Лекарственный препарат, обладающий противовирусным и антибактериальным действием

Изобретение относится к области медицины, в частности к лекарственным препаратам противовирусного и антибактериального действия, которые могут быть использованы в инъекционной форме. Лекарственный препарат содержит компоненты при их следующем соотношении, мас.%: Фармацевтически эффективное количество препарата вводят внутривенно, внутримышечно или перорально.KZ-B-6730 БАШКИРЦЕВА Н. Синий йод - и недуг уйдет. Изд-во "Крылов", 2009 [он-лайн] [Найдено 2012-01-11] Найдено из Интернет: URL: Йода спиртовой раствор - Инструкция,применение, цена, отзывы. Источники данных: Энциклопедия лекарств, 2004, Машковский М.Д. Лекарственные средства, 2000 [он-лайн] [Найдено 2012-01-26] Найдено из Интернет: URL: http://(71)(72)(73) Заявитель, изобретатель и патентовладелец: БЕГАЛИЕВ ШОКАН САБИРХАНОВИЧ; НУГЕРБЕКОВА КУЛЬШАТ МАГЗУМОВНА (KZ) 021496 Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к получению йодосодержащих лекарственных препаратов. Препараты йода в настоящее время занимают важное место среди современных антисептиков. Возбудители многих инфекций чувствительны к йодсодержащим препаратам, которые проявляют фунгицидное, цитоцидное, антипротозойное действия, обладают активностью в отношении некоторых спор и не формируют приобретенной устойчивости к ним. Проблема использования йода состоит в том, что в высокой концентрации он является токсичным,раздражает кожу и слизистые оболочки. Однако в комплексе с полисахаридами и полимерами йод в значительной мере теряет токсичность, действует более медленно и продолжительно (в течение 5 ч), сохраняя при этом антивирусные и антимикробные свойства (Никулин В.Н., Герасименко В.В., 2008; Свирская Е., 2008). Йод проявляет также фунгицидное, цитоцидное, антипротозойное действие, обладает активностью в отношении некоторых спор. При резорбтивном действии он активно участвует в обменных процессах организма, повышает лецитин-холестериновый коэффициент, липопротеиназную и фибринолитическую активность крови; замедляет свертываемость крови; снижает уровень холестерина и -липопротеинов. Комплексы йода с полимерами (йодинол, йоданат, йодовидон, повидон-йод, йодопирон, йодоформ,хиниофон) применяют в качестве антисептиков для орошения миндалин при хроническом тонзиллите,гнойном отите, синусите, кератите, фурункулезе, периодонтите, конъюнктивите, для обработки ран и операционного поля. Известно, что повидон-иод (йод в виде комплекса со связывающим его йодофором - поливинилпирролидоном) обладает большим спектром антибактериального и противовирусного действия, чем другие известные антисептики. Он проявляет активность против многих видов вирусов, включая ВИЧ, в суспензионных опытах in-vitro [Kawanaet al., Inactivationofhumanvirusesbypovidoniodineincomparisonwithotherantiseptics.-Dermatology. 1997, 195, Прилож. 2, стр. 29-35]. Противоинфекционные средства, содержащие повидон-иод, могут использоваться для борьбы с болезнями, вызванными ВИЧ, хламидиями, гонококками, трепонемой и вирусом простого герпеса [Tsutomu S., Junko S. Antiinfective against STD relating, for example, to HIV, chlamidia, gonococcus, treponema pallidum or herpes simplex and device used to preserve/mix principal ingredient and base of such anti-infective - ЕР 0823996 А 1,A01N 59/12, A61K 9/00, заяв. 15.08.96, опубл. 18.02.98, and Shanbrom E. Antiviral, spermicidal vaginal geland foam containing low molecular weight povidoneiodine. US 5545401, A61K 31/79, A61K 33/18, заяв. 02.06.94, опубл. 13.08.96]. Известен препарат Иодомидол, обладающий антивирусным и антибактериальным действием [патент РК 6730, заяв. 26.01.96, опубл. 16.11.98], содержащий йод, иодид калия или натрия, синтетический водорастворимый полимер, выполняющий роль полимерной матрицы, смесь природных полимеров,например поли-, моно - и олигосахаридов, а также воду при следующем соотношении компонентов, г/л: йод - 6-10, йодид калия или натрия - 9-15, синтетический водорастворимый полимер - 2-4, моно-, олиго и полисахариды - 8-120, вода - остальное. Этот препарат обладает относительно высокой токсичностью и предназначен исключительно для лечения вирусных и других бактериальных заболеваний животных. Также известен лечебный препарат, обладающий бактерицидным и вирулицидным действием, содержащий йод, иодид калия или натрия, синтетический