Суспензия, содержащая фибриноген, тромбин и спирт, способ её получения, способ нанесения покрытия, способ сушки покрытия и коллагеновая губка с покрытием
Формула / Реферат
1. Суспензия, содержащая фибриноген, тромбин и спирт, причем способ, которым указанную суспензию получают, включает в себя следующее:
приготовление смеси фибриногена и спирта;
приготовление смеси тромбина и спирта;
смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии,
причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм.
2. Суспензия по п.1, отличающаяся тем, что средний диаметр частиц no Folk Ward находится в пределах 35-80 мкм.
3. Суспензия по п.1 или 2, отличающаяся тем, что вязкость суспензии является таковой, что 90-120 мл суспензии только под действием силы тяжести вытекают через нижнее отверстие емкости, имеющей
цилиндрическую часть с внутренним диаметром 40-50 мм,
внутренней длиной 55-65 мм и
коническую нижнюю часть высотой 17-23 мм с нижним отверстием на нижнем конце указанной конической части в виде круглого отверстия диаметром 2-3 мм,
за 25-75 с.
4. Суспензия по п.3, отличающаяся тем, что указанный объем суспензии вытекает через нижнее отверстие за 30-50 с.
5. Суспензия по любому из пп.1-4, содержащая также апротинин.
6. Способ приготовления суспензии фибриногена и тромбина, включающий
приготовление смеси фибриногена и спирта;
приготовление смеси тромбина и спирта;
смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии,
причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм.
7. Способ по п.6, отличающийся тем, что на стадии приготовления смеси фибриногена предварительно отбирают мелкие частицы фибриногена, чтобы получить частицы со средним диаметром по Folk Ward в пределах 25-100 мкм.
8. Способ по п.6 или 7, отличающийся тем, что предварительно отобранные мелкие частицы фибриногена перемешивают в спирте для получения указанной смеси фибриногена.
9. Способ по любому из пп.6-8, отличающийся тем, что на стадии приготовления смеси ее гомогенизируют.
10. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанную смесь гомогенизируют при температуре в пределах от 0 до 12шC.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что указанную смесь гомогенизируют при температуре в пределах от 2 до 8шC.
12. Способ по п.11, отличающийся тем, что при гомогенизации температуру понижают.
13. Способ по любому из пп.6-12, отличающийся тем, что тромбин содержит по крайней мере один из следующих тромбинов: тромбин человека, бычий тромбин и рекомбинантный тромбин.
14. Способ по любому из пп.6-13, отличающийся тем, что тромбин содержит по крайней мере один из следующих тромбинов: тромбин человека и рекомбинантный тромбин.
15. Способ по любому из пп.6-14, отличающийся тем, что указанная суспензия содержит также апротинин.
16. Способ по любому из пп.6-15, отличающийся тем, что спиртом является этиловый спирт.
17. Способ по п.16, отличающийся тем, что этиловый спирт является безводным.
18. Способ по любому из пп.6-17, отличающийся тем, что стадию смешивания смеси фибриногена и смеси тромбина проводят при перемешивании суспензии.
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что перемешивание проводят при температуре в пределах от 0 до 12шC.
20. Способ по п.19, отличающийся тем, что перемешивание проводят при температуре в пределах от 2 до 8шC.
21. Способ нанесения на носитель покрытия из суспензии, содержащей фибриноген и тромбин, отличающийся тем, что суспензию приготавливают по способу, включающему
приготовление смеси фибриногена и спирта;
приготовление смеси тромбина и спирта;
смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии,
причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм,
причем указанный способ нанесения покрытия включает в себя следующее:
доставку суспензии фибриногена, тромбина и спирта в место рядом с носителем;
нанесение указанной суспензии на покрываемую поверхность носителя.
22. Способ по п.21, отличающийся тем, что носителем является коллагеновый носитель.
23. Способ по п.22, отличающийся тем, что коллагеновый носитель является коллагеновой губкой.
24. Способ по п.23, отличающийся тем, что коллагеновая губка отвечает по крайней мере одному из следующих критериев:
значение pH: 5,0-6,0;
содержание молочной кислоты: не более 5%;
содержание аммония: не более 0,5%;
содержание растворимого белка, рассчитанного как содержание альбумина: не более 0,5%;
содержание зол сульфатов:не более 1,0%;
содержание тяжелых металлов: не более 20 млн-1;
микробиологическая чистота: не хуже 103 КОЕ/г;
содержание коллагена: 75-100%;
плотность: 1-10 мг/см3;
модуль упругости: 5-100 Н/см2.
25. Способ по п.23 или 24, отличающийся тем, что носителем является коллагеновая губка и указанная коллагеновая губка изготовлена по способу, включающему
приготовление геля коллагена;
добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена;
сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры;
отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или с камерами со средним диагональным размером 3 мм.
26. Способ по любому из пп.21-25, отличающийся тем, что суспензию на носитель наносят при окружающей температуре в пределах от 0 до 12шC.
27. Способ по п.26, отличающийся тем, что суспензию на носитель наносят при окружающей температуре в пределах от 1 до 10шC.
28. Способ по п.27, отличающийся тем, что суспензию на носитель наносят при окружающей температуре в пределах от 2 до 8шC.
29. Способ по любому из пп.21-28, отличающийся тем, что суспензию на носитель наносят при относительной влажности окружающей атмосферы в пределах 75-99%.
30. Способ по п.29, отличающийся тем, что суспензию на носитель наносят при относительной влажности окружающей атмосферы в пределах 85-95%.
31. Способ по любому из пп.21-30, отличающийся тем, что на 1 см2 покрываемой поверхности носителя наносят 0,08-0,12 мл суспензии.
32. Способ по любому из пп.21-31, отличающийся тем, что суспензию равномерно распределяют по данной ширине покрываемой поверхности так, чтобы масса фибриногена на единицу площади покрываемой поверхности не превышала 25%.
33. Способ по любому из пп.21-32, отличающийся тем, что для нанесения суспензии на носитель используют аппликатор, имеющий по крайней мере одну форсунку, причем струйный аппликатор под давлением подает суспензию через форсунку при перемещении носителя и форсунки относительно друг друга.
34. Способ по любому из пп.21-32, отличающийся тем, что для нанесения суспензии на носитель используют аппликатор с емкостью, имеющей несколько отдельных выпускных отверстий, в котором суспензия из емкости под давлением подается через выпускные отверстия на носитель.
35. Способ по п.34, отличающийся тем, что при нанесении суспензии на носитель последний и аппликатор перемещаются относительно друг друга в направлении транспортировки.
36. Способ по п.35, отличающийся тем, что скорость перемещения находится в пределах 0,025-0,05 м/с.
37. Способ по п.36, отличающийся тем, что скорость перемещения находится в пределах 0,03-0,04 м/с.
38. Способ по любому из пп.34-37, отличающийся тем, что расход суспензии, наносимой через аппликатор на носитель, находится в пределах 400-600 мл/мин.
39. Способ по п.38, отличающийся тем, что расход суспензии находится в пределах 470-550 мл/мин.
40. Способ по п.39, отличающийся тем, что расход суспензии находится в пределах 495-505 мл/мин.
41. Способ сушки покрытия, формируемого из суспензии фибриногена, тромбина и спирта, нанесенного на покрываемую поверхность носителя, причем указанная суспензия содержит частицы фибриногенр ш тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм, и указанный способ включает в себя стадию воздействия на носитель с нанесенным покрытием давления ниже 1000 мбар так, что получают высушенную покрываемую поверхность носителя и фиксацию высушенного покрытия на покрываемой поверхности.
42. Способ по п.41, отличающийся тем, что указанную суспензию получают следующим образом:
приготовление смеси фибриногена и спирта;
приготовление смеси тромбина и спирта;
смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии,
а носителем может быть коллагеновая губка, изготовленная по способу, включающему следующие стадии:
приготовление геля коллагена;
добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена;
сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры;
отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или с камерой со средним диагональным размером 3 мм,
и покрытие наносят на коллагеновую губку путем
доставки суспензии фибриногена, тромбина и спирта в место рядом с коллагеновой губкой;
нанесения указанной суспензии на покрываемую поверхность коллагеновой губки.
43. Способ по п.41 или 42, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, сушат при указанном давлении при температуре в пределах от 0 до 12шC.
44. Способ по п.43, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, сушат при указанном давлении при температуре в пределах от 1 до 10шC.
45. Способ по п.44, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, сушат при указанном давлении при температуре в пределах от 2 до 8шC.
46. Способ по любому из пп.41-45, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, сушат при указанном давлении при относительной влажности окружающей атмосферы в пределах 75-99%.
47. Способ по любому из пп.41-46, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, сушат при указанном давлении при относительной влажности окружающей атмосферы в пределах 85-95%.
48. Способ по любому из пп.41-47, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, обдувают потоком воздуха.
49. Способ по любому из пп.43-48, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, выдерживают при указанной температуре не менее 1 ч.
50. Способ по любому из пп.43-48, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, выдерживают при указанной температуре не менее 2 ч.
51. Способ по любому из пп.43-48, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, выдерживают при указанной температуре не менее 4 ч.
52. Способ по любому из пп.41-51, отличающийся тем, что площадь высушенной покрываемой поверхности составляет не менее 75% от площади этой поверхности во влажном состоянии.
53. Способ по любому из пп.41-51, отличающийся тем, что площадь высушенной покрываемой поверхности составляет не менее 80% от площади этой поверхности во влажном состоянии.
54. Способ по любому из пп.41-53, отличающийся тем, что содержание влаги в носителе и высушенной покрытой поверхности не превышает 12 вес.%.
55. Способ по любому из пп.41-53, отличающийся тем, что содержание влаги в носителе и высушенной покрытой поверхности не превышает 8 вес.%.
56. Способ по любому из пп.41-55, отличающийся тем, что указанная суспензия содержит также апротинин.
57. Коллагеновая губка с покрытием из фибриногена и тромбина, отличающаяся тем, что покрытую коллагеновую губку получают по способу, включающему следующие стадии:
изготовление коллагеновой губки по способу, который включает в себя следующее:
приготовление геля коллагена;
добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена;
сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры;
отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или с камерой со средним диагональным размером 3 мм;
нанесение суспензии фибриногена, тромбина и спирта на покрываемую поверхность коллагеновой губки, причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм, и
прикладывание к носителю с нанесенным покрытием давления ниже 1000 мбар так, что получают высушенную покрываемую поверхность носителя и фиксацию высушенного покрытия на покрываемой поверхности,
причем коллагеновая губка с нанесенным покрытием обладает по крайней мере одним из следующих свойств:
суспензия равномерно распределена по данной ширине покрываемой поверхности так, что масса фибриногена на единицу площади покрываемой поверхности не превышает 25%;
при встряхивании образца материала с нанесенным покрытием размерами 1x5 см в испытательной пробирке в аппарате для встряхивания Vibrofix при частоте вращения примерно 800-1200 об./мин в течение 2 мин истирание покрытия составляет менее 2,0 мг/см2.
58. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по п.57, отличающаяся тем, что суспензия имеет содержание влаги 20-80 мг/мл.
59. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по п.57, отличающаяся тем, что суспензия имеет содержание влаги 24-32 мг/мл.
60. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-59, отличающаяся тем, что содержание тромбина в суспензии равно 20-40 МЕ/мл.
61. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-59, отличающаяся тем, что содержание тромбина в суспензии равно 24-33 МЕ/мл.
62. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-61, отличающаяся тем, что содержание тромбина в покрываемой поверхности в среднем находится в пределах 2-4 МЕ/см2.
63. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-61, отличающаяся тем, что содержание тромбина в покрытой поверхности в среднем находится в пределах 2,3-3,3 МЕ/см2.
64. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-63, отличающаяся тем, что содержание тромбина в любом месте на покрытой поверхности не превышает 5 МЕ/см2.
65. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-63, отличающаяся тем, что содержание тромбина в любом месте на покрытой поверхности не превышает 3,8 МЕ/см2.
66. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-65, отличающаяся тем, что микробиологическая чистота носителя с нанесенным покрытием не более 4 КОЕ/см2.
67. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-65, отличающаяся тем, что микробиологическая чистота носителя с нанесенным покрытием не более 2,25 КОЕ/см2.
68. Применение коллагеновой губки с нанесенным покрытием для склеивания и закрытия тканей и гемостаза, причем коллагеновая губка имеет покрытие из фибриногена и тромбина, отличающееся тем, что коллагеновую губку с нанесенным покрытием получают по способу, включающему следующие стадии:
изготовление коллагеновой губки по способу, который включает в себя следующее:
приготовление геля коллагена;
добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена;
сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры;
отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или с камерой со средним диагональным размером 3 мм;
нанесение суспензии фибриногена, тромбина и спирта на покрываемую поверхность коллагеновой губки, причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм, и
прикладывание к носителю с нанесенным покрытием давления ниже 1000 мбар так, что получают высушенную покрываемую поверхность носителя ш фиксацию высушенного покрытия на покрываемой поверхности,
причем коллагеновая губка с нанесенным покрытием обладает по крайней мере одним из следующих свойств:
суспензия равномерно распределена по данной ширине покрываемой поверхности так, что масса фибриногена на единицу площади покрываемой поверхности не превышает 25%;
при встряхивании образца материала с нанесенным покрытием размерами 1x5 см в испытательной пробирке в аппарате для встряхивания Vibrofix при частоте вращения примерно 800-1200 об./мин в течение 2 мин истирание покрытия составляет менее 2,0 мг/см2.
Текст
006686 Область техники Изобретение относится к суспензии, содержащей фибриноген, тромбин, спирт и факультативно апротинин. Кроме того, изобретение относится к способу приготовления такой суспензии и способу покрытия носителя такой суспензией. Носителем может быть коллагеновый носитель, например коллагеновая губка. Далее изобретение относится к способу сушки носителя с нанесенным покрытием, в частности к коллагеновому носителю, покрытому предлагаемой суспензией, с получением таким способом коллагенового носителя с нанесенным покрытием, имеющим твердые активные субстанции, зафиксированные на носителе. Коллагеновый носитель с нанесенным покрытием можно применять в качестве готовой к применению абсорбируемой композиции для заклеивания тканей, закрытия тканей и остановки кровотечения(гемостаза), состоящей, по существу, из носителя, на котором зафиксировано покрытие из твердых компонент фибринового клея: фибриногена и тромбина. Такую фиксированную комбинацию можно наносить непосредственно, например, на поверхность раны. При контакте с кровью, общей водой организма или физиологическим раствором механизм этой системы имитирует завершающую стадию системы свертывания, на которой тромбин катализирует превращение фибриногена в фибрин и активацию фактора XIII в фактор XIIIa. Образовавшийся фактор XIIIa стабилизирует фибриновый сгусток ковалентным сшиванием. Как и при использовании любого двухкомпонентного клея, поверхность раны и носитель склеиваются за счет полимеризации. Во время этого процесса, который длится примерно 3-5 мин, предлагаемую композицию предпочтительно прижимают к поверхности раны. Компоненты предлагаемой композиции ферментативно разлагаются примерно в течение 4-6 месяцев после нанесения. Известные решения На рынке представлены фибриновые клеи, имитирующие завершающую стадию системы свертывания, состоящие из высококонцентрированного раствора фибриногена, который перед нанесением на хирургическую рану смешивают с раствором тромбина. Эти смеси содержат ингибиторы фибринолиза,например апротинин или -аминокапроновую кислоту, для предотвращения преждевременного растворения фибринового сгустка фибролизином (плазмином). Такие двухкомпонентные клеи обладают рядом преимуществ при использовании в различных хирургических процедурах, однако, при сильном кровотечении могут вымываться до того, как будет остановлено кровотечение. Далее для этих двухкомпонентных клеев требуются некоторые подготовительные действия, в том числе оттаивание или растворение. Поэтому они весьма непрактичны, работать с ними обременительно, и для успешного применения этих фибриновых клеев требуется опыт. За последнее десятилетие хирурги получили возможность выбирать из большого числа ранозаживляющих фибриновых клеев для ряда показаний. Однако в большинстве клинических испытаний с применением фибриновых клеев для улучшения кровоостанавливающих (гемостатических) и клеящих свойств дополнительно использовался коллаген, что свидетельствовало об их недостатках и ограниченных возможностях применения в хирургии. Коллаген используется в качестве кровоостанавливающего средства с конца шестидесятых годов. Коллаген является основным структурным белком у всех млекопитающих. Мономерный белок массой примерно 300 кДа (тропоколлаген) ковалентно сшит в специфических местах. Вследствие этого зрелый белок нерастворим и образует характерные фибриллы, которые обладают высокой прочностью на растяжение. Известны многочисленные подклассы коллагена, наиболее распространенным из которых является коллаген типа I - основной тип коллагена, содержащегося в коже, костной ткани, сухожилиях и роговице. Коллаген - это белок белых (коллагеновых) волокон, состоящий из тройной спирали длиной примерно 290 нм. Пять таких тройных спиралей (молекул тропоколлагена) расположены в шахматном порядке и образуют микрофибриллу диаметром примерно 3,6 нм. Эти микрофибриллы имеют полярные и неполярные сегменты, которые легко вступают в специфические меж- и внутрифибриллярных взаимодействия. Микрофибриллы упакованы в тетрагональную решетку и образуют субфибриллы диаметром примерно 30 нм. Эти субфибриллы затем собираются в коллагеновую фибриллу, основную единицу соединительной ткани, имеющую диаметр несколько сотен нанометров и наблюдаемую через оптический микроскоп в виде тонкой линии. Коллаген можно применять в качестве материала для закрытия ран, возможно с покрытием, содержащим фибриновый клей. Фибриновые клеи, которые представляют из себя комбинации фибриногена,тромбина и апротинина, в течение многих лет находят успешное терапевтическое применение для склеивания тканей и нервных волокон и для закрытия поверхностей при слабом кровотечении. Одним из недостатков фибриновых клеев является то, что в случае сильного кровотечения клей обычно смывается до того, как произойдет достаточная полимеризация фибрина. Для устранения этого недостатка хирурги начали вручную наносить жидкие фибриновые клеи на абсорбируемые носители, например на пучок коллагеновых волокон. Несмотря на впечатляющий успех этого совместного применения, этот метод до сих пор в широких масштабах не применяется, что обусловлено некоторыми его недостатками. Так, приготовление препарата относительно обременительно, для применения метода требуется опытный и квалифицированный-1 006686 персонал, и в экстренных случаях препарат невозможно применить немедленно, т.к. для его приготовления требуется 10-15 мин. Указанные факторы стимулировали разработку фиксированной комбинации коллагенового носителя с покрытием из твердого фибриногена, твердого тромбина и твердого апротинина, известной из ЕР 0 059 265. Функция коллагенового носителя описана в ЕР 0 059 265 и заключается, главным образом в том, чтобы абсорбировать коагулирующий препарат, которым он покрыт, и придать ему механическую устойчивость. Продукт, сочетающий в себе кровоостанавливающие свойства фибринового клея с преимуществами коллагена как носителя, разработан и выпускается под товарным знаком TachoComb. TachoComb - это готовая к использованию и легкая для применения комбинация коллагеновой заплатки, покрытой следующими активными компонентами фибринового клея: фибриноген человека, бычий тромбин и бычий апротинин.TachoComb продается с начала 1990-х годов компанией Nycomed Pharma и прошел клинические испытания в Европе на более чем 2500 больных. Кроме того, продукт прошел программу клинических испытаний в Японии на более чем 700 больных с самыми разными показаниями, например, при резекции печени и легкого, операциях желчного тракта, в хирургии селезенки, почек и панкреатическая хирургия,в хирургии уха, горла, носа, при оперативной гинекологии и в сердечно-сосудистой хирургии. TachoComb был признан эффективным и безопасным. В ходе проведенных клинических испытаний никаких клинических осложнений, связанных с применением TachoComb, отмечено не было. В WO 97/37694 (компания Immuno France S.A.) описан пример 4, когда при использовании коллагенового продукта TachoComb не удалось остановить кровотечение, что привело к смерти от потери крови, в отличие от остановки кровотечения в течение 5 мин, когда использовался коллагеновый продукт, не содержавший тромбина и приготовленный в соответствии с WO 97/37694. В WO 94/40033 подчеркиваются недостатки бычьего тромбина, используемого в TachoComb. Они заключаются в том, что использование бычьего тромбина и тромбина других видов скота может привести к занесению опасного вирусного загрязнения и возможному переносу болезней коров, например губчатой энцефалопатии коров. В патенте США US 6 177 162 В 1 описаны устройство и способ для получения материала для закрытия и заживления ран. Это устройство содержит емкость, в нижней части которой размещены две подвижные относительно друг друга с перфорированные пластины, и находящаяся в указанной емкости суспензия капает на носитель, который перемещается относительно емкости под ее нижней частью. Описание изобретения Задачей изобретения является создание усовершенствованной суспензии, которая может быть применена, например, в качестве покрытия для коллагенового носителя с получением готовой к применению абсорбируемой композиции для заклеивания и закрытия тканей и остановки кровотечения. Еще одной задачей изобретения является создание способа приготовления такой суспензии. Кроме того, задачей изобретения является создание усовершенствованного способа покрытия носителя, например коллагенового носителя, суспензией, содержащей фибриноген и тромбин. Еще одной задачей изобретения является создание способа сушки влажного покрытия из суспензии, нанесенного на