Метаболиты (r)-3-(4-(7h-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1h-пиразол-1-ил)-3-циклопентилпропаннитрила, ингибитора janus киназ

Данное изобретение предлагает активные метаболиты 3-(4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4 ил)-1 Н-пиразол-1-ил)-3-циклопентилпропаннитрила, которые модулируют активность Janus киназ и которые используют для лечения заболеваний, связанных с активностью Janus киназ,включая, например, связанные с иммунной системой болезни, кожные заболевания, миелоидные пролиферативные нарушения, рак и другие болезни. Роджерс Джеймс Д., Арванитис Аргириос Г., Ши Джек Гуоен (US) Медведев В.Н. (RU) Область техники, к которой относится изобретение Изобретение предлагает активные метаболиты (R)-3-(4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Нпиразол-1-ил)-3-циклопентилпропаннитрила, которые модулируют активность Janus киназ и которые используют для лечения заболеваний, связанных с активностью Janus киназ, включая, например, иммунопатологические заболевания, кожные заболевания, миелоидные пролиферативные нарушения, рак и другие болезни. Предшествующий уровень техники Протеинкиназы (РК) представляют собой группу ферментов, которые регулируют разнообразные биологические процессы, включая среди прочих рост, выживание и дифференциацию клеток, образование и морфогенез органов, неоваскуляризацию, репарацию и регенерацию ткани. Протеинкиназы осуществляют свои физиологические функции через катализирование фосфорилирования белков (или субстратов) и посредством этого модулируя клеточные активности субстратов в различных биологических средах. Помимо функций в нормальных тканях/органах, многие протеинкиназы играют более специализированные роли в хозяине-носителе заболеваний человека, включая рак. Подмножество протеинкиназ(также называемых онкогенными протеинкиназами), при нарушении регуляции, могут вызвать образование и рост опухолей, и в дальнейшем способствовать поддержанию и прогрессированию опухоли(Blume-Jensen P et al., Nature 2001, 411 (6835): 355-365). До сих пор онкогенные протеинкиназы представляют собой одну из самых больших и наиболее привлекательных групп мишеней-белков для воздействия на рак и разработки лекарственных средств. Семейство Janus киназ (JAK) играет роль в цитокинзависимой регуляции пролиферации и функционировании клеток, вовлеченных в иммунную реакцию. В настоящее время для млекопитающих известно четыре представителя семейства JAK: JAK1 (также известная как Janus киназа-1), JAK2 (также известная как Janus киназа-2), JAK3 (также известная как Janus киназа, лейкоцит; JAKL; L-JAK и Janus киназа-3) и TYK2 (также известная как протеинтирозиновая киназа 2). Размер белков JAK колеблется в диапазоне от 120 до 140 кДа, и эти белки JAK содержат семь консервативных доменов JAK гомологии(JH; один из них представляет собой функциональный каталитический киназный домен, и другой представляет собой псевдокиназный домен, который потенциально выполняет регуляторные функции и/или служит в качестве стыковочного сайта для STATs (Scott, Godshall et al. 2002, supra). Блокирование сигнальной трансдукции на уровне JAK киназ представляет собой перспективный подход для совершенствования лечения раковых заболеваний человека. Ингибирование JAK киназ, как ожидается, также может привести к благоприятному исходу лечения для пациентов, страдающих кожными иммунопатологическими заболеваниями, такими как псориаз и кожная сенсибилизация. Таким образом, существует потребность в ингибиторах Janus киназ и родственных киназ, и в некоторых публикациях сообщается об эффективных классах соединений подобного типа. Например, о некоторых ингибиторах JAK, включая (R)-3-(4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил)-3-циклопентилпропаннитрил, формула которого представлена ниже, сообщается в заявке на патент США 11/637545, поданной 12 декабря 2006 года. Таким образом, постоянно существует потребность в новых и улучшенных средствах, которые ингибируют киназы, такие как Janus киназы, для разработки на их основе новых и более эффективных фармацевтических препаратов для лечения рака и других заболеваний. Метаболиты, композиции и способы,описанные в настоящем описании, направлены на удовлетворение этих потребностей и других целей. Краткое изложение существа изобретения Настоящее изобретение предлагает соединение, выбранное из 3-(4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил])-1 Н-пиразол-1-ил)-3-(3-гидроксициклопентил)пропаннитрила; 3-(4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил)-3-(2-гидроксициклопентил)пропаннитрила и 3-(4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил)-3-(3-оксоциклопентил)пропаннитрила или его фармацевтически приемлемую соль. Кроме того, настоящее изобретение предлагает одно или несколько из вышеупомянутых соединений, или их фармацевтически приемлемые соли, в по существу изолированной форме. Кроме того, настоящее изобретение предлагает композиции, содержащие соединение по данному изобретению, или его фармацевтически приемлемую соль, и по крайней мере один фармацевтически приемлемый носитель. Далее настоящее изобретение предлагает способы модуляции активности JAK включающие контактирование JAK с соединением по данному изобретению или его фармацевтически приемлемой солью. Настоящее изобретение, кроме того, предлагает способы лечения болезни у пациента, включающие введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. Настоящее изобретение, кроме того, предлагает соединения по данному изобретению или их фармацевтически приемлемые соли для применения в способе лечения человека или животного (терапевтическим путем). Настоящее изобретение, кроме того, предлагает соединения по данному изобретению или их фармацевтически приемлемые соли для применения в способе лечения одного или нескольких заболеваний,описанных в настоящем описании. Кроме того, настоящее изобретение также предлагает применение соединений по данному изобретению или их фармацевтически приемлемых солей для получения лекарственного средства для применения в способе лечения одного или нескольких заболеваний, описанных в данном контексте. Подробное описание изобретения Изобретение предлагает соединения, которые являются активными метаболитами (R)-3-(4-(7 Нпирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил)-3-циклопентилпропаннитрила, ингибитора JAK. Эти метаболиты модулируют активность одной или нескольких JAK и их используют, например, для лечения болезней, связанных с экспрессией или активностью JAK. Метаболиты по данному изобретению представлены в табл. 1 ниже. Приведенные структуры, как предполагают, охватывают все возможные стереоизомеры. Таблица 1 Метаболиты по данному изобретению выделяют из образцов мочи крыс или собак, собранных при фармакокинетических и токсикокинетических исследованиях ингибитора JAK, (R)-3-(4-(7 Н-пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил)-3-циклопентилпропаннитрила (соединение 1). Как видно из таблицы 2 и детального рассмотрения примера А, метаболиты являются активными и сильнодействующими ингибиторами JAK и имеют преимущественные свойства, которые связаны с существенно большими свободными фракциями и более высокой метаболической стабильностью в микросомах человека, по сравнению с соединением 1. Эти данные дают возможность предположить, что метаболиты по данному изобретению могут, в соответствии с желанием, иметь более длительный период полувыведения у людей, чем имеет соединение 1. В некоторых вариантах метаболиты по данному изобретению находятся по существу в изолированной форме. Под выражением "по существу изолированное" подразумевается, что соединение, по крайней мере, частично или по существу выделено из среды, в которой оно получено или обнаружено. Частичное разделение может включать, например, состав, обогащенный частично соединением по данному изобретению. Существенное разделение может включать составы, содержащие по крайней мере около 50%, по крайней мере около 60%, по крайней мере около 70%, по крайней мере около 80%, по крайней мере около 90%, по крайней мере около 95%, по крайней мере около 97%, или по крайней мере около 99 мас.% метаболита. Настоящее изобретение также включает фармацевтически приемлемые соли соединений, описан-2 017790 ных в данном контексте. Используемый в данном контексте термин "фармацевтически приемлемые соли" относится к производным раскрытых соединений, в которых родительское соединение модифицировано путем превращения имеющейся кислотной или основной части в ее солевую форму. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают, но не ограничиваясь этим, соли неорганических или органических кислот основных остатков, таких как амины; щелочные или органические соли кислотных остатков, таких как карбоновые кислоты и т.