Бис(n,n’-бис(2-галоэтил)амино)фосфороамидаты в качестве противоопухолевых агентов
Номер патента: 6852
Опубликовано: 28.04.2006
Авторы: Козловски Майкл Р., Мэн Фаньин, Херр Джейсон Р., Жишкин Павел, Шоу Стивен Р., Лум Роберт Т.
Формула / Реферат
1. Соединение формулы I
где X обозначает атом хлора или брома;
Q обозначает О, S или NH; и
R обозначает водород, метил или бензил, или обозначает R'CO- или R'SO2-, где
R' обозначает C1-С6алкил, C1-С6алкил, замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы, включающей циано, галоген, C1-С6алкокси, тио, нитро или амино; фенил; фенил, замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы, включающей гидрокси, галоген, C1-С6алкокси, циано, тио, нитро, C1-С6алкил, галоген-С1-С6алкил или амино или R-Q вместе обозначают хлор, или его фармацевтически приемлемые соли.
2. Соединение формулы I
где X обозначает атом хлора или брома;
Q обозначает О, S или NH; и
R обозначает водород, метил или бензил, или обозначает R'CO- или R'SO2-, где
R' обозначает C1-С6алкил, C1-С6алкил, замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы, включающей циано, галоген, C1-С6алкокси, тио, нитро или амино; фенил; фенил, замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы, включающей гидрокси, галоген, C1-С6алкокси, циано, тио, нитро, C1-С6алкил, галоген-С1-С6алкил или амино;
или его фармацевтически приемлемые соли.
3. Соединение по любому из пп.1 или 2, где X обозначает хлор.
4. Соединение по п.2 или 3, где Q обозначает О.
5. Соединение по п.4, где R обозначает R'CO- или R'SO2-.
6. Соединение по п.5, где X обозначает хлор, a R обозначает R'SO2-.
7. Соединение по п.6, где R обозначает метансульфонил, бензолсульфонил, пара-бромбензолсульфонил, пара-нитробензолсульфонил, пара-толуолсульфонил.
8. Соединение по п.7, представляющее собой 2 (пара-бромбензолсульфонилокси)этилN,N,N',N'-тетракис(2-хлорэтил)фосфородиамидат.
9. Соединение по п.4, где X означает хлор и R означает водород, метил или бензил.
10. Соединение по п.9, представляющее собой 2-гидроксиэтилN,N,N',N'-тетракис(2-хлорэтил)фосфородиамидат.
11. Соединение по п.2 или 3, где Q обозначает NH.
12. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-11.
13. Фармацевтическая композиция по п.12, предназначенная для лечения опухолей, в частности рака, у млекопитающего.
14. Применение соединений по любому из пп.1-11 для получения лекарственного средства для лечения опухолей, в частности рака, у млекопитающего.
15. Способ лечения опухолей, в частности рака, у млекопитающего, предусматривающий введение соединения по любому из пп.1-11.
16. Способ получения соединения формулы I
где X, Q и R имеют указанные в п.1 значения, предусматривающий взаимодействие соединения формулы (2)
с соединением формулы (3)
17. Способ получения соединения формулы I
где X, Q и R имеют указанные в п.1 значения, предусматривающий получение заместителей в соединении формулы I хорошо известным методом.
18. Способ получения соединения формулы I
где X, Q и R имеют указанные в п.1 значения, предусматривающий превращение соединения формулы I, где R обозначает водород и Q обозначает кислород, в соединение формулы I, где R-Q вместе обозначают сложноэфирную группу.
19. Способ получения соединения формулы I
где X, Q и R имеют указанные в п.1 значения, предусматривающий взаимодействие соединения формулы I в форме свободного основания с кислотой с образованием фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли.
20. Способ получения соединения формулы I
где X, Q и R имеет указанные в п.1 значения, предусматривающий взаимодействие кислотно-аддитивной соли соединения формулы I с основанием с образованием соответствующего свободного основания.
21. Способ получения соединения формулы I
где X, Q и R имеет указанные в п.1 значения, предусматривающий превращение соли соединения формулы I в другую фармацевтически приемлемую соль соединения формулы I.
22. Способ получения соединения формулы I
где X, Q и R имеет указанные в п.1 значения, предусматривающий разделение рацемической смеси, содержащей любые пропорции стереоизомеров соединения формулы I, для получения требуемого стереоизомера указанного соединения.
