Вакцина на основе вирусоподобных частиц вируса папилломы человека 16 и вируса папилломы человека 18 l 1

009179 Настоящее изобретение относится к вирусоподобным частицам (ВПЧ) из вируса папилломы человека (HPV) и к их применению в медицине, в частности к обеспечению защиты от инфекции и/или заболевания, вызываемых гетерологичными типами HPV. Предшествующий уровень техники Вирусы папилломы представляют собой небольшие опухолеродные ДНК вирусы, которые являются высоковидоспецифичными. На сегодняшний день описано более 100 индивидуальных генотипов вируса папилломы человека (HPV). Как правило, HPV специфичны либо к коже (например, HPV-1 и -2),либо к поверхностям слизистых (например, HPV-6 и -11) и обычно вызывают доброкачественные опухоли (бородавки), которые сохраняются в течение нескольких месяцев или лет. Такие доброкачественные опухоли могут внушать людям беспокойство, но не склонны представлять собой угрозу для жизни, за некоторыми исключениями. Некоторые HPV также ассоциированы с раком, они известны как онкогенные типы HPV. Самой сильной положительной связью между HPV и раком человека является связь, существующая междуHPV-16 и HPV-18 и раком шейки матки. Рак шейки матки представляет собой наиболее распространенное злокачественное заболевание в развивающихся странах, причем каждый год в мире происходит около 500000 новых случаев заболевания. Другими HPV, представляющими особенный интерес в отношении рака, являются типы 31, 33, 35,39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68. Вирусоподобные частицы (ВПЧ) HPV были предложены в качестве потенциальных вакцин для лечения HPV. Исследования на животных показали, что ВПЧ не обеспечивают перекрестный иммунитет к инфекции, вызываемой другими типами HPV, см., например, Suzich, J.A. et al., Proc Natl Acad Sci, 92: 11553-11557, 1995, и Breitburd, Seminars in Cancer Biology, vol. 9, 1999, pp. 431-445. До сих пор имеется потребность в вакцине, защищающей от многочисленных типов HPV. Настоящее изобретение направлено на эту потребность. Краткое изложение сущности изобретения В первом аспекте настоящее изобретение относится к применению смеси, содержащей ВПЧ HPV 16 и HPV 18, в предупреждении инфекции или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типомHPV из группы онкогенных типов HPV, исключая типы 16 и 18. Изобретение также относится к применению смеси, содержащей ВПЧ HPV 16 и HPV 18, в изготовлении лекарственного средства для предупреждения инфекции или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы онкогенных типов HPV, исключая типы 16 и 18. Во втором аспекте изобретение относится к применению смеси, содержащей ВПЧ HPV 16 и HPV 18, в предупреждении инфекции или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы типов HPV 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68. Изобретение также относится к применению смеси ВПЧ HPV 16 и HPV 18 в изготовлении лекарственного средства для предупреждения инфекции или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы типов HPV 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68. В третьем аспекте настоящее изобретение относится к применению ВПЧ HPV 16 в предупреждении инфекции или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы типов HPV 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68. Изобретение также относится к применению ВПЧ HPV 16 в изготовлении лекарственного средства для предупреждения инфекции или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы типов HPV 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68. В четвертом аспекте настоящее изобретение относится к применению ВПЧ HPV 18 в предупреждении инфекции или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы типовHPV 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68. Изобретение также относится к применению ВПЧ HPV 18 в изготовлении лекарственного средства для предупреждения инфекции или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы типов HPV 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68. Более конкретно, изобретение имеет отношение к способу индукции иммунного ответа против одного или более чем одного типа HPV, выбранных из группы, состоящей из всех онкогенных раковых типов, исключая типы 16 и 18, который включает введение субъекту композиции, содержащей ВПЧHPV16. Предпочтительным является способ, в котором типы HPV выбраны из группы, состоящей из типов 18 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68. Также предпочтительным является способ индукции иммунного ответа против одного или более чем одного типа HPV, выбранных из группы, состоящей изHPV31, HPV33, HPV35, HPV52 и HPV58. Наиболее предпочтительным является способ индукции иммунного ответа против одного или более чем одного типа HPV, выбранных из группы, состоящей изHPV31, HPV35 и HPV58. В другом воплощении композиция, полезная в способе, дополнительно содержит ВПЧ HPV18 и/или адъювант. В еще одном воплощении индуцируемый иммунный ответ приводит к предупреждению инфекции, вызываемой перечисленными типами HPV. В еще одном воплощении изобретение имеет отношение к способу индукции иммунного ответа