Применение растительной композиции для лечения воспалительных нарушений

ПРИМЕНЕНИЕ РАСТИТЕЛЬНОЙ КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ НАРУШЕНИЙ Данное изобретение касается применения растительной композиции для лечения воспалительного нарушения, опосредованного фактором некроза опухоли- (TNF- ) и интерлейкинами (IL-1,IL-6, IL-8), включающей экстракт цветочных и плодовых головок растения Sphaeranthus indicus. Экстракт Sphaeranthus indicus содержит соединение 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен 3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-он (7-гидрокси-4,11(13)-эудесмадиен-12,6 олид) (соединение 1) как биоактивный маркер. Данное изобретение также касается применения композиции для лечения воспалительного нарушения, опосредованного фактором некроза опухоли- (TNF-) и интерлейкинами (IL-1, IL-6, IL-8), включающей 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3 метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-он (соединение 1) как активный ингредиент. Данное изобретение также касается способа лечения указанного воспалительного нарушения, который включает введение субъекту композиции, включающей терапевтически эффективное количество экстракта цветочных и плодовых головок растения Sphaeranthus indicus в качестве активного ингредиента и фармацевтически приемлемых носителей. Данное изобретение также касается способа лечения указанного воспалительного нарушения, который включает введение субъекту композиции, включающей терапевтически эффективное количество 3 а-гидрокси 5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-он (соединение 1) в качестве активного ингредиента и фармацевтически приемлемых носителей.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ПИРАМАЛ ЛАЙФ САЙНСИЗ ЛИМИТЕД 014070 Область данного изобретения Данное изобретение касается новой растительной композиции, включающей экстракт цветочных и плодовых головок растения Sphaeranthus indicus. Данное изобретение дополнительно касается растительной композиции, содержащей экстракт, полученный из цветочных и плодовых головок Sphaeranthusindicus, включающий соединение 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Ннафто[1,2-b]фуран-2-он (7-гидрокси-4,11(13)-эудесмадиен-12,6-олид) (соединение 1) как биоактивный маркер и необязательно другой активный(ые) компонент(ы), для эффективного лечения воспалительных нарушений. Данное изобретение также касается фармацевтической композиции, включающей 3 агидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-он (соединение 1) как активный ингредиент и фармацевтически приемлемые носители, для применения в лечении воспалительных нарушений. Данное изобретение также касается способа получения композиций. Композиции по данному изобретению адаптированы для лечения воспалительных нарушений. Данное изобретение также касается ингибиторной активности композиций по отношению к фактору некроза опухоли- (TNF-) и интерлейкину (IL-1, IL-6, IL-8). Данное изобретение дополнительно касается ингибирования композициями экспрессии молекулы межклеточной адгезии 1 (ICAM-1), молекулы адгезии васкулярных клеток 1(VCAM-1) и Е-селектина. Данное изобретение также раскрывает способы введения композиций для лечения воспалительных нарушений. Необязательно экстракт или композицию, включающую указанный экстракт, или композицию, включающую соединение 1, можно применять в комбинации по меньшей мере с одним другим противовоспалительным агентом. Предпосылки данного изобретения Воспаление играет фундаментальную роль в иммунной защите и прогрессировании болезней, опосредованных иммунитетом. Воспалительный ответ инициируется в ответ на повреждение (например,травма, ишемия и чужеродные частицы) и инфекцию (например, бактериальная или вирусная инфекция) множеством путей, включая химические медиаторы (например, цитокины и простагландины) и воспалительные клетки (например, лейкоциты). Он характеризуется усилением кровотока к ткани, вызывая пирексию, эритему, уплотнение и боль. Чувствительное хорошо сбалансированное взаимодействие между гуморальными и клеточными иммунными элементами в воспалительном ответе позволяет элиминировать вредоносные агенты и инициировать восстановление поврежденной ткани. Если это чувствительно сбалансированное взаимодействие разрушено, воспалительный ответ может привести к значительному повреждению нормальной ткани и может быть более вредоносным, чем изначальное повреждение, которое инициирует реакцию. В таких случаях нерегулируемых воспалительных ответов необходимо клиническое вмешательство для предотвращения повреждения ткани и дисфункции органа. Болезни, такие как ревматоидный артрит, остеоартрит, болезнь Крона, астма, аллергии, синдром септического шока, атеросклероз, болезнь воспаления кишечника, среди других клинических состояний характеризуются хроническим воспалением. Цитокины, особенно IL-1, IL-6, IL-8 и TNF-, играют важную роль в воспалительном процессе.TNF-, плеотропный цитокин, продуцируется, главным образом, макрофагами, но может также продуцироваться другими типами клеток. TNF- демонстрирует благоприятную, а также патологическую активности. Он обладает и эффектами, стимулирующими рост, и способностями, ингибирующими рост, помимо того, что является саморегулирующимся. Благоприятные функции TNF- включают поддержание гомеостаза регуляцией циркадного ритма организма, установкой иммунного ответа на бактериальные, вирусные, грибковые и паразитарные инфекции, заменой или реконструкцией поврежденной ткани путем стимулирования роста фибробласта и, как предполагает название, убивая определенные опухоли. Хотя TNF- играет критическую роль во врожденных и приобретенных иммунных ответах, неадекватное продуцирование TNF- может произвести патологические изменения, приводящие к хроническому воспалению и повреждению ткани. Показали, что TNF- играет критическую роль в патогенезе многих хронических воспалительных болезней, таких как болезнь воспаления кишечника, ревматоидный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, псориазный артрит, остеоартрит, рефракторный ревматоидный артрит, хронический неревматоидный артрит, остеопороз/резорбция кости, коронарная болезнь сердца, васкулит, язвенный колит, псориаз, синдром расстройства дыхания у взрослых, диабет, нарушения гиперчувствительности кожи замедленного типа и болезнь Альцгеймера. Интерлейкин-1 (IL-1) является важной частью системы врожденного иммунитета, который регулирует функции адаптивной иммунной системы. Баланс между IL-1 и антагонистом рецептора IL-1 (IL-1ra) в локальных тканях влияет на возможное развитие воспалительной болезни и проистекающее структуральное повреждение. В присутствии чрезмерного количества IL-1 воспалительные и аутоиммунные нарушения могут развиваться в суставах, легких, желудочно-кишечном тракте, центральной нервной системе (ЦНС) или кровеносных сосудах. Среди различных воспалительных нарушений ревматоидный артрит (РА) является аутоиммунным нарушением. РА представляет собой хроническую, системную, воспалительную болезнь сустава неиз-1 014070 вестной этиологии. При РА обычно тонкая синовиальная выстилка суставов заменяется воспалительной,высоко васкуляризованной, инвазивной фиброколлагеназной тканью (паннусом), которая разрушает и хрящ, и кость. Зоны, которые могут быть затронуты, включают суставы рук, запястья, шею, челюсть,локти, колено, ступню и лодыжки. Разрушение хряща при РА связаны с нарушенной экспрессией цитокинов и фактора роста в пораженных суставах. Двумя клинически важными цитокинами, высвобождаемыми в синовиальную оболочку, являютсяIL-1 и TNF-. TNF- может активировать свою собственную экспрессию, а также облегчать экспрессию других генов, вовлеченных в РА, включая IL-1, IL-6, IL-8, циклооксигеназу-2 (СОХ-2), индуцируемую синтетазу оксида азота (iNOS), молекулу межклеточной адгезии 1 (ICAM-1), молекулу адгезии