Гексапептиды и композиции на их основе

ГЕКСАПЕПТИДЫ И КОМПОЗИЦИИ НА ИХ ОСНОВЕ Настоящее изобретение относится к пептидам формулы Tyr-X1-Gly-Phe-X2-X3, где, если X1 - это Gly или L - Ala, то X2 - это независимо Leu, Met, lle или Val; a X3 - это независимо Asp или Glu; либо,если X1 - это D-Ala и Х 3 - это Asp, то X2 - это независимо Leu, Met, Ile или Val; либо, если X1 - этоD-Ala и X3 - это Glu, то X2 - это независимо Met, lle или Val; а также к композициям на их основе. Петропавлов Игорь Артурович (CH),Помыткин Игорь Анатольевич,Виткалова Тамара Александровна(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ЮНАЙТЕД ТЕКНОЛОДЖИС УТ АГ Область изобретения Изобретение относится к новым гексапептидам и композициям на их основе. В частности, оно относится к композициям для ухода за кожей и дерматологическим композициям, содержащим данные гексапептиды. Предпосылки изобретения Нет никаких опубликованных или обнародованных данных, имеющих отношение к новым гексапептидам общей формулы Tyr-X1-Gly-Phe-X2-X3, где, если X1 - это Gly или L-Ala, то X2 - это независимоLeu, Met, He или Val; a X3 - это независимо Asp или Glu; либо, если X1 - это D-Ala и Х 3 - это Asp, то Х 2 это независимо Leu, Met, Ile или Val; либо их производных или солей; так же как и данных, имеющих отношение к применению данных пептидов в качестве ингредиентов в составе композиций для ухода за кожей и дерматологических композиций. Неочевидным из уровня техники образом нами было обнаружено, что при наружном нанесении на кожу данные пептиды способствуют улучшению микроциркуляции крови в сосудах кожи, особенно стареющей кожи. Цель изобретения - предложить данные новые пептиды и композиции на их основе для фармакологии и дерматологии. Подробное описание изобретения Настоящее изобретение предлагает пептид, характеризующийся общей формулой (I)Asp или Glu; либо, если X1 - это D-Ala и X3 - это Asp, то X2 - это независимо Leu, Met, Ile или Val; либо,если X1 - это D-Ala и X3 - это Glu, то X2 - это независимо Met, Ile или Val. В настоящем документе термин "пептид" означает последовательность из шести аминокислотных остатков, при этом заявленные аминокислоты могут быть в L- или D-форме. В предпочтительных вариантах исполнения настоящего изобретения аминокислоты представлены в L-форме. В некоторых вариантах исполнения настоящего изобретения аланин может быть как в L-, так и в D-форме. В предпочтительных вариантах практического воплощения настоящего изобретения пептид,имеющий общую формулу (I), выбирается из группы, состоящей из-1 019154 Далее, настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, характеризующуюся тем, что содержит пептид, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, настоящее изобретение предлагает композицию для ухода за кожей, характеризующуюся тем, что содержит пептид, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из и дерматологически приемлемый носитель. Далее, настоящее изобретение предлагает дерматологическую композицию, характеризующуюся тем, что содержит пептид, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из и дерматологически приемлемый носитель. В данном документе термин "композиция для ухода за кожей" означает композицию для наружного нанесения на кожу человека для улучшения внешнего вида и состояния кожных покровов. В данном отношении термин "кожа/кожные покровы" подразумевает все кожные покровы или любой участок кожи,в том числе волосы, ногти и т.д. В данном документе термин "дерматологическая композиция" означает фармацевтическую композицию, разработанную для кожного применения, например для нанесения на участок кожи, пораженный кожным заболеванием или воспалением. К примерам таких заболеваний и состояний относятся сниженная упругость кожи, сниженная плотность кожи, потеря естественной влажности кожи, сухость кожи,кожный зуд, фурункулы, угри, морщины, лентигиноз, возрастные (старческие) пятна, меланоз кожи, гиперпигментация, гиперкератотические образования на коже, атрофия кожи, сенильная пурпура, псориаз,экзема, воспалительный дерматоз, сосудистые "звездочки" (паукообразные вены), кератозы, а также ломкие волосы и ногти. К другим заболеваниям кожи, лечение которых возможно с использованием композиции настоящего изобретения, относятся заболевания, описанные у Фридберга и соавторовGeneral Medicine (6th Edition, 2003, Кердель и соавт. (Kerdel, et al.) "Лечение дерматологических заболеваний" (Dermatologic Therapeutics (2005, а также в Hardman et al., GoodmanGilman's: "Фармакологические основы терапии", 10-е изд., 2001 г. (The Pharmacological Basis of Therapeutics (10th Edition,2001. Содержание пептидов в настоящем изобретении варьируется от 0,00001 до 10%, предпочтительно от 0,0001 до 0,1% относительно веса всей композиции. В настоящем документе термин "дерматологически приемлемый носитель" означает один или более жидкий, полутвердый или твердый растворитель, подходящий для нанесения на любые участки кожного покрова человека и совместимый с пептидами общей формулы (I), а также другими активными действующими веществами и дополнительными ингредиентами настоящего изобретения. Примеры таких носителей включают в себя (но не ограничиваются лишь ими) дистиллированную или деионизированную воду, пропиленгликоль, глицерол, а также масло. Композиции настоящего изобретения могут использоваться для регулирования состояния кожи, видимых или ощутимых нарушений целостности кожного покрова (особенно поверхности кожи; такие нарушения обычно нежелательны). Такие нарушения могут быть вызваны или являться следствием воздействия внутренних и/или внешних факторов, они включают в себя признаки старения кожи, описанные в-2 019154 данном документе. Термин "регулирование состояния кожи" включает в себя профилактическое регулирование и/или терапевтическое регулирование состояния кожи, в том числе видимых и/или ощутимых нарушений целостности кожного покрова. В настоящем документе "профилактическое регулирование состояния кожи" подразумевает замедление, минимизирование и/или предотвращение появлений видимых и/или ощутимых нарушений целостности кожного покрова. В настоящем документе под терапевтическим регулированием состояния кожи подразумевается улучшение состояния кожи, например сокращение, минимизирование и/или сглаживание нарушений целостности кожного покрова. К регулированию состояния кожного покрова относится улучшение как внешнего вида, так и ощущения кожи. Кроме того, композиции настоящего изобретения особенно полезны для лечения акне, а также других кожных заболеваний и воспалений. Композиции настоящего изобретения особенно подходят для воздействия на признаки старения кожи, особенно на видимые или ощутимые нарушения целостности кожного покрова, связанные со старением. "Воздействие на признаки старения кожи" включает в себя профилактическое воздействие и/или терапевтическое воздействие на один или большее количество таких признаков (аналогичным образом,воздействие на данный определенный признак старения кожи, например на складки, морщины, поры,включает в себя профилактическое и/или терапевтическое воздействия на данный признак). В настоящем документе "профилактическое воздействие" на такие признаки включает в себя замедление, минимизирование и/или предотвращение появлений признаков старения кожи. В настоящем документе "терапевтическое воздействие" на такие признаки включает в себя улучшение состояния кожи, например, ослабление, минимизирование и/или сглаживание признаков старения кожи."Признаки старения кожи" включают в себя, но не ограничиваются лишь ими, все внешние видимые и ощутимые тактильно проявления, также как и другие макро- и микропоследствия старения кожи. Такие признаки могут быть вызваны или являться следствием воздействия внутренних или внешних факторов, например возрастного (хронологического) старения и/или воздействия окружающей среды. Данные признаки могут являться следствием (но не ограничиваться лишь ими) таких процессов, как развитие структурных нарушений, например морщин, как тонких и мелких поверхностных, так и крупных глубоких морщин, кожных линий и складок, трещин, неровностей, бугров, крупных