, NH2, NHR, NR2 или CN, где R представляет собой С-С 6 алкил, алкенил или алкинил, а галоген представляет собой F, Cl, Br или I. Модификации рибозо-фосфатной цепи могут быть выполнены по ряду причин, например с целью повышения стабильности и периода полурасщепления таких молекул в физиологических окружающих средах или применения в качестве зондов на биочипе. Могут быть получены смеси природных нуклеиновых кислот и аналогов; в альтернативе могут быть получены смеси различных аналогов нуклеиновых кислот, а также смеси природных нуклеиновых кислот и аналогов. Термин "вектор", используемый в настоящем описании, относится к последовательности нуклеиновой кислоты, содержащей сайт начала репликации. Вектор может являться плазмидой, бактериофагом,бактериальной искусственной хромосомой или дрожжевой искусственной хромосомой. Вектор может являться РНК или ДНК вектором. Вектор может являться самореплицирующимся внехромосомным вектором или вектором, интегрируемым в геном организма-хозяина. Используемый в настоящем описании термин "лечение" включает снижение или облегчение по меньшей мере одного неблагоприятного эффекта или симптома патологического состояния, заболевания или нарушения, связанного с кожной язвой. Лечение в целом считают "эффективным", если достигнуто улучшение по меньшей мере на одну ступень или уровень классификации в клинически принятой шкале тяжести повреждения или язвы при лечении с применением ингибитора Лп-ФЛА 2. В альтернативе или дополнительно в качестве "эффективного" лечения рассматривают сокращение размера (площади и/или глубины) повреждения кожи по меньшей мере на 25% после лечения. Эффективность профилактики отслеживают посредством осмотра кожи субъекта, подвергаемого опасности развития повреждения кожи, после начала лечения ингибитором Лп-ФЛА 2. Отсутствие повреждений кожи у лица, подвергаемого риску, считают признаком "эффективной" профилактики. Точно так же, когда лицо имеет в анамнезе случай повреждения кожи, отсутствие новых повреждений или даже сокращение, например, на 50% или более, частоты или тяжести каких-либо новых повреждений служит показателем "эффективной" профилактики кожных язв посредством применения способов, описанных в настоящей заявке. Термин "эффективное количество", используемый в настоящем описании, относится к количеству терапевтического средства фармацевтической композиции, которое обеспечивает "эффективное" лечение в той мере, в какой указанный термин определен в настоящей заявке. Эффективное количество, используемое в настоящем описании, также включает количество, достаточное для предотвращения или замедления развития симптома заболевания, изменения течения заболевания (например, помимо прочего, замедление развития симптома заболевания) или обратного развития симптома заболевания. Используемый в настоящем описании термин "введение" относится к размещению средств, которые ингибируют Лп-ФЛА 2, как описано в настоящей заявке, в организме субъекта способом или путем, который приводит, по меньшей мере, к частичной локализации средств в целевом участке. Соединения настоящего изобретения могут быть введены любым подходящим путем, который обеспечивает эффективное лечение субъекта. Термин "векторы" используется попеременно с "плазмидой" и относится к молекуле нуклеиновой кислоты, способной нести другую нуклеиновую кислоту, с которой он связан. Векторы, способные направлять экспрессию генов и/или нуклеотидных последовательностей, с которыми они функционально связаны, указаны в настоящей заявке как "векторы экспрессии". Обычно векторы экспрессии, применяемые в методах генной инженерии, часто находятся в форме "плазмид", которые представляют собой кольцевые двунитевые молекулы ДНК, которые в своей векторной форме не связаны с хромосомой. В различных вариантах осуществления изобретения могут применяться другие векторы экспрессии, например, помимо прочих, плазмиды, эписомы, бактериофаги или вирусные векторы, причем такие векторы могут интегрироваться в геном хозяина или реплицироваться автономно в специфической клетке. Также могут использоваться другие, известные специалистам в данной области, формы векторов экспрессии, которые служат в аналогичных целях. Векторы экспрессии включают векторы экспрессии для стабильной или транзиентной экспрессии, кодирующей ДНК. Используемый в настоящем описании термин "ятрогенный" означает что-либо, вызванное в организме пациента действиями, методами или терапией врача. Например, вызванное лекарственной терапией конкретного заболевания или нарушения. Лп-ФЛА 2: общая информация. Лп-ФЛА 2 также упоминается в уровне техники под названием ЛПНП-ФЛА 2, липопротеинассоциированная фосфолипаза А 2, PLA2G7, фосфолипаза А 2 (группа VII) или ацетилгидролаза Фактора Активации Тромбоцитов (ацетилгидролаза ФАТ или PAFAH). Лп-ФЛА 2 человека кодируется нуклеиновой кислотой, соответствующей номеру GenBank U20157 (SEQ ID NO: 1) или Ref Seq ID: NM005084 (SEQ IDNO: 2), а также Лп-ФЛА 2 человека соответствует белковой последовательности, соответствующей номеру GenBank NP005075 (SEQ ID NO: 3), которые раскрыты в патенте США 5981252, который прямо включен в настоящую заявку путем отсылки в полном объеме. Фермент фосфолипаза А 2 липопротеинассоциированной фосфолипазы А 2 (Лп-ФЛА 2), ее последо-7 018101(SmithKline Beecham pic), который прямо включен в настоящую заявку путем отсылки в полном объеме. Указанный фермент также описан в следующей публикации из той же группы (Tew D. et al., ArteriosclerThromb Vas Biol 1996:16; 591-9), где упоминается как ЛПНП-ФЛА 2, кроме того, в более поздней заявке на патент (WO 95/09921, Icos Corporation) и связанной публикации в Nature (Tjoelker et al., vol. 374, 6April 1995, 549) описан фермент PAF-AH, который имеет, по существу, ту же последовательность, что и Лп-ФЛА 2. Было показано, что Лп-ФЛА 2 ответственна за превращение фосфатидилхолина в лизофосфатидилхолин в процессе превращения липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) в соответствующую окисленную форму. Фермент, как известно, гидролизирует sn-2 сложноэфирную связь в окисленном фосфатидилхолине с формированием лизофосфатидилхолина и окисленной жирной кислоты. Оба продукта воздействия Лп-ФЛА 2 биологически активны, причем лизофосфатидилхолин, в особенности обладающий некоторой проатерогенной активностью, приписываемой ему, включает хемотаксис моноцитов и индукцию эндотелиальной дисфункции, что способствует моноцит-опосредованному накоплению макрофагов в артериальной стенке. Средства, ингибирующие Лп-ФЛА 2. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к ингибированию ЛпФЛА 2. В некоторых вариантах осуществления ингибирование является ингибированием нуклеотидных транскриптов, кодирующих Лп-ФЛА 2, например ингибирование информационной (матричной) РНК(мРНК). В альтернативных вариантах осуществления ингибирование Лп-ФЛА 2 является ингибированием экспрессии и/или ингибированием активности продукта гена Лп-ФЛА 2, например полипептида, или белка Лп-ФЛА 2, или их изоформ. Используемый в настоящем описании термин "продукт гена" относится к РНК, транскрибированной с гена, или к полипептиду, кодируемому геном или транслированному с РНК. В некоторых вариантах осуществления ингибирование Лп-ФЛА 2 обеспечивается средством. Можно применять любое средство, например, помимо прочего, нуклеиновые кислоты, аналоги нуклеиновых кислот, пептиды, фаг, фагмиды, полипептиды, пептидомиметики, рибосомы, аптамеры, антитела, небольшие или крупные, органические или неорганические молекулы или любые комбинации перечисленного. В некоторых вариантах осуществления средства, применяемые в способах настоящего изобретения,включают средства, которые функционируют как ингибиторы экспрессии Лп-ФЛА, например, как ингибиторы мРНК, кодирующей Лп-ФЛА. Средства, применяемые в способах, описанных в настоящей заявке, могут также ингибировать экспрессию генов (т.