Способ лечения гипергликемии комбинацией 25-гидроксивитамина d3 и витамина d

СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ГИПЕРГЛИКЕМИИ КОМБИНАЦИЕЙ 25-ГИДРОКСИВИТАМИНА D3 И ВИТАМИНА D Бак Нейл Роберт (FR), Лйнбергер Бруно Х., Штклин Элизабет (CH),Урбан Каи, Вольфрам Свен (DE),Клархаут Ваутер (CH) Агуреев А.П. (RU) Раскрыто лечение гипергликемии человека с помощью 25-гидроксивитамина D3 (кальцифедиол) и витамина D. Содержание глюкозы в крови снижается до уровня, который ближе к нормальному,чем исходный уровень. Витамин D3 (холекальциферол) необязательно может быть использован вместе с 25-гидроксивитамином D3. Кроме того, описаны формы и дозировки фармацевтической композиции, а также способы получения лекарственных средств.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ДСМ АйПи АССЕТС Б.В. (NL) Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к лечению человеческой гипергликемии с помощью 25-гидроксивитамина D3 (кальцифедиол) и витамина D. Содержание глюкозы в крови снижается до уровня, который ближе к нормальному, чем исходный уровень. При необходимости, витамин D3 может быть использован вместе с 25-гидроксивитамином D3. Уровень техники Витамин D (например, эргокальциферол и холекальциферол) относится к группе жирорастворимых соединений с определенной биологической активностью. Дефицит витамина D вызывает рахит у детей и остеомаляцию у взрослых людей. Однако может наблюдаться токсичность после хронического приема(больше чем 100 раз) рекомендуемой суточной дозы (т.е. 5-15 мкг или 200-600 IU витамина D) в течение нескольких месяцев. Для витамина D "порог токсичности составляет от 500 до 600 мкг/кг массы тела в день. Обычно взрослые люди не должны потреблять больше чем тройное рекомендуемое суточное количество (RDA) в течение продолжительного периода времени" (GarrisonSomer, The Nutrition DeskReference, Third Ed., McGraw-Hill, p. 82, 1997). Гиперкальциемия может наблюдаться при концентрации 25-гидроксивитамина D в крови больше чем 375 нмоль/л. Сравнительно недавно было установлено, что безопасный верхний уровень содержания витамина D составляет по меньшей мере 250 мкг/день(10000 IU) (Hathcock et al. Am. J. Clin. Nutr. 85:6-18, 2007). Было показано, что прием внутрь такой добавки к рациону приводит к концентрации 25-гидроксивитамина D в крови приблизительно 200 нмоль/л. Витамин D представляет собой прогормон, который должен подвергнуться гидроксилированию в печени с образованием 25-гидроксивитамина D (кальцифедиол; 25-ОН витамин D; 25-OH D), который затем подвергается другому гидроксилированию в почках и других тканях с образованием 1,25-дигидроксивитамина D-активной гормональной формы витамина D. 1,25-Дигидроксивитамин D выделяется в кровь, связывается с белком, связывающим витамин D (DBP), и транспортируется в целевые ткани. Связывание между 1,25-дигидроксивитамином D и рецептором витамина D обеспечивает комплекс, действующий как транскрипционный фактор в ядре клетки. Дефицит витамина D может стимулировать резорбцию кости. Кроме того, он может модулировать работу сердечно-сосудистой, иммунной и мышечной систем. При эпидемиологических исследованиях обнаружены корреляции между приемом витамина D и его влиянием на кровяное давление или глюкозный обмен. Активность витамина D контролируется гормоном околощитовидной железы с отрицательной обратной связью. В прошлом как витамин D, так и 25-ОН D3 назначались в качестве лекарственных веществ. Витамин D, конечно, является широкодоступным; в США фирма Organon раньше продавала 25-ОН D3 под наименованием "CALDEROL" (кальдерол), однако в настоящее время он находится в списке Управления по контролю за продуктами и лекарствами для препаратов, снятых с производства. Кальдерол представлял собой желатиновую капсулу, содержащую кукурузное масло и 25-ОН D3. В настоящее время в Испании фирма FAES Farma продает жидкую форму 25-ОН D3 в растворе масла под наименованием "HIDROFEROL" (гидроферол). Комбинация витамина D и 25-ОН D3 была использована в кормах для животных. Для применения в кормах 25-ОН D3 является промышленно доступным от фирмы DSM под наименованием "ROVIMIXTritsch et al. (US 2003/0170324) описали предварительно смешанную кормовую композицию 25-ОНD3 в количестве по меньшей мере между 5 и 50% (по массе), растворенного в масле и антиокисиданта,агента, инкапсулирующего капли 25-ОН D3, масла, и пищевой добавки (например, витамин D3). Эта предварительно приготовленная смесь может быть добавлена в корм домашней птицы, поросят, собак,или в кошачий корм. В этой композиции 25-ОН D3 стабилизирован против окисления.Simoes-Nunes et al. (US 2005/0064018) описали добавление комбинации 25-ОН витамина D3 и витамина D3 в корма для животных. В частности, приблизительно от 10 мкг/кг до 100 мкг/кг 25-ОН витаминаD3 и приблизительно от 200 до 4000 IU/кг витамина D3 добавляют в корм для поросят. Эта добавка улучшает прочность