Получение и выделение гликозидов индолокарбазола

1 Данное изобретение относится к новому способу получения гликозидов индолокарбазола высокой степени чистоты, которые ингибируют рост опухолевых клеток и вследствие этого применимы при лечении рака и подобных заболеваний у млекопитающих. В области химиотерапии рака уже применяется большое число соединений для практического применения в качестве противоопухолевых агентов. Однако остается необходимость в разработке более эффективных соединений,которые эффективны против различных опухолей (смотри Proceedings of the 47th General(1988. Это приводит к необходимости разработки производных индолокарбазола (cмотри патенты US4487925; 4552842; 4785085; 5591842 и 5922860; патент Японии 20277/91;(1991); патенты WO91/18003; WO98/07433; и ЕР 0545195 A1). Показано, что указанные соединения действуют как ингибиторы топоизомеразы и поэтому применимы при лечении рака(Cancer Chemother. Pharmacol. 34 (suppl): S41S45 (1994. Успех указанных соединений в лечении многочисленных раковых заболеваний заставляет разрабатывать усовершенствованные способы их синтеза (см. Bioorg.Med. Chem. Letters 2000, 10,419; Tetrachedron 1997, 53, 5937; Tetrahedron 1997, 53, 585 и Synthesis 1976, 414). Однако ранее известные способы связаны с многочисленными проблемами, такими как использование нежелательных растворителей, солей ртути или серебра,низкий выход и образование нежелательных побочных продуктов, приводящих к обязательным утомительным или затяжным стадиям очистки. Например, ранее известные способы получения гликозидов индолокарбазола III высокой степени чистоты требуют процедур очистки,таких как комбинации обработки углем, хроматографии и/или перекристаллизации сырого материала, которые являются трудоемкими,требующими много времени и опасными, особенно если осуществляются в промышленном масштабе, из-за высокой цитотоксической природы продукта (см. BioorgMed. Chem. Letters 1999, 3307; и Tetrahedron 1997, 585 (описан синтез структурно подобного соединения, требующий повторного растворения сырого продукта для получения чистого материала. Следовательно, целью данного изобретения является разработка нового пути к указанным противоопухолевым веществам, производным индолопирролокарбазола, который позволил бы преодолеть проблемы, свойственные ранее известным синтезам, особенно пути,дающего продукт достаточной степени чистоты,чтобы можно было использовать его в последующих композициях как таковой. Данное изобретение относится к новому способу получения гликозидов индолокарбазола формулы I высокой степени чистоты, которые ингибируют рост опухолевых клеток и вследствие этого применимы при лечении раковых и подобных заболеваний у млекопитающих. Один из вариантов осуществления данного изобретения иллюстрируется способом получения соединения формулы I высокой степени чистоты(a) доведения рН кислой смеси, состоящей,в основном, из спирта, кислоты, воды и соединения I, путем добавления основания до образования раствора с рН в интервале от примерно 1,5 до примерно 6,5;(b) поддерживания температуры раствора стадии (а) в интервале от примерно 50 до примерно 100 С; и(c) выделения кристаллов соединения I. В соответствии со вторым вариантом осуществления данного изобретения предлагается способ, включающий стадии(a) доведения рН кислой смеси, состоящей,в основном, из кислоты, спирта, воды и соединения I, путем прибавления основания до образования раствора с рН в интервале от примерно 1,5 до примерно 6,5;(b) регулирования раствора стадии (а) спиртом до получения раствора, содержащего от примерно 10 до примерно 30% (вес/объем) воды в спирте с концентрацией соединения I примерно от 10 до 20 мл/г;(c) доведения температуры раствора стадии (b) до температуры в интервале от примерно 50 до примерно 100 С;(с) таким образом, чтобы разбавить раствор в соотношении 3:2 (раствор:спирт);(e) выдерживания раствора стадии (d) при температуре в интервале от примерно 50 до примерно 