Биологически активные уреидо-производные, полезные при лечении рассеянного склероза

1 Настоящее изобретение относится к применению уреидо-производных замещенных пирролов при лечении рассеянного склероза у млекопитающих, в том числе у человека. Рассеянный склероз представляет собой заболевание центральной нервной системы,обусловленное процессами демиелинации и возникающее обычно в возрастной группе примерно от 15 до 45 лет. Миелин - жировое вещество, образующее оболочку вокруг определенных нервных волокон и передающее нервные импульсы со скоростью, позволяющей мышцам осуществлять тонкие и точные движения. Заболевание характеризуется индурацией вещества оболочки, приводящей к образованию бляшек различных размеров и локализации, которые являются препятствием для импульсов, обычно проводимых оболочкой. Течение болезни может существенно меняться у индивидуальных пациентов. На ранних стадиях заболевания фаза рецидива обычно сменяется фазой ремиссии; в дальнейшем заболевание переходит в хроническое прогрессивное течение. Однако заболевание обычно вызывает прогрессивное ухудшение контроля мышечных функций и во многих случаях в конечном итоге паралич. Точная причина рассеянного склероза неизвестна и может быть результатом сложного взаимодействия ряда различных факторов. Соответственно, для терапии необходимы лекарства, которые эффективны при лечении рассеянного склероза на стадии его рецидива и/или прогрессирования или способны облегчать состояние пациента, страдающего от рассеянного склероза. В РСТ/ЕР 94/00268 и РСТ/ЕР 94/00984 раскрывается применение определенного класса поли-4-амино-2-карбонил-1-метилпиррольных соединений,которые описаны в РСТ/ЕР 91/00014, соответственно, для профилактики и/или лечения метастатического распространения опухолей, и при лечении лентивирусной инфекции. Настоящим изобретением предлагается использование соединения, которое является уреидо-производным формулы (1) где каждый m и n, которые являются одинаковыми, представляет целое число от 1 до 3; и каждая из R-групп, которые являются одинаковыми, представляет собой нафтильную группу,замещенную 1-3 сульфогруппами, или его фармацевтически приемлемой соли в производстве медикаментов, предназначенных для лечения рассеянного склероза. Соответственно, настоящим изобретением раскрывается описанное выше использование,при котором лекарственный препарат предна 000166 2 значен для лечения рассеянного склероза на стадии его рецидива, например острого рецидива, и/или прогрессирования или для облегчения состояния пациента, страдающего от рассеянного склероза. Настоящим изобретением также предлагается способ лечения млекопитающих, в том числе человека, страдающих рассеянным склерозом, который включает введение указанному млекопитающему эффективного количества соединения, определенного выше. Замещенной нафтильной группой предпочтительно является 5-, 6-, 7- или 8 нафтильная группа, обычно 7- или 8-нафтильная группа. Если нафтильная группа содержит три сульфокислотные группы, предпочтительно они находятся в 1-, 3- и 5- или 1-, 3- и 6 положениях. Если нафтильная группа замещена двумя сульфокислотными группами, заместители предпочтительно находятся в положении 1- и 3-, 1- и 5-, 3- и 5- или 3- и 6-положениях. Если нафтильная группа замещена одной кислотной группой, сульфокислотный заместитель предпочтительно находится в положении 1-, 3- или 5-. В объем патентных притязаний по настоящему изобретению включены все возможные изомеры, стереоизомеры и их смеси и метаболиты и метаболические исходные вещества или исходные биовещества соединений, определенных выше. Как уже указывалось, настоящее изобретение включает также фармацевтически приемлемые соли уреидо-производных формулы (1). Примерами фармацевтически приемлемых солей могут служить либо соли с неорганическими основаниями, например, гидроксидами натрия, калия, кальция и алюминия, или с органическими основаниями, такими как лизин, аргинин, N-метилглутамин, триэтиламин, триэтаноламин, дибензиламин, метилбензиламин, ди(2-этил-гексил)-амин,пиперидин,Nэтилпиперидин, N,N-диэтиламиноэтиламин, Nэтилморфолин, -фенетиламин, N-бензил-фенетиламин, N-бензил-N,N-диметиламин