Фторзамещенные (3r,4r,5s)-5-гуанидино-4-ациламино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновые кислоты, их эфиры и способ применения

Изобретение относится к новым ингибиторам активности нейраминидазы и их использованию для профилактики и лечения инфекции гриппа, а именно к фторзамещенным 4-ациламино-5 гуанидино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновым кислотам и их эфирам общей формулы 1, и их фармацевтически приемлемым солям и/или гидратам:(71)(72)(73) Заявитель, изобретатель и патентовладелец: ИВАЩЕНКО АЛЕКСАНДР ВАСИЛЬЕВИЧ (RU) Область техники Данное изобретение относится к новым соединениям - фторзамещенным (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4 ациламино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновым кислотам и их эфирам - ингибиторам активности нейраминидазы. Предшествующий уровень техники Многие микроорганизмы, содержащие нейраминидазу, патогенны по отношению к человеку и животным, таким как птицы, лошади, свиньи, тюлени. Такие патогенные микроорганизмы включают вирус гриппа. Нейраминидаза связана с патогенностью вируса гриппа. В этой связи новые фторзамещенные (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-ациламино-3-(пентан-3 илокси)циклогексен-1-карбоновые кислоты и их эфиры представляют интерес в качестве лекарственных субстанций для создания новых препаратов, предназначенных для профилактики и лечения гриппа. Известны ингибиторы нейраминидазы - (3R,4R,5S)-5-амино-3-алкилокси-4-ацетиламиноциклогексен-1 карбоновые кислоты А 1, причем наиболее активной из них является (3R,4R,5S)-5-амино-4-ацетиламино 3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновая кислота А 2, которая, как показывают рентгеноструктурные данные для комплекса кислоты с нейраминидазой вируса гриппа, эффективно связывается с активным центром фермента (Oseltamivir Carboxylate) [С.U. Kim, W. Lew, M.A. Williams, et al., J. Am. Chem.Soc. 1997, 119, 681-690]. Этиловый эфир озельтамивир карбоксилата A3, известный как озельтамивир фосфат или тамифлю(Oseltamivir Phosphate, Tamiflu) [J.С. Rohloff, K.M. Kent, M.J. Postich, et al., J. Org. Chem. 1998, 63, 4545],является лекарственным предшественником озельтамивир карбоксилата А 2. Известна также (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-трифторацетиламино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1 карбоновая кислота А 4, обладающая активностью по отношению к нейраминидазе H5N1 вируса гриппаStructure-Activity Relationship (FB-QSAR) for Fragment-Based Drug Design. J. Comput. Chem. 2008, 30(2),295-304]. Известна 5-(ацетиламино)-4-[(аминоиминометил)амино]-2,6-ангидро-3,4,5-тридеокси-D-глицеро-Dгалактонон-2-эноновая кислота (zanamivir), обладающая активностью по отношению к нейраминидазе вирусов гриппа А и В, а также вируса гриппа H1N1 [J.M. Woods, R.С. Bethell, J.A. Coates, et al.,4-Guanidino-2,4-dideoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic acid is a highly effective inhibitor both of the sialidase (neuraminidase) and of growth of a wide range of influenza A and В viruses in vitro. Antimicrob Agents Поиск высокоэффективных противогриппозных лекарственных препаратов, в том числе обладающих повышенной активностью по отношению к резистентным вирусам гриппа, по-прежнему является одним из основных направлений создания новых фармакологических средств для лечения гриппа. В этой связи актуальным является разработка новых противогриппозных субстанций, фармацевтических композиций и лекарственных препаратов, а также способов их получения и применения. Раскрытие изобретения Ниже приведены определения терминов, которые использованы в описании этого изобретения."Алкенил" означает алифатическую линейную или разветвленную углеводородную группу, содержащую от 2 до 7 атомов углерода и включающую по крайней мере одну углерод-углеродную двойную связь. Разветвленная группа означает, что к линейной алкенильной цепи присоединены один или несколько низших алкильных групп, таких как метил, этил или пропил. Алкильная группа может иметь один или несколько заместителей, например, таких как галоген, алкенилокси, циклоалкил, циано, гидро-1 024765 кси, алкокси, карбокси, алкинилокси, аралкокси, арилокси, арилоксикарбонил, алкилтио, гетероаралкилокси, гетероциклил, гетероциклилалкилокси, алкоксикарбонил, аралкоксикарбонил, гетроаралкилоксикарбонил или RkaRk+1aN-, RkaRk+1aNC(=O)-, RkaRk+1aNSO2-, где Rka и Rk+1a независимо друг от друга представляют собой "заместители аминогруппы", значение которых определено в данном разделе, например атом водорода, алкил, арил, аралкил, гетероаралкил, гетероциклил или гетероарил, или Rka и Rk+1a вместе с атомом N, с которым они связаны, образуют через Rka и Rk+1a 4-7-членный гетероциклил или гетероцикленил. Предпочтительными алкильными группами являются метил, трифторметил, циклопропилметил, циклопентилметил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, н-пентил, 3-пентил, метоксиэтил, карбоксиметил, метоксикарбнилметил, бензилоксикарбонилметил и пиридилметилоксикарбнилметил. Предпочтительными алкенильными группами являются этенил, пропенил, н-бутенил, изобутенил, 3 метилбут-2-енил, н-пентенил, и циклогексилбутенил."