Комбинированные вакцины с синтетическими наноносителями

Раскрываются лекарственные формы и связанные с ними способы, которые содержат первую популяцию синтетических наноносителей, имеющих один или несколько первых антигенов,присоединенных к ним, один или несколько вторых антигенов, которые не присоединяют к синтетическим наноносителям, и фармацевтически приемлемый наполнитель. Родственные заявки Эта заявка заявляет приоритет согласно 35 U.S.С. 119 предварительных заявок США 61/348713,поданной 26 мая 2010 г., 61/348717, поданной 26 мая 2010 г., 61/348728, поданной 26 мая 2010 г., и 61/358 635, поданной 25 июня 2010 г., полное содержание каждой из которых целиком включается в настоящий документ посредством ссылки. Предпосылки изобретения Как для минимизации количества детских вакцинаций, так и/или для обеспечения более широкой иммунной защиты против разных штаммов данного патогена, часто существует потребность в комбинировании множественных антигенов в единой лекарственной форме, полученная в результате вакцина называется мультивалентной вакциной. Количество антигенов, которое можно комбинировать в единую лекарственную форму, может быть ограничено количеством каждого антигена, необходимого для вызывания необходимого иммунного ответа и растворимости антигена в воде. В какой-то момент общий объем жидкости лекарственной формы становится слишком большим для того, чтобы удобно и/или безопасно вводить вакцину внутримышечным и/или подкожным путем. Это ограничение особенно заметно в случае конъюгата мультивалентных вакцин, таких как Prevnar, где каждый отличный олигосахаридный антиген конъюгируют к белковому носителю (например, с 7 или 13 олигосахаридными антигенами, конъюгированными к CRM197, нетоксичному мутированному дифтерийному токсину); или тетравалентных менингококковых вакцин, где антигены также конъюгируют кCRM197 или другим детоксифицированным формам дифтерийного токсина. Другим ограничением существующих составов вакцин является их ограниченный охват или их физическая несовместимость друг с другом, которая может исключать обычное перемешивание двух существующих вакцин для создания новой, комбинированной вакцины. Например, вакцины могут состоять из вирусоподобных частиц, состоящих из одного или нескольких антигенов, которые самособираются или связаны с самособирающимися белками. Примеры включают Cervarix и Gardasil, которые являются вакцинами против папилломавируса человека (HPV). Обе эти вакцины нацелены на антигены, которые происходят от белка L1 ограниченного числа штаммов HPV. Эти вакцины не обеспечивают защиты от всех штаммов HPV. Для расширения охвата штаммов этих вакцин желательно иметь возможность примешивать дополнительные вирусные антигены, которые совместимы с существующими вакцинными составами, что обеспечивает более широкий охват, и в связи с этим создает новую расширенную мультивалентную вакцину. При определенных обстоятельствах может не быть возможным просто домешать дополнительные традиционно полученные антигены к существующей вакцине из-за нежелательных взаимодействий между дополнительными традиционно полученными антигенами и существующей вакциной (которые могут привести к выпадению осадка, агрегации и т.п.). Следовательно, необходимы композиции и способы, которые смогут решить обозначенные выше проблемы, которые ассоциированы с получением вакцин. Краткое описание настоящего изобретения В одном аспекте обеспечивается лекарственная форма, включающая (1) первую популяцию синтетических наноносителей, имеющих один или несколько первых антигенов, присоединенных к ним, (2) один или несколько вторых антигенов, которые не присоединяют к синтетическим наноносителям, и (3) фармацевтически приемлемый наполнитель. В одном варианте осуществления любая из обеспеченных лекарственных форм дополнительно содержит один или несколько адъювантов, которые связаны с синтетическими наноносителями первой популяции синтетических наноносителей. В другом варианте осуществления один или несколько присоединенных адъювантов включают любой из адъювантов, обеспечиваемых в данном документе. В одном варианте осуществления один или несколько адъювантов включают блок-сополимеры Pluronic, специфически модифицированные или полученные пептиды, мурамилдипептид, аминоалкилглюкозаминид-4 фосфаты, RC529, бактериальные анатоксины, фрагменты токсинов, агонисты Toll-подобных рецепторов 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9 и/или их комбинаций; производные аденина; иммуностимулирующую ДНК; иммуностимулирующую РНК; имидазохинолинамины, имидазопиридинамины, 6,7-конденсированные циклоалкилимидазопиридинамины, имидазохинолинамины с мостиковыми связями в положении 1 и 2; имиквимод; резиквимод; интерфероны I типа; поли I:С; бактериальный липополисахарид (LPS); VSV-G; HMGB-1; флагеллин или его часть или производные; или молекулы иммуностимулирующей ДНК, содержащиеCpG. В другом варианте осуществления один или несколько присоединенных адъювантов включают агонист toll-подобного рецептора 2, 3, 4, 7, 8 или 9. В еще другом варианте осуществления один или несколько присоединенных адъювантов включают имидазохинолин или оксоаденин. В очередном варианте осуществления имидазохинолин включает резиквимод или имиквимод. В другом варианте осуществления любая из лекарственных форм, обеспечиваемых далее, включает один или несколько адъювантов, которые не связаны с синтетическими наноносителями первой популяции синтетических наносителей. В одном варианте осуществления один или несколько неприсоединенных адъювантов включают стимуляторы или агонисты образраспознающих рецепторов, минеральные соли, квасцы, квасцы, комбинированные с монофосфориллипидом А энтеробактерий (MPL), MPL(AS04), AS15, сапонины, QS-21/Quil-A, ISCOM, ISCOMATRIX, MF59, Montanide ISA 51, Montanide ISA 720, AS02, липосомы и липосомальные составы, AS01, синтезированные или специфически полученные микрочастицы и микроносители, пузырьки наружной мембраны бактериального происхождения от N. gonorrheae or Chlamydia trachomatis, частицы хитозана, депообразующие средства, Блоксополимеры Pluronic, специфически модифицированные или полученные пептиды, мурамилдипептид,аминоалкилглюкозаминид-4-фосфаты, RC529, бактериальные анатоксины, фрагменты токсинов, агонисты Toll-подобных рецепторов 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9 и/или их комбинаций; производные аденина; иммуностимулирующую ДНК; иммуностимулирующую РНК; имидазохинолинамины, имидазопиридинамины, 6,7 конденсированные циклоалкилимидазопиридинамины, имидазохинолинамины с мостиковыми связями в положении 1 и 2; имиквимод; резиквимод; агонист для поверхностной молекулы DC CD40; интерфероныI типа; поли I:С; бактериальный липополисахарид (LPS); VSV-G; HMGB-1; флагеллин или его часть или производные; молекулы иммуностимулирующей ДНК, содержащие CpG; провоспалительные стимулы,высвобожденные из некротических клеток; кристаллы уратов; активированные компоненты каскада реакций комплемента; активированные компоненты иммунных комплексов; агонисты рецепторов комплемента; цитокины или агонисты цитокинового рецептора. В другом варианте осуществления один или несколько неприсоединенных адъювантов включают квасцы, AS01, AS02, AS04, AS15, MPL, QS-21, сапонин или иммуностимулирующую нуклеиновую кислоту, содержащую CpG. В еще одном варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм один или несколько первых антигенов идентичны одному или нескольким вторым антигенам. В дополнительном варианте осуществления любая из лекарственных форм дополнительно включает вторую популяцию синтетических наноносителей, имеющих один или несколько третьих антигенов,присоединенных к ним; где первый и третий антигены не идентичны. Еще в дополнительном варианте осуществления один или несколько первых антигенов любой из лекарственных форм включает антиген для В-клетки или антиген для Т-клетки. В одном варианте осуществления антиген для Т-клетки является универсальным антигеном для Т-клетки или антигеном для Тхелперной клетки. В другом варианте осуществления один или несколько первых антигенов включают антиген для В-клетки или антиген для Т-клетки и универсальный антиген для Т-клетки или антиген для Т-хелперной клетки. Еще в другом варианте осуществления антиген для Т-хелперной клетки включает пептид, который получен или происходит от овальбумина. В очередном варианте осуществления пептид,который получен или происходит от овальбумина включает последовательность, установленную в SEQID NO: 1. В варианте осуществления любой из лекарственных форм универсальный антиген для Тклетки или антиген для Т-хелперной клетки присоединяют с помощью инкапсуляции. В другом варианте осуществления один или несколько вторых антигенов любой из лекарственных форм включает антиген для В-клетки или антиген для Т-клетки. В одном варианте осуществления любая из обеспечиваемых лекарственных форм включает вакцину, которая содержит второй антиген, который не присоединяют к синтетическим наноносителям. В другом варианте осуществления вакцина включает конъюгат гаптен-носитель, вирусоподобную частицу,вакцину с синтетическими наноносителями, вакцину с субъединицами белка или аттенуированный вирус. В очередном варианте осуществления вакцина является любой вакциной, обеспечиваемой в настоящем документе. Еще в другом варианте осуществления вакцина предназначена против любого инфекционного агента, обеспечиваемого в настоящем документе. В очередном варианте осуществления вакцина против сибирской язвы; дифтерии, столбняка и/или коклюша; гемофилического гриппа типа В; гепатита В; гепатита А; гепатита С; опоясывающего герпеса (лишая); папилломавируса человека (HPV); гриппа; японского энцефалита; клещевого энцефалита; кори, свинки и/или краснухи; менингококковой инфекции; пневмококковой инфекции; полиомиелита; бешенства; ротавируса; брюшного тифа; ветряной оспы; вакцинии (натуральной оспы) или желтой лихорадки. В дополнительном варианте осуществления вакцина включает BIOTHRAX, DAPTACEL, INFANRIX, TRIPEDIA, TRIHIBIT, KINRIX, PEDIARIX, PENTACEL, PEDVAXHIB, ACTHIB, HIBERIX, COMVAX, HAVRIX, VAQTA, ENGERIX-B, RECOMBIVAX HB,TWINRIX, ZOSTAVAX, GARDASIL, CERVARIX, FLUARIX, FLUVIRIN, FLUZONE, FLULAVAL,AFLURIA, AGRIFLU, FLUMIST, JE-VAX, IXIARO, M-M-R II, PROQUAD, MENOMUNE, MENACTRA,MENVEO, PNEUMOVAX 23, PREVNAR, PCV13, IPOL, IMOVAX RABIES, RABAVERT, ROTATEQ,ROTARIX, DECAVAC, BOOSTRIX, ADACEL, TYPHIM VI, VIVOTIF BERNA, VARIVAX, ACAM2000 или YF-VAX. В другом варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов получают или происходят от любого из инфекционных агентов, обеспечиваемых в настоящем документе. В одном варианте осуществления инфекционный агент является вирусом семейства Adenoviridae, Picornaviridae, Herpesviridae, Hepadnaviridae, Flaviviridae, Retroviridae, Orthomyxoviridae, Paramyxoviridae, Papillomaviridae, Rhabdoviridae, Togaviridae или Paroviridae. В очередном варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов получают или они происходят от аденовируса, вируса Коксаки, вируса гепатита А, полиовируса, риновируса,вируса простого герпеса, вируса ветряной оспы, вируса Эпштейна-Барра, цитомегаловируса человека,-2 023397 герпесвируса человека, вируса гепатита В, вируса гепатита С, вируса желтой лихорадки, вируса денге,вируса Западного Нила, HIV, вируса гриппа, вируса кори, вируса свинки, вируса парагриппа, респираторно-синцитиального вируса, метапневмовируса человека, папилломавируса человека, вируса бешенства, вируса краснухи, бокавируса человека или парвовируса В 19. Еще в другом варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов получают или происходят от бактерий рода Bordetella, Borrelia, Brucella, Campylobacter, Chlamydia и Chlamydophila, Clostridium, Corynebacterium, Enterococcus, Escherichia, Francisella, Haemophilus, Helicobacter, Legionella, Leptospira, Listeria, Mycobacterium, Mycoplasma, Neisseria, Pseudomonas, Rickettsia, Salmonella, Shigella, Staphylococcus, Streptococcus, Treponema Vibrio или Yersinia. В дополнительном варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов получают или они происходят от Bordetella pertussis, Borrelia burgdorferi, Brucella abortus, Brucella canis, Brucella melitensis, Brucella suis, Campylobacter jejuni, Chlamydia pneumoniae, Chlamydia trachomatis, Chlamydophila psittaci, Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Corynebacterium diphtheriae, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Escherichia coli, Francisella tularensis, Haemophilus influenzae, Helicobacter pylori, Legionella pneumophila, Leptospira interrogans, Listeria monocytogenes, Mycobacterium leprae, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium ulcerans, Mycoplasma pneumoniae, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitides, Pseudomonas aeruginosa, Rickettsia rickettsii, Salmonella typhi, Salmonellacholerae или Yersinia pestis. В другом варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов получают или они происходят от грибка рода Candida, Aspergillus, Cryptococcus, Histoplasma, Pneumocystis или Stachybotrys. В очередном варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов получают или происходят от С. albicans, Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus, Cryptococcus neoformans, Cryptococcus laurentii, Cryptococcus albidus, Cryptococcus gattii, Histoplasma capsulatum, Pneumocystis jirovecii или Stachybotrys chartarum. Еще в одном варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от любого из антигенов, обеспечиваемых в настоящем документе. В одном варианте осуществления антиген включает VI, VII, Е 1 А, Е 319 К, 52 К, VP1, поверхностный антиген, белок 3 А, капсидный белок, нуклеокапсид, поверхностный вырост, трансмембранные белки, UL6, UL18, UL35, UL38, UL19, ранний антиген, капсидный антиген, Рр 65,gB, р 52, потенциальный ядерный антиген-1, NS3, оболочечный белок, домен оболочечного белка Е 2,gp120, р 24, липопептиды Gag (17-35), Gag (253-284), Nef (66-97), Nef (116-145), Pol (325-355), нейраминидаза, нуклеокапсидный белок, матричный белок, фосфопротеин, белок слияния, гемагглютинин, гемагглютинин-нейраминидазу, гликопротеин, Е 6, Е 7, оболочечный липопротеин или неструктурный белок (NS). В другом варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от токсина коклюша (РТ), филаментного гемагглютинина (FHA), пертактина (PRN), фимбрина (FIM 2/3), VlsE; DbpA, OspA, Hia, PrpA,MltA, L7/L12, D15, 0187, VirJ, Mdh, AfuA, L7/L12, внемембранного белка, LPS, антигена типа А, антигена типа В, антигена типа С, антигена типа D, антигена типа Е, FliC, FliD, Cwp84, альфа-токсина, тетатоксина, фруктозо-1,6-бифосфат-альдолазы (FBA), глицеральдегид-3-фосфат дегидрогеназы (GPD), пирувата:ферредоксин оксидоредуктазы (PFOR), фактора -G элонгации (EF-G), гипотетического белка(HP), токсина Т, антигена анатоксина, капсульного полисахарида, белка D, Mip, нуклеопротеина (NP),RD1, РЕ 35, РРЕ 68, EsxA, EsxB, RD9, EsxV, Hsp70, липополисахарида, поверхностного антигена, Sp1,Sp2, Sp3, глицерофосфодиэфир фосфодиэстеразы, белка наружной мембраны, белка шаперона-швейцара,капсульного белка (F1) или V -белка. В еще другом варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от поверхностного антигена, капсульного гликопротеина, Yps3P, Hsp60, главного поверхностного белка,MsgC1, MsgC3, MsgC8, MsgC9 или SchS34. В одном варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от одного или нескольких белков папилломавируса человека. В другом варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм один или несколько первых антигенов включают или получают или происходят от белка L1 папилломавируса человека, и один или несколько вторых антигенов получают или происходят от белка L2 папилломавируса человека. В еще другом варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм один или несколько первых антигенов включают или получают или происходят от белка L2 папилломавируса человека и один или несколько вторых антигенов получают или происходят от белка L1 папилломавируса человека. В очередном варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от одного или нескольких белков вируса гепатита В. В другом варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов-3 023397 включают или получают или происходят от поверхностного антигена гепатита В (HBsAg). В одном варианте осуществления HBsAg ayw штамма, продуцированного в Saccharomyces cerevisiae. В другом варианте осуществления, когда один или несколько первых антигенов получают или происходят от вируса гепатита В, один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от одного или нескольких белков папилломавируса человека. В дополнительном варианте осуществления, когда один или несколько вторых антигенов получают или происходят от вируса гепатита В, один или несколько первых антигенов включают или получают или