Очищенная композиция арабиногалактан-белка ( agp )

012208 Область техники, к которой относится изобретение Данное изобретение относится к очищенной композиции арабиногалактан-белка (AGP), выделенной посредством селективного способа из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana. Данное изобретение относится также к очищенной композиции арабиногалактан-белка (AGP), выделенной из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana, которая имеет одно или несколько из следующих действий: иммуносупрессию, ингибирование лимфопролиферации, модуляцию цитокинов,например, ингибирование IL-2, ингибирование IFN- или индукцию IL-10; ингибирование пролиферации кератиноцитов, кератолитическую активность и ингибирующую активность в тесте опухания уха мыши(MEST). Описание аббревиатур/обозначений, используемых здесь Арабиногалактан-белок: AGP. Высокомолекулярный арабиногалактан-белок: AGP-HM. Низкомолекулярный арабиногалактан-белок: AGP-LM. Краткое описание фигур Фиг. 1 является блок-схемой, суммирующей селективный способ выделения очищенной композиции AGP. Фиг. 2 показывает предлагаемую структуру композиции AGP. Фиг. 3 показывает действие композиции AGP на индукцию IL-10. Фиг. 4 показывает действие композиции AGP на процентное ингибирование IL-2. Фиг. 5 показывает действие композиции AGP на процентное ингибирование IFN-. Фиг. 6 показывает действие композиции AGP на ингибирование GM-CSF. Фиг. 7 показывает действие композиции AGP на ингибирование TNF человека. Фиг. 8 показывает действие композиции AGP на индуцированную NGF пролиферацию кератиноцитов человека. Фиг. 9 показывает действие композиции AGP на индуцированную NGF пролиферацию кератиноцитов человека. Фиг. 10 показывает действие композиции AGP на толщину кожи у стимулированных PPD морских свинок. Фиг. 11 показывает действие композиции AGP на ингибирование толщины эпидермиса, индуцированной TPA (12-О-тетрадеканоилфорбол-13-ацетатом) в мышах Balb/c. Фиг. 12 показывает действие композиции AGP на тест индуцируемого DNFB опухания уха мышей у самок мышей С 57/BL 6. Уровень техники Псориаз является кожным нарушением, характеризуемым воспалительной и атипичной гиперпролиферацией эпидермальных кератиноцитов, приводящей к гиперплазии, утолщению эпидермиса и присутствию красных чешуйчатых бляшек. Это хроническое состояние кожи узнается по его специфическим клиническим симптомам, характеризующимся имеющими границу красными бляшками, покрытыми белыми чешуйками, которые приводят к зуду и шелушению кожи. Псориаз является очень заметным заболеванием и часто поражает лицо, волосистую часть головы, туловище и конечности. Повреждения в этом хроническом заболевании обычно подвергаются ремиссии и обострениям. Хотя псориаз проявляется в виде кожного нарушения, без связывания с какой-либо теорией, авторы считают, что он является заболеванием нарушенного или дефектного клеточно-опосредованного иммунитета. Поскольку клиническое проявление псориаза в значительной степени обусловлено эпидермальными изменениями, это заболевание традиционно рассматривали как заболевание избыточной пролиферации кератиноцитов и атипичной дифференцировки. Существующие факты предполагают, что эпидермальные изменения в псориазе обусловлены действиями Т-лимфоцитов в кожных повреждениях, и чтоT-лимфоциты индуцируют или поддерживают этот процесс заболевания. Псориаз изображается как аутоиммунное заболевание, в котором активированные T-лимфоциты, продуцирующие множественные цитокины, вызывают вторичные эпителиальные отклонения от нормы. Лимфоциты с нарушенной регуляцией продуцируют цитокины, которые стимулируют пролиферацию устойчивых к апоптозу кератиноцитов. Псориатические повреждения кожи характеризуются воспалением, причем Т-клетки и нейтрофилы инфильтрируют как дерму, так и эпидермис, и избыточной чешуйчатостью, связанной с эпидермальной гиперпролиферацией и отклоняющейся от нормы дифференцировкой кератиноцитов [Reich K., Garbe С, Blaschke V., Maurer С., Middel P., Westhal G., Lippert U. and Neumann С. J. Invest. Dermatol., 2001, 116,319]. Аутоиммунные нарушения являются заболеваниями, вызываемыми организмом, продуцирующим иммунную реакцию против его собственных тканей. Причина аутоиммунных заболеваний неизвестна,но, по-видимому, существует наследственная предрасположенность во многих случаях в развитии аутоиммунного заболевания. В нескольких типах аутоиммунного заболевания (таких как ревматическая лихорадка) бактерии или вирус запускают иммунную реакцию, и антитела или Т-клетки атакуют нормальные клетки, так как они-1 012208 имеют некоторую часть их структуры, которая сходна с частью структуры инфицирующего патогенного микроорганизма. Аутоиммунные нарушения делятся на два общих типа: заболевания, которые разрушают многие органы (системные аутоиммунные заболевания), и заболевания, в которых только единственный орган или единственная ткань поражается этим аутоиммунным процессом (локализованные аутоиммунные заболевания). Некоторые из наиболее обычных аутоиммунных нарушений суммированы ниже. Воспалительный процесс включает в себя ряд событий, которые могут быть индуцированы многочисленными стимулами (например, инфекционными агентами, ишемией, взаимодействиями антигенантитело и термическим или другим физическим повреждением). Каждый тип стимула провоцирует характерную картину ответной реакции, которая представляет относительно минорную вариацию в данной картине. На макроскопическом уровне эта реакция обычно сопровождается известными клиническими признаками эритемы, отека, повышенной чувствительности и боли. Симптомы, наблюдаемые у псориатических пациентов, включают в себя гиперплазию и атипичную кератинизацию (ороговение) эпидермальных клеток, приписываемые избытку обновления клеток посредством усиленного обмена, астении воспалительной реакции в эпидермальном слое, вазодилатации и миграции и инфильтрации лейкоцитов в слои эпидермальных клеток. Однако в настоящее время признается, что эпидермальная гиперплазия является реакцией на активацию иммунной системы в очаговых участках кожи, которая, в свою очередь, опосредуется CD8+ и CD4+ Т-лимфоцитами, которые накапливаются в пораженной заболеванием коже. Действительно, псориаз признается в настоящее время как наиболее преобладающее Т-клеточно-опосредованное воспалительное заболевание человека. Таким образом, симптомами в псориазе являются, по-видимому, слишком быстрый рост кератиноцитов и сбрасывание чешуек с поверхности кожи. В псориатических повреждениях время клеточного цикла кератиноцитов уменьшается приблизительно в 8 раз (36 против 311 часов в нормальной коже) и количество делящихся клеток удваивается, приводя к гиперплазии эпидермиса. Лекарственная терапия направлена на замедление этого процесса. Было обнаружено, что терапия PUVA (пероральное введение псоралена и последующее подвергание действию длинноволнового ультрафиолетового света) истощала лимфоциты вместе с улучшениями в этом заболевании. Эти данные согласуются с ролью Т-клеток в патогенезе. Было обнаружено, что циклоспорин, известный иммуносупрессор, оказывал существенные воздействия на активность заболевания. Поскольку циклоспорин имеет основное ингибирующее действие на активацию Т-клеток, стали накапливаться аргументы, что псориаз является в основном воспалительным заболеванием.T-лимфоциты должны инфильтрировать дерму и затем прикрепляться к кератиноцитам для образования псориатической бляшки. Таким образом, молекулярная адгезия и перемещение Т-клеток становятся логичными терапевтическими мишенями, и их роль в патофизиологии имеет существенное значение. События интраваскулярной адгезии могут быть ингибированы блокированием запуска хемокинов или блокированием связывания интегринов (LFA-1 с ICAM-1). Блокада интегринов или уменьшение их поверхностной экспрессии могло бы быть важным событием для перемещения лимфоцитов, которое способствует антипсориатической терапии. Известно, что в антипсориатической активности участвуют иммуносупрессия, ингибирование пролиферации, модуляция цитокинов, например, ингибирование IL-2, ингибирование IFN- или индукция-2 012208 Количество различных и иногда токсичных схем лечения, используемых для ослабления псориаза,является свидетельством устойчивого характера этого заболевания. Так как большинство (90%) пациентов с псориазом имеют ограниченные формы этого заболевания, могут быть использованы местные обработки, которые включают в себя дитранол, препараты дегтя, кортикостероиды и недавно введенные аналоги витамина D3 (кальципотриол, кальцитриол). Меньшинство (10%) пациентов с псориазом имеют более серьезное состояние, для которого доступны ряд системных терапевтических способов воздействия. Конкретные системные способы терапии включают в себя UVB, PUVA, метотрексат, производные витамина D (ацитретин) и иммуносупрессоры, такие как циклоспорин А. Эффективность циклоспорина иFK-506 для лечения псориаза подтверждает гипотезу Т-клеток как первичной причины этого заболевания. Местное применение кортикостероидов уменьшает симптомы псориаза. Однако их введение в течение продолжительного периода времени, которое необходимо в таком лечении, вызывает тахифилаксию, так что либо должна быть увеличена доза, либо должны использоваться более сильные лекарственные средства, приводящие к атрофии и ахромазии или потере пигментации периферической нормальной кожи при местном нанесении на псориатическое повреждение [British National Formulary (BNF), March 2001, No. 41]. Применение фототерапии (облучения ультрафиолетовой радиацией) или фотохимиотерапии, которая состоит из наружного или внутреннего введения псораленов и применения длинноволновых ультрафиолетовых лучей к пораженной части, связано с недостатками, такими как возможность преждевременного старения или пигментации кожи и индукции канцерогенеза [British National Formulary (BNF), March 2001, No. 41]. Однако наружное применение каменноугольного дегтя, даже хотя оно и связано с меньшими побочными действиями, в сравнении со стероидами, является беспорядочным, и его недостатки включают в себя сильный запах, окрашивание кожи и т.д. Иногда он может вызывать стимулированный дерматит. Метотрексат, даже хотя он и является предпочтительным для лечения псориатических состояний,требует тщательного наблюдения, так как он может вызывать повреждение печени и/или уменьшение продуцирования несущих кислород эритроцитов, борющихся с инфекцией лейкоцитов и усиливающих свертывание тромбоцитов. Продолжительное использование псораленов и метотрексата значительно увеличивает риск плоскоклеточной карциномы у пациентов с псориазом [Stern R.S., and Laird N., Cancer,1994, 73, 2759] . Ретиноиды, например этретинат, принимаются внутрь пациентами, страдающими от трудноизлечимого псориаза; однако этретинат является тератогенным и, по-видимому, накапливается в теле в течение более длительного периода времени и, следовательно, они противопоказаны в случае беременности[Stern R.S., and Laird N., Cancer, 1994, 73, 2759]. Применение макроциклических иммуносупрессивных агентов, таких как циклоспорин, такролимус и аскомицин, может нарушать функцию почек или вызывать гипертензию. Возможные побочные действия гидроксимочевины включают в себя анемию и уменьшение лейкоцитов и тромбоцитов. Кальципотриол, синтетический аналог витамина D3, стал одним из широко предписываемых лечений для псориаза. Однако он вызывает значимо большее раздражение кожи, чем сильные применяемые местно кортикостероиды. Обычные вредные эффекты включают в себя раздражение повреждений и области около повреждений, раздражение лица или волосистой части головы или обострение псориаза[Ashcroft D.M., Wan Po A.L., Williams H.