Способ лечения глазных расстройств
Формула / Реферат
1. Способ устранения или уменьшения размера агрегата макромолекул в глазу, предусматривающий введение терапевтически эффективного количества глазной композиции, состоящей из (а) нецитотоксичного хелатообразующего агента, содержащего по меньшей мере 2 отрицательно заряженных хелатообразующих атома, и (b) маскирующего заряд агента, содержащего по меньшей мере одну полярную группу и имеющего молекулярную массу менее чем 250, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту достаточно для обеспечения того, чтобы, по существу, все отрицательно заряженные хелатообразующие атомы были ассоциированы с полярной группой на маскирующем заряд агенте, при этом молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту находится в интервале от 2:1 до 12:1.
2. Способ по п.1, где нецитотоксичный хелатообразующий агент представляет собой основно-аддитивную соль поликислоты.
3. Способ по п.2, где поликислота выбрана из поликарбоновой кислоты, полисульфоновой кислоты и полифосфоновой кислоты.
4. Способ по п.3, где поликислота представляет собой поликарбоновую кислоту.
5. Способ по п.4, где основно-аддитивная соль представляет собой соль щелочного металла.
6. Способ по п.1, где маскирующий заряд агент содержит 2 полярные группы.
7. Способ по п.1, где по меньшей мере один атом в полярной группе представляет собой атом кислорода.
8. Способ по п.6, где по меньшей мере один атом в каждой полярной группе представляет собой атом кислорода.
9. Способ по п.1, где хелатообразующий агент представляет собой основно-аддитивную соль тетракарбоновой кислоты, маскирующий заряд агент имеет структуру формулы (I)
где R1и R2 независимо выбраны из C1-C6-алкила, C1-C6-гетероалкила, C6-С14-аралкила, С2-С12-гетероалкила и Q представляет собой S или Р.
10. Способ по п.9, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту находится в интервале от 4:1 до 10:1.
11. Способ по п.10, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту составляет примерно 8:1.
12. Способ по п.1, где маскирующий заряд агент имеет молекулярную массу менее чем 125.
13. Способ по п.1, где композиция дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель.
14. Способ по п.13, где носитель является водным.
15. Способ по п.13, где композиция вводится в форме глазных капель.
16. Способ по п.14, где композиция состоит, по существу, из хелатообразующего агента, маскирующего заряд агента и водного носителя.
17. Способ по п.1, где агрегат макромолекул включает конечные продукты поздних стадий гликирования.
18. Способ по п.1, где макромолекулы представляют собой пептидильные соединения.
19. Способ по п.18, где макромолекулы представляют собой белки.
20. Способ по п.18, где макромолекулы представляют собой липопротеины.
21. Способ по п.1, где макромолекулы представляют собой липиды.
22. Способ по п.1, где макромолекулы представляют собой полинуклеотиды.
23. Способ по п.1, где хелатообразующий агент составляет по меньшей мере 0,6 мас.% композиции.
24. Композиция для использования в офтальмологии, состоящая, по существу, из:
(а) нецитотоксичного хелатообразующего агента, содержащего по меньшей мере 2 отрицательно заряженных хелатообразующих атома;
(b) маскирующего заряд агента, содержащего по меньшей мере одну полярную группу и имеющего молекулярную массу менее чем 250, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту достаточно для обеспечения того, чтобы, по существу, все отрицательно заряженные хелатообразующие атомы были ассоциированы с полярной группой на маскирующем заряд агенте, при этом молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту находится в интервале от 2:1 до 12:1; и
(c) фармацевтически приемлемого водного носителя.
25. Композиция по п.24, где не цитотоксичный хелатообразующий агент представляет собой основно-аддитивную соль поликислоты.
26. Композиция по п.24, где поликислота выбрана из поликарбоновой кислоты, полисульфоновой кислоты и полифосфоновой кислоты.
27. Композиция по п.26, где поликислота представляет собой поликарбоновую кислоту.
28. Композиция по п.27, где основно-аддитивная соль представляет собой соль щелочного металла.
29. Композиция по п.24, где маскирующий заряд агент содержит 2 полярные группы.
30. Композиция по п.24, где по меньшей мере один атом в полярной группе представляет собой атом кислорода.
31. Композиция по п.29, где по меньшей мере один атом в каждой полярной группе представляет собой атом кислорода.
32. Композиция по п.24, где хелатообразующий агент представляет собой основно-аддитивную соль тетракарбоновой кислоты, маскирующий заряд агент имеет структуру формулы (I)
где R1и R2 независимо выбраны из C1-C6-алкила, C1-C6-гетероалкила, C6-C14-аралкила, C2-C12-гетероалкила и Q представляет собой S или Р.
33. Композиция по п.32, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту находится в интервале от 4:1 до 10:1.
34. Композиция по п.33, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту составляет примерно 8:1.
35. Композиция по п.24, где маскирующий заряд агент имеет молекулярную массу менее чем 125.
36. Композиция по п.24, где носитель является водным.
37. Композиция по п.36, где композиция состоит, по существу, из хелатообразующего агента, маскирующего заряд агента и водного носителя.
38. Композиция по п.24, где агрегат макромолекул включает конечные продукты поздних стадий гликирования.
39. Композиция по п.24, где макромолекулы представляют собой пептидильные соединения.
40. Композиция по п.39, где макромолекулы представляют собой белки.
41. Композиция по п.39, где макромолекулы представляют собой липопротеины.
42. Композиция по п.24, где макромолекулы представляют собой липиды.
43. Композиция по п.24, где макромолекулы представляют собой полинуклеотиды.
44. Композиция по п.36, где композиция, кроме того, включает офтальмологически активное средство.
45. Композиция по п.24, где хелатообразующий агент составляет по меньшей мере 0,6 мас.% композиции.
Текст
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ГЛАЗНЫХ РАССТРОЙСТВ В изобретении предоставляются способ и композиция для лечения медицинских состояний, связанных с образованием и/или отложением макромолекулярных агрегатов, в частности тех, которые связаны с неблагоприятными глазными состояниями. Композиция содержит нецитотоксичный хелатообразующий агент, содержащий по меньшей мере два отрицательно заряженных хелатообразующих атома, и маскирующий заряд агент, содержащий по меньшей мере одну полярную группу и имеющий молекулярную массу менее чем примерно 250, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту достаточно для обеспечения того, чтобы, по существу, все отрицательно заряженные хелатообразующие атомы были ассоциированы с полярной группой на маскирующем заряд агенте. 013931 Область техники Данное изобретение относится в целом к лечению расстройств, заболеваний и других неблагоприятных медицинских состояний, включая неблагоприятные глазные состояния, часто связанные со старением. Конкретнее, изобретение относится к лечению состояний, связанных с присутствием макромолекулярных агрегатов, таких, которые могут присутствовать в глазу. Изобретение находит применение в различных областях, включая офтальмологию и гериатрию. Предшествующий уровень техники Прогрессирующие, возрастные изменения глаз, включая нормальные, а также патологические изменения, всегда были нежелательной, но неизбежной частью продления сроков жизни у людей и других животных. Многие из этих изменений оказывают серьезное воздействие и на функцию, и на косметический вид глаз. Эти изменения включают развитие катаракт; отвердение, помутнение, снижение пластичности и пожелтение хрусталика; пожелтение и помутнение роговицы; пресбиопию; закупорку трабекулярной сети, ведущую к нарастанию внутриглазного давления и глаукоме; увеличивающееся количество телец, плавающих в стекловидном теле; повышение жесткости и снижение диапазона расширения радужной оболочки; возрастную дегенерацию желтого пятна (AMD); образование атеросклеротических отложений в артериях сетчатки; синдром сухости глаз и сниженную чувствительность и незначительный уровень адаптационной способности палочек и колбочек сетчатки. Возрастное нарушение зрения включает потерю остроты зрения, визуального контраста, восприятия цвета и глубины, аккомодации хрусталика, световой чувствительности и адаптации в темноте. Возрастные изменения также включают изменения цветового вида радужной оболочки и образование старческой дуги. Изобретение в большой части направлено на композицию и способ предотвращения и лечения множества возрастных глазных расстройств и заболеваний. Как проиллюстрировано ниже, все части глаза, включая роговицу, склеру, трабекулу, радужку, хрусталик, водянистую влагу и сетчатку, поражаются процессом старения. Роговица Роговица представляет собой самый наружный слой глаза. Она представляет собой прозрачную,куполообразную поверхность, которая покрывает переднюю часть глаза. Роговица составлена из 5 слоев. Эпителий представляет собой слой клеток, который образует поверхность. Он имеет толщину всего примерно 5-6 клеток и быстро регенерируется, когда роговица повреждена. Если повреждение проникает глубже в роговицу, может произойти рубцевание и оставить мутные области, вызывая потерю ее прозрачности и блеска. Непосредственно под эпителием находится мембрана Боумэна, защитный слой, который, является очень плотным и трудно проницаемым. Строма, самый толстый слой роговицы, лежит непосредственно под мембраной Боумэна и состоит из мельчайших коллагеновых волокон, совмещенных параллельно, расположение, которое обеспечивает прозрачность роговицы. Мембрана Десцемета лежит под стромой и она находится непосредственно над самым внутренним слоем роговицы, эндотелием. Эндотелий имеет толщину всего одной клетки и служит для перекачки воды из роговицы в водянистую влагу, поддерживая прозрачность роговицы. При повреждении или заболевании эти клетки не будут регенерироваться. По мере старения глаза роговица может стать более мутной. Помутнение может принимать многие формы. Самая распространенная форма помутнения поражает периферию роговицы и называется старческая дуга или дуга. Этот тип помутнения первоначально включает отложение липидов в мембрану Десцемета. В последующем липиды откладываются в мембрану Боумэна и, возможно, также в строму. Старческая дуга обычно не оказывает существенного влияния на зрение, но представляет собой косметически заметный признак старения. Существуют другие возрастные помутнения роговицы, которые, однако, могут иметь некоторые последствия для зрения. Они включают центральную мутную дистрофию Франсуа, которая поражает средние слои стромы, и задний крокодилий шагрень, который представляет собой центральное помутнение задней стромы. Помутнение в результате рассеивания света приводит к прогрессирующему снижению контрастности зрения и остроты зрения. Помутнение роговицы развивается в результате ряда факторов, включая, в качестве примера: дегенерацию структуры роговицы; поперечную сшивку коллагена и других белков металлопротеиназами; повреждение ультрафиолетовым (УФ) светом; окислительное повреждение и образование таких веществ,как соли кальция, белковые отходы и избыточные липиды. Нет установленного лечения для замедления или устранения изменений роговицы, кроме хирургического вмешательства. Например, мутные структуры можно соскоблить тупым инструментом после удаления сначала эпителия с последующим сглаживанием и профилированием поверхности роговицы лазерным лучом. В тяжелых случаях рубцевания и помутнения единственным эффективным подходом была трансплантация роговицы. Другое распространенное глазное расстройство, которое неблагоприятно воздействует на роговицу,а также другие структуры внутри глаза, является сухой кератоконъюнктивит, обычно именуемый синдром сухого глаза или сухой глаз. Сухой глаз может возникнуть в результате множества причин и часто представляет проблему для пожилых людей. Это расстройство связано с ощущением царапания,-1 013931 избыточной секрецией слизи, ощущением жжения, повышенной чувствительностью к свету и болью. В настоящее время сухой глаз лечат искусственными слезами, имеющимся в продаже продуктом, содержащим смазывающее вещество, такое как полиэтиленгликоль низкой молекулярной массы. Хирургическое лечение также применяется нечасто и обычно включает введение точечной пробки, так что слезные секреты удерживаются в глазу. Однако оба типа лечения являются проблематичными: хирургическое лечение является инвазивным и потенциально рискованным, в то время как продукты в виде искусственных слез обеспечивают лишь очень кратковременное и часто неадекватное облегчение. Склера Склера представляет собой белок глаза. У более молодых индивидуумов склера имеет синеватый оттенок, но, по мере того как люди становятся старше, склера желтеет в результате возрастных изменений в конъюнктиве. Со временем воздействие УФ и пыли может привести к изменениям в ткани конъюнктивы, ведя к формированию пингвекулы и птеригиума. Эти глазные выросты могут, кроме того, вызвать разрыв ткани склеры и роговицы. В настоящее время единственным принятым лечением по поводу пингвекулы и птеригиума является операция, включая трансплантацию конъюнктивы. Трабекула Трабекула, также именуемая как трабекулярная сеть, представляет собой подобную ситу структуру,расположенную у соединения радужки-склеры в передней камере глаза. Трабекула служит для фильтрования водной жидкости и регулирования ее потока из передней камеры в шлеммов канал. По мере старения глаза в нем могут накапливаться осколки клеток и тканей и вызвать закупорку трабекулы, проблему,которая приводит к повышению внутриглазного давления, что в свою очередь может привести к глаукоме и повреждению сетчатки, зрительного нерва и других структур глаза. Препараты против глаукомы могут помочь снижению этого давления, а операция может создать искусственное отверстие для обхода трабекулы и восстановления потока жидкости из стекловидного тела и водянистой влаги. Однако нет известного способа предотвращения накопления осколков клеток и тканей и белково-липидных отходов внутри трабекулы. Радужная оболочка и зрачок С возрастом расширение и сужение радужки в ответ на изменения освещения становятся медленнее, и диапазон ее движения уменьшается. Также с возрастом зрачок прогрессирующе уменьшается, резко ограничивая количество света, попадающего в глаз, особенно в условиях меньшей освещенности. Сужение зрачка и повышение жесткости, замедление адаптации и сужения радужки со временем в значительной степени ответственны за трудность, которую пожилые люди испытывают с ночным зрением и адаптацией к изменениям освещения. Считается, что изменения формы, жесткости и способности к адаптации в целом происходят в результате фиброза и поперечной сшивки между структурными белками. Отложения отходов белков и липидов нарадужке со временем также может осветлить ее окраску. И светлоокрашенные отложения на радужке, и сужение зрачка представляют собой очень заметные косметические маркеры возраста, которые могут иметь социальное значение для индивидуумов. Нет стандартного лечения по поводу какого-либо из этих изменений или по поводу изменений окрашивания радужки с возрастом. Хрусталик С возрастом хрусталик желтеет, становится тверже, жестче и менее податливым и может помутнеть или диффузно, или в определенных участках. Таким образом, хрусталик пропускает меньше света, что снижает контрастность и остроту зрения. Пожелтение также воздействует на цветовое восприятие. Повышение жесткости хрусталика, а также неспособность мышцы аккомодировать хрусталик приводит к состоянию, в целом известному как пресбиопия. Пресбиопия, почти всегда возникающая после среднего возраста, представляет собой неспособность глаза правильно фокусировать. Эта возрастная патология проявляется потерей аккомодационной способности, т.