Применение ингибиторов катехол- о – метилтрансферазы (комт) для производства лекарственного средства для профилактики сосудистых дисфункций при диабете

1 Настоящее изобретение относится к применению ингибиторов катехол-О-метилтрансферазы (КОМТ) для профилактики сосудистых дисфункций при диабете, предпочтительно нефропатии, ретинопатии и невропатии. Во всем мире осуществляется поиск лечения, которое могло бы предотвратить осложнения диабета 1 и 2 типов. Длительное течение диабета приводит к появлению с повышенной частотой микроангиопатических осложнений,которые связаны с повышением заболеваемости и смертности. Например, нарушение микроциркуляции в стопах могут потребовать ампутации ног, что, в свою очередь, может вызвать тяжелые осложнения. В случае диабетической нефропатии почечная недостаточность обычно является истинной причиной смерти. Диабет является также наиболее распространенной причиной почечной недостаточности у молодых людей. Факторы, приводящие к диабетической нефропатии, изучаются повсеместно, однако, до настоящего времени не до конца понятны. Согласно общей концепции, ранние функциональные эффекты диабета, такие как гиперфильтрация, способствуют развитию диабетической нефропатии. Гиперфильтрация связана с повышением давления в клубочках и повышением скорости экскреции альбумина (СЭА). Считают,что увеличение СЭА является ранним признаком повреждения клубочков. Наиболее распространенное в настоящее время лечение ингибиторами АПФ (ангиотензин превращающий фермент) не может предотвратить развитие диабетической нефропатии, но может отсрочить развитие терминальной почечной недостаточности. Описан натрийуретический эффект нитекапона, ингибитора КОМТ (Eklof et al.,J.Am.Soc.Nephrology 5(3), 675, 1994, Holtbck etal., J.Am. Soc.Nephrology 7(9), 1633, 1996). Однако влияние ингибиторов КОМТ на гиперфильтрацию и альбуминурию ранее не предполагалось. Целью настоящего изобретения является применение ингибиторов КОМТ, особенно нитекапона(3-(3,4-дигидрокси-5-нитрофенил) метилен-2,4-пентандиона), для профилактики сосудистых дисфункций при диабете, таких как нефропатия, ретинопатия и невропатия. Соединения согласно настоящему изобретению могут применяться для лечения диабетов любого типа. Подходящие ингибиторы КОМТ и способы их получения описаны, например, вGB 2200109, ЕР 237929 и заявке PCT/FI 96/00295. Фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры этих соединений, где это возможно, могут быть получены известными способами. Все физиологически приемлемые соли полезны в качестве активных лекарственных средств, однако, предпочтительными являются 2 соли натрия, калия, аммония, кальция и магния,а также соли с хлористо-водородной, бромистоводородной, фосфорной и серной кислотами, и соли с органическими кислотами, такими как щавелевая, фумаровая, винная, малоновая, уксусная и лимонная кислоты и т.п. Эффективная доза этого соединения значительно варьирует в зависимости от эффективности конкретного ингибитора КОМТ, тяжести состояния, подвергаемого лечению, и способа введения. Наиболее предпочтительными являются лекарственные формы для перорального введения. Эффективная доза для людей составляет приблизительно от 20 до 2000 мг в день. Соединения согласно изобретению назначаются пациенту отдельно или в сочетании с одним или более активных ингредиентов и/или подходящих фармацевтически неактивных добавок. Последняя группа включает в себя растворители, желирующие агенты, эмульгаторы,стабилизаторы, красители, консерванты, смазывающие агенты, агенты, обеспечивающие скольжение, наполнители и другие широко использующиеся носители и добавки. Соединения, использующиеся в настоящем изобретении, изготавливаются в виде лекарственных форм с помощью общеизвестных способов фармацевтического производства. Эти лекарственные формы могут представлять собой,например, таблетки, гранулы, капсулы, суппозитории, эмульсии, суспензии или растворы. В зависимости от способа введения и галеновой формы, концентрация активного соединения в композиции может обычно варьировать приблизительно от 1 до 100 вес.%. Выбор вспомогательных ингредиентов для композиции является обычной практикой специалистов в данной области. Очевидно, что подходящие растворители, желирующие агенты,агенты, образующие дисперсию, красители и т.