водорастворимый полимер, природные полимеры, например полисахариды и моно- и олигосахариды, при следующем соотношении компонентов, г/л: йод - 6-10, иодид калия или натрия - 9-15, синтетический водорастворимый полимер - 2-4, природный полимер (полисахариды) и моно- и олигосахариды - 8-120, вода - остальное (CZ 5435, A61K 33/18, A61K 31/715). Недостатком данного препарат является его относительно высокая токсичность. Воздействовать на вирусы, уже проникшие в клетки, сложно, так как сама клетка надежно защищает их от любого воздействия. Именно в клетке ведет разрушительную работу приспособленный вирус. Проблема состоит в том,чтобы на молекулярном уровне подавить специфические процессы биологического синтеза вирусных частиц, не затронув, по возможности, жизнедеятельности незараженных вирусом клеток. Наиболее близким по технической сущности является препарат бальзам "Возрождение" (Предварительный патент РК 13765, кл. A61K 33/18, 01.10.2003). Бальзам "Возрождение" содержит, мас.%: йод - 0,5-1,5, йодистый калий - 1,5-1,7, крахмал - 14,016,0, глюкоза - 2,0-3,0, глицерин - 8,0-10,0, молочная кислота - 2,0-3,0, натрия хлорид - 0,8-1,0, яблочный уксус 2,0-3,0, дистиллированная вода - остальное. Однако бальзам "Возрождение" является биологически активной добавкой, без выявленного бактерицидного действия по отношению к микобактериям, и характеризуется низкой бактерицидной активностью по отношению к спорам, спорообразующим бактериям и грибам. Бальзам предназначен для применения исключительно перорально и исключает введение фармацевтического состава субъекту путем внутривенной или внутримышечной инъекции, что в свою очередь ограничивает область применения. Задачей изобретения является создание лекарственного препарата антибактериального, противоязвенного и иммуномодулирующего действия малой токсичности с возможностью его применения в инъ-1 021496 екционной форме, а также способа его получения. Техническим результатом изобретения является расширение ассортимента лекарственных препаратов антибактериального, противоязвенного и иммуномодулирующего действия малой токсичности с возможностью применения в форме инъекций. Технический результат достигается лекарственным препаратом, включающем йод, иодид калия крахмал, кислоту аскорбиновую, глюкозу, хлорид натрия и очищенную воду при следующем соотношении компонентов, мас.%: Неожиданно обнаружено, что изменение содержания компонентов в композиции, а именно иода,иодида калия, крахмала, кислоты аскорбиновой глюкозы и хлорида натрия в водном растворе, позволяет получить препарат, пригодный для использования в инъекционном виде. Он содержит меньшее количество компонентов, а именно 6, относительно прототипа, в составе которого 9 компонентов. Отличительными признаками заявленной композиции от прототипа является состав композиции и концентрация компонентов. Композиция, не содержащая двух кислотных компонентов (кислоты молочной и уксуса яблочного), а также трехатомного спирта (глицерина) и содержащая, мас.%: иод - 0,4-2,0; калия йодид 0,8-4,0; крахмал - 10,0-40,0; кислота аскобиновая - 0,4-2,0; глюкоза - 1,2-4,8; хлорид натрия - 0,3-1,8; является оптимальным составом, что позволило сформировать сбалансированную систему компонентов,устойчивую в водном растворе. Для формирования препарата как целостной субстанции были применены современные принципы комбинаторной химии. Одна из главных функций компонентов, используемых в составе препарата, заключается в формировании особой структуры, которая бы сохраняла окислительную способность йода в состоянии, при котором реализовывалась возможность транспорта этих частиц на большие расстояния для распределения его в конечном итоге по всему организму. Одна из главных функций компонентов, используемых в составе препарата, заключается в формировании особой структуры, которая сохраняет окислительную способность иода в некотором умеренном состоянии для того, чтобы была возможность транспорта этих частиц на большие расстояния для распространения его по всему организму. Образование указанной системы обеспечивает оптимальный состав при следующем соотношении компонентов, мас.%: иод - 0,4-2,0; калия йодид - 0,8-4,0; крахмал 10,0-40,0; кислота аскобиновая - 0,4-2,0; глюкоза - 1,2-4,8; хлорид натрия - 0,3-1,8, дистиллированная вода - остальное. Указанный состав и определенные концентрации компонентов в водном растворе образуют йоднополимерный комплекс, выполнющий роль матрицы и образующий ассоциаты, из которых выделяется активный действующий агент - активная форма йода. В образовании матрицы и ассоциатов принимает участие крахмал и глюкоза, т.