е. способности глаза через хрусталик фокусироваться на близких или далеких объектах изменением формы хрусталика для того, чтобы стать более сферическим (или выпуклым). Пресбиопии подвержены и близорукие, и дальнозоркие индивидуумы. Возрастная потеря аккомодационной амплитуды является прогрессирующей, и пресбиопия является, вероятно, самым распространенным из всех глазных поражений, в конечном счете, поражающим, по существу, всех индивидуумов в течение нормальной продолжительности жизни человека. Считают, что эти изменения в хрусталике вызваны дегенеративными изменениями структуры хрусталика, включая гликированные поперечные сшивки между коллагеновыми волокнами, образование белковых комплексов, распад структур под воздействием ультрафиолетового света, окислительное повреждение и отложения отходов белков, липидов и солей кальция. Эластичные и вязкие свойства хрусталика зависят от свойств волоконных мембран и кристаллов цитоскелета. Волоконные мембраны хрусталика характеризуются крайне высоким отношением холестерина к фосфолипиду. Любое изменение этих компонентов воздействует на деформационную способность мембран хрусталика. Утрату деформационной способности хрусталика также связывали с увеличенным связыванием белков хрусталика с клеточными мембранами. Компенсаторные варианты для облегчения пресбиопии в настоящее время включают бифокальные очки для чтения и/или контактные линзы, монокулярные внутриглазные линзы (IOL) и/или контактные-2 013931 линзы, многофокусные IOL, монозрительные и анизометрические роговичные рефрактивные хирургические процедуры с использованием радиальной кератотомии (RK), фоторефрактивный кератомилез (PRK) и кератомилез in situ с помощью лазера (LASIK). В настоящее время нет общепринятых способов лечения или излечения по поводу пресбиопии. Мутность хрусталика приводит к патологическому состоянию, в целом известному как катаракта. Образование катаракты представляет собой прогрессирующее глазное заболевание, которое в последующем приводит к снижению зрения. Большая часть этого глазного заболевания представляет собой возрастную старческую катаракту. Считают, что у лиц в возрасте от 60 до 70 лет частота образования катаракты составляет 60-70% и почти 100% у лиц в возрасте 80 лет и старше. Однако в настоящее время,нет средства, которое бы доказано ингибировало развитие катаракт. Поэтому была желательна разработка эффективного терапевтического средства. В настоящее время лечение катаракт зависит от коррекции зрения с использованием очков, контактных линз или хирургической операции, такой как вставление внутриглазного хрусталика в капсулу хрусталика после экстракапсулярной экстракции катаракты. При операции по поводу катаракты проблему представляло возникновение вторичной катаракты после операции. Вторичная катаракта отождествляется с мутностью, имеющейся на поверхности остающейся задней капсулы после экстракапсулярной экстракции катаракты. Механизм вторичной катаракты,главным образом, следующий. После иссечения эпителиальных клеток (передней капсулы) хрусталика,вторичная катаракта возникает в результате миграции и пролиферации остаточных эпителиальных клеток хрусталика, которые не полностью удалены во время экстракции коры хрусталика, на заднюю капсулу, ведущей к помутнению задней капсулы. При операции по поводу катаракты невозможно полностью удалить эпителиальные клетки хрусталика и, следовательно, трудно всегда предотвратить вторичную катаракту. Считают, что частота указанного выше помутнения задней капсулы составляет 40-50% в глазах без внутрикапсулярного имплантата хрусталика в заднюю камеру и 7-20% в глазах с внутриглазным имплантатом хрусталика. Кроме того, после операций по поводу катаракты также наблюдались глазные инфекции, отнесенные к эндофтальмиту. Стекловидное тело Плавающие тельца представляют собой осколочные частицы, которые мешают отчетливому зрению вследствие проецирования теней на сетчатку. В настоящее время нет стандартного способа лечения для снижения или устранения плавающих частиц. Сетчатка С возрастом в сетчатке может возникнуть ряд изменений. Развитие атеросклеротических изменений и утечки в артериях сетчатки могут привести к дегенерации желтого пятна, а также к снижению периферического зрения. Палочки и колбочки могут с течением времени стать менее чувствительными, поскольку они медленнее восстанавливают запасы своих пигментов. Накапливаясь, все эти воздействия могут снизить зрение, в конечном счете приводя к частичной или полной слепоте. Заболевания сетчатки,такие как возрастная дегенерация желтого пятна, трудно поддавались лечению. Современные способы лечения сетчатки включают лазерную хирургию для прекращения утечки из кровеносных сосудов глаза. Как указано ранее, современные попытки лечения, направленные на многие глазные расстройства и заболевания, включая возрастные глазные проблемы, часто включают хирургическое вмешательство. Хирургические процедуры являются, конечно, инвазивными и, кроме того, часто не достигают желаемой лечебной цели. Кроме того, операция может быть очень дорогостоящей и может привести к значительным нежелательным последствиям. Например, после операций по поводу катаракты могут развиться вторичные катаракты и возникнуть инфекции. После операций по поводу катаракты также наблюдался эндофтальмит. Кроме того, продвинутые хирургические методики не общедоступны, потому что они требуют очень хорошо развитой медицинской инфраструктуры. Поэтому было бы значительным преимуществом предоставление непосредственно проводимых и эффективных способов фармакологического лечения, которые избегают необходимости в операции. Были продукты, предложенные для воздействия на определенные, отдельные возрастные глазные состояния. Например, искусственная слезная жидкость и травяные композиции, такие как глазные капли сималасан, были предложены для лечения синдрома сухого глаза и имеются другие глазные капли для снижения внутриглазного давления, облегчения дискомфорта, содействия заживлению после травмы,снижения воспаления и предотвращения инфекции. Однако самостоятельное введение множества продуктов несколько раз в день неудобно, может привести к недостаточному соблюдению пациентом предписанной схемы лечения (в свою очередь, снижая общую эффективность), и может быть связано с вредным взаимодействием компонентов композиции. Например, обычный консервант бензалконийхлорид может взаимодействовать с другими желательными компонентами, такими как этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA). Соответственно, в данной области существует потребность во всеобъемлющей фармацевтической композиции, которая может предотвратить, остановить и/или вызвать обратное развитие множества возрастных проблем со зрением и связанных глазных расстройств. До настоящего времени такая композиция не была предоставлена в значительной части ввиду того,что сложные, многокомпонентные фармацевтические продукты часто проблематичны для составителей-3 013931 и изготовителей. Могут возникнуть проблемы, например, вследствие объединения агентов, имеющих различные профили растворимости и/или скорости мембранного транспорта. В отношении последнего соображения в глазные композиции часто необходимо включать агенты, способствующие транспорту, также именуемые усилителями проникновения, и они должны быть фармацевтически приемлемыми, не оказывать эффекта на устойчивость композиции и быть инертными и совместимыми с другим компонентом композиции и физиологическими структурами, с которыми вступит в контакт композиция. Многие неблагоприятные глазные состояния связаны с образованием, присутствием и/или ростом макромолекулярных агрегатов в глазу. Действительно, многие патологические состояния возникают в результате или связаны с отложением и/или агрегацией белков, других пептидильных видов, липопротеинов, липидов, полинуклеотидов и других макромолекул по всему организму, например конечные продукты поздних стадий гликирования (также именуемые AGE) образуются связыванием глюкозы или других восстанавливающих сахаров с белками, липопротеинами и ДНК посредством процесса, известного как неферментативное гликирование с последующей поперечной сшивкой. Эти поперечно сшитые макромолекулы создают жесткость соединительной ткани и приводят к повреждению ткани в почках,сетчатке, сосудистых стенках и нервах. Действительно, считали, что AGE участвуют в патогенезе разнообразных инвалидизирующих заболеваний, таких как сахарный диабет, атеросклероз, болезнь Альцгеймера и ревматоидный артрит, а также в нормальном процессе старения. Пептидильные отложения также связаны с болезнью Альцгеймера, серповидно-клеточной анемией, множественной миеломой и прионовыми заболеваниями. Липиды, в частности стерины и сложные эфиры стерина, представляют дополнительный класс биологических молекул, которые образуют патогенные отложения in vivo, включая атеросклеротические бляшки, желчные камни и им подобные. До настоящего времени не была идентифицирована одна композиция, способная лечить множество таких расстройств. Раскрытие изобретения Настоящее изобретение направлено на указанную выше потребность в данной области и в одном варианте осуществления предоставляет способ устранения или уменьшения размера агрегата макромолекул в глазу, причем способ включает введение терапевтически эффективного количества глазной композиции, состоящей из (а) нецитотоксичного хелатообразующего агента, содержащего по меньшей мере 2 отрицательно заряженных хелатообразующих атома, и (b) маскирующий заряд агент, содержащий по меньшей мере одну полярную группу и имеющий молекулярную массу менее чем примерно 250. Полярная группа содержит по меньшей мере один, а предпочтительно по меньшей мере 2 гетероатома, имеющих электроотрицательность Полинга более чем примерно 3,00, где гетероатомы представляют собой предпочтительно атомы кислорода. Молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту достаточно для обеспечения того, чтобы, по существу, все отрицательно заряженные хелатообразующие атомы были ассоциированы с одним из указанных выше гетероатомов на маскирующем заряд агенте. Поскольку существует много глазных расстройств, связанных с образованием или отложением макромолекулярных агрегатов, должно быть понятно, что изобретение может использоваться при предотвращении и лечении глазных состояний у пациента, включая возрастную дегенерацию желтого пятна(AMD), диабетическую ретинопатию и глаукому. Изобретение также относится к способам применения композиции при предотвращении и лечении глазных состояний, которые включают окисление и/или повреждение свободными радикалами в глазу, некоторые из которых также связаны с образованием или отложением макромолекулярных агрегатов. Эти неблагоприятные глазные состояния включают в качестве примера состояния, заболевания или расстройства роговицы, сетчатки, хрусталика, склеры и переднего и заднего сегментов глаза. Неблагоприятное глазное состояние, поскольку этот термин используется в настоящем описании, может представлять собой нормальное состояние, которое часто наблюдается у стареющих индивидуумов (например, сниженная острота зрения и контрастная чувствительность),или патологическое состояние, которое может быть связано или не связано с процессом старения. Последние неблагоприятные глазные состояния включают широкое разнообразие глазных расстройств и заболеваний. Возрастные глазные проблемы, которые можно предотвратить и/ли лечить с использованием настоящих композиций, включают без ограничения помутнение (помутнение и роговицы, и хрусталика), образование катаракты (включая образование вторичной катаракты) и другие проблемы, связанные с отложением липидов, нарушение остроты зрения, сниженную контрастную чувствительность, светобоязнь, вынужденное пристальное всматривание, сухой глаз, утрату ночного зрения, сужение зрачка, пресбиопию, возрастную дегенерацию желтого пятна, повышенное внутриглазное давление, глаукому и старческую дугу. Под возрастным подразумевается состояние, которое в целом признается как возникающее гораздо чаще у пожилых пациентов, но которое может и изредка возникает у людей более молодого возраста. Композицию можно также применять при лечении разрастаний на глазной поверхности,таких как пингвекулы и птеригиумы, которые обычно вызываются пылью, ветром, ультрафиолетовым светом, но могут также представлять собой симптомы дегенеративных заболеваний, связанных со старением глаз. Другое неблагоприятное состояние, которое в целом не рассматривается как связанное со ста-4 013931 рением, но которое можно лечить с использованием настоящей композиции, включает кератоконус. Следует также подчеркнуть, что настоящую композицию можно преимущественно использовать для повышения остроты зрения в целом у любого млекопитающего индивидуума. То есть введение композиции в глаз может улучшить остроту зрения и контрастную чувствительность, а также восприятие цвета и глубины, независимо от возраста пациента или наличия любого из неблагоприятных глазных состояний. В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ, композицию и имплантат для предотвращения или лечения катаракт, включая вторичные катаракты. Способ включает введение в глаз определенной выше композиции, т.