Произодное аминотетралина для терапии сердечно-сосудистых заболеваний

1 Предпосылки изобретения Область изобретения Настоящее изобретение относится к применению 5,6-диизобутироилокси-2-метиламинотетралина в приготовлении фармацевтических композиций для терапии сердечных расстройств, в частности застойной сердечной недостаточности. Обсуждение предпосылок Несмотря на прогресс последних лет, застойная сердечная недостаточность все еще является одной из основных причин смерти. Симптоматическая терапия обычно нацелена на снижение нагрузки декомпенсированного сердца и улучшение механической функции. Недавно было доказано, что сердечная недостаточность связана с важными биохимическими и нейрогуморальными изменениями, в которые вовлечены различные факторы. В действительности, при снижении минутного сердечного выброса в организме действуют компенсаторные механизмы, поддерживающие циркуляторный гомеостаз. При сердечной недостаточности вазоконстрикция, связанная с активацией указанных механизмов, вызывает увеличение сопротивления периферических сосудов. Как следствие, увеличивается постнагрузка, которая,в свою очередь, может вызвать дополнительное напряжение уже ослабленного сердца, запуская порочный круг, который приводит к развитию патологии. Причиной генерализованной вазоконстрикции является, главным образом, активация симпатической нервной системы вследствие увеличения уровня катехоламинов в плазме,особенно адреналина, что является ранним сигналом сердечной декомпенсации. По всей вероятности, существует тесная взаимосвязь между степенью симпатической активации и тяжестью заболевания, и, более того, установлена прямая связь между плазменными уровнями норадреналина и смертностью. Таким образом, терапия застойной сердечной недостаточности должна быть направлена на улучшение гемодинамических факторов, с одной стороны, и на фармакологическую модуляцию нейрогуморальной системы, с другой стороны. Дофаминергические лекарственные средства являются кандидатами в лекарственные средства для лечения сердечной недостаточности у большинства пациентов. В частности, дофамин имеет специфические характеристики по сравнению с другими лекарствами, поскольку он стимулирует как дофаминергические, так и альфа- и бета-адренергические рецепторы. Существуют два типа дофаминергических рецепторов: рецепторы, локализованные на гладкой мускулатуре сосудистой системы (DA1 рецепторы), которые опосредуют вазодилатацию в почечном, брыжеечном, церебральном и коронарном участках, и рецепторы, локализованные в пресинаптической позиции (DA2 рецепторы), 003830 2 которые ингибируют высвобождение норадреналина из постганглионарных симпатических нервных окончаний в кровеносные сосуды и сердце. Однако применимость дофамина в лечении сердечной недостаточности ограничена тем, что он неактивен перорально. Добутамин,синтетический аналог дофамина, также можно применять только внутривенно. Производные аминотетралина как структурные аналоги дофамина в течение длительного периода времени исследовали для любых применений в качестве лекарств. Однако до настоящего времени ни одно из этих соединений не внедрено в терапию. Одно из них, гидробромид 5,6-дигидрокси 2-метиламинотетралина, раскрыто в качестве коронарного вазодилататора в патенте США 4134997, выданном на имя Joseph G. Cannon.Cannon вводил это соединение собакам со скоростью приблизительно 10 мкг/кг массы животного в минуту (диапазон 8,5-13,9) непрерывной внутривенной инфузией и продемонстрировал существенное увеличение коронарного кровотока. 