Агонисты гуанилатциклазы, пригодные для лечения желудочно-кишечных нарушений, воспаления, рака и других заболеваний

АГОНИСТЫ ГУАНИЛАТЦИКЛАЗЫ, ПРИГОДНЫЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЖЕЛУДОЧНОКИШЕЧНЫХ НАРУШЕНИЙ, ВОСПАЛЕНИЯ, РАКА И ДРУГИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ Изобретение относится к новым пептидным агонистам гуанилатциклазы С и к их применению для лечения заболеваний человека, включающих желудочно-кишечные заболевания, воспаление или рак (например, рак желудочно-кишечного тракта). Пептиды можно вводить отдельно или в комбинации с ингибитором cGMP-зависимой фосфодиэстеразы. Желудочно-кишечное заболевание может включать синдром раздраженного кишечника, констипацию, избыточную кислотность и др. Желудочно-кишечное заболевание может включать воспалительное заболевание кишечника или другое состояние ЖК, включая болезнь Крона и язвенный колит, а также рак. По данному патенту испрашивается приоритет согласно предварительной заявке США 60/933194, поданной 4 июня 2007 г., содержание которой во всей своей полноте включено в настоящее описание посредством ссылки. Настоящее изобретение относится к терапевтическому применению агонистов гуанилатциклазы С(GC-C) в качестве средств, повышающих внутриклеточную продукцию cGMP (цГМФ). Агонисты можно использовать отдельно или в комбинации с ингибиторами cGMP-специфичной фосфодиэстеразы с целью предотвращения или лечения воспаления, рака и других заболеваний, в частности желудочно-кишечного тракта и легких. Урогуанилин, гуанилин и бактериальные пептиды ST являются родственными по структуре пептидами, которые связываются с гуанилатциклазным рецептором и стимулируют внутриклеточную продукцию циклического гуанозинмонофосфата (cGMP) (1-6). В результате происходит активация кистознофиброзного регулятора трансмембранной передачи (CFTR), апикального мембранного канала, обеспечивающего выведение хлоридных ионов из энтероцитов, выстилающих кишечный тракт (1-6). АктивацияCFTR и последующее увеличение трансэпителиальной секреции хлоридного иона приводит к стимуляции секреции натрия и воды в просвет кишечника. Следовательно, являясь паракринными регуляторами активности CFTR, агонисты рецептора cGMP регулируют транспорт жидкостей и электролитов в ЖК тракте (1-6; патент США 5489670). Таким образом, cGMP-опосредованная активация CFTR и зависимый от нее сигнальный путь играют важную роль в нормальном функционировании физиологии кишечника. Следовательно, любая аномалия в данном процессе потенциально может приводить к желудочнокишечным нарушениям, таким как синдром раздраженного кишечника, воспалительная болезнь кишечника, повышенная кислотность и рак (25, 26). Процесс эпителиального обновления включает пролиферацию, миграцию, дифференциацию, старение и возможную потерю клеток ЖК в просвет (7, 8). Слизистую оболочку ЖК можно подразделить на три разные зоны на основе индекса пролиферации эпителиальных клеток. Одной из таких зон является зона пролиферации, которая состоит из недифференцированных стволовых клеток, отвечающих за обеспечение постоянного источника новых клеток. Стволовые клетки мигрируют в направлении просвета, в который они вытесняются. По мере миграции клетки утрачивают способность делиться и становятся дифференцированными, т.е. начинают выполнять специализированные функции слизистой оболочки ЖК(9). Обновление слизистой оболочки ЖК происходит очень быстро, полностью завершаясь в течение 2448 ч (9). В этом процессе мутированные и нежелательные клетки компенсируются новыми клетками. Следовательно, гомеостаз слизистой оболочки ЖК обеспечивается путем непрерывного поддержания баланса скоростей пролиферации и апоптоза (8). Скорости пролиферации и апоптоза клеток эпителия кишечника могут увеличиваться или уменьшаться в зависимости от широкого ряда разных условий, например в ответ на физиологические стимулы,такие как старение, воспалительные сигналы, гормоны, пептиды, факторы роста, химические вещества и особенности диеты. В дополнение, повышенная скорость пролиферации зачастую связана с уменьшением времени обновления и расширением зоны пролиферации (10). Обнаружено, что индекс пролиферации значительно повышается при таких патологических состояниях, как язвенный колит и другие ЖК нарушения (11). Таким образом, гиперплазия кишечника является основной причиной воспаления и канцерогенеза в желудочно-кишечном тракте. Помимо того, что урогуанилин и гуанилин являются модуляторами секреции жидкостей и ионов в кишечнике, указанные пептиды также могут участвовать в непрерывном обновлении слизистой оболочки ЖК путем поддержания баланса между пролиферацией и апоптозом клеток, выстилающих слизистую оболочку ЖК. Следовательно, любое нарушение указанного процесса обновления вследствие уменьшения продукции урогуанилина и/или гуанилина может приводить к воспалению и раку ЖК (25, 26). Такой вывод согласуется с данными, опубликованными ранее в WO01/25266, которые дают возможность предположить, что пептид, содержащий активный домен урогуанилина, может функционировать как ингибитор развития полипов и может использоваться для лечения рака толстой кишки. Однако полученные недавно результаты свидетельствуют о том, что урогуанилин также связывается с неизвестным в настоящее время рецептором, который отличается от рецептора GC-C (3, 4). У нокаутированных мышей по гуанилатциклазному рецептору наблюдается устойчивость к пептидам ST в кишечнике, но эффекты урогуанилина и пептидов ST в почках in vivo не нарушаются (3). Полученные результаты дополнительно подтверждают тот факт, что деполяризация мембраны, индуцированная гуанилином, блокируется генистеином, ингибитором тирозинкиназы, тогда как на гиперполяризацию, индуцированную урогуанилином, генистеин не влияет (12, 13). Таким образом, пока не ясно, опосредуется ли противораковая и противовоспалительная активность урогуанилина и его аналогов связыванием с одним или обоими указанными рецепторами. Воспалительная болезнь кишечника является общим названием группы нарушений, которые вызывают воспаление кишечника, характеризующееся покраснением и опуханием ткани. Воспаление желудочно-кишечного тракта (ЖК) может представлять собой хроническое состояние и зачастую приводит к раку ЖК (14). Примеры таких воспалительных болезней кишечника (IBD) включают болезнь Крона и язвенный колит (UC). По оценкам специалистов от IBD страдает около 1000000 американцев, причем эта болезнь в равной степени поражает как мужчин, так и женщин. Большая часть случаев диагностируется у пациентов, не достигших 30 лет, однако данное заболевание может встречаться у пациентов на шестой,седьмой или более поздних декадах жизни. Болезнь Крона представляет собой серьезное воспалительное заболевание, которое преимущественно поражает подвздошную кишку и толстую кишку, однако оно может встречаться и в других отделах ЖК тракта, тогда как UC представляет собой воспалительное заболевание исключительно ободочной кишки, толстого кишечника (15). В отличие от болезни Крона, при которой поражаются все слои кишечника, причем между пораженными участками кишечника могут существовать нормальные здоровые участки кишечника, UC поражает только наиболее глубокие слои выстилки (слизистой оболочки) толстой кишки в непрерывной манере (16). В зависимости от того, какой участок ЖК тракта поражен заболеванием, болезнь Крона может называться илеитом, регионарным энтеритом, колитом и т.д. Болезнь Крона и UC отличаются от спастической толстой кишки или синдрома раздраженного кишечника, которые связаны с нарушением подвижности ЖК тракта. Хотя точная причина IBD неизвестна, полагают, что данное заболевание может быть связано с нарушением процесса непрерывного обновления слизистой оболочки ЖК (17, 18). Процесс обновления выстилки ЖК представляет собой эффективный и динамичный процесс, включающий непрерывную пролиферацию и замену нежелательных поврежденных клеток. Скорость пролиферации клеток, выстилающих слизистую оболочку ЖК, является очень высокой и занимает второе место, уступая только скорости пролиферации клеток гематопоэтической системы. Таким образом, баланс пролиферации и апоптоза играет важную роль в поддержании гомеостаза слизистой оболочки ЖК (19, 20). Гомеостаз ЖК зависит как от пролиферации, так и от программируемой гибели (апоптоза) эпителиальных клеток, выстилающих слизистую оболочку кишечника. Так, клетки непрерывно поступают из ворсинок в просвет кишечника и пополняются практически с такой же скоростью в результате пролиферации клеток кишечных крипт и их последующего перемещения вверх в ворсинки. Становится все более и более очевидно, что контроль гибели клеток является таким же, если не более важным регулятором числа клеток и индекса пролиферации (19, 20). Пониженная скорость апоптоза зачастую связана с аномальным ростом, воспалением и неопластической трансформацией. Таким образом, пониженная пролиферация и/или повышенная гибель клеток могут приводить к уменьшению числа клеток, тогда как повышенная пролиферация и/или пониженная гибель клеток могут приводить к увеличению индекса пролиферации ткани кишечника (20), что может вызывать воспалительные заболевания и рак ЖК. Также известно, что пептиды урогуанилин и гуанилин стимулируют апоптоз путем регуляции клеточного ионного потока. Изменения в процессе апоптоза связаны с развитием опухоли до метастатического фенотипа. Хотя первичный рак желудочно-кишечного тракта (ЖК) локализуется в тонком кишечнике, толстой кишке и прямой кишке, он может метастазировать и распространяться в такие органы, как кости, лимфатические узлы, печень, легкие, брюшная полость, яичники и мозг. Посредством повышения оттока K+ и притока Са урогуанилин и родственные пептиды могут стимулировать гибель трансформированных клеток и, как следствие, ингибировать метастазы. Синдром раздраженного кишечника (IBS) и хроническая идиопатическая констипация представляют собой патологические состояния, которые вызывают сильный дискомфорт в кишечнике и нарушение его функционирования, однако в отличие от заболеваний IBD, таких как язвенный колит и болезнь Крона, IBS не вызывает серьезного воспаления или изменения ткани кишечника и, как полагают, не приводит к повышению риска рака ободочной и прямой кишки. Раньше воспалительная болезнь кишечника(IBD), глютеиновая болезнь и синдром раздраженного кишечника (IBS) считались совершенно разными заболеваниями. Однако данные, свидетельствующие о том, что при IBS наблюдается воспаление, хоть и незначительное, и что IBS и глютеиновая болезнь имеют общие симптомы, ставят под вопрос это утверждение. Острый бактериальный гастроэнтерит является сильнейшим из идентифицированных к настоящему моменту факторов риска последующего развития постинфекционного синдрома раздраженного кишечника. Клинические факторы риска включают пролонгированное острое расстройство и отсутствие рвоты. Генетически определенная чувствительность к воспалительным стимулам также может являться фактором риска для синдрома раздраженного кишечника. Лежащая в основе патофизиология включает повышенную кишечную проницаемость и небольшое воспаление, а также измененную подвижность и висцеральную чувствительность (27). Серотонин (5-гидрокситриптамин [5-НТ]) является ключевым модулятором пищеварительной функции и, как известно, играет ключевую роль в патофизиологии IBS. Показано, что активность 5-НТ регулируется cGMP (28). Основываясь на данном наблюдении, а также на других эффектах cGMP, авторы настоящего изобретения предположили, что агонисты GC-C можно использовать для лечения IBS. Поскольку среди населения западных стран широко распространены воспалительные состояния,которым сопутствует риск развития раковых поражений в воспаленной ткани, в частности в ткани кишечника, существует потребность в более эффективных способах лечения воспалительных состояний, в частности, желудочно-кишечного тракта. Настоящее изобретение основано на разработке агонистов гуанилатциклазного рецептора. Агонистами являются аналоги урогуанилина и бактериальные пептиды ST, которые обладают превосходными свойствами, такими как, например, высокая устойчивость к деградации по N- и С-концу под действием карбоксипептидаз и/или других протеолитических ферментов, присутствующих в стимулированном кишечном соке человека и в желудочном соке человека. Пептиды настоящего изобретения можно использовать для лечения любого состояния, которое отвечает на повышенные уровни внутриклеточного cGMP. Внутриклеточные уровни cGMP могут повышаться в результате увеличения внутриклеточной продукции cGMP и/или в результате ингибирования его деградации под действием cGMP-специфических фосфодиэстераз. Конкретные состояния, которые можно лечить или предотвращать с помощью таких пептидов, включают желудочно-кишечные заболевания, воспалительные заболевания, заболевания легких, рак, заболевания сердца, заболевания глаз, заболевания ротовой полости, заболевания крови, заболевания печени, заболевания кожи, заболевания простаты, заболевания эндокринной системы, повышенную подвижность желудочно-кишечного тракта и ожирение. К желудочно-кишечным заболеваниям относятся, например, синдром раздраженного кишечника (IBS), неязвенная диспепсия, хроническая кишечная псевдонепроходимость, функциональная диспепсия, псевдонепроходимость толстой кишки, дуоденогастральный рефлюкс, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь (GERD), воспаление, связанное с кишечной непроходимостью (например, послеоперационной кишечной непроходимостью), парез желудка, изжога (высокая кислотность в ЖК тракте), констипация (например, констипация, связанная с применением лекарственных средств, таких как опиоиды,средства против остеоартрита, средства против остеопороза; послеоперационная констипация, констипация, связанная с невропатическими нарушениями). Воспалительные заболевания включают воспаление тканей и органов, такое как воспаление почек (например, нефрит), воспаление желудочно-кишечной системы (например, болезнь Крона и язвенный колит); воспаление поджелудочной железы (например, панкреатит), воспаление легких (например, бронхит или астма) или воспаление кожи (например, псориаз,экзема). Заболевания легких включают, например, хроническое обструктивное заболевание легких(COPD) и фиброз. Рак включает канцерогенез тканей и органов, включая метастазирование, например рак желудочно-кишечного тракта (например, рак желудка, рак пищевода, рак поджелудочной железы,рак ободочной и прямой кишки, рак кишечника, рак анального отверстия, рак печени, рак желчного пузыря или рак толстой кишки; рак легких; рак щитовидной железы; рак кожи (например, меланома); рак ротовой полости; рак мочевых путей (например, рак мочевого пузыря или рак почек); рак крови (например, миелома или лейкоз) или рак простаты. К заболеваниям сердца относятся, например, застойная сердечная недостаточность, трахейная сердечная гипертония, высокий уровень холестерина или высокий уровень триглицеридов. Заболевания печени включают, например, цирроз и фиброз. Кроме того, агонистGC-C также можно использовать для облегчения регенерации печени после трансплантации. Заболевания глаз включают, например, повышенное внутриглазное давление, глаукому, дегенерацию сетчатки при синдроме сухих глаз, заболевания слезных желез или воспаление глаз. К заболеваниям кожи относится, например, ксероз. Заболевания ротовой полости включают, например, сухость во рту (ксеростомия), синдром Шегрена, заболевания десен (например, периодонтальное заболевание) и закупоривание или нарушение функционирования протоков слюнных желез. К заболеваниям простаты относится, например, доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ВРН). Заболевания эндокринной системы включают, например, сахарный диабет, гипертиреоз, гипотиреоз и кистозный фиброз. В одном аспекте настоящее изобретение относится к пептиду, состоящему, по существу, из аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO:2-54 и 57-98, а также к терапевтическим композициям, которые содержат такой пептид. Предпочтительные пептиды включают SEQ ID NO:8, 9, 10,58 и 59. Термин "состоящий, по существу, из" относится к пептидам, которые идентичны последовательности с указанным идентификационным номером, а также к другим последовательностям, которые незначительно отличаются от нее по структуре или функции. В соответствии с настоящим изобретением пептид значительно отличается от пептида SEQ ID NO:2-54 и 57-98, если их структуры различаются более чем на три аминокислоты или если активация клеточной продукции cGMP под действием данного пептида уменьшается более чем на 50% по сравнению с контрольным пептидом, таким как SEQ ID NO:1,55 или 56. Предпочтительно, по существу, подобные пептиды отличаются не более чем на две аминокислоты и в отношении активации продукции cGMP различаются не более чем на 25%. Пептидные последовательности настоящего изобретения содержат по меньшей мере 12 аминокислотных остатков, предпочтительно от 12 до 26 аминокислот в длину. Данные пептиды могут входить в состав фармацевтической композиции, находящейся в виде единичной дозированной формы, вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, эксципиентами или разбавителями. Термин "единичная дозированная форма" относится к отдельной системе доставки лекарственного средства, такой как таблетка, капсула, раствор или композиция для ингаляции. Количество присутствующего пептида должно быть достаточным для достижения положительного терапевтического эффекта после введения пациенту (как правило, оно находится в интервале от 100 мкг до 3 г). "Положительный терапевтический эффект" зависит от конкретного состояния, подлежащего лечению, и включает любое значимое улучшение, легко определяемое специалистом в данной области. Например, он может включать уменьшение воспаления, уменьшение объема полипов или опухо-3 020466 лей, уменьшение метастатического поражения и др. В следующем аспекте изобретение предлагает наряду с указанным агонистом гуанилатциклазного рецептора одновременно или последовательно вводить указанному пациенту эффективную дозу ингибитора cGMP-специфичной фосфодиэстеразы (cGMP-PDE). Ингибитор cGMP-PDE включает, например,сулдинак сульфон, запринаст и мотапизон, варденифил и силденафил. Кроме того, пептиды агонистыGC-C можно использовать в сочетании с ингибиторами транспортеров