Производные пептидов

1 Область техники Настоящее изобретение относится к производным пептидов, проявляющим фармацевтическую активность, например анальгетическую, путем действия на опиоидные рецепторы и тому подобное. Существование опиоидных рецепторов, с которыми связываются такие опиоиды, как морфин, было подтверждено в начале 70-х годов. В настоящее время опиоидные рецепторы разделяются главным образом на три типа, а именно ,и . Морфин как агонист действует главным образом наакцептор и проявляет такую фармацевтическую активность, как анальгетическая, торможение энтерокинеза и дыхания. С 1975 года было последовательно открыто несколько эндогенных морфиноподобных соединений, связывающихся с опиоидными рецепторами. Все эти соединения, найденные к настоящему времени, представляют собой пептиды и обозначаются вместе как опиоидные пептиды. Фармацевтическая активность опиоидных пептидов, как представляется, в основном аналогична морфину. Ожидается, что они могут быть потенциально более безопасными лекарствами, чем морфин, так как представляют собой соединения, присутствующие в живых организмах в естественных условиях. Однако с точки зрения фармакокинетики применение природных опиоидных пептидов проблематично, и они еще не использовались в качестве медикаментов для клиники. В 80-е годы из кутиса лягушек был выделен делморфин, который содержит D-аланин. Обнаружено, что делморфин оказывает в 1000 раз более сильное анальгетическое действие по сравнению с морфином при введении в желудочек мозга и является относительно стабильным в живых организмах. С этого момента берет начало получение синтетических опиоидных пептидов, содержащих D-аминокислоты. В частности, синтетические опиоидные пептиды с высокой селективностью какцепторам рассматриваются как обнадеживающие ненаркотические анальгетики, и их клинические испытания уже начались. Однако возможность их успешного использования как клинических медикаментов сомнительна с точки зрения их эффективности, возможных побочных эффектов, обусловленных их свойствами какагонистов, и коммерческой целесообразностью. Кроме того, эти синтетические опиоидные пептиды невозможно использовать как медикаменты, вводимые перорально, и, соответственно, они не могут заменять такие лекарства, как,например, MS контин, который является препаратом, доступным для перорального введения с контролируемым высвобождением, включающим сульфат морфина, и который широко используется в последнее время как лекарство для 2 купирования болей при раке. С другой стороны,суточная доза MS контина может в некоторых случаях быть увеличена до граммовых количеств, что иногда создает трудности для перорального введения. Вдобавок, в некоторых случаях его введение не может продолжаться из-за появления побочных эффектов, таких как чесотка, возникающая из-за его способности вызывать высвобождение гистамина. Таким образом,желательно иметь заменяющие его медикаменты, которые более безопасны и эффективны,чем морфин. Раскрытие изобретения Для достижения поставленных выше целей авторы изобретения провели различные исследования с целью создания производных опиоидых пептидов, имеющих высокую анальгетическую активность и способность абсорбироваться перорально. В результате они обнаружили,что олигопептидные производные и их соли,имеющие в основе своей структуры L-Tyr-(L или D)-Arg-Phe и амидиногруппу на N-концах их молекул, имеют желаемые свойства, и зарегистрировали патентные заявки, имеющие отношение к этим пептидным производным (патентные заявки Японии(Hei) 6-40989/1994 и(Hei) 7-49894/1995). Авторы провели дальнейшие исследования и нашли, что новые пептидные соединения, полученные с помощью различных модификаций указанной выше основной структуры, также имеют желаемые свойства. Настоящее изобретение построено на основе этих данных. Производные пептидов настоящего изобретения представлены следующей формулой I:HN=C(R1)-X-Y-NH-CH (R2)-CO-Q. В соответствии с настоящим изобретением предлагается лекарственное средство, состоящее из указанного соединения или его соли,анальгетическая фармацевтическая композиция,включающая указанное соединение или его соль как активный ингредиент. В соответствии с настоящим изобретением предлагается применение указанного соединения или его соли для производства указанной выше фармацевтической композиции; метод для предотвращения и/или терапевтического лечения боли, включающий стадию введения млекопитающим эффективного количества указанного соединения или его соли. В указанной выше формуле I R1 представляет собой необязательно замещенную аминогруппу или C1-6 (т.е. от 1 до 6 углеродных атомов) алкильную группу. При наличии заместителей в аминогруппе, их число может быть 1 или 2, а при наличии двух заместителей, они могут быть одинаковыми или различными. Как заместитель может быть использована, например, C1-6 алкильная группа, гидроксильная группа, замещенная или незамещенная аминогруппа.C1-6 алкил согласно описанию может быть линейным или разветвленным. Например, может 3 быть использована метильная группа, этильная группа, н-пропильная группа, изопропильная группа, н-бутильная группа, вторичная бутильная группа, третичная бутильная группа, нпентильная группа, изопентильная группа, неопентильная группа, н-гексильная группа и тому подобное. R1 предпочтительно представляет собой незамещенную аминогруппу или метильную группу.R2 представляет собой C1-6 алкильную группу, с заместителем в виде необязательно замещенной арильной группы или в виде необязательно замещенной С 3-6 циклоалкильной группы. Хотя положение заместителя в виде арильной группы или циклоалкильной группы для C1-6 алкила не имеет особых ограничений,предпочтительно, чтобы заместитель находился на конце C1-6 алкильной группы. Когда арильная группа или циклоалкильная группа замещены, они могут иметь один или более заместителей в любом доступном для замещения положении. Примеры заместителей в арильной группе или в циклоалкильной группе включают, например, гидроксильную группу, необязательно замещенную аминогруппу, необязательно замещенную гуанидиногруппу, C1-6 алкильную группу, C1-6 алкилокси(алкоксильную) группу,атом галогена (используемый здесь термин"атом галогена" обозначает любой из атомов фтора, хлора, брома и иода). Например, пгидроксибензильная группа, фенетильная группа,циклогексилметильная группа,пхлоробензильная группа, п-фторобензильная группа предпочтительны как R2. Хотя абсолютная конфигурация атома углерода, присоединенного к R2, не имеет особых ограничений,соединения, у которых абсолютная конфигурация представляет собой S-конфигурацию, предпочтительны согласно настоящему изобретению. Х представляет собой необязательно замещенный остаток пролина (Pro). Хотя остатком пролина может быть как остаток L-пролина,так и D-пролина, предпочтительнее, чтобы это был остаток D-пролина. Если остаток пролина замещен, он может иметь один или более заместителей в любом положении. Если присутствуют два или более заместителей, заместители могут быть одинаковыми или различными. В качестве замещенного остатка пролина предпочтительно используют 4-гидроксипролин. Х также представляет собой группу формулы 4 В приведенной выше формуле R3, R4 и R5 независимо представляют собой атом водорода,гидроксильную группу, C1-6 алкильную группу,C1-6 алкоксильную группу, атом галогена или-ОSО 3 Н, R3, R4 и R5 могут быть одними и теми же или различными. Например, предпочтительны соединения, в которых все R3, R4 и R5 представляют собой атомы водорода; соединения, в которых R3 представляет собой 4-гидроксильную группу, а R4 и R5 представляют собой метильные группы во втором и шестом положении соответственно; соединения, в которых R3 представляет собой 4-гидроксильную группу, аR4 и R5 представляют собой атомы водорода; соединения, в которых R3 представляет собой 4 метоксигруппу, а R4 и R5 представляют собой атомы водорода; соединения, в которых R3 и R4 представляют собой гидроксильные группы в третьем и четвертом положении, соответственно, а R5 представляет собой атом водорода; и соединения, в которых R3 представляет собой-ОSО 3 Н, а R4 и R5 представляют собой атомы водорода и тому подобное. Соединения, в которых Х представляет собой остаток тирозинаY представляет собой остаток D-пролина В приведенной выше формуле R6 представляет собой атом водорода, необязательно замещенную аминогруппу, необязательно замещенную гуанидиногруппу (-NH-C(NH2)=NH),необязательно замещенную меркаптогруппу(-SH), необязательно замещенную фенильную группу, необязательно замещенную