Композиции магнитных наночастиц и их применения

КОМПОЗИЦИИ МАГНИТНЫХ НАНОЧАСТИЦ И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ Изобретение относится к применению биосовместимой наночастицы или агрегата наночастиц в комбинации с внешним неосциллирующим магнитным полем, где указанная наночастица включает а) сердцевину, содержащую магнитный материал; b) биосовместимую оболочку, окружающую сердцевину; и, необязательно, с) маркирующее средство, где внешний диаметр оболочки меньше чем приблизительно 100 нм, для приготовления композиции, где композиция не содержит какихлибо иных средств нацеливания на клетку. Настоящее изобретение также относится к полученным композициям и к их применению в области здравоохранения, для лечения рака или в диагностике(например, визуализации), для контролирования развития опухоли. 016541 Настоящее изобретение относится в основном к области активируемых частиц, применяемых для терапии рака и контроля развития опухоли. Более конкретно, настоящее изобретение обеспечивает фармацевтические композиции, включающие биосовместимые магнитные наночастицы, способы получения вышеупомянутых композиций и применения их в лечении рака или в получении изображения для контроля развития опухоли с использованием неосциллирующего магнитного поля. Уровень техники За прошлые 30 лет основные успехи были сделаны в диагностике и лечении злокачественных опухолей человека. Параллельно, биотехнологии и нанотехнологии обеспечили направления для развития новых подходов к лечению человеческих болезней. В настоящее время химиотерапия представляет собой широко используемый способ лечения многих раковых образований, но он имеет некоторые явные ограничения и недостатки. Главный недостаток химиотерапии связан с токсичностью препарата, которая строго ограничивает дозировки препарата, которые могут использоваться, чтобы воздействовать на уничтожение раковых клеток. С 1950 г. магнитные зонды и частицы были исследованы как потенциальные средства при лечении рака. Изучения показывают, что гипертермия (Grittner et al., 1997, Hybridoma, 16:109; Higler et al., 1997,Invest. Radiol., 32:705), вызванная магнитными частицами, связанными с магнитным полем переменного тока (АС) высокой частоты (HF) (требующим огромной мощности), могла использоваться как альтернатива или вспомогательное средство в терапии для лечения рака. Как было показано, гипертермическая активность (теплота, получаемая магнитной энергией релаксации магнитного материала) эффективно разрушает опухолевую ткань, окружающую зонды или частицы. Развитие ультрамаленьких магнитных частиц (феррожидкости) с высокой кристалличностью обеспечило следующую стадию в магнитноиндуцированной гипертермической терапии. Это лечение привело к уменьшению размера опухоли, когда частицы были введены непосредственно в ткань и подвергнуты действию переменного магнитного поля. Однако при использовании этого вида лечения не могут быть исключены побочные эффекты из-за потенциальных взаимодействий между излучениями и тканями. Кроме того, стоимость и нехватка HF устройств (в настоящее время не состоящих в системе здравоохранения) являются ограничением относительно их применений в терапии. Специфическое нацеливание химиотерапевтических объектов на раковые клетки уже было осуществлено в других областях исследования (Schally et al., 1999, J. Endocrinol., 141:1; Nagy et al., 1996, Proc.Natl. Acad. Sci., США, 93:7269; Emons et al., 1993, J. Clin. Endocrinol. Metab., 77:1458). Методика нацеленной специфической терапии была объединена с нанотехнологией, чтобы показать концепцию наноклинических препаратов как нового антиракового подхода. В патенте США 6514481 описывают использование неосциллирующего магнитного поля для вызывания магнитноцитолиза селективных LH-RH рецептор-положительных раковых клеток, нацеленных частицами магнитного оксида железа, содержащими LH-RH как нацеливающее средство. Bergey et al. (Biomedical Microdevices. 4:4, 293-299, 2002) иLevy et al. (Chem. Mater. 2002, 14, 3715-3721) не только поддержали селективное нацеливающее действие таких наноклинических препаратов, но и указали на то, что контрольные клетки, не имеющие в достаточном количестве рецепторов для LH-RH, не показывали связывание или накопление наноклинических препаратов и поэтому были нечувствительны к воздействию на них магнитного поля. Эта методика хотя и эффективна для уничтожения специфического клеточного типа опухоли, но требует денег и отнимает много времени на приготовление наноклинических препаратов, разработанных для нацеливания вышеупомянутого специфического типа клеток. Один тип частиц в действительности годен к использованию только для одного типа раковой клетки. Поэтому необходимы многочисленные наночастицы и разработки, чтобы направить в различные раковые образования. Сущность изобретения Авторы изобретения обнаружили, что наночастицы, имеющие сердцевину из терапевтического или диагностического магнитного, предпочтительно ферромагнитного, материала, произвольно окруженного оболочкой, составленной из биосовместимого материала, могут использоваться в фармацевтической или диагностической композиции, даже когда они не имеют никаких иных средств нацеливания на клетку. Такие наночастицы в настоящем изобретении называются "ненацеленными" наночастицами. Настоящее изобретение относится в основном к применению биосоместимых магнитных, предпочтительно ферромагнитных, наночастиц для изготовления композиции для различных биологических и терапевтических применений и к способам, связанным с ними. Авторы настоящего изобретения обеспечивают новые композиции, включающие наноразмерные(менее чем приблизительно 100 нм) частицы, названные как "нанотерапевтические препараты", "нанобиолекарства", "наноклинические препараты", "наночастицы" или "нанопузырьки" для терапевтического применения или для контроля развития опухоли. Более конкретно, авторы обеспечивают новые композиции, включающие магнитные, предпочтительно ферромагнитные, наночастицы, которые могут использоваться в терапии для предотвращения или лечения рака или в диагностике (например, в in vivo получении изображения), чтобы контролировать развитие опухоли (рост или регрессию).