Способ лечения депрессии

Дата публикации и выдачи патента Номер заявки Изобретение относится к способу лечения депрессии, включающему введение субъекту,нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества одного или нескольких описанных в патенте новых производных сульфамида формулы (I) и формулы (II), содержащих гетероцикл, конденсированный с бензольным кольцом. Настоящее изобретение направлено на способ лечения депрессии, который включает монотерапию и, в качестве альтернативы, котерапию,с дополнительным введением как минимум одного антидепрессанта. 015392 Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение направлено на применение производных сульфамида, включающих гетероцикл, конденсированный с бензольным кольцом, для лечения депрессии, включая как монотерапию, так и котерапию как минимум с одним антидепрессантом. Предпосылки изобретения Униполярную депрессию определяют как ежедневное депрессивное настроение с минимальной продолжительностью в две недели. Депрессивный эпизод может характеризоваться унынием, безразличием или апатией либо раздражительностью и обычно связан с изменением ряда нейровегетативных функций, включая характер сна, аппетит и массу тела, двигательное возбуждение или торможение, утомление, нарушение концентрации и принятия решений, ощущение стыда или вины и мысли о смерти или об умирании (Harrison's Principles of Internal Medicine, 2000). Критерий большого депрессивного эпизода включает пять или более симптомов, которые присутствуют в течение того же 2-недельного периода,причем это состояние представляет собой изменение по сравнению с предыдущим состоянием, и где хотя бы один из симптомов представляет собой либо депрессивное настроение, либо потерю интереса к жизни и удовольствия от нее. Симптомы депрессивного эпизода включают депрессивное настроение; заметное уменьшение интереса и удовольствия от всех или почти всех видов деятельности в течение большей части дня; потерю веса при отсутствии диеты или набор веса или уменьшение или увеличение аппетита почти каждый день; бессонницу или повышенную сонливость почти каждый день; психомоторное возбуждение или торможение почти каждый день; утомление или потерю энергии почти каждый день; ощущение бесполезности или избыточной или неадекватной вины почти каждый день; уменьшенную способность к мышлению или концентрации или нерешительность почти каждый день; повторяющиеся мысли о смерти, повторяющееся суицидальное мышление без конкретного плана, или суицидальные попытки, или конкретный план осуществления суицида. Кроме того, перечисленные симптомы вызывают клинически значимое патологическое состояние или ухудшение в социальной, профессиональной или других важных областях человеческой деятельности (Diagnostic and Statistical Manual of MentalDisorders, 4th Edition, Text Revision, American Psychiatric Association, 2000). Существующие в настоящее время возможности лечения униполярной депрессии включают монотерапию или комбинированную терапию различными классами лекарственных средств, включая ингибиторы моноаминооксидазы, трициклические соединения, ингибиторы обратного захвата серотонина, ингибиторы обратного захвата серотонина и норадреналина, норадренергические и селективные серотонинергические средства, ингибиторы обратного захвата норадреналина, "природные продукты" (например,кава-кава, зверобой (St.John's Wort, пищевые добавки (например, s-аденозилметионин) и другие. Более конкретно, лекарственные средства, применяемые при лечении депрессии, включают, не ограничиваясь перечисленным, имипрамин, амитриптилин, дезипрамин, нортриптилин, доксепин, протриптилин, тримипрамин, мапротилин, амоксапин, тразодон, бупропион, кломипрамин, флуоксетин, циталопрам, сертралин, пароксетин, флувоксамин, нефазадон, венлафаксин, ребоксетин, миртазапин, фенелзин, транилципромин и/или моклобемид (например, J.M. KENT, Lancet, 2000, 355, 911-918; J.W. WILLIAMS JR, C.D.MULROW, E. CHIQUETTE, P.H. NOEL, С. AGUILAR, and J. CORNELL, Ann. Intern. Med. 2000, 132, 743756; P.J. AMBROSINI, Psychiatr. Serv. 2000, 51, 627-633). Несколько средств из числа перечисленных,включая ингибиторы обратного захвата серотонина, но не ограничиваясь ими, применяются также при совместном наличии депрессии и тревожности, например при депрессии, сопровождаемой тревожностьюROUILLON, Eur. Neuropsychopharmacol. 1999, 9 Suppl. 3, S87-S92). В клинической практике 40-50% пациентов с депрессией, которым была первоначально назначено лечение антидепрессантами, не испытывают ремиссии симптомов депрессии в положенные сроки. Эта группа пациентов служит примером невосприимчивой к лечению депрессии, что означает неспособность продемонстрировать "адекватную" реакцию на "адекватное" пробное лечение (т.е. лечение достаточной интенсивности в течение достаточного времени) (R.M. Berman, M. Narasimhan, and D.S. Charney,Depress. Anxiety, 1991, 5, 154-164). Кроме того, примерно 20-30% депрессивных пациентов сохраняют частичную или полную невосприимчивость к фармакологическому лечению, в том числе комбинированным методикам лечения (J. Ananth, Psychother. Psychosom. 1998, 67, 61-70; R.J. Cadieux, Am. Fam.Physician, 1998, 58, 2059-2062). Все в большей степени лечение невосприимчивой депрессии включает нарастающие стратегии, в том числе лечение такими фармакологическими средствами, как литий, карбамазепин, трийодтиронин и т.п. (М. HATZINGER and E. HOLSBOER-TRACHSLER, Wien. Med.Wochenschr. 1999, 149, 511-514; С.В. NEMEROFF, Depress: Anxiety 1996-1997, 4, 169-181; Т.A. KETTER,R.M. POST, P.I. PAREKH and K. WORTHINGTON, J. Clin. Psychiatry, 1995, 56, 471-475; R.T. JOFFE,W. SINGER, A.J. LEVITT, С. MACDONALD, Arch. Gen. Psychiatry, 1993, 50, 397-393). Дистимию определяют как расстройство настроения, характеризуемое хроническим депрессивным настроением в течение как минимум 2 лет. Дистимия может иметь как постоянное, так и прерывистое течение, причем депрессивное состояние может присутствовать в большинстве дней, большее количество дней присутствовать, чем отсутствовать и все это продолжается не менее 2 лет (Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4th Edition, American Psychiatric Association, 1994).-1 015392 С другой стороны, биполярное расстройство характеризуется непредсказуемыми колебаниями настроения между манией и депрессией (биполярное расстройство I) или между легкой формой мании и депрессией (биполярное расстройство II) (Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4th Edition,American Psychiatric Association, 1994). При биполярном расстройстве, как правило, намеренно ограничивают применение антидепрессантов, чтобы избежать опасности возникновения мании и опасности быстрой циклической смены состояний, вызываемой антидепрессантами при биполярном расстройствеRapport, S.E. Kimmel and M.D. Shelton, Eur. Neuropsychopharmacol. 1999, 9, S109-S112). Более того, не была доказана антидепрессивная эффективность ни одного из средств, стабилизирующих настроение при биполярном расстройстве (H.J. Moller and H. Grunze, Eur. Arch. Psychiatry Clin. Neurosci. 2000, 250,57-68). Сохраняется потребность в разработке эффективных способов лечения депрессии. Сущность изобретения Настоящее изобретение направлено на способ лечения депрессии, включающий введение субъекту,нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) где каждый из заместителей R1 и R2 независимо выбран из группы, состоящей из водорода иR4 выбран из группы, состоящей из водорода и низшего алкила; а представляет собой целое число от 1 до 2; заместитель где b представляет собой целое число от 0 до 4 и с представляет собой целое число от 0 до 2; каждый из заместителей R5 независимо выбран из группы, состоящей из галогена и C1-C4-алкила; представляет собой при условии, что если тогда а означает 1; или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения. Далее, настоящее изобретение направлено на способ лечения депрессии, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, комбинации терапевтических средств, включающей терапевтически эффективное количество как минимум одного антидепрессанта и соединения формулы (I), описанного в настоящем патенте. Примерами осуществления настоящего изобретения служат способы лечения большого депрессивного расстройства, униполярной депрессии, невосприимчивой к лечению депрессии, устойчивой депрессии, депрессии, сопровождаемой тревожностью, или дистимии, включающие введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества любого из соединений или фармацевтических композиций, описанных выше. В другом варианте настоящее изобретение направлено на способ лечения большого депрессивного расстройства, униполярной депрессии, невосприимчивой к лечению депрессии, устойчивой депрессии,депрессии, сопровождаемой тревожностью, или дистимии, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, как минимум одного антидепрессанта в комбинации с любым из описанных выше соединений или фармацевтических композиций.-2 015392 Подробное описание изобретения Настоящее изобретение направлено на способ лечения депрессии, включающий введение субъекту,нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I), коэффициент а, заместители R1, R2 и R4 соили его фармацевтически приемлемой соли, где фрагмент ответствуют определениям, данным в настоящем патенте. Далее настоящее изобретение направлено на лечение депрессии, включающее введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) в комбинации как минимум с одним антидепрессантом. В настоящем изобретении определяется, что термин "депрессия" включает большое депрессивное расстройство (включая единичный эпизод и повторяющиеся эпизоды), униполярную депрессию, невосприимчивую к лечению депрессию, устойчивую депрессию, депрессию, сопровождаемую тревожностью,и дистимию (называемую также дистимическим расстройством). Далее, термин "депрессия" должен охватывать любое большое депрессивное расстройство, дистимическое расстройство, расстройство настроения, вызванное медицинскими состояниями с депрессивными чертами, расстройство настроения,вызванное медицинскими состояниями с эпизодами, напоминающими большую депрессию, расстройства настроения, вызванные определенными веществами, с депрессивными чертами и депрессивное расстройство, не имеющее каких-либо других особенностей, определенных их диагностическим критерием, в соответствии с перечнем, приведенным в Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4th Edition,Text Revision, American Psychiatric Association, 2000. Предпочтительно депрессия представляет собой большое депрессивное расстройство, униполярную депрессию, невосприимчивую к лечению депрессию, устойчивую депрессию или депрессию, сопровождаемую тревожностью. Более предпочтительно депрессия представляет собой большое депрессивное расстройство. В настоящем описании, если не указано иное, термин "антидепрессант" означает любое фармацевтическое средство, которое лечит депрессию. Подходящие примеры включают, не ограничиваясь перечисленным, ингибиторы моноаминооксидазы, например фенелзин, транилципромин, моклобемид и т.п.; трициклические соединения, например имипрамин, амитриптилин, дезипрамин, нортриптилин, доксепин, протриптилин, тримипрамин, кломипрамин, амоксапин и т.п.; тетрациклические соединения, например мапротилин и т.п.; нециклические соединения, например номифензин и т.п.; триазолпиридины, например тразодон и т.п.; ингибиторы обратного захвата серотонина, например флуоксетин, сертралин, пароксетин, циталопрам, флувоксамин и т.п.; антагонисты рецептора серотонина, например нефазадон и т.п.; ингибиторы обратного захвата серотонина и норадреналина, например венлафаксин, милнаципран и т.п.; норадренергические и селективные серотонинергические средства, например миртазапин и т.п.; ингибиторы обратного захвата норадреналина, например ребоксетин и т.п.; атипические антидепрессанты, например бупропион и т.п.; природные продукты, например кава-кава, зверобой (St. John'sWort) и т.п.; пищевые добавки, например s-аденозилметионин и т.п.; а также нейропептиды, например тиротропин-высвобождающий гормон и т.п.; соединения, нацеливающие нейропептидные рецепторы,например антагонисты рецептора нейрокинина и т.п.; и гормоны, например трийодтиронин и т.п. Предпочтительно антидепрессант выбирают из группы, состоящей из флуоксетина, имипрамина, бупропиона,венлафаксина и серталина. Специалист в данной области техники смог бы легко определить рекомендованные уровни дозировки для известных и/или продаваемых на рынке антидепрессантов и антипсихотических лекарственных средств путем обращения к подходящим источникам, таким как вкладыши-инструкции в упаковках лекарственных средств, указания FDA, Physician's Desk Reference (настольному справочнику врача) и т.