Применение биоусиливающих агентов при перекрестном сшивании роговицы

ПРИМЕНЕНИЕ БИОУСИЛИВАЮЩИХ АГЕНТОВ ПРИ ПЕРЕКРЕСТНОМ СШИВАНИИ РОГОВИЦЫ Изобретение относится к области офтальмологии. Согласно изобретению предложено применение одного или нескольких биоусиливающих агентов, выбранных из ЭДТА(этилендиаминтетрауксусной кислоты), связанной с трометамином, полисорбата 80, трометамина,взятых по одному или смешанных вместе, для изготовления офтальмологической композиции для способа перекрестного сшивания роговицы при лечении кератоконуса или других эктазийных расстройств для способствования прохождению офтальмологической композиции, содержащей рибофлавин, в строму через эпителий роговицы. Также предложены офтальмологические композиции и глазные капли, содержащие указанные выше компоненты.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: СООФТ ИТАЛИЯ СПА (IT) Настоящее изобретение относится к применению усиливающих агентов абсорбции для изготовления офтальмологических композиций (в частности, глазных капель), содержащих рибофлавин, разработанных для пропитывания стромы роговицы без необходимости продолжения для достижения указанного пропитывания, для удаления эпителия роговицы (деэпителизации) при практическом лечении кератоконуса или других эктазийных расстройств роговицы при помощи перекрестного сшивания, и также относится к соответствующим офтальмологическим композициям для способа перекрестного сшивания роговицы. Кератоконус представляет собой серьезное заболевание роговицы, поскольку оно представляет собой невоспалительную прогрессирующую дистрофию, которое каждый год поражает приблизительно 50 человек на каждые 100000, как правило молодых людей в возрасте от 10 до 20 лет. Кератоконус представляет собой генетическое заболевание с большей частотой среди женщин и в настоящее время, повидимому, коррелирует с дисфункциями эндокринных желез (гипофиз и щитовидная железа). Он может поражать оба глаза приблизительно в 85% случаев, прогрессирует, что может варьироваться от субъекта к субъекту. После начала заболевания проявляется нерегулярная кривизна, которая модифицирует рефрактивную силу роговицы, вызывает искажения изображений и дезориентирует зрение на близком и далеком расстоянии. Пациент жалуется в любом случае на ухудшение зрения, прежде всего зрения на далеком расстоянии. Зрение продолжает необратимо ухудшаться с последующей необходимостью частой смены очков, вследствие этого ухудшение может ошибочно приниматься за миопию, ассоциирующуюся с астигматизмом. Из-за врожденной структурной слабости роговичной стромы вследствие указанного заболевания после нескольких лет роговица прогрессивно имеет тенденцию стираться и сокращаться к вершине. Там тогда происходит нерегулярное искривление роговицы, которая теряет свою сферическую форму и принимает характерную форму конуса (кератоконус). Используя биомикроскоп может быть отмечено значительное сокращение толщины роговицы на вершине кератоконуса. С течением времени вершина кератоконуса становится непрозрачной из-за изменения в питании этой части роговицы, которая в самых острых формах может представлять искривление роговицы больше чем 62 диоптрии и достигать толщины роговицы даже 446 мкм. Если болезнью пренебрегают, то вершина может подвергаться изъязвлению с последующей перфорацией роговицы; это вызывает боль, слезотечение и спазм век. Эти изменения роговицы из-за кератоконуса приводят к изменению отложения роговичного белка, вызывая микрорубцы, которые дополнительно искажают изображения и в некоторых случаях препятствуют прохождению света, таким образом приводя к неприятному чувству ослепления, прежде всего во время суток, когда солнце находится низко над горизонтом (восход и закат солнца). Как уже упомянуто, чтобы скорректировать зрение, необходимо часто менять очки. Только после того, как применение очков оказывается неудовлетворительным в более умеренных формах, могут быть применены жесткие контактные линзы. Реальная проблема возникает тогда, когда роговица, пораженная кератоконусом, подвергается значительному утончению или если заживление происходит после раздирания поверхности роговицы, делая необходимым даже хирургическую пересадку роговицы (кератопластику). В 2002 г. так называемая ламеллярная кератопластика была введена в Италии для лечения кератоконуса, при