-1 016541 Как указано выше, наночастицы имеют сердцевину из терапевтического или диагностического магнитного материала, дополнительно окруженного оболочкой, составленной из биосовместимого материала. Наночастицы дополнительно содержат маркирующее средство (метку). Специфическая особенность этих наночастиц заключается в том, что они не имеют какого-либо клеточного нацеливающего средства (средства нацеливания на клетку), т.е. любого средства, способного облегчить взаимодействие (или поглощение) с целевой клеткой, например, раковой клеткой или клеткой,которая предположительно является клеткой опухоли. Такое клеточное нацеливающее средство представляет собой в основном средство, которое специфически связывается с целевой клеткой. В настоящем изобретении наночастицы предпочтительно используются в терапии в комбинации с внешним магнитным полем, чтобы получить фармацевтическую композицию для предотвращения или лечения рака. Таким образом, фармацевтические композиции, обеспеченные в соответствии с настоящим изобретением, лишены любого клеточного нацеливающего средства и включают наночастицы, содержащие а) сердцевину, включающую магнитный материал, предпочтительно ферромагнитный материал, и, необязательно, b) биосовместимый слой, окружающий сердцевину, где внешний диаметр оболочки менее чем приблизительно 100 нм, предпочтительно менее чем приблизительно 50 нм, совместно с биосовместимым носителем. В частности, в настоящем изобретении описан способ селективного разрушения целевых клеток,таких как раковые клетки. После воздействия на клетки наноклиническими препаратами, имеющими магнитную сердцевину, опухоль присоединит и/или усвоит наноклинические препараты. Последующее применение неосциллирующего или стабильного магнитного поля может определенно разрушить нацеленные клетки. При получении изображения согласно настоящему изобретению наночастицы предпочтительно используются в комбинации с внешним магнитным полем, как описано выше, чтобы получить контролирующую композицию, предназначенную для обнаружения или визуализации раковой клетки, ткани или органа, при отсутствии любого клеточного нацеливающего средства. Таким образом, настоящее изобретение дополнительно обеспечивает диагностические композиции,пригодные для контролирования роста опухоли или регрессии. Эти композиции, также лишенные любого клеточного нацеливающего средства, включают наночастицу, содержащую а) сердцевину, включающую магнитный материал, предпочтительно ферромагнитный материал; необязательно b) биосовместимую оболочку, окружающую сердцевину, и с) маркирующее средство, где внешний диаметр оболочки менее чем приблизительно 100 нм, предпочтительно менее чем приблизительно 50 нм, совместно с биосовместимым носителем. Подробное описание изобретения Термины "нанотерапевтический", "нанобиолекарство", "нанопузырик", "наночастица", "наноклинический препарат" или их множества используются попеременно и в рамках описания представляют собой, в среднем, биосовместимую частицу или агрегаты частиц в диаметре менее чем приблизительно 100 нм, лишенные любого клеточного нацеливающего средства, имеющие центральную сердцевину из терапевтического или диагностического материала, необязательно оболочку, окружающую центральную сердцевину; и, необязательно, маркирующее средство (метку). Термины "магнитная наночастица", "нано-MAG, "магнитное средство" или "магнитный материал" используются попеременно и, как используется в настоящем изобретении, относятся к магнитной, в особенности ферромагнитной, энергетически чувствительной ненацеленной частице или агрегату частиц,которые необязательно включают биосовместимое покрытие и которые при воздействии внешним магнитным источником поля принимают предпочтительную ориентацию, предполагающую физическое вращение, ведущее к терапевтическому эффекту. Термин "композиция магнитной наночастицы", как используется в настоящем изобретении, относится к композиции, лишенной любого клеточного нацеливающего средства, которая включает магнитную, предпочтительно ферромагнитную, наночастицу и подходящую среду. Термин "лечение" означает в настоящем изобретении любое улучшение патологических признаков,таких как, в частности, уменьшение размера или развитие опухоли, удаление или разрушение патологических клеток или тканей, замедление или стабилизация прогрессии рака, уменьшение формирования метастазов, регрессия или полная ремиссия и т.д. Частицы согласно изобретению могут быть внедрены, чтобы маркировать, повреждать или разрушать клетки, ткани или органы в комбинации с внешним магнитным полем in vitro, in vivo или ex vivo. Частицы и композиции, включающие вышеупомянутые частицы согласно изобретению, могут использоваться на любом типе ткани, или на поверхности или глубоко, в любом организме млекопитающего,предпочтительно в человеке.-2 016541 Цель настоящего изобретения касается использования биосовместимой наночастицы или агрегата наночастиц в комбинации с внешним магнитным полем, в котором вышеупомянутая наночастица включает:b) биосовместимую оболочку, окружающую сердцевину, в которой внешний диаметр оболочки менее чем приблизительно 100 нм, предпочтительно менее чем приблизительно 50 нм; и необязательноc) маркирующее средство, которое может быть связано с магнитным материалом или с биосовместимым слоем, для изготовления фармацевтической композиции для предотвращения или лечения рака,где композиция не имеет никаких иных средств нацеливания на клетку. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к использованию биосовместимой наночастицы или агрегату наночастиц в комбинации с внешним магнитным полем, в котором вышеуказанная наночастица включает:b) биосовместимую оболочку, окружающую сердцевину, у которой внешний диаметр оболочки менее чем приблизительно 100 нм, предпочтительно менее чем приблизительно 50 нм; иc) маркирующее средство, которое может быть связано с магнитным материалом или с биосовместимым слоем, для изготовления контролирующей композиции, предназначенной для обнаружения или визуализации раковой клетки, ткани или органа, где композиция не имеет никаких иных средств нацеливания на клетку. Биосовместимые магнитные частицы, полезные для настоящего изобретения, должны быть достаточно маленькими в размере, чтобы быть способными проникнуть в ткань, чтобы войти в клетки (процессами эндоцитоза), минуя поглощение макрофагами (фагоцитоз), и достаточно большими, чтобы ответить на приложенное магнитное поле при 37 С. Таким образом, частицы менее чем 200 нм, предпочтительно менее чем приблизительно 100 нм в диаметре или в диапазоне от приблизительно 10 до менее чем приблизительно 100 нм в диаметре, даже более предпочтительно частицы менее чем 50 нм в диаметре пригодны для настоящего изобретения. Предпочтительные частицы, полезные для настоящего изобретения, имеют диаметр между приблизительно 10 и приблизительно 50 нм. Магнитная сердцевина должна быть достаточно большой, чтобы иметь магнитные свойства, в частности ферромагнитные свойства, чтобы обеспечивать терапевтический или диагностический эффект. Наночастицы могут иметь различные формы. Они могут, например, быть шарообразными, сплющенными, удлиненными, сферическими, овальными и т.д. Форма может определяться или контролироваться в процессе производства и реконструироваться специалистом техники изобретения в соответствии с магнитным полем, которое нужно применить, и с требуемыми применениями. Форма частиц может влиять на их свойства (особенно на магнитные свойства). Форма может влиять на "биосовместимость" и биораспределение частиц. Таким образом, по причинам фармакокинетики и для того, чтобы избежать потенциальные нежелательные взаимодействия, в основном предпочтительны наночастицы или агрегаты наночастиц сферической или округлой формы. Кроме того, предпочитают наночастицы или агрегаты наночастиц достаточно однородной формы. Наночастицы, пригодные к применению по настоящему изобретению, должны быть биосовместимыми, т.е. при введении в организм в основном млекопитающего, предпочтительно человека, они не должны вызывать никакого неблагоприятного эффекта. Этот биосовместимый признак может обеспечиваться, например, природой соединений, составляющих частицы, и/или природой покрытия, если оно имеется. Материал, формирующий сердцевину, может быть одним материалом или несколькими материалами, представляющими собой терапевтический или диагностический магнитный материал, включающий по крайней мере один магнитный, предпочтительно ферромагнитный, материал. Такие материалы включают железо, никель, кобальт, гадолиний, самарий, неодимий, бор, алюминий, предпочтительно в форме оксида, гидроксида или их металла и любой смеси из них. В предпочтительном варианте осуществления магнитный материал сердцевины представляет собой металлический материал, предпочтительно ферромагнитный материал, даже более предпочтительно монодоменный ферромагнитный материал. В определенных случаях материал, формирующий сердцевину, выбирают из группы, состоящей из железа (2) и оксида железа (3). Смешанный материал может использоваться для оптимизации взаимодействий между магнитным полем и наночастицами. Формы твердого раствора (известные специалистам в этой области техники как случайная смешанная выборка нескольких материалов), такие как CoFe2O4, например, могут использоваться как смешанный материал. Кроме того, может использоваться форма твердого раствора в несмешиваемых фазах, такая как Fe2O3/Co, например. Как упомянуто выше, наночастицы или агрегаты наночастиц, используемые в настоящем изобретении, необязательно включают оболочку. Такое покрытие преимущественно делает возможным сохранить целостность частиц in vivo и обеспечить или улучшить их биосовместимость и специфическое биораспределение.-3 016541 Биосовместимая оболочка может быть изготовлена из любого аморфного или кристаллического материала. В общем случае покрытие может не разлагаться или разлагаться микроорганизмами. Неразлагаемые микроорганизмами покрытия могут быть выбраны из оксида кремния (SiO2), золота (Au), агарозы, оксида алюминия (Al2O3), насыщенного углеродного полимера и неорганического, линейного или разветвленного полимера, модифицированного или нет (полистирол, например). Разлагаемые микроорганизмами покрытия могут, например, быть выбраны из природных или искусственных биологических молекул, которые могут быть модифицированы или нет. Это может быть полимер, сделанный из биологической молекулы, модифицированной или нет, природной формы или нет, или биологического полимера, такого как сахарид, олигосахарид, полисахарид, полисульфатизированный или нет, например декстран. Материалы или соединения, указанные выше, могут использоваться по одному, в смесях или в сочетаниях, в составе композитов или нет, с ковалентной связью или нет и, необязательно, в комбинации с другими соединениями. Кроме того, можно также использовать любой материал, упомянутый выше,водо- или липорастворимый, естественным или искусственным способом. Биосовместимый материал предпочтительно выбирают, не ограничиваясь, из оксида кремния(SiO2), оксида алюминия (Al2O3), полиэтиленгликоля (ПЭГ) и декстрана. Маркирующее средство или метка (также упомянутое в настоящем изобретении как "маркирующий краситель") может использоваться, необязательно, с целью слежения за наночастицами. Это маркирующее средство может быть присоединено к магнитному материалу, формирующему сердцевину наночастицы, или к биосовместимому слою, если он имеется. Маркирующее средство может находиться внутри биосовместимого слоя или быть присоединенным к поверхности наночастицы. Маркирующее средство может быть выбрано из группы, состоящей из производных флуоресцентных маркеров, химических красителей, ультразвуковых медицинских контрастных веществ, рентгеноконтрастных веществ и препаратов для визуализации при магнитном резонансе. Маркирующий краситель может быть любым флуоресцентным красителем. Примером является краситель, который имеет длину волны возбуждения в инфракрасном диапазоне. Описание двух фотоновых красителей, которые являются подходящими, может быть найдено в патенте США 5912247. Наночастицы в настоящем изобретении могут включать другие молекулы, соединения или поверхностные или структурные материалы, предназначенные для улучшения их стабильности, свойства,функции, специфичности и т.