пор (например, связанных с придаточными структурами, такими как протоки потовых желез, сальные железы и волосяные фолликулы), шероховатости, слоистости и/или других форм проявления неровностей кожи, потери эластичности кожи (потеря и/или инактивация эластина кожи), провисания (в том числе отечность в области глаз и двойного подбородка), потери твердости кожи, потери плотности, потери упругости при деформации, изменения цвета (в том числе круги под глазами), появления пятен, желтоватой окраски, гиперпигментированных участков кожи, как, например, возрастных (старческих) пятен и лентиго, кератоза, атипичной дифференцировки, гиперкератоза, эластоза, разрыва коллагена, а также других гистологических изменений в роговом слое, дерме, эпидерме и кожной сосудистой системе (например, телеангиэктазия или сосудистые "звездочки"), а также нижележащих тканей, особенно расположенных близко к коже. Композиции настоящего изобретения могут содержать дополнительные ингредиенты. Такие дополнительные ингредиенты обычно используются индивидуально в объеме от 0,0005 до 10,0%, предпочтительно от 0,0005 до примерно 1,0% относительно веса всей композиции. Примерами подходящих дополнительных ингредиентов являются (но не ограничиваются лишь ими) вещества, способствующие депигментации; увлажнители; бактерицидные (например, антибактериальные) вещества; противоугревые вещества; вещества, замедляющие процессы старения; вещества,препятствующие появлению морщин, антисептические средства; местные анестетики; вещества, способствующие заживлению ран; дезодоранты и антиперспиранты; средства для увлажнения и смягчения кожи; компоненты, способствующие загару; отбеливающие вещества; противогрибковые вещества; средства для депиляции; обезболивающие вещества для наружного применения; вещества, снимающие раздражение; средства для предотвращения опрелостей; средства макияжа; витамины и питательные вещества,такие как тиамин, рибофлавин, ниацин, пантотенаты, пиридоксин, фолиевая кислота, кобаламин, биотин,холин, инозитол, аскорбиновая кислота, липоевая кислота, карнитин и т.д.; аминокислоты и их производные, такие как аланин, аргинин, аспарагин, аспарагиновая кислота, карнитин, цитруллин, цистеин,диметилглицин, гамма-аминомасляная кислота, глутаминовая кислота, глутамин, глутатион, глицин, гистидин, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, орнитин, фенилаланин, пролин, серин, таурин, треонин,триптофан, тирозин, валин; минеральные элементы, такие как бор, кальций, хром, кобальт, медь, фтор,германий, йод, железо, литий, магний, марганец, молибден, фосфор, калий, селен, кремний, натрий, сера,ванадий, цинк; растительные экстракты; ретиноиды; биофлавоноиды; антиоксиданты; вещества, обладающие свойствами кондиционера для кожи; осветлители для волос; хелатирующие агенты; усилители обновления клеток; красители; а также смесь вышеперечисленных компонентов. Примерами подходящих увлажнителей являются (но не ограничиваются лишь ими) водорастворимые жидкие многоатомные спирты (полиолы) из группы, в которую входят глицерин, пропиленгликоль,гексиленгликоль, бутиленгликоль, пентиленгликоль, дипропиленгликоль, а также их смеси. К подходящим аминокислотам относятся аминокислоты, полученные в результате гидролиза различных белков, так же как и их соли, эфиры и ацилпроизводные. Примерами таких аминокислот могут-3 019154 являться амфотерные аминокислоты, такие как алкиламидоалкиламины, например стеарил ацетил глутамат, каприлоил аминокислоты шелка, каприлоил аминокислоты коллагена; каприлоил аминокислоты кератина; каприлоил аминокислоты зеленого горошка; кокодимониум гидроксипропил аминокислоты шелка; аминокислоты кукурузного глютена; цистеин; глутаминовая кислота; глицин; аминокислоты кератина волос; аминокислоты волос, такие как аспарагиновая кислота, треонин, серин, глутаминовая кислота, глицин, аланин, полуцистеин, валин, метионин, изолейцин, лейцин, тирозин, фенилаланин, цистеиновая кислота, лизин, гистидин, аргинин, цистеин, триптофан, цитруллин; лизин; аминокислоты шелка, аминокислоты