уреидогруппу (-NH-CO-NH2), необязательно замещенную карбамоильную группу (CO-NH2), необязательно замещенную тиоуреидогруппу (-NH-CSNH2), C1-6 алкилсульфонильную группу (-SOC1-6 алкил), C1-6 алкилсульфонильную группу(-SO2-C1-6 алкил), C1-6 ацилоксигруппу, карбоксильную группу или C1-6 алкоксикарбонильную группу, n представляет собой целое число от 1 до 4, и R14 представляет собой атом водорода или C1-6 алкильную группу. В случае, если R6 представляет собой атом водорода, приведенная выше формула предпочтительно представляет собой остаток D-аланина(Nva), остаток L-норвалина (Nva) или им подобные. Если аминогруппа имеет заместители, то количество заместителей может быть один или два. Как заместитель в аминогруппе может быть использована, например, имидазолинильная группа, C1-6 алкильная группа, имино(С 1-6 алкил) группа, такая как 1-иминоэтильная группа, C1-6 5 алканоильная группа, такая как ацетильная группа, или галогенизированная C1-6 алканоильная группа, такая как трифторацетильная группа. Предпочтительно может быть использована аминогруппа, имеющая один заместитель, такой как метил, этил, изопропил, 1-иминоэтил или ацетил. Если заместитель вводится в гуанидиногруппу, атом азота, входящий в гуанидиногруппу, может быть замещен одним или более заместителями, и если вводятся два или более заместителей, заместители могут быть одинаковыми или различными. Например, можно использовать C1-6 алкил, гидроксил, атом галогена,нитрогруппу, C1-6 алканоил, такой как ацетильная группа, галогенизированная C1-6 алканоильная группа, такая как трифторацетильная группа, или им подобные, причем метильная группа является предпочтительной. Если R6 представляет собой замещенную меркаптогруппу, заместителем может быть C1-6 алкильная группа, предпочтительно метильная группа или ей подобная. Если R6 представляет собой замещенную фенильную группу, она может иметь один или более заместителей в любом положении фенильного кольца. В качестве заместителя может быть использована, например, необязательно замещенная аминогруппа или необязательно замещенная гуанидиногруппа, как описывалось выше. Например, предпочтительно используют п-аминофенильную, пгуанидинофенильную группу или им подобные. Если R6 представляет собой замещенную уреидогруппу, замещенную карбамоильную группу или замещенную тиоуреидогруппу, в качестве заместителя можно использовать, например, C1-6 алкильную, C1-6 алканоильную, например, как ацетильную группу, галогенизированную C1-6 алканоильную группу, такую как трифторацетильную группу и им подобные. Если R6 представляет собой C1-6 алкилсульфинильную группу или C1-6 алкилсульфонильную группу, то в качестве C1-6 алкильной группы,служащей заместителем в сульфинильной или сульфонильной группе, предпочтительно используют метильную группу. Если R6 представлен C1-6 ацилоксигруппой,то в качестве последней может быть использована C1-6 алканоилоксигруппа, такая как ацетилоксигруппа, или галогенизированная C1-6 алканоилоксигруппа, например, трифторацетиоксигруппа. Как альтернативный вариант, в качествеR6 может быть использована арилзамещенная карбонилоксигруппа, например, необязательно замещенная бензоилоксигруппа, имеющая один или более заместителей в кольце. В качестве заместителя в фенильном кольце бензоильной группы может быть использована, например,C1-6 алкильная группа, атом галогена или описанная выше необязательно замещенная аминогруппа. Если R6 представляет собой карбоксильную группу, приведенная выше формула 6 предпочтительно представляет собой остаток Dглутаминовой кислоты (Glu) или остаток Lглутаминовой кислоты. Примерами R6, представляющими собой C1-6 алкоксикарбонильные группы, являются, например, метоксикарбонильная группа, этоксикарбонильная группа и им подобные. Соединения, в которых R14 представляет собой атом водорода, являются предпочтительными соединениями настоящего изобретения. Если R6 является замещенной или незамещенной гуанидиногруппой, предпочтительна незамещенная гуанидиногруппа и n=3, R14 предпочтительно является C1-6 алкильной группой, такой как метильная группа. Хотя конфигурацияY, не имеет особых ограничений, остаток Dаминокислоты может быть предпочтителен с точки зрения стабильности в живых организмах. Например, соединения, включающие остаток,выбранный из остатка D-аланина, остатка Dглутаминовой кислоты, остатка D-норвалина,остаткаN-метил-Dаргинина, остатка цитруллина и остатка Dметионинсульфоксида, являются предпочтительными соединениями настоящего изобретения.-NR -C(R11)(R12)(R13). R7 представляет собой атом водорода или C1-6 алкильную группу, R8 представляет собой атом водорода или C1-6 алкильную группу. R9 представляет собой C1-6 гидроксиалкильную группу или C1-6 алкильную группу, замещенную сульфокислотой. Хотя гидроксильная группа и группа сульфокислоты может находиться в любой позиции алкильной группы, предпочтительно введение заместителя на конце алкильной группы. R8 и R9 могут комбинироваться, образуя 5- или 6-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу совместно с атомом азота, к которому присоединены R8 и R9. Гетероциклическая группа может содержать два или более атомов азота. Например, 1-пиперадинил, 1-пирролидинил, 1 пиперидинил или им подобные можно использовать в виде группы -NR8R9. Если Х представляет собой NR10-C(R11) 12(R )(R13), R10 является атомом водорода, C1-6 алкильную группу или C1-6 алкильную группу,замещенную арильной группой, такой как фенильная группа (аралкильная группа). Примером аралкильной группы может быть бензильная группа. R10 предпочтительно представляет собой метильную группу. R11 представляет собой атом водорода; карбоксильную группу; карбонильную группу с заместителем в виде C1-6 алкоксильной группы, такой как метоксикарбонильная и этоксикарбонильная группы; замещенную или незамещенную карбамоильную группу; C1-6 алкильную группу, с заместителем в виде карбоксильной группы; C1-6 алкильную группу с заместителем в виде замещенной или 7 незамещенной карбамоильной группы; или C1-6 алкильную группу, имеющую карбонильную группу, замещенную C1-6 алкоксильной группой. Например, R11 предпочтительно представляет собой -СН 2-СООН.R12 представляет собой атом водорода; C1-6 алкильную группу; амино-С 1-6 алкильную группу; C1-6 алкильную группу с заместителем в виде амидиногруппы; C1-6 алкильную группу с заместителем в виде гуанидиногруппы; гидрокси-C1-6 алкильную группу; C1-6 алкильную группу с заместителем в виде карбоксильной группы; илиC1-6 алкильную группу с заместителем в виде замещенной или незамещенной карбамоильной группы. В качестве альтернативного вариантаR10 и R12 могут объединяться, образуя 5- или 6 членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу, имеющую в кольце карбоксильную группу, вместе с атомом азота, к которому присоединен R10. Примеры гетероциклической группы включают, например, 2 карбокси-1-пирролидинильную группу (-ProОН) и 3-карбокси-1-пиперидинильную группу.R13 представляет собой атом водорода или C1-6 алкильную группу. Например, предпочтительны комбинации, в которых R11 представляет собой карбоксиметильную группу или карбамоилметильную группу, а R12 и R13 являются атомами водорода и указанные выше комбинации, в которых R10 представляет собой метильную группу (т.е. Q представляет собой NСН 3 СН 2-СН 2-СООН). Соединения указанной выше формулы I, в которых R2 является незамещенной бензильной группой, Х представляет собой остаток Lтирозина (L-Tyr) (т.е. R3 является пгидроксильной группой, R4 и R5 представляют собой атомы водорода и конфигурация соответствует имеющейся у L-аминокислоты), a Y представляет собой остаток L- или D-аргинина(Arg) (т.