носитель, для обеспечения надежной фиксации покрытия на носителе. Кроме того, задачей изобретения является создание покрытой коллагеновой губки с покрытием из фибриногена и тромбина, которая эффективно имитирует заключительную стадию системы свертывания при контакте покрытой коллагеновой губки с кровью, общей водой организма или физиологическим раствором. Далее задачей изобретения является создание покрытой коллагеновой губки с указанным покрытием, имеющим достаточную фиксацию покрытия на коллагеновой губке, а именно, удовлетворительную устойчивость к истиранию покрытия при механическом воздействии. В соответствии с первой задачей изобретения предлагается суспензия, содержащая фибриноген,тромбин и спирт, причем способ, которым указанную суспензию получают, включает в себя следующее: приготовление смеси фибриногена и спирта; приготовление смеси тромбина и спирта; смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии, причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по FolkWard в пределах 25-100 мкм, например 35-80 мкм, 40-78 мкм, 40-75 мкм, 45-60 мкм, 47-55 мкм или, например, в пределах 60-100 мкм, например 60-80 мкм, 65-75 мкм, предпочтительно с отклонением в пределах 5 мкм, например 4 мкм, 3,5 мкм,2 мкм, 1,5 мкм,1 мкм,0,8 мкм,0,6 мкм,0,5 мкм. Установлено, что такая суспензия, будучи нанесенной на носитель, например коллагеновый носитель,является эффективной в готовой к применению абсорбируемой композиции для заклеивания тканей, закрытия тканей и остановки кровотечения. Указанная суспензия может факультативно содержать апротинин, добавленный в фибриногеновую смесь в виде концентрированного водного раствора. В качестве красителя можно добавлять рибофлавин с таким расчетом, чтобы суспензию, нанесенную на носитель и высушенную, можно было легко идентифицировать.-2 006686 Учитывая физические свойства суспензии, особенно ее поведение с точки зрения оседания довольно крупных частиц в спирте, то применить какой-либо стандартный показатель жидкостной вязкости суспензии невозможно. В связи с этим испльзован альтернативный способ обеспечения показателя вязкости. По этому способу суспензия может обладать такой вязкостью, что 90-120 мл суспензии только под действием силы тяжести вытекают через нижнее отверстие емкости, имеющей цилиндрическую часть с внутренним диаметром 40-50 мм, внутреннюю длину 55-65 мм и коническую нижнюю часть высотой 17-23 мм с нижним отверстием на нижнем конце указанной конической части в виде круглого отверстия диаметром 2-3 мм,за 25-75 с. Если емкость стальная, то емкость и отверстия имеют следующие размеры: внутренний диаметр цилиндрической части: 46 мм; внутренняя высота цилиндрической части: 60 мм; внутренняя высота конического дна: 20,5 мм; внутренний диаметр нижнего отверстия: 2,6 мм; длина канала, соединенного с нижним отверстием: 9 мм, или если емкость пластмассовая, то емкость и отверстия имеют следующие размеры: внутренний диаметр цилиндрической части: 50 мм; внутренняя высота цилиндрической части: 41 мм; внутренняя высота конического дна: 24 мм; внутренний диаметр нижнего отверстия: 2,5 мм; длина канала, соединенного с нижним отверстием: менее 5 мм. Указанное время вытекания суспензии может быть в пределах 25-60 с, например 25-50, 30-50, 3244, 34-38 с. Параметры и отличительные признаки суспензии, описываемой ниже в связи со вторым способом в соответствии со второй задачей изобретения, относятся и к суспензии в соответствии с первой задачей изобретения. В соответствии со второй задачей изобретения предлагается способ приготовления суспензии фибриногена и тромбина, который включает следующее: приготовление смеси фибриногена и спирта; приготовление смеси тромбина и спирта; смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии,причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм. Параметры и отличительные признаки, описанные выше в связи с суспензией в соответствии с первой задачей изобретения, относятся и к способу в соответствии со второй задачей изобретения. На стадии приготовления смеси фибриногена соответствующим способом, например пропусканием через сито, можно предварительно отобрать мелкие частицы фибриногена диаметром по Folk Ward в пределах 25-100 мкм. Кроме того, на стадии приготовления указанной смеси фибриноген можно непосредственно гомогенизировать в спирте, предпочтительно при температуре в пределах 0-12 С, например в пределах 2-8 С. При гомогенизации температуру можно понизить. Стадию смешивания смеси фибриногена и смеси тромбина можно осуществлять при перемешиванием суспензии, причем перемешивать можно при температуре в пределах 0-12 С, например в пределах 2-8 С. Тромбин может быть человеческим, бычьим или рекомбинантным, а фибриноген может быть человеческим или рекомбинантным. Спирт может органическим, например метиловым, этиловым, пропиловым, изопропиловым, например безводным органическим спиртом, безводным этиловым, безводным пропиловым или безводным изопропиловым спиртом. Фибриноген человека может поставляться лиофилизированным в твердой форме. В соответствии с третьей задачей изобретения предлагается способ нанесения на носитель покрытия из суспензии, содержащей фибриноген и тромбин, отличающийся тем, что суспензию приготавливают по способу, который включает в себя следующее: приготовление смеси фибриногена и спирта; приготовление смеси тромбина и спирта; смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии,причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм,причем указанный способ нанесения покрытия включает в себя следующее: доставку суспензии фибриногена, тромбина и спирта в место рядом с носителем; нанесение указанной суспензии на покрываемую поверхность носителя. Носителем может быть коллагеновый носитель, например коллагеновая губка. Коллагеновая губка может отвечать по крайней мере одному, но предпочтительно нескольким из следующих критериев: значение рН: 5,0-6,0;-3 006686 содержание молочной кислоты: не более 5%; содержание аммония: не более 0,5%; содержание растворимого белка, рассчитанного как содержание альбумина: не более 0,5%; содержание зол сульфатов: не более 1,0%; содержание тяжелых металлов: не более 20 млн-1; микробиологическая чистота: не более 103 КОЕ/г; содержание коллагена: 75-100%; плотность: 1-10 мг/см 3; модуль упругости: 5-100 Н/см 2. Коллагеновую губку можно изготовить по способу, состоящему из следующих стадий: приготовление геля коллагена; добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена; сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющегося внутри камеры; отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или имеющих диаметр камер в среднем не более 3 мм. В данном контексте термин "диаметр камеры" следует понимать как наибольшее расстояние по прямой между стенками камеры, т.е. наибольшее диагональное расстояние камеры по прямой. Камеры могут иметь многоугольную форму, например восьмиугольную. Установлено, что при диаметре камер более 0,75 мм и менее 4 мм или диаметре камер в среднем не более 3 мм коллагеновая губка особенно подходит для ее покрытия препаратом суспензии, содержащей фибриноген и тромбин. Установлено также, что коллагеновая губка с нанесенным покрытием, изготовленная указанным способом, является воздухо- и влагонепроницаемой в том смысле, что, будучи приложенной к ране, не позволяет воздуху или жидкости просачиваться через коллагеновую губку. Суспензию можно наносить на носитель при окружающей температуре в пределах 0-12 С, например 1-10 С, 2-8 С. Далее суспензию можно наносить на носитель при относительной влажности окружающей атмосферы в пределах 75-99%, например 75-99%, 85-95%. В предпочтительном варианте осуществления на 1 см 2 покрываемой поверхности наносят 0,08-0,12 мл суспензии. Для того чтобы обеспечить одинаковую эффективность готового носителя с нанесенным покрытием по всей поверхности, суспензию предпочтительно равномерно распределять по данной ширине покрываемой поверхности с таким расчетом, чтобы масса фибриногена на единицу площади покрываемой поверхности не превышала 25%,например не превышала 20, 15, 10%. Для нанесения суспензии на носитель можно использовать аппликатор, имеющий по крайней мере одну форсунку. Струйный аппликатор под давлением подает суспензию через форсунку при перемещении носителя и форсунки относительно друг друга. Аппликатор может содержать ленточный конвейер,устройство для перемешивания, соединенное с насосом или системой насосов или иным подающим оборудованием, или его можно размещать рядом с ними, и форсунку или систему форсунок, которые перемещаются в поперечном направлении, например под прямым углом к ленточному конвейеру. В зависимости от конкретных характеристик среды форсунка или система форсунок могут иметь различные формы и размеры. Форсунку или систему форсунок можно трубками подключить к подающему оборудованию. Подающее оборудование может обеспечивать подачу среды покрытия из устройства для перемешивания в системы форсунок. В процессе нанесения покрытия систему форсунок можно перемещать поперек носителя. В положении ожидания ее можно держать сбоку от ленточного конвейера. Процесс нанесения покрытия можно запускать по сигналу светового датчика, который обнаруживает присутствие носителя на ленте конвейера, и точно так же можно останавливать по сигналу светового датчика. Такой аппликатор обеспечивает относительно малое мертвое пространство, с ним легко обращаться и легко чистить. Далее, он обеспечивает возможность в любой момент прервать процесс нанесения покрытия, им можно пользоваться в относительно широком диапазоне значений вязкости, и он обеспечивает однородное покрытие. В качестве альтернативы вышеуказанному способу или как дополнение к нему, для нанесения суспензии на носитель можно использовать аппликатор с емкостью, которая имеет несколько отдельных выпускных отверстий и суспензия из емкости под давлением подается через выпускные отверстия на носитель. Последний тип аппликатора в виде емкости с несколькими подвижными пластинами на его дне описан в патенте США 6 177 126 81, который настоящим полностью включается в данное описание путем ссылки. Учитывая равномерное распределение, обеспечиваемое устройствами по патенту США 6177126 В 1, одно из этих устройств применяется в предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения. При нанесении суспензии на носитель последний и аппликатор предпочтительно перемщаются относительно друг друга в направлении подачи, и при этом скорость движения может быть в пределах 0,025-0,05 м/с, например 0,03-0,04 м/с. Расход суспензии, наносимой через аппликатор на носитель, может быть в пределах 400-600 мл/мин, например 470-550, 495-505 мл/мин. В соответствии с четвертой задачей изобретение относится к способу сушки суспензии фибриногена, тромбина и спирта, нанесенной как влажное покрытие на покрываемую поверхность носителя. Ука-4 006686 занный способ включает в себя стадию воздествия на носитель с нанесенным покрытием давлением ниже 1000 мбар для получения высушенной покрываемой поверхности носителя и фиксации высушенного покрытия на покрываемой поверхности. При использовании для сушки вакуума можно поддерживать низкую температуру (2-10 С) и высокую относительную влажность (80-95%), благодаря чему можно обеспечить сохранность структуры и физических свойств носителя, в частности носителя в виде коллагена, например коллагеновой губки, а также фибриногена и тромбина. Суспензию можно получить путем приготовления смеси фибриногена и спирта; приготовления смеси