Способ стабилизации водного раствора производного пиразолоакридона

1 Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к способу стабилизации водного раствора, содержащего производное пиразолоакридона или его фармацевтически приемлемую соль, и к набору,представляющему собой плотно закрытую емкость, содержащую такой водный раствор. Предпосылки создания изобретения Для того, чтобы предотвратить окислительное разложение лекарственных средств,используют антиоксиданты. Однако известно,что к некоторым лекарственным средствам нельзя добавлять антиоксиданты, так как они могут взаимодействовать с активными ингредиентами или другими добавками в препаратах (J.Pharm. Sci., 61, 708 (1972. Известно, что пиразолоакридоны обладают активностью интеркалации ДНК и проявляют противоопухолевое действие (J. Med. Chem., 37,1028 (1994. Конкретные примеры таких пиразолоакридонов описываются в опубликованной не прошедшей экспертизу заявке на патент Японии 1064/93. Пиразолоакридоны или их фармацевтически приемлемые соли могут подвергаться разложению из-за окисления в водных растворах. Таким образом, требуются устойчивые препараты - водные растворы, содержащие пиразолоакридоны или их фармацевтически приемлемые соли, которые могут храниться в течение длительного времени. Описание изобретения Целью настоящего изобретения является способ стабилизации водных растворов, содержащих пиразолоакридоны или их фармацевтически приемлемые соли, и наборы, представляющие собой плотно закрытые емкости, содержащие указанные водные растворы. Настоящее изобретение относится к способу стабилизации водных растворов, содержащих пиразолоакридоны или их фармацевтически приемлемые соли, включающему добавление кислоты к водному раствору, содержащему производное пиразолоакридона, представленное приведенной ниже формулой (I) (называемое далее "соединение (I)") где R1a, R1b, R1c и R1d представляют собой, независимо, водород, C1-С 6 алкильную группу,-(СН 2)р-Х (где р равно целому числу от 1 до 6 и Х представляет гидроксильную группу, C1-С 6 алкоксигруппу или -NR2aR2b (где R2a и R2b представляют, независимо, водород, C1-С 6 алкильную группу, -(CH2)m-Y (где m равно целому числу от 1 до 6 и Y представляет гидроксильную группу,C1-С 6 алкоксигруппу или -NR3aR3b (где R3a и R3b 2 представляют, независимо, водород или C1 С 6 алкильную группу или R2a и R2b образуют гетероциклическую группу вместе с соседним с ними атомом азота, включая пирролидинил,пиперидино, пиперазинил, морфолино, тиоморфолино, хинолил, пиримидинил, пиридазинил,пиридил, пирролил, имидазолил и пиразолил или -СНCH2)nOH)2 (где n равно целому числу от 1 до 5),или его фармацевтически приемлемую соль; включающий добавление кислоты к указанному раствору, находящемуся в плотно закрытой емкости, замещение воздуха в емкости инертным газом и герметизацию емкости. Настоящее изобретение также относится к наборам, представляющим собой плотно закрытые емкостям, содержащие водные растворы,содержащие соединение (I) или его фармацевтически приемлемую соль, где воздух в плотно закрытой емкости заменен на инертный газ. К C1-С 6 алкильной группе и C1-С 6 алкильной группе в C1-С 6 алкоксигруппе в определении формулы (I) относятся линейные или разветвленные алкильные группы с 1-6 атомами углерода, такие как метил, этил, пропил, изопропил,бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, гексил и т.п. Гетероциклическая группа,образованная с участием соседнего атома азота,включает пирролидинил, пиперидино, пиперазинил, морфолино, тиоморфолино, хинолил,пиримидинил, пиридазинил, пиридил, пирролил, имидазолил, пиразолил и т.п. Среди указанных групп предпочтительными являются пирролидинил, пиперидино, пиперазинил и морфолино. Примерами фармацевтически приемлемой соли соединения (I) являются соли неорганических кислот, такие как гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, фосфаты и т.п. и соли органических кислот, такие как ацетаты, оксалаты,малонаты, малеаты, фумараты, тартраты, сукцинаты, цитраты и т.