Лечебный препарат вирулицидного действия

1 Изобретение относится к области медицины, конкретно к лекарственным препаратам,обладающим широким спектром вирулицидного действия, оказывающим влияние на ДНК- и РНК-содержащие вирусы у млекопитающих,включая человека. Может быть использован для борьбы с инфекционными заболеваниями вирусной природы. За последние три десятилетия было предложено множество препаратов для лечения вирусных болезней. Однако в прошлом из-за отсутствия правильной оценки естественного развития большинства вирусных инфекций, незнания механизма поражения вирусом живых клеток организма терапевтические испытания препаратов вели к ошибочным заключениям. В последнее время в результате более детального изучения и разработки методов специфической вирусной диагностики, расширения биохимических знаний о процессах репликации вирусов, а также лучшего понимания поведения вирусов в специфических популяциях клеток хозяев наметилась тенденция в разработке более действенных препаратов, используемых для поражения вирусных инфекций. Выдающимся событием явилось открытие эндогенного интерферона и установление его противовирусной активности. В настоящее время установлено, что действие ряда иммуностимулирующих и противовирусных средств связано с их интерфероногенной активностью, то есть способностью стимулировать образование эндогенного интерферона(Машковский М.Д. Лекарственные средства: Пособие для врачей. - Т. 2. - Харьков: Торсинг, 1998. - С. 349). Природный (лейкоцитарный человеческий) интерферон продолжают применять для профилактики и лечения гриппа и других вирусных инфекций. Из последних наиболее эффективных антивирусных синтетических препаратов следует выделить ремантадин, используемый для лечения заболеваний, вызванных вирусом гриппа, аденовирусами, пикорнавирусами и др. (Кукайн Р.А. и др. Антивирусная активность и механизм действия различных химических соединений. - Рига: Знание, 1979). Опасным свойством вирусов является их способность к мутации. Такие эпидемии вирусных заболеваний, как испанка, гонконгский грипп и, наконец, СПИД, относящийся к ретровирусам, являются вирусами животных, тем не менее ими заболевает и человек. Известная липосомная фармацевтическая композиция, содержащая липид и полиен, например нистатин и амфотерицин В, используется для лечения СПИДа. Однако липосомные композиции избирательно токсичны для инфицированных ВИЧ-1 клеток (WO 92/118415, кл. А 61K 9/127, 31/71,1992 г.). Для лечения СПИДа применяют также рапамицин или его аналог, вызывающий задержку развития или замедление распростране 003100 2 ния ВИЧ-инфекций у млекопитающих (WO 94/05300, кл. А 61 К 31/71, 1994 г.). Известен также фармацевтический препарат, содержащий в качестве активного компонента бенаномицин А или В для ингибирования заражения вирусом СПИДа (EP 0356330A, кл. 4 А 61 К 31/71, опубл. 15.09.1990 г.). Недостатками вышеуказанных средств, используемых для борьбы или/и ингибирования СПИДа является то, что они вызывают ряд побочных реакций организма. Одним из наиболее применяемых препаратов для замедления развития инфекции СПИДа является 3'-азидo-2',3'-дидезоксотимидин (его называют также азидотимидин или зидовудин). Данный препарат обладает позитивным действием при патогенной ретровирусной инфекции, но говорить о полном поражении вируса СПИДа с помощью данного препарата, к сожалению, не приходится (В мире науки: Илл. журнал. - М.: Мир, 1988,12, с. 80-81). Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является лечебный препарат, обладающий бактерицидным и вирулицидным действием, содержащий йод,иодид калия или натрия, синтетический водорастворимый полимер, природные полимеры,например полисахариды, и моно- и олигосахариды, при следующем соотношении компонентов, г/л: Йод 6-10 Иодид калия или натрия 9-15 Синтетический водорастворимый полимер 2-4 Природный полимер (полисахариды) и моно- и олигосахариды 8-120 Вода Остальное(CZ 5435, А 61K 33/18, А 61K 31/715). Недостатком данного препарата является его относительно высокая токсичность. Воздействовать на вирусы, уже проникшие в клетки,сложно, так как сама клетка надежно защищает их от любого воздействия. Именно в клетке ведет разрушительную работу приспособленный вирус. Проблема состоит в том, чтобы на молекулярном уровне подавить специфические процессы биологического синтеза вирусных частиц,не затронув, по возможности, жизнедеятельности незараженных вирусом клеток. Таким образом, задача состоит в поиске препарата, способного поражать вирус как вне,так и внутри зараженной клетки, не убивая при этом саму клетку организма. Кроме того, данный препарат должен обладать широким спектром действия при малой его токсичности. Поставленная задача была решена с помощью препарата, разработанного авторами настоящего изобретения. Предложен лечебный препарат вирулицидного действия, в частности на ДНК- и РНКсодержащие вирусы млекопитающих, включая человека, содержащий йод, иодид калия или натрия, синтетический водорастворимый поли 3 мер, природные полимеры, например полисахариды, и моно- и олигосахариды и воду, отличающийся тем, что он дополнительно содержит хлорид лития, при следующем содержании компонентов, г/л: Йод 0,8-25 Иодид калия или натрия 1,2-38 Хлорид лития 0,1-20 Синтетический водорастворимый полимер 0-6 Природные полимеры (полисахариды) и моно- и олигосахариды 8-400 Вода Остальное Интервалы концентраций компонентов выбраны не случайно. Все признаки, входящие в состав предлагаемого препарата вирулицидного действия, являются необходимыми и достаточными для достижения поставленной цели. Ни один из них не может быть исключен или заменен на другой, в противном случае технический результат не будет достигнут. Подбор как качественных, так и количественных ингредиентов, входящих в состав предлагаемого лечебного препарата, был основан на многочисленных экспериментальных данных. Качественный состав ингредиентов, с точки зрения известности их в литературе, очевиден, однако,авторы заявляемого изобретения пришли к заключению, что в совокупности с другими компонентами каждый из входящих в состав препарата компонентов проявляет не совсем очевидные свойства. В силу того, что химически и биологически активным компонентом является йод, то при его концентрации ниже 0,8 г/л происходит гидролиз йода по реакции то есть лечебный препарат не подлежит хранению. При концентрации йода выше 25 г/л за счет структурообразования комплексных ассоциатов йода с компонентами лекарственного препарата образуются желеобразные системы,неудобные для медицинского применения. Кроме того, протекают во времени реакции галогенирования моно-, олиго- и полисахаридов и при этом повышается токсичность препарата. Интервалы концентраций остальных компонентов служат для обеспечения протекания реакций комплексообразования, ассоциации и агрегации при приготовлении препарата для обеспечения его вирулицидных свойств. Синтетические водорастворимые полимеры (например, поливиниловый спирт, поли-Nвинилпирролидон) выполняют при введении в кровь функцию плазмозаменителей, сорбентов(токсинов, например) или пролонгаторов. В нашем случае синтетический водорастворимый полимер выполняет гелеобразующую функцию. 