Текст
(а) Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к химическим соединениям, способам лечения, фармацевтическим композициям и способам их получения. Более конкретно, оно относится к соединениям, которые обладают противоопухолевой активностью или которые можно модифицировать так, чтобы они обладали противоопухолевой активностью. Таким образом, настоящее изобретение относится прежде всего к применению соединений для лечения опухолей и прежде всего для лечения рака, а также к способам получения соединений.(б) Описание существующего уровня техники Существующие в настоящее время протоколы химиотерапии рака предусматривают введение пациентам антимитотических лекарственных средств, таких как адриамицин, винкристин, цисплатин, доксорубицин, дауномицин и метотрексат, токсинов, таких как дифтерийный токсин, токсин, вырабатываемый бактериями рода Pseudomonas, и рицин, и противоопухолевых лекарственных средств, таких как циклофосфамид и изофосфамид. Циклофосфамид является одним из наиболее широко применяемых во всем мире противораковых агентов и его вводят в сочетании с многими другими лекарственными средствами при лечении широкого разнообразия гематологических заболеваний и твердых опухолей. Однако некоторые особенности циклофосфамида в значительной степени снижают его клиническую эффективность. Например, это лекарственное средство нуждается в метаболической активации в печени для того, чтобы продуцировать метаболиты, токсичные для раковых клеток. Лекарственное средство особенно токсично для мочевого пузыря, а также оказывает токсичное действие в отношении костного мозга, которое является типичным для противоопухолевых лекарственных средств из класса алкилирующих агентов. Циклофосфамид в дозах, применяемых для лечения рака, обладает сильным супрессорным действием в отношении иммунной системы, снижая тем самым способность пациентов, уже ослабленных болезнью,бороться с инфекциями. Наконец, повторное применение циклофосфамида часто приводит к развитию устойчивости раковых клеток в организме пациента к лекарственному средству, делая тем самым лекарственное средство неэффективным. Фосфороамидные производные уже давно известны из литературных источников и подробно описано их применение в качестве алкилирующих реагентов. Было установлено, что некоторые из них можно применять для лечения рака (см. обзор DeVita, "Principles of Cancer Therapy", стр. 765-788 в Petersdorf и др., Principles of Internal Medicine, 10-е изд. McGraw-Hill, NY., 1983). В литературе подробно описаны также аналоги циклофосфамидов и их многочисленные производные (Cyclophosphamide, Merck Index,11-е изд., стр. 429-430, US 5190929). Однако имеется лишь небольшое количество публикаций, где упоминаются бис(N,N'-бис(2-хлорэтил)амино)фосфороамидаты (DE 19524515, US 5306727, WO 9306120, DE 3835772, GB 2207674, DE 3239858, ЕР 072531). В US 5556942 в качестве промежуточного продукта реакции описано соединение где Z обозначает бром и R обозначает водород или R обозначает хлор. Краткое изложение сущности изобретения Одним из объектов настоящего изобретения является новый класс фосфороамидатных соединений,представленных формулой I:R обозначает водород, (низш.)алкил, замещенный (низш.)алкил, арил, замещенный арил, гетероарил или замещенный гетероарил, или обозначает R'CO-, R'NHCO-, R'SO2- или R'NHSO2-, где R' обозначает водород, (низш.)алкил, замещенный (низш.)алкил, арил, замещенный арил, гетероарил или замещенный-1 006852 гетероарил; или R-Q вместе обозначают хлор,и их фармацевтически приемлемые соли. Следующим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, которая содержит терапевтически эффективное количество соединения формулы I в сочетании по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем. В частности, композиция предназначена для лечения рака и других заболеваний, в отношении которых может оказывать благоприятное действие антимитотический агент. Еще одним объектом изобретения является способ лечения у млекопитающего рака и других заболеваний, в отношении которых может оказывать благоприятное действие антимитотический агент, предусматривающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I. Следующим объектом изобретения является способ получения соединения формулы I. Подробное описание изобретения Определения: Используемые в настоящем описании понятия основаны на их общепринятом значении и они должны быть понятны специалистам в данной области. Понятие "галоген" или "гало" обозначает бром, йод, фтор или хлор. Понятие "алкил", используемое в названиях "алкил" или "алкилокси", обозначает одновалентный С 1-С 20-углеводородный фрагмент, который может быть линейным, разветвленным или циклическим. Понятие"(низш.)алкил","гало(низш.)алкил","арил(низш.)алкил" или "гетероарил(низш.)алкил", обозначает полностью насыщенный одновалентный углеводородный радикал, несущий 1-10 атомов углерода и состоящий только из атомов углерода и водорода, который может представлять собой циклический радикал или радикал с разветвленной или прямой цепью. Примерами таких радикалов являются метил, этил, изопропил, пропил, бутил, изобутил, вторбутил, трет-бутил, пентил, гексил, циклопентил, циклопропилметил, циклогексил или циклогексилметил. В контексте настоящего изобретения предпочтительным является (низш.)алкил, несущий 1-6 атомов углерода. Понятие "замещенный алкил или замещенный (низш.)алкил" обозначает алкил или (низш.)алкил соответственно, который, как правило, является моно-, ди- или тризамещенным такими радикалами, как арил, R1 -замещенный арил, гетероарил, нитро, циано, галоген, -OR1, -SR1, -C(O)R1, -OC(O)R1, -C(O)OR1,-NR12, -SO2OR1, -OSO2R1, -SO2NR12, -NRSO2R1, -CONR12 или -NRC(O)R1, где каждый R1 независимо обозначает водород, (низш.)алкил, R2 - замещенный (низш.)алкил, арил, R2 - замещенный арил, гетероарил,гетероарил(низш.)алкил, R2 - замещенный арил(низш.)алкил или арил(низш.)алкил, и каждый R2 независимо обозначает гидрокси, галоген, (низш.)алкилокси, циано, тио, нитро, (низш.)алкил, гало(низш.)алкил или амино. Наиболее предпочтительными являются замещенные алкилы или замещенные(низш.)алкилы, которые имеют один-три заместителя, выбранные из ряда, включающего циано, галоген,(низш.)