которой на практике заменяется не вся роговица, а только внешний слой, то есть часть, пораженная заболеванием. Тем не менее, уже к 1997 г. в Германии в глазной клинике университета Карла Густава Каруса Дрезды разработали новый более безопасный и менее инвазивный способ, названный "перекрестным сшиванием роговицы", при котором используют, в частности, рибофлавин, активированный ультрафиолетовым (UV) лазером; в 2005 г. этот способ был проверен также в Италии и в настоящее время широко используется в различных итальянских глазных клиниках. Перекрестное сшивание роговицы представляет собой малоинвазивный способ, в котором используют рибофлавин, активированный UV лазером (366 нм); указанный способ является безболезненным,его осуществляют при дневном посещении больницы. Перекрестное сшивание позволяет укрепить структуру роговицы, пораженной кератоконусом, посредством переплетения и увеличения связей (перекрестное сшивание) между волокнами роговичного коллагена. В результате проведенных клинических исследований этот способ позволяет уменьшить астигматизм, ассоциирующийся с кератоконусом, а также замедлить или прекратить развитие кератоконуса, таким образом избегая необходимости в пересадке роговицы. Кроме того, при других расстройствах, характеризующихся эктазией роговицы, также выгодно лечение с использованием способа перекрестного сшивания. Перекрестное сшивание роговицы осуществляют путем применения местной роговичной анестезии для осуществления истирания роговичного эпителия (деэпителизации), имеющего диаметр 8-9 мм. За этим следует частое закапывание офтальмологического раствора на основе 0,1% рибофлавина с последующим через 15 мин облучением ультрафиолетовым (UV-A) излучением в течение 5 мин и затем новым закапыванием и новым излучением в общей сложности в течение 6 циклов (всего 30 мин). Рибофлавин, в частности рибофлавин фосфат, который обычно используется при перекрестном сшивании роговицы, представляет собой гидрофильную фотосенситизирующую и фотополимеризирующую молекулу, обладающую плохой способностью к диффузии через эпителий и следовательно достижению роговичной стромы. Поэтому необходимо облегчить его абсорбцию и полное смачивание роговичной стромы прежде, чем начать облучение UV-A посредством удаления роговичного эпителия (деэпителизации). Этот способ может приводить, хотя и редко, к осложнениям на уровне роговицы, боли,что делает задачу окулиста более трудной. Следовательно, желательно улучшить абсорбцию рибофлавина без необходимость деэпителизации роговицы, следовательно приводя к неинвазивному перекрестному сшиванию роговицы с устранением или уменьшением уровня анестезии и затем быстрого заживления без боли или возможных осложнений. Кроме того, было бы желательно предложить соединения, которые давали бы возможность для легкой эпителиальной абсорбции, но обладали бы равной или более высокой активностью, чем рибофлавин в отношении определения фоточувствительности и фотополимеризации волокон коллагена; указанные соединения должны предпочтительно быть активированы при интенсивностях света, близких к видимому, для преодоления вредных эффектов повторных циклов UV излучения, необходимых для активации рибофлавина. Неожиданно обнаружили, что путем нанесения на роговицу офтальмологических композиций, содержащих усиливающие агенты, выбранные из биоусиливающих агентов (т.е. веществ, которые благоприятствуют проникновению рибофлавина или других фотосенситизирующих и фотополимеризующихся веществ через роговичный эпителий, давая возможность для абсорбции самой роговичной стромой),таких как ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота), связанная с трометамином, полисорбат 80 и трометамин, взятые по одному или смешанные вместе; и рибофлавин, достигают улучшенного перекрестного сшивания роговицы при помощи излучения, близкого к видимому, которое является менее вредным,без необходимости деэпителизации. Следовательно, в настоящем изобретении предусмотрено применение описанных выше биоусиливающих агентов самих по себе или различным образом смешанных вместе, для изготовления офтальмологических композиций, содержащих рибофлавин, полезных для перекрестного сшивания при кератоконусе или при других эктазиях роговицы. Биоусиливающие агенты в соответствии с настоящим изобретением могут быть использованы для нанесения