100 С до появления кристаллов соединения I с образованием суспензии; и(f) выделения кристаллов соединения I. Дополнительный вариант осуществления изобретения представляет способ, дополнительно включающий удаление защитных групп промежуточного соединения II(где R независимо друг от друга означают водород или замещенную или незамещенную бензильную защитную группу; причем по меньшей мере один R означает незамещенную или замещенную бензильную защитную группу) гидрированием в присутствии катализатора с образованием реакционной смеси с последующим фильтрованием реакционной смеси, для получения смеси стадии (а). В альтернативном варианте осуществления изобретения R означает бензил в способе, описанном выше. В третьем варианте осуществления данного изобретения предлагается способ получения соединения III высокой степени чистоты(a) доведения рН кислой смеси, состоящей,в основном, из кислоты, спирта, воды и соединения III, путем добавления основания до образования раствора с рН в интервале от примерно 1,5 до примерно 6,5;(b) регулирования раствора стадии (а) спиртом до получения раствора, в котором содержится от примерно 10 до примерно 30%(c) доведения температуры раствора стадии (b) до температуры в интервале от примерно 50 до примерно 100 С;(e) добавления спирта к полученному раствору таким образом, чтобы разбавить раствор в(f) выдерживания раствора стадии (е) при температуре в интервале от примерно 50 до примерно 100 С до образования кристаллов соединения III с получением суспензии; и(g) выделения кристаллов соединения III. В соответствии с третьим вариантом осуществления изобретения способ дополнительно предусматривает стадию удаления защитных групп из промежуточного соединения II(где R независимо друг от друга означают водород или замещенную или незамещенную бензильную защитную группу; причем по меньшей мере один R означает замещенную или незамещенную бензильную защитную группу) путем гидрирования в присутствии катализатора с образованием реакционной смеси, с последующим фильтрованием реакционной смеси с получением смеси стадии (а). Еще одним вариантом осуществления изобретения является способ, описанный выше, где 5 рН на стадии (а) доводят до рН в интервале от примерно 1,5 до примерно 3,5; раствор на стадии (b) регулируют таким образом, чтобы он имел от примерно 15 до примерно 25%(вес/объем) воды в спирте и концентрация соединения III была от примерно 12 до примерно 18 мл/г; и температуру на стадии (с) доводят до примерно 70 С. Дополнительным выполнением является способ, указанный выше, где рН на стадии (а) доводят до рН примерно 2,5; раствор на стадии(b) регулируют таким образом, чтобы раствор имел примерно 20% (вес/объем) воды в спирте и концентрация соединения III была примерно 15 мл/г; и температуру на стадии (с) доводят до примерно 70 С. Данным изобретением охватывается также способ, описанный выше, дополнительно предусматривающий стадию регулирования суспензии стадии (f) таким образом, чтобы содержание воды уменьшалось до от примерно 1 до примерно 10% (вес/объем) перед выделением кристаллов соединения III на стадии (g). Предпочтительным вариантом осуществления изобретения является способ получения соединения III высокой степени чистоты(a) доведения рН кислой смеси, состоящей,в основном, из кислоты, спирта, воды и соединения III, путем добавления низшего алкиламинового основания для образования раствора с рН примерно 2,5;(b) регулирования раствора стадии (а) изопропиловым спиртом до получения раствора, в котором примерно 20% (вес/объем) воды в изопропиловом спирте с концентрацией соединения I примерно 15 мл/г;(c) доведения температуры раствора стадии (b) до температуры примерно 70 С;(e) добавления к раствору изопропилового спирта для получения раствора, в котором соотношение (раствор:изопропиловый спирт) составляет примерно 3:2;(f) выдерживания раствора стадии (е) при температуре примерно 70 С до образования кристаллов соединения I с образованием