происходят от одного или нескольких белков папилломавируса человека. В одном варианте осуществления один или несколько белков папилломавируса человека является белком L1 и/или L2 папилломавируса человека. В другом варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от одного или нескольких белков вируса гриппа. В одном варианте осуществления вирус гриппа является вирусом гриппа А, вирусом птичьего гриппа H5N1 или вирусом гриппа A H1N1. В другом варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм один или несколько первых антигенов получают или происходит от белка М 2 вируса гриппа А, и один или несколько вторых антигенов получают или происходят от гемагглютинина вируса птичьего гриппа H5N1. В дополнительном варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм один или несколько первых антигенов гемагглютинина вируса птичьего гриппа H5N1 и один или несколько вторых антигенов получают или происходят от белка М 2 вируса гриппа А. Еще в другом варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм один или несколько первых антигенов получают или происходят от белка М 2 вируса гриппа А, и один или несколько вторых антигенов получают или происходят от инактивированного бета-пропиолактоном вируса гриппа A H1N1. В очередном варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм один или несколько первых антигенов получают или происходят от инактивированного бетапропиолактоном вируса гриппа A H1N1, и один или несколько вторых антигенов получают или происходят от белка М 2 вируса гриппа А. В одном варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм фармацевтически приемлемый наполнитель включает консервант, буфер, солевой раствор, фосфатно-солевой буфер, окрашивающее средство или стабилизатор. В другом варианте осуществления любой из обеспечиваемых лекарственных форм первые синтетические наноносители включают наночастицы на основе липидов, полимерные наночастицы, металлические наночастицы, эмульсии на основе поверхностно-активного вещества, дендримеры, бакиболы, нанопроволоки, вирусоподобные частицы, частицы на основе пептидов или белков, липидно-полимерные наночастицы, сфероидальные наночастицы, кубоидальные наночастицы, пирамидальные наночастицы,продолговатые наночастицы, цилиндрические наночастицы или тороидальные наночастицы. В одном варианте осуществления каждая из популяций синтетических наноносителей включает один или несколько полимеров. В другом варианте осуществления один или несколько полимеров включают сложный полиэфир. В еще одном варианте осуществления один или несколько полимеров включают или дополнительно включают сложный полиэфир, соединенный с гидрофильным полимером. В еще одном варианте осуществления сложный полиэфир включает поли(молочную кислоту), поли(гликолевую кислоту), сополимер(молочной и гликолевой кислоты) или поликапролактон. В дополнительном варианте осуществления гидрофильный полимер включает простой полиэфир. В еще одном дополнительном варианте осуществления простой полиэфир включает полиэтиленгликоль. В другом аспекте обеспечивается способ, включающий введение любой из обеспечиваемых композиций субъекту. В одном варианте осуществления у субъекта есть или он подвергается риску возникновения инфекции или инфекционного заболевания. В другом варианте осуществления у субъекта есть или он подвергается риску возникновения рака. В одном варианте осуществления любого из обеспечиваемых способов, лекарственная форма вводится посредством перорального, подкожного, легочного, интраназального, внутрикожного или внутримышечного введения. В еще одном аспекте любую из лекарственных форм обеспечивают для применения в терапии или профилактике. В очередном аспекте обеспечивают любую из лекарственных форм для применения в любом из обеспечиваемых способов. В еще другом аспекте обеспечивают любую из лекарственных форм для применения в способе лечения или предотвращения рака. В дополнительном аспекте обеспечивают любую из лекарственных форм для применения в способе лечения или предотвращения инфекции или инфекционного заболевания. В одном варианте осуществления любой из лекарственных форм способ включает введение лекарственной формы посредством перорального, подкожного, легочного, интраназального, внутрикожного или внутримышечного введения. В очередном аспекте обеспечивается применение любой из лекарственных форм для производства лекарственного средства для применения в любом из способов. Краткое описание фигур На фиг. 1 показаны титры антител у мышей, иммунизированных комбинацией NC-M2e и свободного гемагглютинина из штамма вируса птичьего гриппа H5N1 (Вьетнам). На фиг. 2 показаны титры антител у мышей, иммунизированных комбинацией NC-M2e и свободно-4 023397 го гемагглютинина из штамма вируса птичьего гриппа H5N1 (Вьетнам), смешанной с 80 мкг квасцов. На фиг. 3 показаны титры антител у мышей, иммунизированных комбинацией NC-M2e и инактивированного бета-пропиолактоном вируса гриппа A H1N1 (H1N1 Новая Каледония/20/99/ IVR 116), смешанной с 80 мкг квасцов. На фиг. 4 показаны титры антител у мышей, иммунизированных комбинацией NC-пептид L2 иHBsAg штамм ayw, продуцируемым в дрожжах Saccharomyces cerevisiae, смешанной с 80 мкг квасцов. Детальное описание изобретения Перед тем, как описывать настоящее изобретение в деталях, подразумевается, что настоящее изобретение не ограничивается в частности иллюстрируемыми материалами или параметрами процесса, так как таковые могут, конечно, варьировать. Также подразумевается, что терминология, применяемая в данном документе служит только для цели описания конкретных вариантов осуществления настоящего изобретения, и не предназначается для ограничения применения альтернативной терминологии для описания настоящего изобретения. Все публикации, патенты и патентные заявки, цитируемые в данном документе, как выше, так и ниже, настоящим включаются посредством ссылки в своем полном объеме для всех целей. Используемые в настоящем описании и прилагаемой формуле изобретения формы единственного числа включают ссылки на множественное число, кроме тех случаев, когда содержание явно предписывает иное. Например, ссылка на "полимер" включает смесь из двух или более таких молекул, ссылка на"растворитель" включает смесь из двух или более таких растворителей, ссылка на "адгезив" включает смеси из двух или более таких материалов и т.п. Введение Изобретатели непредвиденно и неожиданно обнаружили, что проблемы и ограничения, приведенные выше можно преодолеть, применяя на практике настоящее изобретение, раскрытое в данном документе. В частности, изобретатели непредвиденно обнаружили, что возможно обеспечить композиции, и связанные с ними способы, которые содержат лекарственную форму, содержащую: первую популяцию синтетических наноносителей, обладающую одним или несколькими первыми антигенами, присоединенными к ним, одним или несколькими вторыми антигенами, которые не присоединяют к синтетическим наноносителям, и фармацевтически приемлемый наполнитель. В вариантах осуществления популяции синтетических наноносителей можно комбинировать с одним или несколькими вторыми антигенами (которые могут включаться широким спектром путей) для образования лекарственных форм по настоящему изобретению. Один или несколько вторых антигенов можно обеспечивать в форме растворов, форме суспензии, в форме порошка и т.п. и можно обеспечивать в виде вакцинного состава. Например, в варианте осуществления один или несколько вторых антигенов можно обеспечивать в форме вакцинного состава гаптен-белок-носитель или живой аттенуированный вирус, и популяция синтетических наноносителей, смешанная с вакцинными составами гаптен-белокноситель или живой аттенуированный вирус, образует лекарственную форму мультивалентной вакцины(или повышает валентность вакцинных составов гаптен-белок-носитель или живой аттенуированный вирус). В другом варианте осуществления популяцию синтетических наноносителей можно комбинировать с белками, взятыми от возбудителя инфекции, для образования лекарственной формы мультивалентной вакцины по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления популяцию синтетических наноносителей можно добавлять к другой популяции синтетических наноносителей, которые включают один или несколько вторых антигенов для образования лекарственной формы мультивалентной вакцины с синтетическим наноносителем. В других вариантах осуществления популяцию синтетических наноносителей можно комбинировать с белковыми антигенами в форме вирусоподобных частиц для образования лекарственной формы мультивалентной вакцины по настоящему изобретению. В других вариантах осуществления дополнительные антигены кроме одного или нескольких первых и/или вторых антигенов можно включать в лекарственную форму (посредством смешивания и других техник, раскрытых в настоящем документе или традиционно известных). В варианте осуществления синтетические наноносители, включающие один или несколько первых антигенов и необязательно универсальный антиген для Т-клетки или антиген для Т-хелпера и/или адъювант, можно добавлять к одному или нескольким вторым антигенам (например, существующей вакцине) для создания комбинированной вакцины с расширенным размахом охвата антигена. Например, вакцины Gardasil и Cervarix для защиты против HPV включают эпитопы белкового антигена из белка главного структурного белка L1, который происходит от 4 и 2 наборов штаммов HPV,соответственно. Известны вакцины с антигеном из пептида L1 от не более 9 различных штаммов HPV. Такая вакцина с множественными пептидными антигенами будет потенциально защищать индивида от большинства, но не от всех, штаммов HPV. Если популяцию синтетических наноносителей, включающую один или несколько пептидных эпитопов из другого структурного белка HPV, L2, добавляют к существующей вакцине на основе белка L1, будет получена более широкая защита от повторного введенияHPV с возможным созданием "универсальной вакцины от HPV." Эта популяцию диспергированных в воде синтетических наноносителей пептида L2 можно просто примешивать к существующим водным вакцинным составам, подобно тому как добавляют к составу наполнитель или растворитель. Этот про-5 023397 стой способ для расширения охвата обходится без внедрения пептида L2 в форму рекомбинантного белкового антигена, как традиционно делается. Это иллюстрируется в нижеизложенных примерах 1 и 2, которые вместе иллюстрируют состав комбинированной вакцины от HPV, содержащей общепринятуюGardasil, расширенную синтетическими наноносителями, включающими пептид, который происходит от белка L2. Изобретательский подход к вакцине с комбинацией синтетических наноносителей можно обобщить для включения профилактических или терапевтических вакцин от другого инфекционного заболевания с менее чем 100% защитой от различных штаммов инфекционного агента. Его можно также применять для профилактических и/или терапевтических вакцин, направленных против мишеней, не относящихся к инфекционному заболеванию, таких как рак или низкомолекулярные средства. В вариантах осуществления изобретательские композиции обеспечивают для комбинаций синтетических наноносителей с существующими "традиционными" вакцинами, которые можно просто составлять без ограничений растворимости белкового антигена при более высоких концентрациях. Это может уменьшить объемы мультивалентной вакцины и повысить простоту составления. Примеры 3-6 и 8-11 показывают различные варианты осуществления настоящего изобретения. Примеры 3 и 4 иллюстрируют комбинированную вакцину из общепринятых вакцин от гепатита В, расширенных синтетическими наноносителями, которые включают поверхностно-адсорбированный гепарин в качестве первого антигена. Примеры 5 и 6 иллюстрируют пероральную комбинированную вакцину традиционной антиротавирусной вакцины, расширенной синтетическими наночастицами, которые включают пептиды, произошедшие от белка L2 HPV. Примеры 8 и 9 иллюстрируют комбинированную вакцину из свободного гемагглютинина от штамма птичьего гриппа H5N1 (Вьетнам), расширенную синтетическими наноносителями, которые включают М 2 е, пептид для Т-хелпера OP-II и R848 без или с примешанным адъювантом, соответственно. Пример 10 иллюстрирует комбинацию инактивированной вакцины от вируса гриппа A H1N1 и расширенной синтетическими наноносителями, которые включают М 2 е,пептид для Т-хелпера OP-II и адъювант R848 с примешанными квасцами. Пример 11 иллюстрирует комбинацию рекомбинантного поверхностного антигена гепатита В, расширенного синтетическими наноносителями, которые включают пептид L2, пептид для Т-хелпера OP-II и R848 с примешанными квасцами. Представленные в примерах композиции также обеспечивают в настоящем документе, как и способы их введения субъекту. Настоящее изобретение теперь будет описываться более детально ниже. Определения"Адъювант" означает средство, которое не составляет специфичный антиген, но повышает силу и продолжительность иммунного ответа к совместно введенному антигену, предпочтительно антигену,присутствующему в лекарственной форме вместе с антигеном, и более предпочтительно к сопутствующему вводимому антигену. Такие адъюванты могут включать без ограничений стимуляторы образраспознающих рецепторов, таких как Toll-подобные рецепторы, RIG-1 и NOD-подобные рецепторы (NLR),минеральные соли, такие как квасцы, квасцы, комбинированные с монофосфориллипидом (MPL) А энтеробактерий, таких как Escherihia coli, Salmonella minnesota, Salmonella typhimurium или Shigella flexneri,или, в частности, с MPL (AS04), MPL А вышеупомянутых бактерий отдельно, сапонины, такие как QS21, Quil-A, ISCOM, ISCOMATRIX, эмульсии, такие как MF59, Montanide ISA 51 и ISA 720, AS02(QS21 + сквален+MPL), AS15, липосомы и липосомальные составы, такие как AS01, синтезированные или специфически полученные микрочастицы и микроносители, такие как пузырьки наружной мембраны бактериального происхождения (OMV) от N. gonorrheae, Chlamydia trachomatis и других, или частицы хитозана, депообразующие средства, такие как блок-сополимеры Pluronic, специфически модифицированные или полученные пептиды, такие как мурамилдипептид, аминоалкилглюкозаминид-4-фосфаты,такие как RC529, или белки, такие как бактериальные анатоксины или фрагменты токсинов. В вариантах осуществления адъюванты включают агонисты для образраспознающих рецепторов(PRR), в том числе без ограничения к Toll-подобным рецепторам (TLR), а именно, TLR 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9 и/или их комбинациям. В других вариантах осуществления адъюванты включают агонисты Tollподобных рецепторов 3, агонисты Toll-подобных рецепторов 7 и 8 или агонисты к Toll-подобному рецептору 9; предпочтительно перечисленные адъюванты включают имидазохинолины; такие как R848(резиквимод); производные аденина, такие как раскрытые в патенте США 6329381 (Sumitomo Pharmaceutical Company), опубликованной патентной заявке США 2010/0075995, Biggadike et al., или WO 2010/018132, Campos et al.; иммуностимулирующую ДНК или иммуностимулирующую РНК. В особых вариантах осуществления синтетические наноносители включают в качестве адъювантов соединения,которые являются агонистами для toll-подобных рецепторов (TLR) 7 и 8 ("агонисты TLR 7/8"). Среди общепринятых соединения-агонисты TLR 7/8, раскрытые в патенте США 6696076, Tomai et al., в том числе без ограничений имидазохинолинамины, имидазопиридинамины, 6,7-конденсированные циклоалкилимидазопиридинамины и имидазохинолинамины с мостиковыми связями в положении 1 и 2. Предпочтительные адъюванты включают имиквимод и резиквимод. В особых вариантах осуществления адъювант может являться агонистом для поверхностной молекулы DC CD40. В определенных вариантах-6 023397 осуществления для стимулирования иммунитета, а не устойчивости, синтетический наноноситель включает адъювант, который содействуют созреванию DC (необходимо для примирования наивных Т-клеток) и продукции цитокинов, таких как интерфероны I типа, которые содействует иммунным ответам с антителами. В вариантах осуществления адъюванты также могут включать иммуностимулирующие молекулы РНК, такие как без ограничения дцРНК или поли 1:поли C12U (доступны как Ampligen, либо полиI:С, либо поли 1:полиС 12U, известные как стимуляторы TLR3) и/или раскрытые в F. Heil et al., "SpeciesSpecific Recognition of Single-Stranded RNA via Toll-like receptor 7 and 8" Science 303(5663), 1526-1529(2004); J. Vollmer et al., "Иммунная модуляция с помощью химически модифицированных рибонуклеозидов и олигорибонуклеотидов (Immune modulation by chemically modified ribonucleosides and oligoribonucleotides)" WO 2008033432 A2; A. Forsbach et al., "Иммуностимулирующие олигорибонуклеотиды, содержащие специфический мотив(ы) последовательности и нацеливающиеся на путь toll-подобного рецептора 8 (Immunostimulatory oligoribonucleotides containing specific sequence motif(s) and targeting theToll-like receptor 8 pathway)" WO 2007062107 A2; E. Uhlmann et al., "Модифицированные олигорибонуклеотидные аналоги с усиленной иммуностимулирующей активностью (Modified oligoribonucleotide analogs with enhanced immunostimulatory activity)" публикация патентной заявки США 2006241076; G.Lipford et al., "Иммуностимулирующие вирусные РНК-олигонуклеотиды и их применение для лечения рака и инфекций (Immunostimulatory viral RNA oligonucleotides and use for treating cancer and infections)"screening Methods)" WO 2003086280 A2. В некоторых вариантах осуществления адъювант может представлять собой агонист TLR-4, такой как бактериальный липополисахарид (LPS), VSV-G и/или HMGB-1. В некоторых вариантах осуществления адъюванты могут включать агонисты TLR-5, такие как флагеллин, или его части или производные, в том числе без ограничения раскрытые в патентах США 6130082, 6585980 и 7192725. В особых вариантах осуществления синтетические наноносители включают лиганд для toll-подобного рецептора (TLR)-9, такой как иммуностимулирующие молекулы ДНК, содержащие CpG, которые индуцируют продукцию интерферона I типа и стимулируют активацию Т- и Вклеток, приводящую к повышенной продукции антител и цитотоксическим Т-клеточным ответам (Kriegantigen. J. Immunol. 