Способ получения порошковых препаратов лёгочного поверхностно-активного вещества.

Номер патента: 1382

Опубликовано: 26.02.2001

Автор: Айштеттер Клаус

Скачать PDF файл.

Формула / Реферат

1. Способ получения порошкового препарата легочного поверхностно-активного вещества (ПАВ), содержащего гидрофобные протеины легочного ПАВ, отличающийся тем, что органические раствор или суспензию, содержащие гидрофобные протеины легочного ПАВ и необязательно другие компоненты, подвергают распылительной сушке.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве гидрофобных протеинов легочного ПАВ применяют SP-C и SP-B в органическом растворе или органической суспензии.

3. Способ по п.2, отличающийся тем, что SP-C применяют в органическом растворе или органической суспензии.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что органический раствор или органическая суспензия содержат от 5 до 15 мас.% воды.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве других компонентов применяют фосфолипиды.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что распылительную сушку проводят в нагретом газе.

7. Способ по п.6, отличающийся тем, что в качестве газа применяют воздух или азот.

8. Способ по п.6, отличающийся тем, что температура газа на входе составляет от 60 до 200шС, а на выходе составляет от 40 до 80шС.

9. Способ по п.7, отличающийся тем, что температура газа на входе составляет от 90 до 150шС, а на выходе составляет от 50 до 70шС.

10. Порошковые препараты ПАВ, полученные способом по любому из пп.1-9.