п. Термин "субъект" в настоящем описании относится к животному, предпочтительно млекопитающему, наиболее предпочтительно человеку, который являлся объектом лечения, наблюдения или эксперимента. Термин "терапевтически эффективное количество" в настоящем описании означает такое количество действующего соединения или фармацевтического средства, с помощью которого достигается предполагавшаяся исследователем, ветеринаром, врачом или другим клиницистом, биологическая или медицинская реакция в системе тканей, у животного или человека, которая включает облегчение симптомов подвергаемого лечению заболевания или расстройства. Поскольку настоящее изобретение направлено на котерапию или комбинированную терапию,включающую введение одного или нескольких соединений формулы (I) и одного или нескольких антидепрессантов, "терапевтически эффективное количество" должно означать такое количество комбинации взятых вместе средств, чтобы их совместное действие позволяло добиться желаемой биологической или медицинской реакции. Например, терапевтически эффективное количество препаратов при комбинированной терапии, включающей введение соединения формулы (I) и как минимум одного антидепрессанта,представляло бы собой то количество соединения формулы (I) и то количество антидепрессанта, которые-3 015392 при совместном или последовательном применении привели бы к совокупному результату, который является терапевтически эффективным. Далее, специалист в данной области техники поймет, что в случае комбинированной терапии с применением терапевтически эффективного количества, как в примере выше, само по себе количество соединения формулы (I) и/или количество антидепрессанта может быть или может не быть терапевтически эффективным. В настоящем патенте термин "котерапия" или "комбинированная терапия" должен означать лечение субъекта, нуждающегося в таком лечении, путем введения одного или нескольких соединений формулы(I) в комбинации с одним или несколькими антидепрессантами, где соединение(я) формулы (I), а также антидепрессант(ы) вводят любым подходящим способом, одновременно, последовательно, по отдельности или в одном фармацевтическом составе. Если соединение(я) формулы (I) и антидепрессант(ы) вводятся в различных лекарственных формах, количество введенных доз в течение дня для каждого соединения может быть одинаковым или различающимся. Соединение(я) формулы (I) и антидепрессант(ы) могут вводиться одним и тем же путем или различными путями. Примеры подходящих способов введения включают, не ограничиваясь перечисленными, пероральный, внутривенный (iv), внутримышечный(im), подкожный (sc), трансдермальный и ректальный. Кроме того, соединения могут вводиться непосредственно в нервную систему, включая, но не ограничиваясь этим, интрацеребральный, интравентрикулярный, интрацеребровентрикулярный, интратекальный, интрацистернальный, интраспинальный и/или периспинальный пути введения, путем доставки через внутричерепные или внутрипозвоночные иглы и/или катетеры с помощью или без помощи насосных агрегатов. Соединение(я) формулы (I) и антидепрессант(ы) могут вводиться в одновременном или чередующемся режимах, в одно и то же или в разное время по ходу курса терапии, и при одновременном введении в виде одной или отдельных лекарственных форм. В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения депрессии, включающему введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, комбинации одного или нескольких соединений формулы (I) с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, состоящей из ингибиторов моноаминооксидазы, например фенелзина, транилципромина, моклобемида и т.п.; трициклических соединений, например имипрамина, амитриптилина, дезипрамина, нортриптилина,доксепина, протриптилина, тримипрамина, кломипрамина, амоксапина и т.п.; тетрациклических соединений, например мапротилина и т.п.; нециклических соединений, например номифензина и т.п.; триазолпиридинов, например тразодона и т.п.; ингибиторов обратного захвата серотонина, например флуоксетина, сертралина, пароксетина, циталопрама, флувоксамина, эсциталопрама оксалата и т.п.; антагонистов рецептора серотонина, например нефазадона и т.п.; ингибиторов обратного захвата серотонина и норадреналина, например венлафаксина, милнаципрана, дулоксетина и т.п.; норадренергических и селективных серотонинергических средств, например миртазапина и т.п.; ингибиторов обратного захвата норадреналина, например ребоксетина и т.п.; атипических антидепрессантов, например бупропиона и т.п.; природных продуктов, например кава-кава, зверобой (St.John's Wort) и т.п.; пищевых добавок, напримерs-аденозилметионина и т.п.; а также нейропептидов, например тиротропин-высвобождающего гормона и т.п.; соединений, нацеливающих нейропептидные рецепторы, например антагонистов рецептора нейрокинина и т.п.; и гормонов, например трийодтиронина и т.п. В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения депрессии, включающему введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, комбинации одного или нескольких соединений формулы (I) с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, состоящей из ингибиторов моноаминооксидазы; трициклических соединений; тетрациклических соединений; нециклических соединений; триазолпиридинов; ингибиторов обратного захвата серотонина; антагонистов рецептора серотонина; ингибиторов обратного захвата серотонина и норадреналина; норадренергических и селективных серотонинергических средств; ингибиторов обратного захвата норадреналина; атипических антидепрессантов; природных продуктов; пищевых добавок; нейропептидов; соединений,нацеливающих нейропептидные рецепторы; и гормонов. Предпочтительно одно или несколько соединений формулы (I) вводят в комбинации с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, состоящей из ингибиторов моноаминооксидазы,трициклических соединений, ингибиторов обратного захвата серотонина, ингибиторов обратного захвата серотонина и норадреналина, норадренергических и селективных серотонинергических средств и атипических антидепрессантов. Более предпочтительно одно или несколько соединений формулы (I) вводят в комбинации с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, состоящей из ингибиторов моноаминооксидазы, трициклических соединений и ингибиторов обратного захвата серотонина. Наиболее предпочтительно одно или несколько соединений формулы (I) вводят в комбинации с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, состоящей из ингибиторов обратного захвата серотонина. В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения депрессии, включающему введение субъекту комбинации одного или нескольких соединений формулы (I) с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, состоящей из фенелзина, транилципро-4 015392 мина, моклобемида, имипрамина, амитриптилина, дезипрамина, нортриптилина, доксепина, протриптилина, тримипрамина, кломипрамина, амоксапина, флуоксетина, сертралина, пароксетина, циталопрама,флувоксамина, венлафаксина, милнаципрана, дулоксетина, миртазапина, бупропиона, тиротропинвысвобождающего гормона и трийодтиронина. Предпочтительно одно или несколько соединений формулы (I) вводят в комбинации с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, состоящей из фенелзина, транилципромина, моклобемида, имипрамина, амитриптилина, дезипрамина, нортриптилина, доксепина, протриптилина, тримипрамина, кломипрамина, амоксапина, флуоксетина, сертралина, пароксетина, циталопрама, флувоксамина,венлафаксина, милнаципрана, миртазапина и бупропиона. Более предпочтительно одно или несколько соединений формулы (I) вводят в комбинации с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, состоящей из фенелзина, транилципромина,моклобемида, имипрамина, амитриптилина, дезипрамина, нортриптилина, доксепина, протриптилина,тримипрамина, кломипрамина, амоксапина, флуоксетина, сертралина, пароксетина, циталопрама, эсциталопрама и флувоксамина. Наиболее предпочтительно одно или несколько соединений формулы (I) вводят в комбинации с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, состоящей из флуоксетина, сертралина,пароксетина, циталопрама и флувоксамина. В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения депрессии, включающему введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, комбинации одного или нескольких соединений формулы (I) с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, состоящей из нейропептидов, например тиротропин-высвобождающего гормона и т.п.; соединений, нацеливающих нейропептидные рецепторы, например антагонистов рецептора нейрокинина и т.п.; и гормонов, например трийодтиронина и т.п. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения заместитель R1 выбран из группы,состоящей из водорода и метила. В другом варианте осуществления настоящего изобретения заместительR2 выбран из группы, состоящей из водорода и метила. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения каждый из заместителей R1 и R2 представляет собой водород или каждый из заместителейR1 и R2 представляет собой метил. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения фрагмент -(СН 2)а- выбран из группы,состоящей из -СН 2- и -СН 2-СН 2-. В другом варианте осуществления настоящего изобретения фрагмент-(СН 2)а- представляет собой -СН 2-. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения заместитель R4 выбран из группы,состоящей из водорода и метила, предпочтительно R4 представляет собой водород. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения а представляет собой 1. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения b является целым числом от 0 до 2. В другом варианте осуществления с является целым числом от 0 до 2. В другом варианте осуществления настоящего изобретения b является целым числом от 0 до 1. В другом варианте осуществления с является целым числом от 0 до 1. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения сумма b и с является целым числом от 0 до 2, предпочтительно целым числом от 0 до 1. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения b является целым числом от 0 до 2 и с равно 0. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения фрагмент стоящей из выбран из группы, со выбран из группы, со В другом варианте осуществления настоящего изобретения фрагмент стоящей из В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения фрагмент стоящей из 2-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(бензо[1,3]диоксолила),3-(3,4-дигидробензо[1,4]диоксепинила),2-(6-хлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(6-фтор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(хроманила),2-(5-фтор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(7-хлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(6-хлорбензо[1,3]диоксолила),2-(7-метил-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(5-хлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(6-бром-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(6,7-дихлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(8-хлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(2,3-дигидронафто[2,3-b][1,4]диоксинила) и 2-(4-метилбензо[1,3]диоксолила). В другом варианте осуществления настоящего изобретения фрагмент стоящей из 2-(бензо[1,3]диоксолила),2-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(6-хлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(7-хлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(7-метил-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(6-бром-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила) и 2-(6,7-дихлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила). выбран из группы, со выбран из группы, со В другом варианте осуществления настоящего изобретения фрагмент выбран из группы, состоящей из 2-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),2-(7-метил-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила) и 2-(6-бром-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила). В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения заместитель R5 выбран из группы,состоящей из галогена и низшего алкила. В другом варианте осуществления настоящего изобретения заместитель R5 выбран из хлора, фтора, брома и метила. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения стереоизомерный центр соединения формулы (I) имеет S-конфигурацию. В другом варианте осуществления настоящего изобретения стереоизомерный центр соединения формулы (I) имеет R-конфигурацию. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения соединение формулы (I) присутствует в виде смеси энантиомеров, обогащенной одним из энантиомеров, где % энантиомерного обогащения(%ее) превышает примерно 75%, предпочтительно превышает примерно 90%, более предпочтительно превышает примерно 95%, наиболее предпочтительно превышает примерно 98%. Дополнительные варианты осуществления настоящего изобретения включают те соединения, в которых заместители, входящие в формулу вместо одного или нескольких переменных параметров, определенных в настоящем патенте (т.