4 Следует также отметить, что одним из важных моментов в подборе компонентов, входящих в состав препарата, является то, что роль матрицы выполняют комплексные соединения йода с низко- и высокомолекулярными лигандами, которые образуют, в свою очередь, ассоциаты. Водный раствор их имеет некоторые свойства геля. Известно, что углеводы, к которым относятся моно- и полисахариды, наряду с белками и липидами входят в состав биологических мембран, разделяющих пространство между клетками или внутри клетки. Обнаруженные в мембранах белки обычно являются ферментами (Coleman R. Biochim.Biophys. Acta. - 1973. - 300. - 1). Мембраны, в свою очередь, обеспечивают необходимые пространственные взаимодействия между ферментами, в результате чего продукт реакции, катализируемой одним ферментом, становится субстратом расположенного по соседству другого фермента. На внутриклеточном уровне большую роль в регулировании процессов метаболизма играют гормоны. Связывание гормонов с их рецепторами сходно с взаимодействием фермента и его субстрата. Образование комплексов ферментсубстрат и гормон-рецептор предполагает узнавание молекулами друг друга. На более высоком уровне организации такой способностью обладают клетки. Так, лейкоциты в токе крови узнают и разрушают чужеродные клетки, например бактериальные, но не нападают на собственные клетки крови. Узнавание проявляется и в контактном ингибировании: некоторые клетки высших организмов в питательной среде продолжают делиться до тех пор, пока не придут в контакт с другими клетками. Раковые клетки в тех же условиях продолжают делиться. Процессы клеточного узнавания зависят от подвижности компонентов мембраны (BretscherM.S., Raff M.C. - Nature. - 1975. - 258. - 43). Углеводы, к которым принадлежат моно-,олиго- и полисахариды, выбранные авторами настоящего изобретения в качестве природных полимеров, являются чрезвычайно важным классом природных соединений. В биологии и медицине значение углеводов заключается в доминирующей роли, которая отводится им в живых организмах, и в сложности их функций. Углеводы участвуют в большинстве биохимических процессов в виде высокомолекулярных частиц, хотя во многих биологических жидкостях содержатся моно- и олигосахариды (Comprensive Organic Chemistry/Edited by E. Haslam.V. 5. Biological Compounds. Pergamon Press, 19). Моно-, олиго- и полисахариды, входящие в состав препарата, не являются чужеродными для организма млекопитающих, включая человека, и играют важную роль в процессе клеточного узнавания. 5 Йод, входящий в состав препарата, как в молекулярном виде, так и в виде солей (иодида калия или иодида натрия) в препарате находится в нескольких активных формах за счет реакций комплексообразованияL+I3 [L I3] где L - лиганд (моно-, олиго-, полисахарид и синтетический водорастворимый полимер). Ассоциация комплексных соединений, образующихся по реакциям (1), приводит к гелеобразованию в препарате. Гелеобразующая функция синтетического водорастворимого полимера очень важна. В настоящее время всеобщее признание получила жидкомозаичная модель биологических мембран, предполагающая, что мембрана в физиологических условиях является текучей, а не статичной (Singer S.J. Ann. New York Acad.Sci. - 1972. - 195. -16). Бислои, образующие структуру мембраны и состоящие из фосфолипидов, а также глико- и сульфолипидов, при характеристической температуре претерпевают хорошо выраженный фазовый переход из относительно жесткого гелеобразного состояния в текучее жидкокристаллическое состояние. Вследствие этого компоненты мембраны способны диффундировать в плоскость мембраны. Коэффициент диффузии для белка с молекулярной массой 11010, включенного в мембрану, составляет 31010 см 2/с(Edidian М. Ann. Rev. Biophys. Bioeng. - 1974. 