е. R6 является незамещенной гуанидиногруппой и n равно трем) исключаются из сферы настоящего изобретения. В соединениях настоящего изобретения,представленных в формуле I, присутствуют асимметричные атомы углерода, которые могут быть в S- или R-конфигурации, отличной от описанной выше. Если атом серы имеет заместитель в виде атома кислорода, например, в сульфоксидах, он может находиться в S- или Rконфигурации, конфигурация может быть любой из этих конфигураций. Например, если Y представляет собой остаток D-метионинсульфоксида, остаток D-метионин-(RS)-сульфоксида, остаток D-метионин-(R)-сульфоксида и остаток D-метионин-(S)-сульфоксида, все они включаются в сферу настоящего изобретения. Любые оптические изомеры или рацематы,диастереомеры и смеси таких изомеров включаются в сферу соединений настоящего изобретения, представленных в формуле I. Кислые соли, такие как гидрохлориды, ацетаты и п 001001 8 толуолсульфонаты, или основные соли, такие как соли аммония и соли органического амина включаются в объем соединений настоящего изобретения. Более того, любые гидраты и сольваты свободных форм соединений или форм их солей также включаются в сферу настоящего изобретения. В дополнение к соединениям,представленным в указанной выше формуле,димеры или олигомеры, происходящие из описанных выше соединений, и циклические соединения, получаемые путем связывания С- иN-концов этих соединений, также включаются в объем соединений настоящего изобретения. Пептиды настоящего изобретения имеют более высокую анальгетическую активность,чем морфин. Поскольку их анальгетическая активность сочетается с относительно слабыми по сравнению с морфином эффектами в отношении высвобождения гистамина и угнетения частоты сердечных сокращений по сравнению с таковыми морфина, и так как степень их перекрестной устойчивости по отношению к морфину низка,ожидается, что они могут подходить для лечения более при раке. Таким образом, в соответствии с настоящим изобретением предлагается фармацевтическая композиция, включающая описанное выше соединение. Примеры схемы введения включают, например, внутривенное,подкожное и пероральное введение. Ожидается также, что пригодными для использования будут композиции для поглощения слизистой оболочкой, включая интраназальное поглощение, и композиции для внутрикожного поглощения. Вводимая доза не имеет особых ограничений. Например, однократную дозу от 0,1 до 10 мг для подкожного введения или однократную дозу от 1 до 100 мг для перорального введения можно вводить два или три раза в день. Пептидные производные настоящего изобретения могут быть получены с помощью твердофазного или жидкофазного методов,обычно применяемых для получения пептидов. Например, пептидные цепи могут первоначально быть получены без амидиногрупп с помощью твердофазного метода, а амидиногруппы могут вводиться в аминогруппу N-концевого тирозина для получения желаемых производных. Альтернативно сначала вводят амидиногруппы, а затем модифицируют С-конец. Различные высококачественные агенты пригодны для использования в качестве защиты для аминогрупп и в качестве конденсирующих агентов и им подобных для реакций конденсации. Их, соответственно, выбирают и используют в соответствии с приведенными ниже примерами, или принимая во внимание, например,Koichi Suzuki Ed., "Tanpakushitu Kohgaku-Kiso tothesis", W.H. Freeman и Co., San Francisco, 1969. Для твердофазных методов могут быть пригодны имеющиеся в продаже пептидные синтезаторы, например Модель 430 А (Perkin Elmer Japan,предшествующее название Applied Biosystems). Смолы, реагенты и другие реактивы, используемые для получения пептидов и имеющиеся в продаже, указаны в приведенных ниже примерах. Примеры Настоящее изобретение иллюстрируется,но в то же время не исчерпывается данными примерами. Желаемые производные пептидов настоящего изобретения, охватываемые формулой I, могут быть легко получены на основе рекомендуемых примеров путем модификации или изменения рабочих методик или, соответственно, путем выбора исходных материалов или реагентов для проведения реакций. В примерах обозначения аминокислотных групп сходны с обычно употребляемыми наименованиями. Если аминокислота, на которую здесь ссылаются,имеет D-форму или L-форму, то аминокислота представляет L-форму, если специально не описывается как D-форма. Кроме того, будут использоваться следующие и сходные с ними аббревиатуры, специально не указанные ниже. Обозначения H2NC(NH)-Phe-, Boc-Phe-и BZAPhe-, например, указывают на то, что атом азота на N-конце остатка фенилаланина замещен наH2NC(NH)-, Воc и BZA, соответственно. Аминокислотами иногда обозначаются аминокислотные остатки.(1) H-Tyr-D-Arg-Phe- Ala-OH Указанный выше пептид получали твердофазным методом (оригинальная автоматическаяFmocAla-Alko смола (0,25 ммолей, 675 мг) промывали один раз NMP и обрабатывали NMP,содержащим 20% пиперидин в течение 4 мин, а затем NMP, содержащим 20% пиперидин в течение 16 мин. Смолу промывали NMP 5 раз и затем проводили реакцию с Fmoc-Phe-OH в течение 61 мин. После этого смолу промывалиNMP 4 раза; непрореагировавшие аминогруппы в смоле, выделенной после четвертого промыва,обрабатывали уксусным ангидридом. На проведение описанного выше первого цикла требовалось 120 мин; сходную процедуру повторяли с использованием Fmoc-D-Arg(Pmc)-ОН во втором цикле и Fmoc-Tyr(t-Bu)-ОН в третьем цикле вместо Fmoc-Phe-OH. В качестве защитной группы для боковой цепи D-Arg использовали Рmc, боковой цепи Tyr-t-Bu. 500 мг смолы, полученной как описано выше, обрабатывали при перемешивании в смеси фенола (кристаллический, 0,75 г), этандитиола (0,25 мл), тиоанизола (0,50 мл), воды (0,50 мл) и TFA (10,0 мл) при комнатной температуре в течение 3 ч для отделения пептидов от смолы и одновременного удаления защитных групп. Затем смесь фильтровали через 3 мкм фильтр(фильтр ADVANTEC-Polyflon). К фильтрату добавляли холодный диэтиловый эфир (200 мл) и образовавшиеся преципитаты отделяли фильтрацией через 3 мкм фильтр (фильтр ADVANTEC-Polyflon). Задержанные на фильтре преципитаты растворяли в 2N уксусной кислоте(10-20 мл) и лиофилизировали, что давало сырой пептид со структурой H-Tyr-D-Arg-PheAla-OH.(2) H-Tyr-D-Arg-Phe-NHCH2CH2CONH2 Этот пептид получали способом, аналогичным описанному выше (1), за исключением того, что использовали Fmoc-NH-SAL смолу(3) H-Tyr-D-Arg-Phe- MeAla-OH Этот пептид получали твердофазным способом в соответствии с методом Fmoc/NMP следующим образом. Для фильтрации использовали стеклянный фильтр. Alko смоле (0,500 г) давали набухнуть в DMF (6 мл), после чего ее смешивали с Fmoc-N-метилаланином (Fmoc MeAla-OH, 0,228 г) и пиридином (0,093 мл),встряхивали в течение 1 мин, после чего добавляли 2,6-дихлоробензоила хлорид (0,147 г) и смесь встряхивали в течение 24 ч. Образовавшуюся Fmoc- MeAla-Alko смолу промывали трижды 6 мл DMF, затем трижды 6 мл метанола и, наконец, трижды 6 мл DCM. Непрореагировавшие гидроксиметильные группы бензоилировали добавлением бензоила хлорида (0,0891 мл) и пиридина (0,0847 мл) в DCM (6 мл) и встряхиванием в течение 1 ч. Аминокислотное производное смолы последовательно промыва 001001 12 ли трижды 6 мл DCM, трижды 6 мл DMF и трижды 6 мл метанола, высушивали под вакуумом в эксикаторе над гидроокисью калия.Fmoc- MeAla-Alko смолу обрабатывали трижды 12 мл DMF, затем трижды 12 мл DMF,содержащим 20% пиридин, и дополнительно 6 раз 12 мл DMF для удаления Fmoc группы, после чего добавляли Fmoc-Phe-OH (0,262 г), PyBrop (Watanabe Chemical Industry, 0,315 г), NMP(6 мл) и DIPEA (0,273 мл) и встряхивали в течение 24 ч для образования Fmoc-Phe- MeAlaAlko смолы. После фильтрации и промывки 6 мл NMP, непрореагировавшие аминогруппы были копированы путем обработки DMF (6 мл),содержащим 1-ацетилимидазол (0,248 г) иDIPEA (0,0784 мл) в течение одного часа. Полученную смолу промывали 6 мл NMP.Fmoc группу удаляли из Fmoc-Phe-MeAla-Alko смолы тем же способом, что и описанный выше, к полученному соединению добавляли Fmoc-D-Arg(Pmc)-OH (0,557 г), HOBtFmoc-D-Arg(Pmc)-PheMeAla-Alko смолы. После фильтрации и промывки непрореагировавшие аминогруппы были кепированы тем же способом, что и описанный выше.Fmoc группу удаляли из Fmoc-D-Arg(Pmc)PheMeAla-Alko смолы тем же способом, что и описанный выше, и к полученному соединению добавляли Fmoc-Tyr(t-Bu)-ОН (0,310 г),HOBt (0,103 г), HBTU (0,256 г) и DIPEA (0,235 мл) и встряхивали в течение 1 ч для образованияFmoc-Tyr(t-Bu)-D-Arg(Pmc)-PheMeAla-Alko смолы. После фильтрации и промывки непрореагировавшие аминогруппы были кепированы тем же способом, что и описанный выше. Пептид отделяли от смолы и одновременно удаляли защитную группу тем же способом, что и описанный выше (1).