5,6-Диизобутироилокси-2-метиламинотетралин, обозначенный здесь как CHF 1035,впервые был упомянут в патенте Великобритании 2123410 в ряду производных аминотетралина, раскрытых в качестве потенциальных антибронхоспастических средств за счет действия на адренергические рецепторы. И 5,6-дигидрокси-2-метиламинотетралин(упоминаемый здесь под экспериментальной аббревиатурой CHF 1024), и CHF 1035 раньше были охарактеризованы как соединения, обладающие превалирующим селективным действием на 2-адренергические рецепторы. Теперь неожиданно обнаружено, что CHF 1024 и CHF 1035 в дополнение к уже известной активности агонистов 2 рецепторов обладают значительной пресинаптической активностью в отношении периферических DA2 и 2 рецепторов, приводящей к снижению тонуса симпатической нервной системы, который повышен у пациентов с сердечной недостаточностью. Исследования, проведенные на животных,доказали, что CHF 1024 и CHF 1035 оказывают сосудорасширяющее действие благодаря сочетанию их влияния на 2 и 2 и DA1/DA2 рецепторы, а также сердечное изотропное действие. Они эффективны в очень низких дозах, даже при введении пероральным путем. Активность производных аминотетралина по настоящему изобретению в отношении периферических 2 адренергических и периферических DA2 дофаминергических рецепторов до настоящего времени вообще не была охарактеризована. Напротив, ранее Hilditch А. и Drew 3 активно как агонист рецепторов дофамина в релаксирующих участках селезеночной артерии. Авторы данного изобретения продемонстрировали, что как CHF 1024, так и CHF 1035 обладают активностью агонистов дофаминергических рецепторов, и что они селективны в отношении пресинаптических DA2 рецепторов. 2-адренергическая и DА 2-дофаминергическая активность данных соединений была оценена в тестах на связывание (пример 1 и 3), в изолированных нейронально-стимулированных семявыводящих протоках крысы (пример 2) и в ректокопчиковой мышце кролика (пример 4). Сердечно-сосудистые эффекты этих соединений были определены in vivo на анестезированных крысах как после внутривенного, так и после интрадуоденального введения (пример 5). Пример 1. Тестировали аффинность CHF 1024 и CHF 1035 к 2-адренергическим рецепторам в тромбоцитах человека и в коре головного мозга кролика. Антагонист [3H]-рауволсцин использовали как маркер рецептора, поскольку его связывание является обратимым, насыщаемым и специфичным.CHF 1024 проявил значительно более высокую аффинность, чем дофамин, а именно в 9 раз выше в тромбоцитах и в 15 раз выше в коре головного мозга. Аффинность CHF 1035 была сходна с аффинностью дофамина, использованного в качестве соединения сравнения. Более низкая аффинность CHF 1035 к рецепторам,вероятно, является результатом этерификации молекулы.(0,97) Значения выражены в виде ИК 50 - молярной концентрации лекарственного средства,которая требуется для 50% ингибирования специфического связывания [3H]-рауволсцина. Пример 2. Оценивали 2-адренергическую активность производных аминотетралина CHF 1024 иCHF 1035 в изолированных нейрональностимулированных семявыводящих протоках крысы по сравнению с дофамином. Результаты показаны в следующей ниже таблице в виде значения ИК 50-молярной концентрации лекарственного средства, которая вызывает 50% ингибирование электрически индуцированного сокращения: 4 Соединения CHF 1024 и CHF 1035 примерно в 20-70 раз более сильно действуют, чем дофамин, соответственно. Пример 3. Периферическая DA2 дофаминергическая активность (тест на связывание). Тестировали аффинность CHF 1024 к периферическим DA2 дофаминергическим рецепторам в бычьей коре надпочечника для оценки его влияния на взаимодействие [3 Н](-) сульпирида со специфическими сайтами связывания этой системы. Дофамин использовали в качестве соединения сравнения. Результаты, выраженные в виде ИК 50 (молярная концентрация, которая требуется для 50% ингибирования специфического связывания) представлены ниже.CHF 1024 Дофамин Бычья кора надпочечника 2,1 х 10-8 2,3 х 10-7CHF1035 в отношении периферических DA2 дофаминергических рецепторов в электростимулированной ректокопчиковой мышце кролика. Оба соединения показали дозозависимое ингибирование сокращения, индуцированного электростимуляцией, и приблизительно в 3 раза более сильное действие, чем дофамин, используемый в качестве соединения сравнения. В таблице, приведенной ниже, представлены значения ИК 50 (молярная концентрация лекарства, которая вызывает 50% ингибирование электроиндуцированного сокращения):(95% доверительный интервал) Эффекты, продуцированные CHF 1024,CHF 1035 и дофамином, конкурентно антагонизировали селективным DА 2-антагонистом домперидоном. Пример 5. Сердечно-сосудистые эффектыin vivo. Самцов крысы-альбиноса (Sprague Dawley,350-400 г) анестезировали пентобарбиталом натрия (60 мг/кг) и поддерживали анестезию внутривенной инфузией (6 мг/ч). В трахею вставляли канюлю для облегчения самостоятельного дыхания и поддерживали температуру тела 37 С (Homoiothermic Blanket Control System (Harvard, England. В правую бедренную артерию вставляли канюлю для измерения артериального кровяного давления, а в левую яремную вену или в двенадцатиперстную кишку 5 вставляли канюлю для введения лекарственного средства. Среднее артериальное давление и частоту сердечных сокращений непрерывно контролировали при помощи датчика давления и усилителя со средним усилением, запускаемого ЭКГ сигналом, соответственно. После периода стабилизации примерно 15 мин CHF 1024 (0,23; 0,69 и 2,3 мкг/кг/мин) вводили внутривенной инфузией в течение 30 мин,и сердечно-сосудистые параметры регистрировали в течение следующих 30 мин после окончания инфузии.CHF 1035 вводили интрадуоденально (1 мг/кг). Ответную реакцию на CHF 1035 определяли в отсутствие и в присутствии селективного антагониста 2-адренорецепторов ICI 118,551DА 2-дофаминергического антагониста домперидона (0,3 мг/кг в.в.), как по отдельности, так и в комбинации. Антагонисты вводили за 10 мин до интрадуоденального (и.д.) введения лекарственного средства. Внутривенное введение СНF 1024 вызывало дозозависимое снижение среднего артериального давления, которое удерживалось даже после окончания инфузии. Эффекты, индуцированные внутривенной инфузией данного соединения, на среднее артериальное давление у анестезированных крыс. Представлены средние значениястандартная погрешность (выраженная в виде отклонения от базового значения). Минуты послe Минуты после пг/кг/минN начала инфузии окончания инфузииn = число животных Несмотря на заметную гипотензию, никакого увеличения в частоте сердечных сокращений не наблюдалось. Аналогично, интрадуоденальное введениеCHF 1035 в концентрации 1 мг/кг заметно снижало кровяное давление без влияния на частоту сердечных сокращений. Гипотензивная ответная реакция характеризовалась быстрым и заметным падением (пиковый эффект - примерно 45% снижение от базового значения на 5 мин после введения), после чего следовало медленное восстановление(примерно 20% снижение от базового значения все еще присутствовало через 2 ч после введения). Было показано, что пиковый эффект значительно снижается при предварительной обработке 2-антагонистом, тогда как DА 2 антагонист значительно сокращал время гипотензивного ответа (базовое значение полностью восстанавливалась через 60 мин после введе 003830 6 ния). Введение обоих антагонистов вместе полностью устраняло гипотензивную ответную реакцию. Итак, было продемонстрировано, что данное соединение активно в дозах, значительно более низких, чем дозы, указанные Cannon, и что как 2-адренергические, так и DА 2 дофаминергические рецепторы вовлечены в гипотензивное действие. Представляется, что в частности DA2 стимуляция ответственна за продолжительное действие данного соединения. Для изучения влияния данного соединения как на гемодинамические параметры, так и на нейрогуморальный паттерн было проведено рандомизированное двойное слепое исследование по сравнению с плацебо на 18 пациентах с умеренной застойной сердечной недостаточностью (класс II-III NYHA (NIHA - New YorkHeart Association. Каждый пациент в течение 3 последовательных дней получал 2 активных дозы CHF 1035 и 1 дозу плацебо. Оценивали следующие гемодинамические параметры: заклиненное давление в легочных капиллярах (ЗДЛК) (мм рт.ст.); сердечный индекс (СИ) (л/мин/м 2); индекс ударного объема(ССС) (динссм-5); частота сердечных сокращений (ЧСС)(уд/мин); среднее кровяное давление (СКД) (мм рт.