алкилокси, тио, нитро, амино и гидрокси. Понятие "гало(низш.)алкил" обозначает (низш.)алкил, замещенный одним-тремя атомами галогена,примерами таких радикалов являются -CF3, -CH2CF3 и -СН 2 ССl3. Понятие "арил(низш.)алкил" обозначает (низш.)алкильный радикал, замещенный арилом. Понятие"замещенный арил(низш.)алкил" обозначает арил(низш.)алкильный радикал, имеющий один-три заместителя на арильном фрагменте или алкильном фрагменте радикала, или на обоих фрагментах. Понятие "гетероарил(низш.)алкил" обозначает (низш.)алкильный радикал, замещенный гетероарилом. Понятие "замещенный гетероарил(низш.)арил" обозначает гетероарил(низш.)алкильный радикал,имеющий один-три заместителя на гетероарильном фрагменте или на алкильном фрагменте радикала,или на обоих фрагментах. Понятие "(низш.)алкилокси" обозначает радикал -OR3, где R3 обозначает (низш.)алкил. Понятие "арил", используемое в обозначениях "арил", "арилокси" и "арил(низш.)алкил", обозначает радикал, являющийся производным ароматического углеводорода, несущего 6-20 кольцевых атомов углерода, который имеет одно кольцо (например, фенил) или два или более сконденсированных колец,предпочтительно 2-3 сконденсированных кольца (например, нафтил), или два или более ароматических колец, предпочтительно 2-3 ароматических кольца, соединенные простой связью (например, бифенил). Предпочтительно арил представляет собой С 6-С 16 арил, а еще более предпочтительно С 6-С 14 арил. Арильный радикал сам может иметь один или несколько заместителей, представляющих собой такие радикалы,как алкил, замещенный алкил, галоген, циано, нитро, -SR1, -OR1, -C(O)R1, -ОС(О)R1, -SO2OR1, -OSO2R1,-SO2NR12, -NRSO2R1, -C(O)OR1, -NR12, -CONR12 или -NRC(O)R1, где каждый R1 независимо обозначает водород, (низш.)алкил, R2 - замещенный (низш.)алкил, арил, R2 - замещенный арил, гетероарил, гетероарил(низш.)алкил, арил(низш.)алкил или R2 - замещенный арил(низш.)алкил и каждый R2 независимо обозначает гидрокси, галоген, (низш.)алкилокси, циано, тио, нитро, (низш.)алкил, гало(низш.)алкил или амино. Понятие "замещенный арил" обозначает арил, замещенный одним-тремя заместителями, выбранными из ряда, включающего алкил, замещенный алкил, галоген, циано, нитро, -SR1, -OR1, -C(O)R1,-2 006852-OC(O)R1, -SO2OR1, -OSO2R1, -SO2NR12, -NRSO2R1, -C(O)OR1, -NR12, -CONR12 или -NRC(O)R1, где каждый R1 независимо обозначает водород, (низш.)алкил, R2-замещенный (низш.)алкил, арил, R2 замещенный арил, гетероарил, гетероарил(низш.)алкил, арил(низш.)алкил или R2-замещенный арил(низш.)алкил и каждый R2 независимо обозначает гидрокси, галоген, (низш.)алкилокси, циано, тио,нитро, (низш.)алкил, гало(низш.)алкил или амино. Кроме того, любые два соседних заместителя в арильном фрагменте необязательно могут образовывать вместе (низш.)алкилендиоксигруппу. Наиболее предпочтительными заместителями в замещенном ариле являются гидрокси, галоген, (низш.)алкилокси, циано, тио, нитро, (низш.)алкил, гало(низш.)алкил или амино. Понятие "гетероарил", используемое в обозначениях гетероарил и гетероарил(низш.)алкил, обозначает радикал, являющийся производным ароматического углеводорода, несущего 5-14 кольцевых атомов, из которых 1-5 представляют собой гетероатомы, выбранные независимо из N, О или S, оно включает моноциклические, конденсированные гетероциклические и конденсированные карбоциклические и гетероциклические ароматические кольца (например, тиенил, фурил, пирролил, пиримидинил, изоксазолил, оксазолил, индолил, изобензофуранил, пуринил, изохинолил, птеридинил, имидазолил, пиридил,пиразолил, пиразинил, хинолил и т.д.). Понятие "замещенный гетероарил" обозначает гетероарил, который может иметь один-три заместителя, таких как алкил, R1 -замещенный алкил, галоген, циано, нитро, -SR1, -OR1, -C(O)R1, -OC(O)R1,-SO2OR1, -OSO2R1, -SO2NR12, -NRSO2R1, -С(О)OR1, -NR12, -CONR12 или -NRC(O)R1, где каждый R1 независимо обозначает водород, (низш.)алкил, R2-замещенный (низш.)алкил, арил, R2-замещенный арил, гетероарил, гетероарил(низш.)алкил, арил(низш.)алкил или R2 -замещенный арил(низш.)алкил и каждый R2 независимо обозначает гидрокси, галоген, (низш.)алкилокси, циано, тио, нитро, (низш.)алкил, галоген(низш.)алкил или амино. Кроме того, любые два соседних заместителя в гетероарильном фрагменте необязательно могут вместе образовывать (низш.)алкилендиоксигруппу. Наиболее предпочтительными заместителями замещенного гетероарила являются гидрокси, галоген, (низш.)алкилокси, циано, тио,нитро, (низш.)алкил, гало(низш.)алкил или амино. Понятие "гетероцикл" обозначает радикал, являющийся производным ароматического углеводорода, несущего 5-14 кольцевых атомов, из которых 1-5 представляют собой гетероатомы, выбранные независимо из N, О или S, оно включает моноциклические, сконденсированные гетероциклические и сконденсированные карбоциклические и гетероциклические ароматические кольца (например, тиенил, фурил,пирролил, пиримидинил, изоксазолил, оксазолил, индолил, изобензофуранил, пуринил, изохинолил, птеридинил, имидазолил, пиридил, пиразолил, пиразинил, хинолил и т.д.). Гетероциклы могут иметь одинтри заместителя, таких как алкил, R1 - замещенный алкил, галоген, циано, нитро, -SR1, -OR1,-C(O)R1, -OC(O)R1, -SO2OR1, -OSO2R1, -SO2NR12, -NRSO2R1, -С(О)ОR1, -NR12, -CONR12 или -NRC(O)R1,где каждый R1 независимо обозначает водород, (низш.)алкил, R2 - замещенный (низш.)алкил, арил, R2 замещенный арил, гетероарил, гетероарил(низш.)алкил, арил(низш.)алкил или R2 - замещенный арил(низш.)алкил и каждый R2 независимо обозначает гидрокси, галоген, (низш.)алкилокси, циано, тио,нитро, (низш.)алкил, гало(низш.)алкил или амино. Кроме того, любые два соседних заместителя в гетероарильном фрагменте необязательно могут образовывать вместе (низш.)алкилендиоксигруппу. Наиболее предпочтительными заместителями в замещенном гетероариле являются гидрокси, галоген,(низш.)алкилокси, циано, тио, нитро, (низш.)алкил, гало(низш.)алкил или амино. Понятие "сложноэфирная группа" обозначает R'C(O)-O, R'CO-S-, сульфонат или карбамат, где R' обозначает водород, (низш.)