тромбина и спирта; смешивания смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии,а носителем может быть коллагеновая губка, изготовленная по способу, состоящему из следующих стадий: приготовление геля коллагена; добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена; сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры; отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или с камерой со средним диагональным размером 3 мм,а покрытие можно наносить на коллагеновую губку путем доставки суспензии фибриногена, тромбина и спирта в место рядом с коллагеновой губкой; нанесения указанной суспензии на покрываемую поверхность коллагеновой губки. Способы изготовления коллагеновой губки и приготовления суспензии рассмотрены выше в связи со способами в соответствии со второй и третьей задачами изобретения. Носитель с нанесенным покрытием можно сушить при указанном давлении при температуре в пределах 0-12 С, например 1-10 С, 2-8 С и (или) относительной влажности окружающей атмосферы в пределах 75-99%, например 85-95%. При сушке носитель с нанесенным покрытием можно обдувать потоком воздуха для отвода пара от носителя. Для завершения сушки носитель с нанесенным покрытием предпочтительно выдерживают при указанных условиях не менее 1 ч, например не менее 2 ч, не менее 4 ч. Из-за усадки площадь высушенной покрываемой поверхности меньше, чем площадь влажной покрываемой поверхности. В предлагаемом способе площадь высушенной покрываемой поверхности составляет не менее 75% от площади во влажном состоянии, например не менее 80%. Для обеспечения устойчивости активных компонентов при хранении носителя с нанесенным покрытием содержание влаги в носителе и высушенной покрытой поверхности предпочтительно не превышает 12% по весу, например не превышает 8% по весу. Любые параметры и отличительные признаки суспензии и коллагеновой губки, в том числе способы их приготовления и изготовления, рассмотренные в связи с другими задачами изобретения, относятся и к способу в соответствии с четвертой задачей изобретения. В соответствии с пятой задачей изобретения предлагается покрытая коллагеновая губка с покрытием из фибриногена и тромбина, отличающаяся тем, что покрытую коллагеновую губку изготавливают по способу, включающему следующие стадии: изготовление коллагеновой губки по способу, который включает в себя следующее: приготовление геля коллагена; добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена; сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры; отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или с камерами со средним диагональным размером 3 мм; нанесение суспензии фибриногена, тромбина и спирта на покрываемую поверхность коллагеновой губки, и прикладывание к носителю с нанесенным покрытием давления ниже 1000 мбар с таким расчетом,чтобы получить высушенную покрываемую поверхность носителя и фиксацию высушенного покрытия на покрываемой поверхности, причем коллагеновая губка с нанесенным покрытием обладает по крайней мере одним из следующих свойств: суспензия равномерно распределена по данной ширине покрываемой поверхности так, что масса фибриногена на единицу площади покрываемой поверхности не превышает 25%; при встряхивании образца материала с нанесенным покрытием в аппарате для встряхивания Vibrofix при частоте вращения примерно 800-1200 об./мин в течение 2 мин истирание покрытия составляет менее 2,0 мг/см 2. Равномерное распределение суспензии по покрываемой поверхности повышает эффективность указанной поверхности при ее применении, например, для склеивания и закрытия тканей или гемотаза. Благодаря низкой истираемости покрытия коллагеновую губку с нанесенным покрытием можно переносить,хирург может брать ее руками и (или) хирургическим инструментом и иным образом, манипулировать ею без повреждения высушенной суспензии, т.е. покрытия. Содержание состава фибриногена может со-5 006686 ставлять примерно 60-90% от общего веса коллагеновой губки с нанесенным покрытием. Указанный состав обычно содержит примерно 50-60% по весу следующих субстанций: соли, аминокислоты и альбумин. Содержание самого фибриногена в составе обычно 40-50%. Содержание влаги в суспензии предпочтительно находится в пределах 20-80 мг/мл, например 24-32 мг/мл. Содержание тромбина может быть в пределах 20-40 МЕ/мл, например 24-33 МЕ/мл. В среднем, содержание тромбина после нанесения покрытия может быть в пределах 2-41 МЕ/см 2, например 2,3-3,3 МЕ/см 2. Может оказаться желательным, чтобы содержание тромбина в любом месте на покрытой поверхности не превышало 5 МЕ/см 2 или чтобы не превышало 3,8 МЕ/см 2 в любом месте на указанной поверхности. Микробиологическая чистота носителя с нанесенным покрытием предпочтительно не хуже 4 КОЕ/см 2, например не хуже 2,25 КОЕ/см 2. В еще одном независимом аспекте изобретение относится к применению указанной коллагеновой губки с нанесенным покрытием для склеивания и закрытия тканей и гемостаза. Краткое описание графического материала На фиг. 1-7 показаны различные носители с нанесенным покрытием и инструментарий для их применения, как описано в примере VIII. Фиг. 8 представляет собой блок-схему, иллюстрирующую цепочку операций от приготовления суспензии до упаковки коллагеновой губки с нанесенным покрытием. Фиг. 9 иллюстрирует устройства, используемые для получения показателя для вязкости суспензии. Фиг. 10 и 11 представляют собой блок-схему, иллюстрирующую процесс изготовления коллагеновой губки. Подробное описание графического материала Ниже приводится описание предпочтительных вариантов осуществления предлагаемых способов и продуктов (см. также фиг. 8). Суспензию, содержащую фибриноген, тромбин и спирт, можно приготовить по предлагаемому способу приготовления суспензии, а именно: фибриноген гомогенизируют в 100%-ном этиловом спирте при 2-8 С и получают смесь фибриногена и спирта, причем указанная смесь составляет примерно 80% окончательного объема суспензии. Затем добавляют рибофлавин. После этого смесь перемешивают в закрытом сосуде до дальнейшей операции. Тромбин человека или бычий тромбин разбавляют водой для инъекций. Полученный раствор при 08 С добавляют в 35-кратный объем 100%-ного этилового спирта. Полученную таким образом суспензию тромбина в течение 80-100 с гомогенизируют при 0-8 С. Перед тем как смешать смеси фибриногена и тромбина, в смесь фибриногена добавляют раствор апротинина и воду для инъекций. Затем в смесь фибриногена добавляют смесь тромбина. Добавлением 100%-ного этилового спирта объем суспензии доводят до окончательной кондиции. Способы, включающие в себя описанные выше стадии, далее по тексту именуются "способами группы I". Как альтернатива, способ приготовления предлагаемой суспензии, содержащей фибриноген, тромбин и спирт, состоит из следующих стадий. Смесь фибриногена получают добавлением при перемешивании предварительно отобранных мелких частиц фибриногена со средним диаметром по Folk Ward в пределах 35-80 мкм и рибофлавина в 9497%-ный этиловый спирт при 2-8 С. Полученная таким способом смесь рибофлавина и этилового спирта составляет примерно 70-80% окончательного объема суспензии. После этого смесь фибриногена перемешивают в закрытом сосуде до дальнейшей операции. Смесь тромбина получают добавлением тромбина в 94-97%-ный этиловый спирт при -30 С. Полученную смесь тромбина гомогенизируют в течение 80-100 с. В другом варианте осуществления смесь тромбина получают растворением тромбина в воде для инъекций, после чего полученный раствор тромбина медленно добавляют в 35-кратный объем 100%-ного этилового спирта при -30 С. Полученную суспензию гомогенизируют в течение 80-100 с. В качестве оборудования для гомогенизации можно использовать UptraTurrax компании IKA. Смесь тромбина добавляют в смесь, содержащую фибриноген и рибофлавин. Затем добавляют 9497%-ный этиловый спирт при 2-8 С. Способы, включающие в себя описанные выше стадии, далее по тексту именуются "способами группы II". Способами группы I и группы II можно получить предлагаемую суспензию, предпочтительно со следующими характеристиками: содержание этилового спирта: 94-97%; время вытекания, измеренное устройством, показанным слева на фиг. 9: 31,5-48 с; характеристики осаждения (объем твердых частиц в процентах к общему объему): через 5 мин после начала испытания: более 85%; через 24 ч после начала испытания: 50-80%; размер частиц: средний диаметр по Folk Ward 35-80 мкм.-6 006686 В одном из предпочтительных вариантов осуществления способа сушки полоски коллагеновой губки перед нанесением покрытия на носитель в виде коллагеновой губки инкубируют при 2-8 С и относительной влажности 80-91% в течение 2-30 ч. Аппликатор для нанесения суспензии на коллагеновую губку описан выше. Полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием в течение 8-60 мин инкубируют при 2-8 С и относительной влажности 80-90%. Затем полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием сушат в вакуумной сушильной камере при температуре воздуха 2-8 С и относительной влажности 80-90%. При этом через дыхательный клапан над полосками коллагена пропускают поток воздуха с расходом 1,2-40 м 3/ч. Создают вакуум 30-60 мбар, т.е. абсолютное давление примерно 970 мбар, в зависимости от атмосферного давления, и полоски коллагена с нанесенным покрытием сушат 2-5 ч. Заданную вязкость суспензии получают с помощью одного из устройств, показанных на фиг. 9 и описанных выше. Устройство, показанное слева на фиг. 9, выполнено из стали, при этом емкость и нижнее отверстие имеют следующие размеры: внутренний диаметр цилиндрической части: 46 мм; внутренняя высота цилиндрической части: 60 мм; внутренняя высота конического дна: 20,5 мм; внутренний диаметр нижнего отверстия: 2,6 мм; длина канала, соединенного с нижним отверстием: 9 мм. Устройство, показанное справа на фиг. 9, выполнено из пластмассы, а емкость и нижнее отверстие имеют следующие размеры: внутренний диаметр цилиндрической части: 50 мм; внутренняя высота цилиндрической части: 41 мм; внутренняя высота конического дна: 24 мм; внутренний диаметр нижнего отверстия: 2,5 мм; длина канала, соединенного с нижним отверстием: менее 5 мм. Исходные материалы фибриногена Приведенные ниже примеры I-VI иллюстрируют разные процедуры изготовления покрытой коллагеновой губки с предлагаемым покрытием из фибриногена и тромбина. Указанные процедуры включают в себя предлагаемые способы приготовления суспензии, которые дают в результате в описанных ниже-7 006686 вариантах осуществления предлагаемые суспензии. В этих примерах применяют предлагаемые способы нанесения покрытия и сушки. Пример I. В этом примере суспензия содержит фибриноген человека состава В и тромбин человека состава В. Окончательный объем суспензии 3500 мл получили по способу группы II с использованием следующих количеств и параметров: Смесь фибриногена: 2800 мл этилового спирта (94% при 2-8 С); 492,5 г мелкого фибриногена человека состава В; 493,5 мг рибофлавина. Смесь фибриногена хранили в течение 20 ч при 2-8 С при помешивании. Смесь тромбина: 100 мл этилового спирта (100% при -30 С); 12,27 г тромбина человека состава В. Смесь тромбина хранили в течение 18 ч при -30 С. Суспензия: к смеси фибриногена добавили 157 мл смеси тромбина; добавкой 94%-ного этилового спирта при 2-8 С объем суспензии довели до окончательного объема 3500 мл. Характеристики суспензии: 1. Концентрация этилового спирта: 94,3%. 2. Время вытекания, измеренное у стального устройства, показанного слева на фиг. 9: 36,5 с. 3. Осаждение: а) объем осаждения через 5 мин после начала: 98% испытательного объема; б) объем осаждения через 24 ч после начала: 64% испытательного объема. 