е. поли - и моносахара, имеющие различные по активности функционаьные группы. Введение в состав лекарственного препарата иодида калия позволяет добиться образования физико-химической системы, длительное время предотвращающей дезактивацию главного действующего агента. В настоящее время хорошо известно, что углеводы являются обязательными компонентами бактериальных клеточных стенок, первыми вступающими в контакт с иммунной системой макроорганизма. Благодаря этому обстоятельству механизмы врожденного (innate) иммунитета включают в себя этапы распознавания бактериальных карбогидратов и гликоконъюгатов, связанных с функцией ряда клеточных рецепторов лектинового типа, обнаруженных недавно на поверхности фагоцитирующих клеток. При настаивании крахмала с водой, даже с горячей, крахмальные зерна лишь разбухают и только небольшая часть полисахаридов крахмала переходит в раствор. Коллоидный раствор крахмала (крахмальный клейстер) готовят, размешивая в небольшом количестве воды, и выливают постепенно в кипящую воду при сильном перемешивании. Согласно общепринятому в настоящее время мнению образование комплекса амилоза-йод связано со спиральной конформацией цепи амилозы, в центре спирали которой образуется каналообразная полость с размерами, достаточными для размещения молекул йода. Комплекс крахмал-йод образует гексагональные кристаллы. Обнаружено, что образование йодного комплекса не изменяет вязкости растворов амилозы. При изучении структуры йодно-крахмального комплекса установлено, что это соединение включения с донорноакцепторной связью и валентностью, определяющейся отношением одного атома йода к восьми мономерным звеньям полимера, с зарядом йодной компоненты равном нулю. В присутсвии крахмала молекулы J2 распадаются с образованием сложных ионов J3 и JO, причем, в образовании йодкрахмального комплекса принимает участие только сложный анион J3, который исчезает из раствора. Сложный анион JO, напротив, остается в растворе, не входя в комплекс. Концентрация его резко повы-2 021496 шается за счет расщепления J2. Исследование йодкрахмальной реакции дает основание представить ее механизм в следующем виде: Компоненты препарата обеспечивают селективное окисление главным действующим агентом - йодом, жизненно важных молекулярных компонентов вирусов и бактерий. Таким образом, компоненты заявленного препарата, с одной стороны, направлены на поддержание его стабильности и структурированности, а с другой стороны, ответственны за прямое проявление двух основных свойств: антимикробного и иммуномодулирующего, так как в составе предложенного препарата оптимальным образом сочетаются как компоненты антимикробного характера, так и иммуномодулирующего действия. В совокупности существенные признаки лекарственного препарата обеспечивают циркуляцию препарата в организме в активном состоянии, что и позволяет применять его в инъекционной форме. Способ приготовления лекарственного препарата осуществляют следующим образом. Готовят растворы кристаллического иода и иодида калия, хлористого натрия и аскорбиновой кислоты в дистиллированной воде, а также суспензию крахмала в воде. Все растворы смешивают и доводят до 1 л воды. Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения Пример осуществления способа получения препарата. 10 г кристаллического иода измельчают и 16 г иодида калия растворяют в небольшом количестве очищенной воды. К 150 г крахмала добавляют очищенную воду для приготовления суспензии. Готовят растворы хлористого натрия (9,0 г) и аскорбиновой кислоты (10,0 г), все перемешивают и доводят до 1 л очищенной водой. Приготовленный лекарственный препарат имеет вид сиропообразной жидкости цвета от черного до темно-синего с запахом, характерным для препаратам йода. Примеры, подтверждающие свойства и возможносить применения препарата. Для исследования безопасности применения лекарственного препарата его вводили животным внутрибрюшинно в различных дозах в неразведенном виде и с разведением в физиологическом растворе. При подборе дозы руководствовались рекомендациями о максимально допустимых количествах жидкости для введения в брюшную полость, которая для крыс