алкил, арил или гетероцикл. Подразумевается, что понятие "заболевание" в контексте настоящего описания включает опухоли, в частности, рак, а также другие заболевания, в отношении которых может оказывать благоприятное действие антимитотический агент, включающие (но не ограничиваясь ими) доброкачественную гиперплазию и инфекции, вызванные патогенами, такие как грибковые и паразитарные инфекции. Понятие "фармацевтически приемлемые соли" обозначает соли, которые могут образовываться, если присутствующие кислотные группы, более конкретно кислотные протоны, могут взаимодействовать с неорганическими или органическими основаниями. Кислотные протоны присутствуют, например в группах -OR1 , -SO2OR1 или -C(O)OR1. Как правило, родительское соединение обрабатывают избыточным количеством щелочного реагента, такого как гидроксид, карбонат или алкоксид, который несет соответствующий катион. Примерами катионов, присутствующих в фармацевтически приемлемых солях являются такие катионы, как Na+, К+, Са 2+ и NH4+. Наиболее предпочтительными являются соли, содержащие Na+ . Так, приемлемыми неорганическими основаниями являются гидроксид алюминия, гидроксид кальция, гидроксид калия, карбонат натрия и гидроксид натрия. Соли можно получать также с использованием органических оснований, таких как этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, Nметилглюкамин и трометамин. Если соединения по изобретению содержат основную группу, то можно получать кислотно-аддитивные соли. Примерами основных групп могут служить группы -NR12. Кислотно-аддитивные соли соединений получают из родительского соединения стандартными методами в пригодном растворителе с использованием избыточного количества кислоты, такой как соляная кислота,бромистоводородная кислота, серная кислота (для получения сульфатов и бисульфатов), азотная кислота,фосфорная кислота и т.п., и органических кислот, таких как уксусная кислота, пропионовая кислота, гли-3 006852 колевая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, яблочная кислота, малоновая кислота,янтарная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота,салициловая кислота, пара-толуолсульфоновая кислота, капроновая кислота, энантовая кислота, циклопентанпропионовая кислота, молочная кислота, орто-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, 1,2 этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, парахлорбензолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, камфорсульфоновая кислота, 4 метилбицикло[2.2.2.]окт-2-ен-1-карбоновая кислота, глюкогептоновая кислота, глюконовая кислота, 4,4'метиленбис(3-гидрокси-2-нафтойная) кислота, 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота,трет-бутилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюкуроновая кислота, глутаминовая кислота, 3 гидрокси-2-нафтойная кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота и т.п Понятие "фармацевтически приемлемые соли" включает также внутренние соли или цвиттерионы. Цвиттерионы могут образовываться в том случае, если соединения формулы I содержат как кислотные протоны, так и основные группы. "Внутренние соли" или "цвиттерионы" могут образовываться в результате переноса протона из карбоксильной группы на свободные пары электронов атома азота в аминогруппе. Понятие "стереоизомеры" обозначает соединения, которые имеют одну и ту же последовательность ковалентных связей и различаются относительным расположением своих атомов в пространстве. Понятие "терапевтически эффективное количество" обозначает количество, которое при введении в организм животного с целью лечения заболевания является достаточным для лечения заболевания. Понятие "антимитотический" относится к лекарственному средству или агенту, которые оказывают влияние на деление ядра эукариотической клетки. Подразумевается, что понятия "лечить" или "лечение" заболевания у млекопитающего включают:(1) предупреждение возникновения заболевания у млекопитающего, которое может быть предрасположено к заболеванию, но еще не испытывает или не проявляет симптомов заболевания,(2) стабилизацию заболевания, т.е. прекращение его развития, или(3) ослабление симптомов заболевания, т.е. достижение регресса заболевания. Некоторые соединения по изобретению могут иметь один или несколько хиральных центров. В таких случаях все стереоизомеры подпадают под объем настоящего изобретения. Так, в контексте изобретения подразумевается, что под объем изобретения подпадают индивидуальные выделенные стереоизомеры, а также смеси таких стереоизомеров. Предпочтительные варианты осуществления изобретения Среди соединений, указанных в первом объекте изобретения, определенные соединения (включая фармацевтически приемлемые соли соединений) являются предпочтительными. Такими предпочтительными соединениями являются соединения, где:(1) X обозначает хлор или бром, прежде всего хлор;(3) R обозначает R'CO-, RNHCO-, R'SO2- или R'NHSO2-, где R' обозначает водород, (низш.)алкил,замещенный (низш.)алкил, арил, замещенный арил, гетероарил, или замещенный гетероарил, прежде всего, где R обозначает ацетил, бензоил, бензолсульфонил, пapa-бромбензолсульфонил, пapaнитробензолсульфонил, пapa-толуолсульфонил или метансульфонил; или (3') R обозначает водород,(низш.) алкил, замещенный (низш.)алкил, арил, замещенный арил, гетероарил или замещенный гетероарил; прежде всего где R обозначает водород, метил или бензил. Среди соединений по изобретению соединения, удовлетворяющие указанным условиям предпочтительности, являются более предпочтительными по сравнению с соединениями, которые не удовлетворяют указанным условиям предпочтительности, а соединения, удовлетворяющие большему количеству условий предпочтительности, являются более предпочтительными по сравнению с соединениями, которые удовлетворяют меньшему количеству условий предпочтительности. Особенно предпочтительными являются соединения, где X обозначает хлор, Q обозначает О и R обозначает водород, бензил, ацетил, бензоил, бензолсульфонил, пapa-бромбензолсульфонил, пapaнитробензолсульфонил, пapa-толуолсульфонил или метансульфонил, или R-Q вместе обозначают хлор; и наиболее предпочтительными являются соединения 2-гидроксиэтил-N,N,N',N'-тетракис(2 хлорэтил)фосфородиамидат и 2-хлорэтил-N,N,N',N'-тетракис(2-хлорэтил)фосфородиамидат. Другими предпочтительными соединениями являются соединения, где X обозначает хлор и R обозначает R'SO2-, где R' обозначает водород, (низш.) алкил, замещенный (низш.)