Бетаины, используемые в качестве адъювантов для проверки чувствительности и антимикробной терапии
Формула / Реферат
1. Способ определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам, предусматривающий приведение микроорганизма, имеющего на своей внешней мембране структуры миколевой кислоты, в контакт с композицией, содержащей антибиотик и бетаиноподобный детергент, с последующей оценкой чувствительности указанного микроорганизма к указанному антибиотику на основе жизнеспособности указанного микроорганизма в указанной композиции.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный бетаиноподобный детергент выбран из группы, включающей СВ-подобные, SB-подобные, HSB-подобные, РВ-подобные, CtB-подобные, РhВ-подобные, SoB-подобные, RevB-подобные, АО-подобные, сАВ-подобные и ImB-подобные детергенты.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что указанный СВ-подобный детергент имеет структуру
где R1 является C8-C22;
a является -СН2-,-СН(ОН)-, -(CO)-NH-CH2СН2СН2-, -О- или -С(O)-;
n является 0 или 1;
b является -NЕ -, -РЕ - или -SЕ -;
R2 является -H, -СН3-, -С2Н5-, -С3Н7- или -С4Н9-;
R3 является -Н, -CH3-, -С2Н5-, -С3Н7- или -С4Н9-;
R4 является -СН2-, -С2H4-, -С3H6-, -C4H8-, -C5H10-, -C6H12-, -CH2-C6H4-, -СmН2m-, -СН(ОН)СН2 СН2-, -СН2 СН(ОН) СН2- или -СmH2m-1(ОН)-, где m _ 1;
g является -COOQ .
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что указанный бетаиноподобный детергент выбран из группы, включающей
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 693-33-4),
кококарбоксиметилбетаин и CASR No. 68424-94-2),
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-9-октадеценаминиум, внутреннюю соль (CASR No.871-37-4),
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-3-((1-оксооктадецил)амино)-1-пропанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.6179-44-8),
3-амино-N(карбоксиметил)-N,N-диметил-1-пропанаминиум N-C8-C22ацилпроизводные, внутреннюю соль (CASR No.840-44-0),
N-(карбоксиметил)-3-((12-гидрокси-1-оксо-9-окстадеценил)амино)-N,N-диметил-1-пропанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71850-81-2),
кокоамидопропил карбоксиметилбетаин (CASRNo.61789-39-7 и CASR No.61789-40-0),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 16527-85-8),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-тридеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 132621-79-5),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-тетрадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.69725-38-3),
N-(2-кapбoкcиэтил)-N,N-димeтил-1-гeкcaдeкaнaминиyм, внутреннюю соль (CASR No.42416-43-3),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.30612-73-8),
N-додецил-бета-аланин (CASR No.1462-54-0),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-ундеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.150147-53-8),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.15163-30-1),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-тетрадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.146959-90-2),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-пентадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.146959-91-3),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-32-4),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.78195-27-4),
N-(4-карбоксибутил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.120139-51-7),
N-(5-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.76392-97-7),
N-(5-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.73565-98-7),
N-(6-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.132621-80-8),
4-карбокси-N-додецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-31-3),
2-карбокси-N-додецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-34-6),
4-карбокси-N-гексадецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-33-5),
2-карбокси-N-гексадецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-35-7),
жирный глицинат (CASR No.707-46-8),
сойамидопропил карбоксиметилбетаин и
бабассуамидопропил карбоксиметилбетаин.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что указанный карбоксибетаин является N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиумом, внутренней солью (СВ-18) (CASR No.78195-27-4).
6. Способ по п.2, отличающийся тем, что указанный SB-подобный детергент выбран из группы, включающей SB-18, SB-16, SB-14 и SB-12.
7. Способ по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что указанная композиция содержит два или более бетаиноподобных детергента.
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный антибиотик является представителем класса, выбранного из группы, включающей b -лактамный антибиотик, аминогликозид, аминоциклитол, хинолон, тетрациклин, макролид, линкозамид, гликопептид, липопептид, полипептидный антибиотик, сульфонамид, триметоприм, хлорамфеникол, изониазид, нитроимидазол, рифампицин, нитрофуран, метенамин и мупироцин.
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что указанный b -лактамный антибиотик выбран из группы, включающей пенициллиновые, цефалоспориновые, монобактамные и карбапенемные антибиотики.
10. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанный пенициллин выбран из группы, включающей азлоциллин, метициллин, нафциллин, клоксациллин, диклоксациллин, оксациллин, ампициллин, бакампициллин, карбенициллин, трикарциллин, мезлоциллин и пиперациллин.
11. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанный цефалоспорин выбран из группы, включающей цефокситин, цефоперазон, цефтазидим, цефтриаксон, цефадроксил, цефазолин, цефалексин, цефалоридин, цефалотин, цефапирин, цефрадин, цефаклор, цефамандол, цефоницид, цефоранид, цефпрозил, цефуроксим, лоракарбеф, цефметазол, цефотетан, цефиксим, цефотаксим, цефподоксим и цефтизоксим.
12. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанный монобактам является азтреонамом.
13. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанный карбапенем выбран из группы, включающей имипенем, меропенем, панипенем и биапенем.
14. Способ по любому из пп.8-13, отличающийся тем, что указанная композиция также содержит ингибитор b -лактамазы.
15. Способ по п.14, отличающийся тем, что указанный ингибитор b -лактамазы выбран из группы, включающей клавуланиковую кислоту, сульбактам и тазобактам.
16. Способ по п.8, отличающийся тем, что указанный антибиотик является аминогликозидом или аминоциклитолом.
17. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанные аминогликозид или аминоциклитол выбраны из группы, включающей стрептомицин, канамицин, гентамицин, тобрамицин, амикацин, сисомицин, нетилмицин, неомицин, фрамицетин и паромомицин.
18. Способ по п.8, отличающийся тем, что указанный хинолон выбран из группы, включающхщ наладиксиковую кислоту, оксолиниковую кислоту, циноксацин, флумеквин, милоксацин, розоксацин, пипемидиковую кислоту, норфлоксацин, эноксацин, ципрофлоксацин, офлоксацин, ломефлоксацин, темафлоксацин, флероксацин, пефлоксацин, амифлоксацин, спарфлоксацин, левофлоксацин, клинафлоксацин.
19. Способ по п.8, отличающийся тем, что указанный макролид выбран из группы, включающей эритромицин, олеандомицин, спирамицин, йозамицин, розарамицин, кларитромицин, азитромицин, диритромицин, рокситромицин, флуритромицин и рокитамицин.
20. Способ по п.8, отличающийся тем, что композиция содержит два или более антибиотика.
21. Способ по п.20, отличающийся тем, что указанные антибиотики являются сульфонамидом и триметопримом.
22. Способ по п.21, отличающийся тем, что указанный сульфонамид является сульфаметоксазолом.
23. Способ по п.8, отличающийся тем, что указанный рифампицин выбран из группы, включающей рифампин, рифамицин SV, рифамицин В (рифамид) и рифабутин.
24. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный антибиотик выбран из группы, включающей амикацин, азитромицин, любой b -лактам в сочетании с любыми ингибиторами b -лактамазы, капреомицин, цефметазол, цефокситин, ципрофлоксацин, кларитромицин, клофазамин, циклосерин, дапзон, эритромицин, этамбутол, этионамид, имипенем, изониазид, канамицин, миноциклин, офлоксацин, парааминосалициловую кислоту, протионамид, пиразинамид, рифампин, рифабутин, спарфлоксацин, сульфаметоксазол в сочетании с триметопримом, стрептомицином, тетрациклином, триацетазолом и виомицином.
25. Способ антимикробной терапии инфицированного микроорганизмом больного или человека, подвергающегося риску инфекции микроорганизмом, имеющим на внешней мембране структуры миколевой кислоты, предусматривающий совместное введение данному больному бетаиноподобного детергента и антибиотика в таком количестве и на протяжении такого времени, которые достаточны чтобы убить указанный микроорганизм.
26. Способ по п.25, отличающийся тем, что указанный бетаиноподобный детергент выбран из группы, включающей СВ-подобные, SB-подобные, HSB-подобные, РВ-подобные, CtB-подобные, PhB-подобные, SoB-подобные, RevB-подобные, АО-подобные, сАВ-подобные и ImB-подобные детергенты.
27. Способ по п.26, отличающийся тем, что указанный СВ-подобный детергент имеет структуру
где R1 является С8-С22;
a является -СН2-,-СH(ОН)-, -(CO)-NH-CH2 СН2 СН2-, -О- или -С(O)-;
n является 0 или 1;
b является -NЕ -, -pЕ - или -SЕ -;
R2 является -Н, -СН3-, -С2H5-, -С3H7- или -C4Н9-;
R3 является -Н, -СН3-, -C2H5-, -C3H7- или -С4Н9-;
R4 является -СН2-, -С2H4-, -С3Н6-, -C4H8-, -С5Н10-, -С6H12-, -СH2-С6H4-, -СmH2m-, -СН(ОН)СН2СН2-, -СН2 СН(ОН) СН2-, или -CmH2m-1 (OH)-, где m_ 1;
g является -COOQ .
28. Способ по п.27, отличающийся тем, что указанный СВ-подобный детергент выбран из группы, включающей
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 693-33-4),
кококарбоксиметилбетаин и CASR No. 68424-94-2),
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-9-октадеценаминиум, внутреннюю соль (CASR No.871-37-4),
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-3-((1-оксооктадецил)амино)-1-пропанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.6179-44-8),
3-амино-N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-1-пропанаминиум N-C8-C22ацилпроизводные, внутреннюю соль (CASR No.840-44-0),
N-(карбоксиметил)-3-((12-гидрокси-1-оксо-9-окстадеценил)амино)-N,N-диметил-1-пропанаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 71850-81-2),
кокоамидопропилкарбоксиметилбетаин (CASR No.61789-39-7 и CASR No.61789-40-0),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 16527-85-8),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-тридеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 132621-79-5),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-тетрадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 69725-38-3),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 42416-43-3),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 30612-73-8),
N-додецил-бета-аланин (CASR No.1462-54-0),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-ундеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 150147-53-8),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CAS RNo. 15163-30-1),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-тетрадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.146959-90-2),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-пентадеканаминиум, внутреннюю соль (CAS RNo.146959-91-3),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-32-4),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.78195-27-4),
N-(4-карбоксибутил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 120139-51-7),
N-(5-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 76392-97-7),
N-(5-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 73565-98-7),
N-(6-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 132621-80-8),
4-карбокси-N-додецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 71695-31-3),
2-карбокси-N-додецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-34-6),
4-карбокси-N-гексадецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-33-5),
2-карбокси-N-гексадецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-35-7),
жирный глицинат (CASR No.707-46-8),
сойамидопропил карбоксиметилбетаин и
бабассуамидопропилкарбоксиметилбетаин.
29. Способ по п.28, отличающийся тем, что указанный карбоксибетаин является N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиумом, внутренней солью (СВ-18) (CASR No. 78195-27-4).
30. Способ по п.26, отличающийся тем, что указанный SB-подобный детергент выбран из группы, включающей SB-18, SB-16, SB-14 и SB-12.
31. Способ по любому из пп.26-30, отличающийся тем, что больному вводят два или более бетаиноподобных детергента.
32. Способ по п.25, отличающийся тем, что указанный антибиотик является членом класса, выбранного из группы, включающей b -лактамный антибиотик, аминоциклитол, хинолон, тетрациклин, макролид, линкозамид, гликопептид, липопептид, полипептидный антибиотик, сульфонамид, триметоприм, хлорамфеникол, изониазид, нитроимидазол, рифампицин, нирофуран, метенамин и мупироцин.
33. Способ по п.32, отличающийся тем, что указанный b -лактамный антибиотик выбран из группы, включающей пенициллиновые, цефалоспориновые, монобактамные и карбапенемные антибиотики.
34. Способ по п.33, отличающийся тем, что указанный пенициллин выбран из группы, включающей азлоциллшэ, метициллин, нафциллин, клоксациллин, диклоксациллин, оксациллин, ампициллин, бакампициллин, карбенициллин, трикарциллин, мезлоциллин, пенициллин и пиперациллин.
35. Способ по п.33, отличающийся тем, что указанный цефалоспорин выбран из группы, включающей цефокситин, цефоперазон, цефтазидим, цефтриаксон, цефадроксил, цефазолин, цефалексин, цефалоридин, цефалотин, цефапирин, цефрадин, цефаклор, цефамандол, цефоницид, цефоранид, цефпрозил, цефуроксим, лоракарбеф, цефметазол, цефотетан, цефиксим, цефотаксим, цефподоксим и цефтизоксим.
36. Способ по п.33, отличающийся тем, что указанный монобактам является азтреонамом.
37. Способ по п.33, отличающийся тем, что указанный карбапенем выбран из группы, включающей имипенем, меропенем, панипенем и биапенем.
38. Способ по любому из пп.32-37, отличающийся тем, что указанный способ также включает введение больному ингибитора b -лактамазы.
39. Способ по п.38, отличающийся тем, что указанный ингибитор b -лактамазы выбран из группы, включающей клавуланиковую кислоту, сульбактам и тазобактам.
40. Способ по п.32, отличающийся тем, что указанный антибиотик является аминогликозидом или аминоциклитолом.
41. Способ по п.40, отличающийся тем, что указанные аминогликозид или аминоциклитол выбраны из группы, включающей стрептомицин, канамицин, гентамицин, тобрамицин, амикацин, сисомицин, нетилмицин, неомицин, фрамицетин и паромомицин.
42. Способ по п.32, отличающийся тем, что указанный хинолон выбран из группы, включающей наладиксиковую кислоту, оксолиниковую кислоту, циноксацин, флумеквин, милоксацин, розоксацин, пипемидиковую кислоту, норфлоксацин, эноксацин, ципрофлоксацин, офлоксацин, ломефлоксацин, темафлоксацин, флероксацин, пефлоксацин, амифлоксацин, спарфлоксацин, левофлоксацин и клинафлоксацин.
43. Способ по п.32, отличающийся тем, что указанный макролид выбран из группы, включающей эритромицин, олеандомицин, спирамицин, йозамицин, розарамицин, кларитромицин, азитромицин, диритромицин, рокситромицин, флуритромицин и рокитамицин.
44. Способ по п.32, отличающийся тем, что композиция содержит два или более антибиотика.
45. Способ по п.44, отличающийся тем, что указанные антибиотики являются сульфонамидом и триметопримом.
46. Способ по п.45, отличающийся тем, что указанный сульфонамид является сульфаметоксазолом.
47. Способ по п.32, отличающийся тем, что указанный рифампицин выбран из группы, включающей рифампин, рифамицин SV, рифамицин В (рифамид) и рифабутин.
48. Способ по п.25, отличающийся тем, что указанный антибиотик выбран из группы, включающей амикацин, азитромицин, любой b -лактам в сочетании с любыми ингибиторами b -лактамазы, капреомицин, цефметазол, цефокситин, ципрофлоксацин, кларитромицин, клофазамин, циклосерин, дапзон, эритромицин, этамбутол, этионамид, имипенем, изониазид, канамицин, миноциклин, офлоксацин, парааминосалициловую кислоту, протионамид, пиразинамид, рифампин, рифабутин, спарфлоксацин, сульфаметоксазол в сочетании с триметопримом, стрептомицином, тетрациклином, триацетазолом и виомицином.
49. Способ по п.1 или 25, отличающийся тем, что указанный микроорганизм является Mycobacterium.
50. Способ по п.49, отличающийся тем, что указанная Микобактерия выбрана из группы, включающей M.agri, M.abscessus, M.acetamidolyticum, M.africanum, M.aichiense, M.asiaticum, M.aurum, M.ausroafricanum, M.avium, M.bovis, M.bovis (BCG), M.chelonae, M.chitae, M.chubuense, M. cookii, M.diernhoferi, M.duvalii, M.fallax, M.farcinogenes, M.flavescens, M.fortuitum, M.gadium, M.gastri, M.gilvum, M.gordonae, M. haemophilium, M.intracellulare, M.kansasii, M.komossense, M.leprae, M.lepraemurium, M.marinum, M.malmoense, M.microti, M.moriokaense, M.neoaurum, M.nonchromogenicum, M.obuense, M.parafortuitum, M.paratuberculosis, M.peregrinum, M.phlei, M.porcinum, M.poriferae, M.pulveris, M.rhodesiae, M.scrofulaceum, M.senegalense, M.shimoidei, M.simiae, M.smegmatis, M.sphagni, M.szulgai, M.terrae, M.thermoresistible, M.tokaiense, M.triviale, M.tuberculosis, M.ulcerans, M.vaccae, M.xenopi.
51. Способ по п.50, отличающийся тем, что указанная Микобактерия является членом комплекса Mycobacterium tuberculosis (MTB).
52. Способ по п.51, отличающийся тем, что указанный микроорганизм является M.tuberculosis.
53. Способ по п.50, отличающийся тем, что указанный микроорганизм является членом комплекса Mycobacterium avium (MAC).
54. Способ по п.50, отличающийся тем, что указанный микроорганизм является членом группы MAIS.
55. Композиция для проверки чувствительности микроорганизмов, имеющих на своей внешней мембране структуры миколевой кислоты, к антибиотикам, отличающаяся тем, что содержит один или несколько антибиотиков в смеси с одним или несколькими бетаиноподобными детергентами.
56. Композиция по п.55, отличающаяся тем, что хотя бы один из бетаиноподобных детергентов выбран из группы, включающей СВ-подобные, SB-подобные, HSB-подобные, РВ-подобные, CtB-подобные, РhВ-подобные, SoB-подобные, RevB-подобные, АО-подобные, сАВ-подобные и ImB-подобные детергенты.
57. Композиция по п.56, отличающаяся тем, что указанный СВ-подобный детергент имеет структуру
где Ri является C8-C22;
a является -СН2-, -СH(ОН)-, -(CO)-NH-CH2СH2СН2-, -О- или -С(O)-;
n является 0 или 1;
b является -NЕ -, -РЕ -, или -SЕ -;
R2 является -Н, -CH3-, -С2H5-, -С3H7- или -С4Н9-;
R3 является -Н, -СН3-, -С2Н5-, -С3Н7- или -C4H9-;
R4 является -CH2-, -C2H4-, -C3H6-, -C4H8-, -C5H10-, -C6H12-, -CH2-C6H4-, -СmH2m-, -СН(ОН)СН2СН2-, -СН2СН(ОН)СН2- или -CmH2m-1 (OH)-, где m_ 1;
g является -СООQ .
58. Композиция по п.57, отличающаяся тем, что указанный СВ-подобный детергент выбран из группы, включающей
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (САSR Nо. 693-33-4),
кококарбоксиметилбетаин и CASR No. 68424-94-2),
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-9-октадеценаминиум, внутреннюю соль (CASR No.871-37-4),
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-3-((1-оксооктадецил)амино)-1-пропанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.6179-44-8),
3-амино-N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-1-пропанаминиум N-C8-C22ацилпроизводные, внутреннюю соль (CASR No.840-44-0),
N-(карбоксиметил)-3-((12-гидрокси-1-оксо-9-окстадеценил)амино)-N,N-диметил-1-пропанаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 71850-81-2),
кокоамидопропилкарбоксиметилбетаин (CASR No.61789-39-7 и CASR No.61789-40-0),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 16527-85-8),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-тридеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 132621-79-5),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-тетрадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 69725-38-3),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.42416-43-3),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 30612-73-8),
N-додецил-бета-алаэшэ (CASR No.1462-54-0),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-ундеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 150147-53-8),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 15163-30-1),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-тетрадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.146959-90-2),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-пентадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.146959-91-3),
N-(3-кapбoкcипpoпил)-N,N-димeтил-1-гeкcaдeкaнaминиyм, внутреннюю соль (CASR No.71695-32-4),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиум, внутреннюю соль CASR No.78195-27-4),
N-(4-карбоксибутил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 120139-51-7),
N-(5-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 76392-97-7),
N-(5-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 73565-98-7),
N-(6-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 132621-80-8),
4-карбокси-N-додецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 71695-31-3),
2-карбокси-N-додецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 71695-34-6),
4-карбокси-N-гексадецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-33-5),
2-карбокси-N-гексадецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-35-7),
жирный глицинат (CASR No.707-46-8),
сойамидопропил карбоксиметилбетаин и
бабассуамидопропил карбоксиметилбетаин.
59. Композиция по п.58, отличающаяся тем,что указанный карбоксибетаин является N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиумом, внутренней солью (СВ-18) (CASR No.78195-27-4).
60. Композиция по п.56, отличающаяся тем, что указанный SB-подобный детергент выбран из группы, включающей SB-18, SB-16, SB-14 и SB-12.
61. Композиция по любому из пп.55-60, отличающаяся тем, что указанная композиция содержит два или более бетаиноподобных детергента.
62. Композиция по п.55, отличающаяся тем, что указанный антибиотик является членом класса, выбранного из группы, включающей b -лактамный антибиотик, аминоциклитол, хинолон, тетрациклин, макролид, линкозамид, гликопептид, липопептид, полипептидный антибиотик, сульфонамид, триметоприм, хлорамфеникол, изониазид, нитроимидазол, рифампицин, нирофуран, метенамин и мупироцин.
