Е – 2 – [4 - (4 - хлор - 1, 2 - дифенил - бут - 1 - енил) фенокси] этанол и фармацевтические композиции на его основе

1 Настоящее изобретение относится к Е-2[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанолу (I), проявляющему способность снижать уровень холестерина в сыворотке крови, а также к фармацевтическим композициям на его основе. Соединение (I) является полезным для снижения уровня холестерина в сыворотке крови и для лечения атеросклероза. Оно также потенциально полезно в гормонозаменяющей терапии(HRT). Было показано, что повышенные уровни холестерина в сыворотке, связанные с липопротеинами низкой плотности (LDL), являются основным фактором, способствующим развитию и прогрессированию атеросклероза. Поэтому существует потребность в разработке способа снижения уровней холестерина в сыворотке у пациентов с гиперхолестеринемией или подверженных риску развития гиперхолестеринемии. В международной патентной заявке WO 97/32574 описывается использование Z-2-[4-(4 хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанола для снижения уровня холестерина в сыворотке. Соединение не обладает никакими значительными эстрогенными побочными эффектами в ткани матки и способно блокировать неблагоприятное действие эстрогена на матку. Поэтому данное соединение является особенно полезным для снижения уровня холестерина в сыворотке. Соответствующий Е-изомер не описан в данной патентной заявке.Z-2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанол является метаболитом известного антиэстрогенного лекарственного средства торемифена. Торемифен (Z-4-хлор-1,2-дифенил-1[4-[2-(N,N-диметиламино)этокси]фенил]-1-бутен) в настоящее время используется в клинике для лечения рака молочной железы, являющегося позитивным в отношении рецепторов эстрогена. В настоящее время обнаружено, что Е-2[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанол (I) является значительно более сильным препаратом для снижения уровня общего холестерина, но приблизительно равным в отношении действия на матку по сравнению с соответствующим Z-изомером. Это было неожиданным, поскольку Е-изомер торемифена является исключительно эстрогенным в ткани матки. Кроме того, было обнаружено, что Е-изомер изобретения способен непосредственно ингибировать биосинтез холестерина, в то время как соответствующий Z-изомер не оказывает подобного действия. Таким образом, Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанол (I) является особенно полезным для снижения уровня холестерина в сыворотке и для предотвращения и лечения атеросклероза. Соединение (I) является также потенциально полезным в гормонозаменяющей терапии (HRT). Соответственно изобретение предоставляет новое соединение, полезное для снижения 2 уровня холестерина в сыворотке, причем вышеуказанным соединением является Е-2-[4-(4 хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанол,имеющий структуру (I) или его фармацевтически приемлемый эфир. Фармацевтически приемлемые эфиры включают эфиры, получаемые с алифатическими карбоновыми кислотами, предпочтительноC1-6 кислотами, например уксусной кислотой, и получаемые с ароматическими карбоновыми кислотами, например C7-12 кислотами, такими как бензойная кислота. Алифатические и ароматические кислоты могут необязательно быть замещены, например, одним или более C1-4 алкилами. Изобретение также предоставляет фармацевтическую композицию, включающую Е-2-[4(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанол или его фармацевтически приемлемый сложный эфир в качестве активного ингредиента вместе с фармацевтически приемлемым носителем. Изобретение также предоставляет способ снижения уровня холестерина в сыворотке, который включает введение больному, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанола или его фармацевтически приемлемого сложного эфира. Изобретение предоставляет также способ предотвращения или лечения атеросклероза,предусматривающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанола или его фармацевтически приемлемого сложного эфира. Изобретение также предоставляет способ гормонозаменяющей терапии (HRT), который предусматривает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанола или фармацевтически приемлемого сложного эфира. Соединение изобретения может вводиться различными путями, включая пероральный, парентеральный или трансдермальный, с использованием общепринятых форм препаратов, таких как капсулы, таблетки, гранулы, порошки,суппозитории, инъекции, пластыри, суспензии и сиропы. Термин "эффективное количество" означает количество соединения изобретения, которое способно снижать уровень общего холестерина в сыворотке или которое способно блокировать