С. and Griffiths C.E.M., BMJ, 2000, 320, 963]. Существующие в настоящее время биотехнологические подходы к лечению псориаза относятся к прямой фармацевтически опосредованной атаке, либо на пролиферацию клеток, либо на иммунный компонент этого заболевания. Иммуносупрессивные иммунобиологические вещества, такие как Кленоликсимаб, MEDI-507, ICM3, IDEC-114, SMART Anti-CD3, Зенапакс, Амавив, Hul 134, Ханелим, HuMaxCD4,IC747, IDEC-114, IDEC-131, Нувион, DAB389IL-2, ONTAK и Этарнерцепт, о которых известно, что они блокируют иммунные реакции на различных стадиях, находятся в настоящее время в различных фазах клинических испытаний. Однако ни одна из вышеупомянутых терапий не является универсально безопасной и эффективной. Диапазон воздействия псориаза сходен с диапазоном других заболеваний, таких как депрессия, гипертензия и застойная сердечная недостаточность. Стоимость лечения этого заболевания в среднем равна 800 американских долларов на пациента в год в Соединенных Штатах, и это заболевание может вызывать значительную потерю в работоспособности [Feldman S.R., American Academy of Dermatology, August 2000]. Кроме того, это заболевание, вследствие его спорадического протекания, дает вариабельную реакцию на способы лечения, которые могут также иметь вредные действия. Таким образом, лечение псориаза является трудным. Изнуряющая природа псориаза усиливается степенью побочных эффектов, которые пациенты с псориазом соглашаются переносить, для получения ремиссии в отношении заболевания, которое, как им известно, возвратится рано или поздно. Кроме того, не говоря уже о клинических проявлениях и неудобстве, психологическое влияние этого заболевания на жизнь пациента является огромным. Псориаз является комплексным состоянием,-3 012208 влияющим на все аспекты эмоционального и физического истощения для пациента, существенно понижает качество жизни для миллионов людей по всему свету. Кроме того, он часто явно заметен, и пораженные им индивидуумы страдают от явного дистресса, смущения и дискомфорта [Fortune D.G., RichardsH.L., Main C.J. , and Griffiths C.E.M., J. Am. Acad. Dermatol., 1998, 39, 196]. Композиция, полученная из растительного источника, которая обеспечивает безопасное, хорошо переносимое и эффективное лечение псориаза и которая, кроме того, устраняет недостатки и ограничения существующих терапевтических методик, была описана в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1 авторов данного изобретения. Публикация заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1 описывает применимые in vitro и invivo иммунологические и фармакологические активности лекарственного средства/композиции, содержащей экстракт, полученный из листьев и/или стеблей растения, Agremone mexicana, необязательно в комбинации с экстрактом, полученным из плодов растения, Cuminum cyminum, для лечения и профилактики псориаза и других нарушений. Этот экстракт, который может быть водным, этанольным или водноэтанольным экстрактом, не говоря уже о проявлении полезных иммунологических и фармакологических активностей, обеспечивает значимое уменьшение коэффициента площади поражения и тяжести псориаза(PASI) с лучшей переносимостью в диапазоне нормальных пермиссивных пределов. В исследованиях доказательства концепции, проведенных на пациентах, имеющих хронический псориаз бляшечного типа,было обнаружено, что композиция, содержащая вышеупомянутый экстракт, при пероральном введении приводила к уменьшению балла PASI с 6,332,84 до 0,901,27, причем наблюдали состояние без заболевания у некоторых пациентов после 8 недель лечения. Кроме того, в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1 сообщается об острой токсичности (LD50) экстракта, полученного из листьев и/или стеблей растения, Agremone mexicana, которая, как оценено на мышах и крысах посредством перорального и внутривенного (i.v.) введения, составляет 1000 мг/кг массы тела животного с 50% смертностью. Здесь следует упомянуть, что растение Agremone mexicana состоит из различных соединений, которые включают в себя, среди прочих:v) углеводы, такие как глюкоза и фруктоза и гликозиды;vii) другие соединения, такие как цериловый спирт, -ситостерин, нитрат калия, фосфат кальция и сульфат кальция. Было обнаружено, что экстракт, полученный из листьев и/или стебля растения Agremone mexicana с использованием способа для экстракции, например, мацерации и перколяции, с использованием воды,этанола и их смесей, описанного в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1, содержит по существу все вышеупомянутые соединения. Другими словами, этот экстракт состоит из всех соединений, присутствующих в частях данного растения, используемых для экстракции, т.е. он состоит из смеси алкалоидов, флавоноидов, жирных кислот, органических кислот, аминокислот, сахаров и солей. Было обнаружено, что экстракты, полученные, следовательно, согласно способу, описанному в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1, проявляют in vitro и in vivo иммунологическую и фармакологическую активность, например, иммуносупрессию, ингибирование лимфопролиферации, модуляцию цитокинов, например, ингибирование IL-2, ингибирование IFN- и индукцию IL-10; ингибирование пролиферации кератиноцитов, кератолитическую активность, ингибирование пролиферации эндотелиальных клеток, ингибирование экспрессии молекул клеточной адгезии, таких как ICAM1, ингибирование MEST и ингибирование ферментов, таких как тирозинкиназа р 60src, о которой известно, что она участвует в антипсориатической активности.-4 012208 Кроме того, в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1 сообщается, что вышеупомянутые экстракты листьев и/или стебля растения Agremone mexicana могли бы быть фракционированы с использованием спиртовых растворителей, таких как н-бутанол и метанол, и их полученные фракции также проявляют in vitro и in vivo иммунологическую и фармакологическую активность, в том числе антипсориатическую активность. Процедура фракционирования водных экстрактов листьев и/или стебля растения Agremone mexicana, описанная в публикации заявки на патент с номером 2003/0194456 A1, выполнялась посредством многостадийной, распределительной хроматографии жидкость-жидкость, осаждения и сушки экстрактов,и она обеспечивает фракции, содержащие существенно различающиеся классы соединений в качестве основных компонентов. Например, в соответствии со способом, описанным в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1, растворимую в н-бутаноле фракцию получали добавлением н-бутанола к водному экстракту листьев и/или стебля растения Agremone mexicana, отделением н-бутанольного слоя от водной фазы с последующим промыванием н-бутанольного слоя водой и выпариванием растворителя при пониженном давлении с получением растворимой в н-бутаноле фракции в виде вязкой массы. Водный слой смешивали с метанолом с получением осаждения массы твердого вещества. Эту массу твердого вещества отделяли и растворяли в воде и лиофилизировали с получением нерастворимой в метаноле фракции. Фильтрат, полученный после отделения нерастворимого в метаноле осадка из смеси метанол-вода, после выпаривания давал растворимую в метаноле фракцию в виде массы твердого вещества. Обычно растение Agremone mexicana давало приблизительно 3-4,5% растворимой в н-бутаноле фракции; 46-54% растворимой в метаноле фракции, имеющей число основности 290-340; и 24-30% нерастворимой в метаноле фракции, имеющей число основности 350-380. В данном контексте, число основности является количеством кислоты, которое требуется для нейтрализации всех основных (щелочных) компонентов, присутствующих в 1 г пробы. Как упоминалось здесь выше, эти три фракции существенно отличаются по составу содержащихся в них соединений. Было обнаружено, что растворимая в н-бутаноле фракция содержит алкалоиды, флавоноиды и другие низкомолекулярные соединения; было обнаружено, что растворимая в метаноле фракция содержит аминокислоты, органические кислоты и соли; в то время как нерастворимая в метаноле фракция содержит сахара, органические кислоты и соли. Даже хотя экстенсивные химические исследования на протяжении нескольких лет на различных частях растения Agremone mexicana привели к выделению ряда алкалоидов, флавоноидов, аминокислот,органических кислот, жирных кислот и т.д., однако системное исследование не проводилось и не сообщались выделение и идентификация других компонентов, присутствующих в этом растении. Одним из таких компонентов, обычно обнаруживаемым в царстве растений, являются арабиногалактан-белки (AGP), которые являются по существу макромолекулами полисахаридов, в которых углевод ассоциирован или связан с белками. AGP состоит в основном из остатков арабинозы и галактозы. Они встречаются в растениях в виде полисахаридов в ассоциации с различными количествами белков и обычно содержат высокую долю углеводов со сравнительно меньшей долей белков, обычно менее чем 10% белков, хотя известны также AGP, имеющие более высокие содержания белков. AGP широко распространены в большинстве высших растений, таких как Echinacea purpurea, Nicotiana alata, Vitis vinifera,Diospyros kaki, Gladiolus gandavensis, Lolium raultiflorum [Anderson, R.L., Clarke A.E., Jermyn, M.A., Knox,R.B., and Stone, B.A., Australian J. Plant Physiol., 1977, 4, 143-158], Phaseolus vulgaris [Hawes, G.B., Adams,G.A., Phytochemistry, 1972, 11, 1461-1465] и Acacia arabica [Classen, B., Witthohn, K., and Blaschek, W.,Carbohydrate Research, 2000, 327, 497-501]. Белки AGP обладают адгезивными и удерживающими воду свойствами и реагируют на раны и инфекции в растениях. Они определяют клеточную идентичность и специфические взаимодействия. Они играют также роль в дифференцировке клеток и тканей, а также в контроле соматического эмбриогенеза. Они важны также для различных видов биологической активности [WO 01/00682 A1, 2001]. Имеются два типа AGP, а именно, AGP I и AGP II. Последний, т.е. AGP II, содержит галактозную сердцевинную часть(кор) и является высоко разветвленным, содержит обычно менее чем 10% белков, и имеет боковые цепи,высокозамещенные арабинофуранозильными остатками и иногда другими сахарами, такими как рамноза,глюкоза, манноза и т.д. Сообщалось также присутствие уроновых кислот и замещенных производных. Как упоминалось выше, даже хотя были проведены химические исследования на всех частях Agremone mexicana, ни одно исследование не было направлено на выделение, характеристику и выяснение биологических свойств AGP, присутствующих в некоторых частях этого растения. Сущность изобретения Данное изобретение включает селективный способ выделения AGP из экстракта, полученного из листьев и/или стеблей растения, Agremone mexicana, в очищенной форме, которая проявляет значительно превосходящую антипсориатическую активность и другие виды иммунологической и фармакологической активности в сравнении с этим экстрактом и фракциями листьев и/или стеблей этого растения,Agremone mexicana, описанных в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1. В частности, было обнаружено, что эта значительно превосходящая антипсориатическая активность, прояв-5 012208 ляемая очищенными AGP, полученными этим селективным способом, является в высокой степени полезной в приготовлении фармацевтической композиции, содержащей ее, и посредством этого обеспечивающей безопасное, эффективное и хорошо переносимое лечение, и образует основу данного изобретения. Таким образом, один аспект данного изобретения включает селективный способ выделения очищенной композиции арабиногалактан-белка (AGP) в высокоочищенной форме из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana. В другом аспекте данное изобретение включает очищенную композицию арабиногалактан-белка(AGP), имеющую диапазон средней молекулярной массы 10-150 кД, выделенную из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana. Другим аспектом данного изобретения является получение антипсориатической композиции для лечения псориаза, полученной из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana, которая не только является высокобезопасной, эффективной и хорошо переносимой, но, кроме того, преодолевает недостатки и ограничения существующего терапевтического лечения. Другим аспектом данного изобретения является получение очищенной композиции арабиногалактан-белка (AGP), выделенной при помощи селективного способа из листьев и/или стеблей растенияAgremone mexicana, которая проявляет полезные иммунологические и фармакологические свойства, такие как одно или несколько из таких свойств, как иммуносупрессия, ингибирование лимфопролиферации, модуляция цитокинов, например, ингибирование IL-2, ингибирование IFN- или индукция IL-10; ингибирование пролиферации