Комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином, способ его получения и применения
Номер патента: 20784
Опубликовано: 30.01.2015
Авторы: Ян Циньгунь, У Сун, Ли Вэй, Ци Янь, Гуан Хунмей, Ван Юэхуа, Тун Юаньфэн, Ду Гуаньхуа, Гао Мэй
Формула / Реферат
1. Комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным, содержащий пиноцембрин и циклодекстрин или его производное, причем мольное отношение пиноцембрина к циклодекстрину или его производному составляет 1:1-1:100; и указанный циклодекстрин или его производное выбраны из группы, состоящей из α-циклодекстрина, β-циклодекстрина, γ-циклодекстрина, гидроксиэтил-β-циклодекстрина, диметил-β-циклодекстрина, гидроксипропил-β-циклодекстрина, дигидроксипропил-β-циклодекстрина, метил-β-циклодекстрина, циклодекстрина на основе глюкозы, циклодекстрина на основе мальтозы, циклодекстрина на основе мальтотриозы, карбоксиметилциклодекстрина, сульфобутилциклодекстрина, сульфобутилового эфира β-циклодекстрина и любой комбинации этих соединений.
2. Комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным по п.1, в котором мольное отношение пиноцембрина к циклодекстрину или его производному составляет 1:1-1:10.
3. Комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным по п.1, в котором указанный пиноцембрин выбран из группы, состоящей из L-пиноцембрина, S-пиноцембрина, рацемического пиноцембрина или любой их комбинации.
4. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным по любому из пп.1-3 и, возможно, фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
5. Фармацевтическая композиция по п.4, которая вводится орально или с использованием внутривенной, внутримышечной, внутрибрюшинной или подкожной инъекции.
6. Фармацевтическая композиция по п.4, которая находится в виде препарата для трансфузии, препарата для инъекции, порошка для инъекции, орального раствора, сиропа, таблетки, капсулы, гранулы, диспергируемой таблетки, орально распадающейся таблетки, буккальной таблетки.
7. Фармацевтическая композиция по любому из пп.4-6, которая находится в виде препарата для инъекции на основе комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропил-β-циклодекстрином, имеющего концентрацию 0,01-3% (г/мл).
8. Фармацевтическая композиция по любому из пп.4-6, которая находится в виде порошка для инъекции на основе комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропил-β-циклодекстрином, и раствор, в котором указанный порошок для инъекции растворяется, имеет величину рН 3-10.
9. Способ получения комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным по любому из пп.1-3, включающий стадии (1) добавления циклодекстрина или его производного в растворитель с получением раствора или суспензии циклодекстрина или его производного с весовой концентрацией 1-60%; (2) добавления пиноцембрина к указанному раствору или суспензии и смешения при перемешивании или измельчении с получением указанного комплекса включения; и, возможно, (3) удаления растворителя из смеси комплекса включения, полученной на стадии (2).
10. Способ по п.9, в котором растворитель выбран из группы, состоящей из воды, этанола, метанола, пропанола, изопропанола, этиленгликоля, глицерина, ацетона или любой их комбинации.
11. Применение комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным по любому из пп.1-3 или фармацевтической композиции по любому из пп.4-8 для приготовления фармацевтического лекарства для профилактики и/или лечения болезни или расстройства.
12. Применение по п.11, где указанные болезнь или расстройство представляют собой сердечно-сосудистое или цереброваскулярное заболевание, или церебральный инсульт, или бактериальную и/или грибковую инфекцию.