составляет 5 мл. Выбор дозы препарата для инъекций определяли согласно классификации токсичности химических веществ в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76. Препарат вводили ежедневно однократно внутрибрюшинно. В период эксперимента крысы были разделены на контрольные и опытные группы. Опытных было четыре группы, различные по дозам и срокам введения препарата. Препарат вводился животным внутрибрюшинно с разведением в физиологическом растворе хлорида натрия, а также в неразведенном виде. 1. Животным первой группы ежедневно внутрибрюшинно вводились по 0,06 мл препарата + 3,0 мл. физиологического раствора, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 1,7 раза. Крысы забивались через 5, 10 и 15 дней после начала эксперимента. 2. Животным второй группы однократно вводили по 0,66 мл препарата + 3,0 мл физиологического раствора, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 11 раз, забой животных производили через 5 дней после начала введения. 3. Животным третьей группы однократно вводили 2 мл препарата + 3,0 мл физиологического раствора, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 33 раза и забивали животных через 10 дней после начала эксперимента. 4. Животным четвертой группы однократно вводили 5 мл чистого препарата без разведения, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 83 раза, и забивали животных через 15 суток после начала эксперимента. Основные данные результатов анализа морфологического состава крови и лейкоцитарной формулы приведены в табл. 1. Как видно из табл. 1, изучаемый препарат не вызвал статистически достоверных изменений со стороны форменных элементов крови экспериментальных животных по сравнению с контрольными крысами, следовательно исследуемый препарат не оказывал токсического воздействия на систему крови. Результаты гистологического исследования органов животных контрольной и опытной групп показали, что препарат не вызвал изменений гистологической структуры внутренних органов экспериментальных животных, что также подтверждает нетоксичность препарата. Исследование антимикробного действия препарата проводили в опытах in vitro методом двукратных серийных разведений на жидких питательных средах. Растворы йодистого крахмала и йодамилозы готовили действием рассчитанного количества полийодида калия на 0,2-1% растворы полисахаридов. Концентрация молекулярного йода в растворах варьировала от 0,27 до 1%, концентрация йодполисахарида составляла около 1%. Для изучения антибактериального действия препаратов исходные растворы разводились физиологическим раствором хлорида натрия.-3 021496 К каждому разведению йодполисахарида прибавлялась взвесь бактерий на физиологическом растворе в количестве 5 млн клеток, приготовленная на суточной агаровой культуре испытуемого штамма. После 15-минутной экспозиции из каждого разведения препарата производили высев на мясопептонный агар в чашки Петри. Результаты определяли через сутки по отсутствию роста бактерий, что указывало на полную бактерицидную активность раствора йодвысокополимера. Результаты исследования приведены в табл. 2. Были проведены исследования по изучению противоязвенной эффективности препарата на 10 больных язвенной болезнью желудка и 12-типерстной кишки в течение 2 недель, которые показали высокий противоязвенный эффект препарата. Так, при монотерапии препаратом заживление язв наблюдали в 9 случаях независимо от их локализации (4 язвы желудка: медиогастрадьные и антральные, и 5 язв ДНК). Только в одном случае прием препарата привел к усилению боли (язва ДНК) и потребовалось назначение инъекции противовоспалительного препарата, у всех 9 больных при контрольной эзофагогастроскопии установлено полное заживление язв, при этом купирование боли наблюдалось на 1-2-й день приема препарата. Во всех случаях не было обнаружено зависимости заживляющего эффекта препарата от размеров язв, возраста и пола больных. Полученные данные показывают высокую противоязвенную эффективность препарата и связаны с его репаративными свойствами. У 13 волонтеров, получавших препарат в течение 27 дней, дважды была проведена оценка иммунного статуса (перед назначением и после 27 дней приема). Исследования были проведены на базе лаборатории иммунологии Медицинского центра "Сункар", имеющей официальную лицензию Алматинского городского управления здравоохранения на выполнение