суспензии;(g) регулирования суспензии таким образом, чтобы содержание воды в ней составляло примерно 3% (вес/объем);(h) выдерживания суспензии при примерно 70 С перед охлаждением до примерно 22 С; и(i) выделения кристаллов соединения III. В дополнительном варианте предпочтительного осуществления изобретения предлагаемый способ дополнительно включает удаление защитных групп из промежуточного соединения II(где R независимо друг от друга означают водород или замещенную или незамещенную бензильную защитную группу; причем по меньшей мере один R означает замещенную или незамещенную бензильную защитную группу) путем гидрирования в присутствии катализатора с последующим фильтрованием реакционной смеси,предоставляя смесь стадии (а). Кроме того, в объеме данного изобретения раскрывается способ, описанный выше, где низшим алкиламином на стадии (с) является триэтиламин. Данное изобретение предоставляет продукт, который может непосредственно кристаллизоваться из реакционной среды без дополнительных стадий очистки. Кроме того, предложенный способ дает кристаллы с более стабильной кристаллической геометрией, 3-D-трапецоиды в отличие от ранее известных способов, (дающих) 2-D-иглы, что доказано кинетикой растворимости. Соединение I и соединение III могут быть синтезированы согласно способу, описанному в патенте US5591842, опубликованном 7 января 1997, приведенном здесь в качестве ссылки. Порошок соединения III, полученный по способу, описанному в патенте WO 95/30682, и в патенте US5591842, кристаллизуют по способу данного изобретения. Использованный в данном описании термин высокой степени чистоты относится к продукту, содержащему 1% или менее общих примесей, как измерено с помощью ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии). Кислотная смесь относится к смеси, которая имеет рН меньше примерно 7,0. Более предпочтительно рН кислотной смеси меньше примерно 2,5. Для данного описания виды кислот, которые могут быть использованы, включают, но не ограничивают, безводные или водные HF, HCl,HBr, HI, НNО 3, НСlO4, серную, фосфорную, 7 пропионовую кислоты, MsOH, TsOH, монофосфатную соль, дифосфатную соль, фосфатную смешанную соль, карбоновые кислоты или галогениды аммония. Фосфатная смешанная соль может быть представлена как M1M2HPO4, гдеM1 и М 2 независимо выбраны из Н, Na, K,NH4OH, калий-натрия и подобных. Более предпочтительно в качестве кислоты выбрана HCl. Выбор катализатора в описанных реакциях гидрогенолиза может быть очевиден для специалистов в данной области. Подходящими катализаторами являются палладий на угле,Pd(OH)2, никель Ренея, вольфрамовые катализаторы, Rh/Al2O3 и подобные. Предпочтительными являются палладиевые катализаторы, такие как палладий на угле. Внесение затравки относится к введению в раствор кристаллов (затравочных кристаллов), чтобы катализировать осаждение кристаллов из раствора. Внесение затравки может быть осуществлено добавлением затравочных кристаллов в твердом сухом виде, или затравочные кристаллы могут быть добавлены в виде суспензии в жидкости. Затравочными кристаллами могут быть кристаллы того же соединения, которые индуцирует осаждение, или могут быть другим соединением. В данном случае предпочтительно внесение затравки в виде суспензии того же соединения. Выдерживание означает выдержку раствора при постоянных температуре и объеме в течение определенного периода времени. Время реакций в данном изобретении не является критическим, если специально не указано иначе, и может быть легко установлено специалистами в данной области. Фильтрование означает пропускание раствора через некоторую среду, так что частицы вещества удаляются. Выбор среды не является критическим и может быть легко выбран на практике. Фильтрование может осуществляться через целит, солкафлок, песок, стекловатый шлак, диатомовую землю и подобные. Спирт означает органическую молекулу с линейной или разветвленной цепью с 1-5 атомами углерода по меньшей мере с одной гидроксильной группой, выступающей как активная группа. Спиртами являются метанол, пропанол,изопропанол, бутанол, втор-бутанол и т.