Пептиды, полученные из казеина, и их применение в терапии

007217 Область изобретения Настоящее изобретение относится к биологически активным пептидам, последовательности которых получены из SEQ N-конца S1 фракции молочного казеина, или идентичны данным последовательностям. Данные пептиды способны стимулировать и усиливать иммунную реакцию, защищать от вирусной инфекции, нормализовать уровни холестерина в сыворотке и стимулировать кроветворение. Полученные из казеина пептиды не токсичны, и их можно использовать для лечения и для профилактики иммунных патологий, гиперхолестеринэмии, гематологических нарушений и связанных с вирусами заболеваний. Предпосылки изобретения Биоактивные соединения из продуктов питания. В дополнении к питательной ценности многих пищевых продуктов, некоторые их составляющие и продукты, образующиеся в пищеварительном тракте, обладают способностью влиять на физиологические процессы. Некоторые из таких "обладающих дополнительной питательной ценностью"("extranutritional") составляющих присутствуют в своей активной форме в цельном продукте питания,такие как иммуноглобулины в материнском молоке и молозиве, фитоэстрогены, обнаруженные в продуктах питания на основе сои, полифенольные антиоксиданты из фруктов и витамины. Другие же зашифрованы в молекулах питательных веществ, и выделяются в активной форме в процессе переваривания или в процессе приготовления пищи, например, противогипертензивные пептиды из лактоглобина[Kitts, D.D. (1999), Can. J. Physiol. Pharmacol. 72:4; 423-434]. Биологическая активность молочных белков. Казеин, основной молочный белок, традиционно определяли как состоящий из трех фракций ,и, в соответствии с их электрофоретической подвижностью [N.J. Hipp, et al. (1952), Dairy Sci., 35:272]. В настоящее время их определяют в соответствии с последовательностями аминокислот каждой из подгрупп S1, S2,и[W.N. Engel et al. (1984), J. Dairy Sci. 67: 1599]. В процессе переваривания казеиновые белки подвергаются протеолитическому расщеплению под действием кислотных протеаз, таких как химозин (реннин), трипсин и пепсин, в результате чего образуются более короткие пептиды и вызывается свертывание и секвестрация кальция полученными белковыми фрагментами. Немногочисленные исследования соединений молока продемонстрировали связанную с казеином бактерицидную активность. В патенте США 3764670 раскрыты протеолитические казеиновые гидролизаты, обладающие свойствами антибиотиков против микроорганизмов. В патенте Израиля 42863 раскрыт полученный из казеина пептид, состоящий из 23 аминокислот N-конца казеина, обладающий противобактериальной активностью. Кроме того, другие физиологически активные свойства, такие как активности, подобные активностям опиоидов и факторов роста, были предположены для казеина или его производных [Kitts, D.D., (1999), ibid.]. Для пептидов казеина также наблюдалась иммуномодулирующая активность. Coste et al. (1992,Immun. Lett. 33: 41-46), наблюдали усиление пролиферации лимфоцитов у крыс после обработки их пептидом, полученным из С-конца -казеина. Однако ни в одном из этих исследований не были определены специфические последовательности пептидов казеина, которые придают им их свойства "дополнительной питательной ценности". Кроветворение при терапии злокачественных опухолей. После высоких доз химиотерапии, особенно после миелоаблативных доз химиорадиотерапии, поддержанной трансплантацией аутологичного костного мозга или периферических стволовых кроветворных клеток (ASCT) или трансплантацией аллогенного костного мозга (ВМТ), у пациентов возникает серьезный риск панцитопении. Гранулоцитопения может привести к развитию серьезных, иногда фатальных инфекционных осложнений, вызываемых обычными бактериальными, вирусными, грибковыми и паразитическими агентами непосредственно после момента трансплантации. Аналогичным образом,тромбоцитопения часто приводит к проявлению тенденции к кровотечениям и иногда к длительной тромбоцитной зависимости. Если развивается невосприимчивость к тромбоцитам, эпизоды кровотечений могут угрожать жизни, и осложнения при кровотечениях часто оказываются летальными. Риск, связанный с гранулоцитопенией, можно частично уменьшить поддерживающими средствами, и наиболее эффективно путем введения рекомбинантных цитокинов человека, которые могут усилить восстановление гранулоцитов, особенно гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF) и гранулоцитарномакрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF). Данные агенты чрезвычайно дороги (их стоимость примерно 200-400 долларов США/в день/для пациента) и иногда они вызывают побочные эффекты, связанные с гипертоническими реакциями, лихорадкой, болями в костях и иногда сопровождаются синдромами повышенной сосудистой проницаемости, включая перикардиты и плевриты. Некоторые из этих побочных эффектов могут быть связаны с другими цитокинами, которые могут естественным образом высвобождаться под действием этих кроветворных факторов роста. Более того, применение таких кроветворных факторов роста может быть противопоказано пациентам с опухолевыми клетками,содержащими G-CSF или GM-CSF рецепторы, в таких случаях, как острая и хроническая миелолейкоз и при миелодиспластических синдромах. Тогда как основной прогресс в лечении пациентов с риском пан-1 007217 цитопении был достигнут за счет использования кроветворных цитокинов, прогресса в лечении тромбоцитопении не было достигнуто. После высоких доз химиотерапии и особенно после ADCT, у пациентов возникает риск возникновения тромбоцитопении, которая может длиться в течение многих месяцев, даже вплоть до 3 лет, а некоторые пациенты с тромбоцитопенией могут никогда не выздороветь. Организмы многих пациентов, которых раньше лечили множеством препаратов на основе крови, становятся невосприимчивыми к тромбоцитам, и, следовательно, может оказаться невозможным преодолеть тромбоцитопению, даже на короткое время, несмотря на интенсивные и частые трансфузии тромбоцитов от одного донора. Невосприимчивость к тромбоцитам и длительная тромбоцитопения представляют собой распространенную причину смерти в центрах ASCT во всем мире. В настоящее время проводятся исследования нескольких новых рекомбинантных цитокинов, таких как рекомбинантный интерлейкин-3 человека (rhIL3) и рекомбинантный интерлейкин-6 человека (rhIL6),как потенциальных агентов для усиления мегакариоцитопоэза и восстановления тромбоцитов. К сожалению, предварительные клинические исследования показали, что хотя rhIL3 и rhIL6 могут усилить восстановление тромбоцитов, такие эффекты ни коим образом не являются эффектными, и могут потребовать значительного времени. Очевидно, что длительная тромбоцитопения в настоящее время представляет основную проблему в клинических центрах трансплантации костного мозга, для которой до сих пор не найдено удовлетворительного решения. Поэтому существует широко известная необходимость в создании безопасного, дешевого, быстродействующего и четко определенного стимулятора кроветворения, и особенно мегакариоцитопоэза, который был бы лишен вышеуказанных ограничений, и который было бы весьма выгодно иметь. Фракция казеина S1. Фракцию казеина S1 можно получить из молочных белков различными способами [D.G. SchmidthSci., 47:626; J.С. Mercier, et al. (1968), Bull. Soc. Chim. Biol. 50:521], и полная аминокислотная последовательность фракции казеина S1 была определена J.С. Mercier et al. (1971) (Eur. J. Biochem. 23:41). Геномная и кодирующая последовательности S1 фракции казеина жвачных были также клонированы и секвенированы с применением технологий рекомбинантных ДНК [D. Koczan, et al. (1991), Nucl. Acids Res. 19(20): 5591; McKnight, R.A., et al. (1989), J. Dairy Sci. 72:2464-73]. Протеолитическое расщепление и идентификация N-концевых фрагментов S1 фракции казеина были опубликованы [J.С. Mercier, et al.(1970), Eur. J. Biochem. 16:439; P.L.H. McSweeney et al. (1993), J. Dairy Res., 60:401], также как и абсорбция в кишечнике и появление данного фрагмента в плазме млекопитающих после расщепления белков цельного молока [Fiat, А.М., et al. (1998) Biochimie, 80 (2): 2155-65]. Meisel, H. and Bockelmann, W.[(1999), Antonie Van Leeuwenhoek, 76:207-15] обнаружили аминокислотные последовательности иммунопептидов, казокининов и казоморфинов в пептидах, высвобожденных в результате гидролиза - и казеиновых фракций молочнокислыми бактериями. Особый интерес представляют антиаггрегационная и тромболитическая активности, демонстрируемые С-концевыми участками - и -казеиновых фракций[Chabance, В. et al. (1997), Biochem. Mol. Biol. Int. 42(1) 77-84; Caen J. et al. (1993), J. Dairy Sci. 76(1): 301310]. Предшествующие исследования задокументировали потенциальные биоактивные пептиды, закодированные в N-концевой S1 аминокислотной последовательности, но не было никаких упоминаний о применении данных белковых фрагментов, конкретных последовательностей или определенных синтетических пептидов для усиления кроветворения, профилактики вирусных инфекций или модулирования развития аутоиммунных заболеваний. Сущность изобретения В соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения аутоиммунного заболевания, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения вирусного заболевания, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики вирусной инфекции, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования кроветворения,причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования пролиферации кроветворных стволовых клеток, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина-2 007217 Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования пролиферации и дифференцировки кроветворных стволовых клеток, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования мегакариоцитопоэза, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования эритропоэза,причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования лейкоцитопоэза, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования тромбоцитопоэза, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения тромбоцитопении, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения панцитопении, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения гранулоцитопении, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения гиперлипидемии, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения холестеринемии, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения глюкозурии, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина Sl. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения диабета, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения СПИД, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения инфекции, вызванной ВИЧ, причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения состояний, связанных с миелоаблативными дозами химиорадиотерапии, поддерживаемой трансплантацией аутологичного костного мозга или периферических стволовых кроветворных клеток (ASCT), или трансплантацией аллогенного костного мозга (ВМТ), причем указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения аутоиммунного заболевания, причем указанная фармацевтическая композициявключает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения вирусного заболевания, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики вирусной инфекции, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качест-3 007217 ве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования кроветворения, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования пролиферации кроветворных стволовых клеток, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования пролиферации и дифференцировки кроветворных стволовых клеток, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из Nконцевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования мегакариоцитопоэза, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования эритропоэза, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования лейкоцитопоэза, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования тромбоцитопоэза, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения тромбоцитопении, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения панцитопении, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения гранулоцитопении, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения гиперлипидемии, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения холестеринемии, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения глюкозурии, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения диабета, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения СПИД, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве-4 007217 активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения инфекции, вызванной ВИЧ, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения состояний, связанных с миелоаблативными дозами химиорадиотерапии, поддержанными трансплантацией аутологичного костного мозга или периферических стволовых кроветворных клеток - (ASCT), или трансплантацией аллогенного костного мозга (ВМТ), причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из Nконцевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ усиления колонизации донорных стволовых кроветворных клеток у миелоаблативного реципиента, причем способ включает лечение донора указанных донорных стволовых кроветворных клеток пептидом, полученным из N-концевой части казеина S1, перед передачей и имплантацией донорных стволовых кроветворных клеток реципиенту. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ усиления колонизации донорных стволовых кроветворных клеток у миелоаблативного реципиента, причем способ включает обработку указанных донорных стволовых кроветворных клеток пептидом, полученным из N-концевой части казеина S1, перед имплантацией донорных стволовых кроветворных клеток реципиенту. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения аутоиммунного заболевания. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения вирусного заболевания. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики вирусной инфекции. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования кроветворения. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования пролиферации кроветворных стволовых клеток. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования пролиферации и дифференцировки кроветворных стволовых клеток. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования мегакариоцитопоэза. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования эритропоэза. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования лейкоцитопоэза. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования тромбоцитопоэза. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения тромбоцитопении. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения панцитопении. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения гранулоцитопении. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения гиперлипидемии. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения холестеринемии. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения глюкозурии. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 дляпрофилактики или лечения диабета. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения СПИД. Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения инфекции, вызванной ВИЧ.-5 007217 Далее, в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения состояний, связанных с миелоаблативными дозами химиорадиотерапии, поддержанными трансплантацией аутологичного костного мозга или трансплантацией периферических стволовых кроветворных клеток (ASCT), или трансплантацией аллогенного костного мозга (ВМТ). В соответствии с дальнейшими особенностями предпочтительных вариантов настоящего изобретения, раскрытых ниже, указанный пептид является фрагментом, полученным в результате фрагментацииS1 казеина. В соответствии с дальнейшими особенностями раскрытых предпочтительных вариантов настоящего изобретения указанный пептид является синтетическим пептидом. В соответствии с дальнейшими особенностями раскрытых далее предпочтительных вариантов настоящего изобретения последовательность указанного пептида является одной из представленных далееSEQ ID NO:1-19. Далее, в соответствии с настоящим изобретением предложен очищенный пептид, последовательность аминокислот которого выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO:1-19. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция, включающая очищенный пептид, последовательность аминокислот которого выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-19, и фармацевтически приемлемый носитель. Настоящее изобретение успешно преодолевает недостатки известных в настоящее время конфигураций тем, что предлагает пептиды для лечения заболеваний человека, причем эти пептиды получены изN-концевой части казеина S1 и, обладая высокой терапевтической эффективностью, не обладают определяемой токсичностью. Краткое описание чертежей Далее настоящее изобретение раскрыто только на основании примеров со ссылкой на прилагаемые чертежи. Специально указывается со ссылкой на чертежи, что примеры приведены только для иллюстрации обсуждений предпочтительных вариантов настоящего изобретения и представляют собой то, что можно считать наиболее полезным и легко понятным описанием принципов и концептуальных аспектов настоящего изобретения. В этой связи не предпринимаются попытки продемонстрировать детали настоящего изобретения более подробно, нежели это необходимо для фундаментального понимания изобретения, причем описание вместе с чертежами разъясняет специалистам, как некоторые варианты изобретения можно осуществить на практике. На приведенных чертежах фиг. 1 а-b представляют стимуляцию активности натуральных киллерных (NK) клеток в культивируемых клетках мышиного костного мозга пептидами, полученными из нативного казеина. Лизис 35Sмеченых YAC клеток-мишеней культивируемыми клетками мышиного костного мозга, инкубируемыми в присутствии (+) или в отсутствии (-) 100 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина, выражен как доля полной радиоактивности, выделенной из YAC клеток в надосадочную жидкость культуры (% выделенного 35S). Фиг. 1a представляет NK активность при отношении эффекторные клетки/клеткимишени 25:1. Фиг. 1b представляет NK активность при отношении эффекторные клетки/клетки-мишени 50:1. Фиг. 2 представляет стимуляцию активности натуральных киллерных (NK) клеток в культивируемых стволовых клетках периферической крови (PBSC) человека пептидами, полученными из нативного казеина. Лизис 35S-меченых К 562 клеток-мишеней культивируемыми PBSC клетками человека от доноров, обработанных фактором, стимулирующим колонии гранулоцитов (G-CSF), инкубируемыми в отсутствии (0 мкг) или в присутствии повышающихся концентраций (25-500 мкг/мл) пептидов, полученных из нативного казеина, выражен как доля полной радиоактивности, выделенной из К 562 клеток в надосадочную жидкость культуры (% выделения 35S). Квадратиками представлено отношения эффекторные клетки/клетки-мишени 100:1, треугольниками представлено отношения эффекторные клетки/клетки-мишени 50:1. Фиг. 3 а-3b представляют стимуляцию пролиферации натуральных киллерных (NK) и Тлимфоцитных (Т) клеток из культивируемых стволовых клеток периферической крови (PBSC) человека пептидами, полученными из нативного казеина. Пролиферация NK и Т клеток в культивируемых PBSC человека от доноров, обработанных фактором, стимулирующим колонии гранулоцитов, инкубируемых с пептидами, полученными из нативного казеина, или без них, выражена как процент (%) клеток, связывающих анти-СD3/FIТС флуоресцентные анти-Т клеточные антитела UCHT1, или анти-СD56/RРЕ флуоресцентные анти-NK клеточные антитела МОС-1 (DAKO A/S Denmark). Контролями служат FITC иRPE-конъюгированные анти-мышиный IgG антитела. Фиг. 3 а представляет процент культивируемых человеческих PBSC, связывающих флуоресцентные антитела CD56 (2 независимых образца) после 10 дней инкубирования с (CD56 + пептиды) или без (CD56) 100 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина. Фиг. 3b представляет процент культивируемых PBSC клеток человека, связывающих флуоресцентные анти-СD3 (Т клетки) антитела, анти-CD56 (NK клетки) антитела и клетки, связывающие как CD3,-6 007217 так и СD56 (Т и NK-подобные клетки) антитела после 28 дней инкубирования с (+28) или без (-28) 100 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина. Фиг. 4 представляет стимуляцию активности натуральных киллерных (NK) клеток в культивируемых стволовых клетках периферической крови (PBSC) человека пептидами, полученными из синтетического казеина. Лизис 35S-меченых К 562 клеток-мишеней культивируемыми PBSC клетками (от пациента с раком молочной железы), инкубируемыми в отсутствии (0 мкг) или в присутствии повышающихся концентраций (10-500 мкг/мл) синтетических пептидов, полученных из казеина, выражен как доля полной радиоактивности, выделенной из К 562 клеток в надосадочную жидкость культуры (% выделенния 35(М) и 1-26 (N) первых аминокислот N-концевой части S1 казеина (см. табл. 3 далее для последовательности синтетических пептидов). Фиг. 5 а-с представляют стимуляцию пролиферации культивируемых клеток человека различного происхождения пептидами, полученными из нативного казеина. Пролиферацию культивируемых клеток человека после 14-21 дня инкубирования с возрастающими концентрациями пептидов, полученных из нативного казеина, выражают как количество [3 Н]-тимидина, включенного в каждый образец. Фиг. 5 а представляет включение метки в два образца (PBSC 1, 15 дней инкубирования; и PBSC 2, 20 дней инкубирования) стволовых клеток периферической крови человека, инкубируемых с 50-600 мкг/мл пептидов,полученных из нативного казеина, или без оных (контроль). Фиг. 5b представляет включение [3 Н]тимидина, в культивируемые клетки костного мозга человека после 21 дня инкубирования с или без(контроль) 50-600 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина. Костный мозг получен от больных злокачественными опухолями на стадии ремиссии (ВМ авто, ВМ 1 и ВМ 2) или от здоровых добровольцев (ВМ нормален). Фиг. 5 с представляет включение [3 Н]-тимидина в культивируемые клетки пуповинной крови человека после 14 дней инкубирования с или без (контроль) 50-1000 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина. Пуповинная кровь получена от двух различных доноров (С.В. 1, С.В. 2). Фиг. 6 представляет таблицу, отражающую пролиферацию предшественников кровяных клеток из костного мозга и пуповинной крови человека в результате инкубирования с пептидами, полученными из нативного казеина. Относительное число клеток х 104 на мл, отражающее пролиферацию культивируемых клеток, определяют, подсчитывая клетки, как это указано ниже в разделе Примеры. Костный мозг от здоровых добровольцев (костным мозг) и пуповинную кровь от нормально рожденных детей (пуповинная кровь) инкубируют в течение 13 (пуповинная кровь) или 14 (костный мозг) дней в присутствии факторов роста и АВ сыворотки, с добавлением или без добавления возрастающих концентраций пептидов,полученных из нативного казеина, (25-500 мкг). Фиг. 7 представляет стимуляцию восстановления периферических белых кровяных клеток у миелоаблативных мышей с трансплантированным костным мозгом под действием обработки пептидами, полученными из нативного казеина. Количество клеток представляет число белых кровяных клеток (х 106 на мл, определенное с помощью гемоцитометра). Мыши (n=10 в группе) получают летальную дозу радиации и претерпевают трансплантацию сингеничного костного мозга (106 клеток на мышь) на 9 июня и внутривенно им вводят 1 мг на реципиента пептидов, полученных из нативного казеина, (тест: -+- ) или 1 мг на реципиента альбумина человека сыворотки (контроль: -). Фиг. 8 представляет стимуляцию восстановления тромбоцитов у миелоаблативных мышей с трансплантированным костным мозгом за счет обработки пептидами, полученными из нативного казеина. Количество тромбоцитов (PLT) представляет число тромбоцитов (х 103 на мл, при измерении с помощью гемоцитометра). Мышей (n=60 в группе) облучают летальной дозой радиации, и они претерпевают трансплантацию сингеничного костного мозга (106 клеток на мышь) в первый день, и внутривенное введение 1 мг/реципиент пептидов, полученных из нативного казеина (пептиды: сплошные квадратики) или 1 мг/реципиент альбумина сыворотки человека (HSA: незачерненные квадратики). Фиг. 9a-f представляют проникновение в клетки и захват ядрами FITC-конъюгированных пептидов,полученных из нативного казеина, в культивируемых Т-лимфоцитных клетках, по данным флуоресцентной микроскопии. F1 и F2 представляют идентичные фракции FITC-конъюгированных пептидов, полученных из нативного казеина. Клетки Sup-T1 инкубируют со 100 мкг/мл FITC-конъюгированных пептидов, полученных из нативного казеина, как описано ниже в разделе Примеры. В указанные моменты времени клетки промывают от свободных меток, фиксируют в формалине и подготавливают для наблюдения и регистрации с помощью лазерного сканирующего конфокального микроскопа. Фиг. 9 а-9f представляют отобранные изображения клеток для соответствующих времен инкубирования, которые демонстрируют тот факт, что FITC-конъюгированные пептиды, полученные из нативного казеина, проникают через мембраны Sup-T1 клеток (фиг. 9 а, 9b) и концентрируются в ядрах (фиг. 9c-9f). Фиг. 10 представляет таблицу стимуляции пролиферации Sup-T1 лимфоцитных клеток в результате инкубирования с пептидами, полученными из нативного казеина. Sup-T1 клетки (5000 на лунку) инкубируют с возрастающими концентрациями (50-1000 мкг/мл) пептидов, полученных из нативного казеина,подсчитывают их количество в лунках в указанные моменты времени культивирования и импульсно бомбардируют [3 Н]-тимидином в течение 18 ч. Показателем пролиферации служит отношение среднего-7 007217 значения для трех образцов включенного [3 Н]-тимидина, деленное на значения [3H]-тимидина, включенного в клетки, которые культивируют без пептидов, полученных из нативного казеина (контроль). Фиг. 11 представляет таблицу, отражающую результаты ингибирования HTV-1 инфекции СЕМ лимфоцитов пептидами, полученными из нативного казеина. СЕМ клетки предварительно инкубируют с возрастающими концентрациями (50-1000 мкг/мл) пептидов, полученных из нативного казеина для указанного количества часов (3, 24 и 48 ч) перед осуществлением контактирования с ВИЧ-1 вирусом, как указано ниже в разделе примеры. На 15 день после инфицирования определяют количество клеток и анализируют степень инфицирования HTV-1 с помощью анализа с применением Р 34 антигена, как указано ниже в разделе Примеры. Контрольными культурами служат IF:СЕМ клетки, которые подвергали контактированию с ВИЧ-1 вирусом без предварительной обработки пептидами, полученными из нативного казеина, и UIF:CEM клетки, которые культивировали в идентичных условиях без пептидов, полученных из нативного казеина, и без осуществления контакта с ВИЧ-1 вирусом. Фиг. 12 представляет профилактику с помощью пептидов, полученных из нативного казеина, ювенильного (типа I, IDDM) диабета у самок диабетических (без ожирения) мышей. Степень глюкозурии контролируют с интервалами в течение 230 дней после обработки у самок NOD мышей, которые получают один или два раза в неделю инъекции по 100 мкг пептидов, полученных из нативного казеина, в течение 5 недель (всего 6 или 11 инъекций) (треугольники), и у необработанных контрольных животных(квадраты). У всех контрольных мышей развилась глюкозурия, которая привела впоследствии к их гибели. Фиг. 13 представляет таблицу, отражающую стимуляцию кроветворения у больных злокачественными опухолями в результате инъекций пептидов, полученных из нативного казеина. В периферической крови, взятой у пяти женщин - больных злокачественными опухолями, получающих химиотерапию, либо получавших химиотерапию, как указано выше, определяли полное количество белых кровяных клеток+) внутримышечных инъекций пептидов, полученных из нативного казеина, как указано выше. Пациентка 1 соответствует G.T.; Пациентка 2 соответствует Е.