против одного или более чем одного типа HPV, выбранных из группы, состоящей из всех онкогенных-1 009179 раковых типов, исключая типы 16 и 18, который включает введение субъекту композиции, содержащей ВПЧ HPV18. Предпочтительным является способ индукции иммунного ответа против одного или более чем одного типа HPV, выбранных из группы, состоящей из типов 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 63, который включает введение субъекту композиции, содержащей ВПЧ HPV18. Предпочтительным является способ индукции иммунного ответа против одного или более чем одного типа HPV, выбранных из группы, состоящей из HPV45 и HPV58. В другом воплощении композиция, полезная в способе, дополнительно содержит ВПЧ HPV16 и/или адъювант. В еще одном воплощении индуцируемый иммунный ответ приводит к предупреждению инфекции, вызываемой перечисленными типами HPV. Предпочтительным является способ, как описано выше, в котором иммунный ответ индуцируют против любого из типов HPV 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12 из специфических идентифицированных групп (соответственно размеру предпочтительной группы). Подробное описание В настоящем изобретении авторы изобретения неожиданно обнаружили, что применение ВПЧHPV16 и HPV18 обеспечивает перекрестный иммунитет к инфекции, вызываемой одним или более чем одним типом HPV из группы онкогенных HPV (исключая типы 16 и 18), причем онкогенными типами являются те типы, которые способны вызывать рак. Группа онкогенных типов включает или состоит из типов 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73, 82, 26, 53 и 66. В частности применение ВПЧ HPV16 иHPV18 обеспечивает перекрестный иммунитет к инфекции и/или заболеванию, вызываемым группой типов HPV 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68, далее называемых группой типов с высоким риском рака. Была идентифицирована защита от всей группы типов с высоким риском рака и от определенных специфических типов и комбинаций типов. Эффект является дополнением к гомологичному защитному эффекту, наблюдаемому против HPV 16 и HPV18 при применении ВПЧ HPV 16 и HPV18 соответственно. Как таковые, ВПЧ HPV 16 и ВПЧ HPV 18 можно использовать в вакцине и против HPV 16, HPV 18 и против других типов HPV. Перекрестный иммунитет здесь обозначает, что число случаев инфекции для группы онкогенных типов HPV (случайная инфекции или хроническая инфекция) и/или онкогенного заболевания, вызываемого инфекцией HPV, ниже в группе пациентов, вакцинированных ВПЧ HPV 16 и/или HPV 18, предпочтительно типами 16 и 18, чем в невакцинированной группе. Полный перекрестный иммунитет к типу или группе типов не требуется в настоящем изобретении - на самом деле, любой уровень перекрестного иммунитета обеспечивает преимущество. Предпочтительно уровень наблюдаемого перекрестного иммунитета такой, что в вакцинированной группе инфекций и/или заболеваний меньше на 5%, чем в сравнительной невакциированной группе, более предпочтительно до 10, до 15, до 20, до 25, до 30, до 35, до 40,до 45, до 50, до 55, до 60, до 65, до 70, до 80, до 90 или даже до 100% меньше инфекций и/или заболеваний. Перекрестный иммунитет можно оценить путем определения присутствия нуклеиновых кислот,специфических для различных онкогенных типов, в вакцинируемой и контрольной группе. Определение можно проводить, например, используя методики, как описано в WO 03014402 и ссылках, упомянутых там, особенно для неспецифической амплификации ДНК HPV и последующего определения типов ДНК,используя систему LiPA, как описано в WO 99/14377 и в Kleter et al., [Journal of Clinical Microbiology(1999), 37(8): 2508-2517], которые включены здесь посредством ссылки. Однако может быть использован любой подходящий метод для определения ДНК HPV в образце, такой как типоспецифическая ПЦР (полимеразная цепная реакция) с использованием праймеров, специфических для каждого целевого типаHPV. Подходящие праймеры известны специалистам или могут быть легко сконструированы при условии, что последовательности онкогенных типов HPV известны. Подходящий перекрестный иммунитет наблюдается в женской популяции предпочтительно среди женщин с серонегативной реакцией на инфекцию HPV или с серонегативной реакцией на HPV 16 и 18,предпочтительно среди женщин подросткового возраста с пресексуальной активностью. Перекрестный иммунитет (оцененный по защите, наблюдаемой в вакцинированной группе, относительно контрольной группы) предпочтительно наблюдается против любого онкогенного типа, отличного от 16 или 18, например, любого из группы типов с высоким риском рака 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58,59, 66 или 68, или совместно, против групп типов с высоким риском рака, например 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или 11 типов, или на самом деле против всех типов с высоким риском рака. Все возможные комбинации 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 и 11 типов с высоким риском рака рассматриваются специфически, и, по существу,имеется несколько различных групп типов ВПЧ, индивидуализированных здесь, для которых уровень перекрестного иммунитета можно анализировать по