Связывающиеся с альбумином молекулы и их применение

COLUMBUS, US, vol. 74, no. 11, 1 June 2002 (2002-06-01), Настоящее изобретение относится к транспортируемым альбуминсвязывающим веществам, которые могут быть использованы для улучшения фармакокинетических свойств диагностических или терапевтических средств, а в частности для увеличения времени их циркуляции в крови и/или способности таких средств проникать в ткань. Молекулами согласно изобретению являются соединения, представленные формулой (1) где значения радикалов определены в формуле изобретения. Также настоящее изобретение относится к конъюгату,представленному нижеследующей формулой: где X, A, D, R1 и R2-R10 определены в п.1. Настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию,включающую указанное соединение или конъюгат, предназначенную для лечения заболеваний или состояний, а также для терапевтической визуализации. Область, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к транспортируемым альбуминсвязывающим веществам, которые могут быть использованы для улучшения фармакокинетических свойств диагностических средств или терапевтических свойств диагностических или терапевтических средств, в частности для увеличения времени их циркуляции в крови и/или способности таких средств к проникновению в ткань. Предшествующий уровень техники Фармакокинетические свойства лекарственных средств являются основными показателями их фармацевтического действия в организме человека. В большинстве случаев необходимо, чтобы лекарственные средства сохранялись в организме достаточно длительный период времени и чтобы их концентрации в нужных участках организма были достаточно высокими для осуществления желательной фармакологической функции (например, связывания лекарственного средства с его рецептором). Во многих случаях нужные фармакокинетические свойства низкомолекулярных лекарственных средств могут быть достигнуты благодаря их определенной способности связываться с альбумином, который является наиболее распространенным белком, присутствующим в крови при концентрациях приблизительно 600 мкМ. Фармацевтические компании могут эмпирически проводить скрининг на соответствующие альбуминсвязывающие свойства представляющего интерес лекарственного средства. Однако такой подход имеет ограниченное применение, поскольку в большинстве случаев альбуминсвязывающие свойства в значительной степени зависят от части молекулы, ответственной за нужное фармакологическое действие. Хотя многие альбуминсвязывающие молекулы являются известными, однако подавляющее большинство известных альбуминсвязывающих веществ не являются "транспортируемыми" в том смысле,что они не могут легко присоединяться к другим биологически активным молекулам без потери своих альбуминсвязывающих свойств или других релевантных фармацевтических свойств. Для иллюстрации этого факта в качестве примера могут служить бромфеноловый синий и ибупрофен, т.е. две очень хорошо известные молекулы, применяемые в биохимии и фармацевтике. Бромфеноловый синий представляет собой авидное альбуминсвязывающее вещество, которое образует комплексы с альбумином, являющиеся стабильными, что может быть подтверждено с помощью анализа, проводимого с применением электрофореза в нативном полиакриламидном геле. Однако относительно сложная химическая структура бромфенолового синего не имеет подходящих функциональных групп, посредством которых эта молекула могла бы легко связываться с другими молекулами, представляющими фармацевтический интерес (например, с низкомолекулярными органическими лекарственными средствами или белковыми лекарственными средствами). Ибупрофен, один из наиболее часто используемых противовоспалительных средств,связывается с альбумином с константой диссоциации в микромолярных интервалах. Однако совсем недавно попытка модифицировать карбоксильную группу молекулы карбоновой кислоты (например, путем образования амидной связи), предпринятая в целях связывания ибупрофена с другими молекулами,представляющими биофармацевтический интерес, показала, что в данном случае ибупрофен теряет свою аффинность связывания с альбумином. Тем не менее, длительное время циркуляции альбумина в крови использовали для непосредственного конъюгирования лекарственных средств с альбумином. Так, например, различные терапевтические полипептиды (ЕРО, интерфероны, интерлейкины, терапевтические пептиды) были конъюгированы с альбумином на генетическом уровне, и некоторые из соответствующих гибридных белков проходят испытания в клиниках [1]. Одним из примеров является непосредственное конъюгирование химиотерапевтических средств с уникальным цистеиновым остатком (Cys34) на поверхности человеческого сывороточного альбумина. Для сайт-специфического связывания этого лекарственного средства с остатком Cys34 человеческого альбумина Kratz и сотрудниками была использована либо первичная аминогруппа, либо карбонильная группа антиракового химиотерапевтического лекарственного средства доксорубицина. Химические группы, используемые в качестве линкеров между доксорубицином и альбумином, были выбраны по их способности гидролизоваться и, тем самым, высвобождать фармакологически активную молекулу доксорубицина [2]. В качестве репрезентативного примера можно указать, что максимально допустимая доза DOXO-EMCH в 2-10 раз выше максимально допустимой дозы немодифицированного доксорубицина,а поэтому DOXO-EMCH может быть инъецирован мышам с опухолью в количестве, которое в 2-10 раз превышает количество молярного эквивалента доксорубицина, при этом его токсичность ниже токсичности неконъюгированного доксорубицина, и такое средство обладает более сильным терапевтическим действием. Аналогичные результаты сообщались для ранее полученного конъюгата "доксорубицинHSA" [3]. В настоящее время такое белковое производное проходит испытание в клиниках [4]. Аналогичным образом, та же самая группа может быть использована для химического связывания метотрексата с альбумином с использованием пептидного линкера, который может быть преимущественно расщеплен матриксными металлопротеиназами на пораженных артритом участках in vivo. Соответствующий конъюгат "белок-лекарственное средство" может рассматриваться как пролекарство, и в настоящее время такое пролекарство находится на стадии фармацевтической разработки. Однако конъюгаты "белок-лекарственное средство" имеют серьезные общие недостатки, заклю-1 019335 чающиеся в том, что такие конъюгаты могут быть имунногенными для человека [5]. Поэтому непосредственное конъюгирование не может рассматриваться как общее решение проблемы поиска способов конъюгирования лекарственных средств с альбумином, и тем самым, улучшения их фармацевтических свойств. Наиболее приемлемое решение такой задачи должно быть достигнуто с использованием транспортируемых альбуминсвязывающих молекул, т.е. молекул, которые, с одной стороны, будут обладать селективной аффинностью к альбумину, а с другой стороны, могут быть присоединены к любому представляющему интерес лекарственному средству. Одной из физиологических ролей альбумина является его действие в качестве переносчика жирных кислот. Это свойство было использовано для конъюгирования лекарственного средства с альбумином. Так, например, хорошо известное и выпускаемое промышленностью производное инсулина с коммерческой точки зрения имеет отличительный признак, заключающийся в ковалентной модификации инсулиновой молекулы посредством образования амида с тетрадекановой кислотой (Levemir). Эта длинноцепочечная жирная кислота сообщает инсулину некоторые благоприятные свойства, включая более длительное время выведения из кровотока, что и предполагалось, если принять во внимание способность альбумина связываться с жирной кислотой. Однако недостаток такого способа заключается в том, что при его применении к другим молекулам возникают определенные трудности. В частности, его невозможно применить к менее растворимым белкам или низкомолекулярным лекарственным средствам, что связано с неприемлемо низкой растворимостью полученного производного в воде. Недавно ученые, работающие в компании Genentech, сообщили об обнаружении и использовании конформационно ограниченных дисульфидом альбуминсвязывающих пептидов в качестве транспортируемой метки в целях изменения фармакокинетических свойств белков, обладающих ценными биофармацевтическими свойствами (например, фрагментов антител), и сообщения им более длительного времени циркуляции в кровотоке [6]. Аналогичным образом недавно специалистами нескольких компанийBiotech (например, Domantis, Affibody) путем генетического слияния были получены мутанты небольших глобулярных белков как "транспортируемых" альбуминсвязывающих веществ в целях сообщения белкам, представляющим фармацевтический интерес, более медленного выведения из кровотока [7-10]. Однако пептиды и белки не являются идеальными носителями, которые могут быть использованы для сообщения альбумину аффинности к лекарственным средствам. Пептиды и белки представляют собой подвижные молекулы, которые могут разрушаться в результате гидролиза или денатурации, что создает определенные трудности при их пероральном введении. Поэтому такие лекарственные средства должны быть, в основном, введены путем инъекции, что может вызывать определенные неудобства по сравнению с пероральным введением. Помимо проблем, связанных с введением лекарственных средств как таковых, существует также необходимость в регуляции и увеличении времени удерживания в кровотоке и распределения в ткани диагностических средств, таких как диагностические визуализирующие агенты и констрастные агенты. Хорошим примером, иллюстрирующим возможность удовлетворения такой необходимости, является флуоресцеин. В США и в Европе флуоресцеин обычно используется в офтальмологии для проведения процедур флуороангиографической визуализации и выпускается в количестве более чем миллион инъекций в год. При этом удивительно то, что флуоресцеин не является апробированным фармацевтическим средством. В большинстве случаев перед внутривенной инъекцией врач приготавливает 3-5 мл раствора флуоресцеина-натрия в воде (10%). Флуоресцеин очень быстро выводится из кровотока, а поэтому он может быть введен в больших дозах в виде инъекции ударной дозы. Однако при таких высоких дозах флуоресцеин вызывает тошноту и рвоту у 20% пациентов в зависимости от группы пациентов. Такие осложнения наиболее часто встречаются у пациентов афроамериканцев, пациентов азиатского происхождения, этнических китайцев или пациентов смешанных этнических групп [11]. Более серьезные побочные реакции встречаются редко,ими являются крапивница, отек гортани, бронхоспазм, синкопе, анафилактический шок, инфаркт миокарда и остановка сердца [12]. Экстравазация флуоресцеинового красителя во время инъекции может серьезно затруднять проведение ангиографии. При рН раствора 8-9,8 инфильтрация флуоресцеина может быть достаточно болезненной. Сообщалось, что после экстравазации флуоресцеина наблюдается отслоение эпителия кожи, локализованный некроз, подкожная гранулема и токсический неврит. Хотя во время проведения ангиографии опасные для жизни побочные эффекты возникают редко, однако существует вероятность того, что они все же могут возникать, а поэтому ангиографическое оборудование должно быть соответствующим образом экипировано и подготовлено для выявления серьезных побочных реакций, возникающих во время данной процедуры. Снижение частоты инъекций может уменьшать риск или тяжесть побочных реакций. Однако это негативно влияет на чувствительность визуализации. Поэтому существует необходимость в получении производного флуоресцеина, которое будет лучше и дольше сохраняться в сосудистом пространстве, а в частности, будет меньше подвергаться метаболизму или экстравазации. Такое производное позволит вводить меньшие дозы и тем самым снижать вероятность возникновения и тяжесть побочных эффектов и осложнений и, кроме того, позволит улучшать ка-2 019335 чество изображения. Аналогичным образом рассматривается применение и к контрастным агентам для магнитнорезонансной томографии (МРТ). Современные внеклеточные контрастные агенты для МРТ имеют ограниченное применение из-за их относительно короткого времени полужизни, а также из-за их свободной экстравазации в опорную (background) мышцу, что снижает отношение "контраст-шум" во время стационарной визуализации. Для рутинного клинического применения в МРТ и магнитно-резонансной ангиографии желательно, чтобы контрастный агент селективно удерживался в сосудистом пространстве и имел пролонгированное время полужизни в кровотоке для обеспечения его достаточной концентрации в плазме в "окне визуализации" в течение 1 ч. Более длительное время полужизни в крови может оказаться необходимым для облегчения визуализации множества областей организма и идентификации коронарных артерий путем сканирования длительными строб-импульсами [13]. Различными группами специалистов были предприняты попытки улучшить фармакокинетические свойства контрастных агентов, таких как Gd-DTPA (Magnevist) путем присоединения указанной молекулы к транспортируемым альбуминсвязывающим веществам. Однако численные величины констант диссоциации таких альбуминсвязывающих веществ ограничиваются величинами порядка 100 мкМ [14]. Таким образом, существует необходимость в улучшении свойств контрастных агентов, таких как Gd-DTPA, например, в увеличении их времени полужизни и улучшении релаксирующих свойств. Таким образом, особый интерес представляет идентификация и получение небольших органических молекул, которые могут быть использованы в качестве "транспортируемых" альбуминсвязывающих молекул для конъюгирования с различными представляющими фармацевтический интерес молекулами(например, лекарственных средств в виде небольших органических молекул, белковых лекарственных средств или диагностических средств, например, для их применения в различных формах клинической визуализации). Однако до сих пор попытки идентифицировать небольшие органические молекулы, которые могут быть использованы в качестве транспортируемых альбуминсвязывающих веществ [15], оказывались безуспешными. Конкретными проблемами, связанными с такой идентификацией, являются сила связывания с альбумином, химическая стабильность альбуминсвязывающих конъюгатов in vivo и степень транспортируемости (в частности, хорошие фармакокинетические свойства конъюгата могут быть идеально достигнуты путем конъюгирования любого лекарственного средства или лекарственных средств любого класса, а не только некоторых репрезентативных ценных лекарственных средств). Для разработки фармацевтических средств необходимо минимизировать размер транспортируемых альбуминсвязывающих веществ так, чтобы не нарушалось правило пяти Липински [16]. Другими желательными свойствами транспортируемого альбуминсвязывающего вещества являются селективность его связывания (т.е. отделение альбумина от других молекул), пригодность для легкого осуществления синтеза и конъюгирования с представляющими интерес (био)фармацевтическими молекулами, хорошая растворимость в воде и отсутствие присущей им токсичности. До настоящего времени не представлялось возможным получение альбуминсвязывающих веществ, которые обладали бы всеми вышеупомянутыми предпочтительными свойствами. Описание изобретения Общее описание изобретения Настоящее изобретение относится к новому классу альбуминсвязывающих соединений и их конъюгатов с молекулами, представляющими фармацевтический интерес, в частности с терапевтическими и/или диагностическими средствами. Такие представляющие фармацевтический интерес молекулы могут далее просто называться "агентами". В соответствии с настоящим изобретением указанные соединения и конъюгаты обладают способностью связываться с альбумином, т.е. они обладают аффинностью к альбумину. Соединения и конъюгаты согласно изобретению далее будут называться общим термином "альбуминсвязывающие вещества". Предпочтительно альбуминсвязывающие соединения согласно изобретению связываются с альбумином также селективно, т.е. связываются преимущественно с альбумином, а не с другими партнерами по связыванию. Указанные соединения могут быть легко получены и могут быть легко конъюгированы (т.е. присоединены посредством линкера, связаны, ковалентно связаны) с другими молекулами широкого ряда (в частности, с указанными агентами) химическими методами, известными специалистам в данной области. При конъюгировании с диагностическим или терапевтическим средством альбуминсвязывающие соединения согласно изобретению способствуют благоприятному изменению фармакокинетических свойств указанного средства. В частности, указанное конъюгирование согласно изобретению приводит к увеличению времени их циркуляции в кровотоке (альтернативно, называемого клиренсом крови или временем выведения из кровотока), т.