4. Размер частиц (средний диаметр по Folk Ward): 56,5 1,3 мкм. На носители в виде полосок коллагена суспензией нанесли покрытие. Вначале предварительно инкубировали 48 полосок коллагеновой губки в охладительной камере при следующих условиях: температура: 5,2 С; абсолютная влажность: 4,8 г воды на кг воздуха; время инкубации: 18,5 ч. Для покрытия полосок коллагеновой губки суспензией использовали аппликатор, описанный в патенте США 6 177 126 В 1. Полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием высушили следующим образом. Полоски с нанесенным покрытием инкубировали в течение 15 мин при температуре 5,2 С и абсолютной влажности 4,8 г воды на кг воздуха. Затем полоски с нанесенным покрытием высушили в вакуумной сушильной камере при следующих условиях сушки: воздух: температура 5,2 С, абсолютная влажность 4,8 г воды на кг воздуха; расход воздуха через дыхательный клапан: 23 м 3/ч; вакуум: 59 мбар; время сушки: 4 ч. Истирание полученного покрытия на полосках коллагеновой губки при встряхивании образца размером 1 х 5 см в испытательной пробирке в аппарате для встряхивания Vibrofix при частоте вращения 800-1200 об/мин в течение 2 мин составило примерно 0,2 мг/см 2. Пример II. В этом примере суспензия содержит фибриноген человека состава С и тромбин человека состава С. Окончательный объем суспензии 3500 мл получили по способу группы II с использованием следующих количеств и параметров: Смесь фибриногена: 2252 мл этилового спирта (94% при 2-8 С); 370,7 г мелкого фибриногена человека состава С; 493,5 мг рибофлавина. Смесь фибриногена хранили в течение 20 ч при 2-8 С при помешивании. Смесь тромбина: 188 мл этилового спирта (100% при -30 С); 12 пузырьков тромбина человека состава С (10650 МЕ/пузырек)/12 мл воды для инъекций. Смесь тромбина хранили в течение 18 ч при -30 С. Суспензия: к смеси фибриногена добавили 164,5 мл смеси тромбина; добавкой 94%-ного этилового спирта при 2-8 С объем суспензии довели до окончательного объема 3500 мл.-8 006686 Характеристики суспензии: 1. Концентрация этилового спирта: 94,1%. 2. Время вытекания, измеренное у стального устройства, показанного на фиг. 9: 32,8 с. 3. Осаждение: а) объем осаждения через 5 мин после начала: 94% испытательного объема; б) объем осаждения через 24 ч после начала: 71% испытательного объема. 4. Размер частиц (средний диаметр по Folk Ward): 49,20,93 мкм. На носители в виде полосок коллагена суспензией нанесли покрытие. Вначале предварительно инкубировали 48 полосок коллагеновой губки в охладительной камере при следующих условиях: температура: 4,8 С; относительная влажность: 90,3%; время инкубации: 22,25 ч. Для покрытия полосок коллагеновой губки суспензией использовали аппликатор, описанный в патенте США 6 177 126 В 1. Полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием высушили следующим образом: Полоски с нанесенным покрытием инкубировали в течение 13 мин при температуре 4,9 С и абсолютной влажности 4,8 г воды на кг воздуха. Затем полоски с нанесенным покрытием высушили в вакуумной сушильной камере при следующих условиях сушки: воздух: температура 5,2 С, абсолютная влажность 4,9 г воды на кг воздуха; расход воздуха через дыхательный клапан: 25 м 3/ч; вакуум: 60 мбар; время сушки: 4 ч. Истирание полученного покрытия на полосках коллагеновой губки при встряхивании образца размером 1 х 5 см в испытательной пробирке в аппарате для встряхивания Vibrofix при частоте вращения примерно 800-1200 об./мин в течение 2 мин составило примерно 0,3 мг/см 2. Пример III. В этом примере суспензия содержит фибриноген человека состава В и тромбин человека состава В и апротинин. Окончательный объем суспензии 1000 мл получили по способу группы II с использованием следующих количеств и параметров: Смесь фибриногена: 820 мл этилового спирта (100% при 2-8 С), 39,4 мл воды для инъекций и 10,6 мл апротинина; 90,67 г мелкого фибриногена человека состава В; 141 мг рибофлавина. Смесь фибриногена хранили в течение 20 ч при 2-8 С при помешивании. Смесь тромбина: 50 мл этилового спирта (100% при -30 С); 3,75 г тромбина человека состава В. Смесь тромбина хранили в течение 16 ч при -30 С. Суспензия: к смеси фибриногена добавили весь объем смеси тромбина; добавкой 100%-ного этилового спирта при 2-8 С объем суспензии довели до окончательного объема 1000 мл. Характеристики суспензии: 1. Концентрация этилового спирта: 95%. 2. Время вытекания, измеренное у пластмассового устройства, показанного справа на фиг. 9: 35 с. 3. Осаждение: а) объем осаждения через 5 мин после начала: 89% испытательного объема; б) объем осаждения через 24 ч после начала: 76% испытательного объема. 4. Размер частиц (средний диаметр по Folk Ward): 74,43,5 мкм. На носители в виде полосок коллагена суспензией нанесли покрытие. Вначале предварительно инкубировали 16 полосок коллагеновой губки в охладительной камере при следующих условиях: температура: 5,0 С; относительная влажность: 85%; время инкубации: 17 ч. Для покрытия полосок коллагеновой губки суспензией использовали аппликатор, описанный в патенте США 6 177 126 В 1. Полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием высушили следующим образом: Полоски с нанесенным покрытием инкубировали в течение 35 мин при температуре 5 С и относительной влажности 85%. Затем полоски с нанесенным покрытием высушили в вакуумной сушильной камере при следующих условиях сушки:-9 006686 воздух: температура 5 С, относительная влажность 85%; расход воздуха через дыхательный клапан: 1,2 м 3/ч; вакуум: 35 мбар; время сушки: 4 ч. Истирание полученного покрытия на полосках коллагеновой губки при встряхивании образца размером 1 х 5 см в испытательной пробирке в аппарате для встряхивания Vibrofix при частоте вращения примерно 800-1200 об./мин в течение 2 мин составило примерно 0,2 мг/см 2. Пример IV. В этом примере суспензия содержит фибриноген человека состава С и тромбин человека состава С. Окончательный объем суспензии 780 мл получили по способу группы II с использованием следующих количеств и параметров: Смесь фибриногена: 700 мл этилового спирта (94% при 2-8 С); 84,42 г мелкого фибриногена человека состава С; 110 мг рибофлавина. Смесь фибриногена хранили в течение 20 ч при 2-8 С при помешивании. Смесь тромбина: 35 мл этилового спирта (100% при -30 С); 0,54 г тромбина человека состава С. Смесь тромбина хранили в течение 16 ч при -30 С. Суспензия: к смеси фибриногена добавили 23,0 мл смеси тромбина; добавкой 100%-ного этилового спирта при 2-8 С объем суспензии довели до окончательного объема 780 мл. Характеристики суспензии: 1. Концентрация этилового спирта: 94%. 2. Время вытекания, измеренное у пластмассового устройства, показанного справа на фиг. 9: 33,5 с. 2. Осаждение: а) объем осаждения через 5 мин после начала: 92% испытательного объема; б) объем осаждения через 24 ч после начала: 72% испытательного объема. 3. Размер частиц (средний диаметр по Folk Ward): 60,50,5 мкм. На носители в виде полосок коллагена суспензией нанесли покрытие. Вначале предварительно инкубировали 8 полосок коллагеновой губки в охладительной камере при следующих условиях: температура: 6,0 С; относительная влажность: 85%; время инкубации: 18,5 ч. Для покрытия полосок коллагеновой губки суспензией использовали аппликатор, описанный в патенте США 6 177 126 В 1. Полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием высушили следующим образом. Полоски с нанесенным покрытием инкубировали в течение 45 мин при температуре 5 С и относительной влажности 85%. Затем полоски с нанесенным покрытием высушили в вакуумной сушильной камере при следующих условиях сушки: воздух: температура 5 С, относительная влажность 85%; расход воздуха через дыхательный клапан: 1,2 м 3/ч; вакуум: 35 мбар; время сушки: 4 ч. Истирание полученного покрытия на полосках коллагеновой губки при встряхивании образца размером 1 х 5 см в испытательной пробирке в аппарате для встряхивания Vibrofix при частоте вращения примерно 800-1200 об./мин в течение 2 мин составило примерно 0,3 мг/см 2. Пример V. В этом примере суспензия содержит фибриноген человека состава А и тромбин человека состава А. Окончательный объем суспензии 3120 мл получили по способу группы I с использованием следующих количеств и параметров. Смесь фибриногена: 2540 мл этилового спирта (100% при 2-8 С); 311,6 г фибриногена человека состава А; 440 мг рибофлавина. Смесь фибриногена хранили в течение 18 ч при 2-8 С при помешивании. Смесь тромбина: 210 мл этилового спирта (100% при -30 С); 229 г тромбина человека состава А.-10 006686 Суспензия: к смеси фибриногена добавили 87,3 мл воды для инъекций; к смеси фибриногена добавили смесь тромбина; добавкой 100%-ного этилового спирта при 2-8 С объем суспензии довели до окончательного. Характеристики суспензии: 1. Концентрация этилового спирта: 97%. 2. Время вытекания, измеренное у стального устройства, показанного слева на фиг. 9: 40,8 с. 3. Осаждение: а) объем осаждения через 5 мин после начала: 95,6% испытательного объема; б) объем осаждения через 24 ч после начала: 63,5% испытательного объема. 4. Размер частиц (средний диаметр по Folk Ward): 51,80,8 мкм. На носители в виде полосок коллагена суспензией нанесли покрытие. Вначале предварительно инкубировали 48 полосок коллагеновой губки в охладительной камере при следующих условиях: температура: 6,5 С; относительная влажность: 90%; время инкубации: 22,5 ч. Для покрытия полосок коллагеновой губки суспензией использовали аппликатор, раскрытый в патенте США 6 177 126 В 1. Полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием высушили следующим образом: Полоски с нанесенным покрытием инкубировали в течение 10 мин при температуре 6,5 С и относительной влажности 90%. Затем полоски с нанесенным покрытием высушили в вакуумной сушильной камере при следующих условиях сушки: воздух: температура 6,5 С, относительная влажность 90%; расход воздуха через дыхательный клапан: 21 м 3/ч; вакуум: 58 мбар; время сушки: 4 ч. Истирание полученного покрытия на полосках коллагеновой губки при встряхивании образца размером 1 х 5 см в испытательной пробирке в аппарате для встряхивания Vibrofix при частоте вращения примерно 800-1200 об./мин в течение 2 мин составило примерно 0,2 мг/см 2. Пример VI. В этом примере суспензия содержит фибриноген человека состава А и бычий тромбин и апротинин. Окончательный объем суспензии 16720 мл получили по способу группы I с использованием следующих количеств и параметров. Смесь фибриногена: 13600 мл этилового спирта (100% при 2-8 С); 1750,5 г фибриногена человека состава А; 2361 мг рибофлавина. Смесь фибриногена хранили в течение 21 ч при 2-8 С при помешивании. Смесь тромбина: 420 мл этилового спирта (100% при -30 С); 1229 г бычьего тромбина. Суспензия: к смеси фибриногена добавили 162,3 мл раствора апротинина; к смеси фибриногена добавили 304,7 мл воды для инъекций; к смеси фибриногена добавили смесь тромбина; добавкой 100%-ного этилового спирта при 2-8 С объем суспензии довели до окончательного. Характеристики суспензии: 1. Концентрация этилового спирта: 97%. 2. Время вытекания, измеренное у стального устройства, показанного слева на фиг. 9: 36,8 с. 3. Размер частиц (средний диаметр по Folk Ward): 58,60,6 мкм. На носители в виде полосок коллагена суспензией нанесли покрытие. Вначале предварительно инкубировали 288 полосок коллагеновой губки в охладительной камере при следующих условиях: температура: 6,5 С; относительная влажность: 89%; время инкубации: 25 ч. Для покрытия полосок коллагеновой губки суспензией использовали аппликатор, описанный в патенте США 6 177 126 В 1. Полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием высушили следующим образом. Полоски с нанесенным покрытием инкубировали в течение 10 мин при температуре 6,5 С и относительной влажности 89%.