непосредственно на роговицу для перекрестного сшивания кератоконуса или других эктазий роговицы, не приводящих к цитоцитотоксичности. Еще одну задачу настоящего изобретения образуют офтальмологические композиции, содержащие биоусиливающие агенты, упомянутые выше, и рибофлавин; где указанная офтальмологическая композиция может быть приготовлена в соответствии с известными способами и может содержать один или более чем один биоусиливающий агент и рибофлавин. После офтальмологического введения композиций, описанных выше, содержащих только один или более чем один биоусиливающий агент, может быть возможно нанесение непосредственно на роговицу раствора одного или более чем одного фотосенситизирующего и фотополимеризующего вещества, в частности рибофлавина. Биоусиливающие агенты по настоящему изобретению присутствуют в подходящих количествах во всей композиции, описанной выше, выбранных от 0,001 до 5 мас.% относительно композиции. Настоящее изобретение также относится к глазным каплям для лечения кератоконуса или других эктазийных расстройств при помощи способа перекрестного сшивания роговицы, включающим один или несколько биоусиливающих агентов, выбранных из ЭДТА (этилендиаминтетрауксусной кислоты), связанной с трометамином, полисорбата 80 и трометамина, взятых по одному или смешанных вместе, и рибофлавин. Настоящее изобретение также относится к глазным каплям для применения для лечения кератоконуса или других эктазийных расстройств при помощи способа перекрестного сшивания роговицы, включающим описанную выше композицию по изобретению. ЭДТА широко используется для включения в офтальмологические композиции. Например, в патенте США 5817630, выданном Hofmann et al., описано включение от 0,05 до 0,5 мас.% ЭДТА в глутатионовые глазные капли, в патенте США 5283236, выданном Chiou, описано применение ЭДТА в качестве агента, усиливающего проницаемость, для системной доставки полипептидов в глаза, в патенте США 6376534, выданном Isaji et al., предполагается, что ЭДТА может быть эффективной для ингибирования вторичных катаракт, и в патенте США 6348508, выданном Denick Jr. et al., описана ЭДТА в качестве соединения, связывающего ионы металла в хелатный комплекс. Дополнительно к применению ЭДТА в качестве хелатообразующего агента ее также широко используют в качестве консерванта вместо бензалконий хлорида, как описано, например, в патенте США 6211238, выданном Castillo et al., патенте США 6265444, выданном Bowman et al., раскрыто применение ЭДТА в качестве консерванта и стабилизатора. Тем не менее, ЭДТА, как правило, не применяют местно в любой значительной концентрации в офтальмологических композициях ввиду ее плохого проникновения через эпителий роговицы. Усиливающая способность препарата по настоящему изобретению в основном зависит от связыва-2 022055 ния ЭДТА и трометамина, поскольку два соединения образуют вместе ионную пару между не образующим соль карбоксилом ЭДТА и трометамином, который обладает известной способностью проникать через мембрану. Трометамин (трис(гидроксиметил)аминометан) представляет собой аминоспирт, широко используемый в нескольких видах химических продуктов, таких как косметические препараты, промышленные буферные растворы, компоненты фармацевтических композиций; ввиду своей низкой токсичности он является биологически инертным и используется внутриклеточно и внеклеточно в качестве подщелачивающего агента для коррекции метаболического ацидоза. Хотя трометамин широко используется, в специальной клинической литературе сообщается только об одном случае периорбитального дерматита, вызванного гелем, содержащим трометамин (Nahas et al.Guidelines for the treatment of acidaemia with THAM. Drugs 1998. 55:191-224). Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что если трометамин предпочтительно присутствует в количестве от 0,05 до 0,5 мас.% и ЭДТА предпочтительно представлена в количестве от 0,05 до 0,5 мас.%, то абсорбция рибофлавина является немедленной. Кроме того, рибофлавин, предпочтительно используемый в настоящем изобретении, является рибофлавин фосфатом в соответствующем количестве во всех композициях, описанных выше; в частности,он предпочтительно присутствует в количестве от 0,05 до 0,3 мас.