васкулярных клеток 1 (VCAM-1) и Е-селектин. Этот тип положительной системы регулирования может усилить и сохранить локальные воспалительные ответы. Поэтому неадекватность или надэкспрессияTNF- приводит к координированному усилению экспрессии многих генов, чьи продукты опосредуют воспалительный и иммунный ответы и, таким образом, приводят к клиническим проявлениям РА. Рекрутмент и ретенция лейкоцитов является критическим событием в патогенезе всех хронических воспалительных нарушений, включая РА. Более того, адгезия циркулирующих лейкоцитов, особенно моноцитов, для васкулярного эндотелия также является критическим событием в развитии атеросклероза. Этот процесс зависит от взаимодействия между адгезийными молекулами, экспрессированными на поверхности эндотелиальных клеток, таких как ICAM-1, VCAM-1, Е-селектин, и родственных им лигандов на лейкоцитах. Поэтому ICAM-1, VCAM-1 и Е-селектин отвечают за рекрутмент воспалительных клеток, таких как нейтрофилы, эозинофилы и Т-лимфоциты, от циркуляции до участка воспаления. Эти адгезийные протеины находятся в норме на низком уровне на поверхности эндотелиальных клеток, но значительно индуцируются различными провоспалительными цитокинами, такими как TNF-. Самая общая терапия для лечения воспалительных нарушений включает применение нестероидных противовоспалительных лекарственных средств (NSAID), например напроксен, диклофенак, ибупрофен,для облегчения симптомов, таких как боль. Однако, несмотря на широко распространенное применениеNSAID, многие индивидуумы не могут переносить дозы, необходимые для лечения нарушения в течение длительного периода времени, поскольку NSAID, как известно, причиняют эрозии желудка. Кроме того,NSAID просто лечат симптомы нарушения, а не причину. Если пациенты не реагируют на NSAID, применяются другие лекарственные средства, такие как метотрексат, соли золота, D-пеницилламин и кортикостероиды. Такие лекарственные средства также обладают существенными токсическими эффектами. Лекарственные средства моноклональных антител,такие как инфликсимаб, этанерсепт и адалимумаб, применяются как противовоспалительные агенты, но имеют недостатки, такие как способ введения (только парентеральный), высокая стоимость, индукция аллергии, активация латентного туберкулеза, повышение риска рака и болезни сердечной недостаточности. Следовательно, существует необходимость в развитии улучшенных и альтернативных лекарственных средств с пониженными побочными эффектами для предотвращения и лечения воспалительных нарушений, вызванных усилением IL-1 и TNF-. Травы были известны и применялись во всем мире для лечения многих состояний. Имеется свидетельство, что продукты, полученные из растений, обладают потенциальными фармакологическими и терапевтическими эффектами на млекопитающих и имеют тенденцию проявлять менее вредные побочные эффекты, чем синтетические лекарственные средства. Данное изобретение раскрывает новую растительную композицию, которая содержит экстракт цветочных и плодовых головок растения Sphaeranthus indicus. Композицию можно применять для лечения различных воспалительных нарушений с минимальными побочными эффектами. Sphaeranthus indicus представляет собой общеизвестный сорняк, встречающийся на рисовых полях. Это растение принадлежит семейству Asteraceae, а в произведениях Аюрведы известно как mahamundi или gorakhmundi. Растение, растущее по всей Индии, представляет собой разветвленное травянистое растение с пурпурными цветками. Его применяют при нарушениях печени и желудка. Растение применяют в народной медицине как средство при различных заболеваниях, включая дизентерию, боль в матке и влагалище, болезнях груди, при очистке и обогащении крови, инфекциях мочевыводящих путей,заживлении ран и некоторых других болезнях. Полирастительная формуляция "RV-08", содержащая Sphaeranthus indicus, разработана для противодействия иммунодефицитным нарушениям (Indian Journal of Pharmacology, 33, 454-55, (2001. Сообщили о выделение нового сесквитерпенового гликозида сфаерантанолида из цветков Sphaeranthus indicus. Выделенное соединение сфаерантанолид проявляло иммуностимулирующую активность(Phytochemistry, 29(8), 2573-76, (1990. Сообщили об иммуномодулирующей активности метанольного экстракта цветочных головокSphaeranthus indicus (Ars. Pharmaceutica 45:3; 281 -91, (2004. Сообщают, что водный экстракт, полученный из корней Sphaeranthus indicus, являлся умеренно активным в подавлении Propionibacterium acnes, индуцируя образование TNF- и IL-8. Sphaeranthus indicus причинял меньшую, но все еще значительную, супрессию видов, реагирующих с кислородом (Phytomedicine, 10 (1), 34-38, (2003.-2 014070 Насколько известно, не встречаются сообщения о каком-либо лекарственном средстве, содержащем экстракт цветочных и плодовых головок Sphaeranthus indicus для лечения воспалительных нарушений. Для преодоления проблем побочных эффектов существующего направления лечения, таких как индукция аллергии, активация латентного туберкулеза, миелосупрессия, повышение риска рака и болезнь сердечной недостаточности, связанных с известными в данной области композициями, данное изобретение обеспечивает новую растительную композицию, эффективную против воспаления, обладающую ингибиторной активностью против TNF-, интерлейкинов (IL-1, IL-6, IL-8) и экспрессии молекулы межклеточной адгезии 1 (ICAM-1), молекулы адгезии васкулярных клеток 1 (VCAM-1) и Е-селектина. Композиции по данному изобретению можно также применять в комбинации по меньшей мере с одним другим противовоспалительным агентом. Цели данного изобретения Цель данного изобретения направлена на обеспечение новой растительной композиции, включающей терапевтически эффективное количество экстракта цветочных и плодовых головок Sphaeranthus indicus в качестве активного ингредиента вместе с фармацевтически приемлемыми носителями. Другой целью данного изобретения является обеспечение композиции, включающей терапевтически эффективное количество 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Ннафто[1,2-b]фуран-2-она (соединение 1) в качестве активного ингредиента вместе с фармацевтически приемлемыми носителями, для лечения воспалительных нарушений. Другой дополнительной целью данного изобретения является обеспечение способа получения композиций. Еще одной дополнительной целью данного изобретения является обеспечение композиции, включающей терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстрактаSphaeranthus indicus или соединения 1, для лечения нарушений, опосредованных TNF- и интерлейкинами (IL-1, IL-6, IL-8). Следующей дополнительной целью данного изобретения является обеспечение композиции, включающей терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстрактаSphaeranthus indicus или соединения 1, для лечения нарушений, опосредованных молекулой межклеточной адгезии 1 (ICAM-1), молекулой адгезии васкулярных клеток 1 (VCAM-1) и Е-селектином. Другой целью данного изобретения является обеспечение композиции, включающей терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстракта Sphaeranthus indicus или соединения 1, для лечения воспалительных нарушений. Еще одной целью данного изобретения является обеспечение композиции, включающей терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстракта Sphaeranthus indicus или соединения 1, для лечения воспалительных нарушений, опосредованных TNF-. Еще одной целью данного изобретения является обеспечение композиции, включающей терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстракта Sphaeranthus indicus или соединения 1, для лечения воспалительных нарушений, опосредованных интерлейкинами (IL-1, IL-6,IL-8). Следующей целью данного изобретения является обеспечение композиции, включающей терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстракта Sphaeranthus indicus или соединения 1, для лечения воспалительных нарушений, опосредованных