д. Это может представлять собой обеспечение молекулы или улучшение биосовместимости наночастицы или молекулы, позволяющей наночастице миновать иммунную систему(и в особенности избежать взаимодействий с макрофагами и ретикуло-эндотелиальной системой). Однако вышеупомянутые наночастицы лишены любого специфического клеточного нацеливающего средства. В одном варианте осуществления наночастицы, используемые в настоящем изобретении, представляют собой структуры, включающие сердцевину из Fe2O3 или Fe3O4, необязательно оптический зонд в качестве маркирующего средства и предпочтительно кремниевую оболочку в качестве биосовместимой оболочки. Предпочтительный размер для магнитной сердцевины приблизительно 20 нм. Считается, что кремниевая оболочка стабилизирует магнитную сердцевину. Типичный способ получения наночастиц, пригодных к употреблению в настоящем изобретении,включает стадии:b) формирование биосовместимой оболочки, например кремниевой оболочки, вокруг сердцевины; где внешний диаметр кремниевой оболочки менее чем приблизительно 100 нм, предпочтительно менее чем 50 нм. Частицы с магнитной сердцевиной могут синтезироваться, используя двухстадийный способ, такой,как описано в примере 1. Альтернативные способы получения материалов, пригодных к употреблению для получения наночастиц, пригодных к употреблению в настоящем изобретении, описаны, например, в патенте США 6514481 В 1, в Nelson et al., Chem. Mater. 2003, 15, 688-693 "Nanocrystalline Y203:Eu Phosphors Prepared byAlkalide Reduction" или в Liu et al., Journal of Magnetism and Magnetic Materials. 270 (2004), 1-6 "Preparation and characterization of amino-silane modified superparamagnetic silica nanospheres". Исходя из идеи настоящего изобретения, специалисты в данной области техники должны признать,что ненацеленные магнитные наночастицы могут быть модифицированы, не отступая от сущности изобретения. Другая цель изобретения заключается в любой композиции, включающей биосовместимые, ненацеленные магнитные наночастицы или агрегаты наночастиц, таких как определено выше, и/или которые могут быть получены любым из процессов, описанных выше. Хотя это и необязательно, наночастицы композиций изобретения преимущественно имеют довольно гомогенную форму и размер. Композиции могут быть в твердой или в жидкой форме (суспендированные наночастицы), в форме пасты, аэрозоля и т.д.-4 016541 В специфическом варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, не имеющую никаких иных средств нацеливания на клетку, включающую наночастицу,такую как определено выше, предпочтительно в терапевтически эффективном количестве, включающую а) сердцевину, содержащую магнитный материал, предпочтительно сердцевину, сделанную из ферромагнитного материала, например из оксида железа (2) и оксида железа (3), и предпочтительно b) биосовместимую оболочку, окружающую сердцевину, где внешний диаметр оболочки менее чем приблизительно 100 нм, предпочтительно между приблизительно 10 и приблизительно 50 нм, совместно с биосовместимым носителем. Терапевтически эффективное количество может быть между приблизительно 0,01 и приблизительно 100 мг/1 г опухоли, предпочтительно между приблизительно 0,05 и приблизительно 30 мг/1 г опухоли, даже более предпочтительно между приблизительно 0,05 и приблизительно 10 мг/1 г опухоли. Размер и масса опухоли могут быть оценены и вычислены с использованием изображающей ЯМР-томографии или сканирующего (визуализирующего) устройства. В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает диагностическую или контролирующую композицию, без какого-либо клеточного нацеливающего средства, включающую наночастицу, такую как определено выше, предпочтительно в диагностически эффективном количестве,включающую а) сердцевину, содержащую магнитный материал, предпочтительно сердцевину, сделанную из ферромагнитного материала, например оксида железа (2) и оксида железа (3), предпочтительно b) биосовместимую оболочку, окружающую сердцевину, и с) маркирующее средство, где внешний диаметр оболочки менее чем приблизительно 100 нм, предпочтительно между приблизительно 10 и приблизительно 50 нм, совместно с биосовместимым носителем. Эта диагностическая или контролирующая композиция может комбинироваться с фармацевтической композицией или ассимилироваться с фармацевтической композицией, в особенности, когда контролирование и лечение реализуются одновременно. В последней ситуации, те же самые наночастицы в основном используются как терапевтический и как диагностический инструмент. Количество наночастиц, используемых в приготовлении диагностической или контролирующей композиции, будет зависеть от количества наночастиц, используемых для обеспечения терапевтического эффекта. Эксципиент или носитель может быть любым, самым обычным для этого типа применений, таким как, например, солевой, изотонический, стерильный или буферный растворы и т.д. Они могут дополнительно включать стабилизирующие, подслащивающие и/или поверхностно-активные средства и т.