Анти-il-17-антитела

Идентифицированы анти-IL-17-антитела, которые характеризуются высокой аффинностью к IL17 и низким коэффициентом выведения из организма человека. Антитела по изобретению могут быть химерными, гуманизированными или полностью человеческими антителами, иммуноконъюгатами антител или их антигенсвязывающими фрагментами. Заявленные антитела могут использоваться, в частности, для лечения аутоиммунных, воспалительных, клеточнопролиферативных расстройств и расстройств развития.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ЭЛИ ЛИЛЛИ ЭНД КОМПАНИ (US) 014298 Область изобретения Настоящее изобретение относится к области медицины, в частности к области моноклональных антител против IL-17 человека. Изобретение относится к нейтрализующим анти-IL-17 моноклональным антителам, которые связывают с высокой аффинностью нелинейный или конформационный эпитопIL-17, содержащий аминокислоты DGNVDYH (SEQ ID NO:276). Антитела по изобретению могут быть химерными, гуманизированными или человеческими антителами, иммуноконъюгатами антител или их антигенсвязывающими фрагментами и могут использоваться в качестве лекарственного средства для лечения аутоиммунных и воспалительных нарушений и нарушений пролиферации и развития клеток. Уровень техники Сегодня семейство IL-17 цитокинов включает IL-17A, IL-17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E и IL-17F. Все члены семейства IL-17 имеют четыре высококонсервативных цистеиновых остатка, которые вовлечены в формирование межцепочечных дисульфидных связей, и имеют два или более цистеиновых остатка, которые могут быть вовлечены в межцепочечные дисульфидные связи. Члены семейства IL-17 не имеют никакого сходства с последовательностями любых других известных цитокинов. Однако вирусный гомолог IL-17A был найден в открытой рамке считывания 13 герпесвируса saimiri (Yao Z. et al. Immunity,3:811, 1995) и имеет 72% идентичность аминокислотных остатков с IL-17A человека. Для членов семейства IL-17 были сообщены разнообразные функции, которые преимущественно включают в себя регулирование иммунного ответа. Интерлейкин 17 (IL-17, также указанный как IL-17A) является 20-30 кД гомодимерным гликопротеином, продуцируемым преимущественно активированными CD4+ Т-клетками, и функционирует как провоспалительный цитокин. Если конкретный член семейства IL-17 указан просто как "IL-17", то понятно, что указанный член семейства является IL-17A. IL-17 секретируется активизированными Т-клетками в участках воспаления не в большом круге кровообращения. IL-17 связывается с I типом трансмембранного рецептора, названного IL-17R, который является большим повсеместно экспрессируемым протеином, который демонстрирует отсутствие существенного сходства последовательности с другими известными рецепторами цитокинов. IL-17 имеет разнообразные биологические свойства, включая стимулирование адгезии молекул и индуцирование продукции разнообразных воспалительных цитокинов и хемокинов разных типов клеток, включая синовиоциты, хондроциты, фибробласты, эндотелиальные клетки, эпителиальные клетки, кератиноциты и макрофаги. Также IL-17 индуцирует рекрутинг нейтрофилов к воспалительным участкам посредством индукции высвобождения хемокинов, стимулирует продуцирование простагландинов и металлопротеиназы и ингибирует синтез протеогликанов. Кроме того,IL-17 играет важную роль в созревании гематопоэтических прогениторных клеток. Было продемонстрировано, что IL-17 выполняет сигнальную роль в разных органах и тканях, включая легкие, суставной хрящ, кость, мозг, гематопоэтические клетки, почки, кожу и кишечник. Обзор биологической активностиImmunol., 16:541, 1998. Повышенные уровни IL-17 (т.е. IL-17A) были связаны с некоторыми состояниями, болезнями и расстройствами, включая воспаление дыхательных путей, ревматоидный артрит ("RA"), остеоартрит, костную эрозию, интраперитонеальный абсцесс и спайки, воспалительные заболевания кишечника ("IBD"),отторжение аллотрансплантата, псориаз, некоторые типы рака, ангиогенез, атеросклероз и рассеянный склероз ("MS") (для обзора см. Witkowski et al. Cell. Mol. Life Sci., 61:567-579, 2004). Как IL-17, так иIL-17R повышены в синовиальной ткани больных ревматоидным артритом. Блокирование биологической активности IL-17 с помощью связывания IL-17 специфическим антителом или растворимым рецептором к IL-17 снижает воспаление и костную эрозию на различных животных моделях артрита (см., например,Lubberts et al. ArthritisRheumatism, 50:650-659, 2004). К тому же, IL-17 обладает IL-1-независимыми эффектами на деградацию коллагенового матрикса и воспаление и повреждение суставов, в то время какIL-17 обладает синергизмом с TNF- для усиления воспаления. Таким образом, учитывая локализованное распространение в участках воспаления, IL-17 является новой мишенью для лечения ревматоидного артрита и других воспалительных и аутоиммунных заболеваний с потенциально большим профилем безопасности, чем лекарства, которые нацелены на провоспалительные цитокины большого круга кровообращения, такие как TNF-. Современные биопродукты,одобренные FDA (антитела ENBREL, REMICADE и HUMIRA), которые связывают и нейтрализуютTNF-, продемонстрировали эффективность в снижении симптомов ревматоидного артрита и в замедлении прогрессирования заболевания у ряда больных ревматоидным артритом. Однако не все больные ревматоидным артритом одинаково отвечают на ингибирование биологической активности TNF- с этими биопродуктами. Кроме того, мРНК IL-17 увеличена во множественных склеротических повреждениях и в мононуклеарных клетках в крови и в цереброспинальной жидкости больных рассеянным склерозом,особенно во время клинического обострения. Соответственно, имеется потребность в композициях, которые обладают антагонистическим действием или нейтрализуют активность IL-17 для лечения расстройств, заболеваний или состояний, где присутствие биологической активности IL-17 вызывает или способствует нежелательному патологическому результату, или там, где снижение биологической ак-1 014298 тивности IL-17 способствует желательному терапевтическому результату, включая воспалительные нарушения, нарушения пролиферации и развития клеток, аутоиммунные нарушения, такие как ревматоидный артрит (RA), рассеянный склероз (MS) и воспалительные заболевания кишечника (IBD). Существует потребность в нейтрализующем анти-IL-17-антителе, которое специфически связывает как IL-17 человеческого происхождения, так и IL-17 нечеловеческого млекопитающего, таким образом позволяя использовать антитело в доклинических и клинических изучениях in vivo. К тому же имеется потребность в IL-17-специфическом антителе, которое связывает IL-17 с высокой аффинностью и/или имеет замедленную скорость, таким образом позволяя минимизировать эффективную терапевтическую дозу, приводя к менее частому дозированию с таким антителом, чем с антителом, которое связываетIL-17 с меньшей аффинностью (т.е. высший KD) и/или имеет повышенную скорость. Высокая аффинность IL-17-специфического антитела также является желательной в том, что может позволить вводить антитело пациенту подкожно, а не внутривенно. Также имеется необходимость в IL-17-специфическом антителе с низким значением IC50 в анализе биологической активности IL-17 для того, чтобы получить терапевтическое анти-IL-17-антитело с минимальной эффективной терапевтической дозой. Также является желательным обеспечить антитело, специфическое к IL-17, где иммунный ответ на антитело, вызванный пациентом, получающим антитело, был снижен до минимума. Настоящее изобретение удовлетворяет эти потребности и обеспечивает связанные преимущества. Краткое описание изобретения Антитела по настоящему изобретению являются химерными, гуманизированными или полностью человеческими анти-IL-17 моноклональными антителами и их антигенсвязывающими частями, которые связывают нелинейный эпитоп, содержащий аминокислоты IL-17 DGNVDYH (SEQ ID NO:276) и противодействуют или нейтрализуют по крайней мере одну in vitro или in vivo биологическую активность, связанную с IL-17 или его частью. В одном из вариантов осуществления антитела по настоящему изобретению имеют IC50 меньше чем или равно приблизительно 1 нМ, 900, 800, 700, 600, 560 или 500 пМ в анализе IL-8-репортер in vitro, как описано, например, в примере 6 А описания, или меньше или равно 560 пМ в анализе GRO-репортер,как описано, например, в примере 6 В данного описания. В другом из вариантов осуществления антитела по изобретению характеризуются сильным сродством к связыванию (KD) IL-17 человека, т.е. меньше чем приблизительно 7, 6,5, 6,0, 5,5, 5,0, 4,5 или 4,0 пМ. Альтернативно, антитела по изобретению характеризуются KD для IL-17 человека не больше чем приблизительно 7, 6,5, 6,0, 5,5, 5,0, 4,5 пМ или предпочтительно не больше чем приблизительно 4,0 пМ. Более того, антитела по изобретению предпочтительно характеризуются коэффициентом выведения koff для IL-17 человека меньше чем 210-5 с-1. В другом из вариантов осуществления анти-IL-17-антитело по изобретению характеризуется специфическим связыванием IL-17 человека, также как и IL-17 макаки-крабоеда, в то время как связываниеIL-17 мыши или крысы не превышает уровней фона. Дополнительно анти-IL-17-антитело по изобретению связывает IL-17 человека (т.е. IL-17A), но не связывает IL-17 человека В, С, D, Е или F. В одном из вариантов осуществления анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению содержит полипептид вариабельного участка легкой цепи ("LCVR"), содержащий 3 CDR-последовательности,которые вместе присутствуют в Fab, приведенном в табл. 3 описания ниже, и которые присутствуют в антителе по изобретению в том же CDR-положении, как и в Fab, приведенном в табл. 3. Предпочтительно анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению содержит LCVR-полипептид с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:178-243. В другом из вариантов осуществления анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению содержит полипептид вариабельного участка тяжелой цепи ("HCVR"), содержащий 3 CDR, которые вместе присутствуют в Fab, приведенном в табл. 2 данного описания ниже, и которые присутствуют в антителе по изобретению в том же CDR-положении, как и в Fab, приведенном в табл. 2. Предпочтительно анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению содержит HCVR-полипептид с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:56-121. В другом из вариантов осуществления анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению содержит LCVR-полипептид, содержащий 3 CDR, которые вместе присутствуют в Fab, приведенном в табл. 3 данного описания ниже, и которые присутствуют в антителе по изобретению в том же CDR-положении, как и в Fab, приведенном в табл. 3, и, кроме того, содержит HCVR-полипептид, содержащий 3 CDR, которые вместе присутствуют в Fab, приведенном в табл. 2 описания ниже, и которые присутствуют в антителе по изобретению в том же CDR-положении, как и в Fab, приведенном в табл. 2. Предпочтительно 6 CDR антитела по изобретению или его функционального фрагмента существуют вместе вFab, приведенном в табл. 1 описания ниже, и присутствуют в антителе по изобретению в том жеCDR-положении, как и в Fab, приведенном в табл. 1. В предпочтительном из вариантов осуществления анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению содержит (i) LCVR-полипептид с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы,состоящей из SEQ ID NO:178-243, и (ii) HCVR-полипептид с аминокислотной последовательностью, вы-2 014298 бранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:56-121. В более предпочтительном из вариантов осуществления антитело по изобретению, содержащее LCVR-полипептид с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:178-243, кроме того, содержит HCVR-полипептид,выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:56-121, которая присутствует в Fab, приведенном в табл. 1, которая содержит конкретный LCVR, присутствующий в антителе. В другом из вариантов осуществления моноклональное антитело по изобретению является антителом, которое может конкурировать за связывание IL-17 человека или части IL-17 человека с конкурирующим антителом, где конкурирующее антитело содержит два полипептида с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO:241 и 118. В другом из вариантов осуществления LCVR-полипептид анти-IL-17 моноклонального антитела по изобретению содержит 1, 2 или 3 пептида, предпочтительно 3 пептида, выбранных из группы, состоящей из пептидов с последовательностью, как показано в (а) SEQ ID NO:122-149; (b) SEQ ID NO:150-167 и (с)SEQ ID NO:168-177 (т.е. один пептид из (а), один пептид из (b) и один пептид из (с) для антитела, содержащего 3 указанных пептида). Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:122-149, когда присутствует в антителе по изобретению, находится в CDRL1. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:150-167, когда присутствует в антителе по изобретению, находится в CDRL2. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:150-167, когда присутствует в антителе по изобретению,находится в CDRL3. В другом из вариантов осуществления HCVR-полипептид анти-IL-17 моноклонального антитела по изобретению содержит 1, 2 или 3 пептида, предпочтительно 3 пептида, выбранных из группы, состоящей из пептидов с последовательностью, как показано в (а) SEQ ID NO:11-28; (b) SEQ ID NO:29-32 и (с) SEQID NO:33-55 и 261 (т.е. один пептид из (а), один пептид из (b) и один пептид из (с) для антитела, содержащего 3 указанных пептида). Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:11-28, когда присутствует в указанном антителе, находится в CDRH1. Пептид с последовательностью, показанной вCDRH3. Настоящее изобретение, кроме того, обеспечивает анти-IL-17 моноклональное антитело, содержащее шесть пептидов, выбранных из группы, состоящей из пептидов с последовательностью, как показано в (a) SEQ ID NO:122-149; (b) SEQ ID NO:150-167; (с) SEQ ID NO:168-177; (d) SEQ ID NO:11-28; (e) SEQID NO:29-32 и (f) SEQ ID NO:33-55 и 261 (т.е. один пептид от каждого из (а-f; предпочтительно шесть пептидов сосуществуют в Fab, приведенном в табл. 1 описания. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:122-149, когда присутствует в антителе по изобретению, находится в CDRL1. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:150-167, когда присутствует в антителе по изобретению, находится в CDRL2. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:150-167, когда присутствует в антителе по изобретению, находится в CDRL3. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:11-28, когда присутствует в указанном антителе, находится в CDRH1. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:29-32, когда присутствует в указанном антителе, находится вCDRH2. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:33-55 и 261, когда присутствует в указанном антителе, находится в CDRH3. Настоящее изобретение, кроме того, относится к анти-IL-17 моноклональному антителу, содержащему шесть пептидов с последовательностями, как показано в SEQ ID NO:247, 248, 249, 244, 245 и 246. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:247, находится в CDRL1. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:248, находится в CDRL2. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:249, находится в CDRL3. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ IDCDRH2. Пептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:246, находится в CDRH3. Анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению может содержать или состоять из интактного антитела (т.е. полноразмерного), по существу интактного антитела или его антигенсвязывающей части,например Fab-фрагмента, F(ab')2-фрагмента или одноцепочечного Fv-фрагмента. Более того, антитело по изобретению может быть помечено обнаруживаемой меткой, иммобилизированным на твердой фазе и/или конъюгированным с гетерологичным соединением, например, энзимом, токсином или молекулой полиэтиленгликоля. В другом из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к способу получения антиIL-17 моноклонального антитела по изобретению, содержащему поддержание клетки-хозяина по изобретению (т.