Текст
КОМПЛЕКС ВКЛЮЧЕНИЯ ПИНОЦЕМБРИНА С ЦИКЛОДЕКСТРИНОМ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ Заявляется комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным,содержащий пиноцембрин и циклодекстрин или его производное, причем мольное отношение пиноцембрина к циклодекстрину или его производному составляет 1:1-1:100; и указанный циклодекстрин или его производное выбраны из группы, состоящей из циклодекстрина, -циклодекстрина, -циклодекстрина, гидроксиэтилциклодекстрина, диметил-циклодекстрина, гидроксипропилциклодекстрина, дигидроксипропилциклодекстрина,метилциклодекстрина, циклодекстрина на основе глюкозы, циклодекстрина на основе мальтозы, циклодекстрина на основе мальтотриозы, карбоксиметилциклодекстрина,сульфобутилциклодекстрина, сульфобутилового эфира -циклодекстрина и любой комбинации этих соединений.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: СиЭсПиСи ЧЖУНЦИ ФАРМАСЬЮТИКЛ ТЕКНОЛОДЖИ(ШИЦЯЧЖУАН) КО., ЛТД.; ИНСТИТЬЮТ ОВ МЭТИРИЭ МЕДИКЭ, ЧАЙНИЗ ЭКЭДЭМИ ОВ МЕДИКЛ САЙЭНСИЗ (CN) Область техники, к которой относится изобретение Данное изобретение относится к комплексу включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным, к способу его получения, к фармацевтической композиции, содержащей указанный комплекс, и к применению указанного комплекса или указанной фармацевтической композиции. Предпосылки создания изобретения Пиноцембрин, известный как 5,7-дигидроксифлаванон или 2,3-дигидро-5,7-дигидрокси-2-фенил 4 Н-1-бензопиран-4-он, представляет собой нерастворимое в воде флавононовое соединение следующей формулы: В структуре пиноцембрина имеется один хиральный центр, а природный пиноцембрин имеет Sконфигурацию с []D15, равным -45,3 (с, 0,9, ацетон в качестве растворителя).(S)-пиноцембрин представляет собой природный продукт, экстрагированный из прополиса. Он также находится в небольших концентрациях в кедровых деревьях, листьях эвкалипта, смоле акации и т.п. (Combined Chemical Dictionary, 2004). В настоящее время пиноцембрин может быть получен путем синтеза и, следовательно, в большом количестве (Yonghao Cheng, Yabo Duan, Yan Qi, Xiaoyun Guo, Yuanfeng Tong, Guanhua Du, Song Wu, chemical reagent, 2006, vol. 28, No. 7:437). В литературе сообщается, что пиноцембрин чувствителен ко многим опасным бактериям и грибкам и проявляет довольно хорошее антибактериальное действие, особенно, в случае штаммов, стойких к лекарствам (Hyun Koo, Pedro L. Rosalen, Jaime A. Cury, Yong K. Park, and William H. Bowen, Antimicrob.AgentsChemother. 2002, 46 (5), 1302-1309). В заявке CN 200410037860.9 указано, что левопиноцембрин обладает эффективным действием при церебральном инсульте. Пиноцембрин обладает низкой оральной биодоступностью вследствие его нерастворимости в воде и его довольно низкой оральной абсорбции. Более того, трудно сделать его инъекцию из-за его нерастворимости в воде. Поскольку для лечения заболеваний в острой форме, таких как церебральный инсульт,требуются фармацевтические составы, быстро высвобождающие активные агенты и быстро проявляющие свое действие, наиболее распространенным клиническим способом лечения острого заболевания является внутривенная инъекция. Следовательно, проблема растворимости пиноцембрина должна быть решена первой для того, чтобы получить лекарственные формы для инъекции. Поэтому необходимо приготовить фармацевтические составы на основе пиноцембрина с хорошей растворимостью в воде. Сущность изобретения Изобретатели данного изобретения неожиданно обнаружили, что растворимость пиноцембрина в воде может быть значительно повышена при применении циклодекстрина или его производного для образования комплекса включения пиноцембрина. Следовательно, данное изобретение предусматривает комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным. Комплекс включения содержит пиноцембрин и циклодекстрин или его производное в любом отношении. Предпочтительно, чтобы мольное отношение пиноцембрина к циклодекстрину или его производному находилось в интервале от 1:1 до примерно 1:100 и более предпочтительно в интервале от 1:1 до примерно 1:10. Согласно другому аспекту данное изобретение предусматривает способ получения комплекса включения пиноцембрина и циклодекстрина или его производного. Данное изобретение относится также к фармацевтической композиции, содержащей указанный комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным и, возможно, фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. Настоящее изобретение предусматривает также применение комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным или фармацевтической композиции, содержащей этот комплекс включения для профилактики и/или лечения болезни или расстройства у субъекта. В соответствии с одним из вариантов указанная болезнь представляет собой сердечно-сосудистое или церебральноваскулярное заболевание, или церебральный инсульт, или бактериальную и/или грибковую инфекцию. Описание фигур На фиг. 1 показана типичная картина гистопатологии уха кролика, куда была сделана инъекция физиологического раствора (изотонического раствора хлорида натрия) (окрашивание НЕ). Как показано на фигуре, имеется гладкая внутренняя оболочка вены без воспалительного ответа на периферии кровеносного сосуда. На фиг. 2 показана типичная картина гистопатологии уха кролика, куда была сделана инъекция комплекса включения пиноцембрина (окрашивание НЕ). Как показано на фигуре, имеется гладкая внутренняя оболочка вены без воспалительного ответа на периферии