костей у свиней.Stark et al. (US 5695794) описали добавление комбинации 25-ОН витамина D3 и витамина D3 в корм для домашней птицы с целью улучшения состояния дисхондроплазии большеберцовой кости.Borenstein et al. в US 5043170 описали комбинацию витамина D3 и либо 1-альфагидроксихолекальциферола, либо 1-альфа,25-дигидроксихолекальциферола с целью улучшения прочности яиц и мощности ног у яйценосных кур и старых кур.D3, а также 25-гидроксивитамин D3, имеют улучшенное общее состояние здоровья, телосложение, количество и здоровье приплода и другие производственные параметры. Кроме того, описана пищевая добавка 25-ОН D3 для людей, однако диапазон доз добавки 5-15 мкг на 1 кг массы тела, что соответствует очень высокой суточной дозе 300-900 мкг, для человека является весьма высокой. Насколько известно авторам изобретения, в уровне техники не рекомендуется и не предлагается применение 25-гидроксивитамина D3 в качестве лекарственного вещества для лечения людей с гипергликемией. Формы и дозировки композиции обеспечивают желательные воздействия, когда паци-1 019348 ента лечат эффективными количествами витамина D3 и 25-гидроксивитамина D3, чтобы нормализовать содержание глюкозы в крови. Прочие преимущества и усовершенствования описаны ниже или будут очевидными из раскрытия изобретения. Сущность изобретения Было обнаружено, что 25-гидроксивитамин D3 (кальцифедиол) может быть использован в качестве лекарственного средства с целью снижения высокого содержания глюкозы в крови или для поддержания содержания глюкозы в крови человека на нормальном уровне. Это лекарственное средство необязательно может содержать дополнительно витамин D3 (холекальциферол). Возраст человека может быть любым, включая детей и подростков, начиная с рождения до совершеннолетия, и возрастом от 18 до 80 лет или старше 80 лет. Кроме того, описаны формы и дозировки фармацевтической композиции, а также способы получения лекарственных средств. В первом аспекте разработан способ приема человеком по меньшей мере 25-гидроксивитамина D3. Это обеспечивает возможность снижения содержания глюкозы в крови или поддерживать его на уровне,который близок к нормальному (например, меньше чем 7 ммоль глюкозы на 1 л плазмы взрослого человека, натощак). Витамин D назначают вместе с 25-гидроксивитамином D3 или отдельно от него. Эти компоненты можно принимать один раз в день, один раз в неделю или один раз в месяц. В следующем аспекте обеспечено применение 25-ОН D3 и витамина D для поддержания нормального уровня глюкозы в плазме крови или для снижения содержания глюкозы в крови до нормального уровня. В следующем аспекте обеспечено применение 25-ОН D3 и витамина D для лечения гипергликемии у человека. Дополнительные аспекты станут очевидными из следующего ниже описания и формулы изобретения и, кроме того, из обобщений. Подробное описание изобретения В описании и формуле изобретения используются следующие определения. Термин "витамин D" означает или витамин D3 (холекальциферол), и/или витамин D2 (эргокальциферол). Человеческий организм не способен вырабатывать витамин D2 (эргокальциферол), однако может использовать его в качестве источника витамина D. Витамин D2 может быть синтезирован различными растениями и часто используется в дополнение к витамину D в качестве эквивалента витамина D. Выражение "метаболит витамина D" означает любой метаболит витамина D, отличающийся от 25-гидроксивитамина D3. Термин "25-ОН D3" относится конкретно к 25-гидроксивитамину D3. Термин "25-ОН D" относится к 25-гидроксилированному метаболиту или витамина D2, или витамина D3, который представляет собой главную циркулирующую форму, обнаруженную в плазме. Подразумевается, что термин "предупреждать" включает улучшение состояния больного, снижение тяжести симптомов, раннее вмешательство и удлинение продолжительности начала болезни, причем не предполагается ограничение ситуацией, когда пациент уже не способен ни фиксировать заболевание, ни испытывать какие-либо симптомы. Витамин D3 и 25-гидроксивитамин D3 может быть получен из любого источника, причем композиция витамина может быть приготовлена с использованием подходящей технологии. Обычно кристаллы витамина D3, 25-гидроксивитамина D3 или обоих (отдельно или вместе) растворяют в масле при нагревании и перемешивании. Предпочтительно масло помещают в сосуд и нагревают. После этого в сосуд добавляют витамин D3, 25-гидроксивитамин D3 или оба компонента, поддерживая температуру масла постоянной или повышая температуру во времени. Композицию перемешивают с целью растворения кристаллов витамина D, 25-гидроксивитамин D3 или обоих компонентов. До добавления в масло кристаллы могут быть измельчены путем помола и/или просеивания с целью улучшения растворения. Композицию можно перемешивать путем взбалтывания, вращения сосуда, вымешивания, гомогенизации,рециркуляции или путем обработки ультразвуком. Предпочтительно масло может быть нагрето в сосуде до температуры приблизительно от 80 до 85C; сортированные по крупности кристаллы вводят в сосуд и перемешивают содержимое для того, чтобы кристаллы растворились в масле."