е. подавлять и/или репрессировать экспрессию гена). Такие средства известны в уровне техники как "сайленсеры генов" и обычно известны средним специалистам в данной области. Примеры включают, помимо прочего, нуклеотидную последовательность для РНК, ДНК или аналога нуклеиновой кислоты, которая может являться однонитевой или двунитевой и может быть выбрана из группы, включающей нуклеиновую кислоту, кодирующую целевой белок, олигонуклеотиды, нуклеиновые кислоты,аналоги нуклеиновой кислоты, например, помимо прочего, пептидно-нуклеиновую кислоту (ПНК), псевдокомплементарную ПНК (рс-ПНК), закрытые нуклеиновые кислоты (ЗНК), их производные и т.д. Средства на основе нуклеиновой кислоты также включают, например, помимо прочего, последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующие белки, которые действуют как репрессоры транскрипции, антисмысловые молекулы, рибозимы, малые ингибиторные нуклеотидные последовательности, например, помимо прочего, РНКи, мшРНК, миРНК, микроРНК (мкРНК), антисмысловые олигонуклеотиды и т.д. Используемые в настоящей заявке средства, применяемые в способе в качестве ингибиторов экспрессии Лп-ФЛА 2 и/или ингибиторов функции белка Лп-ФЛА 2, могут являться единицей любого типа,например, помимо прочего, химическими соединениями, последовательностями нуклеиновых кислот,аналогами нуклеиновой кислоты, белками, пептидами или фрагментами перечисленного. В некоторых вариантах осуществления средством является любое химическое соединение, единица или группа, включающие без ограничения, синтетические и природные небелковые единицы. В конкретных вариантах осуществления средством является небольшая молекула, содержащая химическую группу. Например, в некоторых вариантах осуществления химическая группа является соединением на основе пиримидиона,как описано в настоящей заявке. В альтернативных вариантах осуществления средства, применяемые в способах, описанных в настоящей заявке, представляют собой белки, и/или пептиды, или их фрагмент, которые ингибируют экспрессию гена Лп-ФЛА 2 или функцию белка Лп-ФЛА 2. Такие средства включают, например, помимо прочего, варианты белков, мутированные белки, терапевтические белки, усеченные белки и фрагменты белков. Белковые средства могут быть также выбраны из группы, включающей мутированные белки, белки,полученные с помощью генной инженерии, пептиды, синтетические пептиды, рекомбинантные белки,химерные белки, антитела, миди-антитела, мини-антитела, тримерные антитела, гуманизированные белки, гуманизированные антитела, химерные антитела, модифицированные белки и их фрагменты. В альтернативе средства, применяемые в способах, описанных в настоящей заявке, в качестве ингибиторов Лп-ФЛА 2 могут являться химическими соединениями, небольшой молекулой, большой молеку-8 018101 лой, или единицей, или группой, включая без ограничения синтетические и природные небелковые соединения. В конкретных вариантах осуществления средством является небольшая молекула, содержащая химические группы, как описано в настоящей заявке. Небольшие молекулы. В некоторых вариантах осуществления средства, которые ингибируют Лп-ФЛА 2, представляют собой небольшие молекулы. В способах настоящего изобретения могут применяться необратимые или обратимые ингибиторы Лп-ФЛА 2. Необратимые ингибиторы Лп-ФЛА 2 описаны в заявках на патент WO 96/13484, WO 96/19451, WO 97/02242, WO 97/217675, WO 97/217676, WO 97/41098 и WO 97/41099 (SmithKline Beecham plc), которые прямо включены в полном объеме в настоящую заявку путем отсылки и в которых среди прочего описаны различные группы 4 тионил/сульфинил/сульфонил-азетидиноновых соединений, которые являются ингибиторами фермента Лп-ФЛА 2. Они являются необратимыми ацилирующими ингибиторами (Tew D.et al., Biochemistry, 37, 10087, 1998). Ингибиторы Лп-ФЛА 2, эффективно действующие в организме человека, хорошо известны средним специалистам и включают ингибиторы Лп-ФЛА 2, которые проходят испытания, например проходят доклинические и клинические испытания, включая II фазу клинических испытаний. Ряд заявок был подан и опубликован SmithKline Beecham и ее преемником GlaxoSmithKline. Список релевантных опубликованных заявок, относящихся к тому же, включает WO 01/60805, WO 02/30904, WO 03/016287, WO 00/66567,WO 03/042218, WO 03/042206, WO 03/042179, WO 03/041712, WO 03/086400, WO 03/087088, WO 02/30911, WO 99/24420, WO 00/66566, WO 00/68208, WO 00/10980 и WO 2005/021002, которые прямо включены в полном объеме в настоящую заявку путем отсылки. Кроме того, следует указать предварительные заявки на патент США 60/829328 и 60/829327, поданные 13 октября 2006 г., которые также прямо включены в полном объеме в настоящую заявку путем отсылки. Другие ингибиторы Лп-ФЛА 2, применяемые в способах, раскрытых в настоящей заявке, описаны в опубликованных заявках на патент, например WO 2006063791 A1, WO 2006063811 A1, WO 2006063812A1, WO 2006063813 A1, все от имени Bayer Healthcare; и US 2006106017 A1, закрепленный за Korea Res.Inst. BioscienceBiotechnology, которые прямо включены в полном объеме в настоящую заявку путем отсылки. Ингибиторы Лп-ФЛА 2 также включают известные средства, например, помимо прочих, включают применение статинов с ниацином (см. www.genengnews.com/news/bnitern.aspxname=6724568) и фенофибратом (см. www.genengnews.com/news/bnitem.aspxname=14817756taxid=19). Все заявки, указанные в параграфах выше, включены в настоящую заявку путем отсылки. Предполагается, что любые соединения, раскрытые в указанных документах, могут применяться для профилактики или лечения кожных язв. Свиная модель диабетических кожных язв, описанная в настоящей заявке и приведенная в примере, может использоваться средним специалистом в данной области для определения, какое из раскрытых соединений или других ингибиторов Лп-ФЛА 2, например антител, небольших молекул или РНКи, является эффективным при лечении или профилактике кожных язв, как заявлено в настоящей заявке. В конкретном варианте осуществления ингибиторы Лп-ФЛА 2, описанные в патентах США 6649619 и 7153861, которые прямо включены в полном объеме в настоящую заявку путем отсылки (а также международная заявка WO 01/60805), и патенте США 7169924, который включен в полном объеме в настоящую заявку путем отсылки (а также международная заявка WO 02/30911), могут применяться в способах, описанных в настоящей заявке для профилактики или для лечения кожных язв. В некоторых вариантах осуществления ингибиторы Лп-ФЛА 2, раскрытые в опубликованной заявке на патент США 2005/0033052 А 1, которая включена в полном объеме в настоящую заявку путем отсылки, а также в международных заявках WO 02/30904, WO 03/042218, WO 03/042206, WO 03/042179, WO 03/041712, WO 03/086400 и WO 03/87088, являются обратимыми ингибиторами Лп-ФЛА 2. Формула (I). Можно применять группу обратимых ингибиторов Лп-ФЛА 2, которые раскрыты в международной заявке WO 01/60805, из которой возникли патенты США 6649619 и 7153861, которые включены в полном объеме в настоящую заявку путем отсылки, описания которых полностью включены в настоящую заявку, как если были бы изложены в пределах настоящего документа. Более узкая группа целевых соединений включает соединения формулы (I), описанной в WO 01/60805 и заявленной в патентах США 6649619 и 7153861, а именно-9 018101 в которой Ra и Rb вместе с атомами углерода пиримидинового кольца, к которым они присоединены,формируют конденсированное 5-членное карбоциклическое кольцо;R3 представляет собой метил или С(1-3)алкил, замещенный NR8R9; илиR3 представляет собой Het-C(0-2)алкил, в котором Het является 5-7-членным гетероциклильным кольцом, содержащим атом N, в котором атом N не замещен или замещен С (1-6)алкилом;R8 и R9, которые могут быть одинаковыми или различными, выбраны из группы, состоящей из водорода или С(1-6)алкила;X представляет собой S,или их фармацевтически приемлемую соль. Еще больший интерес представляют следующие соединения, находящиеся в рамках формулы (I) и раскрытые в заявке и патентах, указанных выше: 1-(N-(2-(диэтиламино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4-фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он, используемый в исследовании на свиньях, описанном в настоящей заявке; 1-(N-(2-(диэтиламино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(2,3 дифторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он; 1-(N-(2-(диэтиламино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(3,4 дифторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он; 1-(N-(2-(диэтиламино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(2,3,4 трифторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он; 1-(N-(2-(диэтиламино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(2 фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он; 1-(N-метил-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4-фторбензил)тио-5,6 триметиленпиримидин-4-он; 1-(N-(2-(1-пиперидино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4 фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он; 1-(N-(1-этилпиперидин-4-ил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4 фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он; 1-(N-(2-этиламино-2-метилпропил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4 фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он;N-(2-трет-бутиламиноэтил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4-фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он; 1-(N-(1-метилпиперидин-4-ил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4 фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он; 1-(N-(1-изопропилпиперидин-4-ил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4 фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он; 1-(N-(1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4-фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он; 1-(N-(2-(этиламино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4-фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он; или фармацевтически приемлемая соль указанных соединений. Способы получения данных соединений описаны в указанных документах. Второй способ получения 1-(N-(2-(диэтиламино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4-фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-она можно найти в заявке WO 03/016287 (публикация US 20050014793 A1), которая полностью включена в настоящую заявку путем отсылки. Формула (II). Другая группа соединений, которая может применяться в осуществлении способов настоящего изобретения, раскрыта в WO 02/30911 и патенте США 7169924, который соответствует указанной международной заявке. Оба документа полностью включены в настоящую заявку путем отсылки. Обобщенная формула в данном случае, обозначенная в настоящей заявке как формула (II), является следующей:- 10018101 в которой R1 является арильной группой, которая необязательно замещена 1, 2, 3 или 4 заместителями,которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из С(1-6)алкила, С(1-6)алкокси,С(1-6)алкилтио, гидрокси, галогена, CN и моноперфтор-C(1-4)алкила;R2 и R3 вместе с атомами углерода пиримидонового кольца, к которым они присоединены, формируют конденсированные 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо; илиR2 и R3 вместе с атомами углерода пиримидонового кольца, к которым они присоединены, формируют конденсированное бензо- или гетероарильное кольцо, необязательно замещенное 1, 2, 3 или 4 заместителями, которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из галогена, С(1-4) алкила, циано, С(1-6)алкокси, С(1-6)алкилтио или моноперфтор-С(1-4)алкила;R4 является водородом, С(1-6)алкилом, который может быть незамещен или замещен 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, OR7, COR7, карбокси, COOR7, CONR9R10, NR9R10,NR7COR8, моно- или ди-(гидроксиС(1-6)алкил)амино и N-гидроксиС(1-6)алкил-N-C(1-6)алкиламино; илиR4 представляет собой Het-C(0-4)алкил, где Het является 5-7-членным гетероциклильным кольцом,включающим N и необязательно О или S, где N может быть замещен COR7, COOR7, CONR9R10 или С(1-6) алкилом, необязательно замещенным 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, OR7,COR7, карбокси, COOR7, CONR9R10 или NR9R10, например пиперидин-4-илом, пирролидин-3-илом;R5 является арильным или гетероарильным кольцом, необязательно замещенным 1, 2, 3 или 4 заместителями, которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из С(1-6)алкила, С(1-6) алкокси, С(1-6)алкилтио, арилС(1-6)алкокси, гидрокси, галогена, CN, COR7, карбокси, COOR7, NR7COR8,CONR9R10, SO2NR9R10, NR7SO2R8, NR9R10, моноперфтор-С(1-4)алкила и моноперфтор-С(1-4)алкокси;R6 является арильным или гетероарильным кольцом, которое также необязательно замещено 1, 2, 3 или 4 заместителями, которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из С(1-18)алкила, С(1-18)алкокси, С(1-6)алкилтио, С(1-6)алкилсульфонила, арилС(1-6)алкокси, гидрокси, галогена, CN,COR7, карбокси, COOR7, CONR9R10, NR7COR8, SO2NR9R10, NR7SO2R8, NR9R10, моноперфтор-С(1-4)алкила и моноперфтор-С(1-4)алкокси или С(5-10)алкила;R7 является водородом или С(1-12)алкилом, например С(1-4)алкилом (например, метилом или этилом);R9 и R10, которые могут являться одинаковыми или различными, выбраны из водорода или С(1-12) алкила, или R9 и R10 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют 5-7-членное кольцо, необязательно содержащее один или несколько дополнительных гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы, и необязательно замещенное одним или двумя заместителями, выбранными из гидрокси, оксо, С(1-4)алкила, С(1-4)алкилкарбокси, арила, например фенила, или аралкила, например бензила, например морфолина или пиперазина; иX является С(2-4)алкиленом, необязательно замещенным 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из метила и этила, или CH=CH. Все соли формулы (II) также могут применяться в настоящем способе лечения. Особый интерес представляют соединения формулы (II), в которых, как указано в WO 02/30911 для формулы (I), R1 может являться фенильной группой, которая необязательно замещена 1, 2, 3 или 4 заместителями, которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из галогена, С 1-С 6 алкила,трифторметила или C1-С 6 алкокси. Более конкретно, фенил не замещен или замещен 1, 2, 3 или 4 галогеновыми заместителями, в частности 1-3 фторогруппами, а наиболее предпочтительно 2,3-дифтор, 2,4 дифтор или 4-фтор. В другом варианте осуществления формулы (II) Y представляет собой -СН 2 СН 2-. Кроме того, интерес представляют соединения формулы (II), где R2 является водородом, по умолчанию, или галогеном, С 1-С 6 алкилом, моноперфтор-С 1-С 4 алкилом, моноперфтор-С 1-С 4 алкокси или C1 С 6 алкокси; в частности моноперфтор-С 1-С 4 алкилом, моноперфтор-С 1-С 4 алкокси или С 1-С 6 алкокси. Особый интерес представляют соединения формулы (II), где R2 не является водородом, n в (R2)n равен 1, 2 или 3, а положение замещения включает мета и/или пара, в особенности пара, т.е. заместитель в 4 положении. См. также те соединения, где R2 является 4-трифторметилом или 4-трифторметокси.R3 и R4 могут являться одинаковыми или различными и являются метилом, этилом, н-пропилом или н-бутилом. Особый интерес представляют те соединения формулы (II), в которых R3 и R4 являются одинаковыми и являются метилом или этилом; наиболее предпочтительно метилом.R5 может являться водородом, С(1-6)алкилом, который является линейным или разветвленным. Особенный интерес представляет метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, третбутил, н-пентил или н-гексил. Следует понимать, что в рамках соединений формулы (II) согласно изобретению присутствует дополнительная подгруппа соединений, гдеR2 и R3 вместе с атомами углерода пиримидинового кольца, к которым они присоединены, формируют конденсированное 5-членное циклопентенильное кольцо;R6 является фенилом, который замещен трифторметилом по 4 положению, или тиен-2-илом, который замещен трифторметилом по 5 положению; иX представляет собой (СН 2)2. Конкретные предпочтительные соединения формулы (II) являются следующими:N-(2-диэтиламиноэтил)-2-(2-(2-(4-(трифторметокси)фенил)этил)-4-оксо-4,5,6,7-тетрагидроциклопентапиримидин-1-ил)-N-(4'-трифторметилбифенил-4-илметил)ацетамида; или свободное основание любой битартратной соли или другой фармацевтически приемлемой соли. Кроме того, интерес