пшеницы; а также смесь вышеперечисленных веществ. Примерами подходящих протеинов являются (но не ограничиваются лишь ими) коллаген, дезоксирибонуклеаза, йодированный белок кукурузного зерна; кератин; молочный протеин; протеаза; сывороточный протеин; шелк; протеины сладкого миндаля; протеины пшеничных зародышей; протеины пшеницы; протеины пшеницы, альфа- и бета-спирали протеинов кератина; протеины волос, такие как белки промежуточных филаментов, протеины с высоким содержанием серы, протеины со сверхвысоким содержанием серы, примесные белки промежуточных филаментов, протеины с высоким содержанием тирозина, протеины с высоким содержанием глицина и тирозина, трихогиалин, богатые аргинином пептиды, такие как олигоаргинины (Apr)8, либо смесь вышеперечисленных веществ. Примеры подходящих антиперспирантов и дезодорантов включают в себя (но не ограничиваются лишь ими) хлоргидраты алюминия, хлоргидраты алюминия и циркония, а также смеси вышеперечисленных веществ. Примеры подходящих снимающих раздражение средств включают в себя (но не ограничиваются лишь ими) камфору, ментол, метилсалицилат, мятное и гвоздичное масло, ихтаммол, а также смеси вышеперечисленных веществ. Примеры подходящих замедляющих процессы старения веществ включают в себя (но не ограничиваются лишь ими) ретиноиды; такие витамины, как витамин С, витамин В и их производные; антиоксиданты, в том числе кислоты, такие как гликолевая кислота, лимонная кислота, молочная кислота, яблочная кислота, миндальная кислота, аскорбиновая кислота, альфа-гидроксимасляная кислота, альфагидроксиизомасляная кислота, альфа-гидроксиизокапроновая кислота, атролактиновая кислота, альфагидроксиизовалериановая кислота, этилпируват, галактуроновая кислота, глюкогептоновая кислота, 1,4 лактон глюкогептоновой кислоты, глюконовая кислота, глюконолактон, глюкуроновая кислота, глюкуронолактон, гликолевая кислота, изопропилпируват, метилпируват, муциновая кислота, пировиноградная кислота, сахарная кислота, 1,4-лактон сахарной кислоты, винная кислота и тартроновая кислота; янтарная кислота или ее соли; кислоты, такие как бета-гидроксимасляная кислота, бета-фенилмолочная кислота, бета-фенилпировиноградная кислота; растительные экстракты, такие как экстракт зеленого чая, сои,молочного чертополоха (расторопши), морских водорослей, алоэ, дудника, горького апельсина, кофе,коптиса (золотая нить), грейпфрута, трутового гриба, жимолости, кукушкиных слез (слез Иовы), литоспермума (воробейника), шелковицы (тутовой ягоды), пиона, пуэрарии, риса, сафлора, либо смеси вышеперечисленных экстрактов. Примеры подходящих веществ для депигментации включают в себя (но не ограничиваются лишь ими) гидрохинон и его производные; витамины, такие как ниацин, витамин С и его производные; экстракты, такие как экстракт ромашки лекарственной и зеленого чая, а также их смеси. Примеры подходящих отбеливающих кожу компонентов включают в себя (но не ограничиваются лишь ими) гидрохинон, катехол и его производные, аскорбиновую кислоту и ее производные, а также смесь вышеперечисленных веществ. Композиции настоящего изобретения получают с использованием общеизвестных процедур. К таким процедурам относятся (но не ограничиваются лишь ими) смешивание пептидов настоящего изобретения с другими ингредиентами композиции традиционным методом. Руководство по приготовлению косметических и дерматологических композиций данного изобретения можно найти в следующем справочнике: Ремингтон: "Наука и практика фармацевтики, 20-е изд. (Remington: "The science and practice ofBoylan, Marcel Dekker, Inc., New York, 1988 ISBN 0-8247-2800-9 или в более свежей редакции). Как хорошо известно квалифицированным лицам, к характерным добавкам к дерматологическим композициям относятся (но не ограничиваются лишь ими) мазевые основы, растворители, буферные вещества, вещества для поддержания уровня pH, консерванты, увлажнители (влагоудерживающие вещества), хелатирующие агенты, антиоксиданты, стабилизаторы, эмульгаторы, суспендирующие компоненты, гелеобразующие компоненты, ароматизирующие