молекулой межклеточной адгезии 1 (ICAM-1), молекулой адгезии васкулярных клеток 1 (VCAM-1) и Е-селектином. Еще одной целью данного изобретения является обеспечение композиции, включающей терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстракта Sphaeranthus indicus или соединения 1, в комбинации по меньшей мере с одним биоактивным веществом, для получения синергического эффекта. Следующей целью данного изобретения является обеспечение применения указанных композиций отдельно или в комбинации по меньшей мере с одним другим противовоспалительным агентом для лечения воспалительных нарушений, включающих ревматоидный артрит. Другие цели и дополнительная возможность применимости данного изобретения станут очевидными из следующего детального описания. Краткое описание данного изобретения Таким образом, согласно одному аспекту данного изобретения предусмотрена новая растительная композиция, включающая терапевтически эффективное количество экстракта цветочных и плодовых головок Sphaeranthus indicus в качестве активного ингредиента вместе с фармацевтически приемлемыми носителями. Согласно другому аспекту данного изобретения предусмотрена композиция, включающая терапевтически эффективное количество 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Ннафто[1,2-b]фуран-2-она (соединение 1) в качестве активного ингредиента вместе с фармацевтически приемлемыми носителями, для лечения воспалительных нарушений. Согласно дополнительному аспекту данного изобретения предусмотрен способ получения композиций.-3 014070 Согласно другому дополнительному аспекту данного изобретения предусмотрена композиция,включающая терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстрактаSphaeranthus indicus или соединения 1, для лечения нарушений, опосредованных TNF- и интерлейкинами (IL-1, IL-6, IL-8). Согласно следующему дополнительному аспекту данного изобретения предусмотрена композиция,включающая терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстрактаSphaeranthus indicus или соединения 1, для лечения нарушений, опосредованных молекулой межклеточной адгезии 1 (ICAM-1), молекулой адгезии васкулярных клеток 1 (VCAM-1) и Е-селектином. Согласно дополнительному аспекту данного изобретения предусмотрена композиция, включающая терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстракта Sphaeranthusindicus или соединения 1, для лечения воспалительных нарушений. Согласно дополнительному аспекту данного изобретения предусмотрена композиция, включающая терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстракта Sphaeranthusindicus или соединения 1, для лечения воспалительных нарушений, опосредованных TNF-. Согласно дополнительному аспекту данного изобретения предусмотрена композиция, включающая терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстракта Sphaeranthusindicus или соединения 1, для лечения воспалительных нарушений, опосредованных интерлейкинами(IL-1, IL-6, IL-8). Согласно дополнительному аспекту данного изобретения предусмотрена композиция, включающая терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстракта Sphaeranthusindicus или соединения 1, для лечения воспалительных нарушений, опосредованных молекулой межклеточной адгезии 1 (ICAM-1), молекулой адгезии васкулярных клеток 1 (VCAM-1) и Е-селектином. Согласно следующему дополнительному аспекту данного изобретения предусмотрена композиция,включающая терапевтически эффективное количество активного ингредиента, выбранного из экстрактаSphaeranthus indicus или соединения 1 в комбинации по меньшей мере с одним биоактивным веществом для достижения синергического эффекта. Согласно другому дополнительному аспекту данного изобретения предусмотрено применение композиций отдельно или в комбинации по меньшей мере с одним другим противовоспалительным агентом для лечения воспалительных нарушений, включающих ревматоидный артрит. Детальное описание данного изобретения Следует понимать, что детальное описание и специфические примеры, определяющие примеры осуществления данного изобретения, приведены только для иллюстрации, поскольку различные изменения и модификации в идее и объеме данного изобретения станут очевидными специалисту в данной области. Специалист в данной области на основе описания сможет использовать данное изобретение в его самых широких пределах. Следующие специфические примеры осуществления следует рассматривать только как иллюстративные, а не ограничивающие следующее из описания каким-либо путем. Если не определено иначе, все технические и научные выражения, применяемые здесь, имеют те же значения, что и общепринятые в области, к которой принадлежит данное изобретение. Выражение "воспалительное нарушение", как применяется здесь, означает болезнь или состояние,характеризующееся хроническим воспалением, включая, но не ограничиваясь, ревматоидный артрит,остеоартрит, ювенильный ревматоидный артрит, псориазный артрит, рефракторный ревматоидный артрит, хронический неревматоидный артрит, остеопороз/резорбцию кости, коронарную болезнь сердца,атеросклероз, васкулит, язвенный колит, псориаз, болезнь Крона, синдром расстройства дыхания у взрослых, нарушение гиперчувствительности кожи замедленного типа, синдром септического шока и болезнь воспаления кишечника. Выражение "фармацевтически приемлемые", как применяется здесь, означает носитель, растворитель, наполнители и/или соли, которые должны быть совместимыми с другими ингредиентами формуляции и не вредным для реципиента. Выражение "фармацевтически приемлемый носитель", как применяется здесь, означает нетоксичное, инертное твердое вещество, полутвердое вещество, растворитель, капсулирующий материал или вспомогательную формуляцию какого-либо типа. Некоторые примеры материалов, которые могут служить фармацевтически приемлемыми носителями, представляют собой сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как натрия карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и целлюлоза ацетат; солод; желатин; тальк; а также другие нетоксичные совместимые смазывающие агенты, такие как натрия лаурилсульфат и магния стеарат, а также подкрашивающие агенты, агенты высвобождения, покрывающие агенты, подсластители, вкусовые и ароматизирующие агенты; консерванты и антиоксиданты также могут присутствовать в композиции согласно обсуждению разработчика рецептур. Выражение "терапевтически эффективное количество", как применяется здесь, означает количество соединения или композиции (например, экстракта Sphaeranthus indicus), достаточное для значительной индукции положительной модификации в состоянии, требующем регуляции или лечения, но достаточно-4 014070 низкое для избежания побочных эффектов (при разумном соотношении пользы к риску), в рамках обоснованного медицинского обсуждения. Терапевтически эффективное количество соединения или композиции будет варьировать в зависимости от конкретного состояния, которое лечат, возраста и физического состояния пациента, серьезности состояния, которое лечат/предупреждают, продолжительности лечения,природы конкурентной терапии, применяемого специфического соединения или композиции, конкретного применяемого фармацевтически приемлемого носителя и подобных факторов. Как применяется здесь,все проценты определяются по весу, если не определено иначе. Выражение "биоактивный маркер" применяется здесь для определения характеристики (или фитохимического профиля), которая коррелирует с приемлемой степенью фармацевтической активности."