Терапевтические композиции с нейротоксином ботулина

011652 Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, которые включают нейротоксин ботулина, выделенный из Clostridium botulinum, причем этот нейротоксин свободен от комплексообразующих белков в природном комплексе нейротоксина ботулина, или нейротоксин ботулина, который модифицирован химически или модифицирован с помощью генетических методик, причем указанный модифицированный токсин ботулина свободен от комплексообразующих белков, которые в естественном состоянии образуют комплексы с нейротоксинами ботулина. Кроме того, фармацевтические композиции по настоящему изобретению обладают хорошей стабильностью и преимущественно не содержат в своем составе альбумина человеческой сыворотки. Альбумин человеческого происхождения применялся в качестве объемного носителя и стабилизатора для активных белковых ингредиентов, включенных в фармацевтические композиции. Было показано, что альбумин стабилизирует активные белковые ингредиенты в фармацевтических композициях за счет понижения адгезии и уменьшения денатурации действующего ингредиента. Кроме того, альбумин не обладает иммуногенностью при инъекции пациенту из числа людей. Однако применение альбумина в фармацевтической композиции сопровождается значительными недостатками. Альбумину приписывают передачу некоторых стабильных вирусов, прионов или других инфекционных или патогенных объектов, например человеческой передающейся губчатой энцефалопатии (TSE). Следовательно, контролирующими органами проводятся тщательные испытания фармацевтических композиций, содержащих альбумин человеческой сыворотки. Кроме этого, в качестве заменителя альбумина в некоторых фармацевтических композициях, содержащих активные белковые ингредиенты,применялся желатин. Поскольку желатин является белком, выделенным из млекопитающих, он также несет аналогичную опасность передачи патогенов. Следовательно, существует необходимость замены белковых стабилизаторов, полученных из млекопитающих. Комплексы токсина ботулина состоят из комплексов клостридиальных белков. Они представляют собой гемагглютинины с различными молекулярными массами, нетоксичный, не гемагглютинирующий белок (Mr около 120000) и нейротоксин (Mr около 150000). Указанные молекулы образуют устойчивый к действию кислот комплекс, который является ответственным за токсичность при пероральном введении в случае пищевого отравления. В противоположность чистому нейротоксину, комплекс устойчив к действию агрессивной среды в желудочно-кишечном тракте, что делает возможным абсорбцию нейротоксина в кишечнике, после чего он достигает целевых клеток с потоком крови либо через лимфатическую систему и вызывает блокирование выделения нейротрансмиттера в этих клетках. За этим следует мышечный паралич и прекращение различных функций вегетативной нервной системы. Отравленные пациенты умирают от прекращения работы дыхательных мышц. Поскольку чистый нейротоксин разрушается в желудочно-кишечном тракте и, таким образом, не подвергается абсорбции в кишечнике, он не является токсичным после приема внутрь. При парентеральном введении терапевтическое воздействие нейротоксина и комплекса не отличаются, так как комплекс разлагается в ткани на свои составляющие, и только нейротоксин поглощается целевыми клетками. В настоящее время утверждены два препарата, включающие нейротоксин ботулина типа А, для лечения блефароспазма, гемифациальных спазмов и спастической кривошеи, а именно ВОТОХ иDYSPORT. В известном уровне техники нейротоксин ботулина инъецируют непосредственно в дистонические или спастические мышцы, где нейротоксин высвобождается из комплекса при физиологических значениях pH и вызывает желаемый фармакологический результат. В настоящее время проходят клинические испытания препараты для лечения других расстройств нервной системы (различных видов спастичности, мигрени, поясничной боли, расстройств шейного отдела позвоночника, повышенного слюноотделения). Комплекс токсина ботулина типа А (Mr 900000) одобрен к применению для лечения различных дистоний. Кроме этого, утвержденные продукты применяются по косметическим показаниям,таким как повышенное потоотделение и явно выраженное образование морщин. Другие комплексы токсина Clostridium botulinum (типов B, C1, D, E, F, G), а также токсины, которые получены из этих токсинов Clostridium botulinum с помощью химических модификаций или генетических методик, также подходят для этих видов терапии. Оба препарата, как ВОТОХ, так и DYSPORT, поставляются клиницистам в лиофилизированной форме для восстановления непосредственно перед применением. К сожалению, не для всех пациентов и показаний к применению требуется одинаковая дозировка. Следовательно, восстановленную композицию часто либо замораживают, либо охлаждают для последующего использования. Эти восстановленные композиции, подвергшиеся хранению, оценивали с точки зрения сохранения их эффективности. После восстановления и хранения при охлаждении в течение 12 ч наблюдалась потеря ВОТОХ'ом, как минимум, 44% своей эффективности. Кроме того, если восстановленную композицию замораживают приbotulinum toxin type A (Botox): Degradation in potency with storage, Otolaryngology - Head and Neck Surgery 102(2): 135-140 (1992). Подобная нестабильность приводит к значительным колебаниям дозировки и напрасным потерям продукта. Таким образом, цель настоящего изобретения заключается в разработке и получении стабильного жидкого и лиофилизированного состава, содержащего токсин ботулина, который-1 011652 по сравнению с существующими составами обладает лучшими характеристиками при использовании. Были разработаны новые фармацевтические композиции, которые содержат нейротоксин ботулина(типов A, B, C1, D, E, F или G), свободный от гемагглютининов и других экзогенных белков. Это уменьшает общее количество белков в фармацевтическом составе без уменьшения количества токсина. В исследованиях антигенности авторы обнаружили, что чистый нейротоксин всех типов, в противоположность коммерческим продуктам типа А и комплексам типов B-G, не вызывает образования антител или, в худшем случае, вызывает очень незначительное их образование. При терапевтическом применении этих вновь разработанных фармацевтических составов (чистых нейротоксинов типов A, B, C1, D, E, F или G) не наблюдается неудачного исхода лечения из-за появления антител даже после повторного введения. Однако и как отмечено выше, с составом возникают проблемы. Будучи действующим веществом белковой природы, токсин ботулина является весьма неустойчивым. Кроме того, комплексы токсина ботулина чрезвычайно чувствительны к денатурации при поверхностной денатурации, под действием нагревания и щелочной среды. Как и для ферментов вообще, биологическая активность токсинов ботулина (которые являются внутриклеточными пептидазами) зависит, по крайней мере, частично от их трехмерной конформации. Таким образом, токсины ботулина могут лишаться токсичности при нагревании, а также при действии различных химических реагентов, поверхностного растяжения или высушивания. Кроме этого, известно,что незначительные концентрации токсина, используемые при утвержденных показаниях, приводят к быстрой детоксикации токсина в случае отсутствия подходящего стабилизирующего агента. Кроме того,стабильность токсина является существенным фактором при хранении. Следовательно, стабилизирующие агенты являются чрезвычайно важными. До сих пор стабильность достигалась за счет включения в состав препарата белков млекопитающих, т.