Способ диагностики обострения или ремиссии приобретенных иммунодефицитных и аутоиммунных заболеваний

1 Изобретение относится к области медицины и, в частности, касается вопросов диагностики обострения, ремиссии приобретенных дефицитных и аутоиммунных заболеваний (хронический билиарный цирроз печени /ХБЦП/, хронический активный В гепатит /ХАВГ/, рассеянный склероз /PC/) по выделению долихолов с мочей/ДМ/ /1, 2/. Цель изобретения - повышение достоверности диагностики путем разработки способа диагностического критерия обострения или наступления ремиссии приобретенных иммунодефицитных и аутоиммунных заболеваний(ХБЦП, ХАВГ, PC), который включает в себя наряду со стандартной клинической диагностикой определение выделения ДМ, и в случае увеличения его выделения более 15 мкг/ммоль по креатинину диагностирование обострения заболевания, затем применяя соответствующие дозы соединения "Ропрен", компенсацию потери долихолов с последующей нормализацией выделения ДМ (менее 15 мкг/ммоль по креатинину) и диагностирование ремиссии заболевания, которая подтверждается клинически. Приобретенные иммунодефицитные и аутоиммунные заболевания в структуре заболеваний занимают одно из ведущих мест, к тому же,подавляющее большинство из них не имеют достаточно простых и четких диагностических критериев обострения или наступления ремиссии заболевания. Соответственно экономические и социальные потери не поддаются достаточно эффективному контролю. Для компенсации потери долихолов применяют соединение "Ропрен" с углеродной цепью, состоящей из 50 и более атомов углерода,имеющих следующую формулу где n - число изопреновых единиц от 8 до 18 /3/. Соединение "Ропрен" - получают из хвои сосны (Pinus silvetris) и ели (Picea abies), которое рассматривается как новый класс низкомолекулярных биорегуляторов, превращающийся в организме человека в долихол - длинноцепочный полипренол, содержащий -насыщенную изопреновую единицу, и участвует в процессе биосинтеза полисахаридов, гликопротеинов и подобных им углеводосодержащих биополимеров /4, 5/. Соединение "Ропрен" - это маслянистый оранжево-желтый продукт со специфическим запахом, содержащий полипренолы не менее 95%, с плотностью 0,902 г/см 3. Выделение долихолов происходит через мочевыводящую систему. Нормальный уровень долихолов в моче составляет 6-15 мкг/ммоль креатинина. Соединение "Ропрен" прошло все стадии доклинической апробации и Фармакологический, и Фармакопейный комитет Министерства 2 Благосостояния Латвийской Республики разрешил его клиническую апробацию (протокол 7 от 10.07.1995 г.) (см. приложение) /6/. Материалы и методы Исследовались выделения долихолов в моче у контрольной группы (10 здоровых добровольцев) и у больных с верифицированными диагнозами ХБЦП, ХАВГ, PC. 1. Диагностика обострения/ремиссии у больных хроническим билиарным циррозом,хроническим В активным гепатитом. Исследовалась возможность диагностики обострения/ремиссии у 10 больных ХБЦП и у 10 ХАВГ. Диагнозы упомянутых заболеваний были подтверждены морфологически. Во время исследования у всех больных и контрольной группы проводили (до исследования, через 1 месяц лечения и через 1 месяц после окончания лечения) осмотр и оценку состояния пациентов по следующим критериям: признаки интоксикации (слабость, пониженный аппетит, рвота, tС тела); признаки холестаза (кожный зуд, размеры печени, кровоизлияния, метеоризм), а также определение- показателей функционального состояния печени /ПФСП/ (в сыворотке крови): 1. билирубина (Бл) /7/; 2. общего белка (ОБ) /8/; 3. альбумина (Алб) /9/; 4. -глобулина (ГГ) /9/; 5. аланинаминотрансферазы (АлАТ) /10/; 6. щелочной фосфатазы (ЩФ) /11/ (не определялся как несущественный показатель при ХАВГ);- уровня долихолов в моче (ДМ) /1,2/. Полученные результаты обрабатывали на ЭВМ общепринятыми методами вариационной статистики. Больные получали соединение "Ропрен" в дозе 35 мг в течение 1 месяца (30 дней). 1.1. Хронический, билиарный цирроз печени. В время исследования у больных с обострением ХБЦП проводили определение в сыворотке крови содержания Бл, ОБ, Алб, ГГ, АлАТ,ЩФ, содержания ДМ (см. табл. 1), а также осмотр и оценку состояния пациентов на признаки интоксикации и холестаза. Как свидетельствуют результаты исследований, приведенные в табл. 1, до исследования у больных ПФСП были патологически изменены и выделение ДМ повышено. Через 1 месяц после приема СР нормализация выделения ДМ и улучшение всех ПФСП. Затем через 1 месяц без приема СР значения ПФСП и ДМ практически не изменились, т.е. остались стабильными. Клинические наблюдения у больных ХБЦП подтверждали наступление ремиссии заболевания(исчезновение признаков интоксикации и холестаза) у всех больных через 1 месяц приема СР Таблица 1 Показатели функционального состояния печени и содержания долихола в контрольной группе и у пациентов, получавших ропрен (Хm) Группа Название Через 1 мес. До исследования Через 1 мес. пациентов анализа после исследования Ропрен Билирубин 117,626,1 мкмоль/л 51,89,2 мкмоль/л 47,64,2 мкмоль/л Щелочная 1182178,5 МЕ/л 396,548,4 МЕ/л 390,839,3 МЕ/л фосфатаза АлАТ 74,39 МЕ/л 49,710,2 МЕ/л 50,38,1 МЕ/л Общий белок 50,17,4 г/л 55,45,6 г/л 57,53,9 г/л Альбумины 38,29,6 % 50,13,4 % 52,44,0 % 29,75,9 % 13,21,5 % 13,71,6 % и ее стабильности в течение последующего месяца без СР, т.