Масло" может быть любым подходящим съедобным маслом, липидом или жиром: например маслом бабассу, кокосовьм маслом, кохуновым маслом, жиром мурумиру, косточковым пальмовым маслом или тукумовым маслом. Масло может быть натуральным, синтетическим, полусинтетическим или любой их комбинацией. Натуральное масло может быть произведено из любого источника (например, животного, растительного, грибкового, морского); синтетическое или полусинтетическое масло может быть получено с использованием удобной технологии. Предпочтительно масло представляет собой смесь растительных триглицеридов со средней длиной цепи, главным образом, каприловой и каприновой кислот. Композиция необязательно может содержать один или несколько других подходящих компонентов, например, таких как фармацевтически приемлемые антиокислители, консерванты, растворяющие агенты,поверхностно-активные вещества, агенты, регулирующие рН, или буферы, увлажнители и их любые комбинации. Вышеупомянутые компоненты являются примерами фармацевтически приемлемых носителей. Подходящие антиокислители включают токоферол, смешанные токоферолы, токоферолы из натуральных или синтетических источников, бутилированный гидрокситолуол (БГТ), бутилированный гидроксианизол (БГА), натуральные антиокислители, такие как розмариновый экстракт, пропилгалат, и любые другие, которые используются в производстве лекарственных веществ для людей. Предпочтительным антиокислителем является токоферол. Подходящие консерванты включают метилпарабензоат, пропилпарабензоат, сорбат калия, бензоат натрия, бензойную кислоту и их любые комбинации. Подходящие растворяющие агенты включают неорганические или органические растворители, например спирты,хлорированные углеводороды, и их любые комбинации. Подходящие поверхностно-активные вещества могут быть анионными, катионными или неионогенными, например аскорбилпальмитат, полисорбаты,полиэтиленгликоли и их любые комбинации. Подходящие агенты, регулирующие рН, или буферы включают лимонную кислоту - цитрат натрия, фосфорную кислоту - фосфат натрия, уксусную кислоту - ацетат натрия и их любые комбинации. Подходящие увлажнители включают глицерин, сорбит, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль и их любые комбинации. После образования масляная композиция может быть введена в различные другие полезные композиции, некоторые из которых рассмотрены ниже. Например, могут образоваться эмульсии, которые необязательно могут быть подвергнуты инкапсулированию или распылительной сушке. Могут быть приготовлены разнообразные эмульсии путем сочетания описанных выше неводных композиций с водными композициями. Эти эмульсии могут быть любого типа. Подходящие эмульсии включают эмульсии масла-в-воде, эмульсии вода-в-масле, безводные эмульсии, твердые эмульсии и микроэмульсии. Эмульсии могут быть получены с использованием любой удобной технологии. Эмульсия содержит водную композицию и неводную (например, масляную) композицию, причем последняя содержит витамин D3,25-гидроксивитамин D3 или оба компонента (отдельно или вместе), растворенные в масле в количестве приблизительно между 3 и 50% (по массе) в расчете на общую массу масляной композиции. Используемые в изобретении термины "водная композиция" и "водная фаза" являются взаимозаменяемыми. Обычно эмульсия может содержать приблизительно от 20 до 95% водной композиции и приблизительно от 5 до 80% неводной композиции. Однако предпочтительно эмульсия содержит приблизительно от 85 до 95% (по объему) водной композиции и приблизительно от 5 до 15% (по объему) неводной композиции. Неводная композиция может быть удобно диспергирована в виде капель в водной композиции. Например, капли в водной композиции могут иметь средний диаметр меньше чем приблизительно 500 нм. Удобно, чтобы капли имели средний диаметр приблизительно между 100 и 200 нм. В особенно выгодном варианте осуществления эмульсия содержит инкапсулирующий агент, который способствует заключению в капсулу масляной композиции при дальнейшей обработке эмульсии(например, при распылительной сушке). Инкапсулирующий агент может быть любым съедобным веществом, которое способно заключать в капсулу масляную композицию. Предпочтительно инкапсулирующий агент является преимущественно коллоидным материалом. Такие материалы включают крахмалы,белки животного происхождения (в том числе желатины), белки растительного происхождения, казеин,пектин, альгинат, агар, мальтодекстрины, лигносульфонаты, производные целлюлозы, сахара, сахариды,сорбиты, смолы и их любые комбинации. Подходящие крахмалы включают растительные крахмалы (например, CAPSUL или HI-САР от фирмы National StarchChemical Corp., New York, NY), другие модифицированные пищевые