% относительно композиции по настоящему изобретению. Офтальмологические композиции по настоящему изобретению могут быть изготовлены в технической форме глазных примочек, глазных капель, промываний для глаз, мазей и в любом случае во всех фармацевтических технических формах, которые дают возможность для нанесения на роговицу в соответствии с известными способами. Далее описаны примеры, приведенные в качестве иллюстрации, не ограничивающие каким-либо образом объем настоящего изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации в объеме изобретения понятны специалистам в данной области техники, для которых предназначено изобретение. В приведенных ниже композициях доза индивидуальных компонентов выражена в мас.%. Пример 1. Следует обратить внимание на то, что когда концентрация трометамина увеличивается, то необходимо увеличить NaH2PO4 достаточным образом, чтобы обеспечить рН 7-7,2. Следует отметить, что препараты 1-8 также могут быть изотоническими или даже гипертоническими с добавлением достаточного количества хлорида натрия (или другого осмолита) для достижения указанной цели. Экспериментальные данные исследований, осуществляемых заявителем, представлены ниже. Экспериментальное исследование 1. В настоящем исследовании оценили возможность осуществления трансэпителиального CXL (corneal collagen crosslinking - кросслинкинг (перекрестное сшивание) роговичного коллагена) с использованием композиции, содержащей 0,1% рибофлавин, связанный с усиливающим агентом, позволяющим рибофлавину проникать через строму роговицы даже в присутствии непрерывного эпителия. В исследование вовлечены 20 пациентов (14 мужчин и 6 женщин в возрасте от 12 до 42 лет), пораженных билатеральным прогрессирующим кератоконусом II и III степени в соответствии с классификацией AmslerKrumeich. Только один глаз подвергали лечению, тогда как противоположный глаз использовали в качестве контроля. Лечение осуществляли в отношении глаза, демонстрирующего значительное искривление и минимальную толщину роговицы. Все пациенты демонстрировали среднюю толщину роговицы 412,9 мкм (минимальная толщина 380, максимальная 444). У всех пациентов прогрессирование заболевания оценивали по увеличению максимального искривления верхушки конуса по меньшей мере на 1 диоптрий, топографически измеряемого в течение последних 6 месяцев, или по уменьшению толщины роговицы больше чем на 2% и увеличению центрального астигматизма роговицы на 1 диоптрий в течение последних 6 месяцев. Пациентов оценивали до лечения и по истечении 7 суток, 15 суток, 1, 3, 6, 9 месяцев после лечения. Зрение тестировали в состоянии естественного миоза с использованием графиков Log Mar ETDRScharts (Early Treatment Diabetic Retinopathy Study (исследование на ранней стадии лечения диабетической ретинопатии в соответствии со способом, описанным Ferris et al., 1982, Am. J. Ophthalmol. 94: 91-6. Зрение измеряли с расстояния 4 м. Роговицы анализировали путем проверки при помощи щелевой лампы, при помощи ультразвуковой и оптической пахиметрии, топографии роговицы и аберрометрии (Topografo Optikon Keratron Scout software 4.2). Развитие кератоконуса топографически определяли с использованием аксиальных карт, карт искривления и карт преломления. Прогресс патологии отслеживали с использованием соответствующих параметров. Пахиметрию осуществляли с использованием ультразвуковой пахиметрии (Optikon Mizar) и ОКТ(оптической когерентной томографии) роговицы (Spectral ОСТ SLO-OPKO, USA). За трое суток до лечения вводили норфлоксацин в количестве 50 мкл (приблизительно 1 каплю) 4 раза/сутки. За 20 мин до лечения роговицу анестезировали с использованием 0,2% оксибупрокаина гидрохлорида и для уменьшения повреждений других глазных структур вследствие УФ воздействия миоз вызывали путем введения 1% пилокарпина. Композицию в соответствии с настоящим изобретением, содержащую 0,1% рибофлавин, связанный с усиливающим агентом, вводят за 2 ч до обработки 50 мкл(приблизительно 1 капля) каждые 10 мин. Затем УФ-излучение применяли в течение 30 мин при 2,9-3 мВт/см 2 с пятном диаметром 8 мм в соответствии с протоколом, предложенным Caporossi et al., 2006,Eur. J. Ophthalmol 16:530-5. Во время излучения количество композиции, содержащей рибофлавин, постоянно поддерживают в контакте с эпителием роговицы. После обработки в глаз добавляют одну каплю норфлоксацина и одну каплю раствора для искусственного глаза, содержащего 0,15% гиалуроновую