кровеносного сосуда. На фиг. 3 показано влияние DL0108 (комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропил-циклодекстрином) на величину показателя по шкале Бедерсона у крыс после операции по перманентной закупорке средней артерии головного мозга (после МСАО). Фиг. 4 отражает влияние DL0108 на показатель по шкале неврологических симптомов (NSS) у животных после МСАО. На фиг. 5 показана величина rCBF (регионального церебрального кровотока) в области кортикальных артерий среднего размера, снабжающих мозг артериальной кровью, в разное время после МСАО (А) и влияние DL0108 на величину cCBF у крыс после МСАО (В). Данные на фиг. 3-5 выражены в виде средних значенийS.E.M. Результаты проанализированы методом однонаправленного анализа вариантности ANOVA и методом Дюнетта. N = 10,Р 0,01, данные для холостой контрольной группыР 0,05,Р 0,01 и данные для контрольной группы, которой вводили носитель. Подробное описание данного изобретения Согласно одному из аспектов данное изобретение предусматривает комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным, при этом указанный комплекс включения содержит пиноцембрин и циклодекстрин или его производное, мольное отношение пиноцембрина к циклодекстрину или его производному находилось в интервале от 1:1 до 1:100, предпочтительно от 1:1 до 1:10. В соответствии с данным изобретением термин "пиноцембрин" включает L-пиноцембрин, Sпиноцембрин, рацемический пиноцембрин, а также их любую комбинацию. Пиноцембрин может быть также получен из природных источников или путем химического синтеза. Согласно настоящему изобретению циклодекстрин и его производное могут быть выбраны из группы, состоящей из -циклодекстрина, -циклодекстрина, -циклодекстрина и их производных, содержащих различные замещающие группы, включая, но без ограничения, гидроксиэтилциклодекстрин, диметилциклодекстрин, гидроксипропилциклодекстрин, дигидроксипропилциклодекстрин, метил-циклодекстрин, циклодекстрин на основе глюкозы, циклодекстрин на основе мальтозы, циклодекстрин на основе мальтотриозы, карбоксиметилциклодекстрин, сульфобутилциклодекстрин, сульфобутиловый эфир -циклодекстрина и любой их комбинации. Согласно одному из вариантов указанные циклодекстрин и его производное представляет собой -циклодекстрин или гидроксипропилциклодекстрин. В соответствии с другим аспектом указанный циклодекстрин или его производное представляет собой диметилциклодекстрин, гидроксипропилциклодекстрин, сульфобутиловый эфир -циклодекстрина,гидроксиэтилциклодекстрин и любую их комбинацию. Согласно данному изобретению комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным может быть в жидкой или твердой форме или даже в полутвердой форме, что зависит от требований к лекарственной форме или от цели лечения. В соответствии с другим аспектом данное изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую эффективное количество указанного комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным и, возможно, фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. Стандартная дозированная форма фармацевтической композиции содержит 1-1000 мг, предпочтительно 50-250 мг активного агента пиноцембрина. Комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным может быть получен в виде соответствующих фармацевтических форм для млекопитающих, особенно для человека, способами, хорошо известными специалистам. Фармацевтическая композиция может быть введена различными путями, такими как оральное введение и внутривенная, внутримышечная, внутрибрюшинная или подкожная инъекции. Фармацевтическая композиция может быть получена в виде жидкой лекарственной формы, такой как раствор для инъекции (включая раствор для трансфузии, водный раствор для инъекции и порошок для инъекции), оральный раствор и сироп, с использованием указанного комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным в жидком виде; фармацевтическая композиция может быть получена в виде твердой лекарственной формы, такой как таблетка, капсула, гранула, диспергируемая таблетка, оральная распадающаяся таблетка и т.п., с использованием указанного комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным в твердой форме. Предпочтительная жидкая лекарственная форма включает препарат комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным для инъекции, такой как его водный раствор для инъекции. По одному из вариантов указанный водный раствор для инъекции имеет концентрацию 0,01-2 020784 3% (г/мл) и величина рН раствора равна 3-10, предпочтительно 4-9, более предпочтительно 5-8 и особенно 6-8; водный раствор для инъекции может также содержать агент, регулирующий осмотическое давление, такой как хлорид натрия и глюкоза, и агент, регулирующий величину рН, такой как соляная кислота и гидроокись натрия. Указанный препарат для инъекции может быть в виде порошка для инъекции. По одному из вариантов раствор, в котором растворяется порошок для инъекции, имеет величину рН 3-10; указанный порошок для инъекции может также содержать носитель, такой как маннит и лактоза, и агент, регулирующий величину рН, такой как соляная кислота и гидроокись натрия. Согласно другому аспекту данное изобретение предусматривает способ получения указанного комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным, включающий стадии добавления циклодекстрина или его производного в растворитель или носитель с целью получения раствора или суспензии циклодекстрина или его производного с весовой концентрацией 