63. Набор для определения чувствительности микроорганизмов, имеющих на внешней мембране структуры миколевой кислоты, к антибиотикам, отличающийся тем, что он содержит один или несколько бетаиноподобных детергентов и один или несколько антибиотиков в непосредственной близости или соседстве.
64. Набор по п.63, отличающийся тем, что хотя бы один из бетаиноподобных детергентов выбран из группы, включающей СВ-подобные, SB-подобные, HSB-подобные, РВ-подобные, CtB-подобные, PhB-подобные, SoB-подобные, RevB-подобные, АО-подобные, сАВ-подобные и ImB-подобные детергенты.
65. Набор по п.64, отличающийся тем, что указанный СВ-подобный детергент имеет структуру
где R1 является C8-C22;
a является -СН2-, -СН(ОН)-, -(СО)-NН-СН2СН2СН2-, -О- или -С(O)-;
n является 0 или 1;
b является -NЕ -, -PЕ - или -SЕ -;
R2 является -Н, -СН3-, -С2Н5-, -С3Н7- или -C4H9-;
R3 является -Н, -СН3-, -С2Н5-, -С3Н7- или -C4Н9-;
R4 является -СH2-, -С2H4-, -С3H6-, -C4H8-, -C5H10-, -С6H12-, -СH2-С6H4-, -CmH2m-, -СН(ОН)CH2CH2-, -CH2СН(ОН)СH2-, или -CmH2m-1 (OH)-, где m_ 1;
g является -СООQ .
66. Набор по п.65, отличающийся тем, что указанный СВ-подобный детергент выбран из группы, включающей
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 693-33-4),
кококарбоксиметилбетаин и CASR No. 68424-94-2),
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-9-октадеценаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 871-37-4),
N-(карбоксиметил)-N,N-диметил-3-((1-оксооктадецил)амино)-1-пропанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.6179-44-8),
3-амино-N(карбоксиметил)-N,N-диметил-1-пропанаминиум N-C8-C22ацилпроизводные, внутреннюю соль (CASR No.840-44-0),
N-(карбоксиметил)-3-((12-гидрокси-1-оксо-9-окстадеценил)амино)-N,N-диметил-1-пропанаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 71850-81-2),
кокоамидопропилкарбоксиметилбетаин (CASR No.61789-39-7 и CASR No.61789-40-0),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 16527-85-8),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-тридеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 132621-79-5),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-тетрадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 69725-38-3),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.42416-43-3),
N-(2-карбоксиэтил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 30612-73-8),
N-додецил-бета-аланин (CASR No.1462-54-0),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-ундеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 150147-53-8),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No. 15163-30-1),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-тетрадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.146959-90-2),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-пентадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.146959-91-3),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-32-4),
N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.78195-27-4),
N-(4-карбоксибутил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.120139-51-7),
N-(5-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.76392-97-7),
N-(5-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-гексадеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.73565-98-7),
N-(6-карбоксипентил)-N,N-диметил-1-додеканаминиум, внутреннюю соль (CASR No.132621-80-8),
4-карбокси-N-додецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-31-3),
2-карбокси-N-додецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-34-6),
4-карбокси-N-гексадецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-33-5),
2-карбокси-N-гексадецил-N,N-диметил-1-бензенметанаминиум, внутреннюю соль (CASR No.71695-35-7),
жирный глицинат (CASR No.707-46-8),
сойамидопропил карбоксиметилбетаин и
бабассуамидопропил карбоксиметилбетаин.
67. Набор по п.66, отличающийся тем, что указанный карбоксибетаин является N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиумом, внутренней солью (СВ-18) (CASR No.78195-27-4).
68. Набор по п.64, отличающийся тем, что указанный SB-подобный детергент выбран из группы, включающхщ SB-18, SB-16, SB-14 и SB-12.
69. Набор по любому из пп.63-68, отличающийся тем, что указанный набор содержит коллекцию различных бетаиноподобных детергентов.
70. Набор по п.63, отличающийся тем, что указанный антибиотик является представителем класса, выбранного из группы, включающей b -лактамный антибиотик, аминогликозид, аминоциклитол, хинолон, тетрациклин, макролид, линкозамид, гликопептид, липопептид, полипептидный антибиотик, сульфонамид, триметоприм, хлорамфеникол, изониазид, нитроимидазол, рифампицин, нитрофуран, метенамин и мупироцин.
Текст
1 Область, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к композициям и способам получения характеристик чувствительности бактерий, содержащих структуры миколевой кислоты. Заявленные в изобретении композиции и способы особенно применимы в качестве адъювантов при тестировании чувствительности и при антимикробной терапии, и наиболее применимы при тестировании и при терапии с использованием семейства (3 лактамных антибиотиков. Уровень техники Современные методы лечения больных,инфицированных бактериями, предусматривают выбор антибиотиков. Обычно лечение основывается на опыте врача. Попросту говоря, врач считает, что широкий спектр антибиотиков должен быть эффективен против большинства обычных инфекционных агентов, обуславливающих определенные симптомы у больного. Однако, в некоторых случаях выбор соответствующего терапевтического средства основывается на тестировании чувствительности. Тестирование чувствительности дает практикующему медику возможность определить какое терапевтическое средство с наибольшей вероятностью окажется эффективным при лечении конкретного патогена, а какие антимикробные агенты скорее всего окажутся бесполезными. Тестирование чувствительности служит важным инструментом, особенно когда у больного подтверждена микобактериальная инфекция, и, в частности, туберкулез (ТВ: вызванный бактериями комплекса Mycobacterium tuberculosis (MTB. Действующие федеральные правила предусматривают тестирование чувствительности при всех новых случаях ТВ (Tenover, F.C. et al.,Jour.Clin.Micro. 31:767-770 (1993. Тестирование чувствительности является неоценимым инструментом, на который рассчитывают практически все врачи при выборе соответствующей терапии антибиотиками для своих больных. Способы лечения бактериальных инфекций ограничены спектром активности конкретного соединения. Например, не все бактерии чувствительны к данному антимикробному соединению. Различные классы бактерий устойчивы к действию антибиотиков различных классов. Вообще говоря, спектр активности данного антибиотика приходится на отдельные группы в зависимости от класса организма, на который он действует (напр., антигрибковый против антибактериального, действующий на грамположительные бактерии против действующего на грамотрицательные бактерии). Антибиотики проявляют свой эффект, нарушая разнообразные клеточные функции. Например, известно, что различные классы антибиотиков действуют на различных этапах синтеза клеточной стенки, синтеза РНК/ДНК, репликации ДНК или синтеза белка. Бактерии устойчивы к различным антибиотикам по различнымPress, Washington, D.C. (1995) pp. 1308-1326 рассматривают некоторые из этих механизмов устойчивости и отмечают, что антибиотик должен прежде всего проникнуть в клетку и уже затем он может проявить свой эффект в месте(сайте) действия. Основа устойчивости может лежать в проницаемости организма, молекулярная конфигурация сайта действия может оказаться неприемлемой, или его может вовсе не существовать. Кроме того, бактерии могут модифицировать, разрушать или выводить агент. Устойчивость может быть исходной или приобретенной. Приобретенная устойчивость может быть обусловлена приобретением генетического материала (например, транспозонов) или наследуемыми нарушениями репликации ДНК (например, точечные мутации). Повидимому, микобактерии обладают дополнительным механизмом устойчивости. Heifets,L.B. In: Drug Susceptibility in the ChemotherapyPress, Boston, MA (1991), pp. 13-57 классифицирует субпопуляции инфекционных клеток МТВ как активно растущие или находящиеся на различных стадиях "спящего состояния". "Спящее состояние" позволяет этим субпопуляциям выжить во время лечения больного. Лечение микобактериальных инфекций также затруднено сложным характером чувствительности. Например, при том, что инфекции МТВ обычно эффективно поддаются лечению изониазидом (INH) и/или пиразинамидом (PZA),изоляты MAC обычно устойчивы к этим препаратам, а изоляты M.fortuitum и M.chelonae обычно устойчивы ко всем антитуберкулезным агентам "первого ряда". На сегодня туберкулез является наиболее превалирующим инфекционным заболеванием в мире, им инфицирована приблизительно треть населения земного шара, т.е. около 1,7 миллиарда человека (Kochi, A. Tubercle 72:1-6 (1991. Кроме того, туберкулез убивает во всем мире больше людей (приблизительно 3 миллиона ежегодно), чем любое другое инфекционное заболевание (Morbidity and Mortality WeeklyReport 42:961-964 (1993. Подавляющее число случаев ТВ приходится на развивающиеся страны, однако, устойчивые (MDR) к препаратам штаммы МТВ (MDR-TB) стали серьезной всемирной проблемой (World Health Organization(1996. Если не остановить подъем MDR-TB, то неизбежным окажется возврат в прошлое, когда туберкулез был наиболее частой причиной смерти как в развивающихся, так и индустриальных странах. Другие микобактерии, такие как комплексMycobacterium avium (MAC), M. paratuberculosis, M. ulcerans, M.leprae, M.kansasii и ком 3 плекс M.fortuitum, также являются распространенными патогенами (cм.:Wayne, L.G. Clin. Micro. Rev.5:1-25 (1992) или Falkinham, J.O. Clin.Micro. Rev.9:177-215 (199), где рассматриваются различные микобактериальные патогены). MAC вызывает диссеминированное заболевание более чем у половины больных СПИДом на поздних стадиях (Nightingale, S.D. et al., Jour. Infect.Dis. 165:1082-1085 (1992. Всемирная Организация Здравоохранения подсчитала, что к 2000 му году число людей, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (HIV) может превысить 40 миллионов (World Health Organization(подвид M.avium) вызывает болезнь Джона у жвачных. Подсчитано, что болезнь Джона обходится сельскому хозяйству США (т.е. производству мяса и молочных продуктов) приблизительно в 1,5 миллиарда долларов ежегодно из-за снижения продуктивности и плодовитостиAssociation, pp.484-490 (1985. Вызываемые микобактериями заболевания обусловливают огромные общественные затраты. Наиболее широко используемым на сегодня и лучше всего охарактеризованным классом антибиотиков являются -лактамы. В силу широкого спектра действия лечение микобактериальных инфекций этими агентами дает серьезные преимущества. Применение -лактамов в терапевтических схемах для лечения микобактериальных инфекций дало ограниченный успех(Chambers, H.F. et al., Antimicrob. Agents Chemo. 39:2620-2624 (1995. Возможность расширить чувствительность микобактерий, в частности к-лактамам, с учетом механизмов устойчивости,имеет значительный потенциал повышения эффективности лечения микобактериальных инфекций. Описываемое в настоящей заявке изобретение относится к новым способам и композициям, при помощи которых может быть охарактеризована чувствительность микобактерий. Эти способы и композиции изменяют чувствительность данных бактерий, повышая эффективность антибиотиков, особенно -лактамных антибиотиков. Данные способы и композиции могут служить компонентом эффективной терапии и/или диагностики подобных инфекций. Краткое описание изобретения Стремясь подавить рост контаминирующих бактерий в жидких культурах, полученных из биологических образцов и обработанных по способу Thornton WO 95/27076 и U.S. 5,658,749,авторы добавили в стандартный антимикробный состав (в частности, РАNТА) цефалоспорин третьего поколения, цефтазидим (CASNo.72558-82-8). Авторы неожиданно обнаружили, что C18-карбоксипропилбетаин (СВ-18), используемый как реагент для обработки согласноThornton WO 95/27076 и U.S. 5,658,749 в сочетании с данным антимикробным составом, приводит к значительному и резкому снижению чувствительности в жидких культурах. Для реализации преимуществ в чувствительности диагностики согласно Thornton WO 95/27076 и U.S. 5,658,749 авторы провели исследования с целью охарактеризовать и предотвратить данное снижение чувствительности в жидких культурах. Эти исследования привели к разработке способов и композиций, с использованием которых чувствительность микобактерий к антибиотикам, в особенности антибиотикам семейства лактамов, может быть изменена благодаря применению бетаиноподобных соединений, описанных Thornton WO 95/27076 и U.S. 5,658,749. Способы применимы для характеристики и изменения чувствительности бактерий, в частности микобактерий и в особенности бактерий комплекса М.tuberculosis, к антимикробным соединениям, применяемым при антимикробной терапии в качестве адъювантов. Предметом изобретения является также композиция для тестирования чувствительности, причем данная композиция содержит один или несколько антибиотиков в смеси с одним или несколькими бетаиноподобными детергентами. Предметом изобретения является также набор для определения чувствительности микроорганизма, причем данный набор включает один или несколько бетаиноподобных детергентов и один или несколько антибиотиков в тесном соседстве или близости. Краткое описание фигур На фиг. 1 А и 1 В представлена схема экспериментов, проведенных с целью получения важных ростовых характеристик изолятов АТСС 27294 и 571/573-BAL Mycobacterium tuberculosis в культуральной системе CB-18/12B/PANTA/caz. На фиг. 2 А-2 Н представлены кривые роста при тестировании изолята АТСС 27294 Mycobacterium tuberculosis согласно схеме, приведенной на фиг. 1 А и 1 В. Звездочки: PANTA; квадраты: P/caz. Фиг. 2 А: АТСС 27294, L-J, обработка в буфере, выращивание в буфере. Фиг. 2 В: АТСС 27294, L-J, обработка в буфере, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). Фиг. 2 С: АТСС 27294, L-J, обработка в СВ-18 (383 мкг/мл), выращивание в буфере. Фиг. 2D: АТСС 27294, L-J, обработка в СВ-18 (383 мкг/мл), выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). Фиг. 2 Е: АТСС 27294, селективная 7 Н 11,обработка в буфере, выращивание в буфере.(конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). Фиг. 2G: АТСС 27294, селективная 7 Н 11,обработка в СВ-18 (383 мкг/мл), выращивание в буфере. Фиг. 2 Н: АТСС 27294, селективная 7 Н 11,обработка в СВ-18 (383 мкг/мл), выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 3 А-3 Н представлены кривые роста при тестировании изолята 571/573-BAL Mycobacterium tuberculosis согласно схеме, приведенной на фиг. 1 А и 1 В. Звездочки: PANTA; квадраты: P/caz. Фиг. 3 А: 571/573-BAL, L-J, обработка в буфере, выращивание в буфере. Фиг. 3 В: 571/573-BAL, L-J, обработка в буфере, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). Фиг. 3 С: 571/573-BAL, L-J, обработка в СВ-18 (383 мкг/мл), выращивание в буфере. Фиг. 3D: 571/573-BAL, L-J, обработка в СВ-18 (383 мкг/мл), выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). Фиг. 3 Е: 571/573-BAL, селективная 7 Н 11,обработка в буфере, выращивание в буфере. Фиг. 3F: 571/573-BAL, селективная 7 Н 11,обработка в буфере, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). Фиг. 3G: 571/573-BAL, селективная 7 Н 11,обработка в СВ-18 (383 мкг/мл), выращивание в буфере. Фиг. 3 Н:571/573 -BAL, селективная 7 Н 11,обработка в СВ-18 (383 мкг/мл), выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 4 представлена схема экспериментов, осуществленных при выращивании с лецитином в инокулятах малого объема. Цель опыта состояла в проверке способности лецитина нейтрализовать эффект СВ-18. Целью опыта также была проверка эффекта СВ-18 в инокулятах различного объема. На фиг. 5A-5F представлены кривые роста при тестировании изолята 571/573-BAL Mycobacterium tuberculosis согласно схеме, приведенной на фиг. 4. Фиг. 5 А и 5 В отражают результаты экспериментов с разведением бактериального стока в 5 000 раз (приблизительно 16554 кое). Фиг. 5 С и 5D отражают результаты экспериментов с разведением бактериального стока в 25 000 раз (приблизительно 3311 кое). Фиг. 5 Е и 5F отражают результаты экспериментов с разведением бактериального стока в 100 000 раз (приблизительно 83 кое). Звездочки: буфер в R.F.; квадраты: буфер в P/caz; треугольники: лецитин в R.F.; "х": лецитин в P/caz. Фиг. 5 А: выращивание в буфере или буфер/лецитин. 6 Фиг. 5 В: выращивание в СВ-18 (17 мкг/мл) или СВ-18/ лецитин (17 мкг/мл ). Фиг. 5 С: выращивание в буфере или буфер/лецитин. Фиг. 5D: выращивание в выращивание в СВ-18 (17 мкг/мл) или СВ-18/лецитин (17 мкг/мл ). Фиг. 5 Е: выращивание в выращивание в буфере или буфер/лецитин. Фиг. 5F: выращивание в в СВ-18 (17 мкг/мл) или СВ-18/лецитин (17 мкг/мл ). На фиг. 6 представлена схема экспериментов по титрованию СВ-18 и ТМА-18 с целью сравнения эффекта СВ-18 с действием четвертичной аммониумной соли триметилоктадецил аммониумбромида (ТМА-18). На фиг. 7 А-7 С представлены кривые роста при тестировании изолята АТСС 27294 Mycobacterium tuberculosis согласно схеме, приведенной на фиг. 6. Звездочки: R.F.; квадраты:PANTA; треугольники :P/caz. Фиг. 7 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере. Фиг. 7 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). Фиг. 7 С: селективная 7 Н 11, выращивание в ТМА-18 (конечная концентрация 3,4 мкг/мл). На фиг. 8 А-8 С представлены кривые роста при тестировании изолята 571/573-BAL M. tuberculosis согласно схеме, приведенной на фиг. 6. Звездочки: R.F.; квадраты: PANTA; треугольники :P/caz. Фиг. 8 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере; Фиг. 8 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). Фиг. 8 С: селективная 7 Н 11, выращивание в ТМА-18 (конечная концентрация 3,4 мкг/мл). На фиг. 9 представлена схема экспериментов, проведенных с целью титрования СВ-18 для проверки эффекта СВ-18 при различных его концентрациях на различных видах микобактерий, перечисленных в табл. 7. На фиг. 10 А и 10 В представлены кривые роста при тестировании изолята АТСС 27294 M."