Реконструированные поверхностно-активные вещества, имеющие улучшенные свойства

Изобретение относится к реконструированному поверхностно-активному веществу, содержащему липидный носитель, полипептидный аналог природного поверхностно-активного белка SPC и полипептид, содержащий последовательность повторяющихся единиц, состоящих из ряда гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одного основного аминокислотного остатка. Изобретение также относится к содержащим его фармацевтическим композициям и его применению для профилактики и/или лечения RDS (респираторного дистресссидрома) и других респираторных расстройств. 017697 Данное изобретение относится к реконструированному поверхностно-активному веществу, содержащему липидный носитель и комбинацию конкретных полипептидных аналогов природного поверхностно-активного белка SP-C с полипептидами, содержащими последовательность повторяющихся единиц,состоящих из ряда гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одного основного аминокислотного остатка. Изобретение также относится к соответствующим фармацевтическим композициям и их применению для профилактики и/или лечения RDS и других респираторных расстройств. Предшествующий уровень техники Человеческое легкое состоит из большого числа маленьких воздушных мешочков, называемых альвеолами, в которых газы обмениваются между кровью и воздушными пространствами в легких. У здоровых индивидуумов этот обмен опосредуется присутствием белоксодержащего поверхностно-активного комплекса, который предохраняет легкие от коллапса в конце выдоха. Поверхностно-активный комплекс легких состоит, главным образом, из липида и содержит незначительные количества различных белков. Отсутствие достаточных уровней этого комплекса приводит к дисфункции легкого. Этот синдром называется респираторным дистресс-синдромом (RDS от англ. Respiratory Distress Syndrome) и обычно поражает недоношенных младенцев. Указанный синдром эффективно лечат препаратами модифицированных природных поверхностноактивных веществ, экстрагированными из легких животных. Имеющиеся в продаже препараты модифицированных поверхностно-активных веществ, напримерCurosurf, получены из легкого свиньи, Infasurf экстрагирован из легочного лаважа теленка и Survanta представляет собой химически модифицированный натуральный экстракт легкого крупного рогатого скота. Основными компонентами этих препаратов поверхностно-активных веществ являются фосфолипиды, такие как 1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-фосфохолин, широко известный как дипалмитоилфосфатидилхолин (DPPC), фосфотидилглицерин (PG) и поверхностно-активные гидрофобные белки В и С (SP-B и SP-C). Вследствие недостатков препаратов поверхностно-активных веществ из животных тканей, таких как сложные процессы производства и стерилизации и возможная индукция иммунных реакций, были разработаны синтетические поверхностно-активные вещества, имитирующие композицию модифицированных природных поверхностно-активных веществ. Указанные синтетические поверхностно-активные вещества известны как реконструированные поверхностно-активные вещества. Однако оказалось, что разработка клинически активных реконструированных поверхностноактивных веществ является сложной, поскольку природные гидрофобные белки слишком велики для синтеза, имеют сложную структуру и нестабильны в чистой форме. С целью замены указанных природных гидрофобных белков некоторые синтетические полипептиды, частично соответствующие их последовательностям, и их аналоги были предложены в предшествующем уровне техники и раскрыты, например, в WO 89/06657, WO 92/22315, WO 95/32992, US 6660833, ЕР 413957, WO 91/18015 и WO 00/47623. Однако согласно имеющейся литературе в исследованиях на животных обработка реконструированными поверхностно-активными веществами дает в результате недостаточные объемы газа в легких и степень раскрытия альвеол в конце выдоха и требуется вентиляция с положительным давлением в конце выдоха (PEEP) с целью достижения активности in vivo, сравнимой с той, которая достигается с помощью модифицированных природных поверхностно-активных веществ (Johansson J. et al. J. Appl Physiol. 