Максимальная применимая доза" представляет собой самое большое количество лекарственного средства, которое взрослый может безопасно принять. Следует отметить, что, как применяется в описании и приложенной формуле, формы единственного числа включают множественное число обозначенного, если из контекста явно не следует иное."Sphaeranthus indicus экстракт" или "экстракт Sphaeranthus indicus", упомянутый здесь, означает смесь соединений, присутствующих в растении Sphaeranthus indicus. Эти соединения экстрагируют из сухих цветочных и плодовых головок растения с помощью методик экстракции, хорошо известных в данной области (например, применение органических растворителей, таких как низшие спирты, алкильные сложные эфиры, алкильные простые эфиры, алкильные кетоны, хлороформ, простой эфир нефти,гексан, и/или неорганических растворителей, таких как вода). Данный процесс экстракции входящих в состав растительных производных из цветочных и плодовых головок Sphaeranthus indicus можно расширить до крупномасштабного получения. Выражение "активный ингредиент", как применяется здесь, означает "экстракт Sphaeranthus indicus", или "соединение 1", или "обогащенный экстракт Sphaeranthus indicus, содержащий смесь двух или более активных соединений". Экстракт Sphaeranthus indicus можно стандартизировать с помощью традиционных методов, таких как высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) или высокоэффективная тонкослойная хроматография (ВЭТСХ). В примере осуществления данное изобретение касается растительной композиции, включающей стандартизированный экстракт Sphaeranthus indicus вместе с фармацевтически приемлемыми носителями. Биоактивные маркерные соединения можно выделить из экстракта цветочных и плодовых головокSphaeranthus indicus путем очистки на определяющей биоактивность колоночной хроматографии и препаративной ВЭЖХ. Соединения можно охарактеризовать анализом данных спектра. Растительная композиция по данному изобретению содержит экстракт цветочных и плодовых головок Sphaeranthus indicus, включая 2-9% 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро 3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-она (соединение 1) как биоактивный маркер и необязательно другой активный(ые) агент(ы). В примере осуществления данное изобретение касается композиции, включающей 3 агидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-он (соединение 1) как активный ингредиент вместе с фармацевтически приемлемыми носителями. В примере осуществления данное изобретение касается применения указанной композиции, включающей 3 а-гидрокси-5 а,9 диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-он (соединение 1), для получения лекарственного средства для лечения воспалительных нарушений. Данное изобретение дополнительно направлено на способ получения композиций, приемлемых для лечения воспалительных нарушений. Стандартизированный экстракт Sphaeranthus indicus смешивают с фармацевтически приемлемыми носителями и формулируют в терапевтические дозированные формы. Доза для ежедневного введения должна быть выбрана для удовлетворения желательного эффекта. В примере осуществления указанная растительная композиция, включающая стандартизированный экстракт Sphaeranthus indicus, предусмотрена для лечения воспалительных нарушений. В другом примере осуществления по данному изобретению композиция, включающая 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Ннафто[1,2-b]фуран-2-он (соединение 1) вместе с фармацевтически приемлемыми носителями, предусмотрена для лечения воспалительных нарушений. Соединение 1 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен 3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-он выделили из экстракта Sphaeranthus indicus методикой, известной в родственных областях, и характеризовали с помощью ядерного магнитного резонанса(ЯМР) и масс-спектрометрии. Композиция включает соединение 1 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен 3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-он, которое также можно получить из других растительных источников или можно получить традиционными синтетическими способами, известными специалисту в данной области. В объем данного изобретения включена фармацевтическая композиция, содержащая соединение 1, которое можно получить из других источников, для применения в лечении воспалительных нарушений. В следующем примере осуществления данного изобретения предусмотрен способ получения фармацевтической композиции, включающей 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен 3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-он (соединение 1), путем смешивания соединения 1 с одним или более фармацевтически приемлемым носителем и формулирования в терапевтические дози-5 014070 рованные формы. Дозу для ежедневного введения нужно выбрать для приемлемого желательного эффекта. Композиции по данному изобретению можно вводить орально, например, в форме пилюль, таблеток,покрытых таблеток, капсул, гранул, эликсиров или сиропа. Экстракт цветочных и плодовых головокSphaeranthus indicus применяют для получения оральных препаратов, содержащих 3-70 вес.% указанного экстракта, который тщательно смешивают с традиционной основой, как будет ниже описано в деталях. Экстракта цветочных и плодовых головок, содержащего 2-9% (вес./вес.) соединения 1 как биоактивного маркера, достаточно для достижения желательных результатов. Соединение 1 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил 3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-он применяют для получения оральных препаратов, содержащих 3-99 вес.% указанного соединения, которое тщательно смешивают с традиционной основой, как будет ниже описано в деталях. Композиции по данному изобретению можно применять для местного и чрескожного введения. Местные композиции, применяемые в данном изобретении,включают формуляции, приемлемые для местного нанесения на кожу. Композиции можно формулировать в широко варьирующие типы продукта, что включают, но не ограничиваются, лосьоны, кремы, гели,стики, спреи или мази. Экстракт цветочных и плодовых головок Sphaeranthus indicus применяют для получения местных препаратов, содержащих 1-15 вес.% указанного экстракта, который тщательно смешивают с традиционной основой, как будет ниже описано в деталях. Экстракта цветочных и плодовых головок Sphaeranthus indicus, содержащего около 2-9% (вес./вес.) соединения 1 как биоактивного маркера,достаточно для достижения желательных результатов. В примере осуществления композиции предусмотрены для лечения воспалительных нарушений,опосредованных TNF- и интерлейкинами (IL-1, IL-6, IL-8). В примере осуществления композиции предусмотрены для лечения воспалительных нарушений,опосредованных молекулой межклеточной адгезии 1 (ICAM-1), молекулой адгезии васкулярных клеток 1(VCAM-1) и Е-селектином. Актуальные уровни дозировки активного ингредиента, экстракта Sphaeranthus indicus или соединения 1, в композициях по данному изобретению могут варьировать для получения количества активного ингредиента, которое эффективно для достижения желательного терапевтического ответа для конкретного пациента, композиции и способа введения. Выбранный уровень дозировки будет зависеть от ряда факторов, включая активность конкретного применяемого активного ингредиента, экстракта Sphaeranthus indicus или соединения 1, способ введения,время введения, скорость выведения конкретной используемой композиции, продолжительность лечения, применение в комбинации с другими экстрактами, возраст, пол, вес, состояние, общее состояние здоровья и предшествующая история болезни пациента, нуждающегося в лечении, и подобные факторы,хорошо известные в медицине. В другом примере осуществления данное изобретение касается композиции, включающей активный ингредиент, экстракт Sphaeranthus indicus или соединение 1, в комбинации по меньшей мере с одним другим растительным экстрактом, проявляющим противовоспалительную активность, для получения синергического эффекта. Это другое растение можно выбрать из растений, таких как Curcuma longa и Zingiber officinale. В следующем примере осуществления композиция дополнительно содержит активный ингредиент,экстракт Sphaeranthus indicus или соединение 1, в комбинации по меньшей мере с одним