х": 7 мкг/мл СВ-18; 13 мкг/мл СВ-18; кружки: 27 мкг/мл СВ-18; вертикальные риски: 54 мкг/мл СВ-18; горизонтальные риски: 109 мкг/мл СВ-18. Фиг. 10 А, титрование без P/caz. Фиг. 10 В, каждое титрование проведено сP/caz. На фиг. 11 А и 11 В представлены кривые роста при тестировании изолята 571/573-BAL М. tuberculosis с титрованием СВ-18 согласно схеме, приведенной на фиг. 9. Звездочки: R.F.; квадраты: P/caz; треугольники: 3 мкг/мл СВ-18;"х": 7 мкг/мл СВ-18; 13 мкг/мл СВ-18; кружки: 27 мкг/мл СВ-18; вертикальные риски: 54 мкг/мл СВ-18; горизонтальные риски: 109 мкг/мл. Фиг. 11 А, титрование без P/caz. Фиг. 11 В, каждое титрование проведено сP/caz. На фиг. 12 А и 12 В представлены кривые роста изолята АТСС 25291 М.avium с титрованием СВ-18 согласно схеме, приведенной на фиг. 9. Звездочки: R.F.; квадраты: P/caz; треугольники: 3 мкг/мл СВ-18; "х": 13 мкг/мл СВ 18; 27 мкг/мл СВ-18. Фиг. 12 А, титрование без P/caz. Фиг. 12 В, каждое титрование проведено сP/caz. На фиг. 13 А и 13 В представлены кривые роста изолята комплекса М.avium 802-BAL с титрованием СВ-18 согласно схеме, приведенной на фиг. 9. Звездочки: R.F.; квадраты: P/caz; треугольники: 7 мкг/мл СВ-18; "х": 13 мкг/мл СВ-18; 27 мкг/мл СВ-18. Фиг. 13 А, титрование без P/caz. Фиг. 13 В, каждое титрование проведено сP/caz. На фиг. 14 А и 14 В представлены кривые роста изолята АТСС 5841 Мfortuitum с титрованием СВ-18 согласно схеме, приведенной на фиг. 9. Звездочки: R.F.; квадраты: P-cft; треугольники: 7 мкг/мл СВ-18; "х": 13 мкг/мл СВ 18; 27 мкг/мл СВ-18; кружки: 54 мкг/мл СВ 18; вертикальные риски: 109 мкг/мл СВ-18. Фиг. 14 А, титрование без P-cft. Фиг. 14 В, каждое титрование проведено сP-cft. На фиг. 15 А и 15 В представлены кривые роста изолята 495-JHH М.fortuitum с титрованием СВ-18 согласно схеме, приведенной на фиг. 9. Звездочки: R.F.; квадраты: P-cft; треугольники: 7 мкг/мл СВ-18; "х": 13 мкг/мл СВ-18; 27 мкг/мл СВ-18; кружки: 54 мкг/мл СВ-18; вертикальные риски: 109 мкг/мл СВ-18. Фиг. 15 А, титрование без P-cft. Фиг. 15 В, каждое титрование проведено сP-cft. На фиг. 16 представлена схема экспериментов, проведенных на различных изолятах МТВ с целью скрининга антибиотиков и проверки эффекта СВ-18 вместе с различными антибиотиками на различные изоляты М. tuberculosis, перечисленные в таблице 8. На фиг. 17 А и 17 В представлены кривые роста изолята АТСС 27294 М. tuberculosis в экспериментах по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. Квадраты: 8 На фиг. 18 А и 18 В представлены кривые роста изолята 571/573-BAL М. tuberculosis в экспериментах по скринингу антибиотиков,схема которых приведена на фиг. 16. Квадраты::Р/сах; кружки: P-cft. Фиг. 18 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере. Фиг. 18 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 19 А и 19 В представлены кривые роста изолята 573-BAL М. tuberculosis в экспериментах по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. Звездочки: R.F.; квадраты: PANTA; треугольники: P/caz; "х": Pcfp; :Р/сах; кружки: P-cft. Фиг. 19 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере. Фиг. 19 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 20 А и 20 В представлены кривые роста изолята 535-BAL М. tuberculosis в экспериментах по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. Звездочки: R.F.; квадраты: PANTA; треугольники: P/caz; "х": Pcfp; :P/сах; кружки: P-cft. Фиг. 20 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере. Фиг. 20 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 21 А и 21 В представлены кривые роста изолята 896-BAL М. tuberculosis в экспериментах по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. Звездочки: R.F.; квадраты: PANTA; треугольники: P/caz; "х": Pcfp; :Р/сах; кружки: P-cft. Фиг. 21 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере. Фиг. 21 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 22 А и 22 В представлены кривые роста изолята 040-TBR М. tuberculosis в экспериментах по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. Звездочки: R.F.; квадраты: PANTA; треугольники: P/caz; "х": Pcfp; : Р/сах; кружки: P-cft; Фиг. 22 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере. Фиг. 22 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 23 А и 23 В представлены кривые роста изолята 061-TBR М.tuberculosis в экспериментах по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. Звездочки: R.F.; квадраты: PANTA; треугольники: P/caz; "x": Pcfp; :Р/сах; кружки: P-cft. Фиг. 23 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере. 9 Фиг. 23 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 24 А и 24 В представлены кривые роста изолята 512-JHH М.tuberculosis в экспериментах по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. Звездочки: R.F.; квадраты: PANTA; треугольники: P/caz; "x": Pcfp; :Р/сах; кружки: P-cft; Фиг. 24 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере. Фиг. 24 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 25 А и 25 В представлены кривые роста изолята 538-JHH М. tuberculosis в экспериментах по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. Звездочки: R.F.; квадраты: PANTA; треугольники: P/caz; "x": Pcfp; :Р/сах; кружки: P-cft. Фиг. 25 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере. Фиг. 25 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 26 А и 26 В представлены кривые роста изолята 52-96-BOL М. tuberculosis в экспериментах по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. Звездочки: R.F.; квадраты: PANTA; треугольники: P/caz; "x": Pcfp; :Р/сах; кружки: P-cft. Фиг. 26 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере. Фиг. 26 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 27 А и 27 В представлены кривые роста изолята 57-96-BOL М. tuberculosis в экспериментах по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. Звездочки: R.F.; квадраты: PANTA; треугольники: P/caz; "x": Pcfp; :Р/сах; кружки: P-cft. Фиг. 27 А: селективная 7 Н 11, выращивание в буфере. Фиг. 27 В: селективная 7 Н 11, выращивание в СВ-18 (конечная концентрация СВ-18 17 мкг/мл). На фиг. 28 А и 28 В представлены кривые роста изолята 572/573-BAL М.tuberculosis в модифицированной версии экспериментов по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. Звездочки: R.F.; квадраты:P/caz; звездочки: эритромицин; "х": цефтриаксон. Фиг. 28 А: скрининг антибиотиков, выращивание в R.F. Фиг. 28 В: скрининг антибиотиков, выращивание в СВ-18. На фиг. 29 А и 29 В представлены кривые роста изолята 061-TBR М.tuberculosis в модифицированной версии экспериментов по скринингу антибиотиков, схема которых приведена 10 на фиг. 16. В этих экспериментах были дополнительно проверены нелактамные антибиотики. Звездочки: R.F.; квадраты: P/caz; треугольники: полимиксин В; "х": олеандомицин;: линкомицин; кружки: налидиксиновая кислота; вертикальные риски: пенициллин G; горизонтальные риски: цефтриаксон. Фиг. 29 А: скрининг антибиотиков, выращивание в R.F. Фиг. 29 В: скрининг антибиотиков, выращивание в СВ-18. На фиг. 30 А и 30 В представлены кривые роста изолята 57-96-BOL М.tuberculosis в модифицированной версии экспериментов по скринингу антибиотиков, схема которых приведена на фиг. 16. В этих экспериментах были дополнительно проверены нелактамные антибиотики. Звездочки: R.F.; квадраты: P/caz; треугольники: налидиксиновая кислота; "х": пенициллин G; : цефтазидим; кружки: цефтриаксон. Фиг. 30 А: скрининг антибиотиков, выращивание в R.F. Фиг. 30 В: скрининг антибиотиков, выращивание в СВ-18. На фиг. 31 приведена схема экспериментов, направленных на скрининг бетаиноподобных детергентов и других детергентов, приведенных в таб. 10, на способность вызывать индуцированную чувствительность аналогично таковой для СВ-18. На фиг. 32 А представлены суммарные кривые роста в присутствии всех контролей,использованных в эксперименте, который отражен на фиг. 31. На фиг. 32 В представлены суммарные кривые роста в присутствии нескольких выбранных детергентов, подчеркивающие различия в результатах. Фиг. 32 А: детергентные контроли: звездочки: Буфер/R.F.; квадраты: буфер/PANTA; треугольники: буфер/Р-саx; Фиг. 32 В: выбранные детергенты: звездочки: Твин 80; квадраты: стеариновая кислота; треугольники: детаин РВ; "х": SB18; "=": кросултаин Е 30; незакрашенные кружки: велветексOLB; закрашенные кружки: С 18-карбоксиэтилбетаин. На фиг. 33 приведено сопоставление результатов, полученных с СВ-18, с таковыми,полученными для ЭДТА, при сравнении их действия в культуральной системе. На фиг. 34 А и 34 В представлены кривые роста изолята АТСС 27294 М tuberculosis при выращивании его согласно схеме, приведенной на фиг. 33. Фиг. 34 А: засев в R.F., Р-сах или в СВ-18"х": ЭДТА в Р/сах. На фиг. 35 А и 35 В представлены кривые роста изолята 571/573-BAL М.tuberculosis при выращивании его согласно схеме, приведенной на фиг. 33. Фиг. 35 А: засев в R.F., Р-сах или в СВ-18"х": ЭДТА в Р/сах. На фиг. 36 приведена экспериментальная схема тестирования чувствительности микобактерий, использованная для сопоставления существующей практики тестирования чувствительности микобактерий с тестом на бетаиновую чувствительность, заявленным в настоящем изобретении. На фиг. 37 представлены кривые роста изолята АТСС 27294 М.tuberculosis при выращивании его согласно схеме, приведенной на фиг. 36. На фиг. 37 А представлены результаты теста на бетаиновую чувствительность, полученные с использованием в качестве инокулята 0,5 стандарта Мак Фарланда (6.28 0.57 х 105 кое). На фиг. 37 В, 37 С, 37D и 37 Е представлены кривые роста с использованием в качестве инокулята 10 Х (62,8005,700 кое), 100 Х (6,280570 кое), 1,000 Х (62857 кое), и 10,000 Х (636 кое) разведений стандарта Мак Фарланда, соответственно. Звездочки: R.F.; квадраты: Р-сах; треугольники: 15 мкг/мл СВ-18; "х": 30 мкг/мл СВ 18; :60 мкг/мл СВ-18; кружки: 15 мкг/мл СВ 18 с Р/сах; вертикальные риски: 30 мкг/мл СВ 18 с Р/сах; горизонтальные риски: 60 мкг/мл СВ-18 с Р/сах. На фиг. 38 представлены кривые роста изолята 571/573-BAL M.tuberculosis при выращивании его согласно схеме, приведенной на фиг. 36. На фиг. 38 А представлены результаты теста на бетаиновую чувствительность, полученные с использованием в качестве инокулята 0,5 стандарта Мак Фарланда (1.1 0.18 х 106 кое). На фиг. 38 В, 38 С, 38D и 38 Е представлены кривые роста с использованием в качестве инокулята 10 Х (111,00017,900 кое), 100 Х(11,1001,790 кое), 1,000 Х (1,110179 кое), и 10,000 Х (11118 кое) разведений стандарта Мак Фарланда, соответственно. Звездочки: R.F.; квадраты: Р-сах; треугольники: 15 мкг/мл СВ 18; "х": 30 мкг/мл СВ-18; :60 мкг/мл СВ-18; кружки: 15 мкг/мл СВ-18 с Р/сах; вертикальные 12 риски: 30 мкг/мл СВ-18 с Р/сах; горизонтальные риски: 60 мкг/мл СВ-18 с Р/сах. Фиг. 39 (А,В,С). Фиг. 39 А иллюстрирует энзиматический механизм модификации миколевых кислот согласно Yuan Y. et al., Proc. Natl.Acad.Sci. 93:12828-12833 (1996). На фиг. 39 В представлен механизм, посредством которого тиатетракозаноевые кислоты могут действовать в качестве ингибиторов тех же самых ферментов. Образующийся при этом стабильный аналог переходного состояния будет сульфониумкарбоксибетаином. На фиг. 39 С представлен возможный механизм синтеза такого сульфониумкарбоксибетаина. Подробное описание предпочтительных вариантов осуществления изобретения В последующем описании широко используются многие термины, применяемые в фармацевтике и при тестировании чувствительностиin vitro. Для того, чтобы обеспечить более полное и правильное понимание описания и формулы изобретения, включая вкладываемый в определенные термины смысл, приводятся определения следующих терминов. Термин "эффект СВ-18" означает повышение чувствительности отдельных бактерий, в частности микобактерий, к антибиотикам в присутствии бетаиноподобного детергента. Данный эффект проявляется при культивировании микроорганизма, такого как инфекционный агент,клинический изолят или его жизнеспособный экстракт, способный к росту, in vitro в присутствии эффективных количеств одного или нескольких антибиотиков с добавлением или без добавления одного или нескольких бетаиноподобных детергентов, в частности СВ-18. Присутствие бетаиноподобного детергента повышает чувствительность определенных бактерий, в частности микобактерий, к антибиотикам. Рост бактерий может быть охарактеризован количественно и качественно. Примером качественного результата является простая регистрация роста или его отсутствия. При количественной оценке регистрируют ростовой индекс в зависимости от количества дней культивирования,как это понимается из уровня техники. Примерами ростовых индексов могут быть простые условные символы (т.е."-, , 1+,2+,3+ и 4+") или цифровые показатели (т.е. от 0 до 999), как это предусмотрено культуральной системой ВАСТЕС 12 В (Beckton Dikinson, Cockeysville, MD,USA). Эффект СВ-18 может проявляться в полном подавлении роста или не влиять на рост perse, а сказываться на подавлении, задержке или в уменьшении наклона кривой роста (т.е. снижение скорости роста) в ходе экспоненциальной фазы роста, как это понимается из уровня техники. Существенная сторона эффекта СВ-18 состоит в том, что он проявляется в изменении одной или нескольких ростовых характеристик 13 микроорганизма, инфекционного агента или клинического изолята, причем это изменение реализуется в контексте заявленного теста на бетаиновую чувствительность. Это проиллюстрировано в примере 10, где различные антибиотики применены в сочетании с различными бетаиноподобными детергентами. Наблюдаемое изменение совпадает с повышенной чувствительностью изолята к присутствующему антибиотику. Термин "тест на бетаиновую чувствительность" означает применение одного или нескольких бетаиноподобных детергентов в сочетании с одним или несколькими антибиотиками в тесте in vitro с целью определения характера чувствительности микроорганизма (например,инфекционного агента или клинического изолята), или смеси различных микроорганизмов. При осуществлении теста на бетаиновую чувствительность образец, например, гомогенную популяцию микроорганизмов или смесь типов/вариантов/изолятов и т.д. микроорганизмов,приводят в контакт с композицией, содержащей антибиотик и бетаиноподобный детергент, и определяют чувствительность микроорганизма в образце к указанному антибиотику на основе жизнеспособности микроорганизма в образце. Тест на бетаиновую чувствительность является первым вариантом осуществления заявленных в изобретении способов. Такое тестирование бетаиновой чувствительности может быть проведено в микротитровальном варианте, в культуральных флаконах или плашках с плотной средой, как это понимается из уровня техники. Примерами стандартных жидких сред служат ВАСТЕС (Beckton Dikinson, Cockeysville, MD),ESP Myco System II (DIFCO Laboratories, Detroit, MI) или МТ/ВасТ (Organon Teknika, Durham, NC). Примерами стандартных твердых сред служат известный из уровня техники агар Мюллера-Хинтона или другие эквивалентные среды. В подобные культуральные системы должны обязательно входить соответствующий антибиотик(и) и бетаиноподобный детергент(ы) в соответствующих комбинациях и соответствующих концентрациях, которые обсуждаются в настоящем описании. Как и в случае любого другого тестирования чувствительности, целью такого тестирования является идентификация антибиотика (антибиотиков), который с наибольшей вероятностью успешно излечит больного от инфекции. Микроорганизм, такой как клинический изолят или инфекционный агент, считают "чувствительным", если данный микроорганизм (например, Mycobacterium), подвергается отрицательному воздействию антибиотика таким образом, что данный клинический изолят или инфекционный агент становится некомпетентным,неинфекционным или нежизнеспособным, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C."чувствительный" синонимичен термину "чувствительность". Когда определяют чувствительность микроорганизма, такого как клинический изолят или инфекционный агент, к конкретному антибиотику, считается, что антибиотик обладает "активностью" или "активен"против данного клинического изолята или инфекционного агента. Термин "тестирование чувствительности" означает тест in vitro, в котором определяется чувствительность микроорганизма, такого как клинический изолят или инфекционный агент, к ряду антимикробных соединений, как это понимается из уровня техники (Jorgensen, J.H. et al.,In: Murray, P.R. et al., eds. Manual of Clinical Microbioilogy, ASM Press, Washington, D.C.Villanova, PA (1995) (все работы упоминаются в качестве ссылок). Целью любого тестирования чувствительности является более точное предсказание успешности терапевтического вмешательства. Термин "антибиотик" обозначает любое известное из уровня техники соединение, обладающее отрицательным эффектом на жизнеспособность, целостность, инфекционность или компетентность инфекционного агента, как это понимается из уровня техники (см. Murray, P.R.Lorian, V. ed. Antibiotics in Laboratory Medicine 2nd Edition, WilliamsWilliams, Baltimore, MD,все работы упоминаются в качестве ссылок. К примерам антибиотиков различных классов относятся -лактамные антибиотики, ингибиторы-лактамазы, аминогликозиды и аминоциклитолы, хинолоны, тетрациклины, макролиды и линкозамиды, а также гликопептиды, липопептиды и полипептиды, сульфонамиды и триметоприм, 15 хлорамфеникол, изониазид, нитроимидазолы,рифампины, нитрофураны, метенамин и мупироцин, причем все перечисленные антибиотики могут оказаться полезны при осуществлении заявленного в изобретении способа. Термин"антибиотик" в данном контексте синонимичен терминам "терапевтическое средство" или "лекарство". Все антибиотики являются лекарствами или терапевтическими средствами, но не все лекарства или терапевтические средства являются антибиотиками. Термин "адъювант" означает химическое соединение, которое может обладать или не обладать антимикробной активностью, но примененное в сочетании (напр., одновременно) с одним или несколькими антибиотиками, данное соединение действует синергично и усиливает эффект этого антибиотика (или антибиотиков). Адъювант(ы) можно применять для повышения эффективности тестов на чувствительность или для антимикробной терапии. Примером терапевтического адъюванта может служить ингибитор -лактамазы (infra). Способы и композиции, описанные в настоящей заявке, не подразумевают применение ингибиторов -лактамазы в качестве адъювантов pеr se, речь идет об использовании бетаиноподобных детергентов в качестве адъювантов, однако, бетаиноподобные детергенты можно применять сами по себе или с другими адъювантами, включая ингибиторы-лактамазы. Термин "бетаиноподобный" синонимичен термину "SB-18-подобный", как они трактуются в WO 95/27076 и в U.S.5,658,749 (обе работы упоминаются в качестве ссылок). Согласно WO 95/27076 и U.S.5,658,749, бетаиноподобные детергенты обладают способностью диспергировать тяжи (и скопления) микобактерий и/или снижать плавучесть микобактерий. Диспергирование образующих тяжи микобактерий, таких,например, как организмы комплекса Mycobacterium tuberculosis (MTB), облегчает их обнаружение, поскольку повышается вероятность того,что взятые для анализа аликвоты окажутся столь же репрезентативны, как и образец в целом. Бетаиноподобные детергенты, способные диспергировать тяжи микобактерий, имеют алкильную цепь длиной более чем 16 атомов углерода, и наиболее предпочтительна цепь длиной более чем 18-20 атомов углерода. Бетаиноподобные детергенты также облегчают сбор микобактерий, таких, например, как организмы комплекса Mycobacterium avium (MAC), которые растут, не образуя скоплений, в некоторой степени снижая естественную плавучесть данных организмов. Такое снижение происходит посредством механизма, при помощи которого детергент проникает в бактериальную клетку. Бетаиноподобные детергенты, способные снижать плавучесть, предпочтительно имеют алкильную цепь длиной более чем 12 атомов уг 002808 16 лерода, и наиболее предпочтительна цепь длиной 16-20 атомов углерода. Таким образом, используемый в данном контексте термин "бетаиноподобный", включает структуры, описанные в табл. 2 и 3 WO 95/27076 и U.S.5,658,749 (обе работы упоминаются в качестве ссылок), включая, например, СВ-подобные, SB-подобные,HSB-подобные, РВ-подобные, StB-подобные,PhB-подобные, SoB-подобные, RevB-подобные,АО-подобные, сАВ-подобные и ImB-подобные соединения, которые обладают SB-18-подобной активностью, как описано в WO 95/27076 иU.S.5,658,749. К "бетаиноподобным" детергентам относится цвиттерионные соединения,имеющие структуру, приведенную в табл. 1. Считается, что данные структуры наиболее применимы для осуществления заявленных в изобретении способов. Таблица 1. Наиболее применимые бетаиноподобные детергенты. Приведена общая структура наиболее применимых бетаинов. R1 представляет собой гидрофобную алкильную цепь, аявляется Термин "СВ-подобный" означает такой бетаиноподобный детергент, который содержит карбоксилатную сущность (-СОО) в качестве аниона (т.е. карбоксибетаиноподобный). Термин"SB-подобный" означает такой бетаиноподобный детергент, который содержит сульфонатную сущность (-SO3) в качестве аниона (т.е. сульфобетаиноподобный). Термин"HSBподобный" означает такой бетаиноподобный детергент, который содержит сульфонатную сущность в качестве аниона и гидроксильную группу (-ОН) в качестве мостика (т.е. гидроксисульфобетаиноподобный). Термин"РВподобный" означает такой бетаиноподобный детергент, который содержит фосфатную"StBподобный" означает такой бетаиноподобный детергент, который содержит сульфатную"АО 17 подобный" означает такой бетаиноподобный детергент, который содержит оксидный радикал(-O) в качестве аниона (т.е. аминоксидоподобный). Термин "PhB-подобный" означает такой бетаиноподобный детергент, который содержит фосфониумную (-Р-) сущность в качестве катиона (т.е., фосфониумбетаиноподобный). Термин "SoB-подобный" означает такой бетаиноподобный детергент, который содержит сульфониумную (-S-) сущность в качестве катиона(т.е. сульфониумбетаиноподобный). Термин "nалкил бетаин" означает такой бетаиноподобный детергент, который содержит аммониумную(-N-) сущность в качестве катиона (т.е. n-алкил бетаиноподобный). Термин "ImB-подобный" означает такой бетаиноподобный детергент,который содержит имидазолиниумную сущность в качестве катиона (т.е. имидазолиниумбетаиноподобный). Термин "RevB-подобный" означает такой бетаиноподобный детергент,который содержит алкильную цепь, ковалентно присоединенную к аниону, а не к катиону (т.е. обратный бетаиноподобный). Термин "сАВподобный" означает такой бетаиноподобный детергент, содержит алкильную цепь, ковалентно присоединенную к мостику, а не к катиону или аниону (т.е. с-алкил бетаиноподобный). Термин "СВ-18" означает N-(3-карбоксипропил)-N,N-диметил-1-октадеканаминиум,внутреннюю соль. СВ-18 также известен как внутренняя соль N,N-диметил-N-(n-октадецил)N-(3-карбоксипропил)аммония или C18-карбоксипропилбетаин. СВ-18 имеет обозначение(CAS No.14933-09-6) и термин "SB-12" означает N-додецилдецилN,N-диметил-3-аммонио 1-пропансульфонат (CAS No. 14933-08-5). Термин "клинический изолят" означает очищенный штамм бактериального агента, вызывающего инфекцию, при этом данный клинический изолят получен от больного, инфицированного данным инфекционным агентом. От одного больного можно получить один или несколько клинических изолятов, или один и тот же клинический изолят может быть получен от различных больных, как это имеет место при нозокомиальных вспышках (Pittet, D. et al, Archives of Internal Medicine 155:1177-1184,(1995. Такие клинические изоляты обычно очищают сочетанием культуральных методов с методами обработки образца. Все такие клинические изоляты жизнеспособны и, следовательно, пригодны для дальнейшего анализа и тестирования в отношении чувствительности к анти 002808 18 биотикам в таких тестах in vitro, как тест на чувствительность. К методам выделения таких клинических изолятов относятся известные из уровня техники способы, в частности, описанные Kent, Р.Т. et al., "Public Health Mycobacteriology: A Guide for the Level III Laboratory", USClinical Microbioilogy, ASM Press, Washington,D.C. (1995) pp.379-399 для выделения Corynebacterium и Nocardia, соответственно (все работы упоминаются в качестве ссылок). Термин "инфекционный агент" означает инфекционный микроорганизм, в особенности инфекционную бактерию, как это понимается из уровня техники. К инфекционным агентам,представляющим особенный интерес в свете заявленных в изобретении способов, относятся такие, которые содержат структуры миколевой кислоты, например, микобактерии, и, в частности, бактерии комплекса Mycobacterium tuberculosis, вызывающие заболевание (Isenberg, H.D.