циклических нуклеотидов. Необязательно можно вводить и противовоспалительные средства. Противовоспалительные средства включают, например, стероиды и нестероидные противовоспалительные средства (NSAIDS). Другие признаки и преимущества настоящего изобретения станут очевидными из следующего подробного описания и формулы изобретения, в объем которых они входят. На фиг. 1 А приведена гистограмма, демонстрирующая биологическую активность SP-304 после инкубации со стимулированным желудочным соком (SGF) в течение указанных промежутков времени. Биологическую активность SP-304 определяют путем измерения его способности стимулировать синтезcGMP в клетках Т 84. После инкубации образцы анализируют на способность стимулировать синтезcGMP в клетках Т 84. Способность стимулировать cGMP в образце после инкубации с SGF в момент времени 0 мин принимают за 100%. Активность в образцах после инкубации с SGF в течение других промежутков времени рассчитывают как процент от активности в образце после инкубации в момент времени 0 мин. Результаты выражают в виде среднего значения от тройных повторовSD (стандартное отклонение). На фиг. 1 В схематически представлены результаты хроматографических анализов методом ВЭЖХ образцов SP-304 после инкубации с SGF в течение указанных периодов времени. После инкубации с SGF основной пик SP-304 остается неизменным, свидетельствуя об устойчивости пептида к расщеплению под действием SGF. Стрелки указывают момент элюирования SP-304. На фиг. 2 А приведена гистограмма, демонстрирующая синтез циклического GMP (ГМФ) в клетках Т 84 под действием образцов SP-304 после инкубации со стимулированным кишечным соком (SIF) в течение указанных промежутков времени. После инкубации образцы анализируют на способность стимулировать синтез cGMP в клетках Т 84. Способность стимулировать cGMP в образце после инкубации сSIF в момент времени 0 мин принимают за 100%. Активность в образцах после инкубации с SIF в течение других промежутков времени рассчитывают как процент от активности в образце после инкубации в момент времени 0 мин. Результаты выражают в виде среднего значения от тройных повторовSD. На фиг. 2 В схематически представлены результаты хроматографических анализов методом ВЭЖХ образцов SP-304 после инкубации с (А) инактивированным нагреванием SIF в течение 300 мин или с (В)SIF в течение 120 мин. После инкубации с SIF SP-304 полностью превращается в другой пептид, элюирующийся при 9,4 мин, который обозначают . Стрелки указывают положение SP-304. На фиг. 3 схематически изображены продукты деградации SP-304. На фиг. 4 показана стимуляция синтеза cGMP в клетках Т 84 под действием укороченных пептидовSP-304. Так, SP-338 имеет такую же пептидную последовательность, как и SP-304, за исключением того,что у него на С-конце отсутствует Leu. Подобным образом в последовательностях SP-327, SP-329 и SP331 на С-конце отсутствует Leu в отличие от исходных пептидов SP-326, SP-328 и SP-330. Пептиды анализируют на способность стимулировать синтез cGMP в клетках Т 84. Результаты выражают в виде среднего значения от двойных повторов. На фиг. 5 показана стимуляция синтеза cGMP в клетках Т 84 под действием SP-304 и подобных пептидов. Клетки подвергают воздействию аналогов пептидов в течение 30 мин, после чего в клеточных лизатах определяют уровень внутриклеточного cGMP. Результаты выражают в виде среднего значения от тройных повторовSD. На фиг. 6 показана стимуляция синтеза cGMP в клетках Т 84 под действием SP-339 и других пептидов. Клетки Т 84 подвергают воздействию указанного пептида в течение 30 мин, после чего в клеточных лизатах определяют уровень внутриклеточного cGMP. Результаты выражают в виде среднего значения от тройных повторовSD. На фиг. 7 А показана стабильность SP-333 при воздействии стимулированного кишечного сока (SIF) в течение указанных периодов времени. Контрольный образец, обозначенный С 120, получают путем инкубации пептидов с инактивированным нагреванием SIF. Образцы, полученные после инкубации, нагревают при 95 С в течение 5 мин, чтобы инактивировать пищеварительные ферменты, и затем используют для стимуляции синтеза циклического GMP в клетках Т 84. Способность стимулировать cGMP после инкубации в момент времени 0 мин принимают за 100% в каждой серии. Результаты выражают в виде среднего значения от тройных повторовSD. На фиг. 7 В показана стабильность SP-332 при воздействии стимулированного кишечного сока (SIF) в течение указанных периодов времени. Контрольный образец, обозначенный С 120, получают путем инкубации пептидов с инактивированным нагреванием SIF. Образцы, полученные после расщепления, нагревают при 95 С в течение 5 мин, чтобы инактивировать пищеварительные ферменты, и затем используют для стимуляции синтеза циклического GMP в клетках Т 84. Способность стимулировать cGMP по-4 020466 сле инкубации в момент времени 0 мин принимают за 100% в каждой серии. Результаты выражают в виде среднего значения от тройных повторовSD. На фиг. 7 С показана стабильность SP-304 при воздействии стимулированного кишечного сока (SIF) в течение указанных периодов времени. Контрольные образцы, обозначенные С 0 и С 60, получают путем инкубации пептидов с инактивированным нагреванием SIF. Образцы, полученные после расщепления,нагревают при 95 С в течение 5 мин, чтобы инактивировать пищеварительные ферменты, и затем используют для стимуляции синтеза циклического GMP в клетках Т 84. Способность стимулировать cGMP после инкубации в момент времени 0 мин принимают за 100% в каждой серии. Результаты выражают в виде среднего значения от тройных повторовSD. На фиг. 7D приведены результаты ВЭЖХ анализа образцов SP-304 после инкубации с SIF при 0 и 60 мин. Стрелка указывает момент элюирования пептида SP-304. Результаты отчетливо демонстрируют,что пик SP-304, элюирующийся при 14,3 мин, полностью исчезает, и появляются два новых пика при 7,4 и 10,3 мин. Эти новые пики могут быть обусловлены наличием продуктов распада пептида SP-304. На фиг. 7 Е приведены результаты ВЭЖХ анализа образцов SP-332 после инкубации с SIF при 0 и 120 мин. Стрелка указывает момент элюирования пептида SP-332. Результаты демонстрируют, что пептид SP-332, элюирующийся при 14,8 мин, не изменяется после инкубации с SIF, позволяя предположить,что SP-332 не чувствителен к протеолизу под действием протеаз, присутствующих в SIF. На фиг. 7F приведены результаты ВЭЖХ анализа образцов SP-333 после инкубации с SIF при 0 и 120 мин. Стрелка указывает момент элюирования пептида SP-333. Результаты демонстрируют, что пептид SP-333, элюирующийся при 14,8 мин, не изменяется после инкубации с SIF, позволяя предположить,что SP-333 не чувствителен к протеолизу под действием протеаз, присутствующих в SIF, при инкубации в течение 120 мин. На фиг. 8 показана стимуляция синтеза cGMP в клетках Т 84 под действием пэгилированных аналогов SP-333. Клетки Т 84 подвергают воздействию указанных пептидов в течение 30 мин, после чего в клеточных лизатах определяют уровни внутриклеточного cGMP. Результаты выражают в виде среднего значения от тройных повторовSD. На фиг. 9 показана стимуляция синтеза cGMP в клетках Т 84 под действием SP-304 (0,1 мкМ), используемого либо в отдельности, либо в комбинации с ингибиторами фосфодиэстеразы (PDE) сулиндаксульфоном (100 мкМ) или запринастом (100 мкМ). Клетки Т 84 подвергают воздействию разных комбинаций, как указано, в течение 30 мин, после чего в клеточных лизатах определяют уровни внутриклеточного cGMP. Результаты выражают в виде среднего значения от двойных повторов. На фиг. 10 показана стимуляция синтеза cGMP в клетках Т 84 под действием SP-304 (0,1 или 1,0 мкМ), используемого либо в отдельности, либо в комбинации с возрастающими концентрациями ингибиторов фосфодиэстеразы (PDE), как указано. Клетки Т 84 подвергают воздействию разных комбинаций,как указано, в течение 30 мин, после чего в клеточных лизатах определяют уровни внутриклеточногоcGMP. Результаты выражают в виде среднего значения от двойных повторов. На фиг. 11 показана стимуляция синтеза cGMP в клетках Т 84 под действием SP-333 (0,1 или 1,0 мкМ), используемого либо в отдельности, либо в комбинации с возрастающими концентрациями запринаста, как указано. Клетки Т 84 подвергают воздействию разных комбинаций, как указано, в течение 30 мин, после чего в клеточных лизатах определяют уровни внутриклеточного cGMP. Результаты выражают в виде среднего значения от двойных повторов. На фиг. 12 показана стимуляция синтеза cGMP в клетках Т 84 под действием SP-333 (0,1 мкМ), используемого либо в отдельности, либо в комбинации с возрастающими концентрациями сулиндаксульфона, как указано. Клетки Т 84 подвергают воздействию разных комбинаций, как указано, в течение 30 мин, после чего в клеточных лизатах определяют уровни внутриклеточного cGMP. Результаты выражают в виде среднего значения от двойных повторов. На фиг. 13 показана схема поддержания внутриклеточных концентраций cGMP. Внутриклеточные уровни cGMP можно поддерживать путем стимуляции синтеза посредством активации GC-С и путем ингибирования его деградации под действием cGMP-PDE. Так, комбинация агониста GC-C с ингибитором PDE может оказывать синергическое действие, увеличивая уровни cGMP в тканях и органах. Настоящее изобретение основано на разработке агонистов гуанилатциклазы-С (GC-C). Агонисты представляют собой аналоги урогуанилина и бактериальных пептидов ST, которые обладают превосходными свойствами, такими как, например, высокая устойчивость к деградации по N- и С-концу под действием карбоксипептидаз и/или других протеолитических ферментов, таких как ферменты, присутствующие в стимулированных кишечных соках человека и желудочных соках человека.GC-C экспрессируется на разных клетках, включая клетки желудочно-кишечного эпителия, а также на клетках тканей, отличных от тканей кишечника, которые включают ткани почек, легких, поджелудочной железы, гипофиза, надпочечников, развивающейся печени, сердца и мужских и женских репродуктивных органов (обзор опубликован в Vaandrager 2002 Mol. Cell Biochem. 230:73-83). GC-C является ключевым регулятором баланса жидкостей и электролитов в кишечнике и почках. В кишечнике после стимуляции GC-C вызывает повышение уровня cGMP в эпителии. Данное увеличение уровня cGMP вызывает уменьшение абсорбции воды и натрия и увеличение секреции хлоридных ионов и ионов калия,-5 020466 приводя к изменению транспорта жидкостей и электролитов в кишечнике и увеличению подвижности кишечника. Агонисты гуанилатциклазы-С настоящего изобретения, включающие SEQ ID NO:2-54 и SEQ IDNO:57-98, приведены ниже в табл. I и II. Агонисты гуанилатциклазы-С настоящего изобретения имеют общее название "пептиды GCRA". Таблица I Пептиды GCRA, описанные в данном описании, связывают гуанилатциклазу С (GC-C) и стимулируют внутриклеточную продукцию циклического гуанозинмонофосфата (cGMP). Необязательно пептиды GCRA индуцируют апоптоз. В некоторых аспектах пептиды GCRA стимулируют внутриклеточную продукцию cGMP на более высоком уровне, чем природные агонисты GC-C(например, урогуанилин, гуанилин и пептиды ST) и/или SP-304. Например, пептиды GCRA настоящего изобретения стимулируют 5, 10, 20, 30, 40, 50, 75, 90% или более внутриклеточного cGMP по сравнению с природными агонистами GC-C и/или SP-304. Термины "индуцированный и стимулированный" на протяжении данного описания используются как взаимозаменяемые. Пептиды GCRA, описанные в данном описании, являются более стабильными, чем природные агонисты GC-C и/или SP-304. Под более стабильным подразумевается пептид, который деградирует в меньшей степени и/или медленнее под действием стимулированного желудочно-кишечного сока и/или стимулированного кишечного сока, чем природные агонисты GC-C и/или SP-304. Например, деградация пептида GCRA настоящего изобретения составляет 2, 3, 5, 10, 15, 20, 30, 40, 50, 75, 90% или менее от деградации природных агонистов GC-C и/или SP-304. Пептиды GCRA, описанные в данном описании, оказывают терапевтическое действие при лечении широкого ряда нарушений и состояний, включающих, например, желудочно-кишечные заболевания, воспалительные заболевания, заболевания легких, рак, сердечные заболевания, заболевания глаз,заболевания ротовой полости, заболевания крови, заболевания печени, заболевания кожи, заболевания простаты, заболевания эндокринной системы, повышенную подвижность желудочно-кишечного тракта и ожирение. К желудочно-кишечным заболеваниям относятся, например, синдром раздраженного кишечника (IBS), неязвенная диспепсия, хроническая кишечная псевдонепроходимость, функциональная диспепсия, псевдонепроходимость толстой кишки, дуоденогастральный рефлюкс, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь (GERD), воспаление, связанное с кишечной непроходимостью (например, послеоперационной кишечной непроходимостью), парез желудка, изжога (высокая кислотность в ЖК тракте), констипация (например, констипация, связанная с применением лекарственных средств, таких как опиоиды,средства против остеоартрита, средства против остеопороза; послеоперационная констипация, констипация, связанная с невропатическими нарушениями). Воспалительные заболевания включают воспаление тканей и органов, такое как воспаление почек (например, нефрит), воспаление желудочно-кишечной системы (например, болезнь Крона и язвенный колит); воспаление поджелудочной железы (например, панкреатит), воспаление легких (например, бронхит или астма) или воспаление кожи (например, псориаз,экзема). Заболевания легких включают, например, хроническое обструктивное заболевание легких(COPD) и фиброз. Рак включает канцерогенез тканей и органов, включая метастазирование, например рак желудочно-кишечного тракта (например, рак желудка, рак пищевода, рак поджелудочной железы,рак ободочной и прямой кишки, рак кишечника, рак анального отверстия, рак печени, рак желчного пузыря или рак толстой кишки); рак легких; рак щитовидной железы; рак кожи (например, меланома); рак ротовой полости; рак мочевых путей (например, рак мочевого пузыря или рак почек); рак крови (например, миелома или лейкоз) или рак простаты. К заболеваниям сердца относятся, например, застойная сердечная недостаточность, трахейная сердечная гипертония, высокий уровень холестерина или высокий уровень триглицеридов. Заболевания печени включают, например, цирроз и фиброз. Заболевания глаз включают, например, повышенное внутриглазное давление, глаукому, дегенерацию сетчатки при синдроме сухих глаз, заболевания слезных желез или воспаление глаз. К заболеваниям кожи относится, например, ксероз. Заболевания ротовой полости включают, например, сухость во рту (ксеростомия), синдром Шегрена, заболевания десен (например, периодонтальное заболевание) и закупоривание или нарушение функционирования протоков слюнных желез. К заболеваниям простаты относится, например,доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ВРН). Заболевания эндокринной системы включают, например, сахарный диабет, гипертиреоз, гипотиреоз и кистозный фиброз. Как использовано в данном описании, термин "гуанилатциклаза С (GC-C)" относится к классу рецепторов, сопряженных с гуанилатциклазой С, которые присутствуют на клетках любых типов, и с которыми связываются агонистические пептиды настоящего изобретения или природные агонисты, описанные в данном описании. Как использовано в данном описании, термин "гуанилатциклазный рецептор кишечника" относится к рецептору, присутствующему исключительно на эпителиальных клетках, выстилающих слизистую оболочку ЖК. Полагают, что урогуанилин, гуанилин и пептиды ST могут связываться с данными рецепторами и вызывать апоптоз. Не исключается возможность, что для каждого агонистического пептида существуют разные рецепторы. Следовательно, данный термин относится к классу гуанилатциклазных рецепторов на эпителиальных клетках, выстилающих слизистую оболочку ЖК. Как использовано в данном описании, термин "агонист GCR" относится к пептидам и/или другим соединениям, которые связываются с гуанилатциклазой С кишечника и стимулируют транспорт жидкостей и электролитов. Данный термин также охватывает фрагменты и про-пептиды, которые связываются с GC-C и стимулируют секрецию жидкостей и воды. Как использовано в данном описании, термин "практически эквивалентный" относится к пептиду,который имеет аминокислотную последовательность, эквивалентную последовательности связывающего домена, в которой некоторые остатки могут быть удалены или заменены другими аминокислотными остатками без уменьшения способности пептида связываться с гуанилатциклазным рецептором кишечника и стимулировать транспорт жидкостей и электролитов. Добавление носителей (например, забуференного фосфатом физиологического раствора, или PBS) и других компонентов к композиции настоящего изобретения относится к сфере компетенции специалистов в данной области. Помимо соединения такие композиции могут содержать фармацевтически прием-8 020466 лемые носители и другие ингредиенты, которые заведомо облегчают введение и/или повышают поглощение. В соответствии с настоящим изобретением также можно использовать другие составы композиций, такие как микросферы, наночастицы, липосомы и иммунологические системы. Другие примеры включают композиции, содержащие полимеры (например, 20% мас./об. полиэтиленгликоля) или целлюлозу либо растворимые в кишечнике композиции. В основе настоящего изобретения лежит несколько концепций. Первая заключается в том, что существует cGMP-зависимый механизм, который регулирует баланс между пролиферацией и апоптозом клеток, и что уменьшение уровня cGMP вследствие дефицита урогуанилина/гуанилина и/или вследствие активации cGMP-специфичных фосфодиэстераз является ранней и ключевой стадией неопластической трансформации. Вторая концепция заключается в том, что cGMP-зависимый механизм осуществляет понижающую регуляцию высвобождения арахидоновой кислоты из мембранных фосфолипидов, которое приводит к активации цитоплазматической фосфолипазы А 2 (cPLA2), циклооксигеназы-2 (СОХ-2) и,возможно, 5-липоксигеназы (5-LO) в процессе воспаления, приводя к снижению уровней простагландинов и лейкотриенов, и что повышение внутриклеточного уровня cGMP, как следствие, может вызывать противовоспалительный эффект. Кроме того, полагают, что cGMP-зависимый механизм участвует в регуляции провоспалительного процесса. Следовательно, путем