д. Они могут быть приготовлены в форме ампул, колб, таблеток или капсул с использованием per se известных галеновых методик. Композиции, наночастицы и агрегаты по изобретению могут использоваться во многих областях,особенно при лечении человека или в ветеринарной медицине. При воздействии магнитным полем и в зависимости от продолжительности воздействия магнитные наночастицы обеспечивают клеточное или тканевое разрушение (продолжительностью в течение нескольких минут, например от 2 или 5 до 120 мин) или просто контролирование или визуализацию клетки или ткани (получение изображения, диагностика) (продолжительностью в течение нескольких секунд или минут, в особенности от 1 с до 120 мин, предпочтительно от 1 до 60 мин, например от 10 с до 10 мин). В частности, контролирование может регистрироваться в течение времени лечения. Другие способы отображения, такие как сканирование, маммография, PET, визуализация с ультразвуком, могут использоваться для визуализации наночастиц и обеспечения получения изображения для диагностики и/или с целью последующего наблюдения опухоли. С использованием магнитных полей частицы изобретения применяются для визуализации любой ткани в теле. Преимущественно наночастицы или агрегаты наночастиц и композиции настоящего изобретения могут использоваться для лизиса раковых клеток или предполагаемых раковых клеток при воздействии магнитного поля. Таким образом, в специфическом варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению биосовместимой наночастицы или агрегата наночастиц в комбинации с внешним магнитным полем, в котором вышеупомянутая наночастица включает:b) биосовместимую оболочку, окружающую сердцевину, в которой внешний диаметр оболочки менее чем приблизительно 100 нм, предпочтительно около или менее чем приблизительно 50 нм; для изготовления фармацевтической композиции для разрушения клетки, такой как раковая клетка, в частности, для предотвращения или лечения рака, где композиция не имеет никаких иных средств нацеливания на клетку.-5 016541 Изобретение также относится к стимулирующему или вызывающему апоптоз, некроз или лизис опухолевой клетки in vitro, ex vivo или in vivo способу, включающему следующие стадии:(a) контактирование фармацевтической композиции согласно изобретению и описанной выше с опухолевыми клетками в течение времени, достаточного для того, чтобы вышеупомянутые опухолевые клетки связывали и/или поглощали наночастицы или агрегаты наночастиц, содержащихся в вышеупомянутой фармацевтической композиции; и(b) воздействие на клетки неосциллирующим или стабильным магнитным полем, в котором вышеупомянутое воздействие вызывает апоптоз, некроз или лизис опухолевых клеток, которые связались с наночастицами и/или поглотили их. Не связываясь с любой специфической теорией, данные, детально описанные в экспериментальной части настоящего применения, предполагают, что вероятный механизм для цитолиза мог бы представлять собой физическую ориентацию магнитных наночастиц в поле, которые индуцируют физическое напряжение или местное разрушение, ведущее к разрушению клетки. Настоящее изобретение демонстрирует магнитно-цитолитическую способность (процесс лизиса клетки) этих наноклинических препаратов. Доказательство, представленное в настоящем изобретении, предполагает, что эти наноклинические препараты взаимодействуют с раковыми клетками и концентрируются в опухолях, покидая проницаемую сосудистую систему, окружающую твердые опухоли, благодаря явлению, известному как увеличенный эффект проникания и удерживания (EPR). Ткани опухоли, как известно, в действительности имеют проницаемую сосудистую систему и уменьшенную лимфатическую систему по сравнению с нормальной гистологией. Это явление приводит к пассивному накоплению наномасштабных частиц в опухолях. Как объяснено ранее, клетки, которые нужно разрушить, могут быть любыми раковыми клетками из любого млекопитающего, в особенности из человека. Раковые клетки предпочтительно выбирают из группы, состоящей из клеток рака толстой кишки, клеток рака молочной железы, клеток рака яичника,клеток рака поджелудочной железы, клеток рака почек, клеток рака мочевого пузыря, клеток рака пищевода, клеток рака мозга, клеток рака печени, клеток рака матки и клеток рака предстательной железы. Другая цель изобретения относится к способу стабилизации или лечения рака, включающего (а) введение пациенту, болеющему раком, композиции изобретения, такой как определено ранее, в условиях, позволяющих наночастицам или агрегатам наночастиц, включенных в вышеупомянутую композицию, контактировать или проникать в раковые клетки, и (b) воздействие на пациента магнитным полем,как объяснено выше, приводя к нарушению, повреждению или функциональному разрушению его раковых клеток, вылечивая, таким образом, рак. Вышеупомянутый описанный способ пригоден к применению для лечения любого типа рака, в особенности солидных опухолей, метастазированных или нет. Человеческая злокачественная опухоль, которая может быть стабилизирована или вылечена с использованием магнитных наночастиц согласно изобретению, включает, но не ограничивается, рак толстой кишки, печени, легкого, почки, мочевого пузыря, головы и шеи, мозга, кожи, кишечника, молочной железы, яичника, матки, предстательной железы, поджелудочной железы и т.