клинико-иммунологических исследований. Оценка иммунного статуса включала: определение в периферической (венозной) крови общего количества лейкоцитов, лимфоцитов, лейкоформулы, относительного и абсолютного содержания основных субпопуляций лимфоцитов (общих Т-лимфоцитов, их хелперных и супрессорных субпопуляций Влимфоцитов, натуральных киллеров), неспецифической функциональной активности Т-лимфоцитов,уровня основных классов сывороточных иммуноглобулинов и циркулирующих иммунных комплексов,фагоцитарную и функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов. Основные субпопуляции лимфоцитов идентифицировали с помощью коммерческих наборов моноклональных антител к кластерам СВ 3+, СВ 4+, СВ 8, СВ 16+, СВ 72+ (российского производства) методом непрямой иммунофлюоресценции на микроскопе "Люмам И-3"; неспецифическую функциональную активность Тлимфоцитов изучали с помощью прямой реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) при стимуляции клеток ФГА-Р; концентрацию основных классов сывороточных иммуноглобулинов (М, G, А) определяли традиционным методом иммунодиффузии в агаре с использованием коммерческих наборов моноспецифических антииммуноглооулиновых сывороток; концентрацию общего IgE иммуноферментным методом: циркулирующих иммунных комплексов - с помощью реакции преципитации в ПЭГ-6000,с последующей спектрофотометрией осадков; фагоцитарную активность нейтрофильных лейкоцитов изучали в реакции фагоцитоза с частицами латекса и теста восстановления нитросинего тетразолия(НСТ-тест), при этом осуществлялась параллельная постановка как спонтанного, так и стимулированного пирогеналом, вариантов обоих тестов (табл. 3). Таким образом, предложенный лекарственный препарат, можно использовать как для внутреннего применения, так и для инъекций. Установлено, что антимикробное действие не только сопоставимо с действием водных растворов йода, но и в ряде случаев превосходит их. Результаты оценки иммунного статуса в процессе апробации лекарственного препарата показали наличие иммуннокоррегирующего эффекта. Оптимальными лекарственными формами препарата являются суспензия для приема внутрь и суспензии для инъекций. Препарат является нетоксичным, обладает противомикробным действием, противоязвенным эффектом и иммунокоррегирующими свойствами. Таким образом, в результате проведенных исследований разработан состав йодвысокополимера. Учитывая широкий спектр фармакологической активности препаратов йодвысокополимеров, мы разработали технологию производства препарата в двух лекарственных формах: суспензия для внутреннего использования и суспензия для инъекций. Исследования по стандартизации и определению сроков хранения. Препарат - суспензия для приема внутрь. Описание. Сиропообразная жидкость от темно-синего до черного цвета с характерным вкусом и запахом, свойственным препаратам йода. Подлинность. К 5 мл препарата прибавляли 5 мл раствора натрия тиосульфата 0,1 М; раствор мгновенно обесцвечивается (йод). рН от 3,0 до 5,0 (потенциометрический, ГФ XI, вып.1, стр. 113). Сухой остаток не менее 9,0% (ГФ XI, вып.2, стр. 148). Плотность 1,03-1,08 г/см 3 (ГФ XI, вып.1, стр. 24). Микробиологическая чистота. Не допускается наличие бактерий семейства Enterobacteliaceace,Pseudomonas, aeruginosa и Staphylococcus aureus.-4 021496 Препарат - суспензия для инъекций Описание. Сиропообразная жидкость от темно-синего до черного цвета с характерным вкусом и запахом, свойственным препаратам йода. Подлинность. К 5 мл препарата прибавляли 5 мл раствора натрия тиосульфата 0,1 М; раствор мгновенно обесцвечивается (йод). рН от 3,0 до 5,0 (потенциометрически, ГФ XI, вып.1, стр.113). Сухой остаток не менее 9,0% (ГФ XI, вып.2, стр. 148). Плотность 1,03-1,08 г/см 3 (ГФ XI, вып.1, стр. 24). Стерильность - препарат стерилен. Испытания проводят методом прямого посева в соответствии с требованиями ГФ XI, вып.1, стр. 187. Пирогенность. Препарат апирогенен. Тест-доза 0,1 мг препарата, разведенная в 1 мл воды для инъекций на 1 кг массы животного, внутривенно (ГФ XI, вып.2, стр. 183). Токсичность. Препарат нетоксичен. Тест-доза 0,1 мг препарата, разведенная в 0,5 мл воды для инъекций, внутривенно (ГФ XI, вып.2, стр. 182). Срок наблюдения 48 ч. Испытания стабильности препарата, суспензии для внутреннего применения, в соответствии с Руководством СРМР/ICH/2736/99 "Stability Testing of New Drugs and Products". Результаты