повышения внутриклеточных уровнейcGMP можно лечить и подавлять нарушения, включающие желудочно-кишечные заболевания, воспалительные заболевания, заболевания легких, рак, заболевания сердца, заболевания глаз, заболевания ротовой полости, заболевания крови, заболевания печени, заболевания кожи, заболевания простаты, заболевания эндокринной системы, повышенную подвижность желудочно-кишечного тракта и ожирение. К желудочно-кишечным заболеваниям относятся, например, синдром раздраженного кишечника (IBS),неязвенная диспепсия, хроническая кишечная псевдонепроходимость, функциональная диспепсия, псевдонепроходимость толстой кишки, дуоденогастральный рефлюкс, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь (GERD), воспаление, связанное с кишечной непроходимостью (например, послеоперационной кишечной непроходимостью), парез желудка, изжога (высокая кислотность в ЖК тракте), констипация (например, констипация, связанная с применением лекарственных средств, таких как опиоиды, средства против остеоартрита, средства против остеопороза; послеоперационная констипация, констипация, связанная с невропатическими нарушениями). Воспалительные заболевания включают воспаление тканей и органов, такое как воспаление почек (например, нефрит), воспаление желудочно-кишечной системы (например, болезнь Крона и язвенный колит); воспаление поджелудочной железы (например, панкреатит),воспаление легких (например, бронхит или астма) или воспаление кожи (например, псориаз, экзема). Заболевания легких включают, например, COPD и фиброз. Рак включает канцерогенез тканей и органов,включая метастазирование, например рак желудочно-кишечного тракта (например, рак желудка, рак пищевода, рак поджелудочной железы, рак ободочной и прямой кишки, рак кишечника, рак анального отверстия, рак печени, рак желчного пузыря или рак толстой кишки); рак легких; рак щитовидной железы; рак кожи (например, меланома); рак ротовой полости; рак мочевых путей (например, рак мочевого пузыря или рак почек); рак крови (например, миелома или лейкоз) или рак простаты. К заболеваниям сердца относятся, например, застойная сердечная недостаточность, трахейная сердечная гипертония, высокий уровень холестерина или высокий уровень триглицеридов. Заболевания печени включают, например,цирроз и фиброз. Заболевания глаз включают, например, повышенное внутриглазное давление, глаукому, дегенерацию сетчатки при синдроме сухих глаз, заболевания слезных желез или воспаление глаз. К заболеваниям кожи относится, например, ксероз. Заболевания ротовой полости включают, например,сухость во рту (ксеростомия), синдром Шегрена, заболевания десен (например, периодонтальное заболевание) и закупоривание или нарушение функционирования протоков слюнных желез. К заболеваниям простаты относится, например, доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ВРН). Заболевания эндокринной системы включают, например, сахарный диабет, гипертиреоз, гипотиреоз и кистозный фиброз. Без связи с какой-либо теорией авторы подчеркивают тот факт, что транспорт ионов через цитоплазматическую мембрану, на который оказывают влияние средства, изменяющие концентрацию cGMP,может являться важным регулятором баланса пролиферации и апоптоза клеток. Показано, что урогуанилин стимулирует отток K+, отток Са и транспорт воды в желудочно-кишечном тракте (3). Кроме того,показано, что предсердный натрийуретический пептид (ANP), который также связывается со специфическим гуанилатциклазным рецептором, индуцирует апоптоз мезангиальных клеток крыс и сердечных миоцитов по механизму, опосредованному cGMP (21-24). Связывание агонистов настоящего изобретения с гуанилатциклазным рецептором стимулирует продукцию cGMP. Такое взаимодействие лиганда с рецептором посредством активации каскада cGMPзависимых протеинкиназ и CFTR индуцирует апоптоз в клетках-мишенях. Следовательно, введение новых пептидов, имеющих последовательности SEQ ID NO:2-54 и SEQ ID NO:57-98, как показано в табл. I и II, или пептидов, подобных урогуанилину, или гуанилина, или пептида ST E. coli, можно использовать для предотвращения или, по меньшей мере, замедления появления таких заболеваний, как желудочнокишечные заболевания, воспалительные заболевания, заболевания легких, рак, сердечные заболевания,заболевания глаз, заболевания ротовой полости, заболевания крови, заболевания печени, заболевания кожи, заболевания простаты, заболевания эндокринной системы, повышенная подвижность желудочнокишечного тракта и ожирение. К желудочно-кишечным заболеваниям относятся, например, синдром раздраженного кишечника (IBS), неязвенная диспепсия, хроническая кишечная псевдонепроходимость,функциональная диспепсия, псевдонепроходимость толстой кишки, дуоденогастральный рефлюкс, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь (GERD), воспаление, связанное с кишечной непроходимостью (например, послеоперационной кишечной непроходимостью), парез желудка, изжога (высокая кислотность в ЖК тракте), констипация (например, констипация, связанная с применением лекарственных средств,таких как опиоиды, средства против остеоартрита, средства против остеопороза; послеоперационная констипация, констипация, связанная с невропатическими нарушениями). Воспалительные заболевания включают воспаление тканей и органов, такое как воспаление почек (например, нефрит), воспаление желудочно-кишечной системы (например, болезнь Крона и язвенный колит); воспаление поджелудочной железы (например, панкреатит), воспаление легких (например, бронхит или астма) или воспаление кожи(например, псориаз, экзема). Заболевания легких включают, например, хроническое обструктивное заболевание легких (COPD) и фиброз. Рак включает канцерогенез тканей и органов, включая метастазирование, например рак желудочно-кишечного тракта (например, рак желудка, рак пищевода, рак поджелудочной железы, рак ободочной и прямой кишки, рак кишечника, рак анального отверстия, рак печени,рак желчного пузыря или рак толстой кишки); рак легких; рак щитовидной железы; рак кожи (например,меланома); рак ротовой полости; рак мочевых путей (например, рак мочевого пузыря или рак почек); рак крови (например, миелома или лейкоз) или рак простаты. К заболеваниям сердца относятся, например,застойная сердечная недостаточность, трахейная сердечная гипертония, высокий уровень холестерина или высокий уровень триглицеридов. Заболевания печени включают, например, цирроз и фиброз. Заболевания глаз включают, например, повышенное внутриглазное давление, глаукому, дегенерацию сетчатки при синдроме сухих глаз, заболевания слезных желез или воспаление глаз. К заболеваниям кожи относится, например, ксероз. Заболевания ротовой полости включают, например, сухость во рту (ксеростомия), синдром Шегрена, заболевания десен (например, периодонтальное заболевание) и закупоривание или нарушение функционирования протоков слюнных желез. К заболеваниям простаты относится,например, доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ВРН). Заболевания эндокринной системы включают, например, сахарный диабет, гипертиреоз, гипотиреоз и кистозный фиброз. Урогуанилин представляет собой циркулирующий пептидный гормон с натрийуретической активностью, который, как обнаружено, стимулирует транспорт жидкостей и электролитов подобно другому семейству термостабильных энтеротоксинов (пептиды ST), секретируемых патогенными штаммами Е.coli и другими кишечными бактериями, которые могут активировать гуанилатциклазный рецептор и вызывать секреторную диарею. В отличие от бактериальных пептидов ST связывание урогуанилина с гуанилатциклазным рецептором зависит от физиологического рН в кишечнике. Следовательно, можно предположить, что урогуанилин регулирует транспорт жидкостей и электролитов в рН-зависимой манере, не вызывая тяжелой диареи. Пептиды GCRA. В одном аспекте изобретение предлагает пептид GCRA. Пептиды GCRA являются аналогами урогуанилина и бактериального пептида ST. Термин "пептид" не подразумевает какую-либо конкретную длину. В некоторых вариантах осуществления пептид GCRA содержит менее 25 аминокислот, например не более 20, 15, 14, 13, 12, 11, 10 или 5 аминокислот в длину. Пептиды GCRA могут представлять собой полимеры 1-аминокислот, D-аминокислот или их сочетаний. Например, в других вариантах осуществления пептиды представляют собой D-ретроинверсопептиды. Термин "ретро-инверсоизомер" относится к изомеру линейного пептида, который имеет обратное направление последовательности и в котором все аминокислотные остатки имеют инвертированную хиральность; см., например, Jameson et al., Nature, 368, 744-746 (1994); Brady et al., Nature, 368,692-693 (1994). Конечный результат объединения D-энантиомеров и обратного синтеза заключается в том, что положения карбонильных групп и аминогрупп меняются, но положение боковых групп при каждом альфа-атоме углерода сохраняется. Если специально не указано иное, предполагается, что любую конкретную 1-аминокислотную последовательность настоящего изобретения можно преобразовать в Dретро-инверсопептид путем синтеза последовательности, обратной соответствующей нативной 1 аминокислотной последовательности. Например, пептид GCRA включает последовательность SEQ IDNO:2-54 и SEQ ID NO:57-98. В других вариантах осуществления пептид GCRA включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:45-54 и SEQ ID NO:87-98, где пептид индуцирует продукцию cGMP в клетке. В других вариантах осуществления пептид GCRA настоящего изобретения включает аминокислотную последовательность, соответствующую формулам I-IX (например, SEQ ID NO:45-54), при условии, что последовательность пептида GCRA отличается от SEQ ID NO:1. В следующих вариантах осуществления пептид GCRA настоящего изобретения включает аминокислотную последовательность, соответствующую формулам X-XVII (например, SEQ ID NO:87-98), при условии, что последовательность пептида GCRA отличается от SEQ ID NO:55 или SEQ ID NO:56. Под индуцированием продукции cGMP подразумевается, что пептид GCRA индуцирует продукцию внутриклеточного cGMP. Уровень внутриклеточного cGMP измеряют с помощью известных в данной области методов. Например, пептид GCRA настоящего изобретения стимулирует 5, 10, 20, 30, 40, 50, 75, 90% или более внутриклеточного cGMP по сравнению с природными агонистами GC-С. Необязательно, пептиды GCRA настоящего изобретения стимулируют 5, 10, 20, 30, 40, 50, 75, 90% или более внутриклеточного cGMP по сравнению с SP-304(SEQ ID NO:1). В следующих вариантах осуществления пептид GCRA стимулирует апоптоз, т.е. программируемую гибель клетки, или активирует регулятор трансмембранной проводимости при кистозном фиброзе (CFTR). В некоторых вариантах осуществления пептиды GCRA, описанные в данном описании,являются более стабильными, чем природные агонисты GC-C и/или SP-304 (SEQ ID NO:1), SP-339 (SEQID NO:55) или SP-340 (SEQ ID NO:56). Под более стабильным подразумевается пептид, который деградирует в стимулированном желудочном соке и/или в стимулированном кишечном соке в меньшей степени и/или более медленно, чем природные агонисты GC-C и/или SP-304. Например, деградация пептидаGCRA настоящего изобретения составляет 2, 3, 5, 10, 15, 20, 30, 40, 50, 75, 90% или меньше от деградации природных агонистов GC-C и/или SP-304, SP-339 или SP-340. Как использовано в данном описании, PEG3, 3 PEG, означает полиэтиленгликоль, который содержит аминоэтилоксиэтилоксиуксусную кислоту (АееА). Как использовано в данном описании (например,в формулах I-XVII, SEQ ID NO:45-54 и SEQ ID NO:87-98), Хаа означает любую природную аминокислоту, неприродную аминокислоту или аналог аминокислоты; Маа означает цистеин (Cys), пеницилламин(Pen), гомоцистеин или 3-меркаптопролин; Xaan1 означает аминокислотную последовательность любой природной аминокислоты, неприродной аминокислоты или аналога аминокислоты, длина которой составляет один, два или три остатка; Xaan2 означает аминокислотную последовательность любой природной аминокислоты, неприродной аминокислоты или аналога аминокислоты, длина которой составляет ноль или один остаток; и Xaan3 означает аминокислотную последовательность любой природной аминокислоты, неприродной аминокислоты или аналога аминокислоты, длина которой составляет ноль, один,два, три, четыре, пять или шесть остатков. Кроме того, любая аминокислота, обозначаемая Хаа, Xaan1,Xaan2 или Xaan3, может представлять собой 1-аминокислоту, D-аминокислоту, метилированную аминокислоту или любую их комбинацию. Необязательно любой пептид GCRA, представленный формулами IVII, может содержать один или несколько остатков полиэтиленгликоля по N-, С-концу или по обоим концам. Примеры полиэтиленгликоля включают аминоэтилоксиэтилоксиуксусную кислоту и ее полимеры. В некоторых вариантах осуществления пептиды GCRA включают пептиды, содержащие аминокислотную последовательность формулы I, где по меньшей мере одна аминокислота формулы I представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту и/или аминокислота в положении 16 представляет собой серин. Предпочтительно аминокислота в положении 16 формулы I представляет собой Dаминокислоту или метилированную аминокислоту. Например, аминокислота в положении 16 формулы I представляет собой d-лейцин или d-серин. Необязательно, одна или несколько аминокислот в положениях 1-3 формулы I представляют собой D-аминокислоты или метилированные аминокислоты либо комбинацию D-аминокислот и метилированных аминокислот. Например, Asn1, Asp2 или Glu3 (или их комбинация) формулы I представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту. Предпочтительно аминокислота в положении Хаа 6 формулы I представляет собой лейцин, серин или тирозин. В альтернативных вариантах осуществления пептиды GCRA включают пептиды, содержащие аминокислотную последовательность формулы II, где по меньшей мере одна аминокислота формулы II представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту. Предпочтительно аминокислота, обозначаемая Xaan2 в формуле II, представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту. В некоторых вариантах осуществления аминокислота, обозначаемая Xaan2 в формуле II, представляет собой лейцин, d-лейцин, серин или d-серин. Предпочтительно одна или несколько аминокислот,обозначаемых Xaan1 в формуле II, представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту. Предпочтительно аминокислота в положении Хаа 6 формулы II представляет собой лейцин, серин или тирозин. В некоторых вариантах осуществления пептиды GCRA включают пептиды, содержащие аминокислотную последовательность формулы III, где 1) по меньшей мере одна аминокислота формулы I представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту, и/или 2) Маа отличается от цистеина. Предпочтительно аминокислота, обозначаемая Xaan2 в формуле III, представляет собой Dаминокислоту или метилированную аминокислоту. В некоторых вариантах осуществления аминокислота, обозначаемая Xaan2 в формуле III, представляет собой лейцин, d-лейцин, серин или d-серин. Предпочтительно одна или несколько аминокислот, обозначаемых Xaan1 в формуле III, представляет собой Dаминокислоту или метилированную аминокислоту. Предпочтительно аминокислота в положении Хаа 6 формулы III представляет собой лейцин, серин или тирозин. В других вариантах осуществления пептиды GCRA включают пептиды, содержащие аминокислотную последовательность формулы IV, где по меньшей мере одна аминокислота формулы IV представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту, и/или 2) Маа отличается от цистеина. Предпочтительно Xaan2 в формуле IV представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту. В некоторых вариантах осуществления аминокислота, обозначаемая Xaan2 в формуле IV,представляет собой лейцин, d-лейцин, серин или d-серин. Предпочтительно одна или несколько амино- 11020466 кислот, обозначаемых Xaan1 в формуле IV, представляют собой D-аминокислоты или метилированные аминокислоты. Предпочтительно аминокислота, обозначаемая Хаа 6 в формуле IV, представляет собой лейцин, серин или тирозин. В следующих вариантах осуществления пептиды GCRA включают пептиды, содержащие аминокислотную последовательность формулы V, где по меньшей мере одна аминокислота формулы V представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту. Предпочтительно аминокислота в положении 16 формулы V представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту. Например, аминокислота в положении 16 (т.