е. к увеличению физиологического времени полужизни указанного средства. Конъюгирование с альбуминсвязывающими соединениями согласно изобретению приводит к увеличению времени выведения и/или разложения данного средства, в результате чего такое средство благодаря альбуминсвязывающей молекуле согласно изобретению будет сохраняться в кровотоке в альбуминсвязанной форме. Таким образом, вышеупомянутые аспекты настоящего изобретения являются предпочтительными при их применении, например, к агентам, которые в иных условиях быстро подвер-3 019335 гаются метаболизму или выведению, например к макромолекулам, в частности к фрагментам антител,или к более мелким глобулярным связывающим белкам, или к любому другому агенту или молекуле, для которой желательно более эффективное и более длительное удерживание в кровотоке, например к флуоресцеину, производным флуоресцеина или к контрастным агентам для исследований визуализации методами МРТ или рентгенографии, например Gd-DTPA для МРТ. В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения альбуминсвязывающие соединения согласно изобретению сообщают агенту, с которым они конъюгированы, повышенную способность проникновения в ткань. В описании настоящего патента термин "способность проникать в ткань" может, с одной стороны, означать степень проникновения агентов в ткань, а с другой стороны, - специфичность или селективность проникновения агентов в ткань, либо то и другое. В соответствии с настоящим изобретением уровень проникновения в ткань определяют путем количественной оценки присутствия лекарственного средства/агента в нужной ткани через различные периоды времени. Предпочтительно это может быть достигнуто путем мечения молекул (например, радиоактивными и флуоресцентными метками) с последующей их инъекцией в ткань или путем прямой количественной оценки с помощью жидкостной хроматографии/тандемной масс-спектрометрии(ЖХ/МС/МС). Время полужизни в кровотоке и уровень проникновения в ткань коррелируют друг с другом, как описано в публикации 18, в случае антител и фрагментов антител различных форматов, где было показано, что увеличение времени полужизни в сыворотке коррелирует с увеличением уровня аккумуляции в опухоли. Таким образом, вышеуказанные аспекты настоящего изобретения являются предпочтительными при их применении, например, к агентам, которые могут быть нацелены на предполагаемый участок их действия с использованием альбумина в качестве носителя. Таким образом, противораковое лекарственное средство может быть эффективно нацелено на быстро растущие опухоли, которые используют альбумин в качестве питательного вещества. Преимущество всех вышеуказанных аспектов настоящего изобретения заключается в том, что конъюгирование альбуминсвязывающих соединений согласно изобретению с терапевтическими или диагностическими средствами позволит вводить указанные средства пациентам или индивидуумам в более низких дозах. Кроме того, таким преимуществом согласно изобретению является снижение риска развития и/или тяжести побочных эффектов, побочных реакций или осложнений, ассоциированных с действием указанных средств. Так, например, при конъюгировании диагностического визуализирующего агента, такого как флуорофор или контрастный агент с соединением согласно изобретению, полученное конъюгированное производное такого агента, обладающее способностью нековалентно связываться с альбумином, отличается тем, что оно имеет более медленный характер выведения из кровотока и способствует увеличению интенсивности продуцируемого сигнала (например, сигнала при флуоресценции, магнитном резонансе,рентгенографии, позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ) или однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (SPECT, например, в кровеносных сосудах, по сравнению с недериватизированным агентом, что позволяет вводить такие средства в меньших дозах, а также получать необходимые для диагностики изображения (например, ангиограммы, МРТ-изображения, рентгенограммы или ПЭТ) лучшего качества. Это особенно относится к случаям использования, например, флуоресцеина и его производных и их применения в офтальмологической ангиографии. Что касается аффинности, растворимости и фармакокинетических свойств альбуминсвязывающих соединений согласно изобретению, то такие соединения идеально подходят, например, для конъюгирования с контрастными агентами, такими как Gd-DTPA, что тем самым позволяет увеличивать их время полужизни и улучшать релаксирующие свойства (предпочтительно, снижать время релаксации по сравнению с временем релаксации контрастного агента, не конъюгированного с альбуминсвязывающим соединением согласно изобретению). Общим преимуществом альбуминсвязывающих соединений согласно изобретению является то, что такие соединения, благодаря их относительно небольшому размеру и хорошей растворимости, сообщают низкомолекулярным агентам аффинность связывания с альбумином и при этом не оказывают какоголибо значительного влияния на растворимость или другие фармакологически ценные свойства указанного низкомолекулярного агента. Другим преимуществом альбуминсвязывающих соединений согласно изобретению является то, что они обладают универсальной транспортируемостью, т.е. являются в высокой степени многоцелевыми. Т.е. указанные соединения могут быть конъюгированы с любым агентом при условии, что такой конъюгированный агент содержит функциональную группу, способную связываться с альбуминсвязывающимся соединением, т.е. функциональную группу, способную вступать в реакцию, в результате которой такой агент будет связываться с альбуминсвязывающимся соединением, или при условии, что такая функциональная группа может быть введена в данный агент. В соответствии с настоящим изобретением применение соединений согласно изобретению для такого конъюгирования позволяет получать конъюгаты согласно изобретению, в которых остаток альбуминсвязывающего соединения согласно изобретению может прямо или опосредованно связываться с остатком представляющего интерес агента. Настоящее изобретение также относится к применению указанных конъюгатов в медицине, в терапии и диагностике. Подробное описание изобретения Соединения согласно изобретению. Настоящее изобретение относится к классу транспортируемых альбуминсвязывающих соединений,имеющих формулу 1 где Е представляет собой разветвленную, неразветвленную или циклическую углеводородную группу, имеющую до 6 атомов углерода, необязательно прерываемых 1-2 гетероатомами, и необязательно замещенную 1-6 группами, выбранными из F, Cl, Br, I, разветвленных, неразветвленных или циклических C1-C10-углеводородных групп, OR9, OCOR9, COOR9, CHO, COR9, CH2OR9, NR9R10, CH2NR9R10, SR9,=O, =S и =NH;D представляет собой функциональную группу, имеющую до 10 атомов, которые имеют отрицательный заряд, либо они могут быть депротонированы с образованием отрицательного заряда;R1 и R2 независимо выбраны из Н, F, Cl, Br, I, разветвленных, неразветвленных или циклических C1C10-углеводородных групп, OR9, OCOR9, COOR9, CH2OR9, CHO, COR9, NR9R10 и SR9; либо R1 и R2, взятые вместе, образуют циклическую структуру, содержащую разветвленную, неразветвленную или циклическую C1-C10-углеводородную группу (где указанная углеводородная группа необязательно прерывается 1-2 гетероатомами и необязательно замещена 1-3 группами, независимо выбранными из F, Cl, Br, I,OR9, OCOR9, COOR9, CHO, COR9, CH2OR9, NR9R10, CH2NR9R10, SR9, =O, =S и =NH); В содержит разветвленную, неразветвленную или циклическую углеводородную группу, содержащую до 30 атомов углерода, необязательно прерываемых 1-10 гетероатомами, или пептидильную цепь,содержащую до 20 аминокислотных остатков, где В необязательно замещена 1-5 группами, выбранными из F, Cl, Br, I, =O, OR9, OCOR9, COOR9, CN, NR9, NR9R10, =S и SR9, при условии, что В содержит по меньшей мере 3 атома в цепи между группой D и группой А;Y представляет собой функциональную группу, способную связываться с молекулой терапевтического или диагностического лекарственного средства;R9 и R10 независимо выбраны из группы, состоящей из Н и разветвленных, неразветвленных и циклических C1-C10-углеводородных групп,или их солям. Кроме того, настоящее изобретение относится к альбуминсвязывающим конъюгатам, представленным формулой 2 где Е представляет собой разветвленную, неразветвленную или циклическую углеводородную группу, имеющую до 6 атомов углерода, необязательно прерываемых 1-2 гетероатомами, необязательно замещенную 1-6 группами, выбранными из F, Cl, Br, I, разветвленных, неразветвленных или циклических C1-C10-углеводородных групп, OR9, OCOR9, COOR9, CHO, COR9, CH2OR9, NR9R10, CH2NR9R10, SR9,=O, =S и =NH;D представляет собой функциональную группу, содержащую до 10 атомов, которые имеют отрицательный заряд, либо они могут быть депротонированы с образованием отрицательного заряда;R1 и R2 независимо выбраны из Н, F, Cl, Br, I, разветвленных, неразветвленных или циклических C1C10-углеводородных групп, OR9, OCOR9, COOR9, CH2OR9, CHO, COR9, NR9R10 и SR9; либо R1 и R2, взятые вместе, образуют циклическую структуру, содержащую разветвленную, неразветвленную или циклическую C1-C10-углеводородную группу (где указанная углеводородная группа необязательно прерывается 1-2 гетероатомами и необязательно замещена 1-3 группами, независимо выбранными из F, Cl, Br, I,OR9, OCOR9, COOR9, CHO, COR9, CH2OR9, NR9R10, CH2NR9R10, SR9, =O, =S и =NH); В содержит разветвленную, неразветвленную или циклическую углеводородную группу, содержащую до 30 атомов углерода, необязательно прерываемых 1-10 гетероатомами, или пептидильную цепь,содержащую до 20 аминокислотных остатков, где В необязательно замещена 1-5 группами, выбранными из F, Cl, Br, I, =O, OR9, OCOR9, COOR9, CN, NR9, NR9R10, =S и SR9, при условии, что В содержит по меньшей мере 3 атома в цепи между группой D и группой А;Y' представляет собой остаток функциональной группы, способный связываться с молекулой терапевтического или диагностического средства;Z включает остаток молекулы терапевтического или диагностического средства и необязательно линкер;R9 и R10 независимо выбраны из группы, состоящей из Н и разветвленных, неразветвленных и циклических C1-C10-углеводородных групп,или к их фармацевтически приемлемой соли. В соответствии с предпочтительными вариантами изобретения молекула Е включает группу, представленную формулой 3 где R3-R8 независимо выбраны из Н, F, Cl, Br, I, разветвленных, неразветвленных или циклическихC1-C10-углеводородных групп, OR9, OCOR9, COOR9, CHO, COR9, CH2OR9, NR9R10, CH2NR9R10 и SR9; либо пары заместителей R3 и R4, взятых вместе, R5 и R6, взятых вместе, или R7 и R8, взятых вместе,необязательно и независимо выбраны из групп =O, =S и =NH. В других предпочтительных вариантах изобретения молекула Е включает группу, представленную формулой 4 где R3 и R4 независимо выбраны из Н, F, Cl, Br, I, разветвленных, неразветвленных или циклических C1-C10-углеводородных групп, OR9, OCOR9, COOR9, CHO, COR9, CH2OR9, NR9R10, CH2NR9R10 иSR9; либо пары заместителей R3 и R4, взятых вместе, необязательно и независимо выбраны из групп =O,=S и =NH. Соединения и конъюгаты согласно изобретению обладают способностью связываться с альбумином, т.е. они обладают аффинностью к альбумину. Аффинность этих соединений является предпочтительной при константе диссоциации 100 мкМ или менее, более предпочтительной при 90, 80, 70, 60, 50,40, 30, 20, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 мкМ либо менее, более предпочтительной при 90, 80, 70, 60, 50, 40,30, 20, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 нМ либо менее. Предпочтительно соединения и конъюгаты согласно изобретению селективно связываются с альбумином. Считается, что альбуминсвязывающее вещество обладает селективной аффинностью к альбумину по сравнению с аффинностью к альтернативному партнеру по связыванию в том случае, если альбуминсвязывающее вещество связывается с альбумином с большей аффинностью, чем с альтернативным партнером по связыванию, где константа диссоциации для связывания указанного альбуминсвязывающего вещества с альтернативным партнером по связыванию по меньшей мере в 1,5 раза, предпочтительно по меньшей мере в 2, 3, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 200, 300, 400, 500, 750 или 1000 раз превышает константу диссоциации для связывания указанного альбуминсвязывающего вещества с альбумином. В одном из вариантов изобретения молекула В, взятая вместе с группой D, содержит аминокислотный остаток. Аминокислота представляет собой любую органическую молекулу, содержащую функциональную кислотную группу и аминогруппу. Одна или обе указанные группы могут быть, но необязательно, дериватизированы. Аминогруппа и кислотная группа могут находиться в любом положении по отношению друг к другу, а указанной аминокислотой обычно являются 2-аминокарбоновые кислоты, 3 аминокарбоновые кислоты, 4-аминокарбоновые кислоты и т.п., т.е. в предпочтительных вариантах изобретения аминогруппа присутствует у атома, обозначаемого 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16,17, 18, 19, 20 и т.п., в соответствии с соглашениями ИЮПАК по нумерации аминокислотных остатков[17, 19]. В соответствии с альтернативными соглашениями по нумерации, также известными специалистам, указанная аминокислота может представлять собой -, -, -, -, - (и т.п.) вплоть до аминокислоту. В предпочтительном варианте изобретения такой аминокислотой может быть аминокарбоновая кислота [например, 17, 19]. Однако в других вариантах изобретения кислотная группа аминокислоты выбрана из групп -ОРО 3 Н 2, -РО 3 Н 2, -OSO3H и -SO3H. В предпочтительных вариантах изобретения указанной аминокислотой является природная аминокислота или ее производное. В других предпочтительных вариантах изобретения указанной аминокислотой является альфа(-)-аминокислота, где указанная аминокислота может представлять собой D- или L-аминокислоту. Предпочтительной аминокислотой является D- или L-энантиомер аминокислоты, выбранной из группы, состоящей из аргинина, аспарагина, аспартата, цистеина, глутамата, глутамина, глицина, гистидина, лейцина, лизина, метионина, фенилаланина, пролина, серина, треонина, триптофана, тирозина и/или валина. Наиболее предпочтительной из указанных аминокислот является D-лизин или L-лизин. В тех вариантах изобретения, в которых применяется D-энантиомер, такое применение D-энантиомера может оказывать благоприятное действие,направленное на дополнительное снижение скорости метаболизма и, тем самым, выведения лекарственного средства из кровотока. В предпочтительных вариантах изобретения, если В или B-D содержит аминокислотный остаток,то, как очевидно специалисту в данной области, Y обычно представляет собой аминогруппу аминокислоты, а наиболее предпочтительно альфа(-)-аминогруппу -аминокислоты. В соответствии с другим вариантом изобретения группа В высвобождается в физиологических условиях, предпочтительно в условиях in vivo в нужном участке действия молекулы данного терапевтического или диагностического средства, входящего в конъюгат согласно изобретению. Так, например, в соответствии с некоторыми вариантами настоящего изобретения такими условиями в указанном участке являются патофизиологические условия, а в других вариантах изобретения указанными условиями являются обычные условия, наблюдаемые в конкретной ткани или клетке. Патофизиологическими условиями предпочтительно являются условия, наблюдаемые в раковой ткани, на участке опухоли, на участке воспаления, в области свертывания крови или в области образования патологических бляшек (например,образования атеросклеротических или амилоидных бляшек) и т.п. Указанная группа В предпочтительно отщепляется в результате гидролиза, а более предпочтительно под действием фермента, т.е. ферментативно. В соответствии с предпочтительными вариантами изобретения такое отщепление происходит в результате амидолиза или протеолиза, т.е. под действием пептидазы или протеазы. В соответствии с предпочтительными вариантами изобретения группа В может, например, отщепляться под действием фермента, т.