1998. 160:870-876; Lipford et al., Bacterial DNA as immune cell activator. Trends Microbiol. 1998. 6:496-500; патент США 6207646, Krieg et al.; патент США 7223398, Tuck et al.; патент США 72504 03, Van Nest et al.; или патент США 7566703, Krieg et al.). В некоторых вариантах осуществления адъюванты могут представлять собой провоспалительные стимулы, высвобожденные из некротических клеток (например, кристаллы уратов). В некоторых вариантах осуществления адъюванты могут быть активированными компонентами каскада реакций комплемента (например, CD21, CD35 и т.д.). В некоторых вариантах осуществления адъюванты могут быть активированными компонентами иммунных комплексов. Адъюванты также включают агонисты рецепторов комплемента, такие как молекулы, которые связываются с CD21 или CD35. В некоторых вариантах осуществления агонист рецепторов комплемента индуцирует эндогенную опсонизацию синтетического наноносителя с помощью комплемента. В некоторых вариантах осуществления адъюванты представляют собой цитокины, которые являются небольшими белками или биологическими факторами (в диапазоне 5 кДа-20 кДа), которые высвобождаются клетками и специфично воздействуют на клеточно-клеточное взаимодействие, связь и поведение других клеток. В некоторых вариантах осуществления агонист цитокинового рецептора является малой молекулой, антителом, белком слияния или аптамером. В вариантах осуществления по меньшей мере часть дозы адъюванта можно присоединять к синтетическим наноносителям, предпочтительно, всю дозу адъюванта присоединяют к синтетическим наноносителям. В других вариантах осуществления по меньшей мере часть дозы адъюванта не присоединяют к синтетическим наноносителям. В вариантах осуществления доза адъюванта включает два или более типов адъювантов. Например, и без ограничения, можно комбинировать адъюванты, которые действуют на различные рецепторы TLR. В качестве примера, в варианте осуществления агонист TLR 7/8 можно комбинировать с агонистом TLR 9. В другом варианте осуществления агонист TLR 7/8 можно комбинировать с агонистом TLR 4. В еще одном варианте осуществления агонист TLR 9 можно комбинировать с агонистом TLR 3."Вводить" или "введение" означает предоставление лекарственной формы субъекту способом, который является фармакологически применимым."Количество эффективное" представляет собой любое количество композиции, дающее один или несколько желательных иммунных ответов. Это количество может быть для in vitro или in vivo назначений. Для in vivo назначений количество может быть таковым, что, как будет полагать врач-терапевт, мо-7 023397 жет иметь клинический результат для субъекта, нуждающегося в иммунном ответе с антителами, специфичном в отношении одного или нескольких антигенов. В вариантах осуществления, следовательно, количество эффективное является таковым, что, как будет полагать врач-терапевт, может вырабатывать иммунный ответ с антителами против антигена(ов) изобретательских композиций, обеспеченных в данном документе. Эффективные количества можно контролировать традиционными способами. Количество, которое является эффективным для выработки одного или нескольких требуемых иммунных ответов может также представлять собой количество композиции, обеспечиваемой в данном документе, которое дает желательный терапевтический ожидаемый результат или желательный терапевтический результат. Следовательно, в других вариантах осуществления количество эффективное таково, что, как будет полагать клиницист, будет обеспечивать терапевтическую полезность (в том числе профилактическую полезность) для субъекта, представленного в данном документе. Такие субъекты включают тех, у которых есть или которые подвергаются риску возникновения рака, инфекции или инфекционного заболевания. Количества эффективные будут зависеть, конечно, от конкретного субъекта, подлежащего лечению; тяжести состояния, заболевания или расстройства; индивидуальных параметров пациента, включающих возраст, физическое состояние, размер и вес; продолжительность лечения; природы сопутствующей терапии (если таковая имеется); специфический путь введения и подобных факторов в пределах знания и практического опыта врача-терапевта. Эти факторы хорошо известны специалистам в настоящей области и могут предусматривать не более чем традиционное проведение исследования. В целом предпочтительно, чтобы применялась "максимальная доза", т.е. наивысшая безопасная доза, в соответствии с результатами тщательной медицинской оценки. Специалистам в данной области будет понятно, однако, что пациент может настаивать на более низкой дозе или переносимой дозе по медицинским причинам, психологическим причинам или, по существу, по любым другим причинам. Антиген(ы) любой из изобретательских композиций, обеспеченных в данном документе, могут в вариантах осуществления быть в количестве эффективном."Антиген" означает антиген для В-клетки или антиген для Т-клетки. В вариантах осуществления антигены присоединяют к синтетическим наноносителям. В других вариантах осуществления антигены не присоединяют к синтетическим наноносителям. В вариантах осуществления лекарственные формы по настоящему изобретению содержат один или несколько антигенов, например, один или несколько первых антигенов, один или несколько вторых антигенов, один или несколько третьих антигенов, один или несколько четвертых антигенов один или несколько дополнительных антигенов. В вариантах осуществления антигены вводят совместно с синтетическими наноносителями. В других вариантах осуществления антигены не вводят совместно с синтетическими наноносителями. "Тип(ы) антигенов" означает молекулы, которые имеют одинаковые или практически одинаковые, антигенные характеристики."По меньшей мере часть дозы" означает по меньшей мере какую-либо часть дозы, варьирующую до включающей всю дозу. Субъект "с риском" является таковым, который, как полагает врач-терапевт, имеет шанс подвергнуться заболеванию или состоянию, представленному в данном документе, в том числе без ограничений инфекции, инфекционному заболеванию или раку."Антиген для В-клетки" означает любой антиген, который или распознается и запускает иммунный ответ в В-клетке (например, антиген, который, в частности, распознается В-клеточным рецептором на Вклетке). В некоторых вариантах осуществления антиген, который является антигеном для Т-клетки, также является антигеном для В-клетки. В других вариантах осуществления антиген для Т-клетки не является также антигеном для В-клетки. Антигены для В-клетки включают без ограничений белки, пептиды,малые молекулы, углеводы. В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает небелковый антиген (т.е., антиген не являющийся белком или пептидом). В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает углевод, ассоциированный с инфекционным агентом. В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает гликопротеин или гликопептид, ассоциированный с инфекционным агентом. Инфекционным агентом может являться бактерия, вирус, грибок, простейшее, паразит или прион. В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает слабоиммуногенный антиген. В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает вещество, которым злоупотребляют, или его часть. В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает вещество, вызывающее зависимость, или его часть. Вещества, вызывающие зависимость, включают без ограничений никотин, наркотическое средство, средство от кашля, транквилизатор и седативное средство. В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает токсин, такой как токсин из химического оружия или естественных источников, или загрязнитель. Антиген для В-клетки может также включать вредное экзогенное средство. В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает аутоантиген. В других вариантах осуществления антиген для В-клетки включает аллоантиген, аллерген,контактный аллерген, антиген дегенеративного заболевания, гаптен, антиген инфекционного заболевания, антиген злокачественной опухоли, антиген атопического заболевания, антиген аутоиммунного заболевания, вещество, вызывающее зависимость, ксеноантиген или фермент метаболического заболевания или его ферментативный продукт."Присоединять" или "присоединяют" или "присоединяет" (и т.п.) относится к химическому ассоциированию одной структурной единицы (например, фрагмента) с другой. В некоторых вариантах осуществления присоединение является ковалентным, означающее, что присоединение имеет место в смысле присутствия ковалентной связи между двумя структурными единицами. В нековалентных вариантах осуществления нековалентное присоединение опосредуется нековалентными взаимодействиями, включающими без ограничения взаимодействия зарядов, аффинные взаимодействия, металлокоординацию,физическую адсорбцию, взаимодействия гость-хозяин, гидрофобные взаимодействия, ТТ-стэкинг взаимодействия, взаимодействия с водородными связями, ван-дер-ваальсовы взаимодействия, магнитные взаимодействия, электростатические взаимодействия, диполь-дипольные взаимодействия и/или их комбинаций. В вариантах осуществления инкапсуляция представляет собой форму соединения. В вариантах осуществления популяции синтетических наноносителей обладают одним или несколькими антигенами и/или адъювантами, присоединенными к ним, то есть множество, предпочтительно большинство, синтетических наноносителей в пределах популяции обладают присоединенными к ним одним или несколькими антигенами и/или адъювантами, которых похожи друг на друга. В других вариантах осуществления изобретательские лекарственные формы могут содержать антигены и/или адъюванты, которые не присоединены к синтетическим наноносителям в пределах популяции синтетических наноносителей."Происходит" означает взят из источника и подвергнут существенной модификации. Например,пептид или нуклеиновая кислота с последовательностью с лишь 50% идентичностью с естественным пептидом или нуклеиновой кислотой, предпочтительно естественным консенсусным пептидом или нуклеиновой кислотой, будет указан, как который происходит от естественного пептида или нуклеиновой кислоты. Существенная модификация представляет собой модификацию, которая в существенной степени влияет на химические или иммунологические свойства материала, о котором идет речь. Пептиды и нуклеиновые кислоты, которые происходят, могут также включать таковые, имеющие последовательность с большей, чем 50% идентичностью с естественным пептидом или последовательностью нуклеиновой кислоты, если указанные пептиды и нуклеиновые кислоты, которые происходят, имеют измененные химические или иммунологические свойства по сравнению с естественным пептидом или нуклеиновой кислотой. Такие химические или иммунологические свойства включают гидрофильность, стабильность, аффинность и способность соединяться с носителем, таким как синтетический наноноситель."Лекарственная форма" означает фармакологически и/или иммунологически активный материал в среде, носителе, разбавителе или устройстве, пригодном для введения субъекту."Инкапсулировать" означает заключать внутрь синтетического наноносителя, предпочтительно заключать полностью внутрь синтетического наноносителя. Большая часть или все вещество, которое инкапсулируют не доступно для местного окружения, внешнего по отношению к синтетическому наноносителю. Инкапсуляция отличается от абсорбции, при которой большая часть или все вещество помещается на поверхность синтетического наноносителя, и вещество остается доступным для местного окружения,внешнего по отношению к синтетическому наноносителю."Идентичный" означает, что вещество разделяет одну или несколько общих химических и/или иммунологических характеристик с другим веществом. Например, один или несколько антигенов идентичны, когда оба набора антигенов разделяют одну или несколько общих химических или иммунологических характеристик. Вещества, такие как антигены, не являются идентичными, когда они не соответствуют критериям, того что они идентичны. Определенные биологически активные макромолекулы можно описать, как обладающие процентом идентичности в отношении друг друга, которая представляет собой меру совпадения их последовательностей, как традиционно известно в уровне техники. Такие биологически активные макромолекулы являются идентичными в рамках настоящего изобретения, когда они разделяют более чем 20% идентичность, предпочтительно более чем 30% идентичность, предпочтительно более чем 40% идентичность, предпочтительно более чем 50% идентичность, предпочтительно более чем 60% идентичность, предпочтительно более чем 70% идентичность, предпочтительно более чем 80% идентичность или предпочтительно более чем 90% идентичность друг с другом."Инфекция" или "инфекционное заболевание" представляет собой любое состояние или заболевание, вызванное микроорганизмом, патогеном или другим агентом, таким как бактерия, грибок, прион или вирус."Выделенная нуклеиновая кислота" означает нуклеиновую кислоту, которая отделена от своего нативного окружения и присутствует в достаточном количестве, позволяющем ее идентификацию или применение. Выделенная нуклеиновая кислота представляет собой таковую, которая(i) амплифицирована in vitro посредством, например, полимеразной цепной реакции (PCR);(ii) продуцирована рекомбинантно посредством клонирования;(iii) очищена, как например расщеплением и гель-разделением; или(iv) синтезирована посредством, например, химического синтеза. Выделенная нуклеиновая кислота представляет собой таковую, с которой легко манипулировать посредством техник рекомбинантной ДНК, хорошо известных в настоящем уровне техники. Таким образом, нуклеотидная последовательность, содержащаяся в векторе, в котором известны 5' и 3' сайты рест-9 023397 рикции, или для которого были раскрыты последовательности праймеров полимеразной цепной реакции(PCR), считается выделенной, с другой стороны последовательность нуклеиновой кислоты, существующей в своем нативном состоянии в своем естественном хозяине, не считается. Выделенная нуклеиновая кислота может быть в основном очищенной, но это не обязательно. Например, нуклеиновая кислота, которая является выделенной в клонирующем векторе или векторе экспрессии не является чистой, в том смысле, что она может составлять только ничтожную долю материала в клетке, в которой она находится. Такая нуклеиновая кислота является выделенной, однако, в роли выражения, используемого в данном документе, поскольку оно охотно используется для стандартных техник, известных специалистам в данной области. Любая из обеспечиваемых в данном документе нуклеиновых кислот может быть выделенной. В некоторых вариантах осуществления антигены в композициях, обеспеченных в данном документе, присутствуют в форме выделенной нуклеиновой кислоты, такой как выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует антигенный пептид, полипептид или белок."Выделенный пептид, полипептид или белок" означает, что полипептид (или пептид или белок) отделяют от его нативного окружения, и он присутствует в достаточном количестве, позволяющем его идентификацию или применение. Это означает, например, что полипептид (или пептид или белок) может быть (i) селективно продуцирован посредством экспрессионного клонирования или (ii) очищен, как например, посредством хроматографии или электрофореза. Выделенные пептиды, белки или полипептиды могут быть, но не обязательно, в основном чистыми. Поскольку выделенный пептид, полипептид или белок можно смешивать с фармацевтически приемлемым носителем в фармацевтическом препарате, полипептид (или пептид или белок) могут составлять лишь небольшой процент от веса препарата. Полипептид (или пептид или белок) является все же выделенным, в том смысле, что его отделили от веществ,с которыми он мог быть ассоциирован в живых системах, т.