3. - 179). Латеральная диффузия в биологических мембранах является в высокой степени регулируемым процессом. Поперечное перемещение компонентов мембран между внутренней и внешней половинами бислоя происходит во времени, однако наличие других компонентов биологических мембран может резко увеличить эту скорость (до t1/2 5 мин) (Marsh D. Essays Biochem. - 1975. - 11. - 139). Йод, его различные формы, находящиеся в составе препарата, способен взаимодействовать практически со всеми классами веществ, входящих в состав организма млекопитающего,включая человека, равно как и в состав мембраны и самой клетки: белками, углеводами, липидами, аминокислотами, глико- и фосфолипидами, гормонами, ферментами, витаминами и т.д. При этом протекают реакции комплексообразования и галогенирования, однако, последовательность биохимических процессов в живом организме приводит к тому, что после взаимодействия одной из активных форм йода образуется новая активная форма йода, входящая в состав других комплексов, например йодфермент, йод-гормон, йод-биологическая мембрана, йод-белок и т.д. Каждый вновь образующийся комплекс является биологически активным и своим для 6 живого организма млекопитающих, включая человека. За счет механизма узнавания и специфического химического взаимодействия йод, входящий в состав лечебного препарата, а также комплексы йода, образующиеся в организме, галогенируют (иодируют) ДНК- и РНК-содержащие вирусы, находящиеся как внутри, так и вне клетки. Галогенирование протекает, в первую очередь, посредством замещения атома водорода в пептидной связи молекулы вируса В результате галогенирования образуются новые вещества, не обладающие свойствами исходного вируса. На этом основано специфическое вирулицидное действие лечебного препарата. Последовательностью протекающих биохимических реакций при введении препарата в организм млекопитающего, включая человека,объясняется иммуномодулирующее, иммуностимулирующее действие лечебного препарата. Хлорид лития, введенный в состав препарата, выполняет необычную для галогенидов щелочных металлов роль. Он улучшает проводимость в клеточных мембранах, способствует улучшению латеральной диффузии в бислое клеточных мембран за счет малого размера катиона лития и его более прочной координации по донорным атомам моно-, олиго- и полисахаридов. Предлагаемый лечебный препарат вирулицидного действия, в частности на ДНК-и РНКсодержащие вирусы, - это водный раствор темно-синего цвета молекулярных и ионных комплексов йода с ассоциатами синтетических водорастворимых гелеобразующих полимеров и природных моно-, олиго- и полисахаридов. Температура плавления лечебного препарата равна 1,51 С, плотность 1,048 г/см 3, массовая доля сухих веществ не менее 25%. Лечебный препарат вирулицидного действия имеет значение рН 6-7. Все его компоненты растворены в изотоническом растворе хлорида натрия. Лечебный препарат вирулицидного действия мало токсичен. ЛД 100 равна 75 г/кг живой массы (для белых мышей) при пероральном введении. Лечебный препарат вирулицидного действия обладает широким спектром действия. Он эффективен при инфекциях, вызываемых вирусами полиомиелита, ящура, энцефаломиокардита, гриппа, кори (РНК-содержащие вирусы); 7 вызываемых вирусами герпеса, оспы овец, эктимы и др. (ДНК-содержащие вирусы). Препарат не токсичен в отношении клеточных культур в разведениях водой в соотношениях от 1:20 до 1:100. Антивирусное действие препарата проявляется на всех уровнях при одновременном,предварительном и последующем его введении по отношению к вирусам. Препарат является эффективным средством для химиотерапии вирусных инфекций. Препарат обладает способностью стимулировать антителообразование в культурах лимфоцитов. Лечебный препарат вирулицидного действия применяют для млекопитающих, включая человека, внутривенно, внутримышечно, внутрибрюшинно и подкожно. Возможно также применение пероральное и др. Способ получения заявляемого лечебного препарата основан на реакциях комплексообразования йода с