представляют соединения формулы (III), раскрытой в WO 02/30904 в которой R1 является арильной группой, которая необязательно замещена 1, 2, 3 или 4 заместителями,которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из C(1-6)алкила, С(1-6)алкокси, С(1-6) алкилтио, гидрокси, галогена, CN, моноперфтор-С(1-4)алкила, моноперфтор-C(1-4)алкоксиарила и арил С(1-4)алкила;R2 и R3 вместе с атомами углерода пиридонового кольца, к которым они присоединены, формируют конденсированное 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо; илиR2 и R3 вместе с атомами углерода пиридонового кольца, к которым они присоединены, формируют конденсированное бензо- или гетероарильное кольцо, необязательно замещенное 1, 2, 3 или 4 заместителями, которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из галогена, С(1-4)алкила,циано, С(1-3)алкоксиС(1-3)алкила, С(1-4)алкокси или С(1-4)алкилтио или моноперфтор-С(1-4)алкила;R4 является водородом, С(1-6)алкилом, который может являться незамещенным или замещенным 1,2 или 3 заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, OR7, COR7, карбокси, COOR7, CONR9R10,NR9R10, NR7COR8, моно- или ди-(гидроксиС(1-6)алкил)амино и N-гидроксиС(1-6)алкил-N-C(1-6)алкиламино; илиR4 является Het-C(0-4)алкилом, в котором Het является 5-7-членным гетероциклильным кольцом,включающим N и необязательно О или S, и в котором N может быть замещен COR7, COOR7, CONR9R10,или С(1-6)алкилом, необязательно замещенным 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, OR7, COR7, карбокси, COOR7, CONR9R10 или NR9R10, например пиперидин-4-илом, пирролидин-3 илом;R5 является арильным или гетероарильным кольцом, необязательно замещенным 1, 2, 3 или 4 заместителями, которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из С(1-6)алкила, С(1-6) алкокси, С(1-6)алкилтио, арилС(1-6)алкокси, гидрокси, галогена, CN, COR7, карбокси, COOR7, NR7COR8,CONR9R10, SO2NR9R10, NR7SO2R8, NR9R10, моноперфтор-С(1-4)алкила и моноперфтор-С(1-4)алкокси;R6 является арильным или гетероарильным кольцом, которое также необязательно замещено 1, 2, 3 или 4 заместителями, которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из C(1-6)алкила, C(1-6)алкокси, C(1-6)алкилтио, С(1-6)алкилсульфонила, арилС(1-6)алкокси, гидрокси, галогена, CN,COR7, карбокси, COOR7, CONR9R10, NR7COR8, SO2NR9R10, NR7SO2R8, NR9R10, моноперфтор-С(1-4)алкила и моноперфтор-С(1-4)алкокси или С(5-10)алкила;R7 и R8 независимо являются водородом или С(1-12)алкилом, например С(1-4)алкилом (например, метилом или этилом);R9 и R10, которые могут являться одинаковыми или различными, выбраны из водорода или С(1-12) алкила, или R9 и R10 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют 5-7-членное кольцо, необязательно содержащее один или несколько других гетероатомов, выбранных из кислорода,азота и серы, и необязательно замещенное одним или двумя заместителями, выбранными из гидрокси,оксо, С(1-4)алкила, С(1-4)алкилкарбокси, арила, например фенила, или аралкила, например бензила, например морфолина или пиперазина; иX является С(2-4)алкиленовой группой (необязательно замещенной 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из метила и этила), СН=СН, (CH2)nS или (СН 2)nO, где n является 1, 2 или 3; или их фармацевтически приемлемая соль. Особый интерес представляют те соединения формулы (III), где R2 и R3 вместе с атомами углерода пиридонового кольца, к которым они присоединены, формируют конденсированное бензо- или гетероарильное кольцо, необязательно замещенное 1, 2, 3 или 4 заместителями, которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из галогена, С(1-4)алкила, циано, С(1-4)алкокси или С(1-4)алкилтио,или моноперфтор-С(1-4)алкила. Предпочтительно R1 является фенилом, который необязательно замещен галогеном, С(1-6)алкилом, трифторметилом, С(1-6)алкокси, предпочтительно от 1-3 фторозамещенным,более предпочтительно 2,3-дифтор. Типичные примеры R4 включают пиперидин-4-ил, замещенный по 1 положению метилом, изопропилом, 1-(2-метоксиэтилом), 1-(2-гидроксиэтилом), трет-бутоксикар- 13018101 бонилом или этоксикарбонилметилом; этил, замещенный по 2 положению аминоэтилом; 1 этилпиперидинилметил; пиперидин-4-ил; 3-диэтиламинопропил; 4-пирролидин-1-илбутил и 1 этилпирролидин-3-ил. Предпочтительно R4 является 1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-илом, 1 метилпиперидин-4-илом или 1-этилпирролидин-3-илом. Типичные примеры R5 включают фенил и пиридил. Предпочтительно R5 является фенилом. Типичные примеры R6 включают фенил, необязательно замещенный галогеном или трифторметилом, предпочтительно по 4 положению, и гексилом. Предпочтительно R6 является фенилом, замещенным трифторметилом по 4 положению. Другие типичные примерыR6 включают фенил, замещенный 1 или несколькими С(1-3)алкилами. Предпочтительно R6 является фенилом, замещенным этилом по 4 положению. Предпочтительно R5 и R6 вместе формируют 4(фенил)фенильный или 2-(фенил)пиридинильный заместитель, в котором дальнее фенильное кольцо необязательно может быть замещено галогеном или трифторметилом, предпочтительно по 4 положению. Предпочтительно X является С(2-4)алкиленом, более предпочтительно C(2-3)алкиленом, наиболее предпочтительно (СН 2)2 или CH2S. Следует понимать, что в пределах группы соединений, охватывающих формулу (III), есть подгруппа соединений, в которойR2 и R3 вместе с атомами углерода пиридонового кольца, к которым они присоединены, формируют конденсированное бензо- или пиридокольцо;R5 и R6 вместе формируют 4-(фенил)фенильный заместитель, в котором дальнее фенильное кольцо замещено трифторметилом, предпочтительно по 4 положению; иX является CH2S или (СН 2)2. Следующие соединения формулы (III) также представляют интерес: битартратN-(1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-ил)-2-[2-(2-(2,3-дифторфенил)этил)-4-оксо-4 Нхинолин-1-ил]-N-(4'-трифторметилбифенил-4-илметил)ацетамида; или соответствующее свободное основание, или другая фармацевтически приемлемая соль. Формула (IV). Также интерес представляют соединения формулы (IV) в которой R1 является арильной группой, которая не замещена или замещена 1, 2,3 или 4 заместителями,которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из группы, состоящей из С 1 С 6 алкила, C1-С 6 алкокси, С 1-С 6 алкилтио, арилС 1-С 6 алкокси, гидрокси, галогена, CN, COR6, COOR6,NR6COR7, CONR8R9, SO2NR8R9, NR6SO2R7, NR8R9, галоген С 1-С 4 алкила и галоген С 1-С 4 алкокси;R5 является водородом, С 1-С 10 алкилом, С 2-С 10 алкенилом, С 2-С 10 алкинилом, галоген С 1-С 4 алкилом,С 3-С 8 циклоалкилом, С 3-С 8 циклоалкилом, С 3-С 8 циклоалкилС 1-С 4 алкилом, С 5-С 8 циклоалкенилом, С 5 С 8 циклоалкенилС 1-С 4 алкилом, 3-8-членным гетероциклоалкилом, 3-8-членным гетероциклоалкилС 1 С 4 алкилом, С 6-С 14 арилом, С 6-С 14 арилом, С 1-С 10 алкилом, гетероарилом или гетероарилС 1-С 10 алкилом; где каждая группа необязательно является единожды или более раз той же и/или другой группой, которая является С 1-С 6 алкокси, С 1-С 6 алкилтио, арилС 1-С 6 алкокси, гидрокси, галогеном, CN, NR8R9 или галоген С 1-С 4 алкокси;R6 и R7 независимо являются водородом или С 1-С 10 алкилом;R8 и R9 являются одинаковыми или различными и являются водородом или С 1-С 10 алкилом, или R9 и 10R вместе с азотом, к которому они присоединены, формируют 5-7-членное кольцо, необязательно содержащее один или более других гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы, и необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидрокси, оксо, С 1 С 4 алкила, С 1-С 4 алкилкарбокси, арила и арилС 1-С 4 алкила; или их фармацевтически приемлемая соль. Без намерения исключить какие-либо определенные заместители и/или соответствующие перечисленные радикалы из объема формулы (IV), особый интерес представляют следующие группы R и связанные радикалы. Что касается R1, он может являться фенильной группой, которая необязательно замещена 1, 2, 3 или 4 заместителями, которые могут являться одинаковыми или различными, выбранными из галогена, С 1 С 6 алкила, трифторметила или С 1-С 6 алкокси. Более конкретно, фенил не замещен или замещен 1, 2, 3 или 4 галогеновыми заместителями, в особенности 1-3 фторгруппами и наиболее конкретно 2,3-дифтором,2,4-дифтором или 4-фтором. В другом варианте осуществления формулы (I) Y представляет собой -СН 2 СН 2-. Изобретение также обеспечивает соединение формулы (I), в которой R2 является водородом, по умолчанию, или представляет собой галоген, С 1-С 6 алкил, моноперфтор-С 1-С 4 алкил, моноперфтор-С 1-С 4 алкокси или С 1-С 6 алкокси; в особенности моноперфтор-С 1-С 4 алкил, моноперфтор-С 1-С 4 алкокси или С 1 С 6 алкокси. Особенный интерес представляют соединения, в которых R2 не являеся водородом, n в (R2)n равен 1, 2 или 3, а профиль замещения включает мета и/или пара, в особенности пара, т.