е. клетка-хозяин, которая была трансформирована, преобразована или инфицирована вектором(или векторами) по изобретению, экспрессирующая антитело по изобретению) в условиях, подходящих для экспрессии моноклонального антитела по изобретению, при помощи которого такое антитело экспрессируется. Способ, кроме того, может содержать шаг выделения моноклонального антитела по изобретению из клетки или предпочтительно из культуральной среды, в которой выращивали клетку. Предполагают диагностическое применение антитела по изобретению. В одном из диагностических применений настоящее изобретение обеспечивает способ определения уровней IL-17-протеина в образ-3 014298 це, содержащий воздействие на тестируемый образец анти-IL-17-антителом по изобретению в условиях связывания и определение специфического связывания антитела с образцом. Анти-IL-17-антитело по изобретению может быть использовано, чтобы определить уровни IL-17 в тестируемых образцах путем сравнивания значений тестируемого образца со стандартной кривой, полученной с помощью связывания указанного антитела с образцами с известными количествами IL-17. Кроме того, изобретение обеспечивает набор, содержащий антитело по изобретению и предпочтительно инструкцию по использованию антитела для обнаружения IL-17-протеина в образце. Изобретение относится к композиции, предпочтительно фармацевтической композиции, содержащей анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению. Фармацевтическая композиция по изобретению содержит фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель и/или разбавитель. В указанной фармацевтической композиции анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению является единственным активным ингредиентом. Предпочтительно фармацевтическая композиция содержит гомогенную или по существу гомогенную популяцию анти-IL-17 моноклонального антитела по изобретению. Композиция для терапевтического использования является физиологически совместимой, стерильной и может быть лиофилизированной и необязательно снабженной подходящим разбавителем. Изобретение относится к способу ингибирования по крайней мере одной биологической активностиIL-17 у животного, предпочтительно у млекопитающего, более предпочтительно у человека, нуждающегося в этом, включающему введение терапевтически эффективного количества или нейтрализующегоIL-17 количества анти-IL-17 моноклонального антитела по изобретению указанному животному. Изобретение, кроме того, относится к способу лечения заболевания или нарушения, улучшаемого нейтрализацией или противодействием биологической активности IL-17, например ингибирование трансдукции сигналов, обусловленной связыванием IL-17 с его рецептором, который содержит введение пациенту(например, человеку), нуждающемуся в таком лечении или профилактике, терапевтически эффективного количества или нейтрализующего IL-17 количества моноклонального антитела по изобретению. Изобретение относится к анти-IL-17 моноклональному антителу по изобретению для использования для производства лекарственного средства для введения млекопитающему, предпочтительно человеку,для лечения, например, аутоиммунных нарушений или воспалительных нарушений, или клеточнопролиферативных нарушений. Кроме того, изобретение относится к изделию, содержащему упаковочный материал и антитело по изобретению, содержащееся в указанном упаковочном материале, где упаковочный материал содержит упаковочный вкладыш, в котором указывает, что антитело специфически нейтрализует активность IL-17 или снижает уровень функционального IL-17, присутствующего в системе. Изобретение, кроме того, относится к выделенным молекулам нуклеиновой кислоты, кодирующей антитело по изобретению или его легкую или тяжелую цепь; вектор (или векторы), содержащий указанную нуклеиновую кислоту, необязательно функционально связанную с контрольными последовательностями, которые распознаются клеткой-хозяином, трансформированной вектором; клетку-хозяина, содержащую такой вектор; процесс продуцирования антитела по изобретению, который включает культивирование клетки-хозяина таким образом, чтобы экспрессировать нуклеиновую кислоту и, необязательно,восстанавливая антитело из культуральной среды клетки-хозяина. Изобретение, кроме того, относится к выделенным молекулам нуклеиновой кислоты, кодирующейIL-17 макаки-крабоеда (SEQ ID NO:253) или IL-17 кролика (SEQ ID NO:251); IL-17-протеин, кодируемый нуклеиновой кислотой обезьяны или кролика (SEQ ID NO:10 или 9 соответственно); векторы, содержащие указанную молекулу нуклеиновой кислоты; клетку-хозяина, содержащую указанный вектор; и процесс продуцирования IL-17 макаки-крабоеда или IL-17 кролика. Краткое описание чертежей На фиг. 1 показано выравнивание аминокислотной последовательности членов семейства IL-17 протеинов человека (IL-17, IL-17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E и IL-17F). На фиг. 2 показано выравнивание аминокислотной последовательности IL-17 из человека, кролика,крысы, макаки-крабоеда и мышиных видов. Подробное описание изобретения Изобретение относится к химерным, гуманизированным или полностью человеческим анти-IL-17 моноклональным антителам или их антигенсвязывающим частям, способным нейтрализовать или противодействовать активности IL-17 in vitro и/или in vivo. Предпочтительно такие антитела по изобретению,кроме того, отличаются тем, что значение IC50 составляет меньше приблизительно 600 или 560 пМ в,например, IL-8-репортер или GRO-репортер анализе (см., например, пример 6) и/или предпочтительно имеют сильное сродство к связыванию IL-17 меньше чем 4 пМ. Антитела по изобретению, кроме того,отличаются тем, что специфически связывают IL-17 человека или макаки-крабоеда (SEQ ID NO:1 и 10 соответственно), но не связывают IL-17 мыши или крысы (SEQ ID NO:7 и 8 соответственно). Антигенный эпитоп, с которым моноклональные антитела по изобретению связываются, является нелинейным эпитопом IL-17 человека (и обезьяны) и содержит остатки DGNVDYH (SEQ ID NO:276) IL-17. Антитело по изобретению производит контакт с DGNVDYH (SEQ ID NO:276) пептидом, если он находится в контексте полноразмерного IL-17."Интерлейкин 17", также указанный как "IL-17" или "IL-17 А", является 20-30 кД гликозилированным гомодимерным протеином. Ген IL-17 человека кодирует 155-ти аминокислотный протеин, который имеет 19-ти аминокислотную сигнальную последовательность и 136-ти аминокислотный зрелый сегмент. Аминокислотная последовательность IL-17 человека на 62,5 и 58% идентична аминокислотным последовательностям мыши и крысы соответственно, как показано на фиг. 2. Аминокислотная последовательность IL-17 человека на 97,4% идентична последовательности интерлейкина-17 макаки-крабоеда. Полноразмерное антитело в том виде, в котором оно встречается в природе, представляет собой молекулу иммуноглобулина, которая состоит из четырех пептидных цепей, две тяжелые (Н) цепи (приблизительно 50-70 кД при полной длине) и две легкие (L) цепи (приблизительно 25 кД при полной длине),взаимосвязанных дисульфидными мостиками. Аминоконцевая часть каждой цепи включает вариабельный участок из приблизительно 100-110 или более аминокислот, которые в основном отвечают за распознавание антигенов. Карбоксиконцевая часть каждой цепи определяет константный участок, главным образом, отвечающий за функцию эффектора. Легкие цепи классифицируют как каппа или лямбда и они характеризуются конкретным константным участком. Каждая легкая цепь состоит из вариабельного участка N-концевой легкой цепи (в данной заявке "LCVR") и константного участка легкой цепи, состоящего из одного домена, CL. Тяжелые цепи классифицируют как гамма, мю, альфа, дельта или эпсилон, и они определяют изотип антитела, такой как IgG, IgM, IgA, IgD и IgE, соответственно, и несколько из них могут быть дополнительно разделены на подклассы (изотипы), например IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2. Каждый тип тяжелой цепи характеризуется конкретным константным участком. Каждая тяжелая цепь состоит из вариабельного участкаN-концевой тяжелой цепи (в данной заявке "HCVR") и константного участка тяжелой цепи. Константный участок тяжелой цепи состоит из трех доменов (CH1, CH2 и СН 3) для IgG, IgD и IgA и 4 доменов (CH1,CH2, СН 3 и СН 4) для IgM и IgE. Участки HCVR и LCVR могут быть дополнительно разделены на участки гипервариабельности, названные гипервариабельными участками (CDR), перемежающиеся с более консервативными участками,названными каркасными участками (FR). Каждый HCVR и LCVR состоит из трех CDR и четырех FR,расположенных в следующем порядке от аминоконца к карбоксиконцу: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3,CDR3, FR4. Для полноразмерного антитела по изобретению легкие цепи после FR4 предпочтительно содержат полипептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:277. Для полноразмерного антитела по изобретению тяжелые цепи после FR4 предпочтительно содержат полипептид с последовательностью, показанной в SEQ ID NO:278. В данной заявке 3 CDR тяжелые цепи обозначены как "CDRH1,CDRH2 и CDRH3", а 3 CDR легкой цепи обозначены как "CDRL1, CDRL2 и CDRL3". CDR содержат большинство остатков, которые образуют специфические взаимодействия с антигеном. Нумерацию и позиционирование CDR-аминокислотных остатков в пределах HCVR и LCVR участков осуществляют по изобретению с хорошо известной номенклатурой Кэбота. Термин "антитело" в связи с анти-IL-17 моноклональным антителом по изобретению (либо упрощенно, "моноклональное антитело по изобретению"), как используется в данной заявке, относится к моноклональному антителу. "Моноклональное антитело", как используется в данной заявке, относится к антителу грызуна, предпочтительно к антителу мыши, химерному антителу, гуманизированному антителу или полностью человеческому антителу, если в данной заявке не указано иное. Моноклональные антитела по изобретению могут быть получены с использованием, например, гибридомных методик, хорошо известных из уровня техники, а также рекомбинантных технологий, технологий фагового дисплея,синтетических технологий или комбинаций таких технологий или других технологий, хорошо известных из уровня техники. Термин "моноклональное антитело", как его используют в данной заявке, не ограничивается антителами, полученными с помощью гибридомной технологии. "Моноклональное антитело" относится к антителу, полученному из единой копии или клона, включая, например, любой эукариотический, прокариотический или фаговый клон, а не к способу его получения. "Моноклональное антитело" может быть интактным антителом (содержащим полный или полноразмерный Fc-участок), по существу интактным антителом, частью или фрагментом антитела, содержащими антигенсвязующую часть, например Fab-фрагмент, Fab'-фрагмент или F(ab')2-фрагмент мышиного антитела или химерного, гуманизированного или человеческого антитела. "Fab"-фрагмент содержит вариабельный и константный домен легкой цепи и вариабельный домен и первый константный домен (СН 1) тяжелой цепи. "F(ab')2"фрагменты антитела содержат пару Fab-фрагментов, которые в основном ковалентно связаны возле их карбоксиконцов шарнирными цистеинами между ними. Другие химические связывания фрагментов антител также хорошо известны из уровня техники. Вариабельные участки каждой из пар легкая/тяжелая цепь образуют антигенсвязывающие сайты антитела. Таким образом, интактное IgG антитело имеет два сайта связывания. За исключением бифункциональных или биспецифических антител два сайта связывания являются одинаковыми. Как используется в данной заявке, "антигенсвязывающая часть", или "антигенсвязывающий участок", или "антигенсвязывающий домен" относятся, взаимозаменяемо, к такой части молекулы антитела, которая содержит аминокислотные остатки, взаимодействующие с антигеном и придающие антителу его специфичность и-5 014298 аффинность по отношению к антигену. Эта часть антитела включает "каркасные" аминокислотные остатки, необходимые для поддержания надлежащей конформации антигенсвязывающих остатков. Предпочтительно CDR антигенсвязывающего участка или весь антигенсвязывающий участок антител по изобретению имеет полностью мышиное происхождение или по существу мышиное происхождение с определенными аминокислотными остатками, измененными, например, замещенными разными аминокислотными остатками (см., например, табл. 2 и 3) с тем, чтобы оптимизировать конкретные свойства антитела, например KD, koff, IC50. Предпочтительно каркасные участки антитела по изобретению имеют человеческое происхождение или по существу человеческое происхождение (по крайней мере на 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% человеческое происхождение). Предпочтительные каркасные участки антитела по изобретению имеют следующие аминокислотные последовательности: SEQ ID NO:262(HCVR FR1), 263 (HCVR FR2), 264 (HCVR FR3), 265 (HCVR FR4), 266 (LCVR FR1), 267 (LCVR FR2),268 (LCVR FR3), 269 (LCVR FR4) и соответствуют номенклатуре Кэбота. В других вариантах осуществления антигенсвязывающий участок IL-17-антитела по изобретению может происходить из других нечеловеческих видов, включая кролика, крысу или хомяка, но не ограничиваясь ими. Альтернативно, антигенсвязывающий участок может происходить из человеческих видов. Кроме того, "моноклональное антитело", как используется в данной заявке, может быть одноцепочечным Fv-фрагментом, который может быть получен путем связывания ДНК, кодирующей LCVR иHCVR, с линкерной последовательностью (см. Pluckthun, The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, p. 269-315, 1994). Понятно, что вне зависимости от того, указаны ли фрагменты или части, термин "антитело", как используется в данной заявке,включает такие фрагменты или части, а также одноцепочечные формы. До тех пор пока белок сохраняет способность специфического или предпочтительного связывания своей мишени (например, эпитопа или антигена), он относится к термину "антитело". Антитела могут быть гликозилированными, или не быть таковыми, и входят в рамки изобретения. Популяция "моноклональных антител" относится к гомогенной или по существу гомогенной популяции антител (т.е. по крайней мере приблизительно 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96%, более предпочтительно по крайней мере приблизительно 97 или 98% или еще более предпочтительно по крайней мере 99% антител в популяции будут конкурировать в анализе ELISA за тот же антиген или эпитоп, или более предпочтительно антитела являются идентичными в аминокислотной последовательности). Антитела могут быть, а могут и не быть, гликолизированными и все еще подпадать в объем изобретения. Моноклональные антитела могут быть гомогенными, если они имеют идентичную аминокислотную последовательность, хотя они могут отличаться по посттрансляционной модификации, например паттернгликолизации."Вариант" антитела относится в данной заявке к молекуле, аминокислотная последовательность которой отличается от аминокислотной последовательности "родительского" антитела путем добавления,делеции и/или замещения одного или более аминокислотных остатков в последовательности родительского антитела. В предпочтительном из вариантов осуществления вариантное антитело содержит по крайней мере одну аминокислотную (например, от одной до приблизительно десяти и предпочтительно 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8) добавку, делецию и/или замещение в CDR-участках родительского антитела. Идентичность или гомологичность относительно последовательности вариантного антитела определена в данной заявке как процент аминокислотных остатков в последовательности вариантного антитела, идентичный остаткам родительского антитела, после выравнивания последовательностей и введения разрывов, при необходимости, для достижения максимального процента идентичности последовательности. Вариантное антитело сохраняет способность связывать антиген или предпочтительно эпитоп, с которым связывается родительское антитело или предпочтительно имеет по крайней мере одно свойство или биологическую активность, которая превосходит аналогичные свойства родительского антитела. Например,антитело предпочтительно обладает более сильной аффинностью связывания, более медленной скоростью, более низким IC50 или повышенной способностью ингибировать биологическую активность антигена, чем родительское антитело. Вариантное антитело, представляющее особый интерес, в данной заявке является антителом, проявляющим по крайней мере приблизительно 2-кратное, предпочтительно по крайней мере приблизительно 5-кратное, 10-кратное или 20-кратное увеличение биологической активности по сравнению с родительским антителом."