п. используются обычным способом. Результаты Влияние нитекапона на почечную функцию. Влияние лечения нитекапоном (3-(3,4 дигидрокси-5-нитрофенил)метилен-2,4-пентадионом) длительностью 3-6 недель на почечную функцию изучали на крысах с диабетом. Для индуцирования диабета в хвостовую вену крыс инъецировали стрептозоцин (СТЦ). Концентрацию глюкозы в крови регулярно измеряли. Гипергликемия у крыс с диабетом, которых включали в исследование, должна была быть отчетливой через 12 ч после инъекции СТЦ и должна была оставаться стабильной (16-25 мМ глюкозы) в течение всего периода наблюдения. Крысы, которым был инъецирован СТЦ с концентрацией глюкозы в плазме (не натощак) менее 16,5 мМ через 48 ч после инъекции, исключались из исследования. Влияние нитекапона на скорость клубочковой фильтрации (СКФ) представлено в табл. 3 1. Крыс изучали с помощью стандартных методик определения клиренса с применением инулина в качестве индикатора СКФ. Величины приведены для подобранных по возрасту контрольных крыс. У нелеченных крыс с диабетом была характерная гиперфильтрация, которая устранялась при лечении нитекапоном. СКФ у крыс с диабетом, леченных нитекапоном, и контрольных крыс не различалась. Таблица 1 Влияние ежедневного лечения нитекапоном (30 мг/кг массы тела дважды в день) на СКФ у крыс с индуцированным стрептозоцином диабетом (3 недели) СКФ мл/мин Крысы с диабетом (без лечения нитекапоном) 2,250,26 Крысы с диабетом (леченные нитекапоном) 1,280,26 Крысы без диабета 1,590,12 Число крыс n = 7-8 в каждой группедостоверно отличается от других 2 групп (однофакторный дисперсионный анализ) Влияние ежедневного лечения нитекапоном на скорость экскреции альбумина (СЭА) у крыс с диабетом представлено в табл. 2. У нелеченных крыс с диабетом СЭА была повышена. Лечение нитекапоном вызывало выраженное ослабление этого осложнения диабета. Почти 4 50% леченных нитекапоном крыс имели очень низкую (т.е. нормальную) СЭА. Таблица 2 Влияние ежедневного лечения нитекапоном (30 мг/кг массы тела дважды в день) на скорость экскреции альбумина (СЭА) СЭА, мг/мл СКФ 3 недели без нитекапона 6,181,53 3 недели с нитекапоном 1,201,39 6 недель без нитекапона 10,92,33 6 недель с нитекапоном 2,332,91 достоверно ниже, чем у нелеченных крыс Помимо указанных выше результатов, неизменно наблюдалось, что отек кишечника,свойственный обычно крысам с диабетом, отсутствовал у леченных нитекапоном животных. Удивительно также, насколько низкие дозы нитекапона нужны для получения желаемого эффекта. Этот факт показывают результаты,представленные в табл. 3. Нитекапон в питьевой воде (25 мкг/мл воды = 9,7 мг/кг/день) давали крысам линии Spraque Dawley с индуцированным стрептозоцином диабетом в течение 10 дней. Скорость клубочковой фильтрации определяли на 10 день. Образцы крови брали на 7 день в 10 ч утра. Таблица 3 Влияние ежедневного лечения нитекапоном (9,7 мг/кг в питьевой воде) на СКФ у крыс с индуцированным стрептозоцином диабетом (10 дней) КрысаЛечение Масса тела, г Потребление воды мл/день СКФ, мл/мин НК в плазме, нг/мл 84 А Контроль 281 140 3,36 84 В Контроль 276 140 2,34 84 С Контроль 276 140 3,31 85 А Контроль 272 180 3,55 85 В Контроль 256 180 3,87 Влияние нитекапона на ретинопатию. Способность нитекапона ослаблять биохимические маркеры, связанные с диабетической ретинопатией, изучали на культуре эпителиальных клеток пигментного слоя сетчатки свиней (ЭПС). Содержание протеинкиназы С(ПКС) определяли в клетках, которые подвергались воздействию нормальных (5 мМ) или высоких (20 или 50 мМ) концентраций глюкозы с нитекапоном или без него. В изучавшихся концентрациях (10-40 мкМ) нитекапон устранял индуцированное глюкозой повышение содержания ПКС в клетках ЭПС. Эти данные предпола гают наличие у нитекапона антиретинопатического эффекта. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ профилактики сосудистых дисфункций при диабете посредством введения млекопитающему, нуждающемуся в указанной профилактике, эффективного количества ингибитора катехол-O-метилтрансферазы (КОМТ) или его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира. 2. Способ по п.1, при котором указанная дисфункция относится к микроангиопатии. 3. Способ по п.2, при котором указанная дисфункция относится к нефропатии и/или ретинопатии. 4. Способ по любому из пп.1-3, при котором указанным ингибитором КОМТ является нитекапон. 5. Способ профилактики невропатии посредством введения млекопитающему, нуж 6 дающемуся в указанной профилактике, эффективного количества ингибитора КОМТ или его фармацевтически приемлемой соли, или сложного эфира для предупреждения возникновения невропатии. 6. Способ по п.5, при котором указанным ингибитором КОМТ является нитекапон.