е. R1, R2, R3, R4, X-Y и А), выбраны независимо таким образом, чтобы представлять собой любой отдельный заместитель или любое подмножество заместителей, выбранных из полного списка заместителей, определенного в настоящем патенте. Типовые соединения по настоящему изобретению представляют собой соединения, перечисленные в табл. 1 ниже по тексту. Дополнительные соединения по настоящему изобретению представляют собой соединения, перечисленные в табл. 3. В приведенных ниже табл. 1 и 2 в колонке, озаглавленной "Стереоизомерия", определены пространственные конфигурации атома углерода гетероцикла, соединенного связью, которая помечена звездочкой. Если обозначение отсутствует, соединение было получено в виде смеси стереоизомеров. Если в таблице присутствуют обозначения "R" или "S", данная стереоконфигурация была получена на основе энантиомерно-обогащенного исходного вещества.-6 015392 Таблица 1 Типовые соединения формулы (I) В настоящем описании, если не отмечено иное, термин "галоген" должен означать хлор, бром, фтор и йод. В настоящем описании, если не отмечено иное, термин "алкил", использованный самостоятельно-7 015392 либо в качестве части названия замещающей группы, включает линейные или разветвленные углеродные цепи. Например, алкильные радикалы включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, вторбутил, трет-бутил, пентил и т.п. Если не отмечено иное, термин "низший", применяемый в отношении алкила, означает углеродную цепь, состоящую из 1-4 атомов углерода. В настоящем описании, если не отмечено иное, термин "алкокси" должен означать кислородсодержащий остаток простого эфира, включающий описанную выше линейную или разветвленную цепь алкильной группы, например метокси, этокси, н-пропокси, втор-бутокси, трет-бутокси, н-гексилокси и т.п. В настоящем описании обозначение должно указывать на наличие центра стереоизомерии. Когда та или иная конкретная группа является "замещенной" (например, алкил, арил и т.д.), эта группа может иметь один или несколько заместителей, предпочтительно от одного до пяти заместителей,более предпочтительно от одного до трех заместителей, наиболее предпочтительно от одного до двух заместителей, независимо выбранных из перечня заместителей. В отношении заместителей термин "независимо" означает, что, когда возможно наличие более чем одного такого заместителя, такие заместители могут быть одинаковыми или отличаться друг от друга. Согласно стандартной номенклатуре, применяемой во всем тексте данного описания, концевая часть описываемой боковой цепи фигурирует в названии первой, затем перечисляются соседние функциональные группы в направлении точки присоединения к остальной части молекулы. Так, например,название заместителя "фенил-алкил-амино-карбонил-алкил" относится к группе формулы Если соединения по настоящему изобретению имеют хотя бы один хиральный центр, они соответственно могут существовать в виде энантиомеров. Если соединения обладают двумя или более хиральными центрами, они могут дополнительно существовать в форме диастереомеров. Следует понимать, что все такие изомеры и их смеси входят в объем настоящего изобретения. Кроме того, некоторые из кристаллических форм соединений могут существовать в виде полиморфов, причем имеется в виду, что в виде та-8 015392 ковых они входят в объем настоящего изобретения. Помимо этого некоторые из соединений могут образовывать сольваты с водой (так называемые гидраты) или распространенными органическими растворителями, причем предполагается, что эти сольваты также охвачены объемом настоящего изобретения. Соли соединений по настоящему изобретению, предназначенные для применения в медицине, именуются нетоксичными "фармацевтически приемлемыми солями". Однако при получении соединений по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей могут применяться и другие соли. Подходящие фармацевтически приемлемые соли соединений включают кислотно-аддитивные соли, которые могут быть получены, например, смешиванием раствора соединения с раствором фармацевтически приемлемой кислоты, такой как соляная кислота, серная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, уксусная кислота, бензойная кислота, лимонная кислота, винная кислота,карбоновая кислота или фосфорная кислота. Кроме того, если соединения по настоящему изобретению содержат кислотный фрагмент, их подходящие фармацевтически приемлемые соли могут включать соли щелочных металлов, например соли натрия или калия; соли щелочно-земельных металлов, например соли кальция или магния; и соли, образованные с подходящими органическими лигандами, например соли четвертичного аммония. Так, в число типовых фармацевтически приемлемых солей входят следующие: ацетат, бензолсульфонат, бензоат, бикарбонат, бисульфат, битартрат, борат, бромид, кальция эдетат, камсилат, карбонат, хлорид, клавуланат, цитрат, дигидрохлорид, эдетат, эдизилат, эстолат, эзилат, фумарат, глюцептат, глюконат, глутамат, гликолиларсанилат, гексилрезорцинат, гидрабамин, гидробромид, гидрохлорд, гидроксинафтоат, йодид, изотионат, лактат, лактобионат, лаурат, малат, малеат,манделат, мезилат, метилбромид, метилнитрат, метилсульфат, мукат, напсилат, нитрат, N-метилглюкамин аммониевая соль, олеат, памоат (эмбонат), пальмитат, пантотенат, фосфат/дифосфат, полигалактуронат, салицилат, стеарат, сульфат, субацетат, сукцинат, таннат, тартрат, теоклат, тозилат, триэтиодид и валерат. Типовые кислоты и основания, которые могут применяться при получении фармацевтически приемлемых солей, включают следующие соединения: кислоты включают уксусную кислоту, 2,2-дихлоруксусную кислоту, ацилированные аминокислоты, адипиновую кислоту, альгиновую кислоту, аскорбиновую кислоту, L-аспарагиновую кислоту, бензолсульфоновую кислоту, бензойную кислоту, 4-ацетамидобензойную кислоту, (+)-камфорную кислоту, камфорсульфоновую кислоту, (+)-(1S)-камфор-10 сульфоновую кислоту, каприновую кислоту, капроновую кислоту, каприловую кислоту, коричную кислоту, лимонную кислоту, цикламовую кислоту, додецилсерную кислоту, этан-1,2-дисульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, 2-гидрокси-этансульфоновую кислоту, муравьиную кислоту, фумаровую кислоту, галактаровую кислоту, гентизиновую кислоту, глюкогептоновую кислоту, D-глюконовую кислоту, D-глюкуроновую кислоту, L-глутаминовую кислоту, -оксоглутаровую кислоту, гликолевую кислоту, гиппуровую кислоту, бромисто-водородную кислоту, хлористо-водородную кислоту, (+)-Lмолочную кислоту, -D,L-молочную кислоту, лактобионовую кислоту, малеиновую кислоту, (-)-Lяблочную кислоту, малоновую кислоту, (+)-D,L-миндальную кислоту, метансульфоновую кислоту, нафталин-2-сульфоновую кислоту, нафталин-1,5-дисульфоновую кислоту, 1-гидрокси-2-нафтойную кислоту,никотиновую кислоту, азотную кислоту, олеиновую кислоту, оротовую кислоту, щавелевую кислоту,пальмитиновую кислоту, памовую кислоту, фосфорную кислоту, L-пироглутамовую кислоту, салициловую кислоту, 4-аминосалициловую кислоту, себациновую кислоту, стеариновую кислоту, янтарную кислоту, серную кислоту, дубильную кислоту, (+)-L-винную кислоту, тиоциановую кислоту, п-толуолсульфоновую кислоту и ундециленовую кислоту; и основания включают аммоний, L-аргинин, бенетамин, бензатин, гидроксид кальция, холин, деанол, диэтаноламин, диэтиламин, 2-(диэтиламино)этанол,этаноламин, этилендиамин, N-метилглюкамин, гидрабамин, 1 Н-имидазол, L-лизин, гидроксид магния, 4(2-гидроксиэтил)морфолин, пиперазин, гидроксид калия, 1-(2-гидроксиэтил)пирролидин, вторичный амин, гидроксид натрия, триэтаноламин, трометамин и гидроксид цинка. Соединения формулы (I) могут быть получены способом, изображенным на схеме 1. Схема 1 В соответствии со схемой имеющее подходящие заместители соединение формулы (X), представляющее собой известное соединение или соединение, полученное известными способами, вводят во взаимодействие с сульфамидом, который является известным соединением, где сульфамид предпочтительно присутствует в количестве от примерно 2 до примерно 5 экв., в органическом растворителе, таком-9 015392 как ТГФ, диоксан и т.п., предпочтительно при повышенной температуре в диапазоне от примерно 50 до примерно 100 С, более предпочтительно примерно при температуре рефлюкса, получая соответствующее соединение формулы (Ia). В качестве альтернативы, подходящим образом замещенное соединение формулы (X), являющееся известным соединением или соединением, полученным известными способами, вводят во взаимодействие с подходящим образом замещенным соединением формулы (XI), которое является известным соединением или соединением, полученным известными способами, в присутствии основания, например TEA,DIPEA, пиридина и т.п., в органическом растворителе, таком как ДМФА, ДМСО и т.п., получая соответствующее соединение формулы (I). Соединения формулы (X), в которых чены по способу, приведенному на схеме 2., могут быть полу Схема 2 В соответствии со схемой соединение формулы (XII), имеющее подходящие заместители и являющееся известным соединением или соединением, полученным известным способом (например, представленным на схеме 3), вводят во взаимодействие с NH4OH, т.е. известным соединением, необязательно в органическом растворителе, таком как ацетонитрил и т.п., получая соответствующее соединение формулы (XIII). Соединение формулы (XIII) вводят в реакцию с подходящим образом выбранным восстановителем,например LAH и т.п., в органическом растворителе, таком как ТГФ, диэтиловый эфир и т.п., получая соответствующее соединение формулы (Ха). Соединения формулы (X), в которых чены по способу, приведенному на схеме 3., могут быть полу Схема 3 В соответствии со схемой подходящим образом замещенное соединение формулы (XIV), представляющее собой известное соединение или соединение, полученное известными способами, вводят во взаимодействие с NH4OH в присутствии сшивающего реагента, например DCC и т.п., необязательно в органическом растворителе, таком как ацетонитрил и т.п., получая соответствующее соединение формулы (XV). Соединение формулы (XV) вводят во взаимодействие с подходящим образом подобранным восстановителем, таким как LAH и т.п., в органическом растворителе, таком как ТГФ, диэтиловый эфир и т.п.,получая соответствующее соединение формулы (Xb). Соединения формулы (X), в которых представляет собой быть получены по способу, приведенному на схеме 4. В соответствии со схемой подходящим образом замещенное соединение формулы (XVI), в которомJ1 представляет собой подходящую уходящую группу, например Br, Cl, I, тозил, мезил, трифлил и т.п., и которое является известным соединением или соединением, полученным известными способами (например, активацией соответствующего соединения, в котором J1 представляет собой ОН), вводят во взаимодействие цианидом, например цианидом калия, цианидом натрия и т.п., в органическом растворителе,таком как ДМСО, ДМФА, ТГФ и т.п., получая соответствующее соединение формулы (XVII). Соединение формулы (XVII) восстанавливают известными способами, например взаимодействием с подходящим восстановителем, например LAH, бораном и т.п., получая соответствующее соединение формулы (Хс). представляет собой Соединения формулы (X), в которых быть получены по способу, приведенному на схеме 5. Схема 5 В соответствии со схемой подходящим образом замещенное соединение формулы (XVIII), являющееся известным соединением или соединением, полученным известными способами, активируют по известной методике, получая соответствующее соединение формулы (XIX), в котором J2 является подходящей уходящей группой, например тозилатом, Cl, Br, I, мезилатом, трифлатом и т.п. Соединение формулы (XIX) вводят во взаимодействие с солью фталимида, например фталимидом калия, фталимидом натрия и т.п. в органическом растворителе, таком как ДМФА, ДМСО, ацетонитил и т.п., предпочтительно при повышенной температуре в диапазоне от 50 до примерно 200 С, более предпочтительно примерно при температуре рефлюкса растворителя, получая соответствующее соединение формулы (XX). Соединение формулы (XX) вводят во взаимодействие с N2H4, т.е. известным соединением, в органическом растворителе, таком как этанол, метанол и т.п., предпочтительно при повышенных температурах в диапазоне от примерно 50 до примерно 100 С, более предпочтительно примерно при температуре рефлюкса растворителя и т.п., получая соответствующее соединение формулы (Xd).