Алкил" означает алифатическую углеводородную линейную или разветвленную группу с 1-12 атомами углерода в цепи. Разветвленная группа означает, что алкильная цепь имеет один или несколько"низших алкильных" заместителей. Алкил может иметь один или несколько одинаковых или различных заместителей ("алкильных заместителей"), включая галоген, алкенилокси, циклоалкил, арил, гетероарил,гетероциклил, ароил, циано, гидрокси, алкокси, карбокси, алкинилокси, аралкокси, арилокси, арилоксикарбнил, алкилтио, гетероарилтио, аралкилтио, арилсульфонил, алкилсульфонилгетероаралкилокси, аннелированный гетероарилциклоалкенил, аннелированный гетероарилциклоалкил, аннелированный гетероарилгетероцикленил, аннелированный гетероарилгетероциклил, аннелированный арилциклоалкенил,аннелированный арилциклоалкил, аннелированный арилгетероцикленил, аннелированный арилгетероциклил,алкоксикарбонил,аралкоксикарбонил,гетероаралкилоксикарбонил илиRk Rk+1 NC(=O)-, Rk Rk+1 NC(=S)-, Rk Rk+1 NSO2-, где Rk и Rk+1 независимо друг от друга представляют собой "заместители аминогруппы", значение которых определено в данном разделе, например водород,алкил, арил, аралкил, гетероаралкил, гетероциклил или гетероарил, или Rka и Rk+1a вместе с атомом N, с которым они связаны, образуют через Rka и Rk+1a 4-7-членный гетероциклил или гетероцикленил. Предпочтительными алкильными группами являются метил, трифторметил, циклопропилметил, циклопентилметил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, н-пентил, 3-пентил, метоксиэтил, карбоксиметил, метоксикарбонилметил, этоксикарбонилметил, бензилоксикарбонилметил метоксикарбонилметил и пиридилметилоксикарбнилметил. Предпочтительными "алкильными заместителями" являются циклоалкил, арил, гетероарил, гетероциклил, гидрокси, алкокси, алкоксикарбонил, аралкокси, арилокси, алкилтио, гетероарилтио, аралкилтио, алкилсульфонил, арилсульфонил, алкоксикарбонил, аралкоксикарбонил, гетероаралкилоксикарбонил или RkaRk+1aN-, RkaRk+1aNC(=O)-, аннелированный арилгетероцикленил, аннелированный арилгетероциклил."Алкинил" означает алифатическую линейную или разветвленную углеводородную группу, содержащую от 2 до 12 атомов углерода и включающую по крайней мере одну углерод-углеродную тройную связь. Разветвленная означает, что к линейной алкинильной цепи присоединены один или несколько низших алкильных групп, таких как метил, этил или пропил. Алкильная группа может иметь один или несколько заместителей, например, таких как галоген, алкенилокси, циклоалкил, циано, гидрокси, алкокси, алкинилокси, аралкокси, арилокси, арилоксикарбонил, алкилтио, гетероаралкилокси, гетероциклил,гетероциклилалкилокси, алкоксикарбонил, аралкоксикарбонил, гетероаралкилоксикарбонил илиRkaRk+1aN-, RkaRk+1aNC(=O)-, RkaRk+1aNSO2-, где Rka и Rk+1a независимо друг от друга представляют собой"заместители аминогруппы", значение которых определено в данном разделе, например атом водорода,алкил, арил, аралкил, гетероаралкил, гетероциклил или гетероарил, или Rka и Rk+1a вместе с атомом N, с которым они связаны, образуют через Rka и Rk+1a 4-7-членный гетероциклил или гетероцикленил. Предпочтительными алкильными группами являются метил, трифторметил, циклопропилметил, циклопентилметил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, н-пентил, 3-пентил, метоксиэтил, карбоксиметил, метоксикарбнилметил, бензилоксикарбонилметил и пиридилметилоксикарбнилметил. Предпочтительными алкинильными группами являются этинил, пропинил, н-бутинил, изобутинил, 3-метилбут-2 инил, н-пентинил, бута-1,3-диин и гекса-1,3,5-триин. "Гидрат" означает стехиометрическую или нестехиометрическую композицию соединения или его соли с водой."Лекарственное начало" (лекарственная субстанция лекарственное вещество, drag-substance) означает физиологически активное вещество синтетического или иного (биотехнологического, растительного, животного, микробного и пр.) происхождения, обладающее фармакологической активностью и являющееся активным началом фармацевтической композиции, используемой для производства и изготовления лекарственного препарата (средства)."Лекарственное средство (препарат)" - вещество (или смесь веществ в виде фармацевтической композиции) в виде таблеток капсул инъекций, мазей и др. готовых форм, предназначенное для восстановления, исправления или изменения физиологических функций у человека и животных, а также для лечения и профилактики болезней, диагностики, анестезии, контрацепции, косметологии и пр. Нейраминидаза (сиалидаза, ацилнейраминил гидролаза и EC 3.2.1.18) является обычным для животных и ряда микроорганизмов ферментом. Она представляет собой гликогидролазу, которая отщепляет альфа-кетосидикально связанные сиаловые кислоты от гликопротеинов, гликолипидов и олигосахаридов. Многие из микроорганизмов, содержащих нейраминидазу, патогенны по отношению к человеку и другим животным, включая птицу, лошадей, свиней и тюленей. Такие патогенные организмы включают вирус гриппа. Нейраминидаза связана с патогенностью вируса гриппа. Предположительно она содействует элюированию вновь синтезированных вирионов из инфицированных клеток и движению вируса (благодаря ее гидролазной активности) через слизь респираторного тракта."