1-60%, предпочтительно 5-60%; добавление пиноцембрина к указанному раствору или суспензии; и смешения путем перемешивания или размалывания с целью получения указанного жидкого комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным. Жидкий комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным может быть в виде раствора или суспензии; раствор комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным может быть получен путем перемешивания до получения чистого и прозрачного препарата. Твердый комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным получают путем удаления растворителя из раствора комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным, например, путем лиофилизации, сушки с распылением или путем концентрации при отгонке растворителя. При осуществлении способа получения твердого комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным раствор комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным может быть вначале сконцентрирован до концентрации циклодекстрина или его производного в пределах 10-15 вес.% и затем его подвергают лиофилизации для получения твердого комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным. Согласно одному из вариантов данного изобретения твердый комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным может быть получен путем добавления циклодекстрина или его производного в коллоидную мельницу или в ступку, добавления нужного количества растворителя и перемешивания с получением пасты, добавления пиноцембрина к указанной пасте, измельчения в течение 1-5 ч с получением вязкой пасты и последующей фильтрации, концентрирования или лиофилизации. Подходящий растворитель, способный растворять циклодекстрин или его производное, выбирают из группы, состоящей из воды, этанола, метанола, пропанола, изопропанола, этиленгликоля, глицерина,ацетона или любой их комбинации. Предпочтительно, если растворитель представляет собой воду. При осуществлении описанных выше способов указанный пиноцембрин может быть добавлен в твердом виде или в виде раствора пиноцембрина, растворенного в соответствующем количестве органического растворителя. Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к применению комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным для приготовления фармацевтического препарата для профилактики и/или лечения болезни или расстройства. По одному из вариантов указанные болезнь или расстройство представляют собой сердечнососудистое или церебрально-васкулярное заболевание. Согласно предпочтительному варианту указанные сердечно-сосудистое или церебрально-васкулярное заболевание является церебральным инсультом. Согласно другому варианту указанное заболевание или расстройство представляет собой бактериальную и/или грибковую инфекцию. Кроме того, данное изобретение предусматривает способ профилактики и/или лечения болезни или расстройства у субъекта, который включает введение эффективного количества фармацевтической композиции субъекту, который нуждается в этом. Такой субъект может быть млекопитающим, таким как кошка, собака, лошадь, овца, домашний скот, обезьяна, орангутанг и т.п., предпочтительным субъектом является человек. По одному из вариантов указанные болезнь или расстройство представляют собой сердечнососудистое или церебрально-васкулярное заболевание, особенно церебральный инсульт. По другому варианту указанное заболевание или расстройство представляет собой бактериальную и/или грибковую инфекцию. Что касается эффективного количества фармацевтической композиции по изобретению, то его легко определить специалисту в данной области обычным методом, например, это количество может быть равно 0,001-10 мг/кг веса субъекта. Кроме того, выбирается подходящий путь введения указанной фармацевтической композиции, включая оральное введение или парентеральное введение (в том числе,внутривенная, внутримышечная, внутрибрюшинная или подкожная инъекции). При осуществлении вариантов данного изобретения могут быть получены следующие благоприятные результаты. За счет применения циклодекстрина или его производного для включения пиноцембрина и захвата молекул пиноцембрина трубчатой структурой циклодекстрина или его производного и, следовательно,получения комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным удается значительно повысить растворимость пиноцембрина в воде. Было определено, что при температуре 25 С растворимость комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином в воде увеличивается до 2000 мг/100 мл и гораздо выше, чем растворимость в воде пиноцембрина без включения в комплекс. Конкретные результаты показаны в примере 10. С применением комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным по данному изобретению активный пиноцембрин в виде комплекса включения может быть непосредственно использован в твердой или жидкой лекарственной форме. Циклодекстрин или его производное представляет собой растворимый в воде фармацевтический адъювант с низкой токсичностью, и комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным, полученный на его основе, пригоден для приготовления различных жидких или твердых лекарственных форм. Комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным согласно данному изобретению обладает хорошей растворимостью в воде и почти не раздражает стенки сосудов, он пригоден для приготовления жидких лекарственных форм. При осуществлении вариантов данного изобретения решается проблема низкой растворимости пиноцембрина в воде