д. Наночастицы или композиции согласно изобретению, как описано выше, могут вводиться различными способами, предпочтительно инъекцией. Инъекция может быть местной [внутриопухолевой (IT) или пери-опухолевой, например], чтобы обеспечить местную концентрацию в опухоли и максимизировать терапевтический эффект, или системной [например, внутривенной (IV)], чтобы предоставить пассивное накопление наночастиц в опухоли благодаря эффекту EPR. Введение также может быть реализовано пероральным способом. При необходимости могут выполняться повторные инъекции или введения. Магнитное поле, которое является предпочтительно неосциллирующим или стабильным, может применяться постоянно после первого введения наночастиц, один или более раз, используя любой источник магнитного поля. Каждая активация магнитного поля может сопровождаться одним или несколькими введениями наночастиц или композиций согласно изобретению. Источник магнитного поля представляет собой предпочтительно источник однородного и однонаправленного магнитного поля и может быть выбран из любого постоянного магнитного, электромагнитного оборудования и оборудования ЯМР-томографии (MRI). Подходящее неосциллирующее или стабильное магнитное поле доступно в стандартном MRIоборудовании, которое в основном имеет магнитное поле в диапазоне от 0,5 до 5 Тесла (Тл). Для осуществления лечения или диагностики на опухолевые клетки, как описано выше, воздействуют наночастицами или агрегатами наночастиц согласно изобретению. Наночастицы или агрегаты наночастиц могут вводиться один или более раз, предпочтительно один раз. Наночастицы или агрегаты наночастиц при введении несколько раз, например 2, 3, 4 или 5 раз, могут регулярно вводиться в течение по крайней мере одной недели, предпочтительно двух недель. После связывания и/или усваивания наночастиц или агрегатов наночастиц клетками опухоли на пациента воздействуют магнитным полем, предпочтительно неосциллирующим или стабильным магнитным полем.-6 016541 Для диагностической цели композиции изобретения, как раскрыто выше, также годны к употреблению в качестве контрастных или диагностических средств (контролирующие композиции) для того, чтобы обнаружить и/или визуализировать любой тип раковой ткани. Таким образом, целью изобретения является применение наночастиц или агрегатов наночастиц, таких, как описано выше, в комбинации с магнитным полем для изготовления композиции, предназначенной для обнаружения или визуализации клеток, тканей или органов, или для контролирования развития патологии. Термин "в комбинации" указывает на то, что требуемый эффект получается, когда клетки, ткани или органы, представляющие интерес, частично включающие наночастицы изобретения, возбуждаются магнитным полем. Однако, как объяснено выше в контексте терапии, нет необходимости в том, чтобы операции с частицами и магнитным полем выполняли одновременно и по той же самой методике. Такая композиция может использоваться во время стадии лечения. Магнитное поле, примененное в терапии или диагностике, находится в диапазоне от 0,5 до 7 Тл,предпочтительно в диапазоне от 0,5 до 5 Тл. В основном MRI-устройство может использоваться, чтобы обеспечить возбуждение наночастицы с магнитным полем 1,5 Тл. В соответствующее время (когда биораспределение подходит для хорошей терапевтической активности и минимизации потенциальных сопутствующих разрушений) после единичных или повторных введений наночастиц или композиций изобретения магнитное поле может применяться один или более раз в течение одной или нескольких недель (предпочтительно 1, 2, 3 или 4 недели) и предпочтительно применяется каждые 1 или 2 дня. Число активаций предпочтительно ниже или равно 5 [например, 1, 2, 3,4 или 5 активаций] и в основном длится от 30 до 90 мин во время терапии и от 10 с до 60 мин при диагностике. Методика, описанная выше, может при необходимости быть повторена в течение некоторого времени (каждый месяц или каждые два, три, четыре, пять или шесть месяцев, например). Изобретение будет лучше оценено из следующих примеров, которые предназначены для иллюстрации и не ограничивают настоящее изобретение. Краткое описание чертежей Фиг. 1 показывает TEM-изображение наночастиц из оксида железа, покрытых оболочкой оксида кремния. Фиг. 2 показывает развитие массы C57BL/6 мышей после инъекции увеличивающихся доз наночастиц в пределах от 0,006 до 0,06 мг композиции ненацеленных нано-MAG/мышь. Фигура не показывает никакого влияния на вес мышей композиции ненацеленных нано-MAG в течение месяца после ее введения. Фиг. 3 показывает изображение развития массы C57BL/6 мышей после единичной инъекции 0,9 и 1,8 мг композиций ненацеленных нано-MAG/мышь. Фигура не демонстрирует никакого влияния на вес мышей композиции ненацеленных нано-MAG. Фиг. 4 показывает массу мышей, несущих С 38 опухоли, до и после 5 внутривенных инъекций ненацеленных нано-MAG композиции (0,12 мг/мышь). Никакого различия не наблюдается между весом контрольных мышей и весом мышей, подвергнутых MRI. Фиг. 5 показывает уменьшение роста С 38 опухоли в инъецируемых ненацеленными нано-MAGC57B16 мышах, подвергнутых действию магнитного поля в течение 1, 20 ч постинъекции, по сравнению с инъецируемыми ненацеленными нано-MAG и неактивизированными животными. Фиг. 6 показывает развитие массы С 57 В 16 мышей после инъекции NaCl или инъекции и активации после 5, 20 или 48 ч ненацеленными нано-MAG, которые не показывают никакого различия между контрольными и обработанными животными. Фиг. 7 представляет объемы опухоли мышей, обработанных активизированными ненацеленными нано-MAG относительно необработанных мышей. Рост опухолей уменьшился в мышах, обработанных ненацеленным нано-MAG, активизированным после 48 ч инъекции. Фиг. 8 представляет MRI-изображения мышей, несущих С 38 опухоли (а) после единичнойIT-инъекции 0,9%-ного раствора NaCl и (b) после 48 ч единичной IT-инъекции нано-MAG. Пример 1. Частицы с магнитной сердцевиной синтезируют с использованием двухстадийного процесса. Под стадией осаждения понимают одновременное введение водных растворов хлорида железа(60 ммоль) и гидроксида натрия (120 ммоль) в реактор в атмосфере азота и при механическом перемешивании. Затем полученный раствор гидроксида железа непосредственно окисляют в реакторе введением перекиси водорода. Во время стадии окисления основной объем реакции поддерживают при рН 8 с использованием автобюретки, заполненной раствором гидроксида натрия. В течение всего этого процесса рН, температура и добавленный объем гидроксида натрия регистрируются компьютером, связанным с рН-метром. Раствор инкубируют в течение 2 ч после окончания введения перекиси водорода. Затем 5 граммовые полученные частицы (30 нм в диаметре) промывают центрифугированием в дистиллированной воде и стабилизируют добавлением 1,2 мМ гидроксида тетраметиламмония.