неблагоприятное действие эстрогена, в частности, на матку или ингибировать постклимактерические симптомы. Соединение изобретения может вводиться согласно способу изо 3 бретения 1 раз в месяц, 1 раз в неделю или 1 раз в день или несколько раз в день в зависимости от нужд пациента. Типичная ежедневная пероральная доза находится в пределах приблизительно от 0,5 до 1000 мг, предпочтительно от 10 до 800 мг активного соединения. Однако дозировка может соответственно изменяться в зависимости от возраста, веса тела и состояния больного, а также способа введения. Соединение изобретения может вводиться одно или вместе с другими активными соединениями. Композиции согласно изобретению могут приготавливаться с помощью способов, обычно используемых в данной области. В дополнение к активному соединению композиции могут содержать фармацевтически приемлемые добавки, обычно используемые в данной области,такие как носители, связующие вещества, наполнители или эксципиенты, смазочные агенты,суспендирующие агенты и разбавители. Количество активного соединения в композициях изобретения является достаточным для достижения желаемого терапевтического эффекта,например приблизительно от 0,5 до 1000 мг,предпочтительно от 10 до 800 мг в единичной дозированной форме как для перорального, так и для парентерального введения. Следующие примеры иллюстрируют синтез соединения изобретения. Принятые сокращения, используемые для форм сигнала ЯМР: 1 Н NMR - ядерный магнитный резонансeV - электронвольт (эВ). Примеры Пример 1. Получение Е-2-[4-(4-хлор-1,2 дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанола. а) Е-4-[4-(2-бензилоксиэтокси)фенил]-3,4 дифенил-бут-3-ен-1-ол. Алкилирование исходного фенола бензил(2-бромэтиловым) эфиром выполняли так, как описано в примере 1 международной патентной заявки WO 96/07402, за исключением того, что в настоящем случае исходным соединением являлся другой геометрический изомер Е-4-(4 гидрокси-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенол, который получался по способу, описанному в патенте США 4996225. Продукт экстрагировали толуолом. Толуольные фазы объединяли, промывали водой, сушили и упаривали досуха. Остаток перекристаллизовывали из небольшого количества толуола и осажденный продукт ис 002919 4 пользовали на следующей стадии без дальнейшей очистки. 1b) E-1-[4-(2-бензилоксиэтокси)фенил]-4-хлор 1,2-дифенил-бут-1-ен. Галогенирование Е-4-[4-(2-бензилоксиэтокси)фенил]-3,4-дифенил-бут-3-ен-1-ола выполняли так, как описано в примере 2 международной патентной заявки WO 96/07402, но в качестве исходного соединения использовали Е-4-[4-(2 бензилоксиэтокси)фенил]-3,4-дифенил-бут-3-ен 1-ол. 1c) Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил) фенокси]этанол. 6,9 г E-1-[4-(2-бензилоксиэтокси)фенил]-4 хлор-1,2-дифенил-бут-1-ена растворяли в смеси этилацетата (60 мл) и этанола (60 мл). Добавляли палладий на угле (5%, 0,7 г) и раствор энергично перемешивали в атмосфере водорода при комнатной температуре до тех пор, пока не оставалось никакого исходного соединения (тонкослойная хроматография). Палладий на угле отфильтровывали через кремнезем и фильтрат упаривали досуха. Остаток кристаллизовали несколько раз из смеси этанола и воды. 1(28%), 207 (32%), 191 (30%). Эксперименты Методы Эстрогенно/антиэстрогенную активность исследуемого лекарственного средства испытывали путем измерения его действия на вес матки незрелых (возраст 18 дней) самок крыс SpragueDawley. Соединение вводили перорально в растворе ПЭГ в течение 3 дней (n=5 на группу). В то же самое время изучали способность исследуемого лекарственного средства ингибировать вызванное эстрогеном увеличение веса матки крыс, которым давали эстрадиол в количестве 50 мгк/кг подкожно. Результаты сравнивали с данными соответствующего Z-изомера. Действие на биосинтез холестерина изучали in vitro в клеточных культурах Нер G2, используя 14 С-ацетат в качестве предшественника холестерина. Испытуемое соединение добавляли в культуральную среду в концентрации от 0,01 до 10 микромолярной. После 2 ч культивирование прекращали и вновь синтезированный холестерин измеряли количественно с помощью тонкослойной хроматографии. Полученные данные сравнивали с результатами для Zизомера. 