(4) H-Tyr-D-Arg-Phe-EtAla-OH Указанный пептид получали с помощью твердофазного метода согласно Fmoc/NMP методу следующим образом. Стеклянный фильтр применяли для фильтрации. После набухания(0,177 г) и встряхивали в течение 24 ч. Полученную Fmoc-EtAla-Alko смолу промывали три раза 12 мл NMP, затем три раза 12 мл метанола и дополнительно три раза 12 мл DCM, непрореагировавшие гидроксиметильные группы бензоилировали путем добавления бензоила хлорида (0,178 мл) и пиридина (0,170 мл) вDCM (12 мл) и встряхивания в течение 1 ч. Аминокислотное производное смолы последовательно промывали три раза 12 мл DCM, трижды 12 мл DMF и три раза 12 мл метанола, вы 13 сушивали под вакуумом в эксикаторе над гидроокисью калия.Fmoc-EtAla-Alko смолу обрабатывали трижды 20 мл DMF, затем трижды 12 мл DMF,содержащим 20% пиперидин и затем 6 раз 12 млDMF для удаления Fmoc группы, после чего добавляли Fmoc-Phe-OH (0,387 г), РуВгор (0,466 г), NMP (12 мл) и DIPEA (0,523 мл) и встряхивали в течение 24 ч для образования Fmoc-PheEtAla-Alko смолы. После фильтрации и промывки 12 мл NMP, непрореагировавшие аминогруппы кепировали обработкой DMF (12 мл),содержащим 1-ацетилимидазол (0,551 г) иDIPEA (0,174 мл) в течение 1 ч. После этого полученную смолу вновь промывали 12 млFmoc группу удаляли из Fmoc-PheEtAlaAlko смолы тем же способом, что и описанный выше. К смоле добавляли Fmoc-D-Arg(Pmc)-OHDIPEA (0,348 мл) и встряхивали в течение 1 ч для образования Fmoc-D-Arg(Pmc)-PheEtAlaAlko смолы. После фильтрации и промывки непрореагировавшие аминогруппы были кепированы тем же способом, что и описанный выше.Fmoc группу удаляли из Fmoc-D-Arg(Pmc)Phe-EtAla-Alko смолы способом, аналогичным описанному выше. К полученному материалу добавляли Fmoc-Tyr(t-Bu)-OH (0,460 г), HOBtFmoc-Tyr(t-Bu)-D-Arg(Pmc)-PheEtAla-Alko смолы. После фильтрации и промывки непрореагировавшие аминогруппы были кепированы тем же способом, что и описанный выше. Пептид отделяли от смолы и одновременно удаляли защитную группу тем же способом, что и описанный выше (1).(77 мл). Реакцию конденсации проводили с использованием EDCHCl (121 г) для образования(42 мл). Реакцию конденсации проводили с использованием EDCHCl (65 г) для образования защищенного пептида со следующей формулой: Вос-Tyr(Bzl)-D-Arg(Z2)-Phe-OTce. Boc-Tyr(Bzl)D-Arg(Z2)-Phe-OTce (48 г) обрабатывали 4N(6) H-Tyr(Bzl)-D-Arg(Z2)-MePhe-Mep Ala Используя TosOHMe Ala-OBzl в качестве исходного материала, указанный выше пептид получали последовательно из С-концов жидкофазным методом. Boc-MePhe-OH и TosOHMeAla-OBzl конденсировали EDC-HOBt методом для получения Boc-MePhe-Me Ala-OBzl. Boc группу удаляли из Boc-MePhe-Me Ala-OBzl с помощью 4N HCl/этилацетата и полученный продукт конденсировали с Вос-D-Аrg(Z2)-ОН с помощью EDC-HOBt метода для образования Вос-D-Аrg(Z2)-МеРhе-Ме Ala-OBzl. После этого Boc группу удаляли из Boc-D-Arg(Z2)-MePheМе Ala-OBzl с помощью 4N HCl/этилацетата и полученный продукт конденсировали с ВосТуг(Bzl)-ОН с помощью EDC-HOBt метода для получения защищенного пептида Вос-Туг(Bzl)D-Arg(Z2)-MePhe-Me Ala-OBzl. Boc группу затем удаляли обработкой 4N HCl/этилацетатом(В) Получение соединений изобретения Пример 1: H2NC(NH)-Phe-D-Arg-Phe-MeHCl/этилацетат (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (20 мл), после чего в раствор добавляли 1-(N,N'-бис(бензилоксикарбонил)амидино) пиразол (0,18 г, 0,48 ммоля) и триэтиламин (0,08 мл, 0,6 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. К реакционной смеси добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель отгоняли при пониженном давлении. Полученный маслянистый продукт очищали хроматографией на колонке силикагеля(2) H2NC(NH)-Phe-D-Arg-Phe-Me AlaOHдиацетат Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,36 г, 0,29 ммоля) растворяли в уксусной кислоте (10 мл) и к нему добавляли 0,2 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Каталитическое восстановление проводили в течение 4 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения 200 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.HCl/этилацетат (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (20 мл), после чего в раствор добавляли 1-(N,N'-бис(бензилоксикарбонил) амидино)пиразол (0,25 г, 0,67 ммолей) и триэтиламин (0,12 мл, 0,84 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, к осадку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный маслянистый продукт затем очищали хроматографией на колонке силикагеля(2) N-H2NC(NH)-DMT-D-Arg-Phe-Me AlaOHдиацетат Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,06 г, 0,05 ммоля) растворяли в уксусной кислоте (10 мл) и добавляли 0,2 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 4 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении и остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте. Раствор лиофилизировали для получения 30 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошкаHCl/этилацетат (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилфор 001001 16 мамиде (20 мл), после чего в раствор добавляли 1-(N,N'-бис(бензилоксикарбонил)амидино)пиразол (0,17 г, 0,46 ммолей) и триэтиламин (0,08 мл, 0,57 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали затем хроматографией на колонке силикагеля (элюция смесью бензол: этилацетат = 4:1) для получения 0,22 г бесцветного маслянистого продукта.Ala-OHдиацетат Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,20 г, 0,16 ммолей) растворяли в уксусной кислоте (10 мл) и добавляли 0,20 г 5% Pd-C (содержание воды 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 4 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте. Раствор лиофилизировали для получения 80 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.HCl/этилацетат (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (20 мл), после чего в раствор добавляли 1-(N,N'-бис(бензилоксикарбонил)амидино)пиразол (0,10 г, 0,26 ммолей) и триэтиламин (0,05 мл, 0,33 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при сниженном давлении и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали затем хроматографией на колонке силикагеля (элюция смесью бензол:этилацетат = 2:1) для получения 0,19 г бесцветного маслянистого продукта.Ala-OHдиацетат Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,19 г, 0,15 ммолей) растворяли в уксусной кислоте (10 мл) и к нему добавляли 0,20 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 4 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения 70 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.N-BZA-Tyr(Bzl)-D-Arg(Z2)-Phe Ala-OBzl получали жидкофазным или твердофазным методом, обычно используемым для пептидного синтеза. После этого защищенный пептид растворяли в уксусной кислоте, как в примере 4 (2),и добавляли 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 4 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения соединения, поименованного в заголовке,в виде белого порошка.Ala-OH Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,13 г, 2 ммоля) к диметилформамиду (1,54 г, 100 ммолей) при комнатной температуре и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. После этого к раствору добавляли изопропиловый эфир (100 мл) и перемешивали в течение нескольких минут. После отделения растворителя декантированием раствор вновь промывали дополнительной порцией изопропилового эфира(100 мл). К полученному маслянистому продукту добавляли охлажденный на льду водный раствор аммония (29%, 40 мл) и перемешивали в течение 1 ч в ледяной бане. Полученный сырой продукт растворяли в воде и очищали ODS колоночной хроматографией (элюция смесью вода:метанол=75:25). Желаемые фракции собирали и лиофилизировали для получения 53 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.HCl/этилацетат (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (20 мл), после чего в раствор добавляли 1-(N,N'-бис(бензилоксикарбонил) амидино)пиразол (0,23 г, 0,61 ммолей) и триэтиламин(0,07 мл, 0,50 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали затем хроматографией на колонке силикагеля (элюция смесью хлороформ:метанол= 100:1) для получения 0,40 г бесцветного маслянистого продукта.(2) N-H2NC(NH)-Hyp-D-Arg-Phe-Me AlaOHдиацетат Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,2 г, 0,17 ммолей) растворяли в уксусной кислоте (10 мл) и к нему добавляли 0,20 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 4 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения 100 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.HCl/этилацетат (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (20 мл), после чего в раствор добавляли 1-(N,N'-бис(бензилоксикарбонил)амидино)пира 19 зол (3,33 г, 8,80 ммолей) и триэтиламин (1,12 мл, 8,00 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 50 ч. К реакционной смеси добавляли 10% водный раствор лимонной кислоты (100 мл) и супернатант удаляли декантацией. Выпавший в осадок маслянистый продукт растворяли в хлороформе (40 мл) и промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт кристаллизовали из гексана, что позволило получить 6,81 г белых кристаллов с точкой плавления 136-138 С.