кислоту и аминокислоты. Роговицы проверяют при помощи щелевой лампы для оценки целостности эпителия. Условные обозначения: Pre CXL = зрение до перекрестного сшивания (CXL); UCVA = естественное зрение; BCVA = скорректированное зрение; LogMar = логарифм минимальной четкости в углах; р 0,05. В табл. 1 приведены измерения зрения до и после лечения композицией по настоящему изобретению, содержащей 0,1% рибофлавин, в течение девятимесячного периода наблюдения. Естественное и скорректированное зрение начинает улучшаться в течение первого месяца и улучшение продолжается в течение до шестого месяца. Улучшение скорректированного зрения продолжается до девятого месяца. В то же время для необработанного глаза очевидно прогрессирующее ухудшение естественного и скорректированного зрения, которое в особенности очевидно через шесть месяцев и указывает на прогресс кератоконуса. Таблица 2 Вариации центральных кератометрических значений (3 мм) Условные обозначения: SimkS = кератометрия более искривленного меридиана, SimkF = кератометрия более плоского меридиана, Sim Cyl: роговичный цилиндр (K1-K2), р 0,05. В табл. 2 кератометрические данные обнаруживали путем топографии до и через 1, 3, 6 месяцев после обработки в центральной области размером 3 мм. Таблица 3 Максимальное искривление (KcAK) и параметры осевой размерности), апикальные размеры Условные обозначения: KcAK = апикальная кератометрия кератоконуса, ma = аксиальные значения,mc= апикальные значения, р 0,05, р 0,05. В табл. 3 продемонстрирована вариация максимального искривления верхушки конуса (KcAC) и близлежащих параметров, используемых в топографическом программном обеспечении для исследовании прогресса кератоконуса. Таблица 4 Отклонения роговицы Условные обозначения: Rms (среднеквадратическое значение), S.A. (сферическое искривление),р 0,05. В табл. 4 приведены вариации искривлений роговицы. В таблице показано, что среднеквадратиче-8 022055 ское значение и искривления улучшаются, начиная с самого начала и до шестого месяца; после этого они имеют тенденцию к стабилизации. В то же время в необработанном глазу искривления имеют тенденцию усиливаться. Анализ ОКТ до и после обработки демонстрирует утолщение стромы роговицы, линеаризованной формы, располагающееся на расстоянии 100 мкм от роговичного эпителия ниже боуменовой оболочки. Такое изменение структуры роговицы очевидно через 1 месяц после обработки. Роговицы были прозрачными в течение всего периода наблюдения и не обнаружили никаких симптомов помутнения или отека, типичных для деэпителизирующего лечения. В течение периода наблюдения не обнаружили никаких побочных действий, ассоциирующихся с трансэпителиальным лечением. Экспериментальное исследование 2. Эффективность композиции препарата Е (пример 4), F (пример 5), Н (пример 7) и I (пример 8) оценивали в лечении девяти пациентов (5 мужчин и 3 женщины), имеющих средний возраст 35 лет, все поражены кератоконусом, оцениваемым как IV стадия в соответствии с классификацией Amsler-Krumeich. Всех пациентов подвергали исследованию при помощи щелевой лампы, топографии роговицы, пахиметрии роговицы, оптической когерентной томографии (ОКТ), конфокальной микроскопии, проверке зрения. Пациентов разделяли на три экспериментальные группы, каждая из которых включала трех пациентов, для которых толщина роговицы и тяжесть заболевания были одинаковыми. Препарат Е вводили группе 1, группе 2 вводили препарат F и препарат Н вводили группе 3. Композиции вводили субъектам по одной капле (приблизительно 50 мкл) только в глаз, находящийся в более плохом состоянии (в соответствии с классификацией Amsler-Krumeich), в течение 10 мин каждые 2 ч. В конце введения всех субъектов исследовали для выявления проникновения продукта в строму роговицы. Оценку проникновения продукта осуществляли при помощи щелевой лампы. Не сообщали ни о каких побочных действиях у пациентов, кроме изредка обнаруживаемого небольшого временного раздражения в момент введения композиции. Во всех случаях обнаружили, что все три красителя вызывали образование микротрещин в роговом эпителии, через которые можно обнаружить слабое окрашивание передней области стромы роговицы. В случае введения акридина и хинолина окрашивание стромы роговицы может быть усилено путем встраивания кобальтового фильтра в щелевую лампу, тогда как после введения метиленового синего не требуется никакой фильтр, поскольку голубое окрашивание ясно видно. После этой предварительной процедуры пропитывания стромы роговицы осуществляли перекрестное сшивание роговицы, в частности, при помощи композиции препарата I вводимой пациентам во всех группах в течение 15 мин, роговицы облучали при помощи УФ-света (3 Вт) в течение 30 мин. Обрабатывали глаз, находящийся в более плохом состоянии (т.