Способ получения обогащенного экстракта из листьев растения vitis vinifera l.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОБОГАЩЕННОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ЛИСТЬЕВ РАСТЕНИЯ В изобретении описан способ получения экстракта из листьев растения Vitis vinifera L.,заключающийся в том, что а) подготавливают растительное сырье из листьев растения Vitis viniferaL., б) растительное сырье подвергают экстракционной обработке экстрагентом, выбранным из воды и смесей воды со спиртом, с получением неочищенного экстракта, в) неочищенный экстракт отделяют от подвергнутого экстракционной обработке растительного сырья, г) по меньшей мере, частично удаляют экстрагент с получением сгущенного экстракта, д) сгущенный экстракт вновь растворяют в воде, е) отделяют нерастворимые компоненты, ж) избирательно повышают концентрацию вторичных растительных веществ путем двухфазной экстракции или фильтрования через мембранный фильтр. В изобретении описаны также получаемый этим способом экстракт,содержащие его лекарственные препараты, а также их применение.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: БРИНГЕР ИНГЕЛЬХАЙМ ИНТЕРНАЦИОНАЛЬ ГМБХ (DE) Настоящее изобретение относится к экстрактам из листьев растения Vitis vinifera L., к их получению и применению. Венозной слабостью (слабостью венозных стенок) в обиходной речи называют патологию, при которой образуются скопления воды в мягких тканях нижних конечностей и которая проявляется в виде различного рода расстройств и недомоганий, таких как тяжесть в ногах и быстрая утомляемость ног. Так называемое застаивание воды в ногах означает приводящее к появлению отека скопление воды в мягких тканях и предполагает возможность выхода воды из кровеносных сосудов. В соответствии с этим следует считать, что проницаемость стенок сосудов чрезмерно повышена. Венозную слабость можно также рассматривать как раннюю стадию хронической венозной недостаточности (ХВН). В основе возникновения ХВН, которую называют также синдромом хронического венозного застоя, лежит нарушение микроциркуляции по сосудам вследствие затруднения венозного оттока. Риск возникновения и развития хронической венозной недостаточности увеличивается с возрастом, наличием ожирения, наличием флебита в анамнезе, наличием тромбоза глубоких вен и наличием тяжелой травмы нижних конечностей. У женщин ХВН встречается в два раза чаще, чем у мужчин. Важную роль в возникновении хронической венозной недостаточности играет наличие патологического повышенного кровяного давления в поверхностных венах. В норме оно составляет 20-30 мм рт. ст.,однако вследствие венозного тромбоза, первичной или вторичной патологии венозных клапанов или ослабления мышечного насоса возрастает до 60-90 мм рт. ст. Столь высокое давление является причиной ответственных за последующие осложнения анатомических, физиологических и гистологических изменений сосудов. В физиологических условиях капиллярное русло защищено от значительных изменений давления, поскольку предкапиллярные артериолы способны рефлекторно сжиматься. Однако у пациентов с хронически повышенным венозным давлением такой рефлекс предположительно утрачен, т.е. при изменениях положения тела изменения давления передаются далее непосредственно на капиллярное русло. При длительно сохраняющемся повышенном венозном давлении происходят изменения, затрагивающие стенки капилляров. К таковым изменениям относятся расширение и удлинение капиллярного русла, увеличение поверхности эндотелия, повышенное накопление коллагена типа IV в базальной мембране и перикапиллярное отложение фибрина. Повышенное венозное давление в сочетании с анормальными капиллярами с повышенной проницаемостью их стенок приводит к выходу воды, крупных белков и эритроцитов в интерстиций. Возможность растворения скапливающегося фибрина также представляется не столь простой. Одновременно происходит снижение газообмена, т.