кератиноцитов, кератолитическая активность и ингибирование MEST. Следующим аспектом данного изобретения является получение очищенной композиции арабиногалактан-белка (AGP), выделенной при помощи селективного способа из листьев и/или стеблей растенияAgremone mexicana, для лечения или профилактики одного или нескольких нарушений, таких как дерматит; склеродермия; экзема; воспалительные нарушения и другие аутоиммунные заболевания, такие как псориатический артрит, ревматоидный артрит, болезнь Крона, рассеянный склероз, синдром раздраженной толстой кишки (спастический колит), анкилозирующий спондилит, системная красная волчанка и синдром Шегрена; и/или аллергии, такие как астма и хроническая обструктивная болезнь легких. Еще одним аспектом данного изобретения является получение фармацевтической композиции, которая может быть использована для лечения и/или профилактики вышеупомянутых заболеваний и состояний, содержащей очищенную композицию арабиногалактан-белка (AGP), выделенную из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana. Подробное описание изобретения Если нет других указаний, все технические и научные термины имеют значение, обычно понимаемое специалистом с обычной квалификацией в области, к которой относится данное изобретение. В данном контексте фраза очищенная композиция арабиногалактан-белка (AGP) обозначает композицию, состоящую по существу только из арабиногалактан-белков, которые могут включать в себя следовые количества других компонентов, полученную из экстракта стебля и/или листьев растенияAgremone mexicana в соответствии с данным изобретением. Очищенная композиция AGP отличается от фармацевтической композиции, содержащей композицию AGP, так как эта очищенная композиция AGP не включает в себя никаких фармацевтически приемлемых эксципиентов. В публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1 авторов данного изобретения был описан способ получения экстракта из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana и фракционирование этого экстракта н-бутанолом и метанолом с получением соответствующих растворимой в нбутаноле, растворимой в метаноле и нерастворимой в метаноле фракций. Способ получения различных фракций стебля и/или листьев растения Agremone mexicana, описанный в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1, предусматривает стадии:i) получения экстракта стебля и/или листьев растения Agremone mexicana, посредством ряда процедур экстракции, однако предпочтительно посредством многостадийной последовательной мацерации и перколяции с использованием растворителей, таких как вода, этанол или их смеси, при комнатной температуре с получением соответствующих экстрактов, которые состоят из алкалоидов, флавоноидов, аминокислот, органических кислот, сахаров и солей. Эти экстракты могут быть использованы как таковые или быть подвергнуты лиофилизации с получением лиофилизированной массы, которые в обоих случаях использовали для фракционирования;ii) распределения экстракта в том виде, в каком он был получен, или раствора лиофилизированной массы в воде, полученных на стадии i), с использованием н-бутанола и отделение н-бутанольного слоя от водной фазы с последующим промыванием н-бутанольного слоя водой и выпариванием растворителя при пониженном давлении с получением вязкой массы растворимой в бутаноле фракции, которая состоит главным образом из алкалоидов, флавоноидов и других низкомолекулярных соединений;iii) смешивания и перемешивания водного слоя из стадии ii) с приблизительно шестью-семью его объемами метанола и фильтрования/центрифугирования осажденных твердых веществ и сушки с получением нерастворимой в метаноле фракции, которая состоит главным образом из полисахаридов, органических кислот и солей. Этот материал растворяли в воде и лиофилизировали с получением лиофили-6 012208 зированного порошка; иiv) концентрирования фильтрата, т.е. водного метанольного раствора из стадии iii), при пониженном давлении с получением массы твердого вещества растворимой в метаноле фракции, которая состоит главным образом из аминокислот, органических кислот и неорганических солей. Нерастворимую в метаноле фракцию, полученную в соответствии со способом, описанным в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1, выделяли с выходом приблизительно 33%. Хотя в рассматриваемом описании имеется упоминание, что эта фракция состоит из сахаров, органических кислот и солей, однако эти компоненты в то время не были охарактеризованы. Настоящими исследованиями выявлено, что нерастворимая в метаноле фракция, полученная в соответствии со способом, описанным в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1,состояла из приблизительно 3 мас.% AGP (относительно водного экстракта), причем остальные компоненты являются органическими кислотами, аминокислотами и неорганическими солями, т.е. нерастворимой в метаноле фракцией, полученной в соответствии со способом, описанным в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1, в смеси с другими компонентами. Эта нерастворимая в метаноле фракция содержит AGP, хотя в более низкой концентрации и в высокозагрязненной форме. Авторы данного изобретения обнаружили, что AGP могут быть выделены в чистой форме с выходом приблизительно 0,06% относительно стеблей и/или листьев Agremone mexicana или приблизительно 1% относительно лиофилизированного водного экстракта, полученного из него, с использованием высокоселективного способа, и что выделенный AGP проявляет превосходящую антипсориатическую активность в сравнении с активностью, получаемой при помощи способа, описанного в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1. Этот селективный способ для выделения AGP в очищенной форме из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana предусматривает стадии:a) экстракции 1 мас.ч. листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana 1-10 мас.ч. воды, C1-C3 спирта или их смеси с получением водного экстракта, который может быть, но необязательно, частично или полностью сконцентрирован или лиофилизирован;b) удаления щелочных и кислотных компонентов из этого водного экстракта, частично сконцентрированного экстракта, водного раствора полностью сконцентрированного или лиофилизированного экстракта, полученного на стадии а), подверганием этого частично сконцентрированного экстракта или водного раствора сконцентрированного экстракта ионообменной хроматографии с получением нейтрального водного экстракта;c) фракционирования нейтрального водного экстракта, полученного на стадии b), н-бутанолом с получением растворимой в н-бутаноле фракции;d) смешивания и перемешивания водных промывок из стадии с) с метанолом или этанолом и выделения осажденных твердых веществ с получением нерастворимой в метаноле или этаноле фракции; иe) подвергания нерастворимой в метаноле или этаноле фракции, полученной на стадии d), гельхроматографии и размерно-эксклюзионной хроматографии последовательно с получением очищенного арабиногалактан-белка (AGP). Этот селективный способ выделения очищенного AGP суммирован на фиг. 1. Для экстракции могут быть использованы листья и/или стебли растения Agremone mexicana. Предпочтительно, используют свежие листья, стебли или листья и стебли, и их растирают до грубой или тонкоизмельченной пасты перед экстракцией. В одном варианте осуществления этого изобретения 1 мас.ч. свежих измельченных листьев и/или стеблей Agremone mexicana экстрагируют 1-10 мас.ч. воды, C1-C3 спирта или их смеси 2-4 раза, и объединенные экстракты перколируют в течение 2-20 ч при температуре между 20-45 С. В другом варианте осуществления 1 м.ч. свежих измельченных листьев и/или стеблей Agremonemexicana экстрагируют 1-3 мас.ч. воды, C1-C3 спирта или их смеси 2-4 раза, и объединенные экстракты перколируют в течение 2-16 ч при температуре между 20-45 С. В другом варианте осуществления, одну масс. часть свежих измельченных листьев и/или стеблейAgremone mexicana экстрагируют 1-1,5 мас.ч. воды, C1-C3 спирта или их смеси 2-4 раза, и объединенные экстракты перколируют в течение 16 ч при комнатной температуре.C1-C3 спирт выбран из метанола, этанола, 1-пропанола и 2-пропанола, предпочтительно этанола. После перколяции экстракт фильтруют или центрифугируют, и фильтрат может быть частично концентрирован до определенного объема от исходного объема экстракта или может быть концентрирован досуха или может быть лиофилизирован. При частичном концентрировании экстракта его концентрируют до объема 1/5-1/10 исходного объема экстракта. При концентрировании исходного экстракта досуха или при лиофилизации высушенный экстракт или лиофилизированный порошок может быть повторно растворен в 12-50-кратном количестве по массе воды к одной части по массе высушенной/лиофилизированной массы перед ионообменной хроматографией. В предпочтительном варианте осуществления лиофилизированный водный экстракт растворяли в 12-кратном количестве по массе воды перед ионообменной хроматографией.-7 012208 Либо раствор частично сконцентрированного экстракта, либо водный раствор сконцентрированного или лиофилизированного полученного при полном концентрировании исходного экстракта подвергали затем последовательной ионообменной хроматографии на катионообменной смоле с последующей хроматографией на анионообменной смоле или в другом варианте осуществления ионообменной хроматографии на анионообменной смоле с последующей хроматографией на катионообменной смоле с получением нейтрального водного экстракта. Катионо- и анионообменные смолы используют в соотношениях 1 мас.ч к 50 мас.ч. объема используемого экстракта. Подходящие катионообменные смолы, которые могут быть использованы, включают в себя катионообменники сульфированного полистирола типа сильной кислоты и катионообменники карбоновой кислоты типа слабой кислоты. Подходящие катионообменные смолы включают в себя, но не ограничиваются ими, коммерчески доступные и обычно используемые катионообменники сульфированного полистирола типа сильной кислоты, такие как AG 50W (Bio-Rad, USA), Araberlite IR-20 (Rohm and Haas,USA), Dowex 50W (Dow Chemical Co., USA), Duolite 225 (Dia-Prosim Ltd), Permutit RS (Permutit AG,Germany) и Permutite C50D (Philips and Pain-Vermorel, France); и катионообменники карбоновой кислоты типа слабой кислоты, такие как Amberlite IRC-50 (Rohm and Haas, USA), Bio-Rex 70 (Bio-Rad, USA), Chelax 100 (Bio-Rad, USA), Duolite 436 (Dia-Prosim Ltd) , Permutit C (Permutit AG, Germany) и Permutit H и Н 70 (Permutit Co., USA). Подходящие анионообменные смолы, которые могут быть использованы, включают в себя анионообменники алифатического амина типа слабого основания и анионообменники типа сильного основания. Эти анионообменные смолы включают в себя, но не ограничиваются ими, коммерчески доступные и обычно используемые анионообменники алифатического амина типа слабого основания, такие как Amberlites IR-45 и IRA-67 (Rohm and Haas, USA), Dowex 3 (Dow Chemical Co., USA), Permutit E (PermutitAG, Germany), Permutit A 240A (Philips and Pain-Vermorel, France); и анионообменники типа сильного основания AG 2x8 (Bio-Rad, USA) , Amberlite IRA-400 (Rohm and Haas, USA), Dowex 2x8 (Dow Chemicaland pain-Vermorel, France). Полученный таким образом нейтральный водный экстракт может быть лиофилизирован, и лиофилизированная масса может быть распределена между н-бутанолом и водой для следующей стадии фракционирования. Альтернативно, этот нейтральный водный экстракт может быть использован как таковой для фракционирования с н-бутанолом. Для получения выгодного показателя затраты-эффективность предпочтительно использовать раствор нейтральной фракции, полученный после прохождения через катионо- и анионообменную смолы, как таковой для фракционирования н-бутанолом. Обычно, вышеуказанную лиофилизированную массу нейтрального экстракта распределяют в смеси воды и н-бутанола на 1 часть лиофилизированной массы. Этому раствору дают стоять и н-бутанольный слой отделяют от водной фазы. Эту стадию повторяют 2-4 раза и объединенные водные слои используют для дополнительного фракционирования метанолом или этанолом. В примере этого изобретения 1 объемную часть раствора нейтральной водной фракции, полученной после прохождения через катионо- (Amberlite IR 120) и анионо- (Amberlite IRA 400) обменные смолы,добавляют к приблизительно 10 объемным частям н-бутанола. Эти фазы смешивают, дают им стоять и нбутанольный слой отделяют от водной фазы. Эту стадию повторяют 2-4 раза и объединенные водные слои используют для дополнительного фракционирования метанолом или этанолом. Объединенную водную фазу, полученную в вышеупомянутой стадии, смешивают с метанолом или этанолом и перемешивают для осаждения нерастворимой в метаноле/этаноле фракции. Обычно метанол или этанол используют в соотношении 1-20 объемов на 1 объем водного экстракта. Осажденное твердое вещество, которое содержит AGP, выделяют общепринятыми способами, такими как декантация, фильтрование, центрифугирование и т.