Фармацевтическая композиция" обозначает композицию, включающую в себя соединение формулы 1 и по крайней мере один из компонентов, выбранных из группы, состоящей из фармацевтически приемлемых и фармакологически совместимых наполнителей, растворителей, разбавителей, носителей,вспомогательных, распределяющих и воспринимающих средств, средств доставки, таких как консерванты, стабилизаторы, наполнители, измельчители, увлажнители, эмульгаторы, суспендирующие агенты,загустители, подсластители, отдушки, ароматизаторы, антибактериальные агенты, фунгициды, лубриканты, регуляторы пролонгированной доставки, выбор и соотношение которых зависят от природы и способа назначения и дозировки. Примерами суспендирующих агентов являются этоксилированный изостеариловый спирт, полиоксиэтилен, сорбитол и сорбитовый эфир, микрокристаллическая целлюлоза,метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант, а также смеси этих веществ. Защита от действия микроорганизмов может быть обеспечена с помощью разнообразных антибактериальных и противогрибковых агентов, например, таких как, парабены, хлорбутанол, сорбиновая кислота и подобные им соединения. Композиция может включать также изотонические агенты, например сахара, хлористый натрий и им подобные. Пролонгированное действие композиции может быть обеспечено с помощью агентов, замедляющих абсорбцию активного начала, например моностеарат алюминия и желатин. Примерами подходящих носителей, растворителей, разбавителей и средств доставки являются вода,этанол, полиспирты, а также их смеси, растительные масла (такие как оливковое масло) и инъекционные органические сложные эфиры (такие как этилолеат). Примерами наполнителей являются лактоза, молочный сахар, цитрат натрия, карбонат кальция, фосфат кальция и им подобные. Примерами измельчителей и распределяющих средств являются крахмал, альгиновая кислота и ее соли, силикаты. Примерами лубрикантов являются стеарат магния, лаурилсульфат натрия, тальк, а также полиэтиленгликоль с высоким молекулярным весом. Фармацевтическая композиция для перорального, сублингвального, трансдермального, внутримышечного, внутривенного, подкожного, местного или ректального введения активного начала, одного или в комбинации с другим активным началом, может быть введена животным и людям в стандартной форме введения, в виде смеси с традиционными фармацевтическими носителями. Пригодные стандартные формы введения включают пероральные формы, такие как таблетки, желатиновые капсулы, пилюли, порошки, гранулы, жевательные резинки и пероральные растворы или суспензии, сублингвальные и трансбуккальные формы введения, аэрозоли, имплантаты, местные, трансдермальные, подкожные, внутримышечные, внутривенные, интраназальные или внутриглазные формы введения и ректальные формы введения."Фармацевтически приемлемая соль" означает относительно нетоксичные органические и неорганические соли кислот и оснований, заявленных в настоящем изобретении. Эти соли могут быть получены in situ в процессе синтеза, выделения или очистки соединений или приготовлены специально. В частности, соли оснований могут быть получены специально, исходя из очищенного свободного основания заявленного соединения и подходящей органической или неорганической кислоты. Примерами полученных таким образом солей являются гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, бисульфаты, фосфаты,нитраты, ацетаты, оксалаты, валериаты, олеаты, пальмитаты, стеараты, лаураты, бораты, бензоаты, лактаты, тозилаты, цитраты, малеаты, фумараты, сукцинаты, тартраты, мезилаты, малонаты, салицилаты,пропионаты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, сульфаматы и им подобные (подробное описание свойств таких солей дано в Berge S.M., et al., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 1977, 66:1-19). Соли заявленных кислот также могут быть специально получены реакцией очищенной кислоты с подходящим основанием, при этом могут быть синтезированы соли металлов и аминов. К металлическим относятся соли натрия, калия, кальция, бария, цинка, магния, лития и алюминия, наиболее желательными из которых являются соли натрия и калия. Подходящими неорганическими основаниями, из которых могут быть получены соли металлов, являются гидроксид, карбонат, бикарбонат и гидрид натрия, гидроксид и бикарбонат калия, поташ, гидроксид лития, гидроксид кальция, гидроксид магния, гидроксид цинка. В качестве органических оснований, из которых могут быть получены соли заявленных кислот, выбраны амины и аминокислоты, обладающие достаточной основностью, чтобы образовать устойчивую соль, и пригодные для использования в медицинских целях (в частности, они должны обладать низкой токсичностью). К таким аминам относятся аммиак, метиламин, диметиламин, триметиламин, этиламин, диэтиламин, триэтиламин, бензиламин, дибензиламин, дициклогексиламин, пиперазин, этилпиперидин, трис(гидроксиметил)аминометан и подобные им. Кроме того, для солеобразования могут быть использованы гидроокиси