ст.). Оценку осуществляли путем катетеризации правого отдела сердца (катетер Swan-Ganz), измеряя гемодинамические параметры тестируемого лекарства перед введением или до дозы (ДД) и в течение 300 последующих мин после введения или после дозы (ПД), каждые 20 мин в течение первых 2 ч, затем каждые 60 мин. Чтобы оценить влияние данного соединения на нейрогормоны, определяли также плазменные уровни норадреналина (НА) (пг/мл) и адреналина (А) (пг/мл) перед введением и через 140 мин после введения CHF 1035 и плацебо соответственно. Введение CHF 1035 в 3 дозовых уровнях вызывало изменения гемодинамических и нейрогуморальных параметров, как показано в следующей таблице: ЗДЛК СИ ИУО ССС ЧСС СКД НА А 5 мг ДД ПД 225 184 31 3,41 13912 4311 12432 1052265 7411 7811 8512 8212 299135 301156 5629 4221 р 0,05 10 мг ДД ПД 206 169 2,71 3,41 387 4510 138245 1009315 7011 7612 8510 7713 285244 24488 6542 6244 15 мг ДД ПД 217 166 31 41 4010 4911 135936 881257 7412 8010 8711 7912 340162 308133 5325 5824 7 Напротив, введение плацебо не вызывало никаких изменений тех же параметров. Эти результаты доказывают, что CHF 1035 в дозах, используемых в данном исследовании,индуцирует значительное улучшение гемодинамических параметров и характеризуется особенно благоприятным фармакологическим профилем. Несмотря на то, что наблюдается связанное с дозой снижение сопротивления периферических сосудов (соответственно -15,4%; -27,0%;-35,2% для 3 дозовых уровней), имеет место только относительное увеличение частоты сердечных сокращений, которое не является клинически значимым. Снижение желудочковой пост-нагрузки,которое является результатом снижения сопротивления периферических сосудов, вызывает значительное уменьшение сердечного индекса. Более того, значительное снижение заклиненного давления в легочных капиллярах свидетельствует о том, что данное лекарство также индуцирует венозную вазодилатацию и, как результат, снижение пре-нагрузки левого желудочка. Таким образом, общий гемодинамический эффект CHF 1035 можно отнести на счет периферического сосудорасширяющего действия лекарства, как артериального, так и венозного. Эта очевидная активность по отношению к периферическим рецепторам могла бы индуцировать нейрогуморальную гиперреактивность и,в результате, увеличение плазменных уровней норадреналина и адреналина, что является нежелательным у субъекта с патологией. Однако результаты, о которых сообщалось выше, доказывают, что CHF 1035 способен индуцировать системную вазодилатацию, не вызывая какого-либо рефлексивного увеличения плазменных уровней катехоламинов. Сосудорасширяющее действие данного соединения является результатом его свойств в отношении рецепторов, в частности активности в отношении пре-синаптических DA2 и 2 рецепторов, стимуляция которых может ингибировать высвобождение катехоламинов, как это хорошо известно. Как сказано выше, застойная сердечная недостаточность является одной из наиболее распространенных причин смерти и нетрудоспособности в индустриализованных нациях и находится среди синдромов, наиболее часто встречающихся в клинической практике, затрагивая почти 4 миллиона человек в США и 14 миллионов представителей в Европе. Фармакологическое лечение данного состояния в настоящее время включает в себя диуретики, ингибиторы ангиотензин-превращающего фермента (АПФ) и дигиталис. У специалистов сложилось стойкое мнение, что фармакологическое лечение пациентов с сердечной недостаточностью остается субоп 003830 8 тимальным, и что для предотвращения осложнений и, соответственно, снижения заболеваемости и смертности требуется более эффективное лечение. Продемонстрировано, что CHF 1035 улучшает клиническое состояние пациентов с застойной сердечной недостаточностью и их способность переносить физическую нагрузку, когда его используют в качестве терапевтического средства в дополнение к основной терапии диуретиками, или диуретиками и ингибиторами АПФ, и/или диуретиками и дигиталисом. Также показано, что фармакодинамические эффекты длятся дольше, чем обнаруживаемые уровни лекарственного средства в сыворотке. Течение времени этих эффектов не зависит от кинетики данного лекарства в организме. Эффекты CHF 1030 в качестве дополнительной терапии оценивали у пациентов, страдающих застойной сердечной недостаточностью класса II-III NYHA вследствие умеренной гипертензии, или коронарного заболевания, или хронической кардиомиопатии, которые лечатся диуретиками или диуретиками и ингибитором ангиотензин-превращающего фермента. Пациентам-добровольцам случайным образом было назначено дополнительное лечение с двойным слепым контролем плацебо или тремя различными дозами исследуемого лекарственного средства (5, 10, 15 мг). Исследовательскую терапию пациенты начинали в день 1 и продолжали вплоть до дня 28. Для определения клинического состояния пациентов учитывали следующие параметры: легочный застой; системный застой; центральная гемодинамика; региональные кровотоки. Функциональную ответную реакцию на курс лечения оценивали по результатам тестов с физической нагрузкой - тест 6-минутная ходьба и тест ходьба на 130 м.CHF 1035 улучшал функциональное и клиническое состояние пациентов по сравнению с плацебо. Это улучшение было несомненным с точки зрения функционального класса NYHA, осуществления физической нагрузки, и симптомов и признаков легочного и системного застоя, изменений центральной гемодинамики и уменьшения регионального/органного кровотоков. Для оценки клинического состояния было определено более 60 симптомов и признаков. В статистических целях были суммированы баллы признаков и симптомов (соответствующие) для формирования клинических шкал соединения (КШС) патофизиологической важности при застойной сердечной недостаточности. Три КШС оценивали путем добавления баллов для определенных симптомов и признаков; каждый симптом или признак использовали 9 только для одной КШС. КШС центральной гемодинамики (ЦГ, 0-17), легочного застоя (ЛЗ, 026) и системного застоя (СЗ, 0-8) связывали с функциональным классом NYHA (p=0,013,р=0,001; р=0,001) раньше, и они коррелировали с ним положительно (р=0,001; р=0,022; р 0,001) после дополнительной терапии CHF1035. КШС легочного застоя коррелировал также со средней скоростью ходьбы на 130 м(р=0,026/р=0,019) и конечно-систолическими внутренними размерами левого желудочка до/после дополнительной терапии CHF 1035. Оказалось, что легочный застой является наиболее важной детерминантой функционального статуса при застойной сердечной недостаточности и наиболее чувствительной КШС к дополнительной терапии CHF1035. Кроме того, фармакологические и клинические фармакологические исследования показали, что CHF 1035 увеличивает диурез, не влияя на натрийурез и калийурез.CHF 1035 представляет собой диизобутироиловый эфир 5,6-дигидрокси-2-метиламинотетралина, обозначенный как CHF 1024. Сразу после введения CHF 1035 превращается под действием плазменных и тканевых эстераз в фармакологически активную деэтерифицированную форму, которая также входит в объем настоящего изобретения. Благодаря этим полезным характеристикам, CHF 1035 можно с преимуществом использовать в качестве пролекарства для приготовления фармацевтических композиций для терапии сердечных расстройств и в частности застойной сердечной недостаточности. Суточная доза активного ингредиента может варьировать в пределах 1-100 мг и предпочтительно находится в пределах 2,5-20 мг. Введение можно осуществлять любым путем, предпочтительно пероральным путем. Для перорального введения соединение может быть приготовлено в форме твердого или жидкого препарата, предпочтительно в форме таблеток, с использованием добавок и эксципиентов, обычно применяемых в фармацевтической технологии. Другим особенно предпочтительным способом введения соединения по изобретению являются трансдермальные системы, которые представляют собой адгезивные матрицы для приклеивания на кожу, содержащие подходящую концентрацию активного ингредиента,который может высвобождаться постепенно,поступая таким образом в кровообращение. Эффекты CHF 1024 в комбинации с ингибитором АПФ на адренергическую активность и ремоделирование левого желудочка в экспериментальной модели дисфункции левого желудочка после окклюзии венечной артерии Ремоделирование левого желудочка после инфаркта включает в себя прогрессивное рас 003830 10 ширение камеры, гипертрофию выживающих миоцитов, реорганизацию внеклеточного матрикса и нейрогуморальную активацию. Лекарственные средства, которые влияют на нейрогуморальный ответ, особенно ингибиторы ангиотензин-превращающего фермента (иАПФ),обладают полезными эффектами при лечении инфаркта миокарда и застойной сердечной недостаточности. Действительно, ингибирование АПФ в настоящее время является рекомендуемой терапией для пациентов с застойной сердечной недостаточностью. Поскольку, как было