е. выделен от других белков (или пептидов,или полипептидов). Любой из пептидов, полипептидов или белков, обеспеченных в данном документе,может быть выделенным. В некоторых вариантах осуществления антигены в композициях, обеспеченных в данном документе, представляют собой пептиды, полипептиды или белки."Максимальное измерение синтетического наноносителя" означает наибольшее измерение наноносителя, измеренное вдоль любой оси синтетического наноносителя. "Минимальное измерение синтетического наноносителя" означает наименьшее измерение синтетического наноносителя, измеренное вдоль любой оси синтетического наноносителя. Например, для сфероидального синтетического наноносителя максимальное и минимальное измерение синтетического наноносителя будут практически идентичны, и будут представлять собой размер его диаметра. Подобным образом, для кубоидального синтетического наноносителя минимальное измерение синтетического наноносителя будет представлять собой наименьшее из его высоты, ширины или длины, тогда как максимальное измерение синтетического наноносителя будет представлять собой наибольшее из его высоты, ширины или длины. В варианте осуществления минимальное измерение по меньшей мере 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 90% синтетических наноносителей в образце, исходя из общего числа синтетических наноносителей в образце, больше 100 нм. В варианте осуществления максимальное измерение по меньшей мере 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 90% синтетических наноносителей в образце, исходя из общего числа синтетических наноносителей в образце, равно или меньше 5 мкм. Предпочтительно минимальное измерение по меньшей мере 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 90%, синтетических наноносителей в образце, исходя из общего числа синтетических наноносителей в образце, больше 110 нм, более предпочтительно больше 120 нм, более предпочтительно больше 130 нм и еще более предпочтительно больше 150 нм. Аспектные отношения максимального и минимального измерений изобретательских синтетических наноносителей может варьировать, в зависимости от варианта осуществления. Например, аспектные отношения максимального к минимальному измерениям синтетических наноносителей может варьировать от 1:1 до 1000000:1, предпочтительно от 1:1 до 100000:1, более предпочтительно от 1:1 до 1000:1, еще предпочтительнее от 1:1 до 100:1 и даже более предпочтительно от 1:1 до 10:1. Предпочтительно максимальное измерение по меньшей мере 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 90% синтетических наноносителей в образце, исходя из общего числа синтетических наноносителей в образце, равно или меньше 3 мкм, более предпочтительно равно или меньше 2 мкм, более предпочтительно равно или меньше 1 мкм, более предпочтительно равно или меньше 800 нм, более предпочтительно равно или меньше 600 нм и еще более предпочтительно равно или меньше 500 нм. В предпочтительных вариантах осуществления максимальное измерение по меньшей мере 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 90% синтетических наноносителей в образце, исходя из общего числа синтетических наноносителей в образце, равно или больше 100 нм, более предпочтительно равно или больше 120 нм, более предпочтительно равно или больше 130 нм, более предпочтительно равно или больше 140 нм, и еще более предпочтительно равно или больше 150 нм. Измерение размеров синтетического наноносителя получают,суспендируя синтетические наноносители в жидкой (как правило, водной) среде и с использованием динамического рассеяния света (например, с использованием аппарата Brookhaven ZetaPALS)."Получают" означает взятый из источника без существенной модификации. Существенная модифи- 10023397 кация представляет собой модификацию, которая существенно влияет на химические или иммунологические свойства материала, о котором идет речь. Например, в качестве неограничивающего примера,пептид или нуклеиновая кислота, имеющая последовательность с более чем 90%, предпочтительно более чем 95%, предпочтительно более чем 97%, предпочтительно более чем 98%, предпочтительно более чем 99%, предпочтительно 100% идентичностью с естественной пептидной или нуклеотидной последовательностью, предпочтительно естественной консенсусной пептидной или нуклеотидной последовательностью, и химическими и/или иммунологическими свойствами, которые не существенно отличаются от естественного пептида или нуклеиновой кислоты, будут указываться, как полученные из естественной пептидной или нуклеотидной последовательности. Такие химические или иммунологические свойства включают гидрофильность, стабильность, аффинность и способность соединяться с носителем, таким как синтетический наноноситель."Фармацевтически приемлемый носитель(и) или наполнитель(и)" означает материалы, которые содержатся внутри лекарственной формы, но в существенной степени не вносят вклад в первичную фармакологическую активность лекарственной формы. В вариантах осуществления материалы являются фармакологически неактивными. В вариантах осуществления фармацевтически приемлемые наполнители включают консерванты, буферы, солевой раствор или фосфатно-солевой буфер, окрашивающее средство или стабилизаторы. Фармацевтически приемлемые наполнители включают ряд материалов, известных в настоящем уровне техники, в том числе без ограничения сахариды (такие как глюкоза, лактоза и т.п.),консерванты, такие как противомикробные средства, восстанавливающие средства, окрашивающие средства, солевой раствор (такой как фосфатно-солевой буфер) и буферы."Популяция" означает определенную группу синтетических наноносителей, объединенных одной или несколькими общими физическими или химическими характеристиками. Общие физические или химические характеристики могут включать наличие общего набора поверхностных антигенов, общего присоединенного адъюванта(ов), общих материалов, составляющих готовый к употреблению наноноситель, общую форму, общий размер частиц и т.п. Множественные популяции синтетических наноносителей можно идентифицировать, например, первая популяция, вторая популяция, третья популяция, четвертая популяция и т.п."Субъект" означает животных, в том числе теплокровных млекопитающих, таких как люди и приматы; птиц; домашних комнатных или сельскохозяйственных животных, таких как кошки, собаки, овцы,козы, крупный рогатый скот, лошади и свиньи; лабораторных животных, таких как мыши, крысы и морские свинки; рыб; рептилий; зоопарковых и диких животных и т.п."Синтетический (е) наноноситель(и)" означает дискретный объект, который не обнаруживается в природе, и который обладает по меньшей мере одним измерением, которое меньше или равно размеру 5 микронов. Альбуминовые наночастицы обычно входят в состав синтетических наноносителей, однако в определенных вариантах осуществления синтетические наноносители не включают альбуминовые наночастицы. В вариантах осуществления изобретательские синтетические наноносители не включают хитозан. Синтетический наноноситель может представлять собой без ограничений одну или множество наночастиц на основе липидов (например, липосомы) (также именуемые в данном документе липидными наночастицами, т.е. наночастицами, где большая часть материала, составляющая их структуру, представляет собой липиды), полимерные наночастицы, металлические наночастицы, эмульсии на основе поверхностно-активного вещества, дендримеры, бакиболы, нанопроволоки, вирусоподобные частицы (т.е.,частицы, которые, в основном, составлены из вирусных структурных белков, но не являются инфекционными или имеют низкую инфекционность), пептидные частицы или частицы на основе белков (также именуемые в данном документе белковыми частицами, т.е. частицами, где большая часть материала, составляющая их структуру, представляет собой пептиды или белки) (такие как альбуминовые наночастицы) и/или наночастицы, которые разрабатывают с использованием комбинации наноматериалов, такие как липидно-полимерные наночастицы. Синтетические наноносители могут быть ряда разнообразных форм, включающих без ограничения сфероидальные, кубоидальные, пирамидальные, продолговатые,цилиндрические, тороидальные и т.п. Синтетические наноносители по настоящему изобретению включают одну или несколько поверхностей, в том числе без ограничения внутренние поверхности (поверхности, как правило, обращенные к внутренней части синтетического наноносителя) и внешние поверхности (поверхности, как правило, обращенные к внешнему окружению синтетического наноносителя). Иллюстративные синтетические наноносители, которые можно адаптировать для применения на практике настоящего изобретения включают: (1) биоразлагаемые наночастицы, раскрываемые в патенте США 5543158, Gref et al., (2) полимерные наночастицы из опубликованной патентной заявки США 20060002852, Saltzman et al., (3) наночастицы, конструируемые литографическим способом, из опубликованной патентной заявки США 20090028910, DeSimone et al., (4) раскрытие WO 2009/051837, vonAndrian et al., (5) наночастицы, раскрытые в опубликованной патентной заявке США 2008/0145441,Penades et al., (6) белковые наночастицы, раскрытые в опубликованной патентной заявке США 20090226525, de los Rios et al., (7) вирусоподобные частицы, раскрытые в опубликованной патентной заявке США 20060222652, Sebbel et al., (8) соединенные с нуклеиновой кислотой вирусоподобные ча- 11023397 стицы, раскрытые в опубликованной патентной заявке США 20060251677, Bachmann et al., (9) вирусоподобные частицы, раскрытые в WO 2010047839A1 или WO 2009106999A2, или (10) нанопреципитированные наночастицы, раскрытые в P. Paolicelli et al., "Surface-modified PLGA-based Nanoparticles thatcan Efficiently Associate and Deliver Virus-like Particles" Nanomedicine. 5(6):843-853 (2010). В вариантах осуществления синтетические наноносители могут иметь аспектное отношение больше 1:1, 1:1.2, 1:1.5,1:2, 1:3, 1:5, 1:7 или больше 1:10. Синтетические наноносители по настоящему изобретению, которые обладают минимальным измерением равным или меньше около 100 нм, предпочтительно равным или меньше 100 нм, не содержат поверхность с гидроксильными группами, которые активируют комплемент, или альтернативно содержат поверхность, которая состоит в основном из фрагментов, которые не являются гидроксильными группами, активирующими комплемент. В предпочтительном варианте осуществления синтетические наноносители по настоящему изобретению, обладающие минимальным измерением, равным или меньше около 100 нм, предпочтительно равным или меньше 100 нм, не содержат поверхность, существенно активирующую комплемент или альтернативно содержат поверхность, которая состоит в основном из фрагментов, существенно не активирующих комплемент. В более предпочтительном варианте осуществления синтетические наноносители по настоящему изобретению, которые обладают минимальным измерением равным или меньше около 100 нм, предпочтительно равным или меньше 100 нм, не содержат поверхность, активирующую комплемент или альтернативно содержат поверхность, которая состоит в основном из фрагментов, не активирующих комплемент. В вариантах осуществления синтетические наноносители не включают вирусоподобные частицы. В вариантах осуществления, когда синтетические наноносители включают вирусоподобные частицы, вирусоподобные частицы содержат неестественный адъювант (означает, что VLP содержат адъювант иной, чем встречающаяся в природе РНК, образуемая во время продукции VLP). В вариантах осуществления синтетические наноносители могут иметь аспектное отношение больше 1:1, 1:1.2, 1:1.5, 1:2, 1:3, 1:5, 1:7 или больше 1:10."Антиген для Т-клетки" означает любой антиген, который распознается и запускает иммунный ответ в Т-клетке (например, антиген, который, в частности, распознается Т-клеточным рецептором на Тклетке или NKT-клетке путем презентации антигена или его части, связанной с молекулой комплекса гистосовместимости (МНС) I класса или II класса, или связанной с CD1-комплексом. В некоторых вариантах осуществления антиген, который является антигеном для Т-клетки, также является антигеном для В-клетки. В других вариантах осуществления антиген для Т-клетки не является также антигеном для Вклетки. Антигены для Т-клетки, как правило, представляют собой белки или пептиды. Антигены для Тклетки могут представлять собой антиген, стимулирующий CD8+ Т-клеточный ответ, CD4+ Т-клеточный ответ или оба. Наноносители, следовательно, в некоторых вариантах осуществления могут эффективно стимулировать оба типа ответов. В некоторых вариантах осуществления антиген для Т-клетки является "универсальным" антигеном для Т-клетки, или антигеном для Т-клетки памяти, (т.е., таким, к которому субъект имеет предсуществующую память и который может использоваться, чтобы стимулировать Т-клеточную помощь в отношении неродственного антигена, например неродственного антигена для В-клетки). Универсальные антигены для Т-клетки включают столбнячный анатоксин, также один или несколько пептидов, произошедших от столбнячного анатоксина, вируса Эпштейна-Барра или вируса гриппа. Универсальные антигены для Т-клетки также включают компоненты вируса гриппа, такие как гемагглютинин, нейраминидаза или ядерный белок, или один или несколько пептидов, произошедших от них. В некоторых вариантах осуществления универсальный антиген для Т-клеток не является таковым, который презентируется в комплексе с молекулой МНС. В некоторых вариантах осуществления универсальный антиген для Т-клеток не входит в комплекс с молекулой МНС для презентации Т-хелперной клетке. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления универсальный антиген для Т-клеток не является антигеном для Т-хелперных клеток. Однако в других вариантах осуществления универсальный антиген для Т-клеток является антигеном для Т-хелперных клеток. В вариантах осуществления антиген для Т-хелперной клетки может включать один или несколько пептидов, полученных или произошедших от столбнячного анатоксина, вируса Эпштейна-Барра, вируса гриппа, респираторно-синцитиального вируса, вируса кори, вируса свинки, вируса краснухи, цитомегаловируса, аденовируса, дифтерийного анатоксина или PADRE-пептида (известного из работы Sette et al.,патент США 7202351). В других вариантах осуществления антиген для Т-хелперной клетки может включать овальбумин или пептид, полученный или произошедший от него. Предпочтительно, овальбумин включает аминокислотную последовательность, установленную вдоступа ААВ 59956,NP990483.1, AAA48998 или САА 2371. В других вариантах осуществления пептид, полученный или произошедший от овальбумина, включает следующую аминокислотную последовательность: H-Ile-SerGln-Ala-Val-His-Ala-Ala-His-Ala-Glu-Ile-Asn-Glu-Ala-Gly-Arg-OH (SEQ ID NO: 1). В других вариантах осуществления антиген для Т-хелперной клетки может включать один или несколько липидов или гликолипидов, включающих без ограничения: -галактозилцерамид (-GalCer), гликосфинголипиды с связью (из Sphingomonas spp.), галактозилдиацилглицерины (из Borrelia burgdorferi), липофосфогликан- 12023397 дополнительных липидов и/или гликолипидов, применимых в качестве антигена для Т-хелперной клетки, см. V. Cerundolo et al., "Harnessing invariant NKT cells in vaccination strategies." Nature Rev Immun,9:28-38 (2009). В вариантах осуществления антигены для CD4+ Т-клетки могут производными антигенов для CD4+ Т-клетки, которые получены из источника, такого как естественный источник. В таких вариантах осуществления последовательности антигена для CD4+ Т-клетки, например как те пептиды, которые связываются с МНС II, могут обладать по меньшей мере 70, 80, 90 или 95% идентичностью с антигеном, полученным из источника. В вариантах осуществления антиген для Т-клетки, предпочтительно универсальный антиген для Т-клетки или антиген для Т-хелперной клетки, может быть присоединен к, или отсоединен от, синтетического наноносителя. В некоторых вариантах осуществления универсальный антиген для Т-клеток или антиген для Т-хелперной клетки инкапсулируют в синтетические наноносители изобретательских композиций."