(1995) pp.5-18 (работа упоминается в качестве ссылки). Считается, что человек или животное,страдающие от болезни, вызванной данным инфекционным агентом, переносят "инфекцию",вызванную данным агентом, или являются "инфицированными" данным агентом. Инфекционный агент, который вызывает заболевание, считается "патогенным". Бактерии, которые обычно непатогенны и являются частью нормальной флоры больного, считаются сапрофитами. В определенных условиях, когда иммунитет больного ослаблен или подавлен (например, при инфекции ВИЧ, при СПИД, или после пересадки органов) такие сапрофитные микроорганизмы могут вызывать инфекцию. Больной может быть инфицирован одним или несколькими инфекционными агентами. Под "структурами миколевой кислоты" понимают -гидрокси кислоту с заменой по положению алифатической цепью умеренной длины, как это понимается из уровня техники(1997), где обсуждаются различные коринеформные бактерии (работа упоминается в качестве ссылки). Такие миколеподобные молекулы совокупно обозначают как "структуры миколевой кислоты". Дополнительные таблицы репрезентативных структур миколевой кислоты,включая ненасыщенные, циклопропаноидные,метоксилированные и кетоновые кислоты, можно найти, например, в работах Lederer, E. Chem.Appl. Chem. 25:135-165 (1971) (обе работы упоминаются в качестве ссылок). "Структуры миколевой кислоты" являются кислотоустойчивыми молекулами. Термин "антимикробная терапия" означает лечение больного, будь это человек или животное, in vivo, эффективными количествами содержащих антибиотик композиции, примененной, например, перорально, в виде инъекции,наружно или в виде ингаляции. Доставка заявленных композиций, включающих антибиотик,может осуществляться, без ограничения перечисленным, путем внутривенных инъекций, в виде активного компонента мазей или перорально. Целью антимикробной терапии является нарушение жизнеспособности, целостности или компетентности инфекционного агента таким образом, что инфицированный человек или животное выздоравливает или преодолевает инфекцию. Антимикробная терапия может проводиться с применением одного или нескольких классов препаратов, одного или нескольких препаратов в пределах данного класса антибиотиков, примененных индивидуально или в сочетании, т.е. одновременно или последовательно.Термин "антимикробная терапия" синонимичен понятиям "терапия антибиотиками" или просто "терапия". Под "эффективным количеством" понимают такое количество препарата, которое достаточно для достижения конечной цели. Например, в контексте антимикробной терапии эффективным считается такое количество, применение которого приводит к излечению микробной инфекции. Такое излечение может быть результатом прямого воздействия на микроорганизм или непрямого эффекта, когда эффективное количество препарата воздействует на микроорганизм таким способом, что повышает чувствительность микроорганизма ко второму агенту. Материал считается "по существу свободным от контаминантов" если он в значительной степени очищен от материалов, с которыми он был ассоциирован до такой очистки, до такой степени, которая необходима для проведения необходимых процедур или анализов. Таким образом, подобные контаминанты или полностью отсутствуют, или присутствуют в таких низких концентрациях, что их присутствие (1) не мешает нужному терапевтическому эффекту,когда содержащий подобные материалы препа 002808 20 рат вводят больному и (2) не наносит вреда больному после введение подобного препарата. Термин "введение" больному означает введение нужной субстанции в или на нужное место больного, будь это человек или животное,которому это показано, любым известным из медицинского искусства способом, достаточным для достижения поставленной цели, включая (без ограничения перечисленными) энтеральное, парентеральное (напр., внутривенное) и ионофоретическое введение. Введение может быть также осуществлено в виде повязки, помещенной на место инфекции, при этом повязка обеспечивает эффективное высвобождение антибиотика (антибиотиков) и бетаиноподобных детергентов."Совместное введение" двух или более агентов, таких как антибиотик и бетаиноподобный детергент, больному означает введение этих агентов или вместе в виде одного препарата, или раздельно, в виде индивидуальных препаратов. Термин "фармацевтически приемлемая соль" объединяет соли, образуемые фармацевтически приемлемыми кислотами или основаниями, такими, например (без ограничения перечисленными), как серная, соляная, азотная,фосфорная и др. кислоты, или такими основаниями, как гидроксиды щелочных или щелочноземельных металлов, гидроксидов аммония,гидроксидов алкиламмония и т.д. Термин "фармацевтически приемлемый носитель" объединяет фармацевтически приемлемые растворители, носители, разбавители и т.п., которые используют в качестве добавок к заявленным препаратам для введения подобных соединений. Термин "лечение" означает введение эффективных количеств одного или нескольких терапевтических агентов субъекту или объекту,которому показано введение подобных агентов в целях профилактики, облегчения, предотвращения или излечения заболевания, или искоренения микроорганизма, который считается чувствительным к данным агентам. Термин "приведение в контакт" образца,содержащего микроорганизм, означает смешивание микроорганизма и композиции, или обеспечение контакта между микроорганизмом и композицией каким-либо другим способом. Авторы неожиданно обнаружили, что при сочетании, по меньшей мере, одного бетаиноподобного детергента, такого как C18 карбоксипропилбетаин (СВ-18), с антимикробными соединениями, клинические изоляты микобактерий можно дифференцировать на основе индуцированной чувствительности. Авторы распознали, что данный феномен может быть полезен для характеристики подобных клинических изолятов, а также микроорганизмов и инфекционных агентов вообще, в отношении их чувствительности к подобным антимикробным 21 соединениям. Кроме того, авторы также считают, что данный феномен должен быть полезен для усиления синергистическим образом чувствительности таких микобактерий к подобным антимикробным соединениям при терапии invivo. Таким образом, в своем наиболее широком осуществлении изобретение направлено на способ характеризации чувствительности микроорганизмов к антимикробным соединениям. В предпочтительном варианте осуществления изобретения тестируемый микроорганизм является инфекционным агентом или клиническим изолятом. Согласно другому варианту осуществления изобретения, подлежащий тестированию микроорганизм получен из образца, взятого от пациента, который подозревается на инфицированность или действительно инфицирован нежелательными бактериями,содержащими структуры миколевой кислоты. Заявленный в настоящем изобретении тест на чувствительность обозначается как тест на бетаиновую чувствительность. Результатом тестирования чувствительности является характеристика исследуемого микроорганизма, присутствующего в таком образце, как клинический изолят или инфекционный агент, в отношении описываемого эффекта СВ-18. То есть, заявленный тест на чувствительность дает возможность определить является ли присутствующий в образце микроорганизм (микроорганизмы) чувствительным к проверяемому антибиотику (антибиотикам). Предпочтительно, чтобы в результате тестирования чувствительности были определены один или несколько антибиотиков, или их сочетание с другими эффективными агентами, например,бетаиноподобными детергентами, к которым чувствителен микроорганизм, присутствующий в образце. Однако важно также, чтобы в результате тестирования чувствительности были определены один или несколько антибиотиков, или их сочетание с другими эффективными агентами, например, бетаиноподобными детергентами,к которым микроорганизм, присутствующий в образце нечувствителен. Результат позволяет медику-профессионалу более эффективно выбирать соответствующую антимикробную терапию для лечения больных или, с другой стороны, сделать стерильным в отношении данного микроорганизма то место, откуда был получен образец. Во втором предпочтительном варианте осуществления изобретение направлено на способ лечения больных в ходе терапии антибиотиками с использованием бетаиноподобных детергентов в качестве адъювантов, при этом у пациента подозревают инфекцию, он рискует быть инфицированным или действительно инфицирован нежелательными бактериями. Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения, такие нежелательные бактерии содержат структуры миколевой кислоты. Может 22 быть разработана терапия антибиотиком для излечения подобной инфекции путем применения комбинации одного или нескольких антибиотиков с одним или несколькими бетаиноподобными детергентами. Сочетание антибиотика с бетаиноподобным детергентом более эффективно излечивает больного, нежели терапия только антибиотиком, влияя на целостность бактерий таким образом, что инфекционные организмы становятся некомпетентными, неинфекционными или нежизнеспособными более быстро и более эффективно, нежели бы это происходило при применении антибиотика без бетаиноподобного детергента. В третьем предпочтительном варианте осуществления изобретение направлено на способ стерилизации или предотвращения роста нежелательных микроорганизмов путем применения комбинации одного или нескольких антибиотиков с одним или несколькими бетаинами в месте инфекции и в окружении, в котором подозревается присутствие подобных микроорганизмов. Заявленный в настоящем изобретении тест на чувствительность особенно полезен для определения и установления чувствительности микроорганизма, в частности, клинического изолята и/или инфекционного агента, к антимикробным агентам. Заболевание, вызываемое такими микроорганизмами, может быть вылечено эффективными количествами одного или нескольких антибиотиков с одним или несколькими бетаиноподобными детергентами, которые на основе результатов теста на чувствительность выбраны как рациональные компоненты терапевтического курса для излечения подобного заболевания, вызванного данными микроорганизмами. При постановке тестов на чувствительность применение спектра концентраций данного бетаиноподобного детергента даст необходимую информацию об эффективности данного детергента, но предпочтительно тестирование более чем одного бетаиноподобного детергента. Можно протестировать сколько угодно много бетаиноподобных детергентов или их сочетаний. Предпочтительно, тестируют не менее пяти, хотя и любое другое число, например, 10, 15,20,25 или 30 и даже более можно легко протестировать в различных разведениях. Тест начувствительность дает возможность получить дополнительную информацию относительно эффекта сочетания таких концентраций бетаиноподобного детергента с выбранным антибиотиком (антибиотиками). Рабочая или применимая концентрация данного бетаиноподобного детергента будет зависеть от конкретного используемого детергента. Вообще, рабочие концентрации варьируют в пределах от 0,1 мкг/мл для наиболее сильных соединений до 1 мкг/мл для наиболее слабых соединений, при этом для большинства бетаиноподобных детергентов 23 интервал концентраций от 1 до 100 мкг/мл будет наиболее применим. При постановке тестов на чувствительность такие бетаиноподобные детергенты можно использовать сами по себе или в сочетании с другими бетаиноподобными детергентами. При том, что использование даже одного антибиотика в заявленных способах даст необходимую информацию о чувствительности, в тесте на бетаиновую чувствительность предпочтительно использовать несколько антибиотиков. Можно протестировать сколько угодно много антибиотиков или их сочетаний. Предпочтительно, тестируют не менее пяти, хотя и любое другое число, например, 10, 15, 20, 25 или 30 и даже более можно легко протестировать в различных разведениях. Концентрация данного антибиотика будет зависеть от конкретного используемого антибиотика. Вообще, рабочие концентрации варьируют в пределах от 0,1 мкг/мл для наиболее сильных антимикробных агентов до 100 мкг/мл для наиболее слабых соединений, при этом интервал концентраций от 0,5 до 64 мкг/мл будет наиболее применим для большинства антибиотиков. При осуществлении заявленных способов подобные антибиотики можно использовать сами по себе или в сочетании с другими антибиотиками. Как и в случае других тестов на чувствительность (Woods,G.L. et al., In: Murray, P.R. etPress, Washington, D.C. (1995) pp.1327-1404),можно ожидать, что вариации в объеме инокулята будут влиять на результаты теста на бетаиновую чувствительность. Инокулят получают стандартным способом, включая "перекалывание" колоний или сравнение со стандартом Мак Фарланда, известным из уровня техники. Экспериментальные результаты, представленные на фиг. 5A-5F и в примере 8, показывают, что эффект СВ-18 сопоставим для инокулятов размером от нескольких клеток до нескольких тысяч клеток. В целом, для данных задач применим инокулят размером от 1 клетки до 105 клеток,более предпочтителен инокулят от 100 до 10,000 клеток и наиболее предпочтителен инокулят 1,000 клеток. При инокуляте менее 10 клеток ошибка пипетирования может исказить результаты тестирования, а при инокуляте более 105 клеток система будет перегружена, что также исказит результаты. Инокулят размером от 1,000 до 10,000 клеток дает возможность наблюдать рост контролей в зависимости от времени. Однако применим любой инокулят, дающий возможность наблюдать эффект СВ-18, и в этом отношении заявленный тест на бетаиновую чувствительность аналогичен другим тестам на чувствительность in vitro. Получаемые в результате постановки описываемого теста на бетаиновую чувствительность данные являются результатом динамического взаимодействия изолята, бетаиноподобно 002808 24 го детергента (детергентов) и антибиотика (антибиотиков). В тесте на бетаиновую чувствительность сочетаются эти три компонента, что дает возможность профессионалу определить и подобрать концентрацию антибиотика (антибиотиков) и бетаиноподобного детергента (детергентов) с инокулятом таким образом, чтобы получить эффект СВ-18, обеспечивая тем самым сбор наиболее полезной информации относительно характера и/или чувствительности исследуемого клинического изолята. Из примера 7 видно, что бетаиноподобные детергенты могут оказаться более полезны, нежели другие детергенты в заявленных тестах на чувствительность и терапевтических способах. Например, структуры, имеющие модификации в связи проявляют сниженную активность в тестировании чувствительности и терапевтических способах. Кроме того, бетаиноподобные детергенты, имеющие модификации в мостике, проявляют также сниженную активность в тестировании чувствительности и терапевтических способах. В таблице 1 приведены структуры, которые наиболее применимы для осуществления заявленных в изобретении способов. Наиболее полезными бетаиноподобными детергентами служат такие, в которых нет модификаций, например, когда R1 является простым алкилом, связьявляется простым метиленом, R2 и R3 являются водородом или метальными группами (в зависимости от используемого катиона), а в R4 нет замен. Токсичность бетаиноподобных детергентов для бактерий, содержащих миколевую кислоту, зависит от аниона , длины мостика (R4) и длины алкильной цепи (R1). В целом, баланс между поверхностно-активной природой бетаина и его свойствами как адъюванта обязательно должен учитываться. Например, поверхностноактивные свойства зависят от кислотноосновного характера аниона и длины алкильной цепи. Наиболее ионными детергентами являются фосфобетаины (РО 4) и наиболее неионными детергентами являются сульфатобетаины (SO4). Можно ожидать, что фосфобетаины окажутся исключительно токсичными, а с сульфатобетаинами будут связаны проблемы с растворимостью. Поэтому предпочтительнее сульфобетаины и карбоксибетаины, и наиболее предпочтительны карбоксибетаины. Исходя из обсуждения проницаемости (пример 9), можно предположить, что карбоксибетаины обладают наиболее предпочтительным анионом и при том, что СВ-18 содержит аммониумный катион, разумно предположить, что сульфониумбетаины должны обладать наиболее предпочтительным катионом. Таким образом, к предпочтительным структурам относятся n-алкил сульфобетаины, к особенно предпочтительным - n-алкил карбоксибетаины, и наиболее предпочтительным - алкил сульфониумкарбоксибетаины. 25 Поверхностно-активные свойства бетаинов изменяются с увеличением длины цепи. Более длинные алкильные цепи имеют более низкие критические мицеллярные концентрации(CMC), и наоборот, для более коротких алкильных цепей требуются более высокие концентрации для достижения CMC. Длина алкильной цепи может варьировать в зависимости от применения. Например, при более коротких алкильных цепях требуются более высокие концентрации для достижения CMC и поэтому во втором варианте осуществления изобретения(т.е. при антимикробной терапии) более короткие цепи предпочтительнее, особенно при внутривенном введении. Альтернативно, при терапевтическом применении путем ингаляции могут применяться композиции, которые менее зависят от отношения между концентрацией иCMC; поэтому могут применяться более длинные алкильные цепи. В первом варианте осуществления изобретения (т.е. в тесте чувствительности in vitro) длину алкильной цепи можно варьировать с тем, чтобы определить детергент,способный максимизировать наблюдаемый эффект СВ-18. Предпочтительны бетаиноподобные детергенты с длиной алкильной цепи в 8-22 атома углерода, особенно предпочтительна длина цепи в 12-18 атомов углерода, и наиболее предпочтительна длина цепи в 16-18 атомов углерода. Мостиком минимальной длины, гарантирующим высаливание, будет пропиленовый мостик. Токсичность по отношению к микроорганизму также является функцией длины мостика (Tsubone, K. et al., Jour.Pharm.Sci. 80:441444(1991. Например, этиленовый и бутиленовый мостики обусловливают большую токсичность, чем пропиленовый мостик. При использовании этиленового мостика могут возникнуть проблемы с растворимостью, в зависимости от используемых ионов. Поэтому необходимо принимать в расчет необходимое совпадение соответствующей длины алкильной цепи с ионами и структурой мостика для того чтобы избежать подобных проблем. Например, более длинные алкильные цепи требуют сочетания ионов с сильной полярностью (SO4SO3 СO3 РO4) и такой структуры мостика, которая облегчает высаливание. Предпочтительна структура мостика типа -CmН 2m- (где m1), а наиболее предпочтителен мостик с такой же структурой с 6m3. Согласно Tsubone, K. et al., Jour. Pharm.Sci. 80:441 - 444 (1991), компоненты, используемые для модификации катиона, также вносят вклад в токсичность (т.е. токсичность обратно пропорциональна длине R2 и R3 (см. табл. 1). Длина мостика и катионные компоненты могут варьировать в зависимости от использования. Например, во втором варианте осуществления изобретения (т.е. при антимикробной терапии), можно применять более короткие ал 002808 кильные цепи и структуры мостиков с m2 также применимы, поскольку растворимость представляет меньшую проблему в случае коротких цепей. Альтернативно, доставка путем ингаляции необходимо требует растворимости бетаиноподобного детергента: поэтому могут потребоваться структуры мостиков с m3. Как обсуждалось выше, полярность бетаина может быть изменена путем варьирования аниона. Опять же,соотношение длины мостика и используемых для модификации катиона компонентов может варьировать для максимизации наблюдаемого эффекта СВ-18 в первом варианте осуществления изобретения (т.е. в тесте in vitro). Было проверено несколько карбоксибетаинов, которые проявили эффект СВ-18 в способах, заявленных в изобретении. К ним относятся: С 18-карбоксиметилбетаин (CAS No.693-334), C18-карбоксиэтилбетаин (CAS No. 3061273-8), C18:1-карбоксиметилбетаин (CAS No. 871-37-4) и С 18-карбоксипропилбетаин (CASNo. 78195-27-4). Примерами наиболее полезных карбоксибетаинов, в которых использован метиленовый мостик ("карбоксиметилбетаины": R4 = -СН 2-),метиленовая связь ( = -СН 2-), и которые отличаются только длиной алкильной цепи, являются: С 10 (CAS No. 2644-45-3), С 11 (CAS No. 2956-38-9), C12 (CAS No. 683-10-3), С 13 (CAS(CAS No. 23609-77-0), C16 (CAS No. 693-334) и С 18 (CAS No. 820-66-6). С 12-карбоксиметилбетаин (CAS No. 6232-16-2) служит примером с N,N-диэтилом (R3=R4=-СН 2 СН 3); а примером с двойной алкильной связью служитC18:1 (CAS No.871 -37-4). Примерами наиболее полезных карбоксибетаинов, в которых использован этиловый мостик ("карбоксиэтилбетаины": R4=-CH2CH2-), метиленовая связь ( =-СН 2-), и которые отличаются только длиной алкильной цепи, являются: С 12 (CAS No. 16527-85-8), С 13 (CAS No. 132621-79-5), С 14(CAS No. 69725-38-3), C16 (CAS No. 424-433) и С 18 (CAS No. 30612-73-8). Примером карбоксиэтилбетаина, в котором R2 и R4 в соответствующих условиях являются атомами водорода, служит CAS No. 1462-54-0 (С 12-бета аланин). Примерами наиболее полезных карбоксибетаинов, в которых использован пропиловый мостик ("карбоксипропилбетаины": R4 =-СН 2 СН 2 СН 2-), метиленовая связь ( = -СН 2-), и которые отличаются только длиной алкильной цепи, являются: С 11 (CAS No. 150147-53-8),C12 (CAS No. 15163-30-1), C14 (CAS No. 146959-90-2), C15 (CAS No. 146959-91-3), С 16(CAS No. 71695-32-4) и C18 (CAS No. 7819527-4). Примером полезного карбоксибетаина, в котором использован бутиловый мостик ("карбоксибутилбетаин": R4 = -СН 2 СН 2 CH2 СН 2-) и метиленовая связь ( = -СН 2-), является: С 12 27 наиболее полезных карбоксибетаинов, в которых использован пентиловый мостик ("карбоксипентилбетаины": R4 = -СН 2 СН 2 СН 2 СН 2 СН 2-),метиленовая связь ( = -СН 2-), являются: C12(CAS No. 76392-97-7) и С 16 (CAS No. 7356598-7). Примером карбоксибетаина, в котором использован гексиловый мостик ("карбоксигексилбетаин": R4 = -СН 2 СН 2 СН 2 СН 2 СН 2 СН 2-) и метиленовая связь ( = -СH2-), служит C12(CAS No. 132621-80-8). Имеется несколько примеров карбоксибетаинов, в которых в качестве мостика используется бензильная группа(R4 = -СН 2 -С 6H4-). Имеется два примера С 12, в которых карбоксифункция находится в положении 4, или пара-положении (CAS No.7195-313) и один, в котором карбоксифункция находится в положении 2, или орто-положении (CASNo. 