е. наступает гипоксия кожи. Вследствие этого помимо прочего происходит активизация лейкоцитов. Аналогичный процесс известен по острофазовой реакции при воспалениях. При этом проницаемость стенок сосудов повышается на несколько минут под действием медиаторов сосудистой проницаемости, таких как гистамин, простагландины (например, PGE-2), кинины и серотонин. Типичными инициаторами подобной острофазовой реакции являются цитокины, такие как интерлейкин-1 (IL-1), интерлейкин-6 (IL-6), фактор-альфа некроза опухоли (TNF-), фактор-бета роста опухоли (TGF-) или интерферон-гамма, которые выделяются помимо прочего эндотелиальными клетками, фибробластами, макрофагами, гранулоцитами и лимфоцитами. Такие иммунокомпетентные клетки начинают выделять цитокины, например, после повреждения или гибели соседних клеток. По кровяному руслу цитокины попадают в печень, где они совместно с кортизолом побуждают этот орган к продуцированию примерно 30 различных белков острой фазы (БОФ). БОФ способствуют протеканию процессов заживления ран и противодействуют повреждению ткани. Последствия острофазовой реакции носят не только локальный, но и системный характер. Локальные эффекты должны ограничивать возможные инфекции и элиминировать ксенобиотики (например, синтетические красители, пестициды и хлорированные растворители). Мертвые или поврежденные клетки устраняются в результате фагоцитоза и инициируют восстановительные процессы. Системные же последствия острофазовой реакции проявляются в защитных реакциях, которые должны обеспечивать выживание всего организма, например, в защитных реакциях против эндотоксинов. Согласно директивам Немецкого общества флебологии (директива Ассоциации научных медицинских обществ (AWMF)037/009) в качестве вспомогательных медикаментозных средств при лечении хронической венозной недостаточности используют помимо прочего следующие средства: ацетилсалициловую кислоту, диуретики, фибринолитические средства (дефибротид, станазолол, сулодексид), стимуляторы фибринолиза, илопрост, пентоксифиллин, простагландин Е 1, сапонины (экстракты из центеллы, конского каштана, иглицы), бензарон, кальция добезилат, нафтазон, трибенозид, экстракт гинкго билоба, а также многочисленные вещества, принадлежащие к обширной группе флавоноидов [HavsteenB.H., "The biochemistry and medical significance of the flavonoids", Pharmacol. Ther., 96 (2-3), 2002, c. 67202]. По результатам исследований удалось подтвердить однозначно положительное влияние флавоноидов на развитие отеков [Martinez M.J., Bonfill X., Moreno R.M., Vargas E., Capella D., "Phlebotonics for venous insufficiency", Cochrane Database of Systematic Reviews, 2005, вып. 3, арт.CD003229. DOI: 10.1002/14651858.CD003229.pub2]. По наблюдениям в тех регионах, где широко развито виноградарство, венозная слабость и сопутствующие ей осложнения встречаются значительно реже. Очевидное объяснение этому заключается в том,что в растении вида Vitis vinifera L. (винограда культурного), по-видимому, содержатся соединения, которые обладают антагонистическими свойствами в отношении подобного заболевания и поэтому противодействуют его возникновению и развитию. Традиционно виноградные листья не только употребляли в пищу в качестве зелени, но и использовали в виде отваров и настоев в медицинских целях при нарушениях в период менопаузы или для лечения геморроя. В фармакопее Франции к применению в качестве венотонизирующего средства рекомендован экстракт из листьев красного винограда. На протяжении нескольких лет в продажу под названием Antistax поступают препараты с водным экстрактом из листьев красного винограда, которые успешно применяются при хронической венозной недостаточности (ХВН)[Kiesewetter H., Koscielny J., Kalus U., Vix J.M., Peil H., Petrini О. и др., "Efficacy of orally administered extract of red vine leaf AS 195 (folia vitis viniferae) in chronic venous insufficiency (stages I-II). A randomized,double-blind, placebo-controlled trial", Arzneimittel-Forschung, 50(2), 2000, cc. 109-117]. Содержащийся в таких препаратах экстракт содержит флавоноиды в количестве примерно 5%. В качестве представителей другой группы фенольных соединений в экстракте содержатся антоцианы в количестве примерно 0,1%. С учетом хорошей переносимости известных в настоящее время экстрактов из виноградных листьев цель настоящего изобретения состояла в том, чтобы предложить экстракт нового типа, который в равной степени был бы пригоден для применения во всем спектре воспалительных заболеваний. Локальное противовоспалительное действие может при определенных условиях оказаться полезным на протяжении всего желудочно-кишечного тракта при лечении или профилактике воспалительных заболеваний. К воспалительным заболеваниям верхнего отдела пищеварительного тракта относятся гингивит, пародонтит,стоматит, эзофагит и гастрит. Наиболее известными представителями воспалительных заболеваний кишечника являются лимфоцитарный колит, язвенный колит и болезнь Крона. Под геморроем в обиходной речи понимают варикозноподобное или же узлообразное