д. Предпочтительным спиртом является изопропиловый спирт. Термин замещенная бензильная защитная группа означает, но не ограничивает, параМеО-бензил, орто-нитробензил, пара-нитробензил, пара-галогенбензил (где галогеном может быть хлор, бром и иод), 2,6-дихлорбензил, дифенилметил, трифенилметил и подобные. Дополнительные подходящие защитные группы могут быть найдены в Protective Groups in 8 Данное изобретение предусматривает стадию, где рН фильтрата доводят до определенного уровня. Значение рН может быть установлено с помощью любого подходящего основания,такого как триэтиламин, диизопропилэтиламин,трибутиламин, пиридин, 2,6-лутидин, 2,4,6-лутидин, ДБУ (диазабицикло[5,4,0]ундец-7-ен), DBN(1,5-диазабицикло[4,3,0]но-5-ен), диизопропиламин, N,N-диметиланилин, DABCO (1,4-диазабицикло[2,2,2]октан), N-алкилморфолин и подобные. Предпочтительны низшие алкиламиновые основания. Наиболее предпочтителен триэтиламин. Суспензия относится к суспензии твердого вещества или кристаллов в жидкости. Твердое вещество может быть частично, неполностью или полностью нерастворимо в жидкости. Схема А иллюстрирует обобщенный подход к получению биологически активных гликозидов индолокарбазола путем удаления защитных групп/кристаллизации с получением продукта с высоким выходом и высокой степени чистоты, предотвращая необходимость в дальнейших стадиях очистки перед составлением рецептуры. Схема А Примеры Примеры способствуют дальнейшему пониманию изобретения. Использованные конкретные материалы, виды и условия имеют в виду дальнейшую иллюстрацию изобретения и не ограничивают области его применения. Пример 1. Способ получения соединения 1-1 описан в патенте WО 95/30682 (эквивалент: патент US 5804564), приведенном здесь в качестве ссылки. Этанол (14,0 л) добавляли по каплям к двухфазной смеси соединения 1-1 (1,55 кг, 1,44 моль),толуола (5,6 л) и 48%-ного водного KОН (4,15 кг) в 50-литровом стеклянном сосуде в течение 0,5 ч при комнатной температуре, поддерживая внутреннюю температуру ниже 30 С. Полученную темно-красную смесь перемешивали при 2030 С 12 ч, причем смесь за это время превращалась в гомогенный красный раствор. Затем 9 смесь дополнительно выдерживали при -5 С в течение часа, после чего медленно добавляли 10%-ную водную лимонную кислоту (23,5 кг) до получения смеси с рН 7,7-8,0, поддерживая внутреннюю температуру ниже 5 С. Полученную смесь нагревали и перемешивали при 2530 С 7 ч, периодически добавляя за это время дополнительно 10%-ную водную лимонную кислоту (1,77 кг), сохраняя значение рН при 7,58,0. Смесь затем экстрагировали МТВЕ (третбутилметиловым эфиром) (15,5 л) и отделенный органический слой промывали 3%-ным воднымG-60, 155 г, комнатная температура, 1 ч). Профильтрованный раствор концентрировали в вакууме до объема 6 л и действовали струейMeCN (2 х 15 л), каждый раз упаривая в вакууме до объема 6 л (остаточный толуол: 9%). Смесь затем разбавляли MeCN до получения 23,3 л раствора и медленно прибавляли МеОН (3,0 л) за 0,5 ч при 22-25 С с последующим внесением затравки продукта (1-2), которая инициировала кристаллизацию. Полученную смесь затем выдерживали при указанной температуре 1 ч с последующим медленным добавлением МеОН(17,6 л) в течение 1 ч. Полученную желтую суспензию выдерживали при 22-25 С 1 ч и затем выдерживали при 0-5 С 3 ч. Кристаллы отделяли фильтрованием, промывали смесью (9:1 по объему) MeCN/MeOH (15,5 л) и сушили в вакууме, получая соединение 1-2. 