и другие приемлемые органические амины. Предпочтительны соли натрия и калия. Как указывалось выше, настоящее изобретение также включает в объем патентных притязаний фармацевтически приемлемые биоисходные вещества (иначе именуемые как пролекарства) соединений, определенных выше, то есть вещества, по строению отличающиеся от соединений формулы (1), но которые при введении человеку превращаются в организмепрямо или косвенно в уреидо-производное формулы(1). Предпочтительными соединениями являются такие, у которых m и n в формуле (1) каждый равен двум и каждая из групп R соответствует определению выше. 3 Примерами конкретных предпочтительных соединений являются: 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2 пирролкарбонилимино(N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(N-метил-4,2-пиррол) карбонилимино)-бис(1,3-нафталиндисульфокислота); и их фармацевтически приемлемые соли, в частности соли натрия или калия. ФАРМАКОЛОГИЯ Было установлено,что уреидопроизводные формулы (1) и их фармацевтически приемлемые соли, именуемые в дальнейшем как "соединения по настоящему изобретению" или "активные вещества", являются активными при лечении рассеянного склероза у млекопитающих, в том числе у человека. Такая терапевтическая активность соединений по настоящему изобретению доказана на примере установленного факта их активности в подавлении развития экспериментального аллергического энцефаломиелита (ЭАЭ) у крыс и мышей. Как известно, ЭАЭ представляет демиелинирующее заболевание центральной нервной системы, использованное в качестве экспериментальной модели рассеянного склероза. В соответствии с экспериментальной схемой женские особи мышей SJL (8-10 особей в группе) иммунизировали эмульсией 200 мкг очищенного Миелинового Основного Протеина (МОП) в неполном стимуляторе Фрейнда в основание хвоста внутрикожно. В день иммунизации и 48 ч спустя мышам вводили интраперитонеально 400 мкг токсина пертуссис. Типичный представитель соединений по изобретению - соединение PNU 153429 или физиологический раствор вводили внутривенно каждой группе раз в неделю три раза подряд. Признаки заболевания оценивались ежедневно от начала, 10-12 дней спустя и на 21 день согласно следующей клинической шкале оценок: 0 - отсутствие клинического заболевания; 1 - слабость хвоста; 6 2 - парапарез (неполный паралич одной или обеих задних конечностей); 3 - параплегия (полный паралич одной или обеих задних конечностей) ; 4 - параплегия со слабостью передних конечностей или параличом их; 5 - агония или смерть животных. Как следует из фиг.1, PNU 153429 в дозе 50 мг/кг полностью предотвращает развитие ЭАЭ. Значительное уменьшение признаков заболевания также было достигнуто при введенииPNU 153429 в дозе 25 мг/кг, как показано на фиг.2. Надписи к фиг.1 и 2:= Физиологический раствор. Дозировка соединения по настоящему изобретению, вводимого пациенту, страдающему от рассеянного склероза, может меняться в зависимости от точного характера заболевания и состояния больного. Терапевтически эффективная доза соединений формулы (1), например тетранатриевой соли 2,2'-[карбонил-бис[имино-N-метил-4,2 пирролкарбонилимино(N-метил-4,2-пиррол) карбонилимино бис(1,5-нафталиндисульфокислоты) внутренний код PNU 153429 (FCE 27266) находится в пределах 0,1-10 г/доза для взрослого человека. Приемлемая доза может вводиться в виде разовой дозы или в виде серии доз, разделенных интервалами в несколько дней, недель или месяцев. Следовательно, соединения по настоящему изобретению могут вводиться пациентам, страдающим рассеянным склерозом, протекающим в форме рецидива-ремиссии,рецидивапрогрессирования и хронического прогрессирования. Соединения по настоящему изобретению обычно вводят больным в виде фармацевтических составов. Такие составы, предпочтительно,включают помимо активного вещества физиологически приемлемый носитель и/или разбавитель. Типичными способами введения обычно являются парентеральный, включая введение внутрь оболочки спинного мозга, трансдермальное