е. альбумина и желатина. Как отмечалось выше, белки млекопитающих повышают опасность того, что токсин могут загрязнять некоторые устойчивые вирусы,прионы или другие инфекционные или патогенные объекты, поступившие от донора. Кроме того, к детоксикации токсина приводят условия, в которых осуществляется лиофилизация, в том числе значение pH, температура, разбавление и остаточное давление вакуума. До сих пор для стабилизации токсина ботулина с определенным успехом применялись белки млекопитающих, такие как желатин и альбумин сыворотки, причем они являлись стандартными стабилизаторами. Например, содержащая токсин ботулина коммерчески доступная фармацевтическая композиция ВОТОХ (может быть получена у фирмы Allergan, Inc., of Irvine, California) состоит из очищенного комплекса токсина ботулина А, альбумина и хлорида натрия, упакованных в стерильном лиофилизированном виде. Каждая ампула ВОТОХ содержит около 100 единиц (ед.) комплекса токсина Clostridiumbotulinum типа А, 0,5 мг альбумина человеческой сыворотки и 0,9 мг хлорида натрия в стерильной лиофилизированной форме без консервантов. В технике имеется много попыток стабилизации белковых композиций. Carpender et al., InteractionsBiological Product Freeze-Drying and Formulation, 24-26 October 1990; Karger (1992), 225-239. Применение целлобиозы из группы дисахаридов в качестве наполнителя в сочетании с альбумином и хлоридом натрия демонстрирует снижение токсичности (восстановлено 10% токсичности) после лиофилизации кристаллического токсина ботулина типа А с этим наполнителем, по сравнению с токсичностью после лиофилизации только с альбумином (восстановлено от 75% до 90%). Goodnough et al., Stabilization of Botulinum Toxin Type A During Lyophilization, AppEnvir.Micro. 58 (10) 3426-3428 (1992). Кроме того, известно, что белковые составы, содержащие сахарид (такой как глюкоза или полимер глюкозы) или углеводороды, не являются стабильными, поскольку, как было показано, белки и глюкоза взаимодействуют друг с другом и подвергаются разрушению в реакции Майларда из-за восстановительной природы глюкозы и ее полимеров. В противоположность этому спирты, например инозит и маннит,не являются восстановителями, и долгое время они применялись в качестве криопротекторных наполнителей для стабилизации белков при лиофилизации. В свете нестабильности токсина ботулина и рисков, сопутствующих стабилизаторам, полученным из млекопитающих, и полисахаридам, подходящий стабилизатор белка продолжает оставаться целью специалистов по созданию рецептур. Сущность изобретения Цель настоящего изобретения заключается в разработке небелкового заменителя полученных из млекопитающих белков в фармацевтических композициях, содержащих токсин ботулина или токсин,который получен из токсина ботулина химической модификацией или с помощью генетических методик. Этот новый состав должен иметь низкую и предпочтительно пренебрежимо низкую иммуногенность при инъекции в организм пациента из числа людей. Следовательно, то что, по мнению авторов, входит в объем настоящего изобретения, может быть,между прочим, кратко изложено следующим образом: фармацевтические композиции, включающие нейротоксин ботулина, выделенный из Clostridiumbotulinum типов A, B, C1, D, E, F или G, или смесь двух или нескольких нейротоксинов ботулина, причем-2 011652 нейротоксин или смесь нейротоксинов не содержат комплексообразующих белков, которые в естественном состоянии образуют комплексы с нейротоксинами ботулина, а также небелковый стабилизирующий агент, который сохраняет биологическую активность нейротоксина ботулина в водном растворе; указанная фармацевтическая композиция, в которой нейротоксин ботулина модифицирован химически или модифицирован с помощью генетических методик, или является смесью этих модифицированных нейротоксинов; указанная фармацевтическая композиция, в которой небелковый стабилизирующий агент выбран из одного или нескольких соединений из числа гиалуроновой кислоты, поливинилпирролидона и полиэтиленгликоля; указанная фармацевтическая композиция, которая включает буфер pH; указанная фармацевтическая композиция, в которой буфером pH является ацетат натрия; указанная фармацевтическая композиция, в состав которой входит криопротектор; указанная фармацевтическая композиция, в которой криопротектор представляет собой полиспирт; указанная фармацевтическая композиция, в которой полиспирт выбран из одного или нескольких соединений из числа инозита, маннита и сорбита; указанная фармацевтическая композиция, которая является лиофилизированной; указанная фармацевтическая композиция, в которой небелковый агент является гиалуроновой кислотой, причем композиция лиофилизирована; указанная фармацевтическая композиция, которая содержит гиалуроновую кислоту, причем композиция лиофилизирована; указанная фармацевтическая композиция, предназначенная для введения животным, включая человека, в количестве, эффективном для лечения состояния, в котором показаны терапия или лечение нейротоксином ботулина; указанная фармацевтическая композиция, причем состояние, в котором показаны терапия или лечение нейротоксином ботулина, выбрано из косметических состояний, блефароспазма, гемифациальных спазмов, спастической кривошеи, различных видов спастичности, дистонии, мигрени, поясничной боли,расстройств шейного отдела позвоночника, косоглазия, повышенного потоотделения и повышенного слюноотделения; указанная фармацевтическая композиция, причем косметическое состояние представляет собой появление выраженных морщин; а также препарат нейротоксина ботулина, содержащий нейротоксин ботулина, выделенный из Clostridium botulinum типов A, B, C1, D, E, F или G, или смесь двух или нескольких нейротоксинов ботулина,причем нейротоксин или смесь нейротоксинов не содержат комплексообразующих белков, которые в естественном состоянии образуют комплексы с нейротоксином ботулина, а также небелковый стабилизирующий