1NaHCO3 (15,5 кг, 5,51 моль) в 50-литровом стеклянном сосуде при 0 С за 1,5 ч, поддерживая внутреннюю температуру 0-5 С. Полученную смесь перемешивали еще в течение часа при 0-5 С и экстрагировали МТВЕ, метил-третбутиловым эфиром (41 л) при температуре ниже 10 С. Отделенный органический слой промывали 10%-ным водным Na2SО 3 (5,0 кг) при температуре ниже 10 С и затем 5%-ным водным NaCl(3,0 кг) и 1%-ным NaCl (3,0 кг) при комнатной температуре. Светло-красный органический слой затем подвергали ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии) и подсчитывали содержание 1,48 кг (5,49 моль) желаемого кетона (соединение 2-2). Затем раствор помещали в 50-литровый сосуд и концентрировали в вакууме (баня 40 С) до примерно 8 л с промывкой н-гептаном (2 х 7,5 л) с образованием гептановой смеси (остатки МТВЕ и MeCN 0,005% и 0,90% соответственно) с последующим разбавлением н-гептаном до получения объема 37,5 л. Затем смесь нагревали до 70 С и добавляли раствор Boc-NHNH2 (801 г, 6,06 моль) в толуоле (1,5 л). Полученную смесь перемешивали при температуре выше 70 С 3 ч с последующим охлаждением до 60 С. Вносили затравку продукта (вещество 2-3) и полученную смесь выдерживали при 59-61 С 1 ч для инициирования кристаллизации. Смесь затем оставляли охлаждаться до комнатной температуры и выдерживали в течение ночи. Кристаллы отделяли фильтрованием при 20 С, промывали н-гептаном (7,5 л), затем смесью (7:3 по объему) н-гептан/изо-РrОН (4,5 л) и н-гептаном (4,5 л) и сушили в вакууме с получением соединения 2-3 в виде бесцветных игл. По каплям затем прибавляли раствор соединения 2-3 (1,64 кг, 4,27 моль) и ТГФ (5,9 л) к перемешиваемой суспензии NaBH4 (364 г, 9,62 моль) и ТГФ (7,2 л) в 50-литровом стеклянном сосуде при 0 С, поддерживая внутреннюю температуру ниже 5 С. К полученной смеси затем прибавляли по каплям ВF3 ОЕt2 (920 г, 6,48 моль),поддерживая внутреннюю температуру ниже 10 С. Полученную бесцветную суспензию перемешивали при 0-5 С в течение 1 ч, после чего прибавляли по каплям 6 н водный NaCl (4,29 кг,23,5 моль) за 1 ч, поддерживая внутреннюю температуру ниже 20 С (oсторожно: бурное выделение газа). Полученную бесцветную суспензию нагревали и перемешивали при 60-65 С 2 ч, за которые выделение газа прекращалось. К смеси при 3 С медленно прибавляли дегазированный 2 н водный NaOH (12,9 л, 25,8 моль),поддерживая внутреннюю температуру ниже 20 С, с последующим нагреванием полученной смеси до комнатной температуры и экстрагированием с применением дегазированного МТВЕ(40 л). Отделенный органический слой промывали дегазированной водой (6,6 л), затем дегазированным рассолом (6,5 л) и дегазированной водой (3,3 л). Органический слой затем разбавляли дегазированным МТВЕ до образования 57 литрового раствора и добавляли затравку продукта (соединение 2-4) с последующим прибавлением по каплям раствора щавелевой кислоты(1,97 л) за 15 мин, которые кристаллизовали продукт. Полученную бесцветную суспензию выдерживали при комнатной температуре в течение ночи и отделяли кристаллы фильтровани 11 ем, промывали МТВЕ (12,3 л) и сушили в вакууме, получая соединение 2-4 (1,25 кг, 88%,99,9%-ной чистоты по ВЭЖХ) в виде бесцветных пластинок. 1 В продуваемый азотом 22-литровый сосуд при 22 С загружали DMA (8,3 л), соединение 12 (1,00 кг; 0,94 моль) и соединение 2-4 (350 г; 1,06 моль). Полученную суспензию дегазировали при перемешивании приложением к сосуду вакуума (40-80 торр) циклами по 5 мин и заполнением азотом (три цикла). Содержимое нагревали до 65 С за 30 мин, во время чего раствор становился гомогенным. Быстро добавляли триэтиламин (146 мл; 1,05 моль) и раствор выдерживали при 65 С 3 ч. Содержимое охлаждали до 45 С и переносили в 50-литровый цилиндрический сосуд, содержащий продутый азотом МТВЕ (17,0 л), охлажденный до 10 С. Содержимое снова охлаждали до 10 С и за 10 мин прибавляли продутую азотом воду (4,7 л), поддерживая внутреннюю температуру ниже 30 С. К двухфазной смеси при 22 С добавляли 2 М соляную кислоту (440 мл). После взбалтывания при 22 С в течение 10 мин слои разделяли и органический слой промывали водой (3 х 3,8 л). Органический слой концентрировали в вакууме до 5 л (20-25 С) и для удаления МТВЕ обрабатывали несколькими потоками ТГФ. Удаление растворителя в вакууме дало желаемое соединение 3-1. 1(IPA) (7,9 л) и 3 н НСl (224 мл). Содержимое гидрировали при 40/40 фунтов на кв.