алкил, арил, замещенный арил, гетероарил или замещенный гетероарил. Особенно предпочтительными являются соединения, гдеR обозначает бензоил, метансульфонил, пара-нитробензолсульфонил или пара-бромбензолсульфонил. Наиболее предпочтительно R обозначает пapa-бромбензолсульфонил. Фармакология и практическая применимость Соединения формулы I обладают противоопухолевой активностью или их можно модифицировать таким образом, чтобы они обладали противоопухолевой активностью. 2-галоэтильный, более конкретно 2-хлорэтильный фрагмент молекулы этих соединений, обладает способностью действовать непосредственно в качестве ДНК-алкилирующего агента или он может быть превращен в азиридинил. Азириди-4 006852 нильная форма молекулы обладает очень высокой активностью и предполагается, что она обусловливает механизм действия соединений из класса горчичного газа. Благодаря этому соединения обладают эффективностью при лечении опухолей, а также других заболеваний, в отношении которых может оказывать благоприятное действие антимитотический агент, включающих (но не ограничиваясь ими) доброкачественную гиперплазию и инфекции, вызванные патогенами. Для указанных соединений не требуется метаболическая активация в печени для придания им противоопухолевой активности и следовательно они не обладают профилем токсичности, характерным для циклофосфамидов. Пути введения и фармацевтические композиции Соединения по изобретению можно вводить в терапевтически эффективном количестве любым из обычных и приемлемых для подвергающегося лечению пациента путей введения. Пути введения включают (но не ограничиваясь ими) введение путем инъекции, включая внутривенную, внутрибрюшинную,внутримышечную и подкожную инъекцию, введение через слизистую оболочку или трансдермальное введение, введение с помощью местного нанесения, назального спрея, суппозитория и т.п., или можно использовать пероральное введение. Терапевтически эффективное количество может варьироваться в широких пределах в зависимости от серьезности заболевания, возраста и относительного состояния здоровья пациента, эффективности применяемого соединения, а также других факторов. Как правило, оно составляет от приблизительно 1 мг/кг веса тела в день до 1000 мг/кг веса тела в день, предпочтительно приблизительно от 1 до 100 мг/кг/день. Как правило, соединения по изобретению следует вводить в виде фармацевтических композиций,имеющих форму таблеток, пилюль, капсул, полутвердых препаратов, порошков, композиций с пролонгированным высвобождением, растворов, суспензий, эликсиров или любых других пригодных композиций, которые в целом включают соединение формулы I в сочетании по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем. Приемлемые носители должны быть нетоксичными, должны облегчать введение и не должны оказывать неблагоприятное действие на терапевтическую эффективность соединения формулы I. Такие эксципиенты могут быть твердыми, жидкими или полутвердыми. К твердым фармацевтическим эксципиентам относятся крахмал, целлюлоза, тальк, глюкоза, лактоза, сахароза, желатин, солод, рис, мука, мел, силикагель, стеарат магния, стеарат натрия, моностеарат глицерина, хлорид натрия, сухое обезжиренное молоко и т.п. Жидкие и полутвердые эксципиенты можно выбирать из группы, включающей воду, этанол, глицерин, пропиленгликоль и различные масла, в том числе масла, полученные из нефти, масла животного, растительного или синтетического происхождения(например, арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло и т.д.). Предпочтительные жидкие носители, наиболее пригодные для растворов для инъекции, включают воду, физиологический раствор, водную декстрозу и гликоли. Количество соединения формулы I в композиции может варьироваться в широких пределах в зависимости от типа композиции, размера стандартной дозы, типа эксципиента и других факторов, известных специалистам в области фармацевтики. Как правило, конечная композиция может содержать от 1 до 99 мас.%, более предпочтительно от 10 до 90 мас.% соединения, наиболее предпочтительно от 25 до 75 мас.%, при этом оставшаяся часть приходится на долю эксципиента или эксципиентов. Фармацевтические композиции приготавливают с помощью обычных фармацевтических методов. Объектом настоящего изобретения являются также фармацевтические композиции, содержащие терапевтически эффективное количество соединения формулы IR обозначает водород, (низш.)алкил, замещенный (низш.)алкил, арил,замещенный арил, гетероарил или замещенный гетероарил, или обозначает R'CO-, R'NHCO-, R'SO2 или R'NHSO2-, где R' обозначает водород, (низш.)алкил, замещенный (низш.)алкил, арил, замещенный арил, гетероарил или замещенный гетероарил; или R-Q вместе обозначают галоген, или их фармацевтически приемлемые соли, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель. Кроме того, согласно настоящему изобретению предусматривается, что фармацевтическую композицию, содержащую одно или несколько соединений формулы I, можно вводить как индивидуально, так и в сочетании с другими фармакологическими агентами. Предпочтительный вариант осуществления изо-5 006852 бретения относится к комбинированной терапии, при которой фармацевтическую композицию, содержащую одно или несколько соединений формулы I, применяют в сочетании с другими фармакологически активными агентами, выбранными из группы, включающей антибиотики, противоопухолевые агенты, агенты, уничтожающие опухолевые клетки, стабилизирующие опухоль агенты и т.п. Такое применение комбинированной терапии легко может быть реализовано на практике специалистами в данной области на основе общепринятых стандартов медицинского лечения и на основе общепринятых клинических методов. В настоящем изобретении предложен также способ лечения опухолей, прежде всего рака, у млекопитающего, предусматривающий введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы IR обозначает водород, (низш.)алкил, замещенный (низш.)алкил, арил, замещенный арил, гетероарил или замещенный гетероарил, или обозначает R'CO-, R'NHCO-, R'SO2- или R'NHSO2-, где R' обозначает водород, (низш.)алкил, замещенный (низш.)алкил, арил, замещенный арил, гетероарил или замещенный гетероарил; или R-Q вместе обозначают галоген,или его фармацевтически приемлемой соли. Синтез соединений формулы I Соединения формулы I можно получать согласно реакционной схеме, которая изображена выше и описана ниже: Соединение В можно получать путем взаимодействия оксихлорида фосфора с соединением А,представляющим собой галогенид бис(2-галоэтил)амина. Реакцию проводят в инертном растворителе. В качестве инертных растворителей можно применять ароматические углеводороды. К реакционной смеси добавляют основание, более предпочтительно органическое основание, такое как органический амин,наиболее предпочтительно триэтиламин, и затем реакционную смесь перемешивают в течение продолжительного периода времени при 0-50 С. Смесь, которая часто представляет собой суспензию, нагревают до 0-100 С и перемешивают в течение продолжительного периода времени. Затем смесь охлаждают,обрабатывают адсорбентом, например, углем, перемешивают при комнатной температуре и фильтруют. После этого удаляют растворитель, получая соединение В. Затем соединение В подвергают взаимодействию с соединением С. Реакцию проводят в полярном растворителе. Реакционную смесь перемешивают/взбалтывают и затем охлаждают. К смеси добавляют алкоксид щелочного металла, затем ее медленно нагревают до 0-50 С и перемешивают в течение продолжительного периода времени. В реакционную смесь вносят раствор галогенводорода, например НСl,-6 006852 в воде. Собирают органическую фракцию и водную фракцию экстрагируют не смешивающимся с водой апротонным полярным растворителем (2x4 л). Примерами не смешивающихся с водой апротонных полярных растворителей являются дихлорметан, хлороформ и т.п. Объединенные органические фракции промывают и растворители удаляют при пониженном давлении. Затем образовавшийся неочищенный продукт реакции, т.е. соединение формулы (I), промывают и очищают обычными методами. Более конкретно, соединение 2 (см. схему синтеза 2, ниже) можно получать путем реакции оксихлорида фосфора с соединением 1, а именно, гидрохлоридом бис(2-галоэтил)амина. Реакционную смесь в растворителе, таком как толуол, бензол, ксилол и т.п., перемешивают/взбалтывают при умеренной скорости (до получения прозрачного раствора) и в течение 5-30 мин к реакционной смеси добавляют триэтиламин. Затем реакционную смесь перемешивают в течение продолжительного периода времени при комнатной температуре. К указанной смеси добавляют дополнительное количество гидрохлорида бис(2 галоэтил)амина и триэтиламина. Образовавшуюся суспензию нагревают до температуры дефлегмации растворителя и перемешивают в течение 16-24 ч. Затем смесь охлаждают до комнатной температуры и обрабатывают углем, перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч и затем подвергают вакуумной фильтрации через подушку из целита. Растворитель удаляют при пониженном давлении (30 мм рт.ст., конечная температура бани 50 С) на роторном испарителе, получая соединение 2. Полученное таким образом соединение 2 затем подвергают реакции с соединением 3. Реакцию проводят в растворителе, таком как тетрагидрофуран, диоксан, метил-трет-бутиловый эфир и т.п. Реакционную смесь перемешивают/взбалтывают при умеренной скорости (до получения прозрачного раствора красного цвета) и смесь охлаждают до 0 С с помощью бани лед/вода. К полученному охлажденному раствору в течение 20 мин добавляют трет-бутоксид калия (362 г, 3,22 моля). Затем реакционную смесь медленно нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение продолжительного периода времени (16-24 ч). На этой стадии в реакционную смесь вносят раствор хлористого водорода в воде. Собирают органическую фракцию и водную фракцию экстрагируют этилацетатом (2 x 4 л). Объединенные органические фракции промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (1 х 4 л) и растворители удаляют при пониженном давлении (вакуум 30 мм рт.ст., конечная температура бани 50 С) на роторном испарителе. Затем образовавшийся неочищенный продукт реакции, представляющий собой соединение формулы (I), промывают и очищают обычными методами. Используемые в этом синтезе реагенты, такие как оксихлорид фосфора, соединения 1 и 3, все поступают в продажу от таких фирм, как Aldrich, Fluka и Alfa. При синтезе некоторых соединений формулы I, можно вводить, а по окончании синтеза удалять защитные группы. Пригодные защитные группы для амино-, гидроксильных, карбоксильных групп описаны у Greene и др., в "Protective Groups in Organic Synthesis," 2-е изд., John Wiley and Sons, New York,1991. Для получения некоторых производных требуется этерификация спиртов до сложных эфиров, которую можно осуществлять методами, хорошо известными в данной области (см., например, Larock,"Comprehensive Organic Transformations", VCH Publishers, New York, 1989). В соответствии с вышеизложенным способ получения соединения формулы I предусматривает осуществление одной или нескольких из указанных ниже стадий:(а) взаимодействие соединения формулы (2)(в) превращение соединения формулы I, где R обозначает водород и Q обозначает кислород, в соединение формулы I, где R-Q вместе обозначают сложноэфирную группу; или(г) взаимодействие соединения формулы I в форме свободного основания с кислотой с образованием фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли; или(д) взаимодействие кислотно-аддитивной соли соединения формулы I с основанием с образованием соответствующего свободного основания; или(е) превращение соли соединения формулы I в другую фармацевтически приемлемую соль соединения формулы I; или(ж) разделение рацемической смеси, содержащей любые пропорции стереоизомеров соединения формулы I, для получения требуемого стереоизомера указанного соединения. Примеры Представленные ниже примеры приведены для того, чтобы специалисты в данной области могли более четко понять и воплотить на практике настоящее изобретение. Они не направлены на ограничение объема изобретения, а приведены только с целью иллюстрации репрезентативных вариантов осуществления. В примерах синтеза тонкослойную хроматографию осуществляли на силикагелевых пластинах типаAnaltech GF 350 размером 1 дюйм х 3 дюйма с использованием флуоресцентного индикатора. Визуализацию пластин для ТСХ осуществляли с использованием паров йода. Протонные и углеродные магнитные