2003,95, 2055-2063; Davis A.J. et al. Am J. Respir. Crit Care Med. 1998; 157, 553-559). Имеющиеся в продаже препараты реконструированных поверхностно-активных веществ действительно не способны образовывать стабильную фосфолипидную пленку в альвеолах в конце выдоха. Поэтому до сих пор существует неудовлетворенная потребность в реконструированном поверхностно-активном веществе с улучшенными свойствами в отношении растяжимости легкого. В частности, существует потребность в препарате реконструированного поверхностно-активного вещества, который способен обеспечивать альвеолярную стабильность и таким образом поддерживать альвеолярную стабильность в конце выдоха без необходимости вентиляции с PEEP. В настоящее время было обнаружено и это является предметом настоящего изобретения, что конкретные полипептидные аналоги природного белка SP-C предпочтительно могут быть объединены с конкретными полипептидами, содержащими последовательность с изменяющимся числом гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одним основным аминокислотным остатком, с целью создания препарата реконструированного поверхностно-активного вещества с улучшенными свойствами в отношении растяжимости легкого и, в частности, в отношении способности эффективно поддерживать раскрытое состояние альвеол в конце выдоха без потребности в вентиляции с PEEP. В модели RDS, в которой недоношенных новорожденных обрабатывали экзогенными препаратами поверхностно-активных веществ без применения PEEP, комбинация указанных полипептидов влияет на объемы газа в легких, которые являются показателем проходимости альвеол в конце выдоха.-1 017697 Краткое изложение сущности изобретения Настоящее изобретение относится к реконструированному поверхностно-активному веществу, содержащему липидный носитель и комбинацию конкретных полипептидных аналогов природного поверхностно-активного белка SP-C с полипептидами, содержащими последовательность повторяющихся единиц, состоящих из ряда гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8, предпочтительно от 4 до 5, и одного основного аминокислотного остатка. В частности, изобретение относится к реконструированному поверхностно-активному веществу,содержащему: а) липидный носитель; б) полипептид из по меньшей мере 20 аминокислотных остатков и не более чем 40 аминокислотных остатков, имеющих последовательность, представленную общей формулой: где X представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из I, L и nL; В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из K,R, H, W, F, Y и Orn;S возможно замещен ацильными группами, содержащими 12-22 атомов углерода, предпочтительно 16 атомов углерода, соединенными с боковой цепью через сложноэфирную связь;представляет собой аминокислотный остаток, выбранный из группы, состоящей из М или М,окисленного по атому серы, I, L и nL; а представляет собой целое число, имеющее значение от 1 до 8;b представляет собой целое число, имеющее значение от 1 до 19; е, f, g и р представляют собой целые числа, имеющие значение 0 или 1; при условии, что XaBXb представляет собой последовательность, имеющую максимум 22 аминокислоты; в) полипептид из по меньшей мере 12 аминокислотных остатков и не более чем 60 аминокислотных остатков, содержащий последовательность, представленную общей формулой (II) где U представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из L, I, nL, V, A, M и F; В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из K,R, Н и Orn; а представляет собой целое число, имеющее значение от 3 до 8, предпочтительно от 4 до 5; х представляет собой целое число, имеющее значение от 2 до 6, предпочтительно от 3 до 4. Изобретение также включает фармацевтически приемлемые соли указанных полипептидов и их производные с защищенными N- и С-концами, например, посредством ацетилирования и амидирования. В изобретении также предложены фармацевтические композиции, содержащие реконструированное поверхностно-активное вещество по изобретению. Кроме того, изобретение относится к применению описанного выше реконструированного поверхностно-активного вещества в качестве лекарственного средства. В соответствии с другим аспектом настоящее изобретение относится к применению описанного выше реконструированного поверхностно-активного вещества для профилактики и/или для лечения респираторного дистресс-синдрома у недоношенных детей, заболеваний, связанных с дефицитом или дисфункцией поверхностно-активных веществ, и других респираторных расстройств. Еще один аспект настоящего изобретения относится к способу предупреждения и/или лечения респираторного дистресс-синдрома (RDS) у недоношенных детей, других заболеваний, связанных с дефицитом или дисфункцией поверхностно-активных веществ, и других респираторных расстройств, включающему введение эффективного количества описанного выше реконструированного поверхностноактивного вещества. Описание графических материалов На фиг. 1 показана аминокислотная последовательность человеческого белка SP-C; Cys остатки пальмитоилированы в нативном SP-C; на фиг. 2 представлено изображение витка спирали полипептида KL4; основные аминокислотные остатки обведены кружками; на фиг. 