д., и затем сушат с получением коричневатого аморфного порошка. Полученный таким образом твердый AGP, который содержит AGP-HM и AGP-LM, дополнительно подвергают последовательной гель-хроматографии и размерно-эксклюзионной хроматографии с получением очищенного AGP-HM и AGP-LM. Гель-хроматографию проводят с использованием общепринятых способов и полимерных адсорбентов, таких как адсорбенты Amberlite, такие как XAD-2, XAD-4 или XAD-7, предпочтительно XAD-7. Неочищенный твердый AGP наносят в виде узкой полосы в верхнюю часть требуемой колонки и промывают подвижной фазой, которой является вода. Собирают фракции, содержащие AGP. Элюат, содержащий неочищенный AGP, дополнительно подвергают размерно-эксклюзионной хроматографии с использованием общепринятых способов. Sephacryl (1:25-1:50) может быть использован для получения очищенных AGP, AGP (HM), и AGP (LM) по данному изобретению. Могут быть использованы коммерчески доступные Sephacryl S-100, S-200 HR и S-300 HR, причем предпочтительным является S-200 HR. Sephacryl может быть использован в соотношении 1-2 мас.ч. к 25-250 об.ч. раствора AGP,полученного после гель-хроматографии. В одном варианте осуществления, неочищенный AGP (100 мг) растворяют в воде и наносят наSephacryl S-200 (25 мл). Эту колонку элюируют при скорости 0,5 мл/мин и собирали пятьдесят фракций. Все фракции подвергали мониторингу с использованием HPLC-ELSD. Фракции 10-20 объединяли на основе HPLC с получением AGP-HM и фракции 25-35 также объединяли с получением AGP-LM, причем эти компоненты композиции AGP имеют диапазон средних молекулярных масс 10-150 кД. После размерно-эксклюзионной хроматографии очищенный AGP по данному изобретению может быть выделен из водного раствора с использованием общепринятых способов, таких как выпаривание,лиофилизация, распылительная сушка, сушка вымораживанием и т.д. Было обнаружено, что очищенный AGP, полученный таким образом, обнаруживает диапазон средних молекулярных масс 10-150 кД. Было обнаружено, что он проявляет одно или несколько из следующих действий: иммуносупрессию, ингибирование лимфопролиферации, модуляцию цитокинов, такую как ингибирование IL-2, ингибирование IFN-, индукция IL-10, ингибирование пролиферации кератиноцитов, кератолитическая активность и ингибирование MEST. Известно, что эти механизмы участвуют в воспалительных нарушениях, аутоиммунных заболеваниях и аллергиях. Известно также, что эти механизмы участвуют в антипсориатической активности, дерматите, склеродермии, экземе и чешуйчатых зудящих бляшках. Воспалительные нарушения и аутоиммунные заболевания включают в себя псориатический артрит, ревматоидный артрит, болезнь Крона, рассеянный склероз, синдром раздраженной толстой кишки (спастический колит), анкилозирующий спондилит, системную красную волчанку, синдром Шегрена. Типы псориаза включают в себя бляшковый псориаз, каплевидный псориаз, пустулезный псориаз и псориаз ногтей. Аллергии включают в себя астму и хроническую обструктивную болезнь легких. Индукция IL-10 полезна также в других хронических рецидивирующих и других кожных нарушениях, в которых участвует кожный лимфоцитарный антиген или кожный лейкоцитарный антиген. Очищенная композиция арабиногалактан-белка (AGP) проявляет превосходную антипсориатическую активность in vitro и in vivo, опосредуемую через индукцию IL-10. Очищенный AGP по данному изобретению (который является водорастворимым), полученный после размерно-эксклюзионной хроматографии, например, через сефакрил, состоит из нескольких фракций различающихся молекулярных масс. Такие фракции имеют средние молекулярные массы, такие высокие,как 115-150 кД, и такие низкие, как 10-15 кД. AGP, имеющие высокие молекулярные массы, называютAGP-HM, тогда как AGP с низкими молекулярными массами называют AGP-LM. Таким образом, типичная композиция AGP состоит из AGP-HM и AGP-LM в варьирующихся пропорциях. Должно быть понятно, что вышеупомянутый AGP образуется через биогенный путь, где углеводы/моносахариды постоянно ищут белок для образования ковалентных связей, что приводит к низкомолекулярным (AGP-LM) и высокомолекулярным (AGP-HM) AGP. Такое образование ковалентных связей постоянно расширяется, и закончится ли оно в одном конкретном способе AGP-LM со средней молекулярной массой, меньшей чем 10 кД, или AGP-HM со средней молекулярной массой, большей чем 150 кД, будет зависеть от нескольких факторов, которыми являются, чтобы назвать несколько, природа используемых частей растений,т.е. использовали ли для экстракции свежие листья или стебли растения Agremone mexicana, условия сбора этих листьев, т.е. собирали их в сезон дождей или нет и т.д. Таким образом, может быть получена очищенная композиция AGP, имеющая среднюю молекулярную массу, находящуюся за пределами диапазона 10-150 кД, с использованием способа по данному изобретению в зависимости от вышеуказанных факторов. Ввиду вышесказанного, композиция AGP с молекулярной массой вне диапазона 10-150 кД будет все еще находиться в объеме данного изобретения. Примерами таких композиций AGP являются композиции с нижней границей средней молекулярной массы 9 кД или композиции AGP с верхней границей средней молекулярной массой 155 кД. Основная масса AGP, полученная данным способом, состоит из углеводов с меньшей долей белков. Углеводными компонентами AGP являются арабиноза, рамноза, метилированная уроновая кислота, манноза, галактоза, глюкоза и другие неидентифицированные сахара, которые связаны с белковым компонентом, состоящим из различных аминокислот, которые идентифицированы как аспарагин, глутамин,гидроксипролин, серин, глицин, гистидин, аргинин, треонин, аланин, пролин, тирозин, валин, метионин,изолейцин, лейцин, лизин, фенилаланин и т.д., как будет очевидно из таблиц I и II в данном описании. Отмечается, что не только гликозильный состав как AGP-HM, так и AGP-LM является сходным, т.е. они обнаруживают сходство в соотношении моносахаридов и белков, присутствующих в них, но и гликозильная связь в обоих случаях является также одинаковой. Далее, отмечается, что биологическая активность обоих компонентов с двумя разными молекулярными массами является сравнимой и не обнаруживает большой вариации. То есть, можно сказать, что очищенный AGP-LM, имеющий молекулярную массу 10 кД, проявляет одно или несколько из следующих действий: иммуносупрессию; ингибирование лимфопролиферации; модуляцию цитокинов, такую как ингибирование IL-2, ингибирование IFN-, индукция IL-10; ингибирование пролиферации кератиноцитов, кератолитическую активность и ингибирование MEST и, наиболее важно, антипсориатическую активность, которая сравнима с активностью, проявляемой очищенным AGP-HM, имеющим молекулярную массу 150 кД. Композиция AGP по данному изобретению состоит из AGP (как AGP-HM, так и AGP-LM), который-9 012208 по существу не содержит других компонентов, присутствующих в экстракте этого растения, которые являются смесью алкалоидов, флавоноидов, органических кислот, аминокислот, сахаров, полисахаридов,белков, протеогликанов (за исключением AGP) и солей. В данном контексте, термин по существу не содержит включает в себя композиции AGP, содержащие приблизительно 0,0001 мас.%, приблизительно 10 мас.% других компонентов экстракта этого растения. н-Бутанольная фракция содержит смесь алкалоидов (таких как протопин, протопина нитрат, берберин, берберина нитрат, криптопин, аллокриптопин, коптизин, сангвинарин, дигидросангвинарин, норсангвинарин, 6-ацетонилдигидросангвинарин, дигидрохелеритрин, хелеритрин, норхелеритрин, 6-ацетонилдигидрохелеритрин, (-)-хейлантифолин, (-)скоулерина метогидроксид, (-)стилопина метогидроксид, (-)тетрагидропалматина метогидроксид, ретикулин, талифолин, мурамин, аргемонин, нораргеминин, хеллеритрин и оксигидрастинин), флавоноиды (такие как изорамнетин, изорамнетин-3 глюкозид и изорамнетин-3,7-диглюкозид) и другие низкомолекулярные соединения; растворимая в метаноле фракция содержит аминокислоты (такие как гистидин, лизин, глутаминовая кислота, глицин, аланин, лейцин, валин, фенилаланин, тирозин, треонин, аргинин, серин, аспарагин, цистеин, метионин, триптофан, гидроксипролин, пролин и аспарагиновая кислота), сахара и некоторые соли; и нерастворимая в метаноле фракция содержит некоторые органические кислоты (такие как янтарная,лимонная, винная и яблочная), моносахариды, полисахариды, протеогликаны (в том числе AGP) и соли. В одном варианте осуществления этого изобретения, композиции AGP содержат менее чем 1 мас.% других компонентов экстракта этого растения. Обнаружено, что очищенная композиция AGP, выделенная по способу в соответствии с данным изобретением, является превосходным индуктором для IL-10 в ConA-активированных PBMC человека. Она производила приблизительно 371% индукцию в концентрации 200 мкг/мл, что значительно превышало величину приблизительно 171%, проявляемую нерастворимой в метаноле фракцией, полученной по способу, описанному в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1 при той же самой концентрации 200 мкг/мл. Более конкретно, выделенная композиция AGP отличается тем, что она проявляет индукцию IL-10,равную или большую, чем индукция, проявляемая нерастворимой в метаноле фракцией, полученной по способу, описанному в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1, даже при очень низкой концентрации 0,2-2,0 мкг/мл. Сравнение действия концентрации AGP по данному изобретению на индукцию IL-10 ConAиндуцированными PBMC человека с действием нерастворимой в метаноле фракции, полученной по способу, описанному в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1, суммировано в табл.IA. Сравнение действия композиции AGP по данному изобретению на индукциюIL-10 ConA-индуцированными PBMC человека с действием нерастворимой в метаноле фракции,полученной по способу, описанному в публикации заявки на патент США с номером 2003/0194456 A1 Таблица IA Величины изображены в виде процентного увеличения от фона относительно контроля.Средняя %-ная индукция, проявляемая нерастворимой в метаноле фракцией, полученной по способу, описанному в заявке на патент США 2003/0194456 Al, была равна 171% при концентрации 200 мкг/мл. Такая крайне сильная активность, проявляемая AGP, полученным по описанному здесь выше способу, позволяет вводить его в существенно уменьшенной концентрации 1/100-1/1000 дозы, требуемой- 10012208 для введения с использованием экстрактов/фракций, полученных по способу, описанному в заявке на патент США 2003/0194456 A1, что обеспечивает эффективное в отношении затрат, действенное и хорошо переносимое лечение псориаза и других нарушений. Данное изобретение обеспечивает фармацевтические композиции, которые содержат эффективное количество очищенной композиции арабиногалактан-белка (AGP), имеющей диапазон средних молекулярных масс 10-150 кД, выделенной из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana по селективному способу, описанному здесь выше, в смеси с фармацевтически приемлемыми эксципиентами. Композиции по данному изобретению являются безопасными, эффективными и хорошо переносимыми. Фармацевтические композиции, пригодные для использования в данном изобретении, включают в себя композиции, в которых активные ингредиенты содержатся в количестве, эффективном для достижения желаемой цели. Термин "эффективное количество" обозначает такое количество композицииAGP, которое будет вызывать биологическую или медицинскую реакцию ткани, клетки, системы, животного, млекопитающего не человека или млекопитающего-человека, которая должна быть получена. Предполагается, что это относится к ситуациям, в которых может быть замедление, прерывание, задержка или остановка прогрессирования заболеваний и/или состояний, описанных здесь, но необязательно указывает на полную элиминацию всех симптомов заболевания и состояния, но включает в себя профилактическое лечение заболеваний и/или состояний. Композиция AGP по данному изобретению может быть изготовлена в подходящей дозированной форме в смеси с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами, такими как носители, разбавители, наполнители и т.