и невозможности непосредственного применения его в виде жидкой лекарственной формы, особенно в виде лекарственных форм для инъекции. Кроме того, вследствие улучшенной растворимости в воде твердая лекарственная форма, приготовленная на основе такого комплекса,быстро разрушается (распадается), обладает хорошей растворимостью и высокой биодоступностью и пригодна для клинического использования. Кроме того, комплекс включения согласно данному изобретению обладает достаточной безопасностью. Определение острой токсичности показывает, что комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином имеет величину LD50 при внутривенной инъекции мыши более 700 мг/кг, что в 100 раз больше эффективной дозы. Испытание безопасности (опыт по определению локального раздражения кровеносных сосудов, определение гемолиза, определение анафилактичности и определение степени раздражения при внутримышечной инъекции) показывает, что комплекс включения согласно данному изобретению не раздражает кровеносные сосуды, не вызывает гемолиза и анафилактичности и вызывает незначительное локальное раздражение при внутримышечной инъекции. Следовательно, комплекс включения является безопасным и пригодным для приготовления лекарственных форм для инъекции. Фармакологический анализ показывает, что комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином по настоящему изобретению может в значительной степени улучшать нейроповеденческие характеристики у крыс, ухудшение которых вызвано острой фокальной церебральной ишемией, и облегчает отрицательное уменьшение церебрального кроветока в области коры головного мозга среднего размера,снабжающей артериальной кровью. Комплекс включения согласно данному изобретению может применяться для получения фармацевтического лекарства для профилактики и/или лечения сердечно-сосудистых или церебральноваскулярных заболеваний, предпочтительно церебрального инсульта. Из уровня техники известно, что пиноцембрин является чувствительным к множеству опасных бактерий и грибков и обладает хорошим антибактериальным действием, особенно, на некоторые штаммы,стойкие к действию лекарств. Следовательно, комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным может быть также использован для приготовления фармацевтического лекарства для профилактики и/или лечения бактериальной и/или грибковой инфекции. Примеры, которые приведены ниже, являются иллюстративными примерами осуществления изобретения и никоим образом не ограничивают объем данного изобретения. Различные модификации, превращения и замещения, которые могут быть осуществлены специалистами в данной области в рамках данного изобретения, также входят в его объем. Пример 1. Приготовление жидкого комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропил-циклодекстрином (раствора).(1) Взвешивают 40 г гидроксипропилциклодекстрина, добавляют его к 400 мл дистиллированной воды и растворяют при перемешивании;(2) отдельно взвешивают 1 г пиноцембрина, добавляют его к 20 мл абсолютного этилового спирта с получением раствора и добавляют этот раствор в указанный раствор гидроксипропилциклодекстрина с образованием смешанного раствора;(3) при помощи магнитной мешалки перемешивают смешанный раствор в течение 20 мин при температуре 40-50 С с получением чистого и прозрачного раствора комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином. Пример 2. Приготовление твердого комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропил-циклодекстрином. Стадии (1)-(3) идентичны тем же стадиям в примере 1.(4) Проводят лиофилизацию полученного раствора комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином с получением твердого комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином. Пример 3. Приготовление твердого комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропил-циклодекстрином.(1) Взвешивают 20 г гидроксипропилциклодекстрина в ступке, в которую добавляют 100 мл дистиллированной воды и перетирают, получая пасту;(2) отдельно взвешивают 3 г пиноцембрина, добавляют навеску к 20 мл абсолютного этилового спирта с получением раствора и добавляют его к указанной пасте гидроксипропилциклодекстрина с получением смешанного раствора;(3) перемешивают смешанный раствор в течение 2 ч с получением гомогенной пасты, которую отфильтровывают и выпаривают досуха под вакуумом с получением твердого комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином. Пример 4. Приготовление раствора для инфузии, содержащего хлорид натрия, на основе комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином.(1) Взвешивают 20 г гидроксипропилциклодекстрина, добавляют эту навеску к 200 мл дистиллированной воды и растворяют при перемешивании, добавляя 0,5 г активированного угля для инъекции,нагревают до температуры, равной 80 С, при перемешивании, выдерживают в течение 15 мин и фильтруют для удаления активированного угля;(2) отдельно взвешивают 3 г пиноцембрина, добавляют эту навеску к 20 мл абсолютного этилового спирта с получением раствора, который добавляют к указанному раствору гидроксипропил-циклодекстрина, получая смешанный раствор;(3) при помощи магнитной мешалки перемешивают смешанный раствор в течение 20 мин при температуре 40-50 С с получением чистого и прозрачного раствора комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином;(4) добавляют воду до достижения объема, равного 800 мл, добавляют 7-8 г хлорида натрия для инъекции, устанавливают величину рН 8-9 и, установив величину рН 3,5-7 при помощи 0,05 М HCl или 0,05 М NaOH, добавляют воду до достижения объема, равного 1000 мл, и добавляют 0,1 г активированного угля для инъекции и перемешивают раствор в течение 20 мин;(5) удаляют активированный уголь, заполняют раствором флаконы и выдерживают их в автоклаве при температуре 115 С в течение 30 мин. Пример 5. Получение глюкозного раствора для инфузии на основе комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином. Стадии (1)-(3) идентичны тем же стадиям в примере 4.