е. заместитель в 4 положении. Примеры соединений включают соединения, в которых R2 является 4-трифторметилом или 4-трифторметокси.R3 и R4 могут являться одинаковыми или различными и являются метилом, этилом, н-пропилом или н-бутилом. Особенный интерес представляют те соединения формулы (I), в которых R3 и R4 являются одинаковыми и представляют собой метил или этил; наиболее интересен метил.R5 может являться водородом, С(1-6)алкилом, который является линейным или разветвленным. Особенный интерес представляет метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, третбутил, н-пентил или н-гексил. Любое из соединений, описанных выше, может быть получено в кристаллической или некристаллической форме, и, в случае если соединение находится в кристаллической форме, соединение может быть сольватировано, например, находится в виде гидрата. В объем настоящего изобретения включены стехиометрические сольваты (например, гидраты). Некоторые из соединений, описанных в настоящей заявке, могут содержать один или несколько хиральных атомов или иным образом могут быть способны к существованию в виде двух энантиомеров. Соединения, применимые в способах, описанных в настоящей заявке, включают смеси энантиомеров, а также очищенные энантиомеры или энантиомерно обогащенные смеси. Также в объем изобретения включены отдельные изомеры соединений, представленных формулами (I)-(IV), а также их любые полностью или частично уравновешенные смеси. Настоящее изобретение также охватывает отдельные изомеры заявленных соединений в виде смесей с их изомерами, в которых инвертирован один или несколько хиральных центров. Кроме того, следует понимать, что любые таутомеры и смеси таутомеров заявленных соединений включены в рамки соединений формул (I)-(IV). Различные изомерные формы могут быть выделены или разделены один от другого стандартными способами, либо любой конкретный изомер может быть получен стандартными способами синтеза или стереоспецифическим или асимметричным синтезом. Синтез соединений формул (I), (II), (III) и (IV). Способы получения соединений формул (I), (II) и (III) были опубликованы в доступной литературе. Например, способы получения соединений формулы (I) можно найти в WO 01/60805 и WO 03/016287. Способы получения соединений формулы (II) были приведены в WO 02/30911. И, наконец, способы получения соединения формулы (III) можно найти в WO 02/30904. Настоящий документ обеспечивает способы получения соединений формулы (IV), причем способы взяты из предварительных заявок на патент США 60/829328 и 60/829327, которые прямо включены в настоящую заявку путем отсылки. Некоторые примеры синтезов приведены ниже. Чтобы установить различие между несколькими родственными группами соединений в настоящих примерах, материалы, которые относятся к формуле(II)-1" и т.д., для формулы (III) - "Пример методики синтеза (III)-1 и т.д. и для формулы (IV) - "Пример методики синтеза (IV)-1 и т.д. Синтез соединений формулы (I). Соединения формулы (I) могут быть получены в соответствии со схемой I, как описано в WO 01/60805. Схема IR15 является С(1-6)алкильной группой, например этилом или трет-бутилом, иL1, L2, Ra, Rb, Rc, R2, R3, R4, R5, n, X, Y и Z определены в WO 01/60805. Пример реакции получения целевых соединений формулы (I) является следующим. Пример методики синтеза (I)-1(а). 1-(N-(2-(Диэтиламино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4-фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-он Промежуточное соединение В 69 из WO 01/60805 (87,1 г, 0,26 моль) суспендировали в дихлорметане (2,9 л). Затем добавляли гидрат 1-гидроксибензотриазола (35,2 г, 0,26 моль) и гидрохлорид 1-(3 диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (99,7 г, 0,52 моль) и перемешивали суспензию в течение 45 мин до полного растворения. Промежуточное соединение А 30, WO 01/60805 (91,2 г, 0,2 6 моль) добавляли в виде раствора в дихлорметане (100 мл) в течение 5 мин и перемешивали раствор в течение 4 ч. Затем добавляли смесь насыщенного раствора хлорида аммония и воды (1:1, 1 л) и перемешивали раствор в течение 10 мин. Органическую фазу отделяли и экстрагировали смесью насыщенного раствора хлорида аммония и воды (1:1, 1 л), рН экстрактов был равен 6. Органическую фазу отделяли и экстрагировали водой (1 л), содержащей уксусную кислоту (10 мл), рН экстрактов был равен 5. Слой дихлорметана отделяли и экстрагировали смесью насыщенного солевого раствора, воды и насыщенного раствора хлорида натрия, (1:3:0,2, 1 л), рН 10,5, затем смесью насыщенного солевого раствора и воды (1:1, 1 л). Коричневый раствор высушивали над безводным сульфатом натрия в присутствии обесцвечивающего древесного угля (35 г), фильтровали и отгоняли растворитель в вакууме, получив темно-коричневую пену. Пену растворяли в изопропилацетате (100 мл) и отгоняли растворитель в вакууме. Темно-коричневый вязкий осадок растворяли в кипящем изопропилацетате (500 мл), охлаждали до комнатной температуры, вводили затравку и перемешивали в течение ночи. Полученное светло-кремовое вещество отделяли с помощью фильтрования и промывали изопропилацетатом (100 мл). Твердое вещество фильтровали досуха в течение 1 ч, затем перекристаллизовывали из изопропилацетата (400 мл). После перемешивания в течение ночи образовавшийся осадок отделяли с помощью фильтрования, промывали изопропилацетатом (80 мл) и высушивали в вакууме, получив соединение, соответствующее заголовку, 110 г, выход 63,5%. 1 Н ЯМР (CDCl3, приблизительно 1,9:1 смесь ротамеров)0,99 (6 Н, т), 2,10 (2 Н, м), 2,50 (4 Н, кв.),2,58-2,62 (2 Н, 2 т), 2,70-2,82 (2 Н, 2 т), 2,86 (2 Н, т), 3,28-3,58 (2 Н, 2 т), 4,45-4,52 (2 Н, 2 с), 4,68-4,70 (2 Н,2c), 4,93 (2 Н, с), 6,95 (2 Н, м), 7,31 (2 Н, д), 7,31-7,37 (2 Н, 2 м), 7,48-7,52 (2 Н, д), 7,65 (2 Н, м), 7,72 (2 Н,м); MS (APCI) (М+Н)+ 667; т.пл. 125 С (с помощью ДСК - ассиметричная эндотерма). Пример методики синтеза (I)-1(b). Битартрат 1-(N-(2-(диэтиламино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4-фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-она. Соединение получали из промежуточных соединений А 30 и В 69 из WO 01/60805 способом примера 1 из WO 01/60805. 1 Н-ЯМР (d6-ДМСО, приблизительно 1:1 смесь ротамеров)0,92-0,99 (6H, 2 т), 1,99 (2 Н, м), 2,54(М+1)=667; для C36H38F4N4O2S требуется 666. Пример методики синтеза (I)-1(с). Гидрохлорид 1-(N-(2-(диэтиламино)этил)-N-(4-(4-трифторметилфенил)бензил)аминокарбонилметил)-2-(4-фторбензил)тио-5,6-триметиленпиримидин-4-она. Свободное основание из примера (I)-1(а) (3,00 г, 0,0045 моль) при перемешивании суспендировали в изопропаноле (30 мл) и нагревали до 45 С, получив прозрачный раствор. Затем раствор охлаждали до температуры окружающей среды и добавляли конц. хлороводородную кислоту (0,40 мл, 0,045 моль). Полученную суспензию перемешивали при температуре окружающей среды в течение 35 мин, после чего охлаждали до 0 С в течение 35 мин. Далее суспензию фильтровали и промывали изопропанолом (10 мл),а затем гептаном (30 мл), после чего высушивали в вакууме, получив соединение, соответствующее заголовку, в виде белого твердого вещества (3,00 г, 95%). 