- 11015392 Специалист в данной области техники должен понять, что соединения формулы (X), в которых фрагмент могут быть аналогично получены известными способами или, например, способами, изображенными на схемах 2-5 выше, путем выбора соответствующих соединений, в которых гетероцикл конденсирован с нафтилом, и замены ими исходных соединений, в которых гетероцикл конденсирован с бензольным кольцом. Далее, специалист в данной области техники поймет, что, если желательно получить единственный энантиомер соединения формулы (X) (или смесь энантиомеров, обогащенную одним из них), можно применить описанные выше на схемах 1-5 способы, заменяя соответствующе исходное вещество в виде смеси энантиомеров соответствующим одним энантиомером (или смесью энантиомеров, обогащенной одним из них). Специалист в данной области техники поймет, что, если ту или иную стадию реакции по настоящему изобретению можно проводить в различных растворителях или системах растворителей, указанную стадию реакции можно также проводить в смеси подходящих растворителей или систем растворителей. В случае если способы получения соединений по настоящему изобретению приводят к образованию смеси стереоизомеров, эти изомеры могут быть разделены с помощью стандартных методик, например препаративной хроматографии. Соединения могут быть получены в рацемической форме или же могут быть получены индивидуальные энантиомеры либо с помощью энантиоспецифического синтеза,либо с помощью разделения. Соединения могут быть разделены, например, на составляющие их энантиомеры с помощью стандартных методик, как, например, образования диастереомерных пар за счет образования солей с оптически активной кислотой, такой как (-)-ди-п-толил-D-винная кислота и/или (+)ди-п-толил-L-винная кислота с последующей фракционной кристаллизацией и повторным выделением свободного основания. Кроме того, соединения могут быть разделены с помощью образования диастереомерных сложных эфиров или амидов, с последующим хроматографическим разделением и удалением вспомогательного хирального соединения. В качестве альтернативы, соединения можно разделять с применением хиральной ВЭЖХ колонки. Во время получения любых соединений по настоящему изобретению может оказаться необходимым и/или желательным защитить чувствительные или реакционноспособные группы любой из участвующих в синтезе молекул. Этого можно достичь с помощью хорошо известных защитных групп, например групп, описанных в Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973; и T.W. GreeneP.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John WileySons, 1991. Защитные группы могут быть удалены в ходе соответствующей последующей стадии с применением известных в технике способов. Способ лечения депрессии, описанный в настоящем изобретении, может быть реализован с применением фармацевтической композиции, включающей любое из соединений, определенных в настоящем описании, а также фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтическая композиция может содержать от примерно 0,1 до 1000 мг, предпочтительно примерно от 50 до 500 мг соединения и может принимать любую форму, подходящую для выбранного пути введения. В число носителей входят необходимые и инертные фармацевтические наполнители, включая, но не ограничиваясь перечисленными,связующие вещества, суспендирующие средства, смазки, вкусоароматические добавки, подсластители,консерванты, красители и покрытия. Композиции, подходящие для перорального введения, включают твердые формы, такие как пилюли, таблетки, каплеты, капсулы (каждая из перечисленных форм включает составы с немедленным высвобождением, с отсроченным высвобождением и с продолжительным высвобождением), гранулы и порошки, а также жидкие формы, такие как растворы, сиропы, эликсиры,эмульсии и суспензии. Формы, применимые для парентерального введения, включают стерильные растворы, эмульсии и суспензии.- 12015392 Соединения по настоящему изобретению могут преимущественно вводиться в виде одной дозы в день, или же общую дневную дозу можно разделить на несколько доз и осуществлять введение два, три или четыре раза в день. Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут вводиться в интраназальной форме, с помощью местного применения подходящих интраназальных носителей, или через трансдермальные кожные пластыри, хорошо известные рядовым специалистам в данной области техники. Для введения с помощью трансдермальной системы доставки введение дозы, разумеется, должно быть непрерывным, а не периодическим на протяжении режима дозировки. Например, при пероральном введении в форме таблетки или капсулы действующий компонент лекарственного средства может быть объединен с пероральным, нетоксичным, фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как этанол, глицерин, вода и т.п. Кроме того, если это желательно или необходимо, в смесь могут быть включены подходящие связующие средства; смазывающие средства; дезинтегрирующие средства и красящие средства. Подходящие связующие средства включают, не ограничиваясь перечисленным, крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, подсластители на основе кукурузы, природные и синтетические камеди, такие как гуммиарабик, трагакант или олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п. Дезинтегрирующие средства включают, не ограничиваясь указанными, крахмал, метилцеллюлозу,агар, бентонит, ксантановую камедь и т.п. Жидкие лекарственные формы подходящим образом ароматизированы суспендирующими или диспергирующими средствами, такими как синтетические или природные камеди, например трагакант, гуммиарабик, метилцеллюлоза и т.п. Для парентерального введения желательны стерильные суспензии и растворы. Если желательно внутривенное введение, применяют изотонические препараты, которые, как правило, содержат подходящие консерванты. Во всех случаях, когда требуется лечение депрессии, соединения по настоящему изобретению могут вводиться в составе любой из описанных выше композиций и в соответствии с режимами дозировки,известными в данной области. Дневную дозировку продуктов можно менять в широком диапазоне от 0,01 до 200 мг/кг для взрослого человека в день. Для перорального введения композиции предпочтительно имеют форму таблеток,содержащих 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 100, 150, 200, 250, 500 и 1000 мг действующего ингредиента для симптоматического регулирования дозировки подвергаемому лечению пациенту. Эффективное количество лекарственного средства обычно поступает при уровне дозировки от примерно 0,01 до примерно 200 мг/кг массы тела в день. Предпочтительно диапазон составляет от примерно 0,1 до примерно 100 мг/кг массы тела в день, более предпочтительно от примерно 0,5 до примерно 50 мг/кг, более предпочтительно от примерно 1,0 до примерно 25,0 мг/кг массы тела в день. Соединения могут вводиться в режиме от 1 до 4 раз в день. Оптимальные дозировки препаратов, которые следует назначать пациентам, могут быть легко определены специалистом в данной области техники, и эти дозировки будут меняться в зависимости от конкретного вводимого соединения, пути введения, силы препарата и развитости болезненного состояния. Кроме того, на необходимость коррекции дозировок будут влиять факторы, связанные с конкретным подвергаемым лечению пациентом, включая возраст, массу тела, режим питания пациента и время введения. Специалист в данной области техники поймет, что испытания как in vivo, так и in vitro, в которых используются подходящие, известные и общепринятые клеточные и/или животные модели, обладают предсказательной силой в отношении способности тестируемых соединений лечить или предотвращать то или иное расстройство. Далее специалист в данной области техники поймет, что клинические испытания на человеке,включающие первичные испытания на человеке, определение диапазонов дозировок и испытания эффективности, для здоровых пациентов и/или для пациентов, страдающих тем или иным расстройством, могут быть выполнены в соответствии с методиками, хорошо известными в клинической и медицинской области. Следующие далее примеры приведены для содействия пониманию изобретения, они не предназначены и не подразумевают какого-либо ограничения объема изобретения, изложенного в формуле изобретения, следующей после примеров. Пример 1. 3,4-Дигидро-2 Н-бензо[b][1,4]диоксепин-3-ил)метил)сульфамид (соединение 3) Катехин (5,09 г, 46,2 ммоль) и карбонат кальция смешивали в ацетонитриле и нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 1 ч. Добавляли 2-хлорметил-3-хлор-1-пропен (5,78 г, 46,2 ммоль) и продолжали кипятить с обратным холодильником в течение 24 ч. Раствор охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат упаривали и остаток разбавляли водой и экстрагировали диэтиловым- 13015392 эфиром (3). Объединенный органический раствор высушивали над MgSO4 и концентрировали. После очистки хроматографией (2% этиловый эфир в гексане) получали 3-метилен-3,4-дигидро-2 Нбензо[b][1,4]диоксепин в виде бесцветного масла.(100 мл). При 0 С добавляли комплекс боран-ТГФ (1,0 М в ТГФ, 10,3 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 5 ч. Добавляли аминосульфоновую кислоту (6,97 г, 61,6 ммоль). Реакционную смесь нагревали до кипения с обратным холодильником в течение ночи. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли водный раствор гидроксида натрия (3,0 М,100 мл). Полученный раствор экстрагировали этилацетатом (3100 мл). Объединенный органический раствор высушивали над MgSO4. Раствор концентрировали в вакууме и очищали хроматографией (2-8% метанол в дихлорметане), получая 3,4-дигидро-2 Н-бензо[b][1,4]диоксепин-3-ил)метил)амин в виде бесцветного масла.MC (ESI): 180,1 (М+Н+). 1 Н ЯМР (300 МГц, ДМСО), : 6,92 (м, 4 Н), 4,21 (м, 2 Н), 4,07 (м, 2 Н), 3,33 (уш, 2 Н), 3,16 (д, J=4 Гц,1 Н), 2,72 (д, J=4 Гц, 1 Н), 2,30 (м, 1 Н). 3,4-Дигидро-2 Н-бензо[b][1,4]диоксепин-3-ил)метил)амин (2,90 г, 16,2 ммоль) и сульфамид (3,11 г,32,4 ммоль) смешивали в сухом диоксане (60 мл) и нагревали до кипения с обратным холодильником в течение ночи. Добавляли хлороформ и отделяли осадок фильтрованием. Фильтрат концентрировали в вакууме и очищали хроматографией (2-8% ацетон в дихлорметане), получая указанное в заглавии примера соединение в виде не совсем белого твердого вещества. Рацемический 2,3-дигидро-1,4-бенздиоксин-2-илметиламин (4,4 г, 26 ммоль) и сульфамид (5,1 г,53 ммоль) смешивали в 1,4-диоксане (100 мл) и кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, отделяли фильтрованием и отбрасывали небольшое количество твердого вещества. Фильтрат упаривали в вакууме и очищали остаток с применением колоночной флэш-хроматографии (DCM:метанол-10:1), получая белое твердое вещество. Полученное твердое вещество перекристаллизовывали из DCM, получая указанное в заглавии примера соединение в виде белого твердого вещества. т.пл. 97,5-98,5 С. Элементный анализ: вычислено: С, 44,25; Н, 4,95; N, 11,47; S, 13,13; найдено: С, 44,28; Н, 4,66; N, 11,21; S 13,15. 1 Н ЯМР (300 МГц, ДМСО d6), : 6,85 (м, 4 Н), 6,68 (уш.с, 3 Н, NH), 4,28 (м, 2 Н), 3,97 (дд, J=6,9, 11,4 Гц, 1 Н), 3,20 (м, 1 Н), 3,10 (м, 1 Н). Пример 3. (Бензо[1,3]диоксол-2-илметил)сульфамид (соединение 2) В сухом метаноле (100 мл) смешивали катехин (10,26 г, 93,2 ммоль), метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 40,3 г, 186 ммоль) и метилдихлорацетат (13,3 г, 93,2 ммоль). Раствор нагревали до кипения с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры,подкисляли добавлением концентрированной хлористо-водородной кислоты и затем упаривали в вакууме до объема примерно 50 мл. Затем добавляли воду и смесь экстрагировали диэтиловым эфиром(3100 мл). Объединенный органический раствор высушивали над MgSO4, концентрировали с получением твердого коричневого вещества и очищали хроматографией (2% этилацетат в гексане), получая метиловый эфир бензо[1,3]диоксол-2-карбоновой кислоты в виде бесцветного масла.MC (ESI): 195,10 (М+Н+). 1 Н ЯМР (300 МГц, CDCl3), : 6,89 (уш., 4 Н), 6,29 (с, 1 Н), 4,34 (кв, J=7 Гц, 2 Н), 1,33 (т, J=7 Гц, 3 Н). К метиловому эфиру бензо[1,3]диоксол-2-карбоновой кислоты (7,21 г, 40,0 ммоль) добавляли гидроксид аммония (29% раствор в воде, 10 мл) и достаточное количество ацетонитрила для получения гомогенной смеси (5 мл). Раствор перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре и затем добавляли дистиллированную воду. Амид бензо[1,3]диоксол-2-карбоновой кислоты осаждался в виде белого- 14015392 твердого вещества, его собирали фильтрованием и применяли без дополнительной очистки.(ТГФ, 100 мл). Медленно при комнатной температуре добавляли к раствору литийалюминийгидрид(LAH, 1 M в ТГФ, 39,5 мл, 39,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Для разложения избытка LAH добавляли дистиллированную воду. Добавляли водный гидроксид натрия (3,0 М, 100 мл) и экстрагировали раствор этилацетатом (3100 мл). Объединенный органический раствор промывали водой и высушивали над MgSO4. Растворитель выпаривали, получая Сбензо[1, 3]диоксол-2-илметиламин в виде бесцветного масла.MC (ESI): 152,1 (М+Н+). 