п. Фармацевтически приемлемые соли по данному изобретению включают обычные нетоксичные соли родительского соединения, полученные, например, из нетоксичных неорганических или органических кислот. Фармацевтически приемлемые соли по данному изобретению могут быть синтезированы из родительского соединения, которое содержит основную или кислотную часть, обычными химическими способами. В общем, такие соли можно получить путем взаимодействия свободных кислотных или основных форм этих соединений со стехиометрическим количеством соответствующего основания или кислоты в воде или в органическом растворителе, или в смеси обоих; как правило, предпочтительно использование неводной среды, такой как простой эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил. Перечень подходящих солей имеется в Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 и Journal of PharmaceuticalScience, 66, 2 (1977), содержание каждой из которых входит в настоящее описание в полном объеме в виде ссылки. Выражение "фармацевтически приемлемый" используют в настоящем описании при ссылке на соединения, материалы, композиции и/или лекарственные формы, которые, в рамках разумной медицинской оценки, являются подходящими для использования в контакте с тканями человека и животных без проявления чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или возникновения другой проблемы или осложнения, с соответствующим разумным отношением польза/риск. Метаболиты асимметричны (например, имеющие один или несколько стереоцентров). Если не оговорено иначе, то имеются в виду все стереоизомеры, такие как энантиомеры и диастереомеры. Способы получения оптически активных форм из оптически активных исходных продуктов известны в данной области, как например, путем разделения рацемических смесей или путем стереоселективного синтеза. Соединения по данному изобретению также включают все изотопы атомов, встречающихся в метаболитах. Изотопы включают атомы, имеющие одинаковый атомный номер, но различные массовые числа. Например, изотопы водорода, включают тритий и дейтерий. Используемый в настоящем описании термин "соединение", как полагают, включает все стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры и изотопы изображенных структур. Синтез Соединения по данному изобретению, включая их соли, могут быть получены, используя известные способы органического синтеза, и они могут быть синтезированы в соответствии с любым из многих возможных путей синтеза. Реакции получения соединений по данному изобретению можно осуществлять в подходящих растворителях, которые могут быть легко подобраны специалистом средней квалификации в области органического синтеза. Подходящие растворители могут быть, по существу, химически не активны по отношению к исходным продуктам (реагирующим веществам), промежуточным продуктам или продуктам при температурах, при которых протекают реакции, например температурах, которые могут колебаться в диапазоне от температуры замерзания растворителя до температуры кипения растворителя. Данная реакция может осуществляться в одном растворителе или смеси из более чем одного растворителя. В зависимости от конкретной стадии реакции подходящие растворители для конкретной стадии реакции могут быть выбраны специалистом в данной области. Получение соединений по данному изобретению может включать реакции осуществления защиты различных химических групп и удаления защитных групп. Необходимость осуществления защиты и снятия защиты и выбор соответствующих защитных групп может быть легко определена специалистом в данной области. Химию защитных групп можно найти, например, в T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd. Ed., WileySons, Inc., New York (1999), которая включена в настоящее описание в полном объеме в виде ссылки. Реакции могут контролироваться посредством любого подходящего метода, известного в данной области. Например, образование продукта можно контролировать, используя различные методы спектроскопии, такие как спектроскопия ядерного магнитного резонанса (например, 1 Н или 13 С), инфракрасная спектроскопия, спектрофотометрия (например, ультрафиолетовая - видимая), или массспектрометрия, или хроматографические методы, такие как высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) или тонкослойная хроматография. Соединения по данному изобретению можно получить согласно многочисленным препаративным способам, известным в литературе. Иллюстративные синтетические способы получения соединений по данному изобретению приводятся на нижеследующих схемах. Как показано на схеме 1, синтез диастереомерной смеси цис-спиртов I начинается с циклопентенкарбоновой кислоты 1. Циклопентенкарбоновую кислоту 1 подвергают бромолактонизации, следуя способу, описанному ранее (Hodgson, David M.; Witherington, Jason; Moloney, Brian A., Journal of the Chemi-3 017790cal Society, Perkin Transactions 1: Organic and Bio-Organic Chemistry, 1994, 23, 3950), получая соответствующий бромлактон 2. Бромлактон 2 дебромируют, используя дегалогенирующий агент, такой как(Me3Si)3SiH, получая 3. Лактон 3 восстанавливают до соответствующего гемикеталя, используя восстановитель, такой как DIBAL-H; полученный гемикеталь обрабатывают непосредственно илидом 3 а, получая производное кротонитрила 4. Затем нитрил 4 подвергают взаимодействию с пиразолом 5 в присутствии основания, такого как DBU, получая 6 в виде смеси диастереомеров, которую превращают в спирты I после удаления группы SEM. Индивидуальные стереоизомеры этой смеси (I) могут быть разделены хиральной хроматографией, с получением энантиомерно чистых спиртов (4 результирующих стереоизомера). Схема 1 Как показано на схеме 2, синтез транс-спиртов II начинается с диастереомерной смеси спиртов 6. Диастереомерную смесь спиртов 6 обрабатывают бензойной кислотой в условиях реакции Мицунобу,получая смесь транс-бензоатов 7 при полной инверсии. Смесь бензоатов 7 гидролизуют обработкой основанием, таким как LiOH, получая смесь транс-спиртов 8. Затем удаляют группу SEM в спиртах 8, получая диастереомерную смесь транс-спиртов II, которую разделяют хиральной хроматографией, получая индивидуальные стереоизомеры (4 результирующих стереоизомера). Схема 2 Синтез кетонов III представлен на схеме 3. Смесь цис-спиртов 6 может быть окислена в условиях реакции Сверна с получением соответствующей смеси кетонов 9. Удаляют группу SEM в кетонах 9, получая смесь кетона III, которую разделяют хиральной хроматографией, получая индивидуальные стереоизомеры (4 результирующих стереоизомера). Схема 3 Способы Соединения по данному изобретению могут модулировать активность одной или нескольких Janus киназ (JAK). Термин "модулировать", как полагают, относится к способности увеличивать или снижать активность одного или нескольких представителей JAK семейства киназ. Таким образом, соединения по данному изобретению могут быть использованы в способах модуляции JAK путем контактирования JAK с любым одним или несколькими из соединений или композиций, описанных в настоящем описании. В некоторых вариантах соединения по данному изобретению могут действовать как ингибиторы одной или нескольких JAK. В некоторых вариантах соединения по данному изобретению могут действовать, стимулируя активность одной или нескольких JAK. В других вариантах соединения по данному изобретению могут быть использованы для модуляции активности JAK у индивидуума при необходимости модуляции рецептора путем введения модулирующего количества соединения по данному изобретению.JAK, с которыми соединения по данному изобретению связываются и/или которые модулируются соединениями по данному изобретению, включают любого представителя семейства JAK. В некоторых вариантах JAK представляет собой JAK1, JAK2, JAK3 или TYK2. В некоторых вариантах JAK представляет собой JAK1 или JAK2. В некоторых вариантах JAK представляет собой JAK2. В некоторых вариантах JAK представляет собой JAK3. Соединения по данному изобретению могут быть селективными. Под "селективным" подразумевается, что соединение связывается с или ингибирует JAK с более высоким сродством или эффективностью, соответственно, по сравнению с, по крайней мере, одной другой JAK. В некоторых вариантах соединения по данному изобретению являются селективными ингибиторами JAK1 или JAK2 по сравнению с JAK3 и/или TYK2. В некоторых вариантах соединения по данному изобретению являются селективными ингибиторами JAK2 (например, по сравнению с JAKl, JAK3 и TYK2). Не касаясь никаких теоретических обоснований, поскольку ингибиторы JAK3 могут привести к иммунодепрессивным действиям, соединение, которое является селективным в отношении JAK2 по