е. у больных ХБЦП наступила клинически и биохимически подтвержденная ремиссия заболевания. Вывод: диагностический критерий - повышение уровня ДМ (более 15 мкг/ммоль по креатинину) позволяет достоверно диагностировать обострение, а нормализация показателя ДМ (6-15 мкг/ммоль по креатинину) ремиссию ХБЦП. 1.2. Хронический активный В гепатит. Во время исследования у больных с обострением ХАВГ проводили определение в сыворотке крови содержания Бл, ОБ, Алб, ГГ, АлАТ,содержания ДМ (см. табл. 2), а также осмотр и оценку состояния пациентов на признаки интоксикации и холестаза. Результаты исследований, приведенные в табл. 2, показали, что у больных ПФСП патологически изменены, а уровень ДМ повышен. Через 1 месяц после приема СР уровень ДМ и ПФСП нормализовались (за исключением Бл,уровень которого заметно снизился). Через 1 месяц после окончания приема СР все значения ПФСП и уровень ДМ остались стабильными. В то же время клинические наблюдения продемонстрировали у больных ХАВГ до начала исследования признаки холестаза, интоксикации,затем их исчезновение через 1 месяц после приема СР и стабильности удовлетворительного состояния больных через 1 месяц после окончания приема СР, т.е. наступила клиническая и биохимическая ремиссия заболевания. Вывод: диагностический критерий - повышение уровня ДМ (более 15 мкг/ммоль по креатинину) позволяет достоверно диагностировать обострение, а нормализация показателя ДМ (6-15 мкг/ммоль по креатинину) ремиссию ХАВГ. 2. Диагностика обострения/ремиссии у больных рассеянным склерозом. Таблица 2 Показатели функционального состояния печени и содержания долихола в контрольной группе и у больных хроническим активным В гепатитом, получавших соединение "Ропрен" (Хm) Группа Название Через 1 мес. после До исследования Через 1 мес. п/п пациентов анализа исследования 1. Ропрен Билирубин 58,95,3 мкмоль/л 40,34,8 мкг/ммоль 38,03,9 мкг/ммоль АлАТ 416,557,7 МЕ 108,618,6 ME 102,715,3 ME Общий белок 46,28,0 г/л 55,45,6 г/л 56,24,7 г/л Альбумины 40,38,1 % 50,13,4 % 52,05,4 % 32,77,6 % 16,63,5 % 14,32,2 % Исследовалась возможность диагностики обострения/ремиссии у 9 больных PC (длительность заболевания не более 5 лет, состояние больного по шкале Kurtzke не выше 5 баллов,диагноз был подтвержден методом магнитноядерного резонанса). Контрольная группа состояла из 10 здоровых добровольцев. Во время исследования (до исследования,через 6 месяцев, 1 год и через 6 месяцев после ее окончания) проводили определение уровня ДМ и оценивали состояние больного по шкалеKurtzke от 0 до 10 баллов (см. табл. 3). Больные получали соединение "Ропрен" в дозе 35 мг в течение 1 года. Результаты исследований, приведенные в табл. 3, показали, что выделение ДМ повышено у всех больных рассеянным склерозом, а состояние больных оценивалось по шкале Kurtzke 4,50,5 баллов. Применение СР через 6 месяцев снизило выделение ДМ примерно в 3 раза и улучшило состояние больных до 31 баллов, а через 1 год нормализовался уровень ДМ, состояние больных оценивалось в 10,5 балла, т.е. наступила клинически подтвержденная ремиссия, которая оставалась стабильной в течение последующих 6 месяцев наблюдения. Вывод: диагностический критерий - повышение уровня ДМ (более 15 мкг/ммоль по креатинину) позволяет достоверно диагностировать обострение, а нормализация показателя ДМ (6-15 мкг/ммоль по креатинину) ремиссию Таблица 3 Показатели состояния пациентов по оценочной шкале Kurtzke и уровень содержания долихолов в моче (Xm). Группа Через 6 мес. Метод исследования До исслед. Через 6 мес. Через 1 год пациентов после исслед. Ропрен- Annu Rev. Biochem., 1976, 45, pp. 95-112. 6. Рубенс Ю.П. и др. Материалы доклинических экспериментальных исследований пренолов (ропрена). 1994, Рига, с. 218. 7. Методические указания по применению унифицированных клинических лабораторных методов исследований. M., 1973, с. 84. 8. Слуцкий Л.И. Определение содержания белка в сыворотке крови биуретовым методом. Лаб. дело, 1964,9, с. 25-27.Clin. Pathol, 1957, v. 28,1, pp. 57-63. 11. Покровский А.А. Современные методы в биохимии. M., 1969, вып. 2, с. 5-20. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ диагностики обострения или ремиссии приобретенных иммунодефицитных и аутоиммунных заболеваний, включающий определение содержания долихола в моче по клиренсу креатинина и диагностирование обострения заболевания при определении долихола более 15 мкг/ммоль, отличающийся тем, что, с целью повышения достоверности диагностики,вводят ежедневно в дозе не менее 0,5 мг/кг соединение "Ропрен", состоящее из 50 и более атомов углерода, имеющее следующую химическую формулу: где n - число изопреновых единиц от 8 до 18,затем не менее чем через 30-40 дней повторно определяют содержание долихола в моче по клиренсу креатинина и при его содержании ме 8 нее 15 мкг/ммоль диагностируют ремиссию заболевания.