е. группа В имеет сайт расщепления, который может служить в качестве субстрата для фермента. Предпочтительно указанным ферментом является гидролитический фермент, а более предпочтительно амидолитический, пептидолитический или протеолитический фермент(протеаза). Подходящие сайты ферментативного расщепления, в частности сайты протеолитического расщепления, хорошо известны специалистам в данной области [21], и такими сайтами являются сайты расщепления ферментами, такими как металлопротеиназы (металлопротеиназы матрикса или паппализины или адамализины), сериновые протеазы (например, тромбин, эластаза, факторы свертывания крови,плазмин, тканевый активатор плазминогена, урокиназа или активатор плазминогена) или цистеиновые протеазы (такие как катепсины), карбоновая кислота-протеазы, треониновые протеазы или глутаминовая кислота-протеазы. Предпочтительно указанный сайт расщепления является субстратом для фермента,выбранного из группы, состоящей из глюкуронидазы, активатора плазминогена урокиназного типа, матриксной металлопротеазы, простатического специфического антигена, человеческого гландулярного калликреина 2, плазмина, катепсина В и PSMA. В соответствии с некоторыми вариантами изобретения группа В содержит пептид. Указанный пептид предпочтительно состоит из 2 или более аминокислотных остатков, а предпочтительно из 3, 4, 5, 6, 7,8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 и 20 остатков. Наиболее предпочтительно указанный пептид содержит сайт расщепления [21], описанный выше, т.е. предпочтительно сайт расщепления протеазой, который, кроме того, предпочтительно отщепляется в конкретных патофизиологических условиях. В соответствии с предпочтительными вариантами изобретения, если группа В соединений или конъюгатов согласно изобретению не содержит отщепляемого линкера, то общий класс соединений согласно изобретению может быть еще более расширен за счет отщепляемых линкеров, предпочтительно линкеров, которые гидролизуются in vivo. Таким образом, в предпочтительных вариантах изобретения терапевтические или диагностические средства могут быть присоединены к альбуминсвязывающим соединениям согласно изобретению с использованием одного или нескольких аминокислотных линкеров или пептидов, которые могут отщепляться под действием протеаз; шиффовых оснований, которые могут гидролизоваться при 37 С [20], отщепляемых сложных эфиров или других химических групп, использование которых представляет подходящий компромисс между обеспечением достаточной стабильности invitro и достаточно быстрой и предпочтительно селективной отщепляемости in vivo. Как упоминалось выше в описании формулы 2, линкер может быть, но необязательно, включен в группу Z, где указанный линкер предпочтительно отщепляется, более предпочтительно гидролизуется invivo, наиболее предпочтительно селективно отщепляется in vivo в определенных условиях. То же самое относится к другим описанным в изобретении формулам, для которых определена группа Z. Группа D предпочтительно представляет собой кислотную группу или сопряженное с ней основание, а более предпочтительно такая группа выбрана из ОРО 3 Н 2, РО 3 Н 2, OSO3H, SO3H и СООН, предпочтительно СООН, или сопряженных с ними оснований (фосфата, фосфоната, сульфата, сульфоната и карбоксилата), где атом водорода Н в вышеуказанных формулах заменен отрицательно заряженной группой. Кислотные группы подвергают депротонированию в присутствии подходящих акцепторов протонов (оснований) с получением сопряженных оснований. Специалистам в данной области хорошо известны условия, при которых может происходить депротонирование, либо такие условия могут быть предсказаны. Углеводородными группами или углеводородными остатками в соединениях и конъюгатах согласно изобретению являются остатки углеводородных групп, т.е. радикалы углеводородных цепей, предпочтительно и независимо выбранные из алкильной, алкенильной, алкинильной, арильной и аралкильной групп. Используемый в описании термин "алкил" включает радикалы с прямой, разветвленной и циклической цепью, имеющей 1-30 атомов углерода, предпочтительно 1-20, 1-15, 1-10, 1-8, 1-6, 1-4, 1-3 или 1-2 атомов углерода. Конкретными примерами алкильных остатков являются метил, этил, пропил, изопропил, бутил, пентил, гексил, октил, децил, ундецил, додецил, тридецил, тетрадецил, пентадецил, гексадецил, гептадецил, октадецил, нонадецил, эйкозил, геникозил, докозил, трикозил, тетракозил, пентакозил,гексакозил, гептакозил, октакозил, нонакозил или триакозил, включая их различные разветвленные и/или циклические изомеры, например трет-бутил или изопентил и т.п. Используемый в описании термин "циклический" включает термин "полициклический", относящийся к структурам, имеющим более чем одно кольцо. В частности, термин "циклический" также относится к спироциклическим структурам, где два или более циклов имеют один общий атом, и к конденсированным полициклическим структурам, где два или более циклов имеют по меньшей мере два общих атома. Предпочтительным вариантом указанной конденсированной полициклической структуры является адамантан или его остаток (адамантильный радикал). Используемый в описании термин "алкенил" включает радикалы с прямой, разветвленной и циклической цепью, имеющей 2-30 атомов углерода, предпочтительно 2-20, 2-15, 2-10, 2-8, 2-6, 2-4 или 2-3 атома углерода, включая по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь. Конкретными примерами "алкенильных" групп являются различные алкенильные ненасыщенные эквиваленты указанных алкильных групп, обозначенных в соответствии с соглашениями, известными специалистам в данной области [17, 19], в зависимости от числа и расположения углерод-углеродной двойной связи или связей,такими примерами могут служить, например, бутандиилиден, 1-пропанил-3-илиден. "Алкенильные" группы предпочтительно содержат по меньшей мере 1, более предпочтительно по меньшей мере 2, 3, 4,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или 16 двойных связей, где двойная связь предпочтительно находится в положениях 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28 или 29 углеводородной цепи. Используемый в описании термин "алкинил" включает радикалы с прямой, разветвленной и циклической цепью, имеющей 2-30 атомов углерода, предпочтительно 2-20, 2-15, 2-10, 2-8, 2-6, 2-4 или 2-3 атома углерода, включая по меньшей мере одну углерод-углеродную тройную связь. Конкретными примерами "алкинильных" групп являются различные алкинильные ненасыщенные эквиваленты указанных алкильных и алкенильных групп, обозначенных в соответствии с соглашениями, известными специалистам в данной области [17, 19], в зависимости от числа и расположения углерод-углеродной тройной связи или связей. "Алкинильные" группы предпочтительно содержат по меньшей мере 1, более предпочтительно по меньшей мере 2, 3, 4, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или 16 тройных связей, где двойная тройная связь предпочтительно находится в положениях 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19,20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28 или 29 углеводородной цепи. Термин "алкинил" также включает "алкинильные" группы, дополнительно включающие по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь, т.е. "алкинильные" группы, которые подпадают под определения обеих используемых в описании"алкинильных" и "алкенильных" групп. Используемый в описании термин "арил" означает моноциклические, или полициклические, или конденсированные полициклические ароматические системы, имеющие 2-30, предпочтительно 2-20, 210, более предпочтительно 2-6 атомов углерода. Используемый в описании термин "аралкил" означает группы, содержащие по меньшей мере одну алкильную группу и по меньшей мере одну арильную группу, определенные в настоящем изобретении. Определенная в описании "аралкильная" группа связана с другой группой соединений или конъюгатов согласно изобретению посредством алкильной группы, такой как, например, бензильная группа. Используемый в описании термин "гетероатомы" включает N, О, S, Р, предпочтительно N и О. В вариантах изобретения, в которых R1 и R2, взятые вместе, образуют циклическую структуру, указанная циклическая структура предпочтительно представляет собой прямую или разветвленную углеводородную цепь, состоящую из 3-10, а более предпочтительно 3-9, 3-8, 3-7, 3-6, 3-5, 3-4 или 4 атомов углерода, связанных в двух положениях с фенильным кольцом формулы 1 или формулы 2, т.е. образующих две связи с указанным фенильным кольцом, в результате чего образуется циклическая структура, конденсированная с указанным фенильным кольцом. Предпочтительно указанные две связи присутствуют в мета- (3-) и пара- (4-)-положениях, в орто- (2-) и мета-положениях, или в орто- и пара-положениях указанного фенильного кольца. Указанная циклическая структура необязательно прерывается 1-2 гетероатомами, предпочтительно 1 гетероатомом, либо вообще не прерывается гетероатомами. Указанная циклическая структура необязательно замещена 1-3 группами, предпочтительно 5, 4, 3, 2 и 1 группами, выбранными из F, Cl, Br, I, OR9, OCOR9, COOR9, CHO, COR9, CH2OR9, NR9R10, CH2NR9R10, SR9, =O, =S и=NH, либо она является незамещенной. В особенно предпочтительном варианте изобретения указанная циклическая структура представляет собой фрагмент С 4-цепи (1,4-дирадикал), связанный своими 1 и 4 атомами с указанным фенильным кольцом формулы 1 или формулы 2 с образованием шестичленного кольца, конденсированного с указанным фенильным кольцом, предпочтительно в мета- и пара-положениях указанного фенильного кольца,т.е. предпочтительно образующего конденсированное в мета- и пара-положениях шестичленное кольцо,как в фенильном кольце соединения 539 (фиг. 1), т.е. соединение, которое может быть использовано для синтеза соединений и конъюгатов согласно изобретению.-8 019335 В соответствии с предпочтительными вариантами настоящего изобретения R1 и R2 независимо выбраны из группы I, Br, СН 3 и Н. Более предпочтительно R1 находится в пара-положении и выбран из групп I, Br и СН 3, a R2 представляет собой Н. В некоторых предпочтительных вариантах изобретения R3-R8 представляют собой Н. Независимо от этого, в предпочтительных вариантах изобретения R9 и R10 могут также представлять собой Н. Любая функциональная группа или множество функциональных групп на альбуминсвязывающем соединении согласно изобретению или на агенте, присоединенном к этому соединению, могут быть использованы для связывания данного соединения и агента при условии, что указанные функциональные группы на указанном соединении и агенте способны вступать в реакцию, в результате которой данное соединение присоединяется к другому соединению. Предпочтительно указанное присоединение, т.е. конъюгирование, осуществляется посредством ковалентного связывания, хотя также рассматривается и нековалентное связывание (например, связывание посредством водородных связей, ионных связей, вандер-ваальсовых связей). В настоящем описании термины "связывание" агента с соединением, "присоединение" агента к соединению и "сочетание" или "конъюгирование" агента с соединением означают, что указанный агент и соединение или их остатки непосредственно или опосредованно связаны посредством другой молекулярной группы. В соответствии с предпочтительными вариантами изобретения Y выбран из групп -NH2, -SH, -ОН,-СНО, -NCS, -NCO и Н. Предпочтительно Y представляет собой -NH2. Если Y представляет собой -NH2,то соединения согласно изобретению также включают их протежированную форму (сопряженную кислоту) (NH3+). В предпочтительных вариантах соединений согласно изобретению B(Y)-D включает группу, представленную формулой 5 В других предпочтительных вариантах соединений согласно изобретению B(Y)-D включает группу,представленную формулой 6 В соответствии с другими предпочтительными вариантами изобретения соединениями согласно изобретению являются соединения, представленные формулой 7 В соответствии с другими предпочтительными вариантами изобретения соединениями согласно изобретению являются соединения, представленные формулой 8 В соответствии с предпочтительными вариантами изобретения В включает остаток, выбранный из группы, состоящей из 3-[(2-аминилэтил)дитио]пропионила, N-[-малеимидо-3'-илацетила], N,N'-1,4-бисмалеимидо-3',3-диилбутана, N,N'-1,6-бис-малеимидо-3,3-диилгексана, N,N'-1,2-бис-малеимидо-3',3 диилэтана, N,N'-1,4-бис-малеимидо-3',3-диил-2,3-дигидроксибутана, N-[-малеимидо-3'-илпропионила],N-[-малеимидо-3'-илсемикарбазила], N,N'-1,8-бис-малеимидо-3',3'-диилтриэтиленгликоля, N,N'-1,11 бис-малеимидо-3',3'-диилтетраэтиленгликоля, суберила, диметиладипимидила, диметилпимелимидила,диметилсуберимидила, 1,4-ди[3'-(2'-тиил)пропионамидо]бутана, глутарила, дитиобиспропионила, тартарила, диметил-3,3'-дитиобиспропионимидила, 3,4-дитио-N,N'-1,6-бис-малеимидо-3',3-диилгексана, этиленгликоль-бис-сукцинила, N-7-малеимидо-3'-илкапроила, N-7-малеимидо-3'-илкапроилсемикарбазила,N-[-малеимидо-3'-илбутирила], 1,6-гексан-бис-винилсульфона, N-[k-малеимидо-3'-илундеканоила], N[k-малеимидо-3'-илундеканоилсемикарбазила], 4-[N-малеимидо-3'-илметил]циклогексан-1-карбокси-6[амидокапроила],6-[3-меркапто]пропионамидогексаноила,м-[малеимидо-3-ил]бензоила,4-(4-Nмалеимидо-3'-илфенил)бутирилсемикарбазила, адипила, 3-меркаптопропионилсемикарбазила, N-[пмалеимидо-3-илфенил]уреила,2-меркаптоацетила,3-меркаптопропионила,3[бромацетамидо]пропионила,2-йодацетила,4-[йодацетил]аминобензоила,4-[N-малеимидо-3'илметил]циклогексан-1-карбоксила,4-[п-малеимидо-3'-ил]бутирила,6-[-малеимидо-3 илпропионамидо]гексаноила, п-[2-меркаптоэтил]бензоила и 4-тиобутанимидамидила. В соответствии с предпочтительными вариантами конъюгатов согласно изобретению Y' выбран из групп -NH-, -S-, -O-, -СО-, -NHCS-, -NHCO- и связи. Предпочтительно указанной связью является ковалентная связь. Наиболее предпочтительно Y' представляет собой -NH-. В соответствии с предпочтительными вариантами конъюгатов согласно изобретению B(Y'-Z)-D включает группу, представленную формулой 9 В соответствии с другими предпочтительными вариантами конъюгатов согласно изобретению B(Y'Z)-D включает группу, представленную формулой 10 В соответствии с другими предпочтительными вариантами настоящего изобретения конъюгаты согласно изобретению содержат группу, представленную формулой 11 В соответствии с особенно предпочтительными вариантами настоящего изобретения конъюгаты согласно изобретению содержат группу, представленную формулой 12 В других предпочтительных вариантах соединений или конъюгатов согласно изобретению группа В соответствии с настоящим изобретением терапевтическим или диагностическим агентом, конъюгированным с соединениями согласно изобретению, может быть агент любого типа. Термин "диагностические агенты" включает визуализирующие агенты. Предпочтительно соединения согласно изобретению могут быть конъюгированы с органическими соединениями, металлоорганическим соединением, соединением, содержащим радионуклид; нуклеотидом; нуклеиновой кислотой; полимером; пептидом; нуклеопептидом; белком; липидом; стероидом, либо их производными или комбинациями. Предпочтительно указанный агент выбран из группы, состоящей из небольших молекул, пептидов, антител, терапевтических белков, антисмысловых олигонуклеотидов и неорганических или органических молекул или комплексов, включающих радионуклиды. В соответствии с настоящим изобретением указанные альбуминсвязывающие вещества, благодаря их относительно небольшому размеру и хорошей растворимости, могут быть использованы для конъюгирования с низкомолекулярным агентом и не оказывают какого-либо значительного воздействия на растворимость, предпочтительно, по существу, не снижают такую растворимость, или на другие фармакологически ценные свойства указанного низкомолекулярного агента. Предпочтительно растворимость агента, конъюгированного с соединением согласно изобретению, составляет по меньшей мере 1%, более предпочтительно по меньшей мере 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 98, 99 или 100% от растворимости указанного неконъюгированного агента. Используемый в описании термин "небольшие молекулы" означает молекулы, предпочтительно органические молекулы, молекулярная масса которых составляет менее чем примерно 1500 Да, в частности менее чем 1200, 1000, 900, 800, 700, 600, 500, 400, 350, 300, 250 или 200 Да. Используемые в описании термины "белок", "пептид" или "полипептид" являются взаимозаменяемыми и означают аминокислотные полимеры любой длины. Указанный полимер может быть прямым или разветвленным, может содержать модифицированные аминокислоты и может прерываться молекулами, не являющимися аминокислотами. Такие термины также охватывают аминокислотный полимер,который имеет природные или искусственные модификации, внесенные, например, в результате образования дисульфидных связей, гликозилирования, липидизации, ацетилирования, фосфорилирования или в результате любых других манипуляций или изменений, таких как конъюгирование с компонентом- 11019335 меткой. В определение данного термина также входят, например, полипептиды, содержащие один или несколько аналогов аминокислот (включая, например, неприродные аминокислоты и т.