Родительское" антитело в данной заявке - это антитело, кодированное аминокислотной последовательностью, которая используется для получения варианта. Родительское антитело может иметь каркасную последовательность мышиного происхождения, но предпочтительно каркасная последовательность имеет полностью или по существу человеческое происхождение. Родительское антитело может быть мышиным, химерным, гуманизированным или человеческим антителом. Термин "специфически связывает", как используется в данной заявке, относится к той ситуации,при которой один участник пары специфического связывания не связывает в значительной степени молекулы, отличные от его партнера (партнеров) по специфическому связыванию. Термин также применим, когда, например, антигенсвязывающий домен антитела по изобретению является специфическим для конкретного эпитопа, который переносится рядом антигенов, в таком случае специфическое антите-6 014298 ло, имеющее антигенсвязывающий домен, будет способно к специфическому связыванию различных антигенов, несущих эпитоп. Соответственно, моноклональное антитело по изобретению специфически связывает IL-17 человека (т.е. IL-17A), в то время как оно специфически не связывает человеческиеIL-17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E, IL-17F. Более того, моноклональное антитело по изобретению специфически связывает IL-17 человека и IL-17 макаки-крабоеда, но специфически не связывает IL-17 крысы илиIL-17 мыши. Далее, моноклональное антитело по изобретению специфически связывает нелинейный или конформационный эпитоп IL-17 человека, содержащий аминокислоты DGNVDYH (SEQ ID NO:276), но не связывает эпитоп IL-17 человека, который не содержит аминокислоты DGNVDYH (SEQ ID NO:276). Термин "предпочтительно связывает", как используется в данной заявке, относится к ситуации, в которой антитело связывает специфический антиген по крайней мере приблизительно на 20% больше,предпочтительно по крайней мере приблизительно на 50% и в 2, 20, 50 или 100 раз больше, чем оно связывает иной антиген в соответствии с измерениями, проведенными по методикам, известным из уровня техники, например конкурентного анализа ELISA или KD измерений при помощи анализов BIACORE или KINEXA. Антитело может предпочтительно связывать один эпитоп в пределах антигена, а не другой эпитоп в пределах того же самого антигена. Соответственно, антитело по изобретению предпочтительно связывает IL-17 человека, а не IL-17 кролика. Термин "эпитоп" относится к той части молекулы, которая способна распознаваться и связываться с антителом в одном или более антигенсвязывающих участках антитела. Эпитопы часто состоят из химически активных поверхностных групп молекул, таких как аминокислоты или сахарные боковые цепи, и обладают специфическими трехмерными структурными характеристиками, а также специфическими зарядовыми характеристиками. Под "ингибирующим эпитопом" и/или "нейтрализующим эпитопом" подразумевается эпитоп, который в контексте интактной антигенной молекулы и при связывании антителом, специфическим к эпитопу, приводит к утрате или к уменьшению биологической активности молекулы или организма, который содержит молекулу, in vivo или in vitro. Термин "эпитоп", как используется в данной заявке, кроме того, относится к части полипептида, которая обладает антигенной и/или иммуногенной активностью у животного, предпочтительно млекопитающего, например мыши или человека. Термин "антигенный эпитоп", как используется в данной заявке,определяется как часть полипептида, с которой может специфически связываться антитело, определенная любым способом, хорошо известным из уровня техники, например при помощи традиционного иммунного анализа. Антигенные эпитопы не обязательно должны быть иммуногенными, но могут также быть имуногенными. "Иммуногенный эпитоп", как используется в данной заявке, определяется как часть полипептида, который вызывает отклик антитела у животного, как устанавливается любым способом,известным из уровня техники. "Нелинейный эпитоп" или "конформационный эпитоп" содержат несмежные полипептиды (или аминокислоты) в пределах антигенного протеина, с которым антитело, специфическое к эпитопу, связывается. Выражения "биологическое свойство" или "биологическая характеристика" или термины "активность" или "биоактивность" по отношению к антителу по изобретению используются в данной заявке как взаимозаменяемые и включают, но не ограничиваются приведенными, эпитоп/антигенную аффинность и специфичность, способность нейтрализовать или быть антагонистом активности IL-17 in vivo или invitro, IC50, стабильность антитела и иммуногенные свойства антитела in vivo. Остальные идентифицируемые из уровня техники биологические свойства или характеристики антитела включают, например,перекрестную реактивность (т.е. с нечеловеческими гомологами пептида-мишени или с остальными протеинами или мишенями, в общем), и способность сохранять высокие уровни экспрессии протеина в клетках млекопитающих. Вышеуказанные свойства или характеристики могут наблюдаться, измеряться или оцениваться с использованием методик, признанных в уровне техники, включая, но не ограничиваясь приведенными, анализ ELISA, конкурентный анализ ELISA, BIACORE или анализ поверхностного плазмонного резонанса KINEXA, анализы нейтрализации in vitro или in vivo без ограничений, рецепторного связывания, продуцирования и/или секреции цитокина или фактора роста, сигнальную трансдукцию и иммуногистохимию срезов тканей, полученных из различных источников, включая человека, примата или любой другой источник. Термин "ингибировать" или "нейтрализовать", как используется в данной заявке, по отношению к активности антитела по изобретению, означает способность в значительной степени противодействовать,препятствовать, предотвращать, ограничивать, замедлять, прерывать, уничтожать, прекращать, уменьшать или обращать, например, развитие или тяжесть того, что ингибируют, включая, но не ограничиваясь вышеприведенными, биологическую активность (например, активность IL-I7) или свойство, заболевание или состояние. Ингибирование или нейтрализация активности IL-17 в результате связывания антитела по изобретению с IL-17 составляет предпочтительно по крайней мере приблизительно 20, 30, 40, 50,60, 70, 80, 90, 95% или выше. Термин "выделенный" при использовании по отношению к нуклеиновой кислоте или протеину (например, антителу) относится к молекуле нуклеиновой кислоты или протеину, которые идентифицируют и отделяют по крайней мере от одного контаминантного вещества, с которым он обычно связан в природном источнике. Предпочтительно "выделенное антитело" является антителом, которое в значитель-7 014298 ной степени свободно от других антител, обладающих отличной антигенной специфичностью (например,фармацевтические композиции по изобретению содержат выделенное антитело, которое специфически связывает IL-17 и, по существу, свободно от антител, которые специфически связывают антигены, отличные от IL-17). Термины "Кэбот-номенклатура" и "Кэбот-маркировка" используются в данной заявке как взаимозаменяемые. Данные термины, признанные в данной области, относятся к системе нумерации аминокислотных остатков, которые являются более вариабельными (т.е. гипервариабельными), чем остальные аминокислотные остатки в вариабельных участках тяжелой и легкой цепи антитела (Kabat et al. Ann. NYDepartment of Health and Human Services, NIH Publication91-3242 (1991. Полинуклеотид является "функционально связанным", если он имеет функциональные связи с другим полинуклеотидом. Например, промотор или энхансер функционально связаны с кодирующей последовательностью, если они влияют на транскрипцию последовательности. Пептид "функционально связан" с другим пептидом, если полинуклеотиды, кодирующие их, связаны функционально, предпочтительно, если они находятся в той же открытой рамке считывания. Термины "индивид", "индивидуум" и "пациент" в данной заявке используются как взаимозаменяемые и относятся к млекопитающему, включая, но не ограничиваясь приведенными, мышей, обезьян, людей, млекопитающих сельскохозяйственных животных, млекопитающих спортивных животных и млекопитающих комнатных животных; предпочтительно термин относится к людям. В определенном из вариантов осуществления индивидуум, предпочтительно млекопитающее, предпочтительно человек, дополнительно характеризуется заболеванием или расстройством, или состоянием, которые могут быть улучшены путем уменьшения биоактивности IL-17. Термин "вектор" включает молекулу нуклеиновой кислоты, способную транспортировать другую нуклеиновую кислоту, с которой она связана, включая плазмиды и вирусные векторы, но не ограничиваясь ими. Определенные векторы способны к автономной репликации в клетке-хозяине, в которую они введены, в то время как остальные векторы могут быть интегрированы в геном клетки-хозяина и, таким образом, реплицированы наряду с геномом-хозяином. Более того, определенные векторы способны направлять экспрессию генов, с которыми они функционально связаны. Такие векторы имеют в данной заявке название "векторы рекомбинантной экспрессии" (или, упрощенно, "векторы экспрессии"), а иллюстративные векторы хорошо известны из уровня техники. Как используется в данной заявке, выражения "клетка", "клетка-хозяин", "линия клеток" и "клеточная культура" используются как взаимозаменяемые и включают индивидуальную клетку или клеточную культуру, являющиеся реципиентом любого выделенного полинуклеотида по изобретению или любого рекомбинантного вектора (любых рекомбинантных векторов), которые содержат последовательность,кодирующую HCVR, LCVR или моноклональное антитело по изобретению. Клетки-хозяева включают потомство индивидуальной клетки-хозяина, и потомство может не обязательно быть полностью идентичным (по морфологии или полному ДНК комплементу) оригинальной родительской клетке из-за природных, случайных или преднамеренных мутаций и/или изменений. Клетка-хозяин включает клетки,трансформированные, трансдуцированные или инфицированные рекомбинантным вектором, или моноклональное антитело, которое экспрессирует полинуклеотид по изобретению или его легкую или тяжелую цепь. Клетка-хозяин, которая содержит рекомбинантный вектор по изобретению (как стабильно включенный в хромосом-хозяин, так и не включенный), также может называться "рекомбинантной клеткой-хозяином". Предпочтительными клетками-хозяевами для использования в изобретении являютсяCHO клетки (например, АТСС CRL-9096), NS0 клетки, SP2/0 клетки, COS клетки (АТСС, например,CRL-1650, CRL-1651) и HeLa (АТСС CCL-2). Дополнительные клетки-хозяева для использования в изобретении включают растительные клетки, дрожжевые клетки, другие клетки млекопитающих и прокариотные клетки. Характеристика антител Настоящее изобретение относится к выделенным, моноклональным антителам, которые специфически связываются с IL-17 человека (т.е. IL-17A) с высокой аффинностью. Антитела по изобретению представляют собой предпочтительно химерные, гуманизированные или человеческие антитела или их антигенсвязывающие части. К тому же, антитела по изобретению нейтрализуют или противодействуют по крайней мере одной биологической активности IL-17 in vivo и/или in vitro. Специфическое связывание анти-IL-17 моноклонального антитела по изобретению (включая его антигенсвязывающие части) с IL-17 позволяет использовать указанное антитело как терапевтический агент для IL-17-ассоциированных заболеваний и расстройств, т.е. состояний, заболеваний или расстройств, которые могут быть улучшены путем ингибирования биологической активности IL-17. Антигенный эпитоп IL-17, с которым антитела по изобретению связываются, является нелинейным эпитопом, который содержит аминокислоты ADGNVDYHMN (SEQ ID NO:275), более предпочтительно аминокислоты DGNVDYH (SEQ ID NO:276) IL-17 человека. Антитела, которые связывают указанный эпитоп, специфически или предпочтительнее связывают IL-17 человека и IL-17 макаки-крабоеда по сравнению с их связыванием с IL-17 мыши или IL-17 крысы. Моноклональные антитела по изобретению-8 014298 связывают IL-17 человека по крайней мере в 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или 100 раз больше (например, большая аффинность или большая специфичность), чем с которой оно связывает IL-17 мыши или IL-17 крысы; более предпочтительно по крайней мере в 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550 или 600 раз больше, чем с которой оно связывает IL-17 мыши или IL-17 крысы, еще более предпочтительно он не связывает IL-17 мыши или IL-17 крысы при уровнях, превосходящих фоновые уровни, как определено, например, с помощью ELISA анализа, или конкурентного ELISA анализа, или значений KD вBIACORE или KINEXA анализе. В преимущественном из вариантов осуществления изобретение относится к анти-IL-17 моноклональному антителу, которое обладает сильным сродством к связыванию IL-17 человека, т.е. связываетIL-17 человека или его часть, содержащую DGNVDYH (SEQ ID NO:276) [т.е. антитело связываетDGNVDYH (SEQ ID NO:276)-полипептид], с аффинностью связывания (KD) для IL-17 человека менее чем приблизительно 7, 6,5 или 6 пМ, предпочтительно менее чем приблизительно 5,5, 5 или 4,5 пМ и более предпочтительно менее чем приблизительно 4 пМ. Альтернативно, антитела по изобретению характеризуются KD для IL-17 человека не больше чем приблизительно 7, 6,5 или 6 пМ, предпочтительно не больше чем приблизительно 5,5, 5 или 4,5 пМ и более предпочтительно не больше чем приблизительно 4 пМ. Аффинности антител могут быть определены так, как описано в примерах, приведенных ниже в тексте данной заявки, или с использованием любого пригодного способа, доступного из уровня техники. Предпочтительно анти-IL-17-антитела по изобретению, которые обладают сильным сродством к связыванию, как описано выше, также связывают нелинейный эпитоп IL-17 человека, который содержит аминокислоты ADGNVDYHMN (SEQ ID NO:275), более предпочтительно аминокислоты DGNVDYH (SEQID NO:276), где антитело осуществляет связывание с полипептидом DGNVDYH (SEQ ID NO:276). В одном из вариантов осуществления антитела по изобретению обладают коэффициентом выведения (koff) для IL-17 человека менее чем 510-5, 410-5, 310-5 или 210-5 с-1. В предпочтительном осуществлении антитела по изобретению, характеризующиеся наличием сильного сродства к связыванию IL-17 человека, как описано выше (KD менее чем приблизительно 7 или 6 пМ, предпочтительно менее чем приблизительно 5 или 4,5 пМ и более предпочтительно менее чем приблизительно 4 пМ), также имеют коэффициент выведения (koff) для IL-17 человека менее чем 510-5, 410-5, 310-5 или 210-5 с-1 и еще более предпочтительно также связывают нелинейный эпитоп IL-17 человека, который содержит аминокислотыADGNVDYHMN (SEQ ID NO:275), более предпочтительно аминокислоты DGNVDYH (SEQ ID NO:276)IL-17 человека. В другом из вариантов осуществления антитела по изобретению имеют IC50 менее чем 1 нМ, 900,800, 700, 650, 600, 560, 550 или 500 пМ в, например, анализе IL-8-репортер in vitro или менее чем приблизительно 560 пМ в анализе GRO-репортер (см. пример 6). В предпочтительном осуществлении антитела по изобретению характеризуются обладанием сильного сродства к связыванию IL-17 человека,как описано выше (KD менее чем приблизительно 7 или 6 пМ, предпочтительно менее чем приблизительно 5 или 4,5 пМ и более предпочтительно менее чем приблизительно 4 пМ) и также имеют значениеIC50, составляющее менее чем 1 нМ, 900, 800, 700, 650, 600, 560, 550 или 500 пМ в, например, анализеIL-8-репортер in vitro или менее чем приблизительно 560 пМ в анализе GRO-репортер и еще более предпочтительно также имеют коэффициент выведения (koff) для IL-17 человека менее чем 510-5, 410-5,310-5 или 210-5 с-1, и еще более предпочтительно также связывают нелинейный эпитоп IL-17 человека,который содержит аминокислоты DGNVDYH (SEQ ID NO:276) IL-17 человека, где антитело связывает полипептид DGNVDYH (SEQ ID NO:276). Более предпочтительным из вариантов