Вакцина" означает композицию вещества, которое улучшает иммунный ответ к конкретному патогену или заболеванию. Вакцина типично содержит факторы, которые стимулируют иммунную систему субъекта к распознанию специфичного антигена в качестве чужеродного и удалению его из организма субъекта. Вакцина также создает иммунологическую 'память', таким образом антиген будет быстро распознаваться и на него будет вырабатываться ответ, если человек подвергается повторной антигенной стимуляции. Вакцины могут быть профилактическими (например, для предотвращения будущей инфекции каким-либо патогеном) или терапевтическими (например, вакцина против опухолеспецифичных антигенов для лечения рака). В вариантах осуществления вакцина может включать лекарственные формы по настоящему изобретению. В других вариантах осуществления изобретательская лекарственная форма может включать вакцину, содержащую второй антиген, который не присоединен к синтетическим наноносителям. Вакцины по настоящему изобретению могут включать конъюгат гаптен-носитель, вирусоподобную частицу, вакцину с синтетическими наноносителями, вакцину с субъединицами белка или аттенуированный вирус. В некоторых вариантах осуществления вакцина включает любую из вакцин, в том числе коммерчески доступные вакцины, описанные в данном документе. Изобретательские композиции По настоящему изобретению можно применять большое разнообразие синтетических наноносителей. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители являются сферами или сфероидами. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители плоские или пластинчатой формы. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители являются кубами или кубоидальными. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители являются овалами или эллипсами. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители являются цилиндрами, конусами или пирамидами. В некоторых вариантах осуществления желательным является применение популяции синтетических наноносителей, которые относительно единообразны в отношении размера, формы и/или композиции, так что каждый синтетический наноноситель обладает похожими свойствами. Например, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90%, или по меньшей мере 95% синтетических наноносителей, исходя из общего числа синтетических наноносителей, может иметь минимальное измерение или максимальное измерение, находящиеся в пределах 5, 10 или 20% среднего диаметра или среднего измерения синтетических наноносителей. В некоторых вариантах осуществления популяция синтетических наноносителей может быть гетерогенной в отношение размера, формы и/или композиции. Синтетические наноносители могут быть монолитными или полыми и могут включать один или несколько слоев. В некоторых вариантах осуществления каждый слой имеет уникальную композицию и уникальные свойства, относительно другого(их) слоя(ев). Всего лишь один пример, синтетические наноносители могут обладать структурой ядро/оболочка, где ядро представляет собой один слой (например,полимерное ядро), а оболочка представляет собой второй слой (например, липидный бислой или монослой). Синтетические наноносители могут содержать множество различных слоев. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители могут необязательно содержать один или несколько липидов. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может содержать липосому. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может содержать липидный бислой. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может содержать липидный монослой. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может содержать мицеллу. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может содержать ядро, содержащее полимерную матрицу, окруженную липидным слоем (например, липидным бислоем, липидным монослоем и т.д.). В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может содержать неполимерное ядро (например, металлическую частицу, квантовую точку, керамическую частицу, костную частицу, вирусную частицу, белки, нуклеиновые кислоты, углеводы и т.д.),окруженное липидным слоем (например, липидным бислоем, липидным монослоем и т.д.). В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители могут включать один или несколько полимеров. В некоторых вариантах осуществления такой полимер может окружаться покрывающим слоем (например, липосомой, липидным монослоем, мицеллой и т.д.). В некоторых вариантах- 13023397 осуществления различные элементы синтетических наноносителей можно соединять с полимером. В некоторых вариантах осуществления иммунореактивная поверхность, нацеливающий фрагмент,антиген, адъювант и/или олигонуклеотид можно ковалентно ассоциировать с полимерной матрицей. В некоторых вариантах осуществления ковалентная ассоциация опосредуется линкером. В некоторых вариантах осуществления иммунореактивная поверхность, нацеливающий фрагмент, антиген, адъювант и/или олигонуклеотид можно нековалентно ассоциировать с полимерной матрицей. Например, в некоторых вариантах осуществления иммунореактивная поверхность, нацеливающий фрагмент, антиген, адъювант и/или олигонуклеотид можно адсорбировать на, инкапсулировать внутрь, окружать и/или диспергировать по всей толщине полимерной матрицы. Альтернативно или дополнительно, иммунореактивная поверхность, нацеливающий фрагмент, антиген, адъювант и/или нуклеотид можно ассоциировать с полимерной матрицей посредством гидрофобных взаимодействий, взаимодействия зарядов, ван-дерваальсовых сил и т.д. Большое разнообразие полимеров и способов формирования из них полимерных матриц традиционно известны. В основном, полимерная матрица включает один или несколько полимеров. Полимеры могут быть естественными или неестественными (синтетическими) полимерами. Полимеры могут быть гомополимерами или сополимерами, содержащими два или более мономеров. В отношении последовательности сополимеры могут быть случайные, блоковые или могут содержать комбинацию из случайных и блоковых последовательностей. Типично, полимеры в соответствии с настоящим изобретением представляют собой органические полимеры. Примеры полимеров, подходящих для применения в настоящем изобретении, включают без ограничений полиэтилены, поликарбонаты (например, поли(1,3-диоксан-2-он, полиангидриды (например,поли(себациновый ангидрид, полипропилфумараты, полиамиды (например, поликапролактам), полиацетали, простые полиэфиры, сложные полиэфиры (например, полилактид, полигликолид, сополимер лактида и гликолида, поликапролактон, полигидроксикислоту (например, поли(-гидроксиалконоат,поли(сложные ортоэфиры), полицианоакрилаты, поливиниловые спирты, полиуретаны, полифосфазены,полиакрилаты, полиметакрилаты, полимочевины, полистиролы, полиамины, полилизин, сополимеры полилизина и PEG, а такжеполи(этиленимин), сополимеры поли(этиленимина) и PEG. В некоторых вариантах осуществления полимеры в соответствии с настоящим изобретением включают полимеры, которые были одобрены для применения на людях Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США (FDA) на основании 21 C.F.R.177.2600, включающие без ограничения сложные полиэфиры (например, полимолочную кислоту, сополимер(молочной и гликолевой кислоты),поликапролактон например, поли(1,3-диоксан-2-он; поливалеролактон; полиангидриды (например, поли(себациновый ангидрид; простые полиэфиры (например, полиэтиленгликоль); полиуретаны; полиметакрилаты; полиакрилаты и полицианоакрилаты. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть гидрофильными. Например, полимеры могут содержать анионные группы (например, фосфатную группу, сульфатную группу, карбоксилатную группу); катионные группы (например, группу четвертичного амина) или полярные группы (например, гидроксильную группу, тиоловую группу, аминную группу). В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель, содержащий гидрофильную полимерную матрицу, вырабатывает гидрофильное окружение в пределах синтетического наноносителя. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть гидрофобными. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель, содержащий гидрофобную полимерную матрицу, вырабатывает гидрофобное окружение в пределах синтетического наноносителя. Выбор гидрофильности или гидрофобности полимера может иметь влияние на природу материалов, которые включаются (например, соединяются) в синтетический наноноситель. В некоторых вариантах осуществления полимеры можно модифицировать с помощью одного или нескольких фрагментов и/или функциональных групп. В соответствии с настоящим изобретением можно применять ряд фрагментов или функциональных групп. В некоторых вариантах осуществления полимеры можно модифицировать с помощью полиэтиленгликоля (PEG), с помощью углевода и/или с помощью ациклических полиацеталей, произошедших от полисахаридов (Papisov, 2001, ACS Symposium Series,786:301). Определенные варианты осуществления можно выполнять с использованием основных идей патента США 5543158, Gref et al., или публикации международной заявки WO2009/051837, Von Andrian et al. В некоторых вариантах осуществления полимеры можно модифицировать с помощью липидной или жирнокислотной группы. В некоторых вариантах осуществления жирнокислотная группа может представлять собой одну или несколько из масляной, капроновой, каприловой, каприновой, лауриновой, миристиновой, пальмитиновой, стеариновой, арахиновой, бегеновой или лигноцериновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления жирнокислотная группа может представлять собой одну или несколько из пальмитолеиновой, олеиновой, вакценовой, линолевой, альфа-линолевой, гамма-линолевой, арахидоновой, гадолеиновой, арахидоновой, эйкозапентаеновой, докозагексаеновой или эруковой кислоты. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут представлять собой сложные полиэфиры, в том числе сополимеры, содержащие единицы молочной кислоты и гликолевой кислоты, такие как сопо- 14023397 лимер молочной кислоты и гликолевой кислоты и сополимер лактида и гликолида, вместе указываемые в данном документе как "PLGA"; и гомополимеры, содержащие единицы гликолевой кислоты, указываемые в данном документе как "PGA," и единицы молочной кислоты, такие как поли-L-молочная кислота,поли-D-молочная кислота, поли-D,L-молочная кислота, поли-L-лактид, поли-D-лактид и поли-D, Lлактид, вместе указываемые в данном документе как "PLA". В некоторых вариантах осуществления иллюстративные сложные полиэфиры включают, например, полигидроксикислоты; сополимеры PEG и сополимеры лактида и гликолида (например, сополимеры PLA и PEG, сополимеры PGA и PEG, сополимеры PLGA и PEG и их производные. В некоторых вариантах осуществления сложные полиэфиры включают, например, поли(капролактон), сополимеры поли(капролактон) и PEG, сополимеры L-лактида и Lлизина, поли(сериновый сложный эфир), поли(4-гидрокси-L-пролиновый сложный эфир), поли[-(4 аминобутил)-L-гликолевую кислоту] и их производные. В некоторых вариантах осуществления полимер может представлять собой PLGA. PLGA является биосовместимым и биоразлагаемым сополимером молочной кислоты и гликолевой кислоты, и различные формы PLGA характеризуют по их соотношению молочный кислота:гликолевая кислота. Молочная кислота может представлять собой L-молочную кислоту, D-молочную кислоту или D,L-молочную кислоту. Скорость распадаемости PLGA можно регулировать путем изменения соотношения молочная кислота : гликолевая кислота. В некоторых вариантах осуществления применяемый в соответствии с настоящим изобретением PLGA характеризуется соотношением молочная кислота:гликолевая кислота приблизительно 85:15, приблизительно 75:25, приблизительно 60:40, приблизительно 50:50, приблизительно 40:60, приблизительно 25:75 или приблизительно 15:85. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут представлять собой один или несколько акриловых полимеров. В определенных вариантах осуществления акриловые полимеры включают, например, сополимеры акриловой кислоты и метакриловой кислоты, сополимеры метилметакрилата, этоксиэтилметакрилаты, цианоэтилметакрилат, сополимер аминоалкилметакрилата, поли(акриловую кислоту), поли(метакриловую кислоту), сополимер алкиламида метакриловой кислоты, поли(метилметакрилат), поли(метакриловой кислоты ангидрид), метилметакрилат, полиметакрилат, сополимер поли(метилметакрилата), полиакриламид, сополимер аминоалкилметакрилата, сополимеры глицидилметакрилата, полицианоакрилаты, а также комбинации, содержащие один или несколько из вышеуказанных полимеров. Акриловый полимер может содержать полностью полимеризованные сополимеры сложных эфиров акриловой и метакриловой кислот с низким содержанием групп четвертичного аммония. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут представлять собой катионные полимеры. В основном, катионные полимеры способны конденсировать и/или защищать отрицательно заряженные цепи нуклеиновых кислот (например, ДНК или ее производных). Аминосодержащие полимеры, такие как поли(лизин) (Zauner et al., 1998, Adv. Drug Del. Rev., 30:97 и Kabanov et al., 1995, Bioconjugate Chem.,6:7), поли(этиленимин) (PEI; Boussif et al., 1995, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 1995, 92:7297), и поли (амидоамин)-дендримеры (Kukowska-Latallo et al., 1996, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 93:4897; Tang et al., 1996,Bioconjugate Chem., 7:703; и Haensler et al., 1993, Bioconjugate Chem., 4:372) положительно заряжены при физиологическом рН, формируют ионные пары с нуклеиновыми кислотами и опосредуют трансфекцию в ряде клеточных линий. В вариантах осуществления изобретательские синтетические наноносители могут не содержать (могут исключать) катионные полимеры. В некоторых вариантах осуществления полимерымогут представлять собой разлагаемые сложные полиэфиры, несущие катионные боковые цепи (Putnam et al., 1999, Macromolecules, 32:3658; Barrera et al.,1993, J. Am. Chem. Soc, 115:11010; Kwon et al., 1989, Macromolecules, 22:3250; Lim et al., 1999, J. Am.Chem. Soc, 121:5633; and Zhou et al., 1990, Macromolecules, 23:3399). Примеры этих сложных полиэфиров включают сополимер L-лактида и L-лизина (Barrera et al., 1993, J. Am. Chem. Soc, 115:11010), поли (сериновый сложный эфир) (Zhou et al., 1990, Macromolecules, 23:3399), поли(4-гидрокси-L-пролиновый сложный эфир) (Putnam et al., 1999, Macromolecules, 32:3658; and Lim et al., 1999, J. Am. Chem. Soc,121:5633) и поли (4-гидрокси-L-пролиновый сложный эфир) (Putnam et al., 1999, Macromolecules,32:3658; and Lim et al., 1999, J. Am. Chem. Soc, 121:5633). Свойства данных и других полимеров и способы их получения хорошо известны в настоящем уровне техники (см., например, патенты США 6123727; 5804178; 5770417; 5736372; 5716404; 6095148; 5837752; 5902599; 5696175; 5514378; 5512600; 5399665; 5019379; 5010167; 4806621; 4638045 и 4946929;Wang et al., 2001, J. Am. Chem. Soc, 123:9480; Lim et al., 2001, J. Am. Chem. Soc, 123:2460; Langer, 2000,Acc. Chem. Res., 33:94; Langer, 1999, J. Control. Release, 62:7; и Uhrich et al., 1999, Chem. Rev., 99:3181). В целом, ряд способов для синтезирования определенных подходящих полимеров описываются в ConcisePolymer Chemistry, Allcock et al., Prentice-Hall, 1981; Deming et al., 1997, Nature, 390:386 и в патентах США 6506577, 6632922, 6686446 и 6818732. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут представлять собой линейные или разветвленные полимеры. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут представлять собой дендримеры. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть в существенной степени поперечно- 15023397 сшиты друг с другом. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут в существенной степени не содержать поперечных сшивок. В некоторых вариантах осуществления полимеры можно применять в соответствии с настоящим изобретением без прохождения этапа образования поперечных сшивок. В дальнейшем следует понимать, что изобретательские синтетические наноносители могут включать блоксополимеры, привитые сополимеры, комбинации, смеси и/или аддукты из любых из вышеупомянутых и других полимеров. Специалисты в данной области будут учитывать, что полимеры, перечисленные в данном документе, представляют иллюстративный, не исчерпывающий, список полимеров, которые можно применять в соответствии с настоящим изобретением. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители содержат один или несколько полимеров. Полимерные синтетические наноносители, следовательно, также могут включать, описываемые в публикации международной заявки WO 2009/051837, Von Andrian et al., в том числе без ограничения таковые с одним или несколькими гидрофильными компонентами. Предпочтительно один или несколько полимеров содержат сложный полиэфир, такой как поли(молочная кислота), поли(гликолевая кислота), сополимер молочной и гликолевой кислоты или поликапролактон. Более предпочтительно один или несколько полимеров включают или дополнительно включают сложный полиэфир, соединенный с гидрофильным полимером, таким как простой полиэфир. В вариантах осуществления простой полиэфир включает полиэтиленгликоль. Еще более предпочтительно один или несколько полимеров содержат сложный полиэфир и сложный полиэфир, соединенный с гидрофильным полимером, таким как простой полиэфир. В других вариантах осуществления один или несколько полимеров соединяют с одним или несколькими антигенами и/или одним или несколькими адъювантами. В вариантах осуществления по меньшей мере некоторые из полимеров соединяют с антигеном(ами) и/или по меньшей мере некоторые из полимеров соединяют с адъювантом(ами). Предпочтительно, когда присутствует более одного типа полимера, причем один из типов полимера соединяют с антигеном(ами). В вариантах осуществления один из других типов полимера соединяют с адъювантом(ами). Например, в вариантах осуществления, когда наноносители содержат сложный полиэфир и сложный полиэфир, соединенный с гидрофильным полимером, таким как простой полиэфир, при этом сложный полиэфир соединяют с адъювантом, тогда как сложный полиэфир, соединенный с гидрофильным полимером, таким как простой полиэфир, соединяют с антигеном(ами). В вариантах осуществления, где наноносители содержат антиген для Т-хелперной клетки, причем антиген для Т-хелперной клетки можно инкапсулировать в наноноситель. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители не содержат полимерный компонент. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители могут содержать металлические частицы, квантовые точки, керамические частицы и т.д. В некоторых вариантах осуществления неполимерный синтетический наноноситель представляет собой совокупность из неполимерных компонентов, такую как совокупность атомов металла (например, атомов золота). В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители могут необязательно содержать один или несколько амфифильных структурных единиц. В некоторых вариантах осуществления амфифильная структурная единица может содействовать получению синтетических наноносителей с повышенной стабильностью, усовершенствованной однородностью или повышенной вязкостью. В некоторых вариантах осуществления амфифильные структурные единицы можно ассоциировать с внутренней поверхностью липидной мембраны (например, липидным бислоем, липидным монослоем и т.д.). Многие амфифильные структурные единицы, известные в настоящем уровне техники, подходят для применения в получении синтетических наноносителей в соответствии с настоящим изобретением. Такие амфифильные структурные единицы включают без ограничений фосфоглицериды; фосфатидилхолины; дипальмитоилфосфатидилхолин (DPPC); диолеилилфосфатидилэтаноламин (DOPE); диолеилоксипропилтриэтиламмоний (DOTMA); диолеилфосфатидилхолин; холестерин; сложный эфир холестерина; диацилглицерин; диацилглицеринсукцинат; дифосфатидилглицерин (DPPG); гександеканол; жирные спирты, такие как полиэтиленгликоль (PEG); полиоксиэтилен-9-лауриловый эфир; поверхностноактивную жирную кислоту, такую как пальмитиновую кислоту или олеиновую кислоту; жирные кислоты; моноглицериды жирных кислот; диглицериды жирных кислот; амиды жирных кислот; сорбитантриолеат (Span85) гликохолат; сорбитанмонолаурат (Span20); полисорбат 20 (Tween20); полисорбат 60 (Tween60); полисорбат 65 (Tween65); полисорбат 80 (Tween80); полисорбат 85 (Tween85); полиоксиэтиленмоностеарат; сурфактин; полоксамер; сложный эфир сорбитана и жирных кислот, такой как сорбитантриолеат; лецитин; лизолецитин; фосфатидилсерии; фосфатидилинозитол; сфингомиелин; фосфатидилэтаноламин (цефалин); кардиолипин; фосфатидная кислота; цереброзиды; дицетилфосфат; дипальмитоилфосфатидилглицерин; стеариламин; додециламин; гексадециламин; ацетилпальмитат; глицеринрицинолеат; гексадецилстеарат; изопропилмиристат; тилоксапол; поли (этиленгликоль)5000 фосфатидилэтаноламин; поли(этиленгликоль)400-моностеарат; фосфолипиды; синтетические и/или естественные детергенты со свойствами высокоактивного поверхностно-активного вещества; дезоксихолаты; циклодекстрины; хаотропные соли; агенты для образования ионной пары и их комбинации. Компонент амфифильная структурная единица может представлять собой смесь из различных амфифильных структурных единиц. Специалисты в данной области будут учитывать, что это иллюстративный, не исчерпы- 16023397 вающий, список веществ с активностью поверхностно-активного вещества. Любую амфифильную структурную единицу можно применять в получении синтетических наноносителей, которые применяются в соответствии с настоящим изобретением. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители могут необязательно содержать один или несколько углеводов. Углеводы могут быть естественными или синтетическими. Углевод может представлять собой естественный углевод, образующий производные. В определенных вариантах осуществления углевод включает моносахарид или дисахарид, в том числе без ограничения глюкозу,фруктозу, галактозу, рибозу, лактозу, сахарозу, мальтозу, трегалозу, целлобиозу, маннозу, ксилозу, арабинозу, глюкороновую кислоту, галактуроновую кислоту, маннуроновую кислоту, глюкозамин, галактозамин и нейраминовую кислоту. В определенных вариантах осуществления углевод представляет собой полисахарид, включающий без ограничения пуллулан, целлюлозу, микрокристаллическую целлюлозу,гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС), гидроксицеллюлозу (НС), метилцеллюлозу (МС), декстран,циклодекстран, гликоген, крахмал, гидроксиэтилкрахмал, каррагинан, гликон, амилозу, хитозан, N,Oкарбоксилметилхитозан, альгин и альгиновую кислоту, крахмал, хитин, инулин, конжак, глюкоманнан,пустулан, гепарин, гиалуроновую кислоту, курдлан и ксантан. В вариантах осуществления изобретательские синтетические наноносители не содержат (или в частности исключают) углеводы, такие как полисахарид. В определенных вариантах осуществления углевод может включать производное углевода, такое как сахароспирт, в том числе без ограничения маннит, сорбит, ксилит, эритрит, мальтит и лактит. Композиции по настоящему изобретению включают изобретательские синтетические наноносители в комбинации с фармацевтически приемлемыми наполнителями, такими как консерванты, буферы, солевой раствор или фосфатно-солевой буфер. Композиции можно получать с использованием традиционных техник фармацевтического производства и соединения для достижения применимых лекарственных форм. Типичные изобретательские композиции могут содержать неорганические или органические буферы (например, натриевые или калиевые соли -фосфат, карбонат, ацетат или цитрат) и средства регулировки рН (например, соляная кислота, гидроксид натрия или гидроксид калия, соли - цитрат или ацетат,аминокислоты и их соли), антиоксиданты (например, аскорбиновая кислота, альфа-токоферол), поверхностно-активные вещества (например, полисорбат 20, полисорбат 80, полиоксиэтилен 9-10-нонилфенол,дезоксихолат натрия), стабилизаторы раствора и/или крио/лиостабилизаторы (например, сахароза, лактоза, маннит, трегалоза), средства регулировки осмотического давления (например, соли или сахара), антибактериальные средства (например, бензойная кислота, фенол, гентамицин), противовспенивающие средства (например, полидиметилсилозон), консерванты (например, тимерозал, 2-феноксиэтанол,EDTA), полимерные стабилизаторы и средства, регулирующие вязкость (например, поливинилпирролидон, полоксамер 488, карбоксиметилцеллюлоза) и сорастворители (например, глицерин, полиэтиленгликоль, этанол). В варианте осуществления изобретательские синтетические наноносители суспендируют в стерильном солевом растворе для инъекций вместе с консервантом. В вариантах осуществления, когда получают синтетические наноносители как носители для антигенов и/или адъювантов для применения в вакцинах, могут быть применимы способы присоединения антигенов или адъювантов к синтетическим наноносителям. Если антигены или адъювант представляет собой малую молекулу, может быть преимуществом прикрепление антигенов или адъюванта к полимеру до сборки синтетических наноносителей. В вариантах осуществления также может быть преимуществом получение синтетических наноносителей с поверхностными группами, которые применяются для присоединения антигенов или адъюванта к синтетическому наноносителю посредством использования этих поверхностных групп, а не прикрепления антигенов или адъюванта к полимеру, и затем с использованием этого полимерного конъюгата в конструировании синтетических наноносителей. В определенных вариантах осуществления присоединение может представлять собой ковалентный линкер. В вариантах осуществления пептиды по настоящему изобретению можно ковалентно присоединять к наружной поверхности через 1,2,3-триазольный линкер, образованный реакцией 1,3-диполярного циклоприсоединения азидогрупп на поверхности наноносителя с антигеном и/или адъювантом, содержащими алкиновую группу, или реакцией 1,3-диполярного циклоприсоединения алкинов на поверхности наноносителя с антигенами или адъювантами, содержащими азидогруппу. Такие реакции циклоприсоединения предпочтительно осуществляют в присутствии Cu(I)-катализатора вместе с подходящим Cu(I)лигандом и восстанавливающим средством для восстановления Cu(II)-соединения до каталитически активного Cu(I)-соединения. Это Cu(I)-катализированное азид-алкиновое циклоприсоединение (CuAAC) можно также называть клик-реакцией. Дополнительно, ковалентное присоединение может включать ковалентный линкер, который включает амидный линкер, дисульфидный линкер, тиоэфирный линкер, гидразоновый линкер, гидразидный линкер, иминовый или оксимовый линкер, мочевинный или тиомочевинный линкер, амидиновый линкер, аминовый линкер и сульфонамидный линкер. Амидный линкер образуется через амидную связь между амином на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, с группой карбоновой кислоты второго компонента, такого как наноноситель. Амидную связь в линкере можно получать с использованием любой из традиционных реакций образования амидной связи с надлежаще защищенными аминокислотами или антигенами или адъювантами и ак- 17023397 тивированными карбоновыми кислотами, как например, N-гидроксисукцинимид-активированным сложным эфиром. Дисульфидный линкер образуется через образование дисульфидной (S-S) связи между двумя атомами серы в форме, например, R1-S-S-R2. Дисульфидная связь может образовываться посредством тиольного обмена у антигена или адъюванта, содержащего тиольную/меркаптановую группу(-SH) с другой активированной тиольной группой на полимере или наноносителе, или наноносителя, содержащего тиольные/меркаптановые группы с антигеном или адъювантами, содержащими активированную тиольную группу. Триазольный линкер, в частности 1,2,3-триазол в форме где R1 и R2 могут представлять собой любые химические структурные единицы, образуется с помощью реакции 1,3-диполярного циклоприсоединения азида, прикрепленного к первому компоненту,такому как наноноситель, с концевым алкином, прикрепленным ко второму компоненту, такому как пептид. Реакция 1,3-диполярного циклоприсоединения осуществляется с или без катализатора, предпочтительно с Cu(I)-катализатором, который связывает два компонента через 1,2,3-триазольную функциональную группу. Данная химия детально описывается Sharpless et al., Angew. Chem. Int. Ed. 41(14), 2596,(2002) и Meldal, et al, Chem. Rev., 2008, 108(8), 2952-3015 и часто упоминается как "клик"-реакция илиCuAAC. В вариантах осуществления получают полимер, содержащий азидную или алкиновую группу, концевую относительно полимерной цепи. Этот полимер затем используют для получения синтетического наноносителя таким способом, что несколько алкиновых или азидных групп располагают на поверхности такого наноносителя. Альтернативно, синтетический наноноситель можно получать другим путем и впоследствии функционализировать алкиновыми или азидными группами. Антиген или адъювант получают с присутствием или алкиновой (если полимер содержит азид) или азидной (если полимер содержит алкин) группы. Антигену или адъюванту затем предоставляют возможность реагировать с наноносителем через реакцию 1,3-диполярного циклоприсоединения с или без катализатора, который ковалентно присоединяет антиген или адъювант к частице через 1,4-дизамещенный 1,2,3-триазольный линкер. Тиоэфирный линкер получается в результате образования сера-углеродной (тиоэфирной) связи в форме, например, R1-S-R2. Тиоэфир можно получить или посредством алкилирования тиольной/меркаптановой (-SH) группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант с алкилирующей группой,такой как галогенид или эпоксид, на втором компоненте, таком как наноноситель. Тиоэфирные линкеры также могут образовываться посредством присоединения по Михаэлю тиольной/меркаптановой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, к электрон-дефицитной алкеновой группе на втором компоненте, таком как полимер, содержащем малеинимидную группу или винилсульфоновую группу в качестве акцептора Михаэля. По-другому, тиоэфирные линкеры можно получить посредством радикальной тиол-еновой реакции тиольной/меркаптановой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, с алкеновой группой на втором компоненте, таком как полимер или наноноситель. Гидразоновый линкер получают в результате реакции гидразидной группы на одном компоненте,таком как антиген или адъювант, с альдегидной/кетоновой химической группой на втором компоненте,таком как наноноситель. Гидразидный линкер образуется в результате реакции гидразиновой группы на одном компоненте,таком как антиген или адъювант, с группой карбоновой кислоты на втором компоненте, таком как наноноситель. Такую реакцию, как правило, проводят с использованием химии, подобной образованию амидной связи, где карбоновая кислота активируется активирующим реагентом. Иминовый или оксимовый линкер образуется в результате реакции аминогруппы или Nалкоксиаминогруппы (или аминооксигруппы) на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, с альдегидной или кетонной группой на втором компоненте, таком как наноноситель. Мочевинный или тиомочевинный линкер получается в результате реакции аминогруппы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, с изоцианатной или тиоизоцианатной группой на втором компоненте, таком как наноноситель. Амидиновый линкер получается в результате реакции аминовой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, со сложноэфирной имидогруппой на втором компоненте, таком как наноноситель. Аминовый линкер получают с помощью реакции алкилирования аминовой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, алкилирующей группой, такой как галогенидная, эпоксидная или сульфонатсложноэфирная группа на втором компоненте, таком как наноноситель. Альтернативно,аминовый линкер можно также получить посредством восстановительного аминирования аминовой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, альдегидной или кетоновой группой на- 18023397 втором компоненте, таком как наноноситель, с подходящим восстанавливающим реагентом, таким как цианоборгидрид натрия или триацетоксиборгидрид натрия. Сульфонамидный линкер получают в результате реакции аминовой группы на одном компоненте,таком как антиген или адъювант, с сульфонилгалогенидной (такой как сульфонилхлоридная) группой на втором компоненте, таком как наноноситель. Сульфоновый линкер получают посредством присоединения по Михаэлю нуклеофила к винилсульфону. Либо винилсульфон, либо нуклеофил могут быть на поверхности наночастицы или присоединяться к антигену или адъюванту. Антиген или адъювант можно также конъюгировать к наноносителю посредством способов нековалентной конъюгации. Например, отрицательно заряженный антиген или адъювант можно конъюгировать к положительно заряженному наноносителю посредством электростатической адсорбции. Антиген или адъювант, содержащий лиганд к металлу, можно также конъюгировать к наноносителю, содержащему металлокомплекс, через комплекс металл-лиганд. В вариантах осуществления антиген или адъювант можно прикреплять к полимеру, например,блокполимеру молочная кислота-полиэтиленгликоль, до сборки синтетического наноносителя, или синтетический наноноситель можно формировать с реакционноспособными или способными к активации группами на его поверхности. В последнем случае антиген или адъювант можно получать с группой,которая совместима с химией присоединения, определяемой поверхностью синтетических наноносителей. В других вариантах осуществления пептидный антиген можно прикрепить к VLP или липосомам с использованием подходящего линкера. Линкер представляет собой соединение или реагент, который способен соединить две молекулы вместе. В варианте осуществления линкер может представлять собой гомобифункциональный или гетеробифункицональный реагент, описываемый в Hermanson 2008. Например, VLP или липосомный синтетический наноноситель, содержащий карбоксильную группу на поверхности, можно обрабатывать гомобифункциональным линкером, дигидразидом адипиновой кислоты(ADH), в присутствии EDC для образования соответствующего синтетического наноносителя с ADHлинкером. Получающийся в результате ADH-связанный синтетический наноноситель затем конъюгируют с пептидным антигеном, содержащим кислотную группу, через другой конец ADH-линкера на NC для получения соответствующего конъюгата VLP или липосома-пептид. Для подробных описаний доступных способов конъюгации, см. Hermanson G T "Bioconjugate Techniques", 2nd Edition, Published by Academic Press, Inc., 2008. В дополнение к ковалентному присоединению антиген или адъювант можно присоединять с помощью абсорбции к предварительно сформированному синтетическому наноносителю или его можно присоединять с помощью инкапсуляции во время образования синтетического наноносителя. Способы получения и применения изобретательских лекарственных форм и способы,связанные с ними Синтетические наноносители можно получать с использованием большого разнообразия способов,известных в настоящем уровне техники. Например, синтетические наноносители можно формировать с помощью способов, как нанопреципитация, фокусирование потока с использованием жидкостных каналов, распылительная сушка, выпаривание растворителя из одинарной и двойной эмульсии, экстракция растворителем, разделение фаз, размалывание, методики микроэмульсий, микрообработка, нанообработка, защитные слои, простая и сложная коацервация и других способов, хорошо известных специалистам в данной области. Альтернативно или дополнительно, были описаны синтезы водных и органических растворителей для монодисперсных полупроводниковых, проводящих, магнитных, органических и других наноматериалов (Pellegrino et al., 2005, Small, 1:48; Murray et al., 2000, Ann. Rev. Mat. Sci., 30:545 иTrindade et al., 2001, Chem. Mat., 13:3843). В литературе были описаны дополнительные способы (см.,например, Doubrow, Ed., "Microcapsules and Nanoparticles in Medicine and Pharmacy," CRC Press, BocaRaton, 1992; Mathiowitz et al., 1987, J. Control. Release, 5:13; Mathiowitz et al., 1987, Reactive Polymers,6:275 и Mathiowitz et al., 1988, J. Appl. Polymer Sci., 35:755, а также патенты США 5578325 и 6007845; P. Paolicelli et al., "Surface-modified PLGA-based Nanoparticles that can Efficiently Associate andDeliver Virus-like Particles" Nanomedicine. 