п.), а также другие известные модификации. Полипептиды могут присутствовать в виде отдельных цепей или связанных цепей, и в соответствии с настоящим изобретением могут быть гликозилированными по своей природе или искусственно гликозилированными (т.е. полипептид может иметь картину гликозилирования, отличающуюся от картины гликозилирования, наблюдаемой в соответствующем природном полипептиде). В соответствии с предпочтительными вариантами изобретения молекула терапевтического средства, с которой конъюгированы соединения согласно изобретению или остаток которой присутствует в конъюгате согласно изобретению, представляет собой лекарственное средство для лечения рака, опухоли, сердечно-сосудистого заболевания, ожирения, вирусных, бактериальных, грибковых или других инфекций, воспаления, нервных расстройств, дегенеративных нервных расстройств, психических заболеваний или состояний, депрессии, гормональных расстройств, нарушений метаболизма глюкозы или диабета, или лекарственное средство для контрацепции. Используемые в описании термины "терапия", "лечение", "лечить" и "терапевтический" относятся к аспектам изобретения, в которых рассматриваются и такие понятия, как "профилактика", "предупреждение", "предупреждать" и "профилактический" соответственно. В соответствии с некоторыми вариантами изобретения указанным терапевтическим средством является лекарственное средство для лечения рака прямой и ободочной кишки, молочной железы, предстательной железы, легких, головы и шеи, поджелудочной железы, желудка или яичника; или лимфомы,лейкоза, астроцитомы, высокозлокачественной астроцитомы или гепатоцеллюлярной карциномы. В одном из предпочтительных вариантов изобретения указанным средством является лекарственное средство для лечения быстрорастущих опухолей (предпочтительно опухолей, размер которых увеличивается в два раза за время менее чем 120, 100, 80 или 60 дней). Используемый в описании термин "время увеличения размера опухоли в два раза" означает время, за которое объем опухоли удваивается (время удвоения объема опухоли, см. публикацию 22), как было измерено ранее, см., например, публикацию 23. В особенно предпочтительном варианте изобретения указанной молекулой терапевтического средства является лекарственное средство для лечения опухоли, характеризующейся быстрым поглощением альбумина. Если альбуминсвязывающее соединение согласно изобретению и агент подвергают прямому конъюгированию или конъюгированию посредством связывающей молекулы (линкера) и если молекула В,определенная в настоящем изобретении, или указанный линкер отщепляется в определенных условиях,предпочтительно в патофизиологических условиях, то продукт указанной реакции отщепления больше не сохраняет свою аффинность к альбумину, либо его аффинность к альбумину снижается. В соответствии с конкретными вариантами изобретения конъюгат согласно изобретению содержит агент или лекарственное средство, обладающие способностью проникать в ткани или клетки после отщепления указанного линкера. В соответствии с этим аспектом изобретения указанным конъюгатом может быть пролекарство. В соответствии с другими предпочтительными вариантами изобретения указанной молекулой диагностического средства является средство для осуществления методов диагностической визуализации,флуоресценции, ангиографии, флуороангиографии, ультразвуковой эхографии, методов диагностики на основе магнитного резонанса, методов визуализации на основе магнитного резонанса, рентгенографии,лучевой терапии, однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (SPECT) или позитронноэмиссионной томографии (PET). В особенно предпочтительных вариантах изобретения указанным средством является флуорофор для офтальмологической ангиографии или контрастный агент для рентгенографии или визуализации на основе магнитного резонанса. Наиболее предпочтительно указанный агент содержит флуоресцеин или комплекс "гадолиний (III) - диэтилтриаминпентауксусная кислота (Gd-DTPA) или ее остаток". Предпочтительными также являются комплексы "177Lu-DTPA". В предпочтительных вариантах изобретения терапевтическое или диагностическое средство связано с группой В посредством молекулы тиомочевины (как проиллюстрировано на примере агента флуоресцеина в соединении "428-D-Lys-ФИТЦ"; см. ниже в разделе "Синтез соединений" (2) и в примере 6),или посредством амидной молекулы (как проиллюстрировано на примере агента флуоресцеина в соединении "428-D-Lys-FAM"; см. ниже в разделе "Синтез соединений" (1) и в примере 7). Структуры репрезентативных конъюгатов согласно изобретению (428-Lys-ФИТЦ, 428-Lys-FAM и 428-LysAla-DTPA-Gd) представлены на фиг. 7. Получение соединений и конъюгатов согласно изобретению. Альбуминсвязывающие соединения и конъюгаты согласно изобретению могут быть синтезированы и присоединены к лекарственным средствам, несущим подходящие функциональные группы, различными методами, например методами органического синтеза [24, в частности 25], хорошо известными специалистам. В соответствии с предпочтительными вариантами изобретения соединения согласно изобретению синтезируют из предшественников карбоновой кислоты, указанных как предпочтительные соединения на фиг. 1. Предшественники карбоновой кислоты являются коммерчески доступными (например, ониSALOR,http://cds.dl.ac.uk/cds/datasets/orgchem/isis/salor.html или Maybridge, http://www.maybridge.com), либо они могут быть синтезированы методами, известными специалистам [24]. Предпочтительные предшественники карбоновой кислоты, представленные на фиг. 1, поставляются компаниями, указанными ниже. В тех вариантах изобретения, где X представляет собой О, а А представляет собой NH, молекулу В предпочтительно конъюгируют с карбоновой кислотой компонента предшественников карбоновой кислоты, как описано в примере 1 для соединения 428, являющегося компонентом предшественника карбоновой кислоты, и с лизином, или с 7-аминогептановой кислотой и лизином, являющимися компонентами, составляющими молекулу В. В вариантах изобретения, в которых X представляет собой О и А представляет собой О, карбоксильную группу компонента предшественника карбоновой кислоты предпочтительно подвергают реакции взаимодействия с эквимолярными количествами диэтилазодикарбоксилата (DEAD), трифенилфосфина (PPh3) и компонента, включающего группу В и гидроксильную группу (-ОН). В вариантах изобретения, в которых X представляет собой О и А представляет собой S, осуществляют аналогичную процедуру, за исключением того, что указанный компонент, включающий группу В, содержит тиол (сульфгидрил, -SH) вместо гидроксильной группы. В вариантах изобретения, в которых X представляет собой О, а А представляет собой СН, карбоксильную группу компонента предшественника карбоновой кислоты предпочтительно сначала превращают в ацилхлорид посредством реакции взаимодействия с SOCl2 и следовыми количествами ДМФ, а альтернативно, с PPh3 в CCl4. Затем добавляют ZnBr-производное. В вариантах изобретения, в которых X представляет собой S, после проведения реакций конъюгирования, описанных выше для вариантов, в которых X представляет собой О, группу С=O превращают вC=S с использованием реагента Лавессона. В основном, функциональные группы (например, NH2, COOH, ОН, SH и т.п.) молекулы, составляющей группу В, не являющиеся группами, связанными с компонентом предшественника карбоновой кислоты, являются предпочтительно защищенными (например, NH2 с использованием группы Fmoc или СООН в виде трет-бутилового эфира). Реакцию снятия защиты предпочтительно проводят перед очисткой, как описано в примере 1, или другими методами, известными специалистам. В соответствии с некоторыми предпочтительными вариантами изобретения для присоединения альбуминсвязывающего соединения к агенту, в частности для синтеза группы В, если В содержит пептид, могут быть применены хорошо известные методы пептидного синтеза, известные специалистам [2429]. В предпочтительных вариантах изобретения, в которых Y представляет собой NH2, эта первичная аминогруппа может быть модифицирована с использованием широкого спектра реагентов для конъюгирования (связывания) с представляющими интерес молекулами. В предпочтительных примерах указанная группа NH2 альбуминсвязывающей молекулы может быть модифицирована: 1) посредством образования амидной связи, например, с сукцинимидо-(NHS)-эфирами, сульфоNHS-эфирами, ацилхлоридами, ацилангидридами, с карбоновыми кислотами после активации 1-этил-3(3-диметиламинопропил)карбодиимидом 2) посредством образования мочевины/тиомочевины в результате реакции взаимодействия с изоцианатами/изотиоцианатами и 3) посредством образования шиффовых оснований в результате реакции взаимодействия с альдегидами. В тех вариантах настоящего изобретения, где в целях увеличения числа химических групп, связывающих лекарственные средства с альбуминсвязывающей молекулой согласно изобретению, используются бифункциональные линкеры, особенно предпочтительным является введение: 1) малеимида в результате конъюгирования с NHS-эфиром (например, с Nгидроксисукцинимидоэфиром 4-малеимидомасляной кислоты, GMBS), или 2) тиоловой группы под действием реагента Траута или защищенного тиола. Альтернативно, предпочтительным является присоединение альбуминсвязывающих соединений согласно изобретению к лекарственным средствам, имеющим небольшую органическую молекулу, или к белковым лекарственным средствам в результате химической модификации тиоловой группы (например,под действием малеимидогруппы или йодацетамида). В одном из вариантов изобретения указанная тиоловая группа присутствует на агенте, присоединенном к альбуминсвязывающему соединению согласно изобретению. В другом варианте изобретения Y представляет собой SH, а тиоловая группа может присутствовать непосредственно на альбуминсвязывающем соединении согласно изобретению. В другом варианте изобретения группа SH может быть введена в указанное альбуминсвязывающее соединение или присоединена к указанному соединению посредством бифункционального линкера, описанного выше. Конкретные процедуры получения репрезентативных соединений согласно изобретению описаны в примерах. Альбуминсвязывающие молекулы согласно изобретению могут быть также присоединены к лекарственным средствам посредством нековалентного связывания, например спаривания оснований с использованием нуклеотида или модифицированного нуклеотида и других групп. Фармацевтические композиции. Настоящее изобретение относится к альбуминсвязывающим конъюгатам согласно изобретению или к их фармацевтически приемлемым солям, используемым в качестве лекарственного средства. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим указанные альбуминсвязывающие конъюгаты согласно изобретению и их фармацевтически приемлемые соли, или остатки альбуминсвязывающих соединений согласно изобретению, связанные с терапевтическим или диагностическим агентом или его фармацевтически приемлемыми солями, а также фармацевтически приемлемый носитель. Настоящее изобретение также относится к применению альбуминсвязывающих конъюгатов согласно изобретению или альбуминсвязывающих соединений согласно изобретению в целях получения лекарственных средств для лечения рака, сердечно-сосудистого заболевания, ожирения, вирусных, бактериальных, грибковых или других инфекций, воспаления, нервных расстройств, дегенеративных нервных расстройств, психических заболеваний или состояний, депрессии, гормональных расстройств, или лекарственного препарата для контрацепции. Способы получения фармацевтических композиций хорошо известны специалистам. Фармацевтически приемлемые соли альбуминсвязывающих конъюгатов согласно изобретению могут быть получены в соответствии со стандартными процедурами, такими как проведение реакции взаимодействия свободного основания и/или кислоты альбуминсвязывающего конъюгата, по меньшей мере, со стехиометрическим количеством нужных солеобразующих кислот или оснований соответственно. Фармацевтически приемлемые соли альбуминсвязывающих конъюгатов согласно изобретению включают соли, образованные неорганическими катионами, такими как натрий, калий, кальций, магний,цинк и аммоний, и соли, образованные органическими основаниями. Подходящими органическими основаниями являются N-метил-О-глюкамин, аргинин, бензатин, диоламин, оламин, прокаин и трометамин. Фармацевтически приемлемыми солями согласно изобретению также являются соли, образованные органическими или неорганическими кислотами. Подходящими анионами являются ацетат, адипат, безилат, бромид, камзилат, хлорид, цитрат, эдизилат, эстолат, фумарат, глюцептат, глюконат, глюкуронат,гиппурат, гиклат, гидробромид, гидрохлорид, иодид, изетионат, лактат, лактобионат, малеат, мезилат,метилбромид, метилсульфат, напзилат, нитрат, олеат, памоат, фосфат, полигалактуронат, стеарат, сукцинат, сульфат, сульфосалицилат, таннат, тартрат, терефталат, тозилат и триэтиодид. Фармацевтические лекарственные формы альбуминсвязывающих конъюгатов согласно изобретению могут быть получены в виде препаратов мгновенного высвобождения, регулируемого высвобождения, замедленного высвобождения или в виде системы для доставки нужного лекарственного средства,несмотря на то, что на фармакокинетические свойства лекарственного средства, содержащегося в фармацевтических композициях согласно изобретению, также влияет присутствие альбуминсвязывающей молекулы согласно изобретению, т.е. остатка альбуминсвязывающего соединения согласно изобретению,присутствующего в альбуминсвязывающем конъюгате согласно изобретению. Обычно используемыми лекарственными формами являются, например, овули, имплантаты, пластыри, липосомы, таблетки, драже, пастилки, мягкие или жесткие капсулы, аморфные или кристалличе- 14019335 ские порошки, шипучие порошки или таблетки, аэрозоли, лиофилизованные препараты, растворы и суспензии, (микро)эмульсии, мази, гели, кремы, пасты, пены, суппозитории. В зависимости от применяемого способа введения для нанесения или введения агента могут потребоваться специальные приспособления, такие как, например, шприцы и иглы, ингаляторы, насосы, перья для инъекций, аппликаторы, специальные колбы или другие приспособления для введения, которые могут быть также имплантированы в организм индивидуума. Фармацевтические лекарственные формы в большинстве случаев состоят из лекарственного средства, наполнителя(ей) и контейнера/закрытой системы. Термин "один или несколько наполнителей" также означает неактивные ингредиенты, которые могут быть добавлены в альбуминсвязывающее соединение согласно изобретению в целях улучшения или облегчения получения лекарственного средства, повышения стабильности, облегчения введения и повышения безопасности лекарственного средства, и которые могут быть использованы для достижения нужного профиля высвобождения лекарственного средства. Поэтому тип наполнителя(ей), добавляемого(ых) в композицию, может зависеть от различных факторов,таких как, например, физические и химические свойства агента и/или альбуминсвязывающей молекулы,способа введения и процедуры получения лекарственного средства. Фармацевтически приемлемые наполнители известны специалистам и их список приводится в различных фармакопеях (см., например, [30,31]). Фармацевтические лекарственные формы альбуминсвязывающего вещества согласно изобретению могут быть получены любыми методами, хорошо известными специалистам, такими как, например,стандартные способы смешивания, просеивания, растворения, плавления, грануляции, приготовления драже, таблетирования, суспендирования, экструзии, сушки распылением, растирания в порошок, эмульгирования, (нано/микро)инкапсулирования, захвата или лиофилизации. Как упоминалось выше, композиции согласно изобретению могут включать один или несколько физиологически приемлемых неактивных ингредиентов, облегчающих приготовление из активных молекул препаратов для их применения в фармацевтике. Форма препарата зависит от желательного способа введения. Так, например, для внутривенной инъекции композиция может быть приготовлена, если это необходимо, в водном растворе с использованием физиологически совместимых буферов, включая, например, фосфат, гистидин или цитрат для коррекции рН композиции, и агент для придания тоничности, такой как, например, хлорид натрия или декстроза. Для введения через слизистую или интраназального введения, предпочтительными могут быть полутвердые композиции, жидкие композиции или пластыри, которые могут содержать усилители пенетрации. Такие пенетранты, по существу, известны специалистам. Для перорального введения альбуминсвязывающие конъюгаты могут быть приготовлены в жидких или твердых лекарственных формах и в виде лекарственных препаратов быстрого действия или препаратов с регулируемым/пролонгированным высвобождением. Подходящими лекарственными формами для перорального введения индивидууму являются таблетки, пилюли, драже, жесткие и мягкие капсулы, жидкости, гели,сиропы, взвеси, суспензии и эмульсии. Фармацевтические композиции согласно изобретению могут быть также приготовлены в виде лекарственных форм для ректального или вагинального введения, таких как суппозитории или удерживающие клизмы, например, содержащие стандартные основы для суппозиториев, известные специалистам, такие как масло какао, глицериды, глицеринированный желатин, деполяризованный желатин, полиэтиленгликоль, полисорбат или т.