сравнению с JAK3 и которое используют для лечения рака (такого как множественная миелома, например), может предложить дополнительное преимущество, заключающееся в меньшем проявлении иммунодепрессивных побочных действий. Селективность может быть большей по крайней мере приблизительно в 5 раз, по крайней мере приблизительно в 10 раз, по крайней мере приблизительно в 20 раз, по крайней мере приблизительно в 50 раз, по крайней мере приблизительно в 100 раз, по крайней мере приблизительно в 200 раз, по крайней мере приблизительно в 500 раз или по крайней мере приблизительно в 1000 раз. Селективность можно измерить способами, общепринятыми в данной области. В некоторых вариантах селективность может быть тестирована, определяя Km каждого фермента. В некоторых вариантах селективность соединений по данному изобретению в отношении JAK2 по сравнению с JAK3 может быть определена по клеточной концентрации АТФ (АТР). Другой аспект данного изобретения относится к способам лечения связанного с JAK заболевания или нарушения у индивидуума (например, пациента) путем введения индивидууму, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества или дозы соединения по данному изобретению или фармацевтической композиции на его основе. Связанная с JAK болезнь может включать любую болезнь, нарушение или состояние, которое непосредственно или косвенно связано с экспрессией или активностью JAK, включая сверхэкспрессию и/или патологические уровни активности. Связанная с JAK болезнь может также включать любую болезнь, нарушение или состояние, которое можно предотвратить, облегчить или вылечить путем модуляции активности JAK. Примеры JAK-связанных заболеваний включают болезни с участием иммунной системы, включая,например, отторжение трансплантата (органа) (например, отторжение аллотрансплантата и болезнь"трансплантат против хозяина"). Другие примеры связанных с JAK болезней включают аутоиммунные заболевания, такие как рассеянный склероз, ревматоидный артрит, ювенильный артрит, диабет I типа, обыкновенная волчанка, псориаз, воспалительное заболевание кишечника, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, миастения тяжелая, иммуноглобулиновые нефропатии, аутоиммунные нарушения щитовидной железы, и т.п. В некоторых вариантах аутоиммунная болезнь представляет собой аутоиммунное буллезное кожное нарушение, такое как обыкновенная [вульгарная] пузырчатка (PV) или буллезный пемфигоид (ВР). Другие примеры связанных с JAK болезней включают аллергические состояния, такие как астма,пищевые аллергии, диффузный нейродермит и ринит. Другие примеры связанных с JAK болезней включают вирусные заболевания, такие как вирус Эпштейна-Барра (EBV), гепатит В, гепатит С, вирус иммунодефицита человека (HIV), Т-клеточный лимфотропный вирус человека 1 типа (HTLV 1), вирус ветряной оспы (VZV) и вирус папилломы человека (HPV). Другие примеры связанных с JAK болезней или состояний включают кожные заболевания, такие как псориаз (например, псориаз обыкновенный), диффузный нейродермит, кожная сыпь, раздражение кожи, кожная сенсибилизация (например, контактный дерматит или аллергический контактный дерматит). Например, некоторые вещества, включая фармацевтические препараты, при местном применении,могут вызвать кожную сенсибилизацию. В некоторых вариантах совместное введение или последовательное введение по крайней мере одного ингибитора JAK по данному изобретению вместе со средст-5 017790 вом, вызывающем нежелательную сенсибилизацию, может быть полезным в лечении такой нежелательной сенсибилизации или дерматита. В некоторых вариантах кожное заболевание лечат местным нанесением, по крайней мере, одного ингибитора JAK по данному изобретению. В других вариантах связанная с JAK болезнь представляет собой рак, включая типы рака, характеризуемые образованием солидных опухолей (например, рак предстательной железы, рак почки, рак печени, рак поджелудочной железы, рак желудка, рак молочной железы, рак легкого, рак головы и рак шеи,рак щитовидной железы, глиобластома, саркома Капоши, болезнь Кастлемана, меланома и т.д.), злокачественные заболевания крови (например, лимфома, лейкоз, такой как острый лимфобластный лейкоз, острый миелоидный лейкоз (AML) или множественная миелома), и рак кожи, такой как Т-клеточная лимфома кожи (CTCL) и В-клеточная лимфома кожи. Иллюстративные Т-клеточные лимфомы включают Сезари ретикулез и грибовидный микоз. Связанные с JAK болезни могут, кроме того, включать болезни, характеризуемые экспрессией мутантной JAK2, такой как мутантные JAK2, имеющие по крайней мере одну мутацию в псевдокиназном домене (например, JAK2V617F). Связанные с JAK заболевания могут, кроме того, включать миелопролиферативные нарушения(MPD), такие как красная или истинная полицитемия (PV), эссенциальная тромбоцитемия (ЕТ), миелоидная метаплазия с миелофиброзом (МММ), хронический миелоидный лейкоз (CML), хронический миеломоноцитарный лейкоз (CMML), синдром гиперэозинофилии (HES), системный мастоцитоз (SMCD) и т.п. Другие связанные с JAK болезни включают воспаление и воспалительные заболевания. Иллюстративные воспалительные болезни включают воспалительные заболевания глаза (например, ирит, увеит,склерит, конъюнктивит или сопутствующая болезнь), воспалительные заболевания дыхательных путей(например, верхних дыхательных путей, включая нос и синусы, такие как ринит или синусит, или нижних дыхательных путей, включая бронхит, хроническая обструктивная болезнь легких и т.п.), воспалительную миопатию, такую как миокардит, и другие воспалительные заболевания. Другие воспалительные заболевания, поддающиеся лечению соединениями по данному изобретению, включают синдром системной воспалительной реакции (SIRS) и септический шок. Ингибиторы JAK, описанные в настоящем описании, могут, кроме того, использоваться для лечения повреждений, вызванных ишемической реперфузией или болезни или состояния, связанного с воспалительным ишемическим осложнением, таким как удар или остановка сердца. Ингибиторы JAK, описанные в настоящем описании, могут быть, кроме того, использованы для лечения анорексии, кахексии или утомления, такого как усталость, являющаяся следствием или ассоциируемая с прогрессированием рака. Ингибиторы JAK, описанные в данном контексте, могут быть, кроме того, использованы для лечения рестеноза, склеродермита или фиброза. Ингибиторы JAK, описанные в данном контексте, могут,кроме того, использоваться для лечения состояний, связанных с гипоксией или астроглиозом, таких как,например, диабетическая ретинопатия, рак или нейродегенерация. См., например, Dudley, А.С. et al. Biochem. J. 2005, 390(Pt 2):427-36 и Sriram, K. et al. J. Biol. Chem. 2004, 279(19): 19936-47. Epub 2004 Mar 2. Ингибиторы JAK, описанные в настоящем описании, можно, кроме того, использовать для лечения подагры и увеличения размера простаты, обусловленного, например, доброкачественной гипертрофией предстательной железы или доброкачественной гиперплазией предстательной железы. Используемый в настоящем описании термин "контактирование" относится к сведению вместе указанных частей в системе in vitro или системе in vivo. Например, "контактирование" JAK с соединением по данному изобретению включает введение соединения по данному изобретению индивидууму или пациенту, такому как человек, имеющему JAK, а также, например, введение соединения по данному изобретению в образец, содержащий клеточный или очищенный препарат, содержащий JAK. Используемый в настоящем описании термин "индивидуум" или "пациент," используемый взаимозаменяемо, относится к любому животному, включая млекопитающих, предпочтительно мышей, крыс,других грызунов, кроликов, собак, кошек, свинью, крупный рогатый скот, овцу, лошадей или приматов,и наиболее предпочтительно человека. Используемое в данном контексте выражение "терапевтически эффективное количество" относится к количеству активного соединения или фармацевтического средства, которое вызывает биологическую реакцию или реакцию на лекарственное средство, к проявлению которой в ткани, системе, животном,индивидууме или человеке стремится исследователь, ветеринарный врач, лечащий врач или другой клиницист. Используемый в настоящем описании термин "лечение" или "терапия" относится к одному или нескольким из нижеследующего:(1) предотвращение развития заболевания; например, предотвращение болезни, состояния или нарушения у индивидуума, который может быть предрасположен к развитию заболевания, состояния или нарушения, но еще не испытывает или у которого нет на данный момент проявления патологии или симптоматики, имеющей отношение к данному заболеванию; (2) подавление развития заболевания; например, подавление заболевания, состояния или нарушения у индивидуума, который испытывает или у которого на данный момент имеются признаки проявления патологии или симптоматики данного заболе-6 017790 вания, состояния или нарушения; и (3) облегчение заболевания; например, уменьшение интенсивности симптомов заболевания, состояния или нарушения у индивидуума, который испытывает или у которого на данный момент имеются признаки проявления патологии или симптоматики данного заболевания,состояния или нарушения (т.