п. Подходящими дозированными формами являются формы,пригодные для перорального введения или местного введения. Неограничивающими примерами таких дозированных форм являются жидкости, сухой порошок или порошкообразный концентрат, капсула,таблетка, шарик, гранулы, гели, мази, кремы, эмульсии, суспензии, дисперсии, лосьоны, пилюли и т.п. Обычно типичная фармацевтическая композиция для перорального введения содержит композициюAGP в качестве активного ингредиента в количестве в диапазоне 50-5000 мг, более предпочтительно 200 мг. Обычно типичная фармацевтическая композиция для местного введения содержит композициюAGP в качестве активного ингредиента в количестве в диапазоне 0,1-10 мас.%, более предпочтительно 2 мас.%. Профилактическая или терапевтическая доза композиции AGP или композиций, содержащих композицию AGP, равна 50-5000 мг в день, предпочтительно равна дозе 200 мг в день. Эта доза может вводиться в виде однократной дозы или в виде разделенной дозы. Однако точное приготовление, способ введения и доза могут быть выбраны пациентом или профессионалом в области здравоохранения в связи с состоянием пациента и в зависимости от того, поражен ли этот пациент в данный момент заболеванием или состоянием, или это лечение является профилактическим. Профилактическая доза может вводиться пациенту, который имеет риск развития заболевания или состояния. Факторы риска включают в себя, но не ограничиваются ими, генетические и связанные с окружающей средой факторы риска. Предпочтительно вводить эту фармацевтическую композицию в дозе,которая будет давать желаемый результат без вызывания нежелательных побочных эффектов. В данном контексте термин пациент обозначает животное, млекопитающее, не являющееся человеком, или человека. Могут быть приготовлены подходящие дозированные формы для перорального введения и местного нанесения, содержащие композицию AGP по данному изобретению в смеси с фармацевтически приемлемыми носителями. Подходящие формы для перорального введения включают в себя таблетки, капсулы, порошкообразный концентрат, сиропы, эликсиры или суспензии. Подходящие формы для местного нанесения включают в себя мази, кремы, лосьоны, масла или системы трансдермальной доставки лекарственных средств. Подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты включают в себя сахара, такие как лактоза, сахароза, манит, сорбит и ксилит; крахмалы, такие как кукурузный крахмал, крахмал маниоки и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и метилцеллюлоза; фосфаты кальция, такие как дикальцийфосфат и трикальцийфосфат; сульфат натрия; сульфат кальция; поливинилпирролидон; поливиниловый спирт; стеариновую кислоту; растительные масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, кунжутное масло, оливковое масло и кукурузное масло; неионогенные, катионогенные и анионогенные поверхностно-активные вещества; полимеры этиленгликоля; -циклодекстрин; жирные спирты; гидролизованные твердые вещества злаков; а также другие нетоксичные совместимые наполнители, связующие вещества, разрыхляющие агенты, буферы,консерванты, антиоксиданты, смазывающие вещества, ароматизирующие агенты и т.д. Композиции по данному изобретению готовят в соответствии с общепринятыми способами, известными в данной области. Эти композиции являются фармацевтически приемлемыми в том смысле, что они пригодны для использования людьми и/или животными.- 11012208 Композиции AGP и фармацевтические композиции по данному изобретению применимы в лечении и/или профилактике заболеваний и состояний, описанных здесь. Композиция AGP по данному изобретению или фармацевтическая композиция, содержащая композицию AGP по данному изобретению, может быть использована в лечении и/или профилактике псориатических кожных болезней, таких как псориаз, в том числе бляшковый псориаз, каплевидный псориаз,пустулезный псориаз и псориаз ногтей, предусматривающем введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, или млекопитающему при риске псориатических кожных болезней эффективного количества композиции AGP или фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество очищенной композиции арабиногалактан-белка (AGP). Композиция AGP или фармацевтическая композиция, содержащая композицию AGP, может быть использована в лечении или профилактике воспалительных заболеваний; аутоиммунных заболеваний,таких как псориатический артрит, ревматоидный артрит, болезнь Крона, рассеянный склероз, синдром раздраженной толстой кишки (спастический колит), анкилозирующий спондилит, системная красная волчанка и синдром Шегрена; аллергий, таких как астма и хроническая обструктивная болезнь легких. Лечение или профилактика предусматривает введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, или млекопитающему, находящемуся при риске развития или испытывающему появление одного из этих нарушений или заболеваний, эффективного количества композиции AGP или фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество очищенной композиции арабиногалактан-белка (AGP). Композиции по данному изобретению, которые вызывают иммуносупрессию, также применимы для пациентов, которые ожидают трансплантацию органа или были подвергнуты трансплантации органа. Выяснение структуры и характеристика композиции AGP Определение содержания углеводов композиции AGP Общее содержание углеводов композиций AGP по данному изобретению определяли способом фенол-серная кислота с использованием D-галактозы в качестве стандарта. Композицию AGP, AGP-HM иAGP-LM растворяли отдельно в концентрации 0,16 мг/мл в дистиллированной воде. К 1 мл каждого из этих трех растворов, взятых по отдельности, добавляли 1 мл 5% раствора фенола и 10 мл серной кислоты. Растворы смешивали при помощи вортекса, давали им остыть до комнатной температуры. Оптическую плотность измеряли при 480 нм. Было обнаружено, что содержание углеводов этих композицийAGP было в диапазоне 45-98%, соответственно, в сравнении с галактозным стандартом. Определение содержания белка композиции AGP Общее содержание белка композиций AGP по данному изобретению определяли по методу Бредфорда. Содержание белка композиции AGP, AGP-HM и AGP-LM было в диапазоне 2-20%. Аминокислотные компоненты композиции AGP были идентифицированы как аспарагин, глутамин, гидроксипролин, серин, глицин, гистидин, аргинин, треонин, аланин, пролин, тирозин, валин, метионин, изолейцин,лейцин, лизин и фенилаланин, при помощи аминокислотного анализатора с использованием стандартов. Для идентификации гликозильного и аминокислотного содержимого композиции AGP с использованием гидролиза и TCX брали 20 мг нейтральной фракции, полученной после размерно-эксклюзионной хроматографии, и гидролизовали 2 M трифторуксусной кислотой (ТФУ, 200 мкл) в закрытом флаконе. Этот флакон нагревали при 100 С в течение 1 ч, концентрировали и лиофилизировали. Тонкослойную хроматографию (TCX) этой смеси выполняли со стандартными пробами сахаров и аминокислот. Наблюдаемые результаты обнаруживали присутствие моносахаридов, таких как арабиноза, галактоза, глюкоза,рамноза и манноза. Наблюдали также аминокислоты, такие как валин, фенилаланин, серин, GABA, изолейцин и гистидин. Идентификация гликозильного содержимого композиции AGP Анализ гликозильного состава выполняли объединенной газовой хроматографией/массспектрометрией (GS/MS) пер-О-триметилсилил (TMS)-производных моносахаридных метилгликозидов,полученных из AGP-HM и AGP-LM кислотным метанолизом. Метилгликозиды получали сначала из сухой пробы AGP метанолизом в 1 M HCl в метаноле и уксусном ангидриде при 80C (18-22 ч) с последующим повторным N-ацетилированием с пиридином и уксусным ангидридом в метаноле (для детектирования аминосахаров). Затем эти пробы пер-Отриметилсилилировали обработкой Tri-Sil (Pierce) при 80 С (0,5 ч). Эти процедуры проводили, как описано ранее York, W.S., Darvill, A.G., McNeil, M., Stevenson, T.Т., and Albersheim, P., Methods Enzymol.,1985, 230, 1-15 и Methods Enzymol., 1985, 118, 3-40.GS/MS-анализ TMS-метилгликозидов выполняли на HP 5890 GC interfaced to 5970 MSD с использованием капиллярной колонки коллоидального диоксида кремния (30 м 0,25 мм ID) All Tech EC-1. Таблица I суммирует гликозильные компоненты композиции AGP.- 12012208 Гликозильные компоненты композиции AGP Таблица I Определение гликозильной связи композиции AGPNaOH-способ: для анализа гликозильных связей пробу композиции AGP перметилировали, деполимеризовали, восстанавливали и ацетилировали; и полученные частично метилированные ацетаты альдитов (PMAA) анализировали газовой хроматографией/масс-спектрометрией (GS/MS) , как описано ранее [York, W.S., Darvill, A.G., McNeil, M., Stevenson, T.Т., and Albersheim, P., Methods Enzymol., 1985,230, 1-15 и Methods Enzymol., 1985, 118, 3-40]. Сначала аликвоту этой пробы перметилировали (по способу Ciukanu and Kerek, Carbohydr. Res.,1984, 131, 209-217) с использованием обработки гидроксидом натрия и метилиодидом в сухом ДМСО. Это перметилирование повторяли дважды для ускорения завершения метилирования этого полимера. После обработки пробы перметилирсванный материал гидролизовали с использованием 2 M трифторуксусной кислоты (2 ч в запаянной пробирке при 121 С), восстанавливали NaBD4 и ацетилировали с использованием уксусной кислоты/пиридина. Полученные PMAA анализировали на Hewlett Packard 5890GC interfaced to 5970 MSD (масс-селективный детектор, режим ионизации при столкновении электронов); разделение выполняли на 30 м капиллярной колонке с коллоидальным диоксидом кремния в качестве связанной фазы Supelco 2330. Таблица II суммирует гликозильные связи в виде процентов. Гликозильные связи композиции AGP Таблица II- 13012208 Определение молекулярной массы композиции AGP Композицию AGP, AGP-HM и AGP-LM анализировали с использованием водного прибора GPCWaters, Model Alliance 2690, который оборудован интегрированным узлом манипулирования растворителем и пробой и детектором показателя преломления, содержащим термически защищенную проточную ячейку и оптику с противоточным теплообменником для улучшения стабильности фона. Хроматографическая рабочая станция включает в себя программное обеспечение для сбора данных и управления данными и программное обеспечение Millenium для обработки данных. GPC-колонки получены из TosohCorporation (TSK-GEL PWQ Туре) и состоят из гидрофильного полимера на основе полужесткого геля. Предел исключения для полисахаридов (декстран) находится в диапазоне 1000-7000,00 молекулярной массы. Эти колонки предназначены для аналитического и препаративного разделения синтезированных водорастворимых полимеров, олигомеров и биологических веществ, таких как полисахариды, нуклеиновые кислоты, белки, пептиды и т.д. Пуллулановый набор состоит из проб полисахаридов различной молекулярной массы для калибровки колонок.GPC-способ был разработан с использованием варьирующихся аналитических условий, таких как колонки различной пористости, разные концентрация и природа подвижной фазы, скорость тока, чувствительность детектора и т.