сравнению с группой плацебо. Применение ВПЧ HPV 16 и/или HPV 18 для обеспечения предупреждения инфекции HPV за счет любой такой группы типов HPV является предпочтительным. Соответственно настоящее изобретение обеспечивает перекрестный иммунитет к инфекции и/или заболеванию, вызываемым следующими предпочтительными группами типов HPV: А группа, включающая один или более чем один тип HPV 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68,В группа из утверждения А, включающая тип 31 и один или более чем один тип 33, 35, 39, 45, 51,52, 56, 58, 59, 66, 68,-2 009179C группа из утверждения А или В, включающая тип 33 и один или более чем один тип 35, 39, 45,51, 52, 56, 58, 59, 66, 68,D группа из утверждений А-С, включающая тип 35 и один или более чем один тип 39, 45, 51, 52, 56,58, 59, 66, 68,Е группа из утверждений A-D, включающая тип 39 и один или более чем один тип 45, 51, 52, 56, 58,59, 66, 68,F группа из утверждений А-Е, включающая тип 45 и один или более чем один тип 51, 52, 56, 58, 59,66, 68,G группа из утверждений A-F, включающая тип 51 и один или более чем один тип 52, 56, 58, 59, 66,68,Н группа из утверждений A-G, включающая тип 52 и один или более чем один тип 56, 58, 59, 66, 68,I группа из утверждений А-Н, включающая тип 56 и один или более чем один тип 58, 59, 66, 68,J группа из утверждений А-I, включающая тип 58 и один или более чем один тип 59, 66, 68,K группа из утверждений A-J, включающая тип 59 и один или более чем один тип 66, 68,L группа из утверждений А-K, включающая тип 66 и один или более чем один тип 68. В частности авторы изобретения определили, что среди населения в группе плацебо вероятность инфекции была на 38% больше для по меньшей мере одного из типов группы с высоким риском рака по сравнению с теми женщинами, которых вакцинировали вакциной, содержащей ВПЧ HPV 16 и 18. Таким образом, изобретение относится в особенности к применению композиции, содержащей ВПЧ HPV 16 и 18, в предупреждении инфекции в популяции, вызванной одним или более чем одним типом с высоким риском рака. Предпочтительно композиция является до или по меньшей мере на 20% более эффективной, чем плацебо, в предупреждении инфекции в популяции, вызванной группой, состоящей из типов с высоким риском рака, предпочтительно до или по меньшей мере на 25% более эффективной, наиболее предпочтительно до или по меньшей мере на 30% более эффективной, подходяще до или по меньшей мере на 34% более эффективной в предупреждении инфекции, наиболее предпочтительно до или по меньшей мере на 38% более эффективной в предупреждении инфекции. Предпочтительно настоящее изобретение относится к композиции, содержащей ВПЧ HPV 16 иHPV 18, в изготовлении лекарственного средства для предупреждения инфекции, вызванной одним или более чем одним типом HPV 31, 33, 35, 52 и 58. Авторы изобретения определили, что среди популяции в группе плацебо вероятность инфекции была на 43% больше для по меньшей мере одного из группы типов HPV 31, 33, 35, 52 и 58 по сравнению с теми женщинами, которых вакцинировали ВПЧ HPV 16 и HPV 18. Таким образом, изобретение относится в особенности к применению композиции, содержащей ВПЧ HPV 16 и HPV 18, в предупреждении инфекции в популяции, вызванной одним или более чем одним типом HPV 31, 33, 35, 52 и 58. Предпочтительно комбинация является до или по меньшей мере на 10% более эффективной, чем плацебо, в предупреждении инфекции в популяции, вызванной группой, состоящей из типов HPV 31, 33, 35, 52 и 58,более предпочтительно до или по меньшей мере на 15% более эффективной, более предпочтительно до или по меньшей мере на 20% более эффективной, на 25% более эффективной, на 30% более эффективной, на 37% более эффективной или подходяще до или по меньшей мере на 43% более эффективной в предупреждении инфекции. Предпочтительно настоящее изобретение относится к композиции, содержащей ВПЧ HPV 16 иHPV 18, для изготовления лекарственного средства для предупреждения инфекции, вызываемой одним или более чем одним типом HPV31, 35 и 58. Авторы изобретения определили, что среди популяции в группе плацебо вероятность инфекции была на 58% больше для по меньшей мере одного из группы типов HPV 31, 35 и 58 по сравнению с теми женщинами, которых вакцинировали ВПЧ HPV 16 и HPV 18. Таким образом, изобретение относится в особенности к применению композиции, содержащей ВПЧ HPV 16 и HPV 18, в предупреждении инфекции в популяции, вызываемой одним или более чем одним типом HPV 31, 35 и 58. Предпочтительно композиция является до или по меньшей мере на 15% более эффективной, чем плацебо, в предупреждении инфекции в популяции, вызываемой группой, состоящей из типов HPV 31, 35 и 58, предпочтительно до или по меньшей мере на 20% более эффективной, предпочтительно до или по меньшей мере на 25% более эффективной, до 30% более эффективной, до 35% более эффективной, до 40% более эффективной,до 45% более эффективной, до 49% более эффективной, до 55% более эффективной или даже более подходяще до или по меньшей мере на 58% более эффективной в предупреждении инфекции. Предпочтительно настоящее изобретение относится к композиции, содержащей ВПЧ HPV 16 иHPV 