осуществления по изобретению является анти-IL-17-антитело, содержащее аминокислотную последовательность легкой цепи, состоящую из SEQ ID NO:279, и аминокислотную последовательность тяжелой цепи, состоящую из SEQ ID NO:280. Предпочтительно это антитело содержит две идентичные легкие цепи и две идентичные тяжелые цепи. Предпочтительно легкая цепь с аминокислотной последовательностью, как показано в SEQ ID NO:279, закодирована нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, показанную в SEQ ID NO:281 (включая сигнальную последовательность) или SEQ ID NO:283 (без сигнальной последовательности). Предпочтительно тяжелая цепь с аминокислотной последовательностью, как показано в SEQ ID NO:280, закодирована нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, показанную в SEQ ID NO:282 (включая сигнальную последовательность) или SEQ ID NO:284 (без сигнальной последовательности). Моноклональные антитела ("mAb") могут быть получены с использованием гибридомного способа,хорошо известного из уровня техники (см., например, Kohler et al. Nature, 256:495, 1975) или могут быть получены при помощи рекомбинантных ДНК способов (например, как в патенте США 4816567). В общем, гибридому можно получить путем слияния подходящих иммортальных клеточных линий (например, миеломной линии клеток, таких как SP2/0) с клетками, продуцирующими антитела иммунизированного животного. Клетки, продуцирующие антитела, предпочтительно клетки селезенки или лимфатических узлов, получают от животных, иммунизированных представляющим интерес антигеном. Слитые клетки (гибридомы) могут быть выделены с использованием селективных условий культивирования и клонированы путем серийных разведений. Культуральную среду, в которой выращивают гибридомные-9 014298 клетки, оценивают на предмет продуцирования моноклональных антител, направленных против антигена. Предпочтительно специфичность связывания mAb, редуцированных гибридомными клетками, оценивают путем иммунного осаждения или анализа связывания in vitro, такого как радиоиммунный анализ или ELISA. Клетки, которые продуцируют антитела с желаемыми связующими свойствами, могут быть отобраны при помощи подходящего скринингового анализа. Способы такой изоляции и скрининга хорошо известны из уровня техники. Могут быть использованы другие подходящие способы продуцирования или выделения антител согласно изобретению, включая человеческие или искусственные антитела, включая, например, способы,которые отбирают рекомбинантное антитело (например, одноцепочечный Fv или Fab) из библиотеки,или которые зависят от иммунизации трансгенных животных (например, мышей), способных продуцировать набор человеческих антител (см., например, Jakobovits et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:25512555, 1993; Jakobovits et al. Nature, 362:255-258, 1993; патент США 5545806, 5545807). Одноцепочечные антитела и химерные, гуманизированные или приматизированные (CDR-привитые) антитела, а также химерные или CDR-привитые одноцепочечные антитела и подобные им антитела,содержащие полученные из различных источников части, также охватываются данным изобретением и термином "антитело". Различные части этих антител могут быть соединены вместе химически при помощи традиционных методик, синтетически или могут быть получены как родственный протеин с использованием методов генной инженерии. Например, нуклеиновые кислоты, которые кодируют химерную или гуманизированную цепь, могут быть экспрессированы для продуцирования родственного протеина. См., например, патент США 4816567; европейский патент 125023 В 1; патент США 4816397; европейский патент 120694 B1; WO 86/01533; европейский патент 194276 В 1; патент США 5225539; европейский патент 239400 В 1 и патенты США 5585089 и 5698762. Дополнительно функциональные части антител (т.е. антигенсвязывающие фрагменты), включая антигенсвязывающую часть химерных, гуманизированных, приматизированных или одноцепочечных антител, могут также быть получены и попадать в объем изобретения. Преимущественные функциональные части сохраняют антигенсвязывающую функцию соответствующего полноразмерного антитела. Особенно предпочтительные функциональные фрагменты сохраняют способность к ингибированию одной или более функций или биологических активностей, характерных для зрелого IL-17 млекопитающих,предпочтительно IL-17 человека, таких как активность связывания, сигнальная активность и/или стимулирование клеточного отклика. Например, в одном из вариантов осуществления функциональный фрагмент может ингибировать взаимодействие зрелого IL-17 с его рецептором и/или может ингибировать одну или более опосредованных рецептором функций. Части антитела, способные к связыванию IL-17 человека, включают, но не ограничиваются приведенными, фрагменты Fv, Fab, Fab' и F(ab')2 и охватываются изобретением. Такие фрагменты могут быть получены путем ферментного расщепления или при помощи рекомбинантных методик. Например, расщепление папаином или пепсином может привести к образованию Fab или F(ab')2 фрагментов соответственно. Папаиновая ферментация антител приводит к образованию двух идентичных антигенсвязывающих фрагментов, названных "Fab-фрагментами, каждый с природным антигенсвязывающим сайтом.Fab-фрагмент также содержит константный домен легкой цепи и первый константный домен (СН 1) тяжелой цепи. Результатом пепсиновой обработки является F(ab')2-фрагмент, который имеет два антигенсвязывающих сайта и является все еще способным к перекрестному связыванию антигена. Наименьшим антигенсвязывающим фрагментом является "Fv", который содержит полный антигенраспознающий и антигенсвязывающий сайт. Этот участок состоит из димера одного вариабельного домена тяжелой и одного вариабельного домена легкой цепей в плотном, но нековалентном, соединении. Он находится в такой конфигурации, что три CDR каждого вариабельного домена взаимодействуют,чтобы определить антигенсвязывающий сайт на поверхности VH-VL-димера. Вместе шесть CDR предоставляют антителу антигенсвязывающую специфичность. Для преодоления тенденции нековалентно связанных доменов HCVR и LCVR в Fv диссоциировать при совместной экспрессии в клетке-хозяине может быть сконструирован так называемый одноцепочечный (sc) Fv фрагмент (scFv), в котором присутствуют гибкие и соразмерно длинные полипептидные связи С-концевого HCVR с N-концевого LCVR или С-концевого LCVR с N-концевым HCVR. Наиболее часто используемым линкером является состоящий из 15-остатков (Gly4Ser)3-пептид. Для обзора sFv см. Pluckthun в The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg и Moore eds., Springer-Verlag, New York, p. 269-315 (1994). Антитела также могут быть получены в различных усеченных формах с использованием генов антител, в которых один или более стоп-кодонов были введены над природным стоп-сайтом. Например, может быть разработан химерный ген, кодирующий F(ab')2 часть тяжелой цепи, для включения ДНК последовательностей, кодирующих домен CH1 и шарнирный участок тяжелой цепи. Было доказано, что отбор фрагментов антител из библиотек при помощи технологий обогащения,таких как фаговый дисплей (Matthews D.J. and Wells J.A. Science, 260:1113-7, 1993), рибосомный дисплейJournal of Biotechnology, 96:129-54, 2002) или дрожжевой дисплей (Kieke M.C. et al. Protein Engineering,10:1303-10, 1997) представляют собой успешные альтернативы классической гибридомной технологии(последние обзоры: Little M. et al. Immunology Today, 21:364-70, 2000). Варианты антител Моноклональное антитело мыши или антитело человека (полученное, например, у трансгенных мышей), выведенное против IL-17, может быть родительским антителом. Родительское антитело может быть дополнительно изменено для создания химерной или гуманизированной формы антитела с использованием способов, хорошо известных из уровня техники, например ПЦР мутагенеза. Такие химерные,гуманизированные или иным способом измененные антитела могут служить родительскими антителами для дополнительных вариаций или мутагенеза. Родительские антитела по изобретению могут быть дополнительно мутированы, например, в пределах CDR домена (доменов) (см., например, табл. 2 и 3) для создания вариантного антитела с оптимизированными свойствами, представляющими интерес, например аффинность связывания (низкий KD), IC50, специфичность, предпочтительность связывания и т.д. Предпочтительно свойства, представляющие интерес в вариантном антителе, являются усовершенствованными по сравнению с такими же свойствами в родительском антителе. Вариант антитела с аминокислотными замещениями является предпочтительным и имеет по крайней мере 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 аминокислотных остатков, удаленных из молекулы родительского антитела, и другой остаток вставлен на их место. Сайты наибольшего интереса для заместительного мутагенеза включают CDR участки, но FR изменения также охватываются. Предпочтительными являются консервативные аминокислотные замещения, хотя для более существенных изменений могут быть введены неконсервативные аминокислотные замещения, а полученные антитела, представляющие интерес, подвергнуты скринингу. Подходящим для получения заместительных вариантов родительского антитела способом является созревание аффинности с использованием фагового дисплея. Кратко, молекула полинуклеотида, кодирующая родительское антитело, мутирует один или несколько сайтов CDR участка для создания всех возможных аминокислотных замещений в каждом сайте. Варианты антител, создающиеся таким образом, проявляются в моновалентном виде из волокнистых фаговых частиц как слияния с генным III продуктом М 13, упакованным в каждой частице. Варианты фагового дисплея антител затем подвергают скринингу на предмет их биологической активности (например, связующей активности, специфичности,IC50). Для идентификации сайтов CDR участка, потенциальных для модификации, могут быть получены аланиновые сканирования мутагенов для идентификации остатков CDR участков, которые вносят значительный вклад в связывание антигенов. Альтернативно или дополнительно, эффективным может быть анализ кристаллической структуры комплекса антиген-антитело для идентификации мест контакта антитела и IL-17. Такие контактные остатки и соседние остатки являются кандидатами для замещения в соответствии с методиками, разработанными в данной заявке или известными из уровня техники. Альтернативно или дополнительно, может быть получен неспецифический мутагенез или точечный мутагенез одной или более молекул нуклеотида, кодирующего по крайней мере один CDR. Может быть получен мутагенез одной или более CDR последовательностей в одном или более положениях остатков, когда CDR функционально связан с вариабельным участком или когда CDR не связан с другой последовательностью вариабельного участка, и затем измененный CDR возвращают в вариабельный участок с использованием рекомбинантной ДНК технологии. После того как были получены такие вариантные антитела, набор вариантов подвергают скринингу, как описано в данной заявке, а антитела с лучшими свойствами в одном или более релевантных анализов могут быть отобраны для дальнейшей разработки. Любые цистеиновые остатки, не задействованные для поддержания надлежащей конформации анти-IL-17-антитела по изобретению, могут быть замещены в основном серином для улучшения стойкости молекулы к окислению и предотвращения аберратного перекрестного связывания. Наоборот, к антителу может быть добавлена цистеиновая связь (цистеиновые связи) для улучшения его стабильности (в особенности, если антителом является фрагмент антитела, такой как Fv фрагмент). Другой тип аминокислотного варианта антитела изменяет оригинальный паттерн гликолизации антитела. Под изменением подразумевается делеция одной или более углеводной группы, обнаруженной в антителе, и/или добавление одного или более сайтов гликолизации, которые отсутствуют в родительском антителе. Обычно гликолизация антител является N-связанной или О-связанной. N-связанная гликолизация относится к присоединению углеводной группы к боковой цепи аспарагинового остатка. Трипептидные последовательности аспарагин-Х-серин и аспарагин-Х-треонин, где X - любая аминокислота, за исключением пролина, являются последовательностями распознавания ферментного присоединения углеводной группы к аспарагиновой боковой цепи. Поэтому присутствие любой из этих трипептидных последовательностей в полипептиде создает потенциальный сайт гликолизации. О-связанная гликолизация относится к присоединению одного из сахаров N-ацеилгалактозамина, галактозы или ксилозы к гидроксиламиновой кислоте, наиболее часто - к серину или треонину, хотя также может быть использован 5-гидроксипролин или 5-гидроксилизин. Добавление сайтов гликолизации к антителу легко сопровождается замещением аминокислотной последовательности таким образом, что она содержит одну или более из вышеуказанных трипептидных последовательностей (для N-связанных сайтов гликолизации). Изменение может также быть получено путем добавления или замещения одного или более сериновых или треониновых остатков последова- 11014298 тельности оригинального антитела (для О-связанных сайтов гликолизации). Последовательность Предпочтительное моноклональное антитело по изобретению содержит LCVR, содержащий пептид с последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:178-243 и/или HCVR, содержащий пептид с последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:56-121. В предпочтительном осуществлении антитело по изобретению содержит LCVR, содержащий пептид с последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:178-243 и, кроме того, содержит HCVR,содержащий пептид с последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:56-121, гдеHCVR и LCVR, присутствующие в антителе по изобретению, вместе существуют в Fab, приведенном в табл. 1. Например, антитело по изобретению, содержащее LCVR-полипептид с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:178, предпочтительно дополнительно содержит HCVR-полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:56, 60,68-93 и 95. К тому же антитело по изобретению, содержащее LCVR-полипептид с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:241, предпочтительно дополнительно содержит HCVR-полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:118 и 106. Специалист в данной области техники примет во внимание то, что антитела по изобретению не ограничиваются специфичными последовательностями HCVR и LCVR, приведенными в табл. 1 данной заявки, но также включают варианты этих последовательностей, которые, когда присутствуют в анти-IL17-антителе по изобретению, сохраняют или улучшают антигенсвязывающую способность и по крайней мере одно другое функциональное свойство родительского антитела, например эпитопную специфичность и способность конкурировать с родительским антителом за связывание IL-17, значения IC50 и/илиKD или koff для связывания IL-17 человека. К тому же моноклональное антитело по изобретению является антителом, которое конкурентно ингибировано от связывания IL-17 человека (или его части, содержащей DGNVDYH (SEQ ID NO:276 конкурентным моноклональным антителом, где конкурентное моноклональное антитело содержит два полипептида с аминокислотными последовательностями, показанными в SEQ ID NO:241 (LCVR) и 118(HCVR). Такое конкурентное ингибирование между антителами может быть измерено известными из уровня техники методами, например конкурентным ELISA анализом. Предпочтительно антитело по изобретению, которое конкурирует с конкурентным антителом, определенным выше, дополнительно характеризуется специфическим связыванием IL-17 человека, но не связыванием IL-17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E или IL-17F человека. Дополнительно антитело к тому же характеризуется специфическим связыванием IL-17 человека и IL-17 макаки-крабоеда, но не связыванием IL-17 крысы или IL-17 мыши при уровнях, больших фона. Более предпочтительно антитело по изобретению, которое конкурирует за связывание IL-17 человека с конкурентным антителом, содержащим аминокислотные последовательности, показанные в SEQID NO:241 и 118, дополнительно характеризуется связыванием нелинейного эпитопа IL-17 человека, содержащего аминокислоты DGNVDYH (SEQ ID NO:276). Еще более предпочтительно