е. Хаа 16) формулы V представляет собой d-лейцин или d-серин. Необязательно одна или несколько аминокислот в положениях 1-3 формулы V представляют собой D-аминокислоты или метилированные аминокислоты либо комбинацию D-аминокислот и метилированных аминокислот. Например, Asn1, Asp2 или Glu3 (или их комбинация) в формуле V представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту. Предпочтительно аминокислота, обозначаемая Хаа 6 в формуле V, представляет собой лейцин, серин или тирозин. В дополнительных вариантах осуществления пептиды GCRA включают пептиды, содержащие аминокислотную последовательность формул VI, VII, VIII, IX. Предпочтительно аминокислота в положении 6 формул VI, VII, VIII, IX представляет собой лейцин, серин или тирозин. В некоторых аспектах аминокислота в положении 16 формул VI, VII, VIII, IX представляет собой лейцин или серин. Предпочтительно аминокислота в положении 16 формулы V представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту. В предпочтительных вариантах осуществления пептид GCRA представляет собой SP-332 (SEQ IDNO:8), SP-333 (SEQ ID NO:9) или SP-334 (SEQ ID NO:10). В дополнительных вариантах осуществления пептиды GCRA включают пептиды, содержащие аминокислотную последовательность формул X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI или XVII. Необязательно одна или несколько аминокислот формул X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI или XVII представляют собой Dаминокислоты или метилированные аминокислоты. Предпочтительно аминокислота на карбоксиконце пептидов, соответствующих формулам X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI или XVII, представляет собой Dаминокислоту или метилированную аминокислоту. Например, аминокислота на карбоксиконце пептидов, соответствующих формулам X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI или XVII, представляет собой Dтирозин. Предпочтительно аминокислота, обозначаемая Хаа 6 в формуле XIV, представляет собой тирозин,фенилаланин или серин. Наиболее предпочтительно аминокислота, обозначаемая Хаа 6 в формуле XIV,представляет собой фенилаланин или серин. Предпочтительно аминокислота, обозначаемая Хаа 4 в формулах XV, XVI или XVII, представляет собой тирозин, фенилаланин или серин. Наиболее предпочтительно аминокислота в положении Хаа 4 формулы V, XVI или XVII представляет собой фенилаланин или серин. В предпочтительных вариантах осуществления пептид GCRA представляет собой SP-353 (SEQ IDNO:58) или SP-354 (SEQ ID NO:59). В некоторых вариантах осуществления одна или несколько аминокислот в пептидах GCRA могут быть заменены неприродными аминокислотами или аналогами природных или неприродных аминокислот. Существует много аминокислот, помимо стандартных 20 (Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His,Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr и Val). Некоторые аминокислоты являются природными,другие - неприродными (см., например, Hunt, The Non-Protein Amino Acids: In Chemistry and Biochemistryof the Amino Acids, Barrett, Chapman and Hall, 1985). Например, ароматическую аминокислоту можно заменить 3,4-дигидрокси-L-фенилаланином, 3-иод-L-тирозином, трииодтиронином, L-тироксином, фенилглицином (Phg) или нортирозином (norTyr). Phg и norTyr, а также другие аминокислоты, включая Phe и Tyr, можно заменить, например, галогеном, -СН 3, -ОН, -CH2NH3, -C(О)H, -СН 2 СН 3, -CN, -CH2CH2CH3,-SH или другой группой. Любую аминокислоту можно заменить ее D-аналогом. Что касается неприродных аминокислот или аналогов природных и неприродных аминокислот, в полипептидах и агонистах, описанных в данном описании, ряд замен можно осуществлять поодиночке или в комбинации. Например, остатки глутамина можно заменить гамма-гидрокси-Glu или гаммакарбокси-Glu. Остатки тирозина можно заменить альфа-замещенными аминокислотами, такими как 1 альфа-метилфенилаланин, или другими аналогами, такими как 3-амино-Tyr; Tyr(CH3); Tyr(PO3(СН 3)2);Tyr(SO3H); бета-циклогексил-Ala; бета-(1-циклопентенил)-Ala; бета-циклопентил-Ala; бетациклопропил-Ala; бета-хинолил-Ala; бета-(2-тиазолил)-Ala; бета-(триазол-1-ил)-Ala; бета-(2-пиридил)Ala; бета-(3-пиридил)-Ala; амино-Phe; фтор-Phe; циклогексил-Gly; tBu-Gly; бета-(3-бензотиенил)-Ala; бета-(2-тиенил)-Ala; 5-метил-Trp и А-метил-Trp. Остатки пролина можно заменить гомопро(1 пипеколиновой кислотой); гидрокси-Pro; 3,4-дегидро-Pro; 4-фтор-Pro или альфа-метил-Pro либоN(альфа)-С(альфа)-циклизованными аналогами аминокислот со структурой n=0, 1, 2, 3. Остатки аланина можно заменить альфа-замещенными или N-метилированными аминокислотами, такими как альфааминоизомасляная кислота (aib), L/D-альфа-этилаланин (L/D-изовалин), L/D-метилвалин или L/D-альфаметиллейцин, или неприродными аминокислотами, такими как бета-фтор-Ala. Аланин также можно за- 12020466 менить с: n равен 0, 1, 2, 3. Остатки глицина можно заменить альфа-аминоизомасляной кислотой (aib) или L/D-альфа-этилаланином (L/D-изовалин). Другие примеры неприродных аминокислот включают неприродный аналог тирозина; неприродный аналог глутамина; неприродный аналог фенилаланина; неприродный аналог серина; неприродный аналог треонина; алкил, арил, ацил, азидо, циано, галоген, гидразин, гидразид, гидроксил, алкенил, алкинил, простой эфир, тиол, сульфонил, селено, сложный эфир, тиокислоту, борат, боронат, фосфо, фосфоно, фосфин, гетероцикл, енон, имин, альдегид, гидроксиламин, кето или амино замещенные аминокислоты или любую их комбинацию; аминокислоты, содержащие фотоактивируемый кросс-линкер; спинмеченые аминокислоты; флуоресцентные аминокислоты; аминокислоты с новой функциональной группой; аминокислоты, которые ковалентно или нековалентно связаны с другой молекулой; металлсвязывающие аминокислоты; аминокислоты, амидированные по участку, который в природе не амидируется, металл-содержащие аминокислоты; радиоактивные аминокислоты; фотоэкранирующие и/или фотоизомеризуемые аминокислоты; аминокислоты, содержащие биотин или аналог биотина; гликозилированные или модифицированные углеводом аминокислоты; кето-содержащие аминокислоты; аминокислоты, содержащие полиэтиленгликоль или простой полиэфир; аминокислоты, замещенные тяжелыми атомами (например, аминокислоты, содержащие дейтерий, тритий, 13C, 15N или 18 О); химически расщепляемые или фоторасщепляемые аминокислоты; аминокислоты с удлиненной боковой цепью; аминокислоты, содержащие токсичную группу; аминокислоты, замещенные сахаром, например замещенный сахаром серин или т.п.; аминокислоты, содержащие сахар, присоединенный к атому углерода; аминокислоты с окислительно-восстановительным потенциалом; кислоты, содержащие -гидроксильную группу; аминокислоты, содержащие аминотиокислоту; ,-дизамещенные аминокислоты; -аминокислоты; циклические аминокислоты, отличные от пролина; О-метил-L-тирозин; L-3-(2-нафтил)аланин; 3 метилфенилаланин; п-ацетил-L-фенилаланин; O-4-аллил-L-тирозин; 4-пропил-L-тирозин; три-О-ацетилGlcNAc -серин; L-допа; фторированный фенилаланин; изопропил-L-фенилаланин; п-азидо-Lфенилаланин; п-ацил-L-фенилаланин; п-бензоил-L-фенилаланин; L-фосфосерин; фосфоносерин; фосфонотирозин; п-иодфенилаланин; 4-фторфенилглицин; п-бромфенилаланин; п-амино-L-фенилаланин; изопропил-L-фенилаланин; L-3-(2-нафтил)аланин; D-3-(2-нафтил)аланин (dNal); амино-, изопропил- или Оаллил-содержащие аналоги фенилаланина; допа, О-метил-L-тирозин; гликозилированные аминокислоты; п-(пропаргилокси)фенилаланин; диметиллизин; гидроксипролин; меркаптопропионовую кислоту; метиллизин; 3-нитротирозин; норлейцин; пироглутаминовую кислоту; Z (карбобензоксил); -ацетиллизин;-аланин; аминобензоильные производные; аминомасляную кислоту (Abu); цитруллин; аминогексановую кислоту; аминоизомасляную кислоту (AIB); циклогексилаланин; d-циклогексилаланин; гидроксипролин; нитроаргинин; нитрофенилаланин; нитротирозин; норалин; октагидроиндол карбоксилат; орнитин (Orn); пеницилламин (PEN); тетрагидроизохинолин; ацетамидометил-защищенные аминокислоты и пегилированные аминокислоты. Другие примеры неприродных аминокислот и аналогов аминокислот можно найти в U.S.20030108885, U.S.20030082575, US20060019347 (абзацы 410-418), а также приведенных там ссылках. Полипептиды настоящего изобретения могут включать другие модификации, включая описанные в US20060019347, абзац 589. Примеры пептидов GCRA, содержащих неприродные аминокислоты, включают, например, SP-368 и SP-369. В некоторых вариантах осуществления аминокислоту можно заменить природной, неэссенциальной аминокислотой, такой как таурин. Альтернативно, пептиды GCRA представляют собой циклические пептиды. Циклические пептидыGCRA получают способами, известными в данной области. Например, макроциклизацию часто проводят путем образования амидной связи между N- и С-концами пептида, между боковой цепью и N- или Сконцом [например, с использованием K3Fe (CN)6 при рН 8,5] (Samson et al., Endocrinology, 137: 5182-5185(1996, или между двумя боковыми цепями аминокислот, таких как цистеин; см., например, DeGrado,Adv. Protein Chem., 39: 51-124 (1988). В других аспектах пептиды GCRA представляют собой [4,12; 7,15] бициклы. В некоторых пептидах GCRA один или оба из одной или обеих пар остатков Cys, которые обычно образуют дисульфидную связь, можно заменить на гомоцистеин, пеницилламин, 3-меркаптопролин (Kolodziej et al. 1996 Int. J. Pept. Protein Res. 48:274); ,-диметилцистеин (Hunt et al. 1993 Int. J. Pept. ProteinRes. 42:249) или диаминопропионовую кислоту (Smith et al. 1978 J. Med. Chem. 2 1:117) с получением альтернативных внутренних поперечных связей в положениях обычных дисульфидных связей. Кроме того, одну или несколько дисульфидных связей можно заменить альтернативными ковалентными поперечными связями, такими как амидная связь (-СН 2 СН(О)NHCH2- или -CH2NHCH(О)СН 2-),сложноэфирная связь, тиосложноэфирная связь, лактамовый мостик, карбамоильная связь, мочевиноподобная связь, тиомочевиноподобная связь и фосфонатно-сложноэфирная связь, алкильная связь(-СН 2 СН 2 СН 2 СН 2-), алкенильная связь (-СН 2 СН=СНСН 2-), простая эфирная связь (-СН 2 СН 2 ОСН 2- или СН 2 ОСН 2 СН 2-), простая тиоэфирная связь (-CH2CH2SCH2- или CH2SCH2CH2-), аминная связь(-CH2CH2NHCH2- или -CH2NHCH2CH2-) или тиоамидная связь (-СН 2 СН(S)HNHCH2- или Например, Ledu et al. (Proc Nat'l Acad. Sci. 100:11263-78, 2003) описывают способы получения лактамных и амидных поперечных связей. Примеры пептидов GCRA, которые содержат лактамный мостик,включают, например, SP-370. Пептиды GCRA могут иметь одну или несколько традиционных пептидных связей, замененных альтернативными связями. Такие замены могут увеличивать стабильность полипептида. Например, замена полипептидной связи между аминоконцевым остатком и ароматическим остатком (например, Tyr,Phe, Trp) на альтернативную связь может уменьшить расщепление под действием карбоксипептидаз и увеличить период полужизни в пищеварительном тракте. Связи, которые могут заменять пептидные связи, включают ретро-инверсо связь (C(O)-NH вместо NH-C(O); восстановленная амидная связь (NH-CH2); тиометиленовая связь (S-CH2 или CH2-S); оксометиленовая связь (O-СН 2 или СН 2-O); этиленовая связь(СН 2-СН 2); тиоамидная связь (C(S)-NH); транс-олефиновая связь (СН=СН); фтор-замещенная трансолефиновая связь (CF=CH); кетометиленовая связь (C(O)-CHR или CHR-C(О), где R означает Н или СН 3; и фтор-кетометиленовая связь (С (О)-CFR или CFR-C(O), где R означает Н или F, или СН 3. Пептиды GCRA можно модифицировать с помощью стандартных методов. Модификации можно осуществлять по амино (N-), карбокси (С-) концам, внутри или в комбинации с вышеуказанными положениями. В одном аспекте настоящего описания полипептид может содержать модификации нескольких типов. Модификации включают, но без ограничения: ацетилирование, амидирование, биотинилирование,циннамоилирование, фарнезилирование, формилирование, пиристоилирование, пальмитоилирование,фосфорилирование (Ser, Tyr или Thr), стеароилирование, сукцинилирование, сульфурилирование и циклизацию (посредством дисульфидных мостиков или амидную циклизацию), а также модификацию с использованием Cys3 или Cys5. Описанные в данном описании пептиды GCRA также можно модифицировать с использованием 2,4-динитрофенила (DNP), DNP-лизина, 7-амино-4-метилкумарина (АМС), флуоресцеина, NBD (7-нитробенз-2-окса-1,3-диазола), п-нитроанилида, родамина В, EDANS (5-2 аминоэтил)амино)нафталин-1-сульфоновой кислоты), дабцила, дабсила, дансила, техасового красного,FMOC и Tamra (тетраметилродамина). Описанные в данном описании пептиды GCRA также можно конъюгировать, например, с полиэтиленгликолем (PEG); алкильными группами (например, С 1-С 20 линейными или разветвленными алкильными группами); жирно-кислотными радикалами; сочетаниямиPEG, алкильных групп и жирно-кислотных радикалов (см. патент США 6309633; Soltero et al., 2001 Innovations in Фармацевтической Technology 106-110); BSA и KLH (гемоцианином лимфы улитки). Добавление PEG и других полимеров, пригодных для модификации полипептидов настоящего изобретения, описано в US2006019347, раздел IX. В настоящее изобретение также включены пептиды, биологически или функционально эквивалентные пептидам, описанным в данном описании. Термин "биологически эквивалентный" или "функционально эквивалентный" относится к композициям настоящего изобретения, которые способны проявлять некоторые или все модуляторные эффекты в отношении продукции cGMP. Пептиды GCRA также могут включать производные пептидов GCRA, представляющие собой гибридные и модифицированные формы пептидов GCRA, в которых некоторые аминокислоты удалены или заменены и присутствуют модификации, такие как замена одной или нескольких аминокислот на модифицированные аминокислоты или необычные аминокислоты, а также такие модификации, как гликозилирование, при условии, что модифицированная форма сохраняет биологическую активность пептидовGCRA. Под сохранением билогической активности подразумевается, что пептид GCRA индуцируетcGMP и/или апоптоз, хотя необязательно с той же эффективностью, что и идентифицированный природный пептид GCRA. Предпочтительные варианты содержат консервативные аминокислотные замены одного или нескольких теоретически найденных остатков неэссенциальных аминокислот. "Консервативная аминокислотная замена" представляет собой замену аминокислотного остатка аминокислотным остатком, имеющим подобную боковую цепь. В данной области определены семейства аминокислотных остатков с подобными боковыми цепями. Такие семейства включают аминокислоты, содержащие основные боковые цепи (например, лизин, аргинин, гистидин), кислые боковые цепи (например, аспарагиновая кислота,глутаминовая кислота), незаряженные полярные боковые цепи (например, глицин, аспарагин, глутамин,серин, треонин, тирозин, цистеин), неполярные боковые цепи (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленные боковые цепи (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматические боковые цепи (например, тирозин, фенилаланин, триптофан,гистидин). Таким образом, теоретически найденный остаток неэссенциальной аминокислоты в полипептиде GCRA заменяют на другой остаток аминокислоты, относящейся к тому же семейству боковых цепей. Альтернативно, в другом варианте осуществления на протяжении всей последовательности, кодирующей GCRA или ее части, можно ввести мутации случайным образом, например методом насыщающего мутагенеза, после чего полученные мутанты могут быть подвергнуты скринингу с целью идентификации мутантов, сохраняющих активность. В объем термина "практически гомологичный" входит любой пептид GCRA, который можно выделить посредством перекрестного взаимодействия с антителами против пептида GCRA. Получение пептидов GCRA. Пептиды GCRA можно легко получить с помощью современных методов клонирования или их можно синтезировать методом твердофазного синтеза либо путем сайт-направленного мутагенеза. Пептид GCRA может включать доминантные негативные формы полипептида. Химический синтез, как правило, проводят с использованием стандартных методов синтеза в жидкой фазе или твердофазного синтеза, в которых пептидная связь образуется в результате прямой конденсации аминогруппы одной аминокислоты и карбоксильной группы другой аминокислоты с выделением молекулы воды. Приведенный выше синтез пептидной связи путем прямой конденсации требует подавления реакционноспособности аминогруппы первой аминокислоты и карбоксильной группы второй аминокислоты. Защитные заместители должны легко удаляться, не вызывая повреждения лабильной молекулы пептида. Для синтеза в жидкой фазе можно использовать широкий ряд методов конденсации и защитных групп (см. Gross и Meienhofer, eds., "Peptides: Analysis, Synthesis, Biology," Vol. 1-4 (Academic Press,1979); Bodansky и Bodansky, "The Practice of Peptide Synthesis," 2d ed. (Springer Verlag, 1994. Кроме того, можно проводить промежуточную очистку и линейное масштабирование. Специалистам в данной области известно, что синтез в жидкой фазе требует выбора защитных групп для основных и боковых цепей и способа активации. При выборе сегмента нужно соблюдать осторожность, чтобы минимизировать рацемизацию в процессе конденсации сегмента. Также следует учитывать растворимость. В твердофазном пептидном синтезе в качестве твердого носителя для органического синтеза используют нерастворимый полимер. Иммобилизация пептидной цепи на полимере дает возможность проведения простых стадий промывания и фильтрования вместо трудоемкой очистки на промежуточных стадиях. Твердофазный пептидный синтез, как правило, можно проводить по способу Merrifield et al., J. Am. Chem. Soc.,1963, 85:2149, который включает сборку линейной пептидной цепи на полимерном носителе с использованием защищенных аминокислот. В твердофазном пептидном синтезе обычно используют хорошо известные в данной области стратегии Boc или Fmoc. Специалистам в данной области хорошо известно, что в твердофазном синтезе реакции удаления защитных групп и конденсации должны проходить полностью, и группы, блокирующие боковые цепи,должны быть стабильными на протяжении всего синтеза. Кроме того, твердофазный синтез является наиболее подходящим методом при получении пептидов в небольшом масштабе. Ацетилирование N-конца можно проводить путем взаимодействия конечного пептида с уксусным ангидридом перед отщеплением от смолы. С-Амидирование проводят с использованием подходящей смолы, такой как метилбензгидриламин, и Boc-технологии. Альтернативно, пептиды GCRA можно получить с помощью современных методов клонирования. Например, пептиды GCRA можно получить либо в бактериях, включающих, но без ограничения, Е. coli,либо в других существующих в настоящее время системах продуцирования полипептидов или белков(таких как Bacillus subtilis, бакуловирусные системы экспрессии с использованием клеток дрозофилыSf9, дрожжевые или гифомицетарные системы экспрессии, системы экспрессии млекопитающих), или их можно синтезировать химическими способами. Чтобы продуцировать пептид GCRA или его вариант в бактериях, например Е. coli, можно использовать молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую помимо полипептида лидерную последовательность, которая обеспечивает секрецию зрелого полипептида из клетки. Таким образом, последовательность, кодирующая полипептид, может содержать препоследовательность и пропоследовательность, например, природного бактериального полипептида ST. Секретированный зрелый полипептид можно выделить из культуральной среды. Последовательность, кодирующую описанный в данном описании пептид GCRA, можно вставить в вектор, способный высвобождать и поддерживать молекулу нуклеиновой кислоты в бактериальной клетке. Молекулу ДНК можно вставить в вектор, способный к автономной репликации (подходящие векторы включают, например, pGEM3Z и pcDNA3, а также их производные). В качестве нуклеотидного вектора можно использовать бактериальную ДНК или ДНК бактериофага, а также их производные. После конструирования вектора, содержащего описанную в данном описании нуклеиновую кислоту, проводят трансформацию клетки-хозяина, такой как бактерия. Подходящие бактериальные хозяева включают, но без ограничения, Е. coli, В. subtilis, Pceudomonas, Salmonella. Помимо молекулы кодирующей нуклеиновой кислоты генетическая конструкция также содержит элементы, которые обеспечивают