Применение фотоусиливающих агентов при перекрестном сшивании роговицы

ПРИМЕНЕНИЕ ФОТОУСИЛИВАЮЩИХ АГЕНТОВ ПРИ ПЕРЕКРЕСТНОМ СШИВАНИИ РОГОВИЦЫ Изобретение относится к применению одного или нескольких фотоусиливающих агентов,выбранных из красителей: акридинового желтого, хинидинового желтого, метиленового синего,эритрозина, для изготовления офтальмологической композиции, содержащей рибофлавин, для применения при перекрестном сшивании роговицы при лечении кератоконуса или других эктазийных расстройств для способствования прохождению офтальмологической композиции в строму через эпителий роговицы. Кроме того, настоящее изобретение относится к соответствующей офтальмологической композиции, пригодной для указанного применения. Применение фотоусиливающих агентов позволяет облегчить эпителиальную абсорбцию композиции рибофлавина и за счет этого повысить эффективность перекрестного сшивания роговицы без необходимости в деэпителизации роговицы.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: СООФТ ИТАЛИЯ СПА (IT) Настоящее изобретение относится к применению фотоусиливающих агентов абсорбции для изготовления офтальмологических композиций (в частности, глазных капель), в ассоциации с рибофлавином,разработанных для пропитывания стромы роговицы без необходимости продолжения для достижения указанного пропитывания, для удаления эпителия роговицы (деэпителизации) при практическом лечении кератоконуса, или других эктазийных расстройств роговицы при помощи перекрестного сшивания, и также относится к соответствующим офтальмологическим композициям для способа перекрестного сшивания роговицы. Кератоконус представляет собой серьезное заболевание роговицы, поскольку оно представляет собой невоспалительную прогрессирующую дистрофию, которое каждый год поражает приблизительно 50 людей на каждые 100000, как правило, молодых людей в возрасте от 10 до 20 лет. Кератоконус представляет собой генетическое заболевание с большей частотой среди женщин и в настоящее время, по видимому, коррелирует с дисфункциями эндокринных желез (гипофиз и щитовидная железа). Он может поражать оба глаза, приблизительно в 85% случаев прогрессирует, что может варьировать от субъекта к субъекту. После начала заболевания проявляется нерегулярная кривизна, которая модифицирует рефрактивную силу роговицы, вызывает искажения изображений и дезориентирует зрение на близком и далеком расстоянии. Пациент жалуется в любом случае уменьшения зрения, прежде всего зрения на далеком расстоянии. Зрение продолжает необратимо ухудшаться с последующей необходимостью частой смены очков, и вследствие этого это ухудшение может ошибочно приниматься за миопию, ассоциирующуюся с астигматизмом. Из-за врожденной структурной слабости роговичной стромы вследствие указанного заболевания,после нескольких лет роговица прогрессивно имеет тенденцию стираться и сокращаться к вершине. Там тогда происходит нерегулярное искривление роговицы, которая теряет свою сферическую форму и принимает характерную форму конуса (кератоконус). Используя биомикроскоп может быть отмечено значительное сокращение толщины роговицы на вершине кератоконуса. С течением времени вершина кератоконуса становится непрозрачной из-за изменения в питании этой части роговицы, которая в самых острых формах может представлять искривление роговицы больше чем 62 диоптрии и достигать толщины роговицы даже 446 мкм. Если болезнью пренебрегают, то вершина может подвергаться изъязвлению с последующей перфорацией роговицы; это вызывает боль, слезотечение и спазм век. Эти изменения роговицы из-за кератоконуса приводят к изменению отложения роговичного белка, вызывая микрорубцы, которые дополнительно искажают изображения и в некоторых случаях препятствуют прохождению света, таким образом приводя к неприятному чувству ослепления, прежде всего во времена суток, когда солнце находится низко над горизонтом (восход и закат солнца). Как уже упомянуто, чтобы скорректировать зрение, необходимо часто менять очки. Только после того, как применение очков оказывается неудовлетворительным в более умеренных формах, могут быть применены жесткие контактные линзы. Реальная проблема возникает тогда, когда роговица, пораженная кератоконусом, подвергается значительному утончению или, если заживление происходит после раздирания поверхности роговицы, делая необходимым даже хирургическую пересадку роговицы (кератопластику). В 2002 году так называемая ламеллярная кератопластика была введена в Италии для лечения кератоконуса, при которой на практике заменяется не вся роговица, а только внешний слой, т.