1 Н ЯМР (CDCl3)1,38 (6 Н, т), 2,08 (2 Н, м), 2,82 (2 Н, т), 2,99 (2 Н, т), 3,19 (4 Н, м), 3,35 (2 Н, м), 3,97(2 Н, с), 4,42 (2 Н, с), 4,81 (2 Н, с), 4,99 (2 Н, с), 6,87 (2 Н, т), 7,26 (2 Н, т), 7,33 (2 Н, д), 7,41 (2 Н, д), 7,53 (2 Н,д), 7,71 (2 Н, д), 11,91 (1 Н, с). Синтез соединения формулы (II). Описание получения соединений формулы (II) и примеров промежуточных соединений и конечных продуктов для ранее названных соединений можно найти в опубликованной международной заявке WO 02/30911, которая включена в настоящую заявку путем отсылки. Методика последней стадии получения соединения, применяемого в настоящем изобретении, приведена в примере (II)-1. Пример методики синтеза (II)-1. Битартрат N-(2-диэтиламиноэтил)-2-[2-(2-(2,3-дифторфенил)этил)4-оксо-4,5,6,7-тетрагидроциклопентапиримидин-1-ил]-N-(4'-трифторметилбифенил-4-илметил)ацетамидаWO 02/30911) (0,50 г, 1,44 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (0,56 г, 1,45 ммоль),гидрата 1-гидроксибензотриазола (0,12 г) и 2-(2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо-4,5,6,7-тетрагидроциклопентапиримидин-1-ил)уксусной кислоты (пром. соед. С 1 в WO 02/30911) (0,48 г, 1,44 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при температуре окружающей среды в течение ночи, затем разбавляли дихлорметаном (30 мл), промывали водным раствором бикарбоната натрия и выпаривали. Остаток очищали с помощью хроматографии (10-г картридж с силикагелем, этилацетат-ацетон), получив соединение,соответствующее заголовку, в виде желтой пены (свободное основание) (0,50 г, 52%). 1 Н-ЯМР (ДМСО, смесь ротамеров)0,83-0,89 (6 Н, м), 1,98 (2 Н, м), 2,40 (4 Н, м), 2,45-2,82 (10 Н, м),3,02 (2 Н, м), 4,64-4,75 (2 Н, 2c), 4,96-5,19 (2 Н, 2c), 7,11-7,40 (5 Н, м), 7,65 (2 Н, м), 7,84 (4 Н, м); MS(APCI+) найденная (М+1)=667; для C37H39F5N4O2 требуется 666. К раствору свободного основания (0,40 г, 0,60 ммоль) в метаноле (10 мл) при перемешивании добавляли d-винную кислоту (0,09 г, 0,60 ммоль). Полученный раствор выпаривали с получением соли(10 Н, м), 3,02-3,46 (2 Н, м), 4,20 (2 Н, с), 4,64-4,75 (2 Н, 2c), 4,97-5,18 (2 Н, 2 с), 7,11-7,40 (5 Н, м), 7,65 (2 Н,м), 7,84 (4 Н, м); MS (APCI+) найденная (М+1)=667; для C37H39F5N4O2 требуется 666. В соответствии с описанной методикой или в альтернативе с другими методиками, описанными вWO 02/30911, можно получить другие соединения, названные выше, которые имеют структуру формулы(II). Синтез соединения формулы (III). Полный синтез соединений формулы (III) приведен на следующей схеме III, представленной в WO 02/30904: В отношении данной схемы сложный эфир (IV) обычно получают N-1 алкилированием (V) с использованием (VI), где R11 определен выше, например (VI) представляет собой трет-бутилбромацетат или этилбромацетат, в присутствии основания, например BuLi, в ТГФ или гидрида натрия в Nметилпирролидиноне (NMP) (стадия с). Когда X представляет собой CH2S, ключевое промежуточное соединение (IV) можно синтезировать при взаимодействии (XX) с метилидом диметилоксосульфония, полученным при обработке йодида триметилсульфоксония гидридом натрия при низкой температуре, с получением илида серы (XXII) (стадияq). Последующая обработка (XXII) сероуглеродом в присутствии диизопропиламина, а затем R1CH2-L4,где L является уходящей группой, приводит к получению промежуточного соединения (IV) (стадия r). В альтернативе, когда X представляет собой CH2S, заместитель R1X может быть введен путем замещения уходящей группы L2 (например, Cl) (стадия е) на пиридине (VIII) или N-оксиде пиридина(V) достигается путем снятия защиты с 4-кислорода (например, с использованием (Ph3P)3RhCl в водн. этаноле, когда R12 = аллил) (стадия d), с последующим для (XVI) удалением N-оксидного заместителя с использованием водорода в присутствии Pd/C в уксусной кислоте (стадия k). Пиридин (VIII) или N-оксид пиридина (XIV) может быть получен с применением стадий (i), (h), (g), (f) и (j), где(i) обработка (XIII) дималонатом низшего спирта и алкоголятом натрия в спирте (где R13 является С(1-6)алкилом, обычно R13 = Et); и R1-CH2SH (XIX) обычно получают из тиоацетата, полученного из соответствующего алкилбромида R1-CH2Br. В альтернативе, когда X представляет собой CH2S, R2 и R3 вместе с атомами углерода пиридонового кольца, к которым они присоединены, формируют конденсированное бензокольцо, промежуточное со- 22018101 единение (IV) можно синтезировать из известных исходных материалов с применением стадий (s), (с) и(s) обработка кислоты Мельдрума (XXIII) гидридом натрия при низкой температуре, с последующим взаимодействием с фенилизотиоцианатом и последующей обработкой R1-CH2L4;(v) обработка (XXV) трифторуксусной кислотой. Когда X является алкиленом, предпочтительно использовать стадии (m) и (h) (промежуточные соединения (XVII), (XVIII или стадии (n) и (р) (промежуточные соединения (XIX), (XX), (XXI, где(h) превращение 4-замещенного пиридина в 4-пиридон, например, путем обработки (XVII) R14=Cl водным раствором HCl и диоксаном, или снятие защиты R14=OR12, например, при использовании условий стадии (d);(m) удлинение цепи 2-алкилпиридина, например, когда X=YCH2CH2, путем обработки 2 метилпиридина (XVIII) R1-Y-CH2-L4 (XVI), где L является уходящей группой, и сильным основанием,таким как BuLi, в ТГФ. В альтернативном пути 3-сложноэфирную группу в промежуточном соединении (XIX) R15=C(1-6)алкил удаляют при нагревании в дифениловом эфире, где R15=tBu (стадия n); промежуточное соединение(XIX) получают из 2,6-диоксо-1,3-оксазина (XX) и сложного эфира (XXI) путем обработки основанием,таким как NaH в ДМФА или 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-еном в дихлорметане. Синтез (XX) из известных исходных материалов можно выполнить с применением стадий (w) и (с) или стадий (у) и (с), где(с) как описано выше. Дополнительные подробности и описание по поводу получения соединений формулы (III) см. в WO 02/30904, который включен в настоящую заявку путем отсылки. Пример методики синтеза (III)-1. N-(1-(2-Метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-2-[2-(2,3-дифторбензилтио)-4-оксо-4 Н-хинолин-1-ил]-N-(4'-трифторметилбифенил-4-илметил)ацетамид Свободное основание получали из промежуточного соединения Е 1 и промежуточного соединения А 42 способом примера 1 из WO 02/30904, но с использованием в качестве растворителя ДМФА вместо дихлорметана. 1,97 г данного материала кристаллизовали из н-бутилацетата (10 мл), получив соединение, соответствующее заголовку (1,35 г). 1(М+1) 736; для C40H38F5N3O3S требуется 735. Синтез соединения формулы (IV). На следующей схеме показан способ получения соединений настоящего изобретения. Кроме того, опубликованная заявка РСТ WO 03/016287 используется в качестве ссылки относительно химических методов, которые могут применяться при получении некоторых промежуточных соединений, указанных в данной схеме. Химические методы, если они применяются в данном случае,включены в настоящую заявку путем отсылки, как если бы были полностью изложены в ней. Кроме того,необходимо привести ссылку на способы синтеза, приведенные в опубликованных заявках РСТ WO 01/60805, WO 02/30911, WO 02/30904, WO 03/042218, WO 03/042206, WO 03/041712, WO 03/086400 иWO 03/87088, а также в одновременно рассматриваемых заявках на патент США 60/829328 и 60/829327,поданных 13 октября 2006 г., как отмечено выше. Если желательно получить соединения формулы (IV) с использованием промежуточных соединений, реагентов, растворителей, времени, температуры и т.