экспрессию,такие как промотор и регуляторные последовательности. Векторы экспрессии могут содержать последовательности, регулирующие транскрипцию, которые контролируют инициацию транскрипции, такие как промоторные, энхансерные, операторные и репрессорные последовательности. Специалистам в данной области известен ряд последовательностей, регулирующих транскрипцию. Вектор экспрессии также может содержать последовательность, регулирующую трансляцию (например,нетранслируемую 5'-последовательность, нетранслируемую 3'-последовательность или участок внутренней посадки рибосомы). Вектор может реплицироваться автономно или он может интегрироваться в ДНК хозяина, обеспечивая стабильную продукцию полипептида. Последовательность, кодирующая белок, которая включает описанный в данном описании пептидGCRA, также может быть сопряжена с нуклеиновой кислотой, кодирующей полипептидный аффинный маркер, такой как глутатион S-трансфераза (GST), белок, связывающий мальтозу Е, белок А, маркерFLAG, гексагистидин, маркер myc или маркер НА вируса гриппа, который облегчает очистку. Аффинный маркер или репортерный гибрид соединяет рамку считывания представляющего интерес полипептида с рамкой считывания гена, кодирующего аффинный маркер, с получением трансляционного гибрида. Экспрессия гибридного гена приводит к трансляции одного полипептида, который содержит как представляющий интерес полипептид, так и аффинный маркер. В тех случаях, когда используют аффинные маркеры, последовательность ДНК, кодирующую участок распознавания протеазой, вставляют между рамками считывания аффинного маркера и представляющего интерес полипептида. Для получения полипептидов в биологической системе также можно использовать генетические конструкции и способы, подходящие для продукции незрелых и зрелых форм описанных в данном описании пептидов GCRA и их вариантов в системах экспрессии белков, отличных от бактерий, которые хорошо известны специалистам в данной области. Раскрытые в данном описании пептиды можно модифицирвоать путем присоединения второй молекулы, которая придает пептиду желаемое свойство, такое как повышенный период полужизни в организме, примером такой модификации является пэгилирование. В данном описании такие модификации также входят в объем термина "вариант". Терапевтические методы. Настоящее изобретение предлагает как профилактические, так и терапевтические способы лечения субъекта, имеющего риск заболевания (или чувствительного к заболеванию), или страдающего от заболевания, опосредуемого агонистами гуанилатциклазного рецептора. Заболевания, опосредуемые агонистами гуанилатциклазного рецептора, включают желудочно-кишечные заболевания, воспалительные заболевания, заболевания легких, рак, сердечные заболевания, заболевания глаз, заболевания ротовой полости, заболевания крови, заболевания печени, заболевания кожи, заболевания простаты, заболевания эндокринной системы, повышенную подвижность желудочно-кишечного тракта и ожирение. К желудочно-кишечным заболеваниям относятся, например, синдром раздраженного кишечника (IBS), неязвенная диспепсия, хроническая кишечная псевдонепроходимость, функциональная диспепсия, псевдонепроходимость толстой кишки, дуоденогастральный рефлюкс, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь(GERD), воспаление, связанное с кишечной непроходимостью (например, послеоперационной кишечной непроходимостью), парез желудка, изжога (высокая кислотность в ЖК тракте), констипация (например,констипация, связанная с применением лекарственных средств, таких как опиоиды, средства против остеоартрита, средства против остеопороза; послеоперационная констипация, констипация, связанная с невропатическими нарушениями). Воспалительные заболевания включают воспаление тканей и органов,такое как воспаление почек (например, нефрит), воспаление желудочно-кишечной системы (например,болезнь Крона и язвенный колит); воспаление поджелудочной железы (например, панкреатит), воспаление легких (например, бронхит или астма) или воспаление кожи (например, псориаз, экзема). Заболевания легких включают, например, хроническое обструктивное заболевание легких (COPD) и фиброз. Рак включает канцерогенез тканей и органов, включая метастазирование, например рак желудочнокишечного тракта (например, рак желудка, рак пищевода, рак поджелудочной железы, рак ободочной и прямой кишки, рак кишечника, рак анального отверстия, рак печени, рак желчного пузыря или рак толстой кишки); рак легких; рак щитовидной железы; рак кожи (например, меланома); рак ротовой полости; рак мочевых путей (например, рак мочевого пузыря или рак почек); рак крови (например, миелома или лейкоз) или рак простаты. К заболеваниям сердца относятся, например, застойная сердечная недостаточность, трахейная сердечная гипертония, высокий уровень холестерина или высокий уровень триглицеридов. Заболевания печени включают, например, цирроз и фиброз. Заболевания глаз включают, например,повышенное внутриглазное давление, глаукому, дегенерацию сетчатки при синдроме сухих глаз, заболевания слезных желез или воспаление глаз. К заболеваниям кожи относится, например, ксероз. Заболевания ротовой полости включают, например, сухость во рту (ксеростомия), синдром Шегрена, заболевания десен (например, периодонтальное заболевание) и закупоривание или нарушение функционирования протоков слюнных желез. К заболеваниям простаты относится, например, доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ВРН). Заболевания эндокринной системы включают, например, сахарный диабет, гипертиреоз, гипотиреоз и кистозный фиброз. Термин "лечение" относится к уменьшению или облегчению симптомов у субъекта, предотвращению ухудшения или прогрессирования симптомов, и/или профилактике заболевания у субъекта, который не имеет такого заболевания. У конкретного субъекта улучшение симптома, его ухудшение, регрессию или прогрессирование можно определить с помощью любого объективного или субъективного показателя. Эффективность лечения можно оценить как снижение заболеваемости или смертности (например,удлинение кривой выживаемости для выбранной популяции). Таким образом, эффективное лечение включает лечение существующего заболевания, контроль заболевания путем замедления или остановки его развития, предотвращение появления заболевания, уменьшение числа или тяжести симптомов или их комбинация. Эффект можно продемонстрировать в контролируемом исследовании с использованием одного или нескольких статистически значимых показателей. Внутриклеточный cGMP индуцируется, например, в результате воздействия, например, путем при- 16020466 ведения в контакт ткани (такой как ткань желудочно-кишечного тракта) или клетки агонистов GCRA. Рецепторы GC-C экспрессируются во всем желудочно-кишечном тракте, включая пищевод, двенадцатиперстную кишку, тонкую кишку, подвздошную, слепую и толстую кишку. Клеточные линии рака толстой кишки человека (Т 81, СаСо-2 и НТ-29) также экспрессируют рецепторы GC-C. Под индуцированием подразумевается увеличение продукции cGMP по сравнению с тканью или клеткой, которые не контактируют с пептидом GCRA или его вариантом. Ткани или клетки непосредственно контактируют с пептидом GCRA или его вариантом. Альтернативно, пептид GCRA или его вариант вводят системно. Пептид GCRA или его вариант вводят в количестве, достаточном для повышения концентрации внутриклеточного cGMP. Продукцию cGMP измеряют с помощью клеточных анализов, известных в данной области (25). Заболевания лечат, предотвращают или облегчают путем введения субъекту, например млекопитающему, такому как человек, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективной дозы пептида GCRA. Пептиды GCRA могут присутствовать в фармацевтической композиции, находящейся в виде единичной дозированной формы, вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами. Термин "единичная дозированная форма" относится к отдельному средству доставки лекарственного средства, такому как таблетка, капсула, раствор или композиция для ингаляции. Количество присутствующего пептида должно быть достаточным для обеспечения положительного терапевтического эффекта при введении пациенту (как правило, оно составляет от 10 мкг до 3 г). Параметры, составляющие "положительный терапевтический эффект", зависят от конкретного состояния, подлежащего лечению, и включают любое значительное улучшение состояния, легко распознаваемое специалистом в данной области. Пептиды GCRA можно вводить отдельно или в сочетании с другими средствами. Например, пептиды GCRA можно вводить в сочетании с ингибиторами cGMP-зависимой фосфодиэстеразы, такими как,например, сульдинак сульфон, запринаст, мотапизон, варденифил или силденифил; одним или несколькими другими химиотерапевтическими средствами; или противовоспалительными средствами, такими как, например, стероиды или нестероидные противовоспалительные средства (NSAIDS), такие как аспирин. Сочетанную терапию можно проводить путем введения двух или более средств, например, описанного в данном описании пептида GCRA и другого соединения, которые вводят отдельно в составе разных композиций, или путем введения двух или более средств в одной композиции. Сочетанная терапия также охватывает другие комбинации. Например, два средства можно объединить в составе одной композиции и вводить совместно с другой композицией, содержащей третье средство. В сочетанной терапии два или более средства можно вводить одновременно, но это не обязательно. Например, введение первого средства (или сочетания средств) может предшествовать введению второго средства (или сочетания средств) на несколько минут, часов, дней или недель. Так, введение двух или более средств можно осуществлять с интервалом в несколько минут или 1, 2, 3, 6, 9, 12, 15, 18 или 24 ч, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9,10, 12, 14 дней, или 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 недель. В некоторых случаях интервалы могут быть еще больше. Хотя во многих случаях желательно, чтобы два или более средств, используемых в сочетанной терапии, присутствовали в организме пациента в одно и то же время, такое одновременное присутствие не является обязательным. Описанные в данном описании пептиды GCRA можно объединить с ингибиторами фосфодиэстеразы, такими как сулиндака сульфон, запринаст, силденафил, варденифил или тадалфил, что позволяет дополнительно повысить уровни cGMP в тканях- или органах-мишенях. Сочетанная терапия также включает два или более введений одного или нескольких средств, используемых в сочетании. Например, если средство X и средство Y используют в сочетании, их можно вводить последовательно в любой комбинации один или несколько раз, например, в таком порядке, какX-Y-X, X-X-Y, Y-X-Y, Y-Y-X, X-X-Y-Y и т.д. Сочетанная терапия также включает введение двух или более средств разными способами или в разных участках. Например, (а) одно средство вводят перорально, а другие средства вводят внутривенно,или (b) одно средство вводят перорально, а другое вводят местно. В каждом случае средства можно вводить одновременно или последовательно. Приблизительные дозы некоторых описанных в данном описании средств, используемых в сочетанной терапии, можно найти в "BNF Recommended Dose", колонке таблиц на с. 11-17 WO01/76632 (приведенные в таблицах данные получены из Британского национального формуляра, март 2000), а также в других стандартных формулярах и других инструкциях по применению лекарственных средств. В случае некоторых средств стандартная доза, назначаемая при каком-либо показании, несколько варьирует от страны к стране. Пептиды GCRA, отдельно или в сочетании, можно объединить с любыми фармацевтически приемлемыми носителями или средами. Так, их можно объединить с веществами, которые не вызывают вредного, аллергического или иного нежелаемого ответа при введении пациенту. Используемые носители или среды включают растворители, диспергирующие средства, покрытия, средства, стимулирующие абсорбцию, средства, контролирующие высвобождение, а также один или несколько инертных эксципиентов (которые включают крахмалы, полиолы, гранулирующие средства, микрокристаллическую целлюло- 17020466 зу (например, целфер, Celphere beads), разбавители, лубриканты, связующие средства, дезинтегрирующие средства и т.п.) и др. При желании на таблеточные формы раскрываемых композиций можно нанести покрытие с помощью стандартных водных или неводных методов. Состав фармацевтической композиции настоящего изобретения должен соответствовать предполагаемому способу введения. Примеры способов введения включают парентеральное, например внутривенное, внутрикожное, подкожное, пероральное (например, путем ингаляции), чрезкожное (местное),трансмукозальное и ректальное введение. Растворы или суспензии, используемые для парентерального,внутрикожного или подкожного введения, могут содержать следующие компоненты: стерильный разбавитель, такой как вода для инъекций, физиологический раствор, жирные масла, полиэтиленгликоли, глицерин, пропиленгликоль или другие синтетические растворители; противобактериальные средства, такие как бензиловый спирт или метилпарабены; антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота или бисульфит натрия; хелатирующие средства, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота; буферы, такие как ацетаты, цитраты или фосфаты, а также средства, регулирующие тоничность, такие как хлорид натрия или декстроза. рН можно регулировать с помощью кислот или оснований, таких как хлористоводородная кислота или гидроксид натрия. Препарат для парентерального применения можно поместить в ампулы, одноразовые шприцы или изготовленные из стекла или пластика флаконы, содержащие несколько доз. Фармацевтические композиции, подходящие для инъекций, включают стерильные водные растворы(если соединение растворяется в воде) или дисперсии и стерильные порошки, предназначенные для приготовления стерильных растворов или дисперсий для немедленного применения. В случае внутривенного введения подходящие носители включают физиологический раствор, бактериостатическую воду, Cremophor EL (BASF, Parsippany, N.J.) или забуференный фосфатом физиологический раствор (PBS). Во всех случаях композиция должна быть стерильной и жидкой в такой степени, чтобы ее можно было легко ввести через шприц. Она должна быть стабильной в условиях производства и хранения и должна быть защищена от загрязняющего действия микроорганизмов, таких как бактерии и грибки. Носитель может представлять собой растворитель или дисперсионную среду, которые включают, например, воду, этанол,полиол (например, глицерин, пропиленгликоль, жидкий полиэтиленгликоль и т.п.) и их подходящие смеси. Подходящую текучесть можно поддерживать, например, путем использования покрывающего вещества, такого как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсии и путем использования поверхностно-активных веществ. Защитить композицию от действия микроорганизмов можно с помощью различных противобактериальных и противогрибковых средств, таких как парабены,хлорбутанол, фенол, аскорбиновая кислота, тримеросал и т.п. Зачастую предпочтительно включать в состав композиции изотонические средства, такие как сахара, многоатомные спирты, такие как маннит,сорбит, хлорид натрия. Пролонгированную абсорбцию инъецируемой композиции можно достичь путем включения в состав композиции средства, замедляющего абсорбцию, такого как моностеарат алюминия и желатин. Стерильные растворы для инъекций можно получить путем объединения активного соединения(например, агониста GCRA) в требуемом количестве подходящего растворителя с одним или несколькими из перечисленных выше ингредиентов, в зависимости от потребности, с последующей стерилизацией фильтрацией. Как правило, дисперсии получают путем внедрения активного соединения в стерильную среду, которая содержит основную дисперсионную среду и другие необходимые ингредиенты из перечисленных выше. Способы получения стерильных порошков для приготовления стерильных растворов для инъекций включают вакуумную сушку и сушку замораживанием, которые дают возможность получить из предварительно стерилизованного раствора порошкообразный активный ингредиент и любой другой желаемый ингредиент. Пероральные композиции, как правило, содержат инертный разбавитель или пищевой носитель, такие как маннит, фруктоолигосахариды, полиэтиленгликоль и другие эксципиенты. Их можно заключать в желатиновые капсулы или прессовать в таблетки. С целью перорального терапевтического введения активное соединение можно объединять с эксципиентами и использовать в виде таблеток, пастилок или капсул. Пероральные композиции также можно получать с использованием жидкого носителя для применения в виде жидкости для полоскания рта, где соединение в жидком носителе используется перорально путем полоскания и выплевывания или проглатывания. В состав композиции могут входить фармацевтически совместимые связующие средства и/или вспомогательные вещества. Таблетки, пилюли,капсулы, пастилки и т.