(2) N-H2NC(NH)-Tyr-D-Lys-Phe-Me AlaOHдиацетат Защищенный пептид (1,50 г, 1,29 ммоля),полученный как описано выше (1), растворяли в уксусной кислоте (10 мл) и к нему добавляли 0,75 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 3,5 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток наносили на ODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia, DM 1020T, 50 г) и элюировали ступенчатым градиентом 1-10% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 520 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.Ala-OHH2NC(NH)-Tyr-D-Lys-Phe-Me диацетат, полученный в примере 7(2), (500 мг,0,71 ммоля) растворяли в смеси диметилформамида (4 мл) и воды (3 мл), после чего к раствору добавляли 1 Н-пиразоло-1 карбоксиамидина гидрохлорид (1,08 г, 0,74 ммоля) и триэтиламин (0,35 мл, 2,5 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. рН реакционной смеси доводили до 4 добавлением уксусной кислоты и смесь концентрировали при пониженном давлении. Ацетатную соль полученного сырого продукта наносили на ODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia, DM 1020T, 25 г) и элюировали ступенчатым градиентом 1-10% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 228 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.Rf; 0,58 (n-ВuОН:АсОН:Н 2O:пиридин= 15:3:10:12) Пример 9: H2NC(NH)-Туг-(R)-DABA-PheMe Ala-OHдиацетат Используя Boc-Tyr(Bzl)-(R)-DABA(Z)-PheMe Ala-OBzl (7,07 г, 7,62 ммоля), 1-(N,N'бис(бензилоксикарбонил)амидино)пиразол (3,17 г, 8,38 ммолей) и триэтиламин (1,40 мл, 10,0 ммолей), проводили реакции как в примере 7. Полученный сырой продукт наносили на ODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia, DM 1020T, 100 г) и элюировали ступенчатым градиентом 1-9% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 1,06 г соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.Rf; 0,58 (n-ВuОН:АсОН:Н 2O:пиридин= 15:3:10:12) Пример 10: H2NC(NH)-Tyr-(R)-AGBA-PheMe Ala-OHдиацетат Используя H2NC(NH)-Туг-(R)-DABA-PheMe Ala-OHдиацетат, полученный в примере 9,(2,00 г,2,96 ммоля) 1-Н-пиразоло-1 карбоксиамидина гидрохлорид (1,39 г, 9,49 ммоля) и триэтиламин (1,82 мл, 13,0 ммолей),проводили реакции как в примере 8. Полученный сырой продукт наносили на ODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia, DM 1020T,100 г) и элюировали ступенчатым градиентом 19% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 1,45 г соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.Rf; 0,60 (n-ВuОН:АсОН:Н 2O:пиридин= 15:3:10:12) Пример 11: H2NC(NH)-Туг-(R)-DAPR-PheMe Ala-OHдиацетат Используя Boc-Tyr(Bzl)-(R)-DAPR(Z)-PheMe Ala-OBzl (6,01 г, 6,58 ммоля), 1-(N,N'бис(бензилоксикарбонил)амидино)пиразол (2,74 г, 7,24 ммолей) и триэтиламин (1,40 мл, 10,0 ммолей), проводили реакции как в примере 7. Полученный сырой продукт наносили на ODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia, DM 1020 Т, 100 г) и элюировали ступенчатым градиентом 1-8% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 668 мг (50,0%) соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.Rf; 0,58 (n-ВuОН:АсОН:Н 2O:пиридин= 15:3:10:12) Пример 12: H2NC(NH)-Туг-(R)-AGPR-PheMe Ala-OHдиацетат Используя H2NC(NH)-Туг-(R)-DAPR-PheMe Ala-OHдиацетат, полученный в примере 11, (1,80 г, 2,72 ммоля) 1-Н-пиразоло-1 карбоксиамидина гидрохлорид (1,28 г, 8,72 ммоля) и триэтиламин (2,10 мл, 15,0 ммолей),проводили реакции как в примере 8. Полученный сырой продукт наносили на ODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia, DM 1020T,100 г) и элюировали ступенчатым градиентом 17% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 1,01 г соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.(бензилоксикарбонил)амидино)пиразол (1,36 г,3,60 ммолей) и диизопропилэтиламин (1,05 мл,6,00 ммолей), проводили реакции как в примере 7. Полученный сырой продукт наносили на ODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia, DM 1020 Т, 190 г) и элюировали ступенчатым градиентом 6-15% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 1,36 г соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.N-H2NC(NH)-Туг-(R)-PAPAPhe-Me Ala-OHдиацетат, полученный в примере 13, (0,60 г, 0,80 ммоля) 1-Н-пиразоло-1 карбоксиамидина гидрохлорид (0,75 г, 3,98 ммоля) и триэтиламин (0,78 мл, 0,70 ммолей),проводили реакции как в примере 8. Полученный сырой продукт наносили на ODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia, DM 1020T,75 г) и элюировали ступенчатым градиентом 39% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 208 мг (26%) соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.AlaOBzl (5,20 г, 5,29 ммоля) растворяли в растворе 4N HCl/этилацетат (30 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир, и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (25 мл), после чего в раствор добавляли 1-(N,N'-бис-(бензилоксикарбонил) амидино)пиразол (2,40 г, 6,35 ммолей) и триэтиламин (0,73 мл, 5,3 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. К реакционной смеси добавляли 10% водный раствор лимонной кислоты (100 мл) и супернатант удаляли декантацией. Выпавший в осадок маслянистый продукт растворяли в хлороформе (40 мл) и промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали хроматографией на колонке силикагеля (элюция смесью бензол:этилацетат = 3:1), для получения 6,3 г бесцветного маслянистого продукта.AlaOBzl, полученный как описано выше (1), растворяли в 90% уксусной кислоте (100 мл), к нему добавляли порошок цинка (6,70 г, 103 ммоля) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После удаления порошка цинка фильтрацией добавляли 6,15 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора, и каталитическое восстановление проводили в течение 5 ч. Катализатор удаляли фильтрацией и растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток наносили наODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia,DM 1020 Т, 160 г) и элюировали ступенчатым градиентом 1-9% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 700 мг виде белого порошка.(50 мл), добавляли порошок цинка (3,75 г, 57,3 ммоля) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После удаления порошка цинка фильтрацией фильтрат концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли хлороформ (50 мл) и промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. После выпаривания растворителя при пониженном давлении остаток растворяли в диметилформамиде (15 мл), после чего растворяли Nбензилоксикарбонил-N'-метилтиомочевину(0,873 г, 3,89 ммоля), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида гидрохлорид (0,75 г, 3,89 ммоля) и триэтиламин (0,54 мл, 3,89 ммолей), перемешивая в ледяной бане. Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. К реакционной смеси добавляли этилацетат (100 мл), промывали 10% водным раствором лимонной кислоты и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали затем хроматографией на колонке силикагеля (элюция смесью хлороформ:метанол = 70:1), для получения 1,09 г бесцветного маслянистого продукта.Ala-OHдиацетат Защищенный пептид (0,99 г, 0,82 ммоля),полученный как описано выше (1), растворяли в уксусной кислоте (10 мл) и к нему добавляли 1,0 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Каталитическое восстановление проводили в течение 12,5 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией, фильтрат лиофилизировали для получения 478 мг соединения, поименованного выше в виде белого порошка.(1,00 г, 1,45 ммолей), полученный в примере 15,и этилацетимидата гидрохлорид (358 мг, 2,90 ммолей), растворяли в диметилформамиде (10 мл), добавляли триэтиленамин (0,80 мл, 5,8 ммолей) и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 7 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир (100 мл) и растворитель удаляли декантированием. Полученный сырой продукт наносили на ODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia, DM 1020T, 100 г) и элюировали ступенчатым градиентом 2-10% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. 24 Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 378 мг соединения, поименованного выше, виде белого порошка.AlaOBzl (3,20 г, 2,68 ммоля), полученный в примере 15 (1), растворяли в уксусной кислоте (50 мл), добавляли порошок цинка (3,53 г, 54,0 ммоля) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После удаления порошка цинка фильтрацией фильтрат концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли хлороформ (50 мл) и промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. После выпаривания растворителя при пониженном давлении остаток растворяли в метаноле (10 мл) после чего растворяли ацетон (181 мкл, 2,46 ммоля) и цианоборогидрид натрия (179 мг, 2,70 ммоля) при перемешивании в ледяной бане. Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли хлороформ (30 мл) и промывали 10% водным раствором лимонной кислоты и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении для получения 2,5 г бесцветного маслянистого продукта. Этот защищенный пептид растворяли в уксусной кислоте (30 мл) и к нему добавляли 2,5 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Каталитическое восстановление проводили в течение 6 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении и затем остаток наносили наODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia,DM 1020 Т, 100 г) и элюировали ступенчатым градиентом 3-10% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 1,2 г соединения, поименованного выше, в виде белого порошка.HCl в этилацетате (3 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток растворяли в диметилформамиде (4 мл), после чего в растворе растворяли этилацетимидата гидрохлорид (0,26 г,2,09 ммоля) и триэтиламин (0,28 мл, 2,00 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь растворяли в этилацетате (50 мл) и промывали 10% водным раствором лимонной кислоты и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали затем хроматографией на колонке силикагеля (элюция смесью хлороформ: метанол = 20:1), для получения 330 мг бесцветного маслянистого продукта.(2) Н 3 С-С(NH)-Tyr-D-Lys-Phe-Me AlaOHдиацетат Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (248 мг, 0,76 ммолей) растворяли в уксусной кислоте (4 мл) и к нему добавляли 0,13 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Каталитическое восстановление проводили в течение 4,5 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении и затем полученный остаток наносили на ODS хроматографическую колонку (Fuji Silysia, DM 1020T, 20 г) и элюировали ступенчатым градиентом 1-7% раствора ацетонитрила в 0,1N уксусной кислоте. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 95 мг соединения, поименованного выше, виде белого порошка.HCl в этилацетате (30 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (25 мл), после чего в раствор добавляли 1-(N,N'-бис-(бензилоксикарбонил) амидино)пиразол (0,18 г, 0,48 ммолей) и триэтиламин (0,09 мл, 0,65 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч и концентрировали при пониженном давлении. Затем к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кисло 001001 26 той и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали затем хроматографией на колонке силикагеля (элюция смесью бензол:этилацетат = 5:2) для получения 0,4 г бесцветного маслянистого продукта.(2) N-H2NC(NH)-Tyr-D-Ala-Phe-Me AlaOHмоноацетат Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,4 г, 0,41 ммоля) растворяли в уксусной кислоте (10 мл) и к нему добавляли 0,4 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 4 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения 210 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.HCl в этилацетате (30 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (5 мл), после чего в раствор добавляли l(N,N'-бис-(бензилоксикарбонил)амидино)пиразол (0,23 г, 0,6 ммолей) и триэтиламин (0,07 мл,0,5 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали затем хроматографией на колонке силикагеля (элюция хлороформом) для получения 0,39 г бесцветного маслянистого продукта.(2) H2NC(NH)-Tyr-D-Glu-Phe-Me AlaOHмоноацетат Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,2 г, 0,18 ммолей) растворяли в уксусной кислоте (30 мл) и к нему добавляли 0,2 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 3 ч для удаления защитной группы. После удаления катали 27 затора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения 102 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.HCl в этилацетате (30 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (25 мл), после чего в раствор добавляли 1-(N,N'-бис-(бензилоксикарбонил) амидино)пиразол (0,23 г, 0,6 ммолей) и триэтиламин (0,12 мл, 0,84 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали затем хроматографией на колонке силикагеля(2) H2NC(NH)-Tyr-D-Nva-Phe-Me AlaOHмоноацетат Защищенный пептид (0,42 г, 0,42 ммоля),полученный как описано выше (1), растворяли в уксусной кислоте (30 мл) и к нему добавляли 0,2 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 4 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения 220 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.Boc-Tyr(Bzl)-D-Pro-Phe-Me Ala-OBzl (0,4 г, 0,5 ммолей) растворяли в растворе 4N HCl в этилацетате (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Реакционную смесь промывали гексаном для получения маслянистого продукта. Этот маслянистый продукт растворяли в диметилформамиде (5 мл),после чего к нему добавляли 1-(N,N'-бис(бензилоксикарбонил)амидино)пиразол (0,23 г,0,6 ммолей) и триэтиламин (0,07 мл, 0,23 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении, и полученный маслянистый продукт очищали затем хроматографией на колонке силикагеля (элюция хлороформом) для получения 0,41 г бесцветного маслянистого продукта.(2) H2NC(NH)-Tyr-D-Pro-Phe-Me AlaOHмоноацетат Защищенный пептид (0,2 г, 0,2 ммоля), полученный как описано выше (1), растворяли в уксусной кислоте (50 мл) и к нему добавляли 0,2 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 4 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения 103 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.Ala-OBzl (1,09 г, 1,1 ммоля) растворяли в растворе 4N HCl в этилацетате (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (25 мл), после чего к раствору добавляли 1-(N,N'-бис-(бензилоксикарбонил) амидино)пиразол (0,22 г, 0,59 ммолей) и триэтиламин (0,07 мл, 0,5 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным 29 раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали затем хроматографией на колонке силикагеляAla-OHдиацетат Защищенный пептид (0,3 г, 0,24 ммоля),полученный как описано выше (1), растворяли в уксусной кислоте (30 мл) и к нему добавляли 0,3 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 3 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией, растворитель концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения 170 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка (выход: 83%). К этому порошку добавляли анизол (2 мл) и проводили реакцию с фтористым водородом в течение 30 мин. После удаления фтористого водорода при пониженном давлении остаток промывали несколько раз диэтиловым эфиром для получения остатка в виде порошка. Этот остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и наносили на колонку, заполненную анионообменной смолой РА 308, и элюировали водой. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 109 мг белого порошка.Boc-Tyr(Bzl)-D-Arg(Z2)-Tyr(Bzl)-Me AlaOBzl (0,61 г, 0,50 ммоля) растворяли в растворе 4N HCl в этилацетате (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (10 мл), после чего к раствору добавляли 1-(N,N'-бис-(бензилоксикарбонил) амидино)пиразол (0,23 г, 0,6 ммолей) и триэтиламин (0,07 мл, 0,5 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении, и полученный маслянистый продукт переводили в 30 твердое состояние из смеси этилацетат/гексан для получения 0,5 г бесцветного полумаслянистого продукта.(2) H2NC(NH)-Tyr-D-Arg-Tyr-Me AlaOHдиацетат Защищенный пептид (0,2 г, 0,14 ммоля),полученный как описано выше (1), растворяли в уксусной кислоте (20 мл) и к нему добавляли 0,2 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 3 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения 98 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.OBzl (0,34 г, 0,3 ммоля) растворяли в растворе 4N HCl в этилацетате (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир для получения промытого маслянистого продукта. Этот маслянистый продукт растворяли в диметилформамиде (20 мл), после чего к раствору добавляли 1-(N,N'-бис-(бензилоксикарбонил)амидино)пиразол (0,10 г, 0,27 ммолей) и триэтиламин (0,05 мл, 0,36 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали хроматографией на колонке силикагеля (элюция смесью бензол:этилацетат = 3:1) для получения 0,36 г бесцветного маслянистого продукта.