п. Для перорального введения альбуминсвязывающие конъюгаты согласно изобретению обычно получают в виде твердых лекарственных форм, например в форме таблеток или капсул, или в форме водного раствора или суспензии. Твердые пероральные лекарственные формы могут быть получены с использованием наполнителей,которыми могут быть инертные разбавители, наполнители, дезинтегрирующие вещества, связующие вещества (сухие и влажные), замедлители растворения, замасливатели, вещества, улучшающие скольжение, антиадгезивы, катионообменные смолы, смачивающие агенты, антиоксиданты, консерванты, красители, подсластители и ароматизаторы. Такие наполнители могут быть синтетическими или природными. Примерами таких наполнителей являются производные целлюлозы, лимонная кислота, дикальцийфосфат, желатин, карбонат магния, лаурилсульфат магния/натрия, маннит, полиэтиленгликоль, поливинилпирролидон, силикаты, диоксид кремния, бензоат натрия, сорбит, крахмалы, стеариновая кислота или ее соль, сахара (т.е. декстроза, сахароза, лактоза и т.п.), тальк, трагакантовая слизь, растительные масла(гидрогенизированные) и воски. В качестве усилителей грануляции могут служить этанол и вода. В некоторых случаях на таблетки могут быть нанесены покрытия, полученные, например, из пленки, маскирующей вкус, пленки, устойчивой к действию желудочного сока или пленки, замедляющей высвобождение. Для нанесения покрытия на таблетки часто используются природные и синтетические полимеры в комбинации с красителями, сахарами и органическими растворителями или водой, в результате чего может быть приготовлено драже. Если вместо таблетки предпочтительно использовать капсулу, то подходящая жесткая или мягкая капсула может быть получена с использованием лекарственного порошка,суспензии или раствора. Подходящими инертными разбавителями являются карбонат натрия и кальция, фосфат натрия и кальция, лактоза. Подходящими дезинтегрирующими агентами являются кукурузный крахмал и альгиновая кислота. Связывающими агентами могут быть крахмал и желатин. Замасливатель, если он присутствует, обычно представляет собой стеарат магния, стеариновую кислоту или тальк. Если это необходимо, то таблетки могут быть покрыты таким веществом, как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат,для замедления абсорбции в желудочно-кишечном тракте. Капсулами для перорального введения являются жесткие желатиновые капсулы, в которых активный ингредиент смешан с твердым разбавителем, и мягкие желатиновые капсулы, в которых активный ингредиент смешан с водой или маслом, таким как арахисовое масло, жидкое вазелиновое масло или оливковое масло. Для местного введения через кожу или слизистую оболочку альбуминсвязывающие вещества могут быть введены в кожный пластырь в виде полутвердого или жидкого препарата, например геля (микро)эмульсии, мази, раствора, (нано/микро)суспензии или пены. Проникновение альбуминсвязывающих веществ в кожу или в слизистую оболочку и в подлежащие ткани может регулироваться, например, путем применения усилителей пенетрации; соответствующим образом выбранных липофильных, гидрофильных и амфифильных наполнителей и их комбинаций, включая воду, органические растворители,воски, масла, синтетические и природные полимеры, поверхностно-активные вещества, эмульгаторы; путем коррекции рН и применения комплексобразующих агентов. Для регуляции проникновения альбуминсвязывающего вещества согласно изобретению в кожу могут быть применены и другие методы, такие как ионтофорез. В случае, когда желательной является местная доставка с минимальным системным воздействием, предпочтительным является чрескожное или местное введение. Для введения путем ингаляции или интраназального введения альбуминсвязывающие вещества,применяемые в соответствии с настоящим изобретением, обычно вводят в форме раствора, суспензии,эмульсии или полутвердого аэрозоля из упаковок под давлением, или аэрозольного ингалятора, обычно с использованием пропеллента, например галогенированных углеводородов, происходящих от метана и этана, двуокиси углерода или любого другого подходящего газа. Для аэрозолей, предназначенных для местного применения, могут быть использованы такие углеводороды, как бутан, изобутен и пентан. В случае применения аэрозолей под давлением соответствующая унифицированная доза лекарственного средства может быть введена с помощью дозирующего клапана для доставки. Для введения с помощью ингалятора или инсуффлятора могут быть использованы капсулы и картриджи, состоящие, например, из желатина. Обычно они содержат порошкообразную смесь альбуминсвязывающего вещества и подходящей порошкообразной основы, такой как лактоза или крахмал. Композиции, приготовленные для парентерального введения путем инъекции, обычно являются стерильными и могут быть получены в унифицированных лекарственных формах, например в виде ампул, шприцов, перьев для инъекций или контейнеров для многократного применения, где указанный контейнер обычно содержит консервант. Композиции могут быть получены в таких формах, как суспензии, растворы или эмульсии в маслянистых или водных носителях, и могут содержать технологические средства, такие как буферы, агенты для придания тоничности, агенты, повышающие вязкость, поверхностно-активные вещества, суспендирующие и диспергирующие агенты, антиоксиданты, биологически совместимые полимеры, хелатообразующие агенты и консерванты. В зависимости от участка инъекции носитель может содержать воду, синтетическое или растительное масло и/или органические сорастворители. В некоторых случаях, например в случае использования лиофилизованного продукта или концентрата, парентеральный препарат перед его введением может быть разведен или разбавлен. Депопрепараты, обеспечивающие регулируемое или пролонгированное высвобождение агента согласно изобретению, могут включать суспензии для инъекций, состоящие из нано/микрочастиц или нано/микрокристаллов или из немикронизированных кристаллов. Независимо от увеличения времени циркуляции в кровотоке, достигаемом с использованием альбуминсвязывающего вещества согласно изобретению, в качестве матриц регулируемого/пролонгированного высвобождения, помимо других агентов,известных специалистам, могут служить полимеры, такие как полимолочная кислота, полигликолевая кислота или их сополимеры. Другие депо-системы для доставки могут быть получены в форме имплантатов и насосов с насечками. Подходящие носители для внутривенного введения молекул согласно изобретению хорошо известны специалистам, такими носителями являются водные растворы, содержащие основание, такое как, например, гидроксид натрия, для получения ионизованного агента; сахарозу или хлорид натрия, например,в качестве агента, придающего тоничность. Водный раствор может включать буфер, содержащий фосфат или гистидин. Могут быть добавлены сорастворители, такие как, например, полиэтиленгликоли. Эти водные системы являются эффективными в качестве растворяющих агентов согласно изобретению и обладают низкой токсичностью после системного введения. Содержание компонентов в системе растворов может значительно варьироваться, но при этом оно не должно влиять на растворимость и на токсичность. Кроме того, может варьироваться и тип компонентов. Так, например, могут быть использованы низкотоксичные поверхностно-активные вещества, такие как полисорбаты или полоксамеры, а также могут быть добавлены полиэтиленгликоль или другие сорастворители, биологически совместимые полимеры, такие как поливинилпирролидон, а вместо декстрозы могут быть использованы другие сахара и полиолы. Применение транспортируемых альбуминсвязывающих веществ/способов лечения. Настоящее изобретение относится к применению альбуминсвязывающих соединений согласно изобретению для связывания молекулы терапевтического или диагностического средства с альбумином, т.е. для сообщения указанному средству аффинности к альбумину, или для повышения аффинности указанного средства к альбумину. Предпочтительно аффинность указанного средства увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза, более предпочтительно по меньшей мере в 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 20, 30, 40, 50, 60,70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000,5000, 7000, 104, 105, 106, 108 или 109 раз. Настоящее изобретение также относится к применению указанных соединений для снижения скорости метаболизма или разложения указанного агента в организме индивидуума, и тем самым, для увеличения времени присутствия молекулы терапевтического или диагностического средства в кровотоке(также называемом временем выведения из кровотока, "клиренсом крови" или "физиологическим временем полужизни"). Кроме того, настоящее изобретение также относится к применению указанных соединений для увеличения времени удерживания указанного агента в сосудистом пространстве. Предпочтительно указанное время циркуляции в кровотоке или указанное время удерживания агента в сосудистом пространстве увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза, более предпочтительно по меньшей мере в 2, 3,4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000,1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 5000, 7000, 104, 105, 106 или 107 раз. Кроме того, настоящее изобретение относится к применению указанных соединений для увеличения способности молекулы терапевтического или диагностического средства проникать в ткань. Термин"улучшение способности проникать в ткань" означает, что использование конъюгата согласно изобретению приводит к повышению уровня аккумуляции указанного конъюгата и/или терапевтического или диагностического средства, содержащегося в данном конъюгате или высвобождаемого из него после отщепления линкерной группы в конкретной ткани или на конкретном участке действия, в отличие от уровня аккумуляции, достигаемого в случае использования отдельно взятого указанного терапевтического или диагностического средства, т.е. средства, не конъюгированного с альбуминсвязывающим соединением согласно изобретению. Предпочтительно указанное проникновение в ткань увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза, более предпочтительно по меньшей мере в 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 20, 30, 40, 50,60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000,5000, 7000, 104, 105, 106 или 107 раз. Кроме того, настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или состояния, где указанный способ включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективной дозы альбуминсвязывающего конъюгата согласно изобретению или альбуминсвязывающего соединения согласно изобретению, связанного с терапевтическим или диагностическим средством. В предпочтительных вариантах изобретения указанными заболеваниями или состояниями являются рак, сердечнососудистое заболевание, ожирение, вирусные, бактериальные, грибковые или другие инфекции, воспаление, нервные расстройства, дегенеративные нервные расстройства, психические заболевания или состояния, депрессия или гормональное расстройство. В соответствии с одним из предпочтительных вариантов изобретения указанный способ нацеливает указанный агент, благодаря его конъюгированию с альбуминсвязывающим соединением согласно изобретению, на ткань или участок действия. Указанным участком предпочтительно являются раковые клетки, опухоль, участок воспаления, участок свертывания крови или образования патологических бляшек (например, образования атеросклеротических или амилоидных бляшек) или любые другие участки,обладающие физиологическими или патологическими свойствами, которые могут быть устранены, визуализированы или диагностированы с использованием указанного агента. В соответствии с предпочтительным вариантом изобретения указанная ткань характеризуется высокой скоростью поглощения альбумина. Предпочтительно указанной тканью является опухоль, более предпочтительно раковая опухоль прямой и ободочной кишки, молочной железы, предстательной железы, легких, головы и шеи, поджелудочной железы, желудка или яичника, или лимфома, лейкоз, астроцитома, высокозлокачественная астроцитома или гепатоцеллюлярная карцинома. В одном из предпочтительных вариантов изобретения указанной тканью является быстрорастущая опухоль (предпочтительно опухоль, время удвоения объема которой составляет менее чем 120, 100, 80 или 60 дней). В соответствии с другими предпочтительными вариантами изобретения указанный способ включает стадии связывания терапевтического или диагностического средства с альбумином под действием альбуминсвязывающей молекулы, т.е. альбуминсвязывающего соединения согласно изобретению или его остатка, и тем самым, доставки указанного средства в нужный участок действия указанного средства или в конкретную ткань пациента с использованием сывороточного альбумина в качестве носителя. В предпочтительных вариантах изобретения указанный агент высвобождается из альбумина в указанном участке действия или в указанной ткани. Кроме того, указанное высвобождение данного средства предпочтительно достигается под действием химического процессинга, более предпочтительно посредством расщепления отщепляемого линкера, связывающего данный агент с альбуминсвязывающей молекулой согласно изобретению, где указанным расщеплением предпочтительно является протеолитическое расщепление. В соответствии с одним из вариантов изобретения указанный агент поглощается опухолевой клеткой перед указанным химическим процессингом. В некоторых вариантах способов согласно изобретению агент, с которым конъюгировано альбуминсвязывающее соединение согласно изобретению, блокирует внеклеточные мишени (например, рецепторы, цитокины, факторы роста и ферменты крови). В соответствии с другим своим аспектом настоящее изобретение относится к применению указанных соединений или конъюгатов для диагностической визуализации. Термин "диагностическая визуализация" включает "диагностическую визуализацию" или "визуализирующую диагностику". Такое применение согласно изобретению предпочтительно включает модификацию терапевтического или диагностического средства посредством конъюгирования с соединением согласно изобретению с образованием конъюгата согласно изобретению. Предпочтительно агентом, с которым конъюгировано соединение согласно изобретению, является диагностическое средство. Применение соединений и конъюгатов согласно изобретению для диагностической визуализации также предпочтительно включает введение пациенту эффективной дозы конъюгата согласно изобретению. Как описано в настоящем изобретении, указанной диагностической визуализацией предпочтительно является метод флуоресценции, ангиографии, флуороангиографии, ультразвуковой эхографии, диагностики на основе магнитного резонанса, визуализации на основе магнитного резонанса, рентгенографии, терапии, однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (SPECT) или позитронно-эмиссионной томографии (PET). Способы введения. Альбуминсвязывающие конъюгаты согласно изобретению могут быть введены непосредственно или в виде фармацевтических композиций, содержащих наполнители (см. выше), хорошо известные специалистам. Способы лечения согласно изобретению включают введение индивидууму терапевтически эффективного количества альбуминсвязывающего соединения согласно изобретению. Используемый в описании термин "терапевтически эффективное количество" означает количество конъюгата согласно изобретению, необходимое для лечения, ослабления симптомов или предупреждения данного патологического состояния или для достижения детектируемого терапевтического или профилактического эффекта. В общих чертах, терапевтически эффективная доза может быть сначала оценена либо с помощью анализов клеточной культуры, либо на животных-моделях, например на приматах, не являющихся человеком, мышах, кроликах, собаках или свиньях. Животное-модель может быть также использовано для определения соответствующего интервала концентраций и способа введения. Полученная информация может быть затем использована для определения подходящих доз и способов их введения человеку. Конкретное эффективное количество, вводимое человеку, зависит от тяжести патологического состояния, общего состояния здоровья индивидуума, возраста, массы и пола индивидуума, режима питания, времени и частоты введения, комбинации(й) лекарственных средств, аллергических реакций и толерантности/отвечаемости на данную терапию. Это количество может быть определено с помощью рутинного экспериментирования и в соответствии с назначением врача-клинициста. Вообще говоря, эффективное количество, т.