-11 006686 Затем полоски с нанесенным покрытием высушили в вакуумной сушильной камере при следующих условиях сушки: воздух: температура 6,5 С, относительная влажность 89%; расход воздуха через дыхательный клапан: 22,5 м 3/ч; вакуум: 59 мбар; время сушки: 4 ч. Истирание полученного покрытия на полосках коллагеновой губки при встряхивании образца размером 1 х 5 см в испытательной пробирке в аппарате для встряхивания Vibrofix при частоте вращения примерно 800-1200 об./мин в течение 2 мин составило примерно 0,2 мг/см 2. Пример VII. У коллагеновой губки с нанесенным покрытием, содержащим фибриноген человека, бычий тромбин и апротинин, исследовали устойчивость суспензии покрытия в процессе его нанесения в течение 7 ч в условиях производственных помещений, например, при 2-8 С. Пробы каждого активного ингредиента брали в разное время. Результаты приведены в нижеследующей таблице. Результаты свидетельствуют о хорошей устойчивости всех трех компонентов. Пример VIII. Описание ведется со ссылками на фиг. 1-7, на которых Сравнение губки Nycomed с нанесенным покрытием (TachoComb S) с другими продуктами носителя с покрытием, аналогичным TachoComb S. Сцепление слоя.-13 006686 Метод. 1. Нанесение покрытия на разные носители. На поверхность размерами 2 х 4,5 см каждого носителя наносили в качестве покрытия суспензиюTachoComb S. Количество суспензии соответствовало техническим условиям TachoComb (5,5 мг фибриногена/см 2). Образцы высушили. 2. Приготовили образец размерами 1 х 4 каждого носителя с нанесенным покрытием. 3. Сцепление слоя испытывали следующим образом: Описание метода Оборудование Аналитические весы (точность измерения 0,5 мг) Устройство для встряхивания Vibrofix в сочетании с устройством фиксации Линейка, градуированная в миллиметрах Секундомер, скальпель, пробирки внутренним диаметром 2 см с пробкой Метод Метод и расчет для определения стирания описаны выше. Результаты Комментарий Все носители, за исключением коллагеновой губки Nycomed, после нанесения покрытия не эластичны. Образец необходимо вырезать очень осторожно. При вырезании ножницами много материала покрытия расслаивается, поскольку сам слой жесткий. Заплатка Ethisorb Patch вообще не соединилась с материалом покрытия. При легком встряхивании все покрытие облезло как "ковер". Разница между коллагеновой губкой Nycomed и остальными материалами носителя проявилась очень наглядно. Эластичность увлажненного носителя с нанесенным покрытием Метод 1. Покрытие разных носителей. На поверхность размерами 2 х 4,5 см каждого носителя нанесли в качестве покрытия суспензиюTachoComb S. Количество суспензии соответствовало техническим условиям TachoComb (5,5 мг фибриногена/см 2). Образцы высушили. 2. Приготовили образец площадью примерно 5-7 см 2 каждого носителя с нанесенным покрытием. Измерили точную начальную площадь сухого образца. 3. Образец увлажнили и поместили на эластичный лист из латекса, закрепленный в специальном устройстве (более подробно см. под заголовком "Метод"). Затем к листу из латекса приложили растяги-14 006686 вающее давление. После двух растягивании и отпусков лист растянули в третий раз. Измерили площадь носителя при самом большем растяжении. Описание метода Устройство/химикаты Перистальтический насос (IKA PA-SF). Буферная бутыль под давлением (3 выпускных отверстия). Манометр VDO (пределы измерения 0-250 бар). Стеклянная воронка (диаметр отверстия 1: 30 мм; отверстия 2: 15 мм). Силиконовые трубки и зажимы, латексные рукавицы (Semper Med), скальпель, линейка, градуированная в миллиметрах, ножницы. Физиологический раствор Метод К трем выпускным отверстиям буферной бутыли под давлением силиконовыми трубками герметично присоединили следующее оборудование: а) перистальтический насос; б) манометр; в) стеклянная воронка (к отверстию 2). Из латексной рукавицы вырезали двойной лист размерами примерно 8 х 8 см. Этот лист герметично закрепили на стеклянной воронке (отверстие 1). Из носителя с нанесенным покрытием скальпелем вырезали кусок размером примерно 5-7 см 2. Измерили площадь образца (начальную площадь). Покрытие образца увлажнили физиологическим раствором и поместили на латексный лист. Затем вручную прижали его к латексному листу примерно на 1 мин. Перистальтическим насосом латексный лист растянули путем прикладывания давления примерно 70 мбар. Эту операцию повторили дважды с отпусканием латексного листа после каждого растягивания. После третьего растяжения измерили площадь (длину и ширину) носителя при самом большем растяжении латексного листа. Расчет: Коэффициент "эластичности" = площадь носителя при третьем растяжении начальная площадь образца Результаты Комментарий Эластичность увлажненной коллагеновой губки Nycomed (TachoComb) является одной из важных характеристик продукта. Эластичность играет важную роль при полостных операциях и хирургии грудной клетки. После склеивания носитель должен обладать способностью, например, расширяться и сжиматься вместе с легкими или кишками. Ethisorb вообще не продемонстрировала эластичности. Она сразу же отстала от покрытия. В ходе испытания Willospon Spezial и Opraskin с нанесенным покрытием имели структурные дефекты. Использование носителя с нанесенным покрытием в эндоскопической хирургии Метод 1. Нанесение покрытия на разные носители. На поверхность размерами 2 х 4 см каждого носителя наносили в качестве покрытия суспензиюTachoComb S. Количество суспензии соответствовало техническим условиям TachoComb (5,5 мг фибриногена/см 2). Образцы высушили. 2. Манипуляции с образцами носителя с нанесенным покрытием для применения в эндоскопической хирургии и потеря покрытия в результате этих манипуляций документально зарегистрированы цифровым фотооборудованием. Описание метода ОборудованиеEndodock: инструмент для эндоскопии, предназначенный для применения TachoComb в эндоскопической хирургии (см. фиг. 7). Цифровое фотооборудование. Метод Серия сделанных снимков каждого носителя: 1. Снимок: документальное оформление образцов носителя с нанесенным покрытием и без покрытия. 2. Снимок: Образцы с нанесенным покрытием вставлены в оборудование для эндоскопии(Endodock). Образец необходимо вручную разгладить и намотать его на направляющий "палец". Затем образец осторожно вставляют в стальную трубку диаметром 10 мм. Документальное оформление образца, частично вставленного в трубку Endodock. 3. Снимок: образец осторожно извлекли. После этого его необходимо развернуть. Покрытие, отделившееся от носителя при этой операции, собирают сбоку носителя. Развернутый образец после помещения в эндоскоп и потерю покрытия в результате этой манипуляции документально регистрируют. КомментарийTachoComb (губка из лошадиного коллагена с нанесенным покрытием/Nycomed) в эндоскопической хирургии - это наиболее ответственное применение продукта. TachoComb помещают в оборудование для эндоскопии. Трубка этого оборудования обычно имеет диаметр 10-13 мм. Перед помещением в трубкуTachoComb разглаживают и затем наматывают на направляющий "палец", после чего осторожно вводят в трубку. Таким образом, соединение покрытия с носителем и внутри него должно быть прочным, но продукт в сухом состоянии должен оставаться достаточно эластичным, чтобы его можно было сгибать и разворачивать. Доставленный к месту операции TachoComb осторожно вытягивают из трубки. Затем его необходимо развернуть и поместить на поверхность раны. Для этого часто требуются некоторые манипуляции, чтобы выдержать которые сцепление слоя с носителем должно быть достаточно прочным. Результаты Результаты приведены на прилагаемых фиг. 1-6. Оценка потери материала покрытия приводится ниже: Поскольку Ethisorb - это очень жесткий носитель, сцепление покрытия получается очень слабым. Из-за этого в ходе эксперимента Ethisorb утратил почти все покрытие. По сравнению с коллагеновой губкой Nycomed с нанесенным покрытием, все остальные исследованные носители имеют плоскую поверхность для нанесения покрытия. Поэтому покрытие лежит на носителе подобно "плоскому ковру" и эластичность таких сухих носителей с нанесенным покрытием довольно низкая. Часто при изгибании или разворачивании разрушается само покрытие. После того как носители с нанесенным покрытием помещали трубку эндоскопа и затем разворачивали все носители, за исключением коллагеновой губки Nycomed, потеряли весьма значительное количество покрытия, в результате чего большие площади оказались без покрытия. Высокая эластичность TachoComb в сухом или увлаженном состоянии обусловлена структурой и текстурой коллагеновой губки Nycomed, которая является вспененным материалом и имеет внутри многоугольные камеры. На поверхности эти камеры разрезаны на полости, которые увеличивают поверхность покрытия. При нанесении покрытия суспензию равномерно распределяют на структурированной поверхности. При сушке раствор, содержащий фибриноген и тромбин, фиксируется в указанных полостях как твердое вещество. Благодаря этому TachoComb можно нарезать кусками нужного размера и-16 006686 вставлять в оборудования для эндоскопии с лишь небольшой потерей материала покрытия или вовсе без потерь. Высокая эластичность TachoComb в сухом состоянии является большим преимуществом по сравнению со всеми другими исследованными носителями с нанесенным покрытием. Изготовление коллагеновой губки Коллагеновую губку, которая упоминается в тексте настоящего описания, можно изготовить способом, описываемый ниже со ссылками на его общую иллюстрацию на фиг. 10 и 11. Установлено, что успешное покрытие коллагеновой губки препаратом фибринового клея зависит от текстуры коллагеновой губки. Поэтому требуется способ изготовления коллагеновой губки с определенной текстурой, в частности, для того, чтобы коллагеновая губка была приемлемой для покрытия препаратом фибринового клея и тем самым получить материал для заживления и закрытия ран. Кроме того,требуется способ изготовления коллагеновой губки с улучшенными физическими характеристиками по сравнению с известными губками в смысле улучшенной влажности, эластичности, плотности и модуля упругости. Требуется также способ изготовления коллагеновой губки, которая была бы воздухo- и влагонепроницаемой в том смысле, что, будучи приложенной к ране, не позволяла бы воздуху или жидкости впитываться через коллагеновую губку. Исходя из вышесказанного, способ изготовления коллагеновой губки может состоять из следующих стадий: приготовление геля коллагена; добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена; сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры; отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или имеющих диаметр камер в среднем не более 3 мм. В данном контексте термин "диаметр камеры" следует понимать как наибольшее расстояние по прямой между стенками камеры, т.