Способ очистки биомассы клещей dermatophagoides farinae от питательной среды

СПОСОБ ОЧИСТКИ БИОМАССЫ КЛЕЩЕЙ DERMATOPHAGOIDES FARINAE ОТ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ Изобретение относится к области медицины, а именно к аллергологии, и может быть использовано для получения очищенной от питательной среды биомассы микроскопических клещей Dermatophagoides farinae, применяемых для получения аллергена. Способ очистки заключается в культивировании клещей Dermatophagoides farinae на порошке из дафний. Выращивание проводили в закрытых химических стаканах объемом 500 мл. Культивирование проводят до полного истощения питательной среды и затем всю массу клещей переносят в следующий стакан без питательной среды на неделю. Эту процедуру повторяют 4-кратно (4 недели). Предлагаемый способ применен в лаборатории для производства аллергена из клещейDermatophagoides farinae и может быть использован для очистки биомассы клещей с целью получения исходного биоматериала без примесей питательной среды. Ягофаров Фарид Фуатович (KZ) Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано для производства аллергенов. Известен способ, основанный на феномене агрегации клещей рода Dermatophagoides. Питательную среду, на которой культивировали клещей, высыпают на бумагу, уложенную в чашки Петри, закрывают крышку, ставят под светильником с электролампой 40 Вт, установленной не ближе 15 см от поверхности объекта. Через час после облучения встряхивают обратно в садок. На бумаге остаются сбившиеся в кучки клещи (феномен агрегации) (Плетнев Б.Д., Дмитриева Н.П. Биотический метод отделения культуры клещей рода Dermatophagoides от питательной среды в кн. "Методические рекомендации по некоторым рационализаторским предложениям". Вып.2. Министерство Здравоохранения Чувашской АССР. Чебоксары - 1978, с. 14-15). Но, данный способ очистки аллергена трудоемкий и недостаточно эффективен, т.к. сохраняются остатки питательной среды на поверхности тела клещей, которые также могут быть аллергенами. Известен способ флотации, когда биомассу клещей заливают гипертоническим раствором натрий хлора и многократно встряхивают. Всплывших на поверхность клещей собирают, а затем фильтруют(Бержец В.М., Голышева М.А., Емельянова О.Ю., Перова Н.А. Фракционный состав, очистка и стандартизация аллергенов из клещей рода Dermatophagoides (Обзор литературы. ОТЭИ, 1989. - ВИНИТИ деп. 5766-В от 11.09.89). Этот способ также не дает полной очистки сырья от остатков питательной среды. Все перечисленные способы не обеспечивают полной очистки от питательной среды с поверхности тела клещей и даже в минимальных дозах могут влиять на лечебно-диагностические результаты. Предлагаемый способ основан на биологическом истощении питательной среды и удалении аллергенов пищевого субстракта путем поедания самими клещами. Задачей изобретения является разработка способа очистки биомассы клещей от остатков питательной среды, который способствует получению исходного материала без примесей посторонних аллергенов питательной среды. Технический результат - достигается высокая степень очистки от питательной среды. Способ осуществляется следующим образом: получали биомассу клещей Dermatophagoides farinae,выращенных на порошке из дафний в соотношении 10 весовых частей клещей и 1 часть питательной среды. Выращивание проводили в химических стаканах объемом 500 мл. Стаканы закрывали целофаном с множеством мельчайших отверствий меньше размера тела клещей, что предупреждало расползание подвижных особей и обеспечивало поступление водяных паров из атмосферы. В термостате с химическими стаканами, содержащими культуру клещей, поддерживали оптимальный режим культивирования температура 25-27C при относительной влажности воздуха 70-80%. Культивирование проводят до полного истощения питательной среды и затем всю массу клещей переносят в следующий стакан без питательной среды на неделю. Эту процедуру повторяют 4-кратно (4 недели). Для выяснения степени очистки проводили гипериммунизацию кролика экстрактом из питательной среды. Гипериммунную сыворотку кролика использовали для постановки реакции преципитации в геле по Оухтерлони. Аллергены из клещей очищенные по нашему способу не давали общей линии преципитации с питательной средой, тогда как аллергены из клещей очищенные по методу флотации давали две линии преципитации. Таким образом, предложенный способ дает высокую степень очистки от питательной среды и может быть использован для производства аллергена. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ очистки клещей Dermatophagoides farinae от питательной среды, заключающийся в культивировании клещей на порошке из дафний, отличающийся тем, что выращивание проводят в закрытых химических стаканах объемом 500 мл до полного истощения питательной среды и затем всю массу клещей переносят в следующий стакан без питательной среды на неделю, эту процедуру повторяют 4 кратно (4 недели).