18, для изготовления лекарственного средства, для предупреждения инфекции, вызываемой одним или более чем одним типом HPV 45 и 59. В частности, авторы изобретения определили, что среди популяции в группе плацебо вероятность инфекции была на 33% больше для по меньшей мере одного (или более) из группы типов HPV 45 и 59 по сравнению с теми женщинами, которых вакцинировали вакциной, содержащей ВПЧ HPV 16 и 18. Таким образом, изобретение относится в особенности к применению композиции, содержащей ВПЧ HPV 16 и 18, в предупреждении инфекции в популяции, вызываемой одним или более чем одним типом HPV 45 иHPV 59. Предпочтительно композиция является до или по меньшей мере на 20% более эффективной, чем плацебо, в предупреждении инфекции в популяции, вызываемой группой, состоящей из типов HPV 45 иHPV 59, предпочтительно до или по меньшей мере на 25% более эффективной, более предпочтительно до 30% более эффективной, более предпочтительно до или по меньшей мере на 33% более эффективной в предупреждении инфекции. Предпочтительно настоящее изобретение относится к способу предупреждения инфекции HPV в популяции, при котором вакцинация ВПЧ HPV 16, ВПЧ HPV 18 или их смесью обеспечивает перекрестный иммунитет к инфекции, вызванной следующими группами типов HPV: все онкогенные типы HPV(исключая типы 16 и 18), любая из групп, обозначенных выше в параграфах A-L, группа типов с высоким риском рака, группа HPV 31, 35, 58; группа HPV 31, 33, 35, 52, 58; группа HPV 45 и 59, при этом достигаемая защита против всех членов группы вместе является более сильной, чем та, которая наблюдается при применении плацебо. Предпочтительно композиция, содержащая ВПЧ HPV 16 и HPV 18, обеспечивает перекрестный иммунитет к инфекции, вызванной по меньшей мере одним из типов HPV 35 и HPV 52. Предпочтительно композиция ВПЧ HPV 16 и HPV 18 также обеспечивает защиту против инфекции,вызванной HPV 16 и/или HPV 18, предпочтительно и HPV16, HHPV18. Изобретение также относится к применению ВПЧ HPV 16 в предупреждении инфекции, вызванной одним или более чем одним типом из группы типов с высоким риском рака, предпочтительно из группы,состоящей из HPV 31, 33, 35, 52, 58, или из группы, состоящей из 31, 35, 58. Изобретение также относится к применению ВПЧ HPV 16 в изготовлении лекарственного средства для предупреждения инфекции, вызванной одним или более чем одним типом из группы типов с высоким риском рака, предпочтительно из группы, состоящей из HPV 31, 33, 35, 52, 58, или из группы, состоящей из 31, 35 и 58. Изобретение также относится к применению ВПЧ HPV 18 в предупреждении инфекции, вызванной одним или более чем одним типом из группы типов с высоким риском рака, предпочтительно из группы,состоящей из HPV 45 и 59. ВПЧ HPV 16 по изобретению можно использовать в отсутствие ВПЧ любых других типов HPV или можно использовать в комбинации с ВПЧ другого типа HPV. Предпочтительно ВПЧ HPV 16 используют в комбинации с ВПЧ HPV 18. ВПЧ HPV 18 по изобретению можно использовать в отсутствие ВПЧ любых других типов HPV или можно использовать в комбинации с ВПЧ другого типа HPV. Предпочтительно ВПЧ HPV 18 используют в комбинации с ВПЧ HPV 16. Предпочтительно ВПЧ HPV 16, ВПЧ HPV 18 и их комбинации используют для обеспечения защиты от индивидуальных онкогенных типов, предпочтительно типов с высоким риском рака, конкретно, типовHPV 31, 33, 35, 39,45,51,52,56,58,59,66,68. В дополнение к эффекту перекрестного иммунитета, предпочтительно иммуногенную композицию по изобретению, более предпочтительно комбинацию ВПЧ HPV 16 и HPV 18, используют в активной иммунизации взрослых и девушек-подростков от 10 лет и старше для предупреждения одного или более чем одного из следующего: инфекция HPV-16 и HPV-18, хроническая инфекция HPV-16 и HPV-18 и цервикальная неоплазия, ассоциированная с HPV-16 и HPV-18. Предпочтительно применение иммуногенной композиции по изобретению используют для предупреждения цервикальной неоплазии, ассоциированной с инфекцией, вызванной другими (не HPV 16, 18) онкогенными типами. ВПЧ HPV и способы получения ВПЧ хорошо известны в уровне техники. ВПЧ обычно конструируют из структурных белков L1 и, возможно, L2 вируса, см., например, WO 9420137 и WO 9405792. В настоящем изобретении можно использовать любые подходящие ВПЧ HPV, которые обеспечивают перекрестный иммунитет, например, L1 или L1+L2 ВПЧ. Предпочтительно ВПЧ представляют собой только L1 ВПЧ. ВПЧ могут содержать полноразмерный белок L1. Предпочтительно белок L1, используемый для образования ВПЧ, является процессированным белком L1. Предпочтительно при процессировании удаляется сигнал ядерной локализации. Предпочтительно процессирование представляет собой С-терминальное процессирование. Предпочтительно при Стерминальном процессировании удаляется менее 50 аминокислот, более предпочтительно менее 40 аминокислот. Если ВПЧ представляют собой ВПЧ HPV 16, то предпочтительно при С-терминальном процессировании удаляется 34 аминокислоты из L1 HPV 16. Если ВПЧ представляют собой ВПЧ HPV 18, то предпочтительно при С-терминальном процессировании удаляется 35 аминокислот из L1 HPV 18. Процессированные белки L1 