испытаний стабильности суспензии для внутреннего применения препарата и суспензии для инъекций препарата приведены в табл. 1 и 2 соответственно. Таким образом, результаты исследования по стандартизации препарата по физико-химическим показателям для суспензии для внутреннего применения и для суспензии для инъекций показали, что разработанные лекарственные препараты соответствуют требованиям нормативных документов. Определены сроки годности препаратов для внутривенного применения и для инъекции по всем параметрам качества и количественного определения и установлен срок годности для обоих препаратов в 2 года. Исследование специфической биологической активности и безвредности лекарственного препарата. Исследование антимикробного действия препарата проводилось в опытах in vitro методом двукратных серийных разведений на жидких питательных средах. Растворы йодистого крахмала и йодамилозы готовились действием рассчитанного количества полийодида калия на 0,2-1% растворы полисахаридов. Концентрация молекулярного йода в растворах варьировала от 0,27 до 1%, концентрация йодполисахарида составляла около 1%. Для изучения антибактериального действия препаратов исходные растворы разводили физиологическим раствором хлорида натрия. К каждому разведению йодполисахарида прибавлялась взвесь бактерий на физиологическом растворе в количестве 5 млн клеток, приготовленная на суточной агаровой культуре испытуемого штамма. После 15-минутной экспозиции из каждого разведения препарата производился высев на мясопептонный агар в чашки Петри. Результаты учитывали через сутки по отсутствию роста бактерий, что свидетельствует о полной бактерицидной активность раствора лекарственного препарата. Результаты исследования представлены в табл. 1. Таблица 1. Антибактериальный спектр йодполисахаридов Проведенные исследования по изучению противоязвенной эффективности препарата на 10 больных язвенной болезнью желудка и 12-типерстной кишки в течение 2-х недель показали высокий противоязвенный эффект препарата. Так, при монотерапии препаратом заживление язв наблюдалось в 9 случаях независимо от их локализации (4 - язвы желудка: медиогастральные и антральные, и 5 язв ДГЖ). Только в одном случае прием препарата привел к усилению боли (язва ДПК) и потребовалось назначение инъекции противовоспалительного препарата, у всех 9 больных при контрольной эзофагогастроскопии установлено полное заживление язв, при этом купирование боли наблюдалось на 1-2-й день приема препарата. Во всех случаях не было обнаружено зависимости заживляющего эффекта препарата от размеров язв,возраста и пола больных. Полученные данные показывают высокую противоязвенную эффективность препарата и связаны с его препаративными свойствами. У 13 волонтеров, получавших препарат в тече-5 021496 ние 27 дней, дважды была проведена оценка иммунного статуса (перед назначением и после 27 дней приема). Исследования были проведены на базе лаборатории иммунологии Медицинского центра "Сункар", имеющей официальную лицензию Алматинского городского управления здравоохранения на выполнение клинико-иммунологических исследований. Оценка иммунного статуса включала определение в периферической (венозной) крови общего количества лейкоцитов, лимфоцитов, лейкоформулы, относительного и абсолютного содержания основных субпопуляций лимфоцитов (общих Т-лимфоцитов, их хелперных и супрессорных субпопуляций, Влимфоцитов, натуральных киллеров), неспецифической функциональной активности Т-лимфоцитов,уровня основных классов сывороточных иммуноглобулинов и циркулирующих иммунных комплексов,фагоцитарную и функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов). Основные субпопуляции лимфоцитов идентифицировали с помощью коммерческих наборов моноклональных антител к кластерам СВ 3+, СВ 4+, СВ 8, СВ 16+, СВ 72+ (российского производства) методом непрямой иммунофлюоресценции на микроскопе "Люмам И-3"; неспецифическую функциональную активность Тлимфоцитов изучали с помощью прямой реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) при стимуляции клеток ФГА-Р; концентрацию основных классов сывороточных иммуноглобулинов (M, G, A). определяли традиционным методом иммунодиффузии в агаре с использованием коммерческих наборов моноспецифических антииммуноглобулиновых сывороток; концентрацию общего IgE - иммуноферментным методом; циркулирующих иммунных комплексов - с помощью