7195-34-6). Имеется два примера С 16, в которых карбоксифункция находится в положении 4, или пара-положении (CAS No.7195-33-5) и один, в котором карбоксифункция находится в положении 2, или орто-положении (CASNo.7195-35-7). Таким образом, термин "карбоксибетаинподобный" ("СВ-подобный") включает не только те структуры, в которых в качестве аниона использована карбоксильная группа(=СОО), как определено в WO 95/27076 и U.S. 5,658,749, но и те бетаиноподобные структуры,которые приведены в табл. 1 и которые включают все возможные комбинации R1, , R2, R3,и R4, как они определены в данном контексте. В дополнение к карбоксибетаинам имеются другие доступные бетаины, которые могут быть использованы для целей настоящего изобретения, такие как сульфобетаины, например,высокоочищенные (т.е. реагентной чистоты) детергенты "SB"-cepии и, в частности, SB-18 (Nоктадецил-N,N-диметил-3-аммонио-1-пропансульфонат (CAS No. 13177-41-8, SB-16 (Nгексадецил-N,N-диметил-3-аммонио-1-пропансульфонат (CAS No.2281-11-0), SB-14(Nтетрадецил-N,N-диметил-3-аммонио-1-пропансульфонат (CAS No.14933-09-6) и SB-12 (Nдодедецилдецил-N,N-диметил-3-аммонио-1 пропан-сульфонат (CAS No.14933-08-5. Большинство коммерчески доступных бетаинов используют при производстве детергентов, шампуней, косметики и т.д. Эти бетаины исходно получают из натуральных жиров, таких как кокосовое масло, животный жир, зародыши пшеницы, бабассовое масло, касторовое масло,каноловое масло, соевое масло и рапсовое масло. Есть основания считать, что все эти бетаиноподобные детергенты будут полезны при осуществлении заявленных в изобретении способов. Настоящее изобретение особенно полезно для характеристики и проверки клинических изолятов или лечения заболеваний, вызванных инфекционными микроорганизмами, в частности микроорганизмами, являющимися липо 002808 28 фильными или заключенными в воскоподобную капсулу, и характеризующиеся наличием структур миколевой кислоты на своей внешней стенке (внешней мембране), таких,например, как кориномиколевые кислоты, нокардомиколевые кислоты и миколевые кислоты среди прочих. Заявленными в изобретении способами предусматривается проверка микроорганизма,такого как Mycobacterium, на чувствительность к антибиотикам. В предпочтительном варианте осуществления изобретения микроорганизм представляет собой клинический изолят. Заявленные в изобретении способы направлены на терапевтическое применение, когда больной(человек или животное) подвергается терапии антибиотиками, в частности, с применением бетаиноподобных детергентов в сочетании с антибиотиками. Выбор бетаинов, используемых для тестирования или лечения согласно настоящему изобретению, будет зависеть от того, какой микроорганизм, предпочтительно бактерия,присутствует в образце. Подобные процедуры тестирования или терапевтические схемы применимы к любому конкретному микроорганизму и, в особенности,к конкретной бактерии. В особенно предпочтительном варианте осуществления изобретения микроорганизм представляет собой комплексMycobacterium или является членом данного комплекса. Например, подлежащие тестированию бактерии могут относиться к любой группе или комплексу Mycobacterium, или к любому виду Mycobacterium и, наиболее предпочтительно, к М.tuberculosis (MTB) комплексу, комплексу M.avium (MAC), комплексу MAIS и комплексу M.fortuitum. К подлежащим тестированию бактериям могут относиться как быстро растущие, так и медленно растущие микобактерии, включая идентифицированные и неидентифицированные фотохромогены, нонфотохромогены и скотохромогены. Любые микобактерии могут быть охарактеризованы или обработаны согласно настоящему изобретению, включая M.agri, M.abscessus, M.acetamidolyticum,М.africanum, M.aichiense, M.asiaticum, М.аurum,M.ausroafricanum, M.avium, M.bovis, M.bovisM.tuberculosis,M.africanum,M.bovis,M.bovis (BCG) и M.microti являются членами комплекса Mycobacterium.tuberculosis (MTB).M.terrae, M.triviale и M.nonchromogenicum являются членами комплекса M.terrae. M.avium иMycobacterium avium (MAC); имеется по меньшей мере три различных серологических группы M.avium и более чем 25 сероваровM.avium и микобактерий M.scrofulaceum, но не гибридизуются с нуклеотидными зондами (например, AccuProbe (Gen-Probe, San Diego, CA,гомологичными микобактериям комплексаM.scrofulaceum, M.szulgai, M.xenopi, M.gordonae и M.flavescens являются примерами скотохромогенов. M.avium, M.intracellulare, M.gastri,M.malmoense, M.terrae и M.triviale все служат примерами нонфотохромогенов.M.africanum,M.asiaticum,M.avium,M.bovis, M.bovis (BCG), M.cookii, M.gastri,M.gordonae, M.haemophilium, M.intracellulare,M.kansasii, M.leprae, M.lepraemurium, M.marinum, M.malmoense, M.microti, M.nonchromogenicum,M.paratuberculosis,M.scrofulaceum,M.shimoidei, M.simiae, M.terrae, M.triviale,M.tuberculosis, M.ulcerans и M.xenopi являются медленно растущими видами микобактерий (для выращивания требуется более семи дней).M.agri, M. abscessus, M.acetamidolyticum,M.aichiense, М.aurum, M.ausroafricanum, M.chelonae, M.chitae, M.chubuense, M.diernhoferi,M.duvalii, M.fallax, M.farcinogenes, M.flavescens,M.fortuitum, M.gadium, M.gilvum, M.komossense,M.moriokaense,M.neoaurum,M.peregrinum,M.obuense, M.parafortuitum, M.phlei, M.porcinum, M.poriferae, M.pulveris, M.rhodesiae,M.senegalense, M.smegmatis, M.sphagni, M.thermoresistible, M.tokaiense и M.vaccae являются быстро растущими видами микобактерий (для выращивания требуется менее семи дней). Примерами заболеваний и болезненных состояний, в которых участвуют микобактерии различных видов и которые можно лечить в соответствии с предложенными в изобретениями способами, являются прежде всего туберкулез(проказа человека) и M.lepraemurium (проказа грызунов, болезни птиц, вызываемые бактериями комплекса Mycobacterium avium, оппортунистические инфекции и суперинфекции больных СПИДом и другие заболевания, вызываемые М.avium (Nightingale, S.D. et al.,Jour.Infect.Dis. 165:1082-1085 (1992, и любые инфекции, вызываемые конкретными микобактериальным агентом, таким как, например,M.bovis (представляет особую важность для 30 ветеринарии), М.fortuitum (почвенная бактерия,выделенная из повреждений у животных и человека), М.intracellulare (вызывает оппортунистические инфекции, особенно у больных, инфицированных вирусом СПИД), M.paratuberculosis (представляет особый интерес при диагностике болезни Крона (регионального илеита) у людей), Mycobacterium kansasii (редкий, но разрушительный агент, обычно связанный с заболеваниями легких), Mycobacterium marinum(инфицирует холоднокровных животных и рыб; выделена также из подкожных гранулом конечностей у человека), Mycobacterium paratuberculosis (каузативный агент болезни Джона у телят; очень медленно растет в культуре, требуется 16 недель, прежде чем можно убедиться в отрицательном результате) и М.ulcerance (причина язвы Бурули). Многие из перечисленных видов микобактерий, а также и другие их виды обсуждаются Wayne, L.G. et al., Clin Micro.Rev.5: 1-25(1992) и Falkinham, O., Clin Micro. Rev. 9: 177215 (1996) (обе работы упоминаются в качестве ссылок). Бетаиноподобные детергенты можно использовать в качестве адъювантов сами по себе(если детергент обладает антимикробной активностью) или в сочетании с антибиотиками. Например, согласно одному из предпочтительных вариантов осуществления изобретения, бетаиноподобный детергент (детергенты) являются компонентом панели для проверки чувствительности (как описано в примере 10), при этом такие детергенты применяют сами по себе или в комбинации с антибиотиками или другими бетаиноподобными детергентами для характеризации чувствительности клинического изолята. В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения бетаиноподобные детергенты применяют сами по себе или в комбинации с антибиотиками для антимикробной терапии. При том, что бетаиноподобные детергенты можно применять сами по себе, in lieu антибиотиков, более предпочтительно применять их в сочетании с такими антибиотиками. В любом варианте осуществления изобретения бетаиноподобные детергенты применяют сами по себе или в сочетании с другими адъювантами, одновременно или последовательно. Например, бетаиноподобные детергенты можно использовать в сочетании с другими бетаиноподобными детергентами или с другими адъювантами, такими как ингибиторы -лактамазы. Согласно второму варианту осуществления изобретения, заявленные способы применяются для лечения больного, будь это человек или животное, которому это показано, эффективными количествами заявленных композиций,содержащих бетаиноподобный детергент сам по себе или антибиотик в сочетании с бетаиноподобным детергентом. Понятие антимикробной терапии также включает применение подобных комбинаций. Доставка бетаиноподобных детер 31 гентов может быть осуществлена любым способом, который обеспечит поступление больному эффективных количеств препарата, например,перорально или внутримышечной инъекцией,или, в частности, внутривенной капельницей, и,наиболее эффективно, вдыханием или наружным применением указанных композиций. Антибиотик может вводиться отдельным способом и в другом растворе, или же вводиться вместе с бетаиноподобным детергентом. Очевидно, бетаиноподобные детергенты должны хорошо переноситься при пероральном введении и внутримышечных инъекциях, внутривенные капельницы также могут служить важным способом доставки; однако, должны быть предприняты меры предосторожности в отношении концентрации бетаина в крови. При том, что введение бетаина в дозе, превышающей критическую мицеллярную концентрацию (CMC) может быть переносимо, могут возникнуть осложнения при превышении его общего уровня в крови выше CMC из-за солюбилизации компонентов крови. Инъекция в место инфекции, очевидно, является эффективным способом доставки, однако, это возможно лишь в редких случаях. Предпочтительно, чтобы композиция или, по меньшей мере, один бетаиноподобный детергент доставлялись наиболее прямым способом или, по-возможности, прямо в место инфекции. В этом отношении, применительно к тем микобактериальным инфекциям, которые, как туберкулез, являются респираторными инфекциями,ингаляция является наиболее предпочтительным способом доставки. Примером ингаляционного устройства для доставки бетаиноподобных детергентов, заявленных в изобретении,должен служить ингалятор, используемый в настоящее время для доставки альбутерола, блокатора для астматиков (т.е. Ventolin, продаваемыйGlaxo, Research Triangle Park, NC). Микобактериальные инфекции, вызываемые, например,М.ulcerans (язва Бурули) предпочтительно лечить наложением бетаиноподобного детергента прямо на повреждение (вместе с антибиотиками или без них) в виде мази. Дозировки и расписание введения данного бетаиноподобного детергента больному могут быть определены клиницистом, опытным в лечении микробных инфекций подобного рода. Обычно дозировки антибиотика и бетаиноподобного детергента будут варьировать в зависимости от следующих соображений: тип используемых антибиотика и бетаиноподобного детергента: возраст больного: состояние его здоровья; заболевание, подлежащее излечению; тип возможной конкурентной терапии; частота лечения и природа желаемого эффекта; степень повреждения ткани, пол больного, продолжительность симптомов и возможные противопоказания среди других переменных факторов должны учитываться врачом. Для достижения 32 желаемого результата доза может вводиться однократно или многократно. Вообще, рабочие концентрации могут варьировать в пределах от 0,1 мкг/мл для наиболее сильных соединений(например, карбоксиэтилбетаинов) до 1 мкг/мл для наиболее слабых соединений (например, тех карбоксибетаинов, которые в табл. 10 отмечены,как "не давшие эффекта"), при этом для большинства бетаиноподобных детергентов интервал концентраций от 1 до 100 мкг/мл будет наиболее применим. При применении бетаиноподобных детергентов в виде мази рабочие концентрации могут варьировать в пределах от 0,1 мкг/мл для наиболее сильных соединений до 1 мкг/мл для наиболее слабых соединений, при этом для большинства бетаиноподобных детергентов интервал концентраций от 1 до 100 мкг/мл будет наиболее применим. При осуществлении заявленных терапевтических способов такие бетаиноподобные детергенты могут применяться сами по себе или в сочетании с другими бетаиноподобными детергентами. Предпочтительно бетаин вводят на протяжении того же времени, что и антибиотик. Концентрация данного антибиотика будет зависеть от того, какой антибиотик используется. Согласно заявленным способам антибиотики могут применяться в терапевтически эффективных дозах, известных из уровня техники, или в таких концентрациях, которые определены как терапевтически эффективные в в заявленных тестах на чувствительность. К примерам различных классов антибиотиков, применимых при осуществлении заявленного способа, относятся-лактамные антибиотики, аминогликозиды,аминоциклитолы, хинолоны, тетрациклины,макролиды, линкозамиды, гликопептиды, липопептиды, полипептидные антибиотики, сульфонамиды, триметоприм, хлорамфеникол, изониазиды, нитроимидазолы, рифампины, нитрофураны, метенамин и мупироцин. К антибиотикам, обладающим значительной активностью против микобактерий, относятся, без ограничения перечисленными, амикацин, азитромицин, любой -лактам в сочетании с любым ингибитором -лактамазы, капреомицин, цефметазол, цефокситин, ципрофлоксацин,кларитромицин, клофазамин, циклосерин, дапзон, эритромицин, этамбутол (ЕМВ), этионамид,имипенем, изониазид (INH), канамицин, миноциклин, офлоксацин, парааминосалициловая кислота, протионамид, пиразинамид (PZA), рифампин (RPM), рифабутин, спарфлоксацин,сульфаметоксазол в сочетании с триметопримом, стрептомицином (SM), тетрациклином,триацетазолом и виомицином (Inderlied, C.B. etof Antibiotics 4th ed. J.B.Lippincott Co. Philadelphia, PA (1987) pp.1352-1437). Все перечислен 33 ные антибиотики могут применяться при осуществлении заявленных способов. Термин "-лактам" означает любой пенициллиновый, цефалоспориновый, монобактамный или карбапенемный антибиотик, в чью структуру входит -лактамное кольцо, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al.,In: Murray, P.R. et al., eds. Manual of Clinical Microbiology, ASM Press, Washington, D.C. (1995)(1987) pp.3-584). Все перечисленные -лактамы могут применяться при осуществлении заявленных способов. Термин "пенициллин" означает антибиотик, имеющий в качестве химического ядра 6 аминопеннициллановую кислоту, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al., In:pp.1282-1285). Примерами пенициллинов, без ограничения перечисленными, служат метициллин, нафциллин, клоксациллин, диклоксациллин, оксациллин, ампициллин, бакамипициллин,карбенициллин, трикациллин, мезлоциллин,пиперациллин и, в особенности, азлоциллин. Есть основания считать, что пенициллины с химической структурой, гомологичной таковой для приведенных выше пенициллиновых соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "цефалоспорин" означает антибиотик, имеющий в качестве химического ядра 7 аминоцефалоспораниловую кислоту, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al.,In: Murray, P.R. et al., eds. Manual of Clinical Microbiology, ASM Press, Washington, D.C. (1995)pp.1282-1285). Примерами цефалоспоринов,применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, цефадроксил, цефазолин, цефалексин,цефалоридин, цефалотин, цефапирин, цефрадин,цефаклор, цефамандол, цефоницид, цефоранид,цефпрозил, цефуроксим, лоракарбеф, цефметазол, цефотетан, цефиксим, цефотаксим, цефпродоксим, цефтидоксим и, в особенности, цефтриаксон. Есть основания считать, что цефалоспорины с химической структурой, гомологичной таковой для приведенных выше цефалоспориновых соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "монобактам" означает антибиотик, имеющий в качестве химического ядра лактамное кольцо, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al., In: Murray, P.R. et al.,eds. Manual of Clinical Microbiology, ASM Press,Washington, D.C. (1995) p.1285). Примером монобактама, применимого для осуществления заявленных способов, является, без ограничений названным, азтреонам. Есть основания считать, 002808 34 что монобактамы с химической структурой,гомологичной таковой для приведенного выше монобактама, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "карбапенем" означает антибиотик, имеющий в качестве химического ядра лактамное кольцо, боковую гидроксиэтиловую цепь в положении 6 (в транс конфигурации) и не имеющий атома серы или углерода в ядре, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C.(1995) pp. 1285-1286). Примерами карбапенемов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, имипенем, меропенем, панипенем и биапенем. Есть основания считать, что карбапенемы с химической структурой, гомологичной таковой для перечисленных выше карбапенемных соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "ингибитор -лактамазы" означает антибиотик, имеющий в качестве химического ядра модифицированную -лактамную структуру, как это понимается из уровня техники (Yao,J.D.C. et al., In: Murray, P.R. et al., eds. Manual ofClinical Microbiology, ASM Press, Washington,D.C. (1995) pp. 1286-1287). Известно, что эти соединения, обладая в чистом виде слабой антибактериальной активностью, действуют синергично с -лактамами. Ингибиторы -лактамазы интерферируют с ферментами, которые деградируют -лактамы (т.