-7 016541 Магнитная сердцевина дополнительно может быть покрыта оболочкой, например, из кремния. С этой целью первое нанесение окиси кремния реализуют добавлением силиката натрия к раствору частиц(780 мкл на 1 г частиц в 240 мл дистиллированной воды). Остаток силиката натрия удаляют центрифугированием относительно воды. 125 мг частиц диспергируют в раствор вода/этанол (1/4), содержащий 0,6 ммоль тетраэтилортосиликата. Гидролиз предшественника оксида кремния и конденсацию оксида кремния ускоряют введением раствора аммиака в основной объем. Раствор инкубируют в течение ночи перед промыванием частиц центрифугированием в дистиллированной воде. Покрытые частицы сохраняют в воде (рН поддерживается приблизительно при 7,4). Фиг. 1 представляет изображение ненацеленных нано-MAG, полученных просвечивающей электронной микроскопией. Пример 2. Этот вариант осуществления проверяет максимально допустимую дозу (MTD) ненацеленных магнитных наночастиц (ненацеленных нано-MAG) в здоровых мужских и женских особях C57BL/6 мышей и в здоровых мужских и женских особях швейцарских бестимусных мышей. Эксперимент максимально допустимой дозы (MTD) проводился на 12 здоровых мужских и 12 здоровых женских особях C57BL/6 мышей, а также на 3 здоровых мужских и 3 здоровых женских особях швейцарских бестимусных мышей. Они получили единичную болюсную IV инъекцию носителя наноMAG и ненацеленной нано-MAG-композиции в различных дозах, выбранных авторами. Изучение допустимой величины проводилось, как описано в табл. 1. Таблица 1 Вес тела, клинические признаки токсичности и выживание регистрировались два раза в неделю. Потеря массы тела на 25% и/или смерть животного рассматривались как критерии токсичности. Фиг. 2 не показывает никакого воздействия композиции ненацеленных нано-MAG на массу мышей в течение месяца после введения ее в увеличивающихся дозах (в пределах от 0,006 до 0,06 мг/мышь). Не было обнаружено никакой зависимости от происхождения мыши или от пола мыши. Вскрытие трупов мышей после умерщвления и макроскопическое исследование не показали никакого признака токсичности. Пример 3. Этот вариант осуществления дополнительно демонстрирует толерантность здоровых мышей к ненацеленным магнитным наночастицам (ненацеленным нано-MAG) после единичной IV инъекции. 3.1. Материал. Композиции ненацеленных нано-MAG: 3 г композиции ненацеленных нано-MAG на 1 л и 6 г композиции ненацеленных нано-MAG на 1 л,6 здоровых мужских особей C57BL/6 мышей. 3.2. Обработка. Путь введения: IV, болюсный. Объем инъекции: 300 мкл/мышь/инъекция. Дозы: 0,90 и 1,80 мг композиции ненацеленных нано-MAG/мышь/инъекция. Схема введения: Q1D1 (однократно, один раз в день).-8 016541 Эксперименты изучения толерантности, включающие единичную инъекцию 1,8 мг/композиция ненацеленных нано-MAG/мышь, были получены, как описано в табл. 2. Таблица 2 Инъекции группе 2 осуществлялись только тогда, если в группе 1 толерантность составляла 0,90 мг композиции ненацеленных нано-MAG/мышь/инъекция дозы. 3.3. Контролирование мышей. Масса тела регистрировалась два раза в неделю в течение 10 дней. Жизнеспособность и поведение регистрировались каждый день. Умерщвление и вскрытие трупов мышей проводили через 10 дней после последней инъекции. Эксперименты изучения толерантности не показывали никакого эффекта композиции ненацеленных нано-MAG на массу мышей (см. фиг. 3). Пример 4. Этот вариант осуществления демонстрирует толерантность здоровых C57BL/6 и швейцарских мышей к ненацеленным магнитным наночастицам (ненацеленные нано-MAG) после повторных инъекий. Подобные эксперименты, как и эксперименты, описанные в примерах 2, 3, были выполнены с повторными инъекциями ненацеленных нано-MAG. Масса мышей была измерена до и после 5 внутривенных инъекций композиции ненацеленных нано-MAG (0,12 мг/мышь) (см. фиг. 4). Для того чтобы проверить безопасность наночастиц после активации, несколько мышей были подвергнуты действию магнитного поля (MRI), чтобы активизировать наночастицы. Никакого различия между массой контрольных мышей и массой мышей, подвергнутых MRI, не наблюдалось. Кроме того, умерщвление и вскрытие трупов животных не показали никакого признака токсичности. Пример 5. Этот вариант осуществления демонстрирует эффективность композиций ненацеленных нано-MAG в женских особях C57BL/6 мышей, несущих опухоли толстой кишки С 38. Композиция ненацеленных нано-MAG (1,5 г/л) была непосредственно инъецирована в опухоли С 38 мышам C57BL6. Животные были подвергнуты действию магнитного поля (MRI) в течение 1, 20 ч постинъекции и затем сравнены с инъецированными ненацеленными нано-MAG и неактивированными животными. Фиг. 5 показывает уменьшение роста опухоли у активированных животных. Пример 6. Этот вариант осуществления оценивает антиопухолевую активность ненацеленных нано-MAG, активированных магнитным полем, в модели мужских особей C57BL/6 мышей, несущих опухоль С 38, после единичной внутриопухолевой (IT) инъекции и при различных условиях задержки между ITинъекцией и воздействием магнитным полем. День обработки (D0), 26 из 50 мужских особей C57BL/6 мышей, несущих опухоль, были рандомизированы на 5 групп (1 группа из 6 мышей и 4 группы по 5 мышей). Группы со средними объемами опухоли не имели различий (дисперсионный анализ). Схема обработки была выбрана следующей: Группа 1: 5 мышей получили единичную IT-инъекцию 0,9%-ного раствора NaCl (схема обработкиQ1D1). Группа 2: 6 мышей получили единичную IT-инъекцию ненацеленных нано-MAG при дозе 0,75 мг ненацеленных нано-MAG/мл опухоли (схема обработки Q1D1).