п. могут содержать любой из следующих ингредиентов или соединений подобной природы: связующее средство, такое как микрокристаллическая целлюлоза, трагакантовая камедь или желатин; эксципиент, такой как крахмал или лактоза, дезинтегрирующее средство, такое как альгиновая кислота, примогель или кукурузный крахмал; лубрикант, такой как стеарат магния или стеротез; глидант,такой как коллоидный диоксид кремния; подслащивающее средство, такое как сахароза или сахарин; или ароматизирующее средство, такое как перечная мята, метилсалицилат или апельсиновый ароматизатор. В случае введения путем ингаляции соединения доставляют в виде аэрозольного спрея из находящегося под давлением контейнера или распылителя, который содержит подходящий пропеллент, напри- 18020466 мер газ, такой как диоксид углерода, или аэрозольного аппарата. Системное введение также можно осуществлять трансмукальным или чрезкожным способом. В состав композиций для трансмукального или чрезкожного введения входят пенетранты, соответствующие барьеру, через который они должны проникнуть. Такие пенетранты широко известны в данной области и включают, например, в случае трансмукального введения, детергенты, соли желчных кислот и производные фусидовой кислоты. Трансмукозальное введение можно проводить путем применения назальных спреев или суппозиториев. Для чрезкожного введения используют активные соединения в составе мазей, бальзамов, гелей и кремов в соответствии с хорошо известной в данной области практикой. Соединения также могут входить в состав суппозиториев (например, содержащих традиционные основы для суппозиториев, такие как масло какао и другие глицериды) или удерживающих клизм, обеспечивающих ректальную доставку. В одном варианте осуществления активные соединения используют вместе с носителями, которые защищают соединение от быстрого выведения из организма, например, в составе композиций с контролируемым высвобождением, включающих имплантаты и микрокапсулированные системы доставки. Можно использовать биоразрушаемые, биосовместимые полимеры, такие как этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, сложные полиортоэфиры и полимолочная кислота. Способы получения таких композиций известны специалистам в данной области. Данные вещества можно получить на коммерческой основе от Alza Corporation и Nova Pharmaceuticals, Inc. В качестве фармацевтически приемлемых носителей также можно использовать суспензии липосом (включая липосом, таргетированных на инфицированные клетки с помощью моноклональных антител против вирусных антигенов). Их можно получить с помощью способов, известных специалистам в данной области, которые описаны, например, в патенте США 4522811, полностью включенном в данное описание посредством ссылки. Особенно предпочтительно получать пероральные или парентеральные композиции в виде единичных дозированных форм, обеспечивающих простоту введения и однородность дозирования. Термин единичная дозированная форма в данном описании относится к физически дискретным единицам, подходящих для введения однократных доз субъекту, подлежащему лечению; каждая единица содержит предварительно определенное количество активного соединения, вызывающее желаемый терапевтический эффект, наряду с необходимым фармацевтическим носителем. Технические характеристики единичных дозированных форм настоящего изобретения определяются и непосредственно зависят от индивидуальных свойств активного соединения и желаемого конкретного терапевтического эффекта. Фармацевтические композиции можно заключить в контейнер, упаковку или дозирующее устройство вместе с инструкциями по введению. Кроме того, композиции настоящего изобретения могут необязательно содержать другие терапевтические ингредиенты, средства, предотвращающие комкование, консерванты, подслащивающие средства, красители, ароматизаторы, десикканты, пластификаторы, пигменты, глиданты, средства, предотвращающие слипание, антистатические средства, поверхностно-активные вещества (увлажняющие средства), антиоксиданты, пленкообразующие средства и т.п. Чтобы обеспечить стабильность композиции, все указанные необязательные ингредиенты должны быть совместимыми с описанным в данном описании соединением. При необходимости композиция может содержать другие добавки, включающие, например, такие соединения, как лактоза, глюкоза, фруктоза, галактоза, трегалоза, сахароза, мальтоза, раффиноза, мальтит, мелицитоза, стахиоза, лактит, палатинит, крахмал, ксилит, маннит, миоинозит и т.п., а также их гидраты, аминокислоты, например аланин, глицин и бетаин, полипептиды и белки, например альбумин. Примеры эксципиентов, используемых в качестве фармацевтически приемлемых носителей и фармацевтически приемлемых инертных носителей, и вышеуказанных дополнительных ингредиентов включают, но без ограничения, связующие средства, наполнители, дезинтегрирующие средства, лубриканты,противомикробные средства и средства, образующие покрытие, такие как связующие средства: кукурузный крахмал, картофельный крахмал, другие крахмалы, желатин, природные и синтетические камеди,такие как гуммиарабик, ксантан, альгинат натрия, альгиновая кислота, другие альгинаты, порошкообразный трагакант, гуаровая камедь, целлюлоза и ее производные (например, этилцеллюлоза, ацетат целлюлозы, кальцийкарбоксиметилцеллюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза), поливинилпирролидон (например, повидон, кросповидон, соповидон и др.), метилцеллюлоза, желатинизированный крахмал (например, STARCH 1500 и STARCH 1500 LM, поставляемые Colorcon, Ltd.), гидроксипропилметилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза (FMC Corporation, Marcus Hook, PA, USA) или их смеси,наполнители: тальк, карбонат кальция (например, в виде гранул или порошка), двухосновный фосфат кальция, трехосновный фосфат кальция, сульфат кальция (например, в виде гранул или порошка), микрокристаллическая целлюлоза, порошкообразная целлюлоза, декстраны, каолин, маннит, кремневая кислота, сорбит, крахмал, желатинизированный крахмал, декстроза, фруктоза, мед, безводная лактоза, моногидрат лактозы, лактоза и аспартам, лактоза и целлюлоза, лактоза и микрокристаллическая целлюлоза,мальтодекстрин, мальтоза, маннит, микрокристаллическая целлюлоза и гуаровая камедь, меласса, саха- 19020466 роза или их смеси, дезинтегрирующие средства: агар-агар, альгиновая кислота, карбонат кальция, микрокристаллическая целлюлоза, натрийкроскармелоза, кросповидон, полакрилин калия, крахмалгликолят натрия, крахмал из картофеля или тапиоки, другие крахмалы, желатинизированный крахмал, глины, другие альгинаты, другие целлюлозы, камеди (такие как геллановая камедь), гидроксипропилцеллюлоза с низкой степенью замещения или их смеси, лубриканты: стеарат кальция, стеарат магния, минеральное масло, легкое минеральное масло, глицерин, сорбит, маннит, полиэтиленгликоль, другие гликоли, стеариновая кислота, лаурилсульфат натрия, стеарилфумарат натрия, лубрикант на основе растительных жирных кислот, тальк, гидрированное растительное масло (например, арахисовое масло, хлопковое масло, подсолнечное масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло), стеарат цинка, этилолеат, этиллаурат, агар, силоидный силикагель (AEROSIL 200, W.R. Grace Co., Baltimore, MDUSA), коагулированный аэрозоль синтетического оксида кремния (Deaussa Co., Piano, TX USA), пирогенный диоксид кремния (CAB-O-SIL, Cabot Co., Boston, MA USA) или их смеси, средства, предотвращающие комкование: силикат кальция, силикат магния, диоксид кремния, коллоидный диоксид кремния,тальк или их смеси, противомикробные средства: бензалконийхлорид, бензетонийхлорид, бензойная кислота, бензиловый спирт, бутилпарабен, хлорид цетилпиридиния, крезол, хлорбутанол, дегидроуксусная кислота, этилпарабен, метилпарабен, фенол, фенилэтиловый спирт, феноксиэтанол, фенилацетат ртути,фенилнитрат ртути, сорбат калия, пропилпарабен, бензоат натрия, дегидроацетат натрия, пропионат натрия, сорбиновая кислота, тимерсол, тимо или их смеси, и средства, образующие покрытие: натрийкарбоксиметилцеллюлоза, ацетатфталат целлюлозы, этилцеллюлоза, желатин, фармацевтическая глазурь,гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза (гипромелоза), фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, метилцеллюлоза, полиэтиленгликоль, поливинилацетатфталат, шеллак, сахароза, диоксид титана, карнаубский воск, микрокристаллический воск, геллановая камедь, мальтодекстрин, метакрилаты, микрокристаллическая целлюлоза и каррагенан, или их смеси. Композиция также может содержать другие эксципиенты и их категории, включающие, но без ограничения, L-гистидин, Pluronic, полоксамеры (такие как Lutrol и Poloxamer 188), аскорбиновую кислоту, глутатион, средства, повышающие проницаемость (например, липиды, холат натрия, ацилкарнитин, салицилаты, смешанные соли желчных кислот, жирно-кислотные мицеллы, хелатирующие средства,жирные кислоты, поверхностно-активные вещества, среднецепочечные глицериды), ингибиторы протеаз(например, ингибитор соевого трипсина, органические кислоты), средства, понижающие рН, и средства,повышающие абсорбцию, эффективные для обеспечения биодоступности (включающие, но без ограничения, средства, описанные в US6086918 и US5912014), кремы и лосьоны (такие как мальтодекстрин и каррагенаны); вещества, используемые для получения жевательных таблеток (такие как декстроза, фруктоза, моногидрат лактозы, лактоза и аспартам, лактоза и целлюлоза, мальтодекстрин, мальтоза, маннит,микрокристаллическая целлюлоза и гуаровая камедь, сорбит кристаллический); средства, используемые для получения парентеральных композиций (такие как маннит и повидон); пластификаторы (такие как дибутил себацинат, пластификаторы для покрытий, поливинилацетата фталат); порошкообразные лубриканты (такие как глицерилбегенат); мягкие желатиновые капсулы (такие как специальный раствор сорбита); сферы для нанесения покрытий (такие как сахарные сферы); средства, способствующие образованию сферических частиц (такие как глицерилбегенат и микрокристаллическая целлюлоза); суспендирующие/огеливающие средства (такие как каррагенан, геллановая камедь, маннит, микрокристаллическая целлюлоза, повидон, крахмалгликолят натрия, ксантановая камедь); подслащивающие средства (такие как аспартам, аспартам и лактоза, декстроза, фруктоза, мед, мальтодекстрин, мальтоза, маннит, меласса, сорбит кристаллический, специальный раствор сорбита, сахароза); средства для влажной грануляции (такие как карбонат кальция, безводная лактоза, моногидрат лактозы, мальтодекстрин, маннит, микрокристаллическая целлюлоза, повидон, крахмал), карамель, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, вишневосливочный ароматизатор и вишневый ароматизатор, безводная лимонная кислота, лимонная кислота,кондитерский сахар, DC красный 33, DC желтый 10 алюминиевый лак, динатрия эдетат, 15% этиловый спирт, FDC желтый 6 алюминиевый лак, FDC синий 1 алюминиевый лак, FDC синий 1, FDC синий 2 алюминиевый лак, FDC зеленый 3, FDC красный 40, FDC желтый 6 алюминиевый лак, FDC желтый 6, FDC желтый 10, глицеринпальмитостеарат, глицерилмоностеарат, индигокармин, лецитин, маннит, метил- и пропилпарабены, моноаммонийглицирризинат,природный и искусственный апельсиновый ароматизатор, фармацевтическая глазурь, полоксамер 188,полидекстроза, полисорбат 20, полисорбат 80, поливидон, желатинизированный кукурузный крахмал,желатинизированный крахмал, железа оксид красный, сахарин натрия, натрий карбоксиметиловый эфир,хлорид натрия, цитрат натрия, фосфат натрия, клубничный ароматизатор, синтетический железа оксид черный, синтетический железа оксид красный, диоксид титана и белый воск. Твердые пероральные дозированные формы можно необязательно обработать покрывающими системами (такими как система для нанесения пленочного покрытия Opadry fx, например Opadry синий(OY-LS-20921), Opadry белый (YS-2-7063), Opadry белый (YS-1-7040) и черная краска (S-1-8106). Средства, находящиеся в виде свободной формы или в виде соли можно объединить с полимером,таким как полимолочная-гликолевая кислота (PLGA), поли-(I)-молочная-гликолевая-винная кислота(P(I)LGT) (WO01/12233), полигликолевая кислота (U.S. 3773919), полимолочная кислота (U.S.4767628),поли(-капролактон) и поли(алкиленоксид) (U.S.20030068384), что дает возможность получения композиции с замедленным высвобождением. Такие композиции можно использовать для получения имплантатов, которые высвобождают полипептид или другое средство в течение нескольких дней, нескольких недель или нескольких месяцев, в зависимости от полимера, размера частиц полимера и размера имплантата (см., например, U.S.6620422). Другие композиции и полимеры, обеспечивающие замедленное высвобождение, описаны в ЕР 0467389 А 2, WO93/24150, U.S.5612052, WO97/40085, WO03/075887,WO01/01964A2, U.S.5922356, WO94/155587, WO02/074247A2, WO98/25642, U.S.5968895, U.S.6180608,U.S.20030171296. U.S.20020176841, U.S.5672659, U.S.5893985, U.S.5134122, U.S.5192741, U.S.5192741,U.S.4668506, U.S.4713244, U.S.5445832, U.S.4931279, U.S.5980945, WO02/058672, WO9726015,WO97/04744 и U.S.20020019446. В таких композициях с замедленным высвобождением микрочастицы(Delie и Blanco-Prieto 2005 Molecule 10:65-80) полипептида объединяют с микрочастицами полимера. Один или несколько имплантатов с замедленным высвобождением можно поместить в толстый кишечник, тонкий кишечник или в оба кишечника. В U.S.601101 и WO94/06452 описана композиция с замедленным высвобождением, содержащая либо полиэтиленгликоли (например, PEG 300 и PEG 400), либо триацетин. В WO03/053401 описана композиция, которая может обеспечивать как повышенную биодоступность, так и контролируемое высвобождение средства в ЖК тракте. Другие композиции с контролируемым высвобождением описаны в WO02/38129, ЕР 326151, U.S.5236704, WO02/30398, WO98/13029;U.S.20030064105, U.S.20030138488A1, U.S.20030216307A1, U.S.6667060, WO01/49249, WO01/49311,WO01/49249, WO01/49311 и U.S.5877224, вещества, входящие в состав данных композиций, могут включать описанные в WO04041195 (включая наружное и растворимое в кишечнике покрытие, описанное в указанном документе) и рН-чувствительные покрытия, которые дают возможность достичь высвобождение в толстой кишке, включая, описанные в US4910021 и WO9001329. В US4910021 описано применение рН-чувствительного вещества для нанесения покрытия на капсулу. В WO9001329 описано применение рН-чувствительных покрытий для гранул, содержащих кислоту, где кислота, находящаяся внутри гранулы, отсрочивает растворение рН-чувствительного покрытия. В патенте США 5175003 раскрыта полимерная смесь с двойным механизмом действия, содержащая рН-чувствительные растворимые в кишечнике вещества и образующие пленку пластификаторы, обеспечивающие проникновение к растворимому в кишечнике веществу, такую смесь можно использовать в системах доставки лекарственных средств; матриксную гранулу, состоящую из полимерной смеси с двойным механизмом действия, в которой распределено лекарственное средство и которая иногда покрывает фармацевтически нейтральное ядро; покрытую мембраной гранулу, содержащую матриксную гранулу, покрытую оболочкой из полимерной смеси с двойным механизмом действия, имеющей такой же или другой состав; и фармацевтическую дозированную форму, содержащую матриксные гранулы. Матриксная гранула высвобождает растворимые в кислой среде лекарственные средства в результате диффузии при кислых значениях рН и в результате дезинтеграции при значениях рН, равных примерно 5,0 или выше. Пептиды GCRA, описанные в данном описании, могут входить в состав таргетированных систем с рН-инициируемым контролируемым высвобождением, описанных в WO04052339. Композиции, содержащие описанные в данном описании средства, можно получить с помощью способов, описанных вWO02072075 (двухслойная ламинированная композиция, содержащая средство, снижающее рН, и средство, повышающее абсорбцию); WO04064769 (амидированные полипептиды); WO05063156 (твердая липидная суспензия с псевдотропными и/или тиксотропными свойствами после плавления);US5007790 и US5972389 (дозированные формы с замедленным высвобождением); WO04112711 (пероральные композиции с продленным высвобождением); WO05027878, WO02072033 и WO02072034 (композиции с отсроченным высвобождением, содержащие природную или синтетическую камедь); WO0503 0182 (композиции с контролируемым высвобождением, обеспечивающие нарастающую скорость высвобождения); WO05048998 (система микрокапсулирования); патент США 5952314 (биополимер);US5108758 (матриксная доставка с использованием стеклообразной амилозы); US5840860 (доставка с использованием модифицированного крахмала); JP 10324642 (система доставки, содержащая хитозан и устойчивое в желудке вещество, такое как пшеничный глиадин или зеин); US5866619 и US6368629 (сахарид-содержащий полимер); US6531152 (описывает систему доставки лекарственного средства, содержащую водорастворимое ядро (Са пектинат или другие не растворимые в воде полимеры) и внешний слой, способный разрываться (например, гидрофобный полимер эудрагит); US6234464; US6403130 (покрытие полимером, содержащим казеин, и высокомолекулярный метоксипектин; WO0174175 (продукт реакции Майяра); WO05063206 (композиция, увеличивающая растворимость); WO04019872 (переносящие гибридные белки). Композиции, содержащие описанные в данном описании пептиды GCRA, можно получить, используя методику системы удерживания в желудочно-кишечном тракте (GIRES; Merrion Pharmaceuticals).GIRES включает дозированную форму с контролируемым высвобождением внутри надувного мешка,- 21020466 который помещают в капсулу для перорального введения. После растворения капсулы система, генерирующая газ, надувает мешок в желудке, где он удерживается в течение 16-24 ч, пока происходит высвобождение средств, описанных в данном описании. Композиции, содержащие описанные в данном описании пептиды GCRA, можно получить в осмотическом устройстве, включая композиции, раскрытые в US4503030, US5609590 и US5358502. ВUS4503030 раскрыто осмотическое устройство для распределения лекарственного средства в участки желудочно-кишечного тракта, имеющие определенные значения рН. Более конкретно, указанное изобретение относится к осмотическому устройству, в состав которого входит стенка из полупроницаемой рНчувствительной композиции, которая окружает отделение, содержащее лекарственное средство, и имеет проходное отверстие, соединяющее внешнюю часть устройства с отделением. Это устройство доставляет лекарственное средство с контролируемой скоростью в участок желудочно-кишечного тракта, имеющий рН менее 3,5, и в участке желудочно-кишечного тракта, имеющем рН более 3,5, устройство разрушается и высвобождает все лекарственное средство, обеспечивая, таким образом, возможность полной абсорбции лекарственного средства. В патентах США 5609590 и 5358502 раскрыто осмотическое разрывающееся устройство для распределения лекарственного средства в водную среду. Устройство содержит лекарственное средство и осмотическое средство, окруженные, по меньшей мере, отчасти полупроницаемой мембраной. Лекарственное средство также может функционировать как осмотическое средство. Полупроницаемая мембрана проницаема для воды и практически непроницаема для лекарственного средства и осмотического средства. Запускающий механизм присоединен к полупроницаемой мембране(например, он соединяет две половинки капсулы). Запускающий механизм активируется рН в интервале от 3 до 9 и запускает зависящую от условий, но быструю доставку лекарственного средства. Такие устройства обеспечивают рН-инициируемое высвобождение содержащегося в ядре лекарственного средства в виде болюса в результате осмотического разрыва. Примеры