е., наибольшее диагональное расстояние камеры по прямой. Камеры могут быть многоугольной формы, например, восьмиугольной. Установлено, что диаметр камер более 0,75 мм и менее 4 мм или диаметр камер в среднем не более 3 мм делает коллагеновую губку особенно приемлемой для ее покрытия препаратом фибринового клея. В предпочтительном варианте осуществления гель коллагена имеет сухую массу в пределах 2-20 мг на 1 г геля, например 4-18, 5-13, 6-11 мг на 1 г геля. Динамическая вязкость геля коллагена предпочтительно равна 2-20 Нсм, например 4-10, 6-8 Нcм. Содержание влаги в коллагеновой губке предпочтительно не превышает 20%, например 10-15, примерно 18%. Модуль упругости коллагена предпочтительно находится в пределах 5-100 Н/см 2, например 10-50 Н/см 2, а плотность губки предпочтительно равна 1-10 мг/см 3, например 2-7 мг/см 3. Установлено, что коллагеновая губка, изготовленная вышеуказанным способом, является воздухеи влагонепроницаемой в том смысле, что, будучи приложенной к ране, не дает воздуху или жидкости проходить через коллагеновую губку. Жидкости впитываются губкой. Этот эффект достигается, главным образом, благодаря тому, что стадия добавления воздуха в гель коллагена и перемешивание позволяет получить коллагеновую губку объемной структуры с камерами, разделенными и полностью окруженными стенками из коллагенового материала, в отличие от известных коллагеновых губок, имеющих волокнистую структуру. Гель коллагена может состоять из материала разных типов, например типа I, II или III млекопитающих или полученных из трансгенных или рекомбинантных источников, но можно использовать и все другие типы коллагена. Коллаген может быть получен из сухожилий, выбранных из группы, состоящей из сухожилий лошади, человека и коровы. Гель коллагена может дополнительно или взамен содержать рекомбинантный коллагеновый материал. Содержание коллагена в отделенных частях губки предпочтительно равно 50-100% в пересчете на массу сухого вещества губки, например 75-100, 80-100, 85-100, 90-100, 92-100, 92-98, 93-97, 94-96%. Стадия приготовления геля коллагена состоит из следующих этапов: хранение сухожилий при температуре от -10 до -30 С и очистка сухожилий от оболочек; удаление с сухожилий постороннего белка; уменьшение содержания патогенных микроорганизмов в сухожилиях; набухание сухожилий; гомогенизация набухших сухожилий. Задачей этапов хранения, очистка от оболочек, удаления белка, уменьшения содержания патогенных микроорганизмов и набухания является очистка сырья, а этапа гомогенизации - получение коллагена в виде геля. Этап уменьшения содержания патогенных микроорганизмов предпочтительно включает в себя добавление в сухожилия кислоты, например органической кислоты, например молочной кислоты. Далее, в сухожилия предпочтительно добавляют органический растворитель, например спирт, например этиловый спирт. Далее, этап набухания сухожилий предпочтительно включает в себя добавление в сухожилия-17 006686 молочной кислоты. Используемая молочная кислота может быть 0,40-0,50%-ной молочной кислотой,например 0,45%-ной молочной кислотой. Этап набухания сухожилий может включать в себя поддерживание сухожилий при температуре 425 С, например при температуре 10-20 С, в течение 48-200 ч, например в течение 100-200 ч. Этап гомогенизации набухших сухожилий предпочтительно осуществляют с таким расчетом, чтобы получить размер частиц фрагментов геля коллагена, т.е. волокнистых шариков,диаметром 0,8-0,12 см,например приблизительно 1 см. Далее, физические характеристики геля коллаген предпочтительно являются такими, как указаны выше. Соответствующих характеристик можно, например, добиться проведением этапа гомогенизации набухших сухожилий в мельнице с зубчатыми дисками или ином соответствующем оборудовании для гомогенизации. Стадия добавления воздуха в гель коллагена и перемешивания предпочтительно включает в себя следующие этапы: добавление окружающего воздуха в гель и смешивание с помощью смесителя для получения пены коллагена; подача пены смешанного геля в канал для фракционирования; разделение геля коллагена и пены коллагена, находящихся в канале для фракционирования. По крайней мере, некоторую часть геля коллагена, отделенного от пены коллагена в канале для фракционирования, можно вернуть обратно в смеситель. В этом случае отношение количества геля коллагена, возвращенного в смеситель из канала для фракционирования, к количеству свежего геля, подаваемого в смеситель, предпочтительно равно 0,1-0,5. Этап разделения геля коллагена и пены коллагена предпочтительно включает в себя следующие операции: отделение выбранной части пены коллагена, находящейся в канале для фракционирования; подачу выбранной части пены коллагена из канала для фракционирования на сушку. В предпочтительном варианте осуществления этого способа температуру в канале для фракционирования поддерживают в пределах от 15 до 40 С, например 20-25 С. После смешивания геля коллагена с воздухом пену коллагена можно гомогенизировать в течение 24 мин. Перед операцией сушки пены коллагена и после смешивания геля коллагена с воздухом в пену коллагена можно добавить нейтрализующее вещество для доведения значения рН с обычно 2,5-3,5 до значения рН в пене коллагена 6,5-8,5. В качестве нейтрализующего вещества можно использовать аммиачный раствор, и пену коллагена предпочтительно нейтрализуют в течение 5-30 ч, например 10-20 ч, например,примерно 24 ч. Перед сушкой пены коллагена ее предпочтительно заливают в сушильный контейнер таким образом, чтобы при заливке в пену не втягивался воздух. Сушку предпочтительно проводят при температуре в пределах между 15 и 60 С, например в пределах между 20 и 40 С, в течение 50-200 ч, например 100-150 ч, для получения сухой коллагеновой губки. Сушку можно производить при давлении, чуть меньшем атмосферного, например, при давлении в пределах между 700 и 900 бар, например, примерно 800 бар. Коллагеновая губка, изготовленная вышеописанным способом, предпочтительно отвечает по крайней мере одному из следующих критериев: рН: 5,0-6,0; содержание молочной кислоты: не более 5%; содержание аммония: не более 0,5%; содержание растворимого белка, рассчитанное как содержание альбумина: не более 0,5%; содержание зол сульфатов: не более 1,0%; содержание тяжелых металлов: не более 20 млн-1; микробиологическая чистота: не более 103 КОЕ/г; содержание коллагена: 75-100%; плотность: 1-10 мг/см 3, например 2-7 мг/см 3; модуль упругости: 5-100 Н/см, например 10-50 Н/см 2. Операция отделения частей коллагеновой губки может представлять собой разделение коллагеновой губки на несколько частей разрезанием. Полученным частям можно придать любую желаемую форму, например коническую, цилиндрическую, в том числе цилиндрическую с кольцевым поперечным сечением, прямоугольную, многоугольную, форму куба и плоских листов, или их соответствующим способом гранулирования можно превратить в гранулы. Как следует из вышесказанного, коллагеновую губку можно изготовить способом, который включает в себя следующие стадии: приготовление геля коллагена; добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена; сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры; отделение от блока коллагеновой губки частей губки со следующими свойствами: модуль упругости: 5-100 Н/см 2;-18 006686 плотность: 1-10 мг/см 3; диаметр камер: более 0,75 мм и менее 4 мм или диаметр камер в среднем не более 3 мм. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Суспензия, содержащая фибриноген, тромбин и спирт, причем способ, которым указанную суспензию получают, включает в себя следующее: приготовление смеси фибриногена и спирта; приготовление смеси тромбина и спирта; смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии,причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм. 2. Суспензия по п.1, отличающаяся тем, что средний диаметр частиц no Folk Ward находится в пределах 35-80 мкм. 3. Суспензия по п.1 или 2, отличающаяся тем, что вязкость суспензии является таковой, что 90-120 мл суспензии только под действием силы тяжести вытекают через нижнее отверстие емкости, имеющей цилиндрическую часть с внутренним диаметром 40-50 мм,внутренней длиной 55-65 мм и коническую нижнюю часть высотой 17-23 мм с нижним отверстием на нижнем конце указанной конической части в виде круглого отверстия диаметром 2-3 мм,за 25-75 с. 4. Суспензия по п.3, отличающаяся тем, что указанный объем суспензии вытекает через нижнее отверстие за 30-50 с. 5. Суспензия по любому из пп.1-4, содержащая также апротинин. 6. Способ приготовления суспензии фибриногена и тромбина, включающий приготовление смеси фибриногена и спирта; приготовление смеси тромбина и спирта; смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии,причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм. 7. Способ по п.6, отличающийся тем, что на стадии приготовления смеси фибриногена предварительно отбирают мелкие частицы фибриногена, чтобы получить частицы со средним диаметром по FolkWard в пределах 25-100 мкм. 8. Способ по п.6 или 7, отличающийся тем, что предварительно отобранные мелкие частицы фибриногена перемешивают в спирте для получения указанной смеси фибриногена. 9. Способ по любому из пп.6-8, отличающийся тем, что на стадии приготовления смеси ее гомогенизируют. 10. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанную смесь гомогенизируют при температуре в пределах от 0 до 12 С. 11. Способ по п.10, отличающийся тем, что указанную смесь гомогенизируют при температуре в пределах от 2 до 8 С. 12. Способ по п.11, отличающийся тем, что при гомогенизации температуру понижают. 13. Способ по любому из пп.6-12, отличающийся тем, что тромбин содержит по крайней мере один из следующих тромбинов: тромбин человека, бычий тромбин и рекомбинантный тромбин. 14. Способ по любому из пп.6-13, отличающийся тем, что тромбин содержит по крайней мере один из следующих тромбинов: тромбин человека и рекомбинантный тромбин. 15. Способ по любому из пп.6-14, отличающийся тем, что указанная суспензия содержит также апротинин. 16. Способ по любому из пп.6-15, отличающийся тем, что спиртом является этиловый спирт. 17. Способ по п.16, отличающийся тем, что этиловый спирт является безводным. 18. Способ по любому из пп.6-17, отличающийся тем, что стадию смешивания смеси фибриногена и смеси тромбина проводят при перемешивании суспензии. 19. Способ по п.18, отличающийся тем, что перемешивание проводят при температуре в пределах от 0 до 12 С. 20. Способ по п.19, отличающийся тем, что перемешивание проводят при температуре в пределах от 2 до 8 С. 21. Способ нанесения на носитель покрытия из суспензии, содержащей фибриноген и тромбин, отличающийся тем, что суспензию приготавливают по способу, включающему приготовление смеси фибриногена и спирта; приготовление смеси тромбина и спирта; смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии,-19 006686 причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм,причем указанный способ нанесения покрытия включает в себя следующее: доставку суспензии фибриногена, тромбина и спирта в место рядом с носителем; нанесение указанной суспензии на покрываемую поверхность носителя. 22. Способ по п.21, отличающийся тем, что носителем является коллагеновый носитель. 23. Способ по п.22, отличающийся тем, что коллагеновый носитель является коллагеновой губкой. 24. Способ по п.23, отличающийся тем, что коллагеновая губка отвечает по крайней мере одному из следующих критериев: значение рН: 5,0-6,0; содержание молочной кислоты: не более 5%; содержание аммония: не более 0,5%; содержание растворимого белка, рассчитанного как содержание альбумина: не более 0,5%; содержание зол сульфатов: не более 1,0%; содержание тяжелых металлов: не более 20 млн-1; микробиологическая чистота: не хуже 103 КОЕ/г; содержание коллагена: 75-100%; плотность: 1-10 мг/см 3; модуль упругости: 5-100 Н/см 2. 