резонансные спектры получали с помощью спектрометра ядерного магнитного резонанса типаBruker AC 300 MHz с использованием тетраметилсилана в качестве внутреннего стандарта. Температуры плавления получали с использованием электротермического устройства для определения температуры плавления и их не корректировали. Инфракрасные спектры получали с использованием гранул КВr на инфракрасном спектрофотометре с фурье-преобразованием типа Perkin-Elmer Spectrum 1000. Массспектроскопические анализы проводили на масс-спектрометре типа Shimadzu QP-5000 GC (CI, метан) путем непосредственной инъекции. Термические анализы проводили на дифференциальном сканирующем калориметре типа Mettler Toledo DSC821e. Синтез соединений формулы I Схема 2 Пример 1. Получение соединения 3 (Схема 2) Получение хлорида N,N,N',N'-тетракис(2-хлорэтил)фосфородиамида (2) К трехгорлой круглодонной колбе вместимостью 12 л, находящейся в кожухе с электрическим подогревом, подсоединяли верхнюю механическую мешалку, парциальный конденсатор горячего орошения и капельную воронку с уравновешенным давлением объемом 2 л, снабженную барботром с входным/выходным клапаном для азота. В колбу загружали оксихлорид фосфора (258 мл, 2,77 моля), гидрохлорид бис(2-хлорэтил)амина (495 г, 2,77 моля), соединение 1, и толуол (5 л). Мешалку регулировали таким образом, чтобы перемешивание осуществлялось с умеренной скоростью (для получения прозрачного раствора), и в реакционную смесь в течение 10 мин добавляли триэтиламин (812 мл, 5,82 моля). Затем реакционную смесь перемешивали в течение 26 ч при комнатной температуре. К этой смеси в течение 10 мин добавляли гидрохлорид бис(2-хлорэтил)амина (505 г, 2,83 моля) и триэтиламин (830 мл, 6,11 моля). Суспензию рыжевато-коричневого цвета нагревали до температуры дефлегмации толуола (110 С) и перемешивали в течение 22 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и обрабатывали углем (500 г), перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и после этого подвергали вакуумной фильтрации через подушку из целита (1 кг). Растворитель удаляли при пониженном давлении (30 мм рт.ст., конечная температура бани 50 С) на роторном испарителе, получая хлорид N,N,N',N'-тетракис(2 хлорэтил)фосфородиамида, представляющий собой соединение 2, в виде масла красновато-коричневого цвета (979 г, выход 97%). ТСХ-анализ выявил наличие одного пятна (Rf =0,71; этилацетат: гексан 1:1). Протонный ЯМР-спектр соответствовал продукту, поступающему в продажу. Пример 2. Получение 2-гидроксиэтил-N,N,N',N'-тетракис(2-хлорэтил)фосфородиамидата, соединения 3 К трехгорлой круглодонной колбе вместимостью 12 л, находящейся в кожухе с электрическим подогревом, подсоединяли верхнюю механическую мешалку, термометр и барботр с входным/выходным клапаном для азота. В колбу загружали хлорид N,N,N',N'-тетракис(2-хлорэтил)фосфородиамида, пред-8 006852 ставляющий собой соединение (2) (979 г, 2,68 моля), этиленгликоль (1,5 л, 26,8 моля), соединение 4 и тетрагидрофуран (3 л). Мешалку регулировали таким образом, чтобы перемешивание осуществлялось с умеренной скоростью (для получения прозрачного раствора красного цвета), и смесь охлаждали до 0 С с помощью бани лед/вода. К полученному охлажденному раствору в течение 20 мин добавляли третбутоксид калия (362 г, 3,22 ммоля). Затем реакционную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в общей сложности в течение 19 ч. В колбу в течение 10 мин вводили раствор хлористого водорода в воде (8 л, 1 М). Собирали органическую фракцию и водную фракцию экстрагировали этилацетатом (2x4 л). Объединенные органические фракции промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия (1 х 4 л) и растворители удаляли при пониженном давлении (вакуум 30 мм рт.ст.,конечная температура бани 50 С) на роторном испарителе, получая темное масло красноватокоричневого цвета. Затем этот неочищенный органический продукт растворяли в теплом (40 С) метилтрет-бутиловом эфире (2 л) и давали нагреться до комнатной температуры, осуществляя перемешивание в общей сложности в течение 14 ч. Образовавшуюся суспензию перемешивали в течение 30 мин при 0 С,после чего осадок собирали путем вакуумной фильтрации и промывали холодным метил-третбутиловым эфиром (1 л). Объединенные фильтраты концентрировали при пониженном давлении (вакуум 30 мм рт.ст., конечная температура бани 50 С) на роторном испарителе до объема 500 мл и перемешивали в течение 30 мин при 0 С. Образовавшийся осадок собирали с помощью вакуумной фильтрации и промывали холодным метил-трет-бутиловым эфиром (200 мл). Затем объединяли две партии твердого продукта и сушили в течение ночи (30 мм рт.ст., 40 С), получая 2-гидроксиэтил-N,N,N',N'-тетракис(2 хлорэтил)фосфородиамидат, представляющий собой соединение 3, в виде порошка рыжеватокоричневого цвета (526 г, выход 50%). ТСХ-анализ выявил одно пятно (Rf 0,62; метанол:хлороформ 1:9). Температура плавления: 76-78 С; ИК (КВr) 3372, 2957, 1459, 1344, 1206, 1098, 1053, 929 см-1; МС (CI,метан) m/z 391(MH+), 353, 339, 248, 106. Термический анализ (ДСК) выявил два экзотермических диапазона разложения при 164-179 С и 222-231 С. В представленной ниже табл. 1 приведены соединения, полученные аналогичным методом К раствору, содержащему соединение 3 (0,780 г, 2 ммоля) в ТГФ/Н 2 О (1:1) и 1 н. NaOH (2 мл), добавляли раствор пара-толуолсульфонихлорида (TsCl, 0,40 г, 2,1 ммоля) в ТГФ. Реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч при КТ. Смесь разбавляли метиленхлоридом и промывали 1 н. НСl. Органический слой промывали соляным раствором, сушили над К 2 СО 3 и концентрировали до получения вязкого масла, представляющего собой соединение 11 (1,04 г, 96%) В представленной ниже табл. 2 приведены соединения, полученные аналогичным методом Пример 4. Жизнеспособность клеток Клетки человеческой меланомы линии RPMI 8322 (АТСС) выращивали при 37 С в среде MEM, дополненной 10% фетальной бычьей сыворотки, 1% L-глутамата и 0,1% гентамицина. Клетки высевали в 96-луночные титрационные микропланшеты с плотностью 2X106 клеток/лунку. Через 24 ч среду заменяли такой же средой, в которую добавляли тестируемые соединения в конечных концентрациях от 1 мкМ до 10 мМ и 1% DMSO. Клетки выращивали в присутствии соединений в течение еще 4 дней. Каждую концентрацию соединения тестировали в трех повторностях. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью стандартного анализа, основанного на наблюдении за метаболическим превращением красителя Пример 5. Оценка противоопухолевой эффективности в опытах на мышах Самок бестимусных мышей линии NCr-пи 7-недельного возраста получали от фирмы Charles RiverLaboratories (Рэйлиг, Северная Каролина) и акклиматизировали в лабораторных условиях в течение одной недели перед началом эксперимента. Животных помещали в небольшие изолированные клетки по пять особей в клетку и содержали при световом режиме 12 ч света/12 ч темноты. Животным давали профильтрованную стерилизованную воду и стерильный корм для грызунов ad libitum. Животных ежедневно осматривали и регистрировали клинические признаки, такие как сокращение опухоли. Модель опухоли. 30-40 мг фрагментов опухоли молочной железы человека линии МХ-1 имплантировали подкожно мышам вблизи правой подмышечной области с помощью троакара с иглой 12-го размера и давали расти. Опухолям давали расти до начала обработки до тех пор, пока их масса не достигала 75-196 мг (размер 75-196 мм 3). Обработка лекарственным средством. Соединение 3 вводили внутрибрюшинно в течение пяти последовательных дней в дозах 55, 75 и- 10006852 100 мг/кг/день. Соединение 3 приготавливали каждый раз заново в концентрации 10 мг/мл в смеси 5%EtOH/45% пропиленгликоля/50% ЗФР. Дозы растворов вводили мышам не более чем за 4 ч после приготовления. Соединения вводили с учетом точной величины веса тела, при этом инъецируемый объем составлял 0,1 мл/10 г веса тела. Измерения опухоли. Измерения опухолей и веса тела мышей проводили дважды в неделю, начиная с первого дня обработки. Объем опухоли определяли на основе измерений с помощью циркуля (в мм) и с использованием формулы для объема эллипсоида: L x W2 /2 = мм 3, где L и W обозначают максимальный и минимальный размеры, определяемые при каждом измерении. Указанную формулу можно использовать также для вычисления массы опухоли, зная ее плотность (объем 1 мм 3 соответствует массе 1 мг). Исследования проводили в течение 28 дней после имплантации опухоли. Всех животных, у которых масса опухоли достигала 4 г, умерщвляли до окончания эксперимента. где X обозначает атом хлора или брома;R' обозначает C1-С 6 алкил, C1-С 6 алкил, замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы,включающей циано, галоген, C1-С 6 алкокси, тио, нитро или амино; фенил; фенил, замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы, включающей гидрокси, галоген, C1-С 6 алкокси, циано, тио, нитро, C1 С 6 алкил, галоген-С 1-С 6 алкил или амино или R-Q вместе обозначают хлор, или его фармацевтически приемлемые соли. 2. Соединение формулы I где X обозначает атом хлора или брома;- 11006852 или его фармацевтически приемлемые соли. 3. Соединение по любому из пп.1 или 2, где X обозначает хлор. 4. Соединение по п.2 или 3, где Q обозначает О. 5. Соединение по п.4, где R обозначает R'CO- или R'SO2-. 6. Соединение по п.5, где X обозначает хлор, a R обозначает R'SO2-. 7. Соединение по п.6, где R обозначает метансульфонил, бензолсульфонил, парабромбензолсульфонил, пара-нитробензолсульфонил, пара-толуолсульфонил. 8. Соединение по п.7, представляющее собой 2 (пара-бромбензолсульфонилокси)этилN,N,N',N'тетракис(2-хлорэтил)фосфородиамидат. 9. Соединение по п.4, где X означает хлор и R означает водород, метил или бензил. 10. Соединение по п.9, представляющее собой 2-гидроксиэтилN,N,N',N'-тетракис(2 хлорэтил)фосфородиамидат. 11. Соединение по п.2 или 3, где Q обозначает NH. 12. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-11. 13. Фармацевтическая композиция по п.12, предназначенная для лечения опухолей, в частности рака, у млекопитающего. 14. Применение соединений по любому из пп.1-11 для получения лекарственного средства для лечения опухолей, в частности рака, у млекопитающего. 15. Способ лечения опухолей, в частности рака, у млекопитающего, предусматривающий введение соединения по любому из пп.1-11. 16. Способ получения соединения формулы I где X, Q и R имеют указанные в п.1 значения, предусматривающий взаимодействие соединения формулы (2) 17. Способ получения соединения формулы I где X, Q и R имеют указанные в п.1 значения, предусматривающий получение заместителей в соединении формулы I хорошо известным методом. 18. Способ получения соединения формулы I где X, Q и R имеют указанные в п.1 значения, предусматривающий превращение соединения формулы I,где R обозначает водород и Q обозначает кислород, в соединение формулы I, где R-Q вместе обозначают сложноэфирную группу. 19. Способ получения соединения формулы I где X, Q и R имеют указанные в п.1 значения, предусматривающий взаимодействие соединения формулыI в форме свободного основания с кислотой с образованием фармацевтически приемлемой кислотноаддитивной соли. 20. Способ получения соединения формулы I где X, Q и R имеет указанные в п.1 значения, предусматривающий взаимодействие кислотно-аддитивной соли соединения формулы I с основанием с образованием соответствующего свободного основания. 21. Способ получения соединения формулы I где X, Q и R имеет указанные в п.1 значения, предусматривающий превращение соли соединения формулы I в другую фармацевтически приемлемую соль соединения формулы I. 22. Способ получения соединения формулы I где X, Q и R имеет указанные в п.1 значения, предусматривающий разделение рацемической смеси, содержащей любые пропорции стереоизомеров соединения формулы I, для получения требуемого стереоизомера указанного соединения.
МПК / Метки
МПК: A61K 31/664, A61P 35/04, C07F 9/24
Метки: противоопухолевых, агентов, качестве, бис(n,n'-бис(2-галоэтил)амино)фосфороамидаты
Код ссылки
<a href="https://eas.patents.su/15-6852-bisnn-bis2-galoetilaminofosforoamidaty-v-kachestve-protivoopuholevyh-agentov.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Бис(n,n’-бис(2-галоэтил)амино)фосфороамидаты в качестве противоопухолевых агентов</a>
Предыдущий патент: Кремнийалюмофосфатное молекулярное сито
Следующий патент: Мускариновые агонисты
Случайный патент: Гидравлическая машина, в частности гидравлический двигатель с чередующимся движением