крахмалы и их любые комбинации. Предпочтительным крахмалом является модифицированный растительный крахмал CAPSUL. Подходящие белки животного происхождения включают желатины (например, коровий желатин, свиной желатин (типа А или В) с различными числами Блюма, рыбный желатин), белок снятого молока, казеинат и их любые комбинации. Предпочтительным животным белком является желатин. Подходящие белки растительного происхождения включают картофельный белок (например,ALBUREX от фирмы Roquette Preres Societe Anonyme, Lestrem, France), гороховый белок, соевый белок и их любые комбинации. Предпочтительньм растительным белком является картофельный белокALBUREX. Подходящие мальтодекстрины с различным эквивалентом декстрозы включают мальтодекстрин 5, мальтодекстрин 10, мальтодекстрин 15, мальтодекстрин 20, мальтодекстрин 25 и их любые комбинации. Предпочтительным мальтодекстрином является мальтодекстрин 15. Подходящие производные целлюлозы включают этилцеллюлозу, метилэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу и их любые комбинации. Подходящие сахариды включают лактозу, сахарозу или их любые комбинации. Предпочтительным сахаридом является сахароза. Подходящие смолы включают акацию, плоды рожкового дерева, жемчужный мох и их любые комбинации. Предпочтительной смолой является смола акации. Когда эмульсия содержит инкапсулирующий агент, этот инкапсулирующий агент может быть диспергирован в воде с использованием любой удобной технологии, чтобы получить водную фазу. Эта водная фаза может представлять собой раствор или смесь, в зависимости от свойств выбранных компонентов. Выбранные компоненты могут быть диспергированы с помощью любой удобной технологии, включающей гомогенизацию, перемешивание, эмульгирование, рециркуляцию, статическое смешение, обработку ультразвуком, взбалтывание, нагревание или их любые комбинации. Затем, по желанию, может быть отрегулирована вязкость полученной водной фазы путем добавления воды. Эта водная композиция эмульсии необязательно может содержать любые другие подходящие материалы, в том числе (без ограничения) те, которые рассмотрены выше в связи с неводной композицией. Предпочтительно водная композиция может включать инкапсулирующий агент, пленкообразующий материал, пластификатор, консервант, антиокислитель или их любые комбинации. Подходящие консерванты включают метилпарабензоат, пропилпарабензоат, сорбиновую кислоту, сорбат калия, бензоат натрия и их любые комбинации. Подходящие антиокислители включают натриевую соль аскорбиновой кислоты, аскорбиновую кислоту,лимонную кислоту и их любые комбинации. Предпочтительно водная фаза содержит модифицированный пищевой крахмал, такой как октенилсукцинил-крахмал (CAPSUL), мальтодекстрин и натриевую соль аскорбиновой кислоты. Другая предпочтительная водная фаза содержит картофельный белок (ALBUREX), мальтодекстрин 20 и натриевую соль аскорбиновой кислоты. Выбранные компоненты могут быть растворены в воде с помощью любой удобной технологии, предпочтительно путем перемешивания. Предпочтительно смесь гомогенизируют,пока она не станет однородной, без комков. Предпочтительно гомогенизацию осуществляют при температуре приблизительно между 50 и 75C. Затем может быть отрегулирована окончательная вязкость полученной водной фазы до желательной вязкости, предпочтительно приблизительно от 250 до 450 сП,более предпочтительно приблизительно от 300 до 400 сП, еще более предпочтительно около 385 сП. Эмульсии могут образоваться путем эмульгирования неводной композиции и водной фазы, используя любые приемы, в том числе гомогенизация, роторно-статорный сдвиг, сдвиг высокого давления и кавитация, высокоскоростные "обтекатели" или перемешивание под действием сдвига и их любые комбинации. Предпочтительно объем и вязкость эмульсии можно регулировать путем добавления воды после эмульгирования. Предпочтительно неводные и водные композиции эмульгируются путем гомогенизации. Предпочтительно эмульсия не должна содержать каких-либо минералов, переходных металлов или пероксидов. Как указано выше, эмульсия может быть введена или использована в производстве других полезных композиций, особенно инкапсулированных масел, например порошков распылительной сушки. Обычно инкапсулированное масло содержит масляную композицию и инкапсулирующий агент, заключающий масляную композицию в капсулу, причем масляная композиция содержит витамин D3,25-гидроксивитамин D3 или оба компонента, растворенные в масле в количестве приблизительно между 5 и 50% по массе, в расчете на общую массу масляной композиции. Инкапсулированное масло может быть получено с использованием любой удобной технологии, например сушкой описанной выше эмульсии с помощью любой традиционной технологии, в том числе распылительной сушки, сублимационной сушки, сушки в псевдоожиженным слое, лотковой сушки, адсорбции и их любых комбинаций. Предпочтительно инкапсулированное масло