агент, который сохраняет биологическую активность нейротоксина ботулина в водном растворе; указанный препарат нейротоксина ботулина, в котором нейротоксин ботулина модифицирован химически или модифицирован с помощью генетических методик, или является смесью этих модифицированных нейротоксинов; указанный препарат нейротоксина ботулина, в котором небелковый стабилизирующий агент выбран из одного или нескольких соединений из числа гиалуроновой кислоты, поливинилпирролидона и полиэтиленгликоля; указанный препарат нейротоксина ботулина, в котором водный раствор включает буфер pH; указанный препарат нейротоксина ботулина, в котором буфером pH является ацетат натрия; указанный препарат нейротоксина ботулина, который не содержит белковых стабилизирующих агентов, полученных из млекопитающих; указанный препарат нейротоксина ботулина, причем препарат не содержит белковых стабилизирующих агентов, полученных из млекопитающих, таких как альбумин и желатин; указанный препарат нейротоксина ботулина, в котором небелковый стабилизирующий агент является гиалуроновой кислотой, причем композиция лиофилизирована; указанный препарат нейротоксина ботулина, включающий гиалуроновую кислоту, причем композиция лиофилизирована; а также способ стабилизации нейротоксина ботулина, выделенного из Clostridium botulinum типовA, B, C1, D, E, F или G, или смеси двух или нескольких нейротоксинов ботулина, причем нейротоксин или смесь нейротоксинов не содержит комплексообразующих белков, которые в естественном состоянии образуют комплексы с нейротоксинами ботулина, включающий смешивание нейротоксина с небелковым стабилизирующим агентом в водном растворе в количестве, эффективном для сохранения биологической активности нейротоксина; указанный способ, в котором нейротоксин ботулина модифицирован химически или модифицирован с помощью генетических методик либо представляет собой смесь этих модифицированных нейротоксинов; указанный способ, в котором небелковый стабилизирующий агент выбран из одного или несколь-3 011652 ких соединений из числа гиалуроновой кислоты, поливинилпирролидона и полиэтиленгликоля; указанный способ, в котором водный раствор содержит буфер pH; указанный способ, в котором буфером pH является ацетат натрия; указанный способ, в котором водный раствор содержит криопротектор; указанный способ, в котором водный раствор лиофилизирован; указанный способ, в котором небелковый стабилизирующий агент является гиалуроновой кислотой, причем композиция лиофилизирована; указанный способ, включающий гиалуроновую кислоту, причем композиция лиофилизирована; а также способ лечения состояния, при котором показаны терапия или лечение нейротоксином ботулина, включающий стадию введения человеку или животному в случае необходимости композиции,включающей нейротоксин ботулина, выделенный из Clostridium botulinum типов A, B, C1, D, E, F или G,или смесь двух или нескольких нейротоксинов ботулина, причем нейротоксин или смесь нейротоксинов не содержит комплексообразующих белков, которые в естественном состоянии образуют комплексы с нейротоксинами ботулина, смешанный с небелковым стабилизирующим агентом, который сохраняет биологическую активность нейротоксина ботулина в водном растворе; указанный способ, в котором нейротоксин ботулина модифицирован химически или модифицирован с помощью генетических методик либо представляет собой смесь модифицированных нейротоксинов; указанный способ, в котором небелковый стабилизирующий агент выбран из одного или нескольких соединений из числа гиалуроновой кислоты, поливинилпирролидона и полиэтиленгликоля; указанный способ, в котором водный раствор содержит буфер pH; указанный способ, в котором буфером pH является ацетат натрия; указанный способ, в котором водный раствор содержит криопротектор; указанный способ, в котором криопротектор является полиспиртом; указанный способ, в котором полиспирт выбран из одного или нескольких соединений из числа инозита, маннита и сорбита; указанный способ, в котором небелковый стабилизирующий агент является гиалуроновой кислотой, причем композиция лиофилизирована; указанный способ, в котором водный раствор содержит гиалуроновую кислоту, причем композиция лиофилизирована; указанный способ, причем состояние, в котором показаны терапия или лечение нейротоксином ботулина, выбрано из косметических состояний, блефароспазма, гемифациальных спазмов, спастической кривошеи, различных видов спастичности, мигрени, поясничной боли, расстройств шейного отдела позвоночника, косоглазия, повышенного потоотделения, повышенного слюноотделения и различных видов дистонии; указанный способ, в котором косметическое состояние представляет собой выраженное образование морщин; а также применение указанного препарата нейротоксина ботулина для лечения косметических состояний; а также применение указанного препарата нейротоксина ботулина с целью производства лекарственного средства, предназначенного для лечения состояния, в котором показана терапия нейротоксином ботулина. Определения В настоящем описании приведенные ниже слова и термины имеют следующие определения. Фармацевтическая композиция представляет собой состав, в котором действующий ингредиент, в данном случае токсин ботулина или токсин ботулина, не содержащий белка гемагглютинина, или токсин, полученный из токсина ботулина химической модификацией или с помощью генетических методик,стабилизирован веществом, отличающимся от белка, полученного из млекопитающих. Такая фармацевтическая композиция может подходить для введения с диагностическими или терапевтическими целями(например, с помощью внутримышечной или подкожной инъекции) пациенту из числа людей. Композиция может быть лиофилизированной или высушенной в вакууме, восстановленной или в растворе. Действующий токсин ботулина может быть одним из серологических типов A, B, C1, D, E, F или G токсина ботулина, причем каждый из этих типов может быть дополнительно модифицирован для освобождения от комплексообразующих белков, имеющихся в природном нейротоксине, или модифицирован химически, или же модифицирован с помощью генетических методик. Термин терапевтический состав относится к способности данного состава лечить/облегчать состояния, как, например, состояние, связанное с гиперактивностью (т.е. спастичностью) периферических мышц. Термины стабилизирующий, стабилизирует или стабилизация означают, что действующее вещество, т.е. токсин ботулина, или токсин, полученный из токсина ботулина химической модификацией или с помощью генетической методики, присутствующее в восстановленном или водном растворе фармацевтической композиции, обладает более чем примерно 20% и вплоть до примерно 100% токсичности,-4 011652 которой обладал биологически активный токсин ботулина до включения в фармацевтическую композицию. Термин криопротектор относится к наполнителям, применение которых приводит к тому, что действующее вещество, т.