полифункциональными низко- и высокомолекулярными лигандами. Сама методика получения антивирусного лечебного препарата заключается в следующем. В 100 мл воды растворяют 9 г иодида калия,добавляют 6 г йода кристаллического и раствор перемешивают до полного растворения йода. Отдельно растворяют в 100 мл воды 2 г поливинилового спирта. Отдельно растворяют в 200 мл воды 30 г смеси моно-, олиго- и полисахаридов. Полученные растворы смешивают в следующей последовательности: к раствору поливинилового спирта добавляют раствор смеси моно-, олиго- и полисахаридов, а после этого - раствор йода и иодида калия. Затем добавляют дистиллированной воды до 1 л, предварительно добавив 9 г хлорида натрия и 2 г хлорида лития. По вышеописанной методике в той же последовательности операций готовят растворы лечебного препарата с учетом концентраций компонентов, заявленных в формуле изобретения. Антивирусная активность заявляемого препарата изучалась в отношении вируса гриппа А, штамма A/Aichi 2/68 (H3N2) - представителя ортомиксовирусов, вируса простого герпеса человека второго серотипа (семейство герпесвирусов), вируса энцефаломиокардита (семейство пикорнавирусов), вакцинного аттенуированного полиовируса III типа, штаммa Сэбин, в производственных условиях на ящуре овец. Токсичность лечебного препарата вирулицидного действия изучалась на клеточной культуре, у мышей и на куриных эмбрионах и также по отношению к лимфоцитам. Для усиления и накопления вирусов, для изучения антивирусной активности использованы перевиваемая линия аденокарциномы гортани человека Нер-2 и первичная культура фибропластов КЭ - ФЭК. Клетки культивировали в(Нер-2) и в среде 199 с сывороткой (ФЭК). Влияние предлагаемого авторами препарата на индукцию гуморального и клеточного иммунного ответа лимфоцитов человека в культуре изучали по методике, описанной в журнале Нейрохимия. - 1998. - Т. 15, вып. 1. - С. 45-50. При исследовании антивирусной активности использовали стандартные методы: титрование вируса на клеточных культурах по цитопатическому эффекту; определение титров по методам Кербера; титрование вирусов на мышах по методу Рида и Менча; титрование вирусов на куриных эмбрионах; в реакции гемаглютации. Лечебный препарат вирулицидного действия использовался в виде водных растворов в разведениях от 1:5 до 1:100, приготовляемых extempore. Официнальные антивирусные препараты ремантадин и ацикловир - использовались в качестве положительных контролей на мышах и куриных эмбрионах. Статистическую обработку результатов физико-химических экспериментов и биологических испытаний проводили по методикам,описанным в ГФ XI СССР, с. 199-251. Расчет дозы заявляемого препарата при испытаниях на мышах, куриных эмбрионах,овцах и человеке проводили по формуле где n - количество инфекционных единиц, отнесенных к 1 см 3 крови млекопитающих;- число молекул фармацевтического средства, необходимого для поражения одной инфекционной единицы;k - доля воды в крови млекопитающего (у человека равная 0,72); М - молекулярная масса действующего начала фармацевтического средства; Р - масса тела млекопитающего, кг. После подстановки в уравнение численных значений получаем:D=0,18710-4MP, г. Для подтверждения заявленных в формуле соотношений компонентов приведены используемые при проведении испытаний составы, г/л:I. Иод кристаллический Калия (натрия) иодид Лития хлорид Природные моно-, олигои полисахариды Вода 9 Калия (натрия) иодид 12 Лития хлорид 2 Водорастворимый синтетический полимер 3 Природные моно-, олигои полисахариды 100 Вода ОстальноеIII. Йод кристаллический 25 Калия (натрия) иодид 38 Лития хлорид 20 Водорастворимый синтетический полимер 6 Природные моно-, олигои полисахариды 400 Вода Остальное В качестве природных полисахаридов