(4) Взвешивают 50 г глюкозы для инъекции, добавляют воду при перемешивании для растворения до достижения объема, равного 100 мл, добавляют 0,1 г активированного угля для инъекции и нагревают до легкого кипения в течение 15 мин и фильтруют для удаления активированного угля;(5) добавляют раствор глюкозы в раствор комплекса включения, добавляют воду до достижения объема, равного 800 мл, устанавливают величину рН 6-7 при помощи 0,05 М HCl или 0,05 М NaOH, добавляют снова воду до достижения объема, равного 1000 мл, и добавляют 0,1 г активированного угля для инъекции и перемешивают в течение 20 мин;(6) отфильтровывают полученный раствор через грубый и мелкий фильтр и фильтровальные полоски (размер пор 1,0, 0,45 и 0,22 мкм) и заполняют этим раствором флаконы, которые выдерживают в автоклаве в течение 30 мин при температуре 115 С. Пример 6. Приготовление стерильного порошка для инъекции с применением комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином.(1) В стерильном рабочем помещении взвешивают 40 г гидроксипропилциклодекстрина, растворяют его в воде до достижения объема, равного 80 мл, добавляют 0,1 г активированного угля, нагревают до легкого кипения в течение 15 мин и отфильтровывают раствор, для удаления активированного угля;(2) отдельно взвешивают 1 г пиноцембрина, добавляют его к 20 мл абсолютного этилового спирта с получением раствора и добавляют этот раствор в указанный раствор гидроксипропилциклодекстрина с образованием смешанного раствора;(3) при помощи магнитной мешалки перемешивают смешанный раствор в течение 20 мин при температуре 40-50 С с получением чистого и прозрачного раствора комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином;(4) добавляют воду до достижения объема, равного 100 мл, фильтруют через мембрану (0,22 мкм),заполняют этим раствором флаконы объемом 10 мл (2-3 мл раствора на флакон), проводят лиофилиза-5 020784 цию и закрывают флаконы крышками. Получают стерильный порошок для инъекции. Пример 7. Получение комплекса включения пиноцембрина с -циклодекстрином. Взвешивают 40 г -циклодекстрина, добавляют эту навеску к 100 мл дистиллированной воды, нагревают до температуры 40-50 С для растворения -циклодекстрина. Добавляют 1 г пиноцембрина, растворенного в 20 мл абсолютного этилового спирта, при помощи магнитной мешалки перемешивают раствор в течение 2-3 ч, отфильтровывают, проводят лиофилизацию с получением комплекса включения пиноцембрина с -циклодекстрином. Пример 8. Получение оральной капсулы комплекса включения пиноцембрина с -циклодекстрином. Взвешивают 20 г комплекса включения пиноцембрина с -циклодекстрином и смешивают навеску с 80 г лактозы методом удваивания эквивалентов, растворяют смесь в воде с НРМС в качестве связующего с получением мягкого материала, гранулируют этот мягкий материал с применением сита 20 меш, сушат при температуре 60 С с получением сухих гранул, сортируют сухие гранулы при помощи сита 30 меш,контролируя наличие промежуточных продуктов; помещают 50 мг активных агентов в каждую капсулу,проверяют образцы и упаковывают капсулы. Пример 9. Получение оральной таблетки комплекса включения пиноцембрина с -циклодекстрином. Взвешивают 20 г комплекса включения пиноцембрина с -циклодекстрином и смешивают навеску с 80 г лактозы и 5 г натриевой соли карбоксиметилированного крахмала лактозы методом удваивания эквивалентов, растворяют полученную смесь в воде с НРМС в качестве связующего с получением мягкого материала, гранулируют этот мягкий материал с применением сита 20 меш, сушат при температуре 60 С с получением сухих гранул, сортируют сухие гранулы при помощи сита 30 меш, добавляют 1 г гуммиарабика, перемешивают до получения гомогенной смеси, таблетируют смесь при содержании 50 мг активных агентов в каждой таблетке, проверяют образцы и упаковывают. Пример 10. Определение растворимости пиноцембрина. Для выбора солюбилизатора, сорастворителя и неводного растворителя, пригодного для инъекции,проводят серию опытов с использованием их обычных количеств соответственно для определения эффекта солюбилизации пиноцембрина. Результаты приведены в табл. 1. Таблица 1 Определение растворимости пиноцембрина Величины растворимости в табл. 1 характеризуют растворимость пиноцембрина. Результаты показывают, что растворимость пиноцембрина может быть значительно увеличена при помощи циклодекстрина или его производного, однако другие общепринятые поверхностно-активные вещества или солюбилизатор, сорастворитель и неводный растворитель не оказывают сильного солюбилизирующего действия в отношении пиноцембрина. Определение безопасности. Определение безопасности комплекса включения при его инъекции животным. Препарат для инъекции на основе комплекса включения пиноцембрина был получен путем разбавления препарата для инфузии с хлоридом натрия на основе комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином, полученного в примере 4, раствором 0,9%-го хлорида натрия в 10 раз. 1. Определение степени локального раздражения стенок сосудов. 