Текст

Смотреть все

1 Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к способу получения порошковых препаратов легочного поверхностно-активного вещества (ПАВ). Уровень техники Легкие всех позвоночных животных содержат смесь веществ, называемую легочным поверхностно-активным веществом. Она проявляет поверхностно-активные свойства и настолько понижает поверхностное натяжение в альвеолярной области легких, что предотвращает коллапс конечных участков дыхательных путей при выдохе. Эта смесь веществ регулирует поверхностное натяжение динамическим образом, благодаря чему ожидаемый согласно закону Лапласа коллапс мелких альвеол в пользу более крупных благодаря соответствующей адаптации поверхностного натяжения не происходит. В результате этого образуется хорошо сбалансированная, гистологически и физиологически стабильная структура легких. Легочное ПАВ выделяется альвеолярными пневмоцитами типа II в виде пластинчатых телец. Они представляют собой компактные образования из фосфолипидных двойных слоев с высоким содержанием дипальмитоилфосфатидилхолина (ДПФХ) и фосфатидилглицерина(ФГ). Другими основными компонентами, содержащимися в легочных поверхностноактивных веществах, являются протеины, которые обозначаются как SP-A, SP-B и SP-C. SP-A представляет собой высокомолекулярный гликопротеин, играющий основную роль в регуляции секреции. Гидрофобные протеины SP-C и в меньшей степени SP-B выполняют при формировании мономолекулярной поверхностной пленки (в более узком смысле ПАВ) функцию термодинамических катализаторов. Благодаря наличию этих протеинов кинетика расширения чрезвычайно ускоряется. Только вследствие этого без задержек возможна адаптация состава ПАВ к соответствующим требованиям поверхностного натяжения. Эти свойства отражаются в крайне гидрофобном характере протеинов, в частностиSP-C. У недоношенных младенцев легкие не в состоянии или не в состоянии в достаточной мере вырабатывать легочное ПАВ, что приводит к опасному для жизни недостатку кислорода(респираторный дистресс-синдром новорожденных, РДСН). РДСН представляет собой главную причину смертности недоношенных младенцев. В течение многих лет успешно проводится лечение респираторного дистресс-синдрома новорожденных введением препаратов легочного ПАВ в легкие больных детей. Из предварительных исследований известно, что и при заболевании респираторным дистресс-синдромом взрослых (РДСВ), включая острое повреждение 2 легких (ОПЛ), препараты легочного ПАВ проявляют клиническую эффективность. Препараты легочного ПАВ могут быть получены из легких животного путем сложного процесса экстракции и центрифугирования (легочный лаваж) или составлены из отдельных компонентов. В публикации WO 92/06703 описывается получение препаратов синтетического легочного ПАВ путем упаривания хлороформного раствора, содержащего фосфолипиды, такие, как дипальмитоилфосфатидилхолин (ДПФХ) и диолеилфосфатидилэтаноламин (ДОФЭ), и холестерин, в ротационном испарителе с образованием тонкой пленки, которую при необходимости ресуспендируют с соответствующими протеинами в буфере. Из публикации WO 91/00871 известен способ концентрирования органического раствора препарата легочного ПАВ, содержащего полученный методами генной инженерии протеин легочного ПАВ, и регидратации буфером с последующей лиофилизацией. Недостаток полученного лиофилизата состоит в том, что перед применением его необходимо в течение 15 мин повторно гидратировать при 37 С, что для потребителя является весьма сложной и приводящей к ошибкам процедурой. В заявке ЕР 0119056 описан способ получения препарата легочного ПАВ, состоящий в том, что все компоненты растворяют в органическом растворителе, полученный раствор концентрируют досуха под пониженным давлением, полученный остаток повторно суспендируют в течение продолжительного периода времени в водной среде при повышенной температуре и полученную суспензию подвергают сублимационной сушке. Этот способ также технически очень сложен. В патенте DE 3229179 описан способ получения не содержащего протеин препарата легочного ПАВ, состоящий в том, что компоненты растворяют в ледяной уксусной кислоте и полученный раствор подвергают сублимационной сушке. Недостатком этого способа является применение ледяной уксусной кислоты, что требует принятия широких мер безопасности. В заявке ЕР 0655237 предлагается получение препаратов лекарственного средства, предназначенных для ингалятивного применения в виде суспензионного аэрозоля, путем распылительной сушки смесей этанола и воды. Этот способ описывается, в частности, как пригодный для составов, которые содержат гидрофильные протеины, такие как, например, экатибантацетат, человеческий инсулин и бузерелинацетат. Описание изобретения В основу настоящего изобретения была