1 Н ЯМР (300 МГц, CDCl3), : 6,87 (м, 4 Н), 6,09 (т, J=4 Гц, 1 Н), 3,13 (д, J=4 Гц, 2 Н). С-бензо[1,3]диоксол-2-ил-метиламин (2,94 г, 19,4 ммоль) и сульфамид (3,74 г, 38,9 ммоль) смешивали в сухом диоксане (50 мл) и нагревали раствор до кипения с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали и остаток очищали хроматографией (2-10% ацетон в дихлорметане), получая указанное в заглавии примера соединение в виде белого твердого вещества. Катехин (13,2 г, 0,12 моль) и карбонат калия (16,6 г, 0,12 моль) перемешивали в ДМФА (250 мл),добавляли (2R)-глицидил тозилат (22,8 г, 0,10 моль) и перемешивали реакционную смесь при 60 С в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ледяной водой (1 л) и экстрагировали диэтиловым эфиром (4 раза). Объединенный органический раствор 3 раза промывали 10% карбонатом калия, один раз водой, один раз насыщенным раствором соли и упаривали в вакууме,получая белое твердое вещество, которое очищали колоночной флэш-хроматографией (DCM:метанол 50:1), получая 2S)-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)метанол в виде твердого вещества. Полученное твердое вещество (13,3 г, 68 ммоль) растворяли в пиридине (85 мл), охлаждали до 0 С,добавляли п-толуолсульфонилхлорид (13,0 г, 68 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром (1 л) и 1 н. HCl(1,2 л). Органический слой отделяли и два раза промывали 1 н. HCl (500 мл), 4 раза водой (150 мл), один раз насыщенным раствором соли, высушивали (MgSO4) и упаривали в вакууме, получая белое твердое вещество, которое очищали колоночной флэш-хроматографией (гептан:ЕА - 2:1), получая (2S)-2,3 дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметиловый эфир толуол-4-сульфоновой кислоты в виде белого твердого вещества. Полученное белое твердое вещество смешивали с фталимидом калия (14,4 г, 78 ммоль) в ДМФА(250 мл), нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждали до комнатной температуры, выливали в энергично перемешиваемую воду (1,5 л) и перемешивали в течение 30 мин. Белое твердое вещество отделяли фильтрованием, твердый остаток несколько раз промывали водой, 2% NaOH и снова водой и оставляли сушиться на воздухе, получая (2S)-2-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2 илметил)изоиндол-1,3-дион в виде белого порошкообразного твердого вещества. Полученное белое порошкообразное твердое вещество смешивали с гидразином (2,75 г, 86 ммоль) вEtOH (225 мл) и нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 2 ч, охлаждали до комнатной температуры, добавляли 1 н. HCl до достижения рН 1,0 и перемешивали в течение 15 мин. Отделяли фильтрованием белое твердое вещество, промывали свежей порцией EtOH (твердое вещество выбрасывали) и фильтрат упаривали в вакууме до получения твердого вещества, которое распределяли между диэтиловым эфиром и разбавленным водным раствором NaOH. Эфирный раствор высушивали (Na2SO4) и упаривали в вакууме, получая светло-желтое масло. Это масло очищали колоночной флэшхроматографией (DCM-MeOH-10:1), получая масло. Часть масла (4,82 г, 29 ммоль) обрабатывали в 2 пропаноле (250 мл) 1 н. HCl (30 мл), нагревали на паровой бане до достижения гомогенности и затем давали остыть до комнатной температуры. Через 3 ч смесь охлаждали льдом в течение 2 ч. Белый хлопьевидный осадок (соответствующая HCl соль (2S)-C-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)метиламина) отделяли фильтрованием и затем повторно перекристаллизовывали из 2-пропанола, получая белое твердое вещество.- 15015392 Полученное белое твердое вещество распределяли между DCM и разбавленным NaOH, высушивали раствор в DCM (Na2SO4) и упаривали в вакууме, получая (2S)-С-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2 ил)метиламин в виде масла.[]D=-57,8 (c=1,40, CHCl3). Полученное масло (2,1 г, 12,7 ммоль) и сульфамид (2,44 г, 25,4 ммоль) кипятили с обратным холодильником в диоксане (75 мл) в течение 2 ч и неочищенный продукт очищали колоночной флэшхроматографией (DCM:MeOH 10:1), получая белое твердое вещество, которое перекристаллизовывали изDCM, получая соединение, указанное в заглавии примера, в виде белого твердого кристаллического вещества. т.пл. 102-103 С.(1,52 г, 15 ммоль) смешивали в ДМФА (10 мл) и охлаждали на ледяной бане, добавляя диметилсульфамоил хлорид (1,44 г, 10 ммоль). Затем, не прерывая охлаждения, перемешивали реакционную смесь в течение 3 ч. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, раствор в этилацетате промывали насыщенным раствором соли, высушивали (MgSO4) и упаривали в вакууме, получая масло. Полученное масло очищали с применением колоночной флэш-хроматографии (этилацетат:гептан - 1:1),получая белое твердое вещество, которое очищали перекристаллизацией (этилацетат/гексан), получая указанное в заглавии примера соединение в виде белого хлопьевидного твердого вещества. т.пл. 76-78 С. МС 273 (МН+). Данные элементного анализа: вычислено: С, 48,52; Н, 5,92; N, 10,29; S, 11,78; найдено: С, 48,63; Н, 5,62; N, 10,20; S, 11,90. 1 Н ЯМР (CDCl3), : 6,87 (м, 4 Н), 4,59 (уш.м, 1 Н, NH), 4,35 (м, 1 Н), 4,27 (дд, J=2,3, 11,4 Гц, 1 Н), 4,04 Рацемический 2,3-дигидро-1,4-бенздиоксин-2-илметиламин (825 мг, 5 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл), кипятили с обратным холодильником в течение 30 мин и упаривали в вакууме, получая N-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)формамид в виде масла. Полученное масло обрабатывали в диэтиловом эфире (25 мл) 1 М LAH в ТГФ (9,0 мл, 9,0 ммоль) при 0 С и перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали на бане со льдом и гасили водой (0,50 мл), затем 3 н. NaOH (0,50 мл) и водой (0,50 мл). Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Твердое вещество отделяли фильтрованием и фильтрат упаривали в вакууме, получая остаток, который распределяли между 1 н. HCl и диэтиловым эфиром. Водную фазу подщелачивали 1 н. NaOH и экстрагировали диэтиловым эфиром. Органическую фазу высушивали (MgSO4) и упаривали в вакууме, получая (2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)метиламин в виде масла. МС 180 (МН+). 1 Н ЯМР (CDCl3), : 6,85 (м, 4 Н), 4,30 (м, 2 Н), 4,02 (дд, J=7,9, 11,6 Гц, 1 Н), 2,85 (м, 2 Н), 2,50 (с, 3 Н). Полученное масло (380 мг, 2,1 ммоль) смешивали с сульфамидом (820 мг, 8,5 ммоль) в диоксане(15 мл), кипятили с обратным холодильником в течение 1,5 ч и упаривали в вакууме, получая неочищенный остаток. Этот остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/гептан 1:1) и полученное твердое вещество перекристаллизовывали из смеси этилацетат/гексан, получая указанное в заглавии примера соединение в виде белого твердого вещества. т.пл. 97-98 С. МС 257 (М-1). Вводили в реакцию 4-хлоркатехин, следуя методике, приведенной выше в примере 4, и получали смесь (2S)-С-(7-хлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)метиламина и (2S)-С-(6-хлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)метиламина (соотношение изомеров 6-хлор:7-хлор приблизительно 3:1 определено с помощью RP HPLC). Полученную смесь растворяли в 2-пропаноле (100 мл) и добавляли 1 н. HCl в диэтиловом эфире до достижения рН 1,0. Выпавший в осадок гидрохлорид отфильтровывали (2,65 г) и перекристаллизовывали из смеси метанол/IPA, получая белые кристаллы. Полученные белые кристаллы распределяли между[]D=-67,8 (с=1,51, CHCl3). Полученное масло (7,75 ммоль) смешивали с сульфамидом (1,50 г, 15,5 ммоль) в диоксане (50 мл),кипятили с обратным холодильником в течение 2,0 ч, охлаждали до комнатной температуры и упаривали в вакууме, получая твердое вещество. Продукт очищали колоночной флэш-хроматографией, используя смесь DCM/метанол 20:1, и получали указанное в заглавии примера соединение в виде белого твердого вещества. МС 277 (М-1).(дд, J=2,4, 11,5 Гц, 1 Н), 4,05 (дд, J=7,1, 11,5 Гц, 1 Н), 3,45 (м, 2 Н). Данные элементного анализа: вычислено: С, 38,78; Н, 3,98; N, 10,05; найдено: С, 38,80; Н, 3,67; N, 9,99. Фильтраты полученного выше кристаллизованного гидрохлорида(2S)-С-(6-хлор-2,3 дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)метиламина возвращали для повторной обработки (соотношение изомеров 6-хлор:7-хлор приблизительно 1:1) и упаривали в вакууме, получая твердое вещество, которое распределяли между DCM (200 мл) и разбавленным NaOH (0,5 M, 50 мл). Раствор в DCM один раз промывали насыщенным раствором соли, высушивали (Na2SO4) и упаривали в вакууме, получая масло, которое очищали хроматографией ВЭЖХ на обращенной фазе (10-50% ACN с 0,16% ТФУ в воде с 0,20% ТФУ),получая в виде остатка (2S)-С-(7-хлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)метиламин. Этот остаток смешивали с сульфамидом (0,90 г, 9,4 ммоль) в диоксане (25 мл) и кипятили с обратным холодильником в течение 2,5 ч, охлаждали до комнатной температуры и упаривали в вакууме, получая масло. Это масло очищали колоночной флэш-хроматографией, используя смесь DCM/метанол 10:1, получая (2S)-(-)-N-(7-хлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)сульфамид в виде белого твердого вещества. МС 277 (М-1). 1 Н ЯМР (CDCl3/CD3OD), : 6,88 (д, J=0,7 Гц, 1 Н), 6,81 (м, 2 Н), 4,37 (м, 1 Н), 4,30 (дд, J=2,3, 11,6 Гц,1 Н), 4,04 (дд, J=7,0, 11,6 Гц, 1H), 3,38 (м, 2 Н). Пример 8. Хроман-2-илметилсульфамид (соединение 10) Хроман-2-карбоновую кислоту (4,5 г, 25 ммоль) и НОВТ (3,86 г, 25 ммоль) смешивали в DCM (40 мл) и ДМФА (10 мл). При комнатной температуре добавляли диметиламинопропил этилкарбодиимид(EDC, 4,84 г, 25 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Добавляли гидроксид аммония (2,26 мл, 33,4 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли DCM (50 мл) и водой (50 мл) и рН смеси доводили до значения примерно 3,0 с помощью 1 н.HCl. Отделяли DCM и водную фазу дважды экстрагировали DCM. Объединенные DCM фазы высушивали (Na2SO4) и упаривали в вакууме, получая масло, которое очищали колоночной флэш-хроматографией(этилацетат), получая масло. К полученному маслу (5,35 г, 30 ммоль) в ТГФ (90 мл) при перемешивании добавляли 1 М LAH в- 17015392 ТГФ (36 мл, 36 ммоль) и после этого перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь гасили водой, перемешивали в течение 2 ч, раствор декантировали,высушивали (Na2SO4) и упаривали в вакууме, получая С-хроман-2-илметиламин в виде маслянистого амина. Полученный маслянистый амин (1,63 г, 10 ммоль) смешивали с сульфамидом (1,92 г, 20 ммоль) в диоксане (50 мл) и подвергали смесь кипячению с обратным холодильником в течение 2 ч. Раствор охлаждали и упаривали в вакууме, получая масло, которое очищали с помощью колоночной хроматографии (DCM:метанол 10:1), получая белое твердое вещество. Полученное твердое вещество перекристаллизовывали из смеси этилацетат/гексан, получая хроман-2-илметилсульфамид в виде белого твердого вещества. т.пл. 100-101 С. МС 241 (М-1). Данные элементного анализа: вычислено: С, 49,57; Н, 5,82; N, 11,56; S, 13,23; найдено: С, 49,57; Н, 5,80; N, 11,75; 3, 13,33. Пример 9. 2-(2,3-Дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)этилсульфамид (соединение 16)(6,87 г, 30 ммоль) в ДМСО (90 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Затем реакционную смесь разбавляли водой (250 мл) и дважды экстрагировали диэтиловым эфиром. Эфирный экстракт промывали водой, затем дважды насыщенным раствором соли, высушивали (Na2SO4) и упаривали в вакууме, получая 2-цианометил-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин) в виде белого твердого вещества. 1 Н ЯМР (CDCl3), : 6,89 (м, 4 Н), 4,50 (м, 1 Н), 4,31 (дд, J=2,3, 11,5 Гц, 1 Н), 4,08 (дд, J=6,2, 11,6 Гц,1 Н), 2,78 (д, J=6,1 Гц, 2 Н). 2-Цианометил-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин) растворяли в ТГФ (50 мл), добавляли 1 М ВН 3 в ТГФ(80 мл, 80 ммоль) и кипятили реакционную смесь с обратным холодильником в течение 5 ч, затем перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. При охлаждении на ледяной бане добавляли 2 н.HCl до достижения рН 1,0. Затем реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре и упаривали в вакууме, получая масло. Это масло распределяли между 3 н. NaOH и диэтиловым эфиром, раствор в диэтиловом эфире промывали насыщенным раствором соли, высушивали (Na2SO4) и упаривали в вакууме, получая неочищенный 2-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)этиламин. МС (М+Н)+ 180. Неочищенный 2-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)этиламин в диоксане (100 мл) смешивали с сульфамидом (3,0 г, 31 ммоль) и нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 2 ч. Раствор охлаждали и упаривали в вакууме, получая оранжевое твердое вещество, которое очищали колоночной хроматографией (DCM:MeOH - 10:1), получая белое твердое вещество. Это твердое вещество перекристаллизовывали из DCM, получая указанное в заглавии примера соединение в виде твердого вещества. МС (М-1) 257. т.пл. 101-103 С (корр.). 1 Н ЯМР (CDCl3), : 6,86 (м, 4 Н), 4,70 (м, 1 Н), 4,52 (с, 2 Н), 4,30 (м, 2 Н), 3,94 (дд, J=7,4, 11,3 Гц, 1 Н),3,43 (дд, J=6,4, 12,9 Гц, 2 Н), 1,94 (дд, J=6,5, 12,9, 2 Н). Данные элементного анализа: найдено: С, 46,48; Н, 5,60; N, 10,81; S, 12,41; вычислено: С, 46,50; Н, 5,46; N, 10,85; S, 12,41. Пример 10. (2S)-(-)-N-(6,7-Дихлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)сульфамид (соединение 29)(200 мл). Добавляли (2R)-глицидилтозилат (9,12 г, 40 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 60 С в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли ледяной водой (600 мл) и экстрагировали диэтиловым эфиром (4 раза). Объединенный органический раствор 3 раза промывали 10% карбонатом калия, дважды насыщенным раствором соли, высушивали (MgSO4) и упаривали в вакууме, получая (2S)-2-(6,7-дихлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин)метанол в виде вязкого масла.