е. с -лактамазами). Например, -лактамазы разрушают -лактамы. Обладая такой функцией, микроорганизм эффективно избегает действия -лактамов, что обуславливает устойчивость инфекционного агента. Следовательно, ингибиторы -лактамазы полезны в сочетании с -лактамными антибиотиками, в качестве адъювантов при -лактамной терапии. Примерами ингибиторов -лактамазы,применимых для осуществления заявленных способов наряду с -лактамом, являются, без ограничения перечисленными, клавулановая кислота, сульбактам и тазобактам. Есть основания считать, что ингибиторы -лактамазы с химической структурой, гомологичной таковой для перечисленных выше ингибиторов лактамазы, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термины "аминогликозид" и "аминоциклитол"означают антибиотик, имеющий аминосахара, связанные гликозидиловыми связями с аминоциклитольным ядром, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al., In: Murray,P.R. et al., eds. Manual of Clinical Microbiology,ASM Press, Washington, D.C. (1995) pp.12871288); и Kucers, A. et al., The Use of Antibiotics 4th ed. J.B.Lippincott Co. Philadelphia, PA (1987)pp.585-750). Примерами аминогликозидов и аминоциклитолов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, стрептомицин, канамицин, гентамицин, тобрамицин, амикацин,сисомицин, нетилмицин, неомицин, фрамицетин и паромомицин. Есть основания считать,что аминогликозиды и аминоциклитолы с химической структурой, гомологичной таковой для перечисленных выше аминогликозидных и аминоциклитольных соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термины "хинолон" или "флуорохинолон" означают антибиотик, имеющий нафтиридиновое ядро с различными боковыми цепями, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C.of Antibiotics 4th ed. J.B.Lippincott Co. Philadelphia, PA (1987) pp. 1203-1275). Примерами хинолонов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, оксолиновая кислота, циноксацин, флумеквин, милоксацин, розоксацин,пипемидиловая кислота, норфлоксацин, эноксацин, ципрофлоксацин, офлоксацин, ломефлоксацин, темафлоксацин, флероксацин, пефлоксацин, амифлоксацин, спарфлоксацин, левофлоксацин, цинафлоксацин и, в особенности, налидиксиновая кислота. Есть основания считать,что хинолоны или флуорохинолоны с химической структурой, гомологичной таковой для перечисленных выше хинолонных или флуорохинолонных соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "тетрациклин" означает антибиотик, имеющий в качестве ядра гидронафтаценовую структуру, как это понимается из уровня техники (Yao, J. D. C. et al., In: Murray, P.R. etJ.B.Lippincott Co. Philadelphia, PA (1987) pp.9791044). Примерами тетрациклинов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, тетрациклин, хлортетрациклин, окситетрациклин,диметилхлортетрациклин, демеклоциклин, метациклин, лимециклин, кломоциклин, доксициклин и миноциклин. Есть основания считать,что тетрациклины с химической структурой,гомологичной таковой для перечисленных выше хинолонных или тетрациклиновых соединений,также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "макролид" означает антибиотик,имеющий макроциклическое лактоновое кольцо с двумя присоединенными сахарами, декозамином и кладинозой, и различными заменами, как 36 это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C.of Antibiotics 4th ed. J.B.Lippincott Co. Philadelphia, PA (1987) pp.851-892). Примерами макролидов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, эритромицин, олеандомицин,спирамицин, йозамицин, розарамицин, кларитромицин, азитромицин (известный также как азалид), диритромицин, рокситомицин, флуритромицин и рокитамицин. Есть основания считать, что макролиды с химической структурой,гомологичной таковой для перечисленных выше макролидных соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "линкозамид" означает антибиотик, имеющий аминокислоту, соединенную с аминосахаром, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al., In: Murray, P.R. et al.,eds. Manual of Clinical Microbiology, ASM Press,Washington, D.C. (1995) pp.1292-1293); и Kucers,A. et al., The Use of Antibiotics 4th ed.J.B.Lippincott Co. Philadelphia, PA (1987) pp.819850). Примерами линкозамидов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, линкомицин и клиндамицин. Есть основания считать,что линкозамиды с химической структурой, гомологичной таковой для перечисленных выше линкозамидных соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термины "гликопептид"или "липопептид" означают антибиотик, имеющий комбинацию пептида с углеводородным или липидным компонентом, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al., In: Murray, P.R. et al., eds.Co. Philadelphia, PA (1987) p. 1045-1072). Примерами гликопептидов и липопептидов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, ванкомицин, тейкопланин, даптомицин (известный также как YL 146032) и рамопланин(известный также как MDL 62198). Есть основания считать, что гликопептиды и липопептиды с химической структурой, гомологичной таковой для перечисленных выше гликопептидных и липопептидных соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "полипептидный антибиотик" означает антибиотик, имеющий циклическую полипептидную структуру, или аминокислоты,соединенные с пептидом, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al., In: Murray,P.R. et al., eds. Manual of Clinical Microbiology, 37pp.899-913 и 751-753). Примерами полипептидных антибиотиков, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, полимиксины А, В,С, D и Е, бацитрацин и грамицидин. Есть основания считать, что полипептидные антибиотики с химической структурой, гомологичной таковой для перечисленных выше полипептидных антибиотиков, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "сульфонамид" означает антибиотик, имеющий ядерную структуру, аналогичную парааминобензоиловой кислоте, как это понимается из уровня техники (Yao, J. D. C. et al., In:pp.1293-1295); и Kucers, A. et al., The Use of Antibiotics 4th ed. J. B. Lippincott Co. Philadelphia,PA (1987) pp. 1075-1117). Примерами сульфонамидов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, сульфаниламид, сульфацетамид, сульфапиридин, сульфатиазол, сульфадиазин, сульфамеразин, сульфадимидин, сульфазомидин, сульфасалазин, манефид, сульфаметоксазол, сульфаметоксипиридазин, сульфадиметоксин, сульфазимазин, сульфадоксин, сульфаметопиразин, сульфагуанидин, сукцинилсульфатиазол и фталисульфатиазол. Триметоприм применим для осуществления заявленных способов сам по себе или в сочетании с любым из сульфонамидов. Есть основания считать, что сульфонамиды и аналоги триметоприма с химическими структурами, гомологичными таковой для перечисленных выше сульфонамидных соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "нитроимидазольный антибиотик" означает антибиотик, имеющий нитроимидазольное ядро, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al., In: Murray, P.R. et al.,eds. Manual of Clinical Microbiology, ASM Press,Washington, D.C. (1995) p.1297); и Kucers, A. etCo. Philadelphia, PA (1987) pp. 1290-1343). Примерами нитроимидазольных антибиотиков,применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, метронидазол, тинидазол, ниморазол,орнидазол, карнидазол и секнидазол. Есть основания считать, что нитроимидазолы с химическими структурами, гомологичными таковой для перечисленных выше нитроимидазольных соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "хлорамфеникольный антибиотик" означает антибиотик, имеющий нитробензено 002808 38 вое кольцо в качестве структурного ядра, как это понимается из уровня техники (Yao, J. D. C.of Antibiotics 4th ed. J. B. Lippincott Co. Philadelphia, PA (1987) pp.757-807). Примерами хлорамфениколов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, хлорамфеникол и тиамфеникол. Есть основания считать, что хлорамфениколы с химическими структурами, гомологичными таковой для перечисленных выше хлорамфеникольных соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "рифампицин" означает антибиотик, имеющий анза- или макроциклическое структурное ядро (анзамициновые антибиотики), как это понимается из уровня техники (Yao,J. D. C. et al., In: Murray, P.R. et al., eds. Manualof Antibiotics 4th ed. J. B. Lippincott Co. Philadelphia, PA (1987) pp.914-970). Примерами рифампицинов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, рифампин, рифамицин SV,рифамицин В (рифамид) и рифабутин. Есть основания считать, что рифампицины с химическими структурами, гомологичными таковой для перечисленных выше рифампициновых соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "нитрофуран" означает антибиотик, имеющий гетероциклическое кольцо с нитрогруппой, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al., In: Murray, P.R. et al., eds.pp.1276-1289). Примерами нитрофуранов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленными, нифурател, нитрофуразон, фуразолидон и нитрофурантоин. Есть основания считать, что нитрофураны с химическими структурами, гомологичными таковой для перечисленных выше нитрофурановых соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "метенамин" означает антибиотик,имеющий четвертичный амин, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al., In:pp. 1344-1348). Примерами метенаминов, применимых для осуществления заявленных способов, являются, без ограничения перечисленны 39 ми, метенамин, манделат, метенаминагиппурат. Есть основания считать, что четвертичные амины с химическими структурами, гомологичными таковой для перечисленных выше метенаминовых соединений, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Термин "мупироцин"(известный также как псевдомониковая кислота) означает антибиотик,имеющий уникальную сущность 9-гидроксинонаноиловой кислоты, как это понимается из уровня техники (Yao, J.D.C. et al., In: Murray,P.R. et al., eds. Manual of Clinical Microbiology,ASM Press, Washington, D.C. (1995) pp.12991300); и Kucers, A. et al., The Use of Antibiotics 4th ed. J.B.Lippincott Co. Philadelphia, PA (1987)pp.754-756). Есть основания считать, что соединения с химическими структурами, гомологичными таковой для приведенного выше мупироцинового соединения, также будут применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Терапия больных, инфицированных бактериями комплекса Mycobacterium tuberculosis(MTB), предусматривает использование одного препарата или комбинации препаратов. К предпочтительным первичным препаратам (препараты "первого ряда") для лечения ТВ относятся изониазид (INH), рифампин (RMP), пиразинамид (PZA), стрептомицин (SM) и этамбутол"второго ряда") относятся ципрофлоксацин, офлоксацин, этионамид и циклосерин. К дополнительным препаратам, которые в настоящее время проходят испытания, относятся амикацин,рифабутин, рифапентин и спарфлоксацин (Inderlied, C.B. et al., In: Murray, P.R. et al., eds.Manual of Clinical Microbiology, ASM Press,Washington, D.C. (1995) pp.1385-1404). Любой препарат, обладающий активностью против содержащих структуры миколевой кислоты бактерий, будет применим при осуществлении заявленных в изобретении способов. Антимикробная терапия больных, инфицированных бактериями комплекса Mycobacterium avium (MAC), обычно предусматривает применение одного препарата или сочетания ограниченного числа препаратов. Препаратами"первого ряда" для лечения MAC-инфекций являются азитромицин, кларитромицин и ЕМВ к препаратам "второго ряда" относятся амикацин,клофазамин, ципрофлоксацин и рифабутин. К альтернативным лекарствам относятся циклосерин и SM (Inderlied, С.В. et al., In: Murray, P.R. etPress, Washington, D.C. (1995) рр.1385-1404). Все перечисленные антибиотики применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Инфекцию, вызываемую другими важными микобактериальными патогенами, например,M. kansasii, обычно лечат одним препаратом 40 или сочетанием препаратов, используемых для лечения инфекций ТВ или MAC, как это обсуждалось выше. Инфекции, вызываемые быстро растущими организмами (напр., M.fortuitum и М.chelonae) можно лечить амикацином или кларитромицином, а также -лактамами и, в особенности цефалоспоринами (Inderlied, C. B. et(1995) pp. 1385-1404). Все перечисленные антибиотики применимы при осуществлении заявленных в изобретении способов. Бетаиноподобные детергенты и/или антибиотики, применимые при осуществлении заявленных в изобретении способов, в частности терапевтических, могут вводиться в любой фармакологически или фармацевтические приемлемой форме, включая, при необходимости,фармацевтически приемлемую соль или носитель. Они могут вводиться в любой форме, которая оказывает профилактический, паллиативный, превентивный или лечебный эффект при микробной инфекции людей или животных. Дозы антибиотиков, применимых при осуществлении заявленных способов, обычно рекомендованы производителем. Эти дозировки можно найти, например, в Настольном справочнике врача (PRD), Medical Economics Company,Montvale, New Jersey, USA. Дозировки при ветеринарном применении можно найти, например, в The Merk Veterinary Manual, MerckCo.,Inc., Rahway, New Jersey, USA. Когда антибиотик (антибиотики) и бетаиноподобный детергент (детергенты) вводятся больному в виде индивидуальных препаратов,предпочтительно, чтобы концентрации каждого агента были эффективными, т.е. совпадали во времени. То есть, микроорганизм в месте инфекции у данного больного должен подвергаться в одно и то же время воздействию эффективных концентраций как антибиотика (антибиотиков), так и бетаиноподобного детергента (детергентов), независимо от того, каким образом данные агенты были индивидуально введены больному. Поэтому, например, больному может быть назначено совместное введение антибиотика и бетаиноподобного детергента, например,перорально - антибиотик, а бетаиноподобный детергент - ингаляцией или внутривенно. Если больному назначено совместное введение антибиотика (антибиотиков) и бетаиноподобного детергента (детергентов), то они могут быть применены одновременно, в одном и том же препарате, например, в виде мази или повязки,обеспечивающей поступление как антибиотика(антибиотиков), так и бетаиноподобного детергента (детергентов). Кроме того, больному может быть назначена "предобработка" как антибиотиком, так и бетаиноподобным детергентом в отсутствие другого компонента, а также "обработка" (лечение) антибиотиком или бетаиноподобным де 41 тергентом, с применением того компонента,который отсутствовал при "предобработке",будь это антибиотик или бетаиноподобный детергент, на протяжении времени, за которое не утрачен эффект предобработки на микроорганизм. Поэтому, например, больной может быть предобработан бетаиноподобным детергентом с тем, чтобы нарушить проницаемость и/или жизнеспособность микроорганизма до введения антибиотика вместе с бетаиноподобным детергентом или без него. Альтернативно, больной может быть предобработан антибиотиком до введения бетаиноподобного детергента вместе с антибиотиком или без него. При смешивании каждый антибиотик (антибиотики) и бетаиноподобный детергент (детергента) могут быть в растворе, или же каждый из них быть в твердой форме (в частности, в виде суспензии). Альтернативно, один или несколько антибиотиков и/или один или несколько бетаиноподобных детергентов могут присутствовать в твердой форме в растворе других антибиотиков или детергентов. Примерами композиций согласно настоящему изобретению, предназначенных для парентерального введения, служат стерильные водные или неводные растворы, суспензии и эмульсии. Примерами полезных неводных растворителей являются пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительное масло, рыбий жир и органические эфиры для инъекций. К водным растворителям относятся вода, растворы спирта в воде, эмульсии или суспензии, включая раствор хлорида натрия, рингеровский раствор декстрозы, раствор хлорида натрия с декстрозой,раствор Рингера, содержащий лактозу или стабилизированные масла. Примерами носителей для внутривенного введения служат заместители жидкости, электролитные заместители, основанные на растворе Рингера с декстрозой и им подобные. Инъекционные препараты, такие как масляные растворы, суспензии или эмульсии, можно получить, исходя из уровня техники, с применением приемлемых диспергирующих, увлажняющих или суспендирующих агентов, в зависимости от необходимости. Когда активные соединения водорастворимы, например, существуют в виде водорастворимых солей для приготовления стерильных инъекционных препаратов можно использовать нетоксические парентеральные разбавители или растворители, такие как стерильная непирогенная вода или 1,3 бутандиол. Среди других приемлемых носителей и растворителей, которые могут применяться, можно назвать 5%-ную декстрозу для инъекций, раствор Рингера для инъекций и изотонический раствор хлорида натрия для инъекций(как описано в USP/NF - Фармакопее США). Когда активные соединения представляют собой неводорастворимую форму, используют стерильные масляные суспензии, содержащие 42 приемлемые липофильные растворители или носители, такие как жирные масла, например,сезамовое (кунжутное) масло или синтетические эфиры жирных кислот, например, этилолеат или триглицериды. Альтернативно, могут использоваться водные инъекционные суспензии, содержащие вещества, повышающие вязкость, например натрийкарбоксиметилцеллюлозу, сорбитол и/или декстран в сочетании со стабилизаторами. Фармацевтические препараты для орального применения можно получить путем сочетания активных соединений с твердыми наполнителями, дополнительным гранулированием полученной смеси. После добавления приемлемых дополнительных компонентов, смесь или гранулы при желании или необходимости можно покрыть оболочкой и придать ей форму таблеток или драже. Приемлемыми носителями являются, в частности, такие наполнители, как сахара, например, лактоза и сахароза, маннитол или сорбитол,препараты целлюлозы и/или фосфаты кальция,например, трикальций фосфат или гидроксифосфат кальция, а также связующие, полученные с применением крахмалов и паст, таких,например, как кукурузный крахмал, пшеничный крахмал, рисовый крахмал или картофельный крахмал, желатин, акация, метилцеллюлоза,гидроксипропилметилцеллюлоза,натрийкарбоксиметилцеллюлоза, и/или поливинилпирролидон, и/или, по желанию, дезинтегрирующие агенты, такие как упоминавшиеся выше крахмалы, карбоксиметил крахмалы, поперечно сшитый поливинилпирролидон, агар или альгиновая кислота или ее соли, например, альгинат натрия. Дополнительные компоненты включают, кроме перечисленных выше веществ, агенты, регулирующие текучесть, и любриканты, например,кремний, тальк, стеариновую кислоту или ее соли, такие как стеарат магния или стеарат кальция, с соответствующим покрытием, которое может быть устойчивым к действию желудочного сока, и с этой целью, среди прочего,могут вводиться концентрированные растворы сахара, которые могут дополнительно содержать гуммиарабик, тальк, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль и/или диоксид титана,растворы лаков и приемлемые органические растворители или смесь растворителей. Для того, чтобы получить покрытие, устойчивое к действию желудочного сока, применяют растворы соответствующих препаратов целлюлозы, таких как фталат ацетилцеллюлозы или фталат гидроксипропилметилцеллюлозы. В покрытие таблеток или драже могут вводиться краски или пигменты, например, для идентификации или для характеристики различных сочетаний активного соединения в дозировочной форме. К другим фармацевтическим формам для орального применения относятся сборные капсулы, изготовленные из желатина, а также мяг 43 кие, заплавленные капсулы, изготовленные из желатина с таким пластификатором, как глицерин или сорбитол. Сборные капсулы могут содержать активные соединения в виде гранул,смешанных, например, с такими наполнителями, как лактоза, такими связующими, как крахмалы, и/или такими любрикантами, как тальк или стеарат магния, и, дополнительно, со стабилизаторами. В мягких капсулах активные соединения предпочтительно растворены или суспендированы в соответствующих липидах, таких как жирные кислоты, жидкий парафин или жидкие полиэтиленгликоли; в этом случае также возможно добавление стабилизаторов. Суппозитории для ректального применения соединений согласно настоящему изобретению могут быть получены путем смешивания препарата с соответствующим основанием для суппозиториев, к которым относятся такие нераздражающие наполнители, как кокосовое масло, природные или синтетические триглицериды, парафиновые углеводороды, полиэтиленгликоли или высшие алканолы и особенно основания, которые остаются твердыми при нормальной температуре, но становятся жидкими при температуре тела и потому плавятся в прямой кишке, высвобождая препарат. Кроме того, возможно применение желатиновых ректальных капсул, состоящих из комбинации активного соединения и основания; к возможным материалам в этом случае относятся жидкие триглицериды, полиэтиленгликоли или парафиновые углеводороды. К твердым дозировочным формам для орального применения относятся капсулы, таблетки, пилюли, пастилки, леденцы, порошки и гранулы. В таких твердых дозировочных формах активное соединение может быть смешано,по меньшей мере, с одним инертным наполнителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие дозировочные формы могут быть "одеты" соответствующим покрытием, регулирующим высвобождение активных компонентов. К жидким дозировочным формам для орального применения относятся фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры, содержащие инертные нетоксические растворители, обычно применяемые для подобных целей, такие как вода и спирт. Такие композиции могут также содержать адъюванты, такие как увлажняющие агенты, эмульгаторы, суспендирующие агенты, осладители, ароматизаторы и отдушки. Композиции согласно настоящему изобретению могут вводиться при помощи микронасосов или в виде форм поддерживаемого высвобождения. Композиции согласно настоящему изобретению могут быть доставлены в конкретные органы в высоких концентрациях при использовании соответствующих катетеров или же путем введения таких молекул в состав химерных молекул (или комплексов), предназна 002808 44 ченных для "нацеливания" на конкретный орган. Введение в виде форм поддерживаемого высвобождения более удобно для больного, когда ему показаны повторные инъекции на протяжении длительного времени. Бетаиноподобные детергенты или антибиотики, применяемые в композициях и способах согласно настоящему изобретению, могут назначаться в таких дозировочных формах, как таблетки, капсулы, содержащие порошок мази,порошки, или жидкие растворы для орального применения в том случае, если биологическая активность материала не разрушается в ходе пищеварения и если характеристики соединения делают возможным его всасывание в желудочно-кишечном тракте. Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут быть получены способом, известным из уровня техники, например, при помощи обычного смешивания,гранулирования, приготовления драже, растворения, лиофилизации или аналогичными процессами. Способы согласно настоящему изобретению, в частности тест на чувствительность,также удобно осуществимы если компоненты,используемые в таком тесте, поставляются в виде набора. Такой набор предпочтительно содержит соответствующие буферы, соли, бетаиноподобные детергенты или их комбинацию,антибиотик (антибиотики) или их комбинацию и, при необходимости, воду соответствующей степени чистоты. В предпочтительном варианте осуществления изобретения поставляются коллекция различных бетаиноподобных детергентов и коллекция различных антибиотиков. Бетаиноподобные детергенты и/или антибиотики в коллекции могут быть такими, которые специально подобраны для конкретного микроорганизма, или же коллекция может быть составлена без учета специфики конкретного микроорганизма. Предпочтительно, поставляются не менее пяти различных бетаиноподобных детергентов, хотя в предпочтительном варианте осуществления изобретения поставляется более широкий выбор, т.е. более 5-ти, например, 10, 15, 20,25 или 30, или же любое число в этих пределах. Предпочтительно, поставляются не менее пяти различных антибиотиков, хотя в предпочтительном варианте осуществления изобретения поставляется более широкий выбор, т.