положена задача разработать способ получения протеинсодержащих порошковых препаратов легочного ПАВ, содержащих гидрофобные про 3 теины легочного ПАВ, который был бы технически по возможности не очень сложным и позволял бы получать продукт, эффективный в применении и стойкий при длительном хранении. Неожиданно было установлено, что эта задача может быть решена благодаря тому, что органический раствор или органическую суспензию, содержащий(ую) гидрофобные протеины легочного ПАВ и необязательно другие компоненты, подвергают распылительной сушке. По этому способу получают продукт,стойкий при хранении в течение длительного времени и без особых затрат допускающий повторное суспендирование перед применением. Как на особое преимущество полученного порошка необходимо указать на очень малый размер его частиц (1-5 мкм), который позволяет применять его ингалятивно. Этот аспект имеет особое значение при применении препаратов легочного ПАВ в качестве буксира для лекарственных средств, вводимых через легкие. В настоящее время не может быть дан ответ на вопрос, каким образом обладающие отчасти высокой термочувствительностью компоненты легочного ПАВ выдерживают условия процесса распылительной сушки. Так, например, известно, что протеин SP-C легочного ПАВ очень быстро агрегирует при температурах выше -20 С и в результате инактивируется. Однако этот протеин выдерживает процесс распылительной сушки согласно изобретению без заметного разложения и после сушки имеет вид рыхлого порошка, стойкого при хранении при комнатной температуре. Объектом изобретения является поэтому способ, отличие которого состоит в том, что органический раствор или органическую суспензию, содержащие гидрофобные протеины легочного ПАВ и необязательно другие компоненты, подвергают распылительной сушке. Предпочтительные варианты осуществления изобретения указаны в зависимых пунктах формулы. В качестве гидрофобных протеинов легочного ПАВ могут рассматриваться равным образом как протеины природного происхождения,так и синтетические, в том числе полученные методами генной инженерии, в частности SP-B и SP-C, а также их смеси. Под синтетическими протеинами следует понимать также и такие протеины, аминокислотная последовательность которых в той или иной степени существенно отличается от встречающихся в природе протеинов легочного ПАВ, включая такие синтетические протеины, которые имеют аминокислотную последовательность, сконструированную как последовательность, совершенно особенную в части свойств ее легочного ПАВ, как, например, протеины, описанные в заявках ЕР 0593094 и WO 92/22315. Эти протеины могут быть вы 001382 4 делены, синтезированы и очищены известными методами. В качестве растворителя для получения органического раствора или суспензии согласно изобретению пригодны спирты, такие, как метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол, бутанолы, хлоруглеводороды, такие как дихлорметан,хлороформ и т.д., ацетон, простые эфиры, углеводороды, бензол, толуол и их смеси, причем в них может содержаться также вода, поскольку они способны смешиваться с водой. Максимальное содержание воды составляет 25 мас.%. Предпочтительно содержание воды составляет от 5 до 15 мас.%. Специалист на основе своих специальных знаний в области распылительной сушки и при необходимости с помощью обычных опытов легко может выбрать растворители,соответственно смеси растворителей, наиболее пригодные для подвергаемых сушке смесей ПАВ. В качестве других компонентов препараты легочного ПАВ содержат обычные вещества, в частности фосфолипиды, карбоновые кислоты и буферные вещества. Перед началом распылительной сушки раствор можно фильтровать через стерилизующий фильтр. Распылительную сушку осуществляют известным образом. Подробное описание этой технологии можно найти у K. Masters,Spray Drying Handbook, 5-е изд., 1991 год, и у J.Ind. Pharm., 18, 1169 (1992). Принцип распылительной сушки состоит в том, что раствор или суспензию подвергаемого сушке продукта дробят на мелкие капельки и сушат потоком горячего газа. Остаток твердого вещества после выпаривания растворителя отделяют от газового потока с помощью циклона и/или фильтровальной установки и собирают. В соответствии с изобретением в качестве растворителя целесообразно применять спирты и хлоруглеводороды, в частности метанол, этанол, 2-пропанол и хлороформ и их смеси, при определенных условиях с небольшими добавками воды (максимально до 25 мас.%). В качестве сушильных газов могут рассматриваться, в частности, воздух и азот. Температуру газа на входе в сушилку поддерживают в интервале от 60 до 200 С, предпочтительно от 90 до 150 С. Температуру выходящего газа с помощью соответствующего регулирования распылительной мощности и/или расхода газа поддерживают в интервале от 40 до 80C, предпочтительно от 50 до 70 С. Примеры получения Пример 1. 