е. доза лекарственного средства, составляет от 0,005 до 50 мг/кг, предпочтительно от 0,125 до 20 мг/кг. Эффективные схемы лечения предпочтительными средствами согласно изобретению включают введение один, два или три раза в день и/или один, два, три, четыре, пять или шесть раз в неделю. Поэтому такие схемы лечения являются особенно предпочтительными для их применения в соответствии с настоящим изобретением. Эффективный и удобный способ введения и соответствующее количество компонентов согласно изобретению в фармацевтических композициях (см. выше) могут быть также легко определены путем рутинного экспериментирования. Различные препараты и системы доставки лекарственных средств известны специалистам (см., например, [32, 33]). Подходящими способами введения могут быть, например, пероральное введение, введение в носовую полость (интраназальное введение), внутрилегочное введение или введение через слизистую, местное введение, чрескожное введение, вагинальное введение, ректальное введение, введение в тонкий кишечник, внутриглазное введение, внутриушное введение и парентеральное введение. Основными способами парентерального введения являются внутривенное введение, внутримышечное введение и подкожное введение. Второстепенными способами введения являются внутрибрюшинное введение, внутриартериальное введение, внутрисуставное введение, внутрисердечное введение, интрацистернальное введение, внутрикожное введение, введение в пораженный участок, внутриглазное введение, интраплевральное введение, интратекальное введение, внутриматочное введение и интравентрикулярное введение. Тип используемого препарата и способ введения, а также тот факт, является ли предпочтительным местное или системное введение зависит от показаний для лечения, а также от физических, химических и биологических свойств лекарственного средства. Для композиций, которые могут быть использованы в способах лечения согласно изобретению, терапевтически эффективная доза может быть сначала оценена с применением ряда методов, хорошо из- 18019335 вестных специалистам. Начальные дозы, используемые в исследованиях на животных, могут быть установлены, исходя из эффективных концентраций, определенных в анализах, проводимых на клеточных культурах. Соответствующие интервалы доз для человека могут быть определены, например, с использованием данных, полученных в исследованиях на животных и в анализах, проводимых на клеточных культурах. Термин "терапевтически эффективная доза" или количество конъюгата, лекарственного средства или фармацевтической композиции, содержащей указанный конъюгат, согласно изобретению означает количество или дозу конъюгата, лекарственного средства или фармацевтической композиции, введение которой приводит к ослаблению симптомов заболевания или к увеличению продолжительности жизни индивидуума. Токсичность и терапевтическая эффективность такого конъюгата, лекарственного средства или фармацевтической композиции могут быть определены в соответствии со стандартными фармацевтическими процедурами в клеточных культурах или с использованием экспериментальных животных,например, путем установления LD50 (летальная доза для 50% данной популяции) и ED50 (терапевтически эффективная доза для 50% данной популяции). Отношение токсического и терапевтического эффектов дозы называется терапевтическим индексом, который может быть выражен как отношениеLD50/ED50. При этом предпочтительными являются конъюгаты, лекарственные средства или фармацевтические композиции, имеющие высокий терапевтический индекс. Эффективным количеством или терапевтически эффективным количеством является количество конъюгата, лекарственного препарата или фармацевтической композиции, которое может быть подходящим для вырабатывания биологического или терапевтического ответа в ткани, в системе, у животного или человека, и которое может быть определено исследователем, ветеринаром, врачом общей практики или другим врачом-клиницистом, например, таким количеством является количество, подходящее для предотвращения роста опухоли, предотвращения инфицирования, регуляции метаболизма глюкозы,снижения повышенных или увеличенных уровней глюкозы в крови, лечения или предупреждения расстройства, ассоциированного с изменением уровня метаболизма глюкозы, например, диабета и т.п. В интервалы циркулирующих концентраций предпочтительно входят дозы, которые обнаруживаютED50 и небольшую токсичность или вообще не обнаруживают какой-либо токсичности. Дозы могут варьироваться в таких интервалах в зависимости от используемой лекарственной формы и/или от применяемого способа введения. Рецептура, способ введения, дозы и интервал введения доз должны быть выбраны методами, известными специалистам, с учетом характерных особенностей состояния индивидуума. Количество доз и интервал их введения могут быть скорректированы для каждого отдельного индивидуума так, чтобы уровни активной молекулы в плазме были достаточными для достижения желаемых эффектов, т.е. соответствовали минимальной эффективной концентрации (МЕС). МЕС для каждого средства может варьироваться и может быть определена, например, исходя из данных, полученных invitro или из экспериментов на животных. Дозы, необходимые для достижения МЕС, зависят от особенностей индивидуума и способа введения. В случае местного введения или селективного поглощения,эффективная локальная концентрация лекарственного средства может не зависеть от концентраций в плазме. Количество вводимого агента или вводимой композиции может зависеть от ряда факторов, включая пол, возраст и массу индивидуума, подвергаемого лечению, тяжесть заболевания, способ введения и назначение лечащего врача. Композиции согласно изобретению, если это необходимо, могут быть приготовлены в виде упаковки и раздаточного устройства, содержащего одну или несколько унифицированных лекарственных форм,включающих активный ингредиент. Такая упаковка или устройство может, например, содержать металлическую или пластиковую фольгу, например, представлять собой блистерную упаковку; или, например,в случае флаконов, такая упаковка может иметь стеклянные и резиновые пробки. Упаковка или раздаточное устройство может включать инструкции по введению лекарственных средств. Могут быть также получены композиции, включающие лекарственные средства согласно изобретению, приготовленные в подходящем фармацевтическом носителе и упакованные в соответствующий контейнер, на котором имеется этикетка с рекомендациями по лечению указанного состояния. Краткое описание графического материала На фиг. 1 показаны структурные формулы реагентов 326, 428, 533, 535, 536, 539, 622, 624, 625, 630,631 и 632, из которых могут быть синтезированы соединения согласно изобретению. На фиг. 2 показаны структурные формулы репрезентативных предпочтительных соединений согласно изобретению, удлиненные альбуминсвязывающие молекулы 428- -LysNH2 (вверху) и 428 аминогептановая кислотаLysNH2 (внизу). На фиг. 3 представлены результаты измерений, проводимых с помощью изотермической титрационной калориметрии (ИТК), для 428LysNHAc (A), 428LysNH-ФИТЦ (В) и 428 аминогептановая кислотаLysNHAc (С). На фиг. 4 показан сдвиг электрофоретической подвижности, наблюдаемый при сравнении флуорес- 19019335 цеина (А) и 428LysNH-ФИТЦ (В), каждый из которых был использован отдельно (-) или был предварительно инкубирован с альбумином человеческой сыворотки (HSA) и с человеческой сывороткой(сыворотка). На фиг. 5 проиллюстрирован фармакокинетический профиль 428LysNH-ФИТЦ и флуоресцеина. На фиг. 6 представлены результаты анализа на связывание с альбумином человеческой сыворотки,проведенного с использованием микромассивов. На фиг. 7 на панелях А, В, С показаны структуры 428-Lys-ФИТЦ, 428-Lys-FAM и 428-LysAlaDTPA-Gd, т.е. примеры конъюгатов согласно изобретению соответственно. На фиг. 8 проиллюстрированы исследования по взаимосвязи "структура-активность" для альбуминсвязывающего вещества (ИТК). На фиг. 9 проиллюстрированы измерения величины Kd конъюгата "флуоресцеин-амид" согласно изобретению (428-D-Lys-FAM), проводимые с помощью ИТК. На фиг. 10 проиллюстрированы измерения величины Kd конъюгата "Gd-DTPA" согласно изобретению (428-D-LysAla-DTPA-Gd), проводимые с помощью ИТК. На фиг. 11 проиллюстрированы измерения величин Kd, проводимые с помощью флуоресцентной поляризации. На фиг. 12 систематизированы эксперименты по конкурентному связыванию для характеризации связывания 428-D-Lys-FAM с HSA. На фиг. 13 показан сдвиг электрофоретической подвижности, наблюдаемый при сравнении флуоресцеина, фенетиламина-FAM, 428-D-Lys-FAM и 622-D-Lys-ФИТЦ, каждый из которых был использован отдельно (-) или был предварительно инкубирован с альбумином человеческой сыворотки (HSA) и с человеческой сывороткой (сыворотка). На фиг. 14 проиллюстрированы фармакокинетические профили флуоресцеина, фенетиламина-FAM,428-D-Lys-FAM и 622-D-Lys-FAM у мышей. На фиг. 15 проиллюстрированы фармакокинетические профили DTPA-177Lu и 428-D-LysAlaDTPA-177Lu у мышей. На фиг. 16 охарактеризованы свойства альбуминсвязывающих молекул, определенные с помощью анализа методом количественного отбора (хроматографического анализа на связывания с альбумином). На фиг. 17 показаны улучшенные визуализирующие свойства соединения согласно изобретению(428-D-Lys-FAM) в ангиографическом анализе. На фиг. 18 показаны улучшенные визуализирующие свойства соединения согласно изобретению(428-D-LysAla-DTPA-177Lu) в МРВ-анализе. Примеры Пример 1. Получение соединений согласно изобретению ("428-аминогептановая кислотаLys-NH2" и "428LysNH2").Ha фиг. 1 представлены возможные структурные реагенты, из которых могут быть синтезированы соединения согласно изобретению. Карбоновую кислоту соединения 428 (поставляемую SIGMA,по каталогу 15634) активировали одним эквивалентом EDC и 1,2 эквивалентами NHS в ДМСО в течение 4 ч при 30 С, а затем добавляли десять эквивалентов 7-аминогептановой кислоты и триэтиламина. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 30 С с получением 428-аминогептановой кислоты. Полученный продукт очищали с помощью ВЭЖХ (см. пример 21, "Общие методы") и анализировали с помощью масс-спектрометрии. В основном, все молекулы, синтезированные, как описано в нижеследующих примерах, охарактеризовывали с помощью масс-спектрометрии. В одном из способов получения 428-аминогептановой кислоты: 10 мкмоль соединения 428 перемешивали с 8 мкмоль N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида (EDC) и 10 мкмоль Nгидроксисукцинимида (NHS) в 50 мкл ДМСО в течение 3 ч при 30 С, а затем добавляли 20 мкмоль 7 аминогептановой кислоты (Bachem) в 100 мкл 1 М NaHCO3, рН 9. Реакционную смесь оставляли на ночь при 30 С для перемешивания. После гашения реакции оставшихся реагентов избытком основания Trizma реакционную смесь очищали с помощью ВЭЖХ и охарактеризовывали с помощью масс-спектрометрии. Для получения "химической ветви" в целях ее использования в соответствии с настоящим изобретением в реакциях конъюгирования с различными агентами, где для связывания с альбумином необходимо присутствие функциональной группы карбоновой кислоты, первичную аминогруппу вводили посредством конъюгирования Fmoc-D-Lys-OH через -аминогруппу с карбоксильной функциональной группой соединения 428, или посредством конъюгирования D-Lys(Fmoc)-ОН через -аминогруппу со свободной карбоксильной функциональной группой 428-аминогептановой кислоты (см. фиг. 2). Синтез и очистку осуществляли, как описано выше, включая стадию удаления защитной группы после конъюгирования путем добавления большого избытка триэтиламина за 4 ч до очистки. Пример 2. Получение соединений согласно изобретению ("533-аминогептановая кислотаLys-NH2" и "533LysNH2"). Карбоновую кислоту соединения 533 (поставляемую фирмой SALOR, номер по каталогу S532649) активировали одним эквивалентом EDC и 1,2 экв. NHS в ДМСО в течение 4 ч при 30 С, а затем добавляли 10 экв. 7-аминогептановой кислоты и триэтиламина. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 30 С с получением 533-аминогептановой кислоты. Полученный продукт очищали с помощью ВЭЖХ и анализировали с помощью масс-спектрометрии. Первичную аминогруппу вводили посредством конъюгирования Fmoc-D-Lys-OH через аминогруппу с карбоксильной функциональной группой соединения 533 или посредством конъюгирования D-Lys(Fmoc)-ОН через -аминогруппу со свободной карбоксильной функциональной группой 533 аминогептановой кислоты. Синтез и очистку осуществляли, как описано выше, включая стадию удаления защитной группы после конъюгирования путем добавления большого избытка триэтиламина за 4 ч до очистки. Пример 3. Получение соединений согласно изобретению ("539-аминогептановая кислотаLys-NHg" и "539LysNH2"). Карбоновую кислоту соединения 539 (поставляемую фирмой SALOR, номер по каталогу R244996) активировали 1 экв. EDC и 1,2 экв. NHS в ДМСО в течение 4 ч при 30 С, а затем добавляли 10 экв. 7 аминогептановой кислоты и триэтиламина. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 30 С с получением 539-аминогептановой кислоты. Полученный продукт очищали с помощью ВЭЖХ и анализировали с помощью масс-спектрометрии. Первичную аминогруппу вводили посредством конъюгирования Fmoc-D-Lys-OH через аминогруппу с карбоксильной функциональной группой соединения 539, или посредством конъюгирования D-Lys(Fmoc)-ОН через -аминогруппу со свободной карбоксильной функциональной группой 539 аминогептановой кислоты. Синтез и очистку осуществляли, как описано выше, включая стадию удаления защитной группы после конъюгирования путем добавления большого избытка триэтиламина за 4 ч до очистки. Пример 4. Получение соединений X-D-Lys (X=326, 428, 533, 535, 536, 539, 622 и 624). В одной серии экспериментов молекулы общей формулы X-D-Lys также синтезировали с использованием различных соединений "X" (Х=326, 428, 533, 535, 536, 539, 622 и 624) следующим образом: активацию карбоновой кислоты молекулы X осуществляли, как описано выше в примерах. После добавления 20 мкмоль Fmoc-D-Lys (Bachem) и 43 мкмоль триэтиламина (TEA) в 100 мкл ДМСО реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 30 С. Удаление защитной группы Fmoc в -аминоположении осуществляли путем добавления 10 мкл 5 МKOH и перемешивания в течение 2 ч при 30 С. После очистки с помощью ВЭЖХ в градиенте 0,1% трифторуксусной кислоты осушенные фракции, содержащие X-D-Lys, ресуспендировали в ДМСО. Затем добавляли 5 М HCl до тех пор, пока раствор не становился прозрачным. Пример 5. Модификация "химической ветви" в соединениях согласно изобретению. Конъюгирование уксусной или бутановой кислоты с аминогруппами 428LysNH2 и 428 аминогептановая кислотаLysNH2 соответственно осуществляли путем активации карбоновой кислоты эквимолярным количеством EDC/NHS в течение 3 ч при 30 С, с последующим добавлением активированной кислоты с 100 молярным избытком к 428LysNH2 и 428-аминогептановая кислота-LysNH2 соответственно, и перемешиванием в течение 12 ч при 30 С. Альтернативно, ангидрид уксусной кислоты с 100 молярным избытком добавляли к 428LysNH2 и 428-аминогептановая кислота-LysNH2 соответственно и перемешивали в течение 12 ч при 30 С. В одной серии экспериментов по синтезу соединений молекулы общей формулы X-D-Lys-Ac(Х=326, 428, 533, 535, 536, 539 и 624) синтезировали из X-D-Lys (полученного, как описано в примере 4,и ресуспендированного в ДМСО). В этих случаях X-D-Lys подвергали реакции взаимодействия с 10 хмолярным избытком Ас 2 О в течение 4 ч при 30 С, а затем определяли концентрацию с помощью ВЭЖХ/УФ. Продукт очищали с помощью ВЭЖХ. Пример 6. Получение конъюгатов согласно изобретению: конъюгирование с флуорофором-аминогруппу 428LysNH2 конъюгировали с флуоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ), который используется в качестве репрезентативного флуорофора, диагностического средства и, в общих чертах,молекулы, подобной лекарственному средству. Связывание осуществляли путем перемешивания 2,5 мкмоль 428LysNH2 и 10 мкмоль ФИТЦ в течение 12 ч при 30 С в 650 мМ NaH2PO4, 30% ДМСО, рН 7,2. Продукт (428-D-Lys-ФИТЦ) очищали с помощью ВЭЖХ и охарактеризовывали с помощью массспектрометрии. Пример 7. Получение конъюгатов согласно изобретению: конъюгирование с флуорофором на, 428-D-Lys или 622-D-Lys, полученного, как описано выше, и 14 мкмоль NHS-эфира 5 карбоксифлуоресцеина растворяли в 120 мкл ДМСО. Затем добавляли 72 мкмоль TEA. Реакционную смесь перемешивали в защищенном от света помещении в течение 24 ч при 30 С. После этого реакционную смесь очищали с помощью ВЭЖХ в градиенте ацетата триэтиламмония (ТЕАА). Пример 8. Получение конъюгатов согласно изобретению: конъюгирование с диагностическим контрастным агентом (DTPA). Применение контрастных агентов в методах МРВ-визуализации имеет преимущество в отношении увеличения времени полужизни в крови и уменьшения времени релаксации, которое заключается в том,что они нековалентно связываются с сывороточным альбумином. Контрастный агент DTPA конъюгировали с соединением согласно изобретению описанным ниже методом с получением конъюгата согласно изобретению. 