е. композиции, состоящей из (а) нецитотоксичного хелатообразующего агента, содержащего по меньшей мере 2 отрицательно заряженных хелатообразующих атома, и(b) маскирующий заряд агент, содержащий по меньшей мере одну полярную группу и имеющий молекулярную массу менее чем примерно 250, где полярная группа содержит по меньшей мере один, а предпочтительно по меньшей мере 2 гетероатома, имеющих электроотрицательность Полинга более чем примерно 3,00, и, кроме того, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту достаточно для обеспечения того, чтобы, по существу, все отрицательно заряженные хелатообразующие атомы были ассоциированы с одним из указанных выше гетероатомов на маскирующем заряд агенте. В другом варианте осуществления предоставляется фармацевтическая композиция, которая включает:(a) нецитотоксичный хелатообразующий агент, содержащий по меньшей мере 2 отрицательно заряженных хелатообразующих атома;(b) маскирующий заряд агент, содержащий по меньшей мере одну полярную группу и имеющий молекулярную массу менее чем примерно 250, где полярная группа содержит по меньшей мере один, а предпочтительно по меньшей мере 2 гетероатома, имеющих электроотрицательность Полинга более чем примерно 3,00, и, кроме того, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту достаточно для обеспечения того, чтобы, по существу, все отрицательно заряженные хелатообразующие атомы были ассоциированы с гетероатомом на маскирующем заряд агенте; и(c) фармацевтически приемлемый водный носитель. Глазную композицию можно вводить в любой форме, подходящей для введения глазного препарата, например раствора, суспензии, мази, геля, липосомальной дисперсии, коллоидной суспензии микрочастиц или им подобной, или в глазном вкладыше, например, в необязательно биологически разлагаемой полимерной матрице контролируемого высвобождения. Важно, чтобы по меньшей мере один компонент этой композиции, а предпочтительно 2 или более компонента композиции, были многофункциональными в том, что их можно применять при предотвращении или лечении множественных состояний и расстройств, или имеют более одного механизма действия, или оба указанных свойства. Соответственно, настоящие композиции устраняют существенную проблему в данной области, а именно перекрестное взаимодействие между различными типами композиций и/или активных средств при применение множественных композиций для лечения пациента с множественными глазными расстройствами. Кроме того, в предпочтительном варианте осуществления композиция полностью составлена из компонентов, которые естественно встречаются, и/или считаются GRAS (В целом рассматриваемыми как безопасные) Администрацией по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными средствами США. Изобретение также относится к глазным вкладышам для контролируемого высвобождения хелатообразующего агента, как отмечено выше, например, EDTA, и/или маскирующего заряд агента, такого как метилсульфонилметан. Вкладыш может представлять собой постепенно, но полностью растворимый имплантат, такой, который может быть изготовлен включением набухающих, образующих гидрогель полимеров в водную жидкую композицию. Вкладыш может также быть нерастворимым, и в этом случае агент или агенты высвобождаются из внутреннего резервуара через наружную мембрану посредством диффузии или осмоса. Краткое описание чертежей Фиг. 1 А, 1 В, 2 А и 2 В представляют собой фотографии глаз 46-летнего мужчины перед лечением(правый глаз - фиг. 1 А; левый глаз - фиг. 2 А) и после (левый глаз - фиг. 1 В и правый глаз - фиг. 2 В) получения 8-недельного лечения композицией глазных капель по изобретению, как описано в примере 5. Фиг. 3A, 3B, 4 А и 4 В представляют собой фотографии глаза 60-летнего мужчины перед лечением(правый глаз - фиг. 3A; левый глаз - фиг. 4 А) и после (правый глаз - фиг. 3B; и левый глаз - фиг. 4 В) получения 8-недельного лечения композицией глазных капель по изобретению, как описано в примере 6. Фиг. 5 сравнивает улучшение контрастной чувствительности в результате применения композиции 3 в сравнении с плацебо в примере 14. Фиг. 6 сравнивает проникновение растворов А, В и С в примере 15 через 10 мин, 2 и 16 ч. На фиг. 7 А и 7 В изображено проникновение EDTA, как обнаружено в примере 16. На фиг. 8 А и 8 В изображен эффект различных видов лечения из примера 17. На фиг. 9 изображена передача света в хрусталиках крыс как функцию лечения в примере 17. На фиг. 10 изображен эффект различных видов лечения на жизнеспособность клеток, как обнару-5 013931 жено в примере 18. Подробное описание вариантов осуществления изобретения При отсутствии других указаний изобретение не ограничивается определенными типами композиций, компонентами композиций, схемами дозировок или им подобными, поскольку они могут варьироваться. Следует также понимать, что используемая в настоящем описании терминология используется только с целью описания определенных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения. Пока контекст ясно не требует иного, используемые в описании и прилагаемой формуле изобретения формы единственного числа включают соответствующие формы множественного числа. Так, например, ссылка на хелатообразующий агент включает один такой агент, а также комбинацию или смесь двух или более различных хелатообразующих агентов, ссылка на усилитель проникновения включает не только один усилитель проникновения, но также комбинацию или смесь двух или более различных усилителей проникновения, ссылка на фармацевтически приемлемый носитель включает 2 или более таких носителей. А также один носитель и подобно этому. В настоящем описании и в следующей формуле изобретения будет указан ряд терминов, которые должны определяться как имеющие следующие значения: при ссылке на компонент композиции предполагается, что используемые термины, например,средство или компонент, охватывают не только определенную молекулярную структурную единицу,но также ее фармацевтически приемлемые аналоги, включая без ограничения соли, сложные эфиры,амиды, пролекарства, конъюгаты, активные метаболиты и другие такие производные, аналоги и родственные соединения. Используемые в настоящем описании термины лечить и лечение относятся к введению средства или композиции индивидууму с клиническими симптомами, пораженному неблагоприятным состоянием, расстройством или заболеванием, с тем чтобы обеспечить уменьшение тяжести и/или частоты симптомов, устранить симптомы и/или лежащую в их основе причину, и/или содействовать улучшению или излечению повреждения. Термины предотвратить и предотвращение относятся к введению средства или композиции не имеющему клинических симптомов индивидууму, который восприимчив к определенному неблагоприятному состоянию, расстройству или заболеванию, и, таким образом, относится к предотвращению возникновения симптомов и/или лежащей в их основе причины. Пока в настоящем описании нет других указаний, или ясных, или подразумеваемых, если термин лечение (или лечить) используется без ссылки на возможное предотвращение, предполагается, что предотвращение также должно охватываться, так что способ лечения пресбиопии следует трактовать как охватывающий способ предотвращения пресбиопии. Под терминами эффективное количество и терапевтически эффективное количество композиции или компонента композиции подразумевается нетоксичное, но достаточное количество композиции или компонента для обеспечения желаемого эффекта. Термин контролируемое высвобождение относится к содержащей средство композиции или ее фракции, в которой высвобождение средства не происходит немедленно, т.е. при композиции контролируемого высвобождения, введение не приводит к немедленному высвобождению средства в пул всасывания. Термин используется взаимозаменяемо с не немедленным высвобождением, как определено в руководстве Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Ed. (Easton, PA: Mack PublishingCompany, 1995). В целом используемый в настоящем описании термин контролируемое высвобождение относится к композициям длительного высвобождения, а не отсроченного высвобождения. Термин длительное высвобождение (синономичное с продолжительным высвобождением) используется в его обычном смысле для обозначения композиции, которая обеспечивает постепенное высвобождение средства в течение продолжительного периода времени. Под фармацевтически приемлемым или офтальмологически приемлемым компонентом подразумевается компонент, который не является биологически или иным образом нежелательным, т.е. компонент может быть включен в глазную композицию по изобретению и введен местно в глаз пациента, не вызывая каких-либо нежелаемых биологических эффектов или без взаимодействия вредным образом с любым из других компонентов композиции, в которой он содержится. Когда термин фармацевтически приемлемый используется для обозначения компонента, отличного от фармакологически активного средства, подразумевается, что компонент соответствует требуемым стандартам токсикологического и производственного тестирования, или что он включен в Руководство по неактивным ингредиентам, составленным Администрацией по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными средствами США. Фразы имеющее формулу или имеющее структуру не предназначены для ограничения и используются таким же образом, как обычно используется термин включающее. Используемый в настоящем описании термин алкил относится к линейной, разветвленной или циклической насыщенной углеводородной группе, содержащей от 1 до 6 атомов углерода, такой как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, циклопентил, циклогексил и им подоб-6 013931 ные. При отсутствии других указаний термин алкил включат незамещенный и замещенный алкил, где заместители могут представлять собой, например, галоген, гидроксил, сульфгидрил, алкокси, ацил и т.д. Используемый в настоящем описании термин алкокси обозначает алкильную группу, связанную через одну концевую эфирную связь; то есть алкокси группа может быть представлена в виде О-алкила, где алкил представляет собой, как определено выше. Пока нет других определений, используемый в настоящем описании термин арил относится к ароматическому заместителю, содержащему одно ароматическое кольцо или множество ароматических колец, которые конденсированы вместе, непосредственно связаны или опосредованно связаны (так что различные ароматические кольца связаны с общей группой, такой как метиленовая или этиленовая часть). Предпочтительные арильные группы содержат от 5 до 14 атомов углерода. Иллюстративные арильные группы содержат одно ароматическое кольцо или два конденсированных или связанных ароматических кольца, например фенил, нафтил, бифенил, простой дифениловый эфир, дифениламин, бензофенон и им подобные. При отсутствии других указаний термин арил включает незамещенный и замещенный арил,где заместители могут представлять собой, как указано выше, в отношении необязательно замещенных алкильных групп. Термин аралкил относится к алкильной группе с арильным заместителем, где арил и алкил представляют собой определенные выше группы. Предпочтительные аралкильные группы содержат от 6 до 14 атомов углерода, а особенно предпочтительные аралкильные группы содержат от 6 до 8 атомов углерода. Примеры аралкильных групп включают без ограничения бензил, 2-фенилэтил, 3-фенилпропил,4-фенилбутил, 5-фенилпентил, 4-фенилциклогексил, 4-бензилциклогексил, 4-фенилциклогексилметил, 4 бензилциклогексилметил и им подобные. Термин ацил относится к заместителям, имеющим формулу -(СО)алкил, -(СО)арил или-(СО)аралкил, где арил, алкил и аралкил представляют собой определенные выше группы. Термин гетероалкил и гетероаралкил используются для обозначения содержащих гетероатом,соответственно, алкильных и аралкильных групп, т.е. алкильных и аралкильных групп, в которых один или несколько атомов углерода замещены атомом, отличным от углерода, например азотом, кислородом,серой, фосфором или кремнием, обычно азотом, кислородом или серой. Термин пептидильное соединение предназначен для включения любой структуры, состоящей из двух или более аминокислот. Аминокислоты, образующие весь или часть пептида, могут представлять собой любую из 20 обычных, естественно встречающихся аминокислот, т.е. аланина (А), цистеина (С),аспарагиновой кислоты (D), глутаминовой кислоты (Е), фенилаланина (F), глицина (G), гистидина (Н),изолейцина (I), лизина (K), лейцина (L), метионина (М), аспарагина (N), пролина (Р), глутамина (Q), аргинина (R), серина (S), треонина (Т), валина (V), триптофана (W) и тирозина (Y). Любая из аминокислот может быть замещена не обычной аминокислотой, такой как, например, изомер или аналог обычной аминокислоты (например, D-аминокислотой), не белковой аминокислотой, пост-трансляционной модифицированной аминокислотой, ферментативно модифицированной аминокислотой или конструктом или структурой, сконструированной для имитации аминокислоты. Пептидильные соединения в настоящем изобретении включают белки, олигопептиды, полипептиды, липопротеины, гликозилированные пептиды, гликопротеиды и им подобные. Следовательно, в одном варианте осуществления предоставляется способ устранения или уменьшения размера агрегата макромолекул в глазу. Способ включает введение в глаз(а) пациента терапевтически эффективного количества стерильной глазной композиции, состоящей из (а) нецитотоксичного хелатообразующего агента, содержащего по меньшей мере 3 отрицательно заряженных хелатообразующих атома, и (b) маскирующий заряд агент, содержащий по меньшей мере одну полярную группу и имеющий молекулярную массу менее чем примерно 250. Полярная группа содержит по меньшей мере один, а предпочтительно по меньшей мере 2 гетероатома, имеющих электроотрицательность Полинга более чем примерно 3,00, где гетероатомы представляют собой предпочтительно атомы кислорода. Молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту достаточно для обеспечения того,чтобы, по существу, все отрицательно заряженные хелатообразующие атомы были ассоциированы по меньшей мере с одним из указанных выше гетероатомов на маскирующем заряд агенте. Композиция может наноситься на глаз в любой форме, подходящей для введения глазного препарата, например в виде раствора или суспензии для введения в форме глазных капель или глазных промываний, в форме мази или в глазном вкладыше, который можно имплантировать в конъюнктиву, склеру, pars plana, передний сегмент или задний сегмент глаза. Такие вкладыши обеспечивают контролируемое высвобождение композиции на глазную поверхность, обычно длительное высвобождение в течение продолжительного периода времени. Композицию можно также наносить на кожу вокруг глаза для проникновения через нее, поскольку соединение, используемое в качестве соединения, используемого в качестве маскирующего заряд агента,например метилсульфонилметан, также служит в качестве усилителя проникновения, обеспечивающего возможность проникновения композиции через кожу. Соединения, используемые в качестве хелатообразующих агентов, включают любые соединения,-7 013931 которые координируются или образуют комплексы с двухвалентными или поливалентными катионами металла, таким образом выполняя роль блокатора таких катионов. Соответственно, используемый в настоящем описании термин хелатообразующий агент включает не только двухвалентные и поливалентные лиганды (которые обычно именуются хелатообразователями), но также одновалентные лиганды,способные координироваться или образовывать комплексы с катионом металла. Однако в настоящем изобретении предпочтительные хелатообразующие агенты представляют собой основно-аддитивные соли поликислоты, например поликарбоновой кислоты, полисульфоновой кислоты или полифосфоновой кислоты, причем особенно предпочтительны поликарбоксилаты. Хелатообразующий агент в целом представляет примерно от 0,6 до 10 мас.