биоактивным веществом для получения синергического эффекта. В следующем примере осуществления композиция по данному изобретению, включающая активный ингредиент, экстракт Sphaeranthus indicus или соединение 1, может необязательно содержать по меньшей мере один другой противовоспалительный агент или может также применяться в комбинации с традиционным противовоспалительным агентом. Противовоспалительный агент можно выбрать из стероидов, таких как преднизолон, гидрокортизон; модифицирующих болезнь противоревматических лекарственных средств (DMARD), таких как метотрексат, сульфасалазин; или NSAID, таких как напроксен, диклофенак, ибупрофен и подобное. В примере осуществления растительная композиция, включающая активный ингредиент, экстракт Sphaeranthus indicus или соединение 1, выделенное из экстракта Sphaeranthus indicus, предусмотрена для лечения ревматоидного артрита. Другой пример осуществления по данному изобретению также касается ингибиторной активности на TNF- и интерлейкин (IL-1, IL-6, IL-8) композиций, включающих активный ингредиент. Следующий пример осуществления по данному изобретению также касается ингибирования экспрессии на клеточной поверхности молекул адгезии, таких как молекула межклеточной адгезии 1(ICAM-1), молекула адгезии васкулярных клеток 1 (VCAM-1) и Е-селектин, композициями, включающими активный ингредиент. Композиции по данному изобретению являются приемлемыми для применения в лечении острой и хронической форм воспалительных нарушений, опосредованных TNF-, интерлейкинами (IL-1, IL-6,IL-8), ICAM-1, VCAM-1 и Е-селектином, в частности ревматоидного артрита, ювенильного ревматоидного артрита, псориазного артрита, остеоартрита, рефракторного ревматоидного артрита, хронического неревматоидного артрита, остеопороза/резорбции кости, коронарной болезни сердца, васкулита, язвенного колита, псориаза, синдрома расстройства дыхания у взрослых, болезни Альцгеймера у людей. Так-6 014070 же композиции по данному изобретению можно применять для лечения воспаления при болезнях, подобных болезни воспаления кишечника, болезни Крона, синдрома септического шока, атеросклероза и различных аутоиммунных болезней среди других клинических состояний. Данное изобретение также касается способа лечения воспалительных нарушений, включающего введение композиций селективно оральным путем, местным нанесением, чрескожным нанесением. Следующие примеры иллюстрируют, но не ограничивают, объем данного изобретения. Специалисту в данной области будет понятно, что данное обсуждение представляет собой только типичные примеры осуществления, не предназначенные для ограничения более широких аспектов данного изобретения, которые являются примером осуществления в типичном понимании. Пример 1. Приготовление метанольного экстракта Sphaeranthus indicus. Сухие цветочные и плодовые головки Sphaeranthus indicus (200 г) измельчили. Порошковый материал экстрагировали с помощью метанола (2,5 л) взбалтыванием при 60 С на протяжении 3 ч. Экстракт отфильтровали под вакуумом. Этот процесс экстракции повторили еще два раза. Экстракты объединили и выпарили. Выход: 23,29 г (11,65% вес./вес.). Выяснили, что экстракт примера 1 содержит 6% соединения 1 (описанного в примере 4), как оценили с помощью ВЭТСХ. Пример 2. Приготовление этилацетатного экстракта Sphaeranthus indicus. Сухие цветочные и плодовые головки Sphaeranthus indicus (350 г) измельчили. Порошковый материал экстрагировали с помощью этилацетата (3 л) взбалтыванием при 60 С на протяжении 3 ч. Экстракт отфильтровали под вакуумом. Этот процесс экстракции повторили еще два раза. Экстракты объединили и выпарили. Выход: 19 г (9,5% вес./вес.). Пример 3. Приготовление водного экстракта Sphaeranthus indicus. Сухие цветочные и плодовые головки Sphaeranthus indicus (200 г) измельчили. Порошковый материал экстрагировали с помощью воды (1,2 л) взбалтыванием при 80-90 С на протяжении 3 ч. Экстракт отфильтровали под вакуумом. Этот процесс экстракции повторили. Экстракты объединили и выпарили для удаления воды. Далее неочищенный экстракт высушили сушкой вымораживанием. Выход: 21 г(10,5% вес./вес.). Пример 4. Выделение 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Ннафто[1,2-b]фуран-2-она (соединение 1). Метанольный экстракт (32 г), приготовленный способом, описанным в примере 1, очистили колоночной хроматографией (силикагель, метанол в хлороформе). Окончательную очистку выполнили препаративной ВЭЖХ (колонка силикагеля, гексан:изопропанол, 95:5) для получения указанного соединения. 1H ЯМР (CDCl3, 500 MHz): 51,085 (3 Н, СН 3), 4,997 (1H, s), 5,801 (1H, s), 6,270 (1H, s); МС: m/e (ES) 248 (М+). Соединение охарактеризовали сравнением полученных данных спектра с известными в литературеJ. Chem. Research (M), 0501-0509, 1989). Фармакологические результаты Эффективность данных растительных экстрактов, соединений, выделенных очисткой экстракта, и формуляций по ингибированию активности TNF- и интерлейкинов (IL-1, IL-6 и IL-8) определяли рядом фармакологических исследований, хорошо известных в данной области и описанных ниже. In vitro обследование для идентификации ингибиторов TNF-. Пример 5. Первичное обследование - мононуклеарные клетки периферийной крови человекаTNF-, продуцируемые липополисахаридами (LPS) в hPBMC, измерили согласно способу, описанному Jansky L. et al. (Physiol. Res. 52: 593-598, (2003. Кровь отбирали у здоровых доноров в пробирки с вакуумом (BD вакутейнер) с калия EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота). РВМС выделили с помощью градиентного центрифугирования в растворе Histopaque-1077 (Sigma). Выделенные РВМС суспендировали в культуральной среде RPMI (Gibco BRL, Pasley, Великобритания), содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) (Hyclone, Utah, США), 100 Единиц/мл пенициллина (SigmaChemical Co. St. Louis, МО) и 100 мкг/мл стрептомицина (Sigma Chemical Co. St. Louis, MO). Концентрацию клеток отрегулировали до 1106 клеток/мл. Жизнеспособность, как определено удалением красителя трипанового синего, составляла равномерно 98%. Клеточную суспензию (100 мкл) добавили в лунки 96-лункового культурального планшета. После посева клеток 79 мкл культуральной среды и 1 мкл восьми различных концентраций анализируемых образцов (окончательная концентрация 0,03, 0,1, 0,3, 1, 3,10, 30, 100 мкг/мл), растворенных в DMSO (диметилсульфоксид, Sigma, МО, США), добавили к клеткам. Окончательную концентрацию DMSO довели до 0,5%. Растворитель (0,5% DMSO) использовали как контроль. Ролипрам (100, 300 мкМ) использовали как стандарт. Планшеты инкубировали 30 мин при 37 С в атмосфере 5% СО 2. В заключение добавили 20 мкл (10 мкг/мл) на лунку LPS, (Escherchia coli 0127:B8, Sigma Chemical Co., St. Louis, МО) до окончательной концентрации 1 мкг/мл. Планшеты инкубировали при 37 С 5 ч в атмосфере 5% СО 2. Для оценивания цитотоксического эффекта растительных экстрактов анализ клеточной жизнеспособности выполняли с помощью реагента MTS (3-(4,5-диметил-7 014070 тиазол-2-ил)-5-(3-карбоксиметоксифенил)-2-(4-сульфонил)-2 Н-тетразолиум) после 5 ч инкубации. Супернатанты собрали и исследовали по TNF- с помощью ELISA (твердофазный иммуноферментный анализ), как описано производителем (OptiEIA ELISA sets, BD Biosciences, Pharmingen). Регистрировали процент ингибирования. Оценивали процент цитотоксичности анализируемых образцов по сравнению с контролем. Результаты приведены в табл. 1. Таблица 1 Ингибирование TNF- в мононуклеарных клетках периферической крови человека Пример 6. Эффект на провоспалительные цитокины, высвобождаемые стимулируемыми LPShPBMC. Эффект растительного экстракта на провоспалительные цитокины: TNF-, интерлейкин-1 (IL-1),интерлейкин-6 (IL-6) и интерлейкин-8 (IL-8) измерили с помощью образования супернатантов в первичном исследовании. Уровни этих цитокинов оценили с помощью ELISA, как описано производителем(OptiEIA ELISA sets, BD