антитело по изобретению, которое конкурирует за связывание IL-17 человека с конкурентным антителом, содержащим аминокислотные последовательности, показанные в SEQ ID NO:241 и 118, дополнительно характеризуется наличием KD для IL-17 человека менее чем приблизительно 7, 6,5 или 6 пМ, предпочтительно менее чем приблизительно 5,5, 5 или 4,5 пМ и более предпочтительно менее чем приблизительно 4 пМ и/или характеризуется значением IC50 предпочтительно в анализе IL-8-репортер in vitro, которое составляет менее чем 700, 650, 600, 560, 550 или 500 пМ, или значением IC50 в анализе GRO-репортер in vitro менее чем приблизительно 560 пМ и/или имеет коэффициент выведения (koff) для IL-17 человека менее чем 510-5, 410-5, 310-5 или 210-5 с-1. В одном осуществлении анти-IL-17-антитело по изобретению имеет вариабельный участок тяжелой цепи и вариабельный участок легкой цепи, где вариабельный участок тяжелой цепи содержит(SEQ ID NO:245) и CDRH3 (SEQ ID NO:246); и/или где вариабельный участок легкой цепи содержитID NO:248) и CDRL3 (SEQ ID NO:249). Предпочтительно шесть CDR антитела по изобретению существуют вместе, как в Fab, приведенном в табл. 1 данной заявки. Еще более предпочтительно CDR-участки тяжелой цепи находятся в контексте таких каркасных последовательностей: FR1 с SEQ ID NO:262, FR2 сSEQ ID NO:263, FR3 с SEQ ID NO:264 и FR4 с SEQ ID NO:265 и CDR-участки легкой цепи находятся в контексте таких каркасных последовательностей: FR1 с SEQ ID NO:266, FR2 с SEQ ID NO:267, FR3 сSEQ ID NO:268 и FR4 с SEQ ID NO:269, где порядок расположения от аминоконца является таким:FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4. Кроме того, предполагают, что анти-IL-17-антитело по изобретению содержит HCVR, содержащийSEQ ID NO:33-55 и 261. В другом из вариантов осуществления анти-IL-17-антитело по изобретению содержит LCVR, содержащий CDRL1, который содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:122-149, и/или CDRL2, который содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:150-167, и/или CDRL3, который содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:168-177. В предпочтительном осуществлении анти-IL-17 антитело по изобретению содержит HCVR, содержащий CDRH1, который содержит последовательность,выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:11-28, и/или CDRH2, который содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:29-32, и/или CDRH3, который содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:33-55 и 261, и дополнительно содержитLCVR, содержащий CDRL1, который содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:122-149, и/или CDRL2, который содержит последовательность, выбранную из группы,состоящей из SEQ ID NO:150-167, и/или CDRL3, который содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:168-177. Композиция, содержащая CDR по изобретению, в основном будет последовательностью тяжелой или легкой цепи антитела или существенной их частью, в которой CDR расположен в местоположении в соответствии с Кэбот-нумерацией. Три CDR-участка для каждой цепи, тяжелой и легкой, обеспечены в каркасном участке как смежная последовательность, представленная следующей формулой: FR1-CDR1FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4. FR1, FR2, FR3 и FR4 тяжелой цепи или легкой цепи объединены для формирования полного каркасного участка антитела при расположении в качестве смежной последовательности с CDR в указанном порядке. Предпочтительно каркасные участки антитела по изобретению имеют человеческое происхождение или по существу человеческое происхождение (т.е. больше чем приблизительно 80, 82, 85, 87, 90, 92, 95, 97%). В гуманизированном антителе, предназначенном для терапевтического использования у людей,каркасная последовательность предпочтительно имеет полностью или по существу человеческое происхождение. Предпочтительно каркасный участок легкой цепи гуманизированного, человеческого или химерного антитела по изобретению содержит FR1 с SEQ ID NO:266, FR2 с SEQ ID NO:267, FR3 с SEQ IDNO:268 и FR4 с SEQ ID NO:269. Предпочтительно каркасный участок тяжелой цепи гуманизированного,человеческого или химерного антитела по изобретению содержит FR1 с SEQ ID NO:262, FR2 с SEQ IDNO:263, FR3 с SEQ ID NO:264 и FR4 с SEQ ID NO:265. Например, предпочтительный вариант осуществления LCVR антитела 126 по изобретению, как описано в табл. 1, 2 и 3 данной заявки, содержит (полипептиды расположены от N-конца) FR1 с SEQ ID NO:266, CDR1 с SEQ ID NO:131, FR2 с SEQ ID NO:267,CDR2 с SEQ ID NO:167, FR3 с SEQ ID NO:268, CDR3 с SEQ ID NO:168 и FR4 с SEQ ID NO:269. ПолнаяLCVR-последовательность, функционально связанная с человеческим каппа константным участком, является такой, как показано в SEQ ID NO:274. Кроме того, предпочтительный вариант осуществленияHCVR антитела 126 по изобретению содержит (порядок расположения от N-конца) FR1 с SEQ IDNO:262, CDR1 с SEQ ID NO:26, FR2 с SEQ ID NO:262, CDR2 с SEQ ID NO:30, FR3 с SEQ ID NO:264,CDR3 с SEQ ID NO:52 и FR4 с SEQ ID NO:265. Полная HCVR-последовательность, функционально связанная с Fc-участком IgG4 человека, является такой, как показано в SEQ ID NO:273. В одном осуществлении анти-IL-17-антитело по изобретению, где весь или часть вариабельного участка ограничена конкретной последовательностью, как показано SEQ ID NO: данной заявки (см., например, табл. 1-3), кроме того, характеризуется тем, что является химерным, гуманизированным или полностью человеческим антителом или его антигенсвязывающей частью, которое противодействует или нейтрализует по крайней мере одну активность IL-17 человека in vivo или in vitro. IL-17-антитело по изобретению, где весь или часть вариабельного участка ограничена конкретной последовательностью, как показано SEQ ID NO: данной заявки, кроме того, характеризуется специфическим связыванием IL-17 человека, но не связыванием IL-17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E или IL-17F человека. Дополнительно антитело, кроме того, характеризуется специфическим связыванием IL-17 человека и IL-17 макаки-крабоеда,но не связыванием IL-17 крысы или IL-17 мыши при уровнях, превышающих фон. Более предпочтительно такое антитело дополнительно характеризуется связыванием нелинейного эпитопа IL-17 человека, содержащего аминокислоты DGNVDYH (SEQ ID NO:276), где антитело осуществляет контакт с полипептидом с SEQ ID NO:276. Еще более предпочтительно такое антитело характеризуется наличием KD для IL-17 человека менее чем приблизительно 7, 6,5 или 6 пМ, предпочтительно менее чем приблизительно 5,5, 5 или 4,5 пМ и более предпочтительно менее чем приблизительно 4 пМ и/или характеризуется значением IC50 предпочтительно в анализе IL-8-репортер in vitro, которое составляет менее чем 700, 650, 600, 560, 550 или 500 пМ, или значением IC50 в анализе GRO-репортер in vitro,составляющем менее чем приблизительно 560 пМ, и/или имеет коэффициент выведения (koff) для IL-17 человека менее чем 510-5, 410-5, 310-5 или 210-5 с-1. Экспрессия антител Настоящее изобретение также направлено на линии клеток, которые экспрессируют анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению или его часть. Создание и выделение клеточных линий, продуцирующих моноклональное антитело по изобретению, могут быть выполнены с использованием стан- 13014298 дартных методик, известных из уровня техники. Предпочтительные клеточные линии включают COS,CHO, SP2/0, NS0 и дрожжи (имеющиеся в наличии в таких общественных депозитариях, как АТСС,American Type Culture Collection, Manassas, VA). Может быть использован широкий выбор систем хозяев для экспрессии антитела по изобретению,включая прокариотные (бактериальные) и эукариотные системы экспрессии (такие как дрожжи, бакуловирус, растительные клетки, клетки млекопитающих и клетки других животных, трансгенные животные и гибридомные клетки), а также системы экспрессии фагового дисплея. Примером подходящего бактериального вектора экспрессии является pUC119, а подходящим эукариотным вектором экспрессии - модифицированный pcDNA3.1 вектор с ослабленной системой отбора dhfr. Остальные системы экспрессии антитела также известны из уровня техники и описаны в данной заявке. Антитело по изобретению может быть получено способом рекомбинантной экспрессии генов легкой и тяжелой цепи иммуноглобулина в клетке-хозяине. Для рекомбинантной экспрессии антитела клетку-хозяина трансформируют, трансдуцируют, инфицируют и т.п. с одним или более рекомбинантными векторами экспрессии, носителями ДНК фрагментов, кодирующими легкие и/или тяжелые цепи иммуноглобулина антитела таким образом, чтобы такие легкие и/или тяжелые цепи экспрессировались в клетке-хозяине. Тяжелая цепь и легкая цепь могут быть экспрессированы независимо от различных промоторов, с которыми они функционально связаны в одном векторе, или, альтернативно, тяжелая цепь и легкая цепь могут экспрессироваться независимо от различных промоторов, с которыми они функционально связаны в двух векторах, - один из них экспрессирует тяжелую цепь, а второй - легкую. Необязательно тяжелая цепь и легкая цепь могут экспрессироваться в различных клетках-хозяевах. Предпочтительно рекомбинантные антитела выделяются в среду, в которой культивируют клетки-хозяева, из которой антитела могут быть выделены или очищены. Стандартные рекомбинантные ДНК методологии используют для получения генов легкой и тяжелой цепи антитела, для включения этих генов в векторы рекомбинантной экспрессии и для введения векторов в клетки-хозяева. Такие стандартные рекомбинантные ДНК технологии описаны, например, в Sambrook, Fritsch, and Maniatis (Eds.), Molecular Cloning; A LabiliatiliuBiology, Greene Publishing Associates, 1989. Выделенная ДНК, кодирующая HCVR участок, может быть конвертирована в ген полноразмерной тяжелой цепи путем функционального связывания ДНК, кодирующей HCVR, с другой молекулой ДНК,кодирующей константные участки тяжелой цепи (CH1, CH2 и СН 3). Последовательности генов константного участка человеческой тяжелой цепи известны из уровня техники. См., например, Kabat et al.Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services,NIH Publication91-3242 (1991). ДНК-фрагменты, которые охватывают эти участки, могут быть получены, например, путем стандартной ПЦР-амплификации. Константный участок тяжелой цепи может быть константным участком любого типа (например, IgG, IgA, IgE, IgM или IgD), класса (например, IgG1,IgG2, IgG3 и IgG4) или подкласса и любые аллотипные его варианты, как описано у Kabat (выше). Альтернативно, антигенсвязывающая часть может быть Fab-фрагментом, Fab'-фрагментом, F(ab')2-фрагментом, Fd или одноцепочечным Fv-фрагментом (scFv). Для гена тяжелой цепи Fab-фрагмента ДНК, кодирующая HCVR, может быть функционально связана с другой молекулой ДНК, кодирующей только константный участок тяжелой цепи СН 1. Выделенная ДНК, кодирующая LCVR участок, может быть конвертирована в ген полноразмерной легкой цепи (а также в ген Fab легкой цепи) путем функционального связывания ДНК, кодирующейLCVR, с другой молекулой ДНК, кодирующей константный участок легкой цепи, CL. Последовательности генов константного участка человеческой легкой цепи известны из уровня техники. См., например,Kabat, выше. ДНК фрагменты, охватывающие эти участки, могут быть получены при помощи стандартной ПЦР-амплификации. Константный участок легкой цепи может быть константным участком каппа или лямбда. Для создания scFv гена фрагменты ДНК, кодирующие HCVR и LCVR, функционально связаны с другим фрагментом, кодирующим гибкий линкер, например кодирующим аминокислотную последовательность (Gly4-Ser)3 таким образом, чтобы последовательности HCVR и LCVR могли экспрессироваться как смежный одноцепочечный протеин, где LCVR и HCVR участки соединены гибким линкером. См.,Bird et al. Science, 242:423-6, 1988; Huston et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85:5879-83, 1988; McCafferty etal. Nature, 348:552-4, 1990. В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к вектору, предпочтительно (но не ограничиваясь) к плазмиде, рекомбинантному вектору экспрессии, вектору экспрессии дрожжей или вектору экспрессии ретровируса, содержащему полинуклеотид, кодирующий моноклональное анти-IL-17 антитело по изобретению. Альтернативно, вектор по изобретению содержит полинуклеотид,кодирующий LCVR, и/или полинуклеотид, кодирующий HCVR по изобретению. Если обе последовательности, кодирующие LCVR и HCVR, находятся на одном векторе, то указанные последовательности могут транскрибироваться независимо, каждый с отдельного промотора, с которым он функционально связан. Если последовательности, кодирующие LCVR и HCVR, находятся на одном векторе и транскрибируются с одного промотора, с которым каждый из них функционально связан, то LCVR может распо- 14014298 лагаться в 5' направлении от HCVR или LCVR может располагаться в 3' направлении от HCVR, кроме того, области, кодирующие LCVR и HCVR, могут быть разделены в векторе последовательностью линкера любого размера и содержания предпочтительно таким линкером, если таковой присутствует, который представляет собой полинуклеотид, кодирующий внутренний сайт входа рибосомы. Для экспрессии антитела по изобретению ДНК, кодирующую частичную или полноразмерную легкую и/или тяжелую цепь, полученную, как описано выше, вводят в вектор экспрессии таким образом,чтобы ген был функционально связан с транскрипционными и трансляционными контрольными последовательностями. Были отобраны вектор экспрессии и контрольные последовательности экспрессии,совместимые с используемой экспрессионной клеткой-хозяином. Ген легкой цепи антитела и ген тяжелой цепи антитела могут быть введены в индивидуальные векторы или, более типично, оба гена вводят в тот же самый вектор экспрессии. Гены антитела вводят в вектор экспрессии при помощи стандартных способов. Дополнительно вектор рекомбинантной экспрессии может кодировать сигнальный пептид,который содействует секреции легкой и/или тяжелой цепи анти-IL-17 моноклонального антитела из клетки-хозяина. Ген легкой и/или тяжелой цепи анти-IL-17 моноклонального антитела может быть клонирован в вектор таким образом, что сигнальный пептид является функционально связанным в каркасе к аминоконцу гена цепи антитела. Сигнальный пептид может быть сигнальным пептидом иммуноглобулина или гетерологичным сигнальным пептидом. В дополнение к гену (генам) тяжелой и/или легкой цепи антитела рекомбинантный экспрессионный вектор по изобретению несет регуляторные последовательности, которые контролируют экспрессию гена(генов) цепи антитела в клетке-хозяине. Термин "регуляторная последовательность" предназначен для включения промоторов, энхансеров и других элементов контроля экспрессии (например, сигналы полиаденилирования), при необходимости, которые контролируют транскрипцию либо трансляцию гена (генов) цепи антигена. Конструкция вектора экспрессии, включая выбор регуляторных последовательностей, может зависеть от таких факторов, как выбор клетки-хозяина, которая подлежит трансформации,уровень экспрессии желаемого протеина. Предпочтительные регуляторные последовательности для экспрессии клеток-хозяев млекопитающих включают вирусные элементы, которые направляют высокие уровни экспрессии протеинов в клетках млекопитающих, такие как промоторы и/или энхансеры, полученные из цитомегаловируса (CMV), вируса обезьяны 40 (SV40), аденовируса, (например, основного позднего промотора аденовируса (AdMLP и вируса полиомы. Кроме генов тяжелой и/или легкой цепей антитела и регуляторных последовательностей, рекомбинантные экспрессионные векторы по изобретению могут включать дополнительные последовательности,такие как последовательности, регулирующие репликацию вектора в клетке-хозяине (например, начала репликации) и один или более выбираемых маркерных генов. Выбираемые маркерные гены содействуют отбору клеток-хозяев, в которые был введен вектор. Например, типично, выбираемые маркерные гены придают резистентность к лекарствам, таким как G418, гигромицин или метотрексат, в клетке-хозяине, в которую был введен вектор. Преимущественные выбираемые маркерные гены включают ген дигидрофолатредуктазы (dhfr) (для использования в dhfr-минус клетках-хозяевах с отбором/амплификацией метотрексата), ген neo (для отбора G418) и глутаминсинтетазу (GS) в GS-негативной клеточной линии (такой как NS0) для отбора/амплификации. Для экспрессии легкой и/или тяжелой цепей вектор (векторы) экспрессии, кодирующий (кодирующие) тяжелые и/или легкие цепи, вводят в клетку-хозяина при помощи стандартных технологий, например электропорации, осаждения фосфатом кальция, DEAE-декстран трансфекции, трансдукции, инфекции и т.