5(6):843-853 (2010. Различные материалы можно инкапсулировать в синтетические наноносители, как желательные, с использованием ряда способов, включающих без ограничения С. Astete et al., "Synthesis and characterization of PLGA nanoparticles" J. Biomater. Sci. Polymer Edn, Vol. 17, No. 3, pp. 247-289 (2006); K. Avgoustakisal., "Surface-modified PLGA-based Nanoparticles that can Efficiently Associate and Deliver Virus-like Particles" Nanomedicine. 5(6):843-853 (2010). Можно применять другие способы, подходящие для инкапсулирования материалов, таких как олигонуклеотиды, в синтетические наноносители, в том числе без ограничения способы, раскрытые в патенте Соединенных Штатов 6632671, Unger, от 14 октября 2003 г. В определенных вариантах осуществления синтетические наноносители получают с помощью процесса нанопреципитации или распылительной сушкой. Условия, применяемые при получении синтети- 19023397 ческих наноносителей можно менять для выхода частиц желаемого размера или свойств (например, гидрофобность, гидрофильность, внешняя морфология, "липкость", форма и т.д.). Способ получения синтетических наноносителей и применяемые условия (например, растворитель, температура, концентрация,скорость потока воздуха и т.д.) могут зависеть от материалов, которые необходимо присоединить к синтетическим наноносителям и/или композиции из полимерной матрицы. Если частицы, полученные с помощью любого из вышеупомянутых способов, имеют размер, варьирующий вне желаемого диапазона, частицы можно сортировать по величине, например, с использованием сита. Элементы изобретательских синтетических наноносителей (такие как фрагменты, из которых состоит иммунореактивная поверхность, нацеливающие фрагменты, полимерные матрицы, антигены, адъюванты и т.п.) можно присоединять к полному синтетическому наноносителю, например, посредством одной или нескольких ковалентных связей, или можно соединять с помощью одного или нескольких линкеров. Дополнительные способы функциализирования синтетических наноносителей можно адаптировать из опубликованной патентной заявки США 2006/0002852, Saltzman et al., опубликованной патентной заявки США 2009/0028910, DeSimone et al., или опубликованной международной патентной заявки WO/2008/127532 Al, Murthy et al. Альтернативно или дополнительно, синтетические наноносители можно присоединять к иммунореактивной поверхности, нацеливающим фрагментам, адъювантам, различным антигенам и/или другими элементами прямо или опосредованно путем нековалентных взаимодействий. В нековалентных вариантах осуществления нековалентное присоединение опосредуется нековалетными взаимодействиями,включающими без ограничения взаимодействия зарядов, аффинные взаимодействия, металлокоординацию, физическую адсорбцию, взаимодействия гость-хозяин, гидрофобные взаимодействия, ТТ-стэкинг взаимодействия, взаимодействия с водородными связями, ван-дер-ваальсовы взаимодействия, магнитные взаимодействия, электростатические взаимодействия, диполь-дипольные взаимодействия и/или их комбинации. Такие присоединения можно располагать, чтобы они были на наружной поверхности или внутренней поверхности изобретательского синтетического наноносителя. В вариантах осуществления инкапсуляция и/или адсорбция представляет собой форму присоединения. Большое разнообразие одного или нескольких вторых антигенов (или дополнительных антигенов,которые не присоединяют к популяции синтетических наноносителей) можно включать в лекарственную форму, и можно включать большим разнообразием способов. Типы одного или нескольких вторых антигенов (или дополнительных антигенов, которые не присоединяют к популяции синтетических наноносителей), пригодных для применения с настоящим изобретением были обсуждены в другом месте в данном документе. Существует большое разнообразие способов включения одного или нескольких первых или нескольких вторых антигенов (или дополнительных антигенов, которые не присоединяют к популяции синтетических наноносителей) в изобретательскую лекарственную форму. В варианте осуществления один или несколько вторых антигенов можно смешивать в лекарственную форму вместе с популяцией синтетических наноносителей. Например, в варианте осуществления вакцину, которая содержит один или несколько вторых антигенов, можно смешивать с популяцией синтетических наноносителей для образования изобретательских лекарственных форм. В вариантах осуществления изобретательские синтетические наноносители можно включать в изобретательские лекарственные формы вместе с одним или несколькими первыми антигенами, которые отличаются, подобны или одинаковые, также как с одним или несколькими вторыми антигенами, самыми разнообразными способами, в том числе без ограничений: с или без адъюванта, используя или не используя другую среду доставки, вводимые отдельно в различный момент времени и/или в отличающееся местоположение на теле и/или отличающимся путем иммунизации. В вариантах осуществления популяции синтетических наноносителей можно комбинировать с одним или несколькими вторыми антигенами (которые можно включать большим разнообразием способов) для образования лекарственных форм по настоящему изобретению. Один или несколько вторых антигенов можно обеспечивать в форме раствора, форме суспензии, форме порошка и т.д., и можно обеспечивать как вакцинный состав. Например, в варианте осуществления один или несколько вторых антигенов можно обеспечивать в форме гаптен-белок-носитель, олигосахарида, олигосахаридного комплекса, слияния олигосахарид-белок-носитель, вакцинного состава с живым аттенуированным или рекомбинантным вирусом и популяции синтетических наноносителей, смешанных с гаптеном-белком-носителем, олигосахаридом, олигосахаридным комплексом, слиянием олигосахарид-белок-носитель, вакцинным составом с живым аттенуированным или рекомбинантным вирусом, для образования мультивалентной вакцинной лекарственной формы (или повышения валентности вакцинного состава с гаптеном-белком-носителем или с живым аттенуированным вирусом). В вариантах осуществления один или несколько вторых антигенов могут включаться в вакцину против сибирской язвы; дифтерии, столбняка и/или коклюша; гемофилического гриппа типа В; гепатита В; гепатита А; гепатита С; опоясывающего герпеса (лишая); папилломавируса человека (HPV); гриппа; японского энцефалита; клещевого энцефалита; кори, свинки и/или краснухи; менингококковой инфекции; пневмококковой инфекции; полиомиелита; бешенства; ро- 20023397 тавируса; брюшного тифа; ветрянки; натуральной оспы (оспы животных) или желтой лихорадки. В других вариантах осуществления один или несколько вторых антигенов включают в коммерчески доступную вакцину, в том числе без ограничений BIOTHRAX, DAPTACEL, INFANRIX, TRIPEDIA, TRIHIBIT,KINRIX, PEDIARIX, PENTACEL, PEDVAXHIB, ACTHIB, HIBERIX, COMVAX, HAVRIX, VAQTA,ENGERIX-B, RECOMBIVAX HB, TWINRIX, ZOSTAVAX, GARDASIL, CERVARIX, FLUARIX, FLUVIRIN, FLUZONE, FLULAVAL, AFLURIA, AGRIFLU, FLUMIST, JE-VAX, IXIARO, M-M-R II, PROQUAD, MENOMUNE, MENACTRA, MENVEO, PNEUMOVAX 23, PREVNAR, PCV13, IPOL, IMOVAXBERNA, VARIVAX, ACAM2000 или YF-VAX. В другом варианте осуществления популяцию синтетических наноносителей можно комбинировать с белками, взятыми от инфекционного организма, такими как белок НА вируса гриппа А человека, либо в белковой форме, либо в вирусоподобных частицах, для образования мультивалентной вакцинной лекарственной формы по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления популяцию синтетических наноносителей можно добавить к другой популяции синтетических наноносителей, которая содержит один или несколько вторых антигенов, для образования мультивалентной вакцинной лекарственной формы с синтетическими наноносителями. В других вариантах осуществления в лекарственную форму можно внедрять дополнительные антигены кроме одного или нескольких первых и/или вторых антигенов (посредством смешивания и других техник, раскрытых в данном документе или традиционно известных). В вариантах осуществления изобретательские композиции, обеспеченные в данном документе, содержат 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 15 или больше различных антигенов. В вариантах осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от вируса из семейства вирусов, показанного ниже в табл. 1. В другом варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от вируса из вида, представленного в табл. 1. В очередном варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от антигена, представленного в табл. 1. Таблица 1. Вирусные инфекционные агенты В вариантах осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от бактерии из рода бактерий, показанного ниже в табл. 2. В другом варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от бактериального вида, представленного в табл. 2. В очередном варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от антигена, представленного в табл. 2. Таблица 2. Бактериальные инфекционные агенты В других вариантах осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от грибка из рода грибков, показанного ниже в табл. 3. В другом варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от грибкового вида, представленного в табл. 3. В очередном варианте осуществления один или несколько первых антигенов и/или один или несколько вторых антигенов включают или получают или происходят от антигена, представленного в табл. 3. Комбинации популяции синтетических наноносителей и одного или нескольких вторых антигенов можно осуществлять с использованием традиционных фармацевтических способов смешивания. Таковые включают смешивание жидкость-жидкость, в котором две или более суспензии, содержащие популяцию синтетического наноносителя или один или несколько вторых антигенов, непосредственно комбинируют или объединяют при посредстве одного или нескольких сосудов, содержащих разбавитель. Так как синтетические наноносители можно также получать или хранить в форме порошка, можно производить сухое смешивание порошок-порошок, если один или несколько вторых антигенов доступны в форме порошка, а также можно повторно суспендировать два или более порошков в общей среде. В зависимости от свойств и потенциала взаимодействия синтетических наноносителей и одного или нескольких вторых антигенов, преимущество может отдаваться одному или другому пути смешивания. Техники, подходящие для применения на практике настоящего изобретения, можно найти в Handbook ofIndustrial Mixing: Science and Practice, Ed. Edward L. Paul, Victor A. Atiemo-Obeng, and Suzanne M. Kresta,2004 John WileySons, Inc.; и Pharmaceutics: The Science of Dosage Form Design, 2nd Ed. Ed. M. E. Auten,2001, Churchill Livingstone. В варианте осуществления изобретательские синтетические наноносители суспендируют в стерильном солевом растворе для инъекций вместе с консервантом. Дозы лекарственных форм содержат варьирующие количества популяций синтетических наноносителей и варьирующие количества одного или нескольких вторых антигенов по настоящему изобретению. Количество синтетических наноносителей и/или одного или нескольких вторых антигенов, присутствующих в изобретательских лекарственных формах, может варьировать в соответствии с природой антигенов, терапевтической полезностью, которую необходимо достигнуть, и других таких параметров. В вариантах осуществления можно проводить исследования с целью определения оптимальной дозы для установления оптимального терапевтического количества популяции синтетических наноносителей и количества одного или нескольких вторых антигенов, которое должно присутствовать в лекарственной форме. В вариантах осуществления популяция синтетических наноносителей и один или несколько вторых антигенов присутствуют в лекарственной форме в количестве, эффективном для выработки иммунного ответа к одному или нескольким первым антигенам и одному или нескольким вторым антигенам- 25023397 при введении субъекту. Возможным является определение количеств первого, второго и/или последующих антигенов, эффективных для выработки иммунного ответа, с использованием традиционных исследований и техник с целью определения оптимальной дозы на субъектах. В вариантах осуществления изобретательские синтетические наноносители можно составлять путем смешивания неприсоединенных адъювантов в том же разбавителе или системе доставки, что и популяцию синтетических наноносителей и один или несколько вторых антигенов. Такие адъюванты могут включать без ограничений минеральные соли, такие как квасцы, квасцы, комбинированные с монофосфориллипидом (MPL) А энтеробактерий, таких как Escherichia coli, Salmonella minnesota, Salmonella typhimurium или Shigella flexneri, или в частности с MPL (AS04), MPL А вышеупомянутых бактерий отдельно, сапонинами, такими как QS-21, -A, ISCOM, ISCOMATRIX, эмульсиями, такие как MF59,Montanide ISA 51 и ISA 720, AS02 (QS21 + сквален+MPL), AS15, липосомами и липосомальными составами, такими как AS01, синтезированными или специфически полученными микрочастицами и микроносителями, такими как пузырьки наружной мембраны бактериального происхождения (OMV) N.gonorrheae, Chlamydia trachomatis и других, или частицами хитозана, депообразующими средствами, такими как блок-сополимеры Pluronic, специфически модифицированными или полученными пептидами,такими как мурамилдипептид, аминоалкилглюкозаминид-4-фосфатами, такими как RC529, или белкамии, такими как бактериальные анатоксины или фрагменты токсинов. Дозы таких других адъювантов можно определить с использованием традиционных исследований с целью определения оптимальной дозы. В вариантах осуществления адъювант, который не присоединяют к перечисленным популяциям синтетических наноносителей может быть одинаковым или отличаться от адъюванта, который присоединяют к синтетическим наноносителям. Типичные изобретательские композиции, содержащие синтетические наноносители, могут содержать неорганические или органические буферы (например, натриевые или калиевые соли -фосфат, карбонат, ацетат или цитрат) и средства регулировки рН (например, соляная кислота, гидроксид натрия или гидроксид калия, соли - цитрат или ацетат, аминокислоты и их соли), антиоксиданты (например, аскорбиновая кислота, альфа-токоферол), поверхностно-активные вещества (например, полисорбат 20, полисорбат 80, полиоксиэтилен 9-10-нонилфенол, дезоксихолат натрия), стабилизаторы раствора и/или крио/лиостабилизаторы (например, сахароза, лактоза, маннит, трегалоза), средства регулировки осмотического давления (например, соли или сахара), антибактериальные средства (например, бензойная кислота, фенол, гентамицин),противовспенивающие средства (например, полидиметилсилозон), консерванты(например, тимерозал, 2-феноксиэтанол, EDTA), полимерные стабилизаторы и средства, регулирующие вязкость (например, поливинилпирролидон, полоксамер 488, карбоксиметилцеллюлоза), и сорастворители (например, глицерин, полиэтиленгликоль, этанол). Композиции по настоящему изобретению содержат изобретательские синтетические наноносители в комбинации