представляют собой достаточно функциональные производные белкаL1. Функциональные производные белка L1 способны вызывать иммунный ответ (если необходимо, при применении подходящего адъюванта), этот иммунный ответ способен распознавать ВПЧ, состоящие из полноразмерного белка L1 и/или типа HPV, из которого был получен белок L1. ВПЧ по изобретению могут также содержать другие типы функциональных производных белков,включая мутанты полноразмерных или процессированных белков L1 HPV, такие как делеционные, заме-4 009179 няющие и инсерционные мутанты. Подходящие производные также включают последовательности с оптимизированными кодонами. Белок L1 или производное может также быть слитым белком, таким как слияние белка L1 с L2 или с ранним белком. Белок L1 или функциональное производное белка способны образовывать ВПЧ, и образование ВПЧ может быть оценено посредством стандартных методик, таких как, например, электронная микроскопия и динамическое рассеяние лазерного излучения. ВПЧ можно изготовить в любом подходящем клеточном субстрате, таком как дрожжевые клетки или клетки насекомых, например, бакуловирусные клетки, и методики получения ВПЧ хорошо известны в уровне техники, например, WO 9913056 и US 6245568 и ссылки в них, которые полностью включены здесь посредством ссылки. Предпочтительно ВПЧ изготавливают путем методик разборки и повторной сборки, что может обеспечить более стабильные и/или однородные ВПЧ вируса папилломы. Например, McCarthy et al.,1998 "Quantitative Disassembly and Reassembly of Human Papillomavirus Type 11 Viruslike Particles in Vitro"J. Virology 72(1):33-41, описывает разборку и повторную сборку ВПЧ из рекомбинантного L1 HPV 11,очищенного из клеток насекомых с целью получения однородного препарата ВПЧ. В WO 9913056 иUS6245568 также описаны способы разборки/повторной сборки для изготовления ВПЧ HPV. Предпочтительно ВПЧ HPV по изобретению изготавливают, как описано в WO 9913056 или US 6245568. ВПЧ по изобретению можно объединять с адъювантом. Вакцины по изобретению могут содержать подходящий адъювант или иммуностимулятор, такой как детоксицированный липид А из любого источника и нетоксичные производные липида А, сапонины и другие реагенты, способные стимулировать ответ ТН 1-типа, но не ограничиваются ими. Давно известно, что энтеробактериальный липополисахарид (ЛПС) является мощным стимулятором иммунной системы, хотя его применение в адъювантах было ограничено вследствие его токсичных эффектов. Нетоксичное производное ЛПС, монофосфориллипид A (MPL), получаемое путем удаления коровой углеводной группы и фосфата от восстанавливающего конца глюкозамина, было описано Ribi etal. (1986, Immunology and Immunopharmacology of bacterial endotoxins, Plenum Publ. Corp., NY, p. 407419), и оно имеет следующую структуру: Другой дектоксицированный вариант MPL получается при удалении ацильной цепи из положения 3 дисахаридного остова и называется 3-O-деацилированный монофосфориллипид A (3D-MPL). Он может быть очищен и получен способами, указанными в GB 2122204 В, в котором также раскрыто получение дифосфориллипида А и его 3-О-деацилированных вариантов. Предпочтительной формой 3D-MPL является форма эмульсии, имеющая небольшой размер частиц,менее 0,2 мкм в диаметре, и способ ее изготовления раскрыт в WO 94/21292. Водные препараты, содержащие монофосфориллипид А и поверхностно-активное вещество, описаны в WO 9843670 A2. Адъюванты, имеющие происхождение из бактериального липополисахарида, подлежащие приготовлению в виде композиций по настоящему изобретению, могут быть очищены и обработаны из бактериальных источников или в качестве альтернативы они могут быть синтетическими. Например, очищенный монофосфориллипид А описан Ribi et al. 1986 (выше), и 3-О-деацилированный монофосфорил- или дифосфориллипид А, происходящий из Salmonella sp., описан в GB 2220211 и US 4912094. Были описаны другие очищенные и синтетические липополисахариды (Hilgers et al., 1986, Int. Arch. Allergy. Immunol., 79(4):392-6; Hilgers et al., 1987, Immunology, 60(1):141-6; и ЕР 0549074 B1). Особенно предпочтительным адъювантом на основе бактериального липополисахарида является 3D-MPL. Соответственно, производными ЛПС, которые могут быть использованы в настоящем изобретении,являются те иммуностимуляторы, которые похожи по структуре на таковые ЛПС, или MPL, или 3DMPL. В другом аспекте настоящего изобретения производные ЛПС могут представлять собой ацилиро-5 009179 ванный моносахарид, который является субфрагментом вышеупомянутой структуры MPL. Сапонины описаны в: Lacaille-Dubois, M. and Wagner H. (1996, A review of the biological and pharmacological activities of saponins. Phytomedicine vol. 2 pp. 363-386). Сапонины представляют собой стероидные или тритерпеновые гликозиды, широко распространенные в царствах растений и морских животных. Сапонины известны за счет образования коллоидных растворов в воде, которые пенятся при встряхивании, и за счет осаждения холестерина. Когда сапонины находятся около клеточных мембран, они формируют в мембране структуры, подобные порам, которые вызывают разрыв мембраны. Гемолиз эритроцитов представляет собой пример