3 представлены данные в виде объемов газа в легких (мл/кг); на фиг. 4 представлены данные в виде дыхательных объемов (мл/кг) в зависимости от времени/давления. Определения Респираторную функцию после обработки in vivo препаратами экзогенных поверхностно-активных веществ определяют путем измерения двух параметров: 1) дыхательного объема, который является показателем растяжимости легкого; и 2) объема газа в легких, который является показателем расширения воздушного пространства или-2 017697 раскрытого состояния альвеол в конце выдоха и вследствие этого способности образовывать стабильную фосфолипидную пленку в альвеолах в конце выдоха. Используемое в данной заявке эффективное количество композиции для лечения конкретного заболевания представляет собой количество, достаточное для облегчения или, в некоторой степени, уменьшения симптомов, ассоциированных с заболеванием. Указанное количество будет зависеть от типа и тяжести заболевания и состояния (масса, пол, возраст) пациента. Используемый в данной заявке термин "реконструированное поверхностно-активное вещество" означает липидный носитель, к которому были добавлены полипептидные аналоги поверхностно-активных белков, полученные с использованием рекомбинантной технологии или способов синтеза. Используемый в данной заявке термин "липидный носитель" означает смесь фосфолипидов и возможно другие липидные компоненты, например нейтральные липиды, такие как триацилглицерины, свободные жирные кислоты и/или холестерин. Используемый в данной заявке термин "полипептидные аналоги природного поверхностноактивного белка SP-C" включает полипептиды, имеющие аминокислотную последовательность, в которой по сравнению с природными белками одна или более аминокислот отсутствует(ют) или заменена(ы) другими аминокислотами, при условии, что полипептиды в смеси с липидным носителем, демонстрируют активность легочного поверхностно-активного вещества. Аминокислотные последовательности представлены в соответствии с трехбуквенным кодом аминокислотой, которая несет свободную аминогруппу на левом конце (аминоконец), и аминокислотой, которая несет свободную карбоксильную группу на правом конце (карбоксиконец). Все аминокислотные остатки, идентифицированные в данной заявке, имеют природную Lконфигурацию, и последовательности, идентифицированные в данной заявке, представлены в соответствии со стандартными аббревиатурами аминокислотных остатков, как показано в последующей "Таблице соответствия". Таблица соответствия Подробное описание изобретения Настоящее изобретение относится к реконструированному поверхностно-активному веществу, содержащему липидный носитель и комбинацию полипептидов общей формулы (I) с полипептидами, содержащими последовательность повторяющихся единиц, состоящих из ряда гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одного основного аминокислотного остатка. Авторы изобретения фактически обнаружили, что в модели RDS, в которой недоношенного новорожденного обрабатывали препаратами экзогенных поверхностно-активных веществ без примененияPEEP, полипептиды общей формулы (I) в комбинации с полипептидами общей формулы (II) предпочтительно действуют на объемы газа в легких, которые являются показателем раскрытого состояния альвеол-3 017697 в конце выдоха. Оказалось, что заявленный препарат реконструированного поверхностно-активного вещества улучшает респираторную функцию, выраженную дыхательными объемами, размеров степени, сравнимой с достигнутой после введения модифицированного природного поверхностно-активного вещества. Предпочтительно аналог природного белка SP-C представляет собой полипептид из по меньшей мере 20 аминокислотных остатков и не более чем 40 аминокислотных остатков, имеющий последовательность, представленную общей формулой (I) где X представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из I, L и nL; В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из K,R, H, W, F, Y и Orn;S возможно замещен ацильными группами, содержащими 12-22 атомов углерода, предпочтительно 16 атомов углерода, соединенными с боковой цепью через сложноэфирную связь;представляет собой аминокислотный остаток, выбранный из группы, состоящей из М или М,окисленного по атому серы, I, L и nL; а представляет собой целое число, имеющее значение от 1 до 8;b представляет собой целое число, имеющее значение от 1 до 19; е, f, g и р представляют собой целые числа, имеющие значение 0 или 1; при условии, что XaBXb представляет собой последовательность, имеющую максимум 22 аминокислоты, предпочтительно содержащую от 10 до 22 аминокислот. Предпочтительно полипептид общей формулы (I) состоит из по меньшей мере 30 и не