е. часть, пораженная заболеванием. Тем не менее, уже к 1997 году в Германии в глазной клинике университета Карла Густава Каруса Дрезды разработали новый более безопасный и менее инвазивный способ, названный "перекрестным сшиванием роговицы", при котором используют в частности рибофлавин, активированный ультрафиолетовым (UV) лазером; в 2005 году этот способ была проверен также в Италии и к настоящему времени широко используется успешно в различных итальянских глазных клиниках. Перекрестное сшивание роговицы представляет собой малоинвазивный способ, в котором используют рибофлавин, активированный UV лазером (366 нм); указанный способ является безболезненным и его осуществляют при дневном посещении больницы. Перекрестное сшивание позволяет укрепить структуру роговицы, пораженной кератоконусом, посредством переплетения и увеличения связей (перекрестное сшивание) между волокнами роговичного коллагена. В результате проведенных клинических исследований этот способ оказался способным уменьшить астигматизм, ассоциирующийся с кератоконусом, а также чтобы замедлить или прекратить развитие кератоконуса, таким образом избегая необходимости в пересадке роговицы. Кроме того, при других расстройствах, характеризующихся эктазией роговицы, также выгодно лечение с использованием способа перекрестного сшивания. Перекрестное сшивание роговицы осуществляют путем применения местной роговичной анестезии для осуществления истирания роговичного эпителия (деэпителизации), имеющего диаметр 8-9 мм. За этим следует частое закапывание офтальмологического раствора на основе 0,1% рибофлавина с последующим через 15 мин облучением ультрафиолетовым (UV-A) излучением в течение 5 мин, и затем новым закапыванием и новым излучением в общей сложности в течение 6 циклов (всего 30 мин). Рибофлавин, в частности рибофлавин фосфат, который обычно используется при перекрестном сшивании роговицы, представляет собой гидрофильную фотосенситизирующую и фотополимеризирующуюся молекулу, обладающую плохой способностью к диффузии через эпителий и следовательно достижению роговичной стромы. Поэтому необходимо облегчить его абсорбцию и полное смачивание роговичной стромы прежде, чем начать облучение UV-A посредством удаления роговичного эпителия (деэпителизации). Этот способ может приводить, хотя и редко, к осложнениям на уровне роговицы, боли, в дополнение к тому, что является способом, который делает задачу окулиста более трудной. Следовательно, желательно улучшить абсорбцию рибофлавина без необходимость деэпителизации роговицы, следовательно, приводя к неинвазивному перекрестному сшиванию роговицы с устранением или уменьшением уровня анестезии и затем быстрого заживления без боли или возможных осложнений. Кроме того, было бы желательно предложить соединения, которые давали бы возможность для легкой эпителиальной абсорбции, но обладали бы равной или более высокой активностью, чем рибофлавин в отношении определения фоточувствительности и фотополимеризации волокон коллагена; указанные соединения должны предпочтительно быть активированы при интенсивностях света, близких к видимому, для преодоления вредных эффектов повторных циклов UV излучения, необходимых для активации рибофлавина. Неожиданно обнаружили, что путем нанесения на роговицу офтальмологических композиций, содержащих фотоусиливающие агенты (т.е. светочувствительные и фотополимеризирующиеся вещества,которые могут быть легко абсорбированы эпителием и которые как рибофлавин могут также быть активированы на свету с образованием перекрестного сшивания роговицы), такие как, например, красители акридиновый желтый, хинидиновый желтый, метиленовый синий и эритрозин, структуры которых приведены ниже: акридиновый желтый полезное поглощение: 460 нм метиленовый синий полезное поглощение: 668 нм молекулярная формула: C20H6I4Na2O5; молекулярная масса: 879,86,в ассоциации с рибофлавином, достигают улучшенного перекрестного сшивания роговицы при помощи излучения, близкого к видимому, которое является менее вредным, без