2-(R)-гидроксиметил-DTPA-пента-трет-бутиловый эфир превращали в 2-(R)-аминометил-DTPAпента-трет-бутиловый эфир сначала путем превращения гидроксильной группы в азид при перемешивании в течение 12 ч с эквимолярными количествами диэтилазодикарбоксилата, PPh3 и дифенилфосфорилазида в ТГФ с последующим восстановлением до аминогруппы при перемешивании в течение 12 ч сPd/C/Н 2 в метаноле. Для конъюгирования с 2-(R)-аминометил-DTPA-пента-трет-бутилом первичную аминогруппу 428LysNH2 превращали в тиоловую группу посредством реакции взаимодействия с дитиогликолевой кислотой, активированной EDC/NHS, и последующим восстановлением молекулой ТСЕР. 2-(R)-аминометил-DTPA-пента-трет-бутил,N-(c-малеимидобутирилокси)сукцинимидоэфир(GMBS) и тиоловое производное 428LysNH2 (в отношении 1:2:10) перемешивали в течение 12 ч при 30 С. трет-Бутильную защитную группу карбоновых кислот удаляли под действием TFA. В полученный конъюгат 428LysGMBS-DTPA может быть затем введен Gd, и этот конъюгат может быть использован для МРВ-исследований. В одном случае 428-D-LysAla-DTPA-Gd синтезировали следующим образом: FmocAla конъюгировали с 428-D-Lys с использованием EDC/NHS и защитную группу удаляли под действием 5 М КОН,как описано выше. 19 мкмоль 428-D-LysAla и 14 мкмоль п-SCN-Bn-DTPA (Macrocyclics) растворяли в 120 мкл ДМСО. Затем добавляли 72 мкмоль TEA. Реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч при 30 С. Затем реакционную смесь очищали с помощью ВЭЖХ в градиенте 100 мМ ТЕАА. Реакцию образования комплекса 428-D-LysAla-DTPA и Gd3+ осуществляли путем добавления 10 мкмоль GdCl3 к 1 мкмоль 428-D-LysAla-DTPA и доведения рН до значения 10 с помощью NaOH, с последующим инкубированием в течение ночи при 25 С. Удаление избытка Gd3+ осуществляли с помощью ВЭЖХ в градиенте ТЕАА. Как обычно, конечные продукты охарактеризовывали с помощью масс-спектрометрии. Пример 9. Получение конъюгатов согласно изобретению: конъюгирование с противораковым лекарственным средством (доксорубицином). Доксорубицин конъюгировали с 428LysNH2 через первичную аминогруппу с янтарной кислотой, используемой в качестве бифункционального линкера. Сначала, доксорубицин перемешивали в течение 12 ч при 30 С с 100 х-молярным избытком ангидрида янтарной кислоты, а затем очищали с помощью ВЭЖХ. Затем аминогруппу подвергали реакции взаимодействия с ангидридом янтарной кислоты посредством образования амидной связи и высвобождения карбоновой кислоты. Полученную карбоновую кислоту активировали эквимолярными количествами EDC/NHS в течение 4 ч при 30 С, а затем добавляли 10 х избыток 428LysNH2. Очистку осуществляли с помощью ВЭЖХ и продукт охарактеризовывали с помощью масс-спектрометрии. Для конъюгирования через карбонильную группу доксорубицин перемешивали в течение 12 ч при 30 С с молярным избытком (6-малеимидокапроил)гидразида. Первичную аминогруппу 428LysNH2 превращали в тиол посредством реакции взаимодействия с дитиогликолевой кислотой, активированнойEDC/NHS с последующим восстановлением с использованием ТСЕР. Доксорубицин-гидразонкапроилмалеимид конъюгировали с тиоловым производным 428LysNH2 путем перемешивания с 10-кратным избытком тиолового производного в течение 12 ч при 30 С. Пример 10. Получение конъюгатов согласно изобретению: конъюгирование с противораковым лекарственным средством (эпитилоном). Эпотилоны представляют собой эффективные лекарственные средства, применяемые для лечения рака. Однако главным недостатком применения эпотилонов является их нейротоксичность. Поскольку связывание с сывороточным альбумином приводит к значительному снижению способности лекарственного средства проникать через гематоэнцефалический барьер, то конъюгирование эпотилонов с альбуминсвязывающей молекулой представляет собой эффективный метод, который позволяет устранять побочные эффекты и позволяет вводить более высокие дозы и тем самым повышать их терапевтическую эффективность. Конъюгирование 428LysNH2 с эпотилонами осуществляли в соответствии с протоколом, эквивалентным протоколу конъюгирования с доксорубицином, описанному в примере 9. Сначала 428-LysNH2 превращали в тиоловое производное, как описано в примере 9 для доксорубицина. Эпотилон,(6-малеимидокапроил)гидразид и тиоловое производное 428LysNH2 перемешивали в течение 12 ч в молярном отношении 1:2:10. Для предотвращения побочной реакции с эпоксидной группой эпотилона может быть применена стратегия защиты. Пример 11. Характеризация соединений и конъюгатов согласно изобретению с помощью изотермической титрационной калориметрии (ИТК). Измерение аффинностей связывания в растворе осуществляли с помощью изотермической титрационной калориметрии (ИТК). Эксперименты по связыванию, проводимые с помощью ИТК, осуществляли в соответствии с процедурой, описанной в публикации 34. 12 мкл, а затем 2920 мкл 428-производного вводили в 1,8 мл альбумина человеческой сыворотки. Все ИТК-измерения осуществляли при концентрациях 50-100 мкМ белка и 0,5-1 мМ конъюгата в PBS, 2% ДМСО при 37 С. По оценке 428-аминогептановой кислоты примера 1, проводимой с помощью ИТК-измерений, была определена константа диссоциации Kd=3 мкМ для двух сайтов связывания, имеющих сравнимую аффинность. Модификация первичной аминогруппы в 428-аминогептановая кислотаLysNH2 и 428LysNH2 уксусной и бутановой кислотой не оказывала значительного влияния на аффинность связывания с HSA (Kd=3,2 мкМ для 428LysNHAc,Kd=5,5 мкМ 428LysNHBu, Kd=8 мкМ для 428-аминогептановая кислота-а-LysNHAc, Kd=8 мкМ для 428-аминогептановая кислотаLysNHBu в одном сайте связывания альбумина человеческой сыворотки) (см. фиг. 3). Это подтверждает нужные свойства универсальной "химической ветви", которая может быть использована для конъюгирования различных агентов с соединениями согласно изобретению. 428LysNHAc также связывался с сывороточным альбумином других видов. Альбумин мышиной сыворотки распознавался с аналогичной аффинностью (Kd=3,7 мкМ и 3,6 мкМ в двух отдельных измерениях), тогда как аффинность связывания с альбумином крысиной сыворотки была в 6 раз ниже(Kd=28 мкМ). Взаимосвязь "структура-активность" альбуминсвязывающего вещества дополнительно охарактеризовывали с помощью ИТК в серии измерений, проиллюстрированных на фиг. 8. На этой фигуре показана общая структура для молекул X-D-Lys-Ac, определенная с помощью ИТК (Х=533, 535, 536, 539 и 624). Затем охарактеризовывали связывание 428-D-Lys-Ac (1) и других идентифицированных связывающих молекул (где 2, 3, 4, 5 и 6 соответствуют структурам 533, 535, 536, 539 и 624, соответственно) с HSA. Кроме того, на фиг. 8 проиллюстрированы измерения аффинности 428-D-Lys с MSA (7), которая является сравнимой с аффинностью HAS, на что указывают соответствующие измерения (1). Другие протестированные связывающие вещества (Х=533, 535, 536, 539 и 624), конъюгированные с ацетилированным D-лизином, имели аффинности в микромолярном интервале. Было обнаружено, что ряд их констант диссоциации соответствует их относительному удерживанию в хроматографическом анализе на связывание с альбумином (см. ниже, пример 17). Конъюгирование -аминогруппы 428LysNH2 с ФИТЦ не приводило к какой-либо значительной потере аффинности связывания с альбумином. После конъюгирования с ФИТЦ аффинность связывания с альбумином человеческой сыворотки была аналогичной, как было определено с помощью ИТК(Kd=6,5 мкМ, см. фиг. 3). Кроме того, были охарактеризованы флуоресцеин и несколько производных флуоресцеина (428-DLys-FAM, 622-D-Lys-FAM и фенетиламин-FAM). Константа диссоциации связывания 428-D-Lys-FAM сHSA, измеренная с помощью ИТК при 37 С, составляла 330 нМ (фиг. 9). Кроме того, аффинность связывания 428-D-LysAla-DTPA-Gd с HSA определяли с помощью ИТК(Kd=3,3 мкМ, фиг. 10). Как объяснялось выше, DTPA (диэтилентриаминпентауксусная кислота) представляет собой хелатообразующее вещество, наиболее часто используемое в лучевой терапии, a GdDTPA представляет собой контрастный агент, наиболее широко используемый в МРВ. В общих чертах, измерения с помощью изотермической титрационной калориметрии осуществляли на оборудовании VP-ITC (Microcal). HSA, не содержащий жирной кислоты (Sigma, A1887), или MSA, не содержащий жирной кислоты (А 1056), растворяли в PBS, 2% ДМСО и диализовали против идентичного буфера. Концентрация белка для эксперимента варьировалась от 30 мкМ до 1 мМ. Эксперименты обычно проводили путем титрования сывороточного альбумина связывающими молекулами. HSA или MSA титровали раствором связывающей молекулы, концентрация которого приблизительно в десять раз превышала концентрацию раствора белка в PBS, 2% ДМСО, при 37 С. Обычно титрование проводили до тех пор, пока отношение лиганда к сайту связывания белка не составляло 2:1. Лиганды растворяли в буфере для диализа. Конкретную концентрацию связывающей молекулы определяли с помощью ВЭЖХ/УФ. Затем полученные данные титрования обрабатывали и строили кривые с помощью компьютерной программы Origin 7 (Microcal) для определения величин Kd и Н. Пример 12. Характеризация соединений и конъюгатов согласно изобретению с помощью флуоресцентной поляризации. 100 нМ 428-D-Lys-FAM, 622-D-Lys-FAM и, для сравнения, флуоресцеина и фенетиламина-FAM инкубировали с возрастающими количествами HSA в PBS в течение 1 ч при 25 С. Флуоресцентную поляризацию определяли на длине волны возбуждения 485 нм и измеряли на длине волны 535 нм. Измеренные константы диссоциации составляли 76 мкМ для флуоресцеина, 108 нМ для 428-D-Lys- 23019335FAM, 6,6 мкМ для 622-D-Lys-FAM и 17 мкМ для фенетиламина-FAM (см. фиг. 11). Пример 13. Характеризация соединений и конъюгатов согласно изобретению с помощью флуоресцентной поляризации в экспериментах по конкурентному связыванию. 500 нМ 428-D-Lys-FAM и HSA инкубировали с 1 мкМ, 10 мкМ и 100 мкМ различных агентов, конкурентно связывающихся с HSA, в PBS в течение 1 ч при 25 С. Флуоресцентную поляризацию определяли на длине волны возбуждения 485 нм и измеряли на длине волны 535 нм. Эксперименты по конкурентному связыванию позволяют предположить, что 428-D-Lys-FAM связывается с HSA в сайте II. На фиг. 12 систематизированы результаты, полученные с помощью флуоресцентной поляризации вещества, конкурирующего за связывание с 428-D-Lys-FAM. 500 нМ 428-D-LysFAM и HSA инкубировали с возрастающими количествами конкурирующего агента (левая панель). Приводятся контрольные величины для несвязанного (без HSA) и связанного (без ингибитора) 428-D-LysFAM (правая панель). Пример 14. Характеризация соединений и конъюгатов согласно изобретению с помощью анализа на изменение электрофоретической подвижности. Анализ на изменение электрофоретической подвижности проводили в соответствии с общим протоколом, описанным в публикации 35. 10 мкМ флуоресцеина или 10 мкМ 428LysNH-ФИТЦ предварительно инкубировали в объеме 10 мкл в буфере PBS [36], содержащем либо 100 мкМ человеческого сывороточного альбумина, либо 100 мкМ человеческой сыворотки (разведенной 1/5). Время инкубирования в данном анализе составляло 30 мин. Электрофорез в полиакриламидном геле [35, 36] осуществляли с использованием препарата 20%-го акриламидного геля, буфера ТВЕ (трис/борат/EDTA) [36] и 10 мкл буфера для загрузки образцов в 5% сахарозе. Электрофорез проводили при 180 В в течение 40 мин. Анализ на изменение электрофоретической подвижности продемонстрировал связывание 428-LysNH-ФИТЦ и его специфичность к HSA (фиг. 4). В другой серии экспериментов по изменению электрофоретической подвижности (см. фиг. 13) флуоресцеин, фенетиламин-FAM, 428-D-Lys-FAM и 622-D-Lys-FAM при концентрации 5 мкМ инкубировали с PBS, HSA (50 мкМ) и с человеческой сывороткой (10-кратно разведенной в PBS) в PBS. Через 1 ч образцы загружали в 20% полиакриламидный гель и проводили электрофорез в течение 40 мин при 180 В в буфере трис/борат/EDTA, рН 8,2. Пример 15. Оценка фармакокинетических свойств конъюгатов согласно изобретению. Фармакокинетические свойства конъюгатов согласно изобретению оценивали путем инъекции указанного конъюгата и соответствующего неконъюгированного агента (т.е. агента, который не был модифицирован соединением согласно изобретению) мышам с последующим получением образцов конъюгата и агента в нужных концентрациях. Концентрации конъюгата и агента определяли с помощью жидкостной хроматографии/тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС/МС) методами, известными специалистам [37]. 100 мкл 170 мкМ раствора флуоресцеина и 428LysNH-ФИТЦ инъецировали 2 парам иммунокомпетентных мышей 129SV. Концентрацию отдельных соединений в сыворотке мышей, образцы которой брали через определенные промежутки времени в течение 24 ч, определяли с помощью ЖХ/МС/МС,и полученные результаты показали, что два этих соединения имели значительно отличающиеся фармакокинетические профили. Флуоресцеин быстро выводился из сыворотки (t1/2=12,5 мин), а 428Lys-NH-ФИТЦ сохранялся в сыворотке в течение значительно более длительного периода времени, обнаруживая при этом двухфазный клиренс, где t1/2,=22,5 мин, а t1/2,=340 мин (фиг. 5). В другом эксперименте in vivo определяли и сравнивали фармакокинетические свойства флуоресцеина, фенетиламина-FAM, 428-D-Lys-FAM и 622-D-Lys-FAM. Профили клиренса для четырех соединений значительно отличались (фиг. 14). Флуоресцеин быстро выводился с монофазным профилем и через 30 мин после инъекции уже не детектировался, а производные обнаруживали двухфазный профиль клиренса, который коррелировал с их аффинностями по отношению к HSA (флуоресцеин: t1/2=4,6 мин; 428D-Lys-FAM: t1/2,=27 мин, -фаза=90%, t1/2, =495 мин; 622-D-Lys-FAM: t1/2, =5,3 мин, -фаза=98%,t1/2, =100 мин; фенетиламин-FAM: t1/2, =5 мин, -фаза=99,5%, t1/2, =53 мин). Фармакокинетические анализы проводили по лицензиям 198/2005 Ветеринарной службы кантона Цюрих (Veterinaramt des Kantons Zurich) (выданным Dario Neri). Мышам 129SvPas инъецировали в хвостовую вену 20 нмоль флуоресцеина, фенетиламин-FAM, 428-D-Lys-FAM или 622-D-Lys-FAM, растворенных в 100 мкл 100 мМ трис/HCl, 105 мМ NaCl, pH 8,2 (каждой из 2 мышей). Через 1, 5, 15, 30, 60, 120,240, 360, 480 и 1440 мин после инъекции из подкожной вены с EDTA-покрытыми капиллярами (Sarstedt) брали 20-30 мкл проб крови и центрифугировали. 5-10 мкл плазмы смешивали с 40 мкл 0,1% трифторуксусной кислоты и 200 мкл этанола и инкубировали на льду в течение 1 ч. Через 1 ч образцы центрифугировали для удаления осажденных белков. Супернатант сушили в вакууме, а затем снова растворяли в 50 мкл ДМСО/Н 2 О. 40 мкл инъецировали в ЖХ/МС/МС-систему (Micromass Quattro micro API) и подвергали электрофорезу в линейном градиенте 0,1% НСООН от 5% до 95% ацетонитрила в течение 10 мин на колонке Waters XTerra MS C18 (3,5 мкМ, 150 мм), и за это время наблюдались дочерние ионы с 480,2 для фенетиламина-FAM; с m/z=287,3, 377,2 и 505,2 родительского иона 777,1 для 428-D-Lys-FAM; и с m/z=287,3 и 505,4 родительского иона 651,3 для 622-D-Lys-FAM. Сравнение площади под кривой,построенной с использованием ранее полученных данных для серии разведений флуоресцеина и 428-DLys-FAM в плазме и данных для идентичных препаратов образцов, позволило проводить количественную оценку молекул. Фармакокинетические профили также исследовали на 177Lu-комплексах DTPA и 428-D-LysAlaDTPA, i.v. инъецированных мышам. Аналогично тем случаям, в которых использовались производные флуоресцеина, DTPA-177Lu быстро выводился с монофазным профилем и через 60 мин после инъекции уже не детектировался, a 428-D-Lys-Ala-DTPA-177Lu обнаруживал значительно более медленный клиренс с двухфазным профилем (фиг. 15; 428-DLys-Ala-DTPA-177Lu: t1/2,=22 мин, -фаза=90%,t1/2,=408 мин).DTPA-комплексы получали путем инкубирования 2,25 нмоль DTPA или 428-D-Lys-DTPA с 70 мкКи 177Lu (Perkin Elmer) в течение ночи при 25 С в 250 мкл PBS. Завершение образования комплекса подтверждали с помощью ВЭЖХ с использованием детектора радиоактивности (GABI Star, Raytest) и ТЕАА-буфера. Мышам 129SvPas (каждой из 2 мышей) в хвостовую вену инъецировали 30 мкКи DTPA177Lu или 428-D-LysAla-DTPA-177Lu в 100 мкл PBS. Через 1, 5, 15, 30, 60, 120, 240, 480 и 1440 мин после инъекции брали пробы крови и проводили количественный анализ на содержание 177Lu. Для измерения фармакокинетики MSA 75 нмоль MSA метили DTPA путем проведения реакции с 2,1 мкмоль p-SCN-Bn-DTPA в PBS в течение 4 ч при 4 С, а затем осуществляли очистку на колонке PD10 (GE Healthcare). 