10 мл комплекса включения пиноцембрина для инъекции (содержащего 2 мг пиноцембрина) вводили кролику путем внутривенной (iv) инъекции в ушную вену один раз в день в течение 3 дней. Место инъекции и периферическая область кровеносного сосуда оставались полностью без воспаления и раздражения, такого как покраснение или отек, и не отличались значительно от места инъекции обычного физиологического раствора. Не были отмечены и аномальные гистопатологические изменения. Результаты показаны на фиг. 1 и 2. 2. Определение гемолиза. Суспензия красных клеток, обычный физиологический раствор, разные объемы инъекционного раствора комплекса включения пиноцембрина (с концентрацией 0,20 мг/мл) или дистиллированную воду добавляли в 7 пробирок (см. состав, указанный в табл. 2). Пробирки слегка встряхивали для смешения и затем выдерживали в бане с теплой водой при температуре 37 С. Явление гемолиза наблюдали через 0,5,1, 2 и 3 ч после смешения. В пробирках, содержащих инъекционный раствор комплекса включения пиноцембрина при клинических концентрациях, и в контрольной пробирке с обычным физиологическим раствором не отмечалась значительная разница в результатах. Результаты приведены в табл. 3. Таблица 2 Распределение образцов при определении гемолиза Таблица 3 Влияние инъекционного раствора комплекса включения пиноцембрина на процесс гемолиза Примечание: "+" - полный гемолиз, "-" - отсутствие гемолиза. 3. Определение анафилаксии. Наблюдали за развитием анафилаксии. Степень развития анафилаксии у морских свинок, которым вводили испытуемое лекарство (препарат для инъекции комплекса включения пиноцембрина) и альбумин из яиц (контрольная группа) внутривенно в течение 14 дней и 21 дня соответственно определяли с учетом критериев, указанных в табл. 4. Результаты определения указаны в табл. 5. Таблица 5 Влияние инъекции комплекса включения пиноцембрина на развитие активной системной анафилаксии (ASA) у морских свинок 4. Определение локального раздражения кожи после внутримышечной инъекции. Степень серьезности мышечного ответа определялась в соответствии с критериями, указанными в табл. 6. Через 48 ч после того, как комплекс включения пиноцембрина вводили путем инъекции крысам,в месте инъекции наблюдался только слабый отек (диаметр 0,5 см) и не возникало значительного раздражения (средний показатель по шкале раздражения менее 2,0). Это показывает, что внутримышечная инъекция комплекса включения пиноцембрина вызывает небольшое локальное раздражение. Результаты показаны в табл. 7. Таблица 6 Критерии мышечного ответа Таблица 7 Местное раздражение после внутримышечной инъекции комплекса включения пиноцембрина Фармакологический анализ. Протекторное действие комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином на острое региональное повреждение при церебральной ишемии у крыс. Метод анализа. Анализ проводили по методике с применением модели МСАО, описанной в литературе (Zhang Juntian, Modern Experimental Methods in Pharmacology, October 1998, the First Edition, theUnited Press of Beijing Medical University and Peking Union Medical College). Шкала Бедерсона. Показатель по шкале поведения животных для ложнооперированной группы равняется 0. Средняя величина показателя по шкале нейроповеденческого поведения в группе, которой вводили контрольный носитель (называемая далее "группой с носителем"), составляла 3,40,6. У большей части животных отмечались вращение или аддукция мышц передних лап на стороне, противоположной стороне, где была сделана операция, уменьшенная сила растягивания при боковом смещении в противоположную сторону,резкие движения или случайное перемещение по кругу, показатель по шкале был равен 3. Кроме того,только у немногих животных наблюдались вращения внутрь передних лап или уменьшенная сила мышц,показатель по шкале был равен 2. У некоторых животных наблюдались острые симптомы и отсутствовала автономная активность, показатель по шкале был равен 4. Комплексы включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином (1, 3 и 10 мг/кг в расчете на содержание активного компонента пиноцембрина, DL 108, это обозначение применяется и ниже) могут значительно облегчать симптомы нервного поражения после церебральной ишемии у животных (Р 0,05, Р 0,01) при наличии зависимости эффекта от дозы, их действие превосходит действие контрольного нимодипина (см. фиг. 3). Оценка локомоции (тест с наклонной плоскостью). Средняя величина промежутка времени, в течение которого крысы оставались на наклонной плоскости для ложнооперированной группы, составляла 79,310,4 с. Для группы с носителем эта средняя величина промежутка времени, когда крысы с острой церебральной ишемией оставались на наклонной плоскости, равнялась 4,011,42 с, т.е. была заметно меньше. По сравнению с группой с носителем DL 108 (3, 10 мг/кг) может заметно пролонгировать время, в течение которого животные оставались на наклонной плоскости (Р 0,01) при наличии зависимости результата от дозы DL 108 (3, 10 мг/кг) по своему действию превосходит контрольный нимодипин (фиг. 4). Действие DL 108 на rCBF в ткани при острой церебральной ишемии у крыс. Величина rCBF (регионального церебрального кровотока) в области артерий среднего размера,снабжающих мозг кровью, быстро снижалась до 20-30% от исходной величины до операции, что явилось результатом МСАО. Через 24 ч после развития ишемии (до декапитации) устанавливалась коллатеральная компенсация кровотока и величина rCBF немного возрастала по сравнению с величиной, наблюдаемой во время операции, но все еще оставалась равной менее 50% от исходной величины. Результаты показаны на фиг. 5 А. Через 30 мин после развития церебральной ишемии величина rCBF у крыс в группе с носителем составляла 31,095,35% от исходной величины, а величина rCBF в группе, которой вводили испытуемое лекарство, а именно комплекс включения DL 108 (1, 3, 10 мг/кг), и в группе, которой вводили нимодипин, составляла 40,766,58%, 50,097,09%, 53,288,03%, 55,586,09% от исходной величины соответственно. Эти результаты показали, что в группах, которым вводили комплекс включения, величина церебрального кровотока быстро восстанавливалась, т.