необходимости деэпителизации. Следовательно, в настоящем изобретении предусмотрено применение одного или нескольких фотоусиливающих агентов, выбранных из красителей: акридинового желтого, хинидинового желтого, мети-2 023607 ленового синего, эритрозина, для изготовления офтальмологической композиции, содержащей рибофлавин, для применения при перекрестном сшивании роговицы при лечении кератоконуса или других эктазийных расстройств для способствования прохождению офтальмологической композиции в строму через эпителий роговицы. Фотоусиливающие агенты в соответствии с настоящим изобретением могут быть использованы для нанесения непосредственно на роговицу для перекрестного сшивания кератоконуса или других эктазий роговицы, не приводящих к цитотоксичности. Еще одним объектом настоящего изобретения является офтальмологическая композиция для применения при перекрестном сшивании роговицы при лечении кератоконуса или других эктазийных расстройств, содержащая один или несколько фотоусиливающих агентов, выбранных из красителей: акридинового желтого, хинидинового желтого, метиленового синего, эритрозина, способствующих прохождению офтальмологической композиции в строму через эпителий роговицы, и рибофлавин. Указанная офтальмологическая композиция может быть приготовлена в соответствии с известными способами. Фотосенситизирующие и фотополимеризующие вещества (фотоусиливающие агенты), среди которых находится рибофлавин, по настоящему изобретению используются в соответствующих количествах,выбранных от 0,001 до 1 мас.% относительно композиции. Кроме того, рибофлавин, предпочтительно используемый в настоящем изобретении, является рибофлавин фосфатом в соответствующем количестве во всех композициях, описанных выше; в частности,он предпочтительно присутствует в количестве от 0,05 до 0,3 мас.% относительно композиции по настоящему изобретению. Офтальмологические композиции по настоящему изобретению могут быть изготовлены в технической форме глазных примочек, глазных капель, промываний для глаз, мазей, и в любом случае во всех фармацевтических технических формах, которые дают возможность для нанесения на роговицу в соответствии с известными способами; далее приведены примеры, приведенные в качестве иллюстрации, не ограничивающие каким-либо образом объем настоящего изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации в объеме изобретения понятны специалистам в данной области техники, для которых предназначено изобретение. В приведенных ниже композициях доза индивидуальных компонентов выражена в мас.%. Пример 1. Следует отметить, что препараты 1-4 также могут быть изотоническими или даже гипертоническими с добавлением достаточного количества хлорида натрия (или другого осмолита) для достижения указанной цели. Экспериментальные данные исследований, осуществляемых заявителем, представлены ниже. Экспериментальное исследование 1. Проводили предварительную процедуру пропитывания стромы роговицы композициями препарата Е (пример 1), F (пример 2), Н (пример 4) у девяти пациентов (5 мужчин и 3 женщины), имеющих средний возраст 35 лет, все из которых поражены кератоконусом, оцениваемым как IV стадия в соответствии с классификацией Amsler - Krumeich. Пациентов разделяли на три экспериментальные группы, каждая из которых включала трех пациентов, для которых толщина роговицы и тяжесть заболевания были одинаковыми. Препарат Е вводили группе 1, группе 2 вводили препарат F и препарат Н вводили группе 3. Композиции вводили субъектам по одной капле (приблизительно 50 мкл) только в глаз, находящийся в более плохом состоянии (в соответствии с классификацией Amsler - Krumeich), в течение 10 мин каждые 2 ч. В конце введения всех субъектов исследовали для выявления проникновения продукта в строму роговицы. Оценку проникновения продукта осуществляли при помощи щелевой лампы. Не сообщали ни о каких побочных действиях у пациентов, кроме изредка обнаруживаемого небольшого временного раздражения в момент введения композиции. Во всех случаях обнаружили, что все три красителя вызывали образование микротрещин в роговом эпителии, через которые можно обнаружить слабое окрашивание передней области стромы роговицы. В случае введения акридина и хинидинового желтого окрашивание стромы роговицы может быть усилено путем встраивания кобальтового фильтра в щелевую лампу, тогда как после введения метиленового синего не требуется никакой фильтр, поскольку голубое окрашивание ясно видно. Экспериментальное исследование 2. Цель исследования заключалась в том, чтобы оценить эффективность перекрестного связывания фотоусилителей по изобретению: акридинового желтого, акридинового оранжевого, хинидинового желтого, метиленового синего, эритрозина, самостоятельно или в ассоциации с фосфатом рибофлавина. Тестируемые композиции представляли собой: композиция 1: фосфат рибофлавина 0,147 мас.