%, предпочтительно примерно от 1,0 до 5,0 мас.% композиции. Подходящие биологически совместимые хелатообразующие агенты, которые можно использовать в сочетании с настоящим изобретением, включают без ограничения мономерные поликислоты, такие какEDTA, циклогександиаминтетрауксусную кислоту (CDTA), гидроксиэтилэтилендиамеинтриуксусную кислоту (HEDTA), диэтилентриаминпентауксусную кислоту (DTPA), димеркаптопропансульфоновую кислоту (DMPS), димеркаптоянтарную кислоту (DMSA), аминотриметиленфосфоновую кислоту (АТРА),лимонную кислоту, их офтальмологически приемлемые соли и комбинации любых из указанных выше соединений. Другие иллюстративные хелатообразующие агенты включают фосфаты, например пирофосфаты, триполифосфаты и гексаметафосфаты.EDTA и офтальмологически приемлемые соли EDTA являются особенно предпочтительными, причем репрезентативные офтальмологически приемлемые соли EDTA обычно выбраны из диаммонийEDTA, динатрий EDTA, дикалий EDTA, триаммоний EDTA, тринатрий EDTA, трикалий EDTA и кальцийдинатрий EDTA. В следующей таблице указаны некоторые из обычных хелатообразующих агентов, используемых в сочетании с настоящим изобретением, наряду с некоторыми катионами, с которыми они образуют комплексы: Перечень катионов в данной таблице не следует воспринимать как исчерпывающий. Многие из этих агентов будут в некоторой степени образовывать комплекс с любым катионом металла. Композиция также включает маскирующий заряд агент, содержащий по меньшей мере одну полярную группу и имеющий молекулярную массу менее чем примерно 250, предпочтительно менее чем 125,-8 013931 причем полярная группа содержит по меньшей мере 2 гетероатома, имеющих электроотрицательность Полинга больше чем примерно 3,00, предпочтительно атомы кислорода. Маскирующий заряд агент в целом будет иметь структуру формулы (I) где полярная группа представлена центральной частью Q(O)2, Q представляет собой S или Р, a R1 иR независимо выбраны из C1-C6-алкила (предпочтительно, C1-C3-алкила), C1-C6-гетероалкила (предпочтительно C1-C3-гетероалкила), C6-C14-аралкила (предпочтительно C6-С 8-аралкила) и С 2-С 12-гетероалкила(предпочтительно С 4-C10-гетероалкила). Оптимально Q представляет собой S, a R1 и R2 представляют собой C1-C3-алкил, например метил, как в метилсульфонилметане. В репрезентативном варианте осуществления изобретения композиция включает хелатообразующий агент в форме основно-аддитивной соли тетракарбоновой кислоты, маскирующий заряд агент,имеющий структуру формулы (I), где R1 и R2 независимо выбраны из C1-C3-алкила, C1-C3-гетероалкила,C6-C8-аралкила и С 4-C10-гетероалкила и Q представляет собой S или Р, и молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту находится в диапазоне от 2:1 до 12:1, предпочтительно в диапазоне от 4:1 до 10:1, а оптимально составляет примерно 8:1. Композиция может также включать дополнительные агенты, например известный анти-AGE агент,такой как агент, разрушающий AGE. Как признано в данной области, агенты, разрушающие AGE, действуют для расщепления гликированных связей и, таким образом, облегчают диссоциацию уже образованных AGE. Подходящие агенты, разрушающие AGE, включают, без ограничения, L-карнозин, 3-фенацил 4,5-диметилтиазолийхлорид (РТС), N-фенацилтиазолийбромид (РТВ) и 3-фенацил-4,5-диметилтиазолийбромид (ALT-711, алтеон). Анти-AGE агент можно также выбрать из ингибиторов гликирования и ингибиторов образования AGE. Репрезентативно такие агенты включают аминогуанидин, 4-(2,4,6-трихлорфенилуреидо)феноксиизомасляную кислоту, 4-[(3,4-дихлорфенилметил)-2-хлорфенилуреидо]феноксиизомасляную кислоту, N,N'-бис-(2-хлор-4-карбоксифенил)формамидин и их комбинации. Один репрезентативный анти-AGE агент в настоящей композиции представляет собой L-карнозин,естественный дипептид, содержащий гистидин. L-карнозин также представляет собой естественно встречающийся антиоксидант и, таким образом, обеспечивает в настоящей композиции множественные функции. В предпочтительном варианте осуществления, L-карнозин, в случае присутствия, представляет приблизительно от 0,2 до 5,0 мас.% композиции. Композиция может также включать усилитель микроциркуляции, т.е. средство, которое служит для усиления кровотока внутри капилляров. Усилитель микроциркуляции может представлять собой ингибитор фосфодиэстеразы (PDE), например ингибиторы PDE типа (I). Такие соединения, как будет понятно средним специалистам в данной области, действуют для повышения внутриклеточных уровней циклического АМФ (цАМФ). Предпочтительным усилителем микроциркуляции является винпоцетин, также именуемый этилаповинкамин-2-оат. Винпоцетин, синтетическое производное винкамина, алкалоида барвинка, является особенно предпочтительным в настоящем изобретении ввиду его антиоксидантных свойств и защиты против избыточного накопления кальция в клетках. Винкамин также используется в настоящем изобретении в качестве усилителя микроциркуляции, также как алкалоиды барвинка, кроме винпоцетина. Предпочтительно любой присутствующий усилитель микроциркуляции, например винпоцетин, представляет примерно от 0,01 до примерно 0,2 мас.%, предпочтительно в интервале примерно от 0,02 до примерно 0,1 мас.% композиции. Другие необязательные добавки в настоящих композициях включают вторичные усилители, т.е. один или несколько дополнительных усилителей проникновения. Например, композиция по изобретению может содержать добавленный диметилсульфоксид (DMSO). Если DMSO добавлен в качестве вторичного усилителя, то его количество находится предпочтительно в интервале примерно от 1,0 по 2,0 мас.% композиции, а массовое отношение MSM к DMSO обычно находится в интервале от примерно 1:1 до примерно 50:1. Другие возможные для включения в композиции добавки, которые являются, по меньшей мере,водными, включают без ограничения загустители, изотонические агенты, забуферивающие агенты и консерванты, при условии, что ни один из таких эксципиентов не взаимодействует неблагоприятным образом с любыми другими компонентами композиции. Следует также отметить, что консерванты в целом не являются необходимыми в свете того обстоятельства, что сами выбранные хелатообразующие агенты (и предпочтительные агенты, разрушающие AGE) служат в качестве консервантов. Подходящие загустители будут известны средним специалистам в области глазных композиций и они включают в качестве примера целлюлозные полимеры, такие как метилцеллюлоза (МС), гидроксиэтилцеллюлоза (НЕС), гидроксипропилцеллюлоза (НРС), гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС) и карбоксиметилцеллюлоза натрия (МаСМС) и другие набухаемые гидрофильные полимеры, такие как поливиниловый спирт (PVA),гиалуроновая кислота или ее соль (например, гиалуронат натрия), и поперечно сшитые полимеры акриловой кислоты, совместно именуемые карбомерами (и имеющимися от компании Goodrich в виде по 2-9 013931 лимеров Carbopol). Предпочтительное количество любого загустителя таково, что обеспечивается вязкость в интервале примерно от 15 до 25 сП, поскольку раствор, имеющий вязкость в указанном интервале, в целом считается оптимальным и для комфорта, и для удерживания композиции в глазу. Можно использовать любые подходящие изотонические агенты и забуферивающие агенты, обычно используемые в глазных композициях, при условии, что осмотическое давление раствора не отклоняется от такового слезной жидкости более чем на 2-3% и что рН композиции поддерживается в интервале от примерно 6,5 до примерно 8,0, предпочтительно в интервале от примерно 6,8 до примерно 7,8 и оптимально при рН примерно 7,4. Предпочтительные забуферивающие агенты включают карбонаты, такие как бикарбонат натрия и калия. Композиции по изобретению также включают фармацевтически приемлемый глазной носитель или основу, которая будет зависеть от определенного типа композиции. Например, композиции по изобретению могут быть предоставлены в виде глазного раствора или суспензии, и в этом случае носитель является по меньшей мере частично водным. В идеале, глазные растворы, которые можно вводить в виде глазных капель, представляют собой водные растворы. Композиции могут также представлять собой мази, и в этом случае фармацевтически приемлемый носитель составлен из мазевой основы. Предпочтительные мазевые основы в настоящем изобретении имеют точку плавления или размягчения, близкую к температуре тела, и можно преимущественно использовать любые мазевые основы, обычно используемые в глазных препаратах. Обычные мазевые основы включают вазелин и смеси вазелина и минерального масла. Композиции по изобретению можно получить в виде гидрогеля, дисперсии или коллоидной суспензии. Гидрогели образуются включением набухаемого, образующего гель полимера, такого как те, которые описаны выше в качестве подходящих загущающих агентов (т.е. МС, НЕС, НРС, НРМС, NaCMC,PVA или гиалуроновая кислота или ее соль, например гиалуронат натрия), за исключением того, что композиция, именуемая в данной области как гидрогель , обычно имеет более высокую вязкость, чем композиция, именуемая загущеннымраствором или суспензией. В отличие от таких предварительно образованных гидрогелей композицию можно также получить так, чтобы она образовывала гидрогель insitu после нанесения на глаз. Такие гели представляют собой жидкость при комнатной температуре, но гель при более высоких температурах (и, таким образом, именуются термообратимымигидрогелями),например при помещении в контакте с биологическими жидкостями. Биологически совместимые полимеры, которые придают это свойство, включают полимеры и сополимеры акриловой кислоты, производные N-изопропилакриламида и блоксополимеры ABA этиленоксида и пропиленоксида (обычно именуемые как полоксамерыи имеющиеся в продаже под торговым названием Pluronic от компанииBASF-Wyandotte). Композиции можно также получить в форме дисперсии или коллоидной суспензии. Предпочтительными дисперсиями являются липосомальные, и в этом случае композиция включена внутрь липосом , микроскопических пузырьков, составленных из чередующихся водных компартментов и липидных двухслойных структур. Коллоидные суспензии в целом образованы из микрочастиц, т.е. из микросфер, наносфер, микрокапсул или нанокапсул, где микросферы и наносферы представляют собой в целом монолитные частицы полимерной матрицы, в которые захвачена, адсорбирована или другим образом содержится композиция, тогда как при микрокапсулах и нанокапсулах композиция в действительности инкапсулирована. Верхний предел размера этих микрочастиц составляет примерно от 5 до примерно 10 мкм. Композиции могут также быть включены в стерильный глазной вкладыш, который обеспечивает контролируемое высвобождение композиции в течение продолжительного периода времени, в целом в интервале от примерно 12 ч до 60 дней и возможно до 12 месяцев или более, после имплантации вкладыша в конъюнктиву, склеру или pars plana, или в передний сегмент или задний сегмент глаза. Один тип глазного вкладыша представляет собой имплантат в форме монолитной полимерной матрицы, которая постепенно высвобождает композицию в глаз посредством диффузии и/или разрушения матрицы. При таком вкладыше предпочтительно, чтобы полимер был полностью растворимым или биологически разлагаемым (т.е. физически или ферментативно эродируемым в глазу), так что удаление вкладыша является необязательным. Эти типы вкладышей хорошо известны в данной области и обычно составлены из набухаемого в воде, образующего гель полимера, такого как коллаген, поливиниловый спирт или полимер целлюлозы. Другой тип вкладыша, который можно использовать для доставки настоящей композиции, представляет собой диффузионный имплантат, в котором композиция содержится в центральном резервуаре, заключенном внутрь проницаемой полимерной мембраны, которая обеспечивает возможность постепенной диффузии композиции имплантата. Можно также использовать осмотические вкладыши, т.е. имплантаты, в которых композиция высвобождается в результате увеличения осмотического давления внутри имплантата после нанесения на глаз и последующего всасывания слезной жидкости. Способы и композиции по изобретению можно применять при лечении широкого разнообразия состояний, связанных с образованием и/или отложением макромолекулярных агрегатов. Многочисленные медицинские патологические состояния вызваны или обостряются образованием и отложением in vivo макромолекулярных агрегатов, включая кристаллические агрегаты, фибриллярные агрегаты и аморфные- 10013931 агрегаты. Известно, что определенные пептидильные соединения, включая отобранные олигопептиды,полипептиды и белки, образуют кристаллы и волокна, которые связаны с различными медицинскими состояниями, расстройствами и заболеваниями. Например, известно, что амилоидные пептиды, в частности -амилоид, образуют упорядоченные фибриллярные агрегаты, которые включают внеклеточные и цереброваскулярные старческие бляшки, связанные с болезнью Альцгеймера. См. "The Core Alzheimer'sPathogenesis of Alzheimer's Disease", Biochemistry J.32: 4693-4697. Прионовые заболевания, например класс заболеваний, известных как трансмиссивные губчатые энцефалопатии, также характеризуются патологическим отложением белка в мозговой ткани, в которых отложения состоят из волоконных амилоидных бляшек, образованных, в первую очередь, из прионового белка (PrP). Такие заболевания включают передаваемую через царапины кожи энцефалопатию норок, хроническое вызывающее истощение заболевание мулов, оленей и лосей, губчатую энцефалопатию кошек и губчатую энцефалопатию коров(болезнь сумасшествия коров) у животных и болезнь Куру, болезнь Крейтцфедта-Якоба, болезнь Герстманна-Штреусслера-Шейнкера и смертельная семейная бессонница у людей. Предполагалось, что 15-мерная аминокислотная последовательность, PrP96-111, ответственна за инициацию образования прионов in vivo предоставлением затравки для формирования амилоидных волокон. См. Come et al.Acad. Sc. USA 90: 5959-5963. Фибриллин, связанный с болезнью Матана, представляет собой другой пример белка, который образует упорядоченную фибриллярную структуру, которая вызывает неблагоприятное медицинское состояние. Фибриллярные бляшки, образованные из различных коллагенов, также связаны с определенными медицинскими патологическими состояниями, например сердечными заболеваниями и коллагенофиброзной гломерулопатией, см. Rossi et al. (2001), "Connective Tissue Skeleton in theKidney Dis. 33:123-127. Другие аналогично