25. Способ по п.23 или 24, отличающийся тем, что носителем является коллагеновая губка и указанная коллагеновая губка изготовлена по способу, включающему приготовление геля коллагена; добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена; сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры; отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или с камерами со средним диагональным размером 3 мм. 26. Способ по любому из пп.21-25, отличающийся тем, что суспензию на носитель наносят при окружающей температуре в пределах от 0 до 12 С. 27. Способ по п.26, отличающийся тем, что суспензию на носитель наносят при окружающей температуре в пределах от 1 до 10 С. 28. Способ по п.27, отличающийся тем, что суспензию на носитель наносят при окружающей температуре в пределах от 2 до 8 С. 29. Способ по любому из пп.21-28, отличающийся тем, что суспензию на носитель наносят при относительной влажности окружающей атмосферы в пределах 75-99%. 30. Способ по п.29, отличающийся тем, что суспензию на носитель наносят при относительной влажности окружающей атмосферы в пределах 85-95%. 31. Способ по любому из пп.21-30, отличающийся тем, что на 1 см 2 покрываемой поверхности носителя наносят 0,08-0,12 мл суспензии. 32. Способ по любому из пп.21-31, отличающийся тем, что суспензию равномерно распределяют по данной ширине покрываемой поверхности так, чтобы масса фибриногена на единицу площади покрываемой поверхности не превышала 25%. 33. Способ по любому из пп.21-32, отличающийся тем, что для нанесения суспензии на носитель используют аппликатор, имеющий по крайней мере одну форсунку, причем струйный аппликатор под давлением подает суспензию через форсунку при перемещении носителя и форсунки относительно друг друга. 34. Способ по любому из пп.21-32, отличающийся тем, что для нанесения суспензии на носитель используют аппликатор с емкостью, имеющей несколько отдельных выпускных отверстий, в котором суспензия из емкости под давлением подается через выпускные отверстия на носитель. 35. Способ по п.34, отличающийся тем, что при нанесении суспензии на носитель последний и аппликатор перемещаются относительно друг друга в направлении транспортировки. 36. Способ по п.35, отличающийся тем, что скорость перемещения находится в пределах 0,025-0,05 м/с. 37. Способ по п.36, отличающийся тем, что скорость перемещения находится в пределах 0,03-0,04 м/с. 38. Способ по любому из пп.34-37, отличающийся тем, что расход суспензии, наносимой через аппликатор на носитель, находится в пределах 400-600 мл/мин. 39. Способ по п.38, отличающийся тем, что расход суспензии находится в пределах 470-550 мл/мин. 40. Способ по п.39, отличающийся тем, что расход суспензии находится в пределах 495-505 мл/мин. 41. Способ сушки покрытия, формируемого из суспензии фибриногена, тромбина и спирта, нанесенного на покрываемую поверхность носителя, причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм, и указанный способ включает в себя стадию воздействия на носитель с нанесенным покрытием давления ниже 1000 мбар-20 006686 так, что получают высушенную покрываемую поверхность носителя и фиксацию высушенного покрытия на покрываемой поверхности. 42. Способ по п.41, отличающийся тем, что указанную суспензию получают следующим образом: приготовление смеси фибриногена и спирта; приготовление смеси тромбина и спирта; смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии,а носителем может быть коллагеновая губка, изготовленная по способу, включающему следующие стадии: приготовление геля коллагена; добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена; сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры; отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или с камерой со средним диагональным размером 3 мм,и покрытие наносят на коллагеновую губку путем доставки суспензии фибриногена, тромбина и спирта в место рядом с коллагеновой губкой; нанесения указанной суспензии на покрываемую поверхность коллагеновой губки. 43. Способ по п.41 или 42, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, сушат при указанном давлении при температуре в пределах от 0 до 12 С. 44. Способ по п.43, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, сушат при указанном давлении при температуре в пределах от 1 до 10 С. 45. Способ по п.44, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, сушат при указанном давлении при температуре в пределах от 2 до 8 С. 46. Способ по любому из пп.41-45, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, сушат при указанном давлении при относительной влажности окружающей атмосферы в пределах 75-99%. 47. Способ по любому из пп.41-46, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, сушат при указанном давлении при относительной влажности окружающей атмосферы в пределах 85-95%. 48. Способ по любому из пп.41-47, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, обдувают потоком воздуха. 49. Способ по любому из пп.43-48, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, выдерживают при указанной температуре не менее 1 ч. 50. Способ по любому из пп.43-48, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, выдерживают при указанной температуре не менее 2 ч. 51. Способ по любому из пп.43-48, отличающийся тем, что покрытие, нанесенное на покрываемую поверхность носителя, выдерживают при указанной температуре не менее 4 ч. 52. Способ по любому из пп.41-51, отличающийся тем, что площадь высушенной покрываемой поверхности составляет не менее 75% от площади этой поверхности во влажном состоянии. 53. Способ по любому из пп.41-51, отличающийся тем, что площадь высушенной покрываемой поверхности составляет не менее 80% от площади этой поверхности во влажном состоянии. 54. Способ по любому из пп.41-53, отличающийся тем, что содержание влаги в носителе и высушенной покрытой поверхности не превышает 12 вес.%. 55. Способ по любому из пп.41-53, отличающийся тем, что содержание влаги в носителе и высушенной покрытой поверхности не превышает 8 вес.%. 56. Способ по любому из пп.41-55, отличающийся тем, что указанная суспензия содержит также апротинин. 57. Коллагеновая губка с покрытием из фибриногена и тромбина, отличающаяся тем, что покрытую коллагеновую губку получают по способу, включающему следующие стадии: изготовление коллагеновой губки по способу, который включает в себя следующее: приготовление геля коллагена; добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена; сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры; отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или с камерой со средним диагональным размером 3 мм; нанесение суспензии фибриногена, тромбина и спирта на покрываемую поверхность коллагеновой губки, причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм, и прикладывание к носителю с нанесенным покрытием давления ниже 1000 мбар так, что получают высушенную покрываемую поверхность носителя и фиксацию высушенного покрытия на покрываемой поверхности,причем коллагеновая губка с нанесенным покрытием обладает по крайней мере одним из следующих свойств:-21 006686 суспензия равномерно распределена по данной ширине покрываемой поверхности так, что масса фибриногена на единицу площади покрываемой поверхности не превышает 25%; при встряхивании образца материала с нанесенным покрытием размерами 1 х 5 см в испытательной пробирке в аппарате для встряхивания Vibrofix при частоте вращения примерно 800-1200 об./мин в течение 2 мин истирание покрытия составляет менее 2,0 мг/см 2. 58. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по п.57, отличающаяся тем, что суспензия имеет содержание влаги 20-80 мг/мл. 59. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по п.57, отличающаяся тем, что суспензия имеет содержание влаги 24-32 мг/мл. 60. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-59, отличающаяся тем, что содержание тромбина в суспензии равно 20-40 МЕ/мл. 61. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-59, отличающаяся тем, что содержание тромбина в суспензии равно 24-33 МЕ/мл. 62. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-61, отличающаяся тем, что содержание тромбина в покрываемой поверхности в среднем находится в пределах 2-4 МЕ/см 2. 63. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-61, отличающаяся тем, что содержание тромбина в покрытой поверхности в среднем находится в пределах 2,3-3,3 МЕ/см 2. 64. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-63, отличающаяся тем, что содержание тромбина в любом месте на покрытой поверхности не превышает 5 МЕ/см 2. 65. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-63, отличающаяся тем, что содержание тромбина в любом месте на покрытой поверхности не превышает 3,8 МЕ/см 2. 66. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-65, отличающаяся тем, что микробиологическая чистота носителя с нанесенным покрытием не более 4 КОЕ/см 2. 67. Коллагеновая губка с нанесенным покрытием по любому из пп.57-65, отличающаяся тем, что микробиологическая чистота носителя с нанесенным покрытием не более 2,25 КОЕ/см 2. 68. Применение коллагеновой губки с нанесенным покрытием для склеивания и закрытия тканей и гемостаза, причем коллагеновая губка имеет покрытие из фибриногена и тромбина, отличающееся тем,что коллагеновую губку с нанесенным покрытием получают по способу, включающему следующие стадии: изготовление коллагеновой губки по способу, который включает в себя следующее: приготовление геля коллагена; добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена; сушка пены коллагена для получения сухого блока коллагеновой губки, имеющего внутри камеры; отделение от блока коллагеновой губки частей губки с диаметром камер более 0,75 мм и менее 4 мм или с камерой со средним диагональным размером 3 мм; нанесение суспензии фибриногена, тромбина и спирта на покрываемую поверхность коллагеновой губки, причем указанная суспензия содержит частицы фибриногена и тромбина со средним диаметром частиц по Folk Ward в пределах 25-100 мкм, и прикладывание к носителю с нанесенным покрытием давления ниже 1000 мбар так, что получают высушенную покрываемую поверхность носителя и фиксацию высушенного покрытия на покрываемой поверхности,причем коллагеновая губка с нанесенным покрытием обладает по крайней мере одним из следующих свойств: суспензия равномерно распределена по данной ширине покрываемой поверхности так, что масса фибриногена на единицу площади покрываемой поверхности не превышает 25%; при встряхивании образца материала с нанесенным покрытием размерами 1 х 5 см в испытательной пробирке в аппарате для встряхивания Vibrofix при частоте вращения примерно 800-1200 об./мин в течение 2 мин истирание покрытия составляет менее 2,0 мг/см 2.
МПК / Метки
МПК: A61L 24/10, A61L 15/32
Метки: губка, тромбин, покрытием, суспензия, содержащая, спирт, коллагеновая, сушки, фибриноген, нанесения, покрытия, способ, получения
Код ссылки
<a href="https://eas.patents.su/29-6686-suspenziya-soderzhashhaya-fibrinogen-trombin-i-spirt-sposob-eyo-polucheniya-sposob-naneseniya-pokrytiya-sposob-sushki-pokrytiya-i-kollagenovaya-gubka-s-pokrytiem.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Суспензия, содержащая фибриноген, тромбин и спирт, способ её получения, способ нанесения покрытия, способ сушки покрытия и коллагеновая губка с покрытием</a>
Предыдущий патент: Синергетическая композиция
Следующий патент: Производные арилметиламина для использования в качестве ингибиторов триптазы
Случайный патент: Органические соединения трехвалентного железа фармацевтического качества, их применение и способы их получения