С.; Пациентка 3 соответствует E.S.; Пациентка 4 соответствует J.R.; Пациентка 5 соответствует D.M. Фиг. 14 представляет стимуляцию тромбоцитопоэза пептидами, полученными из нативного казеина, у невосприимчивых к тромбоцитам больным острым лейкозом (М-1). Восстановление тромбоцитов выражают как изменение количества тромбоцитов в периферической крови (PLA, х 106 на мл), определяемое как указано выше, с определенными интервалами после внутримышечной инъекции (как указано ниже в разделе Примеры) 100 мкг пептидов, полученных из нативного казеина. Фиг. 15 представляет стимуляцию тромбоцитопоэза пептидами, полученными из нативного казеина, тромбоцито-невосприимчивых больным острым лейкозом (М-2). Восстановление тромбоцитов выражают как изменение количества тромбоцитов в периферической крови (PLA, х 106 на мл), определенное указанным выше способом через указанные промежутки времени после внутримышечного введения (как это раскрыто ниже в разделе примеры) 100 мкг пептидов, полученных из нативного казеина. Описание предпочтительных вариантов изобретения Настоящее изобретение относится к биологически активным пептидам, последовательности которых получены из N-конца S1 фракции молочного казеина или аналогичны им, к композициям, содержащим данные пептиды, и к способам их применения, например для стимулирования и усиления иммунной реакции, для защиты против вирусной инфекции, для нормализации уровней холестерина в сыворотке и для стимулирования кроветворения. Полученные из казеина пептиды не токсичны, и их можно использовать для лечения и профилактики, например иммунопатологий, гиперхолестеринемии, гематологических нарушений и связанных с вирусами заболеваний. Принципы и способы осуществления настоящего изобретения можно лучше понять со ссылкой на рисунки и сопровождающие их описания. Перед детальным объяснением по крайней мере одного варианта изобретения, следует уяснить, что применение изобретения не ограничивается подробностями, изложенными ниже в описании или проиллюстрированными примерами. Возможны другие варианты изобретения, или его можно использовать на практике другими способами. Кроме того, следует уяснить, что используемая в данном описании терминология и фразеология служит целям описания, и ее не следует рассматривать как ограничивающую. В том смысле, как использовано, термин "лечение" включает существенное ингибирование, замедление или обратное течение развития заболевания, существенное ослабление клинических симптомов заболевания. В том смысле, как использовано, термин "профилактика" включает существенное предотвращение проявления клинических симптомов заболевания. В том смысле, как использовано, термин "пептид" включает нативные пептиды (включая продукты разложения, пептиды, полученные синтетическим путем, или рекомбинантные пептиды) и имитаторы пептидов (обычно пептиды, полученные синтетическим путем), такие как пептоиды и полупептоиды,которые являются аналогами пептидов, и которые могут содержать, например, модификации, которые делают данные пептиды более стабильными в организме. Такие модификации включают, но не ограни-8 007217 чиваясь ими, циклизацию, модификацию N-конца, модификацию С-конца, модификацию пептидной связи, включая, но не ограничиваясь ими, -CH2-NH, СН 2-S, СН 2-S=O, O=C-NH, CH2-O, СН 2-СН 2, S=C-NH,CH=CH или CF=CH, модификацию основной цепи и модификацию остатков. Способы получения соединений-имитаторов пептидов хорошо известны в данной области и раскрыты, например, в QuantitativeDrug Design, С.A. Ramsden Gd., Chapter 17.2, F. Choplin Pergamon Press (1992), которая включена в данное описание в качестве ссылки. Дальнейшая детализация данного аспекта изложена ниже. Так, пептидом настоящего изобретения может быть циклический пептид. Циклизацию можно осуществить, например, за счет образования амидной связи, например, включением Glu, Asp, Lys, Orn, диаминомасляной (Dab) кислоты, ди-аминопропионовой (Dap) кислоты в различные положения в цепи(-CO-NH или -NH-CO связи). Можно также осуществить циклизацию между двумя основными цепями за счет включения модифицированных аминокислот формул H-NCH2)n-COOH)-C(R)H-COOH или HNCH2)n-COOH)-С(R)H-NH2, где n=1-4, и, кроме того, где R представляет природную или не природную боковую цепь аминокислоты. Возможна также циклизация через образование S-S связей за счет включения двух Сys остатков. Кроме того, циклизацию за счет присоединения одной боковой цепи к другой боковой цепи можно осуществить через образование интерактивной связи формулы -(-CH2)n-S-CH2-C-, где n=1 или 2, что возможно, например, за счет включения Суs или homoCys и взаимодействия ее свободной SH группы, например, с бромацетилированными Lys, Orn, Dab или Dap. Пептидные связи (-CO-NH-) внутри пептида могут быть замещены, например, N-метилированными связями (-N(СН 3)-СО-), сложноэфирными связями (-С(R)Н-С-O-О-С(R)-N-), кетометиленовыми связями(-CO-CH2-), -аза связями (-NH-N(R)-СО-), где R представляет любой алкил, например, метил, карбасвязи (-CH2-NH-), гидроксиэтиленовые связи (-СН(ОН)-СН 2-), тиоамидные связи (-CS-NH-), олефиновые двойные связи (-СН=СН-), ретроамидные связи (-NH-CO-), производные пептидов (-N(R)-СН 2-СО-), гдеR представляет "нормальную" боковую цепь, естественно присутствующую у атома углерода. Такие модификации могут быть осуществлены по любым связям вдоль пептидной цепи и даже по нескольким (2-3) одновременно. Природные ароматические аминокислоты, Тrp, Туr и Phe, могут быть замещены для синтеза неприродных кислот, таких как TIC, нафтилеланин (Nol), метилированное по кольцу производное Phe, галогенированное производное Phe или O-метил-Туr. В приведенных ниже табл. 1-2 перечислены все природные аминокислоты (табл. 1) и необычные или модифицированные аминокислоты (табл. 2). Таблица 1 Пептид настоящего изобретения можно использовать как таковой, или в форме части фрагментов,таких как белки и "дисплей" фрагменты, такие как "дисплеи" бактерий и фагов. Пептиды настоящего изобретения можно также модифицировать химически, получая активные димеры или полимеры в одной пептидной цепи или в ковалентно сшитых цепях. Кроме того, пептиды настоящего изобретения включают по крайней мере четыре, необязательно по крайней мере пять, необязательно по крайней мере шесть,необязательно по крайней мере семь, необязательно по крайней мере восемь, необязательно по крайней мере девять, необязательно по крайней мере десять, необязательно по крайней мере одиннадцать, необязательно по крайней мере двенадцать, необязательно по крайней мере тринадцать, необязательно по крайней мере четырнадцать, необязательно по крайней мере пятнадцать, необязательно по крайней мере шестнадцать, необязательно по крайней мере семнадцать, необязательно по крайней мере восемнадцать,необязательно по крайней мере девятнадцать, необязательно по крайней мере двадцать, необязательно по крайней мере двадцать один, необязательно по крайней мере двадцать два, по крайней мере двадцать три, по крайней мере двадцать четыре, по крайней мере двадцать пять, по крайней мере двадцать шесть,необязательно между двадцатью семью и шестьюдесятью или более аминокислотных остатков (которые в данном описании равнозначно называют аминокислотами). Соответственно, в том смысле, как использовано, термин "аминокислота" или "аминокислоты" включает 20 природных аминокислот; такие аминокислоты часто оказываются модифицированными после трансляции in vivo, включая, например, гидроксипролин, фосфосерин и фосфотреонин; и другие необычные аминокислоты, включая, но не ограничиваясь ими, 2-аминоадипиновую кислоту, гидроксилизин, изодесмозин, норвалин, норлейцин и орнитин. Кроме того, термин "аминокислота" включает как D-,так и L-аминокислоты. В том смысле как использовано, фраза "полученный из N-концевой части казеина S1" относится к пептидам в том смысле, как определено, например, продукты расщепления казеина S1 (называемые пептидами, полученными из нативного казеина) , синтетические пептиды, синтезированные химическим путем таким образом, что их аминокислотные последовательности соответствуют аминокислотной последовательности N-концевой части казеина S1 (называемые синтетическими пептидами, полученными из казеина), пептиды, аналогичные (гомологичные) N-концевой части казеина S1, например, пептиды,отличающиеся одним или более из аминокислотных замещений, но не ограничиваясь ими, допустимыми заместителями, при условии, что сохраняется по крайней мере 70%, предпочтительно по крайней мере 80%, более предпочтительно по крайней мере 90% сходства, и их функциональные гомологи. Термины"гомологи" и "функциональные гомологи", в том смысле, как использовано, относятся к пептидам с любыми вставками, делениями и замещениями, которые не влияют на биологическую активность пептида. В том смысле, как использовано, термин "казеин S1" относится к казеину S1 млекопитающих,включая, но не ограничиваясь ими, домашних млекопитающих (например, коров, овец, коз, лошадей,верблюдов, оленей и буйволов), людей и морских млекопитающих. Далее приводится список казеиновS1, аминокислотные последовательности которых известны и идентифицированы по их регистрацион- 12007217 ным номерам в GenBank (NCBI) и источникам: САА 26982 (Ovis aries (овца, САА 51022 (Capra hircus(коза, САА 42516 (Bos tauru (корова, САА 55185 (Homo sapiens), САА 38717 (Sus scrofa (свинья,Р 09115 (кролик) и 097943 (Camelus dromedurius (верблюд. В том смысле, как использовано, термин "N-концевая часть" относится к М аминокислотам S1 казеина, полученным из первых 60 аминокислот казеина S1, где М представляет любое целое число от 5 до 60 (включая целые числа 5 и 60). Предпочтительно данный термин относится к первым М аминокислотам казеина S1. Пептиды настоящего изобретения можно получить путем экстракции из молока, как было указано выше, или с помощью твердофазного пептидного синтеза, который является стандартным способом, известным в данной области. Очистку пептидов настоящего изобретения осуществляют стандартными способами, известными специалистам, такими как высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Фрагментацию молочного казеина для получения пептидов настоящего изобретения можно осуществить,используя различные ферментативные и/или химические способы. Как будет подробно раскрыто ниже и подтверждено примерами в следующем ниже разделе Примеры, пептиды настоящего изобретения обладают различными терапевтическими эффектами. В разделе Примеры приведено множество анализов, с помощью которых специалист может тестировать конкретный пептид, полученный в соответствии с способами настоящего изобретения для конкретного терапевтического эффекта. Любой из описываемых пептидов можно вводить как он есть или в составе фармацевтической композиции, которую можно использовать для лечения или профилактики заболевания. Такие композиции включают в качестве активного ингредиента любые из раскрываемых пептидов и фармацевтически приемлемый носитель. В том смысле, как использовано, термин "фармацевтическая композиция" относится к препарату одного или более из описываемых пептидов с другими химическими компонентами, такими как фармацевтически приемлемые носители и наполнители. Целью создания фармацевтической композиции является облегчение введения соединения в организм. Здесь и далее термин "фармацевтически приемлемый носитель" относится к носителю или разбавителю, который не вызывает заметного раздражения в организме и не разрушает биологическую активность и свойства вводимого соединения. Примерами носителей, но не ограничиваясь ими, являются: пропиленгликоль, солевой раствор, эмульсии и смеси органических растворителей с водой. Термин "наполнитель" относится к инертному веществу, которое добавляют в фармацевтическую композицию для дальнейшего облегчения введения соединения. Примеры наполнителей, но не ограничиваясь ими, включают карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара и различного типа крахмалы, производные целлюлозы, желатин, растительные масла и полиэтиленгликоли. Способы получения лекарственных форм и введения лекарств можно найти в "Remington'sPharmaceutical Sciences", Mack Publishing Co., Easton, PA, в последнем издании. Подходящие способы введения могут, например, включать пероральное, ректальное, чресслизистое,чрескожное, энтеральное или парэнтеральное введение, включая внутримышечные, подкожные и интрамедуллярные инъекции, а также интратекальную, прямую интравентрикулярную, внутривенную, внутрибрюшинную, назальную или внутриглазную инъекции. Фармацевтические композиции настоящего изобретения можно приготовить способами, хорошо известными в данной области, например, с помощью обычного перемешивания, гранулирования, получения драже, растирания в порошок, эмульгирования, заключения в оболочку или в матрицу, или используя процесс лиофилизации. Фармацевтические композиции для использования в соответствии со способом настоящего изобретения можно приготовить обычными способами, используя один или более из фармацевтически приемлемых носителей, включая наполнители и вспомогательные агенты, которые облегчают процесс включения активных пептидов в препараты, которые можно использовать фармацевтически. Подходящая форма зависит от выбранного способа введения. Для инъекций пептиды настоящего изобретения можно приготовить в водных растворах, предпочтительно в физиологически совместимых буферах, таких как раствор Хенка, раствор Рингера или забуференный физиологический солевой раствор, с добавлением или без добавления органических растворителей, таких как пропиленгликоль и полиэтиленгликоль. Для введения через слизистую оболочку в формах используют агенты, способствующие проникновению через слизистую. Такие агенты хорошо известны в данной области. Для перорального введения пептиды можно легко приготовить, комбинируя активные пептиды с фармацевтически приемлемыми носителями, которые хорошо известны в данной области. Такие носители позволяют получить пептиды настоящего изобретения в таких формах, как таблетки, пилюли, драже,капсулы, жидкости, гели, сиропы, взвеси, суспензии и т.п. для перорального приема пациентом. Фармакологические препараты для перорального введения можно приготовить, используя наполнители, необязательно измельчая полученную смесь и превращая смесь в гранулы, затем добавляя при желании под- 13007217 ходящие вспомогательные агенты, для получения таблеток или сердцевин драже. Подходящими наполнителями являются, в частности, наполнители, такие как сахара, включая лактозу, сахарозу, маннит или сорбит; препараты целлюлозы, такие как, например, кукурузный крахмал, пшеничный крахмал, рисовый крахмал, картофельный крахмал, желатин, смола трагаканта, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза; и/или физиологически приемлемые полимеры, такие как поливинилпирролидон (PVP). При желании можно добавить разрыхляющие агенты, такие как сшитый поливинилпирролидон, агар или альгиновая кислота, или ее соль, такая как альгинат натрия. На сердцевины драже наносят покрытия. Для этой цели можно использовать концентрированные растворы сахара, которые могут необязательно содержать гуммиарабик, тальк, полвинилпирролидон,гель карбопола, полиэтиленгликоль, диоксид титана, лакирующие растворы и подходящие органические растворители или смеси растворителей. В оболочки драже или таблеток можно добавить красители или пигменты для идентификации, или для того, чтобы охарактеризовать различные комбинации доз активных ингредиентов. Фармацевтические композиции, которые предназначены для перорального введения, включают сборные капсулы, состоящие из желатина, а также мягкие герметичные капсулы, сделанные из желатина и пластификатора, такого как глицерин или сорбит. Сборные капсулы могут содержать активные ингредиенты в смеси с наполнителями, такими как лактоза, связующими, такими как крахмалы, смазывающими агентами, такими как стеарат магния, и необязательно стабилизаторы. В мягких капсулах активные пептиды могут быть растворены или суспендированы в подходящих жидкостях, таких как нелетучие масла, жидкий парафин или жидкие полиэтиленгликоли. Кроме того, могут быть добавлены стабилизаторы. Все формы для перорального введения должны быть в дозированных формах, подходящих для выбранного способа введения. Для способа введения за щеку, композиции могут быть, как обычно, изготовлены в форме таблеток или пастилок. Для введения путем ингаляции пептиды настоящего изобретения удобно вводить в форме аэрозольных спреев, распыляемых из баллончика со сжатым воздухом