проблематичные биологические молекулы включают без ограничения: белок муковисцидозный трансмембранный регулятор проводимости ("CFTR"), кристаллизация которого связана с муковисцидозом (см. Berger et al. (2000), "Differences Between Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator and HisP in the Interaction with the Adenine Ring of ATP," J. Biol. Chem., 275: 29407-29412),фосфолипазы, которые образуют кристаллы Шарко-Лейдена, связанные с астмой, эозинофильной костной гранулемой, эозинофильной пневмонией и гранулоцитарным лейкозом (см. Reginato и Kumik (1989),"Calcium Oxalate and Other Crystals Associated with Kidney Diseases и Arthritis", Semin Arthritis Rheum 18:198-224); цистин, который образует кристаллические отложения в костном мозге (связанные с рахитом и синовиитом), почечных канальцах и желудочно-кишечном тракте (связанные с цистинурией) и разнообразных других тканях организма, включая почки, глаза и щитовидные железы (связанные с цистинозом, включая тяжелую форму заболевания, нефропатический цистиноз или синдром Фанкони); и гемоглобин, гематоидин, криоглобулины и иммуноглобулины (связанные с гемартрозом и другими суставными расстройствами, криоглобулинемией и множественной миеломой). См. Gatter и Owen, Jr., "2.Crystal Identification и Joint Fluid Analysis", in Gout, Hyperuricemia, Other Crystal-Associated Arthropathies,Eds. Smyth et al. (New York: Marcel Dekker Inc., 1999), p. 15-28 и Reginato и Kumik, supra. Липиды, в частности стерины и сложные эфиры стеринов, представляют дополнительный класс биологических молекул, которые образуют патологические отложения in vivo. Атеросклеротическая бляшка (атерома) и холестериновые эмболы, главным образом, состоят из холестеринмоногидрата и кристаллических сложных эфиров холестерила, включая холестерилпальмитат,олеат, линолеат, пальмитолеат, линоленат и миристат. См. North et al. (1978), "The Dissolution of Cholesterol Monohydrate Crystals in Atherosclerotic Plaque Lipids", Atherosclerosis, 30:211-217; Burks и EngelmanVase Bioi, p. 2682-2688. Образование желчных камней также связано с кристаллизацией холестерина,поскольку желчные камни обычно возникают в результате кристаллизации холестеринмоногидрата в желчи. См. Dowling (2000) "Review: Pathogenesis of Gallstones", Aliment Pharmacol. Ther., 14 (Suppl. 2): 39-46. В указанной выше ссылке также предполагалось, что кристаллические отложения других типов липидов, например жирные кислоты, также являются патогенными. См. приведенную выше ссылку на работу Reginato and Kumik. Кристаллы холестерина также наблюдаются в перезрелых катарактах (например, Reginato и Kumik, supra. Cholesterol crystals are also observed in hypermature cataracts (e.g., Brooks,- 11013931A.M.V. et al. (1994) "Crystalline nature of the iridescent particles in hypermature cataracts", Br. J. Ophth., 78: 581-582; Knapp H.C. (1937) "Spontaneous rupture of the lens capsule in hypermature cataract causing secondary glaucoma", Am J. Ophthalmol., 20: 820-821). Способ и композиции по изобретению можно также применять при лечении у индивидуума неблагоприятных глазных состояний, включая состояния, заболевания или расстройства роговицы, сетчатки,хрусталика, склеры переднего и заднего сегментов глаза, многие из которых включают образование или отложение молекулярных агрегатов, как обсуждалось выше. Особый интерес представляют те неблагоприятные глазные состояния, которые связаны с процессом старения, и/или окислительное и свободнорадикальное повреждение глаз. В качестве примера, а не ограничения, композиции можно применять при лечении следующих неблагоприятных глазных состояний, которые в целом связаны со старением: отвердение, помутнение, снижение податливости и пожелтение хрусталика; пожелтение и помутнение роговицы; пресбиопия; закупорка трабекулярной сети, ведущая к нарастанию внутриглазного давления и глаукоме; увеличение количества плавающих частиц в стекловидном теле; повышение жесткости и снижение интервала расширения радужки; возрастная дегенерация желтого пятна; образование атеросклеротических и других липидных отложений в артериях сетчатки; синдром сухого глаза; развитие катаракт,включая вторичные катаракты; светобоязнь, проблемы с пристальным всматриванием и снижение чувствительности и способности адаптации к уровню освещения палочек и колбочек сетчатки; старческая дуга; сужение зрачка; потеря остроты зрения, включая сниженную контрастную чувствительность, цветовое восприятие и восприятие глубины; потеря ночного зрения; сниженная аккомодация хрусталика; отек желтого пятна; рубцевание желтого пятна и полосная кератопатия. Стареющий индивидуум в целом страдает несколькими этими состояниями, обычно требующими самостоятельного введения двух или более различных фармацевтических продуктов. Поскольку способы и композиции по изобретению можно применять для лечения множественных состояний, дополнительные продукты не требуются и поэтому устраняются неудобство и присущий риск применения множественных фармацевтических продуктов. Дополнительные неблагоприятные глазные состояния, которые можно лечить, используя настоящие композиции, включают кератоконус и разрастания на поверхности глаза, такие как пингвекулы и птеригиумы. Следует также подчеркнуть, что композиции можно применять для улучшения остроты зрения,включая контрастную чувствительность, цветовое восприятие и восприятие глубины, у любого млекопитающего индивидуума вне зависимости от поражения индивидуума неблагоприятным состоянием, связанным со зрением. Изобретение также относится к глазным вкладышам для контролируемого высвобождения композиции по изобретению или ее компонентов. Эти глазные вкладыши могут быть имплантированы в любую область глаза, включая склеру и передний, и задний сегменты. Вкладыш может представлять собой постепенно, но полностью растворимый имплантат, например он может быть изготовлен включением набухаемых, образующих гидрогель полимеров в водную жидкую композицию, как описано в других местах настоящего описания. Вкладыш может также быть нерастворимым, и в этом случае средство высвобождается из внутреннего резервуара через наружную мембрану посредством диффузии или осмоса,как описано в других местах настоящего описания. Пример 1. Композицию в виде глазных капель по изобретению, композицию I, получали следующим образом: деионизированную (DI) воду высокой чистоты (500 мл) фильтровали через фильтр с размером пор 0,2 мкм. MSM (27 г), EDTA (13 г) и L-карнозин (5 г) добавляли к профильтрованной воде DI и смешивали до достижения визуальной прозрачности, указывающей на растворение. Смесь выливали во флаконы по 10 мл, имеющие крышку с капельницей. На основе процентов по массе глазные капли имели следующий состав: Пример 2. Композицию I оценивали на эффективность при лечении четырех пациентов, всех мужчин в возрасте от 52 до 84 лет, смешанной этнической группы. Пациенту 1 было от 50 до 60 лет и у него не было проблем со зрением или выявляемых отклонений глаз от нормы. Пациентам 2 и 3 было от 50 до 60 лет и у них была выраженная старческая дуга по периферии роговицы в обоих глазах, но не было других неблагоприятных глазных состояний (старческая дуга обычно считается косметическим недостатком). Пациент 4 был в возрасте старше 80 лет и страдал катарактами и узелками Зальцмана и сообщал о крайней светобоязни и вынужденного пристального всматривания. Этот пациент испытывал большое затруднение при чтении газет, книг и информации на экране компьютера ввиду вынужденной необходимости пристального всматривания и утраты четкости зрения. Композицию вводили пациентам по одной капле (приблизительно 0,04 мл) в каждый глаз, от двух до четырех раз в 1 день в течение периода более 12 месяцев. Все пациенты были обследованы офтальмо- 12013931 логом в течение и после 12 месяцев. Пациенты и офтальмолог не отмечали и не наблюдали никаких побочных эффектов, кроме небольшого временного раздражения во время введения композиции в глаз. Все 4 пациента завершили исследование. Все пациенты отметили субъективные изменения через 4 недели от начала исследования. На этой стадии изменения, отмеченные пациентами, включали увеличенную яркость, улучшенную четкость зрения и снижение чувствительности к яркому свету (в частности, пациент 4). Через 8 недель были отмечены следующие изменения: все 4 пациента сообщили о значительном улучшении зрения в отношении четкости и контрастности и указали на то, что яркость цветов в дневное время представлялась им увеличенной. Зрение пациента I улучшилось с 20/25 (после коррекции) лучше,чем до 20/20 (при такой же коррекции), и его глаза приобрели более глубокий голубой оттенок. У пациентов 2 и 3 проявилось значительное снижение старческой дуги. У пациента 4, у которого первоначально при наилучшей коррекции зрение его левого глаза составляло 20/400 и зрение его правого глаза составляло 20/200 и у которого имелась острая светобоязнь и вынужденная необходимость пристального всматривания. Вынужденная необходимость пристального всматривания и светобоязнь снизились, и пациент снова начал читать книги, газеты и информацию на экране компьютера. Острота зрения его правого глаза значительно улучшилась с 20/200 (при коррекции) до 20/60 (стенопеическое отверстие) (при такой же коррекции). В его левом глазу острота зрения также улучшилась с 20/400 до 20/200 (при такой же коррекции). В его левом глазу оставалось центральное темное пятно вследствие рубцевания желтого пятна. Через 16 недель были отмечены следующие изменения: все пациенты сообщили о продолжающемся улучшении зрения, включая ночное зрение, а также улучшенной контрастной чувствительности и продолжающемся улучшении цветового восприятия. Зрение пациента 1 продолжало улучшаться с 20/20(после коррекции) до 20/15 (при такой же коррекции). У пациентов 2 и 3 продолжало проявляться уменьшение старческой дуги. Пациент 4 сообщил о дальнейшем уменьшении пристального всматривания и светобоязни и дальнейшем улучшении легкости чтения книг, газет и информации на экране компьютера. Пациент 4 также сообщил о том, что была устранена необходимость пристального всматривания в ночное время. Теперь пациент испытывал комфорт при дневном освещении без необходимости в темных очках и не испытывая тяжелых проблем, связанных с вынужденной необходимостью пристального всматривания. Острота зрения его правого глаза значительно улучшилась с 20/60 (стенопеическое отверстие) до 20/50 (стенопеическое отверстие). Острота зрения его левого глаза также улучшилась с 20/200 до 20/160 (при такой же коррекции). В его левом глазу продолжало оставаться центральное темное пятно вследствие рубцевания желтого пятна. Через 8 месяцев зрение правого глаза пациента 4 улучшилось с 20/50 (стенопеическое отверстие) до 20/40 (стенопеическое отверстие). В его левом глазу острота зрения улучшилась с 20/160 до 20/100 (при такой же коррекции). Темное пятно в левом глазу начало рассеиваться, и он мог читать сквозь туманность бывшего темного пятна. В это время также измеряли его контрастную чувствительность. Его катаракты измеряли при 4+ (по шкале 0-4, причем 4 является самой высокой). Центральный рубец желтого пятна был едва видимым для офтальмолога ввиду затуманенности оптического канала. Через 10 месяцев произошло дальнейшее улучшение остроты зрения пациента 1 с 20/15 до 20/10 (при такой же коррекции). Еще через 2 месяца, т.е. итого через 12 месяцев, зрение пациента 4 продолжало улучшаться. Теперь пациент мог без каких-либо проблем читать книги, газеты и экран компьютера. У пациента также проявилось улучшение в отношении катаракт (уменьшение с 4+ до 3-4+ по шкале 0-4). Прозрачность оптического канала улучшилась достаточно для того, чтобы офтальмолог мог ясно видеть рубец желтого пятна. Улучшение контрастной чувствительности составило от 40 до 100%. Острота зрения по Снеллену в правом глазу улучшилась с 20/40 до 20/30 (стенопеическое отверстие) и в левом глазу с 20/100 до 20/80. Пример 3. Вторую композицию в виде глазных капель по изобретению, композицию 2, получали следующим образом: деионизированную (DI) воду высокой чистоты (500 мл) фильтровали через фильтр с размером пор 0,2 мкм. MSM (13,5 г), EDTA (6,5 г) и L-карнозин (5,0 г) добавляли к профильтрованной воде DI и смешивали до достижения визуальной прозрачности, указывающей на растворение. Смесь выливали во флаконы по 10 мл, имеющие крышку с капельницей. На основе процентов по массе композиция глазных капель имела следующие компоненты: Пример 4. Вслед за экспериментом, описанным в примере 2, провели детальное и контролируемое наблюдательное исследование с использованием несколько более слабой композиции в виде глазных капель,- 13013931 композиции 2 (полученной как описано в примере 3). Также получали и вводили глазные капли плацебо. Капли плацебо были составлены из приобретенного в торговой сети солевого раствора в форме забуференного изотонического водного раствора (содержащего борную кислоту, борат натрия и хлорид натрия с 0,1 мас.% сорбиновой кислоты и 0,025 мас.% динатрий EDTA в качестве консервантов). Исследование проводилось с двойной маскировкой, состоявшей в том, что, кроме одного положительного контроля, ни пациент, ни офтальмолог не знал, получали ли они глазные капли композиции или солевого раствора. Пациентов методом случайной выборки включали в группы, получавшие или исследуемую композицию, или солевой раствор. В исследование были включены 5 пациентов, 3 из которых получали глазные капли композиции 2,и 1 пациент получал глазные капли плацебо. Кроме того, 1 пациенту вводили более сильные глазные капли композиции 1. В каждый глаз вводили 1 каплю (приблизительно 0,04 мл), 2-4 раза/день в течение периода 8 недель. Капли вводили в оба глаза каждого пациента. Участники исследования относились к множеству этнических групп и включали 20% женщин и 80% мужчин. Тестирование офтальмолога в исходном состоянии и в течение периода наблюдения включало: автоматизированное определение рефракции, роговичной топографии; фотографии волнового фронта; остроты зрения с коррекцией очками на расстоянии и дистанции 14 дюймов; тестирование контрастной чувствительности с использованием таблицы Функционального контрастного теста остроты зрения (FACT)Vision Sciences Research Corporation (San Ramon, California); исследование зрачка и измерение размера зрачка; исследование щелевой лампой; измерение внутриглазного давления и исследование глазного дна после расширения зрачка. Через 8 недель пациентов обследовали снова. Результаты определения контрастной чувствительности для каждого пациента показаны в табл. 1 и все результаты сведены в табл. 2. Таблица 1 1 Контрастная чувствительность (CS) представляет собой эквивалент контраста при пороге, т.