с фармацевтически приемлемыми наполнителями. Композиции можно изготавливать с использованием традиционных техник фармацевтического производства и соединения для достижения применимых лекарственных форм. Техники, подходящие для применения на практике настоящего изобретения, можно найти в Handbook of Industrial Mixing: Science and Practice, Eds. Edward L. Paul, Victor A.Form Design, 2nd Ed., Ed. M. E. Auten, 2001, Churchill Livingstone. В варианте осуществления изобретательские синтетические наноносители суспендируют в стерильном солевом растворе для инъекций вместе с консервантом. Следует понимать, что композиции настоящего изобретения можно изготавливать любым подходящим способом, и настоящее изобретение никоим образом не ограничивается композициями, которые можно получить с использованием способов, описанных в настоящем документе. Выбор приемлемого способа может требовать внимания к свойствам конкретных фрагментов, которые ассоциируются. В некоторых вариантах осуществления изобретательские синтетические наноносители производят при стерильных условиях или стерилизуют в конце. Это может гарантировать, что образующаяся композиция является стерильной и неинфекционной, таким образом, повышая безопасность по сравнению с нестерильными композициями. Это обеспечивает ценную меру безопасности, в особенности, когда субъекты, получающие синтетические наноносители, имеют иммунные дефекты, являются страдающими от инфекции и/или восприимчивы к инфекции. В некоторых вариантах осуществления изобретательские синтетические наноносители можно лиофилизировать и хранить в суспензии или в качестве лиофилизированного порошка, в зависимости от методики составления в течение длительных периодов без потери активности. Изобретательские композиции можно вводить посредством ряда путей введения, включающих без ограничения подкожный, внутримышечный, внутрикожный, пероральный; интраназальный, трансмукозальный, сублингвальный, ректальный, глазной, трансдермальный, черескожный или с помощью комбинации из этих путей. Дозы лекарственных форм содержат варьирующие количества синтетических наноносителей или их популяций и варьирующие количества антигенов и/или адъютантов по настоящему изобретению. Ко- 26023397 личество синтетических наноносителей и/или антигенов и/или адъювантов, присутствующих в изобретательских лекарственных формах, может варьировать в соответствии с природой антигенов, терапевтической полезностью, которую необходимо достигнуть, и другими такими параметрами. В вариантах осуществления можно проводить исследования с целью определения оптимальной дозы для установления оптимального терапевтического количества синтетических наноносителей или их популяции и количества антигенов и/или адъювантов, которое должно присутствовать в лекарственной форме. В вариантах осуществления синтетические наноносители и антигены и/или адъюванты присутствуют в лекарственной форме в количестве, эффективном для выработки иммунного ответа к антигенам при введении субъекту. Возможным является определение количеств антигенов и/или адъювантов, эффективных для выработки иммунного ответа, с использованием традиционных исследований и техник с целью определения оптимальной дозы на субъектах. Изобретательские лекарственные формы можно вводить при ряде частот. В предпочтительном варианте осуществления по меньшей мере одного введения лекарственной формы достаточно для выработки фармакологически значимого ответа. В более предпочтительном варианте осуществления для обеспечения фармакологически значимого ответа используют по меньшей мере два введения, по меньшей мере три введения или по меньшей мере четыре введения лекарственной формы. Композиции и способы, описанные в настоящем документе, можно применять для индуцирования,усиления, подавления, модулирования, направления или перенаправления иммунного ответа. Композиции и способы, описанные в настоящем документе, можно применять в диагностике, профилактике и/или лечении состояний, таких как злокачественные опухоли, инфекционные заболевания, метаболические заболевания, дегенеративные заболевания, аутоиммунные заболевания, воспалительные заболевания,иммунологические заболевания или другие расстройства и/или состояния. Композиции и способы, описанные в настоящем документе, можно также применять для профилактики или лечения наркомании,такой как зависимость к никотину или наркотического средства. Композиции и способы, описанные в настоящем документе, можно также применять для профилактики и/или лечения состояния, происходящего от воздействия токсина, опасного вещества, экзогенного токсина или другого вредного агента. У субъектов, предусматриваемых в данном документе, есть или они подвергаются риску возникновения рака. Злокачественные опухоли включают без ограничений рак молочной железы; рак желчных протоков; рак мочевого пузыря; рак головного мозга, включающий глиобластомы и медуллобластомы; рак шейки матки; хориокарциному; рак толстой кишки; рак эндометрия; рак пищевода; рак желудка; гематологические новообразования, включающие острый лимфобластный и миелоидный лейкоз, например, В-клеточный CLL; Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз/лимфому; гистиолимфоцитоз Бернарда; хронический миелоидный лейкоз, множественную миелому; СПИД-ассоциированные лейкозы и Т-клеточный лейкоз/лимфому взрослых; внутриэпителиальные новообразования, включающие болезнь Боуэна и болезнь Педжета, рак печени; рак легкого; лимфомы, включающие болезнь Ходжкина и лимфобластные лимфомы; нейробластомы; рак полости рта, включающий плоскоклеточный рак; рак яичника, включающий возникающие из эпителиальных клеток, стромальных клеток, зародышевых клеток и мезенхимальных клеток; рак поджелудочной железы; рак предстательной железы; рак прямой кишки; саркомы, включающие лейомиосаркому, рабдомиосаркому, липосаркому, фибросаркому и остеосаркому; рак кожи, включающий меланому, карциному из клеток Меркеля, саркому Капоши, базалиому и плоскоклеточный рак; рак яичка, включающий эмбрионально-клеточную опухоль, такую как семинома, несеминома (тератомы, хориокарцинома), стромальные опухоли и герминогенные опухоли; рак щитовидной железы, включающий аденокарциному и медуллярную карциному щитовидной железы, а также рак почки, включающий аденокарциному и опухоль Вильмса. У субъектов, предусматриваемых в данном документе, есть или они подвергаются риску возникновения инфекции или инфекционного заболевания. Инфекции или инфекционные заболевания включают без ограничений вирусные инфекционные заболевания, такие как СПИД, ветряная оспа (ветрянка), насморк, цитомегаловирусная инфекция, лихорадка Колорадо, лихорадка денге, геморрагическая лихорадка Эбола, везикулярный стоматит, гепатит, простой герпес, опоясывающий герпес, HPV, грипп (инфлюэнца), лихорадка Ласса, корь, церкопитековая геморрагическая марбург-вирусная лихорадка, инфекционный мононуклеоз, эпидемический паротит, норовирусная инфекция, полиомиелит, прогрессирующая мультифокальная лейкоэнцефалопатия, бешенство, краснуха, SARS, натуральная оспа (оспа животных),вирусный энцефалит, вирусный гастроэнтерит, вирусный менингит, вирусная пневмония, лихорадка Западного Нила и желтая лихорадка; бактериальные инфекционные заболевания, такие как сибирская язва,бактериальный менингит, ботулизм, бруцеллез, кампилобактериоз, болезнь кошачьих царапин, холера,дифтерия, сыпной тиф, гонорея, импетиго, легионеллез, лепра (болезнь Хансена), лептоспироз, листериоз, боррелиоз, мелиоидоз, ревматическая атака, MRSA-инфекция, нокардиоз, коклюш (судорожный кашель), чума, пневмококковая пневмония, орнитоз, Q-лихорадка, пятнистая лихорадка Скалистых гор(RMSF), сальмонеллез, скарлатина, шигеллез, сифилис, столбняк, трахома, туберкулез, туляремия,брюшной тиф, сыпной тиф и инфекции мочевых путей; паразитарные инфекционные заболевания, такие как африканский трипаносомоз, амебиаз, аскаридоз, бабезиоз, болезнь Шагаса, клонорхоз, криптоспоридиоз, цистицеркоз, дифиллоботриоз, дракункулез, эхинококкоз, энтеробиоз, фасциолез, фасциолопсидоз,- 27023397 филяриоз, инфекции, вызываемые свободноживущими амебами, лямблиоз, гнатостомоз, гименолепидоз,кокцидиоз, индийский висцеральный лейшманиоз, лейшманиоз, малярия, метагонимиаз, миаз, онхоцеркоз, педикулез, оксиуроз, чесотка, шистосомоз, тениоз, токсокароз, токсоплазмоз, трихинеллез, трихиноз,трихиуриаз, трихомоноз и трипаносомоз; грибковые инфекционные заболевания, такие как аспергиллез,бластомикоз, кандидоз, кокцидиоидомикоз, криптококкоз, гистоплазмоз, эпидермофития стопы (дерматофитоз) и паховая эпидермофития; прионные инфекционные заболевания, такие как синдром Альперса,злокачественная наследственная инсомния, синдром Герстманна-Штреусслера-Шейнкера, куру и вариант болезни Крейтцфельда-Якоба. Примеры Пример 1. Синтетические наноносители с ковалентно присоединенным адъювантом. Наноносители, включающие PLGA-R848, PLA-PEG-N3 и пептид овальбумина, приготовили с помощью способа двойной эмульсии, где пептид овальбумина инкапсулирован в наноносителях. Поливиниловый спирт (Mw=11 КДА - 31 КДА, 87-89% частично гидролизирован) приобрели у JTBaker. Пептид овальбумина 323-339 получили от Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505.продукта 4065609). Конъюгаты PLGA-R848 и PLA-PEG-N3 синтезировали и очистили. Вышеизложенные материалы применяли для приготовления следующих растворов: 1. конъюгат PLGA-R848 из расчета 100 мг/мл в метиленхлориде; 2. конъюгат PLA-PEG-N3 из расчета 100 мг/мл в метиленхлориде; 3. пептид овальбумина 323-339 из расчета 70 мг/мл в 0,13 н. HCl; 4. поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ фосфатном буфере, рН 8. Раствор 1 (0,75 мл) и раствор 2 (0,25 мл) объединяли и раствор 3 (0,1 мл) или 0,13 н. HCl (0,1 мл) влили в маленький сосуд и смесь обработали ультразвуком при амплитуде 50% в течение 40 с, применяяBranson Digital Sonifier 250. В эту эмульсию влили раствор 4 (2,0 мл) и обработкой ультразвуком при амплитуде 30% в течение 40 с с применением Branson Digital Sonifier 250 сформировали вторую эмульсию. Ее влили в лабораторный стакан с мешалкой, содержащий 70 мМ фосфатно-солевой буфер, рН 8 (30 мл), и эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч для образования наноносителей. Для промывки наноносителей порцию дисперсии наночастиц (26,5 мл) переместили в 50 мл центрифужную трубку и вращали при 9500 оборотов в минуту (13800 д) в течение одного часа при 4 С, надосадочную жидкость удаляли, и осадок в пробирке ресуспендировали в 26,5 мл фосфатно-соловего буфера. Процедуру центрифугирования повторяли и осадок в пробирке ресуспендировали в 8,3 г фосфатносоловего буфера для конечной дисперсии наноносителя около 10 мг/мл. К суспензии синтетических наноносителей (10 мг/мл в PBS (буфер при рН 7,4), 5 мл, содержащей около 12,5 мг (MW: 20000; 0,000625 ммоль) PLA-PEG-N3) добавили при слабом перемешивании пептидNO:2); который происходит от L2, где X является линкерной группой, включающей ацетиленовый линкер (33 мг). Добавили раствор аскорбата натрия (100 мМ в Н 2 О, 0,3 мл), а затем раствор CuSO4 (10 мМ в воде, 0,6 мл). Полученную в результате светло-желтую суспензию перемешивали при 20 С в течение 15 ч, и добавили дополнительный раствор CuSO4 (0,3 мл) и раствор аскорбата натрия (0,15 мл). Суспензию перемешивали в течение 5 ч при 20 С и разбавили буфером PBS (рН 7,4) до 10 мл и центрифугировали для удаления надосадочной жидкости. Остаточные осадки наноносителя промыли дважды буфером PBS. Промытые наноносители затем ресуспендировали в 5 мл буфера PBS и хранили замороженными. Конъюгацию пептида L2 на поверхности синтетических наноносителей подтвердили ВЭЖХ-анализом расщепленных наноносителей и биоанализом. Пример 2. Композиция с синтетическими наноносителями и неприсоединенными антигенами (возможный). Часть суспензии синтетического наноносителя 4 мл из примера 1, содержащую 8 мг наноносителей с замещенным L2, центрифугируют для осаждения частиц. Надосадочную жидкость удаляют и добавляют 0,5 мл суспензии Gardasil, четырехвалентную вакцину от папилломавируса человека (типы 6, 11, 16 и 18), содержащую очищенные вирусоподобные частицы (VLP) главного капсидного (L1) белка HPV типов 6, 11, 16 и 18. Комбинированную вакцину встряхивают для повторно суспендирования наноносителей и полученную в результате суспензию хранят при -20 С до применения. Пример 3. Синтетические наноносители с нековалентно присоединенным адъювантом [возможный]. Катионные дисульфидные наноносители PRINT, содержащие ДНК, получают способом, описанным в патентной заявке DeSimone, WO2008118861, пример 16 за исключением того, что оцДНК-флуоресцин из примера 16 замещают модифицированной фосфотиоатом CpG 7909 ДНК. После выделения катионные наноносители суспендируют в 1,0 мл раствора PBS, содержащем 10 мг/мл гепарина. После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч наноносители выделяют центрифугированием и промывают дважды PBS при центрифугировании и декантировании. Наноносители, содержащие CpG 7909 с поверхностно-адсорбированным гепарином, повторно суспендируют в 1,0 мл PBS и хранят при -20 С до применения.- 28023397 Пример 4. Композиция с синтетическими наноносителями и неприсоединенным антигеном (возможный). Часть суспензии синтетических наноносителей 1 мл из примера 3, содержащую 10 мг гепаринзамещенных наноносителей, центрифугируют для осаждения частиц. Надосадочную жидкость удаляют и добавляют 1 мл суспензии вакцин Recombivax HB или Engerix-B, вакцин от вируса гепатита В человека (HBV), содержащих очищенные белковоподобные частицы, состоящие из белка главного поверхностного антигена (HBsAg) HBV. Комбинированную вакцину встряхивают для ресуспендирования наноносителей, и полученную в результате суспензию хранят при -20 С до применения. Подобный способ применяют для комбинирования гепарин-замещенных наноносителей из примера 3 с 1 мл суспензии бивалентной вакцины против вирусов гепатита А и В (Twinrix), состоящей из очищенного HBsAg и инактивированного вируса гепатита А человека. Пример 5. Синтетические наноносители с ковалентно присоединенным адъювантом [возможный]. Пример 5 А. Получение R848, ковалентно присоединенного к тиолуCompany. R848 синтезируют в Selecta Biosciences. Раствор 3,3'-дитио-бис-пропионовой кислоты (2,10 мг,1,010-2 моль) и HBTU (15,2 г, 410-2 моль) в EtOAc (450 мл) перемешивают при комнатной температуре под аргоном в течение 45 мин. Добавляют соединение R848 (6,28 г, 210-2 моль), а затем DIPEA (20,9 мл,1,210-1 моль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 часов и затем при 50-55 С в течение 15 ч. После охлаждения смесь промывают 1% раствором лимонной кислоты (240 мл), водой (40 мл) и раствором рассола (40 мл). Раствор сушат над Na2SO4 (10 г), и после фильтрации этилацетат удаляют под вакуумом. Продукт перекристаллизовывают из 2-метоксиэтанола для обеспечения 6,5 мг (78%) белого твердого продукта. Вышеупомянутый дисульфид (5,0 мг) растворяют в хлороформе (200 мл) и раствор обрабатывают дитиотреитолом (1,0 мг). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч раствор в хлороформе промывают водой (100 мл) и потом сушат над сульфатом натрия. После фильтрации для удаления высушивающего средства удаляют хлороформ под вакуумом, а остающееся твердое вещество очищают хроматографией на силикагеле с применением 10% метанола в метиленхлориде в качестве элюента. Фракции, содержащие конъюгат тиол-R848, объединяют и выпаривают для получения 3,5 мг конъюгата (70%) тиол-R848 в виде белого твердого вещества. Пример 5 В. Получение наноносителей. Золотые синтетические наноносители получают, как описано в примере (а) заявки на патент США 2009 0104268 A1 Midatech Limited, за исключением того, что пептид ВС 11 замещают конъюгатом тиолR848 из вышеизложенного примера 5 А, а олигосахаридные антигены замещают пептидом, который происходит от L2, H-Ala-Thr-Gln-Leu-Tyr-Lys-Thr-Cys-Lys-Gln-Ala-Gly-Thr-Cys-Pro-Pro-Asp-Ile-Ile-Pro-LysVal-X (SEQ ID NO:2); где X является линкерной группой, включающей цистеиновый остаток. После промывки и концентрирования, как описано в заявке Midatech, навеску частиц 1,0 мг, применяют как описано в примере 6. Пример 6. Композиция с синтетическими наноносителями и неприсоединенными антигенами (возможный). Часть золотых наноносителей 1,0 мг из примера 5 добавляют к 1 мл пероральной суспензии живой рекомбинантной антиротавирусной вакцины Rotarix против гастроэнтерита, вызванного ротавирусом типа G1 и типами не относящимися к G1 (G3, G4 и G9). Комбинированную пероральную вакцину встряхивают для ресуспендирования наноносителей, и полученную в результате суспензию хранят при -20 С до применения в качестве комбинированной пероральной вакцины. Пример 7. Синтетические наноносители с антигеном для Т-хелпера и адъювантом. Уксуснокислую соль амида пептида овальбумина 323-339 приобрели у Bachem Americas Inc. (3132