получают путем распылительной сушки эмульсии, имеющей указанную выше водную фазу и содержащую инкапсулирующий агент; параметры распылительной сушки определяются физическими характеристиками, которые желательны для конечного инкапсулированного масла. Такие физические параметры включают размер частиц, форму и текучесть частиц порошка и содержание воды. Предпочтительно количество масла составляет меньше чем приблизительно 30%, меньше чем приблизительно 20%, меньше чем приблизительно 10% или меньше чем приблизительно 5% по массе в расчете на общую массу инкапсулированного масла. Инкапсулированное масло должно обладать хорошей текучестью, причем витамин D3 и/или 25-гидроксивитамин D3 должны быть равномерно распределены по всей композиции. Удобно, когда инкапсулированное масло представляет собой порошок. В инкапсулированное масло может быть добавлена любая другая подходящая добавка. Одной из таких добавок может быть добавка, повышающая текучесть, такая как диоксид кремния, чтобы повысить текучесть инкапсулированного масла. Дозировки. Ежедневная. Композиция согласно изобретению, в которой два активных компонента должны вводиться раздельно (или индивидуально), содержит витамин D или 25-ОН D3 в количестве приблизительно от 1 до 50 мкг, предпочтительно приблизительно 5 и 25 мкг. В качестве альтернативы отдельная суточная доза, имеющая оба витамина D и 25-ОН D3, содержит каждый активный компонент в количестве приблизительно от 1 до 50 мкг, предпочтительно приблизительно 5 и 25 мкг. Отношение витамина D к 25-ОН D3 в дозировке приблизительно может составлять от 50:1 до 1:50,более предпочтительно приблизительно от 25:1 до 1:25 и еще более предпочтительно приблизительно от 6:1 до 1:6. Многочисленные отдельные дозировки могут быть упакованы в отдельный комплект (или контейнер). Например, комплект может содержать тридцать отдельных суточных доз обоих активных компонентов (т.е. 60 отдельных дозировок) или объединенных (т.е. 30 дозировок, содержащих оба активных компонента). В комплект могут быть включены инструкции по приему дозировки пациентом. Еженедельная. В отдельной еженедельной дозировке витамин D или 25-ОН D3 содержится в количестве приблизительно от 7 до 350 мкг и предпочтительно приблизительно от 35 до 175 мкг. Альтернативно, отдельная еженедельная дозировка может содержать оба витамина D и 25-ОН D3, каждый в коли-4 019348 честве приблизительно от 7 до 350 мкг и предпочтительно приблизительно от 35 до 175 мкг. Отношение витамина D к 25-ОН D3 в дозировке приблизительно может составлять от 50:1 до 1:50, более предпочтительно приблизительно от 25:1 до 1:25 и еще более предпочтительно приблизительно от 6:1 до 1:6. Ежемесячная. В отдельной ежемесячной дозировке витамин D или 25-ОН D3 содержится в количестве приблизительно от 30 до 1500 мкг, предпочтительно приблизительно от 75 до 500 мкг. Альтернативно, отдельная ежемесячная дозировка может содержать оба витамина D и 25-ОН D3, каждый в количестве приблизительно от 30 до 1500 мкг, предпочтительно приблизительно от 75 до 500 мкг. Комплект может содержать одну, две, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять, десять, одиннадцать или двенадцать еженедельных или ежемесячных дозировок. Отношение витамина D к 25-ОН D3 в дозировке должно быть в диапазоне от 50:1 до приблизительно 1:50, более предпочтительно приблизительно от 25:1 до 1:25 и еще более предпочтительно приблизительно от 6:1 до 1:6. Содержание глюкозы в крови можно удобно измерять с использованием твердофазного ферментного анализа для того, чтобы определить количество глюкозы в крови или ее частях (например, в плазме и сыворотке). Имеются в распоряжении множество различных анализов и устройств для того, чтобы контролировать глюкозу в крови людей, страдающих диабетом. Можно измерять гликозилированный гемоглобин, чтобы контролировать хроническую гиперглицемию, поскольку гемоглобин гликозилируется,когда подвергается воздействию высокой концентрации глюкозы в течение длительного периода времени. Гиперглицемия может приводить к таким симптомам у диабетиков, как полифагия (чрезмерное потребление пищи), полидипсия (патологически усиленная жажда), полиурия (повышенное выделение мочи), утомление, потеря в весе и плохому заживлению ран. Считается, что нормальное содержание глюкозы в крови (плазме) взрослых людей составляет приблизительно от 4 до 7 ммоль/л (натощак). Имеются ограниченные данные о соотношении между перорально принятым 25-гидроксивитамином D3 и полученной системной концентрации этого витамина в организме людей, по сравнению с перорально принятым витамином D3. В настоящее время наиболее комплексное исследование кинетики витамина D3 и 25-гидроксивитамина D3 было проведено Barger-Lux et al. (Osteoperosis 8: с. 222-230, 1998). Здоровые мужчины принимали до 1250 мкг/день витамина D3 в течение восьми недель идо 50 мкг/день 25-гидроксивитамина D3 в течение