тетраалкиламмония, например, такие как, холин, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний и им подобные. В качестве аминокислот могут быть использованы основные аминокислоты - лизин, орнитин и аргинин. Авторы обнаружили новые ингибиторы нейраминидазы, представляющие собой неизвестные ранее фторзамещенные (3R,4R,5S)-4-ациламино-5-гуанидино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновые кислоты и их эфиры общей формулы 1 и их фармацевтически приемлемые соли и/или гидраты:Rf представляет собой CH2F или CHF2 радикал. Новые соединения общей формулы 1, как установили авторы, неожиданно оказались в 5-259 раз более эффективными ингибиторами нейраминидазы других штамов вирусов гриппа, чем известный озельтамивир карбоксилат А 2 (табл. 1). Таблица 1 Антинейраминидазная активность (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-фторацетиламино-3-(пентан-3 илокси)циклогексен-1-карбоновая кислота 1.1 и озельтамивир карбоксилата А 2 на панели штамов вирусов гриппа Новые соединения общей формулы 1, как установили авторы, оказались более эффективными ингибиторами нейраминидазы вирусов гриппа, чем и известный Zanamivir (Zan) (табл. 2). Таблица 2 Антинейраминидазная активность (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-фторацетиламино-3-(пентан-3 илокси)циклогексен-1-карбоновая кислота 1.1 иZanamivir (Zan) на панели штамов вирусов гриппа И, наконец, авторы установили, что новые соединения более эффективны в культуре клеток MDCK в отношении штаммов вируса гриппа Ia/California/07/09 (H1N1) и высокопатогенного штаммаIa/duck/MN/1525/81 (H5N1) в сравнении с осельтамивиром карбоксилатом и Zanamivir (табл. 3). В частности, (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-фторацетиламино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновая кислота 1.1 в отношении штама Ia/California/07/09 (H1N1) в 13 раз активнее озельтамивира карбоксилата(А 2) и в 20 раз активнее Zanamivir (Zan), а в отношении высокопатогенного штамма Ia/duck/MN/1525/81(H5N1) - в 24 раза активнее осельтамивира карбоксилата и в 16 раз активнее Zanamivir (Zan).(3R,4R,5S)-5-Гуанидино-4-(2-трифторацетиламино)-3-(пентан-3-илокси)-циклогексен-1-карбоновая кислота А 4 показала нейраминидазную активность по отношению к вирусу A/California/04/09IC50=80 нм, а к вирусу А/Владивосток/16/09 А 4 IC501000 нм. Неизвестная ранее (3R,4R,5S)-5 гуанидино-4-фторацетиламино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновая кислота 1.1 имеет нейраминидазную активность по отношению к вирусу A/California/04/09 в 400 раз больше, чем А 4, а по отношению к вирусу А/Владивосток/16/09 - новая кислота 1.1 имеет IC50=4 нм, т.е. в 250 раз активнее своего известного 4-(2-трифторацетильного) аналога. Более высокую нейраминидазную активность, чем аналог А 4,имеет и(3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-дифторацетиламино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1 карбоновая кислота 1.4: по отношению к вирусу A/California/04/09, соответствующую IC50=0,3 нм (т.е. в 2,7 раза активнее А 2 и в 267 раз активнее А 4); по отношению к вирусу А/Владивосток/16/09 - новая кислота 1.4 имеет IC50=7 нм (т.е. в 118 раза активнее А 2 и более чем в 140 раз активнее А 4). Таблица 3 Специфическая активность (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-фторацетиламино-3-(пентан-3 илокси)циклогексен-1-карбоновая кислота (1.1) в культуре клеток MDCK в отношении штаммов вируса гриппа Согласно данному изобретению предпочтительными являются соединения общей формулы 1, в которых R представляет собой водород, метил или этил. Согласно данному изобретению более предпочтительными соединениями общей формулы 1 являются (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-фторацетиламино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновая кислота 1.1, ее метиловый эфир 1.2 и этиловый 1.3 эфир, (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-дифторацетиламино-3(пентан-3-илокси)циклогексен-1 карбоновая кислота 1.4, ее метиловый эфир 1.5 и этиловый эфир 1.6. Ингибиторы нейраминидазы вирусов гриппа общей формулы 1 получают, исходя из алкил 4-амино 5-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоксилата общей формулы 2 по нижеследующей схеме. Новые ингибиторы нейраминидазы вирусов гриппа, представляющие собой неизвестные ранее(3R,4R,5S)-4-(2-фторацетиламино)- и (3R,4R,5S)-4-(2,2-дифторацетиламино)-5-гуанидино-3-(пентан-3 илокси)циклогексен-1-карбоновые кислоты и их эфиры общей формулы 1 и их фармацевтически приемлемые соли проявили также высокую противогриппозную активность на животных моделях гриппозной пневмонии. Антинейраминидазную активность соединений определяли по методу, описанному в [WhoCollaborating Centre for ReferenceResearch on Influenza, Australia, Standard Operating Procedure WHO 025. Reviewed by: Aeron Hurt, Senior Scientist Review Date: 13/3/2009]. Согласно данному изобретению новые соединения общей формулы 1 представляют собой лекарственное начало для приготовления фармацевтической композиции и готовых лекарственных форм для профилактики и лечения гриппа у теплокровных животных и людей. Предметом