е. токсин ботулина, или токсин, полученный из токсина ботулина химической модификацией или с помощью генетической методики, которое присутствует в восстановленном или водном растворе фармацевтической композиции, обладает более чем примерно 20% и вплоть до примерно 100% токсичности, которой обладал биологически активный токсин ботулина до лиофилизации в составе фармацевтической композиции. Термин буфер pH относится к химическим веществам, способным доводить значение pH композиции, раствора и т.п. до определенной величины или до определенного диапазона. Термин полиспирт относится к алифатическим или циклоалифатическим углеводам, имеющим больше чем одну функциональную гидроксильную группу, но не имеющим карбонильной функциональной группы (как, например, у сахаров). Фраза не содержащий стабилизирующих агентов, полученных из млекопитающих означает, что композиция или препарат не содержат обнаружимых количеств стабилизирующих агентов, полученных из белков млекопитающих. Термин химическая модификация относится к известным в технике способам, предназначенным для модификации природного токсина ботулина любого серологического типа, с помощью химических реакций или подобных способов; главным образом он относится к замещениям, делециям, вставкам, добавлениям или посттрансляционным модификациям аминокислот токсина ботулина. Термин генетические методики относится к известным в технике способам, предназначенным для модификации природного токсина ботулина любого серологического типа, с помощью модификации гена, кодирующего токсин ботулина, или соответствующих нуклеиновых кислот, таких как ДНК или РНК. Описание изобретения Настоящее изобретение описывает открытие, согласно которому может быть создана стабильная фармацевтическая композиция, содержащая нейротоксин и не содержащая какого бы то ни было белка,полученного из млекопитающих, или объединенного белка доноров, с помощью включения в состав композиции небелкового стабилизирующего агента, а именно с помощью включения гиалуроновой кислоты или поливинилпирролидона, или полиэтиленгликоля, или смеси двух или всех трех перечисленных компонентов. Настоящее изобретение относится к разработке композиций токсина ботулина, которые созданы с применением гиалуроновой кислоты или поливинилпирролидона, или полиэтиленгликоля,или смеси двух, или всех трех перечисленных компонентов. Такая композиция является более безопасной и обладает замечательной стабильностью. Выгодная особенность композиции по настоящему изобретению заключается в том, что токсин ботулина или токсин, полученный из токсина ботулина химической модификацией или с помощью генетической методики, не объединен в составе композиции с белковым стабилизатором, полученным из млекопитающих. Было установлено, что составы, содержащие гиалуроновую кислоту, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль или их смеси, в частности включающие буфер pH, в основном натрий-ацетатный буфер, и/или криопротектор, могут применяться для увеличения стабильности и полезного срока хранения фармацевтической композиции по настоящему изобретению. Кроме того, фармацевтическая композиция или препарат по настоящему изобретению предпочтительно не только не содержат белковых стабилизирующих агентов, полученных из млекопитающих, но также не содержат любых стабилизирующих белков. Настоящее изобретение не ограничено фармацевтическими композициями, но также относится к способам стабилизации композиций токсина ботулина или композиций токсина, который получен из токсина ботулина химической модификацией или с помощью генетической методики. За счет включения в композицию гиалуроновой кислоты, поливинилпирролидона, полиэтиленгликоля или их смесей, достигается стабилизация токсина ботулина или токсина, полученного из токсина ботулина химической модификацией, или с помощью генетических методик. Кроме того, стабильность может быть улучшена за счет включения в фармацевтическую композицию буфера pH, что стабилизирует значение pH и содействует увеличению срока хранения восстановленного токсина, и/или за счет включения в фармацевтическую композицию криопротектора, что увеличивает стабильность и срок хранения лиофилизированного продукта. Предпочтительно, если буфер pH по своей химической природе и количеству способен стабилизировать или доводить значение pH композиции или препарата по настоящему изобретению до величин в диапазоне от примерно 4 до примерно 7,5. Подходящие буферы pH могут быть цитратными, фосфатными и, в особенности, ацетатными буферными системами, в частности, натрий-ацетатными буферными системами. Неожиданно было обнаружено, что если ацетатный буфер используется в композиции или препарате по настоящему изобретению и указанная композиция или препарат подвергнуты лиофилизации, ацетат может удаляться из композиции или препарата в процессе лиофилизации; после восстановления или оттаивания композиция или препарат имеют приблизительно нейтральное значение pH (в диа-5 011652 пазоне от примерно 6,5 до примерно 7,5). Это является преимуществом, если композицию или препарат вводят человеку или пациенту в случае необходимости, особенно при инъекции в мышцу, так как (почти) нейтральная композиция или препарат токсина ботулина вызывает меньшую боль по сравнению с соответствующей композицией или препаратом, имеющими кислотный pH, например 4. Детализированный вариант осуществления настоящего изобретения может представлять собой фармацевтическую композицию, пригодную для инъекции пациенту из числа людей, которая включает токсин ботулина или токсин, полученный из токсина ботулина химической модификацией или с помощью генетической методики, а также гиалуроновую кислоту, поливинилпирролидон или полиэтиленгликоль, причем такая композиция необязательно pH-стабилизирована подходящим буфером pH, в частности натрий-ацетатным буфером, и/или содержит полиспирт в качестве криопротектора. Эта фармацевтическая композиция подходит для введения пациенту из числа людей, с целью достижения терапевтического эффекта, причем нейротоксин может быть одним из токсинов ботулина серологических типов A, B, C1, D, E, F и G, предпочтительно токсином ботулина, который не содержит комплексообразующих белков, присутствующих в природном нейротоксине, или нейротоксином, который модифицирован химически или модифицирован с помощью генетических методик. Модифицированный нейротоксин также не содержит комплексообразующих белков, которые в естественном состоянии образуют комплексы с нейротоксином ботулина. Модификация нейротоксина, полученного из