используются все природные полисахариды,включая антибиотики, относящиеся к этому классу веществ, и их производные, образующие с йодом водорастворимые комплексные соединения в заявленных интервалах концентраций йода и других компонентов. В качестве синтетических водорастворимых полимеров, обладающих гелеобразующими свойствами, используются полимеры, разрешенные к применению Международной Фармакопеей и Фармакопеей СССР XI изд., образующие водорастворимые комплексы с йодом в заявленных интервалах концентраций йода и других компонентов. Профилактическое и терапевтическое действие заявляемого лечебного препарата изучалось на белых мышах массой 12-14 г, у которых после титрования вирусом и определения ЛД 50 экспериментальная гриппозная инфекция воспроизводилась путем интраназального введения вирусной суспензии, содержащей 100 ЛД 50 в объеме 0,05 мл. Титр вируса гриппа для мышей,определенный по методам Рида и Менча, составлял 102,5/0,05 мл. В табл. 1-3 представлены данные профилактического действия заявляемого препарата в различных разведениях при внутрибрюшинном введении за 2 ч до заражения вирусом гриппа. В качестве положительного контроля мышам вводили один из наиболее эффективных химиопрепаратов против вируса гриппа типа А ремантадин. Как следует из данных табл. 1-3, заявляемый препарат в разведениях 1:10 и 1:20 статистически достоверно защищает животных от гриппозной инфекции при введении за 2 ч до заражения. Низкая исходная концентрация йода в препарате по примеру 1 (табл. 2), естественно,не дает возможности получить положительного эффекта при дальнейшем разведении препарата. В табл. 4 представлены данные по изучению терапевтического действия препарата на гриппозную инфекцию у мышей. Дозы препарата, оказавшего антивирусный эффект при профилактическом введении, вводились мышам 10 внутрибрюшинно спустя 2 ч после инфицирования вирусом гриппа. Анализ данных табл. 4 свидетельствует о достоверном снижении летальности при введении исходного препарата и препарата в разведении 1:10. В табл. 5 представлены данные по изучению способности заявляемого препарата в разведениях 1:20 и 1:40 нейтрализовать 100 ТЦД 50 вируса энцефаломиокардита при введении за 1 ч до и после заражения им. О способности препарата нейтрализовать действие вируса судили по степени цитопатического эффекта в опытных и контрольных пробирках с монослоем клеток Нер-2, культуральная жидкость из которых была оттитрована. Как следует из данных табл. 5, даже при применении препарата в разведении 1:40, вводимого после заражения вирусом в дозе 100 ТЦД 50, разница между опытом и контролем составляла 3,5-4,0 log, что свидетельствует о значительном подавлении вируса. Антивирусное действие заявляемого препарата на репродукцию вируса простого герпеса(ВПГ) изучалось на развивающихся куриных эмбрионах, на хорионаллантоисной оболочке которых репродукция ВПГ проявляется в виде бляшек пролиферации. Результаты опытов, представленные в табл. 6, указывают на ингибицию репродукции вируса под воздействием препарата в разведении 1:10. Разница между титрами вируса в опыте и контроле превышает 2 log, что свидетельствует о подавлении титров вирусов в опытах 1 и 2 на 60 и 65% соответственно. Данные о влиянии заявляемого препарата на индукцию гуморального иммунного ответа тонзиллярных лимфоцитов человека на Iersinia enterocolitica и Staphylococcus aureus представлены в табл. 7. Как следует из данных табл. 7, заявляемый препарат обладает способностью стимулировать антителообразование в культуре лимфоцитов в концентрациях от 1:10 до 1:100 к Iersinia enterocolitica и Staphylococcus aureus. Заявляемый препарат стимулирует также бактерицидную активность лимфоцитов человека к Iersinia enterocolitica и