данного изобретения является фармацевтическая композиция, включающая в качестве лекарственного начала соединения общей формулы 1 или его фармацевтически приемлемые соли в терапевтически эффективном количестве. Фармацевтические композиции могут включать фармацевтически приемлемые эксципиенты. Под фармацевтически приемлемыми экспициентами подразумеваются применяемые в сфере фармацевтики разбавители, вспомогательные агенты и/или носители. Фармацевтическая композиция, наряду с соединением общей формулы 1 или их фармацевтически приемлемой солью и/или гидратом по настоящему изобретению, может включать и другие активные субстанции, в том числе обладающие противогриппозной активностью, при условии, что они не вызывают нежелательных эффектов. При необходимости использования фармацевтической композиции по настоящему изобретению в клинической практике она может смешиваться с традиционными фармацевтическими носителями. Носители, используемые в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, представляют собой носители, которые применяются в сфере фармацевтики для получения распространенных форм, в том числе в пероральных формах используются связующие вещества, смазывающие агенты, дезинтеграторы, растворители, разбавители, стабилизаторы, суспендирующие агенты, бесцветные агенты,корригенты вкуса; в формах для инъекций используются антисептические агенты, солюбилизаторы, стабилизаторы; в местных формах используются основы, разбавители, смазывающие агенты, антисептические агенты. Предметом данного изобретения является способ получения фармацевтической композиции смешением с инертным наполнителем и/или растворителем по крайней мере одного лекарственного начала(субстанции) общей формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли в терапевтически эффективном количестве. Предметом данного изобретения является также лекарственное средство, обладающее противогриппозной активностью, в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, предназначенное для профилактики лечения гриппа у людей и теплокровных животных, включающее в свой состав противогриппозное лекарственное начало (субстанцию) общей формулы 1 или фармацевтическую композицию, включающую новое лекарственное начало общей формулы 1 в терапевтически эффективном количестве. Предметом данного изобретения являются также терапевтические коктейли для лечения гриппа,включающие в качестве одного из компонентов новое лекарственное средство или новую фармацевтическую композицию, содержащие в качестве активного компонента по крайней мере одно соединение общей формулы 1 или его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат. Терапевтический коктейль для лечения гриппа, наряду с лекарственным средством по данному изобретению, может включать другие известные препараты, предназначенные для лечения гриппа, или препараты, усиливающие иммунную систему пациента. В соответствии с данным изобретением способ профилактики и лечения гриппа у животных и людей заключается во введении пациенту нового лекарственного средства, новой фармацевтической композиции или нового терапевтического коктейля. Лекарственные средства могут вводиться через ингалятор, перорально или парентерально (например, внутривенно, подкожно, внутрибрюшинно или местно). Клиническая дозировка средства общей формулы 1 у пациентов может корректироваться в зависимости от терапевтической эффективности и биодоступности активных ингредиентов в организме, скорости их обмена и выведения из организма, а также в зависимости от возраста, пола и стадии заболевания пациента, при этом суточная доза у взрослых обычно составляет примерно 10-500 мг, предпочтительно 50-300 мг. Поэтому во время приготовления из фармацевтической композиции лекарственного средства по настоящему изобретению в виде единиц дозировки необходимо учитывать вышеназванную эффективную дозировку, при этом каждая единица дозировки препарата должна содержать примерно 10-500 мг средства общей формулы 1 предпочтительно 50-300 мг. В соответствии с указаниями врача или фармацевта данные препараты могут приниматься несколько раз в течение определенных промежутков времени (предпочтительно от одного до шести раз). Предметом данного изобретения является также способ ингибирования активности нейраминидазы в естественных условиях, в том числе нейраминидазы гриппа, включающий стадию контактирования соединения общей формулы 1 и нейраминидазы. Данное изобретение иллюстрируется, но не ограничивается, следующими примерами. Пример 1. Получение (3R,4R,5S)-этил 4-(2,2-дифторацетамидо)-5-гуанидино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен 1-карбоксилата мезилата 1.6CH3SO3H.