четырех недель. Была продемонстрирована нелинейная кинетика для соотношения витамина D3 и 25-гидроксивитамина D3 в плазме, причем предполагалось, что это может быть вызвано насыщением активности гидроксилазы в печени. Это обосновывалось тем, что не было замечено, чтобы дозирование 25-гидроксивитамина D3 приводило к нелинейной кинетике (Barger-Lux et al., 1998). Хотя данные по 25-гидроксивитамину D3 действительно указывают на нелинейную кинетику, это становится очевидным, только когда доза превосходит уровень, который, как полагают, приводит к максимальной физиологической пользе; это может указывать на активность гомеостатического механизма, который преобладает при очень высоких дозах. Внутри физиологического диапазона это соотношение становится линейным, что сопоставимо с данными Barger-Lux et al. Эти сведения указывают, что с целью получения максимальной пользы для здоровья требуется суточная доза между 10 и 60 мкг 25-гидроксивитамина D. Исследование фармакокинетики принятого перорально 25-гидроксивитамина D3 распылительной сушки, витамина D3 распылительной сушки или обоих витаминов в человеческом организме было предпринято с целью изучения их физиологических взаимодействий. В частности, представляют интерес формы кривых доза витамина - отклик (которая указывает на концентрации витамина D3 и 25-гидроксивитамина D3 при циркуляции в течение заданного времени, а не просто на достигаемую среднюю или максимальную концентрацию) и стационарная кинетика. В отношении первой задачи, важно исследовать изменение формы кривых доза витамина - отклик при воздействии пары - витамина D3 и 25-гидроксивитамина D3. В отношении второй задачи, кроме того, необходимо исследовать их стационарную кинетику при дозировании менее частом, чем ежедневный, поскольку этот режим является предпочтительным для групп, в которых может наблюдаться плохое соответствие с ежедневным приемом добавок (таких как пожилые люди). Следующие ниже не ограничивающие примеры приведены для лучшей иллюстрации изобретения. Примеры Пример 1. Клиническое обследование. Рецептура. Материалы и методы. Рецептура 25-гидроксивитамина D3 получена в виде порошка распылительной сушки. В кратком изложении, 25-гидроксивитамин D3 и DLтокоферол растворяют в масле, имеющем триглицериды со средней длиной цепи, и затем эмульгируют в водном растворе модифицированного крахмала, сахарозы и натриевой соли аскорбиновой кислоты. Эмульсию распыляют, используя распылительную сушилку, в присутствии диоксида кремния. Образовавшийся порошок собирают, когда содержание воды (потери при сушке) составляет меньше 4%, и просеивают на сите 400 мкм. Порошок упаковывают и герметизируют в мешки из алюминиевой фольги, затем хранят в сухом помещении при температуре ниже 15C и используют в течение 12 месяцев от момента его производства. Были произведены три отдельные партии. Была получена основа путем смешивания в течение 120 мин в устройстве FRYMIX для обработки с якорной мешалкой при 70C в вакууме следующих компонентов: 17,300 кг воды (WBI),13,460 кг модифицированного пищевого крахмала (CAPSUL HS),3,270 кг сахарозы,0,730 кг натриевой соли аскорбиновой кислоты. Масляную фазу получают путем смешивания в течение 35 мин в сосуде с двойными стенками и с пропеллерной мешалкой при 82C следующих компонентов: 0,550 кг масла BERGABEST МСТ 60/40,0,049 кг кальцифедиола (HY-D USP),0,183 кг DLтокоферола. Масляную фазу переносят в основу в устройстве FRYMIX для обработки и подвергают предварительному эмульгированию с использованием внутренней коллоидной мельницы (60 мин, 70C). Предварительную эмульсию циркулируют через гомогенизатор высокого давления (20 мин). Эмульсию с вязкостью от 60 до 90 мПас при 70C перемещают с помощью насоса высокого давления в распылительную насадку. В качестве псевдоожижающего материала в колонну подают диоксид кремния (SIPERNAT 320DS). Ниже перечислены параметры распыления и сушки. Для каждой из трех партий 25-гидроксивитамина D3 получают в среднем 8,4 кг порошка распылительной сушки с содержанием 25-гидроксивитамина D3 около 0,25%. Другими компонентами рецептуры являются: 73,2% - модифицированный пищевой крахмал, 17,6% - сахароза, 4,0% - натриевая соль аскорбиновой кислоты, 3,0% - триглицериды со средней длиной цепи, 1,0% - диоксид кремния и 1,0%DLтокоферол. Рецептура витамина D3 получена в виде порошка распылительной сушки. В кратком изложении,витамин D3 и DLтокоферол растворяют в масле, имеющем триглицериды со средней длиной цепи, и затем эмульгируют в водном растворе модифицированного крахмала, сахарозы и натриевой соли аскорбиновой кислоты. Эмульсию распыляют, используя распылительную сушилку, в присутствии диоксида кремния. Образовавшийся порошок собирают, когда содержание воды (потери при сушке) составляет меньше 4%, и просеивают, чтобы удалить большие комки. Порошок хранят в сухом помещении при температуре ниже 15C и используют