этого феномена, который является свойством определенных, но не всех,сапонинов. Сапонины известны как адъюванты в вакцинах для системного введения. Адъювантную и гемолитическую активность конкретных сапонинов активно изучают в уровне технике (Lacaille-Dubois andMolina) и его фракции описаны в US 5057540 и "Saponins as vaccine adjuvants", Kensil, С.R., Crit Rev TherDrug Carrier Syst, 1996, 12 (1-2):1-55, и ЕР 0362279 B1. Структуры в форме частиц, называемые комплексами с иммуностимулирующими свойствами (ISCOMS), содержащие фракции Quil A, являются гемолитическими и использовались в изготовлении вакцин (Morein, В., ЕР 0109942 В 1; WO 96/11711; WO 96/33739). Гемолитические сапонины QS21 и QS17 (очищенные при помощи ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) фракции Quil А) были описаны как мощные системные адъюванты, и способ их получения раскрыт в патенте США 5057540 и ЕР 0362279 В 1. Другие сапонины, которые применяли в исследованиях системной вакцинации, включают сапонины, полученные из других видов растений, таких как Gypsophila и Saponaria (Bomford et al., Vaccine, 10(9):572-577, 1992). Усиленная система включает комбинацию нетоксичного производного липида А и производного сапонина, особенно комбинацию QS21 и 3D-MPL, как раскрыто в WO 94/00153, или менее реактогенную композицию, где QS21 погашен холестерином, как раскрыто в WO 96/33739. Особенно мощный адъювантный препарат, включающий QS21 и 3D-MPL в эмульсии "масло в воде", описан в WO 95/17210 и является предпочтительным препаратом. Соответственно в одном воплощении настоящего изобретения предложена вакцина с адъювантом детоксицированным липидом А или нетоксичным производным липида А, более предпочтительно с адъювантом монофосфориллипидом А или его производным. Предпочтительно вакцина дополнительно содержит сапонин, более предпочтительно QS21. Предпочтительно препарат дополнительно содержит эмульсию "масло в воде". В настоящем изобретении также предложен способ получения вакцинного препарата, включающий смешивание пептидаL2 по настоящему изобретению вместе с фармацевтически приемлемым эксципиентом, таким как 3DMPL. Дополнительные компоненты, которые предпочтительно присутствуют в вакцинном препарате с адъювантом по изобретению, включают неионные детергенты, такие как октоксинолы и полиоксиэтиленовые эфиры, как описано здесь, особенно t-октилфеноксиполиэтоксиэтанол (Triton Х-100) и полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат (Tween 80), и соли желчных кислот или производные холевой кислоты, как описано здесь, особенно дезоксихолат натрия или тауродезоксихолат. Таким образом, особенно предпочтительный препарат содержит 3D-MPL, Triton Х-100, Tween 80 и дезоксихолат натрия, его можно объединять с препаратом антигена L2 для получения подходящей вакцины. В одном предпочтительном воплощении настоящего изобретения вакцина содержит везикулярный адъювантный препарат, содержащий холестерин, сапонин и производное ЛПС. В этом отношении предпочтительный адъювантный препарат содержит однослойную везикулу, содержащую холестерин,имеющую липидный бислой, предпочтительно содержащий диолеоилфосфатидилхолин, где сапонин и производное ЛПС ассоциированы с липидным бислоем или внедрены в него. Более предпочтительно эти адъювантные препараты содержат QS21 в качестве сапонина и 3D-MPL в качестве производного ЛПС,при этом соотношение QS21: холестерин составляет от 1:1 до 1:100 мас./мас., наиболее предпочтительно 1:5 мас./мас. Такие адъювантные препараты описаны в ЕР 0822831 В, описание которого включено сюда посредством ссылки. Подходяще вакцины по изобретению используют в комбинации с алюминием, и они соответственно адсорбируются или частично адсорбируются на алюминиевых адъювантах. Соответственно адъювант представляет собой соль алюминия, предпочтительно в комбинации с 3D MPL, такую как фосфат алюминия и 3D MPL. Гидроксид алюминия, возможно в комбинации с 3D MPL, также является предпочтительным. Наиболее предпочтительной в настоящем изобретении является комбинация ВПЧ с солью алюминия или с солью алюминия + 3D MPL. Гидроксид алюминия является предпочтительным в качестве соли алюминия. Вакцина может также содержать алюминий или алюминиевое соединение в качестве стабилизатора. Вакцины по изобретению могут быть предоставлены посредством любого из множества путей, таких как пероральный, местный, подкожный, слизистый (обычно внутривлагалищный), внутривенный,внутримышечный, интраназальный, сублингвальный, интрадермальный и посредством суппозитория.