- 18015392 Полученное масло (2S)-2-(6,7-дихлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин)метанола (6,4 г, 27 ммоль) растворяли в охлажденном до 0 С пиридине (50 мл). Затем добавляли п-толуолсульфонилхлорид (5,2 г, 27 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром и 1 н. HCl (750 мл), отделяли органический слой и промывали его 2 раза 1 н. HCl (250 мл), один раз водой (150 мл), дважды насыщенным раствором соли, высушивали(2S)-6,7-Дихлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметиловый эфир толуол-4-сульфоновой кислоты (8,0 г, 20,5 ммоль) смешивали с фталимидом калия (6,1 г, 33 ммоль) в ДМФА (75 мл), нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду (0,5 л) при энергичном перемешивании и затем перемешивали в течение 30 мин. Отфильтровывали белое твердое вещество, несколько раз промывали это вещество водой, 2% NaOH, вновь водой и затем оставляли сушиться на воздухе, получая (2S)-2-(6,7-дихлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2 илметил)изоиндол-1,3-дион (6,0 г, 80%) в виде белого порошкообразного твердого вещества. Полученное белое порошкообразное твердое вещество смешивали с гидразином (1,06 г, 33 ммоль) вEtOH (80 мл) и нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 2 ч, затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 1 н. HCl, доводя рН реакционной смеси до значения 1,0, и затем перемешивали реакционную смесь в течение 15 мин. Отделяли фильтрованием белое твердое вещество, промывали его свежей порцией EtOH (твердое вещество выбрасывали) и упаривали фильтрат в вакууме до получения твердого веществ, которое распределяли между диэтиловым эфиром и разбавленным водным раствором NaOH. Раствор в диэтиловом эфире высушивали (Na2SO4) и упаривали в вакууме, получая(2S)-2-аминометил-(6,7-дихлор-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин) в виде вязкого масла. 1 Н ЯМР (CDCl3), : 6,98 (с, 1 Н), 6,96 (с, 1 Н), 4,25 (дд, J=2,0, 11,2 Гц, 1 Н), 4,15 (м, 1 Н), 4,0 (м, 1 Н),2,97 (д, J=5,5 Гц, 2 Н). Часть масла (3,8 г, 16 ммоль) и сульфамид (3,1 г, 32,4 ммоль) кипятили с обратным холодильником в диоксане (100 мл) в течение 2 ч и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией(DCM:MeOH 20:1), получая указанное в заглавии примера соединение в виде белого твердого вещества,которое перекристаллизовывали из смеси этилацетат/гексан, получая указанное в заглавии примера соединение в виде белого твердого кристаллического вещества. МС [М-Н-] 311,0. т.пл. 119-121 С. Указанное в заглавии примера соединение получали по методике, описанной выше в примере 4, исходя из 4-метилкатехина и получая белое твердое вещество, которое перекристаллизовывали из смеси этилацетат/гексан, получая указанное в заглавии примера соединение в виде белого твердого вещества. МС [М-Н-] 257. 1 Н ЯМР (CDCl3), : 6,76 (м, 1 Н), 6,66 (м, 2 Н), 4,80 (м, 1 Н), 4,57 (уш.с, 1 Н), 4,40 (м, 1 Н), 4,28 (м, 1 Н),4,03 (дд, J=6,9, 11,4 Гц, 1 Н), 3,45 (м, 2 Н), 2,25 (с, 3 Н). Данные элементного анализа: вычислено: С, 46,50; Н, 5,46; N, 10,85; S, 12,41; найдено: С, 46,65; Н, 5,60; N, 10,84; S, 12,61. Пример 12. Исследование отношений доминирования-подчинения (DSR) у крыс in vivo. Исследование DSR разделяется на две модели: модель уменьшения доминантного поведения(RDBM), как модель мании, и модель уменьшения подчиненного поведения (RSBM), как модель депрессии. Модель RDBM, в которой воздействию тестируемых соединений подвергаются доминирующие животные, имеет предсказательную силу в отношении способностей тестируемых соединений лечить манию. Модель RSBM, в которой воздействию тестируемых соединений подвергаются подчиненные животные, имеет предсказательную силу в отношении способностей тестируемых соединений лечить депрессию.- 19015392 В данном исследовании использовали самцов крыс Sprague Dawley (массой 140-160 г), полученных у Charles River Laboratories Wilmington, MA. Партии крыс поступали с двухнедельными интервалами. Каждая партия проходила пятидневный карантин, недельный период акклиматизации и недельный процесс отбора, за которым следовало пятинедельное введение лекарственного средства или носителя отобранным парам животных. Крыс поселяли по четыре особи в клетку. Доступ к пище был ограничен одним часом в день после тестирования на протяжении периода с понедельника по четверг. После пятничного тестирования крысы получали свободный доступ к пище до очередного периода ограничения питания в воскресенье. Ни в один из периодов времени крыс не лишали воды. Применявшиеся периоды ограничений пищи оказывали незначительное влияние на набор массы тела, средняя масса тела крыс к концу исследования составляла примерно 300 г. В завершении эксперимента крыс умерщвляли отсечением головы, собирали кровь из туловища и мозг для экспериментов in vitro и измерения концентрации лекарственных препаратов. Основная исследовательская установка состояла из двух камер, соединенных тоннелем, размер которого позволял в каждый момент времени проходить через него только одной крысе. На полу в средней точке тоннеля помещалась емкость с подслащенным молоком. Были сделаны копии этой основной установки, так чтобы одновременно можно было осуществлять видеонаблюдение за четырьмя парами крыс. Камера могла различать крыс, помеченных разными цветами. Так, например, для целей видеонаблюдения головы крыс были окрашены в красный цвет в одной клетке и в желтый цвет в другой клетке. В каждый момент времени только одно из животных могло иметь удобный доступ к кормушке, но оба животных могли пить молоко во время пятиминутной ежедневной сессии. В течение пятиминутных ежедневных сессий время, проводимое каждой крысой в зоне кормушки, фиксировалось программным обеспечением системы видеонаблюдения и сохранялось в текстовом файле. Тест был начат со случайного подбора крыс в пары. Каждого из членов пары помещали в противоположные камеры тестовой установки. Фиксировали время, которое каждое из животных проводило в зоне кормушки. В течение первой недели (пять дней) тестирования животные приучались к новой среде обитания. Доминирование приписывали животному с наивысшим показателем, зафиксированным во время второй недели исследования, если удовлетворялись три критерия. Во-первых, должна была иметься значимая разница (двусторонний t-критерий, Р 0,05) между средними дневными показателями по времени употребления молока для обоих животных. Во-вторых, показатель доминирующего животного должен был быть как минимум на 25% выше, чем показатель подчиненного животного. Наконец, в течение недели, посвященной отбору пар, не должно было наблюдаться "смены ролей", при котором в отдельных случаях предполагаемая подчиненная крыса превосходила показатели своего доминирующего партнера. В идеальном случае и во время недели акклиматизации имела место минимальная смена ролей. Примерно от 25 до 33% исходных пар животных удовлетворяли перечисленным критериям, и только эти пары продолжали участвовать в исследовании. По завершении эксперимента собирали последние образцы крови (0,5-1 мл) в гепаринизированные пробирки. Образцы крови центрифугировали для удаления клеток и 200 мкл супернатанта, представлявшего собой плазму, переносили в чистый пузырек, помещали на сухой лед и затем до проведения анализа хранили в морозильной камере при -80 С. К 100 мкл плазмы или ткани мозга добавляли 200 мкл внутреннего стандарта, содержащего ацетонитрил, для осаждения белков и/или остатков тканей. Образцы центрифугировали и супернатант отделяли для анализа с помощью жидкостной хроматографии - тройной квадрупольной масс-спектрометрии (ЖХ-МС-МС). Калибровочные стандарты получали добавлением подходящих объемов запасного раствора непосредственно в контрольные образцы плазмы или гомогенатов ткани мозга, которые обрабатывали идентично отобранным образцам. Калибровочные стандарты с целью количественного определения готовили в диапазоне от 0,01 до 10 мкМ. Анализ ЖХ-ESI-MC/MC(отрицательный режим) проводили с применением многофакторного мониторинга реакции с целью определения характеристических ионов для тестируемых соединений. Значимую разницу между временем, проводимым у кормушки доминирующей и подчиненной крысами, определяли с помощью дисперсионного анализа ANOVA с использованием программы GraphPadPrism (GraphPad Software, Inc. San Diego, CA) с последующим применением двустороннего t-критерия(Р 0,05). Проводили сравнения между группами, которым вводились препараты, с использованием нормализованных величин уровня доминирования для животных в парах. Уровень доминирования представляет собой величину, которой измеряются социальные отношения между субъектами в парах. Уровень доминирования (DL)=FTD-FTS, где FTD представляет собой время, проведенное у кормушки доминирующими крысами, и FTS означает время, проведенное у кормушки подчиненными крысами. Нормализацию проводят с применением формулы: Уровень доминирования (неделя n в %)=(Уровень доминирования (неделя n/(Уровень доминирования (неделя 2. Статистическую значимость различий в уровне доминирования между контрольной группой (пары крыс, в которых и доминирующее, и подчиненное животное получали носитель) и группой, которой вводили препараты (подчиненным крысам вводили исследуемое средство и доминирующим крысам вводили носитель), определяли с помощью ANOVA с последующим применением t-критерия. Время наступ- 20015392 ления величины активности на уровне 50% от максимальной реакции (АОТ-50) и минимальной и максимальной реакции на препарат рассчитывали, основываясь на уменьшении величины уровня доминирования с применением нелинейного регрессионного анализа (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA). Для этой калибровки использовали нормализованные значения DL, где значения DL для отдельных недель введения препаратов были нормализованы в виде величин в процентах по отношению ко второй неделе(неделя, предшествующая введению препаратов) для пар согласно приведенной выше формуле. При этих начальных условиях минимум реакции (DL) определял положительную активность препарата, соответствующую эффективности, поскольку значения DL всегда уменьшались, если реакция на лекарственный препарат была положительной. В случае отрицательной реакции на препарат (ухудшение симптомов) значения DL возрастали. Если лекарственный препарат не обладал такой активностью, максимум реакции не превышал 100%. Любое максимальное значение DL, существенно превышавшее контрольное значение (примерно 100%), свидетельствовало об отрицательной активности препарата. Соединение 8 подвергали оценке в модели уменьшения подчиненного поведения крысы (RSBM),как модели депрессии (Malatynska, E., Rapp, R., Harrawood, D. and Tunnicliff, G., Neuroscience and Biobehavioral Review, 82 (2005) 306-313; Malatynska, E., and Knapp, R.J., Neuroscience and Biobehavioral Review,29 (2005), 715-737). Более конкретно соединение 8 перорально (р.о.) вводили подчиненным крысам в количестве 2,5 мг/кг (n=8), 12 мг/кг (n=12), 60 мг/кг (n=12) и 120 мг/кг (n=7) один раз в день в течение 5 недель, тогда как доминирующим партнерам вводили носитель (0,5% водную метилцеллюлозу). В качестве контроля дополнительным группам крыс интраперитонеально (i.p.) вводили флуоксетин в количестве 10 мг/кг (n=10) и i.p. венлафаксин в количестве 30 мг/кг (n=6). Введение всех препаратов осуществляли примерно за 1 ч до тестирования. Наблюдали, что соединение 8 уменьшало подчиненное поведение дозозависимым образом. При введении подчиненным животным соединения 8 после первой недели введения утрачивалось значимое различие между доминирующими и подчиненными крысами. Это наблюдалось для всех примененных дозировок, указывая на то, что проявление активности не зависело от дозы. В противоположность этому, если подчиненным животным вводили флуоксетин, значимое различие между доминирующими и подчиненными животными исчезало после третьей недели введения (примененная методика анализа данных не учитывала изменений поведения, которые имели место в контрольной группе). Для сравнения действия различных препаратов и дозировок данные нормализовали относительно величин первой контрольной недели. Значения уровня доминирования (DL) в группе подчиненных крыс, которым вводили соединение 8 в дозировке 2,5 мг/кг, не имели значимых отличий от контроля. Однако группа, которой вводили соединение 8 в количестве 12 мг/кг, продемонстрировала значения DL, существенно отличающиеся от контрольной группы, которой вводили носитель, после второй, четвертой и пятой недель введения. Аналогично, группа, которой вводили соединение 8 в дозировке 60 мг/кг, продемонстрировала значимое отличие величин DL по отношению к контрольной группе, начиная с первой недели и на протяжении всего введения препарата продолжительностью 5 недель. В случае самой высокой дозировки (120 мг/кг) величины DL для соединения 8 значительно отличались от контрольной группы после первой недели, однако эта статистическая значимость исчезала после второй недели введения соединения. Животные, которым вводили флуоксетин (10 мг/кг), постоянно демонстрировали увеличение подчиненности во время первой недели введения препарата. По сравнению с животными, которым вводили флуоксетин (10 мг/кг), группы, получавшие соединение 8, не показали подобного эффекта. При дозировке соединения 860,0 мг/кг разница в величинах DL с группой, получавшей флуоксетин, была статистически значима на уровне р 0,001 после первой недели и р 0,05 после второй недели введения. Во время последующих недель введения