Staphylococcus aureus. Изучено действие заявляемого лечебного препарата при ящуре овец в производственных условиях. Полученные данные представлены в табл. 8, 9. Данные табл. 8, 9 подтверждают вышепредставленные о профилактическом действии препарата, поскольку после двух инъекций препарата больше не выявлялись заболевшие животные с клиникой ящура. Данные табл. 8, 9 свидетельствуют также о надежном терапевтическом действии лечебного препарата вирулицидного действия, так как после двух инъекций препарата падеж животных прекратился, а оставшиеся больные животные выздоровели за 7-10 дней. Общий падеж животных в опытной группе составил 1,83%, в то вре 11 Представленные выше примеры являются лишь иллюстрацией сущности изобретения, без ограничения ими. Таким образом, полученные в опытах invitro и in vivo данные об антивирусном действии заявляемого препарата, отсутствие токсичности,способность поражать вирус вне клетки и внутри нее, наличие как профилактического, так и терапевтического эффекта, широкий спектр действия позволяют отнести препарат к эффективным средствам для химиотерапии вирусных инфекций. Таблица 1 Влияние профилактического введения лечебного препарата вирулицидного действия на исход экспериментальной гриппозной инфекции у мышей Состав препарата по примеру 1 Условия Доза препа- Число молекул Соотношение 1 ИЕ ВГ Kоличество Абсолютное % летальопыта ратa, мг/кг йода в 1 л к числу молекул йода мышей число павших ности П 1(1/10)+ВГ 2 12,32 100 12/100 12 51019 1:51010 П(1/20)+ВГ 6,16 100 28/100 28 1:2,51010 2,51019 П(1/40)+ВГ 3,08 100 50/100 50 1,251019 1:1,251010 Ремантадин+ВГ 1,66 100 16/100 16 1:7,9109 7,91018 ВГ 100 70/100 70 Примечания: 1. П - Препарат (лечебный препарат вирулицидного действия); 2. ВГ - вирус гриппа; 3. В пересчете на йод; 4. ИЕ - инфекционная единица. Таблица 2 Влияние профилактического введения лечебного препарата вирулицидного действия на исход экспериментальной гриппозной инфекции у мышей Состав препарата по примеру 1 Условия Доза препа- Число молекул Соотношение 1 ИЕ ВГ Kоличество Абсолютное % летальопыта ратa, мг/кг йода в 1 л к числу молекул йода мышей число павших ности П 1+ВГ 2 3,69 100 38/100 38 1,501019 1:1,501010 18 9 П(1/10)+ВГ 0,369 100 60/100 60 1:1,5010 1,5010 18 9 Ремантадин 1,66 100 16/100 16 7,9010 1:7,9010 ВГ 100 70/100 70 Примечания: 1. П - Препарат (лечебный препарат вирулицидного действия); 2. ВГ - вирус гриппа; 3. В пересчете на йод; 4. ИЕ - инфекционная единица. Таблица 3 Влияние профилактического введения лечебного препарата вирулицидного действия на исход экспериментальной гриппозной инфекции у мышей Состав препарата по примеру 3 Условия Доза препа- Число молекул Соотношение 1 ИЕ ВГ Kоличество Абсолютное % летальопыта ратa, мг/кг йода в 1 л к числу молекул йода мышей число павших ности П 1(1/31)+ВГ 2 12,32 100 11/100 11 1:51010 51019 П(1/62)+ВГ 6,16 100 27/100 27 2,51019 1:2,51010 П(1/124)+ВГ 3,08 100 51/100 51 1:1,251010 1,251019 Ремантадин+ВГ 1,66 100 16/100 16 7,91018 1:7,9109 ВГ 100 70/100 70 Примечания: 1. П - Препарат (лечебный препарат вирулицидного действия); 2. ВГ - вирус гриппа; 3. В пересчете на иод; 4. ИЕ - инфекционная единица. мя как в контрольной группе, несмотря на карантинные мероприятия, составил 14%. В табл. 10 представлены данные по терапевтическому действию заявляемого препарата при заболеваниях человека, вызванных как ДНК-, так и РНК-содержащими вирусами. Препарат применяли на добровольцах. Как следует из данных табл. 10, препарат эффективен во всех случаях, особенно при быстропротекающих инфекциях (грипп, диарея,ОРЗ, ящур). Ни в одном случае не было отмечено каких-либо осложнений. Таблица 4 Терапевтический эффект лечебного препарата вирулицидного действия в отношении