п. Хотя теоретически возможна экспрессия антитела по изобретению как в прокариотных, так и в эукариотных клетках-хозяевах, предпочтительными являются эукариотные клетки и наиболее предпочтительными - клетки-хозяева млекопитающих, поскольку такие клетки, наиболее вероятно, собирают и выделяют надлежащим образом свернутое и иммунологически активное антитело. Преимущественные клетки-хозяева млекопитающих для экспрессии рекомбинантного антитела по изобретению включают яичники китайского хомячка (клетки СНО) (включая dhfr- минус клетки СНО, описанные в Urlaub andChasin, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77:4216-20, 1980), используемые с выбираемым DHFR маркером, например, как описано у Kaufman and Sharp, J. Mol. Biol., 159:601-21, 1982, NS0 миеломными клетками,COS-клетками и SP2/0-клетками. Когда векторы рекомбинантной экспрессии, кодирующие гены антитела, вводят в клетки-хозяева млекопитающих, то антитела продуцируются путем культивирования клетокхозяев в течение периода времени, достаточного для того, чтобы позволить экспрессию антитела в клетках-хозяевах или более предпочтительно секрецию антитела в культуральную среду, в которой выращивают клетки-хозяева в соответствующих условиях, известных из уровня техники. Антитела могут быть восстановлены из клеток-хозяев и/или из культуральной среды при помощи стандартных способов очистки. Клетки-хозяева также могут быть использованы для продуцирования частей или фрагментов интактных антител, например Fab-фрагментов или молекул scFv с применением традиционных технологий. Квалифицированному специалисту в данной области будет понятно, что вариации вышеуказанной процедуры не выходят за пределы объема данного изобретения. Например, может быть желательной трансфекция клетки-хозяина ДНК, кодирующей либо легкую цепь, либо тяжелую цепь антитела по изобрете- 15014298 нию. Также для удаления некоторых или всех ДНК, кодирующих легкую или тяжелую цепь, или обе цепи, которые не являются необходимыми для связывания IL-17, могут также быть использованы рекомбинантные ДНК технологии. Молекулы, экспрессирующиеся из таких усеченных молекул ДНК, также включены в антитела по изобретению. Изобретение обеспечивает клетку-хозяина, содержащую молекулу нуклеиновой кислоты по изобретению. Предпочтительно клетка-хозяин по изобретению содержит один или более векторов или конструкций, содержащих молекулу нуклеиновой кислоты по изобретению. Клетка-хозяин по изобретению является клеткой, в которую был введен вектор по изобретению, указанный вектор содержит полинуклеотид, кодирующий LCVR антитела по изобретению, и/или полинуклеотид, кодирующий HCVR по изобретению. Изобретение также обеспечивает клетку-хозяина, в которую были введены два вектора по изобретению; один содержит полинуклеотид, кодирующий LCVR антитела по изобретению, и другой содержит полинуклеотид, кодирующий HCVR, присутствующий в антителе по изобретению, и каждый функционально связан с промоторной последовательностью. Типы клеток-хозяев включают клетки млекопитающих, бактерий, растений и дрожжей. Предпочтительно клетка-хозяин является СНО-клеткой,COS-клеткой, SP2/0-клеткой, NS0-клеткой, дрожжевой клеткой или производной, или потомством любого предпочтительного типа клеток. В преимущественной системе рекомбинантной экспрессии антитела по изобретению вектор рекомбинантной экспрессии, кодирующий как легкую цепь антитела, так и тяжелую цепь антитела, введен вdhfr- минус СНО-клетки путем, например, трансфекции, опосредованной фосфатом кальция. В рекомбинантном векторе экспрессии каждый из генов тяжелой и легкой цепей антитела функционально связан с регуляторными элементами энхансера/промотора (например, полученными из SV40, CMV, аденовируса и т.п., таких как регуляторный элемент CMV энхансера/AdMLP промотора или регуляторный элементSV40 энхансера/AdMLP промотора) для запуска высоких уровней генной транскрипции. Вектор рекомбинантной экспрессии также несет ген dhfr, позволяющий отбор СНО-клеток, которые были трансфектированы с вектором с использованием метотрексатного отбора/амплификации. Отобранные трансформированные клетки-хозяева культивируют для того, чтобы позволить экспрессию легкой и тяжелой цепей антитела, а интактное антитело восстанавливают из культуральной среды. Для получения рекомбинантного вектора экспрессии трансфекции клеток-хозяев, отбора трансформантов, культивирования клетокхозяев и восстановления антитела из культуральной среды используют стандартные методы молекулярной биологии. Антитела или их антигенсвязывающие части по изобретению могут быть экспрессированы у животного (например, мыши), которая является трансгенной для человеческих генов иммуноглобулина (см., например, Taylor et al. Nucleic Acids Res., 20:6287-95, 1992). После экспрессии интактные антитела, их димеры, отдельные легкие и тяжелые цепи или иные формы иммуноглобулина по изобретению могут быть очищены согласно стандартным процедурам, известным из уровня техники, включая осаждение сульфатом аммония, ионообменную колоночную хроматографию, аффинную колоночную хроматографию, обратнофазовую колоночную хроматографию, колоночную хроматографию гидрофобного взаимодействия, гель-электрофорез и т.п. Существенно чистые иммуноглобулины, имеющие по крайней мере приблизительно 90, 92, 94 или 96% гомогенность, являются предпочтительными, а 98-99% или более высокая гомогенность является наиболее предпочтительной для фармацевтических целей. После очистки, частичной или до желаемой степени гомогенности, пептиды могут затем быть использованы в терапевтических либо профилактических целях, как описано в данной заявке. Химерное антитело Как используется в данной заявке, термин "химерное антитело" включает моновалентные, дивалентные или поливалентные иммуноглобулины. Моновалентное химерное антитело представляет собой димер, образованный химерной тяжелой цепью, связанной посредством дисульфидных мостиков с химерной легкой цепью. Дивалентное химерное антитело представляет собой тетрамер, образованный двумя димерами тяжелая цепь-легкая цепь, связанными посредством по крайней мере одного дисульфидного мостика. Химерная тяжелая цепь антитела содержит антигенсвязывающий участок, полученный из тяжелой цепи нечеловеческого антитела, специфического к IL-17, который функционально связан по крайней мере с частью человеческого или по существу человеческого (или видов, отличных от тех, из которых был получен антигенсвязывающий участок) константного участка тяжелой цепи, такого как СН 1 или СН 2,или предпочтительнее с константным участком полноразмерной тяжелой цепи. Химерная легкая цепь антитела содержит антигенсвязывающий участок, полученный полностью или по существу из легкой цепи нечеловеческого антитела, специфического к IL-17, функционально связанного по крайней мере с частью человеческого или по существу человеческого (или видов, отличных от тех, из которых был получен антигенсвязывающий участок) константного участка легкой цепи (CL) или предпочтительнее с константным участком полноразмерной легкой цепи. Антитела, фрагменты или производные, содержащие химерные тяжелые цепи и химерные легкие цепи с одинаковой или различной специфичностью связывания вариабельного участка, могут также быть получены путем соответствующего связывания отдельных полипептидных цепей в соответствии со стадиями известного способа.- 16014298 Для данного подхода хозяева, экспрессирующие химерные тяжелые цепи, культивируют отдельно от хозяев, экспрессирующих химерные легкие цепи, а иммуноглобулиновые цепи восстанавливают отдельно, а затем связывают. Альтернативно, хозяева могут быть культивированы совместно, а цепи могут связываться самопроизвольно в культуральной среде с последующим восстановлением собранного иммуноглобулина или фрагмента. Способы получения химерных антител известны из уровня техники (см.,например, патенты США 6284471; 5807715; 4816567 и 4816397). Гуманизированные антитела Предпочтительно антитело по изобретению, предназначенное для использования в терапевтических целях, будет иметь последовательность каркасного и константного участка (до такой степени, до которой она существует в антителе), полученную от млекопитающего, в котором она будет использована как терапевтическое антитело таким образом, чтобы снизить вероятность того, что млекопитающее сможет запретить иммунный ответ на лечебное антитело. Гуманизированные антитела представляют особый интерес, поскольку их считают ценными для применения в терапевтических целях и избежания человеческого отклика на антимышиное антитело, который часто наблюдается для антител грызунов. Дополнительно в гуманизированных антителах часть эффектора антитела имеет человеческое происхождение,таким образом он может лучше взаимодействовать с остальными частями иммунной системы человека(например, разрушать клетки-мишени более эффективно при помощи комплемент-зависимой цитотоксичности или антитело-зависимой клеточной цитотоксичности). Также введенные путем инъекции гуманизированные антитела могут иметь период полураспада больший, чем таковой у человеческих антител,которые встречаются в природе, например мышиные антитела, таким образом позволяя более часто вводить меньшие дозы. Термин "гуманизированное антитело", как используется в данной заявке, относится к антителу, которое содержит части антител различного происхождения, где по крайней мере одна часть имеет человеческое происхождение. Например, гуманизированное антитело может содержать части, полученные из антитела нечеловеческого происхождения с необходимой специфичностью, такого как мышиное антитело, и из антитела человеческого происхождения, соединенных вместе химически при помощи традиционных методик (например, синтетических) или полученных как смежные полипептиды с использованием методов генной инженерии. Предпочтительно "гуманизированное антитело" имеет CDR, которые происходят (или по существу происходят) из нечеловеческого антитела (предпочтительно мышиного моноклонального антитела), в то время как каркасный и константный участок, в той степени, в которой они присутствуют (или их значительная или существенная часть, т.е. по крайней мере приблизительно 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98 или 99%),кодированы информацией последовательности нуклеиновой кислоты, которая встречается в области иммуноглобулина человеческой зародышевой линии (см., например, International ImMunoGeneTicsDatabase) или в рекомбинированных или мутированных их формах, вне зависимости от того, были ли продуцированы указанные антитела в человеческой клетке.CDR гуманизированного антитела могут быть изменены или оптимизированы от CDR негуманизированного родительского антитела, из которого они произошли, для получения желаемых свойств, например специфичности, аффинности и/или предпочтительного связывания. Измененные или оптимизированные CDR могут содержать аминокислотные замещения, добавления и/или делеции по сравнению с родительскими CDR, предпочтительно в общем 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 в пределах шести CDR доменов. Например, аминокислотные положения в CDR, которые подчеркнуты и выделены жирным шрифтом в табл. 2 и 3, являются положениями, которые были оптимизированы от родительских CDR, как показано в Fab1 в табл. 2 и 3. Альтернативно, мышиное антитело 2321 может быть родительским антителом для сравнения CDR антитела по изобретению. Гуманизированные формы нечеловеческих (например, мышиных) антител включают интактное антитело, по существу интактное антитело, часть антитела, содержащую антигенсвязывающий сайт, или часть антитела, содержащую Fab-фрагмент, Fab'-фрагмент, F(ab')2 или одноцепочечный Fv-фрагмент. Гуманизированные антитела предпочтительно содержат минимальную последовательность, полученную из нечеловеческого иммуноглобулина. Гуманизированные антитела могут также содержать остатки, которые не встречаются ни в реципиентом антителе, ни в импортированном CDR или в каркасных последовательностях. В общем, гуманизированное антитело будет содержать существенно все по крайней мере из одного, а типично двух вариабельных доменов, в которых все или по существу все аминокислоты вCDR-участках соответствуют аминокислотам нечеловеческого иммуноглобулина, а все или существенно все аминокислоты в FR-участках являются аминокислотами консенсусной цепи человеческого иммуноглобулина. Гуманизированное антитело, необязательно, также содержит по крайней мере часть константного участка иммуноглобулина (Fc), типично человеческого иммуноглобулина [Jones et al. Nature,321:522-525 (1986); Riechmann et al. Nature, 332:323-329 (1988) и Presta Curr. Op. Struct. Biol., 2:593-596(1992)]. Гуманизированные антитела могут быть подвергнуты мутагенезу in vitro с использованием способов, известных из уровня техники (либо при использовании животного, трансгенного для человеческихIg последовательностей, соматического мутагенеза in vivo) и, таким образом, аминокислотные последовательности каркасного участка HCVR и LCVR участков гуманизированных рекомбинантных антител- 17014298 являются последовательностями, которые, будучи полученными из последовательностей, которые относятся к последовательностям HCVR и LCVR человеческих зародышевых линий, не могут существовать в природе в наборе антител человеческих зародышевых линий in vivo. Описано, что такие аминокислотные последовательности каркасных участков HCVR и LCVR гуманизированных рекомбинантных антител являются по крайней мере на 90, 92, 94, 95, 96, 98% или наиболее предпочтительно по крайней мере на 99% идентичными последовательностям человеческих зародышевых линий. Предпочтительно такие каркасные остатки родительского антитела (например, мышиного антитела или, в общем, антитела, из которого получено гуманизированное антитело), которые поддерживают или влияют на структуру сайта связывания, будут оставлены. Такие остатки могут быть идентифицированы,например, при помощи рентгеновской кристаллографии родительского антитела или Fab-фрагмента, таким образом идентифицируя трехмерную структуру антигенсвязывающего сайта. Одна стратегия гуманизации антител состоит в том, что выбирают человеческую зародышевую последовательность с высочайшей гомологией к каркасу родительского антитела в качестве каркаса для получения донорских CDR. Этот зародышевый подход базируется на том же логическом обосновании, как и стратегия максимального соответствия, но в базе данных ищут только зародышевые последовательности. Гуманизированное антитело по изобретению может содержать или быть получено из каркаса легкой цепи человеческой зародышевой линии. В конкретных вариантах осуществления последовательность легкой цепи человеческой зародышевой линии выбирают из человеческих VK-последовательностей,включая, но не ограничиваясь приведенными, А 1, А 10, A11, А 14, А 17, А 18, А 19, А 2, А 20, А 23, А 26,А 27, A3, А 30, А 5, А 7, В 2, В 3, L1, L10, L11, L12, L14, L15, L16, L18, L19, L2, L20, L22, L23, L24, L25,L4/18a, L5, L6, L8, L9, O1, O11, O12, O14, O18, O2, O4 и O8. В конкретных вариантах осуществления такой каркас легкой цепи человеческой зародышевой линии выбирают из V1-11, V1-13, V1-16, V1-17,V1-18, V1-19, V1-2, V1-20, V1-22, V1-3, V1-4, V1-5, V1-7, V1-9, V2-1, V2-11, V2-13, V2-14, V2-15, V2-17,V2-19, V2-6, V2-7, V2-8, V3-2, V3-3, V3-4, V4-1, V4-2, V4-3, V4-4, V4-6, V5-1, V5-2, V5-4 и V5-6. В других вариантах осуществления гуманизированное антитело по изобретению может содержать или быть получено из каркаса тяжелой цепи человеческой зародышевой линии. В конкретных вариантах осуществления этот каркас тяжелой цепи человеческой зародышевой линии выбирают из VH1-18,VH1-2, VH1-24, VH1-3, VH1-45, VH1-46, VH1-58, VH1-69, VH1-8, VH2-26, VH2-5, VH2-70, VH3-11,VH3-13, VH3-15, VH3-16, VH3-20, VH3-21, VH3-23, VH3-30, YH3-33, VH3-35, VH3-38, VH3-43, VH3-48,VH3-49, VH3-53, VH3-64, VH3-66, VH3-7, VH3-72, VH3-73, VH3-74, VH3-9, VH4-28, VH4-31, VH4-34,VH4-39, VH4-4, VH4-59, VH4-61, VH5-51, VH6-1 