(2) H2NC(NH)-Tyr-D-Arg-APBA-Me AlaOHдиацетат Защищенный пептид (0,3 г, 0,22 ммоля),полученный как описано выше (1), растворяли в уксусной кислоте (20 мл) и к нему добавляли 0,2 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 4 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и рас 31 твор лиофилизировали для получения 130 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.HCl в этилацетате (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и преципитировавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (5 мл), после чего к раствору добавляли 1-(N,N'-бис-(бензилоксикарбонил)амидино)пиразол (0,2 г, 0,53 ммоля) и триэтиламин (0,06 мл, 0,2 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт переводили в твердое состояние из гексана для получения 0,4 г бесцветного полумаслянистого продукта.(2) H2NC(NH)-Tyr-D-Arg-Cha-Me AlaOHдиацетат Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,2 г, 0,15 ммоля) растворяли в уксусной кислоте (20 мл) и к нему добавляли 0,2 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора. Затем каталитическое восстановление проводили в течение 3 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте. Раствор лиофилизировали для получения 96 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.Boc-D-AMSB-Phe-Me Ala-OMe (0,86 г,1,68 ммолей) растворяли в растворе 4N HCl в этилацетате (30 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали при пониженном 32 давлении и остаток промывали диэтиловым эфиром. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт растворяли в метиленхлориде (25 мл). Затем в данном растворе растворяли 1 гидроксибензотриазол (0,27 г, 2,02 ммоля) и триэтиламин (0,28 мл, 2,02 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем 10% водным раствором карбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали хроматографией на колонке силикагеля (элюция смесью хлороформ:метанол = 50:1) для получения 0,17 г бесцветного порошка.(2) Boc-Tyr-D-AMSB-Phe-Me Ala-OH Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,17 г, 0,25 ммолей) растворяли в метаноле (20 мл) и к нему добавляли 1N раствор гидроокиси натрия (0,28 мл, 0,28 ммолей) и перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Метанол концентрировали при пониженном давлении и остаток растворяли в диэтиловом эфире и воде, затем растворы разделяли. Водный слой подкисляли 0,5N HCl (рН 2-3), добавляли этилацетат (80 мл) и промывали водой. Растворитель концентрировали при пониженном давлении, остаток переводили в твердую форму путем добавления гексана и собирали фильтрацией для получения 0,11 г белого порошка.(3) H2NC(NH)-Tyr-D-AMSB-Phe-Me AlaOHмоноацетат Защищенный пептид (0,11 г, 0,17 ммолей),полученный как описано выше (2), растворяли в растворе 4N HCl в этилацетате (30 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и выпавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде (25 мл), после чего в этом растворе растворяли реагент для амидинирования(1 Н-пиразол-1-карбоксамидингидрохлорид, 0,03 г, 0,19 ммолей) и триэтиламин (0,10 мл, 0,72 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. К реакционной смеси вновь добавляли реагент для амидинирования (1 Н-пиразол-1-карбоксамидингидрохлорид, 0,015 г, 0,09 ммолей) и триэтиламин(0,05 мл, 0,36 ммолей) и этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь промывали дважды путем добавления диэтилового эфира с последующим декантированием для получения маслянистого продукта. Маслянистый продукт растворяли в воде, доводя рН до 4 с помощью уксусной кислоты и очищали путем ODS колоночной хроматографии (элюция смесью ацето 33 нитрил:0,1N уксусная кислота) для получения бесцветного маслянистого продукта. Маслянистый продукт растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения 30 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.Boc-Tyr(Bzl)-D-Arg(Z2)-Phe(p-Cl)-Me AlaOBzl (0,58 г, 0,50 ммоля) растворяли в растворе 4N HCl в этилацетате (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и выпавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде(10 мл), после чего в данном растворе растворяли 1-(N,N'-бис-(бензилоксикарбонил)амидино) пиразол (0,23 г, 0,6 ммолей) и триэтиламин (0,07 мл, 0,5 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем 10% водным раствором карбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали путем хроматографии на колонке силикагеля (элюция смесью бензол:этилацетат = 4:1) для получения 0,48 г светложелтого порошка.Ala-OBzlдиацетат Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,2 г, 0,14 ммолей) смешивали с анизолом (0,6 мл) и к смеси добавляли фтористый водород (5 мл) и перемешивали при 0 С в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток промывали диэтиловым эфиром. Полученный порошок растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор обрабатывали ионообменной смолой(РА-308, элюция водой) для получения соли уксусной кислоты, которую затем лиофилизировали для получения 83 мг поименованного в заголовке соединения в виде белого порошка. 34 4N HCl в этилацетате (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и выпавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в диметилформамиде(10 мл), после чего к раствору добавляли 1(N,N'-бис-(бензилоксикарбонил)амидино)пиразол (0,23 г, 0,6 ммолей) и триэтиламин (0,07 мл,0,5 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой и затем 10% водным раствором карбоната натрия. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали хроматографией на колонке силикагеля (элюция смесью бензол:этилацетат = 4:1) для получения 0,44 г светложелтого порошка.Ala-OBzlдиацетат Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), (0,2 г, 0,15 ммоля) растворяли в уксусной кислоте (20 мл) и к нему добавляли 0,2 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора, затем каталитическое восстановление проводили в течение 3 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте и раствор лиофилизировали для получения 90 мг соединения, поименованного в заголовке, в виде белого порошка.Boc-Tyr-D-Met-Phe-Me Ala-OMe (9,45 г,14,3 ммоля) суспендировали в 67% растворе метанола (110 мл) с добавлением 1N NaOH (28,6 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляли воду (50 мл) и метанол концентрировали при пониженном давлении. Остаток промывали этилацетатом. рН водного слоя доводили до 3,используя 6N HCl, в ледяной бане. Выпавший маслянистый продукт экстрагировали этилацетатом и отмывали насыщенным солевым раствором. Экстракт высушивали над сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. Полученный маслянистый продукт растворяли в уксусной кислоте (200 мл), добавляли 30% водный раствор перекиси водорода(1,53 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После удаления растворителя путем выпаривания при пониженном 35 давлении, проводили кристаллизацию остатка из диэтилового эфира для получения 9,39 г желаемого соединения в виде кристаллов (99,5%).Boc-Tyr-D-AMSB-Phe-Me Ala-OH, полученный как описано выше (1), (9,37 г, 14,2 ммоля) растворяли в растворе 4N HCl в диоксане(100 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и выпавшие кристаллы собирали фильтрацией. Кристаллы растворяли в диметилформамиде (70 мл) и затем в данном растворе растворяли этилацетимидата гидрохлорид (3,51 г, 28,4 ммолей) и триэтиламин (8,4 мл, 60 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и супернатант удаляли декантированием. Полученный маслянистый продукт наносили на колонку для ODS хроматографии (Fuji Silysia,DM 1020T, 200 г) и проводили элюцию ступенчатым градиентом 2-11% ацетонитрила/0,1N раствора уксусной кислоты. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 2,57 г поименованного в заголовке соединения в виде белого порошка.H2NC(NH)-Tyr-D-DAPR-Phe-Me Ala-OHдиацетат, полученный в примере 11, (1,33 г, 2,00 ммоля) растворяли в диметилформамиде (10 мл) и затем в данном растворе растворяли этилацетимидата гидрохлорид (494 мг, 4,00 ммоля) и триэтиламин (0,98 мл, 7,0 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и супернатант удаляли декантированием. Полученный маслянистый продукт наносили на колонку для ODS хроматографии(Fuji Silysia, DM 1020T, 50 г) и проводили элюцию ступенчатым градиентом 1-10% ацетонитрил/0,1N раствор уксусной кислоты. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 855 мг поименованного в заголовке соединения в виде белого порошка.Boc-Tyr(Bzl)-D-DAPR(Z)-Phe-MeAlaOBzl (1,00 г, 1,08 ммоля) растворяли в уксусной кислоте (10 мл) и к нему добавляли 0,4 г 5% PdC (содержание воды: 50%) в качестве катализатора и каталитическое восстановление проводили в течение 4,5 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в диметилформамиде (9 мл), затем в данном растворе растворяли 1 Н-пиразол-1-карбоксамидингидрохлорид (341 мг, 2,33 ммоля) и триэтиламин (0,56 мл, 4,0 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и супернатант удаляли декантированием для получения 609 мг маслянистого продукта.Boc-Tyr-D-AGPR-Phe-Me Ala-OH, полученный как описано выше (1), (609 мг, 0,87 ммолей) растворяли в растворе 4N HCl в диоксане (10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и растворитель удаляли декантированием. Полученный маслянистый продукт растворяли в диметилформамиде (10 мл) и затем в данном растворе растворяли этилацетимидата гидрохлорид (215 мг, 1,74 ммоля) и триэтиламин (0,42 мл, 3,0 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт наносили на колонку для ODS хроматографии(Fuji Silysia, DM 1020T, 100 г) и проводили элюцию ступенчатым градиентом 1-9% ацетонитрил/0,1N раствор уксусной кислоты. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 120 мг поименованного в заголовке соединения в виде белого порошка.Boc-Tyr(Bzl)-D-Cit-Phe-Me Ala-OBzl (0,77 г, 0,90 ммолей) растворяли в растворе 4N HCl в диоксане (10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли диэтиловый эфир и выпавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в DMF (10 мл), после чего к раствору добавляли 1-(N,N'-бис(бензилоксикарбонил)амидино)пиразол (323 мг, 37 0,86 ммолей) и триэтиламин (0,15 мл, 1,08 ммоля). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. К реакционной смеси добавляли этилацетат (50 мл) и промывали 1N соляной кислотой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным солевым раствором. После высушивания над безводным сульфатом магния растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный маслянистый продукт очищали хроматографией на колонке силикагеля (элюция смесью хлороформ:метанол = 30:1) для получения 0,76 г желаемого соединения в виде бесцветного маслянистого продукта.(2) H2NC(NH)-Tyr(Bzl)-D-Cit-Phe-Me AlaOH Защищенный пептид, полученный как описано выше (1), растворяли в уксусной кислоте (10 мл) и к нему добавляли 0,5 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора и затем проводили каталитическое восстановление в течение 3,5 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте. Раствор лиофилизировали для получения 460 мг поименованного выше соединения в виде белого порошка.Boc-Tyr(Bzl)-D-Cit-Phe-Me Ala-OBzl (8,75 г, 10,3 ммолей) растворяли в растворе 4N HCl в этилацетате (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, добавляли диэтиловый эфир и выпавшие кристаллы собирали фильтрацией. Эти кристаллы растворяли в уксусной кислоте (100 мл) и добавляли 3,0 г 5% Pd-C (содержание воды: 50%) в качестве катализатора и затем проводили каталитическое восстановление в течение 3,5 ч для удаления защитной группы. После удаления катализатора фильтрацией растворитель концентрировали при пониженном давлении и остаток растворяли в 0,1N уксусной кислоте. Этот раствор лиофилизировали для получения белого порошка.H-Tyr-D-Cit-Phe-Me Ala-OH, полученный как описано выше (1), растворяли в диметилформамиде (30 мл) и затем в данном растворе растворяли этилацетимидата гидрохлорид (1,66 г, 13,4 ммолей) и триэтиламин (4,30 мл, 30,8 ммолей). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, дополнитель 001001 38 но добавляли этилацетимидата гидрохлорид(618 мг, 5,00 ммолей) и триэтиламин (0,70 мл,5,00 ммолей) и затем перемешивали дополнительно в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, полученный остаток наносили на колонку для ODS хроматографии (Fuji Silysia, DM 1020T, 500 г) и проводили элюцию ступенчатым градиентом 410% ацетонитрил/0,1N раствор уксусной кислоты. Фракции, содержащие желаемый продукт,собирали и лиофилизировали для получения 4,96 г поименованного в заголовке соединения в виде белого порошка.Ala-OBzl (1,15 г, 2,00 ммоля), этилацетимидата гидрохлорид (494 мг, 4,00 ммоля) и триэтиламин (0,84 мл, 6,00 ммолей), проводили реакции как в примере 35. Полученный сырой продукт наносили на колонку для ODS хроматографии(Fuji Silysia, DM 1020T, 50 г) и проводили элюцию ступенчатым градиентом 10-20% метанола в 0,1N растворе уксусной кислоты. Фракции,содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 527 мг поименованного в заголовке соединения в виде белого порошка.Boc-Tyr(Bzl)-D-Orn(Tfa)-PheMe Ala-OBzl (1,00 г, 1,11 ммолей), этилацетимидата гидрохлорид (247 мг, 2,00 ммоля) и триэтиламин (0,42 мл, 3,00 ммоля), проводили реакции как в примере 35. Полученный сырой продукт наносили на колонку для ODS хроматографии (Fuji Silysia, DM 1020T, 50 г) и проводили элюцию ступенчатым градиентом 20-30% метанола в 0,1N растворе уксусной кислоты. Фракции, содержащие желаемый продукт, собирали и лиофилизировали для получения 115 мг поименованного в заголовке соединения в виде белого порошка.Boc-Tyr(Bzl)-D-Orn(Ac)-PheMe Ala-OBzl (2,10 г, 2,47 ммолей), этилацетимидата гидрохлорид (629 мг, 4,94 ммоля) и триэтиламин (2,06 мл, 14,8 ммолей), проводили реакции как в примере 35. Полученный сырой продукт наносили на колонку для ODS хроматографии (Fuji Silysia, DM 1020T, 100 г) и проводили элюцию ступенчатым градиентом 3-14% ацетонитрила в 0,1N растворе уксусной кислоты. Фракции, содержащие желаемый продукт,собирали и лиофилизировали для получения 620 мг поименованного в заголовке соединения в виде белого порошка.Rf; 0,59 (n-BuOH:АсОН:H2O:пиридин= 15:3:10:12) Примеры тестирования Анальгетическую активность пептидных производных настоящего изобретения оценивали методом стимуляции боли сдавливанием. Основания хвостов мышей подвергали сдавливанию с приростом давления 10 мм ртутного столба в секунду. Величины сдавливания, при которых в поведении мышей появлялись корчи и покусывание места стимуляции, измерялись и использовались как показатель порога болевой реакции. Для экспериментов использовали мышей, которые по предварительным экспериментам отвечали на сдавливание в 40-50 мм ртутного столба. Максимальное стимулирующее давление составляло 100 мм ртутного столба. Анальгетическую активность рассчитывали как процент от максимально возможного эффекта(%МРЕ) в соответствии со следующим равенством: где Ро представляет собой порог болевой реакции перед введением лекарства; Pt представляет собой порог болевой реакции через "t" минут после введения лекарства; и Рс представляет собой максимальное стимулирующее сдавливание. Данные по анальгетической активности,полученные при подкожном введении (в кожу спины) и пероральном введении, представлены в таблице. Таблица Пептидное производное примерПример 2 Пример 4 Пример 7 Пример 9 Пример 10 Пример 12 Пример 16 Пример 17 Пептидные производные настоящего изобретения пригодны для применения при лечении раковых и им подобных болей. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Соединение, представляемое следующей формулой:Y представляет, по меньшей мере, одну из следующих аминокислот: D-лизин, 2-амино-4 метилсульфинилмасляная кислота (=AMSB илиR обозначает C1-6-алкильную группу (предпочтительно метил), R11 обозначает карбокси-С 1-6 алкильную группу, R12 обозначает атом водорода и R13 обозначает атом водорода,или его соль. 2. Соединение или его соль по п.1, в котором R1 представляет собой метильную группу. 3. Соединение или его соль по п.1, в котором R2 представляет собой незамещенную бензильную группу (фенилзамещенный метил). 4. Соединение или его соль по п.1, в котором R10 представляет собой метильную группу. 5. Соединение или его соль по п.1, в котором R11 представляет собой карбоксиметильную группу. 6. Соединение или его соль по п.1, в котором Y представляет собой D-лизин. 7. Соединение или его соль по п.1, в котором Y представляет собой 2-амино-4 метилсульфинилмасляную кислоту. 8. Соединение или его соль по п.1, в котором Y представляет собой 2-амино-3 гуанидинпропионовую кислоту. 9. Соединение или его соль по п.1, в котором Y представляет собой цитруллин. 10. Соединение или его соль по п.1, в котором Y представляет собой D-глутамин. 11. Соединение или его соль по п.1, в котором Y представляет собой D-орнитин. 12. Соль соединения по любому из пп.1-11,которая представляет собой гидрохлорид или ацетат. 13. Лекарственное средство, включающее соединение или его соль по любому из пп.1-12. 14. Обезболивающая фармацевтическая композиция, включающая в качестве активного ингредиента соединение или его соль по любому из пп.1-12. 42 15. Применение соединения или его соли по любому из пп.1-12 для получения обезболивающей фармацевтической композиции по п.14. 16. Способ предупреждения и/или терапевтического лечения боли, который включает стадию введения млекопитающему эффективного количества соединения или его соли по любому из пп.1-12.