вещества, а также средства для защиты кожи. Композиции настоящего изобретения могут быть представлены в виде различных форм. К этим формам относятся, но не ограничиваются лишь ими, лосьоны, гели, кремы, спреи и растворы. Композиции настоящего изобретения могут применяться для регенерации поврежденных волос и стимуляции роста волос. Кроме того, композиции настоящего изобретения особенно полезны для улучшения состояния и внешнего вида ногтей, усиления роста и регенерации ногтей, для придания ногтям силы и гибкости, а также для устранения проблем, связанных с ногтями, таких как изменение формы и-4 019154 текстуры ногтевой пластины, утолщение ногтей, хрупкость и ломкость ногтей. Композиции настоящего изобретения особенно полезны для воздействия на локальные жировые отложения, в том числе целлюлит. Термин "локальные жировые отложения" означает области избыточного кожного сала, например целлюлита, а также избыток жировой ткани. Термин "целлюлит" означает отложения жировой ткани, которые обычно не реагируют на соблюдение диеты и физические упражнения. Целлюлит - это не единственное косметическое заболевание, встречающееся у женщин. Стрии (растяжки) - это еще один косметический дефект, который встречается не только у женщин, но также и у мужчин. В изобретении предлагается метод ухода за кожей, включающий этап нанесения эффективного количества композиции настоящего изобретения на кожу, волосы или ногти. Согласно методу, описанному в настоящем изобретении, эффективное количество композиции наносится на кожу, после чего его желательно оставить на коже в течение не менее 15 мин, более предпочтительно в течение около 30 мин, а еще более предпочтительнее примерно в течение 1 ч, наиболее предпочтительно на несколько часов, например до 12 ч. Данный метод можно повторять от 1 до 5, предпочтительнее 1-3 раза в день. Обычно эффективное количество композиции составляет от 1 до примерно 100 г, предпочтительно от 1 до примерно 20 г. В изобретении предлагается метод дерматологического ухода/лечения, включающий этап нанесения эффективного количества композиции данного изобретения на кожу. Согласно методу, описанному в изобретении, эффективное количество композиции наносится на кожу, после чего его желательно оставить на коже в течение не менее 15 мин, более предпочтительно в течение около 30 мин, а еще предпочтительнее примерно в течение 1 ч, наиболее предпочтительно на несколько часов, например до 12 ч. Данный метод можно повторять от 1 до 5, предпочтительнее 1-3 раза в день. Обычно эффективное количество композиции составляет от 1 до примерно 100 г, предпочтительно от 1 до примерно 20 г. Композиции настоящего изобретения обычно разрабатываются так, что pH композиции составляет от 4,5 до 9,5, более предпочтительно примерно от 5 до 8,5. Пептиды могут быть получены методом твердофазного пептидного синтеза (ТПС). В предпочтительном варианте исполнения настоящего изобретения, согласно методу ТПС, защищенные аминокислоты в органических растворителях добавляют к связанной смолой пептидной цепи, что в результате ведет к получению целевого пептида с определенной заданной последовательностью в полностью защищенной связанной смолой форме. После этого готовый пептид может быть выделен путем снятия защитных групп и отщепления от полимерного носителя. Такой синтез может проводиться с использованием как неавтоматизированного, так и автоматизированного методов. Для демонстрации изобретения приводятся следующие примеры. Примеры являются только показательными, они никоим образом не должны ограничивать масштаб изобретения. Пример 1. Данный пример демонстрирует получение пептидов настоящего изобретения и их противовоспалительную активность. Пептиды с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: с 1 по 23 были получены методом твердофазного пептидного синтеза (ТПС), используя классическую Fmoc процедуру (J.Biol.Chem. 271,29537-44, 1996), с использованием автоматического пептидного синтезатора (Applied Biosystems 430APeptide Synthesizer) по инструкции, приведенной в руководстве по