5 Изучали действие на вес матки и на уровни холестерина в сыворотке у интактных и овариэктомированных взрослых самок крыс SpragueDawley. Интактным крысам исследуемое лекарственное средство давали перорально ежедневно в дозе 3,17 мг/кг в течение 2 недель и проводили сравнение с эквимолярными дозами Zизомера, Е-изомера торемифена, ралоксифена или эстрадиола. При исследовании с овариэктомией исследуемое лекарственное средство давали перорально при ежедневной дозе 0,1, 1 или 10 мг/кг в течение 4 недель и сравнение проводили с соответствующим Z-изомером и эстрадиолом (100 мкг/кг). Содержание холестерина в сыворотке определяли ферментативным методом. При исследовании с овариэктомией содержание холестерина и молекулы предшественника холестерина в сыворотке определяли газожидкостной хроматографией. Результаты У незрелых крыс действие Е-изомера изобретения на вес матки показало приблизительно равный эстрогенный и антиэстрогенный эффект по сравнению с соответствующим Z-изомером. Результаты показаны в табл. 1, где 1271b (Е) означает Е-изомер изобретения, 1271 а (Z) означает соответствующий Z-изомер и Е 2 означает эстрадиол. Таблица 1 Доза лекар- Средний вес матки (вес после простого лечения ствен. средЕ 2 был принят за 1,00) ства, мг/кг 1271 а (Z) 1271a (Z)+Е 2 1271b (E) 1271b (E)+Е 2 0 0,25 1,00 0,33 1,00 0,1 0,27 1,18 0,37 0,81 0,5 0,43 1,11 0,45 0,82 1 0,53 0,91 0,44 0,57 10 0,75 0,91 0,75 0,83 В системе клеточной культуры in vitro Еизомер изобретения слегка ингибировал биосинтез холестерина, а Z-изомер проявлял противоположное действие, как показано в табл. 2. Таблица 2 Уровень биосинтеза Концентрация лекарственного холестерина, % от контроля 1271a (Z) 1271b (E) средства, М 0,01 143 89 0,1 127 90 1 129 89 10 132 84 У взрослых крыс 1271b (E), 1271a (Z) и ралоксифен уменьшали относительный вес матки приблизительно в одинаковой степени. Вместо этого эстрадиол и Е-изомер торемифена увеличивали вес. Из приведенных лекарственных средств 1271b (E), Е-изомер торемифена, ралоксифен и эстрадиол снижали уровень холестерина в сыворотке приблизительно с равной эффективностью (на 50-60%). Соединение 1271a (Z) было менее эффективным. Результаты показаны в табл. 3. 6 Таблица 3 Относительный вес матки и содержание холестерина в сыворотке Лекарственное(контрольный уровень был принят средство за 1,00; среднее значение SD, n=3) Матка Холестерин 1271b (E) 0,850,07 0,430,05 1271 а (Z) 0,750,06 0,650,10 Торемифен (E) 1,090,10 0,400,18 Ралоксифен 0,770,21 0,480,09 Эстрадиол 1,290,06 0,480,09 В исследовании с овариэктомией 1271b (E) слегка увеличивал (1,5-кратно) относительный вес матки не более чем соответствующий Zизомер. Эстрадиол увеличивал вес в 3,3 раза. 1271b (E) снижал уровень холестерина в сыворотке весьма эффективно (на величину вплоть до 77%), 1271 а (Z) был менее эффективным(снижение составляло до 34%). Результаты показаны в табл. 4. Таблица 4 Относительный вес матки и уровень Доза холестерина в сыворотке лекарственного (контрольный уровень принят за 1,00) средства,1271b (E) 1271a (Z) мг/кг Матка Холестерин Матка Холестерин 0,1 1,54 0,92 1,22 0,5 0,90 1 1,50 0,62 1,78 0,96 5 0,89 10 1,53 0,23 2,04 0,66 Кроме того, в исследовании с овариэктомией было замечено, что 1271b (E), но не 1271a (Z) увеличивал слегка уровень молекул предшественника холестерина в сыворотке, что указывает на прямое ингибирование биосинтеза холестерина с помощью 1271b (Е). Обсуждение Представленные выше данные указывают на то, что как 1271 а (Z), так и 1271b (Е) являются эквивалентными по антиэстрогенному действию на матку крысы. Это отличается от действия торемифена, так как Е-изомер торемифена является явно эстрогенным в отношении матки крысы, а Z-изомер проявляет антиэстрогенные свойства. 1271b (E) является более эффективным в качестве гиполипидемического агента,чем соответствующий Z-изомер. Это, по крайней мере, частично объясняется способностью 1271b (Е) ингибировать непосредственно биосинтез холестерина. Из вышеизложенного следует, что испытуемое соединение 1271b (Е) является антиэстрогенным лекарственным средством, которое проявляет также благотворные и сильные гиполипидемические свойства. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил) фенокси]этанол или его фармацевтически приемлемый сложный эфир. 2. Фармацевтическая композиция, которая включает Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил) фенокси]этанол или его фармацевтически приемлемый эфир в качестве активного ингредиента, вместе с фармацевтически приемлемым носителем. 3. Способ снижения уровня холестерина в сыворотке, который включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут 8 1-енил)фенокси]этанола или его фармацевтически приемлемого сложного эфира. 4. Способ предотвращения или лечения атеросклероза, который включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил)фенокси]этанола или его фармацевтически приемлемого сложного эфира. 5. Способ эстрогензаменяющей терапии(ERT), который включает введение пациенту,нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-бут-1-енил) фенокси]этанола или его фармацевтически приемлемого сложного эфира.