вздутие, соответственно расширение пещеристого тела прямой кишки (Corpus cavernosum recti), которое расположено между прямой кишкой и сфинктером заднепроходного отверстия. Такое пещеристое тело называют также геморроидальным сплетением. Оно состоит из артериального и венозного сплетения, которое совместно со сфинктером обеспечивает возможность точного смыкания заднепроходного отверстия. Говоря о геморрое, под ним, однако, по большей части подразумевают геморроидальную болезнь и причиняемые ею страдания. К типичным для нее симптомам при этом относятся легкие кровотечения, чувство давления, зуд, кожная сыпь и проявляющиеся на далеко зашедшей стадии проблемы при контролируемом отходе образовавшихся в кишечнике газов и при дефекации. Причины могут заключаться помимо прочего в варикозноподобных расширениях расположенных вблизи заднего прохода кровеносных сосудов. Аналогичное заболевание, называемое перианальным тромбозом (или "ложным" геморроем), возникает в результате образования свертка крови (тромба) в кожных венах вокруг заднего прохода и называется также анальным тромбозом. Перианальные тромбозы часто возникают по причине длительного сидения, сидения на холодных поверхностях, сильного или длительного натуживания при дефекации (например, при твердом стуле), а также при беременности и родах. Перианальные тромбозы могут также возникать вследствие сильного кашля, вследствие физической нагрузки, вследствие недостатка жидкости из-за ее питья в слишком малых количествах и даже вследствие чиханья. При этом кровеносные сосуды также могут увеличиваться в размерах, превышающих обычные размеры. При геморроидальной болезни,равно как и при перианальном тромбозе наряду с оперативными мероприятиями распространено также применение суппозиториев с болеутоляющими или противовоспалительными действующими веществами (директива по лечению геморроидальной болезни "www.uni-duesseldorf.de/AWMF/ll/081-007p.htm" и директива по лечению перианального тромбоза "www.derma.de/585.0.html"). Уровень техники В отношении других частей растения Vitis vinifera L., например виноградных косточек, уже описаны некоторые методы повышения концентрации тех или иных веществ. В отличие от таких методов, как микроволновая экстракция (CN 1102589 С), которые, однако, обеспечивают лишь малый коэффициент обогащения при увеличенном выходе продукта, методы экстракции сверхкритическими жидкостями (CN 1107110 С) пригодны только для липофильных структур. Согласно CN 1454896 для повышения концентрации олигомерных проантоцианидов используют кислотную первичную экстракцию в сочетании с жидкостно-жидкостной экстракцией. В ЕР 348781 описан способ повышения концентрации олигомерных соединений из виноградных косточек путем фильтрования через мембранный фильтр, тогда как в WO 2005/036988 и ЕР 1909750 заявлен хроматографический способ избирательного повышения концентрации полифенолов и снижения концентрации мономеров. В GB 934554 описан способ теплой водно-спиртовой экстракционной обработки (50-80% EtOH) листьев красного винограда с последующим подкислением для придания красной окраски. Для удаления хлорофилла и восков предлагается жидкостно-жидкостная экстракция бензолом или четыреххлористым углеродом, а в качестве альтернативы - переосаждение в чистой воде. Путем высаливания можно ускорить осаждение дубильных веществ. Далее следует стадия очистки путем жидкостно-жидкостной экстракции бутанолом или пентанолом. Из полученного в результате спиртового насыщенного экстрагента при необходимости путем обработки диэтиловым эфиром, керосином или бензолом осаждают процианидиновую фракцию и затем сушат в щадящих условиях (в вакууме или в башне распылительной сушилки). Подобный способ является исключительно сложным и затратоемким в осуществлении, а состав получаемого им продукта характеризуется значительными отклонениями от состава эталонного экстракта. Поэтому продолжаются поиски альтернативного способа, который позволял бы получать экстракты с меньшими затратами. В основу настоящего изобретения была положена задача разработать альтернативный способ получения эффективных экстрактов из виноградных листьев. Указанная задача решается с помощью способа получения экстракта из листьев растения Vitis vinifera L., заключающегося в том, что: а) подготавливают растительное сырье из листьев растения Vitis vinifera L.; б) растительное сырье подвергают экстракционной обработке экстрагентом, выбранным из воды и смесей воды со спиртом, с получением неочищенного