Biosciences, Pharmingen). Значение 50% ингибиторной концентрации (IC50) рассчитали методом нелинейной регрессии с помощью программного обеспечения GraphPad (Prism 3.03). Таблица 2 Эффект экстракта примера 1 на провоспалительные цитокины Заключение: выявили ингибирование экстрактом примера 1 провоспалительных цитокинов (TNF-,IL-1, IL-6 и IL-8), высвобождаемых стимулируемыми LPS hPBMC. Пример 7. Эффект соединения 1 на провоспалительные цитокины, высвобождаемые стимулируемыми LPS hPBMC. Соединение 1 получили с помощью методики примера 4. Оценивание биоактивности выполнили по методике примера 6. Эффект соединения 1 на провоспалительные цитокины: TNF-, интерлейкин-1(IL-1), интерлейкин-6 (IL-6) и интерлейкин-8 (IL-8), измерили с помощью образования супернатантов в первичном исследовании. Уровни этих цитокинов оценили с помощью ELISA, как описано производителем (OptiEIA ELISA sets, BD Biosciences, Pharmingen). Значения 50% ингибиторной концентрации (IC50) рассчитали методом нелинейной регрессии с помощью программного обеспечения GraphPad (Prism 3.03). Результаты приведены в табл. 3. Заключение: выявили ингибирование соединением 1 провоспалительных цитокинов (TNF-, IL-1,IL-6 и IL-8), высвобождаемых стимулируемыми LPS hPBMC. Пример 8. Эффект на провоспалительные цитокины, образованные синовиальными клетками, полученными от пациента с РА. Образование цитокинов синовиальными клетками, полученными от пациента с ревматоидным артритом (РА), перенесшего хирургическое замещение на колене, измерили согласно способу, описанномуBrennan, F.M. et al. (The Lancet., July, 29: 244-247, (1989. Ткань синовиальной мембраны поместили вDMEM (среда Игла, модифицированная Дюльбекко) (Gibco), содержащую 10% FBS, 100 Единиц/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина, 4 мг/мл коллагеназы типа I (Worthington), 1,5 мкг/мл ДНКазы типа I (Sigma) и 15 Единиц/мл гепарина, и инкубировали при 37 С 3 ч. После инкубации погруженную ткань отфильтровали через 70-мкм мембрану, а клетки промыли 3 раза в полной среде (DMEM с 10%FBS). Синовиальные клетки культивировали при 1106 клеток/мл в присутствии/отсутствии анализируемого образца в течение 10 ч. Супернатанты собрали центрифугированием, а уровни цитокинов (TNF-,IL-1, IL-6, IL-8) измерили с помощью ELISA. Для оценивания цитотоксического эффекта растительных экстрактов анализ клеточной жизнеспособности выполняли с помощью реагента MTS. Значение 50% ингибиторной концентрации (IC50) рассчитали методом нелинейной регрессии с помощью программного обеспечения GraphPad (Prism 3.03). Заключение: выявили ингибирование экстрактом примера 1 провоспалительных цитокинов (TNF-,IL-1, IL-6 и IL-8), продуцируемых синовиальными клетками, полученными от пациента с РА. Пример 9. Эффект соединения 1 на провоспалительные цитокины, продуцируемые синовиальными клетками, полученными от пациента с РА. Эффект соединения 1 на провоспалительные цитокины, продуцируемые синовиальными клетками,полученными от пациента с РА, изучали по соединению 1, как описано методикой примера 8. Результаты приведены в табл. 4. Таблица 4 Эффект соединения 1 на провоспалительные цитокины,продуцируемые синовиальными клетками Заключение: выявили ингибирование соединением 1 провоспалительных цитокинов (TNF-, IL-6 иIL-8), продуцируемых синовиальными клетками, полученными от пациента с РА. Пример 10. Клеточный ELISA для экспрессии адгезийных молекул. Исследование разработали на основе ссылки на Transplantation, vol. 63(5), 759-764, 1997 с модификациями. Клеточная культура и реагенты. Эндотелиальные клетки пупочной вены человека (HUVEC) получили от Cascade Biologies и выдерживали в М 200 (Cascade Biologies, Portland, Or), дополненной ростовой добавкой с низким содержанием сыворотки (LSGS) при 37 С в инкубаторе с 5% СО 2. Клетки U937 (АТСС, Manassas, VA) выращивали на среде RPMI 1640, дополненной 10% FBS (Hyclone, Logan, UT). Рекомбинантный человеческий TNF-,антитела к VCAM-1, ICAM-1, Е-селектину получили от RD Systems, а LPS получили от Sigma (St.Louis, МО). Клеточный ELISA для экспрессии адгезийных молекул.HUVEC высеяли при 7105 клеток/лунка в 96-луночные планшеты, покрытые фибронектином. Клетки стимулировали TNF- (10 нг/мл) или LPS (1 мкг/мл) через 30 мин после добавления анализируе-9 014070 мого соединения. После стимуляции клетки (Е-селектин и ICAM-1) фиксировали параформальдегидом в фосфатном буферном растворе (PBS). Неспецифическое связывание блокировали 2% бычьим сывороточным альбумином (BSA) в фосфатном буферном растворе (PBS) в течение 1 ч, а клетки инкубировали с первичным антителом в течение 2 ч. Для определения VCAM-1 клетки блокировали, инкубировали с первичным антителом на протяжении ночи, а затем фиксировали. Клетки промыли 0,1% BSA в PBS и инкубировали с конъюгированным с пероксидазой антителом (Ab) к мышиному иммуноглобулинуG (IgG), добавленным в течение 90 мин. После семикратного промывания добавили 3,3'5,5'-тетраметилбензидиновый жидкий субстрат (ТМВ субстрат) и определяли оптическую плотность каждой лунки при 450 нм с помощью считывающего устройства микротитровального планшета (Spectramax, Molecular Devices, CA). BAY 11-7082 [(E)-3-(4-метилфенилсульфонил)-2-пропеннитрил] использовали как стандарт, aDMSO как контроль растворителя. Оценивали процент ингибирования анализируемого образца по сравнению с контролем. Значение 50% ингибирующей концентрации (IC50) для каждого образца по сравнению с контролем определяли методом нелинейной регрессии. Результаты приведены в табл. 5. Таблица 5 Клеточный ELISA для экспрессии адгезийных молекул для экстракта примера 1 и соединения 1 Заключение: экстракт примера 1 и соединение 1 в зависимости от дозы снижают TNFиндуцированную поверхностную экспрессию в эндотелиальных клетках адгезийных молекул, таких как ICAM-1,VCAM-1 и Е-селектин. Пример 11. Адгезия ТНР-1 мононуклеарных клеток к HUVEC монослоям. Исследования адгезии выполняли на линии промоноцитных клеток ТНР-1, которая признана как приемлемая модель для моноцитов при исследованиях адгезии в Circ. Res., 97, 236-243, 2005 с модификациями. Клетки ТНР-1 дважды промыли средой для мечения (М 200 плюс LSGS). Клетки ТНР-1 (6105 клеток на мл) пометили 10 мкг/мл ацетоксиметилового эфира бис-карбоксиэтилкарбоксифлюоресцина(флуоресцентная проба, BCECF-AM; Sigma) в течение 30 мин при комнатной температуре. После гашения с 0,1% BSA гранулу ресуспендировали в среде для мечения. Для оценки адгезии с моноцитамиHUVEC монослои обработали TNF- (1 нг/мл) в присутствии или отсутствии различных концентраций анализируемого образца. Среду удалили, промыли, добавили клетки, меченные ТНР-1 в лунки (6104 клеток на лунку), и инкубировали 10 мин при комнатной температуре в темноте. После совместного инкубирования лунки промыли, наполнили лизирующим буфером (0,1% Тритон-Х в 1,5 М Tris буфера) и инкубировали 30 мин. Флуоресценцию измерили с помощью считывающего устройства для флуоресценции (PolarStar Optima, BMG Labtech) с пиком возбуждения 485 нм и пиком эмиссии 520 нм. Значения являются средними значениями + SEM (стандартная ошибка среднего значения), представляя данные флуоресценции адгезии. BAY 11-7082 [(Е)-3-(4-метилфенилсульфонил)-2-пропеннитрил] использовали как стандарт, a DMSO как контроль растворителя. Результаты приведены в табл. 6.- 10014070 Таблица 6 Адгезия ТНР-1 мононуклеарных клеток к HUVEC монослоям для экстракта примера 1 и соединения 1 Заключение: экстракт примера 1 и соединение 1 ингибировали стимулированную TNF- адгезию моноцитных ТНР-1 клеток к HUVEC при 10 мкг/мл и 1 мкМ соответственно. Поскольку эти соединения ингибируют на поверхности клеток экспрессию адгезии молекул на HUVEC, а также моноцитную адгезию к HUVEC, таким образом, они могут затруднять миграцию лейкоцитов, что является ключевым событием в хронических воспалительных болезнях, и могли бы быть полезными при ряде воспалительных нарушений.In vivo исследования Пример 12. Высвобождение фактора некроза опухоли (TNF)- , индуцированного липополисахаридами (LPS), у мышей BALB/c. Протокол, описанный Fukuda Т. et al. (Eur. J. Pharmacol., 391: 317-320, (2000, является следующим. Мышей BALB/c распределили на группы по десять в каждой. Анализируемый образец суспендировали вTween 80 и 0,5% карбоксиметилцеллюлозе (КМЦ), орально (р.