е. реверсия патологии и/или симптоматики), а именно снижение тяжести заболевания. Комбинированные лечения (комплексные терапии) Одно или несколько дополнительных фармацевтических средств, таких как, например, химиотерапевтические средства, противовоспалительные средства, стероиды, иммунодепрессивные средства, а также ингибиторы Bcr-Abl, Flt-3, RAF и FAK, такие как, например, ингибиторы киназ, описанные в WO 2006/056399, или другие средства, могут быть использованы в комбинации с соединениями по данному изобретению для лечения JAK-связанных болезней, нарушений или состояний. Одно или несколько дополнительных фармацевтических средств могут вводиться пациенту одновременно или последовательно. Иллюстративные химиотерапевтические средства включают ингибиторы протеосом (например,бортезомиб), талидомид, ревлимид, и ДНК-поражающие средства, такие как мелфалан, доксорубицин,циклофосфамид, винкристин, этопозид, кармустин и т.п. Примеры стероидов включают кортикостероиды, такие как дексаметазон или преднизон. Примеры ингибиторов Bcr-Abl включают соединения, и их фармацевтически приемлемые соли, типов и разновидности, раскрытых в патенте США 5521184, WO 04/005281, ЕР 2005/009967, ЕР 2005/010408 и US60/578491. Примеры подходящих ингибиторов Flt-3 включают соединения и их фармацевтически приемлемые соли, раскрытые в WO 03/037347, WO 03/099771 и WO 04/046120. Примеры подходящих ингибиторов RAF включают соединения и их фармацевтически приемлемые соли, раскрытые в WO 00/09495 и WO 05/028444. Примеры подходящих ингибиторов FAK включают соединения и их фармацевтически приемлемые соли, раскрытые в WO 04/080980, WO 04/056786, WO 03/024967, WO 01/064655, WO 00/053595 и WO 01/014402. В некоторых вариантах один или несколько из метаболитов по данному изобретению могут быть использованы в комбинации с одним или несколькими другими ингибиторами киназ, включая иматиниб,в частности, для лечения пациентов, резистентных к иматинибу или другим ингибиторам киназ. В некоторых вариантах один или несколько ингибиторов JAK по данному изобретению могут быть использованы в комбинации с химиотерапевтическим средством для лечения рака, такого как множественная миелома, и эта комбинация может усилить реакцию на лечение по сравнению с реакцией на лечение только одним химиотерапевтическим средством, без обострения его токсических воздействий. Примеры дополнительных фармацевтических средств, используемых для лечения множественной миеломы,например, могут включать, без ограничения, мелфалан, мелфалан плюс преднизон [МР], доксорубицин,дексаметазон и Velcade (бортезомиб). Другие дополнительные средства, используемые для лечения множественной миеломы, включают ингибиторы киназ Bcr-Abl, Flt-3, RAF и FAK. Проявление аддитивного или синергического действия - желанное последствие объединения ингибитора JAK по данному изобретению с дополнительным средством. Кроме того, резистентность клеток множественной миеломы к средствам, таким как дексаметазон, может быть обратимой при лечении ингибитором JAK по данному изобретению. Средства могут быть объединены с соединениями по данному изобретению в одной или непрерывной лекарственной форме, или средства могут вводиться одновременно или последовательно в виде раздельных лекарственных форм. В некоторых вариантах кортикостероид, такой как дексаметазон, вводят пациенту в комбинации с,по крайней мере, одним ингибитором JAK, и в этом случае дексаметазон, в противоположность непрерывному введению, вводят с перерывами. В некоторых дополнительных вариантах комбинации одного или нескольких ингибиторов JAK по данному изобретению с другими терапевтическими средствами могут быть введены пациенту до, во время и/или после трансплантации костного мозга или трансплантации стволовых клеток. Фармацевтические препараты и лекарственные формы При использовании в качестве фармацевтических препаратов соединения по данному изобретению могут вводиться в форме фармацевтических композиций. Эти композиции можно получить способом,хорошо известным в фармацевтической области, и их можно вводить различными способами, в зависимости от того, какое требуется лечение, местное или системное, и от того какая область (тела) подлежит лечению. Введение может быть местным (включая трансдермальное, эпидермальное, глазное и применительно к слизистым оболочкам, включая интраназальную, вагинальную и ректальную доставку), легочным (например, посредством ингаляции или инсуффляции порошков или аэрозолей, включая путь с помощью распылителя, интратрахеально или интраназально), пероральным или парентеральным. Парентеральное введение включает внутривенную, внутриартериальную, подкожную, интраперитонеальную,внутримышечную инъекцию или инфузию; или интракраниальное, например интратекальное или интравентрикулярное введение. Парентеральное введение может осуществляться в форме разовой болюсной дозы или может осуществляться, например, с помощью перфузионного насоса непрерывного действия. Фармацевтические композиции и препараты для местного применения могут включать трансдермальные пластыри, мази, лосьоны, кремы, гели, капли, суппозитории, спреи, жидкости и порошки. При этом может возникнуть необходимость или потребность в использовании обычных фармацевтических носителей, водных, порошкообразных или маслянистых основ, загустителей и т.п. Могут быть также использованы снабженные покрытием презервативы, перчатки и т.п. Данное изобретение также включает фармацевтические композиции, которые содержат в качестве активного ингредиента одно или несколько из вышеупомянутых соединений по данному изобретению в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями (наполнителями). При приготовлении композиций по данному изобретению активный ингредиент обычно смешивают с наполнителем, разбавляют наполнителем или помещают внутрь такого носителя в форме, например, капсулы, пакетика, бумажного или другого контейнера. В тех случаях когда наполнитель служит в качестве растворителя, он может представлять собой твердый, полутвердый или жидкий материал, который действует как наполнитель, носитель или среда для активного ингредиента. Соответственно, композиции могут находиться в форме таблеток, пилюль, порошков, пастилок, саше, облаток, эликсиров, суспензий,эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (в виде твердого вещества или в жидкой среде), мазей, содержащих, например, вплоть до 10 мас.% активного соединения, мягких и твердых желатиновых капсул,суппозиториев, стерильных растворов для инъекции и стерильных порошков в упаковке. При получении конечного состава композиции активное соединение может быть подвергнуто измельчению с получением частиц подходящего размера до смешивания его с другими ингредиентами. Если активное соединение, по существу, является нерастворимым, его можно измельчить до размера частиц меньше чем 200 меш. Если активное соединение является в значительной степени растворимым в воде, размер частиц может быть отрегулирован посредством измельчения таким образом, чтобы получить, по существу, равномерное распределение частиц активного соединения в конечном составе композиции, например, около 40 меш. Соединения по данному изобретению могут быть подвергнуты измельчению, используя известные способы измельчения, такое как мокрое измельчение, получая размер частиц, подходящий для получения таблеток и других типов препаратов. Препараты в форме тонкоизмельченных частиц (наночастиц) соединений по данному изобретению можно получить способами, известными в данной области, например,см. международную патентную заявку W0 2002/000196. Некоторые примеры подходящих наполнителей включают лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит,маннит, крахмалы, аравийскую камедь, фосфат кальция, альгинаты, трагакант, желатин, силикат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, целлюлозу, воду, сироп и метилцеллюлозу. Конечные составы композиций могут дополнительно включать смазки, такие как тальк, стеарат магния и минеральное масло; увлажняющие средства; эмульгирующие и суспендирующие средства; консерванты, такие как метил- и пропилоксибензоаты; подслащивающие средства; и ароматизирующие вещества. Композиции по данному изобретению могут быть составлены таким образом, чтобы обеспечить быстрое, долговременное или пролонгированное высвобождение активного ингредиента после введения пациенту, используя способы, известные в данный области. Композиции по данному изобретению могут быть получены в виде разовой лекарственной формы,при этом каждая лекарственная форма содержит от около 5 до около 1000 мг (1 г), чаще всего от около 100 до около 500 мг, активного ингредиента. Термин "разовые лекарственные формы" относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз для человека и других млекопитающих, причем каждая единица содержит предопределенное количество активного вещества, по расчету обеспечивающее проявление желательного терапевтического действия, в связи с подходящим фармацевтическим наполнителем. Активное соединение может быть эффективным в пределах широкого диапазона доз и обычно его вводят в фармацевтически эффективном количестве. Следует иметь в виду, однако, что количество фактически вводимого соединения обычно определяется врачом, в соответствии с существующими обстоятельствами, включая состояние, подлежащее лечению; выбранный способ введения, тип реально вводимого соединения, возраст, массу тела и реакцию отдельного пациента, тяжесть симптомов (заболевания),проявляемых у пациента, и т.