в течение 12 месяцев от момента его производства. Клиническое обследование. Субъекты исследования. Обследуют здоровых постклимактерических женщин (возраст от 50 до 70 лет) - при их согласии после получения соответствующей информации и отбирают, используя следующие критерии: содержание 25-гидроксивитамина D3 в сыворотке - между 20 и 50 нмоль/л, показатель массы тела - между 18 и 27 кг/м 2, кровяное давление - меньше чем 146/95 мм рт. ст., содержание кальция в сыворотке - меньше чем 2,6 нмоль/л, содержание глюкозы натощак - меньше чем 100 мг/дл, отсутствие упражнений высокой интенсивности - больше чем три раза в неделю, отсутствие терапии повышенного давления, отсутствие использования больших доз витамина D или кальциевой добавки или препарата, влияющего на костный обмен веществ (например, дифосфоната, кальцитонина, модулятора эстрогенного рецептора, гормональной заместительной терапии, гормона околощитовидной железы), и отсутствие "солнечного" облучения в течение исследования. Женщин случайным образом распределяют в одну из семи терапевтических групп (т.е. суточная,недельная, болюс в виде отдельной дозы и болюс в виде комбинированной дозы). Каждая группа включает пять женщин. Их отправили на четыре месяца в Цюрих (Швейцария), в течение зимы. Схема исследования. Целью является исследование и сопоставление фармакокинетических характеристик витамина D3 и 25-гидроксивитамина D3, принятых людьми. Исследованы эквимолярные количества обоих веществ. Режим основан на дозе 25- гидроксивитамина D3 20 мкг/день (или ее эквивалента в расчете на неделю). С целью сопоставления необходимо было принимать эквимолярные количества или витамина D3, или 25-гидроксивитамина D3. Что касается приема внутрь витамина D3, считается, что доза является достаточной для исключения непостоянства фона и обеспечения эффективной дозы для участников. Ежедневно: 120 приемов внутрь Болюс: комбинированный прием Капсулы из твердого геля, которые упакованы во флаконы, содержат 20 или 140 мкг или витаминаD распылительной сушки, или 25-гидроксивитамина D3 в каждой капсуле. Каждую дозировку потребляют орально за завтраком. Продолжительность исследования составляет четыре месяца для "Ежедневной" и "Еженедельной" групп. Субъекты, внесенные в список "Болюсной" группы, потребляют орально отдельную дозу при втором исследовательском осмотре. Концентрацию 25-гидроксивитамина D3 в плазме (например, пиковую и стационарную) определяют с использованием проб, отобранных у субъектов в различное время после поглощения дозы. С целью скрининга и установления значений исходного уровня получают пробу крови до внесения в список исследования и в клинической лаборатории измеряют содержание витамина D3, 25-гидроксивитамина D3,кальция, креатинина, альбумина и содержание глюкозы натощак в сыворотке. В понедельник первой недели исследования в течение 24 ч оценивают фармакокинетику витамина D3, 25-гидроксивитамина D3 и 1,25-дигидроксивитамина D в сыворотке; сывороточные маркеры (т.е. витамин D, 25-OH D, кальций,креатинин, альбумин, РТН, GOT, GPT, ALP, триглицериды, HDL, LDL, общий холестерин, bALP и содержание глюкозы натощак) и маркеры мочи (т.е. кальций, креатинин и DPD). Отбирают суточные пробы в остальные дни 1-й недели и в понедельник 2-й недели, чтобы оценить сывороточный витамин D3 и 25-гидроксивитамин D3, сывороточные маркеры (т.е. кальций, креатинин, альбумин) и маркеры мочи(т.е. кальций, креатинин). Оценки продолжаются по понедельникам 3-, 5-, 7-, 9-, 11-, 13- и 15-й недель. В понедельник 16-й недели отбирают пробы, чтобы оценить фармакокинетику витамина D3,25-гидроксивитамина D3 и 1,25-дигидроксивитамина D3 в сыворотке; сывороточные маркеры (т.е. витамин D3, 25-гидроксивитамин D3, кальций, креатинин, альбумин, РТН, GOT, GPT, ALP, триглицериды,HDL, LDL, общий холестерин, bALP и содержание глюкозы натощак) и маркеры мочи (т.е. кальций, креатинин и DPD). Результаты. Строгий статистический анализ полученных результатов не может быть осуществлен по двум причинам. Во-первых, при распознавании данных было обнаружено, что существует различие между группами исходного уровня глюкозы и что это различие наблюдается в ходе всего исследования. Во-вторых,при рассмотрении содержания инсулина отмечено, что у ряда пациентов по меньшей мере при одном визите инсулин зарегистрирован как "0.0". Это означает, что существует проблема либо с анализом, либо с образцом, методом или комбинацией. Однако, несмотря на указанные выше проблемы, были сделаны следующие наблюдения. Содержание глюкозы. Из десяти пациентов, принимавших ежедневно или еженедельно витамин D3, семь имели пониженное содержание глюкозы на 15-й неделе по сравнению со 2-й неделей. Для витамина 25-ОН D3, 6 из 10 пациентов имели пониженное содержание глюкозы. Таким образом, оказалось, что витамины D3, а также 25-ОН могут снижать уровень глюкозы. Содержание инсулина. Из десяти