экстракта; в) неочищенный экстракт отделяют от подвергнутого экстракционной обработке растительного сырья; г) по меньшей мере, частично удаляют экстрагент с получением сгущенного экстракта; д) сгущенный экстракт вновь растворяют в воде; е) отделяют нерастворимые компоненты; ж) избирательно повышают концентрацию вторичных растительных веществ путем:II) фильтрования через мембранный фильтр. Согласно изобретению используют листья растения Vitis vinifera L. Их в принципе можно использовать в свежем или высушенном состоянии. Листья предпочтительно измельчать перед их экстракционной обработкой. В одном из частных вариантов осуществления настоящего изобретения подготовка растительного сырья заключается в сборе листьев растения Vitis vinifera L. в момент, к которому содержание в них флавоноидов достигло оптимума, в сушке и измельчении листьев, а также при необходимости в резке листьев на кусочки. Экстракционную обработку растительного сырья проводят водой или смесью воды со спиртом для получения таким путем неочищенного экстракта. Экстрагент предпочтительно при этом использовать в количестве от 5 до 30 кг на 1 кг высушенного растительного сырья. В качестве экстрагента предпочтительно использовать воду или смесь воды с этанолом с содержанием последнего от 5 до 95% (в объемном соотношении). Особенно предпочтительно применение экстрагента, который наряду с водой содержит этанол в количестве от 25 до 50% (в объемном соотношении). Экстракционную обработку растительного сырья предпочтительно проводить при температуре в пределах от 40 до 80C, а наиболее целесообразно проводить ее, как было установлено, при температуре,которая на 15-25C ниже температуры кипения применяемого экстрагента. Преобладающее при экстракционной обработке растительного сырья давление может лежать в широких пределах, не являясь критичной величиной. Обычно, однако, экстракционную обработку растительного сырья проводят при давлении в пределах от 900 до 1500 мбар, преимущественно от 950 до 1100 мбар, прежде всего при окружающем давлении, т.е. при давлении около 1013 мбар. Неочищенный экстракт затем отделяют от подвергнутого экстракционной обработке растительного сырья. Такое отделение обычно проводят путем фильтрации или иными известными специалисту методами. Для применения в подобных целях пригодна, например, фильтрация через сито с размером отверстий 4 мм и через последующие полиамидные рукавные фильтры с размером ячеек 250 мкм. Другие пригодные для применения в этих целях методы разделения известны специалисту. После этого из отделенного неочищенного экстракта, по меньшей мере, частично удаляют экстрагент с получением сгущенного экстракта. Под частичным удалением экстрагента согласно настоящему изобретению подразумевается удаление экстрагента в количестве от 30 до 99% (в объемном соотношении) в пересчете на используемый объем экстрагента, предпочтительно в количестве от 75 от 98% (в объемном соотношении), прежде всего в основном полное удаление экстрагента, т.е. его удаление в количестве по меньшей мере 95% (в объемном соотношении). Обычно экстрагент удаляют путем нагрева и/или под пониженным давлением. Пригодные для применения в этих целях методы и оборудование известны специалисту. Полученный таким путем сгущенный экстракт вновь растворяют в воде и отделяют нерастворимые компоненты. Обычно воду для повторного растворения в ней сгущенного экстракта используют в количестве,составляющем от 1 до 10 ч. в пересчете на 1 ч. полученного неочищенного экстракта. Нерастворимые компоненты отделяют обычными в данной области методами, такими как фильтрация и/или центрифугирование. Далее следует стадия избирательного повышения концентрации вторичных растительных веществ либо путем двухфазной экстракции, либо путем фильтрования через мембранный фильтр. Двухфазную экстракцию можно проводить в виде твердофазной экстракции, при этом для применения в качестве твердой фазы хорошо зарекомендовала себя адсорбирующая смола. К пригодным для применения в этих целях адсорбирующим смолам относятся, например, таковые из группы неионогенных гидрофобных сополимеров дивинилбензола, алифатических сложных полиэфиров и формофенольных полимеров, выпускаемых под наименованиями Amberlite, Levatite, Miontech и Diaion. Для применения при осуществлении предлагаемого в изобретении способа пригодны адсорбирующие смолы со средним размером внутренних пор предпочтительно в пределах от 300 до 700 , преимущественно от 400 до 500 . Вещества, которые