и VH7-81. См. РСТ WO 2005/005604, где приведено описание различных последовательностей зародышевых линий. В конкретных вариантах осуществления вариабельный участок легкой цепи и/или вариабельный участок тяжелой цепи содержат каркасный участок или по крайней мере часть каркасного участка (например, содержащую 2 или 3 подучастка, такие как FR2 и FR3). В конкретных вариантах осуществления по крайней мере FRL1, FRL2, FRL3 или FRL4 являются полностью человеческими. В других вариантах осуществления по крайней мере FRH1, FRH2, FRH3 или FRH4 являются полностью человеческими. В некоторых вариантах осуществления по крайней мере FRL1, FRL2, FRL3 или FRL4 являются последовательностями зародышевой линии (например, человеческой зародышевой линии) или содержат человеческие консенсусные последовательности для конкретного каркаса. В других вариантах осуществления по крайней мере FRH1, FRH2, FRH3 или FRH4 являются последовательностью зародышевой линии (например, человеческой зародышевой линии) или содержат человеческие консенсусные последовательности для конкретного каркаса. В преимущественных вариантах осуществления каркасный участок является человеческим каркасным участком. В общем, гуманизированные антитела могут быть продуцированы путем получения нуклеиновокислотных последовательностей, кодирующих HCVR и LCVR антитела, например, антитела мыши или антитела, полученного путем гибридомы, которая связывает эпитоп IL-17 по изобретению, идентифицируя CDR в указанных HCVR и LCVR (нечеловеческих), и имплантируя такие CDR-кодирующие нуклеиновокислотные последовательности в выбранные человеческие нуклеиново-кислотные последовательности, кодирующие каркас. Необязательно CDR участок может быть оптимизирован путем рандомизированного мутагенеза или мутагенеза в конкретных положениях для замещения одной или более аминокислот в CDR на другую аминокислоту до прививания CDR-участка в каркасный участок. Альтернативно, CDR участок может быть оптимизирован после инсерции в человеческий каркасный участок с использованием способов, известных специалисту в данной области. Предпочтительно человеческие каркасные аминокислотные последовательности выбирают таким образом, чтобы полученное в результате антитело, вероятно, было подходящим для введения людям in vivo. Это можно определить, например,основываясь на предыдущем использовании антител, которые содержат такую человеческую каркасную последовательность. Предпочтительно человеческая каркасная последовательность сама по себе не будет существенно иммуногенной. Альтернативно, аминокислотные последовательности каркасов антитела, предназначенного для гуманизации, могут быть сравнимы с последовательностями известных человеческих каркасных последовательностей, предназначенных для CDR-имплантирования и отобранных на основании содержащихся в- 18014298 них последовательностей, в значительной степени подобных последовательностям родительского антитела, например мышиного антитела, которое связывает IL-17 (например, антитело, содержащее HCVR сSEQ ID NO:270 и дополнительно содержащее LCVR с SEQ ID NO:271). Были выделены многочисленные человеческие каркасные последовательности, а об их последовательностях сообщалось в уровне технике. Это повышает вероятность того, что полученное в результате CDR-привитое гуманизированное антитело, содержащее CDR родительского антитела (например, мышиного) или оптимизированные CDR родительского антитела, имплантированные в отобранные человеческие каркасы (и, возможно, также человеческий константный участок), в существенной степени сохранит антигенсвязывающую структуру и, таким образом, сохранит аффинность связывания родительского антитела. Для сохранения значительной степени антигенсвязывающей аффинности отобранные человеческие каркасные участки будут предпочтительно такими, которые, как ожидается, будут подходить для введения in vivo, т.е. не иммуногенными. В любом из способов получают ДНК последовательности, кодирующие HCVR и LCVR участки предпочтительного мышиного анти-IL-17-антитела. Способы клонирования последовательностей нуклеиновых кислот, кодирующих иммуноглобулины, хорошо известны из уровня техники. Такие способы могут, например, включать амплификацию иммуноглобулинкодирующих последовательностей, предназначенных для клонирования с использованием соответствующих праймеров путем полимеразной цепной реакции (ПЦР). О праймерах, подходящих для амплификации нуклеиново-кислотных последовательностей иммуноглобулина, в особенности последовательностей мышиных HCVR и LCVR, сообщалось в литературе. После того как такие последовательности, кодирующие иммуноглобулин, клонируют,они будут секвенированы способами, известными из уровня техники. После прививания CDR-кодирующих последовательностей в отобранные человеческие каркасные кодирующие последовательности, полученные ДНК последовательности, кодирующие "гуманизированные" вариабельные тяжелые и вариабельные легкие последовательности, затем экспрессируются с получением гуманизированного Fv или гуманизированного антитела, которое связывает IL-17. Гуманизированные HCVR и LCVR могут экспрессироваться как часть целой молекулы анти-IL-17-антитела, т.е. как слитый белок с человеческими последовательностями константного домена, чьи кодирующие ДНК последовательности были получены из коммерчески доступной библиотеки или были получены с использованием, например, одного из описанных выше способов для получения ДНК последовательностей, или способов, известных из уровня техники. Однако HCVR и LCVR последовательности могут также экспрессироваться при отсутствии константных последовательностей для получения гуманизированного анти-IL-17 Fv. Тем не менее, сплавление человеческих константных последовательностей в вариабельном участке является потенциально желательным, т.к. получаемое в результате гуманизированное антиIL-17-антитело может обладать функциями человеческого эффектора. Способы синтеза ДНК, кодирующей протеин известной последовательности, хорошо известны из уровня техники. С использованием таких способов синтезируют ДНК последовательности, кодирующие гуманизированные HCVR и LCVR последовательности индивидуума (с константными участками и без них), а затем экспрессируют в векторную систему, подходящую для экспрессии рекомбинантных антител. Это может быть получено в любой векторной системе, которая обеспечивает гуманизированныеHCVR и LCVR последовательности для индивидуума, предназначенные для экспрессии в качестве слитого протеина с последовательностями человеческих константных доменов и для соединения с получением функциональных (связывающих антиген) антител или фрагментов антител. Последовательности человеческого константного домена хорошо известны из уровня техники и о них сообщалось в литературе. Преимущественные человеческие константные последовательности легкой цепи включают каппа и лямбда константные последовательности легкой цепи. Преимущественные человеческие константные последовательности тяжелой цепи включают человеческий IgG1, человеческийIgG2, человеческий IgG3, человеческий IgG4 (см., например, SEQ ID NO:257-260 соответственно) и их мутированные версии, что обеспечивает измененную функцию эффектора, например увеличенный период полураспада in vivo, сниженное связывание рецептора Fc, измененный профиль диамидирования и т.п. Если таковые имеются, человеческие каркасные участки предпочтительно получены из вариабельного участка человеческого антитела, имеющего последовательность, подобную последовательности аналогичного или эквивалентного участка донора антигенсвязывающего рецептора (т.е. родительского антитела). Другие источники каркасных участков для частей человеческого происхождения гуманизированного антитела включают человеческие вариабельные консенсусные последовательности (см., например, Kettleborough С.A. et al. Protein Engineering, 4:773-783 (1991); Carter et al., WO 94/04679). Например,последовательность антитела либо вариабельного участка, которое используют для получения нечеловеческой части, может быть сравнима с человеческими последовательностями, как описано у Kabat et al.Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, NIH, U.S. Government Printing Office (1991). В особенно преимущественном из вариантов осуществления каркасные участки цепи гуманизированного антитела получены из человеческого вариабельного участка, имеющего по крайней мере приблизительно 60% общей идентичности последовательности, предпочтительно по крайней мере приблизительно 70, 80 или 90% общей идентичности последовательности и более предпочтительно по крайней мере приблизи- 19014298 тельно 85% общей идентичности последовательности с вариабельным участком нечеловеческого донора. Человеческая часть может быть также получена из человеческого антитела, имеющего по крайней мере приблизительно 65% идентичности последовательности и предпочтительно по крайней мере приблизительно 70% идентичности последовательности с конкретной частью (например, FR), которую используют по сравнению с эквивалентной частью (например, FR) нечеловеческого донора. Ссылками, в которых приведены способы, которые могут быть использованы при гуманизации мышиного антитела, являются, например, Queen et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88:2869, 1991; патенты США 5693761; 4816397; 5225539; компьютерные программы ABMOD и ENCAD, как описано уLevitt М. J. Mol. Biol., 168:595-620, 1983; гуманизация может быть в значительной степени проведена в соответствии со способом, описанным Winter et al. [Jones et al. Nature, 321:522-525 (1986); Riechmann etal. Nature, 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al. Science, 239:1534-1536 (1988)]. Человеческие антитела В качестве альтернативы гуманизации могут быть получены человеческие антитела. Последние могут быть получены с использованием различных методов, известных из уровня техники, включая библиотеки фагового дисплея. Hoogenboom and Winter J. Mol. Biol., 227:381 (1991); Marks et al. J. Mol. Biol.,222:581 (1991). Известны также методы Cole et al. и Boerner et al. для получения человеческих моноклональных антител (Cole et al. Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985) и Boerneret al. J. Immunol., 147(1):86-95 (1991. Аналогично, человеческие антитела могут быть получены путем введения локусов человеческого иммуноглобулина в трансгенных животных, например мышей, в которых эндогенные иммуноглобулиновые гены были частично или полностью инактивированы. После иммунизации, например, антигеном, содержащим иммуногенный эпитоп по изобретению, получают полный набор продуцентов человеческого антитела, который близко совпадает с тем, который наблюдается у людей во всех отношениях, включая набор и расположение генов, и набор антител. Данный подход описан, например, в патентах США 5545807; 5545806; 5569825; 5589369; 5591669; 5625126; 5633425; 5661016 и в следующих научных публикациях: Marks et al. BioTechnology, 10:779-783, 1992;Immunol., 13:65-93 (1995) и Jobkobovits et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:2551, 1993. Гены человеческого иммуноглобулина, введенные в мышь, создают, таким образом, трансгенных мышей, способных реагировать на антигены с антителами, имеющими человеческие последовательности, и которые также описаны у Bruggemann et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86:6709-6713 (1989. Известны несколько стратегий для создания млекопитающих, продуцирующих человеческие антитела. В частности, существует "минилокусный" подход, в котором экзогенный Ig локус имитирован посредством включения частей (отдельных генов) из Ig локуса (см., например, патенты США 5545807, 5545806,5625825, 5625126, 5633425, 5661016, 5770429, 5789650 и 5814318, 5612205, 5721367, 5789215), YAC введения больших и существенно зародышевых фрагментов Ig локусов [см. Mendez et al. Nature Genetics,15:146-156 (1997), Green and Jakobovits J. Exp. Med., 188:483-495 (1998)], и введения целых или по существу целых локусов посредством использования микроклеточного слияния (см. Европейскую патентную заявкуЕР 0843961 А 1). Любая трансгенная мышь, способная к ответу на иммунизацию антителами, имеющими человеческие последовательности, может быть использована для получения анти-IL-17-антитела по изобретению,когда используют способы, доступные специалисту в данной области техники, например, когда такая мышь иммунизирована полипептидом, содержащим иммуногенный эпитоп по изобретению. Применение Антитела по изобретению являются полезными для применения в терапевтических, профилактических, диагностических и исследовательских целях, как описано в данной заявке. Антитело по изобретению может быть использовано для диагностики расстройства или заболевания, связанных с экспрессиейIL-17 человека. Аналогично, антитело по изобретению может быть использовано в анализе для контроля уровней IL-17 у индивидуума, который тестируется на наличие состояния, связанного с IL-17. Исследовательское применение включает способы, в которых используют антитело по изобретению и метку для детекции IL-17 в пробе, например в жидкости человеческого организма, или в клетке, или в клеточном экстракте. Антитела по изобретению могут быть использованы с модификацией или без нее и помечены путем ковалентного или нековалентного присоединения группы, которую можно детектировать. Группой, которую можно детектировать, может быть любая группа, способная продуцировать, непосредственно или опосредованно, детектируемый сигнал. Например, детектируемой группой может быть радиоизотоп, такой как, например, 3 Н, 14 С, 32 Р, 35S или 125I, флуоресцентное или хемилюминесцентное соединение, такое как флуоресцеин изотиоцианат, родамин или люциферин; или фермент, такой как щелочная фосфатаза, бета-галактозидаза или пероксидаза хрена. Может быть использован любой способ, известный из уровня техники, для отдельного конъюгирования антитела к группе, которая может быть детектирована, включая способы, описанные у Hunter et al. Nature, 144:945, 1962; David et al. Biochemistry, 13: 1014, 1974; Pain et al. J. Immunol. Meth., 40: 219, 1981 и Nygren J. Histochem. and Cytochem., 30: 407, 1982. Ряд традиционных протоколов для измерения IL-17, включая, например, ELISA, RIA и FACS, из- 20014298 вестны из уровня техники и обеспечивают основание для диагностики измененных или ненормальных уровней экспрессии IL-17. Нормальные или стандартные значения экспрессии устанавливают при помощи любой методики, известной из уровня техники, например, путем комбинирования пробы, содержащей полипептид IL-17 с, например, антителами в условиях, подходящих для образования комплекса антиген:антитело. Антитело непосредственно или опосредованно помечают веществом, которое можно детектировать, для того, чтобы содействовать детекции связанного или несвязанного антитела. Подходящие вещества, которые могут быть детектированы, включают различные ферменты, простетические группы, флуоресцентные материалы, люминесцентные материалы и радиоактивные материалы. Примеры подходящих ферментов включают пероксидазу хрена, щелочную фосфатазу, -галактозидазу или ацетилхолинэстеразу; примеры подходящих простетических комплексов групп включают стрептавидин/биотин и авидин/биотин; примеры подходящих флуоресцентных материалов включают умбеллиферон, флуоресцеин, флуоресцеин изотиоцианат, родамин, дихлортриазиниламин флуоресцеин, данзил хлорид или фикоэритрин; пример люминесцентного материала включает люминол; и примеры радиоактивных материалов включают 125I, 131I, 35S или 3 Н (см., например, Zola, Monoclonal Antibodies: A Manualof Techniques, CRC Press, Inc. (1987. Количество стандартных образованных комплексов подсчитывают различными способами, такими, как, например, фотометрические способы. Количества полипептидаIL-17, который экспрессируется у индивидуума, затем сравнивают со стандартными значениями. Для удобства антитело по изобретению может быть обеспечено в наборе упакованной комбинации реагентов в заранее определенных количествах с инструкциями по выполнению диагностического анализа. Если антитело помечено ферментом, то набор будет включать субстраты и кофакторы, необходимые для фермента (например, субстратный прекурсор, который обеспечивает детектируемый хромофор или флуорофор). Кроме того, могут быть включены другие вспомогательные вещества, такие как стабилизаторы, буфера (например, блокирующий буфер или лизисный буфер) и т.