нейротоксина ботулина с помощью химических превращений или генетических методик, может происходить на любом участке нейротоксинового белка,например, на участке тяжелой цепи и/или участке легкой цепи молекулы нейротоксина. Это могла бы быть одна модификация или несколько модификаций. Предпочтительно тяжелая цепь нейротоксинового белка, полученного из нейротоксина ботулина, содержит одну или несколько модификаций, которые могут уменьшить или увеличить сродство нейротоксина к связыванию с нервными клетками по сравнению с природным нейротоксином. Такой модифицированный нейротоксин может включать, как минимум, одно замещение, и/или делецию, и/или включение, и/или добавление, и/или посттрансляционную модификацию аминокислот нейротоксина и предпочтительно тяжелой цепи нейротоксина. Если фармацевтическая композиция помимо действующего нейротоксинового ингредиента содержит только гиалуроновую кислоту, поливинилпирролидон или полиэтиленгликоль в качестве стабилизатора, эта фармацевтическая композиция сохраняет свою эффективность в основном неизменной в течение периодов, равных шести месяцам, одному году, двум годам, трем годам и/или четырем годам, в случае хранения при температуре от примерно +8 до примерно -20 С. Кроме этого, указанные фармацевтические композиции в случае восстановления могут иметь эффективность или процент сохранения эффективности от примерно 20 до примерно 100%. В рамках настоящего изобретения фармацевтическая композиция может включать нейротоксин и гиалуроновую кислоту. Гиалуроновая кислота стабилизирует нейротоксин. Раскрытые в настоящем изобретении фармацевтические композиции в случае восстановления или при инъекции могут иметь pH от примерно 4 до 7,5. Гиалуроновая кислота в фармацевтических композициях по настоящему изобретению предпочтительно объединена с токсином ботулина в количестве от 0,1 до 10 мг, главным образом 1 мг гиалуроновой кислоты на миллилитр раствора токсина ботулина, содержащего 200 ед./мл. Более предпочтительно, если рассматриваемый раствор также содержит 1-100 мМ, в основном 10 мМ натрийацетатный буфер. В другом предпочтительном варианте осуществления композиция может содержать полиспирт в качестве криопротектора. Примеры полиспиртов, которые могли бы быть использованы, включают, например, инозит, маннит и другие не восстанавливающие спирты. Следует понять, что композиции или препараты по настоящему изобретению не содержат трегалозу, мальтотриозу или родственные сахара или полигидроксисоединения, которые иногда используются в качестве криопротекторов. Поливинилпирролидон в фармацевтических композициях по настоящему изобретению предпочтительно объединяют с токсином ботулина в количестве от 10 до 500 мг, главным образом 100 мг поливинилпирролидона на миллилитр раствора токсина ботулина, содержащего 200 ед./мл. Более предпочтительно, если рассматриваемый раствор также содержит 1-100 мМ, в основном 10 мМ натрий-ацетатный буфер. Полиэтиленгликоль в фармацевтических композициях по настоящему изобретению предпочтительно объединяют с токсином ботулина в количестве от 10 до 500 мг, главным образом 100 мг поливинилпирролидона на миллилитр раствора токсина ботулина, содержащего 200 ед./мл. Более предпочтительно,если рассматриваемый раствор также содержит 1-100 мМ, в основном 10 мМ натрий-ацетатный буфер. Таким образом, настоящее изобретение относится к токсину ботулина, включенному в состав фармацевтической композиции, которая содержит такие стабилизаторы, как гиалуроновая кислота, поливинилпирролидон или полиэтиленгликоль. Дополнительно эта фармацевтическая композиция может содержать натрий-ацетатную буферную систему и/или спиртовой криопротектор. Следующие ниже по тексту примеры приведены только с целью иллюстрации и не предназначены служить ограничениями.-6 011652 Препараты или фармацевтические композиции по настоящему изобретению применимы для лечения состояний, для которых показаны терапия или лечение нейротоксином ботулина. В одном из аспектов они могут применяться для лечения косметических состояний, таких как образование морщин и выраженное образование морщин. В другом аспекте они могут применяться для лечения состояний, которые выбраны из блефароспазма, гемифациальных спазмов, спастической кривошеи, различных видов спастичности, мигрени, поясничной боли, расстройств шейного отдела позвоночника, косоглазия, повышенного потоотделения, повышенного слюноотделения и различных дистоний. Кроме того, препараты или композиции по настоящему изобретению также применимы для производства лекарственного средства для лечения состояний, при которых показана терапия нейротоксином ботулина, причем состояния предпочтительно выбраны из косметических состояний, блефароспазма, гемифациальных спазмов, спастической кривошеи, различных видов спастичности, мигрени, поясничной боли, расстройств шейного отдела позвоночника, косоглазия, повышенного потоотделения, повышенного слюноотделения и различных дистоний. Дополнительными медицинскими показания, подходящими для лечения препаратами или композициями по настоящему изобретению, являются, среди прочих, умеренные спазмы, врожденный тремор, миокимия, нейрогенная гипертрофия мышц, велопалатинная миоклония, спинальная миоклония,синкинезия/расстройства VII черепного нерва, синдром ретракции глазного яблока Дуэйна, нистагм, терапевтический блефароптоз для защиты роговицы, осциллопсия, спастическая дисфония, гранулема, пуберофония, задний ларингостеноз, восстановление равновесия, заикание, недостаточность ТЕР, врожденное дрожание голоса, голосовые тики, дисфункция перстневидно-глоточной мышцы, бруксизм, гипертрофия жевательной мышцы, патологическое ожирение, ахалазия, анальная трещина, анизм, упорная икота, тяжелый запор, аноректальная боль, гастропарез, доброкачественные анальные расстройства, дивертикулез пищевода, дисфункция сфинктера Одди, синдром крокодиловых слез, киста слюнной железы, сиалорея, слюнотечение, свищ околоушной железы, синдром Фрея, птиализм, асинергия детрузора и сфинктера, сверхактивный мочевой пузырь, вагинизм, задержка мочевыделения, гиперплазия, доброкачественная гиперплазия, тензионная головная боль, боль шейного происхождения, миофациальная боль,апраксия открытия века, синкинезия в результате паралича лицевого нерва, заикание с блокированием гортани, запах тела, наследственный ринит. Примеры Было продемонстрировано, что препараты токсина ботулина по настоящему изобретению и фармацевтические композиции на их основе, а также способы лечения данными препаратами, обладают уникальными и полезными свойствами, представляя собой целостный предмет изобретения, что неочевидно заявлено в формуле настоящего изобретения. Препараты токсина ботулина и их фармацевтические