дюйм при быстром перемешивании 4-14 ч, при этом абсорбировалось 110% от теоретического количества водорода. Содержимое охлаждали до 25 С и реакционную смесь фильтровали через слой солка-флок, который промывали 3/2 IРА/ТГФ(1 х 3 л). Фильтрат доводили до рН 2,5 (интервал 1,5-6,5), используя 1 М триэтиламина в IPA(примерно 600 мл), с последующим добавлением воды (4,0 л). Загрузку концентрировали при атмосферном давлении до объема 7,5 л. Перегонку продолжали при постоянном объеме загрузки, добавляя смесь (4/1) IPA/воды (6,5 л). Содержание воды снижалось до 20% (вес/ объем) (интервал 10-30% воды) добавлением в сосуд IPA (примерно 9 л), поддерживая объем загрузки 7,5 л. Содержимое охлаждали до 70 С и вносили затравку (5,0 г) в виде суспензии вIPA (50 мл). Загрузку выдерживали при 70 С 1 ч с последующим прибавлением IPA (5,0 л) за 90 мин. Загрузку выдерживали при 70 С 9-24 ч, в течение которых масса продукта закристаллизовывалась. Постоянный объем перегонки, питаемый IPA, (17 л) приводил к уменьшению содержания воды до 3% (вес/объем) (интервал 110%). Суспензию выдерживали при 70 С в течение 3-6 ч и затем охлаждали до 22 С и выдерживали 1 ч. Суспензию фильтровали и лепешку на фильтре промывали IPA (2,5 л) и затем метанолом (1,5 л), после чего сушили 6 ч в вакууме при 38 С, получая продукт 4-1 в виде оранжевого твердого вещества с чистотой более 99 А% и выходом более 80%. 13 Данные ЯМР (константы сочетания (J) приведены в герцах): 1 Н ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d6) данные для главного ротамера 11,23 (с, 1 Н), 9,80 (с,1 Н), 9,77 (с, 1 Н), 8,90 (д, J=8,4, 1H), 8,82 (д,J=8,4, 1H), 7,21 (шир.с, 1H), 7,01 (шир.с, 1H),6,84 (перекрывание м, 6 Н), 6,00 (д, J=8,0, 1H),5,88 (т, J=3,6, 1H), 5,57 (д, J=2,4, 1H), 5,34 (д,J=4,4, 1H), 5,13 (д, J=4,4, 1H), 4,94 (д, J=4,4, 1H),4,56 (т, J=5,6, 2 Н), 4,04 (дд, J=11,2, 3,2, 1H), 3,95(перекрывание м, 2 Н), 3,81 (дд, J=10,4, 4,0, 1H),3,53 (перекрывание м, 6 Н); 13 С ЯМР (100,64 МГц, ДМСО-d6) данные для главного ротамера 169,03, 168,94, 157,79,157,63, 144,38, 143,12, 129,46, 127,92, 125,19(2 С), 118,91, 117,57, 115,94, 114,32, 114,23,113,92, 110,30, 110,24, 97,54, 97,49, 84,49, 78,39,76,77, 72,88, 67,53, 62,59, 60,47 (2 С), 58,33,21. Анализ ВЭЖХ Параметры ВЭЖХ: Колонка: YMC ODS-AQ (250 х 4,6 мм) Скорость потока: 1,5 мл/мин Определение: 228 нм Подвижная фаза: А=0,1% Н 3 РO4 водный В=ацетонитрил Градиент: Мин А, % В, % 0 85 15 40 74 26 60 30 70 61 85 15 65 85 15(a) доведения рН кислой смеси, состоящей,в основном, из кислоты, спирта, воды и соединения I, путем добавления основания до получения раствора с рН в интервале от примерно 1,5 до примерно 6,5;(b) регулирования раствора со стадии (а) спиртом до образования раствора, содержащего от примерно 10 до примерно 30% (вес/объем) воды в спирте и с концентрацией соединения I от примерно 10 до 20 мл/г;(c) доведения температуры раствора со стадии (b) до температуры в интервале от примерно 50 до примерно 100 С;(e) выдерживания раствора со стадии (d) при температуре в интервале от примерно 50 до примерно 100 С до образования кристаллов соединения I с образованием суспензии; и(f) выделения кристаллов соединения I. 3. Способ по п.2, который дополнительно включает удаление защитных групп из промежуточного соединения II Объем впрыскивания: 10 мкл Температура: 25 С ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ получения кристаллов соединения I(a) доведения рН кислой смеси, состоящей,по существу, из кислоты, спирта, воды и соединения I, путем добавления основания до получения раствора с рН в интервале от примерно 1,5 до примерно 6,5;(b) поддерживания температуры раствора со стадии (а) в интервале от примерно 50 до примерно 100 С; и(c) выделения кристаллов соединения I. 2. Способ по п.1, включающий стадии(где R независимо друг от друга означают водород или замещенную или незамещенную бензильную защитную группу; при условии, что по меньшей мере один R означает замещенную или незамещенную бензильную защитную группу) гидрированием в присутствии катализатора с образованием реакционной смеси с последующим фильтрованием реакционной смеси с получением смеси стадии (а). 