7,0 г 1,2-дипальмитоил-3-sn-фосфатидилхолина, 2,5 г 1-пальмитоил-2-олеоил-3-sn-фосфатидилглицерилнатрия, 205 мг дигидрата хлорида кальция и 250 мг пальмитиновой кислоты растворяют при нагревании до 60 С в 300 мл смеси этанол/вода (85:15), охлаждают до комнатной температуры и смешивают с 350 мл раствора SP-C в смеси хлороформ/метанол (9:1, с = 429 мг/л). Полученный раствор сушат распылением в лабораторной распылительной сушилкеBchi B 191. Условия распылительной сушки: сушильный газ - воздух, температура на входе в сушилку 90 С, температура на выходе из сушилки 52-54 С. Таким путем получают рыхлый порошок. Пример 2. Раствор выделенного из легких крупного рогатого скота ПАВ (получают путем экстракции и очистки, как описано, например, в ЕР 406732) в смеси хлороформ/метанол сушат распылением при следующих условиях: лабораторная распылительная сушилка Bchi B 191, сушильный газ - азот, температура на входе в сушилку 80 С, температура на выходе из сушилки 50-52 С. Таким путем получают тонкий желтоватый порошок. Пример 3. 10,95 г 1,2-дипальмитоил-3-sn-фосфатидилхолина, 4,6 г 1-пальмитоил-2-олеоил-3-snфосфатидилглицериламмония, 418 мг дигидрата хлорида кальция и 750 мг пальмитиновой кислоты растворяют в 330 мл смеси 2 пропанол/вода (85:15) при 50 С и после охлаждения до 30 С смешивают с 620 мл раствора SPC в смеси изопропанол/вода (95:5, с = 484 мг/л). Полученный раствор сушат распылением в лабораторной распылительной сушилке Bchi B 191. Условия распылительной сушки: сушильный газ - азот, температура на входе в сушилку 100 С, температура на выходе из сушилки 5860 С. Таким путем получают бесцветный порошок. Пример 4. 3,74 г (5,1 ммоля) 1,2-дипальмитоил-3-snфосфатидилхолина, 2,81 г (3,7 ммоля) 1-пальмитоил-2-олеоил-3-sn-фосфатидилхолина, 2,90 г(3,9 ммоля) 1,2-дипальмитоилфосфатидил-3-snфосфатидилглицерилнатрия, 234 мг пальмитиновой кислоты и 279 мг (1,9 ммоля) дигидрата хлорида кальция растворяют в 160 мл смеси 2 пропанол/вода (85:15) при 50 С и после охлаждения до 30 С смешивают с 566 мл раствора SPC в смеси изопропанол/вода (92:8, с = 330 мг/л) при 30 С. Полученный раствор сушат распылением в лабораторной распылительной сушилкеBchi B 191. Условия распылительной сушки: сушильный газ - азот, температура на входе в сушилку 90 С, температура на выходе из су 6 шилки 58-60 С. Таким путем получают бесцветный порошок. Пример 5. 0,5 г RLLLLRLLLLRLLLLRLLLLR (где R означает Arg, а L означает Leu), 7,125 г 1,2 дипальмитоил-3-sn-фосфатидилхолина и 2,43 г 1-пальмитоил-2-олеоил-3-sn-фосфатидилглицериламмония растворяют в 500 мл смеси хлороформ/метанол 1:1 при нагревании до 45 С и затем сушат распылением в лабораторной распылительной сушилке Bchi B 191. Условия распылительной сушки: сушильный газ - азот,температура на входе в сушилку 85 С, температура на выходе из сушилки 55 С. Таким путем получают бесцветный порошок. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ получения порошкового препарата легочного поверхностно-активного вещества (ПАВ), содержащего гидрофобные протеины легочного ПАВ, отличающийся тем, что органические раствор или суспензию, содержащие гидрофобные протеины легочного ПАВ и необязательно другие компоненты, подвергают распылительной сушке. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве гидрофобных протеинов легочного ПАВ применяют SP-C и SP-B в органическом растворе или органической суспензии. 3. Способ по п.2, отличающийся тем, чтоSP-C применяют в органическом растворе или органической суспензии. 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что органический раствор или органическая суспензия содержат от 5 до 15 мас.% воды. 5. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве других компонентов применяют фосфолипиды. 6. Способ по п.1, отличающийся тем, что распылительную сушку проводят в нагретом газе. 7. Способ по п.6, отличающийся тем, что в качестве газа применяют воздух или азот. 8. Способ по п.6, отличающийся тем, что температура газа на входе составляет от 60 до 200 С, а на выходе составляет от 40 до 80 С. 9. Способ по п.7, отличающийся тем, что температура газа на входе составляет от 90 до 150 С, а на выходе составляет от 50 до 70 С. 10. Порошковые препараты ПАВ, полученные способом по любому из пп.1-9.

МПК / Метки

МПК: A61K 9/14, C07K 14/785

Метки: лёгочного, порошковых, получения, вещества, поверхностно-активного, способ, препаратов

Код ссылки

<a href="https://eas.patents.su/4-1382-sposob-polucheniya-poroshkovyh-preparatov-lyogochnogo-poverhnostno-aktivnogo-veshhestva.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Способ получения порошковых препаратов лёгочного поверхностно-активного вещества.</a>

Похожие патенты