д.,которые отличаются от приведенных на предыдущей схеме, то указанные опубликованные заявки РСТ и одновременно рассматриваемые заявки на патент США могут обеспечить полезное руководство. Если химические реакции в указанных заявках подходят для получения соединений согласно настоящему изобретению, то данные материалы включаются в настоящую заявку путем отсылки. Промежуточное соединение (IV)-А 1. [4'-(Трифторметил)-4-бифенилил]метиламин Получение данного соединения было описано в WO 02/30911 как промежуточное соединение D7. Промежуточное соединение (IV)-А 2. Гидрохлорид (4'-[(трифторметил)окси]-4-бифенилилметил) амина Раствор 4'-[(трифторметил)окси]-4-бифенилкарбонитрила (полученного из 4-[(трифторметил)окси] фенилбороновой кислоты способом, аналогичным описанному для 4'-трифторметильного аналога промежуточного соединения D6, WO 02/30911) (66,6 г) в этаноле (2000 мл) и концентрированной хлороводородной кислоте (100 мл) гидрировали над катализатором Перлмана (10 г) при 172,4 кПа (25 psi) до полного восстановления. Катализатор удаляли с помощью фильтрации через целит, затем растворитель отгоняли в вакууме с получением целевого продукта. ЖХМС Rt=2,212 мин; m/z [M+H]+=251,0. Промежуточные соединения для получения соединений формулы (IV). Промежуточное соединение (IV)-A3. Метиловый эфир 2-метил-2-(4-оксо-1-пиперидинил)пропановой кислоты Смесь метилового эфира 2-бром-2-метилпропановой кислоты (80,87 мл, 5 экв.), моногидрата гидрохлорида 4-пиперидона (19,6 г, 1 экв.), ацетонитрила (200 мл) и карбоната калия (69,1 г, 4 экв.) нагревали с обратным холодильником под азотом с механическим перемешиванием в течение 17,5 ч, а затем охлаждали в ледяной бане перед добавлением диэтилового эфира (100 мл). После фильтрации через целит с последующей флэш-хроматографией (силикагель, 10-50% этилаце- 24018101 тат в гексане) и выпариванием фракций, содержащих продукт, целевой продукт получали в виде желтого масла (14,28 г). 1 Н ЯМР (CDCl3)1,41 (6 Н, с), 2,47 (4 Н, м), 2,88 (4 Н, м), 3,73 (3 Н, с). Промежуточное соединение (IV)-А 4. Этиловый эфир 2-метил-2-(4-оксо-1-пиперидинил)пропановой кислоты Смесь этилового эфира 2-бром-2-метилпропановой кислоты (48,3 мл, 5 экв.), моногидрата гидрохлорида 4-пиперидона (100 г, 1 экв.), ацетонитрила (1216 мл) и карбоната калия (353 г, 4 экв.) нагревали с обратным холодильником под азотом с механическим перемешиванием в течение 20 ч, а затем охлаждали в ледяной бане перед добавлением диэтилового эфира (приблизительно 1400 мл). Смесь фильтровали через целит, выпаривали в вакууме, а затем отгоняли избыток бромзамещенного сложного эфира(температура дефлегматора 50 С/1,3 кПа (10 Торр. После флэш-хроматографии (силикагель, 5-30% этилацетат в гексане) и выпаривания фракций, содержащих продукт, неочищенный продукт получали в виде желтого масла. Для удаления остатка нежелательного бромзамещенного сложного эфира продукт разделяли между этилацетатом и 2 М водной хлороводородной кислотой. Органический слой отбрасывали, а водный слой подщелачивали карбонатом натрия, насыщали хлоридом натрия и экстрагировали этилацетатом. После высушивания и выпаривания органических экстрактов целевой продукт получали в виде желтого масла (54,7 г). 1 Н ЯМР (CDCl3)1,27 (3 Н, т), 1,40 (6 Н, с), 2,47 (4 Н, м), 2,90 (4 Н, м) 4,20 (2 Н, кв.). Промежуточное соединение (IV)-А 5. 1,1-Диметилэтиловый эфир 2-метил-2-(4-оксо-1-пиперидинил)пропановой кислоты Смесь 1,1-диметилэтилового эфира 2-бром-2-метилпропановой кислоты (8,0 г, 1,1 экв.), гидрохлорида 4-пиперидона (5,0 г, 1 экв.), ацетона (50 мл) и карбоната калия (13,0 г, 3 экв.) нагревали с обратным холодильником при перемешивании в течение 24 ч, затем фильтровали, а фильтрат выпаривали. Неочищенный остаток использовали в следующей стадии без очистки. Смесь метилового эфира 2-метил-2-(4-оксо-1-пиперидинил)пропановой кислоты (промежуточное соединение A3) (14,28 г, 1 экв.), [4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метиламина (промежуточное соединение А 1) (19,6 г, 0,85 экв.), DCE (300 мл), уксусной кислоты (3,8 мл, 0,90 экв.) и триацетоксиборгидрида натрия (20,7 г, 1,25 экв.) перемешивали при комнатной температуре под азотом в течение 17,5 ч. Затем добавляли водный раствор карбоната натрия (2 М раствор, избыток) и перемешивали в течение 4 ч, после чего смесь экстрагировали смесью диэтилового эфира и ТГФ. Органические экстракты промывали водой и насыщенным солевым раствором, высушивали над сульфатом натрия и фильтровали через слой силикагеля, промытый 2,5% метанолом в ДХМ. После выпаривания в вакууме неочищенный продукт кристаллизовали из смеси эфир/гексан в конце при температуре ледяной бани, получив после высушивания белое твердое вещество (20,9 г). ЖХМС Rt=2,070 мин; m/z [M+H]+=435,2. 1 Н ЯМР (d6-ДМСО)1,15-1,32 (8 Н, м), 1,75-187 (2 Н, м), 1,97-2,12 (2H, м), 2,27-2,40 (1 Н, м), 2,772,90 (2 Н, м), 3,60 (3 Н, с), 3,76 (2 Н, с), 7,46 (2 Н, д, J=8,03 Гц), 7,67 (2 Н, д, J=8,28 Гц), 7,80 (2 Н, д, J=8,53 Гц), 7,88 (2 Н, д, 8,03 Гц). Промежуточное соединение (IV)-В 2. Этиловый эфир 2-метил-2-[4-([4'-(трифторметил)-4 бифенилил]метиламино)-1-пиперидинил]пропановой кислоты Смесь этилового эфира 2-метил-2-(4-оксо-1-пиперидинил)пропановой кислоты (промежуточное соединение А 4) (25,6 г, 1,2 экв.), [4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метиламина (промежуточное соединение А 1) (31,1 г, 1,0 экв.), DCE (400 мл) и уксусной кислоты (6,3 мл, 1,1 экв.) перемешивали при комнатной температуре под азотом. Затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (33,5 г, 1,5 экв.) и продолжали перемешивание в течение 19 ч. После этого добавляли водный раствор карбоната натрия (2 М рас- 25018101 твор, избыток) и перемешивали в течение 1,5 ч, а затем смесь экстрагировали смесью диэтилового эфира и ТГФ. Органические экстракты промывали водой и насыщенным солевым раствором, фильтровали через слой силикагеля, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали в вакууме. Целевой продукт получали в виде белого твердого вещества (44,2 г), которое использовали без дополнительной очистки. ЖХМС Rt=2,194 мин; m/z [M+H]+=449,3. 1 Смесь этилового эфира 2-метил-2-(4-оксо-1-пиперидинил)пропановой кислоты (промежуточное соединение А 4) (1,09 г, 1,2 экв.), гидрохлорида (4'-[(трифторметил)окси]-4-бифенилилметил)амина (промежуточное соединение А 2) (1,28 г, 1,0 экв.), DCE (21 мл) и уксусной кислоты (0,27 мл, 1,1 экв.) перемешивали при комнатной температуре под азотом. Затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (1,42 г, 1,5 экв.) и продолжали перемешивание в течение 3 ч. Затем добавляли водный р-р карбоната натрия(2M раствор, избыток) и перемешивали в течение 45 мин, после чего смесь разделяли смесью диэтилового эфира/ТГФ и воды. Органические экстракты промывали водой и насыщенным солевым раствором,высушивали над сульфатом натрия и выпаривали в вакууме. Целевой продукт получали в виде светложелтого твердого вещества (2,14 г), которое использовали без дополнительной очистки. ЖХМС Rt=2,244 мин; m/z [M+H]+=465,3. Промежуточное соединение (IV)-В 4. 1,1-Диметилэтиловый эфир 2-метил-2-[4-([4'-(трифторметил)4-бифенилил]метиламино)-1-пиперидинил]пропановой кислоты Смесь 1,1-диметилэтилового эфира 2-метил-2-(4-оксо-1-пиперидинил)пропановой кислоты (промежуточное соединение А 6) (370 мг, 1,2 экв.), [4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метиламина (промежуточное соединение А 1) (397 мг, 1 экв.), триацетоксиборгидрида натрия (400 мг, 1,5 экв.), ДХМ (10 мл) и уксусной кислоты (0,076 мл, 1 экв.) перемешали при комнатной температуре, пока ЖХМС не подтверждала отсутствие исходного амина (приблизительно 18 ч). Затем добавляли водный раствор карбоната натрия и проводили экстракцию ДХМ. Органические экстракты высушивали над сульфатом натрия и концентрировали с получением твердого вещества (420 мг), которое использовали без дополнительной очистки. ЖХМС Rt=2,24 мин; m/z [M+H]+=477,3. Промежуточное соединение (IV)-С 1. [2-[2-(2,3-Дифторфенил)этил]-4-оксо-1(4 Н)-хиназолинил]уксусная кислота Получение данного соединения было описано в WO 02/30911 как промежуточное соединение С 43. Промежуточное соединение (IV)-С 2. [2-[2-(2,3-Дифторфенил)этил]-4-оксо-1,8-нафтиридин-1(4H)ил]уксусная кислота Получение данного соединения было описано в WO 02/30904 как промежуточное соединение Е 21. Промежуточное соединение (IV)-С 3. [2-[2-(2,4-Дифторфенил)этил]-4-оксо-1(4H)-хиназолинил]уксусная кислота Получение данного соединения было описано в WO 02/30911 как промежуточное соединение С 45. Промежуточное соединение (IV)-С 4. Этиловый эфир [2-[2-(2,4-дифторфенил)этил]-4-оксопиридо Смесь этилового эфира (2,4-диоксо-3,4-дигидропиридо[2,3-d]пиримидин-1(2H)-ил)уксусной кислоты (WO 02/30911, промежуточное соединение В 52) (40,8 г, 1,2 экв.) и 3-(2,4-дифторфенил)пропанимидамида (полученного способами, аналогичными описанным для 2,3-дифторизомеров, промежуточные соединения А 1-А 3 WO 02/30911) (30,0 г, 1 экв.) плавили при 150 С на масляной бане в течение 25 мин, а затем быстро охлаждали до комнатной температуры в водяной бане. После хроматографической очистки(силикагель, неочищенный продукт вносили в ДХМ и элюировали 50-100% этилацетатом в гексане) получали целевой продукт (43,56 г). ЖХМС Rt=2,521 мин; m/z [М+Н]+=374,1. 