значимая разница между нормализованными уровнями DL пар, которым вводили флуоксетин и соединение 8, отсутствовала. Для оценки времени проявления активности средние ежедневные величины времени пребывания у кормушки для пар доминирующего и подчиненного животного наносили на график и рассчитывали статистически значимые различия между этими двумя группами с применением двустороннего t-критерия. Первый день устойчивого отсутствия статистической значимости наступал в случае введения соединения 8 в дозировке 12 мг/кг на 6-й день и при введении 60 мг/кг на 4-й день. Не наблюдалось устойчивого отсутствия статистической значимости по времени пребывания у кормушки доминирующей и подчиненной крыс после введения соединения 8 в дозировках 2,5 и 120 мг/кг. Для сравнения времени проявления активности в группах, которым вводили различные количества препарата, время проявления активности определяли из соответствия нелинейной регрессии. Модель нелинейной регрессии подбирали для каждого препарата и нормализованных по дозировке ежедневных величин DL. Время проявления активности при достижении 50% эффекта (АОТ 50) и Emax для соединения 8 при дозировках 2,5, 12 и 60 мг/кг составляло 2,1; 5,3 и 1,6 дней соответственно, причем отсутствовали значимые различия между дозировками. Максимальный из эффектов, полученный в этом анализе, составлял 52,432,7% (SEM), 87,942,6% (SEM) и 116,929,5% (SEM) для дозировок 2,5 мг/кг, 12 мг/кг и 60 мг/кг соответственно, и между этими дозировками также не было статистически значимых различий.ED50, равным 6,60,8 мг/кг [CI=3,0-10,2], и Emax, равным 131,44,7% [CI=111,3-151,5]. В данном исследовании соединение 8 уменьшало подчиненное поведение, показывая, что данное соединение активно в качестве антидепрессивного средства. Пример 13. Исследование модели подвешивания мышей за хвост (поведение в критической ситуации). В тесте, связанном с подвешиванием мышей за хвост (TST), для оценки активности соединений в качестве антидепрессантов, мышей подвешивают за их хвосты к металлическому или пластмассовому стержню, используя зажим или полоску скотча. Данный тест, как правило, является довольно коротким,занимая 5-7 мин, и промежуток времени, в течение которого мышь остается неподвижной, фиксируется либо вручную, либо с помощью автоматизированного устройства. Средства, обладающие антидепрессантной активностью, уменьшают продолжительность неподвижности мыши в данном тесте. Основная установка для исследования подвешивания за хвост состояла из желтой пластмассовой камеры (914510 см), разделенной на четыре отсека шириной 25, 20, 20 и 25 см, отделенных друг от друга стенками из желтой пластмассы толщиной 0,75 см. Мышей подвешивали за хвосты, используя резиновый зажим (длиной 7 см), прикрепленный к пластмассовому стержню, который помещался в верхней части испытательной камеры, на половине ее глубины. Каждая экспериментальная сессия фиксировалась на видеопленку и подвергалась анализу для четырех животных в реальном времени с помощью компьютерной программы ("Depression Scan" Clever Sys Inc.). Компьютерное подтверждение неподвижности калибровали с использованием животных, которым была введена доза лоразепама, тогда как подтверждение движения калибровали с помощью животных, которым была введена высокая доза дезипрамина. Поведение контрольных животных, которым вводили носитель, и животных, которым вводили соединение 8, анализировали при установках программы, полученных в результате калибровки. Эти установки отдельно регулировали для темных (линии СН 3/HeJ и C57BI/6J) и белых мышей (линии Balb/cJ и A/J). Для записи движений темных мышей использовали желтый фон, и для белых мышей использовали синий фон. Способность тестируемого соединения уменьшать продолжительность неподвижности или увеличивать подвижность измеряли с применением описанной выше методики TST. Срочное введение клинически эффективных антидепрессантов и/или новых соединений, которые имеют потенциальные антидепрессантные свойства, уменьшает продолжительность неподвижности и в то же время увеличивает подвижность в TST. Данные анализировали с применением программы GraphPad Prism (GraphPad Software, Inc., SanDiego, CA). Для сравнения влияния различных дозировок разных лекарственных средств на неподвижность в тесте TST применяли однофакторный дисперсионный анализ (ANOVA) и затем тест множественных сравнений Даннета. Значения ED50 и Emax рассчитывали для DMI, VLX, DLX и соединения 8 с использованием нелинейного регрессионного анализа с уравнением однофазного экспоненциального затухания для подгонки кривых. Сравнивали значения ED50 и Emax с применением двухфакторногоANOVA и апостериорного теста Бонферрони. Оценивали зависимость доза-реакция для различных антидепрессантов и соединения 8 у мышей СН 3/HeJ. Соединение 8 суспендировали в 0,5% метилцеллюлозе. Положительный контроль включал дулоксетин (DLX), венлафаксин (VLX) и дезипрамин (DMI), причем перечисленные препараты растворяли в 0,5% метилцеллюлозе, и лоразепам (LOR), который суспендировали в 0,5% метилцеллюлозе в воде с помощью обработки ультразвуком. Все препараты и носители вводили перорально (р.о.) через зонд в объеме 10 мл/кг. Были заказаны мыши в возрасте 5 недель и в начале эксперимента их масса составляла 205 г. Животных помещали группами по четыре особи в пластиковые клетки при температуре окружающей среды от 21 до 23 С с автоматическим циклом свет/темнота 12/12 ч и с неограниченным доступом к воде и стандартному корму для грызунов. Исследование было разделено на восемь экспериментов, в которых определяли действие соединения 8, положительных контрольных препаратов (DMI, VLX, DLX) в различных дозировках и отрицательного контроля (L0R) в дозировке 5 мг/кг. В каждом эксперименте было задействовано семь групп с различным режимом введения препаратов по четыре животных в группе. В каждом эксперименте использовалось в общей сложности 28 животных. Каждые два последовательных эксперимента (1 и 2, 3 и 4, 5 и 6, 7 и 8) являлись точными повторениями друг друга. Это приводило к тому, что в конце исследования общее число животных в каждой группе равнялось восьми. В каждом эксперименте одной группе из четырех животных вводили носитель. Помимо группы, получавшей носитель, в экспериментах 1 и 2 испытывали действие DMI в дозировке 6, 12, 30, 60 и 120 мг/кг и LOR в дозировке 5 мг/кг. В экспериментах 3 и 4 испытывали действие соединения 8 в дозировке 6, 12, 30, 60, 120 и 240 мг/кг. В экспериментах 5 и 6 исследовали действие DLX в дозировках 6, 12, 30, 60, 120 мг/кг и LOR в дозировке 5 мг/кг. В экспериментах 7 и 8 исследовали действие VLX в дозировках 6, 12, 30, 60, 120 и LOR в дозировке 5 мг/кг. Во время исследования одна мышь умерла по причине ошибочной дозировки в группе, которой- 22015392 вводили соединение 812 мг/кг, поэтому данная группа в конце исследования состояла из 7 животных. Соединение 8 и все исследованные антидепрессанты уменьшали время неподвижности и увеличивали подвижность мышей СН 3/HeJ во время 7-минутной сессии тестирования. Действие соединения 8 было статистически значимым в дозировке 12, 60 и 120 мг/кг. Значимость определяли путем сравнения с контрольными животными, которым параллельно вводили носитель. Действие DMI было статистически значимым при дозировках 12, 30, 60 и 120 мг/кг. Действие VLX было статистически значимым при дозировках 6, 12, 30, 60 и 120 мг/кг. Действие DLX было статистически значимым при дозировках 60 и 120 мг/кг. Значения ED50 и Emax рассчитывали на основании полученных результатов с помощью нелинейного регрессионного анализа. Величины ED50 и Emax приведены в табл. 2 ниже по тексту. Величины ED50, рассчитанные для неподвижности и подвижности, не имели значимых отличий для различных режимов введения препаратов. Величина ED50 для соединения 8 была существенно ниже, чем величина ED50 дляDLX, но не отличалась от величин ED50 для DMI и VLX. Величины Emax, рассчитанные для неподвижности и подвижности, не имели значительных отличий для соединения 8, но значительно различались для всех исследованных антидепрессантов. Кроме того, величина Emax, рассчитанная по времени неподвижности для соединения 8, была существенно ниже, чем соответствующие величины для антидепрессантов. Таблица 2 Значения ED50 и Emax для различных препаратов в тесте TST В итоге, исследования, описанные в данном примере, показали, что соединение 8 обладает активностью, подобной активности антидепрессантов, которая измерена в тесте по подвешиванию за хвост. В условиях исследования авторов изобретения рассчитанное значение ED50 для соединения 8 составляло 3,62,9 мг/кг и рассчитанное значение Emax составляло 22,26,1%. Пример 14. Тест на вынужденное плавание (поведение в критической ситуации). Тест на вынужденное плавание (FST) представляет собой методику, которую обычно используют для отбора соединений с точки зрения возможных антидепрессантных свойств. Этот тест известен также как поведенческий тест в безвыходной ситуации. Грызуны, помещенные в хорошо знакомые емкости,заполненные водой, демонстрируют разнообразное поведение, связанное с неподвижностью или попытками спасения. Антидепрессанты различных классов заметно усиливают поведение, направленное на спасение, и/или уменьшают время задержки или продолжительность неподвижности. Поскольку такое действие является характерным для клинически действующих антидепрессантов, считается, что соединения с неизвестной клинической активностью, демонстрирующие подобное действие в тесте FST, обладают потенциалом для лечения расстройств настроения у человека. Соединение 8 и мапротилин растворяли в 10% солютоле. Венлафаксин и дезипрамин растворяли в воде. Все препараты и их носители вводили перорально (р.о.) с помощью зонда в объеме 5 мл/кг. Использовались крысы Sprague Dawley (от 140 до 160 г) от Charles River Laboratories Wilmington,MA. Перед тем как животных подвергали эксперименту, они прошли пятидневный период карантина.- 23015392 Животных поселяли группами по четыре особи в пластмассовые клетки при температуре окружающей среды от 21 до 23 С с автоматическим 12-часовым циклом свет-темнота и неограниченным доступом к воде и стандартному корму для грызунов. Животных не брали в руки, кроме случаев регулярной замены подстилки до сессии плавания перед тестом. Исследование было разделено на шесть экспериментов, в которых изучалось действие соединения 8, трех положительных контрольных препаратов (дизипрамина, мапротилина, венлафаксина) и отрицательного контроля (лоразепама) в различных дозировках. В каждом эксперименте было задействовано семь групп, которым вводили различные препараты, с количеством животных в группе n=4. В каждом эксперименте принимало участие в общей сложности 28 животных. Два последовательных эксперимента(1 и 2, 3 и 4, 5 и 6) являлись точными повторениями друг друга. Это приводило к тому, что общее число животных в каждой группе, которой вводили тот или иной препарат, в конце исследования равнялось восьми. В каждом эксперименте одна из групп в количестве n=4 животных являлась группой, которой вводили носитель. Помимо группы, получавшей носитель, действие дезипрамина в дозировке 3, 6, 12, 30 и 60 мг/кг и лоразепама в дозировке 1 мг/кг изучалось в экспериментах 1 и 2. В экспериментах 3 и 4 изучалось действие соединения 8 в дозировке 3, 6, 12, 30, 60 и 120 мг/кг. В экспериментах 5 и 6 изучалось действие венлафаксина и мапротилина в дозировке 12, 30 и 60 мг/кг. По ходу исследования одна из крыс умерла по причине неправильной дозировки в группе, которой вводили дезипрамин в дозировке 12 мг/кг,так что к концу исследования данная группа состояла из семи животных. Основная установка состояла из цилиндра (46 см высоты 20 см в диаметре), заполненного водой с температурой 251 С до уровня 30 см. Для проведения эксперимента использовали автоматизированный вариант FST. Система трубопроводов для автоматической подачи и удаления воды соединяла четыре цилиндра. Цилиндры помещались в отдельные камеры шириной 25 см для исключения визуального контакта между животными. Каждая 5-минутная экспериментальная сессия фиксировалась на видеопленку и анализировалась в реальном времени компьютерной программой (Clever Systems, Inc.) для четырех животных одновременно. Продолжительность периодов неподвижности, плавания, карабканья на стенки и попыток спасения фиксировалась программой. Перечисленные четыре вида деятельности животных определялись следующим образом: неподвижность: животное плавает без движения или совершает только те движения, которые необходимы для удержания его головы над поверхностью воды; карабканье: животное энергично движется в вертикальном направлении, царапая стенки по окружности цилиндра; плавание: животное движется горизонтально по окружности цилиндра более интенсивно, чем необходимо для удержания его головы над поверхностью воды; и попытки спасения: совокупность всех энергичных активных движений. Способность тестируемого соединения уменьшать продолжительность или частоту неподвижности или изменять время плавания, карабканья и попыток спасения измеряли, используя описанную выше методику FST. Клинически эффективные антидепрессанты и/или новые соединения, которые потенциально обладают свойствами антидепрессантов, при введении между сессиями предварительного и основного тестирования, уменьшают продолжительность или частоту периодов неподвижности в тесте FST. Анализ результатов описанного исследования был сфокусирован на времени неподвижности на протяжении 5-минутной тестовой сессии. В каждом эксперименте проводили две сессии плавания. Во-первых, проводили предварительную сессию плавания продолжительностью 15 мин. Через 48 ч проводили тестовую сессию 5-минутной продолжительности. По завершении сессии плавания каждое животное помещали в клетку с мягкой подстилкой под нагревательную лампу примерно на 15 мин, чтобы избежать переохлаждения. Животным предварительно вводили носитель или тестируемое соединение после завершения предварительной сессии плавания, затем введение повторяли через 24 ч и затем незадолго перед 5-минутной тестовой сессией; т.