%, акридиновый желтый 0,05 мас.%; композиция 2: акридиновый желтый 0,05 мас.%; композиция 3: фосфат рибофлавина 0,147 мас.%, акридиновый оранжевый 0,05 мас.%; композиция 4: акридиновый оранжевый 0,05 мас.%; композиция 5: фосфат рибофлавина 0,147 мас.%, хинидиновый желтый 0,05 мас.%; композиция 6: хинидиновый желтый 0,05 мас.%; композиция 7: фосфат рибофлавина 0,147 мас.%, метиленовый синий 0,05 мас.%; композиция 8: метиленовый синий 0,05 мас.%; композиция 9: фосфат рибофлавина 0,147 мас.%, эритрозин 0,05 мас.%; композиция 10: эритрозин 0,05 мас.%; композиция 11: фосфат рибофлавина 0,147 мас.%. Эффективность перекрестного связывания. Тесты осуществляли на обоих глазах 22 взрослых кроликов, разделенных на 11 групп по 2 кролика в каждой. Каждой группе вводили одну композицию. По две капли композиции капали в каждый глаз каждые 30 мин в течение 8 ч, затем роговицы исследовали при помощи щелевой лампы для оценки уровня стромального пропитывания. Для оценки стромальной абсорбции использовали фильтр синий кобальт. Затем группы подвергали перекрестному связыванию при помощи УФ-излучения при 3 мВт в течение 30 мин для подтверждения и сравнения способности каждого фотоусилителя самого по себе (акридиновый желтый, акридиновый оранжевый, хинидиновый желтый, метиленовый синий и эритрозин) и в ассоциации с фосфатом рибофлавина активировать перекрестное связывание в строме роговицы. Оценку эффективности перекрестного связывания осуществляли путем исследования ОСТ обработанных глаз через 7 суток после УФ-обработки. Результаты представлены в таблице далее. Эффективность оценивали при помощи условной шкалы от 1 до 10, где 1 представляет собой минимальную оценку, а 10 представляет собой максимальную оценку и более хорошую эффективность. Полученные результаты продемонстрировали, что фотоусилители с последующей УФ-обработкой содействуют образованию перекрестных связей в строме роговицы как сами по себе, так и в ассоциации с фосфатом рибофлавина, однако в ассоциации с фосфатом рибофлавина их действие значительно увеличивается. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение одного или нескольких фотоусиливающих агентов, выбранных из красителей: акридинового желтого, хинидинового желтого, метиленового синего, эритрозина, для изготовления офтальмологической композиции, содержащей рибофлавин, для применения при перекрестном сшивании роговицы при лечении кератоконуса или других эктазийных расстройств для способствования прохождению офтальмологической композиции в строму через эпителий роговицы. 2. Применение по п.1, где фотоусиливающие агенты в указанной композиции присутствуют в количестве от 0,001 до 1 мас.%, рибофлавин представляет собой рибофлавин фосфат и присутствует в количестве от 0,05 до 0,3 мас.%. 3. Офтальмологическая композиция для применения при перекрестном сшивании роговицы при лечении кератоконуса или других эктазийных расстройств, содержащая один или несколько фотоусиливающих агентов, выбранных из красителей: акридинового желтого, хинидинового желтого, метиленового синего, эритрозина, способствующих прохождению офтальмологической композиции в строму через эпителий роговицы, и рибофлавин. 4. Глазные капли для лечения кератоконуса или других эктазийных расстройств при перекрестном сшивании роговицы, содержащие один или несколько фотоусиливающих агентов, выбранных из красителей: акридинового желтого, хинидинового желтого, метиленового синего, эритрозина, способствующих прохождению офтальмологической композиции в строму через эпителий роговицы, и рибофлавин. 5. Глазные капли для лечения кератоконуса или других эктазийных расстройств при перекрестном сшивании роговицы, включающие композицию по п.3. Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2