е. наблюдалось значительное улучшение по сравнению с группой с носителем. Введение DL 108 (3, 10 мг/кг) и нимодипина (3 мг/кг) приводило к результатам,которые значительно отличались от результатов в группе с носителем (Р 0,05). Результаты показаны на фиг. 5 В. В заключение следует указать, что комплекс включения пиноцембрина с гидроксипропил-циклодекстрином согласно данному изобретению может значительно уменьшить нейроповеденческое повреждение, вызванное острой фокальной церебральной ишемией у крыс и замедляет степень снижения церебрального кровотока в области кортикальных артерий среднего размера, снабжающих мозг кровью. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным, содержащий пиноцембрин и циклодекстрин или его производное, причем мольное отношение пиноцембрина к циклодекстрину или его производному составляет 1:1-1:100; и указанный циклодекстрин или его производное выбраны из группы, состоящей из -циклодекстрина, -циклодекстрина, -циклодекстрина, гидроксиэтилциклодекстрина, диметилциклодекстрина, гидроксипропилциклодекстрина, дигидроксипропилциклодекстрина, метилциклодекстрина, циклодекстрина на основе глюкозы, циклодекстрина на основе мальтозы, циклодекстрина на основе мальтотриозы, карбоксиметилциклодекстрина, сульфобутилциклодекстрина, сульфобутилового эфира -циклодекстрина и любой комбинации этих соединений. 2. Комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным по п.1, в котором мольное отношение пиноцембрина к циклодекстрину или его производному составляет 1:1-1:10. 3. Комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным по п.1, в котором указанный пиноцембрин выбран из группы, состоящей из L-пиноцембрина, S-пиноцембрина, рацемиче-9 020784 ского пиноцембрина или любой их комбинации. 4. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным по любому из пп.1-3 и, возможно, фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. 5. Фармацевтическая композиция по п.4, которая вводится орально или с использованием внутривенной, внутримышечной, внутрибрюшинной или подкожной инъекции. 6. Фармацевтическая композиция по п.4, которая находится в виде препарата для трансфузии, препарата для инъекции, порошка для инъекции, орального раствора, сиропа, таблетки, капсулы, гранулы,диспергируемой таблетки, орально распадающейся таблетки, буккальной таблетки. 7. Фармацевтическая композиция по любому из пп.4-6, которая находится в виде препарата для инъекции на основе комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином, имеющего концентрацию 0,01-3% (г/мл). 8. Фармацевтическая композиция по любому из пп.4-6, которая находится в виде порошка для инъекции на основе комплекса включения пиноцембрина с гидроксипропилциклодекстрином, и раствор,в котором указанный порошок для инъекции растворяется, имеет величину рН 3-10. 9. Способ получения комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным по любому из пп.1-3, включающий стадии (1) добавления циклодекстрина или его производного в растворитель с получением раствора или суспензии циклодекстрина или его производного с весовой концентрацией 1-60%; (2) добавления пиноцембрина к указанному раствору или суспензии и смешения при перемешивании или измельчении с получением указанного комплекса включения; и, возможно, (3) удаления растворителя из смеси комплекса включения, полученной на стадии (2). 10. Способ по п.9, в котором растворитель выбран из группы, состоящей из воды, этанола, метанола, пропанола, изопропанола, этиленгликоля, глицерина, ацетона или любой их комбинации. 11. Применение комплекса включения пиноцембрина с циклодекстрином или его производным по любому из пп.1-3 или фармацевтической композиции по любому из пп.4-8 для приготовления фармацевтического лекарства для профилактики и/или лечения болезни или расстройства. 12. Применение по п.11, где указанные болезнь или расстройство представляют собой сердечнососудистое или цереброваскулярное заболевание, или церебральный инсульт, или бактериальную и/или грибковую инфекцию.
МПК / Метки
МПК: A61K 47/40, A61K 9/00, A61P 31/10, A61P 31/04, A61P 9/00, A61K 31/352
Метки: способ, получения, комплекс, циклодекстрином, пиноцембрина, применения, включения
Код ссылки
<a href="https://eas.patents.su/12-20784-kompleks-vklyucheniya-pinocembrina-s-ciklodekstrinom-sposob-ego-polucheniya-i-primeneniya.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином, способ его получения и применения</a>
Предыдущий патент: Фармацевтическая композиция, содержащая 4-[3-(4-циклопропанкарбонилпиперазин-1-карбонил)-4-фторбензил]-2н-фталазин-1-он и коповидон
Следующий патент: Машина для транспортирования рельсов и способ транспортирования
Случайный патент: Способ штамповки державки петли крышки люка грузового вагона и устройство для осуществления данного способа