гриппозной инфекции у мышей Состав препарата по примеру 2 Условия Доза препа- Число молекул Соотношение 1 ИЕ ВГ Kоличество Абсолютное % летальопыта ратa, мг/кг йода в 1 л к числу молекул йода мышей число павших ностиBГ 1+П 2 123,2 100 3/100 3 1:51011 51020 ВГ+П(1/10) 12,32 100 21/100 21 1:51010 51019 ВГ+П(1/20) 6,16 100 42/100 42 1:2,51010 2,51019 18 9 ВГ+Ремантадин 1,66 100 20/100 20 7,910 1:7,910 ВГ 100 60/100 60 Примечания: 1. ВГ - вирус гриппа; 2. П - Препарат (лечебный препарат вирулицидного действия); 3. В пересчете на йод; 4. ИЕ - инфекционная единица. Таблица 5 Влияние предварительного и последующего введения лечебного препарата вирулицидного действия на репродукцию вируса энцефаломиокардита (ВЭМ) в клетках культуры Нер-2 Состав препарата по примеру 2 Выраженность ЦПД Результаты титрования проб Степень ингибиции в log Условия опыта 1 опыт 2 опыт 1 опыт 2 опыт 1 опыт 2 опыт П(1/20)+ВЭМ 0/4 1/4 1,0 2,0 5,5 4,5 П(1/40)+ВЭМ 0/4 1/4 0,75 2,25 5,75 4,25 ВЭМ+П(1/20) 1/4 1/4 1,5 1,75 5,0 4,75 ВЭМ+П(1/40) 2/4 3/4 2,5 3,0 4,0 3,5 Контроль ВЭМ 4/4 4/4 6,5 6,5 Таблица 6 Результаты изучения ингибирующего действия лечебного препарата вирулицидного действия на репродукцию вируса простого герпеса (ВПГ) в куриных эмбрионах (КЭ) Число инфицированных КЭ Титры ВПГ в log Разведение Koличество контроль опыт контроль опыт вируса объектов КЭ 1 2 1 2 1 2 1 2 10-1 100 100/100 75/100 50/100 50/100 3,75 3,5 1,5 1,25 10-2 100 100/100 75/100 50/100 25/100 10-3 100 75/100 50/100 0/100 0/100 10-4 100 50/100 50/100 0/100 0/100 10-5 100 0/100 25/100 0/100 0/100 Таблица 7 Влияние различных концентраций препарата на формированиеaнтителообразующих клеток (АОК) в культуре на антигены Состав препарата по примеру 2 Условия эксперимента Количество антигенспецифических АОК в (в пересчете на 1106 клеток) Таблица 8 Результаты действия лечебного препарата вирулицидного действия при ящуре овец Состав препарата по примеру 2. 1-е введение препарата Количество забоДоза препарата - 0,1 мл/кг живой массы Количество левших животных внутримышечно овец,количество павших животных количество заболевших животных голов голов% Опыт 1200 52 4,3 20 1,7 5 0,42 Контроль 500 25 5,0 15 3,0 20 4,1 Таблица 9 Результаты действия лечебного препарата вирулицидного действия при ящуре овец Состав препарата по примеру 2. 2-е сведение препарата через 24 ч Количество забоДоза препарата - 0,3 мл/кг живой массы Количество левших животных внутримышечно овец,количество павших животных количество заболевших животных голов голов% Опыт 1200 52 4,3 2 0,17 Контроль 500 25 5,0 20 4,3 25 5,4 После этого в контрольной группе была сделана вакцинация, общий падеж составил 14%. Таблица 10 Результаты терапевтического действия лечебного препарата вирулицидного действия при заболеваниях вирусной природы Способ применениявнутримышечно. Состав препарата по примеру 2 Семейство,Количество Суточная доза, Cрок лечения, Количество Заболевание род вируса добровольцев мл/кг сутки доз ДНК-содержащие вирусыAphtovirus ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Лечебный препарат вирулицидного действия, в частности на ДНК- и PНK-содержащие вирусы млекопитающих, включая человека, содержащий йод, иодид калия или натрия, синтетический водорастворимый полимер, природные полимеры, например полисахариды, и моно- и олигосахариды и воду, отличающийся тем,что он дополнительно содержит хлорид лития,при следующем содержании компонентов, г/л: Йод 0,8-25 Иодид калия или натрия 1,2-38 Хлорид лития 0,1-20 Синтетический водорастворимый полимер 0-6 Природные полимеры (полисахариды) и моно- и олигосахариды 8-400 Остальное 2. Лечебный препарат по п.1, отличающийся тем, что он обладает иммуномодулирующим и иммуностимулирующим действием. Вода