связываются с адсорбентом, вымывают из него и используют в дальнейшем, а не связавшиеся с ним вещества отбрасывают. Обычно экстракцию проводят при температуре в пределах от 10 до 30C. Значение рН применяемого загружаемого раствора обычно устанавливают на величину в пределах от 3 до 6, а предпочтительно устанавливать его на величину в пределах от 4,5 до 5,5, особенно предпочтительно на 5. Двухфазную экстракцию можно далее проводить в виде жидкостно-жидкостной экстракции, при этом в предпочтительном варианте вторая фаза представляет собой не смешивающуюся с водой жидкость и выбрана из группы спиртов, кетонов, алканов и сложных эфиров. В одном из частных вариантов вторая фаза представляет собой не смешивающийся с водой спирт, предпочтительно спирт с С 4-С 5, особенно предпочтительно н-бутанол. При этом ту фракцию, которая переходит во вторую фазу, используют в дальнейшем, а водную фазу отбрасывают. Обычно экстракцию проводят при содержании сухого вещества в исходном растворе в пределах от 3 до 30%, предпочтительно от 10 до 20%, особенно предпочтительно 15%. В принципе для избирательного повышения концентрации можно также использовать фильтрование через мембранный фильтр, для применения при котором хорошо зарекомендовали себя мембраны с отсечкой по молекулярной массе (пределом крупности проходящих через них макромолекул) в пределах от 30 до 2000 (кДа). При этом пермеат используют в дальнейшем, а концентрат отбрасывают. В одном из частных вариантов осуществления настоящего изобретения экстракт по завершении избирательного повышения концентрации с получением сухого экстракта из листьев растения Vitis viniferaL. подвергают сушке. Сушку при этом проводят обычными в данной области методами, такими, например, как распылительная сушка в ленточной сушилке. Однако концентрированный экстракт можно также использовать в дальнейшем и без его предшествующей сушки. Описанным выше предлагаемым в изобретении способом получают экстракты из листьев растенияVitis vinifera L. с соотношением между натуральным растительным сырьем и экстрактом (НРС/Э) в пределах от 12:1 до 40:1. Общее содержание флавоноидов в полученных предлагаемым в изобретении способом и предлагаемых в изобретении экстрактах обычно составляет по меньшей мере 15 мас.%, преимущественно по меньшей мере 20 мас.%, а содержание антоцианов составляет по меньшей мере 0,1 мас.%,преимущественно по меньшей мере 0,2 мас.%, прежде всего по меньшей мере 0,3 мас.%. Благодаря этому достигается усиленное ингибирование цитокинов, повышающих проницаемость сосудистых стенок, в сопоставлении со сравнительным или контрольным экстрактом (согласно уровню техники). В соответствии с этим еще одним объектом настоящего изобретения является экстракт, полученный описанным выше способом. Следующим объектом настоящего изобретения является препарат-экстракт, содержащий предлагаемый в изобретении экстракт, а также по меньшей мере одно физиологически совместимое вспомогательное вещество. Приемлемые физиологически совместимые вспомогательные вещества известны специалисту. Еще одним объектом настоящего изобретения является применение предлагаемого в изобретении экстракта или предлагаемого в изобретении препарата-экстракта для приготовления медикаментов, фармацевтических композиций или пищевых добавок. Подобные средства приготавливают обычными в данной области методами. Еще одним объектом настоящего изобретения является применение предлагаемого в изобретении экстракта или предлагаемого в изобретении препарата-экстракта для лечения или профилактики воспалительных заболеваний кровеносных сосудов или желудочно-кишечного тракта, при нарушении венозной микроциркуляции, при обусловленных ишемией заболеваниях, при геморроидальной болезни или при перианальном тромбозе. Под лечимым согласно изобретению воспалительным заболеванием кровеносных сосудов подразумевается, прежде всего, флебит. Под лечимым согласно изобретению нарушением венозной микроциркуляции подразумевается, прежде всего, хроническая венозная недостаточность(ХВН). Под лечимыми согласно изобретению обусловленными ишемией заболеваниями подразумеваются, прежде всего, заболевания сердца, особенно инфаркт миокарда. Следующим объектом настоящего изобретения является применение предлагаемого в изобретении экстракта или предлагаемого в изобретении препарата-экстракта для лечения или профилактики острых или хронических воспалений желудочно-кишечного тракта, геморроидальной болезни или перианально-4 022250 го