д. Оптимальное разделение с пробой полисахаридов получают с использованием 0,2 M раствора нитрата натрия, и приведенные далее условия были подходящими аналитическими условиями для характеристики лекарственной молекулы на основе полисахарида. Молекулярную массу композиции AGP определяли сравнением времени элюции с использованием размерно-эксклюзионной хроматографии. На основе этого сравнения было обнаружено, что диапазон средних молекулярных масс композиции AGP был 10-150 кД. Молекулярные массы AGP3-HM и AGP-LM определяли также сходным образом. На основе этого сравнения было обнаружено, что средняя молекулярная масса этих компонентов была 13 и 115 кД, соответственно. Инфракрасный спектр с преобразованием Фурье (FT-IR) композиции AGP ИК-спектр AGP-HM данного изобретения, измеренный с использованием спектрометра с преобразованием Фурье (8201 PC Shimadzu) с использованием нуджоловой пасты в KBr-гранулах, показывает широкую полосу поглощения при 3400 см-1, указывающую на присутствие гидроксильных групп, и при 2850-2960 см-1, обнаруживающую растяжение СН-связей.h) 1H-ядерный магнитный спектр композиции AGP. 1 Н-ЯМР-спектр AGP по данному изобретению регистрировали в D2O при 500 МГц в спектрометре ядерного магнитного резонанса Brucker DRX 500. Проводили экстенсивное присваивание всех основных типов связей, детектированных при помощи анализа метилирования. В 1H-ЯMP-спектре детектировали сигналы H-1, соответствующие остаткам -DGal-p ( 4,22-4,47) и остаткам -L-Ara-f ( 5,17-5,33). Были многочисленные сигналы 3,53-4,22, которые соответствовали Н-2-Н-6 остатков -D-Gal р, Н-2-Н-5 малых остатков глюкозы, рамнозы и маннозы. Для разрешения и приписывания этих сигналов к конкретным остаткам проводили двухмерные гомо- и гетероядерные эксперименты. Приписывание различных типов связей к каждой из этих спиновых систем,идентифицированных в этих 2D-спектрах, подтверждали как данными по связям, представленными в табл. II, так и сравнением с данными ЯМР, сообщенными в литературе для других AGP. Аномерные протоны: Аномерные протоны, наблюдаемые при 5,33 и 5 5,17, приписывали концевому и 5-связанному -L-Ara f остаткам, соответственно. Сигнал при 5,17 также приписывали концевому -L-Rha p и 5,10 приписывали 4-связанному -L-Rha р. Подобным образом, сигнал при 4,61 приписывали 3-связанному -L-Rha p. Сигнал при 4,56 приписывали 6-связанному -D-Gal р. Сигнал при 4,61 приписывали 3-связанному -D-Gal p и сигналы при 4,56 и 4,57 приписывали концевому D-Gal р и 3-, 6-связанным -D-Gal р. Протоны H-2. Сигналы при 4,31 и 4,22, приписывали H-2 концевого и 5-связанного -L-Ara f остатка, соответственно. Далее сигнал при 3,45 приписывали концевому -D-Gal р, тогда как сигнал при 3,74 приписывали 3-, 6- и 3, 6-связанным -D-Gal р остаткам. Сигналы при 4,03, 3,74 и 3,57 приписывали протонам Н-2 4-связанного, 3-связанного и концевого -L-Rha p остатков, соответственно. Протоны Н-3. Сигнал при 4,03 приписывали концевому и 5-связанному -L-Ara f остаткам. Далее сигнал при 3,81 приписывали концевому и 6-связанному -D-Gal р. Подобным образом, сигнал при 4,31 приписывали 3- и 3,6-связанным -D-Gal р остаткам. Сигналы при 3,93, 3,63 и 3,57 приписывали 4-связанному, концевому и 3-связанному -L-Rha p, соответственно. Протоны H-4. Сигнал при 4,22 приписывали концевому и 5-связанному -L-Ara f. Сигнал при 3,63 приписывали 3- и 6-связанным остаткам -D-Gal р. Далее, сигналы при 3,86 и 4,03 приписывали концевому и 3,6-связанным остаткам -D-Gal р, соответственно. Подобным образом, сигналы при 3,63,3,09 и 2,82 приписывали 4-связанному, 3-связанному и концевому остатку -L-Rha p. Протоны Н-5. Сигнал при 3,81 приписывали 6- и 3,6-связанному -D-Gal р. Подобным образом,сигнал при 4,03 приписывали концевому и 3-связанному остатку -D-Gal p. Сигналы при 3,91 и 3,93- 14012208 приписывали концевому и 5-связанному -L-Ara f. Сигналы при 4,22, 4,03 и 3,09 приписывали Н-5 концевого, 4-связанного и 3-связанного -L-Rha p. Сигналы при 4,03, 3,45 и 4,03 могли бы быть приписаны Н-5 3-связанного -D-Gal р и концевого -D-Gal р остатков, соответственно. Протоны Н-6. Сигнал при 3,93 приписывали 6- и 3,6-связанному -D-Gal р. Сигналы при 3,91 и 3,81 приписывали концевому и 3-связанному -D-Gal р, соответственно. Протоны метила при 1,03, 1,34 и 1,40 приписывали 3-связанному, 4-связанному и концевому -L-Rha p. Приведенные выше приписывания дополнительно подтверждали проведением экспериментов HOMOCOSY. Аминокислотные остатки. Метильную группу для аминокислот валина, лейцина и изолейцина наблюдали при 1,03, тогда как метилы, приписываемые треонину и аланину, были расположены при 1,34 и 1,40, соответственно. Протоны C, C (C-H, CH2), C (CH2) и С (CH2) аргинина, аспарагина, глутамина, изолейцина,лейцина, лизина, метионина, пролина и валина наблюдали между 1,3 и 2,8. Протоны C (CH2, CH), C, С аспарагина, гистидина, фенилаланина и тирозина наблюдали между 2,8 и 3,5. Протоны C аланина, аргинина, глутамина, глицина, изолейцина, лейцина, лизина, метионина, треонина и валина наблюдали между 3,5 и 3,9. Протоны C аспарагина, гистидина, фенилаланина, пролина, серина, тирозина и протоны C серина и треонина наблюдали между 3,90 и 4,2. Слабые сигналы в слабом поле от 6,6 до 7,5 приписывали N-H и ароматическим протонам фенилаланина и тирозина.i) 13 С-ядерный магнитный спектр композиции AGP. Аномерные углероды: В 13 С-ЯМР-спектре сигналы при 109,10 и 107,37 приписывали аномерным углеродам концевого и 5-связанного -L-Ara f остатка. Сигналы между 103-102 приписывали аномерным углеродам концевого, 3-связанного, 6-связанного и 3,6-связанных -D-Gal p остатков. Те же самые перекрывающиеся сигналы между 103 и 102 приписывали аномерным углеродам 4-связанного -D-Glu р, 4-связанного -D-xyl р, концевого -D-Glc p и 3-связанного -L-Rha p. С-2. Сигналы при 81,97 приписывали 5-связанному -L-Ara f. Сигналы для С-2, наблюдаемые при 72,94 и 72,72, приписывали концевому и 6-связанному -D-Gal р остаткам, соответственно. Подобным образом, сигналы С-2, приписываемые концевому и 6-связанному -D-Glc р, наблюдали при 74,81,74,60 и 73,33, соответственно. Сигналы С-2 в остатках -L-Rha р, приписываемые концевому, 3 связанному и 4-связанному остаткам, наблюдали при 80,02, 76,55 и 70,68, соответственно. Сигнал при 81,24 приписывали 2-связанному остатку -D-Man p. С-3. Сигнал при 76,55 приписывали концевому и 5-связанному -L-Ara f. Сигнал при 74,81 приписывали концевому и 6-связанному -D-Gal р. Далее, сигнал при 81,97 приписывали 3- и 3,6 связанному остатку -D-Gal р. Сигналы при 76,55 и 74,81 приписывали концевому, 4-связанному и 6 связанному остатку -D-Glc р. Подобным образом, сигналы при 80,02, 76,55 и 70,6 приписывали концевому, 3-связанному и 4-связанному остатку -L-Rha p, соответственно. С-4. Сигнал при 83,85 приписывали концевому и 5-связанному остатку -L-Ara f. Сигнал при 70,15 приписывали концевому остатку -D-Gal р. Сигнал при 70,68 приписывали 3- и 6-связанному остатку -D-Gal р. В то же время сигнал при 73,33 приписывали 3,6-связанному остатку -D-Gal р. Сигналы при 80,02, 70,68 и 70,15 приписывали С-46-связанного и концевого -D-Glc р, соответственно. Сигналы при 81-83 приписывали С-43-связанного, 4-связанного и концевого остатка -L-Rha p. С-5. Сигнал, обусловленный С-55-связанного -L-Ara f, наблюдали при 69,17, тогда как сигнал концевого -L-Ara f наблюдали при 61,25. Сигналы С-5, обусловленные 3-связанным, 6-связанным и концевым остатком -D-Gal р, наблюдали между 74 и 77, тогда как сигналы С-5, обусловленные концевым остатком -D-Glc р, наблюдали при 75-76. С-6. Сигналы С-6, обусловленные 6- и 3,6-связанными остатками -D-Gal p, наблюдали при 69,17,тогда как 3-связанные и концевые сигналы наблюдали при 60,93 и 61,25, соответственно. Сигнал, обусловленный С-6 в остатках -D-Glc р, для концевых остатков наблюдали между 60 и 62, а сигнал при 70,1 наблюдали для 6-связанного остатка. Метилы. Эти сигналы, наблюдаемые при 16,7, 19,9 и 22,2, приписывали метильным группам -LRha p. Приведенные выше приписывания дополнительно подтверждали проведением экспериментов- 15012208 Сигнал при 31,01 приписывали C (CH2) аргинина, метионина, лизина, пролина и C (CH2) глутамина. Сигнал при 38,05 приписывали C (CH2) аспарагина, лейцина, фенилаланина, тирозина, C глицина и C (CH2) аргинина и лизина. Сигнал при 48,45 приписывали C-протону аланина, аспарагина,лейцина и C пролина. Сигнал при 59,81 приписывали С-протонам аргинина, цистина, глутамина, гистидина, изолейцина, лизина, метионина, фенилаланина, серина и тирозина. Сигнал при 60,9 приписывали C-протону валина и треонина, тогда как сигнал при 61,25 приписывали С-протону пролина и C-протону серина. Сигнал при 68,38 приписывали C (CH) треонина. Сигналы между 108 и 140 приписывали олефиновым протонам гистидина и ароматическим протонам фенилаланина. Сигнал при 155,64 приписывали C аргинина и С-4 тирозина, тогда как сигнал карбонила при 166,19 приписывали глутамину. В районе слабого поля сигналы, наблюдаемые между 171 и 175, приписывали карбонильным группам аминокислот аланина, аргинина, аспарагина, глутамина, глицина, гистидина, изолейцина, лейцина, лизина, метионина, фенилаланина, пролина, серина, треонина и тирозина. В заключение можно сказать, что структура AGP-HM состоит из 6-связанной галактопиранозы и 3,6-связанной галактопиранозы в качестве скелета и арабинофуранозильного, арабинопиранозильного,рамнопиранозильного, глюкопиранозильного и галактопиранозильного остатков в концевых положениях. Далее, AGP содержит 3-связанный, 4-связанный рамнопиранозильный, 2-связанный маннопиранозильный, 2-связанный глюкопиранозильный, 3-связанный, 4-связанный галактопиранозильный, 6 связанный, 3,6-связанный глюкопиранозильный и 4-связанный ксилопиранозильный остатки вместе с метилуроновой кислотой. Аминокислотные компоненты композиции AGP были идентифицированы как аспарагин, глутамин, гидроксипролин, серин, глицин, гистидин, аргинин, треонин, аланин, пролин, тирозин, валин, метионин, изолейцин, лейцин, лизин и фенилаланин. Однако сайты присоединения аминокислот не были определены. AGP-LM также обладает сходной структурой, но отличается по молекулярной массе. На основе приведенных выше данных для композиции AGP была предложена следующая структура (фиг. 2). Как AGP-HM, так и AGP-LM обладают сходной биологической активностью, следовательно, композиция AGP может быть использована для всех биологических исследований. Иммунологические и фармакологические свойства композиции AGP. Ниже описаны анализ цитокинов, таких как IL-2, IFN-, IL-10, и других активностей in vivo, таких как аллергическая реакция замедленного типа (DTH) у морских свинок. Сравнение биологических активностей водного экстракта, полученного по способу, полученному в публикации заявки на патент США 2003/0194456 A1, и композиции AGP по данному изобретению приведено в табл. III. Сравнительная биологическая эффективность водного экстракта (1), полученного по способу,описанному в публикации заявки на патент США 2003/0194456 A1, и композиции AGP по данному изобретению (2) Таблица III Токсикологические исследования композиции AGP Острую токсичность (LD50) композиции AGP оценивали в мышах и крысах посредством перорального и внутривенного способов введения. Группам из десяти (10) животных каждого вида на одну дозу на один способ вводили лекарственные средства и результаты рассчитывали в день 15.