или распылителя с подходящим распыляющим агентом, например, дихлордифторметаном, трихлорфторметаном, дихлортетрафторэтаном или диоксидом углерода. В случае аэрозолей под давлением единичную дозу можно определить с помощью клапана, который пропускает отмеренное количество препарата. Капсулы и картриджи, например,желатина, для использования в ингаляторе или в устройстве для вдувания, можно выполнить таким образом, чтобы они содержали смесь порошка соединения и подходящую порошковую основу, такую как лактоза или крахмал. Раскрываемые в данном описании пептиды можно приготовить в формах для парэнтерального введения, например, для болюсного введения или для непрерывного вливания. Формы для инъекций могут быть выполнены в виде разовых дозированных форм, например, в ампулах, или в контейнерах с многими дозами, в которые необязательно добавлен консервант. Композиции могут иметь вид суспензий, растворов или эмульсий в масляных или водных носителях, и могут содержать способствующие созданию формы агенты, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. Фармацевтические композиции для парентерального введения включают водные растворы активных препаратов в водорастворимой форме. Кроме того, суспензии активных пептидов можно приготовить в виде масляных суспензий для инъекций. Подходящие липофильные растворители или носители включают нелетучие масла, такие как кунжутное масло, или сложные эфиры жирных кислот, такие как этилолеат, триглицериды или липосомы. Водные суспензии для инъекций могут содержать вещества,которые повышают вязкость суспензии, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлоза, сорбит или декстран. Необязательно суспензия может содержать подходящие стабилизаторы или агенты, которые повышают растворимость пептидов, чтобы обеспечить получение высококонцентрированных растворов. В другом варианте активный ингредиент может быть в форме порошка для растворения перед применением в подходящем растворителе, например, в стерильной, не содержащей пирогенов воде. Пептиды настоящего изобретения могут быть также приготовлены в виде композиций для ректального введения, в таком виде, как суппозитории или клизмы, используя, например, обычные основы для суппозиториев, такие как масло какао или другие глицериды. Описываемые фармацевтические композиции могут также содержать подходящие твердые носители, носители в виде геля, или наполнители. Примеры таких носителей или наполнителей включают, но не ограничиваясь ими, карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара, крахмалы, производные целлюлозы, желатин и полимеры, такие как полиэтиленгликоли. Специалисты могут легко определить оптимальные дозы и схемы приемов для каждого из пептидов настоящего изобретения. Для любого из пептидов, используемых в соответствии со способом настоящего изобретения, терапевтически эффективное количество, называемое также терапевтически эффективной дозой, можно определить, вначале используя анализ клеточных культур или анализ in vivo на животных. Так, например,дозу можно определить в модели на животных для достижения циркулирующей концентрации в интервале, который включает ИК 50 или ИК 100, определенные для культуры клеток. Такую информацию можно- 14007217 использовать для более точного определения необходимых для человека доз. Начальные дозы можно также определить из результатов исследований in vivo. Используя эти начальные руководства, специалист может определить величину эффективной дозы для человека. Более того, токсичность и терапевтическую эффективность описываемых пептидов можно определить с помощью стандартных фармацевтических процедур для культуры клеток или на экспериментальных животных, например, определяя ЛД 50 и ЭД 50. Отношение величин токсичной дозы и дозы терапевтически эффективной является терапевтическим показателем, и его можно выразить как отношение ЛД 50 к ЭД 50. Предпочтительны пептиды, которые демонстрируют высокие терапевтические показатели. Результаты анализов, полученные для клеточных культур и исследований на животных, можно использовать для определения дозового интервала, который не был бы токсичным для человека. Дозы для таких пептидов находятся предпочтительно в интервале циркулирующих концентраций, который включает ЭД 50 с малой токсичностью или вовсе без токсичности. Дозы могут меняться в этом интервале значений в зависимости от используемой формы дозы и способа введения. Конкретную форму, способ введения и дозу должен выбрать врач с учетом состояния пациента (см., например, Fingi et al., 1975, In: ThePharmacological Basis of Therapeutics, chapter 1, page 1). Количество доз и интервал между введениями можно установить индивидуально для достижения таких уровней активного ингредиента в плазме, которых достаточно для поддержания терапевтического эффекта. Обычные допустимые дозы для перорального введения находятся в интервале от около 50 до 2000 мг/кг/прием обычно от около 100 до 1000 мг/кг/прием, предпочтительно от около 150 до 700 мг/кг/прием и наиболее предпочтительно от около 250 до 500 мг/кг/прием. В некоторых случаях терапевтически эффективные уровни в сыворотке достигаются в результате введения нескольких доз каждый день. В случае локального введения или селективного поглощения эффективная локальная концентрация лекарства может не быть связана с концентрацией в плазме. Специалист сможет оптимизировать эффективную локальную дозировку без чрезмерных экспериментов. В зависимости от серьезности состояния и реакции подлежащего лечению пациента, прием доз может быть однократным с применением композиции с замедленным выделением, при этом курс лечения длится от нескольких дней до нескольких недель, до излечения или до ослабления болезненного состояния. Необходимое для введения количество композиции будет, естественно, зависеть от подлежащего лечению пациента и тяжести заболевания, способа введения, точки зрения врача и т.д. Композиции настоящего изобретения можно при желании представить в упаковке или в распределительном устройстве,таком как набор, одобренный FDA, который может содержать одну или более из разовых дозированных форм, содержащих активный ингредиент. Упаковка может, например, содержать металлическую или пластиковую фольгу, такую как блистер. Упаковка или распределительное устройство может сопровождаться инструкцией для применения. Упаковка или распределительное устройство может также сопровождаться предупреждением, связанным с контейнером в форме предписания правительственного учреждения, регулирующего изготовление, применение или продажу лекарств, при этом такое предупреждение отражает утверждение учреждением формы композиции или введения человеку или животным. Такое предписание может быть, например, этикеткой, утвержденной администрацией США по пищевым и лекарственным продуктам для лекарств, отпускаемых по рецепту врача. Композиции, включающие пептид настоящего изобретения, приготовленные в совместимом фармацевтическом носителе, можно поместить в соответствующий контейнер и пометить для лечения или профилактики указанного состояния или для того, чтобы вызвать нужный результат. Соответствующие указания в примечании могут включать лечение и/или профилактику аутоиммунного заболевания, вирусного заболевания, вирусной инфекции, тромбоцитопении, панцитопении, гранулоцитопении, гиперлипидемии, холестеринемии, гликозурии и диабета, или индуцирование кроветворения, пролиферации и дифференцировки кроветворных стволовых клеток, мегакариоцитопоэза, эритропоэза, лейкоцитопоэза и/или тромбоцитопоэза. Фармацевтические композиции настоящего изобретения могут быть полезны для поддержания и/или восстановления составляющих кровеносной системы, баланса количества кровяных клеток, для баланса уровней метаболитов в крови, включая уровни сахара, холестерина, кальция, мочевой кислоты,мочевины и ферментов, таких как щелочная фосфатаза. Далее фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть полезна для индуцирования пролиферации кровяных клеток, модулирования количества белых и/или красных кровяных клеток, особенно повышения количества белых и/или красных кровяных клеток, повышения уровня гемоглобина в крови и модулирования количества тромбоцитов. Термин "балансировка", используемый в связи с уровнями некоторых физиологических параметров, означает изменение уровней данных параметров и подведение их ближе к нормальным значениям. Термин "нормальные значения", в том смысле, как использовано в связи с физиологическими параметрами, означает значения, которые попадают в интервал значений для здоровых людей и животных. В особо предпочтительных вариантах пептиды настоящего изобретения приводят к нормальным значениям количество красных кровяных клеток, белых кровяных клеток, тромбоцитов и уровень гемоглобина. Фармацевтические композиции настоящего изобретения можно использовать для лечения и/или- 15007217 профилактики заболеваний гемопоэтических стволовых клеток, включая заболевания, опосредованные тромбоцитами, лимфоцитами, плазмоцитами и нейтрофилами, а также дефицита и неправильного функционирования при предлейкозных и лейкозных состояниях и при тромбоцитопении. Далее фармацевтические композиции можно использовать для лечения и/или профилактики клеточно-пролиферативных заболеваний. В этой связи следует отметить, что фармацевтические композиции настоящего изобретения выгодно использовать для стимулирования иммунной реакции при химиотерапии или лучевой терапии, для ослабления негативных эффектов, уменьшения рвоты, вызываемой химиотерапией и облучением, чтобы способствовать быстрейшему выздоровлению. Кроме того, фармацевтические композиции настоящего изобретения можно использовать для стимулирования иммунной реакции человека во время лечения заболеваний, связанных с иммунодефицитом, например, ВИЧ и аутоиммунных заболеваний. Композиции настоящего изобретения могут быть также предназначены для использования в ветеринарии. Фармацевтические композиции настоящего изобретения можно использовать для лечения и/или профилактики, например, заболеваний, сопровождающихся аномальными уровнями кровяных клеток,заболеваний, сопровождающихся продуцированием и дифференцировкой гемопоэтических стволовых клеток, для лечения заболеваний, опосредованных тромбоцитами, лимфоцитами и/или нейтрофилами,для лечения предлейкозных или лейкозных состояний и для лечения тромбоцитопении. Фармацевтические композиции настоящего изобретения можно использовать для лечения заболеваний, связанных с пролиферацией клеток, и заболеваний, связанных с иммунодефицитом, таких как ВИЧ и аутоиммунные заболевания. Далее фармацевтические композиции настоящего изобретения можно использовать для стимулирования иммунной реакции при химиотерапии или лучевой терапии, например, для уменьшения рвоты, связанной с химиотерапией. Далее настоящее изобретение относится к антибактериальным фармацевтическим композициям,включающим в качестве активного ингредиента по крайней мере один пептид настоящего изобретения, и к использованию пептидов настоящего изобретения в качестве антибактериальных агентов. Таким образом, в настоящем изобретении предложен способ профилактики или лечения аутоиммунных заболеваний, причем способ этот осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения вирусного заболевания, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеинаS1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики вирусной инфекции, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования кроветворения,причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования пролиферации кроветворных стволовых клеток, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования пролиферации и дифференцировки кроветворных стволовых клеток, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования мегакариоцитопоэза, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования эритропоэза,причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования лейкоцитопоэза, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ индуцирования тромбоцитопоэза, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1.- 16007217 Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения тромбоцитопении, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения панцитопении, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения гранулоцитопении, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеинаS1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения гиперлипидемии, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения холестеринемии, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения глюкозурии, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения диабета, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения СПИД, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения инфекции, вызванной ВИЧ, причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из N-концевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен способ профилактики или лечения состояний, связанных с миелоаблативными дозами химиорадиотерапии, поддерживаемой трансплантацией аутологичного костного мозга или периферических стволовых кроветворных клеток (ASCT), или трансплантацией аллогенного костного мозга (ВМТ), причем указанный способ осуществляют путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения аутоиммунного заболевания, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения вирусного заболевания, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики вирусной инфекции, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования кроветворения, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования пролиферации кроветворных стволовых клеток, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования пролиферации и дифференцировки кроветворных стволовых клеток, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из Nконцевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования мегакариоцитопоэза, причем указанная фармацевтическая композиция включает в каче- 17007217 стве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложенафармацевтическая композиция для индуцирования эритропоэза, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования лейкоцитопоэза, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования кроветворения, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для индуцирования тромбоцитопоэза, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения тромбоцитопении, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения панцитопении, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения гранулоцитопении, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения гиперлипидемии, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения холестеринемии, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения глюкозурии, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения диабета, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения СПИД, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения инфекции, вызванной ВИЧ, причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения состояний, связанных с миелоаблативными дозами химиорадиотерапии, поддержанными трансплантацией аутологичного костного мозга или периферических стволовых кроветворных клеток (ASCT), или трансплантацией аллогенного костного мозга (ВМТ), причем указанная фармацевтическая композиция включает в качестве активного ингредиента пептид, полученный из N-концевой части казеина S1, и фармацевтически приемлемый носитель.