50 нмоль MSA-DTPA метили 50 мкКи 177Lu (Perkin Elmer) и очищали на колонке PD10, уравновешенной в PBS. 3 мкКи MSA-DTPA-177Lu инъецировали в хвостовую вену мышей 129SvPas(2 мышам). Взятие проб крови проводили через 1, 15, 30, 60, 120, 240, 480 и 1440 мин после инъекции,как описано выше. Количество 177Lu в растворе для инъекции и в плазме оценивали путем подсчета радиоактивности на -счетчике Packard Cobra. Пример 16. Детектирование связывания с альбумином с использованием микромассивов. В нижеследующем примере описан проводимый с использованием микромассивов анализ на связывание соединений (например, на связывание конъюгатов терапевтических или диагностических средств с альбуминсвязывающим доменом или с любыми другими молекулами) с альбумином. В этом анализе, в котором может быть легко одновременно проанализировано большое число соединений, указанные соединения отдельно и ковалентно присоединяли к аналогичным, но отдельным олигонуклеотидам, несущим аминогексильную молекулу у 5'-конца [как описано в публикации 38]. Все эти олигонуклеотиды имеют идентичную последовательность у 5'-конца, что позволяет им гибридизоваться с комплементарными олигонуклеотидами, но отличаются областью, состоящей из 6 оснований. Эта уникальная отдельная область действует как уникальный "идентификационный код" для каждого органического соединения, связанного с отдельным олигонуклеотидом. Смесь конъюгатов "олигонуклеотид-соединение", протестированных на связывание с альбумином(далее называемая "библиотекой"), гибридизовали с немодифицированным 24-мерным олигонуклеотидом, комплементарным константной области у 5'-конца олигонуклеотидов. Димеризация олигонуклеотидов достигалась путем денатурации олигонуклеотидов в течение 3 мин при 94 С, а затем в течение 10 мин при 50 С наблюдалось образование гетеродуплекса в 10 мМ трис/Cl, 1 мМ MgCl2, рН 8, при конечных концентрациях библиотеки 87 и 120 нМ немодифицированных спаривающихся олигонуклеотидов. 10 мкл этой сконструированной библиотеки инкубировали с 50 мкл CNBr-сефарозой, модифицированной либо альбумином человеческой сыворотки, либо трис, используемыми в качестве негативного контроля, предварительно инкубированного со 100 мкг/мл ДНК спермы сельди в общем объеме 100 мкл в течение 1 ч. После трехстадийной промывки 400 мл 100 мМ NaH2PO4, 1 мМ MgCl2, 0,1% Твина 20, рН 8,5, на колонках SpinX, смолу ресуспендировали в 100 мкл Н 2 О. "Коды" остальных конъюгатов "олигонуклеотид-соединение" амплифицировали с помощью экспоненциальной ПЦР за 25 циклов с использованием 5 мкл ресуспендированной смолы. После удаления немеченых праймеров с помощью набора для ПЦР-очистки (Qiagen) указанные коды линейно 25 амплифицировали с использованием Су 3-меченного праймера. Продукт осаждали в этаноле и снова растворяли в 120 мкл буфера для гибридизации (4SSC,50 мМ HEPES, 0,2% ДСН, рН 7), и инкубировали с предметными стеклами, на которые были нанесены микромассивы (представляющие 19-меры со специфическими последовательностями, комплементарными 6 нуклеотидным кодам отдельной библиотеки олигонуклеотидов в квинтуплете), на устройстве для гибридизации Tecan HS 400 в течение 4 ч при 44 С, а затем проводили последовательные стадии промывки 2SSC/0,2% (мас./об.) ДСН, 0,2SSC/0,2% (мас./об.) ДСН и 0,2SSC. После гибридизации микромассивы анализировали с использованием профессионального сканера Genepix professional 4200A (возб. 532 нм, мощность лазера 100%, фотоумножитель 300). Интенсивности пятен количественно оценивали и анализировали на аппарате Genespotter (v2.4.3). После вычитания фона среднюю величину использовали как интенсивность сигнала пятна (среднее для пяти пятен). Сравнение интенсивности сигнала после инкубирования с альбумином человеческой сыворотки с интенсивностями после инкубирования с погашенной трисом смолой и с библиотекой перед инкубированием показало, что тестируемые соединения обладают альбуминсвязывающими свойствами (фиг. 6). Пример 17. Характеризация альбуминсвязывающих свойств, проводимая с помощью анализа методом количественного отбора (хроматографического анализа на связывание с альбумином). Связывающие свойства, в частности, селективность связывания соединений и конъюгатов согласно изобретению с альбумином могут быть также проанализированы с помощью описанного ниже анализа методом количественного отбора. 24-мерный олигонуклеотид, комплементарный константной ("идентичной") последовательности олигонуклеотидов, таких как библиотека примера 16, радиоактивно метили по 5'-концу -33 Р-АТР и полинуклеотидкиназой Т 4. В отдельных пробирках радиоактивно меченный олигонуклеотид гибридизовали либо с одним из конъюгатов "олигонуклеотид-соединение", либо с неконъюгированным олигонуклеотидом, используемым в качестве негативного контроля. Эксперименты проводили при концентрации дуплекса 100 нМ. Аликвоты этих дуплексных пар олигонуклеотидов инкубировали с альбумином человеческой сыворотки, конъюгированным со взвесью CNBr-сефарозы, в течение 1 ч и промывали, как описано в процедуре отбора. После этого осуществляли инкубирование в проточной среде и проводили стадии промывки, а затем 33 Р-радиоактивность смолы подсчитывали на сцинтилляционном счетчике Beckman LS 6500. Уровень радиоактивности указывает на относительную степень удерживания, если оно наблюдается (например, связывания), конъюгатов "олигонуклеотид-соединение" на данной смоле. В одной серии экспериментов 24-мерный олигонуклеотид метили, как описано выше, -33 Р-АТР (GEHealthcare) и полинуклеотидкиназой Т 4 (USB). В отдельных пробирках радиоактивно меченный олигонуклеотид гибридизовали с одним из выбранных конъюгатов "олигонуклеотид-соединение" или с неконъюгированным олигонуклеотидом, используемым в качестве негативного контроля при концентрации каждого олигонуклеотида 100 нМ. Аликвоты этих дуплексных пар олигонуклеотидов инкубировали с HSA-смолой в 100 мкл PBS. После 1-часового инкубирования проводили три раунда промывки 400 мклPBS, и 33 Р-радиоактивность остальных сфер, а также аликвот начальной стадии промывки и всех фракций промывки подсчитывали на сцинтиляционном счетчике Beckman LS 6500. На фиг. 16 указан уровень радиоактивности, количественно определенный для отбора альбуминсвязывающих молекул в нескольких стадиях промывки. Этот метод может быть применим для начальной классификации связывающих веществ. Было обнаружено, что из всех связывающих веществ, протестированных, как показано на фиг. 16, наиболее сильно связывающиеся вещества и их относительная сила связывания (приведенная по возрастанию силы связывания) могут быть описаны как 428539624535533536326 другие связывающиеся молекулы. Пример 18. Анализ на удаление альбумина из сыворотки. Связывание представляющих интерес соединений с альбумином и специфичность указанного связывания с альбумином по сравнению с другими белками в сыворотке могут быть оценены путем связывания представляющих интерес соединений, а также билирубина (природного лиганда HSA с наномолярной аффинностью) с аминомеченной сефарозой. Образцы альбумина человеческой сыворотки и человеческой сыворотки (или соответствующие образцы животного альбумина и сыворотки, например, мыши, крысы и т.п.) инкубировали с конъюгатами"соединение-смола" или пропускали через хроматографические колонки, заполненные указанной смолой. 1 мл смолы (модифицированной 100-100-кратным молярным избытком связывающей молекулы по отношению к NH2-группам на смоле) инкубировали с 1 мл HSA (2 мг/мл) в PBS в течение 30 мин. Затем смолу загружали на колонку и промывали 3 мл PBS. После этого элюировали 1 мл 8 М мочевины или 100 мМ триэтиламина. Результаты визуализировали на гелях с белком, т.е. исходную сыворотку, фракцию, промытую струей воды, или промывку от смолы, и элюент смолы наносили на дорожки полиакриламидного геля,который подвергали электрофорезу методами, известными специалистам [36]. Оценка и сравнение указанных дорожек с полосами белка на геле [36] после их визуализации (например, окрашивания и проявления окраски) показали, что в отличие от билирубина, используемого в качестве позитивного контроля,в данном случае, наблюдался определенный уровень удаления сывороточного альбумина из образцов сыворотки под действием различных конъюгатов "соединение-смола". В частности, была выявлена степень, с которой указанные конъюгаты "соединение-смола" селективно удаляют альбумин (т.е. связываются с ним) по сравнению с другими белками, содержащимися в сыворотке. Пример 19. Улучшенные визуализирующие свойства соединений согласно изобретению (ангиографический анализ). Для получения функциональной информации относительно визуализирующих свойств 428-D-LysFAM проводили ангиографический анализ флуоресцеина сетчатки. Флуоресцеин и 428-D-Lys-FAM i.v. инъецировали мышам и через различные промежутки времени получали изображения глазного дна. Ангиографические картины флуоресцеина подтверждали результаты фармакокинетических исследований. В случае флуоресцеина окрашивание кровеносных сосудов было слабым даже в начальные периоды времени, а через 20 мин, оно вообще не обнаруживалось. В противоположность этому, окрашивание кровеносных сосудов 428-D-Lys-FAM было более продолжительным и позволяло визуализировать более мелкие кровеносные сосуды (фиг. 17). Визуализацию методом сканирующей лазерной офтальмоскопии осуществляли на ангиографе Хайдельберга для сетчатки (HRA I, Heidelberg Engineering, Germany), т.е. на конфокальном сканирующем лазерном офтальмоскопе в соответствии с ранее описанными процедурами [см. работу 39]. Вкратце,мышей C57BL/6 дикого типа анестезировали кетамином (66,7 мг/кг) и ксилазином (11,7 мг/кг), их зрачки расширяли путем закапывания тропикамидных глазных капель (Mydriaticum Stulln, Pharma Stulln, Germany). Ангиограф HRA функционирует на двух длинах волн аргона (488 нм и 514 нм) в коротком диапазоне длин волн и на двух инфракрасных диодных лазерах (795 нм и 830 нм) в длинноволновом диапазоне. Для ангиографии флуоресцеина использовали лазер с длиной волны 488 нм, который имеет блокирующий фильтр, работающий на длине волны 500 нм. В хвостовую вену каждой из четырех мышей i.v. инъецировали 50 нмоль флуоресцеина или 428-D-Lys-FAM, растворенного в 100 мкл 100 мМ трис/HCl,105 мМ NaCl, pH 8,2. Через 1, 5, 20 и 60 мин после инъекции получали изображения с использованием тех же самых параметров, установленных на оборудовании. В частности, величину яркости в этом исследовании фиксировали так, чтобы самое яркое изображение (428-D-Lys-FAM через 1 мин после инъекции) могло быть зарегистрировано без чрезмерного облучения. Все эти исследования были разрешены местными Регуляторными органами (Anzeige v. 13.12.2006, RP Tuebingen) и проводились в соответствии с рекомендациями ARVO по использованию животных в офтальмических исследованиях и исследованиях органов зрения. Пример 20. Улучшенные визуализирующие свойства соединений согласно изобретению (МРВанализ). Для проверки транспортируемости 428-D-Lys, используемого в качестве альбуминсвязывающей молекулы, второй контрастный агент, диэтилентриаминпентауксусную кислоту (DTPA) конъюгировали с 428-D-Lys (428-D-LysAla-DTPA-Gd) и оценивали. DTPA представляет собой хелатообразующее вещество, наиболее часто используемое в лучевой терапии, a Gd-DTPA представляет собой контрастный агент, наиболее широко используемый в МРВ. В процедурах МРВ-визуализации, проводимых после i.v. инъекции контрастных агентов, наблюдалась быстрая экстравазация DTPA-Gd, но медленная экстравазация 428-D-LysAla-DTPA-Gd. МРВанализ крупных кровеносных сосудов головного мозга (фиг. 18) выявил более медленное снижение интенсивности сигнала у мышей, которым инъецировали 428-D-LysAla-DTPA-Gd, что соответствовало его замедленному профилю клиренса (см. фиг. 15). Все эксперименты на животных проводили при неукоснительном соблюдении законодательства Швейцарии по защите животных. МР-измерения проводили на МР-системе Bruker PharmaScan 47/16(Bruker BioSpin GmbH), работающей на 200 МГц с использованием кольцевой криогенной поверхностной спирали для передачи и приема сигнала. Мышей анестезировали 1,4-1,5% изофлураном в воздухе:О 2(4:1). Для оценки анатомии животного проводили поисковое сканирование. Снижение влияния контрастных агентов DTPA-Gd и 428-D-LysAla-DTPA-Gd на удлинение времени релаксации в крови (Т 1) исследовали на двух мышах С 57/В 16. В этих целях трансверсальные рентгеновские 2-мерные изображения получали с использованием нижеследующего ряда параметров, таких как поле зрения (FOV): 19190,5 мм 3, размер матрицы: 128128, угол поворота: 15, TE/TR: 3,0/14 мс, средние значения: 6, повторения: 50, временное разрешение: 10,75 с, общее время сканирования: 8 мин 57 с. Поступающую кровь насыщали путем получения толстого 4-мм среза (угол поворота: 15) в направлении черепа по отношению к плоскости изображения. Контрастные агенты инъецировали в хвостовую вену после проведения двадцати измерений фона. Сначала вводили дозу 1,2 мкмоль DTPA-Gd, а затем по истечении времени ожидания 30 мин вводили дозу 1,2 мкмоль 428-D-LysAla-DTPA-Gd. Время продолжительности МР-сигнала анализировали в больших сосудах и нормализовали за фоновую величину для сравнения. Пример 21. Метод ВЭЖХ-очистки. ВЭЖХ-очистка. Все продукты реакций очищали с помощью ВЭЖХ на колонке Waters XTerra Prep RP18 (5 мкМ,10150 мм) с использованием линейного градиента 0,1% трифторуксусной кислоты-ацетонитрила или 100 мМ ТЕАА, рН 7,100 мМ ТЕАА в 80% ацетонитриле, рН 7, в течение 15 мин. Если конкретно не указан какой-либо один градиент, то это означает, что для очистки могут быть использованы оба градиента. После сбора нужных фракций растворители и буфер удаляли в вакууме.D выбран из группы, состоящей из ОРО 3 Н 2, РО 3 Н 2, OSO3H, SO3H и СООН или сопряженных с ними оснований;R1 и R2 независимо выбраны из Н, F, Cl, Br, I, разветвленных, неразветвленных или циклических C1C10-углеводородных групп, OR9, OCOR9, COOR9, CH2OR9, CHO, COR9, NR9R10 и SR9; либо R1 и R2, взятые вместе, образуют циклическую структуру, содержащую разветвленную, неразветвленную или циклическую C1-C10-углеводородную группу (где указанная углеводородная группа необязательно прерывается 1-2 гетероатомами и необязательно замещена 1-3 группами, независимо выбранными из F, Cl, Br, I,OR9, OCOR9, COOR9, CHO, COR9, CH2OR9, NR9R10, CH2NR9R10, SR9, =O, =S и =NH);R3-R8 независимо выбраны из H, F, Cl, Br, I, разветвленных, неразветвленных или циклических C1C10-углеводородных групп, OR9, OCOR9, COOR9, CHO, COR9, CH2OR9, NR9R10, CH2NR9R10 и SR9; либо пары заместителей R3 и R4, взятых вместе, R5 и R6, взятых вместе, или R7 и R8, взятых вместе,необязательно и независимо выбраны из групп =O, =S и =NH; В содержит разветвленную или неразветвленную алкильную группу, содержащую до 6 атомов углерода, необязательно прерываемых пептидильной цепью, содержащую до 20 аминокислотных остатков,при условии, что В содержит по меньшей мере 3 атома в цепи между группой D и группой А;Y выбран из групп -NH2, -SH, -ОН, -CHO, -NCS, -NCO;R9 и R10 независимо выбраны из группы, состоящей из Н и разветвленных, неразветвленных и циклических C1-C10-углеводородных групп,где углеводородные группы представляют собой углеводородные радикалы, независимо выбранные из алкильной, алкенильной, алкинильной, арильной и аралкильной групп, где алкенил включает радикал, включающий по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь; алкинил включает радикал, включающий по меньшей мере одну углерод-углеродную тройную связь; арил означает ароматическую кольцевую систему; аралкил означает группу, содержащую по меньшей мере одну алкильную группу и по меньшей мере одну арильную группу; гетероатомы выбраны из группы, состоящей из N, О, S и Р;