реакции преципитации в ПЭГ 6000, с последующей спектрофотометрией осадков; фагоцитарную активность нейтрофильных лейкоцитов изучали в реакции фагоцитоза с частицами латекса и теста восстановления нитросинего тетразолия(НСТ-тест), при этом осуществлялась параллельная постановка как спонтанного, так и стимулированного пирогеналом вариантов обоих тестов. При попытке определения достоверного влияния приема препарата на иммунологическую реактивность организма по средним значениям не было установлено статистически достоверного эффекта (см. табл. 2). Таблица 2. Среднегрупповые значения изученных иммунологических параметров в процессе исследования Исключение составляют значения сывороточного иммуноглобулина класса М, показавшие статистически достоверное нарастание его концентрации (с 0,63+0,08 до 0,98+0,07 г/л). В результате проведенных исследований и был установлен иммунокорригирующий эффект препарата в условиях нормы. Возможно, в условиях патологии этот эффект проявится более четко. Для исследования безопасности применения лекарственного препарата животным вводили его внутрибрюшинно в различных дозах в неразведенном виде и с разведением в физиологическом растворе. При подборе дозы руководствовались рекомендациями о максимально допустимых количествах жидкости для введения в брюшную полость, которая для крыс составляет 5 мл. Выбор дозы препарата для инъекций был определен согласно классификации токсичности химических веществ в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76. Препарат, предварительно разведенный физиологическим раствором, вводился ежедневно однократно внутрибрюшинно при помощи одноразовых шприцев. В период эксперимента крысы были разделены на контрольные и опытные группы. Опытных было четыре группы, различные по дозам и срокам введения препарата. Препарат вводили животным внутрибрюшинно с разведением в физиологическом растворе хлорида натрия, а также в неразведенном виде. 1. Животным первой группы ежедневно внутрибрюпшнно вводились по 0,06 мл препарата + 3,0 мл физиологического раствора, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 1,7 раза. Крысы забивались через 5, 10 и 15 дней после начала эксперимента. 2. Животным второй группы однократно вводили по 0,66 мл препарата + 3,0 мл физиологического-6 021496 раствора, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 11 раз, забой животных производили через 5 дней после начала введения. 3. Животным третьей группы однократно вводили по 2 мл препарата + 3,0 мл физиологического раствора, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 33 раза, и забивали животных через 10 дней после начала эксперимента. 4. Животным четвертой группы однократно вводили 5 мл чистого препарата без разведения, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 83 раза, и забивали животных через 15 суток после начала эксперимента. Основные данные результатов анализа морфологического состава крови и лейкоцитарной формулы приводятся в табл. 3. Таблица 3. Морфологический состав крови экспериментальных животных Как видно из табл. 3, изучаемый препарат не вызвал статистически достоверных изменений со стороны форменных элементов крови экспериментальных животных по сравнению с контрольными крысами, следовательно исследуемый препарат не оказывал токсического воздействия на систему крови. Результаты гистологического исследования органов животных контрольной и опытной групп показали, что препарат не вызвал изменений гистологической структуры внутренних органов экспериментальных животных, что также указывает на нетоксичность изучаемого препарата. Таким образом, разработанный лекарственный препарат обладает антибактериальнам, противоязвенным и иммуномодулирующим действием при малой токсичности и может применяться в инъекционной форме. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Лекарственный препарат для внутривенного введения пациенту, обладающий противовирусным и антибактериальным действием, содержащий йод, йодистый калий, крахмал, глюкозу, аскорбиновую кислоту, натрия хлорид и дистиллированную воду, отличающийся тем, что содержит компоненты в следующем соотношении, мас. %: 2. Применение лекарственного препарата по п.1 для лечения вирусных и бактериальных инфекций млекопитающих, включая человека. 3. Применение лекарственного препарата по п.1 для лечения язвенной болезни млекопитающих,включая человека.