е. более 5 ти, например, 10, 15, 20, 25 или 30, или же любое число в этих пределах. Конкретные наборы,по желанию, содержат, среди прочего, конкретную микобактерию, в частности, Mycobacterium,для использования в качестве стандарта. В таком наборе, если небактериальные компоненты еще не смешаны, такие компоненты находятся в непосредственной близости друг к другу, пусть даже в различных контейнерах или упаковках, и 45 в непосредственной близости к любым микробиологическим образцам, входящим в набор. Пилотное исследование СВ-18 Описываемое изобретение уходит корнями в наблюдения, сделанные при осуществлении изобретения Thornton WO 95/27076 и USA 5,658,749 (способ, описанный в примере 1). В примере 2 приведены результаты экспериментов с описанной процедурой обработки, показывающие, что чувствительность жидких культур подвержена сильному влиянию сочетания СВ 18 с антимикробной добавкой PANTA, усиленной цефтазидимом (caz) (табл. 6). Из табл. 6 видно, что чувствительность культур NALC/NaON в жидкой и плотной среде составляла 98,4 и 75,4%, соответственно, тогда как чувствительность в жидкой и плотной среде того же набора образцов, обработанных СВ-18, составляла 64,0 и 83,1%, соответственно. Другими словами, чувствительность в жидкой культуре с СВ-18 была подавлена даже когда СВ-18 обеспечивал на 46% общее повышение чувствительности (табл. 3). Более существенным оказалось наблюдение, что разница в чувствительности в жидких культурах положительных и отрицательных образцов составляла только 4% для осадков NALC/NaON (т.е. 100% против 95,8%),а такое же сравнение применительно к СВ-18 показало разницу в 65% (т.е. 75,0% против 45,4%). Поскольку разница в чувствительности на плотных средах для положительных и отрицательных образцов, обработанных двумя различными способами, была сопоставима (34% против 39% для NALC/NaOH и СВ-18, соответственно), исходно считали, что усилениеPANTA добавлением caz полностью ответственно за утрату чувствительности в жидких культурах. Пример 3 (фиг. 3 А-3 Н), однако, выявил, что СВ-18 обладает способностью не только влиять на ростовые характеристики тестируемого изолята (571/573-BAL: см. таблицу 8), но что PANTA сам по себе или в сочетании сcaz также обладал способностью влиять на ростовые характеристики данного изолята. Этот эффект, так называемый "эффект СВ-18", был синергичным и ступенчатым когда СВ-18 добавлялся в сочетании с антибиотиками.PANTA содержит полимиксин В, амфотерицин В, налидиксиновую кислоту, триметоприм и азлоциллин. Назначение амфотерицина В состоит в предотвращении контаминации грибами, а все остальные антибиотики обладают антибактериальной активностью. Полимиксин В является полипептидом, который взаимодействует с фосфолипидами, приводя к изменениям проницаемости. Налидиксиновая кислота - это хинолон, интерферирующий с синтезом ДНК(на уровне ДНК-гиразы). Триметоприм является аналогом пиримидина, обычно применяемым в сочетании с сульфонамидами, который также влияет на синтез ДНК (на уровне дегидрофолатредуктазы). Азлоциллин - это пеннициллиновый 46 антибиотик, относящийся к семейству лактамных антибиотиков и проявляющий свое действие на уровне синтеза структур клеточной стенки. Показано, что налидиксиновая кислота,Триметоприм и азлоциллин обладают активностью в отношении различных видов микобактерий. Тот факт, что СВ-18 может влиять на рост в сочетании с PANTA без caz (пример 3, фиг. 3F и 3 Н), показывает, что данный феномен не определяется полностью присутствием цефтазидима,но широко применим к различным классам антибиотиков (supra). Фиг. 28-30 иллюстрируют широту применения различных классов антибиотиков. Есть основания полагать, что данный феномен будет наблюдаться при использовании различных классов антибиотиков. Первоначально цефтазидим был введен в систему детекции CB-18/12B/PANTA для предотвращения контаминации (пример 1), но не за счет жизнеспособности микобактерий. Это заключение было сделано после экспериментов по проверке действия различных цефалоспоринов на жизнеспособность микобактерий. К проверенным комбинациям PANTA-цефалоспорин, с добавлением цефтазидима, относятся цефоперазон (cfp), цефотаксим (сft) и цефтриаксон (сax) в различных сочетаниях (например, cfp/cft, cfp/cax и cfp/cft/cax). Данные эксперименты были проведены с использованием СВ-18 в концентрации 7-15 мкг/мл и различных АТСС штаммов М.tuberculosis (АТСС 27294), М.avium (ATCC 25291),М.kansasii (АТСС 12478), M.fortuitum (АТСС 6841), М.xenopi(ATCC 19250), М.gordonaecaz было единственным составом, оказавшим минимальное воздействие на эти изоляты в ходе предварительных исследований. Например, все сочетания PANTA с cfp/cft, cfp/cax и cfp/cft/cax вызывали заметную задержку роста всех проверенных изолятов. PANTA/caz вызывал задержку роста проверенного изолята М.avium и заметную задержку роста проверенного изолята М.gordonae. В пилотном исследовании СВ-18 в системе СВ-18/12B/PANTA/caz было проверено 14 положительных изолятов из мазков (табл. 6). Анализ этих 14-ти положительных изолятов показал, что 5 из них относились к МТВ, а другие 9 к различным видам МОТТ, включая 4 MAC, 2 М.fortuitum и по одному М.chelonae, M.szulgai и М.kansasii. Существенный вывод, следующий из этих результатов, состоит в том, что система СВ-18/12B/PANTA/caz влияет на широкий спектр микобактерий, как МТВ, так и МОТТ. Эффект СВ-18 наблюдался и в отсутствие цефтазидима (пример 3), т.е. другие антибиотики (т.е. оба цефалоспорина, другие компонентыPANTA и дополнительные антибиотики) могли вызывать задержку роста различных микобактерий и очевидная чувствительность системы к концентрациям В-18 привела к постановке экс 47 периментов, описанных в примерах 5 и 6. Опыты примера 5 были направлены на тестирование изолятов М.tuberculosis, комплекса М.avium и комплекса М.fortuitum в отношении концентрации СВ-18, а в пример 6 посвящен определению характера чувствительности изолятов М.tuberculosis. В табл. 7 суммированы результаты опытов примера 5, в на фиг. 10-15 представлены результаты опытов с различными видами микобактерий. В табл. 8 суммированы результаты опытов примера 6, в на фиг. 17-27 представлены результаты опытов с протестированными изолятами М.tuberculosis. Из фиг. 28-30 видно, что данный феномен не ограничивается только проверенными -лактамами. При том, что в описанных в примерах 5 и 6 опытах наблюдались существенные различия между видами и изолятами, на всех проверенных видах и изолятах в той или иной степени проявлялся синергизм действия СВ-18 и антибиотиков. Изоляты М.tuberculosis оказались наиболее чувствительными из всех проверенных микобактериальных видов, а для быстрорастущих видов была характерна меньшая чувствительность, но наивысший синергизм при применении СВ-18 в сочетании с антибиотиками. Изоляты комплекса М. avium проявляли промежуточный ответ. В основном, все изоляты могут быть дифференцированы на основе их ростовых характеристик в присутствии СВ-18 и различных антибиотиков. Таким образом, эффект СВ-18 зависит от изолята и использованного антибиотика, и наличие СВ-18 в соответствующей концентрации необходимо для дифференцирования изолятов. Это наблюдение привело к выводу о том,что различные бетаины могут обеспечивать более высокую степень чувствительности в отношении дифференцируемых изолятов. В примере 7 использованы различные детергенты в сочетании с раствором для реконституции (R.F.),PANTA или PANTA/сax. В таблице 10 суммированы результаты этих опытов и на фиг. 32 В представлены результаты, полученные с несколькими различными детергентами (в присутствии только Р-сах). Таким образом, эффект СВ 18 зависит от динамического взаимодействия изолята, детергента и антибиотика и именно в данном взаимодействии заключается возможность использования эффекта СВ-18. Антимикробное лечение, устойчивость к лекарствам и проницаемость Антибиотики различаются в отношении их сайта действия. Например, Yao, J.D.C. et al., In:Murray, P.R. et al., eds. Manual of Clinical Microbiology, ASM Press, Washington, D.C. (1995) pp. 1281 -1307) рассматривает различные классы антибактериальных агентов и отмечает, что спектр сайтов действия сильно варьирует от воздействия или интерференции с различными аспектами синтеза и целостности клеточной стенки и клеточной мембраны, до синтеза белка,синтеза нуклеиновых кислот (т.е. предшествен 002808 48 ников РНК и ДНК), репликации ДНК, а некоторые препараты просто облегчают мутагенез. Бактерии нечувствительны (т.е. устойчивы) к различным антибиотикам по ряду причин.Manual of Clinical Microbiology, ASM Press,Washington, D.C. (1995) pp.1308-1326) (работа упоминается в качестве ссылки) рассматривает некоторые из этих механизмов. В целом антибиотик должен сначала проникнуть в клетку и затем оказать эффект в сайте действия. Основой устойчивости могут служить: (а) проницаемость организма, (б) молекулярная конфигурация сайта действия антибиотика может быть неподходящей или данный сайт может вообще не существовать в конкретном клиническом изоляте,или (в) бактерии могут модифицировать, разрушать или удалять антибиотик из внутриклеточного пространства. В первом случае, если бактерия непроницаема для препарата, антибиотик не может достичь сайта действия и оказать эффект. Во втором случае, если препарат может проникнуть в бактерию, но сайт действия (т.е. трехмерная структура сайта-мишени) таков, что антибиотик не может связаться, или сайт действия вовсе не существует (т.е. "адресные" структура или фермент не являются частью экспрессируемых компонентов), и поэтому данный препарат не оказывает влияния на бактерию. В последнем случае антибиотик может проникнуть в клетку, и мишень его действия существует, но бактерия может эффективно избежать действия препарата, деградируя антибиотик,модифицируя его со снижением токсичности,или удаляя антибиотик из внутриклеточной среды. Лечение микобактериальных инфекций сильно ограничено (supra), сильнее, чем в случае других микроорганизмов (Inderlied, C.B. et(1995) pp. 1385-1404). Нечувствительность этих микроорганизмов отчасти объясняется непроницаемой природой этого класса бактерий: микобактерии в 1,000 - 10,000 раз менее проницаемы, чем Escherichia coli (Jarlier, V., et al.,Jour.Bact. 172: 1418-1423 (1990) и Nikaido, H., etal., Res.Microbiol. 142:437-443 (1991. Connell,N.D., et al., In: Tuberculosis. Pathogenesis, Protection and Control. Bloom, B.R. ed. ASM Press,Washington, D.C. (1994) pp. 333-352 рассматривает характеристики проницаемости микобактерий и констатирует, что "низкая проницаемость клеточной стенки М.chelonae полностью объясняет уровень устойчивости данного организма к цефалоспорину". Низкая проницаемость частично ответственна за сложный характер чувствительности,характерный для микобактерий. Например, при том, что инфекции МТВ можно эффективно лечить INH и/или PZA, изоляты MAC обычно устойчивы к этим препаратам. Кроме того, изо 49 ляты M.fortuitum и М.chelonae обычно устойчивы ко всем антитуберкулезным лекарствам "переднего края" (Inderlied, C.B. et al., In: Murray,P.R. et al., eds. Manual of Clinical Microbiology,ASM Press, Washington, D.C. (1995) pp.13851404). Cynamon, M.H. et al., In: Drug Susceptibility in the Chemotherapy of Mycobacterial Infections, Heifets, L.B. ed. CRC Press, Boston, MA(1991), pp. 147-159 обсуждает лечение инфекций, вызываемых быстрорастущими микроорганизмами, в свете их различной чувствительности. Например, для каждой категории рассмотренных антибиотиков (-лактамы, сульфонамиды, макролиды, аминогликозиды и т.д.) описан разброс чувствительности от нескольких процентов до 100%, а интервал от 30 до 60% считается нормой (в зависимости от препарата и его концентрации). Heifets, L.B. In: Drug Susceptibility in the Chemotherapy of Mycobacterial Infections, Heifets, L.B. ed. CRC Press, Boston, MA(1991), pp. 13-57 суммирует аналогичные исследования, выполненные на МТВ и MAC, обсуждает разнообразие в чувствительности и отмечает, что характер чувствительности, весьма разнообразный, не слишком вариабелен. При том, что проницаемость вносит существенный вклад в характер чувствительности микобактерий, эти микроорганизмы имеют два дополнительных механизма, играющих важную роль в их устойчивости. Во-первых, инфекции МТВ обусловлены несколькими субпопуляциями клеток. Эти субпопуляции могут быть классифицированы как (а) активно растущие, (б)"полуспящие" в силу низкого рН макрофага, (в)"полуспящие" со спорадическими взрывами метаболизма и (г) "спящие" (Heifets, L.B. In:Drug Susceptibility in the Chemotherapy of Mycobacterial Infections, Heifets,L.B. ed. CRC Press,Boston, MA (1991), pp. 13-57). "Спящее" состояние дает возможность этим субпопуляциям выживать во время лечения. Другим механизмом,по-видимому, является генетическая нестабильность. Образование точечных мутаций обуславливает молекулярную вариабельность в потенциальной "мишени" терапевтического агента. В целом, вариабельность в характере чувствительности представляет собой сочетание этих механизмов и то, какой механизм является доминирующим, зависит от вида и даже изолята микроорганизма. В целом к механизмам устойчивости, наиболее значимым для микобактерий, относятся проницаемость, регуляция пролиферации (т.е."спящее" состояние) и структурная вариабельность сайта (сайтов) "мишени". В подходах, направленных на преодоление устойчивости,должны использоваться модификация проницаемости, понимание механизмов пролиферации и воздействие на них, или модификация химической структуры антибиотика с тем, чтобы он более полно "совпадал" с сайтом мишени. 50 В свете подобных перспектив должны быть рассмотрены пять соображений, представленных в примерах. Во-первых, механизм действия СВ-18 отличается от такового для четвертичных солей аммония. Эта группа детергентов обладает общим поверхностно-активным эффектом, приводящим к разрыву клеточной мембраны и денатурации клеточных белков (Hugo,W. B. In: S. C. I. Monograph no.19: Surface-ActiveAgents in Microbiology. London Soc. Chem. Industry, London (1964) pp.69-82). На фиг. 7 А-7C и 8 А-8 С проведено сравнение действия ТМА-18 и СВ-18, которое подтверждает, что эффект СВ 18 отличен от действия четвертичных детергентов. Однако в высоких концентрациях бетаины напоминают четвертичные детергенты и вызывают общий отрицательный эффект. Во-вторых, не наблюдается постантибиотиковый эффект (РАЕ). Например, 90-минутная обработка СВ-18 в концентрации 383 мкг/мл не оказывала явного воздействия на ростовые характеристики (фиг. 3 С и 3G). Если эффект СВ 18 специфичен, т.е. не вызывает общего отрицательного эффекта, а наоборот, требуются его минимальные концентрации на фоне активного метаболизма, тогда РАЕ должен быть минимальным. Изониазид является противотуберкулезным агентом, не обладющим РАЕ (Heifets,L.B. In: Drug Susceptibility in the ChemotherapyPress, Boston, MA (1991), pp. 13-57). Третье соображение обусловлено тем фактом, что применительно к некоторым изолятам эффект СВ-18 наблюдается в присутствии только жидкости для реконституции (R.F.) (т.е. в отсутствие антибиотиков) (фиг. 10-15). Тот факт, что данный эффект зависит от изолята(фиг. 17-27), дает основания предполагать существование специфического сайта действия для СВ-18. Другими словами, эффект СВ-18 является отражением микрогетерогенности в характере чувствительности среди микобактерий, в частности среди микобактерий комплекса. В-четвертых, эффект СВ-18 отличается от действия ЭДТА (фиг. 34-35). ЭДТА изменяет проницаемость, экстрагируя и хелатируя двухвалентные катионы металлов, которые стабилизируют структуры клеточной стенки. Rastogi, N.(1990) сообщают, что выращивание в присутствии 1 мМ ЭДТА (372,5 мкг/мл) имело столь разрушительный эффект, что полученные результаты не могли быть использованы в анализе(приблизительно эквимолярные количества) и было показано, что они ведут себя по-разному в заявленных тестах. Кроме того, Tsubone, К.,Jour.Pharm.Sci. 50:1051-1054 (1991) показывает, 51 что практически не существует корреляции (или она очень невелика) между хелатирующей активностью различных фосфобетаинов и антимикробной активностью. Кроме того, в табл. 10 рассмотрены различные протестированные бетаины. Те карбоксибетаины, которые содержали амидопропильную связь, оказались неэффективны по сравнению с карбоксибетаинами с тем же самым мостиком, но без амидопропильной связи (сравнены Хетаин (Hetaine CLA) или Шеркотаин (Schercotaine WOAB) с ДеТаином(DeTaine РВ) и Велветексом (Velvetex OLB. Амидопропильная связь не должна препятствовать хелатированию между центрами заряда, но должна интерферировать с эффектом СВ-18 в сайте действия, физиологическом по своей природе (т.е. ферменте). В-пятых, в примере 7 (фиг. 32 В) в данном тесте был проверен Твин 80: он не оказал эффекта на изолят 571/573-BAL в концентрации 17 мкг/мл (13 мкМ). Это довольно примечательный результат, поскольку несколько авторов сообщали о том, что введение Твина 80 в культуральную среду также вызывает индукцию чувствительности (Hui, J., et al., Antimicrob. AgentsChemo. 11:773-779 (1977); Yamori, S. et al., Microbiol. Immunol. 35:921 -926 (1991. Представленные нами результаты дают основания полагать, что механизм, при помощи которого Твин 80 проявляет свой эффект, отличен от такового для СВ-18. Например, при высоких концентрациях Твина 80 (т.е. 1% (10 мг/мл) рост действительно оптимален и даже концентрация, равная 10%, не оказывала подавляющего воздействия(Stinson, M.W. et al., Am.Rev.Resp.Dis. 104:717727 (1971. Напротив, СВ-18 в концентрации 37 мкг/мл не оказывал воздействия на рост, но в концентрации 54 мкг/мл полностью подавлял рост изолятов АТСС 27294 и 571/573-BAL (фиг. 10 А и 11 А). Эффект СВ-18 наблюдался в узком интервале концентраций (приблизительно между 13 мкг/мл и 27 мкг/мл, в зависимости от изолята). Наконец, лецитин отменял эффект СВ-18. Этот факт противоречит результатам Ваrrу, С.Е.et al., (U.S. 5,610,198). Barry, C.E. et al., (U.S. 5,610, 198) приводят лецитин в качестве адъюванта при осуществлении своего изобретения. Согласно описываемому здесь изобретению, данный фосфолипид должен действовать или нейтрализуя СВ-18 (аналогично его электростатическому взаимодействию с четвертичными солями), или как конкурентный ингибитор (интерферируя с СВ-18 в сайте действия). Поскольку СВ-18 имеет суммарный нейтральный заряд,последняя гипотеза выглядит более правдоподобной (т.е. стабильное электростатическое взаимодействие должно быть минимальным). Если такие липиды, как лецитин, действуют как конкурентные ингибиторы, то этим можно объяснить отсутствие РАЕ. 52 Если СВ-18 задерживается в липидных тельцах, как предполагает Thornton WO 95/27076, тогда бетаиноподобные детергенты не могут действовать как поверхностно-активные агенты. Если микобактерии гетерогенны в отношении сайта реализации эффекта СВ-18, то различные клинические изоляты должны вести себя по-разному в присутствии различных бетаиноподобных детергентов (пример 7). Кроме того, если изменение проницаемости облегчает доступ терапевтического агента к сайтумишени, а популяция клинического изолята гетерогенна в отношении сайта-мишени антибиотика, то можно ожидать вариаций также и на этом уровне (как видно из примеров 5 и 6). Можно ожидать, что сочетания бетаиноподобных детергентов и различных антибиотиков будут проявлять значительную вариабельность в отношении поведения. Таким образом, тест на бетаиновую чувствительность может давать информацию о двух различных сайтах действия. Изобретение может быть направлено на один или несколько механизмов устойчивости(т.е., проницаемость, "спящее состояние" или молекулярная совместимость). Без стремления ограничиться изложенной гипотезой нижеследующие объяснения приводятся для иллюстрации применимости изобретения. Задержка роста может быть проявлением стимуляции механизма, ответственного за "спящее состояние". Например, поскольку большинство антибиотиков имеет естественный срок полужизни, если эффект СВ-18 вызывает снижение метаболизма микобактерий на тот период, пока токсические уровни антибиотика не понизятся, то эффект СВ-18 может быть использован для определения природы клинического изолята в отношении его пролиферационных характеристик. Эта информация полезна клиницисту при выборе препарата и определении продолжительности лечения. Другой механизм устойчивости обусловлен проницаемостью микобактерий. Без стремления ограничиться изложенной гипотезой нижеследующие объяснения приводятся для иллюстрации применимости изобретения. Бетаиноподобные детергенты могут изменять проницаемость микобактерий путем модификации конформаций миколевой кислоты. Конечным результатом будет индуцированная чувствительность к антибиотикам. Эта информация полезна клиницисту при выборе препарата для наиболее эффективной терапии. Концепция о том, что эффект СВ-18 может являться результатом изменений модификации миколевой кислоты, частично основана на работе Yuan,Y. et al., Proc.Natl.Acad.Sci. 93:1282812833 (1996) и подробно проверена в Примере 9. Вообще, модификации миколевой кислоты могут быть прямо связаны с текучестью клеточной стенки. Определенные модификации снижают текучесть клеточной стенки, что коррелирует со снижением проницаемости. Считается, 53 что низкая проницаемость микобактерий играет существенную роль в устойчивости против антимикробных препаратов (Yuan.Y. et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.92:6630-6634 (1995); Brennan,P.J. et al., Annu.Rev.Biochem. 64:29-63 (1995. Напомним, что Connell, N. D. et al., In: Tuberculosis. Pathogenesis, Protection and Control. Bloom,B.R. ed. ASM Press, Washington, D.C. (1994)M.chelonae к цефалоспоринам исключительно проницаемости. Модификации миколевых кислот происходят через серию S-аденозил метионин (SАМ)зависимых ферментных реакций (фиг. 39 А).Barry, C.E. et al., (U.S. 5,610,198) отмечают, что тиолированные жирнокислотные производные("тиатетракозаноевые кислоты") могут быть использованы для ингибирования этих SAMзависимых модификаций миколевых кислот(фиг. 39 В), т.