п. Для получения твердых композиций, таких как таблетки, основной активный ингредиент смешивают с фармацевтическим наполнителем, получая предварительный состав твердой композиции, содержащий гомогенную смесь соединения по данному изобретению. Ссылаясь на эти предварительные составы композиций как на гомогенные, имеют в виду, что активный ингредиент практически равномерно диспергирован по всему объему композиции так, что эта композиция может быть легко подразделена на равноэффективные разовые лекарственные формы, такие как таблетки, пилюли и капсулы. Затем этот предварительный состав твердой композиции подразделяют на разовые лекарственные формы описанного выше типа, содержащие, например, от около 0,1 до около 1000 мг активного ингредиента по данному изобретению. Таблетки или пилюли по данному изобретению могут быть покрыты оболочкой или компаундированы иным образом с целью получения лекарственной формы, обладающей преимуществом пролонги-8 017790 рующего действия. Например, таблетка или пилюля может включать внутренний дозированный и наружный дозированный компонент, при этом последний находится в форме оболочки поверх первого (из двух). Два компонента могут быть разделены энтеросолюбильным слоем, который служит для противодействия дезинтеграции в желудке и дает возможность внутреннему компоненту проникнуть неповрежденным в двенадцатиперстную кишку или позволяет замедлить его высвобождение. Для получения таких энтеросолюбильных слоев или покрытий могут быть использованы различные материалы, и эти материалы включают ряд полимерных кислот и смеси полимерных кислот с такими веществами как шеллак, цетиловый спирт и ацетат целлюлозы. Жидкие формы, в которые соединения и композиции по данному изобретению могут быть включены для введения пероральным путем или с помощью инъекции, включают водные растворы, подходящим образом ароматизированные сиропы, водные и маслянистые суспензии и ароматные эмульсии с пищевым маслом, таким как хлопковое масло, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисовое масло,а также эликсиры и аналогичные фармацевтические наполнители. Композиции для ингаляции или инсуффляции включают растворы и суспензии в фармацевтически приемлемых, водных или органических растворителях или их смесях, и порошки. Жидкие или твердые композиции могут содержать подходящие фармацевтически приемлемые наполнители, описанные выше. В некоторых вариантах композиции вводят пероральным путем или респираторным путем через нос для осуществления их местного или системного действия. Композиции могут распыляться путем использования инертных газов. Распыленные растворы можно вдыхать непосредственно из распыляющего устройства или распыляющее устройство может быть присоединено к тенту, покрывающему голову, или дыхательному аппарату, работающему в режиме перемежающегося положительного давления на вдохе. Раствор, суспензия или порошкообразные композиции можно вводить перорально или назально из устройств, которые доставляют препарат подходящим образом. Количество соединения или композиции, вводимой пациенту, обычно варьируется в зависимости от того, какое соединение или какая композиция подлежит введению, цели введения, как например, профилактика или лечение, состояния пациента, способа введения и т.п. При терапевтическом применении композиции могут вводиться пациенту, уже страдающему болезнью, в количестве, достаточном для лечения или, по крайней мере, частичного подавления симптомов болезни и ее осложнений. Эффективные дозы обычно зависят от состояния болезни, подлежащего лечению, а также усмотрения врачаконсультанта в зависимости от ряда факторов, таких как тяжесть заболевания, возраст, масса тела и общее состояние пациента и т.п. Композиции, вводимые пациенту, могут быть в форме фармацевтических композиций, описанных выше. Эти композиции могут быть стерилизованы с помощью обычных методов стерилизации или могут быть стерилизованы посредством фильтрации. Водные растворы могут быть упакованы для использования в том виде, как они есть, или лиофилизованы, при этом лиофилизованный препарат объединяют со стерильным водным носителем перед введением. рН препаратов на основе соединения обычно находится в диапазоне от 3 до 11, более предпочтительно от 5 до 9 и наиболее предпочтительно от 7 до 8. Следует иметь в виду, что использование некоторых из вышеупомянутых наполнителей, носителей или стабилизаторов может привести к образованию фармацевтических солей. Терапевтическая доза соединений по данному изобретению может варьироваться в соответствии с,например, конкретным использованием, для которого создается лечение, способом введения соединения,здоровья и состояния пациента и усмотрения врача, прописывающего указанное лекарственное средство. Пропорция или концентрация соединения по данному изобретению в фармацевтической композиции может меняться в зависимости от ряда факторов, включая дозу, химические свойства (например, гидрофобность), и способа введения. Например, в случае парентерального введения соединения по данному изобретению могут быть представлены в водном физиологическом буферном растворе, содержащем от около 0,1 до около 10 мас./мас.% соединения. Некоторые типичные диапазоны доз составляют от около 1 мкг/кг до около 1 г/кг массы тела в день. В некоторых вариантах диапазон дозы составляет от около 0,01 мг/кг до около 100 мг/кг массы тела в день. Вероятно, что доза зависит от таких переменных, как тип и степень прогрессирования болезни или нарушения, общего состояния здоровья конкретного пациента,относительной биологической эффективности выбранного соединения, рецептуры наполнителя и способа введения лекарственного средства. Эффективные дозы могут быть получены экстраполяцией кривой зависимости доза-эффект, полученной из in vitro систем для испытаний или модельных тест-систем на животных. Композиции по данному изобретению могут, кроме того, содержать одно или несколько дополнительных фармацевтических средств, таких как химиотерапевтическое средство, стероид, противовоспалительное средство или иммунодепрессивное средство, примеры которых перечислены здесь выше. Меченые соединения и методы анализа Другой аспект настоящего изобретения относится к меченым соединениям по данному изобретению (меченные радиоактивным изотопом, меченные флуоресцирующим веществом, и т.д.), которые могут быть использованы не только в способах визуализации, но также в анализах, как in vitro, так и in vivo,для определения местонахождения и количественного определения JAK в образцах ткани, включая чело-9 017790 века, и для идентифицирования лигандов JAK путем ингибирующего связывания меченого соединения. Таким образом, настоящее изобретение включает анализы JAK с использованием таких меченых соединений. Настоящее изобретение, кроме того, включает изотопически меченные соединения по данному изобретению. "Изотопически" или "меченное радиоактивным изотопом" соединение представляет собой соединение по данному изобретению, в котором один или несколько атомов замены или замещены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа,обычно встречающегося в природе (т.