внутривенное, внутримышечное, подкожное и интраперитонеальное введение, внутривенное вливание и через рот. В соответствии с предпочтительным примером осуществления настоящего изобретения желательно вводить заявленные активные агенты непосредственно в центральную нервную систему. Однако наличие гематоэнцефалического барьера ограничивает свободный проход многих типов молекул из крови в клетки центральной нервной системы. Во время активной фазы воспалительных заболеваний, таких как рассеянный склероз, как известно, возможен проход кровь - головной 7 мозг, что дает возможность проходу соединений по настоящему изобретению в центральную нервную систему. Тем не менее, существует ряд методик, которые или физически разрушают гемато-энцефалический барьер, или создают обходной путь для доставки лекарственных препаратов. Примерами таких приемов являются внутрикапсулярные инъекции, хирургические вмешательства и осмотические приемы. Предпочтительным примером введения соединений по настоящему изобретению является инъекция внутрь оболочки спинного мозга,то есть непосредственно в цереброспинальную жидкость путем пункции сквозь мембраны, окружающие центральную нервную систему. Пункции мембран, окружающих центральную нервную систему, являются обычно поясничными. Пролонгированные дозировки препаратов непосредственно в цереброспинальную жидкость могут осуществляться путем использования инфузионных насосов, которые инплантируются хирургически. Еще одним предпочтительным примером для введения соединений по настоящему изобретению является инъекция непосредственно в поясничную цереброспинальную жидкость(внутрь оболочки спинного мозга) или внутривенная инъекция. Примерами подходящих носителей и разбавителей для жидких составов служат, но не ограничиваются ими, физиологический раствор,глюкоза, буфферный раствор, оливковое масло,этилолеат, гликоли, например пропиленгликоль,и, если необходимо, подходящее количество лидокаингидрохлорида. Твердые формы для перорального приема,например таблетки и капсулы, могут помимо активного соединения включать разбавители,такие как лактоза, дестроза, сахароза, целлюлоза, кукурузный крахмал и картофельный крахмал; смазочные агенты, например кремнезем,тальк, стеариновая кислота, стеарат кальция или магния, и/или полиэтиленгликоли; связующие агенты, такие как крахмалы, аравийская камедь,желатин, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, поливинилпирролидон; дезинтеграторы, например крахмал, альгиновая кислота, альгинаты, крахмалгликолят натрия; шипучие смеси; красители; подслащивающие вещества; смачивающие агенты, например лецитин, полисорбаты, лаурилсульфаты; и обычно нетоксичные и фармакологически неактивные вещества, используемые в фармацевтических готовых формах препаратов. Указанные фармацевтические препараты могут производиться известным способом, например путем смешения, гранулирования, таблетирования, покрытия сахаром или покрытия пленкой. Соединения по настоящему изобретению могут применяться в способе лечения рассеянного склероза, включающем как раздельное, так и по существу одновременное введение компо 000166 8 зиции, содержащей соединение формулы (1),или его фармацевтически приемлемой соли, и фармацевтической композиции, содержащей дополнительный биологически активный агент. Дополнительными биологически активными агентами могут быть или другие соединения формулы (1), или стероиды, например гидрокортизомеры, такие как метилпреднизалон, противовоспалительные или противоиммунные лекарства, такие как метотрексат, азатиоприн,циклофосфамид или циклоспорин А, или интерферон-, или антитела, такие как анти-СД 4 антитела или их смеси. Соединения по настоящему изобретению могут быть получены в соответствии со способом, описанным в РСТ-ЕР 91/00014, например путем реакции соединения формулы (II)(III) где каждая из Х-групп, которые могут быть одинаковыми или различными, является легко отщепляемой группой, и, если необходимо, превращения соединения формулы (1) в соль; и/или, если необходимо, получения свободного соединения формулы (1) из его соли. Солью соединения формулы (II) может быть соль неорганических оснований, например такая, как перечислены выше, в качестве фармацевтически приемлемых солей, используемых в настоящем изобретении, причем предпочтительны соли натрия и калия. Предпочтительными примерами отщепляющихся групп, соответствующих значениямX, являются атомы галогена, в частности хлора,или другие легко отщепляемые группы, такие как имидазолил, триазолил, пара-нитрофенокси,трихлорфенокси или трихлорметилокси. Реакция соединения формулы (II) или его соли с соединением формулы (III) является способоманалогом и может осуществляться хорошо известными методами, например, в соответствии с условиями, описанными в органической химии для реакций этого типа, то есть для синтеза производных мочевины. Предпочтительно, когда в соединении формулы (III) Х представляет собой атом галогена, например хлора, реакция осуществляется при молярном отношении соединения (II), или его соли, к соединению (III) примерно 1,1-1,4. Реакцию предпочтительно осуществляют в органических растворителях,таких как диметилсульфоксид, гексаметилфосфотриамид, диметилацетамид или, предпочтительно, диметилформамид, или в их водных смесях, или в смесях вода/диоксан или во 9 да/толуол в присутствии либо органического основания, такого как триэтиламин или диизопропилэтиламин, или неорганического основния, такого как бикарбонат натрия или ацетат натрия. Температура реакции может меняться в пределах примерно -10-50 С, и время реакции примерно 1-12 ч. Соединения по настоящему изобретению,полученные в соответствии с описанными выше способами, могут очищаться стандартными методами, такими как хроматография на колонке с силикагелем или окисью алюминия, и/или перекристаллизация из органических растворителей,таких как низшие алифатические спирты или диметилформамид. Аналогично солеобразование уреидопроизводного формулы (I) может достигаться известными способами, равно как и превращение соли уреидо-производного формулы (I) в свободный продукт и превращение уреидопроизводного формулы (I) в фармацевтически приемлемую его соль. Следующие примеры дополнительно иллюстрируют настоящее изобретение. Пример 1. Тетранатриевая соль 8,8'[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(N-метил-4,2-пиррол) карбонилимино]-бис (3,5-нафталиндисульфокислоты). К раствору гидрохлорида двунатриевой соли 8-[амино-N-мeтил-4,2-пирролкарбонилимино(N-метил-4,2-пиррол)карбонилимино](3,5-нафталиндисульфокислоты) (1256 мг, 2 ммоля) в 60 мл воды и 20 мл диоксана добавляли при перемешивании 2 мл однонормального раствора едкого натра и 328 мг (4 ммоля) ацетата натрия. Полученную массу охлаждали до 5 С в ледяной бане, затем по каплям в течение одного часа добавляли раствор 149 мг (0,5 ммоля) бис(трихлорметил)карбоната в 15 мл диоксана. Смесь перемешивали в течение двух часов при комнатной температуре. Растворители выпаривали в вакууме, и остаток хроматографировали на силикагелевой колонке с элюирующим растворителем метиленхлорид : метанол : водаF.A.B. масс-спектр m/z: 1209, MH; 640; 618; 614; 592. Аналогично были синтезированы следующие соединения: 14 тетранатриевая соль 8,8'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино (Nметил-4,2-пиррол) карбонилимино] бис-(2,5 нафталиндисульфокислоты); тетранатриевая соль 8,8'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(Nметил-4,2-пиррол) карбонилимино] бис-(3,6 нафталиндисульфокислоты); гексанатриевая соль 8,8'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(Nметил-4,2-пиррол)карбонилимино] бис-(2,3,5 нафталинтрисульфокислоты); гексанатриевая соль 8,8'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(Nметил-4,2-пиррол)карбонилимино] бис-(1,4,6 нафталинтрисульфокислоты); гексанатриевая соль 8,8'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино (Nметил-4,2-пиррол) карбонилимино] бис-(2,4,6 нафталинтрисульфокислоты); двунатриевая соль 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(Nметил-4,2-пиррол)карбонилимино] бис(1-нафталинсульфокислоты); двунатриевая соль 7,7-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(Nметил-4,2-пиррол)карбонилимино] бис(2-нафталинсульфокислоты); двунатриевая