е. между двумя сессиями плавания каждое животное получало три дозы препарата в течение 3 последовательных дней. Время до тестовой сессии составляло 1 ч для дезипрамина, мапролитина, венлафаксина, лоразепама или 4 ч для соединения 8; т.е. время наибольшего действия препаратов в тесте на максимальные судороги при электрошоке (MES). Данные анализировали с применением программы GraphPad Prism (GraphPad Software, Inc., SanDiego, CA). Для сравнения действия различных дозировок разных лекарственных средств на неподвижность в тесте FST применяли однофакторный дисперсионный анализ (ANOVA) и затем тест множественных сравнений Даннета. Значения ED50 и Emax рассчитывали для дезипрамина и соединения 8 с использованием нелинейного регрессионного анализа с уравнением однофазного экспоненциального затухания для подгонки кривых. Значения ED50 и Emax статистически сравнивали с применением двустороннего t-критерия. Все тестированные антидепрессанты уменьшали время неподвижности в течение 5-минутной тестовой сессии. Действие дезипрамина было статистически значимым при дозировках 6, 12, 30 и 60 мг/кг. Рассчитанное значение ED50 для дезипрамина составляло 2,00,1 мг/кг (CI=1,3-3,3 мг/кг) и значение Emax для этого препарата составляло 508,4 с (CI=31,8-57,7). Результат введения соединения 8 был статисти- 24015392 чески значимым при дозировках 12, 60 и 120 мг/кг по сравнению с контрольными животными, которым вводили носитель. Значительная изменчивость результатов для отдельных животных приводила к тому,что результат для дозировки соединения 830 мг/кг не обладал значимыми отличиями от контроля. По этой причине данные по времени неподвижности для дозировки 30 мг/кг не применялись в расчете ED50. Значение ED50, рассчитанное для соединения 8, составляло 5,60,6 мг/кг (CI=2,2-15,6 мг/кг) и значениеEmax для этого соединения составляло 67,011,6 с (CI=30,3-103,8). Значение ED50 для соединения 8 значимо отличалось от значения ED50 для дезипрамина при величине р 0,001 (двусторонний t-критерий). Отсутствовало статистически значимое различие между значениями Emax для дезипрамина и соединения 8. Венлафаксин и мапротилин (положительный контроль) тестировали только в трех дозировках, составлявших 12, 30 и 60 мг/кг. Как для венлафаксина, так и для мапротилина время неподвижности исследованных животных при дозировках 30 и 60 мг/кг значимо отличалось от контрольных животных, которым вводили носитель. Однако для этих двух препаратов имелось слишком мало данных для расчета значений ED50. Лоразепам (отрицательный контроль) тестировали в дозировке 1 мг/кг и он не показал значимого влияния на неподвижность крыс во время тестовой сессии. Эти результаты показывают, что соединение 8 обладает активностью, подобной активности антидепрессантов, в тесте FST. Таблица 3 Значения ED50 и Emax для соединения 8 и DMI в тесте FST Пример 15. Модель легкого хронического стресса (хронической депрессии). В модели легкого хронического стресса (CMS) крысы, подвергаемые действию источников легкого стресса в течение продолжительного периода времени, в числе прочих поведенческих, биохимических и физиологических нарушений, демонстрируют значительное снижение способности реагировать на поощрительные стимулы. За этим снижением обычно следят по уменьшению потребления 1% раствора сахарозы, но кроме этого снижение можно заметить и в других тестах, например выработке условного рефлекса предпочтения места или внутричерепной самостимуляции. Поскольку пониженная чувствительность к поощрениям по-видимому является отражением ангедонии (неспособности испытывать удовольствие), которая является главным симптомом больших депрессивных расстройств, методика CMS может служить удобным исследовательским средством при изучении механизмов действия антидепрессантов. Самцов крыс Wistar приносили в лабораторию за два месяца до начала эксперимента. За исключением описанных ниже случаев, животных поселяли по одному со свободным доступом к воде и пище и содержали в условиях 12-ч свет/темнота при постоянной температуре (222 С) и влажности (505%). В первую очередь, животных обучали употреблять 1% раствор сахарозы; обучение состояло из восьми 1-часовых предварительных тестов, в которых сахарозу давали животному в клетку после 14 часового лишения воды и пищи; потребление раствора сахарозы измеряли с помощью взвешивания предварительно взвешенных бутылок с раствором сахарозы в конце теста. Впоследствии за потреблением сахарозы наблюдали в сходных условиях с недельными интервалами на протяжении всего эксперимента. На основе потребления животными сахарозы в последнем предварительном тесте крыс делили на две отобранные группы, одну группу животных подвергали легкому хроническому стрессу в течение 7 последовательных недель. Каждую неделю режим, вызывающий стресс, состоял из двух периодов лишения пищи или воды, двух периодов наклона клетки на угол 45, двух периодов быстрого чередования освещения (свет включали и выключали каждые 2 ч), двух периодов загрязнения клетки (250 мл воды в подстилку из опилок), одного периода парного проживания с другой особью, двух периодов стробоскопического освещения низкой интенсивности (150 вспышек/мин) и трех периодов отсутствия стресса. Все источники стресса имели продолжительность 10-14 ч и применялись индивидуально и непрерывно, в течение круглых суток. Контрольных животных помещали в отдельные комнаты и у них отсутствовал контакт с животными, подвергаемыми стрессу. Контрольных животных лишали воды и пищи на 14 ч перед каждым тестом на употребление сахарозы, но в другое время вода и пища были свободно доступны животным в их клетках. Исходя из потребления сахарозы отдельными животными на протяжении первых двух недель стресса как подвергаемые стрессу, так и контрольные животные были дополнительно разделены на отобранные подгруппы (n=8) и в последующие пять недель они один раз в день интраперитонеально получали носитель (0,5% метилцеллюлозы 1 мл/кг), соединение 8 в дозировках 12, 30 или 60 мг/кг, имипрамин в дозировке 10 мг/кг или венлафаксин в дозировке 10 мг/кг в качестве эталонных препаратов для сравнения. Препараты вводили примерно в 10.00 и еженедельный тест на потребление сахарозы проводили через 24 ч после последней инъекции препарата. Через пять недель прерывали введение всех препаратов и через 24 ч у всех животных отбирали образцы крови и/или тканей мозга и подвергали их до- 25015392 полнительному биохимическому анализу. Стресс продолжался во время всего периода введения препаратов. Животных по одному уносили из комнат их постоянного проживания в другую комнату для умерщвления. Затем им отсекали головы в полуслучайном порядке. Мозг удаляли целиком, быстро замораживали в смеси сухой лед/гептан немедленно после умерщвления и хранили в пластмассовых сосудах при -70 С. Кровь из тела для получения плазмы собирали в пробирки с ЭДТУ, которые содержали ЭДТУ(примерно 1,6 мг/мл крови). Кровь с ЭДТУ центрифугировали непосредственно при 1500g в течение 10 мин при 4 С. Плазму отсасывали и хранили в пробирках Эппендорфа при -70 С. Кроме того, получали 2 партии плазмы по 20 мл от животных, не принимавших участия в эксперимента, с целью построения стандартной кривой соединения для биоанализа. Все результаты, полученные в данном исследовании, анализировали с помощью многофакторного дисперсионного анализа с использованием трех факторов взаимосвязи между субъектами(стресс/контроль, введение препаратов и последовательные тесты на употребление сахарозы). LSDкритерий Фишера использовался для апостериорных сравнений средних значений. Легкий хронический стресс вызывал постепенное уменьшение потребления 1% раствора сахарозы. В последнем из предварительных тестов все животные выпивали приблизительно 11 г раствора сахарозы. После первых двух недель стресса потребление контрольных животных осталось приблизительно на том же уровне, но упало приблизительно до 6 г у животных, испытывавших стресс, приводя к статистически значимому групповому эффекту [F(1,84)=87,204; р 0,001]. Такое различие между контрольными и стрессовыми животными, которым вводили носитель, сохранялось примерно на том же уровне все остальное время эксперимента. По сравнению с введением носителя имипрамин был неактивен у контрольных животных [результат введения: F(1,84)=1,578; NS] и приводил к значительному эффекту у животных, испытывавших стресс [результат введения: F(1,84)=22,651; р 0,001 и взаимозависимость введениечисло недель:F(5,84)=2,717; р=0,025]. Аналогично, венлафаксин был неактивен у контрольных животных [результат введения: F(1,84)=0,208; NS] и приводил к значительному эффекту у животных, испытывавших стрессF(5,84)=3,219; р=0,010]. По сравнению с параметрами недели 0 увеличение потребления сахарозы у стрессовых животных достигало статистической значимости после четырех недель введения имипрамина (р 0,05) и венлафаксина (р 0,01); этот результат сохранялся в дальнейшем. Одно из стрессовых животных ( 480) не реагировало на введение венлафаксина, но оно было исключено из статистического анализа. По сравнению с введением носителя соединение 8 не вызывало значимого эффекта ни у контрольных [F(3,168)=1,198; NS], ни у стрессовых [F(3,168)=1,676; NS] животных, и эти данные показывают, что данное соединение неактивно в CMS модели депрессии. Пример 16. Исследование модели хозяин/чужак (известное также как исследование хронического социального стресса). Поведенческое исследование модели хозяин/чужак применяется для отбора соединений с активностью, подобной активности антидепрессантов. Соединение 8 тестировали в данном исследовании, причем исследование проводили согласно методике, описанной в Rygula, R., Abumaria, N., Flugge, G., Fuchs,E., Ruther, E., Havemann-Reinecke, U., Behavioral Brain Research, 162 (2005), p. 127-134. В приведенных ниже табл. 4-6 помещены средние значения и стандартные отклонения измеренных параметров для следующих соединений, вводимых р.о. (перорально): носитель, контрольные соединения имипрамин в дозировке 10 мг/кг и венлафаксин в дозировке 10 мг/кг, соединение 8 в дозировке 60 мг/кг и соединение 8 в дозировке 120 мг/кг.- 26015392 Таблица 4 Влияние препаратов на потребление раствора сахарозы в тесте хозяин/чужак статистически значимое отличие от стрессовых животных, которым вводили носитель.- 27015392 Таблица 5 Влияние препаратов на двигательную активность в тесте хозяин/чужак статистически значимое отличие от стрессовых животных, которым вводили носитель.- 28015392 Таблица 6 Влияние препаратов на результаты тестов по вынужденному плаванию в модели хозяин/чужак статистически значимое отличие от стрессовых животных, которым вводили носитель. Соединение 8 было активно в исследовании хозяин/гость, и эти данные указывают на то, что можно было бы ожидать от соединения 8 активности в качестве антидепрессанта. Пример 17. В качестве конкретного варианта осуществления композиции для перорального введения 100 мг соединения 8, полученного в соответствии с примером 7, смешивали с достаточно тонко измельченной лактозой, получая композицию общей массой 580-590 мг, предназначенную для заполнения твердой желатиновой капсулы размера О. Хотя в предшествующем описании изложены основные идеи настоящего изобретения в сочетании с примерами, приведенными с целью иллюстрации, следует понимать, что практическое осуществление изобретения охватывает все стандартные варианты, адаптации и/или модификации, которые входят в объем следующей далее формулы изобретения и ее эквивалентов. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ лечения депрессии, включающий введение субъекту, нуждающемуся в лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) где каждый из заместителей R1 и R2 независимо выбран из группы, состоящей из водорода и C1-C4 алкила;R4 выбран из группы, состоящей из водорода и C1-C4-алкила; а представляет собой целое число 1 или 2; заместитель где b представляет собой целое число от 0 до 4 и с представляет собой целое число от 0 до 2; каждый из заместителей R5 независимо выбран из группы, состоящей из галогена и C1-C4-алкила;