более чем 35 аминокислот, более предпочтительно не более чем 33 аминокислот. В частности, воплощения полипептидов общей формулы (I) состоят из 30, или 33, или 35 аминокислот. Предпочтительно полипептидный аналог белка SP-C представлен общей формулой (Ia), в которой е и n равны 0 и g равно 1. где X, В иявляются такими, как определено выше; а равно 1;f и р равны 0 или 1. Более предпочтительно, когда полипептидный аналог белка SP-C представлен общей формулой(Ib), в которой f равно 1 где X, В, , а и b являются такими, как определено выше; р равно 0 или 1. Еще более предпочтительно, когда полипептидный аналог белка SP-C представлен общей формулой (Ic) гдеявляется таким, как определено выше; р равно 0 или 1. Примеры полипептидов формулы (Ic) представлены ниже: Полипептид (Id) известен в предшествующем уровне техники как SP-C33. Наиболее предпочтительно, когда аналог SP-C представляет собой полипептид, выбранный из группы полипептидов, имеющих формулы (Ie)-(Ih). Наиболее предпочтительный полипептид имеет формулу (If). Предпочтительно полилептид, содержащий последовательность с изменяющимся числом гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одним основным аминокислотным остатком,состоит из по меньшей мере 12 аминокислотных остатков и не более 60 аминокислотных остатков, предпочтительно из не менее 20 и не более 35, и представлен общей формулой (II) где U представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из L, I, nL, V, A, M и F; В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из K,-4 017697R, Н и Orn; а представляет собой целое число, имеющее значение от 4 до 5, предпочтительно 4; х представляет собой целое число, имеющее значение от 3 до 4, предпочтительно 4. Группа предпочтительных полипептидов включает или состоит из последовательности, где U представляет собой L или I, В представляет собой K или R, а равно 4 или 5, предпочтительно 4, и х равно 3 или 4, предпочтительно 4. Особенно предпочтительным полипептидом является полипептид, который известен в уровне техники как KL4 и который имеет последовательность, представленную ниже Другим примером особенно предпочтительного полипептида является полипептид, имеющий последовательность, представленную ниже, и названный в данной заявке KL5 Фактически обнаружили, что KL5 демонстрирует распределение заряженных остатков вокруг целого витка спирали пептида, аналогичное таковому для KL4. Другими примерами предпочтительных полипептидов являются полипептиды, имеющие последовательность (III) Примером полипептида общей формулы (IIIa) является полипептид, который известен в уровне техники как SP-C (LKS) Полипептиды общих формул (I) и (II) могут быть получены любым известным методом, например,описанным в J.M. Steward и J.D. Young, "Solid Phase Peptide Synthesis", W.H. Freeman Co., San Francisco,1969 и J. Meienhofer, Hormonal Proteins and Peptides", vol. 2, p. 46, Academic Press (New York), 1983, для твердофазного синтеза пептидов, и Е. Schroder and K. Kubke, "The Peptides", vol. 1, Academic Press (NewYork), 1965, для классического синтеза в растворе. Краткое изложение методов синтеза полипептидов можно найти в J. Stuart и J.D. Young, Solid Phase Peptide Synthesis, Pierce Chemical Company, Rockford, IL,3d Ed., Neurath, H. et al., Eds., p. 104-237, Academic Press, New York, NY (1976). Соответствующие защитные группы для применения в таких синтезах можно найти в вышеупомянутых руководствах, а также в J.F.W. McOmie, Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press, NewYork, NY (1973). В целом, эти способы включают последовательное добавление одного или более аминокислотных остатков или соответствующим образом защищенных аминокислотных остатков к растущей пептидной цепи. Как правило, либо амино-, либо карбоксильная группа первого аминокислотного остатка защищена подходящей, избирательно удаляемой защитной группой. Используя твердофазный синтез пептидов в качестве примера, защищенную или дериватизированную аминокислоту присоединяют к инертной твердой подложке через ее незащищенную карбоксильную или аминогруппу. Защитные группы для амино- или карбоксильной группы затем избирательно удаляют и добавляют следующую аминокислоту в последовательности, имеющую комплементарную (амино- или карбоксильную) группу, соответствующим образом защищенную, и подвергают взаимодействию в условиях, подходящих для образования амидной связи с остатком, уже присоединенным к твердой подложке. Защитную группу для амино- или карбоксильной группы затем удаляют из вновь добавленного аминокислотного остатка и затем добавляют следующую аминокислоту (соответствующим образом защищенную) и т.