композиции в стандартных общепринятых надежных методиках тестирования продемонстрировали следующие ценные свойства и характеристики. Пример 1. Получение токсина ботулина. Чистый нейротоксин из Clostridium botulinum типа А получали по методике, основанной на методике DasGuptaSathyamoorthy. Clostridium botulinum типа А культивировали в 20 л биореакторе в среде,состоящей из 2% протеозолептона, 1% экстракта дрожжей, 1% глюкозы и 0,05% тиогликолята натрия. После культивирования в течение 72 ч токсин осаждали добавлением 3 н. серной кислоты (конечное значение pH 3,5). Осажденную и центрифугированную биомассу экстрагировали 0,2 М натрий-фосфатным буфером при pH 6,0. После удаления нуклеиновых кислот осаждением с протаминсульфатом, токсин осаждали добавлением сульфата аммония. Солюбилизированный и диализированный против 50 мМ фосфата натрия приpH 6,0 осадок связывали на колонке с DEAE-Sephadex при том же значении pH и элюировали 150 мМNaCl. Затем осуществляли хроматографию на колонке с QAE-Sephadex, которую приводили в равновесие 50 мМ буфером Tris/HCl с pH 7,9. Токсин элюировали градиентом NaCl. На последней стадии токсин хроматографировали на SP-Sephadex при pH 7,0. В этом случае связанный токсин элюировали из колонки, применяя градиент NaCl (0-300 мМ). Очищенный токсин анализировали с помощью электрофореза на SDS-полиакриламидном геле (SDS-PAGE), причем он демонстрировал чистоту 95+/-5%. Биологическую активность определяли с помощью анализа LD50 для мышей: одна единица LD50 соответствовала 4,8 пг белка. Пример 2. Конечная фармацевтическая композиция, содержащая гиалуроновую кислоту. Очищенный нейротоксин из примера 1 использовали для получения раствора, который содержал 200 ед. препарата токсина ботулина и 1 мг гиалуроновой кислоты на миллилитр дистиллированной воды. Раствор разливали во флаконы. Пример 3. Конечная фармацевтическая композиция, содержащая гиалуроновую кислоту и натрийацетатный буфер. Очищенный нейротоксин из примера 1 использовали для получения раствора, который содержал 200 ед. препарата токсина ботулина и 1 мг гиалуроновой кислоты на миллилитр дистиллированной воды,и доводили pH до 4,5, 5,0 и 5,5 добавлением 10 мМ натрий-ацетатного буфера. Раствор разливали во флаконы.-7 011652 Пример 4. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина. Получали состав из примера 2 и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбумин человеческой сыворотки (HSA). При получении оба препарата обладали одинаковой активностью. Через 24 и 48 ч стабильность состава из примера 2 соответствовала стабильности препарата с HSA, причем в обоих образцах наблюдалась потеря исходной активности менее 5%. Пример 5. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина, при меняющемся значении pH. Получали составы из примера 3 и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбумин человеческой сыворотки (HSA). В момент приготовления как составы по настоящему изобретению при всех значениях pH, так и препарат с HSA обладали одинаковой активностью. Препарат с pH 4,5 демонстрировал потерю приблизительно 50% активности на шестой день. Препараты с pH 5,0 и 5,5 потеряли всю активность на шестой день. Пример 6. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина, при меняющемся значении pH и лиофилизации. Получали составы из примера 3 и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбумин человеческой сыворотки (HSA). В момент приготовления состав по настоящему изобретению с pH 4,5 обладал той же активностью, что и препарат с HSA. Более важно, что не было обнаружено потери активности при лиофилизации. Пример 7. Конечная фармацевтическая композиция, содержащая поливинилпирролидон. Очищенный нейротоксин из примера 1 использовали для получения раствора, который содержал 200 ед. препарата токсина ботулина и 100 мг поливинилпирролидона на миллилитр дистиллированной воды. Раствор разливали во флаконы. Пример 8. Конечная фармацевтическая композиция, содержащая поливинилпирролидон и натрийацетатный буфер. Очищенный нейротоксин из примера 1 использовали для получения раствора, который содержал 200 ед. препарата токсина ботулина и 100 мг поливинилпирролидона на миллилитр дистиллированной воды, и доводили pH до 4,5, 5,0 и 5,5 добавлением 10 мМ натрий-ацетатного буфера. Раствор разливали во флаконы. Пример 8A. Конечная фармацевтическая композиция, содержащая поливинилпирролидон, маннит и натрий-ацетатный буфер. Очищенный нейротоксин из примера 1 использовали для получения раствора, который содержал 200 ед. препарата токсина ботулина, 100 мг поливинилпирролидона и 20 мг маннита на миллилитр дистиллированной воды, и доводили pH до 4,5, 5,0 и 5,5 добавлением 10 мМ натрий-ацетатного буфера. Раствор разливали во флаконы. Пример 8 В. Конечная фармацевтическая композиция, содержащая поливинилпирролидон, сорбит и натрий-ацетатный буфер. Очищенный нейротоксин из примера 1 использовали для получения раствора, который содержал 200 ед. препарата токсина ботулина, 100 мг поливинилпирролидона и 20 мг сорбита на миллилитр дистиллированной воды, и доводили pH до 4,5, 5,0 и 5,5 добавлением 10 мМ натрий-ацетатного буфера. Раствор разливали во флаконы. Пример 9. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина. Получали состав из примера 7 и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбумин человеческой сыворотки (HSA). В момент приготовления оба препарата обладали одинаковой активностью. Пример 10. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина, при меняющемся значении pH. Получали составы из примера 8 и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбумин человеческой сыворотки (HSA). В момент приготовления как составы по настоящему изобретению при всех значениях pH, так и препарат с HSA обладали одинаковой активностью. Препараты с pH 4,5 и 5,0, а также препарат с HSA демонстрировали отсутствие потери активности в течение 24 ч после приготовления. Препарат с pH 5,5 потерял 20% активности в течение 24 ч по сравнению с HSA и другими препаратами. Пример 10 А. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина, при меняющемся значении pH. Получали составы из примера 8 А и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбумин человеческой сыворотки (HSA). В момент приготовления как составы по настоящему изобретению при всех значениях pH, так и препарат с HSA обладали одинаковой активностью. Препараты с pH 4,5, 5,0 и 5,5, а также препарат с HSA демонстрировали отсутствие потери активности в течение 24 ч после приготовления. Пример 10 В. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина, при меняющемся значении pH. Получали составы из примера 8 В и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбу-8 011652 мин человеческой сыворотки (HSA). В момент приготовления как составы по настоящему изобретению при всех значениях pH, так и препарат с HSA обладали одинаковой активностью. Препараты с pH 4,5, 5,0 и 5,5, а также препарат с HSA демонстрировали отсутствие потери активности в течение 24 ч после приготовления. Пример 11. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина, при меняющемся значении pH и лиофилизации. Получали составы из примера 8 и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбумин человеческой сыворотки (HSA). В момент приготовления как составы по настоящему изобретению при всех значениях pH, так и препарат с HSA обладали одинаковой активностью. Более важно, что при лиофилизации для всех составов в течение срока до 6 месяцев была обнаружена менее чем 10% потеря активности. Пример 11 А. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина, при меняющемся значении pH и лиофилизации. Получали составы из примера 8 А и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбумин человеческой сыворотки (HSA). В момент приготовления как составы по настоящему изобретению при всех значениях pH, так и препарат с HSA обладали одинаковой активностью. Более важно, что при лиофилизации для всех составов в течение срока до 6 месяцев была обнаружена менее чем 10% потеря активности. Пример 11 В. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина, при меняющемся значении pH и лиофилизации. Получали составы из примера 8 В и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбумин человеческой сыворотки (HSA). В момент приготовления как составы по настоящему изобретению при всех значениях pH, так и препарат с HSA обладали одинаковой активностью. Более важно, что при лиофилизации для всех составов в течение срока до 6 месяцев была обнаружена менее чем 10% потеря активности. Пример 12. Конечная фармацевтическая композиция, содержащая полиэтиленгликоль. Очищенный нейротоксин из примера 1 использовали для получения раствора, который содержал 200 ед. препарата токсина ботулина и 100 мг полиэтиленгликоля на миллилитр дистиллированной воды. Раствор разливали во флаконы. Пример 12 А. Конечная фармацевтическая композиция, содержащая полиэтиленгликоль и маннит. Очищенный нейротоксин из примера 1 использовали для получения раствора, который содержал 200 ед. препарата токсина ботулина, 100 мг полиэтиленгликоля и 20 мг маннита на миллилитр дистиллированной воды. Раствор разливали во флаконы. Пример 12 В. Конечная фармацевтическая композиция, содержащая полиэтиленгликоль и сорбит. Очищенный нейротоксин из примера 1 использовали для получения раствора, который содержал 200 ед. препарата токсина ботулина, 100 мг полиэтиленгликоля и 20 мг сорбита на миллилитр дистиллированной воды. Раствор разливали во флаконы. Пример 13. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина. Получали состав из примера 12 и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбумин человеческой сыворотки (HSA). В момент приготовления оба препарата обладали одинаковой активностью. Пример 14. Определение стабильности состава, содержащего токсин ботулина. Получали состав из примеров 12 А и 12 В и сравнивали с составом, содержащим токсин ботулина и альбумин человеческой сыворотки (HSA). В момент приготовления оба препарата по настоящему изобретению, а также препарат с HSA обладали одинаковой активностью. Препараты по настоящему изобретению, а также препарат с HSA продемонстрировали потерю менее 20% активности в течение 24 ч с момента получения составов. Пример 15. Применение фармацевтической композиции, содержащей токсин ботулина. Женщина в возрасте 50 лет нуждалась в лечении блефароспазма. Пациентке вводили внутримышечно от примерно 10 до примерно 20 ед. препарата токсина ботулина из примера 3, содержащего гиалуроновую кислоту. В течение 1-7 дней симптомы блефароспазма смягчались, причем ослабление симптомов сохранялось в течение, как минимум, от примерно 2 до примерно 6 месяцев. Пример 16. Применение фармацевтической композиции, содержащей токсин ботулина. Женщина в возрасте 50 лет нуждалась в лечении блефароспазма. Пациентке вводили внутримышечно от примерно 10 до примерно 20 ед. препарата токсина ботулина из примера 8, содержащего поливинилпирролидон. В течение 1-7 дней симптомы блефароспазма смягчались, причем ослабление симптомов сохранялось в течение, как минимум, от примерно 2 до примерно 6 месяцев. Пример 17. Применение фармацевтической композиции, содержащей токсин ботулина. Женщина в возрасте 50 лет нуждалась в лечении блефароспазма. Пациентке вводили внутримышечно от примерно 10 до примерно 20 ед. препарата токсина ботулина из примера 12, содержащего полиэтиленгликоль. В течение 1-7 дней симптомы блефароспазма смягчались, причем ослабление симптомов сохранялось в течение, как минимум, от примерно 2 до примерно 6 месяцев.-9 011652 Пример 18. Применение фармацевтической композиции, содержащей токсин ботулина. Женщина в возрасте 50 лет нуждалась в лечении блефароспазма. Пациентке вводили внутримышечно от примерно 10 до примерно 20 ед. препарата токсина ботулина из примера 12 А, содержащего полиэтиленгликоль. В течение 1-7 дней симптомы блефароспазма смягчались, причем ослабление симптомов сохранялось в течение, как минимум, от примерно 2 до примерно 6 месяцев. Пример 19. Применение фармацевтической композиции, содержащей токсин ботулина. Женщина в возрасте 50 лет нуждалась в лечении блефароспазма. Пациентке вводили внутримышечно от примерно 10 до примерно 20 ед. препарата токсина ботулина из примера 12 В, содержащего полиэтиленгликоль. В течение 1-7 дней симптомы блефароспазма смягчались, причем ослабление симптомов сохранялось в течение, как минимум, от примерно 2 до примерно 6 месяцев. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Фармацевтическая композиция, содержащая нейротоксин ботулина Clostridium botulinum типа A,B, C1, D, E, F или G или смесь двух или нескольких нейротоксинов ботулина, причем нейротоксин или смесь нейротоксинов не содержат комплексообразующих белков, которые в естественном состоянии образуют комплексы с нейротоксинами ботулина, а также небелковый стабилизирующий агент, выбранный из гиалуроновой кислоты, поливинилпирролидона и полиэтиленгликоля, который сохраняет биологическую активность нейротоксина ботулина в водном растворе, где композиция не содержит белков млекопитающих. 2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой нейротоксин ботулина содержит замены, делеции, вставки, добавления или посттрансляционные модификации аминокислот. 3. Фармацевтическая композиция по п.1, содержащая буфер pH. 4. Фармацевтическая композиция по п.3, в которой буфер pH представляет собой ацетат натрия. 