п. Соединения (I) являются известными соединениями, которые можно получить, например, по способу получения, описанному в опубликованной не прошедшей экспертизу заявке на патент Японии 1064/93. Концентрация соединения (I) в водном растворе составляет, предпочтительно, от 0,1 до 1000 мМ, предпочтительнее - от 1 до 100 мМ, и особенно предпочтительно - от 10 до 50 мМ. Примеры соединения (I) приводятся в табл. 1. Примеры кислот включают неорганические кислоты, органические кислоты и их неорганические соли. Примерами неорганических кислот являются фосфорная кислота, хлористо-водородная кислота, серная кислота, азотная кислота и подобные кислоты. Примерами органических кислот являются органические кислоты, представленные приведенной ниже формулой (II) (называемые далее(II),4 где R представляет водород или гидрокси; и R5 представляет водород, карбокси или алкил с 1-3 атомами углерода, которые могут быть замещены гидрокси или карбокси. Примерами алкилов с 1-3 атомами углерода в определении формулы(II) являются метил, этил, пропил, изопропил и т.п. Число замещений гидрокси или карбокси равно 1 или 2. Примерами соединения (II) являются молочная кислота, глицериновая кислота,тартроновая кислота, яблочная кислота, винная кислота и подобные кислоты. В качестве органической кислоты особенно предпочтительна молочная кислота. Примерами неорганической соли являются соли щелочных металлов, такие как литиевые соли, натриевые соли, калиевые соли и т.п.; и соли щелочно-земельных металлов, такие как бериллиевые соли, магниевые соли, кальциевые соли и т.п. Концентрация кислоты в водном растворе составляет, предпочтительно, от 1 до 1000 мМ,предпочтительнее - от 5 до 500 мМ, и особенно предпочтительно - от 10 до 200 мМ. Материал и форма плотно закрытой емкости набора особо не ограничиваются до тех пор,пока они могут предотвращать проникание кислорода. Примеры таких материалов включают стекло, металлы, полимеры и т.п. Примерами полимеров являются полиэтилен, полистирол,поликарбонат, полипропилен, поливинилхлорид, 6-нейлон, полиэтилентерефталат и подобные полимеры, причем предпочтительны полимеры с низким коэффициентом проницаемости 4 кислорода. Примерами полимеров с низким коэффициентом проницаемости кислорода являются полимеры с коэффициентом проницаемости кислорода менее 0,1 х 10-11 см 3 (STP) см-1 с-1 смНg-1,такие как поливиниловый спирт, полиакрилонитрил, поливинилиденхлорид и т.п. Примеры подходящей формы емкости включают ампулу,флакон, шприц и т.п. Величина рН водного раствора составляет от 1 до 7, предпочтительно - от 2 до 6, и особенно предпочтительно - от 3 до 5. Величину рН можно регулировать с использованием щелочи,такой как гидроксид натрия, гидроксид калия,или подобной щелочи, или неорганической кислоты, такой как хлористо-водородная кислота,серная кислота, или подобной кислоты. Водный раствор может содержать фармацевтически приемлемые антиоксидант, солюбилизирующий агент, средство, придающее изотоничность, поверхностно-активное вещество,успокаивающее средство и т.п., если это желательно. Примерами антиоксиданта являются аскорбиновая кислота, витамин Е, L-цистеин и т.п. Примерами солюбилизирующего агента являются полиэтиленгликоль и т.п. Примерами средства, придающего изотоничность, являются глицерин, глюкоза, хлорид натрия и т.п. Примерами поверхностно-активного вещества являются НСО-60 (производство Nikko Chemical Co.,Ltd.) и т.п. Примерами успокаивающего средства являются бензиловый спирт, лидокаин и т.п. Примерами инертного газа являются газы азот, аргон, гелий, диоксид углерода и т.п. Среди них предпочтительным является азот. Замещение воздуха в плотно закрытой емкости инертным газом можно осуществить обычным способом. Например, инертный газ можно впустить после сбрасывания давления в плотно закрытой емкости путем откачивания из нее воздуха вакуумным насосом или подобным образом. С другой стороны, водный раствор можно наливать в емкость в атмосфере инертного газа. Таким образом, выражение "замещение воздуха в плотно закрытой емкости, содержащей водный раствор, инертным газом", используемое в настоящем описании, включает способы, где водный раствор наливают в емкость в атмосфере инертного газа с последующей герметизацией, и выражение "воздух в плотно закрытой емкости заменяют на инертный газ" включает условия, когда водный раствор наливают в емкость в атмосфере инертного газа с последующей герметизацией. Когда воздух в емкости заменяют на инертный