средств, используемых в сочетанной терапии. Обезболивающие средства. Описанные в данном описании пептиды GCRA можно использовать в сочетанной терапии вместе с обезболивающим средством, например обезболивающим соединением или обезболивающим полипептидом. Указанные полипептиды и соединения можно вводить с пептидами GCRA, описанными в данном описании (одновременно или последовательно). Они могут быть необязательно ковалентно связаны с описанным в данном описании средством или присоединены к нему с получением терапевтических конъюгатов. К подходящим обезболивающим средствам относятся блокаторы Са каналов, антагонисты рецептора 5 НТ (например, антагонисты рецепторов 5 НТ 3, 5 НТ 4 и 5 НТ 1), агонист опиоидного рецептора(лоперамид, федотозин и фентанил), антагонисты рецептора NK1, агонист рецептора CCK (например,локсиглумид), антагонисты рецептора NK1, антагонисты рецептора NK3, ингибиторы обратного поглощения норэпинефрина-серотонина (NSRI), агонисты ваниллоидных и каннабиноидных рецепторов и сиалорфин. Обезболивающие средства разных классов описаны в литературе. В качестве обезболивающих полипептидов можно использовать сиалорфин-родственные полипептиды, включая полипептиды, содержащие аминокислотную последовательность QHNPR (SEQ ID NO:),включающие: VQHNPR (SEQ ID NO:); VRQHNPR (SEQ ID NO:); VRGQHNPR (SEQ ID NO:);(SEQ ID NO:). Сиалорфин-родственные полипептиды связываются с неприлизином и ингибируют неприлизин-опосредованное разрушение вещества Р и Met-энкефалина. Следовательно, соединения или полипептиды, являющиеся ингибиторами неприлизина, можно использовать в качестве обезболивающих средств, которые можно вводить вместе с полипептидами, описанными в данном описании, в рамках сочетанной терапии, или их можно присоединить к описанным в данном описании полипептидам, например, посредством ковалентной связи. Сиалорфин и родственные ему полипептиды описаны в патенте США 6589750; U.S.20030078200 А 1 и WO02/051435 А 2. Антагонисты и агонисты опиоидных рецепторов можно вводить с описанными в данном описании пептидами GCRA в рамках сочетанной терапии или их можно присоединить к описанному в данном описании средству, например, посредством ковалентной связи. Например, полагают, что антагонисты опиоидных рецепторов, такие как налоксон, налтрексон, метилналозон, налмефен, супридим, бетафуналтрексамин, налоксоназин, налтриндол и нор-биналторфимин, можно использовать для леченияIBS. Иногда полезно вводить опиоидные антагонисты данного типа в состав композиций с отсроченным и замедленным высвобождением, обеспечивающих высвобождение антагониста в области среднего и дистального тонкого кишечника и/или восходящей ободочной кишки. Такие антагонисты описаны вWO01/32180 А 2. Пентапептид энкефалин (НОЕ 825; Tyr-D-Lys-Gly-Phe-L-гомосерин) является агонистом мю- и дельта-рецепторов опиоида, способным повышать подвижность кишечника (Eur. J. Pharm. 219:445,1992), этот полипептид можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами. Также можно использовать тримебутин, который способен связываться с мю-/дельта-/каппарецепторами опиоида, активировать высвобождение мотилина и модулировать высвобождение гастрина,вазоактивного кишечного полипептида, гастрина и глюкагонов. Агонисты опиоидного каппа-рецептора,такие как федотозин, асимадолин и кетоциклазоцин, и соединения, описанные в WO03/097051 иWO05/007626, можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии. Кроме того, можно использовать агонисты опиоидного мю-рецептора,такие как морфин, дифенилоксилат, фракефамид (H-Tyr-D-Ala-Phe(F)-Phe-NH2; WO01/019849 A1) и лоперамид. Tyr-Arg (киоторфин) представляет собой дипептид, который стимулирует высвобождение метэнкефалинов, вызывая обезболивающий эффект (J. Biol. Chem. 262:8165, 1987). Киоторфин можно использовать в сочетании с описанными в данном описании пептидами GCRA или в присоединенном к ним состоянии. Хромогранин-производный полипептид (CgA 47-66; см., например, Ghia et al. 2004 Regulatory Polypeptides 119: 199) можно использовать в сочетании с описанными в данном описании пептидами GCRA или в присоединенном к ним состоянии. Агонисты рецептора CCK, такие как церулеин из амфибий и других видов, можно использовать в качестве обезболивающих средств в сочетании с описанными в данном описании пептидами GCRA или в присоединенном к ним состоянии. Конотоксиновые полипептиды представляют собой большой класс обезболивающих полипептидов,которые действуют на потенциал-зависимые кальциевые каналы, рецепторы NMDA или никотиновые рецепторы. Указанные полипептиды можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии. Пептидные аналоги тимулина (заявка Франции 2830451) могут проявлять обезболивающую активность и могут использоваться в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии. Антагонисты рецептора CCK (CCKa или CCKb), включающие локсиглумид и декслоксиглумид (Rизомер локсиглумида) (WO88/05774) могут проявлять обезболивающую активность и могут использоваться в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии. Другие пригодные обезболивающие средства включают агонисты 5-НТ 4, такие как тегасерод(Zelnorm), мосаприд, метоклопрамид, закоприд, цисаприд, рензаприд, производные бензимидазолона,такие как BIMU 1 и BIMU 8, и лирексаприд. Такие агонисты описаны в ЕР 1321142 A1, WO03/053432 А 1,ЕР 505322 А 1, ЕР 505322 B1, US5510353, ЕР 507672 А 1, ЕР 507672 В 1 и US5273983. Блокаторы кальциевых каналов, такие как зиконотид и родственные ему соединения, описанные,например, в ЕР 625162 В 1, US5364842, US5587454, US5824645, US5859186, US5994305, US6087091,US6136786, WO93/13128 A1, ЕР 1336409 A1, ЕР 835126 A1, ЕР 835126 B1, US5795864, US5891849,US6054429, WO97/01351 A1, можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии. Различные антагонисты рецепторов NK-1, NK-2 и NK-3 (обзор: Giardina et al. 2003, Drugs 6:758) можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии. Антагонисты рецептора NK1, такие как апрепитант (MerckСо Inc.), вофопитант, эзлопитант(Pfizer, Inc.), R-673 (Hoffmann-La Roche Ltd), SR-48968 (Sanofi Synthelabo), CP-122721 (Pfizer, Inc.),GW679769 (Glaxo Smith Kline), TAK-637 (Takeda/Abbot), SR-14033 и родственные им соединения, описанные, например, в ЕР 873753 A1, US20010006972 A1, US20030109417 A1, WO01/52844 A1, можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии. Антагонисты рецептора NK-2, такие как непадутант (Menarini Ricerche SpA), саредутант (SanofiSynthelabo), GW597599 (Glaxo Smith Kline), SR-144190 (Sanofi-Synthelabo) и UK-290795 (Pfizer Inc.),можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии. Антагонисты рецептора NK3, такие как осанетант (SR-142801; Sanofi-Synthelabo), SSR-241586, талнетант и родственные им соединения, описанные, например, в WO02/094187 А 2, ЕР 876347 A1,WO97/21680 A1, US6277862, WO98/11090, WO95/28418, WO97/19927 и Boden et al. (J. Med. Chem. 39:1664-75, 1996), можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии. Ингибиторы обратного поглощения норэпинефрина-серотонина (NSRI), такие как милнаципран и родственные им соединения, описанные в WO03/077897 А 1, можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии. Антагонисты ваниллоидного рецептора, такие как арванил и родственные соединения, описанные вWO01/64212 А 1, можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии. Обезболивающие полипептиды и соединения можно вводить в сочетании с полипептидами и агонистами, описанными в данном описании (одновременно или последовательно). Обезболивающие средства также можно ковалентно присоединить к описанным в данном описании полипептидам и агонистам с получением терапевтических конъюгатов. Если обезболивающее средство представляет собой полипептид, ковалентно присоединенный к описанному в данном описании средству, полученный в результате полипептид также может содержать по меньшей мере одну область расщепления трипсином. Присут- 23020466 ствующий в полипептиде обезболивающий полипептид может находиться до (если он присоединен по карбоксиконцу) или после (если он присоединен по аминоконцу) области расщепления трипсином, которая обеспечивает высвобождение обезболивающего полипептида. В дополнение к сиалорфин-родственным полипептидам обезболивающие полипептиды включают:AspPhe, эндоморфин-1, эндоморфин-2, ноцистатин, даларгин, лупрон, зиконотид и вещество Р. Средства для лечения желудочно-кишечных заболеваний. Примеры других терапевтических средств для лечения желудочно-кишечных и других заболеваний включают средства для лечения констипации (например, активаторы каналов хлоридных ионов, такие как бициклические жирные кислоты, лубипростон (ранее известный как SPI-0211; Sucampo Pharmaceuticals, Inc.; Bethesda, MD), слабительные средства (например, слабительные, увеличивающие объем кишечного содержимого (такие как отличные от крахмала полисахариды, Colonel Tablet (поликарбофил кальция), Plantago Ovata, Equalactin (поликарбофил кальция, волокна (например, FIBERCON (поликарбофил кальция), осмотические слабительные средства, стимулирующие слабительные средстваLaboratories, Braintree MA), декслоксиглумид (Forest Laboratories, также известный как CR 2017 Rottapharm (Rotta Research Laboratorium SpA, слабительные средства на основе солевых растворов, клизмы,суппозитории и CR 3700 (Rottapharm (Rotta Research Laboratorium SpA); средства, понижающие кислотность, такие как ингибиторы протонного насоса (например, омепразол (Prilosec), эзомепрозол (Nexium), лансопразол (Prevacid), пантопразол (Protonix) и рабепразол (Aciphex и антагонисты рецептора гистамина Н 2 (также известные как блокаторы рецептора Н 2, которые включают циметидин,ранитидин, фамотидин и низатидин); прокинетические средства, включающие итоприд, октреотид, бетанехол, метоклопрамид (Reglan), домперидон (Motilium), эритромицин (и его производные) или цисаприд (Propulsid); гомологи, варианты и химерные формы прокинетических полипептидов, включая описанные в US 7052674, которые можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами или в присоединенном к ним состоянии; средства, повышающие подвижность, такие как вазостатин-производный полипептид, хромогранин А (4-16) (см., например, Ghia et al. 2004 RegulatoryPolypeptides 121:31) или агонисты мотилин (например, GM-611 или митемцинал фумарат) или модуляторы рецепторов ноцицептина/орфанина FQ (US20050169917); другие пептиды, способные связывать и/или активировать GC-C, включая описанные в US20050287067; полные или частичные агонисты или антагонисты рецептора 5 НТ (например, 5 НТ 1, 5 НТ 2, 5 НТЗ, 5 НТ 4) (включая антагонисты 5 НТ 1 А (например,AGI-OOI (терапевтические средства AGI), антагонисты 5 НТ 2 В (например, PGN 1091 и PGN1164 (Pharmagene Laboratories Limited) и агонисты рецептора 5 НТ 4 (такие как тегасерод (ZELNORM), прукалоприд, мосаприд, метоклопрамид, закоприд, цисаприд, рензаприд, производные бензимидазолона, такие как BIMU 1 и BIMU 8, и лирексаприд). Такие агонисты/модуляторы описаны в ЕР 1321142 A1,WO03/053432 А 1, ЕР 505322 А 1, ЕР 505322 B1, US5510353, ЕР 507672 А 1, ЕР 507672 Bl, US5273983 иDDP-225 (MCI-225; Dynogen Pharmaceuticals, Inc.), цилансетрон (Calmactin), алосетрон (Lotronex),ондансетрон HCl (Zofran), доласетрон (ANZEMET), палоносетрон (Aloxi), гранисетрон (Kytril),YM060 (рамосетрон; Astellas Pharma Inc.; суточная доза рамосетрона может составлять от 0,002 до 0,02 мг, как описано в ЕР 01588707) и ATI-7000 (Aryx терапевтические средства, Santa Clara CA); агонисты мускаринового рецептора; противовоспалительные средства; антиспастические средства, включающие,но без ограничения, антихолинергические средства (такие как дицикломин (например, Colimex, Formulex, Lomine, Protylol, Visceral, Spasmoban, Bentyl, Bentylol), гиоциамин (например, IBStat, Nulev, Levsin, Levbid, Levsinex Timecaps, Levsin/SL, Anaspaz, A-Spas S/L, Cystospaz,Cystospaz-M, Donnamar, Colidrops Liquid Pediatric, Gastrosed, Hyco Elixir, Hyosol, Hyospaz,Hyosyne, Losamine, Medispaz, Neosol, Spacol, Spasdel, Symax, Symax SL), доннатал (например, Donnatal Extentabs), клидиний (например, кварзан, в сочетании с либриумом = либракс), метантелин (например, бантин), мепензолат (например, кантил), гоматропин (например, гикодан, гомапин), пропантелина бромид (например, пробантин), гликопирролат (например, Robinul, Robinul Forte), скополамин (например, Transderm-Scop, Transderm-V), гиосин-N-бутилбромид (например, Buscopan),пирензепин (например, Gastrozepin), пропантелина бромид (например, Propanthel), дицикловерин(например, Merbentyl), гликопиррония бромид (например, Glycopyrrolate), гиосцина гидробромид,гиосцина метобромид, метантелиний и октатропин); масло перечной мяты; и прямые релаксанты гладкой мускулатуры, такие как циметропия бромид, мебеверин (DUSPAT AL, DUSPATALIN, COLOFAC(включая тримебутина малеат (Modulon); антидепрессанты, включающие, но без ограничения, перечисленные в данном описании, а также трициклические антидепрессанты, такие как амитриптилин (Ela- 24020466vil), десипрамин (Norpramin), имипрамин (Tofranil), амоксапин (Asendin), нортриптилин; селективные ингибиторы обратного поглощения серотонина (SSRT), такие как пароксетин (Paxil), флюоксетин (Prozac), сертралин (Zoloft) и цитралопрам (Celexa); а также другие, такие как доксепин (Sinequan) и тразодон (Desyrel); обезболивающие средства центрального действия, такие как агонисты опиоидных рецепторов, антагонисты опиоидных рецепторов (например, налтрексон); средства для лечения воспалительной болезни кишечника; средства для лечения болезни Крона и/или язвенного колита(Genzyme, Inc.; Cambridge, MA) и TRAFICET-EN (ChemoCentryx, Inc.; San Carlos, CA); средства для лечения желудочно-кишечной или висцеральной боли; средства, повышающие уровень cGMP (как описано в US20040121994), такие как антагонисты адренэргических рецепторов, агонисты рецептора допамина и PDE (фосфодиэстеразы) ингибиторы, включающие, но без ограничения, раскрытые в данном описании; слабительные средства, способствующие перемещению жидкостей в кишечник (например,VISICOL, сочетание моногидрата одноосновного фосфата натрия и безводного двухосновного фосфата натрия); кортикотропин-рилизинг фактор (CRF) антагонисты рецепторов (включая NBI-34041 (Neurocrine Biosciences, San Diego, CA), CRH9-41, астрессин, R121919 (Janssen Pharmaceutica), CP154,526, NBI27914, анталармин, DMP696 (Bristol-Myers Squibb) CP-316,311 (Pfizer, Inc.), SB723620 (GSK), GW876008(DPP-IV опосредует инактивацию glp-1); тофизопам, энантиомерно чистый R-тофизопам, и их фармацевтически приемлемые соли (US20040229867); трициклические антидепрессанты дибензотиазепинового типа, включающие, но без ограничения, Dextofisopam (Vela Pharmaceuticals), тианептин (Stablon) и другие средства, описанные в US6683072; нонаэтиленгликольметиловый эфир (Е)-4-(1,3-бис(циклогексилметил)-1,2,3,4,-тетрагидро-2,6-дионо-9 Н-пурин-8-ил)коричной кислоты и родственные соединения, описанные в WO02/067942; пробиотик PROBACTRIX (The BioBalance Corporation; NewYork, NY), который содержит микрорганизмы, используемые для лечения желудочно-кишечных заболеваний; антидиарейные средства, включающие, но без ограничения, лоперамид (имодиум, Pepto Diarrhea),дифеноксилат с атропином (ломотил, ломокот), холестирамин (Questran, Cholybar), атропин (кофенотроп,диарсед, дифеноксилат, лофен, логен, лонокс, виатро, инъекция атропина сульфата) и Xifaxan (рифаксимин; Salix Pharmaceuticals Ltd), TZP-201 (Tranzyme Pharma Inc.), блокатор нейронного рецептора ацетилхолина (nAChR) AGI-004 (AGI терапевтические средства) и висмута субсалицилат (пептовисмол); анксиолитические средства, включающие, но без ограничения, ативан (лоразепам), алпразолам (Xanax),хлордиазепоксид/клидиний (Librium, Librax), клоназепам (Klonopin), клоразепат (Tranxene), диазепам (Valium), эстазолам (ProSom), флуразепам (Dalmane), оксазепам (Serax), празепам(AGI терапевтические средства); антагонисты нейрокинина, включая описанные в US20060040950; модуляторы калиевого канала, включая описанные в US7002015; модулятор серотонина AZD7371 (AstraZeneca PIc); антагонисты мускаринового рецептора М 3, такие как дарифенацин (Enablex; Novartis AG и заминенацин (Pfizer); растительные и природные терапевтические средства, включающие, но без ограничения, ацидофиллин, ромашковый чай, масло энотеры, семена фенхеля, полынь горькая, окопник лекарственный, а также соединения Вао-Ji-Wan (магнолол, гонокиол, императорин и изоимператорин), описанные в US6923992; и композиции, содержащие лизин и антистрессовое средство, для лечения синдрома раздраженного кишечника, как описано в ЕРО 1550443. Инсулин и инсулин-модулирующие средства. Пептиды GCRA, описанные в данном описании, можно использовать в сочетанной терапии вместе с инсулином и родственными соединениями, включающими инсулин приматов, грызунов или кроликов,включая биологически активные варианты инсулина, включающие аллельные варианты, более предпочтительно человеческий инсулин, доступный в рекомбинантной форме. Источники человеческого инсулина включают фармацевтически приемлемые и стерильные композиции, например, поставляемые EliLilly (Indianapolis, Ind. 46285) в виде Humulin (полученный с использованием рДНК человеческого инсулина); см., THE PHYSICIAN'S DESK REFERENCE, 55.sup.th Ed. (2001) Medical Economics, ThomsonHealthcare (где раскрыты другие подходящие человеческие инсулины). Пептиды GCRA, описанные в данном описании, также можно использовать в сочетанной терапии вместе со средствами, способными усиливать эффекты или повышать уровни инсулина у субъекта после введения, такими как глипизид и/или розиглитазон. Полипептиды и агонисты, описанные в данном описании, можно использовать в сочетанной терапии вместе с SYMLIN (прамлинтида ацетат) и Exenatide(синтетический эксендин-4; полипептид, содержащий 39 аминокислот). Средства для лечения послеоперационной кишечной непроходимости. Пептиды GCRA, описанные в данном описании, также можно использовать в сочетанной терапии вместе со средствами, используемыми для лечения послеоперационной кишечной непроходимости и других заболеваний (такими как Entereg (алвимопан; ранее называемый адолор/ADL 8-2698), кониваптан и родственные средства, описанные в US6645959). Антигипертензивные средства. Пептиды GCRA, описанные в данном описании, можно использовать в сочетанной терапии вместе с антигипертензивными средствами, включающими, но без ограничения: (1) диуретики, такие как тиазиды, включающие хлорталидон, хлортиазид, дихлорфенамид, гидрофлуметиазид, индапамид, политиазид и гидрохлортиазид; петлевые диуретики, такие как буметанид, этакриновая кислота, феросемид и торсемид; калийсберегающие мочегонные средства, такие как амилорид и триамтерен; ингибиторы карбоангидразы, осмотические средства (такие как глицерин) и антагонисты альдостерона, такие как спиронолактон, эпиренон и т.