показано, CHF 1024 снижает симпатическую гиперактивность (1), авторы данного изобретения подтверждают, что данное лекарственное средство может давать дополнительную пользу при ингибировании АПФ в крысиной модели дисфункции левого желудочка (ДЛЖ). Целью этого исследования было, таким образом 1) изучить эффекты четырехнедельной инфузии CHF 1024 на морфологические, гемодинамические и нейрогуморальные изменения у крыс с дисфункцией левого желудочка, получающих иАПФ, и 2) сравнить эти эффекты с четырехнедельным лечением только иАПФ. В качестве иАПФ в этом исследовании использовали делаприл. Инфаркт миокарда (ИМ) индуцировали наложением лигатуры на левую венечную артерию у 134 крыс. 6 крыс оставляли не прооперированными. Через два месяца выживших животных с ИМ, доказанным ЭКГ, вводили в четырехнедельную фазу лечения. Им случайным образом назначали один из следующих курсов лечения: 1) делаприл, 6 мгкг-1 сутки-1, (n=12); 2) делаприл, 6 мгкг-1 сутки-1, и CHF1024, 0,33 мгкг-1 сутки-1, (n=13); 3) носитель (0,05% аскорбиновая кислота; n=12). Делаприл растворяли в питьевой воде в конечной концентрации 0,043 мг/мл. Готовили свежие растворы делаприла каждый третий день, и их концентрацию регулировали по массе тела каждые 15 суток для получения средней дозы 6 мгкг-1 сутки-1.CHF 1024 вводили непрерывно в течение четырех недель через осмотические мининасосы, имплантированные подкожно на задней поверхности шеи. Концентрированные растворы CHF 1024 растворяли в 10% растворе аскорбиновой кислоты в дистиллированной воде в конечной концентрации 40 мМ (средняя скорость доставки 0,33 мгкг-1 сутки-1). На 4 неделе лечения крыс помещали в отдельные камеры для сбора 24-часовой мочи для измерения экскреции катехоламина. По завершении фазы лечения животных анестезировали пентобарбиталом, 50 мг/кг внутриперитонеально. Датчик давления с микрочипом вставляли в правую сонную артерию для регистрации систолического и диастолического кровяного дав 11 ления (СКД, ДКД) и продвигали в левый желудочек для измерения давления в левом желудочке (ЛЖ). Сердце затем останавливали в диастоле для гистоморфометрии ЛЖ. Анализировали только крыс со средней величиной инфаркта 12%, гистологически определенной в 6-10 серийных поперечных срезах как процент площади ЛЖ. Число проанализированных животных в каждой экспериментальной группе составляло 6 (носитель), 6 (только делаприл), 8(делаприл и CHF 1024) и 6 не прооперированных. На экскрецию норэпинефрина с мочой не оказал влияния делаприл один, но она понижалась при добавлении CHF 1024 (40% относительно группы, получавшей носитель). Морфометрический двумерный и трехмерный анализы ЛЖ были выполнены по методике,описанной ранее (1) и расширены для трехмерных оценок (2). Геометрия левого желудочка была затронута инфарктом, что отражено в увеличении радиуса камеры ЛЖ на экваториальном уровне(+30%, р=0,005), общей высоты ЛЖ (+8%,р=0,047) и в сдвиге центра камеры ЛЖ ("сдвиг камеры", р 0,001) у группы с ИМ, которой делали инфузию носителя, по сравнению с не прооперированными животными. Очевидно, что многочисленные модификации и варианты настоящего изобретения воз 12 можны в свете вышеупомянутого. Поэтому следует иметь в виду, что в объеме прилагаемой формулы изобретения данное изобретение может практиковаться иначе по сравнению с тем,как это конкретно изложено здесь. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение 5,6-дигидрокси-2-метиламинотетралина, или 5,6-диизобутироилокси-2 метиламинотетралина, или их фармацевтически приемлемой соли в комбинации с ингибитором ангиотензин-превращающего фермента для приготовления лекарства для лечения дисфункции или ремоделирования левого желудочка. 2. Применение по п.1, где указанное ремоделирование левого желудочка является последствием инфаркта миокарда. 3. Применение по п.1, где ингибитор ангиотензин-превращающего фермента представляет собой делаприл. 4. Применение 5,6-дигидрокси-2-метиламинотетралина, или 5,6-диизобутироилокси-2 метиламинотетралина, или их фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарства для уменьшения ремоделирования левого желудочка у пациентов, страдающих сердечной недостаточностью.