е. природного происхождения). Подходящие радионуклиды, которые могут быть введены в соединения по данному изобретению, включают, но ими не ограничиваясь, 2 Н(также обозначаемый в письменной форме как D для дейтерия), 3 Н (также обозначаемый в письменной форме как Т для трития), 11 С, 13 С, 14 С, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 18F, 35S, 36Cl, 82Br, 75Br, 76Br, 77Br, 123I, 124I, 125I и 131I. Выбор радионуклида, который подлежит введению в меченные радиоизотопом соединения по данному изобретению, обычно зависит от конкретного применения рассматриваемого меченного радиоактивным изотопом соединения. Например, для in vitro мечения металлопротеазы и конкурентносвязывающих анализов, в большинстве случаев обычно используют соединения, которые включают 3 Н,14 С, 82Br, 125I, 131I, 35S. В случае применений для радионуклидной визуализации, обычно чаще всего используют 11C, 18F, 125I, 123I, 124I, 131I, 75Br, 76Br или 77Br. Понятно, что "меченное радиоактивным изотопом" или "меченое соединение" представляет собой соединение, которое содержит, по крайней мере, один радионуклид. В некоторых вариантах радионуклид выбран из группы, состоящей из 3 Н, 14 С, 125I, 35S и 82Br. Настоящее изобретение может, кроме того, включать синтетические способы введения радиоактивных изотопов в соединения по данному изобретению. Синтетические способы введения радиоактивных изотопов в органические соединения хорошо известны в данной области, и специалисту среднего уровня компетентности в данной области очевидны способы, которые могут быть использованы для соединений по данному изобретению. Меченое соединение по данному изобретению может быть использовано в скрининг-анализе для идентифицирования/оценки соединений. Например, вновь синтезированное или идентифицируемое соединение (т.е. испытуемое соединение), которое метят, может быть оценено на его способность связывать JAK, контролируя изменение его концентрации при контактировании с JAK, через отслеживание мечения (введенной метки). Например, испытуемое соединение (меченое) может быть оценено по его способности снижать связывание другого соединения, которое, как известно, связывается с JAK (т.е. стандартное соединение). Таким образом, способность испытуемого соединения конкурировать со стандартным соединением за связывание с JAK непосредственно коррелирует с его сродством к связыванию. Наоборот, в некоторых других скрининг-анализах метят стандартное соединение, а испытуемые соединения являются немечеными. Соответственно, для оценки конкуренции между стандартным соединением и испытуемым соединением контролируют концентрацию меченого стандартного соединения, и таким образом устанавливают относительное сродство к связыванию испытуемого соединения. Наборы Настоящее изобретение также включает фармацевтические наборы, используемые, например, для лечения или предотвращения связанных с JAK заболеваний или нарушений, таких как рак, и эти наборы включают один или несколько контейнеров, содержащих фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество соединения по данному изобретению. Такие наборы могут, кроме того, включать, если это необходимо, один или несколько из различных обычных компонентов фармацевтического набора, таких как, например, контейнеры с одним или несколькими фармацевтическими приемлемыми носителями, дополнительные контейнеры, и т.д., как это очевидно специалистам в данной области. Кроме того, в набор могут быть включены инструкции либо в виде вкладышей, либо в виде этикеток, указывающие на количество компонентов, подлежащих введению; рекомендации для введения и/или рекомендации для смешивания компонентов. В дальнейшем данное изобретение поясняется более детально при рассмотрении конкретных примеров. Нижеследующие примеры приводятся с иллюстративной целью, и при этом подразумевается, что они никоим образом не ограничивают объем данного изобретения. Для специалистов в данной области очевидно наличие различных неопределяющих параметров, которые могут быть изменены или модифицированы, приводя, в конечном счете, к получению, по существу, аналогичных результатов. Примеры Пример 1. 3-[(1S,3R)-3-Гидроксициклопентил]-3-[4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрил и 3-[(1R,3S)-3-гидроксициклопентил]-3-[4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрил Бромтриметилсилан (3,1 мл, 0,023 моль) добавляют по каплям к раствору диметилсульфоксида (1,6 мл, 0,023 моль) в хлороформе (38,0 мл) в круглодонной колбе при 0 С. Полученную смесь перемешивают при 0 С в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляют по каплям раствор циклолент-3-ен-1 карбоновой кислоты (2,00 г, 0,0178 моль) в хлороформе (12 мл) на протяжении периода времени 15 минут и реакционную смесь перемешивают при 0 С в течение 10 мин. Затем добавляют N,Nдиизопропилэтиламин (4,0 мл, 0,033 моль) и полученную смесь перемешивают при 0 С. Через 15 мин смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляют хлороформом, промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (MgSO4) и упаривают в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 30% EtOAc/гексаны, с получением продукта. 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3):4,88 (ушир.с, 1 Н), 4,34 (м, 1 Н),2,90 (м, 1 Н), 2,66 (м, 1 Н), 2,31 (м, 1 Н), 1,93 (м, 1 Н), 1,83 (м, 1 Н). Стадия 2. 2-оксабицикло[2.2.1]гептан-3-он Трис(триметилсилил)силан (4,7 мл, 15 ммоль) добавляют по каплям к раствору 6-бром-2 оксабицикло[2.2.1]гептан-3-она (1,96 г, 10,3 ммоль) и 2,2'-азо-бис-изобутиронитрила (0,2 г, 1 ммоль) в толуоле (100 мл) в круглодонной колбе и полученную смесь перемешивают при 80 С в течение 5 ч. Реакционную смесь концентрируют роторным испарением и остаток разбавляют этилацетатом, промывают насыщенным NH4Cl, сушат (MgSO4) и упаривают в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюентов сначала 100% гексаны, затем смесь EtOAc/гексаны, постепенно изменяя ее состав до 25% EtOAc/гексаны, затем 33% EtOAc/гексаны, с получением продукта. 1H ЯМР 1,00 М диизобутилалюминийгидрида в толуоле (8,0 мл) добавляют по каплям к раствору 2 оксабицикло[2.2.1]гептан-3-она (600 мг, 5 ммоль) в метиленхлориде (20 мл) в круглодонной колбе при 78 С. Полученную смесь перемешивают при -78 С в течение 45 мин. Реакционную смесь обрабатывают насыщенным раствором сегнетовой соли. После перемешивания в течение 15 мин реакционную смесь экстрагируют этилацетатом и объединенные органические экстракты промывают водой, насыщеннымNaCl, сушат (MgSO4) и упаривают в вакууме. Неочищенный продукт используют на следующей реакции без дополнительной очистки. Раствор неочищенного 2-оксабицикло[2.2.1]гептан-3-ола (400 мг, 4 ммоль) и (трифенилфосфоранилиден)ацетонитрила (1,2 г, 3,8 ммоль) в толуоле (12 мл) в круглодонной колбе нагревают при 80 С в течение 2 ч. Затем реакционную смесь очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 4 0% EtOAc/гексаны, получая рацемические продукты. 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3):6,78 (дд,1 Н), 5,30 (д, 1 Н), 5,20 (м, 1 Н), 2,67 (м, 1 Н), 2,20 (м, 1 Н), 1,40-1,90 (м, 6 Н). Стадия 4. 3-[(1S,3R)-3-Гидроксициклопентил]-3-[4-(7-[2-(триметилсилил)этокси]метил-7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидина (0,57 г, 1,8 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) в круглодонной колбе. Полученную смесь перемешивают при 25 С в течение 2 дней, и по истечении этого времени анализ методом ЖХМС показывает расходование 80% исходных продуктов. Реакционную смесь очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 1:1 EtOAc/гексаны, с получением продукта. 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3):8,90 (д, 1 Н), 8,39 (м, 2 Н), 7,46 (м, 1 Н), 6,86 (м, 1 Н), 5,73 (с, 2 Н), 4,52 (м, 2 Н), 3,59 (м, 2 Н),3,2 (м, 1H), 3,02 (м, 1 Н), 2,78 (м, 1 Н), 2,3 (м, 1 Н), 1,30-1,90 (м, 6 Н), 0,99 (м, 2 Н), 0,08 (с, 9 Н) . ЖХ/МС: 453[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрила (85,0 мг, 0,188 ммоль) в ацетонитриле (1,5 мл) и воды (0,135 мл) в пробирке. Полученную смесь нагревают при 85 С в течение 26 ч. После предоставления реакционной смеси возможности охладиться до 25 С, к ней добавляют этилендиамин (63 мкл, 0,94 ммоль) и полученную смесь перемешивают при 25 С в течение 3 ч. Реакционную смесь очищают препаративной ЖХ, получая продукт в виде соли трифторуксусной кислоты. Полученную соль растворяют в метаноле и добавляют Amberlyst 26. Полученную смесь перемешивают в течение 10 мин, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хиральной хроматографией, получая 4 основных пика и 4 второстепенных пика (колонка: ChiralPak IA, 4,6250 мм, размер частиц 5 мкм. Подвижная фаза: смесь 30% этанола в гексанах. Скорость потока: 0,8 мл/мин-аналитическая; колонка: ChiralPak IA, 20250 мм, размер частиц 5 мкм. Подвижная фаза: смесь 30% этанола в гексанах. Скорость потока: 12 мл/минпрепаративная). Второстепенные пики относятся к трифторацетатным эфирам, которые очень подвижны и гидролизуются при стоянии в метаноле до образования соответствующих спиртов. Основной пик 1 [Время удерживания: 18,56 мин]: 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD):8,66 (ушир.