- 18007217 Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения аутоиммунного заболевания. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения вирусного заболевания. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики вирусной инфекции. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования кроветворения. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования пролиферации кроветворных стволовых клеток. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования пролиферации и дифференцировки кроветворных стволовых клеток. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования мегакариоцитопоэза. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования эритропоэза. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования лейкоцитопоэза. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для индуцирования тромбоцитопоэза. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения тромбоцитопении. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения панцитопении. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения гранулоцитопении. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения гиперлипидемии. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения холестеринемии. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения глюкозурии. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения диабета. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения СПИД. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части казеина S1 для профилактики или лечения инфекции, вызванной ВИЧ. Далее в соответствии с настоящим изобретением раскрыто применение пептида, полученного из Nконцевой части S1 казеина для профилактики или лечения состояний, связанных с миелоаблативными дозами химиорадиотерапии, поддержанными трансплантацией аутологичного костного мозга или трансплантацией периферических стволовых кроветворных клеток (ASCT), или трансплантацией аллогенного костного мозга (ВМТ). Далее в соответствии с настоящим изобретением предложен очищенный пептид, последовательность аминокислот которого выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-19. Далее в соответствии с настоящим изобретением предложена фармацевтическая композиция, включающая очищенный пептид, последовательность аминокислот которого выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-19, и фармацевтически приемлемый носитель. Настоящее изобретение с успехом решает недостатки известных в настоящее время конфигураций,предоставляя пептиды для лечения заболеваний человека, причем указанные пептиды получены из Nконцевой части казеина S1, не обладают видимой токсичностью, зато отличаются высокой терапевтической эффективностью. Дополнительные цели, преимущества и новые отличительные особенности настоящего изобретения станут очевидны специалистам после ознакомления со следующими примерами, которые не следует рассматривать как ограничивающие. Кроме того, каждый из различных вариантов и аспектов настоящего изобретения, как оно изложено выше и как заявлено в формуле изобретения, находит экспериментальное подтверждение в приведенных далее примерах.- 19007217 Примеры Сделаны ссылки на следующие примеры, которые вместе с приведенным выше описанием иллюстрируют изобретение не лимитирующим образом. Материалы и экспериментальные методы Препараты пептидов, полученных из нативного казеина. Фракцию казеина из коровьего молока выделяют по способу Hipp et al. (1952), ibid. и подвергают исчерпывающему протеолитическому расщеплению химозином (известным также как реннин) (20 нг/мл) при 30 С. После завершения реакции, раствор нагревают для инактивирования фермента и гидролизат осаждают как параказеин, подкисляя органической кислотой, уксусной или трихлоруксусной кислотой. Параказеин выделяют центрифугированием и надосадочную фракцию, содержащую представляющие интерес пептидные фрагменты, диализуют и снова осаждают как казеицидин более высокими концентрациями кислоты. Полученный казеицидин после повторного суспендирования, диализа и нейтрализации, лиофилизируют. Анализируют биологическую активность полученного порошкообразного препарата, как указано ниже, и выделяют с помощью ВЭЖХ для пептидного анализа. ВЭЖХ анализ пептидов, полученных из нативного казеина. Пептиды, полученные из нативного казеина, как указано выше, анализируют с помощью ВЭЖХ в две стадии. Вначале лиофилизированный казеиновый гидролизат разделяют, используя С 18 обращенную фазу и градиентное элюирование смесью 0,1% водная трифторуксусная кислота (вес/вес) - ацетонитрил. Детектирование осуществляют по УФ поглощению на 214 нм. После этого образцы анализируют с помощью ВЭЖХ-Масс-спектрометра (MS), снабженного источником распыления электронов. Рассчитанные массы представляют массы ионизированных пептидных образцов, полученных по времени удерживания. После разделения аминокислотный состав пептидов определяют с помощью газофазного микросеквенатора (Applied Biosystems 470A). Приведенные результаты являются репрезентативными: обычно наблюдают восемь пиков пептидов, из которых 3 основных пика имеют величину Rt = 17,79, 19,7, 23,02, и 5 более слабых пиков с величинами Rt = 12,68, 14,96, 16,50, 21,9 и 25,1, причем данные величины Rt соответствуют молекулярным массам 2764, 1697, 1880, 2616, 3217, 2333, 1677 и 1669 Да соответственно. Для Rt 17,79 (соответствующему 2764 Да) основной пик пептида, состоящего из 23 аминокислот, которые представляют аминокислоты 1-23 S1 казеина, имеет последовательность RPKHPIKHQGLPQEVLNENLLRF (SEQ ID NO: 16, см.McSweeny et al., 1993, ibid., для пептидной последовательности S1 казеина). Другие пептиды соответствуют положениям 208-224 -казеина, положениям 16-37 казеина S1 и положениям 197-222 S2 подобного казеинового предшественника. Присутствуют также и другие пептиды. Синтетические пептиды, полученные из казеина. Пептиды, с возрастающей длиной цепочки, соответствующие N-концевым 8-26 аминокислотам S1 казеина, были синтезированы NoVetide Ltd., Haifa, Israel, со степенью чистоты 95% (ВЭЖХ). Контроль качества включает ВЭЖХ, масс-спектрометрию (EI), анализ аминокислот и содержания пептидов. В представленной ниже табл. 3 приведены указанные пептиды. Таблица 3 Ювенильный (тип I, IDDM) диабет у диабетических мышей без ожирения (NOD).NOD мыши представляют обычно используемую модель для исследования аутоиммунных заболеваний и ювенильного диабета человека. Шестинедельные самки NOD мышей получают либо одну, либо две инъекции в неделю по 100 мкг пептидов, полученных из нативного казеина, всего в течение 5 или 11 раз. Контрольным мышам инъекции не проводят. Степень заболевания определяют по глюкозурии, которую измеряют, используя Combi test sticks [Gross, D.J. et al. (1994), Diabetology, 37:1195]. Результаты выражают как процент мышей без глюкозурии для каждого из образцов в течение периода в 230 дней. Стимулирование пролиферации натуральных киллерных (NK) клеток. Из периферических стволовых кровяных клеток человека (PBSC): PBSC от G-CSF-обработанных субъектов разделяют на градиенте фиколла, дважды промывают средой RPMI-1640 и высевают в 1,5 мл лунки без пептидов или с пептидами, полученными из нативного казеина, или пептидами, полученными из синтетического казеина, как указано (0-500 мкг/мл). После двух дней инкубирования клетки анализируют на природную киллерную активность, измеряя радиоактивность, выделенную из 35S-меченых К 562 клеток-мишеней (NEG-709A, 185,00 МБк, 2,00 мКи EASYTAGth метионин, L-[35S] 43,48 TBq на ммоль,1175,0 Кюри на ммоль, 0,488 мл, Boston USA). Две концентрации эффекторных клеток (2,5104 и 5104 клеток на лунку) инкубируют с 5103 клеток-мишеней на лунку (отношения эффекторные клетки:клетки-мишени составляют 50:1 и 100:1 соответственно) в планшетах для культуры тканей с Uобразными лунками. Клетки инкубируют в течение 5 ч при 37 С в смеси 5% СO2, 95% воздуха, и осаждают пятиминутным центрифугированием со скоростью 1000 об./мин. Выделение 35S измеряют в 50 мкл образцах надосадочной жидкости. Из клеток мышиного костного мозга (ВМ). Костный мозг отбирают у необработанных мышей BALB/c и С 57 В 1/6. Костный мозг отбирают из длинных костей передних и задних лап мышей, вводя среду, используя иглы 25 размера. Отсосанные клетки промывают RPMI 1640, подсчитывают в гемоцитометре и витально окрашивают (20 мкл клеток в 380 мкл уксусной кислоты-трипановый синий), затем высевают в культуральные склянки в концентрации 2-5106 клеток/мл в среду RPMI-1640, содержащую 10% фетальной телячьей сыворотки, антибиотики и глутамин с добавлением или без добавления 100 мкг пептидов, полученных из нативного казеина. Культуры клеток инкубируют в смеси 5% СO2, 95% воздуха в течение 12-15 дней при 37 С, собирают десятиминутным центрифугированием при 1500 об./мин, подсчитывают и высевают в U-образные лунки с 51 Сr (хром-51, 740 МБк, 2,00 мКи активность) или 35S (NEG-709A, 185,00 МБк, 2,00 мКи EASYTAGth Метионин, L-[35S] 43,48 TBq на ммоль, 1175,0 Кюри на ммоль, 0,488 мл, Boston USA) мечеными клетками мышиной лимфомы (YAC) при отношении эффекторные клетки:клетки-мишени либо 25:1, либо 50:1.NK активность выражают как процент радиоактивности в не содержащих клеток надосадочных жидкостях. Пролиферация человеческих клеток в культуре. Периферическую кровь (РВ) отбирают у здоровых или больных пациентов. Больным пациентам не вводят ничего, кроме G-CSF перед плазмофорезом. Клетки костного мозга (ВМ) отбирают у здоровых добровольцев или больных пациентов с ремиссией после химиотерапии путем инъекции в медуллярное пространство и отсасывания. Пуповинную кровь отбирают в процессе нормальных родов. Клетки человека, различного происхождения, выделяют с помощью градиента фиколла, дважды промывают средойRPMI-1640 и высевают в 0,2 мл плоскодонные культуральные планшеты, в указанных концентрациях с добавлением или без добавления пептидов, полученных из нативного казеина, или с добавлением или без добавления пептидов, полученных из синтетического казеина, как указано. Все обработки, включая контрольные, повторяют трижды. Клеточную пролиферацию определяют, добавляя радиоактивный тимидин[тимидин(метил-[3 Н]). Удельная активность 6,7 Кюри на мл 37 МБк на мл, ICN Corp.] после инкубирования в течение указанного количества дней. Клетки инкубируют в течение 16-20 ч с меткой, собирают и дважды промывают средой. Включенную радиоактивность измеряют с помощьюсцинтилляционного счетчика. Пролиферация клеточных линий лейкоза К 562 и рака толстой кишки. Клеточные линии рака толстой кишки и лейкоза К 526 являются распространенными линиями злокачественных клеток, выращиваемых в культуре. Обе клеточные линии выращивают в культуральных флаконах в атмосфере, состоящей из 5% СO2, 95% воздуха, при 37 С, собирают и промывают средой перед посевом в лунки для культуры тканей в количестве 4105 клеток (К 562) или 3103 клеток (раковые клетки толстой кишки) на лунку. Пептиды, полученные из нативного казеина, добавляют в лунки в указанных концентрациях, и после 9 (К 562) или 3 (толстая кишка) дней инкубирования добавляют меченый тимидин, как указано выше. Сбор и измерения захваченной радиоактивности осуществляют указанным выше способом.- 21007217 Определение NK и Т клеточной пролиферации стволовых кроветворных клеток в периферической крови (PBSC) человека с помощью флуоресцентных антител: Стволовые клетки периферической крови (PBSC) от пациентов, которым вводили G-CSF, собирают с помощью плазмофореза, разделяют, используя градиент фиколла, дважды промывают средой RPMI1640, содержащей 10% фетальную телячью сыворотку, и инкубируют в культуральных бутылях при 37 С в атмосфере, содержащей 5% СO2 и 95% воздуха, с добавлением или без добавления пептидов, полученных из нативного казеина в указанных концентрациях. После 10, 14 или 28 дней инкубирования с пептидами, полученными из нативного казеина, наличие Т клеток (СD3 поверхностный антиген) и NK клеток (CD56 поверхностный антиген) определяют с помощью прямой иммунофлуоресценции, используя анти-СD3 флуоресцентное антитело (CD3/FITC клон UHCT1), анти-СD56 флуоресцентное антитело(CD56/RPE клон МОС-1) (DAKO A/S, Denmark) и мышиные IgGl/RPE и IgGl/FITC антитела в качестве контроля. Детектирование флуоресцентно меченых клеток осуществляют, используя сортировку по флуоресцентно активированным клеткам (FACS) и флуоресцентную микроскопию. Стимулирование кроветворения в клетках костного мозга (ВМ) в культуре. Пролиферация мегакариоцитов в мультипотенциальных колониях (CFU-GEMM) из мышиных клеток костного мозга. Первичные клетки костного мозга (1105 на мл), полученные от 8-12 недельных CSH/HeJ мышей,выращивают на не содержащей сыворотки среде метилцеллюлоза-IMDM в течение 8-9 дней в атмосфере,содержащей 5% CO2 и 95% воздуха, при 37 С. Среда, подходящая для выращивания мультипотентных колоний (CFU-GEMM), содержит 1% BSA (Sigma), 10-4 М тиоглицерина (Sigma), 2,810-4 М трансферрина человека (TF, Biological industries, Israel), 10% WEHI-CM в качестве источника IL-3, и 2 ед/мл эритропоэтина (rhEPO, RD Systems, Minneapolis). Колонии оценивают, спустя 8-9 дней, используя темнопольный микроскоп Olympus. Их отбирают микропипеткой, цитоцентрифугируют и окрашивают MayGrunwald-Giemsa для дифференциального подсчета. Для каждого препарата подсчитывают по крайней мере 700 клеток. Пролиферация клеток, образующих мегакариоциты и эритроиды из костного мозга и кровяных клеток спинного мозга человека. Образец костного мозга, полученный от видимо здорового человека, разделяют, используя градиент плотности на Histopaque-107 (Sigma Diagnostics), в результате чего получают очищенную популяцию мононуклеарных клеток (MNC). Анализ колоний осуществляют в среде для чашек Петри, содержащей конечную концентрацию 0,92% метилцеллюлозы (4000 centripase порошок, Sigma Diagnostic), снова растворяют в среде Дюльбекко, модифицированной Исковым, содержащей 36 мМ бикарбоната натрия(Gibco), 30% фетальной телячьей сыворотки (FBS) (Hyclone), 0,292 мг/мл глутамина, 100 ед/мл пенициллина и 0,01 мл стрептомицина (Biological Industries, Beit Haemek). Кровь, взятую из пуповины здоровых новорожденных, собирают и обрабатывают указанным выше способом. Среду для анализа колоний, содержащую 105 MNC в мл, высевают в 24-луночные культуральные планшеты (в трех экземплярах) (Greiner), по 0,33 мл на лунку. Культуры инкубируют при 37 С, в атмосфере, содержащей 5% СO2 и 95% воздуха, при 55% относительной влажности без пептидов или с пептидами, полученными из нативного казеина, или пептидами, полученными из синтетического казеина в указанных концентрациях. Планшеты анализируют спустя 14 дней, подсчитывая колонии, содержащие более 50 клеток. Мегакариоциты идентифицируют с помощью косвенной иммунофлуоресценции, используя высокоспецифичные кроличьи антитела, распознающие гликопротеины тромбоцитов человека, иFITC-конъюгированный козий антикроличий IgG. Добавленные факторы роста включают 15 нг/мл(Difco Lab), кондиционированную среду (СМ) для индуцирования развития гранулоцит-моноцитных колоний (CFU-GM). Для индуцирования образования эритроидных колоний добавляют эритропоэтин(ЕРО) в количестве 2 ед/мл. В другом варианте клетки костного мозга человека, полученные от добровольцев-доноров или пациентов, которые претерпели аутологичную трансплантацию костного мозга, предварительно культивируют в среде, содержащей 10-1000 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина, культуру ведут на полутвердом агаре и подсчитывают гранулоцитарно-макрофагальные кроветворные колонии (GMCFU) на 7 или 14 день после обработки. Мегакариоцитопоэз оценивают для нормальных клеток костного мозга, полученных от здоровых добровольцев-доноров, либо подсчитывая число мегакариоцитов в образцах жидких культур (RPMI-1640 плюс 10% АВ сыворотка человека, глутамин и антибиотики) без добавления или с добавлением 100 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина, или с помощью метилцеллюлозного анализа для оценки образования колоний. 2 х 105 клеток костного мозга высевают в присутствии стандартной комбинации факторов роста без добавления или с добавлением пептидов, полученных из нативного казеина. В метилцеллюлозном анализе мегакариоциты подсчитывают с помощью инвертированного микроскопа на 12-14 день после посева. Клинические исследования с использованием пептидов, полученных из нативного казеина.- 22007217 В одной из серий исследований единичную дозу, содержащую 50 мг пептидов, полученных из нативного казеина, вводят внутримышечно пациенту 3 порциями в течение 2 ч. Клинические параметры контролируют с указанными интервалами. В других исследованиях пациенты с различными стадиями лечения и/или ремиссии по поводу раковых заболеваний и метастазов получают пептиды, полученные из нативного казеина, один или два раза, при этом осуществляется контроль за изменениями количества клеток в периферической крови.In vitro ингибирование ВИЧ клеток лимфоцитами человека. Пептиды. Пептиды (либо пептиды, полученные из нативного казеина, либо синтетические пептиды(состоящие из 8-26 аминокислот, см. табл. 3, полученные из казеина), поставляемые в виде лиофилизированного порошка, снова суспендируют в полной среде RPMI и добавляют в клеточные культуры в конечных концентрациях от 50 до 1000 мкг/мл. Клетки. Известно, что несколько типов свежевыделенных клеток человека (первичные клетки) и клеточных линий восприимчивы in vitro к ВИЧ-1 инфекции, хотя в основном любая клетка, даже с низким уровнем содержания на поверхности CD4 молекул, может рассматриваться как потенциальная мишень для ВИЧ-1 инфекции. Были выбраны две обычно используемые клеточные линии человека, которые проявляют высокую чувствительность к ВИЧ-1 инфекции, СЕМ и Sup-Tl. СЕМ представляет Т 4-лимфобластоидную клеточную линию человека, полученную вначале G.E.Foley et al. [(1965), Cancer 18:522] из периферической крови лейкоцитарной пленки 4-летней кавказской девочки с острым лимфобластным лейкозом. Данные клетки постоянно поддерживались в суспензии в среде и были использованы для анализов инфекционной способности, противовирусных агентов и нейтрализующих антител.Sup-Tl представляет Т-лимфобластоидную клеточную линию человека, полученную из плевральной жидкости 8-летнего мальчика с неходжкинской Т-клеточной лимфомой [Smith, S.D. et al. (1984) CancerResearch 44:5657]. Данные клетки экспрессируют высокие уровни поверхностных CD4, и их удобно использовать при изучении слияния клеток, цитопатического эффекта и инфекционной способности ВИЧ 1. Культуру Sup-Tl клеток ведут в суспензии в обогащенной среде. Среда. Клетки выращивают в полной среде RPMI-1640, обогащенной 10% фетальной телячьей сывороткой, 2 мМ глутамина и 2 мМ пенициллин-стрептомицина (GIBCO). Вирус. В качестве ВИЧ вирусного штамма используют ВИЧ-1IIIВ, исходно обозначавшийся какHTLV-IIIB. Концентрированные культуральные жидкости периферической крови, полученной от нескольких пациентов со СПИД или родственными заболеваниями, используют для установления постоянной продуктивной инфекции в Н-9 клетках. Данный подтип В вируса обладает высокой способностью реплицироваться в Т-клеточных линиях человека. Титр вируса составляет 5,38 нг/мл в исходном растворе.FIТС-меченые пептиды. Используют FITC F-1300 (Флуоресцеин изотиоцианат, изомер I, Sigma (F25o-2) St. Louis, MI, USA) с максимумами возбуждение/испускание при около 494/520 нм, соответственно. Аминореакционноспособное производное флуоресцеина является, вероятно, наиболее общим реагентом, обеспечивающим получение флуоресцирующего производного для ковалентно меченых белков. Конъюгированные с FITC пептиды, полученные из нативного казеина, получают ковалентным связыванием FITC с аминогруппами лизина. Анализ захвата антигена ВИЧ-1 Р 24. Используют набор для анализа захвата ВИЧ-1 Р 24 антигена, созданный для количественного определения ВИЧ-1 Р 24 ядерного антигена, что прямо пропорционально степени продуцирования вируса в клетках. Данный набор поступает из программы вакцинации СПИД SAIC-NCI-Frederick Cancer ResearchInstitute, P.O. Box B, Frederick, M.D 21702, USA и включает 96-луночные планшеты, покрытые моноклональным антителом к ВИЧ-1 Р 24, первичную антитело-кроличий анти-ВИЧ Р 24 сыворотку, вторичное козий анти-кроличий-IgG (H+L) конъюгированное с пероксидазой антитело, систему ТМВ пероксидазного субстрата и подвергнутый лизису ВИЧ-1 Р 24 стандарт. Анализ захвата ВИЧ-1 Р 24 антигена осуществляют с помощью считывающего на длине волны 450 нм устройства Organon-Technica ELISA reader,используя сравнение на длине волны 650 нм.ELISA захвата антигена ВИЧ-1 Р 24. ВИЧ инфицирование измеряют с помощью косвенного ферментного иммуноанализа, в котором определяют ВИЧ-1 Р 24 ядерные антигены в среде для культуры тканей. Надосадочную жидкость культуры тканей подвергают взаимодействию с первичным кроличьим анти-ВИЧ-1 Р 24 антигеном и визуализируют, используя конъюгированный с пероксидазой козий анти-кроличий IgG, причем интенсивность возникающей окраски пропорциональна количеству ВИЧ-1 антигена, присутствующего в надосадочной жидкости культуры тканей. Уровень биологической безопасности (BL-3) лаборатории. Все процессы получения и выделения вирусов, инфицирования вирусами, процесс культивирования ВИЧ-1 инфицированных клеток, сбор надосадочной жидкости, содержащей Р 24 антиген, и ELISA захва- 23007217 та Р 24 антигена, осуществляли в условиях BL-3 Hebrew University, Hadassah Medical School и проводились в соответствии с практикой биобезопасности, указанной в NIH и CDC (USA). Проточная цитометрия. Сортировщик клеток FACSort (BectonDickinson, San Jose, CA. USA) использовали для (i) определения процента CD4 позитивных СЕМ и sup-Tl клеток перед их инфицированием ВИЧ-1 для подтверждения существования одинаковых степеней инфицирования в каждом из экспериментов; и (ii) определения Т клеток, которые содержат FITC-конъюгированные пептиды, полученные из нативного казеина, в своей цитоплазме и ядрах. Инкубатор с СО 2. Для получения клеток вирусных культур с ВИЧ-1, клетки и вирусы, предварительно обработанные пептидами, полученными из нативного казеина, и клетки, которые затем инкубируют с ВИЧ-1, все содержались во влажной атмосфере CO2 на протяжении всего эксперимента. ВИЧ инфицирование культивируемых CD4+ клеток человека. Клетки (СЕМ, Sup-Tl) предварительно инкубируют с несколькими возрастающими концентрациями пептидов, полученных из нативного казеина (50-1000 мкг/мл), или синтетических пептидов, полученных из казеина (10-500 мкг/мл), в течение 3, 24 (для синтетических и нативных пептидов) и 48 (только для нативных пептидов) ч, и после этого в каждую лунку добавляют ВИЧ-1IIIB (45 пг/мл конечная концентрация). ВИЧ-1IIIВ предварительно инкубируют с пептидами в течение 3 ч, а затем добавляют к клеткам(5000 клеток/лунка) в планшеты для культуры тканей. В качестве контроля используют IF (инфицированные клетки, культивируемые с ВИЧ-1 и без пептидов), UIF (не инфицированные клетки, культивируемые с ВИЧ-1 и без пептидов) и UIF + Ch (неинфицированные клетки + пептиды, полученные из нативного казеина, причем, клетки культивируют в присутствии пептидов, полученных из нативного казеина, 50-1000 мкг/мл) для проверки действия пептидов, полученных из нативного казеина, и синтетических пептидов, полученных из казеина, на жизнеспособность и рост клеток. Жизнеспособность и степень пролиферации клеток определяют на 7, 10 и 14 день после инфицирования (день сбора надосадочной жидкости с культуры Р 24 антигена). Клетки и надосадочные жидкости культуры тканей (среду) собирают и немедленно подвергают лизису в 1/10 объема 10% Triton X-100. Затем образцы инкубируют при 37 С в течение 1 ч и хранят при -80 С до момента тестирования на р 24 антиген. Конфокальная микроскопия. Для определения проникновения FITC-конъюгированных пептидов в клетки используют конфокальную лазерную сканирующую систему Zeiss LSM 410, соединенную с инвертированным микроскопом TW Zeiss Axiovert 135M, в котором использована техника лазерной сканирующей конфокальной микроскопии. Т клетки инкубируют с FITC-конъюгированными пептидами, полученными из нативного казеина, в инкубаторе с атмосферой, содержащей 5% СO2 и 95% воздуха, при 37 С, после чего клетки трижды промывают забуферированным фосфатом солевым раствором (PBS) для удаления не связанныхFITC-пептидов. Клетки фиксируют 3,8% формалином в течение 10 мин, дважды промывают PBS и снова суспендируют в 50-100 мкл PBS перед наблюдением клеток под микроскопом. Выбранные изображения клеток для различных времен инкубирования (15 мин, 30 мин, 1 ч, 1,5 ч и 3 ч), которые демонстрируют различные количества FITC-пептидов, полученных из нативного казеина в их цитоплазме и ядрах, хранят на 3,5 дюймовых дискетах (230 MB), и для получения изображений используют программное обеспечение Photoshop. Тест на включение [3 Н]-тимидина. Для того чтобы определить влияние пептидов, полученных из нативного казеина, на пролиферацию Т клеток несколько концентраций пептидов, полученных из нативного казеина, (исходная концентрация 1 мкг/мл в RPMI) добавляют к Sup-Tl клеточным культурам в 96 микролуночном плоскодонном планшете (5000 клеток/лунка), как описано для ВИЧ-1 инфицирования в Sup-Tl клетки. Клетки подсчитывают и определяют их жизнеспособность с помощью исключения трипанового синего. Их импульсно метят [3H]тимидином в определенные моменты времени (3, 7, 10 и 14 дней) в течение 18 ч (в течение ночи) и собирают на фильтры из стекловолокна для измерения радиоактивности (включение [3 Н]-тимидина в клеточную ДНК пропорционально степени клеточной пролиферации). Токсичность пептидов, полученных из нативного казеина, для нормальных, миелоаблативных и мышей, и морских свинок с трансплантатами. Внутримышечными или внутривенными инъекциями нормальным животным вводят в одной дозе или в трех дозах, вплоть до 5000 мг пептидов, полученных из нативного казеина на кг веса животного. Используют различные штаммы, включая мышей BALB/c, С 3 Н/HeJ и не тучных диабетических (NOD). Мышей наблюдали либо в течение 10 месяцев перед забоем и исследовали посмертно (анализ токсичности), либо наблюдают в течение 200 дней (степень выживания). Морским свинкам вводят однократно с помощью внутримышечной инъекции 20 мг пептидов каждому животному. Через 15 дней их забивают и исследуют на предмет патологических изменений. Восстановление лейкоцитов и тромбоцитов у мышей с трансплантированным костным мозгом. Мышей BALB/c облучают летальной дозой из источника, расположенного на расстоянии 70 см от кожи, дозой 50 сГй в минуту, всего до 600 сГй. Облученных животных восстанавливают сингеничным- 24007217 костным мозгом как указано выше и внутривенно вводят спустя 24 ч 1 мг/животное пептидов, полученных из нативного казеина, синтетических пептидов, полученных из казеина (13-26 аминокислот, см. табл. 3 выше), или альбумин сыворотки человека (контроли), с последующим двойным слепым исследованием. Восстановление лейкоцитов определяют в соответствии с количеством клеток в периферической крови, отобранной в указанные временные интервалы от 6 до 12 дней после обработки. Восстановление тромбоцитов определяют по количеству клеток в крови отобранной из ретроорбитального сплетения, в гепаринизированные капилляры, в указанные временные интервалы с 6 по 15 день после обработки. В дополнительной серии экспериментов СВА мышей облучали летальной дозой (900 сГй), восстанавливали и обрабатывали пептидами, полученными из нативного казеина, или альбумином сыворотки человека, как указано выше. Восстановление тромбоцитов определяют, как указано выше. Восстановление мышей с трансплантатами костного мозга. Мышей C57/Black/6 облучают летальными дозами из источника, расположенного на расстоянии 70 см от кожи, дозой 50 сГй в минуту, всего 600 сГй. Облученных мышей восстанавливают сингеничным костным мозгом от мышей, которых либо обрабатывали за день до отбора костного мозга 1 мг/животное пептидов, полученных из нативного казеина, либо вовсе не обрабатывали, с последующим двойным слепым протоколом. В одном эксперименте за выживанием мышей следили 18 дней. В другом эксперименте мышей забивали через 10 дней и оценивали колонизацию селезенки. Экспериментальные результаты. Пептиды, полученные из нативного казеина. Исходя из наблюдения, что свернувшееся молоко часто тормозит рост бактерий, из молочного белка выделяют казеиновые фрагменты, обладающие бактерицидными свойствами (United States Patent No. 3764670 to Katzirkatchalsky, et al.). Сырые пептиды, полученные в результате протеолиза нативного казеина, получают в результате кислотного осаждения растворимой фракции протеолитического гидролизата казеина, диализа и лиофилизации. При тестировании на биологическую активность после длительного хранения было отмечено,что такой сырой препарат, после лиофилизации и хранения при 4 С сохраняет активность (как in vitro,так и in vivo), по крайней мере, в течение 12 месяцев. Для идентификации активных пептидов, содержащихся в пептидов, полученных из нативного казеина, лиофилизованный сырой препарат фракционируют, используя высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ), как было указано выше. Все проанализированные лиофилизированные