газ, предпочтительно, чтобы концентрация инертного газа в газе в емкости достигала 90% (об./об.) или более. В настоящем изобретении концентрация инертного газа в газе в емкости составляет,предпочтительнее, 95% (об./об.) или более, и особенно предпочтительно - 99% (об./об.) или более. Концентрацию инертного газа в газе в емкости можно определить, непосредственно 5 измеряя концентрацию инертного газа известным способом, или измеряя концентрацию кислорода. Концентрацию кислорода в газе можно измерить, например, с использованием анализатора микроколичеств кислорода RO-102-SP(производство lijima Elecronics Corporation). Далее приводятся примеры, примеры для сравнения и примеры испытаний. Однако настоящее изобретение не ограничивается указанными примерами. Концентрация (%) азота приводится как об./об. Наилучшие способы осуществления изобретения Пример 1. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5 и 9 мг молочной кислоты. После доведения рН раствора до 4 путем добавления к нему гидроксида натрия общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science), и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. С использованием сублимационной сушилки в емкости при сушке вымораживанием сбрасывают давление,и затем подают газообразный азот для замены воздуха в свободном пространстве в каждом флаконе на азот. После подачи азота флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. При анализе с помощью анализатора микроколичеств кислорода RO-102-SP (производство lijima ElecronicsCorporation) концентрация азота в газе в свободном пространстве флакона составляла 99,5%. Пример 2. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5. После доведения рН раствора до 4 путем добавления соляной кислоты общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм,Acrodisc, производство Gelman Science), и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. С использованием сублимационной сушилки в емкости при сушке вымораживанием сбрасывают давление и затем подают газообразный азот для замены воздуха в свободном пространстве каждого флакона на азот. После подачи азота флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. При анализе с помощью анализатора микроколичеств кислорода RO-102-SP (производство lijima Elecronics Corporation) концентрация азота в газе в свободном пространстве флакона составляла 99,5%. Пример 3. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5 и 9 мг молочной кислоты. После доведения рН раствора до 6 путем добавления к нему гидроксида натрия общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через 6 стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science) и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. С использованием сублимационной сушилки в емкости при сушке вымораживанием сбрасывают давление и затем подают газообразный азот для замены воздуха в свободном пространстве каждого флакона на азот. После заполнения азотом флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. При анализе с помощью анализатора микроколичеств кислорода RO-102-SP (производство lijima Elecronics Corporation) концентрация азота в газе в свободном пространстве флакона составляла 99,5%. Пример 4. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5 и 6 мг уксусной кислоты. После доведения рН раствора до 4 путем добавления к нему гидроксида натрия общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science) и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. С использованием сублимационной сушилки в емкости при сушке вымораживанием сбрасывают давление и затем подают газообразный азот для замены воздуха в свободном пространстве каждого флакона на азот. После подачи азота флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. При анализе с помощью анализатора микроколичеств кислорода RO-102-SP (производство lijima ElecronicsCorporation) концентрация азота в газе в свободном пространстве флакона составляла 99,5%. Пример 5. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5 и 13,6 мг дигидрофосфата калия. После доведения рН раствора до 4 путем добавления к нему соляной кислоты общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science) и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. С использованием сублимационной сушилки в емкости при сушке вымораживанием сбрасывают давление и затем подают газообразный азот для замены воздуха в свободном пространстве каждого флакона на азот. После подачи азота флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. При анализе с помощью анализатора микроколичеств кислорода RO-102-SP (производство lijima Elecronics Corporation) концентрация азота в газе в свободном пространстве флакона составляла 99,5%. 7 Пример 6. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5 и 15 мг винной кислоты. После доведения рН раствора до 4 путем добавления к нему гидроксида натрия общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science) и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. С использованием сублимационной сушилки в емкости при сушке вымораживанием сбрасывают давление и затем подают газообразный азот для замены воздуха в свободном пространстве каждого флакона на азот. После подачи азота флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. При анализе с помощью анализатора микроколичеств кислорода RO-102-SP (производство lijima ElecronicsCorporation) концентрация азота в газе в свободном пространстве флакона составляла 99,5%. Пример для сравнения 1. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5 и 9 мг молочной кислоты. После доведения рН раствора до 4 путем добавления к нему гидроксида натрия общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science) и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. Затем флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. Пример для сравнения 2. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5. После доведения рН раствора до 4 путем добавления к нему соляной кислоты общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science), и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. Затем флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. Пример для сравнения 3. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5 и 9 мг молочной кислоты. После доведения рН раствора до 6 путем добавления к нему гидроксида натрия общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science) и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. Затем флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. Пример для сравнения 4. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5 и 6 мг уксусной кислоты. После доведения рН раствора до 4 путем добавления к 8 нему гидроксида натрия общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science) и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. Затем флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. Пример для сравнения 5. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5 и 21 мг лимонной кислоты. После доведения рН раствора до 4 путем добавления к нему гидроксида натрия общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science), и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. Затем флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. Пример для сравнения 6. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5 и 13,6 мг дигидрофосфата натрия. После доведения рН раствора до 4 путем добавления к нему соляной кислоты общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science) и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. Затем флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. Пример для сравнения 7. В воде для инъекций растворяют 50 мг соединения 5 и 15 мг винной кислоты. После доведения рН раствора до 4 путем добавления к нему гидроксида натрия общий объем доводят до 10 мл. Раствор асептически фильтруют через стерильный фильтр (0,22 мкм, Acrodisc, производство Gelman Science) и в стеклянные флаконы наливают по 1 мл раствора. Затем флаконы герметизируют резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками для получения препарата водного раствора соединения 5. Пример испытаний 1. Препараты водные растворы, полученные в приведенных выше примерах 1-6 и примерах для сравнения 1-7, хранят в термостате при 60 С в течение 60 дней. Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии определяют оставшееся количество соединения 5. Условия анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: колонка: YMC-Pack ODS-AM АМ-312,подвижная фаза: 0,1 М фосфатный буфер Пример 1 Пример 2 Пример 3 Пример 4 Пример 5 Пример 6 Пример для сравнения 1 Пример для сравнения 2 Пример для сравнения 3 Пример для сравнения 4 Пример для сравнения 5 Пример для сравнения 6 Пример для сравнения 7 003747 Таблица 2 Остаточное количество соединения 5, % 91,7 81,5 73,3 89,4 88,3 92,7 26,9 38,9 16,2 30,5 16,0 36,8 21,8 Пример испытаний 2. Препараты водные растворы, полученные в приведенных выше примерах 1-6 и примерах для сравнения 1-7, хранят в термостате при 60 С в течение 60 дней. Затем невооруженным глазом наблюдают за окраской и состоянием каждого водного раствора. Результаты приводятся в табл. 3. Таблица 3 Пример 1 Пример 2 Пример 3 Пример 4 Пример 5 Пример 6 Пример для сравнения 1 Пример для сравнения 2 Пример для сравнения 3 Пример для сравнения 4 Пример для сравнения 5 Пример для сравнения 6 Пример для сравнения 7 Изменение Состояние окраски раствора Прозрачный Шкала оценки изменения окраски+ наблюдается небольшое усиление окра 10 где R1a, R1b, R1c и R1d представляют собой, независимо, водород, C1-C6 алкильную группу,-(СН 2)р-Х (где р равно целому числу от 1 до 6 и Х представляет гидроксильную группу, C1C6 алкоксигруппу или -NR2aR2b (где R2a и R2b представляют, независимо, водород, C1C6 алкильную группу, -(CH2)m-Y (где m равно целому числу от 1 до 6 и Y представляет гидроксильную группу, C1-C6 алкоксигруппу илиR2a и R2b образуют гетероциклическую группу вместе с соседним с ними атомом азота, включая пирролидинил, пиперидино, пиперазинил,морфолино, тиоморфолино, хинолил, пиримидинил, пиридазинил, пиридил, пирролил, имидазолил и пиразолил или СНСН 2)nОН)2 (где n равно целому числу от 1 до 5),или его фармацевтически приемлемую соль,включающий добавление кислоты к указанному раствору, находящемуся в плотно закрытой емкости, замещение воздуха в емкости инертным газом и герметизацию емкости. 2. Способ по п.1, где кислота представляет собой органическую кислоту, представленную следующей формулой (II):(II),4 где R представляет водород или гидрокси и R5 представляет водород, карбокси или алкил с 1-3 атомами углерода, которые могут быть замещены гидрокси или карбокси. 3. Способ по п.1, где кислота представляет собой молочную кислоту. 4. Способ по любому из пп.1-3, где водный раствор имеет рН 2-6. 5. Способ по любому из пп.1-4, где инертный газ представляет собой азот. 6. Набор, представляющий собой плотно закрытую емкость, содержащую водный раствор производного пиразолоакридона формулы (I) скизаметное усиление окраскивесьма заметное усиление окраски Промышленная применимость Согласно настоящему изобретению препараты водные растворы, содержащие производное пиразолоакридона или его фармацевтически приемлемую соль, можно хранить в стабильном состоянии в течение длительного времени. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ стабилизации водного раствора,содержащего производное пиразолоакридона формулы (I) где R1a, R1b, R1c и R1d представляют собой, независимо, водород, C1-C6 алкильную группу,-(СН 2)р-Х (где р равно целому числу от 1 до 6 и Х представляет гидроксильную группу, C1C6 алкоксигруппу или -NR2aR2b (где R2a и R2b представляют, независимо, водород, C1C6 алкильную группу, -(CH2)m-Y (где m равно целому числу от 1 до 6 и Y представляет гидроксильную группу, C1-C6 алкоксигруппу илиR2a и R2b образуют гетероциклическую группу вместе с соседним с ними атомом азота, включая пирролидинил, пиперидино, пиперазинил,морфолино, тиоморфолино, хинолил, пиримидинил, пиридазинил, пиридил, пирролил, имидазолил и пиразолил или СНСН 2)nОН)2 (где n равно целому числу от 1 до 5),или его фармацевтически приемлемую соль и кислоту, при этом воздух в плотно закрытой емкости замещен инертным газом. 7. Набор по п.6, где указанная кислота представляет собой органическую кислоту формулы (II)(II),где R представляет водород или гидрокси и R5 представляет водород, карбокси или алкил с 1-3 атомами углерода, которые могут быть замещены гидрокси или карбокси. 8. Набор по п.6, где кислота представляет собой молочную кислоту. 9. Набор по любому из пп.6-8, где водный раствор имеет рН 2-6. 10. Набор по любому из пп.6-9, где инертный газ представляет собой азот. 4