е. деленную на самый низкий контраст, при котором могут распознаваться формы или линии. Величины логарифма контрастной чувствительности представляют собой общепринятый способ сравнения величин контрастной чувствительности. 2cpd = циклы на градус для пространственной частоты. 3 1 Контрастная чувствительность (CS) представляет собой эквивалент контраста при пороге, т.е. деленную на самый низкий контраст, при котором могут распознаваться формы или линии. Величины логарифма контрастной чувствительности представляют собой общепринятый способ сравнения величин контрастной чувствительности. 2cpd = циклы на градус для пространственной частоты. 3 Процент улучшения = [log10 (CS после лечения)/log10 (CS перед лечением)-1]100. 4 Все пациенты, получавшие лечение композицией и композицией 2, проявили очень существенное улучшение, включая улучшенную гладкость и равномерность роговицы, улучшенную аккомодационную/фокусирующую способность, более однородную и устойчивую слезную пленку и уменьшенное пожелтение роговицы и хрусталика. У пациентов, получавших плацебо, не проявилось какое-либо существенное изменение. Все пациенты сообщили об улучшенной способности видеть дорожные знаки на расстоянии, более яркие и четкие цвета и улучшенное ночное зрение. Пример 5. Композицию 1 оценивали на эффективность у 46-летнего мужчины. Перед лечением у пациента не было выраженных проблем со зрением или отклонений глаз от нормы, но ему требовались бифокальные линзы для коррекции ошибок рефракции в обоих глазах. Пациента обследовал независимый офтальмолог перед лечением и снова после 8 недель лечения. Выполненные тесты включали: исследование остроты зрения по Снеллену для зрения на расстоянии(20 футов) и вблизи (14 дюймов), ауторефракции, расширения зрачка (максимальный скотоскопический размер зрачка при измерении пупиллометром), исследование щелевой лампой, автоматизированное картирование роговичной топографии, контрастной чувствительности (функциональный контрастный тест остроты зрения), автоматизированное картирование аберрации волнового фронта и фотографии переднего сегмента. Лечение состояло из местной инстилляции одной капли (приблизительно 0,04 мл) композиции 1 в каждый глаз 2-4 раза/день в течение 8 недель. Результаты этого лечения были следующие: офтальмолог не наблюдал или пациент не сообщал о раздражении, красноте, боли или других неблагоприятных эффектах, кроме преходящего небольшого раздражения глаза во время введения глазной капли. Острота зрения по Снеллену: при использовании такой же коррекции рефракции острота зрения на расстоянии улучшилась с 20/25+1 до 20/20 в правом глазу и с 20/20-2 до 20/20 в правом глазу. Зрение вблизи не изменилось и оставалось в обоих глазах на уровне 20/50. Ауторефракция: правый глаз был не изменен: сферичность -3,75; астигматизм +2,5 по оси 24. Левый глаз проявил незначительное улучшение: сферичность уменьшилась с -4,00 до -3,75; астигматизм уменьшился с +3,50 на 175 до +3,25 на 179. Расширение зрачка: улучшение в обоих глазах с 5,0 до 6,0 мм. Обследование щелевой лампой: сетчатки представлялись неизмененными и во время всех обследований катаракты не наблюдались. Роговичная топография: наблюдалась улучшенная гладкость и однородность роговицы в обоих глазах. Офтальмолог отметил, что улучшение могло быть связано с более равномерной и устойчивой слезной пленкой. Контрастная чувствительность: измерения показаны в табл. 3.CPD = циклы на градус (пространственная частота типа). Эти данные указывают на согласованное, значимое улучшение контрастной чувствительности. Автоматизированное картирование волнового фронта: в правом глазу сферическая аберрация была,по существу, неизменной (от +0,15660 до +0,15995). Формирование сетчаточного изображения улучшилось с 6070 до 4570 мин дуги, что представляет на 25% более плотное формирование изображения. В левом глазу: сферическая аберрация уменьшилась с +0,14512 до +0,09509, представляя улучшение на 34,4%. Формирование сетчаточного изображения улучшилось при более плотном изображении, составляющем, по оценкам, 20%. Фотографии переднего сегмента, фиг. 1 А (правый глаз, перед лечением), фиг. 1 В (правый глаз, после лечения), фиг. 2 А (левый глаз, перед лечением) и фиг. 2 В (левый глаз, после лечения): изменился цвет радужки в более темно-голубой; степень изменения была отмечена как удивительная. Изменение было, вероятно, связано с уменьшением пожелтения роговицы. Кроме того, пациент сообщил, что после лечения он перешел к менее мощным прописанным очкам и больше не нуждался в бифокальных очках. Он сделал следующие замечания: Я применял глазные капли в течение 8 недель, и мое зрение значительно улучшилось. Я ярче вижу цвета. Я заменил бифокальные очки моими более старыми, менее сильными не бифокальными очками. Я гораздо лучше вижу на расстоянии и не нуждаюсь в очках для чтения. Цвет моих глаз стал более темно-голубым, подобно первоначальному цвету моих глаз, и мое ночное зрение улучшилось. Пример 6. Композицию 1 оценивали на эффективность у 60-летноего мужчины. Перед лечением у пациента не было серьезных проблем со зрением или отклонений глаз от нормы, кроме ошибок рефракции в обоих глазах. Пациента обследовал независимый офтальмолог перед лечением и снова после 7 недель лечения. Выполненные тесты включали: исследование остроты зрения по Снеллену для зрения на расстоянии(20 футов) и вблизи (14 дюймов), ауторефракции, расширения зрачка (максимальный скотоскопический размер зрачка при измерении пупиллометром), исследование щелевой лампой, автоматизированное картирование роговичной топографии, контрастной чувствительности (функциональный контрастный тест остроты зрения), автоматизированное картирование аберрации волнового фронта и фотографии переднего сегмента. Лечение состояло из местной инстилляции одной капли (приблизительно 0,04 мл) композиции 1 в каждый глаз 2-4 раза/день в течение 7 недель. Результаты этого лечения были следующие: офтальмолог не наблюдал или пациент не сообщал о раздражении, красноте, боли или других неблагоприятных эффектах, кроме преходящего небольшого раздражения глаза во время введения глазной капли. Острота зрения по Снеллену: при использовании такой же коррекции рефракции (преднамеренно недостаточно корригированной в левом глазу), острота зрения на расстоянии оставалась неизменной на уровне 20/15 в правом глазу и улучшилась с 20/40-2 до 20/40 в левом глазу. Зрение вблизи снизилось с 20/70 до 20/100 в правом глазу (вероятно, вследствие избыточной коррекции на расстояние) и улучшилось с 20/40-2 до 20/25 в левом глазу. Ауторефракция: в правом глазу сферическое измерение было неизменным (-6,00) и наблюдалось некоторое улучшение астигматизма (с +0,75 на 115 до +0,50 на 113). Левый глаз проявил незначительное улучшение: сферичность уменьшилась с -8,25 до -8,00; астигматизм был неизменным, от +1,00 на 84 до +1,00 на 82. Расширение зрачка: в правом глазу улучшилось с 4,0 до 4,5 мм, в левом глазу оно было неизменным на уровне 4,0 мм. Обследование щелевой лампой: сетчатки представлялись неизмененными, и во время обоих обследований наблюдались минимальные катаракты. Роговичная топография: наблюдалась улучшенная гладкость и однородность роговицы в обоих глазах. Офтальмолог отметил, что улучшение могло быть связано с более равномерной и устойчивой слезной пленкой. Контрастная чувствительность: измерения показаны в табл. 4.CPD = циклы на градус (пространственная частота типа). Эти данные указывают на согласованное, значимое улучшение контрастной чувствительности. Автоматизированное картирование волнового фронта: в правом глазу: сферическая аберрация уменьшилась с +0,01367 до +0,00425, улучшение на 69%. Формирование сетчаточного изображения улучшилось с 8080 до 7065 мин дуги, что представляет на 28,9% более плотное формирование изображения. В левом глазу: сферическая аберрация уменьшилась с +0,04687 до -0,00494, представляя улучшение 100%. Формирование сетчаточного изображения улучшилось с 150150 до 100100 мин дуги, что представляет на 33% более плотное формирование изображения. Офтальмолог отметил на втором обследовании: Общая сферическая аберрация ближе к таковой молодого здорового глаза, а не 60-летнего глаза. Фотографии переднего сегмента, фиг. 3A (правый глаз, перед лечением), фиг. 3B (правый глаз, после лечения), фиг. 4 А (левый глаз, перед лечением) и фиг. 4 В (левый глаз, после лечения): наблюдалось очевидное уменьшение мутности хрусталика, сниженное пожелтение кристаллического хрусталика и улучшенная прозрачность роговицы. Кроме того, пациент заявил: Я применял глазные капли в течение 7 недель. Я вижу мячик для гольфа на расстоянии 300 ярдов, в то время как ранее он был едва различим на расстоянии 220 ярдов. Мое зрение значительно улучшилось, особенно в отношении способности видеть дорожные знаки на расстоянии. Я вижу цвета гораздо ярче и яснее. Пример 7. Глазное фармакокинетическое поведение EDTA при введении в качестве компонента композиции 1 оценивали у кроликов в течение периода 5 дней. Для исследования использовали двух здоровых самцов кроликов, каждый с массой тела приблизительно от 2,5 до 3 кг. В 1-й день исследования 1 каплю композиции 1 местно инстиллировали в каждый глаз обоих кроликов (всего 4 глаза). В течение хода исследования дополнительные глазные капли не вводили. Образцы водянистой влаги экстрагировали через 15, 30 мин, 1, 4 ч, 3 и 5 дней после введения (как указано в следующей таблице). Стекловидное тело экстрагировали через 5 дней после введения из всех четырех глаз. Концентрацию EDTA измеряли во всех образцах водянистой влаги и стекловидного тела анализом ВЭЖХ. Результаты исследования суммированы в табл. 5. Таблица 5 Примеры 1-7 указывают на то, что местные капли, составленные из многофункциональных агентовMSM и EDTA с добавлением L-карнозиновых агентов, разрушающих AGE, значительно улучшили качество и дневного, и ночного зрения (остроты зрения), значительно улучшили контрастную чувствительность, улучшили расширение зрачка, вызывали продукцию более однородной и устойчивой слезной пленки, уменьшали старческую дугу и значительно снижали пристальное всматривание и дискомфорт,связанный со светобоязнью. Неблагоприятные патологические изменения или снижение остроты зрения не наблюдались. Пример 8. В следующем эксперименте in vivo глазное фармакокинетическое поведение EDTA при введении сMSM в качестве агента, усиливающего проникновение, оценивали у кроликов в течение периода 5 дней. Для исследования использовали двух здоровых самцов кроликов, каждый с массой тела приблизительно от 2,5 до 3 кг. Композицию глазных капель по изобретению получали следующим образом: деионизированную(DI) воду высокой чистоты (500 мл) фильтровали через фильтр с размером пор 0,2 мкм. MSM (27 г),EDTA (13 г) и L-карнозин (5 г) добавляли к профильтрованной воде DI и смешивали до достижения визуальной прозрачности, указывающей на растворение. Смесь выливали во флаконы по 10 мл, имеющие крышку с капельницей. На основе процентов по массе глазные капли имели следующую композицию: В 1-й день исследования 1 каплю композиции 1 местно инстиллировали в каждый глаз обоих кроликов (всего 4 глаза). В течение хода исследования дополнительные глазные капли не вводили. Образцы водянистой влаги экстрагировали через 15, 30 мин, 1, 4 ч, 3 и 5 дней после введения (как указано в следующей таблице). Стекловидное тело экстрагировали через 5 дней после введения из всех четырех глаз. Концентрацию EDTA измеряли во всех образцах водянистой влаги и стекловидного тела анализом ВЭЖХ. Результаты исследования суммированы в следующей таблице: Эти результаты показывают, что композиция 1 доставляет EDTA в переднюю камеру глаза (водянистая влага) очень быстро: концентрация 10,7 мкг/мл достигается только через 30 мин после введения. Поскольку водянистая влага полностью вымывается из передней камеры приблизительно каждые 90 мин, то соединения из обычных композиций глазных капель обычно не выявляются в водянистой влаге через 4 ч после введения. Однако заявители наблюдали значимые концентрации EDTA в водянистой влаге даже через 5 дней после введения. Данные заявителей также показывают, что EDTA достигла стекловидного тела, где она присутствовала почти в такой же концентрации, как в водянистой влаге. Таким образом, вероятно, что стекловидное тело (и, вероятно, прилегающие ткани) действовало в качестве резервуара для абсорбированной EDTA при некотором количестве этой EDTA, со временем диффундирующей назад в водянистую влагу. Продемонстрированное проникновение EDTA из композиции 1 в задний сегмент глаза, включая стекловидное тело, указывает на потенциальную способность композиции по изобретению доставлять терапевтические средства в заднюю часть глаза при введении в виде глазных капель. Такая доставка препаратов в заднюю часть глаза обеспечивает возможность лечения многих глазных состояний, заболеваний и расстройств, включая возрастную дегенерацию желтого пятна, отек желтого пятна, глаукому, отторжение клеточного трансплантата, инфекции и увеит. Пример 9. Композицию 1 оценивали на эффективность при лечении мужчины старше 80 лет, который страдал катарактами и узелками Зальцмана, у которого наилучшая коррекция составляла 20/400 в левом глазу и 20/200 в правом глазу и у него была острая светобоязнь и вынужденное пристальное всматривание, а также тяжелое рубцевание желтого пятна в левом глазу. Композицию вводили пациенту по одной капле(приблизительно 0,04 мл) в каждый глаз, 2-4 раза/день в течение периода 12 месяцев. Пациенты и офтальмолог не отмечали и не наблюдали никаких побочных эффектов, кроме небольшого временного раздражения во время введения композиции в глаз.