-9 016541 Группа 3: 5 мышей получили единичную IT-инъекцию ненацеленных нано-MAG при дозе 0,75 мг ненацеленных нано-MAG/мл опухоли (схема обработки Q1D1). Мыши затем были подвергнуты воздействию в течение 1 ч магнитным полем в 4,7 Тл через 5 ч после IT-инъекции ненацеленных наноMAG. Группа 4: 5 мышей получили единичную IT-инъекцию ненацеленных нано-MAG при дозе 0,75 мг ненацеленных нано-MAG/мл опухоли (схема обработки Q1D1). Мыши затем были подвергнуты воздействию в течение 1 ч магнитным полем в 4,7 Тл через 20 ч после IT-инъекции ненацеленных наноMAG Группа 5: 5 ь мышей получили единичную IT-инъекцию ненацеленных нано-MAG при дозе 0,75 мг ненацеленных нано-MAG/мл опухоли (схема обработки Q1D1). Мыши затем были подвергнуты воздействию в течение 1 ч магнитным полем в 4,7 Тл через 48 ч после IT-инъекции ненацеленных нано-MAG. Схему обработки свели в табл. 3. Таблица 3 Воздействие магнитного поля и активация были выполнены, как описано в табл. 4. Таблица 4 Масса тела, клинические признаки токсичности и выживание регистрировались два раза в неделю. Потеря массы тела на 15-20% и/или смерть животного рассматривались как критерии для токсичности. Этот опыт не показал никакого различия между весом контрольных и обработанных животных (см. фиг. 6). Длина и ширина опухоли были измерены кронциркулем и объем опухоли был оценен формулой(ширина 2 длина)/2. Эффективность обработки была оценена, исходя из эффектов активированных ненацеленных нано-MAG на объемы опухоли обработанных мышей относительно необработанных мышей. Рост опухоли был проконтролирован и представлен на фиг. 7. Рост опухолей уменьшился, когда мышей обрабатывали ненацеленными нано-MAG, активированными через 48 ч после их инъекции. Фиг. 8 показывает MRI-изображения мышей, несущих С 38 опухоли, инъецируемых внутриопухольно NaCl 0,9% (а) или нано-MAG (b), через 48 ч после инъекции, нано-MAG обнаруживались in vivo и привели к повышению специфичности и контраста. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ лечения или предотвращения рака у пациента, включающий:i) введение фармацевтической композиции, содержащей биосовместимую наночастицу или агрегат наночастиц, где указанная наночастица не содержит никаких иных средств нацеливания на клетку и наночастица включает:b) биосовместимую оболочку, окружающую сердцевину, где внешний диаметр оболочки менее чем 100 нм; иii) воздействие на пациента внешним неосциллирующим магнитным полем. 2. Способ по п.1, где ферромагнитный материал выбирается из группы, состоящей из железа, никеля, кобальта, гадолиния, самария, неодимия, бора, алюминия и любой их смеси. 3. Способ по п.2, где материал ферромагнитной сердцевины находится в форме оксида, гидроксида или металла. 4. Способ по п.3, где ферромагнитный материал представляет собой монодоменный ферромагнитный материал. 5. Способ по п.4, где материал магнитной сердцевины выбирается из группы, состоящей из оксида железа (2) и оксида железа (3). 6. Способ по любому из пп.1-5, где биосовместимая оболочка сделана из материала, выбранного из группы, состоящей из оксида кремния, золота, оксида алюминия, сахара, ПЭГ и декстрана. 7. Способ по п.6, где внешний диаметр оболочки составляет от 10 и менее чем 100 нм. 8. Способ по п.7, где внешний диаметр оболочки составляет между приблизительно 10 и приблизительно 50 нм. 9. Способ по любому из пп.1-8, где наночастица дополнительно включает маркирующее средство,присоединенное к магнитному материалу. 10. Способ по любому из пп.1-9, где наночастица или агрегат наночастиц имеют, по существу, сферическую или округлую форму. 11. Способ обнаружения или визуализации раковой клетки, ткани или органа у пациента, включающий:i) введение композиции, содержащей биосовместимую наночастицу или агрегат наночастиц, где указанная наночастица не содержит никаких иных средств нацеливания на клетку и наночастица включает:a) сердцевину, содержащую ферромагнитный материал,b) биосовместимую оболочку, окружающую сердцевину, где внешний диаметр оболочки менее чем 100 нм, иii) воздействие на пациента внешним неосциллирующим магнитным полем. 12. Способ по любому из пп.1-11, где магнитное поле применяется с использованием любого источника магнитного поля. 13. Способ по п.12, где источник магнитного поля представляет собой источник однородного и однонаправленного магнитного поля. 14. Способ по п.12 или 13, где источник магнитного поля выбирают из любого электромагнитного оборудования и оборудования ЯМР-томографии (MRI). 15. Способ по п.11, где для визуализации используется сканирующее устройство, или рентгенографическое устройство, или ультразвуковое устройство. 16. Фармацевтическая композиция для лечения или предотвращения рака, содержащая биосовместимую наночастицу или агрегат наночастиц и биосовместимый носитель, где наночастица или агрегат наночастиц включает: а) сердцевину, содержащую ферромагнитный материал; иb) биосовместимую оболочку, окружающую сердцевину, где внешний диаметр оболочки менее чем 100 нм. 17. Композиция по п.16, где ферромагнитный материал сердцевины выбирают из группы, состоящей из оксида железа (2) и оксида железа (3). 18. Композиция по п.16 или 17, где внешний диаметр оболочки составляет между 10 и 50 нм. 19. Композиция по любому из пп.16-18, где наночастица или агрегат наночастиц имеет, по существу, сферическую или округлую форму. 20. Диагностическая композиция для лечения и обнаружения или визуализации раковой клетки,ткани или органа у пациента, включающая биосовместимую наночастицу или агрегат наночастиц и биосовместимый носитель, где наночастица или агрегат наночастиц включает: а) сердцевину, содержащую ферромагнитный материал;- 11016541 с) маркирующее средство, где внешний диаметр оболочки менее чем 100 нм и предпочтительно менее чем 50 нм, совместно с биосовместимым носителем. 21. Композиция по п.20, где ферромагнитный материал сердцевины выбирают из группы, состоящей из оксида железа (2) и оксида железа (3). 22. Композиция по п.20 или 21, где внешний диаметр оболочки составляет между 10 и 50 нм. 23. Композиция по любому из пп.20-22, где наночастица или агрегат наночастиц имеют, по существу, сферическую или округлую форму.