(3R,4R,5S)-Этил 4-амино-5-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1 карбоксилат (2 г, 0.0054 моль, 1 экв), 1H-бензо[d][1,2,3]триазол-1-ол (0.867 г, 0.0065 моль, 1.2 экв),N1-этилимино)метилен)-N2,N2-диметилэтан-1,2-диамин гидрохлорид (1.239 г, 0.0065 моль, 1.2 экв) и диизопропилэтиламин (2.212 г, 0.0178 моль, 3.3 экв) растворяют в 20 мл ТГФ и по каплям добавляют 2,2-дифторуксусную кислоту 3b (0.624 г, 0.0065 моль, 1.2 экв). Реакционную массу перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Затем растворители отгоняют в вакууме, оставшееся масло растворяют в этилацетате, промывают 5% раствором NaHCO3, сушат над Na2SO4, фильтруют и сушат в вакууме. Выход (3R,4R,5S)-этил 5-(трет-бутоксикарбониламино)-4-(2,2-дифторацетамидо)-3-(пентан-3 илокси)циклогексен-1-карбоксилата 4b составляет 89% (2.15 г).LCMS (М+Н): Найдено 449; Вычислено 448.51. Полученный продукт 4b (2.15 г, 0.0048 моль) растворяют в 20 мл 10%-ного раствора трифторуксусной кислоты в хлористом метилене и перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. Затем растворители отгоняют в вакууме, оставшееся масло растворяют в этилацетате, промывают 5% раствором NaHCO3, сушат над Na2SO4, фильтруют и сушат в вакууме. Выход продукта составляет 96%(1.605 г). Дополнительную очистку проводят методом колоночной хроматографии - элюент этилацетат/ТГФ или перекристаллизацией из гексана. Получают (3R,4R,5S)-этил 5-амино-4-(2,2 дифторацетамидо)-3-(пентан-3-илоки)циклогексен-1-карбоксилат 5b, который растворяют в хлористом метилене и добавляют эквивалентное количество метансульфоновой кислоты. Через 10 мин растворитель отгоняют, полученный продукт промывают гексаном и сушат в вакууме. Выход мезилата 5bCH3SO3H 90%.(3R,4R,5S)-Этил 5-амино-4-(2,2-дифторацетамидо)-3-(пентан-3-илоки)циклогексен-1-карбоксилата 5b (1.6 г; 0.004598 моль; 1 экв) растворяют в 16 мл ДМФА и охлаждают в ледяной бане. Затем добавляют триэтиламин (2.57 г; 0.0253 моль; 5.5 экв), N,N'-ди-boc-тиомочевину (0.00505 моль; 1.35 г; 1.1 экв) и хлорид ртути(II) (0.0055 моль; 1.49 г; 1.2 экв). Полученную смесь перемешивают при охлаждении в ледяной бане в течение 1.5 ч. По окончании реакции осадок отфильтровывают через селит, ДМФА отгоняют в вакууме, полученное масло растворяют в этилацетате, промывают 5% раствором NaHCO3, сушат над(3R,4R,5S)-этил 5-Z)-2,3-бис-(трет-бутоксикарбонил)гуанидино)-4-(2,2-дифторацетамидо)-3(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоксилат 6b (1.82 г; 0.00308 моль) растворяют в 20 мл 10%-ного раствора трифторуксусной кислоты в хлористом метилене и перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. Затем растворители отгоняют в вакууме, оставшееся масло растворяют в этилацетате, промывают 5% раствором NaHCO3, сушат над Na2SO4, фильтруют и сушат в вакууме. Получают 1.1 г (92%)(3R,4R,5S)-этил 4-(2,2-дифторацетамидо)-5-гуанидино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоксилата 1.6 Полученный продукт растворяют в хлористом метилене и добавляют эквивалентное количество метансульфоновой кислоты. Через 10 мин растворитель отгоняют, полученный продукт промывают гексаном и сушат в вакууме. Получают (3R,4R,5S)-этил 4-(2,2-дифторацетамидо)-5-гуанидино-3-(пентан-3 илокси)циклогексен-1-карбоксилата мезилата 1.6CH3SO3H, выход 95%.(м, 1 Н), 1.44 (м, 4 Н), 1.22 (т, J=7.2 Гц, 3H), 0.856 (т, J=7.6 Гц, 3H), 0.795 (т, J=7.6 Гц, 3H). Используя в качестве исходного соединения 2(3R,4R,5S)-аллил-4-амино-5-(третбутоксикарбониламино)-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоксилат и (3R,4R,5S)-проп-2-инил-4 амино-5-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоксилат аналогично получали аллиловый эфир (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-(2,2-дифторацетамидо)-3-(пентан-3-илокси)циклогексен 1-карбоновой кислоты 1.7 (LCMS (М+Н): найдено 354; вычислено 353.44, по отношению к вирусу(3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-(2,2,дифторацетамидо)-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновой кислоты 1.8 (LCMS (М+Н): найдено 352; вычислено 351.42, по отношению к вирусу A/California/04/09 IC501 нМ). Используя в качестве исходного соединения соответствующий (3R,4R,5S)-4-амино-5-(третбутоксикарбониламин)-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоксилат 2 получали: 2-циклогексилэтиловый эфир(3R,4R,5S)-Этил 4-(2-фторацетамидо)-5-гуанидино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоксилата мезнлат 1.3CH3SO3H получают по методике, приведенной в примере 1, с использованием монофторуксусной кислоты в качестве ацилирующего агента.(3R,4R,5S)-4-(2,2-Дифторацетамидо)-5-гуанидино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновая кислота 1.4. К раствору 250 мг (3R,4R,5S)-этил 5-Z)-2,3-бис-(трет-бутоксикарбонил)гуанидино)-4-(2,2 дифторацетамидо)-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоксилата 6b в 5 мл диоксана добавляют 2,5 мл 5%-ного раствора гидроксида лития и перемешивают реакционную массу при комнатной температуре в течение 45 мин. Затем гидроксид лития пассивируют, добавляя 300 мкл уксусной кислоты, растворители отгоняют в вакууме. Полученный осадок экстрагируют изопропиловым спиртом, экстракт сушат надLCMS (М+Н): Найдено 563; Вычислено 562.62. Растворяют 200 мг полученной кислоты 8b в 2 мл 10%-ного раствора трифторуксусной кислоты в хлористом метилене и перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. Затем растворители отгоняют в вакууме.(3R,4R,5S)-4-(2-Фторацетамидо)-5-гуанидино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновую кислоту 1.1 получают аналогично примеру 3.