- 18013931 После 4 недель участия в исследовании изменения, о которых сообщал пациент, включали увеличенную яркость, улучшенную четкость зрения и снижение вынужденного пристального всматривания. Через 8 недель вынужденное пристальное всматривание и светобоязнь были уменьшены, и пациент снова начал читать книги, газеты и информацию на экране компьютера. Острота зрения его правого глаза значимо улучшилась с 20/200 (с коррекцией) до 20/60 (стенопеическое отверстие). Острота зрения его левого глаза также улучшилась с 20/400 до 20/200 (при такой же коррекции). В его левом глазу продолжало оставаться центральное темное пятно вследствие рубцевания желтого пятна. Пациент сообщил о дальнейшем уменьшении вынужденного пристального всматривания и светобоязни и о дальнейшем улучшении легкости чтения книг, газет и информации на экране компьютера. Пациент также сообщил о том, что было устранено вынужденное пристальное всматривание в ночное время. Теперь пациент испытывал комфорт при дневном освещении без необходимости в темных очках и не испытывая тяжелых проблем, связанных с вынужденной необходимостью пристального всматривания. Острота зрения его правого глаза улучшилась с 20/60 (стенопеическое отверстие) до 20/50 (стенопеическое отверстие). Острота зрения его левого глаза также улучшилась с 20/200 до 20/160 (при такой же коррекции). В его левом глазу продолжало оставаться центральное темное пятно вследствие рубцевания желтого пятна. Через 8 месяцев зрение правого глаза пациента улучшилось с 20/50 (стенопеическое отверстие) до 20/40 (стенопеическое отверстие). В левом глазу острота зрения улучшилась с 20/160 до 20/100 (при такой же коррекции). Темное пятно в левом глазу начало рассеиваться, и он мог читать сквозь туманность бывшего темного пятна. В это время также измеряли его контрастную чувствительность. Его катаракты измеряли при 4+ (по шкале 0-4, причем 4 является самой высокой). Центральный рубец желтого пятна был едва видимым для офтальмолога ввиду затуманенности оптического канала. Всего через 12 месяцев зрение пациента продолжало улучшаться. Теперь пациент мог без какихлибо проблем читать книги, газеты и экран компьютера. У пациента также проявилось улучшение в отношении катаракт (уменьшение с 4+ до 3-4+ по шкале 0-4). Прозрачность оптического канала улучшилась достаточно для того, чтобы офтальмолог мог ясно видеть рубец желтого пятна. Улучшение контрастной чувствительности составило от 40 до 100%. Острота зрения по Снеллену в правом глазу улучшилась с 20/40 до 20/30 (стенопеическое отверстие) и в левом глазу с 20/100 до 20/80. Сообщалось также,что впервые за 40 лет он начал видеть левым глазом волнистые буквы. Эти результаты демонстрируют, что глазные капли достигают сетчатку в задней части глаза и MSM содействовал проникновению EDTA и L-карнозина. Эти результаты согласуются с данными исследования на кроликах примера 4. Пример 10. Композиция 1 оценивалась на эффективность при лечении женщины в возрасте от 60 до 70 лет,имевшей проблемы в виде плавающих помех в обоих глазах. Композицию вводили женщине по одной капле (приблизительно 0,04 мл) в каждый глаз, 2-4 раза/день в течение периода более 12 месяцев. Пациентка и офтальмолог не отметили побочных эффектов, кроме небольшого временного раздражения во время введения композиции в глаз. После 8 недель применения глазных капель пациентка сообщила о значительном снижении плавающих частиц, снова подтверждая, что препарат достигал стекловидного тела и оказывал благоприятный эффект. Пример 11. Композиция 1 оценивалась на эффективность при лечении мужчины в возрасте от 50 до 60 лет, у которого острота зрения при коррекции была 20/15 и очень выраженная старческая дуга. Композицию вводили пациенту по одной капле (приблизительно 0,04 мл) в каждый глаз, 2-4 раза/день в течение периода более 12 месяцев. Пациент и офтальмолог не отметили побочных эффектов, кроме небольшого временного раздражения во время введения композиции в глаз. После 16 недель пациент сообщил об улучшении остроты зрения с 20/25 до 20/15, а также об очень значимом уменьшении его старческой дуги. Пример 12. Композицию в виде глазных капель по изобретению, композицию 3, получали следующим образом: приблизительно 500 мл деионизированной (DI) воды высокой чистоты фильтровали через фильтр с размером пор 0,2 мкм и добавляли 27 г метилсульфонилметана (MSM) и 13 г дигидрата динатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA). Композицию смешивали до достижения визуальной прозрачности, рН доводили до 7,2 NaOH и объем доводили до 500 мл. Смесь выливали во флаконы по 10 мл,имеющие крышку с капельницей. На основе процентов по массе глазные капли имели следующую композицию:- 19013931 Пример 13. Композицию 3 оценивали на эффективность в течение максимального периода 120 дней. Пациентам вводили или композицию 3, или плацебо (имеющийся в продаже солевой раствор без консервантов) и инструктировали применять одну каплю (приблизительно 0,04 мл) в каждый глаз, 4 раза/день. Пациентов методом рандомизации включали в группы, получавшие или исследуемую композицию, или плацебо. В 12 глаз вводили композицию 3, тогда как в 12 глаз вводили плацебо. Исследование проводилось с двойной маскировкой, состоявшей в том, что ни пациент, ни офтальмолог не знал, получали ли они глазные капли композиции 3 или плацебо. Контрастную чувствительность измеряли в мезопических условиях, имитирующих сумерки (3 канделы/м 2), используя FACT (Функциональный контрастный тест остроты зрения) и тестер контрастной чувствительности CST 1800 Digital. Измерения проводили в одном глазу, дважды для каждого глаза и двойные измерения усредняли. В FACT используется синусно-волновая решетчатая таблица для испытания контрастной чувствительности. Таблица состоит из 5 рядов (пространственные частоты), причем каждый ряд имеет 9 уровней контрастной чувствительности. Синусно-волновые решетки представляют собой специальные типы теста, которые выглядят в виде варьирующихся размеров и контрастов серых полос, расположенных в виде кругов. Решетки в пространственной частоте А имеют вид более крупных серых полос (самая большая длина волн), в то время как решетки в пространственной частоте Е имеют вид самых маленьких серых полос (самая маленькая длина волн). Рассматривая таблицу через тестер контрастной чувствительности CST 1800 Digital, пациенты сообщают об ориентации каждой решетки: правой, верхней или левой. Для каждой пространственной частоты имеется 9 уровней контрастной чувствительности, также называемых пятнами. Уровень 1 имеет самый большой контраст, в то время как уровень 9 - самый маленький. Пациент сообщает об ориентации последней видимой решетки (с 1 по 9) для каждого ряда (А,В, С, D и Е). При балльной оценке FACT на график наносятся 9 уровней контрастной чувствительности с использованием логарифмической шкалы. Улучшение одного уровня или участка в виде пятна представляет приблизительно увеличение контрастной чувствительности в 1,5 раза. Для количественного определения улучшения контрастной чувствительности данные, полученные в 14-й день (Т 0), сравнивали с последними данными определения контрастной чувствительности для каждого пациента, который завершил по меньшей мере 60-дневный курс лечения. Из 12 глаз, в которые вводили композицию 3, 8 глаз (67%) проявили улучшение контрастной чувствительности по меньшей мере двух пятен в двух пространственных частотах, статистически значимый результат (р=0,0237). Из 13 глаз, в которые вводили плацебо, только в 3 (23%) проявилось улучшение по меньшей мере двух пятен в двух пространственных частотах. В качестве другого показателя улучшения контрастной чувствительности среднее улучшение пятен глаза, в который вводили композицию 3, сравнивали с группой глаз, в которые вводили плацебо, по каждой пространственной частоте (фиг. 5). В глазах, в которые вводили композицию 3, проявилось значимое улучшение контрастной чувствительности при всех пространственных частотах, при улучшении более чем 2,5 пятен при пространственной частоте D и улучшении более 3 пятен для пространственной частоты Е. Ни один из пациентов не сообщил о серьезных глазных или системных неблагоприятных явлениях. Пример 14. Цель. Определить степень проникновения 14C-EDTA в водянистую влагу глаза при наличии и отсутствии MSM в глазных каплях, наносимых на глаза крыс. Реагенты. Этилендиаминтетрауксусную кислоту-1,2-14 С-тетразолий закупали у компании Sigma. 14C-EDTA (удельная активность: 10,6 мКи/ммоль, радиохимическая чистота: 99% или выше). Все другие химические соединения, используемые в настоящем исследовании, имели аналитическую степень чистоты и закупались в торговой сети. Смесь ScintiVerse II (жидкий сцинтилляционный растворитель, LCS) представлял собой коктейль LSC общего назначения для водных, неводных и эмульсионных счетчиков от компании Fisher Scientific. Животные. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г получали из Central Animal CareServices at the University of Texas Medical Branch. Для обеспечения благополучия животных строго соблюдались руководства NIH (Национального института здоровья) и указание ARVO по использованию животных в исследовании глаз и зрения. Крыс умерщвляли, используя 100% диоксид углерода при низкой скорости потока (25-30% объема клетки в 1 мин) в течение примерно 2 мин. Экспериментальная процедура. Получали 100 мкл каждого из следующих трех растворов глазных капель. Раствор А: 80 мкл 5,4% MSM; 10 мкл 600 мМ EDTA (тетранатриевая соль EDTA); 10 мкл 14C-EDTA (непосредственно из флакона);- 20013931 Раствор В: 80 мкл 5,4% MSM; 10 мкл 120 мМ EDTA (тетранатриевая соль EDTA); 10 мкл 14C-EDTA (непосредственно из флакона). Раствор С: 80 мкл PBS; 10 мкл 600 мМ EDTA (тетранатриевая соль EDTA); 10 мкл 14C-EDTA (непосредственно из флакона). 8 мкл каждого раствора глазных капель наносили на роговицу каждого из глаз. Одну крысу лечили каждым раствором. Через 0,5, 2 и 16 ч из каждого глаза аспирировали водянистую влагу, используя тонкую иглу 30 калибра с инсулиновым шприцем, и выливали в 50 мкл PBS. Для солюбилизации белка образцы помещали на водяную баню при 50 С на 3 ч с последующим центрифугированием при 10000 об/мин в течение 10 мин. Определение радиоактивности образцов. Образцы добавляли во флакончики подсчета, содержащие 25 мл жидкости для подсчета ScintiVerse II, энергично смешивали и оставляли в течение 1 ч в темноте. Затем образцы подсчитывали, используя жидкостный сцинтилляционный счетчик (LS 1801 Liquid Scintillation Systems, Beckman Instruments, Inc.). Количество импульсов в 1 мин усредняли для двух глаз, в которые вводили каждый раствор, для каждой точки времени. Для оценки способности каждого раствора транспортироваться из роговицы в водянистую влагу количество 14C-EDTA в водянистой влаге сравнивали между растворами А, В и С (фиг. 6). В отсутствиеMSM очень немного EDTA присутствовало в водянистой влаге. Независимо от концентрации EDTA. В точку времени через 30 мин имелось увеличение приблизительно в 5 раз количества 14 С-EDTA в водянистой влаге в присутствии MSM. Пример 15. Исследование фармакокинетики EDTA. Цель. Определить количество EDTA, меченной 14 С, которое проникает в различные структуры глаза крысы (роговицу, водянистую влагу, хрусталик, стекловидное тело и сетчатку), при использовании глазных капель, которые содержат MSM. Сравнение двух различных композиций глазных капель, которые отличались концентрацией в них EDTA. Реагенты. Этилендиаминтетрауксусную кислоту-1,2-14 С-тетразолий закупали у компании Sigma. 14C-EDTA (удельная активность: 10,6 мКи/ммоль, радиохимическая чистота: 99% или выше). Все другие химические соединения, используемые в настоящем исследовании, имели аналитическую степень чистоты и закупались в торговой сети. Смесь ScintiVerse II (жидкий сцинтилляционный растворитель, LCS) представлял собой коктейль LSC общего назначения для водных, неводных и эмульсионных счетчиков от компании Fisher Scientific. Животные. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г получали из Central Animal CareServices at the University of Texas Medical Branch. Для обеспечения благополучия животных строго соблюдались руководства NIH (Национального института здоровья) и указание ARVO по использованию животных в исследовании глаз и зрения. Крыс умерщвляли, используя 100% диоксид углерода при низкой скорости потока (25-30% объема клетки в 1 мин) в течение примерно 2 мин. Глазные капли 1. 60,5 мМ EDTA; 10 мкл, 5 мКи 14C-EDTA; 10 мкл 600 мМ EDTA; 8 0 мкл 5,4% MSM. Глазные капли 2. 12,5 мМ EDTA; 10 мкл, 5 мКи 14C-EDTA; 10 мкл 120 мМ EDTA; 8 0 мкл 5,4% MSM. 8 мкл глазных капель 1 наносили на глаза крыс. Через 0,5, 1, 2, 4 и 16 ч крыс умерщвляли и удаляли глазные яблоки. Глазные яблоки каждый раз быстро промывали 6 раз в 5 мл солевого раствора. Водянистую влагу аспирировали из обоих глаз и выливали в 50 мкл PBS. Роговицу, хрусталик, стекловидное тело и сетчатку из каждого глаза отделяли и помещали в пробирки Эппендорфа, содержащие H2O и 0,1 Н Для солюбилизации белка образцы помещали на водяную баню при 50 С на 3 ч с последующим центрифугированием при 10000 об/мин в течение 10 мин. Образцы добавляли во флакончики подсчета,- 21013931 содержащие 25 мл жидкости для подсчета ScintiVerse II, энергично смешивали и давали возможность постоять в течение 1 ч в темноте. Затем образцы подсчитывали, используя жидкостный сцинтилляционный счетчик (LS 1801 Liquid Scintillation Systems, Beckman Instruments, Inc.). 8 мкл глазных капель 2 наносили на глаза крыс. Через 0,5, 2,4 ч крыс умерщвляли и эксперимент проводили таким же образом как для глазных капель 1. Для изучения распределения каждой композиции в структурах глаза количество нанограмм EDTA рассчитывали для каждой точки времени (фиг. 7 А). Наблюдалась зависимость от дозы, в частности, в водянистой влаге, роговице и хрусталике. Процентная доля EDTA, обнаруживаемой в каждой глазной структуре, рассчитывали для двухчасовой точки времени для глазных капель 1 (фиг. 7 В). Большая часть EDTA была обнаружена в водянистой влаге; однако композиция глазных капель 1 присутствовала во всех исследованных тканях. Пример 16. Оценка вызванной окислением токсичности в органной культуре хрусталика крыс(RLCE). Материалы. EDTA, аскорбиновую кислоту и Н 2 О 2 закупали у компании Sigma. Все компоненты среды для клеточной культуры были от компании Invitrogen. Животные. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г получали из Central Animal CareServices at the University of Texas Medical Branch. Для обеспечения благополучия животных строго соблюдались руководства NIH (Национального института здоровья) и указание ARVO по использованию животных в исследовании глаз и зрения. Крыс умерщвляли, используя 100% диоксид углерода при низкой скорости потока (25-30% объема клетки в 1 мин) в течение примерно 2 мин. Культура хрусталика. Хрусталики крыс иссекали и промывали 1% пенициллином/стрептомицином в стерильном PBS. Хрусталики культивировали в среде 199, содержащей 0,1% гентамицин, при 37 С в увлажненной атмосфере 5% CO2. Хрусталики делили на группы по 2 хрусталика каждая и подвергали контакту или с глюкозой, или с аскорбатом с Н 2 О 2 MSM и/или EDTA. Среду меняли ежедневно в течение 7 дней. Хрусталики рассматривали под микроскопом Nikon Eclipse 200 и делали фотографии, используя устройство многомерной визуализации. Получение реагентов Экспериментальная процедура. 1. Умерщвляли 7 крыс, как можно быстро удаляли глазные яблоки и клали их в пробирку, содержащую PBS с 0,1% гентамицином. 2. Сразу иссекали хрусталики и промывали PBS. 3. Все хрусталики переносили в 2 12-луночные планшеты (2 мл среды на лунку/на хрусталик). Каждую обработку выполняли в 2 лунках. Конечные концентрации для 6 обработок были следующие: 50 мМ глюкозы 50 мМ глюкозы + 4 мМ MSM 50 мМ глюкозы + 4 мМ MSM + 0,5 мМ EDTA 1 мМ аскорбата + 100 мкМ пероксида водорода 1 мМ аскорбата + 100 мкМ пероксида водорода + 4 мМ MSM 1 мМ аскорбата + 100 мкМ пероксида водорода + 4 мМ MSM + 0,5 мМ EDTA 4. Среду и реагенты меняли ежедневно. 