п. Относительные количества различных реагентов могут быть изменены в широком диапазоне для обеспечения концентраций в растворе реагентов, которые существенно оптимизируют чувствительность анализа. В частности, реагенты могут быть обеспечены как сухие порошки, обычно лиофилизированные, включая наполнители, которые при растворении обеспечивают раствор реагентов, имеющий соответствующую концентрацию. Терапевтические применения антителаIL-17 является провоспалительным цитокином, выделяемым активированными Т-клетками в сайтах воспаления, но не в большом круге кровообращения; его не легко выявить в сыворотке или в тканях здорового человека. IL-17 дезрегулирует адгезию молекул, индуцирует продуцирование множества воспалительных цитокинов и хемокинов из различных типов клеток, включая синовиоциты, хондроциты, фибробласты, эндотелиальные клетки, эпителиальные клетки, таким образом индуцируя рекрутинг нейтрофилов к воспалительному участку, стимулирует простагландины и металлопротеиназы и ингибирует синтез протеогликанов. Кроме того, IL-17 играет важную роль в созревании гематопоэтических прогениторных клеток. IL-17 имеет сигнализирующие роли в разных органах и тканях, включая легкие, суставной хрящ, кость, мозг, гематопоэтические клетки, почки, кожу и кишечник. IL-17 имеет 15-27% аминокислотную гомологию с IL-17 В, С и Е и 44-50% аминокислотную гомологию с IL-17 D и F. Интерлейкин 17 связывает IL-17-рецептор с низкой аффинностью (приблизительно 1 нМ), в то время как другие члены семейства IL-17 не связывают рецептор IL-17. Повышенные уровни IL-17 (то есть IL-17A) были связаны с некоторыми состояниями, болезнями и расстройствами, включая воспаление дыхательных путей, ревматоидный артрит ("RA"), остеоартрит,костную эрозию, интраперитонеальный абсцесс и спайки, воспалительные заболевания кишечника("IBD"), отторжение аллотрансплантата, псориаз, некоторые типы рака, ангиогенез, атеросклероз и рассеянный склероз ("MS"). И IL-17, и IL-17R сверхрегламентированы в синовиальной ткани больных ревматоидным артритом. IL-17 приводит в действие его роль в патогенезе ревматоидного артрита черезIL-1- и TNF- зависимые и независимые пути. IL-17 стимулирует секрецию других цитокинов и хемокинов, например TNF-, IL-1, IL-6, IL-8 и Gro-. IL-17 непосредственно способствует прогрессированию заболевания при ревматоидном артрите. Инъекция IL-17 в колено мыши провоцирует деструкцию сустава независимо от активности IL-1 (Ann. Rheum. Dis., 59:529-32, 2000). Анти-IL-1-антитело не эффективно при индуцированных IL-17 воспалении и повреждении сустава (J. Immunol., 167:1004-1013,2001). В SCW-индуцированной модели мышиного артрита IL-17 индуцирует инфильтрацию воспалительных клеток и истощение протеогликана у мышей дикого типа, IL-1-нокаутных мышей и TNF-нокаутных мышей. IL-17-нокаутные мыши являются фенотипно нормальными в отсутствие антигенного стимула, но имеют заметно ослабленный артрит после коллагеновой иммунизации типа II (J. Immunol.,171:6173-6177, 2003). Рассеянный склероз ("MS") является аутоиммунным заболеванием, характеризующимся воспалением центральной нервной системы ("ЦНС") с повреждением миелиновой оболочки, окружающей аксоны. Признак рассеянного склероза состоит в том, что Т-клетки инфильтрируют в ЦНС. Рассеянный склероз поражает более чем 350000 человек в США и 2,5 млн. человек во всем мире. Существует много форм и наиболее общие являются релапсирующим/ремиттирующим заболеванием ("RRMS), завершающимся- 21014298 повторной прогрессирующей стадией. Находящиеся в употреблении терапевтические средства состоят из интерферона- (AVONEX, BETASERON и REBIF), который снижает частоту рецидивов/обострений на 31-34%, но может вызывать подобные гриппу симптомы и/или синтез нейтрализующих антител (например, приблизительно у 15% пациентов, получающих AVONEX, продуцируют нейтрализующие антитела через 18 месяцев). TYSABRI, одобренный FDA для RRMS, был впоследствии изъят из продажи изза участия в иммуносупрессии ЦНС. Все еще остается неудовлетворенная потребность в лечении рассеянного склероза. IL-17 мРНК увеличен в множественных склеротических повреждениях и в мононуклеарных клетках в крови и в цереброспинальной жидкости больных рассеянным склерозом. Высокие количества IL-17 мРНК-экспрессирующих кровяных мононуклеарных клеток обнаруживаются во время клинического обострения рассеянного склероза по сравнению с ремиссией (Multiple Sclerosis, 5:101-104,1999). К тому же экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит (ЕАЕ), доклиническая животная модель для рассеянного склероза, значительно угнетен у IL-17-нокаутных мышей. Вследствие этого фармацевтическая композиция, содержащая анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению, может быть использована для лечения или профилактики состояний, когда присутствиеIL-17 вызывает или содействует нежелательным патологическим эффектам, или снижение активностиIL-17 имеет терапевтическую пользу для млекопитающих, предпочтительно для людей, включая, но не ограничиваясь приведенными, воспаление дыхательных путей, астму, ревматоидный артрит ("RA"), остеоартрит, костную эрозию, интраперитонеальный абсцесс и спайки, воспалительные заболевания кишечника ("IBD"), отторжение аллотрансплантата, псориаз, некоторые типы рака, ангиогенез, атеросклероз и рассеянный склероз, также как и другие воспалительные расстройства, состояния и заболевания,включая без ограничения: эритематоз, аллергическую реакцию, связанные с Helicobacter pylori гастриты,бронхиальную астму и отторжение аллотрансплантата (например, почечного), системную красную волчанку и волчаночный нефрит. Использование анти-IL-17 моноклонального антитела по изобретению для лечения или профилактики по крайней мере одного из вышеупомянутых заболеваний, в которых активность IL-17 причиняет ущерб или для которых снижение уровней биологической активности IL-17 полезно, предусмотрены в данной заявке. Дополнительно предусматривается использование анти-IL-17 моноклонального антитела по изобретению в производстве лекарственного средства для лечения по крайней мере одного вышеупомянутого расстройства. Использованные в данной заявке термины "лечение", "обработка" и подобное относятся к получению желательного фармакологического и/или физиологического эффекта. Эффект может быть профилактическим, исходя из полного или частичного предотвращения заболевания или его симптома, и/или может быть терапевтическим, исходя из частичного или полного лечения заболевания и/или неблагоприятного эффекта, приписываемого заболеванию. "Лечение", как его используют в данной заявке, включает введение соединения по изобретению для лечения заболевания или состояния у млекопитающего, особенно у человека, и включает (а) профилактику заболевания, случающегося у индивидуума, который может быть предрасположенным к заболеванию, но у которого оно еще не диагностировано; (b) угнетение заболевания, т.е. купирование его развития; и (с) облегчение заболевания, т.е. добиваясь регрессии заболевания или расстройства или облегчая симптомы или их осложнения. Схемы приема могут быть приспособлены для обеспечения оптимально желаемого ответа (например, терапевтического или профилактического ответа). Например, может быть введен единичный болюс, могут быть введены несколько разделенных во времени доз или доза может быть пропорционально снижена или увеличена, как определено требованиями терапевтической ситуации. Фармацевтическая композиция Антитело по изобретению может быть включено в фармацевтическую композицию, пригодную для введения индивидууму (см., например, пример 14). Соединения по изобретению могут быть введены отдельно или в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем и/или наполнителем в однократных или многократных дозах. Фармацевтические композиции для введения разработаны таким образом, чтобы соответствовать выбранному режиму введения, а фармацевтически приемлемые разбавители, носители и/или наполнители, такие как диспергирующие агенты, буфера, поверхностноактивные вещества, консерванты, солюбилизирующие агенты, изотонические агенты, стабилизаторы и т.п. использованы должным образом (см. пример 14 данной заявки). Указанные композиции разработаны в соответствии с традиционными методами, приведенными в, например, Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 19th Edition, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA 1995, где предоставлен набор методов получения композиций, в общем известных специалистам. Фармацевтическая композиция, содержащая анти-IL-17 моноклональное антитело по изобретению,может быть введена индивидууму, имеющему риск развития или имеющему патологии, как описано в данной заявке, с использованием стандартных методов введения, включая пероральное, внутривенное,интраперитонеальное, подкожное, легочное, трансдермальное, внутримышечное, интраназальное, буккальное, сублингвальное или при помощи суппозиториев. Фармацевтическая композиция по изобретению предпочтительно является "терапевтически эффективным количеством" или "профилактически эффективным количеством" антитела по изобретению. "Терапевтически эффективное количество" относится к количеству, эффективному при дозировках и на про- 22014298 тяжении периодов времени, необходимого для достижения желаемого терапевтического результата. Терапевтически эффективное количество антитела может варьироваться в зависимости от таких факторов,как состояние болезни, возраст, пол и вес индивидуума, и способности антитела или части антитела вызывать желательную реакцию у индивидуума. Терапевтически эффективное количество также представляет собой количество, при котором терапевтически полезный эффект антитела преобладает над токсическим или вредным эффектом. "Профилактически эффективное количество" относится к количеству,эффективному при дозировках и на протяжении периодов времени, необходимых для достижения желательного профилактического результата. Поскольку профилактическую дозу используют для индивидуумов до или на ранней стадии заболевания, то, типично, профилактически эффективное количество может быть меньшим, чем терапевтически эффективное количество. Терапевтически эффективное или профилактически эффективное количество представляет собой,по крайней мере, минимальную дозу, но меньшую, чем токсическая доза активного агента, необходимую для обеспечения терапевтической пользы индивидууму. С другой стороны, терапевтически эффективное количество антитела по изобретению представляет собой количество, которое у млекопитающих, предпочтительно людей, снижает биологическую активность IL-17, например связывание IL17R, где присутствие IL-17 вызывает или способствует нежелательным патологическим эффектам, или снижение уровней IL-17 вызывает благоприятный терапевтический эффект у млекопитающего, предпочтительно человека. Маршрут введения антитела по изобретению может быть пероральным, парентеральным, путем ингаляции или местным. Предпочтительно антитела по изобретению могут быть включены в фармацевтическую композицию, пригодную для парентерального введения. Термин "парентеральный", как используется в данной заявке, включает внутривенное, внутримышечное, подкожное, ректальное, вагинальное или интраперитонеальное введение. Преимущественным является введение путем внутривенной или интраперитонеальной, или подкожной инъекции. Подходящие носители для таких инъекций непосредственно известны из уровня техники. Фармацевтическая композиция, типично, должна быть стерильной и стабильной в условиях производства и хранения в контейнере, который обеспечивается, включая, например, герметично закрытый пузырек или шприц. Поэтому фармацевтические композиции могут быть стерильно профильтрованными после получения состава либо сделаны микробиологически пригодными иным образом. Типичная композиция для внутривенной инфузии может иметь объем в 250-1000 мл жидкости, такой как стерильный раствор Рингера, физиологический раствор, раствор декстрозы и раствор Хенка, и терапевтически эффективную дозу (например, 1-100 мг/мл или более) концентрации антитела. Доза может варьировать в зависимости от вида и тяжести заболевания. Как хорошо известно из уровня техники в области медицины, дозировки для любого из индивидуумов зависят от многих факторов, включая размеры пациента,площадь поверхности тела, возраст, конкретное соединение, предназначенное для введения, пол, время и маршрут введения, общее состояние здоровья и другие лекарства, которые вводят одновременно. Типичная доза может находиться, например, в диапазоне 0,001-1000 мкг; однако, предвидятся дозы, находящиеся ниже или выше этого иллюстративного диапазона, особенно учитывая вышеуказанные факторы. Режим дозировок ежедневного парентерального введения может составлять от приблизительно 0,1 мкг/кг до приблизительно 100 мг/кг от общей массы тела, предпочтительно от приблизительно 0,3 мкг/кг до приблизительно 10 мг/кг и более предпочтительно от приблизительно 1 мкг/кг до 1 мг/кг,даже более предпочтительно от приблизительно 0,5 до 10 мг/кг массы тела в день. Прогресс можно контролировать путем периодического оценивания. Для повторного введения в течение нескольких дней или дольше в зависимости от состояния лечение повторяют до достижения желаемого подавления симптомов болезни. Однако полезными могут быть остальные режимы дозировок, которые не исключены из данной заявки. Желаемая дозировка может быть введена путем одноболюсного введения, множественных болюсных введений или путем непрерывного инфузионного введения антитела в зависимости от образца фармакокинетического распада, которого хочет достигнуть практикующий специалист. Эти предположительные количества антитела в сильной степени зависят от решения терапевта. Ключевым фактором выбора соответствующей дозы и режима является получаемый результат. Факторы,рассматриваемые в данном контексте, включают конкретное заболевание, которое лечат, конкретное млекопитающее, которое лечат, клиническое состояние отдельного пациента, причину расстройства, место введения антитела, конкретный вид антитела, способ введения, режим введения и остальные факторы, известные практикующим специалистам-медикам. Терапевтические агенты по изобретению могут быть заморожены либо лиофилизированы и восстановлены перед применением в подходящем стерильном носителе. Лиофилизирование и восстановление могут приводить к различным степеням потери активности антитела. Дозировки могут быть установлены для компенсации. В общем, преимущественными являются значения рН от 6 до 8. Готовые изделия В другом из вариантов осуществления по изобретению обеспечивается готовое изделие, содержащее материалы, полезные для лечения или профилактики расстройств или состояний, описанных выше. Готовое изделие содержит контейнер и метку. Подходящие контейнеры включают, например, колбы,- 23014298 пузырьки, шприцы и аналитические пробирки. Контейнеры могут быть сделаны из ряда материалов, таких как стекло или пластик. Контейнер содержит композицию по изобретению, которая является эффективной для профилактики или лечения расстройства или состояния, и может иметь стерильный порт доступа (например, контейнер может быть пакетом для внутривенного раствора или пузырьком, имеющим пробку, проницаемую для гиподермальной иглы для инъекций). Активный агент в композиции является анти-IL-17-антителом по изобретению. Метка на контейнере, или присоединенная к нему, указывает на то, что композицию применяют для лечения выбранного заболевания. Готовое изделие может дополнительно содержать второй контейнер, содержащий фармацевтически приемлемый буфер, такой как фосфатно-буферный раствор, раствор Рингера и раствор декстрана. Он может дополнительно включать другие материалы, желательные с коммерческой и потребительской точки зрения, включая другие буферы,разбавители, фильтры, иглы, шприцы и вкладыши в упаковку с инструкциями по применению. Следующие примеры приведены только в иллюстративных целях и не предназначены для ограничения области данного изобретения. Таблица 1