п.; (2) бета-адренергические блокаторы, такие как ацебутолол, атенолол, бетаксолол, бевантолол, бисопролол, бопиндолол, картеолол, карведилол, селипролол, эсмолол, инденолол, метапролол, надолол, небиволол, пенбутолол, пиндолол, пропанолол, соталол, тертатолол, тилизолол, тимолол и т.п.; (3) блокаторы кальциевых каналов, такие как амлодипин, аранидипин, азелнидипин, барнидипин, бенидипин, бепридил, циналдипин, клевидипин, дилтиазем, эфонидипин, фелодипин, галлопамил, исрадипин, лацидипин, лемилдипин, лерканидипин, никардипин, нифедипин, нилвадипин, нимодепин, низолдипин, нитрендипин, манидипин, пранидипин, верапамил и т.п.; (4) ингибиторы ангиотензинконвертирующего фермента (АСЕ), такие как беназеприл; каптоприл, серанаприл, силазаприл, делаприл,эналаприл, эналоприл, фосиноприл, имидаприл, лизиноприл, лозиноприл, моексиприл, хинаприл, хинаприлат, рамиприл, периндоприл, периндроприл, кваниприл, спираприл, тенокаприл, трандолаприл, зофеноприл и т.п.; (5) ингибиторы нейтральной эндопептидазы, такие как омапатрилат, кадоксатрил и экадотрил, фосидотрил, сампратрилат, AVE7688, ER4030 и т.п.; (6) антагонисты эндотелина, такие как тезосентан, А 308165, YM62899 и т.п.; (7) сосудорасширяющие средства, такие как гидралазин, клонидин,миноксидил, никотиниловый спирт и т.п.; (8) антагонисты рецептора ангиотензина II, такие как апросартан, кандесартан, эпросартан, ирбесартан, лосартан, олмесартан, пратосартан, тазосартан, телмисартан,валсартан, ЕХР-3137, FI6828K, RNH6270 и т.п.; (9) /-адренэргические блокаторы, такие как нипрадилол, аротинолол, амосулалол и т.п.; (10) альфа 1-блокаторы, такие как теразоцин, урапидил, празоцин,тамсулоцин, буназоцин, тримазоцин, доксазоцин, нафтопидил, индорамин, WHP 164, XENOIO и т.п.;WO03/030833. Конкретные антигипертензивные средства, которые можно использовать в сочетании с описанными в данном описании полипептидами и агонистами, включают, но без ограничения: диуретики, такие как тиазиды (например, хлорталидон, циклотиазид (CAS RN 2259-96-3), хлортиазид (CAS RN 72956-09-3, который можно получить по способу, раскрытому в US2809194), дихлорфенамид, гидрофлуметиазид, индапамид, политиазид, бендрофлуметазид, метиклотазид, политиазид, трихлорметазид, хлорталидон, индапамид, метолазон, квинетазон, алтиазид (CAS RN 5588-16-9, который можно получить по способу, раскрытому в Британском патенте 902658), бензтиазид (CAS RN 91-33-8, который можно получить по способу, раскрытому в US3108097), бутиазид (который можно получить по способу, раскрытому в Британском патенте 861367) и гидрохлортиазид, петлевые диуретики (например, буметанид, этакриновая кислота, феросемид и торасемид), калийсберегающие мочегонные средства (например,амилорид и триамтерен (CAS396-01-0 и антагонисты альдостерона (например, спиронолактон (CAS52-01-7) эпиренон и т.п.); -адренэргические блокаторы, такие как амиодарон (кордарон, пацерон),бунолола гидрохлорид (CAS RN 31969-05-8, Parke-Davis), ацебутолол )-N-[3-ацетил-4-[2-гидрокси-3[(1-метилэтил)амино]пропокси]фенил]бутанамид или -3'-ацетил-4'-[2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси]бутиранилид), ацебутолола гидрохлорид (например, Sectral, Wyeth-Ayerst), альпренолола гидрохлорид (CAS RN 13707-88-5 см. патентная заявка Нидерландов 6605692), атенолол (например,Tenormin, AstraZeneca), картеолола гидрохлорид (например, Cartrol Filmtab, Abbott), селипролола гидрохлорид (CAS RN 57470-78-7, также см. US4034009), цетамолола гидрохлорид (CAS RN 77590-95-5,см. также US4059622), лабеталола гидрохлорид (например, Normodyne, Schering), эсмолола гидрохлорид (например, Brevibloc, Baxter), левобетаксолола гидрохлорид (например, Betaxon, глазная суспензия, Alcon), левобунолола гидрохлорид (например, Betagan Liguifilm и С CAP Compliance Cap, Allergan), надолол (например, надолол, Mylan), практолол (CAS RN 6673-35-4, см. также US3408387), пропранолола гидрохлорид (CAS RN 318-98-9), соталола гидрохлорид (например, Betapace AF, Berlex),тимолол (полугидрат (S)-1-[(1,1-диметилэтил)амино]-3-4-4(4-морфолинил)-1,2,5-тиадиазол-3-ил]окси]2-пропанола, CAS RN 91524-16-2), тимолола (малеатная соль (S)-1-[(1,1-диметилэтил)амино]-3-4-(4 морфолинил)-1,2,5-тиадиазол-3-ил]окси]-2-пропанол-(Z)-2-бутендиоата (1:1), CAS RN 26921-17-5), бисопролол )-(1-[4-2-(1-метилэтокси)этокси]метил]феноксил]-3-[(1-метилэтил)амино]-2-пропанол, CASRN 66722-44-9), бисопролола фумарат (такой как -1-[4-2-(1-метилэтокси)этокси]метил]фенокси]-3[(1-метилэтил)амино]-2-пропанол (Е)-2-бутендиоат (2:1) (соль), например, Zebeta, Lederle Consumer),небивалол ('-[имино-бис-(метилен)]-бис-[6-фтор-3,4-дигидро-2 Н-1-бензопиран-2-метанол, CAS RN 99200-09-6, см. также патент США 4654362), циклопролола гидрохлорид, такой как гидрохлорид 1-[4- 26020466(N-[4-[2-гидрокси-3-[(1-метилэтил)амино]пропокси]фенил]ацетамид, CAS RN 6673-35-4;) трипренолола гидрохлорид (гидрохлорид -1-[(1 метилэтил)амино]-3-[2-(метилтио)фенокси]пропанола, CAS RN 39832-43-4), толамолол (4-[2-2 гидрокси-3-(2-метилфенокси)пропил]амино]этоксил]бензамид, CAS RN 38103-61-6), бопиндолол, инденолол, пиндолол, пропанолол, тертатолол, тилизолол и т.п.; блокаторы кальциевого канала, такие как безилат амлодипина (такой как бензолсульфонат 3-этил-5-метил-2-(2-аминоэтоксиметил)-4-(2 хлорфенил)-1,4-дигидро-6-метил-3,5-пиридиндикарбоксилата, например, Norvasc, Pfizer), клентиазема малеатZ)-2-бутендиоат 3-(ацетилокси)-8-хлор-5-[2-(диметиламино)этил]-2,3-дигидро-2-(4 метоксифенил)-(2S-цис)-1,5-бензотиазепин-4(5 Н)-она, (1:1), см. также US4567195), исрадипин )-4(4 бензофуразанил)-1,4-дигидро-2,6-диметил-3,5-пиридиндикарбоксилат метил-1-метилэтилового эфира 4(4-бензофуразанил)-1,4-дигидро-2,6-диметил-З,5-пиридиндикарбоновой кислоты, см. также US4466972); нимодипин (такой как изопропил(2-метоксиэтил)-1,4-дигидро-2,6-диметил-4-(3-нитрофенил)-3,5 пиридиндикарбоксилат, например, Nimotop, Bayer), фелодипин (такой как этилметил 4-(2,3 дихлорфенил)-1,4-дигидро-2,6-диметил-3,5-пиридиндикарбоксилат, например Plendil длительного высвобождения, AstraZeneca LP), нилвадипин (3-метил-5-(1-метилэтиловый) эфир 2-циано-1,4-дигидро-6 метил-4-(3-нитрофенил)-3,5-пиридиндикарбоновой кислоты, см. также US3799934), нифедипин (такой как диметиловый сложный эфир 1,4-дигидро-2,6-диметил-4-(2-нитрофенил)-3,5-пиридиндикарбоновой кислоты, например Procardia XL таблетки длительного высвобождения, Pfizer), дилтиазема гидрохлорид (такой как моногидрохлорид (+)-цис-3-(ацетилокси)-5-[2-(диметиламино)этил]-2,3-дигидро-2(4 метоксифенил)-1,5-бензотиазепин-4 (5 Н)-она, например, Tiazac, Forest), верапамила гидрохлорид (такой как гидрохлорид (альфа)-3-2-(3,4-диметоксифенил)этил]метиламино]пропил]-3,4-диметокси(альфа)-(1-метилэтил)бензолацетонитрила, например Isoptin SR, Knoll Labs), телудипина гидрохлорид(1986); 40:543 (1986, силазаприл (Hoffman-LaRoche) раскрытый в J. Cardiovasc. Pharmacol. 9:39 (1987),индалаприл (делаприла гидрохлорид (1,1-диоксид 3-бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил-6-хлор-3,4-дигидро 2 Н-1,2,4-бензотиадиазин-7-сульфонамида, CAS RN 2259-96-3); раскрытый в US4385051), эналаприл (а также другие, раскрытые в US4374829), эналоприл, эналоприлат, фосиноприл такой как натриевая соль 4-циклогексил-1-2-метил-1-(1-оксопропокси)пропокси](4-фенилбутил)фосфинил]ацетил]-L-пролина,например моноприл, Bristol-Myers Squibb, а также другие, раскрытые в US4168267), фосиноприл натрия(Supp. 5): 173 (1986, тенокаприл, трандолаприл, зофеноприл (а также другие, раскрытые в US4316906),рентиаприл (фентиаприл, раскрытый в Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 10:131 (1983, пиворил, YS980, тепротид (потенциирующий фактор брадикинина ВРР 9 а CAS RN 35115-60-7), BRL 36,378 (Smith Kline(1986), CGS 14824 (Ciba-Geigy, 3-([1-этоксикарбонил-3-фенил-(1S)-пропил]амино)-2,3,4,5-тетрагидро-2 оксо-1-(3S)-бензазепин-1-уксусная кислота HCl, см. патент Великобритании 2103614), CGS 16617 (Ciba-Geigy,3(S)-(1S)-5-амино-1-карбоксипентил]амино]-2,3,4,5-тетрагидро-2-оксо-1 Н-1-бензазепин-1 этановая кислота, см. US4473575), RU 44570 (Hoechst, см. Arzneimittelforschung 34:1254 (1985, R 312201 (Hoffman-LaRoche см. FEBS Lett. 165:201 (1984, CI925 (Pharmacologist 26:243, 266 (1984, WY44221 (Wyeth, см. J. Med. Chem. 26:394 (1983, а также раскрытые в US2003006922 (параграф 28),US4337201, US4432971 (фосфонамидаты); ингибиторы нейтральной эндопептидазы, такие как омапатрилат (Vanlev), CGS 30440, кадоксатрил и экадотрил, фасидотрил (также известный как аладотрил или алатриоприл), сампратрилат, миксанприл и гемопатрилат, AVE7688, ER4030, а также раскрытые вUS5362727, US5366973, US5225401, US4722810, US5223516, US4749688, US5552397, US5504080,US5612359, US5525723, ЕР 0599444, ЕР 0481522, ЕР 0599444, ЕР 0595610, ЕР 0534363, ЕР 534396,ЕР 534492, ЕР 0629627; антагонисты эндотелина, такие как тезосентан, А 308165 и YM62899, и т.п.; сосудорасширяющие средства, такие как гидралазин (апресолин), клонидин (клонидина гидрохлорид (моногидрохлорид N-(2,6-дихлорфенил)-4,5-дигидро-1 Н-имидазол-2-амина, CAS RN 4205-91-8), катапрес, миноксидил (лонитен), никотиниловый спирт (рониасол), дилтиазема гидрохлорид (такой как моногидрохлорид (+)-цис-3-(ацетилокси)-5-[2-(диметиламино)этил]-2,3-дигидро-2-(4-метоксифенил)-1,5-бензотиазепин-4(5 Н)-она, например Tiazac, Forest), изосорбида динитрат (такой как 1,4:3,6-диангидро-Dглюцитола 2,5-динитрат, например Isordil Titradose, Wyeth-Ayerst), сосорбида мононитрат (такой как 1,4 : 3,6-диангидро-D-глюцито-1,5-нитрат, органический нитрат, например Ismo, Wyeth-Ayerst), нитроглицерин (такой как 2,3 пропантриола тринитрат, например Nitrostat Parke-Davis), верапамила гидрохлорид (такой как гидрохлорид -(альфа)-[3-2-(3,4-диметоксифенил)этил]метиламино]пропил]-3,4 диметокси-(альфа)-(1-метилэтила)бензолацетонитрила, например Covera HS длительного высвобождения, Searle), хромонар (который можно получить по способу, раскрытому в US 3282938), клонитат (Annalen 1870 155), дропрениламин (который можно получить по способу, раскрытому в DE 2521113), лидофлазин (который можно получить по способу, раскрытому в US 3267104); прениламин (который можно получить по способу, раскрытому в US 3152173), пропатила нитрат (который можно получить по способу, раскрытому в патенте Франции 1103113), миофлазина гидрохлорид (дигидрохлорид 3(аминокарбонил)4-[4,4-бис-(4-фторфенил)бутил]-N-(2,6-дихлорфенил)-1-пиперазинацетамида, CAS RN 83898-67-3), миксидин (бензолэтанамин 3,4-диметокси-N-(1-метил-2-пирролидинилиден)пирролидина, 2[(3,4-диметоксифенетил)имино]-1-метил-1-метил-2-[(3,4-диметоксифенетил)имино]пирролидин, CAS RN 27737-38-8), молсидомин (внутренняя соль 5-[(этоксикарбонил)амино]-3-(4-морфолинил)-1,2,3 оксадиазолия, CAS RN 25717-80-0), изосорбида мононитрат (5-нитрат 1,4:3,6-диангидро-D-глюцитола,CAS RN 16051-77-7), эритритила тетранитрат (тетранитрат (2R,3S)-rel-1,2,3,4-бутантетрола, CAS RN 7297-25-8), клонитрат (динитрат 3-хлор-1,2-пропандиола, (7Cl, 8Cl, 9Cl) CAS RN 2612-33-1), дипиридамол (2,2',2",2'"-[(4,8-ди-1-пиперидинилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,6-диил)динитрило]тетракисэтанола,CAS RN 58-32-2), никорандил (CAS RN 65141-46-03), пиридинкарбоксамид (метил 2-метилпропиловый эфир 1,4-дигидро-2,6-диметил-4-(2-нитрофенил)-N-[2-(нитроокси)этил]низолдипин-3,5-пиридиндикарбоновой кислоты, CAS RN 63675-72-9), нифедипин (диметиловый эфир 1,4-дигидро-2,6-диметил-4-(2 нитрофенил)-3,5-пиридиндикарбоновой кислоты, CAS RN 21829-25-4), пергексилина малеат 2Z)-2 бутендиоат 2-(2,2-дициклогексилэтил)пиперидина, (1:1) CAS RN 6724-53-4), окспренолола гидрохлорид(-[3-2-(3,4-диметоксифенил)этил]метиламино]пропил]-3,4-диметокси(1 метилэтил)бензолацетонитрила, CAS RN 52-53-9) и т.п.; антагонисты рецептора ангиотензина II, такие как апросартан, золасартан, олмесартан, пратосартан, FI6828K, RNH6270, кандесартан (2-этокси-1-2'(1 Н-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]4-ил]метил]-1 Н-бензимидазол-7-карбоновая кислота, CAS RN 13948159-7), кандесартан цилексетил )-1-(циклогексилкарбонилокси)этил-2-этокси-1-2'-(1 Н-тетразол-5 ил)бифенил-4-ил]-1 Н-бензимидазолкарбоксилат, CAS RN 145040-37-5, US5703110 и US5196444), эпросартан (3-[1-(4-карбоксифенилметил)-2-н-бутилимидазол-5-ил]-(2-тиенилметил)пропеновая кислота,US5185351 и US5650650), ирбесартан (2-н-бутил-3-2'-(1 Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил]метил]-1,3 диазаспиро[4,4]нон-1-ен-4-он, US5270317 и US5352788), лосартан (2-N-бутил-4-хлор-5-гидроксиметил-1- 28020466(3 Н)-он,3-[2'-карбоксибифенил-4-ил)метил]-2-циклопропил-7-метил-3 Н-имидазо[4,5-b]пиридин,2 бутил-4-хлор-1-[(2'-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил)метил]имидазолкарбоновая кислота, калиевая соль 1(этоксикарбонилокси)этилового эфира 2-бутил-4-хлор-1-2'-(1 Н-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4 ил]метил]-1 Н-имидазол-5-карбоновой кислоты,дикалий 2-бутил-4-(метилтио)-1-2(пропиламино)карбонил]амино]сульфонил](1,1'-бифенил)-4-ил]метил]-1 Н-имидазол-5-карбоксилат,метил-2-4-бутил-2-метил-6-оксо-5-2'-(1 Н-тетразол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-ил]метил]-1-(6 Н)-пиримидинил]метил]-3-тиофенкарбоксилат,5-[(3,5-дибутил-1 Н-1,2,4-триазол-1-ил)метил]-2-[2-(1 Н-тетразол-5 илфенил)]пиридин, соль D,L-лизина 6-бутил-2-(2-фенилэтил)-5-2'-(1 Н-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4 метил]пиримидин-4-(3 Н)-она, 5-метил-7-н-пропил-8-2'-(1 Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил]метил]-[1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3 Н)-он, калиевая соль 2,7-диэтил-5-2'-(5-тетразолил)бифенил-4-ил]метил]5 Н-пиразоло[1,5-b][1,2,4]триазола, калиевая соль этилового эфира 2-[2-бутил-4,5-дигидро-4-оксо-3-[2'(1 Н-тетразол-5-ил)-4-бифенилметил]-3 Н-имидазол[4,5-с]пиридин-5-илметил]бензойной кислоты, 3 метокси-2,6-диметил-4-2'(1 Н-тетразол-5-ил)-1,1'-бифенил-4-ил]метокси]пиридин,2-этокси-1-2'-(5 оксо-2,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бифенил-4-ил]метил]-1 Н-бензимидазол-7-карбоновая кислота, 1[N-(2'-(1 Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-илметил)-N-валеролиламинометил) циклопентан-1-карбоновая кислота, 7-метил-2-н-пропил-3-2'-1 Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил]метил]-3 Н-имидазо[4,5-6]пиридин, 2[5-[(2-этил-5,7-диметил-3 Н-имидазо[4,5-b]пиридин-3-ил)метил]-2-хинолинил]бензоат натрия, 2-бутил-6 хлор-4-гидроксиметил-5-метил-3-2'-(1 Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил]метил]пиридин,(тетразол-5 ил)бифенил-4-ил]метил]пиримидин-6-он-2-2-бутил-1-[(4-карбоксифенил)метил]-1 Н-имидазол-5-ил]метил]амино]бензойная кислота,4(S)-[4-(карбоксиметил)фенокси]-N-[2(R)-[4-(2-сульфобензамидо)имидазол-1-ил]октаноил]-L-пролин,1-(2,6-диметилфенил)-4-бутил-1,3-дигидро-3-6-[2-(1 Нтетразол-5-ил)фенил]-3-пиридинил]метил]-2 Н-имидазол-2-он, 5,8-этано-5,8-диметил-2-н-пропил-5,6,7,8 тетрагидро-1-2'-(1 Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил]метил]-1 Н,4 Н-1,3,4 а,8 а-тетразациклопентанафталин 9-он, 4-[1-[2'-(1,2,3,4-тетразол-5-ил)бифен-4-ил)метиламино]-5,6,7,8-тетрагидро-2-трифулхиназолин, 2(2-хлорбензоил)имино-5-этил-3-[2'-(1 Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил)метил-1,3,4-тиадиазолин, дикалиевая соль 2-[5-этил-3-[2-(1 Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил]метил-1,3,4-тиазолин-2-илиден]аминокарбонил 1-циклопентенкарбоновой кислоты и 1-этоксикарбонилоксиэтиловый эфир 2-бутил-4-[N-метил-N-(3 метилкротоноил)амино]-1-2'-(1 Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил]метил]-1 Н-имидазол-5-карбоновой кислоты, а также раскрытые в патентных публикациях ЕР 475206, ЕР 497150, ЕР 539086, ЕР 539713,ЕР 535463, ЕР 535465, ЕР 542059, ЕР 497121, ЕР 535420, ЕР 407342, ЕР 415886, ЕР 424317, ЕР 435827,ЕР 433983, ЕР 475898, ЕР 490820, ЕР 528762, ЕР 324377, ЕР 323841, ЕР 420237, ЕР 500297, ЕР 426021,ЕР 480204, ЕР 429257, ЕР 430709, ЕР 434249, ЕР 446062, ЕР 505954, ЕР 524217, ЕР 514197, ЕР 514198,ЕР 514193, ЕР 514192, ЕР 450566, ЕР 468372, ЕР 485929, ЕР 503162, ЕР 533058, ЕР 467207 ЕР 399731,ЕР 399732, ЕР 412848, ЕР 453210, ЕР 456442, ЕР 470794, ЕР 470795, ЕР 495626, ЕР 495627, ЕР 499414,ЕР 499416, ЕР 499415, ЕР 511791, ЕР 516392, ЕР 520723, ЕР 520724, ЕР 539066, ЕР 438869, ЕР 505893,ЕР 530702, ЕР 400835, ЕР 400974, ЕР 401030, ЕР 407102, ЕР 411766, ЕР 409332, ЕР 412594, ЕР 419048,ЕР 480659, ЕР 481614, ЕР 490587, ЕР 467715, ЕР 479479, ЕР 502725, ЕР 503838, ЕР 505098, ЕР 505111,ЕР 513979, ЕР 507594, ЕР 510812, ЕР 511767, ЕР 512675, ЕР 512676, ЕР 512870, ЕР 517357, ЕР 537937,ЕР 534706, ЕР 527534, ЕР 540356, ЕР 461040, ЕР 540039, ЕР 465368, ЕР 498723, ЕР 498722, ЕР 498721,ЕР 515265, ЕР 503785, ЕР 501892, ЕР 519831, ЕР 532410, ЕР 498361, ЕР 432737, ЕР 504888, ЕР 508393,ЕР 508445, ЕР 403159, ЕР 403158 ЕР 425211, ЕР 427463, ЕР 437103, ЕР 481448, ЕР 488532, ЕР 501269,ЕР 500409, ЕР 540400, ЕР 005528, ЕР 028834, ЕР 028833, ЕР 411507, ЕР 425921, ЕР 430300, ЕР 434038,ЕР 442473, ЕР 443568, ЕР 445811, ЕР 459136, ЕР 483683, ЕР 518033, ЕР 520423, ЕР 531876, ЕР 531874,ЕР 392317, ЕР 468470, ЕР 470543, ЕР 502314, ЕР 529253, ЕР 543263, ЕР 540209, ЕР 449699, ЕР 465323,ЕР 521768, ЕР 415594, WO92/14468, WO93/08171, WO93/08169, WO91/00277, WO91/00281, WO91/14367,WO92/00067, WO92/00977, WO92/20342, WO93/04045, WO93/04046, WO91/15206, WO92/14714,WO92/09600, WO92/16552, WO93/05025, WO93/03018, WO91/07404, WO92/02508, WO92/13853,WO91/19697, WO91/11909, WO91/12001, WO91/11999, WO91/15209, WO91/15479, WO92/20687,WO92/20662, WO92/20661, WO93/01177, WO91/14679, WO91/13063, WO92/13564, WO91/17148,WO91/18888, WO91/19715, WO92/02257, WO92/04335, WO92/05161, WO92/07852, WO92/15577,WO93/03033, WO91/16313, WO92/00068, WO92/02510, WO92/09278, WO92/10179, WO92/10180,WO92/10186, WO92/10181, WO92/10097, WO92/10183, WO92/10182, WO92/10187, WO92/10184,- 29