д. После того как все желаемые аминокислоты были соединены в соответствующей последовательности, оставшиеся защитные группы для концевых и боковых групп (и твердую подложку) удаляют последовательно или одновременно с получением конечного полипептида. В частности, полипептиды общих формул (I) и (II) могут быть получены в соответствии со способами, раскрытыми в WO 00/47623, в то время как полипептиды, состоящие из последовательности общей формулы (II), могут быть получены в соответствии со способами, описанными в WO 92/22315. Реконструированное поверхностно-активное вещество по изобретению может быть получено смешиванием раствора или суспензии полипептидов общих формул (I) и (II) и липидов и последующей сушкой смеси, в других случаях они могут быть получены лиофилизацией или сушкой распылением. Предпочтительно полипептиды общей формулы (I) и полипептиды общей формулы (II) присутствуют в реконструированных поверхностно-активных веществах по изобретению в фиксированном количестве и количественном соотношении в виде фиксированной комбинации. Соотношение полипептидов общих формул (I) и (II) к реконструированному поверхностноактивному веществу может варьировать. Предпочтительно каждый полипептид может присутствовать в количестве от 0,5 до 10% на основании массы поверхностно-активного вещества (мас./мас.), предпочтительно от 1 до 5%, наиболее предпочтительно от 1 до 3%. Предпочтительно липидный носитель включает фосфолипиды, которые содержатся в препаратах природного легочного поверхностно-активного вещества, например фосфатидилхолины (PC), такие как-5 017697 дипальмитоилфосфатидилхолин (DPPC) и пальмитоилолеоилфосфатидилхолин (РОРС), и фосфатидилглицерины (PG), такие как пальмитоилолеоилфосфатидилглицерин (POPG) и дипальмитоилфосфатидилглицерин (DPPG). Другие фосфолипиды, которые могут быть предпочтительно использованы, представляют собой фосфатидилинозитолы (PI), фосфатидилэтаноламины (РЕ), фосфатидилсерины и сфингомиелины (SM). В конкретном воплощении липидный носитель может содержать дополнительные компоненты, например нейтральные липиды, такие как триацилглицерины, свободные жирные кислоты и/или холестерин. Предпочтительно реконструированное поверхностно-активное вещество по изобретению содержит от 90 до 99 мас.% липидного носителя, предпочтительно от 92 до 98 мас.%, более предпочтительно от 94 до 96 мас.% и от 1 до 10 мас.% суммы обоих пептидов, предпочтительно от 2 до 8 мас.%, более предпочтительно от 4 до 6 мас.%. В конкретном воплощении изобретения реконструированное поверхностно-активное вещество содержит 96 мас.% липидного носителя, 2 мас.% полипептида общей формулы (I) и 2 мас.% полипептида общей формулы (II). Фосфолипиды, входящие в состав липидного носителя, представляют собой предпочтительно смеси, состоящие из DPPC и пальмитоилолеоилфосфолипида, выбранного из POPG или его смеси с РОРС в массовых соотношениях, варьирующих от 95:5 до 50:50, предпочтительно от 80:20 до 60:40. Массовое соотношение DPPC и POPG варьирует предпочтительно от 75:25 до 65:35 и более предпочтительно составляет 68:31. В случае смесей DPPC:POPG:POPC фосфолипиды предпочтительно используют в массовых соотношениях 60:20:20 или 68:15:16. В предпочтительном воплощении реконструированное поверхностно-активное вещество содержит от 1 до 5 мас.% полипептида общей формулы (Ia), от 1 до 5 мас.% полипептида формулы (II) и смесьDPPC и POPG в массовом соотношении 68:31. В еще более предпочтительном воплощении реконструированное поверхностно-активное вещество содержит от 1,5 до 3 мас.% полипептида, выбранного из группы, состоящей из (Ie)-(Ih), более предпочтительно полипептида (If), от 1,5 до 3 мас.% пептида общей формулы (II) и смесь DPPC и POPG в массовом соотношении 68:31. Введение реконструированного поверхностно-активного вещества по изобретению осуществляют стандартно, предпочтительно посредством интратрахеальной инстилляции (инфузия или болюс) или распыления. Эффективная доза реконструированного поверхностно-активного вещества варьирует в зависимости от многих факторов, включая способы введения, характер и тяжесть заболевания, и от того, является ли лечение профилактическим или терапевтическим. Как правило, доза составляет от 0,01 мг до 10 г на 1 кг массы тела, предпочтительно от 10 до 500 мг на 1 кг, более предпочтительно от 40 до 200 мг на 1 кг. Специалист может легко определить оптимальную дозу и частоту ее введения. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим реконструированное поверхностно-активное вещество по изобретению. Указанные композиции предпочтительно вводят в форме раствора, дисперсии, суспензии или сухого порошка. Предпочтительно указанные композиции содержат реконструированное поверхностно-активное вещество, растворенное или суспендированное в подходящем растворителе или среде для ресуспендирования. Предпочтительно указанные фармацевтические композиции поставляют в виде суспензии в забуференном физиологическом растворе в одноразовых стеклянных флаконах. Предпочтительно концентрация реконструированного поверхностно-активного вещества (выраженная в виде содержания фосфолипида) варьирует от примерно 2 до примерно 160 мг поверхностно-активного вещества на 1 мл, предпочтительно от 10 до 100 мг/мл, более предпочтительно от 20 до 80 мг/мл. Для уменьшения вязкости указанные композиции могут дополнительно содержать электролиты, такие как соли кальция, магния и/или натрия (например, хлорид кальция или хлорид натрия). Фармацевтические композиции по изобретению применимы для профилактики и/или лечения респираторного дистресс-синдрома (RDS) у недоношенных детей или других заболеваний, связанных с дефицитом или дисфункцией поверхностно-активных веществ, включающих острое легочное повреждение(ALI), RDS у взрослых (ARDS), синдром мекониевой аспирации (MAS) и бронхолегочную дисплазию(BPD). Они также могут быть полезны для профилактики и/или лечения других респираторных расстройств, таких как пневмония, бронхит, COPD (хроническая обструктивная болезнь легких), астма и кистозный фиброз, а также для лечения серозного среднего отита (экссудативного отита). Следующий пример иллюстрирует изобретение более подробно. Пример Эксперименты in vivo с реконструированным поверхностно-активным веществом на основе полипептидов SP-C33 и KL4. Препараты поверхностно-активного вещества испытывали на преждевременно рожденных крольчатах, полученных путем удаления матки на сроке беременности 27 суток. Эксперименты выполняли без-6 017697 применения положительного давления в конце выдоха (PEEP). В качестве аналога SP-C использовали полипептид, известный как SP-С 33, который получен, как описано в WO 00/47623. В качестве аналога SP-B использовали полипептид, известный как KL4, который получен, как описано в WO 92/22315. Животных обрабатывали при рождении 200 мг/кг (80 мг/мл) препаратами реконструированного поверхностно-активного вещества, содержащими 2% SP-С 33 или 2% SP-C33+2% KL4 в комбинации со смесью фосфолипидов, состоящей из DPPC:POPG в соотношении 68:31 мас./мас. Животные, обработанные Curosurf (80 мг/мл), служили в качестве положительных контролей, а необработанные детеныши того же помета в качестве отрицательных контролей. Недоношенных новорожденных крольчат подвергали вентиляции наряду со стандартизированной последовательностью максимальных давлений при инсуффляции. Для того чтобы открыть легкие, давление сначала устанавливали на уровне 35 см Н 2 О в течение 1 мин. После этого приема стимуляции давление понижали до 25 см H2O в течение 15 мин и далее до 20 и 15 см Н 2 О. В конце давление снова повышали до 25 см H2O в течение 5 мин, после чего легкие вентилировали в течение дополнительных 5 мин азотом и затем иссекали для измерений объема газа. Измеряли как объемы газа в легких, так и дыхательные объемы, выраженные в виде мл/кг, и результаты, представленные в виде средних значений, показаны на фиг. 4 и 5 соответственно. На фиг. 3 показано, что животные, обработанные препаратом реконструированного поверхностноактивного вещества, содержащим 2% мас./мас. SP-C33 в комбинации с 2% KL4, имели более высокие объемы газа в легких, чем животные, которые получали 2% мас./мас. SP-C33, что указывает на то, что добавление 2% мас./мас. KL4 к поверхностно-активному веществу SP-C33 привело к увеличению объемов газа в легких. Указанный результат демонстрирует, что реконструированное поверхностно-активное вещество по изобретению обеспечивает лучшую стабилизацию фосфолипидной пленки в альвеолах в конце выдоха,чем препарат реконструированного поверхностно-активного вещества, содержащий только аналог белкаSP-C. Более того, на фиг. 4 показано, что заявленный препарат реконструированного поверхностноактивного вещества, как оказалось, значительно улучшает респираторную функцию, выраженную дыхательными объемами. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Реконструированное поверхностно-активное вещество, содержащее липидный носитель и комбинацию аналога природного поверхностно-активного белка SP-C с полипептидом, содержащим последовательность повторяющихся единиц, состоящих из ряда гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одного основного аминокислотного остатка, где указанный аналог белка SP-C представлен общей формулой (Ia) где X представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из I, L и nL; В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из K,R, H, W, F, Y и Orn;S возможно замещен ацильными группами, содержащими 12-22 атомов углерода, соединенными с боковой цепью через сложноэфирную связь;представляет собой аминокислотный остаток, выбранный из группы, состоящей из М или М,окисленного по атому серы, I, L и nL; а равно 1;f и р равны 0 или 1; где указанный полипептид, содержащий последовательность повторяющихся единиц, имеет по меньшей мере 12 аминокислотных остатков и не более 60 аминокислотных остатков и представлен общей формулой (II) где U представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из L, I, nL, V, A, M и F; В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из K,R, Н и Orn; а представляет собой целое число, имеющее значение от 4 до 5; х представляет собой целое число, имеющее значение от 3 до 4. 2. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.1, где ацильные группы в качестве возможных заместителей S содержат 16 атомов углерода.-7 017697 3. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.1 или 2, где аналог природного поверхностно-активного белка SP-C представлен общей формулой (Ib) где р равно 0 или 1. 4. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.1 или 2, где аналог природного поверхностно-активного белка SP-C представлен общей формулой (Ic) где p равно 0 или 1. 5. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.4, где аналог природного поверхностно-активного белка SP-C выбран из группы, состоящей из 6. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.1 или 2, где полипептид общей формулы (II) содержит или состоит из последовательности, представленной общей формулой (III) где U представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из L и I; В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из K и R; х представляет собой целое число, имеющее значение 3 или 4. 7. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.6, где полипептид имеет формулу 8. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.1 или 2, где аналог природного поверхностно активного белка SP-C имеет формулу и полипептид, содержащий последовательность повторяющихся единиц, имеет формулу 9. Реконструированное поверхностно-активное вещество по любому из пп.1-8, где липидный носитель содержит смесь фосфолипидов. 10. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.9, где смесь фосфолипидов состоит из дипальмитоилфосфатидилхолина (DPPC) и пальмитоилолеоилфосфолипида, выбранного из пальмитоилолеоилфосфатидилглицерина (POPG) или их смеси с пальмитоилолеоилфосфатидилхолином (РОРС) в соотношениях по массе, варьирующих от 95:5 до 50:50. 11. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.10, где фосфолипидная смесь состоит из DPPC и POPG в соотношении по массе 68:31. 12. Фармацевтическая композиция для профилактики и/или лечения респираторного дистресссиндрома (RDS) у недоношенных детей или другого заболевания, связанного с дефицитом или дисфункцией поверхностно-активных веществ, выбранного из группы, состоящей из острого повреждения легких(ALI), RDS у взрослых (ARDS), синдрома мекониевой аспирации (MAS) и бронхолегочной дисплазии(BPD), содержащая реконструированное поверхностно-активное вещество по любому из пп.1-11. 13. Фармацевтическая композиция по п.12, содержащая реконструированное поверхностноактивное вещество в концентрации от 2 до 160 мг/мл. 14. Фармацевтическая композиция по п.13, где концентрация реконструированного поверхностноактивного вещества составляет от 20 до 80 мг/мл. 15. Препарат, содержащий водную суспензию реконструированного поверхностно-активного вещества по любому из пп.1-11. 16. Применение реконструированного поверхностно-активного вещества по любому из пп.1-11 в качестве лекарственного средства для профилактики и/или лечения респираторного дистресс-синдрома(RDS) у недоношенных детей или другого заболевания, связанного с дефицитом или дисфункцией поверхностно-активных веществ, выбранного из группы, состоящей из острого повреждения легких (ALI),RDS у взрослых (ARDS), синдрома мекониевой аспирации (MAS) и бронхолегочной дисплазии (BPD). 17. Применение реконструированного поверхностно-активного вещества по любому из пп.1-11 для профилактики и/или лечения респираторного дистресс-синдрома (RDS) у недоношенных детей. 18. Применение реконструированного поверхностно-активного вещества по любому из пп.1-11 для профилактики и/или лечения заболевания, связанного с дефицитом или дисфункцией поверхностноактивных веществ, выбранного из группы, состоящей из острого повреждения легких (ALI), RDS у взрослых (ARDS), синдрома мекониевой аспирации (MAS) и бронхолегочной дисплазии (BPD).