тромбоза. При предлагаемом в изобретении применении предлагаемого в изобретении экстракта или предлагаемого в изобретении препарата-экстракта для лечения или профилактики указанных выше заболеваний и нарушений его можно вводить в организм внутрисосудисто, перорально, ректально или чрескожно. При этом предлагаемые в изобретении экстракты или предлагаемые в изобретении препараты-экстракты обладают местным или системным действием. Ниже изобретение более подробно поясняется на не ограничивающих его объем примерах. Используемые методы анализа Химические параметры. Содержание флавоноидов определяют методом жидкостной хроматографии высокого разрешения(ЖХВР-методом), который позволяет выявлять наличие таких флавоноидов, как изокверцитин, кверцитин-3-ОD-глюкуронид и кемферол-3-ОD-глюкозид. Неподвижной фазой при этом служит хроматографическая колонка Superspher RP8 с частицами размером 4 мкм и с размером 1254 мм. Изократическое разделение проводят в жидкостном хроматографе при 25C и при скорости потока 1 мл/мин. Экстрагент состоит на 107 ч. из тетрагидрофурана, на 55 ч. из ацетонитрила и на 810 ч. из фосфорной кислоты (0,003 моль/л). Обнаружение проводят на длине волны 360 нм. Содержание антоцианов определяют отдельным ЖХВР-методом аналогично европейской фармакопее 6.4, монография 2394 "Fresh Bilberry fruit dry extract, refined and standardised". Фармакологическая модель in vitro по ингибированию цитокинов. Человеческие моноциты в течение 24 ч при 37C в атмосфере с 5%-ным содержанием CO2 стимулируют липополисахаридом (10 нг/мл). Экстракты добавляют за 30 мин до добавления липополисахарида с целью проверить, способны ли они влиять на стимуляцию клеток липополисахаридом. Действие экстрактов исследовали при их применении в анализируемых концентрациях от 10 до 300 мкг/мл. По истечении 24 ч надосадочные растворы отбирали, центрифугировали и анализировали на содержание в нихPGE-2, IL-6, IL-1 и TNF-, концентрацию которых определяли при этом, используя наборы для твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA)/иммуноферментного анализа (EIA) (фирмаBiotrend/фирма Immunotools) согласно инструкциям производителя. Пример 1. Водный сравнительный экстракт (уровень техники). 2 кг растительного сырья из листьев растения Vitis vinifera, подготовленного в соответствии с европейской фармакопеей, подвергают в перколяторе при 75C экстракционной обработке 24 л осмотической воды (воды, очищенной обратным осмосом). Элюат фильтруют и при пониженном давлении концентрируют до сгущенного экстракта с содержанием сухого вещества около 50%. Густой экстракт смешивают с 4% диоксида кремния и сушат в вакуумном сушильном шкафу при 50C. Полученный экстракт характеризуется соотношением НРС/Э, равным 5:1, содержанием флавоноидов 5,1% и содержанием антоцианов 0,15%. Пример 2. Предлагаемый в изобретении обогащенный путем адсорбции экстракт (на водной основе). 2 кг растительного сырья из листьев растения Vitis vinifera, подготовленного в соответствии с европейской фармакопеей, подвергают в перколяторе при 75C экстракционной обработке 44 л осмотической воды. Элюат при пониженном давлении концентрируют до сгущенного экстракта с содержанием сухого вещества около 50%. Густой экстракт хранят в холоде в течение 16 ч, после чего вновь разбавляют осмотической водой до содержания сухого вещества 10%. По истечении 24 ч выпавшие в осадок дубильные вещества (таннины) отфильтровывают и затем разбавленный экстракт наносят на адсорбент XAD7HP. Насыщенный адсорбент промывают осмотической водой, после чего компоненты экстракта элюируют этанолом. Этанольную фазу упаривают до содержания сухого вещества более 50%. Полученный густой экстракт в естественном виде сушат в вакуумном сушильном шкафу при 50C. Полученный экстракт характеризуется соотношением НРС/Э, равным 19:1, содержанием флавоноидов 21,1% и содержанием антоцианов 0,77%. В экспериментах с обогащенным путем адсорбции экстрактом из примера 2 удалось выявить увеличение ингибирования цитокинов в сопоставлении со сравнительным экстрактом из примера 1, полученным известным из уровня техники способом. В экспериментах по ингибированию IL-6 необходима в 5 раз меньшая концентрация предлагаемого в изобретении экстракта для достижения такого же противовоспалительного действия. Влияние на PGE-2 выражено в еще большей степени. При использовании экстракта из примера 1 в анализируемой концентрации 300 мкг/мл удалось достичь лишь 11,6%-ного ингибирования. В отличие от этого при применении предлагаемого в изобретении экстракта из примера 2 в 6 раз меньшей концентрации, равной 50 мкг/мл, достигалось даже 32,1%-ное ингибирование. Оба эти значения в 5 раз, соответственно в 18 раз (в 3 раза большее значение в %, умноженное на коэффициент концентрации, равный 6) превышают коэффициент обогащения, равный 3,8 и присущий предлагаемому в изобретении экстракту при его сопоставлении с экстрактом из примера 1. Коэффициент обогащения, равный 3,8, представляет собой частное от деления соотношений НРС/Э у сравниваемых между собой экстрактов. Пример 3. Предлагаемый в изобретении экстракт (с обогащением путем жидкостно-жидкостной экстракции). 