соль 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(Nметил-4,2-пиррол)карбонилимино] бис(3-нафталинсульфокислоты); двунатриевая соль 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(Nметил-4,2-пиррол)карбонилимино] бис(4-нафталинсульфокислоты); гексанатриевая соль 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино (Nметил-4,2-пиррол) карбонилимино] бис-(1,4,6 нафталинтрисульфокислоты); гексанатриевая соль 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(Nметил-4,2-пиррол)карбонилимино] бис-(1,3,6 нафталинтрисульфокислоты); гексанатриевая соль 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(Nметил-4,2-пиррол)карбонилимино] бис-(2,4,6 нафталинтрисульфокислоты); гексанатриевая соль 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино (Nметил-4,2-пиррол) карбонилимино] бис-(2,3,5 нафталинтрисульфокислоты). Пример 2. 8,8'-[карбонил-бис имино-Nметил-4,2-пирролкарбонилимино(N-метил-4,2 пиррол) карбонилимино] бис(3,5-нафталиндисульфокислоты). Раствор 400 мг тетранатриевой соли 8,8'[карбонил-бис-имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино(N-метил-4,2-пиррол)-карбонилимино] бис(3,5-нафталиндисульфокислоты) в 10 мл воды хроматографировали через колонку с Амберлитом 1R-120(H) (20 мл) водой в ка 15 честве элюента. Раствор упаривали досуха в вакууме, получая 0,3 г целевого соединения. Следуя описанной процедуре, получали следующие соединения: тетранатриевую соль 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2-пирролкарбонилимино] бис(1,3-нафталиндисульфокислоты) 1 Н-ЯМР-спектр (200 МГц, ДМСО):3,86H-ЯМР-спектр (200 МГц, ДМСО):3,84,3,86, 3,88 (тройной синглет, 9 Н), 6,80 (дублет,J=1,7 Гц, 1 Н), 7,05 (мультиплет, 2 Н), 7,20 (дублет, J=1,6 Гц, 1 Н), 7,25 (дублет, J=1,6 Гц, 1H),7,34 (дублет, J=1,6 Гц, 1 Н), 7,87 (мультиплет,2 Н), 7,80 (дублет, J=1,7 Гц, 1 Н), 8,16 (синглет,1 Н), 8,21 (дублет, J=1,7 Гц, 1 Н), 8,95 (синглет,1 Н), 9,85, 9,99, 10,23 (тройной синглет, 3 Н). Пример 3. Внутримышечные инъекции 40 мг/мл. Пригодный для инъекций фармацевтический препарат готовили растворением 40 г тетранатриевой соли 2,2'-[карбонил-бис[имино-Nметил-4,2-пирролкарбонилимино (N-метил-4,2 пиррол)-карбонилимино-бис-(1,5-нафталиндисульфокислоты) в воде для инъекций (1000 мл ) и запайкой ампул по 1-10 мл. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение соединения, которое является уреидо-производным формулы (I): где каждый из m и n, которые являются одинаковыми, представляет целое число от 1 до 3; и каждая из R групп, которые являются одинаковыми, представляют собой нафтильную группу,замещенную 1-3 сульфокислотными группами,или фармацевтически приемлемой его солью; в производстве лекарственного средства, для лечения рассеянного склероза. 2. Применение по п.1, при котором в формуле (I) m и n каждый равен 2. 3. Применение по п.1, при котором соединение выбрано из соединений: 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2 пирролкарбонилимино(N-метил-4,2-пиррол) карбонилимино] бис(3,5-нафталиндисульфокислота); 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2 пирролкарбонилимино(N-метил-4,2-пиррол)(имино-N-метил-4,2 пирролкарбонилимино)]-бис(1,3-нафталиндисульфокислота); 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2 пирролкарбонилимино(N-метил-4,2-пирролкарбонилимино[N-метил-4,2-пиррол] карбонилимино)-бис(1,3-нафталиндисульфокислота); 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2 пирролкарбонилимино(N-метил-4,2-пиррол) карбонилимино] бис(2,4,6-нафталинтрисульфокислота); 7,7'-[карбонил-бис имино-N-метил-4,2 пирролкарбонилимино(N-метил-4,2-пиррол) карбонилимино] бис(2,3,5-нафталинтрисульфокислота); и их фармацевтически приемлемых солей. 4. Применение по п.1, при котором соединение представляет собой натриевую или калиевую соль уреидо-производного формулы (I). 5. Применение по п.1, при котором лекарственный препарат предназначен для лечения рассеянного склероза на стадии рецидива и/или прогрессирования или для облегчения состояния пациента, страдающего от рассеянного склероза.