5. Фармацевтическая композиция по п.1, содержащая криопротектор. 6. Фармацевтическая композиция по п.5, в которой криопротектор представляет собой полиспирт. 7. Фармацевтическая композиция по п.6, в которой полиспирт выбран из одного или нескольких соединений из числа инозита, маннита и сорбита. 8. Фармацевтическая композиция по п.5, которая является лиофилизированной. 9. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой небелковый агент представляет собой гиалуроновую кислоту, причем композиция лиофилизирована. 10. Фармацевтическая композиция по п.4, содержащая гиалуроновую кислоту, причем композиция лиофилизирована. 11. Фармацевтическая композиция по п.1, предназначенная для введения животным, включая человека, в количестве, эффективном для лечения состояния, для которого показаны терапия или лечение нейротоксином ботулина. 12. Фармацевтическая композиция по п.11, где состояние, для которого показаны терапия или лечение нейротоксином ботулина, выбрано из косметических состояний, блефароспазма, гемифациальных спазмов, спастической кривошеи, различных видов спастичности, различных дистоний, мигрени, поясничной боли, расстройств шейного отдела позвоночника, косоглазия, повышенного потоотделения и повышенного слюноотделения. 13. Фармацевтическая композиция по п.12, в которой косметическое состояние представляет собой выраженное образование морщин. 14. Лекарственное средство нейротоксина ботулина, содержащее нейротоксин ботулина, выделенный из Clostridium botulinum типов A, B, C1, D, E, F или G, или смесь двух или нескольких нейротоксинов ботулина, причем нейротоксин или смесь нейротоксинов не содержат комплексообразующих белков,которые в естественном состоянии образуют комплексы с нейротоксинами ботулина, а также небелковый стабилизирующий агент, выбранный из гиалуроновой кислоты, поливинилпирролидона и полиэтиленгликоля, который сохраняет биологическую активность нейротоксина ботулина в водном растворе,где композиция не содержит белков млекопитающих. 15. Лекарственное средство нейротоксина ботулина по п.14, в котором нейротоксин содержит замены, делеции, вставки, добавления или посттрансляционные модификации аминокислот. 16. Лекарственное средство нейротоксина ботулина по п.14, в котором водный раствор содержит буфер pH. 17. Лекарственное средство нейротоксина ботулина по п.16, в котором буфер pH представляет собой ацетат натрия. 18. Лекарственное средство нейротоксина ботулина по п.14, которое не содержит белковых стабилизирующих агентов, полученных из млекопитающих. 19. Лекарственное средство нейротоксина ботулина по п.16, причем лекарственное средство не содержит белковых стабилизирующих агентов, полученных из млекопитающих, таких как альбумин и желатин.- 10011652 20. Лекарственное средство нейротоксина ботулина по п.14, в котором небелковый стабилизирующий агент представляет собой гиалуроновую кислоту, причем композиция лиофилизирована. 21. Лекарственное средство нейротоксина ботулина по п.17, включающее гиалуроновую кислоту,причем композиция лиофилизирована. 22. Способ стабилизации нейротоксина ботулина Clostridium botulinum типа A, B, C1, D, E, F или G или смеси двух или нескольких нейротоксинов ботулина, причем нейротоксин или смесь нейротоксинов не содержат комплексообразующих белков, которые в естественном состоянии образуют комплексы с нейротоксинами ботулина, включающий стадии объединения нейротоксина с небелковым стабилизирующим агентом, выбранным из гиалуроновой кислоты, поливинилпирролидона и полиэтиленгликоля, в водном растворе в количестве, эффективном для сохранения биологической активности нейротоксина, и где нейротоксин ботулина в водном растворе не содержит белков млекопитающих. 23. Способ по п.22, в котором нейротоксин содержит замены, делеции, вставки, добавления или посттрансляционные модификации аминокислот. 24. Способ по п.22, в котором водный раствор содержит буфер pH. 25. Способ по п.24, в котором буфер pH представляет собой ацетат натрия. 26. Способ по п.22, в котором водный раствор содержит криопротектор. 27. Способ по п.26, в котором водный раствор подвергают лиофилизации. 28. Способ по п.22, в котором небелковый стабилизирующий агент представляет собой гиалуроновую кислоту, причем композиция лиофилизирована. 29. Способ по п.25, включающий гиалуроновую кислоту, причем композиция лиофилизирована. 30. Способ лечения состояния, при котором показаны терапия или лечение нейротоксином ботулина, включающий стадию введения человеку или животному, в случае необходимости, композиции,включающей нейротоксин ботулина, выделенный из Clostridium botulinum типа A, B, C1, D, E, F или G,или смесь двух или нескольких нейротоксинов ботулина, причем нейротоксин или смесь нейротоксинов не содержат комплексообразующих белков, которые в естественном состоянии образуют комплексы с нейротоксинами ботулина, смешанный с небелковым стабилизирующим агентом, выбранным из гиалуроновой кислоты, поливинилпирролидона и полиэтиленгликоля, который сохраняет биологическую активность нейротоксина ботулина в водном растворе, где композиция не содержит белков млекопитающих. 31. Способ по п.30, в котором нейротоксин содержит замены, делеции, вставки, добавления или посттрансляционные модификации аминокислот. 32. Способ по п.30, в котором водный раствор содержит буфер pH. 33. Способ по п.32, в котором буфер pH представляет собой ацетат натрия. 34. Способ по п.30, в котором водный раствор содержит криопротектор. 35. Способ по п.34, в котором криопротектор является полиспиртом. 36. Способ по п.35, в котором полиспирт выбран из одного или нескольких соединений из числа инозита, маннита и сорбита. 37. Способ по п.30, в котором небелковый стабилизирующий агент представляет собой гиалуроновую кислоту, причем композиция лиофилизирована. 38. Способ по п.33, в котором водный раствор содержит гиалуроновую кислоту, причем композиция лиофилизирована. 39. Способ по п.30, причем состояние, для которого показаны терапия или лечение нейротоксином ботулина, выбрано из косметических состояний, блефароспазма, гемифациальных спазмов, спастической кривошеи, различных видов спастичности, мигрени, поясничной боли, расстройств шейного отдела позвоночника, косоглазия, повышенного потоотделения, повышенного слюноотделения и различных дистоний. 40. Способ по п.39, в котором косметическое состояние представляет собой выраженное образование морщин. 41. Применение лекарственного средства нейротоксина ботулина по меньшей мере по одному из пп.12-18 для лечения косметических состояний. 42. Применение лекарственного средства нейротоксина ботулина по меньшей мере по одному из пп.12-18 для производства лекарственного средства для состояния, при котором показана терапия с помощью нейротоксина ботулина.