пациентов, принимавших ежедневно или еженедельно витамин D3, только четыре имели содержание инсулина, в котором отсутствовал результат "0.0" в каком-либо визите. Из этих четырех пациентов трое имели повышенное содержание инсулина на 15-й неделе по сравнению со 2-й неделей; и только у одного отмечено пониженное значение. Из десяти пациентов, принимавших ежедневно или еженедельно витамин 25-ОН D3, пятеро имели содержание инсулина, в котором отсутствовал результат"0.0" в каком-либо визите. Из этих пятерых пациентов, один имел повышенное содержание инсулина на 15-й неделе по сравнению со 2-й неделей; но у четырех отмечено пониженное значение. Пониженное содержание инсулина является желательным результатом, так как указывает на улучшение инсулиновой чувствительности. Таким образом, оказалось, что витамин 25-ОН D3 обладает большей способностью улучшать инсулиновую чувствительность, чем витамин D3. Пример 2. Исследование на мышах. Воздействие 25-ОН D3 или комбинации 25-ОН D3 и витамина D3 на глюкозу в крови проведено в двух исследованиях на мышах. В первом эксперименте определяют воздействие 25-ОН D3 на глюкозу в крови с использованием модели мышечной гипертрофии. Кратко, анестезируют две группы по 10 животных и закрепляют левую заднюю конечность у животных. Все животные получают болеутоляющее средство. Делают небольшой надрез на шкуре, выше икроножной мышцы. Обнажают всю икроножную мышцу и ее сухожилия. Обе верхушки икроножной мышцы осторожно отсекают от нижележащих неповрежденных мышц, причем принимают меры, чтобы не разорвать нервы и сосуды. Шкурку зашивают шелковой хирургической нитью и возвращают животных в клетки. После того как животные отходят от анестезии, они могут двигаться в своих клетках без затруднений. Животных обрабатывают через желудочный зонд в течение трех недель витамином 25-ОН D3 при суточной дозе 50 мкг/кг, причем контрольная группа получала носитель. В конце исследования берут пробу крови и определяют концентрацию глюкозы в плазме с помощью автоматического анализатора Hitachi 912. Во втором эксперименте определяют воздействие 25-ОН D3 или комбинации 25-ОН D3 и витаминаD3 на глюкозу в крови, используя модель мышечной атрофии. Кратко, случайно распределяют девятимесячных в начале изучения на пять групп по 10 животных в группе. Животных размещают в специальных клетках на период трех недель, причем животных подвешивают за хвост, что приводит к атрофии скелетной мышцы в ненагруженных задних конечностях. В идентичные клетки помещают дополнительную группу с нагруженными задними конечностями, чтобы обнаружить влияние отсутствия нагрузки. Все мыши содержатся отдельно и имеют свободный доступ к корму и воде по своему желанию. Всех животных ежедневно обрабатывают через желудочный зонд в течение 3 недель эксперимента: 1) контрольная группа с нагруженными конечностями, получавшая носитель (желатин); 2) контрольная группа с ненагруженными конечностями, получавшая носитель (желатин); 3) группа витамина D3 с ненагруженными конечностями, получавшая витамин D3 (50 мкг/кг/по массе); 4) группа 25-ОН D3 с ненагруженными конечностями, получавшая 25-ОН D3 (50 мкг/кг/по массе); 5) группа 25-ОН D3 плюс витамин D3 с ненагруженными конечностями, получавшая витамин D3 + 25-ОН D3 (50 + 50 мкг/кг/по массе). В табл. 1 показана концентрация глюкозы в плазме после 1-го эксперимента. Таблица 1 В табл. 2 показана концентрация глюкозы в плазме после завершения 2-го эксперимента. Таблица 2 Результаты из табл. 1 показывают, что обработка витамином 25-ОН D3 приводит к снижению концентрации глюкозы в плазме, по сравнению с контрольной группой без лечения. Результаты в табл. 2 показывают, что отсутствие нагрузки задних конечностей приводит к увеличению содержания глюкозы в крови (контрольная группа с нагрузкой по сравнению с контрольной группой без нагрузки). ОбработкаD3 или 25-ОН D3 приводит к умеренному снижению содержания глюкозы в крови. Однако лечение комбинацией витамина D3 и 25-ОН D3 приводит к синергетическому снижению содержания глюкозы в плазме, которое почти достигает уровня для контрольных животных с нагрузкой, таким образом, ослабляется эффект отсутствия нагрузки. Таким образом, данные настоящего изобретения показывают, что комбинация витамина D3 и 25-ОН D3 синергетически снижает повышенное содержание глюкозы в крови и нормализует патологические изменения содержания глюкозы. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ лечения гипергликемии у человека, включающий введение 25-гидроксивитамина D3 (25 ОН D3) и витамина D в количестве, достаточном для снижения или поддержания содержания глюкозы в плазме крови на уровне между 4 и 7 ммоль/л. 2. Применение 25-ОН D3 и витамина D для поддержания нормального уровня глюкозы в плазме крови или для снижения содержания глюкозы в крови до нормального уровня. 3. Применение 25-ОН D3 и витамина D для лечения гипергликемии у человека.