с, 1 Н),8,64 (с, 1 Н), 8,38 (с, 1 Н), 7,51 (м, 1 Н), 6,97 (м, 1 Н), 4,57 (м, 1 Н), 4,20 (м, 1 Н), 3,16 (м, 2 Н), 2,65 (м, 1 Н),1,64-2,00 (м, 5 Н), 1,28 (м, 1 Н). ЖХ/МС: 323 (М+Н)+. Основной пик 2 [Время удерживания: 25,88 мин]: 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD):8,66 (ушир.с, 1 Н),8,64 (с, 1 Н), 8,38 (с, 1 Н), 7,50 (м, 1 Н), 6,96 (м, 1 Н), 4,60 (м, 1 Н), 4,30 (м, 1 Н), 3,18 (м, 2 Н), 2,61 (м, 1 Н),2,23 (м, 1 Н), 1,40-1,80 (м, 5 Н). ЖХ/МС: 323 (М+Н)+. Основной пик 3 [Время удерживания: 39,84 мин]: 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD):8,66 (ушир.с, 1 Н),8,64 (с, 1 Н), 8,38 (с, 1 Н), 7,50 (м, 1 Н), 6,96 (м, 1 Н), 4,60 (м, 1 Н), 4,30 (м, 1 Н), 3,18 (м, 2 Н), 2,61 (м, 1 Н),2,23 (м, 1 Н), 1,40-1,80 (м, 5 Н). ЖХ/МС: 323 (М+Н)+. Основной пик 4 [Время удерживания: 51,48 мин]: 1 Н ЯМР (400 МГц, CD3OD):8,66 (ушир.с, 1 Н),8,64 (с, 1 Н), 8,38 (с, 1 Н), 7,51 (м, 1 Н), 6,97 (м, 1 Н), 4,57 (м, 1 Н), 4,20 (м, 1 Н), 3,16 (м, 2 Н), 2,65 (м, 1H),1,64-2,00 (м, 5 Н), 1,28 (м, 1 Н). ЖХ/МС: 323 (М+Н)+. Пример 2. Соль трифторуксусной кислоты 3-[(1S,3S)-3-гидроксициклопентил]-3-[4-(7 Нпирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрил и соль трифторуксусной кислоты 3[(1R,3R)-3-гидроксициклопентил]-3-[4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1 ил]пропаннитрил. этокси]метил-7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]этил)циклопентилбензоат. Диизопропилазодикарбоксилат (0,38 мл, 1,9 ммоль) добавляют к раствору 3-[(1S,3R)-3 гидроксициклопентил]-3-[4-(7-[2-(триметилсилил)этокси]метил-7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Нпиразол-1-ил]пропаннитрила и 3-[(1R,3S)-3-гидроксициклопентил]-3-[4-(7-[2-(триметилсилил)этокси] метил-7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрила (0,51 г, 1,9 ммоль) в тетрагидрофуране (5,3 мл) в круглодонной колбе при 0 С. Полученную смесь перемешивают в течение 10 минут и добавляют бензойную кислоту (0,24 г, 1,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0 С в течение 2 ч, и по истечении этого времени анализ методом ТСХ указывает на отсутствие исходного продукта. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом, промывают насыщенным NaHCO3, водой, насыщенным NaCl, сушат (MgSO4) и упаривают в вакууме. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 20% EtOAc/гексаны, с получением продукта. 1H ЯМР (300 МГц,CDCl3):8,91 (д, 1 Н), 8,39 (м, 2 Н), 8,08 (м, 2 Н), 7,75 (м, 1 Н), 7,61 (м, 1 Н), 7,48 (м, 2 Н), 7,46 (м, 1 Н), 6,87[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрил и 3-[(1R,3R)-3-гидроксициклопентил]-3-[4-(7-[2(триметилсилил)этокси]метил-7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрил. Гидроксид лития (22,7 мг, 0,000948 моль) добавляют к раствору (1S,3S)-3-2-циано-1-[4-(7-[2(триметилсилил)этокси]метил-7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]этилциклопентилбензоата и (1R,3R)-3-2-циано-1-[4-(7-[2-(триметилсилил)этокси]метил-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4 ил)-1 Н-пиразол-1-ил]этилциклопентилбензоата (440 мг, 0,0007 9 моль), растворенных в смеси 1,4 диоксана (10,0 мл, 0,128 моль), метанола (4,0 мл, 0,099 моль) и воды (4,0 мл, 0,22 моль) в круглодонной колбе. Полученную смесь перемешивают в течение 20 ч, и по истечении этого времени анализ методом ЖХМС указывает на отсутствие исходного продукта. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом и органические экстракты промывают насыщенным NaHCO3, водой, насыщенным NaCl, сушат (MgSO4) и упаривают в вакууме. Остаток используют на следующей реакции без дополнительной очистки. ЖХ/МС: 453 (M+Н)+. Стадия 3. Соль трифторуксусной кислоты 3-[(1S,3S)-3-гидроксициклопентил]-3-[4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрил и соль трифторуксусной кислоты 3-[(1R,3R)-3 гидроксициклопентил]-3-[4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрил. С компонентов смеси, 3-[(1S,3S)-3-гидроксициклопентил]-3-[4-(7-[2-(триметилсилил)этокси] метил 7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрила и 3-[(1R,3R)-3-гидроксициклопентил]-3-[4-(7-[2-(триметилсилил)этокси]метил-7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил] пропаннитрила, снимают защиту в таких же условиях, как описаны в примере 1, стадия 5. Смесь разделяют, используя хиральную ЖХ, и затем очищают с помощью ЖХ, получая изомеры в виде солей трифторуксусной кислоты. Колонка: ChiralPak IA, 4,6250 мм, размер частиц 5 мкм. Подвижная фаза: смесь 30% этанола в гексанах. Скорость потока: 0,8 мл/мин-аналитическая; колонка: ChiralPak IA, 20250 мм,размер частиц 5 микрон. Подвижная фаза: смесь 30% этанола в гексанах. Скорость потока: 12 мл/мин препаративная). при -78 С в течение 15 мин и по каплям добавляют раствор 3-[(1S,3R)-3-гидроксициклопентил]-3-[4-(7[2-(триметилсилил)этокси]метил-7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрила и 3-[(1R,3S)-3-гидроксициклопентил]-3-[4-(7-[2-(триметилсилил)этокси]метил-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрила (0,84 г, 1,8 ммоль) в метиленхлориде (17 мл). Полученную смесь перемешивают при -78 С в течение 60 мин и добавляют триэтиламин (0,722 мл, 5,18 ммоль). После перемешивания при -78 С в течение 60 мин реакционную смесь нагревают до 0 С и перемешивают в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом, промывают водой, насыщенным NaCl, сушат(MgSO4) и упаривают в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 40% EtOAc/гексаны, с получением продукта. 1 Н ЯМР (300 МГц, CDCl3):8,91 (м, 1 Н),8,40 (д, 1H), 8,38 (с, 1H), 7,47 (м, 1H), 6,85 (т, 1 Н), 5,74 (с, 2 Н), 4,51 (м, 1 Н), 3,60 (т, 2H), 3,00-3,30 (м, 3 Н),1,50-2,70 (м, 6 Н), 0,98 (т, 2 Н), 0,00 (с, 9 Н). ЖХ/МС: 451 (М+Н)+. Стадия 2. Трифторацетатная соль 3-[(1S)-3-оксоциклопентил]-3-[4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4 ил)-1H-пиразол-1-ил]пропаннитрила и трифторацетатная соль 3-[(1R)-3-оксоциклопентил]-3-[4-(7Hпирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропаннитрила. С компонентов смеси, 3-[(1S)-3-оксоциклопентил]-3-[4-(7-[2-(триметилсилил)этокси]метил-7 Нпирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрила и 3-[(1R)-3-оксоциклопентил]-3-[4-(7[2-(триметилсилил)этокси]метил-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1 Н-пиразол-1-ил]пропаннитрила,снимают защиту в условиях, аналогичных примеру 1, стадия 5, получая два диастереомерных кетона,которые разделяют хиральной хроматографией и очищают с помощью ЖХ, получая диастереомеры и энантиомеры в виде трифторацетатных солей. Колонка: ChiralPak IA, 4,6250 мм, размер частиц 5 мкм. Подвижная фаза: смесь 30% этанола в гексанах. Скорость потока: 0,8 мл/мин-аналитическая; колонка: Метаболиты 1, 2 и 3 выделяют из мочи крысы или собаки после введения соединения 1 в связи с фармакокинетическими и токсикокинетическими исследованиями. Данные активности для метаболитов 1, 2 и 3, наряду с данными по свободной фракции и внутреннему клиренсу, сравнивают с аналогичными показателями для родительского соединения, соединения 1. Ниже описаны испытания по определению активности JAK, свободной фракции и внутреннего клиренса. Получают базовые точки для некоторых отдельных стереоизомеров метаболитов 1, 2 и 3, и область числовых значений, представленная выше,отражает максимальные и минимальные значения, полученные для всех испытуемых стереоизомеров. Из табл. 1 можно видеть, что метаболиты, подобно соединению 1, представляют собой сильнодействующие ингибиторы JAK1, JAK2 и JAK3. Однако свободные фракции, полученные для метаболитов, оказываются неожиданно более высокими и внутренний клиренс, в соответствии с желанием, ниже, чем для соединения 1. Анализ in vitro JAK киназы Соединения по данному изобретению испытывают на ингибирующую активность в отношении мишеней JAK в соответствии с нижеприведенным анализом in vitro, описанным в Park et al., AnalyticalBiochemistry 1999, 269, 94-104. Каталитические домены человеческой JAK1 (аминокислоты [а.