- 16012208 Следующие величины наблюдали для композиции AGP:LD50 крыс i.v.: 250 мг/кг массы тела. Биологический анализ композиции AGP Описание способов оценки продуцирования IL-10 человека Для оценки эффективности композиции AGP в отношении ее терапевтического потенциала в псориазе, ее роль в индукции IL-10 in vitro оценивали анализом продуцирования IL-10 ConAиндуцированными PBMC [Raychudhuri S.P., Farber E.M., Raychudhuri S. K., Int. J. Immuriopharmacol.,1999, 21, 609]. Вкратце, PBMC человека (мононуклеарные клетки периферической крови) выделяли и стимулировали 10 мкг/мл ConA вместе с различными концентрациями композиции AGP и инкубировали в течение 48 ч при 37 С в СО 2-термостате с 5% CO2. Супернатанты собирали и замораживали при -70 С до количественного определения при помощи ELISA. Используемые наборы ELISA для IL-10 человека получали из RD System для детектирования IL-10 в культуральном супернатанте. Процентную индукцию рассчитывали с учетом контроля. Эти результаты суммированы в табл. IV. Было обнаружено, что композиция AGP, выделенная из Agremone mexicana, проявляла увеличение продуцирования IL-10 в ConA-активированных PBMC человека в диапазоне 0,0002-200 мкг/мл. (фиг. 3). Было обнаружено, что IL-10 является регуляторным цитокином в лечении псориаза, и хорошо известно,что он индуцирует антипсориатическую терапию. Индукция IL-10 применима в лечении и/или профилактике псориаза, дерматита, склеродермии,воспалительных нарушений и других аутоиммунных заболеваний, таких как псориатический артрит,бляшковый псориаз, каплевидный псориаз, ревматоидный артрит, болезнь Крона, рассеянный склероз,синдром Шегрена, аллергии, такие как астма, хроническая обструктивная болезнь легких и родственные состояния, такие как экзема и чешуйчатые зудящие бляшки. Индукция IL-10 применима также в других хронических, рецидивирующих и других кожных заболеваниях, где участвует кожный лимфоцитарный антиген или кожный лейкоцитарный антиген. Действие композиции AGP на индукцию IL-10 ConA-индуцированными PBMC человека Таблица IV Эти величины изображены в виде процентного увеличения от фона относительно контроля. Описание способов оценки продуцирования IL-2 и IFN- человека Для оценки эффективности композиции AGP на ее терапевтический потенциал в псориазе ее роль в модуляции in vitro IL-2 и IFN- оценивали при помощи анализа продуцирования IL-2 и IFN- с использованием индуцированных фитогемагглютинином (PHA) PBMC [Brynskov J., Tvede N., Gut, 1990, 31(7), 795]. Цель этого исследования состояла в оценке действия AGP на РНА-индуцированное продуцирование IL-2 и IFN- из лимфоцитов человека. Вкратце, клетки мононуклеарной периферической крови(PBMC) получали из здоровых индивидуумов. Один миллион PBMC на мл стимулировали PHA (5 мкг/мл) вместе с различными концентрациями композиции AGP, выделенной из Agremone mexicana, в течение 48 ч при 37C в CO2-термостате с 5% CO2. Супернатанты собирали и замораживали при -70 С. Используемые наборы ELISA для IL-2 и IFN- человека получали из RD System для детектирования IL2 и IFN- в культуральном супернатанте. Процентное ингибирование рассчитывали относительно контроля. Было обнаружено, что композиция AGP, выделенная из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana, была ингибирующей относительно индуцированного митогеном продуцирования IL-2 между 0,002 мкг/мл и 20 мкг/мл (фиг. 4). Известно, что эта ингибирующая активность в отношении индуцированного митогеном продуцированияIL-2 является иммуносупрессивной, и хорошо установлено, что она применима в лечении и/или профилактике псориаза. Эти результаты суммированы в табл. V. Эти величины изображены в виде процентного ингибирования относительно контроля. Было обнаружено, что композиция AGP, выделенная из листьев и/или стеблей растения Agremonemexicana, была ингибирующей относительно индуцированного митогеном продуцирования IFN- между 0,0002 мкг/мл и 2 мкг/мл (фиг. 5). Известно, что эта ингибирующая активность в отношении индуцированного митогеном продуцирования IFN- является иммуносупрессивной, и хорошо установлено, что она применима в лечении и/или профилактике псориаза. Эти результаты суммированы в таблице VI. Действие композиции AGP на продуцирование IFN- РНА-индуцированными PBMC человека Таблица VI Эти величины изображены в виде процентного ингибирования относительно контроля. Описание способов оценки продуцирования GM-CSF и TNF-альфа человека Для оценки эффективности композиции AGP по данному изобретению в отношении ее терапевтического потенциала в псориазе, ее роль в модуляции in vitro стимулирующего колонии гранулоцитов и макрофагов фактора (GM-CSF) и TNF- оценивали анализом ингибирования продуцирования GM-CSF иTNF- PBMC, стимулированными ConA и LPS. Вкратце, PBMC человека выделяли из крови здоровых волонтеров, стимулировали 10 мкг/мл ConA вместе с различными концентрациями композиции AGP и инкубировали в течение 48 ч при 37C в CO2 термостате с 5% CO2. Добавляли 5 мкг/мл LPS и инкубировали в течение 24 ч при тех же самых условиях. Супернатанты собирали и замораживали при -70 С до количественного определения при помощиELISA. Процент ингибирования рассчитывали с учетом контроля. Было обнаружено, что композиция AGP, выделенная из Agremone mexicana, была ингибирующей относительно индуцированного митогеном продуцирования GM-CSF между 0,02 и 2 мкг/мл (фиг. 6). Известно, что эта ингибирующая активность в отношении индуцированного митогеном продуцированияGM-CSF является иммуносупрессивной, и хорошо установлено, что она применима в лечении и/или профилактике псориаза. Эти результаты суммированы в табл. VII. Действие композиции AGP на продуцирование GM-CSF ConA- и LPS-индуцированными PBMC человека Таблица VII Эти величины изображены в виде процентного ингибирования относительно контроля.- 18012208 Было обнаружено, что композиция AGP, выделенная из Agremone mexicana, была ингибирующей относительно индуцированного митогеном продуцирования TNF- между 0,002 и 2 мкг/мл (фиг. 7). Известно, что эта ингибирующая активность в отношении индуцированного митогеном продуцированияTNF- является иммуносупрессивной, и хорошо установлено, что она применима в лечении и/или профилактике псориаза. Эти результаты суммированы в табл. VIII. Действие композиции AGP на продуцирование TNF- ConA- и LPS-индуцированными PBMC человека Таблица VIII Эти величины изображены в виде процентного ингибирования относительно контроля. Действие композиции AGP на NGF-индуцированную пролиферацию кератиноцитов человека Кератиноциты покупали из GIBCO (USA) и поддерживали в бессывороточной среде для кератиноцитов (GIBCO,10744-019), дополненной факторами роста. В каждую лунку 96-луночного плоскодонного планшета добавляли приблизительно 150 мкл KGM (базальной среды для кератиноцитов). Тридцать микролитров разведенной композиции AGP добавляли в каждую лунку в трех повторностях, за исключением лунок с контрольными клетками. NGF (фактор роста нервов) в количестве 100 нг/мл добавляли в каждую лунку. Среду удаляли после 8 дней инкубирования. Клетки промывали PBS. Добавляли проявляющий лизисный раствор LDH (лактатдегидрогеназы) и инкубировали в течение 10 мин при 37C. OD измеряли в ELISA-ридере при длине волны 492 нм. Рассчитывали процентную пролиферацию/ингибирование. Эти результаты суммированы в табл. IX. Действие композиции AGP на NGF-индуцированную пролиферацию кератиноцитов человека Таблица IX Эти величины изображены в виде процентного ингибирования относительно контроля. Было обнаружено, что композиция AGP, выделенная из Agremone mexicana, была ингибирующей относительно NGF-индуцированной пролиферации кератиноцитов человека в диапазоне 0,0001-40 мкг/мл (фиг. 8 и 9). Известно, что эта ингибирующая активность в отношении NGF-индуцированной пролиферации кератиноцитов человека будет иммуносупрессивной, и хорошо установлено, что она применима в лечении и/или профилактике псориаза. Описание способов оценки иммуносупрессии in vivo с использованием аллергии замедленного типа у морских свинок Эту стандартную процедуру использовали для оценки эффективности in vivo композиции AGP в отношении ее способности ингибировать индуцированную очищенным белковым производным (PPD) аллергию замедленного типа в морских свинках. Вкратце, морских свинок сенсибилизировали 100 мкгPPD интрадермально с полным адъювантом Фрейнда. Две последующие бустерные иммунизации 100 мкг PPD вводили перорально один раз в день в течение 28 дней. Животным вводили 100 мкг PPD интрадермально на 28-ой день, и различие в толщине инъецированной контролем и PPD кожи измеряли после 24 ч после инъекции PPD циркулем Вернье. Различия толщины кожи рассчитывали вычитанием толщи- 19012208 ны кожи, инъецированной солевым раствором, у той же самой морской свинки. Было обнаружено, что композиция AGP, выделенная из Agremone mexicana, была иммуносупрессивной в отношении сенсибилизированных PPD и инъецированных PPD морских свинок в диапазоне ингибирования 20-65,89% при дозе 0,10-100 мг/кг р.о. Было обнаружено, что эффективная доза, вызывающая 50% ингибирование (ED50) толщины кожи в получавших PPD морских свинках, была равна 0,508 мг/кг (фиг. 10). Это сильное иммуносупрессивное свойство хорошо установлено и является ценным для антипсориатического лечения. Иммуносупрессия в модели DTH является полезной моделью для нескольких заболеваний, в которых требуется иммуносупрессия, таких как псориаз, дерматит, склеродермия, воспалительные нарушения и другие аутоиммунные заболевания, такие как псориатический артрит, бляшковый псориаз и каплевидный псориаз. Эти результаты суммированы в табл. X. Действие композиции AGP на толщину кожи у морских свинок, стимулированных PPD Таблица X Описание способов оценки TPA Мышей Balb/c рандомизировали и акклиматизировали в клетках за 5 дней перед экспериментом. Шерсть удаляли с использованием местного нанесения Anne French и хорошо очищали. Группы состояли из шести мышей каждая. Контрольная группа с ацетоном и контрольные группы с TPA (12-Oтетрадеканоилфорбол-13-ацетат) были использованы вместе с группой тестируемого лекарственного средства. Композицию AGP растворяли в рекомендуемом носителе (ацетоне) и животным вводили дозу перорально в течение 4 дней один раз в день. Двадцать микролитров 100 нМ TPA наносили на второй день на очищенную поверхность кожи и давали ей всасываться. Животных умерщвляли спустя 72 часа после нанесения TPA. Кусочки кожи фиксировали в 10% формалине в течение 3 дней. Гистопатологические предметные стекла получали следующими стандартными способами. Толщину эпидермиса измеряли по меньшей мере в 10 разных зонах с использованием окулометра и результаты выражали в виде процентного ингибирования (фиг. 11). Эти результаты суммированы в табл. XI. Действие композиции AGP на модель TPA Таблица XI Величины изображены в виде процентного ингибирования относительно контрольной группы сTPA Описание способов оценки иммуносупрессии in vivo с использованием теста опухания уха мыши(MEST) Эту стандартную процедуру использовали для сценки эффективности in vivo композиций AGP на их способность ингибировать DNFB-индуцированную аллергию замедленного типа в мышах [CornacoffJ.В., House R.V., Dean J.H., Fundam. Appl. Toxicol., 1988, 10(1), 40; Fundam. Appl. Toxicol., 1992, 19(1),157]. Вкратце, для этого теста использовали мышей C57BL6. Мышей сенсибилизировали 0,2% DNFB (в смеси 1:4 оливковое масло:ацетон) нанесением на спинки мышей. Три бустерных нанесения DNFB вы- 20012208 полняли каждый третий день. Мышей аллергизировали 0,2% DNFB (в смеси 1:4 оливковое масло:ацетон) на наружном ухе. Толщину уха в центре уха измеряли спустя 24 ч с использованием циркуля Вернье. Анализ выполняли расчетом процентного ингибирования относительно отрицательного контроля, предоставляемого перорально в различных дозах. Эти результаты суммированы в таблице XII. Действие композиции AGP на тест DNFB-индуцированного опухания уха мышей у самок мышей C57/BL6 Таблица XII Данные представлены в виде процентного ингибирования с каждыми из 7-12 животных. Композицию AGP сравнивали с группой, обработанной водой Milli Q, а циклоспорин сравнивали с животными,обработанными 2% Твином 80. Было обнаружено, что композиция AGP из листьев и/или стеблей Agremone mexicana является иммуносупрессивной в отношении DNFB-сенсибилизированных мышей C57BL6. Было определено, чтоED50 для композиции AGP равна 6,43 мг/кг (фиг. 12). Это сильное иммуносупрессивное свойство хорошо установлено и является полезным для лечения или профилактики псориаза. Иммуносупрессия в модели MEST применима в оценке действия в отношении нескольких заболеваний, в которых требуется иммуносупрессия, таких как псориаз, дерматит, склеродермия, воспалительные нарушения и другие аутоиммунные заболевания, такие как псориатический артрит, бляшковый псориаз, каплевидный псориаз, ревматоидный артрит, болезнь Крона, рассеянный склероз, анкилозирующий спондилит, системная красная волчанка, синдром Шегрена, аллергии, такие как астма, хроническая обструктивная болезнь легких и родственные состояния, такие как экзема и чешуйчатые зудящие бляшки. Далее данное изобретение иллюстрируется следующими неограничивающими примерами. Пример 1. Выделение композиции AGP, AGP-HM и AGP-LM. 10 кг свежих листьев Agremone mexicana измельчали и экстрагировали деминерализованной водой(15 л). Эту суспензию центрифугировали, и водный экстракт концентрировали при температуре ниже 40 С под вакуумом. Этот концентрированный материал лиофилизировали с получением 0,54 кг сухого твердого вещества. 