образцы продемонстрировали одинаковые профили времен удерживания, и содержание их соответствовало указанному выше. Так, основным компонентом препарата сырых пептидов, пептидов, полученных из нативного казеина, является N-концевой фрагмент казеина S1. Пептиды, полученные из нативного казеина, не токсичны для грызунов и людей. Интенсивные исследования кратковременных и длительных эффектов высоких доз пептидов, полученных из нативного казеина, на мышей, морских свинок и людей-добровольцев подтвердили отсутствие токсичности, тератогенности или вредных побочных эффектов препарата. В одной серии тестов разовую дозу, представляющую 1750- и 12500-кратное превышение установленной эффективной дозы пептидов,полученных из нативного казеина, вводят внутримышечно облученным летальной дозой радиации мышам с сингеничными трансплантатами костного мозга. Стандартные посмертные исследования патологических изменений у данных мышей не выявили эффектов токсичности на внутренних органах или других аномалий. Аналогичные тесты на токсичность для морских свинок не выявили аномалий через две недели после введения разовой дозы 20 мг пептидов, полученных из нативного казеина, введенной внутримышечно. В другой серии экспериментов высокие дозы пептидов, полученных из нативного казеина,введенные здоровым мышам, не оказали влияния на ряд гематологических параметров, которые определяли спустя две недели, включая белые кровяные клетки (WBC), красные кровяные клетки (RBC), гемоглобин (HGB), электролиты, глюкозу и другие. В третьей серии тестовых экспериментов повторяющиеся высокие дозы в 100 мг/кг веса, которые вводили мышам и крысам, в течение двух недель, не выявили аллергических, замедленных кожных или анафилактических реакций и никаких патологических эффектов при посмертных исследованиях. При тестировании пептидов, полученных из нативного казеина, в отношении их влияния на длительность выживания облученных, с восстановленным костным мозгом,мышей BALB/c и С 3 Н/HeJ, длительность выживания обработанных мышей (18 из 27 BALB/c и С 3 Н/HeJ; 66%) очевидно превышала длительность выживания обработанных альбумином контрольных животных(4 из 26 BALB/c и С 3 Н/HeJ; 15%). Стандартные тесты на тератогенность [для подробностей см., например, Drug Safety in Pregnancy, Folb and Dakes, p. 336, Elsevier; Amsterdam, NewYork, Oxford (1990)] на мышах, обработанных пептидами, полученными из нативного казеина, не выявили влияния пептидов ни на какие параметры развития. Аналогично отсутствию токсичности или побочных эффектов в тестах на грызунах, пептиды, полученные из нативного казеина, были также безопасны и при введении людям. Сравнение образцов крови и мочи у семи здоровых добровольцев до инъекции и через 7 дней после внутримышечной инъекции пептидов, полученных из нативного казеина, не выявило никаких изменений ни в каких клинических параметрах. Не наблюдалось также никаких негативных эффектов.- 25007217 Таким образом, высокие дозы и длительная обработка грызунов пептидами, полученными из нативного казеина, не выявили видимых токсичных, патологичных, гиперчувствительных, тератогенных,серологических или каких-либо других негативных эффектов. Более того, введение пептидов, полученных из нативного казеина, облученным мышам с риском кратковременных и длительных осложнений,подтвердили заметное пролонгирование выживания в течение 200-300 дней. Все это и отсутствие какихлибо нежелательных эффектов в тестах на здоровых добровольцах, которым вводили инъекции пептидов, полученных из нативного казеина, четко продемонстрировало безопасность данных пептидов при парэнтеральном введении. Восстановление костного мозга трансплантатами у мышей-реципиентов. Когда мышей C57/Black/6 облучили летальными дозами радиации и восстанавливали сингеничным костным мозгом от мышей, которых либо обрабатывали, либо не обрабатывали дозой 1 мг/животное пептидами, полученными из нативного казеина, за день до аспирации костного мозга, выживание облученных мышей, которым ввели костный мозг от обработанных мышей, значительно превосходило выживание облученных мышей, которым ввели костный мозг от необработанных мышей (выживание облученных мышей, которым ввели костный мозг от обработанных мышей составило 15 из 18 через 10 дней после облучения; тогда как выживание облученных мышей, которым ввели костный мозг от необработанных мышей, составило 4 из 17 через 10 дней после облучения). Селезенки облученных мышей, которым ввели костный мозг от обработанных мышей, содержали в два или три раза больше колоний на селезенку, нежели содержали селезенки облученных мышей, которым ввели костный мозг от необработанных мышей (1-5 колоний по сравнению с 0-3 колониями). Пептиды, полученные из нативного казеина, стимулируют пролиферацию тромбоцитов. Природные киллерные (NK) и цитотоксичные Т клетки являются критическими для способности иммунных систем защищать от вторжения как инфекционных патогенов, так и раковых клеток, как за счет активной цитотоксичности, так и за счет секреции иммунорегуляторых лимфокинов. Иммунный компромисс, такой как при СПИД или после химиотерапии, приводит к ненормальной, ослабленной активности Т или NK клеток. Если клетки нормального мышиного костного мозга от мышей BALB/c и С 57 В 1/6 культивируют в присутствии 100 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина, постоянно наблюдается более чем двукратное усиление лизиса клеток-мишеней (фиг. 1). Аналогичные эксперименты с стволовыми кровяными клетками человека от доноров, обработанных фактором стимулирования колоний гранулоцитов, продемонстрировали еще более значительную, зависящую от концентрации стимуляцию лизиса клеток-мишеней, даже под действием столь малого количества, как 10 мкг/мл пептидов,полученных из нативного казеина (фиг. 2). В другой серии экспериментов с PBSC, полученными от здоровых людей-доноров, пептиды, полученные из нативного казеина, стимулируют увеличение количества NK и Т клеток, которое развивается после 10 (фиг. 3 а) и 14 (фиг. 3b) дней в культуре, достигая трехкратного и более через 28 дней. Иммуностимулирующий эффект пептидов, полученных из нативного казеина, в отношении PBSC клеток наиболее заметен у доноров с исходно низкими уровнями Т и NK клеток (фиг. 3a-b). Таким образом, пептиды,полученные из нативного казеина, стимулируют пролиферацию как Т-лимфоцитов, так и натуральных киллерных клеток из предшественников нормальных клеток мышиной и крови человека. Пептиды, полученные из синтетического казеина, стимулируют пролиферацию человеческих лимфоцитов in vitro. Если пептиды, полученные из синтетического казеина, представляющие первые 1-16 остатков S1 казеина, инкубируют с PBSC клетками человека, полученными от здоровых и больных злокачественными опухолями (см. ниже), наблюдается значительное усиление активности NK клеток. Наиболее интенсивный лизис наблюдается (от 3- до 5-кратного превышения значений для контроля) в PBSC культурах клеток от пациентов с неходжкинской лимфомой и раком молочной железы после двух дней инкубирования для столь малой концентрации, как 10 мкг/мл пептидов, содержащих первые 10 или более остатков казеина S1 (фиг. 4). В идентичных условиях ни один из тестированных пептидов не продемонстрировал значительного влияния на активность NK в PBSC культурах от здоровых людей-доноров. Таким образом, даже низкие концентрации пептидов, содержащих первые 10 остатков N-концевой последовательности казеина S1, способны селективно стимулировать in vitro пролиферацию лимфоцитов в клетках,полученных от больных злокачественными опухолями. Стимуляция кроветворения в предшественниках клеток человеческой крови. Предшественники кровяных клеток дифференцируются в различные клетки крови: макрофаги, моноциты, гранулоциты, лимфоциты, эритроциты и мегакариоциты. Клетки предшественников находятся в изобилии в костном мозге, но также обнаружены в периферической крови после обработки гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (PBSC клетки) в свежей пуповинной крови. Если возрастающие концентрации (50-600 пг/мл) пептидов, полученных из нативного казеина, добавляют к культурам костного мозга, PBSC и пуповинной крови человека, отмечается усиление клеточной пролиферации по данным, полученным с включением [3 Н]-тимидина (фиг. 5 а-6 с). Пролиферация PBSC человека наиболее сильно вызывается концентрацией 300 мкг/мл (фиг. 5 а) после 15 дней культивирования. Еще более за- 26007217 метный эффект отмечается для клеток пуповинной крови (3-4-кратное усиление по данным включения[3 Н]-тимидина) после 14 дней инкубирования (но не после 7 дней) с пептидами, полученными из нативного казеина, (600 мкг/мл, фиг. 5b). Культивируемые клетки костного мозга человека от трех из четырех доноров также сильно реагировали (3-5-кратное увеличение включения) на пептиды, полученные из нативного казеина (300 мкг/мл) после 21 дня инкубирования (фиг. 5 с). Таким образом, пептиды, полученные из нативного казеина, стимулируют пролиферацию предшественников клеток крови из костного мозга человека, также как и из других источников. Интересно, что инкубирование культивируемых К 562 (хронический миелолейкоз) клеточной линии и клеточной линии толстой кишки человека (рак толстой кишки) с высокими концентрациями (вплоть до 500 мкг/мл) пептидов, полученных из нативного казеина, в аналогичных условиях не оказывает влияния на включение [3 Н]-тимидина. Таким образом, пептиды, полученные из нативного казеина, стимулируют пролиферацию предшественников кровяных клеток человека, но не рост раковых клеток. Стимулирование мегакариоцитопоэза пептидами, полученными из казеина. Пептиды, полученные из нативного казеина, стимулируют пролиферацию предшественников мегакариоцитов в культивируемых клетках мышиного костного мозга. Многоядерные мегакариоциты развиваются в костном мозге из примитивных стволовых клеток, созревают до гигантских клеток и служат источником для тысяч тромбоцитов из одного мегакариоцита. Тромбоциты являются критическим моментом для образования сгустков крови, и тромбоцитопения является основной причиной миелоаблативных состояний (после химиотерапии и радиотерапии). Первичные культуры клеток костного мозга можно индуцировать для образования колоний CFUGM (гранулоцитов и мегакариоцитов), которые служат источниками мегакариоцитов, и колоний CFUGEMM (гранулоцитов, эритроидов, макрофагов и мегакариоцитов), содержащих дополнительные типы кровяных клеток. Количество колоний отражает экспансию специфических предшественников, число клеток отражает скорости пролиферации и дифференциальное число клеток отражает то, какие именно типы специфических клеток развиваются [Patenkin, D. et al. (1990), Mol. Cel. Biol. 10, 6046-50]. В культивируемых клетках мышиного костного мозга, инкубируемых с эритропоэтином и EL-3, добавление пептидов, полученных из нативного казеина, в количестве 25 мкг/мл в течение 8 дней увеличивает количество CFU-GEMM в два с половиной раза по сравнению с контролями, стимулируя трехкратное увеличение относительного числа клеток на колонию в CFU-GEMM. В аналогичных сериях экспериментов добавление пептидов, полученных из нативного казеина, к клеткам костного мозга, инкубируемым с эритропоэтином и кондиционированной средой (см. раздел материалы и методы) стимулирует зависящее от концентрации увеличение процента ранних и поздних мегакариоцитов (15% мегакариоцитов без пептидов, до 50% при 500 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина). Так, восьмидневная обработка пептидами, полученными из нативного казеина, стимулирует значительное увеличение образования и развития мегакариоцитов в первичных культурах мышиного костного мозга. Синтетические пептиды, полученные из казеина, стимулируют пролиферацию предшественников мегакариоцитов в культивируемых клетках мышиного костного мозга. Аналогично указанному выше и в аналогичных условиях экспериментов показано, что пептиды,полученные из синтетического казеина, представляющие первые 10 и 11 аминокислот казеина S1, оказывают сильное (более десятикратного) стимулирующее действие на CFU-GEMM пролиферацию в клетках мышиного костного мозга после 8 дней инкубирования. Несколько меньшая, но все-таки заметная стимуляция наблюдается при использовании пептидов, полученных из синтетического казеина, представляющих первые 12-26 аминокислот S1. Пептиды, полученные из нативного казеина, стимулируют мегакарицитопоэз в культивируемых клетках костного мозга человека. Если 100 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина, добавляют в аналогичных условиях к культурам клеток костного мозга человека от здоровых доноров, образование CFU-GM колоний усиливается с добавлением или без добавления стимулирующих факторов (GM-CSF, CM). Пептиды, полученные из нативного казеина, стимулируют также образование колоний эритроидных клеток в присутствии эритропоэтина. Обработка клеток костного мозга человека тромбопоэтином (ТРО) стимулирует образование колоний мегакариоцитов (МК). Добавление 300 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина, к клеткам, обработанным ТРО, стимулирует усиление более двукратного (16 колоний на 2105 клеток без пептидов, и 35 колоний на 2105 с пептидами, полученными из нативного казеина) пролиферации МК колоний. В присутствии дополнительных кроветворных факторов, таких как эритропоэтин, IL-3, hSCF и АВ сыворотки человека, 14 дней инкубирования с пептидами, полученными из нативного казеина, стимулируют почти трехкратное увеличение CFLJ-GEMM колоний из клеток костного мозга человека (158 колоний с добавлением 500 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина, 68 колоний с одними только факторами), но оказывает меньшее действие (полуторакратное увеличение) на образование CFU-GEMM в культивируемых клетках пуповинной крови.