5. Через 7 дней культивирования хрусталика делали фотографии и определяли уровень прохождения света через хрусталики. Результаты. Фотографии культуры хрусталиков показали, что существенная мутность хрусталиков крыс была вызвана и глюкозой, и аскорбатом плюс пероксидом водорода (фиг. 8 А и 8 В). MSM ослаблял помутнение хрусталика обоими окислителями; однако, MSM плюс EDTA обеспечивали самую эффективную защиту. Уровень передачи света через хрусталик использовали для количественной характеристики мутности хрусталика для каждой обработки. Согласованно с результатами фотографирования MSM повышал уровень передачи света для обоих окислительных обработок, в то время как MSM + EDTA дали большее улучшение (фиг. 9). Передача света через хрусталик, обработанный аскорбатом/пероксидом водорода(АН), составила 32% передачи света через контроль (верхний график). Передача света через хрусталики,- 22013931 обработанные аскорбатом/пероксидом водорода и MSM (АН + М) и аскорбатом/пероксидом водорода иMSM/EDTA (АН + ME), составила, соответственно, 57 и 66%. Аналогичный тип наблюдался, когда в качестве окислителя использовали 50 мМ глюкозы (нижний график). Передача света через хрусталик,обработанный глюкозой, составила лишь 45% передачи света через необработанный контроль. Передача света через хрусталики, обработанные глюкозой плюс MSM (G + М) и глюкозой и MSM/EDTA (G + ME),составила, соответственно, 68 и 92%. Пример 17. Оценка жизнеспособности клеток после вызванной окислением токсичности в эпителиальных клетках хрусталика человека (HLEC) и защиты MSM и/или EDTA Материалы. EDTA (тетранатриевую соль), содержащий двухвалентное железо сульфат аммония,хлорид трехвалентного железа, аденозин-5'-дифосфат (ADP), аскорбиновую кислоту и H2O2 закупали у компании Sigma. Все компоненты среды для культуры клеток были от компании Invitrogen. Культура клеток и обработка. Эпителиальные клетки хрусталика человека (HLEC) с увеличенной продолжительностью жизни культивировали в среде DMEM, содержащей 0,1% гентамицин с добавкой 20% фетальной телячьей сыворотки (FBS) при 37 С в увлажненной атмосфере 5% CO2. 1,0105 HLEC/мл(пассаж 5) высевали в 12-луночную планшету на ночь перед добавлением реагентов окисления и MSM и/или EDTA. Жизнеспособность клеток. Выживание клеток определяли окрашиванием трипаном синим и подсчетом гемоцитометром. Мертвые клетки окрашиваются в синий цвет, в то время как живые клетки исключают трипановый синий. Жизнеспособность клеток представлена в виде процента количества живых клеток от общего количества клеток. Получение реагентов Экспериментальная процедура. 1. Высевали 0,510 /мл HLEC (пассаж 5) в 3 12-луночные планшеты, инкубировали при 37 С в течение ночи. 2. Меняли среду на среду 2% FBS DMEM. 3. Добавляли реагенты окисления и MSM, и/илиEDTA в соответствующие лунки. Конечные концентрации были следующие: 4 мМ MSM 0,5 мМ EDTA 10 0 мкМ H2O2 50 мМ глюкозы 1 мМ аскорбата Фентон: содержащий двухвалентное железо сульфат аммония (FAS) 10 мкМ, ADP 100 мкМ, H2O2 100 мкМ Фентон: FAS 10 мкМ, ADP 100 мкМ, H2O2 100 мкМ Хлорид трехвалентного железа: FeCl3 50 мМ, EDTA 50 мМ, H2O2 200 мМ. После добавления реагентов окисления и MSM, и/или EDTA клетки инкубировали при 37 С в атмосфере 5% CO2 и 95% воздуха, собирали 0,25% трипсином-EDTA и определяли жизнеспособность клеток трипаном синим. Результаты. На фиг. 10 показан процент жизнеспособности клеток в каждом состоянии. Окислители снижали жизнеспособность клеток от 30% (фентон) и примерно 45% (аскорбат + H2O2). Добавление 4 мМ MSM увеличивало процент жизнеспособности клеток для всех окислителей, в то время как добавление 4 мМ MSM с 0,5 мМ EDTA давало большее увеличение процентной доли жизнеспособных клеток.- 23013931 Тест Хи квадрат выполняли для определения того, были ли статистически значимыми защитные эффекты MSM/EDTA. Для тех лунок, которые содержали окислитель плюс смесь MSM/EDTA, были получены статистически значимые результаты (величина Р меньше чем 0,05) для всех окислителей, кроме фентона. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ устранения или уменьшения размера агрегата макромолекул в глазу, предусматривающий введение терапевтически эффективного количества глазной композиции, состоящей из (а) нецитотоксичного хелатообразующего агента, содержащего по меньшей мере 2 отрицательно заряженных хелатообразующих атома, и (b) маскирующего заряд агента, содержащего по меньшей мере одну полярную группу и имеющего молекулярную массу менее чем 250, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту достаточно для обеспечения того, чтобы, по существу, все отрицательно заряженные хелатообразующие атомы были ассоциированы с полярной группой на маскирующем заряд агенте, при этом молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту находится в интервале от 2:1 до 12:1. 2. Способ по п.1, где нецитотоксичный хелатообразующий агент представляет собой основноаддитивную соль поликислоты. 3. Способ по п.2, где поликислота выбрана из поликарбоновой кислоты, полисульфоновой кислоты и полифосфоновой кислоты. 4. Способ по п.3, где поликислота представляет собой поликарбоновую кислоту. 5. Способ по п.4, где основно-аддитивная соль представляет собой соль щелочного металла. 6. Способ по п.1, где маскирующий заряд агент содержит 2 полярные группы. 7. Способ по п.1, где по меньшей мере один атом в полярной группе представляет собой атом кислорода. 8. Способ по п.6, где по меньшей мере один атом в каждой полярной группе представляет собой атом кислорода. 9. Способ по п.1, где хелатообразующий агент представляет собой основно-аддитивную соль тетракарбоновой кислоты, маскирующий заряд агент имеет структуру формулы (I) где R1 и R2 независимо выбраны из C1-C6-алкила, C1-C6-гетероалкила, C6-С 14-аралкила, С 2-С 12 гетероалкила и Q представляет собой S или Р. 10. Способ по п.9, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту находится в интервале от 4:1 до 10:1. 11. Способ по п.10, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту составляет примерно 8:1. 12. Способ по п.1, где маскирующий заряд агент имеет молекулярную массу менее чем 125. 13. Способ по п.1, где композиция дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель. 14. Способ по п.13, где носитель является водным. 15. Способ по п.13, где композиция вводится в форме глазных капель. 16. Способ по п.14, где композиция состоит, по существу, из хелатообразующего агента, маскирующего заряд агента и водного носителя. 17. Способ по п.1, где агрегат макромолекул включает конечные продукты поздних стадий гликирования. 18. Способ по п.1, где макромолекулы представляют собой пептидильные соединения. 19. Способ по п.18, где макромолекулы представляют собой белки. 20. Способ по п.18, где макромолекулы представляют собой липопротеины. 21. Способ по п.1, где макромолекулы представляют собой липиды. 22. Способ по п.1, где макромолекулы представляют собой полинуклеотиды. 23. Способ по п.1, где хелатообразующий агент составляет по меньшей мере 0,6 мас.% композиции. 24. Композиция для использования в офтальмологии, состоящая, по существу, из:(а) нецитотоксичного хелатообразующего агента, содержащего по меньшей мере 2 отрицательно заряженных хелатообразующих атома;(b) маскирующего заряд агента, содержащего по меньшей мере одну полярную группу и имеющего молекулярную массу менее чем 250, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту достаточно для обеспечения того, чтобы, по существу, все отрицательно заряженные хелатообразующие атомы были ассоциированы с полярной группой на маскирующем заряд агенте, при этом молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту находится в интервале от 2:1 до 12:1; и(c) фармацевтически приемлемого водного носителя. 25. Композиция по п.24, где нецитотоксичный хелатообразующий агент представляет собой основно-аддитивную соль поликислоты. 26. Композиция по п.24, где поликислота выбрана из поликарбоновой кислоты, полисульфоновой кислоты и полифосфоновой кислоты. 27. Композиция по п.26, где поликислота представляет собой поликарбоновую кислоту. 28. Композиция по п.27, где основно-аддитивная соль представляет собой соль щелочного металла. 29. Композиция по п.24, где маскирующий заряд агент содержит 2 полярные группы. 30. Композиция по п.24, где по меньшей мере один атом в полярной группе представляет собой атом кислорода. 31. Композиция по п.29, где по меньшей мере один атом в каждой полярной группе представляет собой атом кислорода. 32. Композиция по п.24, где хелатообразующий агент представляет собой основно-аддитивную соль тетракарбоновой кислоты, маскирующий заряд агент имеет структуру формулы (I) где R1 и R2 независимо выбраны из C1-C6-алкила, C1-C6-гетероалкила, C6-C14-аралкила, C2-C12 гетероалкила и Q представляет собой S или Р. 33. Композиция по п.32, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту находится в интервале от 4:1 до 10:1. 34. Композиция по п.33, где молярное отношение маскирующего заряд агента к хелатообразующему агенту составляет примерно 8:1. 35. Композиция по п.24, где маскирующий заряд агент имеет молекулярную массу менее чем 125. 36. Композиция по п.24, где носитель является водным. 37. Композиция по п.36, где композиция состоит, по существу, из хелатообразующего агента, маскирующего заряд агента и водного носителя. 38. Композиция по п.24, где агрегат макромолекул включает конечные продукты поздних стадий гликирования. 39. Композиция по п.24, где макромолекулы представляют собой пептидильные соединения. 40. Композиция по п.39, где макромолекулы представляют собой белки. 41. Композиция по п.39, где макромолекулы представляют собой липопротеины. 42. Композиция по п.24, где макромолекулы представляют собой липиды. 43. Композиция по п.24, где макромолекулы представляют собой полинуклеотиды. 44. Композиция по п.36, где композиция, кроме того, включает офтальмологически активное средство. 45. Композиция по п.24, где хелатообразующий агент составляет по меньшей мере 0,6 мас.% композиции.
МПК / Метки
МПК: A61K 9/00
Метки: расстройств, глазных, способ, лечения
Код ссылки
<a href="https://eas.patents.su/30-13931-sposob-lecheniya-glaznyh-rasstrojjstv.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Способ лечения глазных расстройств</a>
Производные индол-2-она для лечения расстройств центральной нервной системы, желудочно-кишечных расстройств и сердечно-сосудистых расстройств
Номер патента: 10865
Опубликовано: 30.12.2008
Авторы: Мезеи Тибор, Паллаги Каталин, Левелеки Чилла, Гачальи Иштван, Эдьед Андраш, Шимиг Дьюла, Сенаши Габор, Гиглер Габор, Леваи Дьёрдь, Капиллерне Дежёфи Рита, Сираи Нора, Баркоци Йожеф, Харсинг Ласло Габор, Вольк Балаж, Мориц Кристина
МПК: C07D 401/06, A61P 25/00, A61K 31/404...
Метки: индол-2-она, сердечно-сосудистых, лечения, производные, центральной, нервной, расстройств, желудочно-кишечных, системы
Формула / Реферат:
1. 3,3-Дизамещенные производные индол-2-она общей формулы (I) где R1 и R2 независимо представляют собой водород, галоген, алкил, имеющий в своем составе от 1 до 7 атомов углерода, или сульфамоил; R3 представляет собой водород или алкил с прямой или разветвленной цепью, имеющий в своем составе от 1 до 7 атомов углерода; R4 означает алкил, имеющий в своем составе от 1 до 7 атомов углерода; R5 является водородом и R6 означает фенил, необязательно...
Фармацевтическая композиция в форме глазных капель на основе азитромицина, способ ее приготовления и применение азитромицина для получения глазных капель
Номер патента: 8088
Опубликовано: 27.02.2007
Авторы: Пилотаз Фредерик, Люйк Жак
МПК: A61K 47/44, A61K 9/08, A61K 31/7048...
Метки: капель, азитромицина, композиция, глазных, получения, приготовления, способ, применение, фармацевтическая, основе, форме
Формула / Реферат:
1. Фармацевтическая композиция для лечения глазных инфекций при местном применении, отличающаяся тем, что она имеет форму глазных капель, содержащих в качестве терапевтически активного соединения азитромицин, растворенный в концентрации от 0,7 до 2 вес.% в маслянистом носителе, представляющем собой триглицериды жирных кислот с линейными цепями средней длины. 2. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что указанный носитель...
Способы лечения глазных неоваскулярных заболеваний
Номер патента: 6746
Опубликовано: 28.04.2006
Автор: Гайер Дэвид Р.
МПК: C12N 5/10, A61K 31/70, C07H 21/00...
Метки: неоваскулярных, заболеваний, лечения, глазных, способы
Формула / Реферат:
1. Способ лечения глазного неоваскулярного заболевания у пациента, где данный способ включает этапы: (a) введения указанному пациенту эффективного количества аптамера против VEGF; и (b) обеспечения пациента фототерапией. 2. Способ по п.1, в котором указанная фототерапия включает фотодинамическую терапию (PDT). 3. Способ по п.1, в котором указанная фототерапия включает термическую лазерную фотокоагуляцию. 4. Способ по п.1, в котором указанное...
Пиперазинбензотиазолы, используемые в качестве средств для лечения церебральных ишемических расстройств или расстройств цнс
Номер патента: 9682
Опубликовано: 28.02.2008
Авторы: Гайяр Паскаль, Готтелан Жан-Пьер, Витте Пьер-Ален
МПК: C07D 417/06, A61K 31/506, A61P 25/28...
Метки: пиперазинбензотиазолы, лечения, используемые, качестве, средств, расстройств, церебральных, ишемических, цнс
Формула / Реферат:
1. Пиперазинбензотиазоловые производные формулы а также их таутомеры, геометрические изомеры, оптически активные формы в виде энантиомеров, диастереомеры и их рацематы, а также их фармацевтически приемлемые соли, где R выбран из группы, включающей или состоящей из Н; C1-С6алкила; C1-С6алкилa, замещеннoгo гидроксигруппой или C1-С6алкоксикарбонилом; C1-С6алкильной группы, имeющей арильный заместитель, означающий ненасыщенную ароматическую...
Средство для профилактики и лечения расстройств репродуктивной системы человека и способ его получения
Номер патента: 11616
Опубликовано: 28.04.2009
Авторы: Борода Анатолий, Комисаренко Сергий, Даценко Зоя, Чернявский Павел, Канивец Наталия
МПК: A61K 31/355, A61K 31/198, A61K 31/665...
Метки: человека, репродуктивной, профилактики, способ, системы, расстройств, получения, средство, лечения
Формула / Реферат:
1. Способ получения средства для профилактики и лечения расстройств репродуктивной системы человека или животных, отличающийся тем, что сырье репродуктивных органов морских организмов в период их полового созревания в замороженном состоянии измельчают, после чего измельченное сырье экстрагируют этиловым спиртом, полученный экстракт упаривают до полного удаления спирта, а сухой остаток дважды перерастворяют в этиловом спирте при соотношении 100 г...
Предыдущий патент: Способ гидроразрыва пласта
Следующий патент: Сборный модульный дом из конструкций из формованного под давлением порошка
Случайный патент: Платформа с автоматическим регулированием предварительного напряжения