500 г сухого водного экстракта растворяли в 6 л воды, центрифугировали и декантировали. Супернатант наносили на катионообменную колонку (5 л) при скорости 10 мл/мин. Элюат (7,5 л) собирали,концентрировали (2,5 л) и наносили на анионообменную колонку (5 л). Элюат (3 л) концентрировали до приблизительно 1,5 л. Этот эксперимент повторяли с другим 0,5 кг материала (водного экстракта). Объединенные элюаты (1,5 л) в каждом случае смешивали и концентрировали до 2,5 л и наносили на катионообменную колонку. Элюат (3 л) концентрировали до 1,2 л и наносили на анионообменную колонку. Элюат (1,5 л) лиофилизировали с получением 42,39 г порошка. 42 г описанного выше порошка растворяли в 600 мл воды и распределяли между н-бутанолом (3 х 400 мл) и водой. н-Бутанольный слой выбрасывали. 3 л метанола приливали в этот водный слой (600 мл),и происходило осаждение твердого вещества. Раствор центрифугировали и супернатант декантировали. Этот супернатант концентрировали до объема приблизительно 300 мл. Опять приливали метанол (1 л) для осаждения нерастворимых в метаноле твердых веществ. Этот раствор центрифугировали и супернатант декантировали. Осажденное твердое вещество из обоих экспериментов лиофилизировали (8,75 г). Эти сухие вещества растворяли в воде и дважды наносили на колонку XAD-2. Водный элюат лиофилизировали с получением 6,10 г композиции AGP. Ее дополнительно подвергали хроматографии на сефакриле с получением 5 мг AGP-HM и 10,3 мг AGP-LM. Пример 2. Выделение композиции AGP, AGP-HM и AGP-LM. 22 кг свежих листьев Agremone mexicana измельчали и экстрагировали деминерализованной водой(36 л). Эту суспензию центрифугировали, и водный экстракт концентрировали при температуре ниже 40C под вакуумом. Этот концентрированный материал лиофилизировали с получением 1,25 кг сухого твердого вещества.- 21012208 1,2 кг сухого водного экстракта растворяли в 12 л воды, центрифугировали и декантировали. Супернатант наносили на катионообменную колонку (5 л) при скорости 10 мл/мин. Элюат (15,5 л) собирали, концентрировали (5,5 л) и наносили на анионообменную колонку (5 л). Элюат (6,25 л) концентрировали до приблизительно 3,2 л. Элюат (3,2 л) концентрировали до 2,6 л и наносили на катионообменную колонку. Элюат (4 л) концентрировали до 1,5 л и наносили на анионообменную колонку. Элюат (1,6 л) лиофилизировали с получением 54 г порошка. 40 г описанного выше порошка растворяли в 700 мл воды и распределяли между н-бутанолом (3 х 500 мл) и водой. н-Бутанольный слой выбрасывали. 4 л метанола приливали в этот водный слой (675 мл),и происходило осаждение твердого вещества. Раствор центрифугировали и супернатант декантировали. Этот супернатант концентрировали до объема приблизительно 400 мл. Опять приливали метанол (3 л) для осаждения нерастворимых в метаноле твердых веществ. Этот раствор центрифугировали и супернатант декантировали. Осажденные твердые вещества лиофилизировали (7,3 г). Полученный таким образом сухой материал растворяли в воде и дважды наносили на колонку XAD-2. Водный элюат лиофилизировали с получением 5,5 г композиции AGP. Ее дополнительно подвергали хроматографии на сефакриле с получением 4,5 мг AGP-HM и 12,4 мг AGP-LM. Пример 3. Унифицированный состав (рецепт) для капсульного препарата, содержащего AGP по данному изобретению и фармацевтически приемлемые носители Таблица XIII Вышеуказанные ингредиенты, приведенные в табл. XIII, могут быть смешаны до однородности и затем помещены в твердые желатиновые капсулы размера '00'. Зона обработки в идеале поддерживается при 405% относительной влажности при 18-22C. Типичный процесс приготовления композиции по данному изобретению иллюстрируется ниже. Активный ингредиент, микрокристаллическую целлюлозу, натрий-кроскармеллозу, стеарат магния и коллоидальный диоксид кремния смешивают до однородности. Смесь помещают в твердые желатиновые капсулы размера "00". Зона обработки в идеале поддерживается при 405% относительной влажности при 18-22 С. При локальном введении количество растения Agremone mexicana находится в диапазоне 0,1-10 мас.% экстракта. Унифицированный рецепт приготовления мази для местного применения, содержащей AGP и носители, суммирован в таблице XIV. Унифицированный состав (рецепт) мази для местного применения, содержащей AGP по данному изобретению и фармацевтически приемлемые носители Таблица XIV Типичный процесс приготовления мази для местного применения предусматривает медленное смешивание всех этих ингредиентов до гладкого геля общепринятыми способами и заполнение этим гелем тюбиков.- 22012208 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Очищенная композиция арабиногалактан-белка (AGP), имеющая диапазон средней молекулярной массы 10-150 кД, выделенная из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana, полученная способом, предусматривающим стадии:i) экстракции 1 мас.ч. листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana 1-10 мас.ч. воды, C1-3 спирта или их смесей с получением водного экстракта; и частично или полностью концентрирования или лиофилизации этого экстракта;ii) подвергания этого водного экстракта, частично концентрированного водного экстракта или водного раствора полностью сконцентрированного или лиофилизированного экстракта, полученного на стадии i), последовательно ионообменной хроматографии с получением нейтрального водного экстракта;iii) фракционирования нейтрального водного экстракта, полученного на стадии ii), с н-бутанолом и разделения водной и н-бутанольной фаз;iv) смешивания и перемешивания водных фаз, полученных на стадии iii), с метанолом или этанолом и выделения осажденных твердых веществ с получением нерастворимой фракции;v) подвергания нерастворимой фракции, полученной на стадии iv), последовательной гельхроматографии и размерно-эксклюзионной хроматографии с получением очищенной композиции арабиногалактан-белка (AGP). 2. Композиция по п.1, где C1-3 спирт выбран из метанола, этанола, 1-пропанола или 2-пропанола. 3. Композиция по п.1, где ионообменной хроматографией является катионообменная хроматография с последующей анионообменной хроматографией. 4. Композиция по п.1, где ионообменной хроматографией является анионообменная хроматография с последующей катионообменной хроматографией. 5. Композиция по п.3 или 4, где катионообменную хроматографию проводят через катионообменники сульфированного полистирола типа сильной кислоты и катионообменники карбоновой кислоты типа слабой кислоты. 6. Композиция по п.3 или 4, где анионообменную хроматографию проводят через анионообменники алифатического амина типа слабого основания и анионообменники типа сильного основания. 7. Композиция по п.1, по существу, не содержащая других алкалоидов, флавоноидов, аминокислот,органических кислот, жирных кислот и других соединений, присутствующих в листьях и/или стеблях растения Agremone mexicana. 8. Композиция по п.1, содержащая 6-связанную галактопиранозу и 3,6-связанную галактопиранозу в качестве скелета, и арабинофуранозильный, арабинопиранозильный, рамнопиранозильный, глюкопиранозильный и галактопиранозильный остатки в концевых положениях и 3-связанный, 4-связанный рамнопиранозильный, 2-связанный маннопиранозильный, 2-связанный глюкопиранозильный, 3-связанный,4-связанный галактопиранозильный, 6-связанный, 3,6-связанный глюкопиранозильный, 4-связанный ксилопиранозильный остатки вместе с метилуроновой кислотой. 9. Композиция по п.1, которая состоит из 45-98 мас.% углеводов. 10. Очищенная композиция арабиногалактан-белка (AGP) по п.1, которая состоит из 2-20 мас.% белков. 11. Способ выделения композиции арабиногалактан-белка (AGP), предусматривающий стадии:i) экстракции 1 мас.ч. листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana 1-10 мас.ч. воды, C1-3 спирта или их смесей с получением водного экстракта, и частично или полностью концентрирования или лиофилизации этого экстракта;ii) подвергания этого водного экстракта, частично концентрированного водного экстракта или водного раствора полностью сконцентрированного/лиофилизированного экстракта, полученного на стадииi), последовательно ионообменной хроматографии с получением нейтрального водного экстракта;iii) фракционирования нейтрального водного экстракта, полученного на стадии ii), с н-бутанолом и разделения водной и н-бутанольной фаз;iv) смешивания и перемешивания водных фаз, полученных на стадии iii), с метанолом или этанолом, и выделения осажденных твердых веществ с получением нерастворимой фракции;v) подвергания нерастворимой фракции, полученной на стадии iv), последовательной гельхроматографии и размерно-эксклюзионной хроматографии с получением очищенной композиции арабиногалактан-белка (AGP). 12. Способ по п.11, где C1-3 спирт выбран из метанола, этанола, 1-пропанола или 2-пропанола. 13. Способ по п.11, где ионообменной хроматографией является катионообменная хроматография с последующей анионообменной хроматографией. 14. Способ по п.11, где ионообменной хроматографией является анионообменная хроматография с последующей катионообменной хроматографией. 15. Способ по п.13 или 14, где катионообменную хроматографию проводят через катионообменники сульфированного полистирола типа сильной кислоты и катионообменники карбоновой кислоты типа слабой кислоты.- 23012208 16. Способ по п.13 или 14, где анионообменную хроматографию проводят через анионообменники алифатического амина типа слабого основания и анионообменники типа сильного основания. 17. Способ по п.11, где гель-хроматографию проводят через полимерный адсорбент амберлит. 18. Способ по п.11, где размерно-эксклюзионную хроматографию проводят через сефакрил. 19. Способ по п.11, где гель-хроматографию проводят через амберлитовые полимерные адсорбенты, выбранные из XAD-2, XAD-4 и XAD-7. 20. Способ по п.11, где размерно-эксклюзионную хроматографию проводят через сефакрил, выбранный из сефакрила S-100, сефакрила S-200 HR и сефакрила S-300 HR. 21. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество очищенного арабиногалактан-белка (AGP) по любому из пп.1-10 и фармацевтически приемлемый эксципиент. 22. Композиция по п.21, дополнительно содержащая по меньшей мере один из нетоксичных совместимых наполнителей, связующих агентов, разрыхляющих агентов, буферов, консервантов, антиоксидантов, смазывающих агентов или ароматизирующих агентов. 23. Фармацевтическая композиция по п.21, где фармацевтически приемлемый эксципиент выбран из сахаров, крахмалов, целлюлозы и ее производных, фосфатов кальция, сульфата натрия; сульфата кальция; поливинилпирролидона; поливинилового спирта; стеариновой кислоты; растительных масел; неионогенных, катионогенных и анионогенных поверхностно-активных веществ; полимеров этиленгликоля; -циклодектрина; жирных спиртов; или гидролизованных твердых веществ злаков. 24. Композиция, содержащая очищенный арабиногалактан-белок (AGP), имеющий диапазон средней молекулярной массы 10-150 кД, выделенный из листьев и/или стеблей растения Agremone mexicana. 25. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество очищенного арабиногалактан-белка (AGP) по п.24 и фармацевтически приемлемый эксципиент. 26. Применение очищенного арабиногалактан-белка (AGP) по любому из пп.1-10 или 24 в приготовлении лекарственного средства для лечения псориаза, воспалительного нарушения, аутоиммунного заболевания, аллергии, экземы или чешуйчатых зудящих бляшек или кожного заболевания у млекопитающих. 27. Применение композиции по любому из пп.21-23 или 25 в приготовлении лекарственного средства для лечения псориаза, воспалительного нарушения, аутоиммунного заболевания, аллергии, экземы или чешуйчатых зудящих бляшек или кожного заболевания у млекопитающих. 28. Применение по п.26 или 27, где это нарушение выбрано из группы, состоящей из дерматита; склеродермии; экземы; псориатического артрита; ревматоидного артрита, болезни Крона, рассеянного склероза, синдрома раздраженной толстой кишки, анкилозирующего спондилита, системной красной волчанки, синдрома Шегрена и чешуйчатых зудящих бляшек. 29. Применение по п.26 или 27, где указанной аллергией является астма или хроническая обструктивная болезнь легких. 30. Применение по п.26 или 27, где указанный псориаз выбран из группы, состоящей из бляшкового псориаза, каплевидного псориаза, пустулезного псориаза и псориаза ногтей.