-6 009179 Вакцина возможно может также быть изготовлена в виде препарата или введена совместно с другими антигенами HPV, такими как ранние антигены или не-HPV антигены. Соответственно эти не-HPV антигены могут обеспечивать защиту от других заболеваний, наиболее предпочтительно венерических заболеваний, таких как вирус простого герпеса, вирус Эпштейна-Барра (EBV), хламидии и вирус иммунодефицита человека (ВИЧ). Авторы изобретения особенно предпочитают, чтобы вакцина содержала gDHSV (herpes simplex virus, вирус простого герпеса) или его процессированный фрагмент. В этом случае вакцина обеспечивает защиту и от HPV, и от HSV. Дозировка компонентов вакцины будет различаться в зависимости от состояния, пола, возраста и массы пациента, способа введения и HPV вакцины. Количество также может различаться в зависимости от числа типов ВПЧ. Подходяще осуществляют доставку количества вакцины, подходящего для генерации иммунологически защитного ответа. Подходяще каждая доза вакцины содержит 1-100 мкг каждой ВПЧ, предпочтительно 5-80 мкг, более предпочтительно 5-30 мкг каждой ВПЧ, наиболее предпочтительно 5-20 мкг каждой ВПЧ, особенно предпочтительно 5, 6, 10, 15 или 20 мкг. Для всех вакцин по изобретению предпочтительно, чтобы вакцину применяли для вакцинации девушек-подростков в возрасте 10-15, предпочтительно 10-13 лет. Вакцину также можно вводить женщинам после ненормального РАР мазка (мазка по Папаниколау) или после оперативного вмешательства после удаления поражения, вызванного HPV, или тем, которые имеют серонегативную реакцию и ДНК негативную реакцию на раковые типы HPV. Предпочтительно вакцину доставляют в 2 или 3 дозовом режиме, например 0, 1 месячном режиме или 0, 1 и 6 месячном режиме соответственно. Подходяще режим вакцинации включает бустер-инъекцию через 5-10 лет, предпочтительно 10 лет. Предпочтительно вакцина представляет собой жидкий вакцинный препарат, хотя вакцина может быть лиофилизована и повторно восстановлена перед введением. Предпочтительно иммуноген, используемый в настоящем изобретении (ВПЧ HPV 16 или HPV 18),используют в качестве вакцины, и он может быть включен в вакцину с использованием соответствующих эксципиентов. Таким образом, изобретение в особенности относится к применению вакцины HPV 16 или HPV 18, такой как вакцина только из L1, в предупреждении инфекции HPV. Настоящее изобретение проиллюстрировано здесь со ссылкой на следующий неограничивающий пример. Пример. Здоровые женщины в возрасте между 15 и 25 годами были иммунизированы смесью ВПЧHPV 16 и HPV 18 L1. Женщины в момент включения имели: 1) серонегативную реакцию на HPV 16 иHPV 18; 2) негативную реакцию на высокий риск инфекции HPV шейки матки (определено путем HPV ПЦР; 3) 6 или менее сексуальных партнеров в течение жизни и 4) нормальные РАР мазки. Смесь содержала на 0,5 мл дозу 20 мкг ВПЧ HPV-16 L1, 20 мкг ВПЧ HPV-18 L1 и 500 мкг гидроксида алюминия и 50 мкг 3D MPL в качестве адъюванта. Группе плацебо делали инъекции 500 мкг одного гидроксида алюминия. Оценивали эффективность вакцины (V.E.) в отношении типов HPV с высоким риском рака, при этом V.E. представляет собой улучшение защиты против инфекции, осуществляемой вакциной, по сравнению с группой плацебо, выраженное в %. Перекрестный иммунитет оценивали путем определения присутствия нуклеиновой кислоты, специфической для разных онкогенных типов, среди вакцинируемых и в контрольной группе. Определение проводили, используя методики, описанные в WO 03014402 и ссылках в ней, особенно для неспецифической амплификации ДНК HPV и последующего определения типов ДНК с использованием системыLiPA, как описано в WO 99/14377 и в Kleter et al., [Journal of Clinical Microbiology (1999), 37(8): 25082517], которые полностью включены сюда посредством ссылки. Однако для определения ДНК HPV в образце может быть использован любой подходящий способ,такой как типоспецифическая ПЦР с использованием праймеров, специфичных для каждого целевого типа HPV. Подходящие праймеры известны специалистам или могут быть легко сконструированы при условии, что известны последовательности онкогенных типов HPV. Была оценена эффективность вакцины против инфекций, вызванных всеми 12 типами с высоким риском рака, типами, филогенетически родственных HPV 16 (группы 31, 35 и 58; 31, 33, 35, 52 и 58) и типами, филогенетически родственных HPV 18 (45 и 59). Первичный анализ проводили на "ITT" (Intention To Treat, группе с намерением лечения, представляющей собой всех пациентов, которые получали по меньшей мере одну дозу вакцины). Эти данные показаны в табл. 1. Результаты, представленные в табл. 2 и 3, относятся к группе "АТР" (According To Protocol, соответствующие протоколу) для тех пациентов, которые соответствовали всем критериям исследования. Табл. 2 представляет собой анализ средних точек, причем данные были получены от всех пациентов в момент времени, когда по меньшей мере для 50% группы прошло 18 месяцев после их первой вакцинации. Табл. 3 предоставляет конечные результаты, причем все данные были получены от субъектов через 18 месяцев после первой вакцинации (месяц 0). В группе АТР все пациенты получали 3 дозы вакцины в 0, 1 и 6 месяцы и имели серонегативную реакцию на 6 месяце.