эксплуатации, предоставляемой поставщиком. Пептиды выделялись в форме ацетатов со средней чистотой 90%. Противовоспалительная активность пептидов SEQ ID NO: 1-23 тестировалась in vitro. На культуре кератиноцитов человека оценивалась эффективность пептидов подавлять продукцию клетками провоспалительного цитокина интерлейкина-1 в ответ на стимуляцию интерлейкином-1 бета. Стимуляция кератиноцитов 0,5 мкг/л интерлейкина- в течение 48 ч приводит к 55-кратному увеличению выброса клетками провоспалительного цитокина интерлейкина-1 (1,400 мкг/л по сравнению с 0,024 мкг/л в контроле), что характеризует развивающийся воспалительный процесс. Дополнительное введение в среду инкубации пептидов в концентрации 7 мг/л привело к достоверному снижению стимулированной продукции интерлейкина-1 клетками до уровней, не превышающих 0,300 мкг/л, для всех исследованных пептидовSEQ ID NO: 1-23. Таким образом, пептиды настоящего изобретения обладают выраженными противовоспалительными свойствами, что делает их полезными в составе фармацевтических и дерматологических композиций. Пример 2. Данный пример демонстрирует композицию в форме геля для ухода за кожей. Приготовление геля: пептид смешивается с вышеперечисленными ингредиентами традиционным методом для получения геля для ухода за кожей. Метод ухода за кожей с использованием геля: 1 мл вышеупомянутого геля нанести на кожу лица,желательно оставить на коже в течение не менее 15 мин. Пример 3. Данный пример демонстрирует фармацевтическую дерматологическую композицию в форме геля. Приготовление геля: пептид смешивают с вышеперечисленными ингредиентами традиционным методом для получения дерматологической композиции в форме геля. Метод лечения кожи с использованием геля: 1 мл вышеупомянутого геля нанести на кожу лица,желательно оставить на коже в течение не менее 15 мин. Пример 4. Данный пример демонстрирует эффективность наружной композиции, содержащей пептид SEQ IDNO: 3, в качестве средства по уходу за кожей. Композицию, содержащую 0,02% гексапептида с последовательностью аминокислот SEQ ID NO: 3,наносили на область под глазами волонтеров с характерными темными кругами (n=19, женщины, средний возраст 45,610,9 лет) два раза в день, в течение четырех недель. Эффективность увлажения кожи оценивали при помощи прибора Corneometr CM825. Уровень увлажнения кожи после четырех недель применения достоверно вырос на 22% (р 0,01). Визуальная оценка фотографий волонтеров, выполненная при помощи устройства Visioface Quick, показала уменьшение темных кругов под глазами у 58% волонтеров. Таким образом, наружная композиция, содержащая пептид настоящего изобретения, эффективна в улучшении увлажнения кожи и улучшении внешнего вида кожи. Пример 5. Данный пример демонстрирует эффективность наружной дерматологической композиции, содержащей пептид SEQ ID NO:3, в качестве средства для уменьшения последствий солнечного ожога. Композицию, содержащую 0,02% гексапептида с последовательностью аминокислот SEQ ID NO: 3,или плацебо, наносили на покрасневшую и отечную область кожи спины, подвергшейся солнечному ожогу, волонтерам (n=6, мужчины, средний возраст 4112 лет). Эффективность оценивали по времени,необходимому для снятия симптомов ожога. Среднее время снятия симптомов ожога в группе, использовавшей композицию, содержащую пептид, было в 2,1 раза быстрее, чем в группе, получавшей плацебо. Таким образом, дерматологическая композиция, содержащая пептид настоящего изобретения, эффективна для уменьшения последствий солнечного ожога. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Пептид, характеризующийся общей формулой (I) 3. Фармацевтическая композиция, включающая пептид, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из: SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 12,SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 23; и фармацевтически приемлемый носитель. 4. Композиция для ухода за кожей, включающая пептид, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из: SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 9, SEQ ID