е. с более крутым искривлением роговицы в соответствии с классификацией Amsler-Krumeich). Противоположный глаз использовали в качестве контроля. Исследованные при помощи щелевой лампы роговицы пациентов продемонстрировали полный эпителий, несмотря на присутствие небольших трещин и слабое окрашивание в голубой цвет стромы. За всеми субъектами наблюдали и исследовали каждый месяц в течение периода шести месяцев для оценки терапевтического действия. Результаты. Первый месяц: ОКТ роговицы выявила утолщение стромы роговицы под боуменовой оболочкой(глубиной приблизительно 100 мкм). Такое изменение стромы является обычным для всех обрабатываемых групп, имеющих одну и ту же толщину, топографические карты через один месяц после обработки демонстрируют небольшое улучшение максимального искривления. Такое улучшение более заметно в группе, обработанной хинолином. Менее выражено у субъектов, которые получали метиленовый синий. Показатели перекрестного сшивания не обнаружены ни в одной из трех групп; улучшение зрения не поддается оценке. Роговицы казались прозрачными при оценке с помощью щелевой лампы. Второй месяц: ОКТ роговиц выявила значительно менее выраженное утолщение стромы роговицы. Никаких различий в трех обрабатываемых группах не выявили. Топографические карты продемонстрировали дальнейшее улучшение состояния болезни при уменьшении максимального искривления и общее улучшение других топографических показателей кератоконуса. В частности, сообщали об уменьшении роговичного астигматизма, ассоциирующегося с улучшением естественного зрения. Уменьшение астигматизма больше в группе, обработанной хинолином. Конфокальная микроскопия продемонстрировала утолщение стромы роговицы, ассоциирующееся с активацией клеток роговицы. Роговица выглядит прозрачной при исследовании при помощи щелевой лампы. Третий месяц: никакие показатели изменения стромы не обнаружены при помощи ОКТ. Карты роговицы поддерживаются на уровне, близком к обнаруженному, через два месяца после лечения при не изменившемся астигматизме роговицы и естественном зрении во всех группах пациентов. Конфокальная микроскопия выявила усиленную активацию кератиноцитов и возникающие перекрестно сшивающие мостики в первой трети роговицы в области утолщения стромы, обнаруживаемой при помощи ОКТ. Роговица выглядит прозрачной при исследовании при помощи щелевой лампы. Четвертый месяц: увеличенная активация кератиноцитов и дальнейшее образование перекрестносвязывающих мостиков. Все другие параметры остались без изменения. Роговица выглядит прозрачной при исследовании при помощи щелевой лампы. Пятый месяц: дополнительная модификация стромы, характеризующаяся образованием перекрестно-сшивающих мостиков в передней области стромы глубиной приблизительно 100-150 мкм. Улучшение топографических индексов при уменьшении астигматизма у пациентов, обработанных хинолином. Роговица выглядит прозрачной в соответствии с щелевой лампой. Шестой месяц: увеличение образования перекрестно-сшивающих мостиков у всех пациентов, которых лечили. Роговица прозрачная. В течение шестимесячного периода наблюдения не сообщали ни о вариациях прозрачности роговицы, ни о других побочных действиях. Изменение стромы с активацией кератиноцитов, обнаруженное в исследуемых группах через три месяца после лечения, определяло образование перекрестно-сшивающих мостиков. Такие связи представлены только в передней части стромы. Перекрестно-сшивающее действие, достигаемое при помощи описанного способа, отличается от действия, обеспечиваемого путем введения рибофлавина и удаления эпителия; фактически, в случае перекрестного сшивания с деэпителизацией модификации стромы роговицы обнаруживаются при помощи конфокальной микроскопии только в нижней трети роговицы, тогда как верхняя треть не изменяется при обработке. Представленные экспериментальные данные демонстрируют, что возможно лечение кератоконуса