2 кг растительного сырья из листьев растения Vitis vinifera, подготовленного в соответствии с европейской фармакопеей, подвергают в перколяторе при 75C экстракционной обработке 44 л осмотической воды. Элюат при пониженном давлении концентрируют до сгущенного экстракта с содержанием сухого вещества около 50%. Густой экстракт хранят в холоде в течение 16 ч, после чего вновь разбавляют осмотической водой до содержания сухого вещества 10%. По истечении 24 ч выпавшую в осадок танниновую фракцию отфильтровывают и затем разбавленный экстракт дважды подвергают экстракционной обработке н-бутанолом в соотношении 3:2. Бутанольную фазу упаривают до содержания сухого вещества более 50%. Полученный густой экстракт в естественном виде сушат в вакуумном сушильном шкафу при 50C. Полученный экстракт характеризуется соотношением НРС/Э, равным 16:1, содержанием флавоноидов 21,7% и содержанием антоцианов 0,43%. Оставшаяся водная фаза характеризуется соотношением НРС/Э, равным 5:1, содержанием флавоноидов менее 0,1% и содержанием антоцианов ниже предела обнаружения. При сравнении обеих фаз, полученных в результате жидкостно-жидкостной обработки, со всей очевидностью следует, что в органической фазе (бутаноле) возможно повышение концентрации противовоспалительных активных начал. В экспериментах с экстрактом из примера 3 А, обогащенным путем экстракционной обработки бутанолом, удалось выявить увеличение ингибирования цитокинов в 15 раз (TNF-), в 42 раза (IL-) и в 91 раз (PGE-2) в сопоставлении с отделенной водной фазой из примера 3 Б. При этом коэффициент обогащения составляет лишь 3,2 (частное от деления соотношений НРС/Э у сравниваемых между собой экстрактов из примера 3 А и примера 3 Б). Сказанное свидетельствует об избирательном повышении концентрации активных начал в органической фазе в результате их перехода в нее из водной фазы. Предлагаемый в изобретении экстракт из примера 3 А превосходит также экстракт, полученный известным из уровня техники способом. В экспериментах с экстрактом из примера 3 А удалось выявить увеличение ингибирования цитокинов в сопоставлении с экстрактом из примера 1, полученным известным из уровня техники способом. В экспериментах по ингибированию TNF- необходима в 5 раз меньшая концентрация предлагаемого в изобретении экстракта из примера 3 А для достижения такого же противовоспалительного действия. Влияние на PGE-2 выражено в еще большей степени. При использовании экстракта из примера 1 в анализируемой концентрации 300 мкг/мл удалось достичь лишь 11,6%-ного ингибирования. В отличие от этого при применении предлагаемого в изобретении экстракта из примера 3 А в 6 раз меньшей концентрации, равной 50 мкг/мл, достигалось даже 24,3%-ное ингибирование. Оба эти значения в 5 раз, соответственно в 12 раз (в 2 раза большее значение в %, умноженное на коэффициент концентрации, равный 6) превышают коэффициент обогащения, равный 3,2 и присущий предлагаемому в изобретении экстракту при его сопоставлении с экстрактом из примера 1. Коэффициент обогащения, равный 3,2, представляет собой частное от деления соотношений НРС/Э у сравниваемых между собой экстрактов. Пример 4. Получение предлагаемого в изобретении этанольного экстракта. 2 кг растительного сырья из листьев растения Vitis vinifera, подготовленного в соответствии с европейской фармакопеей, подвергают в перколяторе при 45C экстракционной обработке 24 л EtOH, взятом в количестве 40 об.%. Элюат фильтруют и затем при пониженном давлении концентрируют до сгущенного экстракта с содержанием сухого вещества около 50%. Густой экстракт хранят в холоде в течение 16 ч, после чего вновь разбавляют осмотической водой до содержания сухого вещества 10%. По истечении 24 ч выпавшие в осадок дубильные вещества отфильтровывают и затем из разбавленного экстракта путем фильтрования через мембранный фильтр (с отсечкой по молекулярной массе 300 кДа) удаляют прочие соэкстрагированные высокомолекулярные вещества. Полученную в результате фракцию (пермеат) досуха сушат в вакууме при 50C. Полученный экстракт характеризуется соотношением НРС/Э, равным 6,7:1, и содержанием флавоноидов 7,6%. Пример 5. Получение предлагаемого в изобретении обогащенного путем адсорбции экстракта (на основе EtOH). 