1 Н ЯМР (CDCl3)1,31 (3 Н, т), 3,13 (2H, м), 3,26 (2H, м), 4,28 (2 Н, кв.), 5,27 (2 Н, с), 6,82 (2 Н, м), 7,34 Получение данного соединения было описано в WO 02/30911 как промежуточное соединение С 35. Промежуточное соединение (IV)-С 5. [2-[2-(2,4-Дифторфенил)этил]-4-оксопиридо[2,3-d]пиримидин 1(4H)-ил]уксусная кислота Этиловый эфир [2-[2-(2,4-дифторфенил)этил]-4-оксопиридо[2,3-d]пиримидин-1(4 Н)-ил]уксусной кислоты (промежуточное соединение С 1) (32,76 г, 1 экв.) растворяли в этаноле (350 мл) и воде (70 мл),охлаждали во льду, после чего добавляли водный раствор гидроксида лития (2 М раствор, 43,42 мл, 0,99 экв.). Перемешивание продолжали в течение 2 ч при комнатной температуре. Раствор концентрировали в вакууме, а остаток повторно растворяли в воде (700 мл) и насыщенном водном растворе бикарбоната натрия (50 мл), затем промывали этилацетатом (200 мл). Водный слой подкисляли до pH 2 2M хлороводородной кислотой, затем выпавший осадок выделяли с помощью фильтрования, промывали водой со льдом (50 мл) и высушивали в вакууме (50 С, 16 ч), получив целевой продукт (23,2 г). 1 Н ЯМР (d6-ДМСО)2,4-2,6 (4 Н, м), 5,24 (2 Н, с), 7,04 (1 Н, м), 7,22 (1 Н, м), 7,48 (1 Н, м), 7,60 (1 Н,м), 8,47 (1 Н, м), 8,84 (1 Н, м). Пример (IV)-1. Метиловый эфир 2-[4-([2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо-1(4 Н)-хиназолинил] ацетил[4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метиламино)-1-пиперидинил]-2-метилпропановой кислоты в виде 2,3-дигидроксибутандиоата (соль) Смесь [2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо-1(4 Н)-хиназолинил]уксусной кислоты (промежуточное соединение С 1) (100 мг, 1 экв.), метилового эфира 2-метил-2-[4-([4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метиламино)-1-пиперидинил]пропановой кислоты (промежуточное соединение В 1) (130 мг, 1,03 экв.),DIPEA (0,1 мл, 3,6 экв.), ацетонитрила (2 мл) и HATU (130 мг, 1,4 экв.) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем выпаривали и повторно растворяли в ацетонитриле. После очистки с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ (подготовительный метод А) получали метиловый эфир 2-[4-([2[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо-1(4H)-хиназолинил]ацетил[4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метил амино)-1-пиперидинил]-2-метилпропановой кислоты (128 мг). ЖХМС Rt=2,686 мин; m/z [M+H]+=761,3. 1(5 Н, м), 8,22-8,28 (1 Н, м). Свободное основание превращали в битартрат, добавляя L-винную кислоту (1,675 г, 1,0 экв.) в один прием, а затем перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Раствор концентрировали в вакууме до получения грязно-белого порошка, который высушивали в вакуумной печи при комнатной температуре. Пример методики синтеза (IV)-2. Метиловый эфир 2-[4-([2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо-1,8 нафтиридин-1(4 Н)-ил]ацетил[4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метиламино)-1-пиперидинил]-2-метилпропановой кислоты в виде 2,3-дигидроксибутандиоата (соль) Смесь [2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо-1,8-нафтиридин-1(4 Н)-ил]уксусной кислоты (промежуточное соединение С 2) (100 мг, 1 экв.), карбонилдиимидазола (50 мг, 1,05 экв.) и диметилацетамида (4 мл) перемешивали при 60 С в течение 30 мин, затем добавляли метиловый эфир 2-метил-2-[4-([4'(трифторметил)-4-бифенилил]метиламино)-1-пиперидинил]пропановой кислоты (промежуточное соединение В 1) (132 мг, 1,05 экв.) и повышали температуру до 80 С в течение 2 ч. Затем добавляли дополнительную порцию карбонилдиимидазола (0,5 экв.) и продолжали перемешивание при 80 С в течение 15 ч. После охлаждения неочищенную смесь подвергали очистке с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ(препаративный метод А), получив метиловый эфир 2-[4-([2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо-1,8 нафтиридин-1(4 Н)-ил]ацетил[4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метиламино)-1-пиперидинил]-2 метилпропановой кислоты (99 мг). ЖХМС Rt=2,845 мин; m/z [М+Н]+=761,3. 1(1 Н, м), 3,00-3,12 (4 Н, м), 3,19 (1 Н, с), 3,68-3,73 (3 Н, м), 4,11/4,41 (1 Н, 2 уш.м), 4,73 (1 Н, с), 4,97 (1 Н, с),5,51 (1 Н, с), 6,29-6,34 (1 Н, м), 7,06-7,20 (2 Н, м), 7,35-7,41 (1 Н, м), 7,48-7,58 (2 Н, м), 7,68-7,84 (6 Н, м),8,60-8,68 (1 Н, м), 8,87-8,91 (1 Н, м). Полученное соединение превращали в битартрат методом, аналогичным описанному в примере методики синтеза (I). Пример методики синтеза (IV)-3. Этиловый эфир 2-[4-([2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо-1(4 Н)хиназолинил]ацетил[4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метиламино)-1-пиперидинил]-2-метилпропановой кислоты в виде 2,3-дигидроксибутандиоата (соль) Смесь [2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо-1(4 Н)-хиназолинил]уксусной кислоты (промежуточное соединение С 1) (115 мг, 1 экв.), этилового эфира 2-метил-2-[4-([4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метил амино)-1-пиперидинил]пропановой кислоты (промежуточное соединение В 2) (150 мг, 1 экв.), HATU (151 мг, 1,2 экв.), ДМФА (2,7 мл) и DIPEA (0,17 мл, 3 экв.) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Реакционную смесь разделяли между этилацетатом/метанолом и водным раствором бикарбоната натрия, затем органический слой промывали насыщенным солевым раствором и высушивали. После очистки с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 3-4% метанол в ДХМ) получали этиловый эфир 2-[4-([2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксопиридо[2,3-d]пиримидин-1(4 Н)-ил]ацетил[4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метиламино)-1-пиперидинил]-2-метилпропановой кислоты в виде белого твердого вещества (190 мг). ЖХМС Rt=2,55 мин; m/z [M+H]+=775,3. 1 Н ЯМР (CDCl3)1,18-1,40 (9 Н, м), 1,61-2,09 (4 Н, м), 2,22-2,45 (2 Н, м), 2,75-2,85 (1 Н, м), 2,90-3,34(3 Н, м), 7,27-7,33 (1 Н, м), 7,34-7,52 (3 Н, м), 7,56-7,62 (1 Н, м), 7,63-7,77 (4 Н, м), 8,29-8,44 (2 Н, м). Полученное соединение превращали в битартрат методом, аналогичным описанному в примере методики синтеза (I). Пример методики синтеза (IV)-4. Этиловый эфир 2-4-2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо 1(4 Н)-хиназолинил]ацетил(4'-[(трифторметил)окси]-4-бифенилилметил)-амино]-1-пиперидинил-2 метилпропановой кислоты в виде 2,3-дигидроксибутандиоата (соль) Смесь [2-[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо-1(4H)-хиназолинил]уксусной кислоты (промежуточное соединение С 1) (124 мг, 1,2 экв.), этилового эфира 2-метил-2-4-[(4'-[(трифторметил)окси]-4 бифенилилметил)амино]-1-пиперидинилпропановой кислоты (промежуточное соединение В 3) (139 мг,1 экв.), ДМФА (1.2 мл) и DIPEA (0,16 мл, 3 экв.) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем добавляли HATU (176 мг, 1,5 экв.) и продолжали перемешивание в течение 4 ч. После очистки с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ (препаративный метод В) получали этиловый эфир 2-4-2[2-(2,3-дифторфенил)этил]-4-оксо-1(4 Н)-хиназолинил]ацетил(4'-[(трифторметил)окси]-4-бифенилил метил)амино]-1-пиперидинил-2-метилпропановой кислоты в виде белого твердого вещества (174 мг). ЖХМС Rt=2,77 мин; m/z [M+H]+=791,3. 1H ЯМР (CDCl3) Характеристические пики:1,21-1,42 (9 Н, м), 1,58-2,08 (4 Н, м), 2,20-2,48 (2 Н,м), 2,71-5,1 (13 Н, уш.м), 6,79-6,87 (1 Н, д), 6,92-7,11 (3 Н, м), 7,30-7,46 (5 Н, м), 7,48-7,63 (5 Н, м), 8,268,40 (1 Н, м). Полученное соединение превращали в битартрат методом, аналогичным описанному в примере методики синтеза (I). Пример методики синтеза (IV)-5. Метиловый эфир 2-[4-([2-[2-(2,4-дифторфенил)этил]-4-оксо 1(4 Н)-хиназолинил]ацетил[4'-(трифторметил)-4-бифенилил]метиламино)-1-пиперидинил]-2-метилпропановой кислоты в виде 2,3-дигидроксибутандиоата (соль)