-7 009179 Как демонстрируют данные, представленные в табл. 1, иммунизация смесью ВПЧ HPV 16 и HPV 18 обеспечила явный перекрестный иммунитет к другим типам HPV. На этой точке размеры образцов слишком малы для получения точного статистического анализа, но данные демонстрируют положительную тенденцию и свидетельствуют о том, что иммунизация ВПЧ HPV 16 и HPV 18 является эффективной против инфекции, вызванной другими типами HPV. Это было подтверждено в ходе исследования. Табл. 2 демонстрирует, что HPV 16 и HPV 18 обеспечивают статистически значимый перекрестный иммунитет к группе типов с высоким риском рака 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68. Табл. 3 демонстрирует, что кроме типов, родственных HPV-18 (которые демонстрируют очень сильную тенденцию), имеется статистически значимый перекрестный иммунитет к группам: HPV 31, 35,58; HPV 31, 33, 35, 52, 58, и 12 проанализированных типов с высоким риском (не HPV-16/18). Таблица 1 Образцы отбирали у пациентов на 9, 12, 15 и 18 месяцах и тестировали на инфекцию HPV, вызванную типами,указанными выше. Табл. 2 - эффективность вакцины в предупреждении случаев гетерологичных инфекций после трех доз. Таблица 2 Эффективность вакцины против инфекции, вызванной типами, филогенетически родственными HPV-16,типами, филогенетически родственными HPV-18, типами, филогенетически родственными HPV-16 и/илиn = число субъектов со случаем инфекции HPVAR = Степень заболевания = n/N 95% Cl = 95% доверительный интервал нижний предел = 1-exp(log(arv/arp)+1,96 sqrt(1/nv-1/Nv+1/np-1/Np верхний предел = 1-exp(log(arv/arp)-1,96 sqrt(1/nv-1/Nv+1/np-1/Np когда число случаев в группе вакцины = 0: нижний предел = 1-exp(log(arv/arp)+1,96 sqrt(1/(nv+0,5)-1/(Nv+0,5)+1/(np+0,5)-1/(Np+0,5 верхний предел = 1-exp(log(arv/arp)-1,96 sqrt(1/(nv+0,5)-1/(Nv+0,5)+1/(np+0,5)-1/(Np+0,5, гдеarv = степень заболевания среди реципиентов вакциныarp = степень заболевания среди реципиентов плацебоnv = число случаев среди реципиентов вакциныNv = число случаев и не случаев среди реципиентов вакциныnp = число случаев среди реципиентов плацебоNp = число случаев и не случаев среди реципиентов плацебо Родственные HPV-16: филогенетически родственные HPV-16 типы 35, 31, 58 без рассмотрения других типов HPV Родственные HPV-16: филогенетически родственные HPV-16 типы 35, 31, 58, 33, 52 без рассмотрения других типов HPV Родственные HPV-18: филогенетически родственные HPV-18 типы 45, 59 без рассмотрения других типов HPV Родственные HPV-16 и/или HPV-18: филогенетически родственные HPV-16 и/или HPV-18 типы 35,31, 58, 45, 59 без рассмотрения других типов HPV Родственные HPV-16 и/или HPV-18: филогенетически родственные HPV-16 и/или HPV-18 типы 35, 31, 58, 33, 52, 45, 59 без рассмотрения других типов HPV= Типы с высоким риском, исключая HPV-16 и HPV-18 Таблица 3 Образцы отбирали у пациентов на 18 месяце и тестировали на инфекцию HPV, вызванную типами, указанными выше. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение композиции, содержащей вирусоподобные частицы (ВПЧ) вируса папилломы человека (HPV) 16 и HPV 18, в изготовлении лекарственного средства для предупреждения инфекции и/или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы онкогенных типов HPV,причем из группы исключены типы HPV 16 и HPV 18. 2. Применение композиции по п.1 для предупреждения инфекции и/или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы типов HPV 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68. 3. Применение по п.2 для предупреждения инфекции и/или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы HPV 31, HPV 33, HPV 35, HPV 52 и HPV 58. 4. Применение по п.3 для предупреждения инфекции и/или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы HPV 31, HPV 35 и HPV 58. 5. Применение по любому из пп.1-4, где степень предупреждения определяют путем сравнения вакцинированной популяции с невакцинированной популяцией (группой плацебо) относительно всех членов группы типов HPV. 6. Применение по любому из пп.1-5, где ВПЧ HPV объединены с адъювантом. 7. Применение по п.6, где адъювант представляет собой комбинацию соли алюминия и 3-Одеацилированного монофосфориллипида A (3D-MPL). 8. Применение по п.7, где адъювант представляет собой комбинацию гидроксида алюминия и 3DMPL. 9. Применение по п.8, где композиция содержит 20 мкг L1 ВПЧ HPV 16 и 20 мкг ВПЧ HPV 18, а адъювант содержит 500 мкг гидроксида алюминия и 50 мкг 3D-MPL. 10. Применение по любому из пп.1-9, где ВПЧ содержат белок L1 или его иммуногенный фрагмент,но не белок L2. 11. Способ индукции иммунного ответа против одного или более чем одного типа HPV из группы онкогенных типов HPV, причем из группы исключены типы HPV 16 и HPV 18, который включает введение субъекту композиции, содержащей ВПЧ HPV 16 и ВПЧ HPV 18. 12. Способ предупреждения инфекции и/или заболевания, вызываемых одним или более чем одним типом HPV из группы онкогенных типов HPV, причем из группы исключены типы HPV 16 и HPV 18,который включает введение субъекту композиции, содержащей ВПЧ HPV 16 и ВПЧ HPV 18.-9 009179 13. Способ по п.11 или 12, где типы HPV выбраны из группы, состоящей из типов 31, 33, 35, 39, 45,51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68. 14. Способ по любому из пп.11-13, где типы HPV выбраны из группы, состоящей из HPV типовHPV 31, HPV 33, HPV 35, HPV 52 и HPV 58. 15. Способ по любому из пп.11-14, где типы HPV выбраны из группы, состоящей из HPV 31, HPV 35 и HPV 58. 16. Способ по любому из пп.11-15, где композиция дополнительно содержит адъювант. 17. Способ по п.16, где адъювант содержит соль алюминия и 3D-MPL. 18. Способ по п.17, где соль алюминия представляет собой гидроксид алюминия.