4. Способ по п.3, где R означает бензил. 5. Способ получения соединения III высокой степени чистоты(a) доведения рН кислой смеси, состоящей,в основном, из кислоты, спирта, воды и соеди 15 нения III, путем прибавления основания до получения раствора с рН в интервале от примерно 1,5 до примерно 6,5;(b) регулирования раствора со стадии (а) спиртом до образования раствора, содержащего от примерно 10 до примерно 30% (вес/объем) воды в спирте и с концентрацией соединения III от примерно 10 до 20 мл/г;(c) доведения температуры раствора со стадии (b) до температуры в интервале от примерно 50 до примерно 100 С;(e) добавления спирта к раствору до разбавления раствора в отношении примерно 3:2(f) выдерживания раствора со стадии (е) при температуре в интервале от примерно 50 до примерно 100 С до образования кристаллов соединения III с образованием суспензии; и(g) выделения кристаллов соединения III. 6. Способ по п.5, который дополнительно включает удаление защитных групп из промежуточного соединения II(где R независимо друг от друга означают водород или замещенную или незамещенную бензильную защитную группу; при условии, что по меньшей мере один R означает замещенную или незамещенную бензильную защитную группу) гидрированием в присутствии катализатора с образованием реакционной смеси с последующим фильтрованием реакционной смеси с получением смеси стадии (а). 7. Способ по п.5 или 6, где рН на стадии(а) доводят до значения в интервале от примерно 1,5 до примерно 3,5; раствор на стадии (b) доводят до раствора, содержащего от примерно 15 до примерно 25% (вес/объем) воды в спирте с концентрацией соединения III от примерно 12 до примерно 18 мл/г; и температуру на стадии(с) доводят до примерно 70 С. 8. Способ по п.7, где на стадии (а) доводят рН до примерно 2,5; раствор на стадии (b) доводят до раствора, содержащего 20% (вес/объем) воды в спирте с концентрацией соединения III примерно 15 мл/г; и температуру на стадии (с) доводят до примерно 70 С. 9. Способ по п.8, дополнительно включающий стадию регулирования суспензии после 16 стадии (f) таким образом, чтобы перед выделением кристаллов соединения III на стадии (g) содержание воды в суспензии было снижено до интервала от примерно 1 до примерно 10%(a) доведения рН кислой смеси, состоящей,в основном, из кислоты, спирта, воды и соединения III, путем добавления низшего алкиламинного основания до получения раствора с рН примерно 2,5;(b) регулирования раствора со стадии (а) изопропиловым спиртом до образования раствора, содержащего от примерно 20% (вес/ объем) воды в изопропиловом спирте и с концентрацией соединения I примерно 15 мл/г;(c) доведения температуры раствора со стадии (b) до температуры примерно 70 С;(e) добавления изопропилового спирта к раствору до получения раствора, в котором соотношение (раствор:спирт) составляет примерно 3:2;(f) выдерживания раствора со стадии (е) при температуре примерно 70 С до образования кристаллов соединения I с образованием суспензии;(g) регулирования суспензии таким образом, чтобы содержание воды в ней составляло примерно 3% (вес/объем);(h) выдерживания суспензии при примерно 70 С перед охлаждением до примерно 22 С; и(i) выделения кристаллов соединения III. 11. Способ по п.10, дополнительно включающий удаление защитных групп из промежуточного соединения II(где R независимо друг от друга означают водород или замещенную или незамещенную бензильную защитную группу; при условии, что по меньшей мере один R означает замещенную или незамещенную бензильную защитную группу) гидрированием в присутствии катализатора с образованием реакционной смеси с последующим фильтрованием реакционной смеси с получением смеси стадии (а). 12. Способ по п.11, где низшим алкиламином на стадии (а) является триэтиламин.