о.) вводили мышам. Через один час LPS,растворенные в стерильном апирогенном солевом растворе, вводили i.p. (интраперитониально) при дозе 1 мг/кг. Группа отрицательного контроля получала солевой раствор в виде i.p. инъекции, тогда как все остальные группы получали LPS. Ролипрам (30 мг/кг, р.о.) использовали как стандартное лекарственное средство. Через один час и полчаса под уретановой анестезией (1,5 г/кг, i.p.) кровь отбирали из абдоминальной артерии с помощью 1-мл шприца, промытого гепарином (500 международных единиц/мл). Гепарин (5 мкл) использовали как антикоагулянт в пробирках с собранной кровью. Плазму отделили центрифугированием при 10000 rpm при комнатной температуре, поделили на аликвоты и хранили при-70 С до анализа. Уровни TNF- в образцах крови исследовали с помощью ELISA и рассчитали процент ингибирования высвобождения TNF- по сравнению с контрольной группой. Результаты приведены в табл. 7. Таблица 7 Высвобождение фактора некроза опухоли (TNF)-, индуцированного липополисахаридами (LPS), у мышей BALB/c для экстракта примера 1 и для соединения 1- 11014070 Пример 13. Индуцированный коллагеном артрит (ИКА) у мышей DBA/1J. Самцов мышей DBA/1J возрастом 8-10 недель иммунизировали 200 мкг коллагена типа II в виде эмульсии в полном адъюванте Фрейнда внутрикожной инъекцией в основании хвоста. Через двадцать один день мышам ввели бустерную дозу 100 мкг коллагена типа II. Ряд наивных мышей также выдерживали рядом. Начиная с дня 23, мышей оценили на возникновение ревматоидного артрита с помощью суставного индекса в качестве параметра. В исследовании использовали мышей с минимальной оценкой на задней лапе 2. Экстракт примера 1 вводили при дозе 400 m.p.k (миллиграм на килограмм веса тела) оральным путем дважды в день в течение 12 дней. Соединение 1 вводили при дозе 50 m.p.k. и 100 m.p.k. оральным путем дважды в день в течение 12 дней. Энбрел (3 мг/кг) использовали как стандарт и вводили подкожно один раз в день. Ежедневно регистрировали объем лапы и суставной индекс. Данные анализировали по статистической значимости. В конце эксперимента лапы мышей обработали для гистопатологической оценки. Данные снижения толщины лапы и снижение суставного индекса приведены в табл. 8. Таблица 8 Эффективность экстракта примера 1 и соединения 1 на модели ИКА Гистопатологический анализ. Оценивали благоприятный эффект экстракта примера 1 и соединения 1 на патологию артрита(ИКА) мышей DBA/1J. Микроскопию выполняли после окрашивания синовиальных суставов гематоксилином и эозином, а также сафранином О. Гистопатологический анализ показал, что и экстракт примера 1,и соединение 1 проявляли благоприятные эффекты на снижение разрушения хряща, разрушение кости и синовит по сравнению с группой, обработанной растворителем. Заключение: и экстракт примера 1, и соединение 1 проявляли благоприятные эффекты на ИКА модели артрита. Исследования токсичности Пример 14. Острая оральная токсичность. Экстракт примера 1 анализировали по острой оральной токсичности на крысах Sprague Dawley в соответствии с руководящими принципами, установленными в "Списке Y" Закона о лекарственных и косметических средствах, 1940 (Индия). Экстракт примера 1, суспендированный в 0,5% Tween 80 в воде, вводили орально принудительным путем как отдельную дозу группе крыс из пяти самцов и пяти самок с максимально приемлемой дозой 2000 мг/кг веса тела. Животных наблюдали по смертности и признакам интоксикации в течение 14-дневного периода после введения дозы, и также регистрировали вес их тел. В завершении исследования на всех крысах выполнили некропсию. Заключение: в данном исследовании отдельное оральное введение экстракта примера 1 крысамSprague Dawley с максимальной приемлемой дозой 2000 мг/кг не вызвало смертность у обработанных крыс. Выяснили, что средняя летальная доза (LD50) экстракта примера 1 после орального введения в виде отдельной дозы крысам Sprague Dawley, и самцам, и самкам, составила более чем 2000 мг/кг веса тела. Пример 15. Подострая оральная токсичность. Изучение подострой оральной токсичности (28 дней) экстракта примера 1 на крысах Sprague Dawley в соответствии с руководящими принципами, установленными в "Списке Y" Закона о лекарственных и косметических средствах, 1940 (Индия). Группам шести самцов и шести самок крыс Sprague Dawley вводили ежедневно дозы 0, 250, 500 или- 12014070 1000 мг/кг веса тела экстракта примера 1 принудительным оральным путем в течение 28 дней, и на день 29 крыс забили для оценки его токсичности. Крыс обследовали ежедневно на признаки токсичности. Вес тела и потребление пищи для отдельных крыс регистрировали на протяжении периода эксперимента вместе со всеми случаями смертности и признаками ухудшения здоровья. По окончании исследования выполнили лабораторные обследования крови. Всех животных подвергли полной некропсии и зарегистрировали вес определенных органов. Гистопатологическую оценку выполнили на всех перечисленных протоколом тканях у всех животных контрольных групп и групп высокой дозировки. Все животные, получавшие экстракт примера 1 при дозах 1000 мг/кг и не более 1000 мг/кг, выжили в течение периода лечения. Не наблюдалось клинических признаков токсичности у какого-либо из обработанных животных. Данные прибавления веса тела и приема пищи не показали никакого неблагоприятного эффекта из-за анализируемого образца при дозах 1000 мг/кг и не более 1000 мг/кг. Заключение: на основе полученных данных этого исследования не наблюдали никакой уровень неблагоприятного эффекта (NOAEL) экстракта примера 1 на крысах после орального введения в течение 28 дней не более чем 1000 мг/кг веса тела. Формуляции Пример 16. Приготовление капсулы. Общая методика: ингредиенты 01-05 в определенном количестве взвесили и поместили в приемлемый миксер. Содержимое хорошо смешали, добавили ингредиенты 09, 10 и 11, а смешивание продолжили. К этой смеси добавили ингредиенты 06, 07 и 08 и массу смешивали 30-45 мин. Смесь пропустили сквозь сито 40 меш и использовали для наполнения капсул. Таблица 9 Капсульная формуляция Sphaeranthus indicus. Каждая капсула содержит Пример 17. Приготовление таблетки. Общая методика: ингредиенты 01-05 в определенном количестве взвесили и поместили в приемлемый миксер. Добавили ингредиент 13 и влажную массу хорошо смешали. К этому добавили ингредиенты 09, 10, 11 и 12 и смешивание продолжили до получения гомогенизированной массы. Эту увлажненную массу пропустили сквозь сито 16 меш и влажные гранулы сушили при 70 С 5 С. К полученным гранулам добавили ингредиенты 06, 07 и 08 и массу смешивали 30-45 мин. Затем смесь пропустили сквозь сито 40 меш и прессовали таблетки с помощью приемлемого пуансона. Пример 18. Приготовление сиропа. Общая методика: ингредиент 01 взвесили и добавили к нему ингредиент 15 при постоянном перемешивании. К этому добавили отвешенные количества ингредиентов 03, 04, 05, 06, 08, 09, 10, 11, 12 и 14 при постоянном перемешивании до растворения. Ингредиенты 02 и 13 отвесили и растворили в ингредиенте 07. К этому добавили очищенную воду до объема 10 мл. Полученный раствор отфильтровали сквозь фильтр-пресс/нейлоновую ткань. Таблица 11 Сиропная формуляция Sphaeranthus indicus. Каждые 10 мл сиропа содержат- 14014070 Пример 19. Приготовление формуляции крема. Общая методика: ингредиент 01 взвесили и суспендировали в ингредиенте 17. Расплавили ингредиенты 02-07. Взвесили ингредиенты 08, 09, 10, 11, 13 и 14 и смешали с порцией 18. Ингредиент 12 взвесили, добавили к оставшейся