при помощи CXL, опосредованного хинолином, акридином, метиленовым синим, с избеганием удаления роговичного эпителия, кроме того, результаты, достигаемые при лечении хинолином, являются более оптимистичными по сравнению с другими тестируемыми красителями. Кратко, представленные данные ясно демонстрируют, что композиции в соответствии с настоящим изобретением эффективны для ограничения прогресса кератоконуса, при отсутствии побочных действий ни во время вмешательства, ни после него и во время периода наблюдения. Зарегистрированные обработки без удаления эпителия с использованием описанных композиций являются простыми и обеспечивают несколько преимуществ: отсутствие осложнений вследствие деэпителизации, поддержание зрения до обработки, отсутствие боли после обработки, перекрестное сшивание роговицы по настоящему изобретению не требует наличия операционной, возможность для лечения пациентов в возрасте до 10 лет. Фактически, в приведенных случаях из практики пациенты возвращались к своей обычной деятельности через несколько часов после лечения, при ясном улучшении основных наблюдаемых параметров в течение одного месяца. Анализ стромы роговицы после обработки с использованием композиций по настоящему изобретению продемонстрировал образования утолщения стромы приблизительно 100 мкм относительно поверхности эпителия. Такое изменение отличается от изменения, которое классически достигается при помощи CXL с деэпителизацией. Следовательно, два способа CXL не приводят к перекрывающимся результатам, а могут рассматриваться как взаимодополняющие. Такие наблюдения открывают новые перспективы в лечении кератоконуса, поскольку трансэпителиальный способ с использованием представленных композиций не служит для замены используемых в настоящее время протоколов, а для их дополнения, например, без деэпителизации и постхирургических процедур можно усилить действие традиционного лечения путем CXL, которое не позволяет достичь полного блокирования прогресса кератоконуса. Кроме того, процедуры CXL, осуществляемые с использованием композиции по настоящему изобретению, позволяют расширить диапазон пациентов, для которых показано это лечение, вследствие, в основном, соблюдения пациентом схемы лечения с возможностью лечить очень молодых пациентов,страдающих от исходного кератоконуса, замедления развития патологии и общего улучшения терапевтических ожиданий. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение одного или нескольких биоусиливающих агентов, выбранных из ЭДТА (этилендиаминтетрауксусной кислоты), связанной с трометамином, полисорбата 80, трометамина, взятых по одному или смешанных вместе, для изготовления офтальмологической композиции для способа перекрестного сшивания роговицы при лечении кератоконуса или других эктазийных расстройств для способствования прохождению офтальмологической композиции, содержащей рибофлавин, в строму через эпителий роговицы. 2. Применение по п.1, где биоусиливающие агенты присутствуют в количестве, выбранном из от 0,0001 до 5 мас.% относительно композиции, в частности ЭДТА составляет от 0,001 до 1 мас.%, трометамин составляет от 0,001 до 2 мас.% и полисорбат 80 составляет от 0,001 до 5 мас.%. 3. Применение по п.2, где ЭДТА присутствует в количестве от 0,05 до 0,5 мас.% и/или трометамин присутствует в количестве от 0,05 до 0,5 мас.%. 4. Применение по любому из пп.1-3, где рибофлавин фосфат присутствует в количестве от 0,05 до 0,3 мас.%. 5. Офтальмологическая композиция, включающая один или несколько биоусиливающих агентов,выбранных из ЭДТА (этилендиаминтетрауксусной кислоты), связанной с трометамином, полисорбата 80 и трометамина, взятых по одному или смешанных вместе, и рибофлавин, для способа перекрестного сшивания роговицы при лечении кератоконуса или других эктазийных расстройств. 6. Глазные капли для лечения кератоконуса или других эктазийных расстройств при помощи способа перекрестного сшивания роговицы, включающие один или несколько биоусиливающих агентов, выбранных из ЭДТА (этилендиаминтетрауксусной кислоты), связанной с трометамином, полисорбата 80 и трометамина, взятых по одному или смешанных вместе, и рибофлавин. 7. Глазные капли для применения для лечения кератоконуса или других эктазийных расстройств при помощи способа перекрестного сшивания роговицы, включающие композицию по п.5.