(3R,4R,5S)-Метил 4-(2-фторацетамидо)-5-гуанидино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1 карбоксилата мезилат 1.2CH3SO3H был получен по методике, приведенной в примере 1, с использованием в качестве исходного (3R,4R,5S)-метил 4-амино-5-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(пентан-3 илокси)циклогексен-1-карбоксилата и монофторуксусной кислоты в качестве ацилирующего агента.(3R,4R,5S)-Метил 4-(2,2-дифторацетамидо)-5-гуанидино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1 карбоксилата мезилат 1.5CH3SO3H был получен по методике, приведенной в примере 1, с использованием в качестве исходного (3R,4R,5S)-метил 4-амино-5-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(пентан-3 илокси)циклогексен-1-карбоксилата и дифторуксусной кислоты в качестве ацилирующего агента.LCMS (М+Н): Найдено 373; Вычислено 372.44. Пример 7. Получение фармацевтической композиции в форме таблеток. Смешивают 1600 мг крахмала, 1600 мг измельченной лактозы, 400 мг талька и 1000 мг (3R,4R,5S)4-(2-фторацетамидо)-5-гуанидино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновой кислоты 1.1. Полученный брусок измельчают в гранулы и просеивают через сита, собирая гранулы размером 14-16 меш. Полученные гранулы таблетируют в подходящую форму таблетки весом 560 мг каждая. Пример 8. Получение фармацевтической композиции в форме капсул. Тщательно смешивают(3R,4R,5S)-4-(2-фторацетамидо)-5-гуанидино-3-(пентан-3 илокси)циклогексен-1-карбоновой кислоты 1.1 с порошком лактозы в соотношении 2:1. Полученную порошкообразную смесь упаковывают по 300 мг в желатиновые капсулы подходящего размера. Пример 9. Получение фармацевтической композиции для внутримышечных, внутрибрюшинных или подкожных инъекций. Смешивают 500 мг (3R,4R,5S)-4-(2-фторацетамидо)-5-гуанидино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен 1-карбоновой кислоты 1.1 с 300 мг хлорбутанола, 2 мл пропиленгликоля и 100 мл инъекционной воды. Полученный раствор фильтруют и помещают по 1 мл в ампулы, которые запаивают. Пример 10. Определение активности соединений общей формулы 1 по отношению к нейраминидазе вирусов гриппа. В предварительных экспериментах были определены рабочие разведения для штаммов аллантоисных вирусов гриппа A/California/07/09 (H1N1) и А/Аичи/2/69 (H3N2), а также для полученного в культуре клеток озельтамивир резистентного вируса гриппа А/Владивосток/16/09 (H1N1). Для этого было приготовлено по 60 мкл каждого двукратно разведеного вируса на реакционной буферной смеси (РБС,50 мМ MES, 5 мМ CaCl2, рН 6,5) в 96-луночном планшете с круглым дном. Из этого планшета по 50 мкл двукратно разведеного вируса было перенесено в 96-луночные планшеты с плоским дном для измерения флуоресценции (FluoroNunc, черные, кат.237105), далее к ним был добавлен равный объем субстратного буфера (СБ, 12,5 мМ 2'-(4-метилумбеллиферил)D-N-ацетилнейраминовой кислоты, Sigma, на 40 мМ ацетатного буфера рН 5,8). В качестве контроля были использованы лунки, к которым вместо вируса было добавлено по 50 мкл РБС. После инкубации планшета при 37C в течение 1 ч при слабом покачивании к каждой лунке планшета было добавлено по 100 мкл стоп-раствора (2.225 мл 0.824 М NaOH в 11.0 мл этанола), после чего было проведено измерение флуоресценции на приборе Varioskan Flach(Thermo Scientific) при ex=360 нм и em=448 нм. Для дальнейшей работы были выбраны те разведения вирусов, которые соответствовали середине линейного участка кривой зависимости разведения вируса от величины флуоресценции. Для определения антинейраминидазной активности соединений в 96-луночные планшеты с плоским дном для измерения флуоресценции (FluoroNunc, черные,кат.237105) в лунки рядов от В до Н было добавлено по 50 мкл приготовленных на РБС разведений соединений общей формулы 1 и аналогов формулы А 2 и формулы А 4 (концентрации 0,03; 0,3; 3; 30; 300; 3000; 30000 нм - каждая концентрация на ряд). В качестве вирусного контроля были использованы лунки ряда А, к которым было добавлено по 50 мкл РБС. Далее к соответствующим лункам было добавлено 50 мкл выбранных рабочих разведений каждого из вирусов на РБС. В качестве контроля были использованы лунки, к которым вместо вируса был добавлен такой же объем РБС. После перемешивания и инкубации при комнатной температуре в течение 45 мин ко всем лункам был добавлен равный объем СБ. После перемешивания и инкубации планшета при 37C в течение 1 ч к каждой лунке планшета было добавлено по 100 мкл стоп-раствора. Измерение флуоресценции было проведено на приборе Varioskan Flach(Thermo Scientific) при ex=360 нм и em=448 нм. Все определения проводились не менее чем в двух повторах (две лунки планшета). Процент ингибирования нейраминидазной активности изучаемым веществом общей формулы 1 определяли по формуле: процент ингибирования = 100 - (УЕФ опыта - УЕФ контроля/УЕФ вирусного контроля в отсутствии соединения - УЕФ контроля). Концентрация препарата,уменьшающая значение величины УЕФ на 50%, принималась за ингибирующую концентрацию 50 (IC50). Пример 11. Изучение противогриппозной активности соединений общей формулы 1 (1.1, 1.