- 27007217 Относительные количества клеток в культивируемых колониях костного мозга и пуповинной крови отражают пролиферацию мегакариоцитных клеток, как реакцию на добавление 25 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина (см. табл. на фиг. 6). Так, инкубирование культивируемых первичных клеток костного мозга и пуповинной крови человека с пептидами, полученными из нативного казеина,стимулирует развитие и пролиферацию как мегакариоцитных, так и эритроидных колоний клеток. Пептиды, полученные из нативного казеина, стимулируют рематопоэз in vivo после облучения и трансплантации костного мозга. Миелоаблативная терапия может привести к угрожающему жизни уменьшению количества тромбоцитов и лейкоцитов, что может произойти, несмотря на введение кровяных клеток и факторов роста. Нижеследующее демонстрирует действие пептидов, полученных из нативного казеина, после облучения и трансплантации костного мозга. Пептиды, полученные из нативного казеина, усиливают восстановление лейкоцитов и тромбоцитов после трансплантации сингеничного костного мозга у мышей. После облучения летальной дозой (600 сГй), с минимально восстановленным костным мозгом, мышам BALB/c (n=60) внутривенной инъекцией вводят по 1 мг/мышь пептидов, полученных из нативного казеина, вместе с клетками костного мозга. Отмечается значительное увеличение количества периферических белых кровяных клеток в течение 7-14 дней по сравнению с контрольными мышами, которым вводили альбумин человеческой сыворотки (фиг. 7). Количество тромбоцитов в периферической крови как у обработанных, так и у контрольных облученных мышей, у мышей с трансплантированным костным мозгом было одинаково понижено вплоть до 8 дней после обработки. Однако к девятому дню отчетливое преимущество отмечалось для мышей, которым были введены пептиды, полученные из нативного казеина, а к 13 дню выявилось двукратное увеличение тромбоцитов по сравнению с контрольными мышами, которым вводили альбумин человеческой сыворотки (фиг.8). Таким образом, пептиды, полученные из нативного казеина, усиливают восстановление тромбоцитов и лейкоцитов после трансплантации с ограниченным числом клеток костного мозга. Можно ожидать, что этот эффект будет еще сильнее выражен в плане восстановления при оптимальном, а не ограниченном числе клеток костного мозга. Синтетические пептиды, полученные из казеина, усиливают восстановление лейкоцитов после трансплантации мышам сингеничного костного мозга. После облучения летальной дозой (600 сГй) с минимально восстановленным костным мозгом мышам BALB/c (n=5 для синтетического пептида, n=10 для контрольной группы) с помощью внутрибрюшинной инъекции вводят 1 мг/мышь синтетических пептидов (13-26 аминокислот в длину, см. табл. 3),полученных из казеина, вместе с клетками костного мозга. Отмечается значительное увеличение количества периферических лейкоцитов в течение от 10 до 14 дней для пептидов с 13 аминокислотами (10 день: 17,2106 кл/дл; 12 день: 65,4106 кл/дл), с 17 аминокислотами (10 день: 27,4106 кл/дл; 12 день: 52,0106 кл/дл) (см. табл. 3) по сравнению с контрольными мышами, которым вводили альбумин человеческой сыворотки (10 день: 16,7106 кл/дл; 12 день: 46,4106 кл/дл). Таким образом, синтетические пептиды,полученные из казеина, усиливают восстановление лейкоцитов после трансплантации с ограниченным количеством клеток костного мозга. Пептиды, полученные из нативного казеина, ингибируют in vitro инфицирование лимфоцитных Т клеточных линий ВИЧ-1 вирусом. Для исследования механизмов иммунной стимуляции и противовирусного действия пептидов, полученных из нативного казеина, восприимчивые Sup-Tl и СЕМ культивируемые Т-клетки человека обрабатывают пептидами, полученными из нативного казеина, перед in vitro инфицированием ВИЧ-1 вирусом. С помощью флуоресцентной микроскопии было выявлено, что FITC-конъюгированные пептиды,полученные из нативного казеина, (100 мкг/мл) проникают в Sup-Tl клетки при инкубировании вместе с ними как указано выше (фиг. 9a-f). Небольшие количества меток наблюдаются в цитоплазме клеток через 15 мин (фиг. 9a-b). Через 30 мин (фиг. 9c-d) еще больше меток наблюдается в цитоплазме при ограниченном захвате ядер. Начиная с 1 часа после начала инкубирования и далее (фиг. 9e-f), FITC-меченые пептиды, полученные из нативного казеина, наблюдаются в цитоплазме, но большинство их сконцентрировано в ядрах клеток. Анализ Sup-Tl клеток с помощью цитометрии в потоке подтвердил усиление захвата меченых пептидов, полученных из нативного казеина, начиная с 5 мин после начала инкубирования. Пептиды, полученные из нативного казеина, усиливаютпролиферацию лимфоцитов. Присутствие пептидов, полученных из нативного казеина, в культуральной среде, приводит к увеличению количества Sup-Tl клеток в течение 14 дней. Наибольшее увеличение количества клеток к 7 дню наблюдается для 50 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина (42%), для 1000 мкг на десятый день (30%) и для 600 мкг (32%) на 14 день инкубирования. Измерение включения [3H]-тимидина культивируемыми клетками, что дает показатель пролиферации, отражает увеличение количества клеток,причем наиболее сильный эффект наблюдается для 100 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина, на 10 день (фиг. 10). Снижение пролиферации на 14 день, вероятно, отражает избыточный рост клеток и израсходование питательных веществ.- 28007217 Синтетические пептиды, полученные из казеина, усиливают пролиферацию лимфоцитов человека. Присутствие синтетических пептидов, полученных из казеина (все пептиды перечислены в табл. 3),в культуральной среде приводит к увеличению количества Sup-Tl клеток в течение 10 дней. Увеличение аналогично для всех синтетических пептидов. Наибольшее увеличение количества клеток в инфицированных клетках наблюдается для 250 мкг/мл пептидов (8 аминокислот - 80%). При 500 мкг/мл пептидов(8 аминокислот - 33%). Пептиды, полученные из нативного казеина, ингибируют инфицирование ВИЧ-1 клеток лимфоцитов человека. Восприимчивые СЕМ лимфоцитные клетки, предварительно обработанные пептидами, полученными из нативного казеина (50-1000 мкг/мл) за 3, 24 или 48 ч до инкубирования с ВИЧ-1, демонстрируют усиленную клеточную пролиферацию и пониженные уровни вирусной инфекции по сравнению с необработанными контрольными. Количества клеток и анализ ВИЧ-1 Р 24 антигена на 15 день после инфицирования выявили 100% ингибирование вирусной инфекции после 3 ч инкубирования с 600-1000 мкг/мл пептидов, полученных из нативного казеина, и 98% и 99% ингибирования после 24 ч инкубирования с 50 и 600 мкг/мл пептидов соответственно. Более длительное время ингибирования не оказалось более эффективным (фиг. 11). Хотя увеличение концентрации пептидов, полученных из нативного казеина, усиливает клеточную пролиферацию через 3 и 24 ч после инфицирования, вирусная инфекция наиболее заметно ингибируется в таких наиболее быстро растущих культурах. Еще более заметное усиление клеточной пролиферации и ингибирование ВИЧ-1 инфекции наблюдается в Sup-Tl клетках, предварительно обработанных пептидами, полученными из нативного казеина, перед инфицированием ВИЧ-1 (среднее ингибирование вирусной инфекции составляет 96,7%, 88,7% и 95,7% после 3 ч, 24 ч и 48 ч предварительной обработки соответственно). Таким образом, пептиды, полученные из нативного казеина, проникают в культивируемые клетки лимфоцитов человека и в их ядра, усиливают рост клеток и значительно снижают восприимчивость CD4+ клеток к ВИЧ-1 инфекции. Ожидается, что пептиды, полученные из нативного казеина, как таковые, могут быть полезны как для профилактики ВИЧ инфекции, так и для лечения после инфицирования ВИЧ инфицированных и СПИД пациентов. Пептиды, полученные из нативного казеина, предотвращают развитие глюкозурии у диабетических без ожирения (NOD) мышей. У диабетических без ожирения (NOD) мышей спонтанно развивается ювенильный (типа I, IDDM) диабет, аутоиммунное состояние, вызывающее воспалениеклеток поджелудочной железы, и заканчивающееся болезнью и смертью. Самки NOD мышей крайне восприимчивы, демонстрируя доказательство инвазии макрофагов кусочка ткани поджелудочной железы уже у 5 недельных мышей. Инъекции по 100 мкг пептидов, полученных из нативного казеина, один или два раза в неделю в течение 5 недель (всего 6 или 11 инъекций) оказались полностью эффективны для профилактики глюкозурии, связанной с началом и течением заболевания. К 200 дню 100% необработанных контрольных мышей (n=5) стали диабетическими, и затем погибли, тогда как обработанные мыши (n=5) остались на 100% эугликемическими, и все еще были живы на 230 день (фиг. 12). Таким образом, пептиды, полученные из нативного казеина, эффективно защитили генетически восприимчивых мышей от возникновения данного аутоиммунного воспалительного состояния. Клинические исследования пептидов, полученных из нативного казеина. Пациентам внутримышечными инъекциями вводили по 50 мкг пептидов, полученных из нативного казеина, каждому, одной или тремя порциями, как указано. Пептиды, полученные из нативного казеина, стимулируют гематопоэз у больных злокачественными опухолями. Гематологические профили шести больных злокачественными опухолями, которые получили или которые были в процессе получения химиотерапии, исследовали до и после введения пептидов, полученных из нативного казеина, как указано. Особое внимание обращали на изменения значений для тромбоцитов (PLT), лейкоцитов (WBC), эритроцитов (RBC) и гемоглобина (HGB), характеризующих тромбоцитопоэз, лейкоцитопоэз и эритроцитопоэз соответственно.G.T. (пациентка женщина): у пациентки был рак яичников, она подверглась гистерэктомии с последующей химиотерапией. Она получила две внутримышечные инъекции пептидов, полученных из нативного казеина, через два и через два с половиной месяца после операции. Между первым и вторым введением пептидов, полученных из нативного казеина, не проводили никакой химиотерапии. Тесты крови,взятые на 6 день после первой инъекции, на 1 и 13 день после второй инъекции продемонстрировали значительное увеличение содержания тромбоцитов и WBC компонентов, также как и повышение RBCJE.C. (пациентка женщина): пациентка подверглась радикальной мастэктомии по поводу лобулярной карциномы в 1983 г, и шесть лет спустя страдала от метастазов в желудке. За три дня до начала химиотерапии она получила одну внутримышечную инъекцию пептидов, полученных из нативного казеина, и вторую через 10 дней после химиотерапии. Хотя показатели крови, взятой на 10 и 16 день после химиотерапии, не показали ослабления подавленного гематологического профиля, что обычно наблюда- 29007217 ется после химиотерапии, наиболее значительные эффекты пептидов, полученных из нативного казеина,были отмечены через 3 дня после первой инъекции до начала химиотерапии (фиг. 13).E.S. (пациентка женщина): пациентка страдала широко распространенными метастазами карциномы молочной железы, впервые обнаруженной в 1987 г. Два года спустя она получила первую внутримышечную инъекцию пептидов, полученных из нативного казеина, и вторую через 23 дня. На протяжении этого промежутка времени она не получала дополнительного лечения. Тесты крови показали сильное увеличение PLT через семь дней после первой инъекции, и значительное увеличение RBC и WBC через семь дней после второй инъекции (фиг.13).J.R. (пациентка женщина): у пациентки диагноз рак молочной железы с костными метастазами. Она получила одну внутримышечную инъекцию пептидов, полученных из нативного казеина, за 8 дней до начала химиотерапии и другую - через 14 дней после химиотерапии. Наиболее заметный эффект четко виден по быстрому возвращению WBC уровней после вызванного химиотерапией снижения (фиг.13).D.M. (пациентка женщина): у пациентки рак печени, сопровождающийся широко распространенными метастазами. Она получила три внутримышечные инъекции пептидов, полученных из нативного казеина, на 10, 8 и 6 дни до начала химиотерапии. Вторую серию инъекций провели на 10, 12 и 14 дни после химиотерапии. Хотя значительный эффект воздействия на гематологический профиль отмечен после первой серии инъекций и до начала химиотерапии, наиболее резкое улучшение проявляется в быстром возвращении пониженных после химиотерапии значений к нормальным количествам клеток после второй серии инъекций пептидов, полученных из нативного казеина (фиг. 13). Таким образом, введение пептидов, полученных из нативного казеина, больным злокачественными опухолями приводит к улучшению гематологических профилей, особенно к усилению эритропоэза, лейкоцитопоэза и тромбоцитопоэза, и способно уменьшить и сократить длительность вызванного химиотерапией подавления компонентов крови. Пептиды, полученные из нативного казеина, стимулируют тромбоцитопоэз у реципиентов трансплантатов с устойчивой тромбоцитопенией. Пролонгированная, невосприимчивая к внутривенным вливаниям тромбоцитопения с эпизодами тяжелого кровотечения, может быть угрожающим жизни осложнением при трансфузии костного мозга,особенно если традиционная терапия оказывается не эффективной. Двум пациентам с тяжелой резистентной тромбоцитопенией вводят пептиды, полученные из нативного казеина. М-1 (пациентка женщина): 32-летняя пациентка, страдающая острым миелолейкозом в полной ремиссии, после трансфузии аутологичных стволовых клеток. У нее были два угрожающие жизни эпизода кровотечения, включающие легочное кровотечение и обширную обструктивную гематому мягкого неба. Более чем на 114 день после трансфузии количество тромбоцитов было рефрактивно К rhIL-3, rhIL-6,внутривенному гамма-глобулину и рекомбинантному эритропоэтину. После одной внутримышечной дозы 50 мкг пептидов, полученных из нативного казеина, разделенной на три порции, ее состояние немедленно улучшилось. Наряду с быстрым возвращением к нормальному количеству тромбоцитов(фиг.14) прошли кровотечения и петехии нижних конечностей, она смогла начать ходить и вернуться домой заграницу без осложнений или побочных эффектов. М-2 (пациент мужчина): 30-летний пациент, страдающий острым миелолейкозом, на стадии второй полной ремиссии после внутривенного вливания аутологичных стволовых клеток, демонстрирующий полностью резистентное количество тромбоцитов и обширные эпизоды желудочно-кишечного кровотечения. Ему требовались ежедневные внутривенные вливания порций клеток, у него была развита гипоальбуминемия, и ему не помогло интенсивное лечение rhIL-3, rhIL-6 и гаммаглобулином. После одной внутримышечной дозы 50 мкг пептидов, полученных из нативного казеина, введенной тремя порциями,через 86 дней после вливания наблюдается быстрое восстановление тромбоцитов (фиг. 15) и постепенное прекращение кровотечений. Не потребовалось никакого дальнейшего лечения, и пациент в настоящее время полностью асимптоматичен, причем количество тромбоцитов соответствует норме. Таким образом, один курс внутримышечного введения пептидов, полученных из нативного казеина,в количестве 1 мг/кг веса тела, разделенного на три порции, оказывается эффективным для быстрого восстановления количества тромбоцитов и ослабления сопутствующих клинических симптомов у пациентов с пролонгированной, невосприимчивой к переливаниям тромбоцитопенией с угрожающими жизни эпизодами кровотечениями. Пептиды, полученные из нативного казеина, снижают содержание триглицеридов и LDLхолестерина при наследственной гиперлипидемии.M.S. (женщина пациентка): пациентка женщина 38 лет с наследственной историей гиперлипидемии. До обработки пептидами, полученными из нативного казеина, химический анализ крови выявил повышенный уровень холестерина (321 мк/дл), триглицеридов (213 мк/дл; при норме 45-185 мк/дл) и повышенный уровень LDL-холестерина (236,4 мк/дл; при норме 75-174 мк/дл). Через месяц после введения 50 мкг пептидов, полученных из нативного казеина, в виде трех внутримышечных инъекций, гиперлипидемия стабилизировалась: полное содержание холестерина снизилось до 270 мк/дл, триглицеридов до 165 мк/дл и уровень LDL-холестерина составил 201 мк/дл, что было все еще выше нормальных значений, но