порции ингредиента 18 и смешали с ингредиентами 15 и 16. Содержимое всех этапов смешали при 55 С и гомогенизировали, позволили охладиться и запаковали в приемлемый тюбик. Таблица 12 Формуляция крема Sphaeranthus indicus. Каждые 100 г крема содержат Пример 20. Приготовление формуляции геля. Общая методика: ингредиент 01 взвесили и суспендировали в ингредиенте 06. Ингредиент 04 растворили в ингредиенте 07. Ингредиенты 05 и 08 смешали. Ингредиенты 02 и 03 смешали. Смесь хорошо перемешали и запаковали в приемлемый тюбик. Таблица 13 Формуляция геля Sphaeranthus indicus. Каждые 100 г геля содержат- 15014070 Пример 21. Приготовление формуляции мази. Общая методика: ингредиенты 02-06 взвесили и расплавили в приемлемом сосуде. К этому добавили ингредиент 01. К смеси добавили ингредиенты 07 и 08. Содержимое хорошо перемешали и запаковали в приемлемый тюбик. Таблица 14 Формуляция мази Sphaeranthus indicus. Каждые 100 г мази содержат Пример 22. Приготовление таблетки. Общая методика: ингредиенты 01 и 02 взвесили отдельно, просеяли сквозь сито 20 меш и смешали. Ингредиенты 03-07 взвесили и просеяли сквозь сито 40 меш. Ингредиенты 03, 04, 05 и 07 смешали и добавили к смеси ингредиентов 01 и 02. К этой смеси добавили ингредиент 06 и смешали. Полученную смазанную смесь прессовали на приемлемом механическом устройстве. Таблица 15 Таблеточная формуляция соединения 1. Каждая таблетка содержит Пример 23. Приготовление таблетки. Общая методика: ингредиенты 01 и 02 взвесили отдельно и просеяли сквозь сито 20 меш. Ингредиент 04 растворили в ингредиент 08 при перемешивании. Полученную смесь гранулировали с помощью связывающего раствора. Влажную массу пропустили сквозь приемлемое сито. Просеянную массу сушили при комнатной температуре (25 С), а затем при около 40 С. Сухую массу просеяли сквозь приемлемое сито. Ингредиенты 03, 05 и 07 отдельно просеяли сквозь сито 40 меш и смешали. Добавили к этой сухой массе и смешали. К этой смеси добавили ингредиент 06 и смазанную смесь прессовали на приемлемом механическом устройстве.- 16014070 Таблица 16 Таблеточная формуляция соединения 1. Каждая таблетка содержит Пример 24. Приготовление капсулы. Общая методика: ингредиенты 01 и 02 взвесили отдельно, просеяли сквозь сито 20 меш и смешали. Ингредиент 03 взвесили и просеяли сквозь сито 40 меш. Все ингредиенты смешали и смазали ингредиентом 04. Смесью наполнили пустую твердую желатиновую капсулу с помощью приемлемого механического устройства. Таблица 17 Формуляция капсулы соединения 1. Каждая капсула содержит ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение композиции для лечения воспалительного нарушения, опосредованного фактором некроза опухоли- (TNF-) и интерлейкинами (IL-1, IL-6, IL-8), причем указанная композиция включает терапевтически эффективное количество экстракта цветочных и плодовых головок растения Sphaeranthusindicus как активного ингредиента и фармацевтически приемлемые носители. 2. Применение по п.1, где экстракт Sphaeranthus indicus содержит биоактивный маркер. 3. Применение по п.2, где биоактивный маркер, содержащийся в экстракте Sphaeranthus indicus, является 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-оном(соединение 1). 4. Применение по п.3, где экстракт Sphaeranthus indicus содержит 2-9% соединения 1. 5. Применение композиции для лечения воспалительного нарушения, опосредованного фактором некроза опухоли- (TNF-) и интерлейкинами (IL-1, IL-6, IL-8), причем указанная композиция включает терапевтически эффективное количество 3 а-гидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9bоктагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-она (соединение 1) как активного ингредиента и фармацевтически приемлемые носители. 6. Применение по п.1 или 5, где воспалительное нарушение опосредовано молекулой межклеточной адгезии 1 (ICAM-1), молекулой адгезии васкулярных клеток 1 (VCAM-1) и Е-селектином. 7. Применение по любому из предыдущих пп.1-6, где указанная композиция адаптирована для орального, местного или чрескожного введения субъекту, нуждающемуся в лечении воспалительного нарушения. 8. Применение по п.7, где указанная композиция, адаптированная для орального введения, сформулирована в форме таблетки, капсулы или сиропа. 9. Применение по п.7, где указанная композиция, адаптированная для местного введения, сформулирована в форме крема, геля или мази. 10. Применение по любому из предыдущих пп.1-9, где воспалительное нарушение выбрано из группы, состоящей из болезни воспаления кишечника, ревматоидного артрита, ювенильного ревматоид- 17014070 ного артрита, псориазного артрита, остеоартрита, рефракторного ревматоидного артрита, хронического неревматоидного артрита, остеопороза/резорбции кости, коронарной болезни сердца, атеросклероза, васкулита, язвенного колита, псориаза, синдрома расстройства дыхания у взрослых, диабета, нарушений гиперчувствительности кожи замедленного типа и болезни Альцгеймера. 11. Применение по любому из предыдущих пп.1-9, где воспалительное нарушение является ревматоидным артритом. 12. Применение по любому из предыдущих пп.1-9, где воспалительное нарушение является болезнью воспаления кишечника. 13. Применение по любому из предыдущих пп.1-9, где воспалительное нарушение является язвенным колитом. 14. Применение по любому из предыдущих пп.1-9, где воспалительное нарушение является атеросклерозом. 15. Способ лечения воспалительного нарушения, опосредованного фактором некроза опухоли(TNF-) и интерлейкинами (IL-1, IL-6, IL-8), причем указанный способ включает введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, композиции, включающей терапевтически эффективное количество экстракта цветочных и плодовых головок растения Sphaeranthus indicus в качестве активного ингредиента и фармацевтически приемлемых носителей. 16. Способ лечения воспалительного нарушения, опосредованного фактором некроза опухоли(TNF-) и интерлейкинами (IL-1, IL-6, IL-8), причем указанный способ включает введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, композиции, включающей терапевтически эффективное количество 3 агидрокси-5 а,9-диметил-3-метилен-3 а,4,5,5 а,6,7,8,9b-октагидро-3 Н-нафто[1,2-b]фуран-2-он (соединение 1) в качестве активного ингредиента и фармацевтически приемлемых носителей. 17. Способ по п.15 или 16, где воспалительное нарушение опосредовано молекулой межклеточной адгезии 1 (ICAM-1), молекулой адгезии васкулярных клеток 1 (VCAM-1) и Е-селектином. 18. Способ по любому из предыдущих пп.15-17, где указанная композиция адаптирована для орального, местного или чрескожного введения субъекту, нуждающемуся в лечении воспалительного нарушения. 19. Способ по п.18, где композиция, адаптированная для орального введения, сформулирована в форме таблетки, капсулы или сиропа. 20. Способ по п.18, где композиция, адаптированная для местного введения, сформулирована в форме таблетки, капсулы или сиропа. 21. Способ по любому из предыдущих пп.15-20, где воспалительное нарушение выбрано из группы,состоящей из болезни воспаления кишечника, ревматоидного артрита, ювенильного ревматоидного артрита, псориазного артрита, остеоартрита, рефракторного ревматоидного артрита, хронического неревматоидного артрита, остеопороза/резорбции кости, коронарной болезни сердца, атеросклероза, васкулита,язвенного колита, псориаза, синдрома расстройства дыхания у взрослых, диабета, нарушения гиперчувствительности кожи замедленного типа и болезни Альцгеймера. 22. Способ по любому из предыдущих пп.15-21, где воспалительное нарушение является ревматоидным артритом. 23. Способ по любому из предыдущих пп.15-21, где воспалительное нарушение является болезнью воспаления кишечника. 24. Способ по любому из предыдущих пп.15-20, где воспалительное нарушение является язвенным колитом. 25. Способ по любому из предыдущих пп.15-20, где воспалительное нарушение является атеросклерозом.