З., 1.4 и 1.6) на модели гриппозной пневмонии мышей. Предварительно взвешенные мыши (самки нелинейные, средний вес 12-15 г) инфицировались интраназально под легким эфирным наркозом вирусом гриппа А/Аичи/2/69 (H3N2) (10 ЛД 50 в 50 мкл). В предварительном опыте было проведено определение ЛД 50 путем титрования аллантоисного вируса на таких же мышах, которые затем использовались в основном опыте. Была использована следующая схема лечения соединениями: за 24 ч до инфицирования, за 1 ч до инфицирования, через 24 ч и далее 1 раз в день в течение 5 дней. Для перорального введения использовали одноразовый инсулиновый шприц со специальной иглой (лаваж), исследовался эффект следующих доз: 25 мг/кг/день соединений в объеме 100 мкл. В качестве препарата сравнения был использован Тамифлю в дозах от 5 до 30 мг/кг/день. В группе "вирусного контроля", в группах "леченных соединениями" общей формулы 1 и Тамифлю формулы A3 было по 10 мышей в каждой. За лечеными и контрольными животными велось ежедневное наблюдение, в первые 5 дней после инфицирования мышей взвешивали каждый день, далее - через день. Химиотерапевтическую активность соединений на модели гриппозной пневмонии мышей оценивали по показателю защиты от смертельной вирусной инфекции, и снижению веса в группах животных, леченных препаратом по сравнению с контрольной группой. Уменьшение или увеличение веса рассчитывалось отдельно для каждой мыши и выражалось в процентах. При этом за 100% принимался вес животного перед инфицированием. Для всех мышей одной группы определялось среднее значение процента потери или увеличения веса. В предварительном опыте определяют дозу вируса, содержащую 10 ЛД 50 в объеме 100 мкл. Всех животных в опыте заражают этой дозой вируса. Эффективность действия соединений общей формулы 1 на модели гриппозной пневмонии мышей оценивалась по количеству животных, выживших после инфицирования вирусом, средней продолжительности жизни и изменению веса инфицированных животных. Было установлено, что на 7-й день наблюдения все мыши, зараженные вирусом и не прошедшие лечение указанными соединениями (группа "вирусного контроля"), погибли. Проведенные эксперименты показали, что к последнему дню гибели животных из группы "вирусного контроля" лечение указанными соединениями общей формулы 1 и Тамифлю животных из групп"леченных соединениями" позволило предотвратить их гибель полностью. Противогриппозная эффективность изученных препаратов общей формулы 1 и Тамифлю формулыA3 выражается в снижении темпов потери веса в группах леченных мышей по сравнению с группой "вирусного контроля". Потеря веса животного является одним из клинических признаков проявления гриппозной пневмонии. Большее снижение веса животного свидетельствует о более тяжелом протекании заболевания. Взвешивание мышей проводилось на 1, 2, 3, 4, 5 дни после инфицирования, а далее через день до 15 дня наблюдения. Было установлено, что в группе вирусного контроля животные больше всего теряли вес на 5 день после инфицирования (около 10%). В отличие от вирусного контроля в группах животных, проходящих лечение всеми указанными соединениями общей формулы 1 и Тамифлю, в среднем не наблюдалось потери веса. Начиная с 9 дня все животные в группах, "леченных соединениями", активно и стабильно набирали в весе. Таким образом, показана высокая эффективность лечения гриппозной пневмонии мышей соединениями формулы 1.1, 1.3, 1.4 и 1.6. Промышленная применимость Изобретение может быть использовано в медицине и ветеринарии. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. (3R,4R,5S)-5-Гуанидино-4-фторацетиламино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновая кислота и ее эфиры общей формулы 1 и их фармацевтически приемлемые соли:(3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-фторацетиламино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1-карбоновую кислоту 1.1,метиловый эфир (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-фторацетиламино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1 карбоновой кислоты 1.2,этиловый эфир (3R,4R,5S)-5-гуанидино-4-фторацетиламино-3-(пентан-3-илокси)циклогексен-1 карбоновой кислоты 1.3. 3. Лекарственное начало, обладающее активностью в отношении нейраминидазы вируса гриппа,представляющее собой соединение по любому из пп.1, 2. 4. Фармацевтическая композиция, обладающая противовирусной активностью и предназначенная для лечения гриппа и сопутствующих заболеваний, вызванных вирусом гриппа, включающая лекарственное начало по п.3 в терапевтически эффективном количестве. 5. Фармацевтическая композиция по п.4 в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку. 6. Фармацевтическая композиция по любому из пп.4 или 5 для лечения пневмонии, обусловленной вирусом гриппа, в эффективном количестве. 7. Способ ингибирования активности нейраминидазы вируса гриппа, заключающийся в контактировании нейраминидазы с соединением по любому из пп.1, 2. 8. Способ профилактики и лечения гриппа и заболеваний, обусловленных вирусом гриппа, заключающийся во введении терапевтически эффективного количества лекарственного начала по п.3 или фармацевтической композиции по любому из пп.4-6.