е. для лечения заболеваний, вызываемых патогенными микобактериями. Структура переходного состояния тиатетракозаноевых кислот напоминает бетаиноподобный детергент (Yuan,Y. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 93:12828-12833 (1996, в особенности основанный на сульфониуме карбоксибетаин (табл. 1 и фиг. 39 В). Для активации сульфониумкарбоксибетаинов не требуется энзиматического катализа и они будут ингибировать эти SAMзависимые ферменты. В отличие от бетаиноподобных детергентов, тиатетракозаноевые кислоты крайне нерастворимы. Другими словами, Крафтовы температуры тиатетракозаноевых кислот будут выше физиологически нормальной (т.е. 37 С). Сульфониумкарбоксибетаины будут значительно более растворимы (даже при R1=18-20, но особенно при R43 (табл. 1; Laughlin, R., Langmuir 7: 842-847 (1991. Бетаиноподобные структуры должны облегчить проблему растворимости и, в некоторой степени, проблему введения. Например, тиатетракозаноевые кислоты скорее всего останутся в твердой фазе при внутривенном введении. Поскольку бетаины более растворимы, внутривенное введение небольшой дозы будет более простым в силу более низкой Крафтовой температуры бетаинов. Ваrrу, С.Е. et al., (U.S. 5,610,198) указывают, что тиатетракозаноевые кислоты будут специфичны в отношении медленно растущих патогенных микобактерий. Ваrrу, С.Е. et al., (U.S. 5,610,198) также отмечают, что только те антибиотики, которые нарушают синтез миколевой кислоты, будут действовать синергично с этими тиолированными жирнокислотными производными. В настоящем описании констатируется,что бетаиноподобные детергенты применимы в отношении широкого спектра бактерий, содержащих структуры миколевой кислоты (т.е. коринебактерий, Nocardia, а также и микобактерий(пример 9, и что широкий круг антибиотиков может быть использован в соответствии со спо 002808(примеры 5 и 6). Синтез сульфониумкарбоксибетаина может быть осуществлен согласно схеме, приведенной на фиг. 39 С, однако, любой метод, приводящий к тому же конечному результату с применением известных из уровня техники способов, также приемлем (March, Advanced Organic Chemistry. Reactions, Mechanisms andYork, NY (1992) обе работы упоминаются в качестве ссылок). Без стремления ограничиваться приведенными далее объяснениями, можно подытожить,что эффект СВ-18, по-видимому, является следствием взаимодействия между бетаиноподобным детергентом и конкретным сайтом действия. Если это взаимодействие модифицирует проницаемость бактерий, содержащих структуры миколевой кислоты, то конечным результатом будет повышение эффективной концентрации антибиотика в сайте действия. Например,что касается изолятов, использованных в пилотном исследовании СВ-18 (табл. 7 и 8). Если эти микобактерии проявляют гетерогенность как в отношении сайта-мишени (т.е. синтез пептидогликана), так и в отношении сайта -лактамазы,то можно ожидать еще большей степени дискриминации в тесте на бетаиновую чувствительность. Например, возможен сценарий, когда конкретный изолят должен быть чувствителен к данному -лактаму, но из-за низкой проницаемости данный изолят может избежать действия антибиотика. Если бетаиноподобные детергенты способны повышать проницаемость данного изолята, то -лактамаза может обладать или не обладать способностью разрушать антибиотик до того, как он проявит свое действие. Если лактамаза тестируемого изолята дефицитна в отношении способности разрушать конкретную-лактамную структуру, изменения проницаемости может оказаться достаточно для проявления заметного отрицательного эффекта, наблюдаемого как эффект СВ-18. Есть основания считать, что различные бактерии, содержащие структуры миколевой кислоты, обладают существенными различиями в отношении места действия трех различных молекул, обсуждаемых в настоящем примере (-лактам, бетаиноподобный детергент и -лактамаза). Поэтому, чем больше число имеющихся антибиотиков (особенно, -лактамов), используемых в сочетании с большим количеством имеющихся бетаиноподобных детергентов, тем выше будет степень дискриминации. Тест на чувствительность, заявленный в настоящем изобретении, открывает возможность использования -лактамов в качестве терапевтических адъювантов при антитуберкулез 55 ной терапии, что чрезвычайно важно, поскольку количество наиболее используемых и хорошо охарактеризованных антибиотиков гораздо шире, чем только класс -лактамов. В силу широкого спектра действия этих антибиотиков лечение микобактериальных инфекций этими агентами должно иметь существенные преимущества. Применение -лактамов в терапевтических схемах, направленных на лечение микобактериальных инфекций, до настоящего времени имело ограниченный успех. Например, Chambers,H.F. et al., Antimicro.Agents Chemo. 39:26202624 (1995) проверили пять клинических изолятов МТВ и несколько различных классов лактамов. Большинство изолятов оказались устойчивы к пеннициллинам и большинству цефалоспоринов; однако, имипенем (карбопенем) проявил некоторую активность. Для достижения значительной чувствительности необходимо сочетание почти всех -лактамов с ингибитором-лактамазы. Как обсуждалось выше, ингибиторы лактамазы влияют на механизм устойчивости,при помощи которого организм разрушает антибиотик. Это является примером терапии антибиотиками, направленной на механизм устойчивости и потому усиливающий любую химиотерапию с применением -лактамов. Возможность расширить чувствительность микобактерий к антибиотикам, в частности, антибиотикам-лактамного ряда, имеющая целью механизмы усточивости, чрезвычайно важна для эффективного лечения микобактериальных инфекций. В описываемом изобретении используются молекулы, которые влияют на механизм устойчивости бактерий таким образом, который ранее описан не был. Анализ изолятов 512-JHH (фиг. 24) и 53 8-JHH (фиг. 25), а также понимание того факта, что СВ-18 обладает существенным воздействием на изолят, подвергнутый антитуберкулиновой терапии in vivo (табл. 9), подчеркивает терапевтическую применимость бетаиноподобных детергентов. При том, что изобретение полностью описано, квалифицированному специалисту будет понятно, что изобретение может быть осуществлено в широких и эквивалентных пределах условий, параметров и т.п., без нарушения идеи или объема изобретения или любого из вариантов его осуществления. Все процитированные работы приведены в качестве ссылок. Примеры Пример 1. Описываемое изобретение в значительной мере явилось результатом наблюдений, проведенных в ходе разработки новых способов обработки клинических образцов с целью обнаружения микобактерий. Данные процедуры основаны на методах Thornton, описанных в WO 95/27076 и направленных на первичную методологию выделения бактерий, содержащих 56 структуры миколевой кислоты, в частности микобактерий, из клинических образцов, в частности, из респираторных образцов. Способ Thornton (WO 95/27076) описан ниже, а приготовление реактивов для данной процедуры описано в конце данного примера.(1) Поместите 1-10 мл мокроты или бронхиального смыва в 50 мл коническую пробирку. Примечание: при том, что респираторные образцы являются преобладающим типом образцов, которые будут использоваться при проведении описываемой процедуры, пробы другого типа, такие как вода, почва, ткани, фекалии и другие, также могут быть использованы. Некоторые из этих проб должны быть предварительно осветлены путем суспендирования в воде или буфере и пропусканием смеси через колонкуSpin-X II, заполненную стеклянной смесью 2060 мкм (Corning Costar, Boston, MA). Такая колонка может также содержать матрикс, такой как Sephadex (Sephadex G-50: Pharmacia, Piscataway, NJ), или другую эквивалентную смолу для усиления очистки. Любой образец может быть обработан описанным ниже способом.(2) Добавьте к образцу равный объем ожижающего раствора 0,5% NALC (см. ниже: 0.5% NALC/25 мМ цитрата натрия) и перемешайте.(3) Инкубируйте при комнатной температуре 10 мин (перемешать через 5 мин и перед следующим этапом).(4) Откройте пробирку и добавьте к образцу стерильную, фильтрованную воду до конечного объема около 35 мл (Примечание: используйте стерильную фильтрованную воду (напр.,GIBCO/BRL, Gaithersburg, MD, Cat.15230022.(7) Инкубируйте при 37 С 90 мин при встряхивании (140 об/мин).(9) Декантируйте супернатант и добавьте к образцу 500 мкл стерильной воды или буфера.(10) Полностью ресуспендируйте осадок и подготовьте образец для обнаружения бактерий такими методами, как быстрое кислотное окрашивание (т.е., микроскопия), культивирование,амплификация нуклеиновых кислот или иммунодиагностика. В предварительных экспериментах, направленных на определение природы контаминантов, вырастающих на жидкой среде ВАСТЕС 12 В с добавлением PANTA, были использованы респираторные образцы (n=277) от QuestDianostics - Baltimore. (Примечание: жидкая культуральная система ВАСТЕС 12 В является 57 одним из стандартных методов культивирования микобактерий, а PANTA представляет собой антимикробную добавку, содержащую полимиксин В, азлоциллин, налидиксиновую кислоту, триметоприм и амфотерицин В: эта культуральная система была обозначена как"12B/PANTA"(Beckton Dickinson, Cockeysville,MD Образца забирали и обрабатывали СВ-18 в соответствии с описанной выше процедурой. Приблизительно 400-500 мкл каждого осадка засевали на 12B/PANTA. Всех контаминантов идентифицировали морфологически и окраской по Граму, а затем дифференцировали как положительные или отрицательные по оксидазе/каталазе. Затем определяли вид контаминантов и их чувствительность к антибиотикам с использованием панелей MicroScan (Dade,West Sacramento, CA). Результаты приведены в табл. 2. Таблица 2 Идентификация контаминантов в системе ВАСТЕС 12B/PANTA (n=277) Группа% Грамотрицательные 48 84,2% Грамположительные 5 8,8% Дрожжи 3 5,3% Грибы 1 1,8% Всего: 57 От 40 больных: контаминация = 14.4% Из табл. 2 видно, что из 40 образцов было выделено 57 контаминантов. Частота контаминации в расчете на образец составляла 14,4%(40-277). Эти данные дают основание считать,что главной проблемой при обработке респираторных образцов в соответствии с WO 95/27076(т.е. СВ-18), является присутствие грамотрицательных организмов (84%). Приблизительно 31Enterobacteriaceae. Наиболее частыми изолятами были Providencia stuartii (n=13), виды Pseudomonas (n=11) и Proteus mirabilis (n=7). Поэтому значительное снижение частоты контаминации требует существенного подавления грамотрицательных организмов. Данные по чувствительности показывают, что 40 из 48 грамотрицательных бактерий были чувствительны к цефтазидиму (в конечной концентрации 8 мкг/мл) при подавлении контаминации грамотрицательными организмами (система 12B/PANTA с добавлением цефтазидима"12B/PANTA/caz"). На основе параллельных опытов с использованием нескольких АТСС микобактериальных штаммов было показано,что цефтазидим должен снижать частоту грамотрицательной контаминации без значительного влияния на жизнеспособность микобактерий. Приготовление 10 Х СВ-18 буфераLouis, Mo, Cat.: S 7653) и перемешайте (примечание: используйте стерильную фильтрованную воду (напр., GIBCO/BRL, Gaithersburg, MD,Cat.15230-022.(iii) Доведите объем до 1 литра и убедитесь в полном растворении солей.(iv) Проверьте рН в аликвоте. Значение рН должно быть 8,00,2.(фильтр 0,22 мк), разделите на 50 мл аликвоты и храните при комнатной температуре.(i) Смешайте 25 мл изопропанола аналитической чистоты (Baxter, McGaw Park, IL,Cat.:3043-1 NY) с 25 мл воды в градуированном цилиндре и получите 50 мл смеси 1:1 изопропанол: вода (примечание: используйте стерильную фильтрованную воду(ii) Перенесите 25 мл смеси изопропанол:вода (1:1) в коническую пробирку на 50 мл.(iv) Добавьте еще смеси изопропанол:вода(1:1), приблизительно до 40 мл и осторожно перемешайте вращением. Дайте раствору постоять около 20 мин, осторожно помешивая каждый 5 мин.(v) Когда СВ-18 растворится (приблизительно через 30 мин) доведите конечный объем до 50 мл смесью изопропанол:вода (1:1) и перемешайте перевертыванием цилиндра.(vi) Разлейте раствор в две стерильные пластиковые конические пробирки на 50 мл и храните при комнатной температуре.(i) Определите количество образцов, которые будут тестироваться и введите это число в таблицу, приведенную ниже (прибавьте к этому числу один, чтобы иметь достаточный объем буфера), вычислите окончательное количество каждого компонента, необходимого для приго 59 товления соответствующего количества 10X Количество образцов плюс один(ii) Непосредственно перед использованием смешайте 20 Х буферные соли, NALC (Fluka,Ronkonkoma, NY, Cat.:01039), 100X CB-18 и доведите объем стерильной фильтрованной водой (примечание: используйте стерильную фильтрованную воду (напр., GIBCO/BRL,Gaithersburg, MD, Cat.15230-022. Примечание: Если в буфере в любой момент проведения процедуры образовался осадок, не используйте этот буфер. Раствор при хранении и использовании должен быть теплым(т.е. выше 20 С). Не храните этот раствор в холодильнике. Приготовление ожижающего раствора 0,5%(1) 10 Х стоковый раствор Na-цитрата: 0,25 мМ натрий цитрат дигидрат. Тринатрий цитрат дигидрат(i) Налейте около 25 мл воды в 100 мл градуированный цилиндр (примечание: используйте стерильную фильтрованную воду (напр.,GIBCO/BRL, Gaithersburg, MD, Cat.15230-022.(ii) Добавьте тринатрий цитрат дигидрат(Sigma, St. Louis, МО, Cat.% C-3434) и перемешайте вращением. Добавьте оставшуюся воду до 10 мл и перемешайте переворачиванием.(iii) Стерилизуйте фильтрованием (фильтр 0,22 мк), разделите на 50 мл аликвоты в конических пробирках и храните при комнатной температуре.(i) Определите примерный объем требуемого ожижающего раствора NALC.(ii) Смешайте 10X стоковый раствор Naцитрата и NALC (Fluka, Ronkonkoma, NY,Cat.:01039) в 50 мл конической пробирке или градуированном цилиндре и доведите конечный объем водой (примечание: используйте стерильную фильтрованную воду Приготовление стокового раствора цефтазидима и 12B/PANTA/caz(1) Стоковый раствор цефтазидима (36 мг/мл). Цефтазидим 72 мг 1 М Na-бикарбонат 85,6 мкл Добавьте воду до 2 мл(i) В мерной колбе на 2 мл смешайте 1 мл воды и 1 М Na-бикарбонат (Sigma, St. Louis, МО,Cat.: S 6297) (растворите 8.40 г Na-бикарбоната в 100 мл воды, простерилизуйте фильтрованием и храните в замороженном виде в 10 мл- и 1 мл аликвотах) (примечание: используйте стерильную фильтрованную воду (напр., GIBCO/BRL,Gaithersburg, MD, Cat.15230-022.(ii) Добавьте цефтазидим (Sigma, St. Louis,МО, Cat.: С 3809) и немедленно доведите объем водой до 2 мл.(iii) Осторожно перемешивайте переворачиванием до тех пор, пока раствор не станет прозрачным. Не нагревайте раствор выше комнатной температуры (т.е. не грейте раствор в руках).(iv) Немедленно разделите на 50 мкл порции в 1,5 мл микроцентрифужных пробирках и до использования храните при -70 С.(i) Достаньте из холодильника лиофилизированный PANTA и жидкость для реконституции (R.F.), а из морозильника - одну 50 мкл аликвоту стокового раствора цефтазидима (36 мг/мл).(ii) Когда цефтазидим оттает, с помощью 5 мл шприца добавьте 1 мл R.F. к стоку цефтазидима. Перемешайте набором в шприц один раз. Шприцом перенесите весь раствор во флакон с(iv) Добавьте 100 мкл PANTA/caz в каждый флакон 12 В до использования (добавление антибиотика должно происходить в пределах 2 часового интервала от добавления образца).(v) Храните неиспользованный раствор при -20 С не более 48 ч (т.е. не замораживайте и оттаивайте более 1 раза). Пример 2. Пилотное исследование СВ-18. СВ-18 был использован при обработке респираторных образцов для обнаружения микобактерий (кислые быстрорастущие бациллы,acid fast bacilli: AFB) с тем, чтобы оценить способы Thornton WO 95/27076. Респираторные образцы (n=573) собирали в ТВ-лаборатории Квест Диагностикс-Балтимор (BAL), Квест Диагностикс-Тетерборо (TBR), Вашингтон, Д.С.
МПК / Метки
МПК: C12Q 1/04
Метки: проверки, чувствительности, терапии, используемые, антимикробной, адъювантов, бетаины, качестве
Код ссылки
<a href="https://eas.patents.su/30-2808-betainy-ispolzuemye-v-kachestve-adyuvantov-dlya-proverki-chuvstvitelnosti-i-antimikrobnojj-terapii.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Бетаины, используемые в качестве адъювантов для проверки чувствительности и антимикробной терапии</a>
Трициклические соединения, обладающие активностью в отношении интегринов, в частности, в отношении интегрина альфаvбета 3, способ их получения и промежуточные соединения, используемые в этом способе,их применение в качестве медикаментов и содержащие их фармацевтические композиции.
Номер патента: 2271
Опубликовано: 28.02.2002
Авторы: Питти Роберт М., Бернар Серж, Кнолле Йохен, Бодари Сара С., Штильц Ханс-Ульрих, Венер Фолькмар, Карниато Дени, Макдауэлл Роберт С., Гадек Томас Р., Тетш Жан-Жорж, Гурвест Жан-Франсуа
МПК: A61P 9/10, C07C 281/12, A61K 31/19...
Метки: содержащие, качестве, используемые, интегринов, применение, фармацевтические, промежуточные, соединения, частности, отношении, трициклические, этом, способ, альфаvбета, медикаментов, интегрина, получения, композиции, активностью, обладающие, способе,их
Формула / Реферат:
1. Соединения общей формулы (I) в которой R1 обозначает группу -О-[А]-[В]-COR6, в которой R6 обозначает -ОН, C1-С6алкокси, -О-СН2-СН(ОН)-СН2OН, [A] обозначает группу C1-С6алкилен, возможно замещенный оксогруппой, [B] обозначает радикал -CH(Z)- или простую связь, Z обозначает группу -NHCO2Rc, или -NHSO2Rc, где Rc обозначает радикал фенил(C1-С4)алкил-, хинолинил или пиридинилимидазолил(C1-С4)алкил-, R2 и R3, одинаковые или разные, обозначают атом...
Устройство для проверки подлинности банкнот
Номер патента: 733
Опубликовано: 28.02.2000
Авторы: Мазовиески Томас В., Уолш Майкл, Блажек Мирослав
МПК: G07D 7/00
Метки: устройство, проверки, банкнот, подлинности
Формула / Реферат:
1. Устройство для проверки подлинности банкнот, включающее средства для определения подлинности банкноты, а также для приема и отбраковки банкноты, систему для определения соответствия указанной банкноты цветовому стандарту, фотодетектор для считывания светового излучения красного, зеленого и синего цветов, а также инфракрасного излучения, испускаемого со стороны банкноты, аналого-цифровые преобразователи, осуществляющие преобразование выходных...
Иммуномодулятор с антимикробной и антимикобактериальной активностью, способ его получения и лекарственный препарат для лечения микобактериозов, хронических неспецифических заболеваний легких, заболеваний, передающихся половым путем, и иммунодефицита на их основе
Номер патента: 1412
Опубликовано: 26.02.2001
Авторы: Мичурина Елена Андреевна, Гришин Владимир Кузьмич, Стукалов Николай Александрович, Голощапов Николай Михайлович, Костюк Любовь Елизаровна, Голощапова Елена Николаевна, Филипских Тамара Петровна, Цывкина Галина Ивановна, Хаитов Рахим Мусаевич
МПК: A61P 31/06, A61K 31/505, C07D 401/12...
Метки: антимикобактериальной, микобактериозов, антимикробной, легких, лекарственный, передающихся, заболеваний, основе, способ, хронических, половым, иммунодефицита, активностью, препарат, получения, лечения, путем, неспецифических, иммуномодулятор
Формула / Реферат:
1. Иммуномодулятор с антимикробной и антимикобактериальной активностью, представляющий собой N-(6-метил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидро-5-пиримидинсульфон)-N'-изоникотиноилгидразид гидрат, следующей формулы: 2. Способ получения иммуномодулятора с антимикробной и антимикобактериальной активностью, представляющего собой N-(6-метил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидро-5-пиримидинсульфон)-N'-изоникотиноилгидразид гидрат, следующей формулы: ...
Система для проверки состояния трубопроводов
Номер патента: 1491
Опубликовано: 23.04.2001
Авторы: Холен Свейн Оге, Доланн Альф
МПК: G01N 23/04, G01M 3/22
Метки: трубопроводов, система, проверки, состояния
Формула / Реферат:
1. Способ проверки состояния подвижных или деформируемых слоев в трубопроводе (1), в частности, в местах соединений между частями труб, при котором индикаторы или метки (11, 12) устанавливают, по меньшей мере, в один подвижный или деформируемый слой (5), например, из полимерного материала, который расположен между, по меньшей мере, двумя слоями (8, 9) из относительно твердого материала, например, стали, при этом индикаторы или метки (11, 12)...
Устройство для проверки листового материала, в частности банкнот.
Номер патента: 116
Опубликовано: 27.08.1998
Автор: Циммерман Карл-Хайнц
МПК: G07D 7/00
Метки: проверки, банкнот, материала, устройство, листового, частности
Формула / Реферат:
1. Устройство для проверки листового материала, в частности банкнот, имеющее листовое основание, с доступной для оператора лицевой стороной, на которой вдоль одной стороны и/или по разные стороны от перемещающего листовой материал транспортера смонтированы состоящие из одной или нескольких составных частей датчики, предназначенные для проверки различных свойств листового материала, отличающееся тем, что датчики (1-8) крепятся к основанию (30)...
Предыдущий патент: Сельскохозяйственные композиции, содержащие бактерии
Следующий патент: Промежуточные соединения для получения ациклических нуклеозидов
Случайный патент: Способ обработки компонентсодержащего материала и устройство