2 кг растительного сырья из листьев растения Vitis vinifera, подготовленного в соответствии с европейской фармакопеей, подвергают в перколяторе при 75C экстракционной обработке 24 л EtOH, взятом в количестве 20 об.%. Элюат при пониженном давлении концентрируют до сгущенного экстракта с содержанием сухого вещества около 50%. Густой экстракт хранят в холоде в течение 16 ч, после чего вновь разбавляют осмотической водой до содержания сухого вещества 10%. По истечении 24 ч выпавшие в осадок дубильные вещества отфильтровывают и затем разбавленный экстракт наносят на адсорбентXAD7HP. Насыщенный адсорбент промывают осмотической водой, после чего компоненты экстракта элюируют этанолом. Этанольную фазу упаривают до содержания сухого вещества более 50%. Полученный густой экстракт в естественном виде сушат в вакуумном сушильном шкафу при 50C. Полученный экстракт характеризуется соотношением НРС/Э, равным 21:1, и содержанием флавоноидов 25,1%. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ получения экстракта из листьев растения Vitis vinifera L., заключающийся в том, что: а) подготавливают растительное сырье из листьев растения Vitis vinifera L.; б) растительное сырье подвергают экстракционной обработке экстрагентом, выбранным из воды и смесей воды со спиртом, с получением неочищенного экстракта; в) неочищенный экстракт отделяют от подвергнутого экстракционной обработке растительного сырья; г) по меньшей мере, частично удаляют экстрагент с получением сгущенного экстракта; д) сгущенный экстракт вновь растворяют в воде; е) отделяют нерастворимые компоненты; ж) избирательно повышают концентрацию вторичных растительных веществ путем:II) фильтрования через мембранный фильтр. 2. Способ по п.1, при осуществлении которого в качестве экстрагента используют воду или смесь воды с этанолом с содержанием последнего в пределах от 5 до 95 об.%. 3. Способ по п.1 или 2, при осуществлении которого экстрагент для экстракции нагревают до температуры в пределах от 40 до 80C, предпочтительно до температуры, которая на 15-25C ниже его температуры кипения. 4. Способ по одному из предыдущих пунктов, при осуществлении которого двухфазную экстракцию проводят в виде твердофазной экстракции. 5. Способ по п.4, при осуществлении которого в качестве второй фазы используют адсорбирующую смолу, предпочтительно выбираемую из группы неионогенных гидрофобных сополимеров дивинилбензола, алифатических сложных полиэфиров и формофенольных полимеров. 6. Способ по одному из предыдущих пунктов, при осуществлении которого двухфазную экстракцию проводят в виде жидкостно-жидкостной экстракции. 7. Способ по п.6, при осуществлении которого в качестве второй фазы используют не смешивающуюся с водой жидкость, выбранную из группы спиртов, кетонов, алканов и сложных эфиров. 8. Экстракт из листьев растения Vitis vinifera L., полученный способом по одному из пп.1-7. 9. Экстракт по п.8, у которого соотношение между натуральным растительным сырьем и экстрактом (НРС/Э) составляет от 12:1 до 40:1, общее содержание флавоноидов составляет по меньшей мере 15 мас.%, а содержание антоцианов составляет по меньшей мере 0,1 мас.%. 10. Препарат-экстракт, содержащий экстракт по п.8 или 9, а также по меньшей мере одно физиологически совместимое вспомогательное вещество. 11. Применение экстракта по п.8 или 9 для приготовления медикаментов, фармацевтических композиций или пищевых добавок. 12. Применение экстракта по п.8 или 9 для лечения или профилактики воспалительных заболеваний кровеносных сосудов или желудочно-кишечного тракта, при нарушении венозной микроциркуляции,-7 022250 при обусловленных ишемией заболеваниях, при геморроидальной болезни или при перианальном тромбозе. 13. Применение по п.12, при котором воспалительное заболевание кровеносных сосудов представляет собой флебит. 14. Применение по п.12, при котором нарушение венозной микроциркуляции представляет собой хроническую венозную недостаточность (ХВН). 15. Применение по п.12, при котором обусловленные ишемией заболевания представляют собой заболевания сердца, прежде всего инфаркт миокарда.