а.] 8371142), Jak2 (аминокислоты 828-1132) и Jak3 (аминокислоты 781-1124) с N-концевой His-меткой экспрессируют, используя бакуловирус, в клетках насекомого и очищают. Каталитическую активность JAK1,- 14017790JAK2 или JAK3 анализируют путем измерения фосфорилирования биотинилированного пептида. Фосфорилированный пептид детектируют, используя метод флуоресценции с разрешением по времени (homogenous time resolved fluorescence) (HTRF). IC50 соединений измеряют для каждой киназы в реакциях, в которых реакционные смеси содержат фермент, АТР (аденозинтрифосфат, АТФ) и 500 нМ пептида в 50 мМ Трис (рН 7,8) буфере с 100 мМ NaCl, 5 мМ DTT и 0,1 мг/мл (0,01%) BSA. Концентрация АТР в реакционных смесях составляет 90 мкМ для Jak1, 30 мкМ для Jak2 и 3 мкМ для Jak3. Реакции осуществляют при комнатной температуре в течение 1 ч и затем останавливают 20 мкл 45 мМ EDTA, 300 нМ SA-APC,6 нМ Eu-Ру 20 в буфере для анализа (Perkin Elmer, Boston, MA). Связывание с меченным европием антителом происходит в течение 40 мин и сигнал HTRF измеряют на планшет-ридере (Fusion plate reader)(Perkin Elmer, Boston, MA). Активными считают соединения, имеющие IC50 10 мкМ или менее для любой из вышеуказанных мишеней JAK. Анализ свободной фракции Связывание с белком испытуемого соединения определяют посредством равновесного диализа, используя Dianorm систему от Harvard Apparatus (Holliton, MA), Диализ осуществляют при 37 С в течение 2 ч в человеческой сыворотке. Метаболиты инкубируют при 3 мкМ и соединение 1 при 3 и 10 мкМ. Концентрации соединения в сыворотке и буфере постдиализа определяют посредством анализа методом ЖХ/МС/МС. Свободную фракцию определяют как отношение (концентрации) в буфере к концентрации в сыворотке. Анализ внутреннего клиренса Внутренний клиренс определяют путем инкубирования 1 мкМ испытуемого соединения в смешанных тендерных микросомах печени человека смеси тендерных микросом печени человека (белок 0,5 мг/мл) при 37C в присутствии 1 мМ NADPH. Исчезновение испытуемого соединения контролируют посредством метода ЖХ/МС на 0, 5, 10, 20 и 30 мин. Наклон (кривой) падения концентрации соединения используют для вычисления внутренного клиренса человека, используя способы, опубликованные в литературе. Различные модификации данного изобретения, помимо описанных в настоящем описании конкретных вариантов его осуществления, очевидны для специалистов в данной области из рассмотрения вышеприведенного описания. Такие модификации, как полагают, не выходят за рамки объема нижеследующей формулы изобретения. Каждая ссылка, цитируемая в настоящей заявке, включена в настоящее описание в полном объеме в виде ссылки. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Соединение, выбранное из 3-(4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил)-3-(3-гидроксициклопентил)пропаннитрила; 3-(4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил)-3-(2-гидроксициклопентил)пропаннитрила и 3-(4-(7 Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил)-3-(3-оксоциклопентил)пропаннитрила,или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемую соль и по крайней мере один фармацевтически приемлемый носитель. 3. Фармацевтическая композиция по п.2 для перорального введения. 4. Способ модуляции активности JAK, включающий контактирование JAK с соединением по п.1 или его фармацевтически приемлемой солью. 5. Способ по п.4, где указанная модуляция является ингибирующей. 6. Способ лечения болезни у пациента, где указанное заболевание связано с активностью JAK,включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 7. Способ по п.6, где указанная болезнь представляет собой отторжение аллотрансплантата или болезнь "трансплантат против хозяина". 8. Способ по п.6, где указанная болезнь представляет собой аутоиммунное заболевание. 9. Способ по п.8, где указанное аутоиммунное заболевание представляет собой кожное заболевание,рассеянный склероз, ревматоидный артрит, ювенильный артрит, диабет I типа, обыкновенную волчанку,воспалительное заболевание кишечника, болезнь Крона, миастению тяжелую, иммуноглобулиновые нефропатии, миокардит или аутоиммунное нарушение щитовидной железы. 10. Способ по п.8, где аутоиммунное заболевание представляет собой буллезное кожное нарушение. 11. Способ по п.10, где указанное буллезное кожное нарушение представляет собой обыкновенную[вульгарную] пузырчатку (PV) или буллезный пемфигоид (ВР). 12. Способ по п.6, где указанное заболевание представляет собой кожное нарушение. 13. Способ по п.12, где указанное кожное нарушение представляет собой диффузный нейродермит,псориаз, кожную сенсибилизацию, раздражение кожи, кожную сыпь, контактный дерматит или аллерги- 15017790 ческую контактную сенсибилизацию. 14. Способ по п.6, где указанная болезнь представляет собой вирусное заболевание. 15. Способ по п.14, где указанное вирусное заболевание представляет собой заболевание, вызванное вирусом Эпштейна-Барра (EBV), вирусом гепатита В, вирусом гепатита С, вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ, HIV), Т-клеточным лимфотропным вирусом человека I типа (HTLV I), вирусом ветряной оспы (VZV) или вирусом папилломы человека (HPV). 16. Способ по п.6, где указанное заболевание представляет собой рак. 17. Способ по п.16, где указанный рак представляет собой солидную опухоль. 18. Способ по п.17, где указанный рак представляет собой рак предстательной железы, рак почки,рак печени, рак молочной железы, рак легкого, рак щитовидной железы, саркому Капоши, болезнь Кастлемана или рак поджелудочной железы. 19. Способ по п.17, где указанный рак представляет собой рак предстательной железы. 20. Способ по п.16, где указанный рак представляет собой рак крови. 21. Способ по п.20, где указанный рак представляет собой лимфому, лейкоз или множественную миелому. 22. Способ по п.16, где указанный рак представляет собой рак кожи. 23. Способ по п.22, где указанный рак кожи представляет собой Т-клеточную лимфому кожи или Вклеточную лимфому кожи. 24. Способ по п.20, где указанный рак представляет собой множественную миелому. 25. Способ по п.6, где указанная болезнь характеризуется мутантной JAK2. 26. Способ по п.25, где по крайней мере одна мутация указанной мутантной JAK2 находится в псевдокиназном домене указанной JAK2. 27. Способ по п.6, где указанная болезнь представляет собой миелопролиферативное нарушение. 28. Способ по п.27, где указанное миелопролиферативное нарушение (MPD) представляет собой красную, или истинную, полицитемию (PV), эссенциальную тромбоцитемию (ЕТ), миелоидную метаплазию с миелофиброзом (МММ), хронический миелоидный лейкоз (CML), хронический миеломоноцитарный лейкоз (CMML), синдром гиперэозинофилии (HES) или системный мастоцитоз (SMCD). 29. Способ по п.6, где указанная болезнь представляет собой воспалительное заболевание. 30. Способ по п.29, где указанная болезнь представляет собой воспалительное заболевание глаза. 31. Способ по п.30, где указанное заболевание представляет собой ирит, увеит, склерит или конъюнктивит. 32. Способ по п.29, где указанная болезнь представляет собой воспалительное заболевание дыхательных путей. 33. Способ по п.32, где указанная болезнь представляет собой воспалительное заболевание верхних дыхательных путей. 34. Способ по п.32, где указанная болезнь представляет собой воспалительное заболевание нижних дыхательных путей. 35. Способ по п.6, где указанное воспалительное заболевание представляет собой воспалительную миопатию. 36. Способ по п.35, где указанное воспалительное заболевание представляет собой миокардит. 37. Способ по п.6, где указанная болезнь представляет собой ишемическую реперфузию или связана с ишемическим осложнением. 38. Способ по п.6, где указанное заболевание представляет собой анорексию или кахексию, являющуюся следствием или связанную с прогрессированием злокачественного заболевания (рака). 39. Способ по п.6, где указанное заболевание представляет собой утомление, являющееся следствием или связанное с прогрессированием злокачественного заболевания (рака). 40. Способ лечения рака у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 41. Способ лечения ревматоидного артрита у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 42. Способ лечения рака предстательной железы у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 43. Способ лечения псориаза у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 44. Способ лечения множественной миеломы у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 45. Способ лечения миелоидной метаплазии с миелофиброзом (МММ) у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 46. Способ лечения красной, или истинной, полицитемии (PV) у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 47. Способ лечения эссенциальной тромбоцитемии (ЕТ) у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 48. Способ лечения грибовидного микоза у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 49. Способ лечения злокачественного заболевания крови у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 50. Способ лечения хронического миелоидного лейкоза (CML) у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 51. Способ лечения острого лимфобластного лейкоза (ALL) у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 52. Способ лечения хронического миеломоноцитарного лейкоза (CMML) у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли.